FOSFORILAO OXIDATIVA E CADEIA TRANSPORTADORA DE ELTRONS o estgio final do metabolismo produtor de energia em organismos aerbicos.

. Mecanismo que acopla a oxidao com a fosforilao: Oxidao fluxo de eltrons (H) gerado pelo catabolismo (carboidrato, gorduras e aminocidos) Fosforilao sntese de ATP, a partir de ADP e Pi Ento a sntese de ATP direcionada pelo fluxo de eltrons

Envolve a reduo do O2 a H2O com eltrons doados pelo NADH e FADH2 Ocorre na mitocndria O entendimento atual da sntese de ATP est baseado na hiptese, introduzida por Peter Mitchell (1961) Teoria quimiosmtica: as diferenas na concentrao transmembrana de prtons so centrais para a produo de energia

Anatomia bioqumica de uma mitocndria

Os eltrons so canalizados para transportadores universais de eltrons

Ao das desidrogenases coletam eltrons das etapas oxidativas do catabolismo. Essas desidrogenases usam piridina nucleotdeos (NAD+ ou NADP+) ou flavina nucleotdeo (FAD+ ou FMN) como receptores
Substrato reduzido + NAD+ Substrato reduzido + NADP+ substrato oxidado + NADH + H+ substrato oxidado + NADPH + H+

Sistemas circulares so requeridos para transportar o NADH citoslico para dentro da mitocndria

1) Sistema de lanadeira malato aspartato A lanadeira malato aspartato usada nos RINS, FGADO E NO CORAO

2) Sistema de lanadeira glicerol-3-fosfato

Usada no MSCULO ESQUELTICO E NO CREBRO. No usa sistema de transporte atravs da membrana.

Enzima: glicerol 3-fosfato desidrogenase

Ele difere do circuito malato-aspartato pelo fato de liberar os equivalentes redutores do FADH2 no complexo III

A cadeia respiratria consiste de uma srie de carreadores de eltrons que atuam em ordem crescente do potencial de reduo, a maioria deles so protenas integrais com grupos prostticos que aceitam ou doam eltrons.

Alm do NAD e das flavoprotenas (FAD), uma ubiquinona e dois tipos de protenas que contm ferro (citocromo e protena ferro enxofre) funcionam na cadeia respiratri UBIQUINONA (tambm chamada de coenzima Q)
uma molcula pequena e hidrofbica, sendo, portanto facilmente difusvel dentro da bicamada lipdica.
A ubiquinona pode aceitar um eltron para se tornar o radical semiquinona (QH) ou dois eltrons para formar ubiquinol (QH2)

CITOCROMOS
- Protenas que contm grupos prostticos heme, que contm ferro - H trs classes de citocromos: A, b e c -Os quatro tomos de nitrognio esto coordenados com um on Fe central que pode estar na forma Fe+2 (reduzida) ou Fe+3 (oxidada)

PROTENAS FERRO-ENXOFRE Participam de transferncia de um eltron em que cada tomo de ferro do arranjo ferro-enxofre est oxidado ou reduzido

Os transportadores de eltrons mitocondriais funcionam em complexos ordenados em srie

O meu potencial muito positivo

O meu potencial muito negativo

Os eltrons tendem a fluir espontaneamente dos o transportadores de E menor para transportadores de E maiores

Complexo I : NADH desidrogenase (NADH at ubiquinona). - Tambm chamado de complexo da NADH desidrogenase
- Presente na membrana mitocondrial interna - grande complexo de flavoprotenas A rotenona (um produto vegetal usualmente utilizada como inseticida) inibe o fluxo de eltrons do centro Fe-S a UQ

NADH + H+ + UQ

NAD+ + UQH2

A transferncia de um par de eltrons para a ubiquinona faz com que 4 prtons da matriz seja expulso da matriz mitocondrial para o espao intermembrana

Complexo II : Succinato desidrogenase (Succinato a ubiquinona) - no ciclo do cido ctrico tem nome de succinato desidrogenase, sendo a nica enzima do ciclo ligada membrana.

