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A Molcula da Vida Durante a evoluo da clula formou-se uma molcula, que hoje se sabe ser o cido desoxirribonuclico (DNA

ou ADN):molcula longa, formada pela juno de um grande nmero de nucleotdeos, e que contm a informao gentica codificada. So macromolculas definidas como sendo polinucleotdeos ligados em cadeia. Enquanto os monmeros das protenas so os aminocidos, os nucleotdeos so os monmeros dos cidos nuclicos. Os cidos nuclicos recebem esse nome porque pensava-se que eles fossem encontrados apenas no ncleo da clula. Hoje, sabe-se que eles se encontram tanto no ncleo como no citoplasma das clulas. So considerados as "molculas mestras" por controlarem a atividade celular nos seres vivos. So responsveis pela transferncia de informaes genticas e por direcionar a sntese de protenas. Normalmente, os cidos nuclicos se associam a protenas, das quais constituem grupos protticos. Tais protenas so chamadas nucleoprotenas. Existem dois tipos de cidos nuclicos: - cido desoxirribonuclico (ADN ou DNA) - cido ribonuclico (ARN ou RNA) Os nucleotdeos so as unidades formadoras dos cidos nuclicos. Cada nucleotdeo formado por: - uma molcula de cido fosfrico - uma molcula de pentose - uma base nitrogenada O cido fosfrico se liga pentose que, por sua vez liga-se base nitrogenada. O cido fosfrico sempre o mesmo para qualquer nucleotdeo, tanto do DNA como do RNA. A pentose nos cidos nuclicos pode ser a ribose ou a desoxirribose. No RNA, a pentose sempre a ribose, e no DNA, a desoxirribose. A base nitrogenada pode ser prica ou pirimdica. As bases nitrogenadas pricas so formadas por um anel de carbono e outro de nitrognio. So em nmero de duas: adenina e guanina e ocorrem tanto no DNA como no RNA. As bases nitrogenadas pirimdicas so formadas por um nico anel de carbono e nitrognio. So em nmero de trs: citosina, timina e uracila. A base nitrogenada uracila s ocorre no RNA, e a base nitrogenada timina s ocorre no DNA. Quando um composto formado por uma pentose unida a uma base nitrogenada, recebe o nome de nucleosdeo. Um nucleosdeo de grande importncia a adenosina, formada por uma ribose unida base nitrogenada adenina. A partir do momento em que trs grupos fosfato se unem adenosina, tem-se a formao de um nucleotdeo de grande interesse biolgico, o ATP (trifosfato de adenosina). As ligaes entre os grupos fosfatos so altamente energticas, liberando grande quantidade de energia para a clula quando quebradas. Quando uma dessas ligaes rompida, uma grande quantidade de energia liberada juntamente com um grupo fosfato e o ATP se transforma em ADP (difosfato de adenosina). A energia desprendida nessa transformao pode ser utilizada pela clula para as mais variadas atividades. Para garantir um perfeito mecanismo de obteno e armazenamento de energia, molculas de ADP podem se converter em molculas de ATP por um mecanismo conhecido como fosforilao. Havendo energia disponvel, o ADP se liga a um grupo fosfato cedido pela clula, formando o ATP. O ATP, por sua vez, pode ceder energia para a clula, retornando a ADP+P. Os cidos nuclicos so polinucleotdeos, isto , so formados pela unio de vrios nucleotdeos. A pentose de um nucleotdeo se liga ao cido fosfrico de outro e assim por diante na formao do cido nuclico O DNA constitui uma espcie de cdigo que determina o que uma clula tem. Alm disso, o DNA capaz de produzir uma cpia de si mesmo. Antes de entra no estudo do DNA propriamente dito, faz-se necessria a compreenso de alguns conceitos sobre relao entre cromossomos e DNA. Os cromossomos contm os genes que por sua vez so formados por DNA (cido desoxirribonuclico). Estes genes permitem a transmisso das informaes genticas de gerao a gerao. O material responsvel pelo comando e coordenao de toda a atividade celular e pelas divises celulares e transmisses das caractersticas hereditrias est representado nas clulas pelos cromossomos.