- possui um FAD covalentemente ligado e um centro Fe-S

Via dos eltrons do NADH, succinato, acil-CoA e glicerol 3fosfato at a ubiquinona

Nenhum prton bombeado neste processo

Complexo III : Complexo do citocromo bc1 (ubiquinona a

citocromo c)

- Transferncia de 2e- da ubiquinona para o complexo III - Ocorre a transferncia de 4 H+ para fora da mitocndria

Ciclo Q

O efeito global da transferncia: QH2 oxidado a Q e duas molculas de citocromo c so reduzidas.

Complexo IV: citocromo oxidase

2 H+ so bombeados para o espao intermembrana

O2

Equao para formao de uma molcula de gua:

O2 + 2H+ + 2e- (2 Citocromos) H2O

Equao para formao de duas molculas de gua:

O2 + 4H+ + 4e- (4 Citocromos) 2H2O

Resumo do fluxo de eltrons e prtons atravs dos quatros complexos

A transferncia dos eltrons para o O2 altamente exergnica

O modelo quimiosmtico: um gradiente de prtons acopla o fluxo de eltrons e a fosforilao oxidativa.

ATPsintase A ATP sintase um complexo protico que sintetiza o ATP na

membrana mitocondrial interna.

Acopla o fluxo de prtons a sntese de ATP

 um complexo protico que fornece um poro transmembrana (a protena integral Fo) para a passagem de prtons do espao intermembrana para matriz mitocondrial e uma mquina molecular (a protena perifrica F1) que usa a energia liberada pelo fluxo de prtons por meio de Fo para sintetizar ATP. A letra O subscrita em Fo significa sensvel a oligomicina (A oligomicina liga-se subunidade Fo da sntase do ATP bloqueando a transferncia de prtons) O nmero 1 subscrito na poro F1 significa que foi o primeiro fator identificado como essencial para a sntese de ATP (fosforilao oxidativa) Complexo F1 Apresenta 9 subunidades de cinco tipos diferentes, com a composio 33.

F1

Fo

Embora a seqncia de aminocidos das trs subunidades sejam idnticas, as suas conformaes so diferentes, devido a associao da subunidade com apenas uma das trs. As diferenas conformacionais se ampliam para diferena nos stios de ligao do ATP/ADP. As diferentes conformaes so:-ATP, -ADP e -vazia. So importantes para a sntese de ATP

Complexo Fo
Constitui o poro de prtons (H+) composto de 3 subunidades a, b e c em uma proporo ab2c10-12

A enzima possui 3 stios de ligao, um para cada par de subunidades e : 1 stio de ligao para ATP (T) 2 - stio de ligao para ADP e Pi (L) 3 stio vazio Em qualquer momento um dos trs stios est na conformao: T (de ligao forte, do ingls tight) - est ocupado pelo ATP o segundo est na conformao L (de ligao fraca, do ingls loose) o ADP e Pi se ligam fracamente um terceiro est na conformao O (aberto, do ingls open) - vazio

O T O L

A fora prton-motora provoca, pelo fluxo de prtons atravs do canal Fo, uma mudana conformacional cooperativa onde o stio T convertido em stio O, e o ATP se dissocia dele, o stio L convertido em T

O fluxo de eltrons na mitocndria tambm serve para direcionar vrios processos de transporte essenciais

Adenina nucleotdeo translocase (antiporte)

ATPsintase

Fosfato translocase (sinporte)

Proporo P/O
Relaciona a quantidade de ATP sintetizado quantidade de O2 reduzido. Na mitocndria respirando, essa proporo no um nmero inteiro O valor experimental mais aceito para o nmero de prtons que proporciona a sntese de um ATP 4, dos quais 1 para transportar Pi, ATP e ADP. O fluxo de dois eltrons (NADH) pelos complexos I, III e IV resulta na translocao de 10 H+ para o espao intermembrana. O retorno desses 10 H+ leva a sntese de 2,5 ATPs

10 = 2,5 4

ATPs por NADH

O retorno de 6 H+ leva a sntese de 1,5 ATPs

6 = 1,5 4

ATPs por FADH2