Nas clulas procariticas, o cromossomo uma nica molcula de um cido nuclico, denominado cido desoxirribonuclico, o DNA. Nas clulas eucariticas, o cromossomo formado por DNA associado a molculas de histona, que so protenas bsicas. na molcula de DNA que esto contidos os genes, responsveis pelo comando da atividade celular e pelas caractersticas hereditrias. Cada molcula de DNA contm vrios genes dispostos linearmente ao longo da molcula. Cada gene, quando em atividade, transcrito em molculas de outros cidos nuclicos denominados ribonuclicos, que comandaro a sntese de protenas. Nas clulas procariticas, os cromossomos encontram-se imersos no prprio citoplasma formando uma estrutura denominada nucleide. Nas clulas eucariticas os cromossomos encontram-se separados dos citoplasma pela membrana nuclear ou carioteca, em uma estrutura denominada ncleo. A presena de carioteca uma caracterstica tpica das clulas eucariticas, que as distingue das procariticas. Alm disso, as clulas procariticas no apresentam organelas membranosas, como ocorre com as eucariticas. Estrutura A molcula de DNA constituda por uma seqncia de nucleotdeos,que por sua vez formado por trs diferentes tipos de molculas: um acar (pentose) um grupo fosfato uma base nitrogenada Segundo Watson e Crick, a molcula de DNA seria formada por duas cadeias nucleotdicas dispostas em uma forma helicoidal. Assim, a molcula de DNA apresenta um estrutura em dupla hlice. Os cidos fosfricos e as desoxirriboses da cadeia nucleotdica dispem-se de maneira a constituir o eixo da hlice, enquanto as bases nitrogenadas se dispem perpendicularmente ao eixo longitudinal da estrutura e voltadas para o interior dela. Essa organizao helicoidal mantida por pontes de hidrognio ou ligaes de hidrognio que se estabelecem entre as bases nitrogenadas das duas cadeias. Existem pares de bases nitrogenadas que so, particularmente, adequadas formao de ligaes de hidrognio: adenina e timina formam entre si duas ligaes de hidrognio, enquanto que guanina e citosina formam trs. As duas cadeias nucleotdicas que constituem a dupla hlice do DNA so ditas complementares, isto , quando em uma cadeia aparece uma adenina, na mesma posio da outra cadeia existe uma timina e vice versa; quando em uma cadeia aparece a guanina, na outra deve existir um citosina e vice versa. No existe uracila no DNA. A ligao entre a base nitrogenada e a pentose Esta ligao feita covalentemente atravs de uma ligao N-glicosdica com a hidroxila ligada ao carbono-1 da pentose.

A ligao entre o grupo fosfato e a pentose Esta ligao feita atravs de uma ligao fosfoster com a hidroxila ligada ao carbono-5 da pentose. Para a formao da molcula de DNA necessrio que ocorra a ligao entre os nucleotdeos. Os nucleotdeos esto ligados covalentemente por ligaes fosfodister formando entre si pontes de fosfato. O grupo hidroxila do carbono-3 da pentose do primeiro nucleotdeo se liga ao grupo fosfato ligado a hidroxila do carbono-5 da pentose do segundo nucleotdeo atravs de uma ligao fosfodister.

Devido a esta formao a cadeia de DNA fica com uma direo determinada, isto , em uma extremidade temos livre a hidroxila do carbono-5 da primeira pentose e na outra temos livre a hidroxila do carbono-3 da ltima pentose. Isto determina que o crescimento do DNA se faa na direo de 5' para 3'.

Sabendo-se como so feitas as ligaes entre os nucleotdeos, formando assim a fita de DNA, podemos analisar a estrutura tridimensional do DNA. James Watson e Francis Crick postularam o modelo tridimensional para a estrutura do DNA baseando-se em estudos de difrao de raio-X. O DNA consiste de duas cadeias helicoidais de DNA, enroladas ao longo de um mesmo eixo, formando uma dupla hlice de sentido rotacional direita. Ainda com base nestes estudos, concluiu-se que na dupla hlice as duas fitas de DNA esto em direo opostas, isto significa que so anti-paralelas. O termo anti-paralelas deve-se ao fato de que uma das fitas tem a direo exata da sua sntese (5'---3') enquanto que a outra est invertida (3'----5'). Esta conformao em fitas anti-paralelas levar necessidade de mecanismos especiais para a replicao do DNA. Com base na estrutura de dupla hlice do DNA e nas caractersticas de hidrofobicidade das molculas, a estrutura do DNA fica da seguinte forma: O grupo fosfato e o acar (parte hidroflica) - esto localizados na parte externa da molcula. As bases nitrogenadas (parte hidrofbica) - esto localizadas na parte interna da molcula. A relao espacial entre as duas fitas cria um sulco principal e um sulco secundrio. O pareamento das bases de cada fita se d de maneira padronizada, sempre uma purina com uma pirimidina, especificamente: adenina com timina e citosina com guanina. A proximidade destas bases possibilita a formao de pontes de hidrognio, sendo que adenina forma duas pontes de hidrognio com a timina e a citosina forma trs pontes com a guanina. A dupla hlice mantida unida por duas foras: Por pontes de hidrognio formadas pelas bases complementares Por interaes hidrofbicas, que foram as bases a se "esconderem" dentro da dupla hlice. Estudos recentes mostram que existem duas formas de DNA com a hlice girando para a direita, chamadas A-DNA e B-DNA, e uma forma que gira para a esquerda chamada Z-DNA. A diferena entre as duas formas que giram para a direita est na distncia necessria para fazer uma volta completa da hlice e no ngulo que as bases fazem com o eixo da hlice. B-DNA: Tem a dupla hlice mais longa e mais fina. Para completar uma volta na hlice so necessrios 10 pares de bases. A-DNA: Tem a forma mais curta e mais grossa. Para completar uma volta na hlice so necessrios 11 pares de bases. Em soluo, geralmente o DNA assume a conformao B. Quando h pouca gua disponvel para interagir com a dupla hlice, o DNA assume a conformao A-DNA. Existe uma terceira forma de DNA que difere das duas anteriores, pois seu sentido de rotao para a esquerda, este tipo de DNA chamado de Z-DNA. Esta conformao mais alongada e mais fina do que o B-DNA. Para completar uma volta na hlice so necessrios 12 pares de bases. O DNA, em soluo com altas concentraes de ctions, assume a conformao Z-DNA. Em eucariotes o DNA tende a assumir a conformao Z-DNA devido a metilao do DNA.

Propriedades fsicas e qumicas do DNA Solues de DNA, em pH = 7,0 e temperatura ambiente, so altamente viscosas; A altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturao, isto porque ocorre ruptura das pontes de hidrognio entre os pares de bases. Esta desnaturao faz com que diminua a viscosidade da soluo de DNA; Durante a desnaturao nenhuma ligao covalente desfeita, ficando portanto as duas fitas de DNA separadas; Quando o pH e a temperatura voltam ao normal, as duas fitas de DNA espontaneamente se enrolam formando novamente o DNA dupla fita. Este processo envolve duas etapas: A primeira mais lenta pois envolve o encontro casual das fitas complementares de DNA, formando um curto segmento de dupla hlice. A segunda etapa mais rpida e envolve a formao das pontes de hidrognio entre as bases complementares reconstruindo a conformao tridimensional. O RNA (cido ribonuclico) tem a sua molcula formada por uma nica cadeia de nucleotdeos (fita simples), portanto o nmero de bases pricas , em geral, diferente do nmero de bases pirimdicas. No existe timina na molcula de RNA. Existem trs tipos de RNA relacionados diretamente com o processo de sntese de protenas: - RNA mensageiro - RNA transportador - RNA ribossmico Duplicao do DNA Replicao do DNA o processo de auto-duplicao do material gentico mantendo assim o padro de herana ao longo das geraes. Duas teorias tentaram explicar a replicao do DNA: Teoria conservativa: Cada fita do DNA sofre duplicao e as fitas formadas sofrem pareamento resultando num novo DNA dupla fita, sem a participao das fitas "parentais" (fita nova com fita nova formam uma dupla hlice e fita velha com fita velha formam a outra dupla fita). Teoria semi-conservativa: a autoduplicao inicia-se com o rompimento das ligaes de hidrognio que unem as bases nitrogenadas. As duas fitas comeam a se afastar e nucleotdeos de DNA livres, que j se encontram no interior da clula, se encaixam nas duas fitas que se afastaram. Esse encaixe s possvel a partir do critrio de complementao de bases nitrogenadas e pela ao cataltica de uma enzima denominada DNA-polimerase. Pelo critrio de complementao de bases nitrogenadas, adenina se liga timina (e vice versa), assim como citosina se liga guanina (e vice-versa). O resultado desse processo a formao de duas novas molculas de DNA idnticas entre si e molcula me. Os dois filamentos da molcula de DNA comeam a se separar e novos nucleotdeos do tipo adequado, carregando grupos fosfatos muito ricos em energia, fixam-se nos lugares convenientes. Diz-se que cada filamento de DNA funciona como molde para formao de duas novas molculas. Os dois filamentos originais do DNA se separam completamente e novos nucleotdeos vo sendo acrescentados. Os novos parceiros das bases pricas e pirimdicas estabelecem as ligaes de hidrognio entre os pares e cada nucleotdeo fica ligado pelo grupo fosfato ao nucleotdeo seguinte. Completa-se, assim, o processo de duplicao do DNA. Cada molcula nova de cido nuclico exatamente igual original. Em cada nova molcula de DNA formada, h um filamento antigo que pertencia molcula-me e um filamento novo formado atravs do processo de complementao de bases. Diz-se que a molcula de DNA apresenta uma autoduplicao semi-conservativa, j que cada molcula-filha conserva metada da molcula-me.

Alm da capacidade de duplicao, o DNA tambm responsvel pela sntese de outro cido nuclico muito importante para a clula: o cido ribonuclico ou RNA. Chama-se transcrio o processo de formao de RNA a partir de DNA. A transcrio inicia-se com o rompimento das ligaes de hidrognio que unem as bases nitrogenadas da molcula de DNA. Assim como na autoduplicao do DNA, a seqncia de bases nitrogenadas condiciona a formao da molcula de RNA. No entanto, na transcrio, apenas uma fita de molcula de DNA funciona como molde de modo que o RNA formado ter uma fita simples diferentemente da molcula de DNA que possui fita dupla.

Mutaes Gnicas Em 1941, os pesquisadores Beadle e Tatum, fazendo experincias com um tipo de bolor de po, a Neurospora sp, observaram que nem sempre a autoduplicao do DNA ocorria de modo perfeito. O bolor crescia num meio de cultura contendo acar e diversos sais inorgnicos. Seus esporos eram submetidos a raios X e alguns deles passavam depois a produzir bolores com novas caractersticas. Por exemplo, alguns perdiam a capacidade de fabricar lisina e s conseguiam sobreviver quando aquele aminocido era acrescentado ao meio de cultura. Essa incapacidade foi relaciona com a falta de uma enzima necessria para a sntese de lisina. Concluram, ento, que os raios X teriam danificado a formao daquele tipo especfico de enzima. Como a produo de uma enzima depende de informao codificada no DNA, a concluso daqueles pesquisadores ficou conhecida como a relao "um gene - uma enzima". Atualmente, fala-se, com maior preciso, na relao "um gene - uma cadeia polipeptdica". A modificao gentica induzida atravs dos raios X conhecida como mutao. As mutaes podem resultar de uma alterao na seqncia dos nucleotdeos, ou de quebras e mudanas de posio dos fragmentos da molcula de DNA. Portanto so mutaes as alteraes numricas e estruturais dos cromossomos, que persistem atravs das autoduplicaes, transmitindo-se s clulas-filhas. Existem tambm erros que ocorrem no RNA, no momento das transcries ou das tradues, e afetam somente a prpria clula. As mutaes so produzidas por agentes mutagnicos, que compreendem principalmente vrios tipos de radiao, dentre os quais os raios ultravioleta, os raios X e substncias que interferem na autoduplicao do DNA ou na transcrio do RNAm, determinando erros nas seqncias dos nucleotdeos. A lista das substncias mutagnicas tem aumentado muito nos ltimos anos, sendo bastante conhecidos o gs mostarda, o cido nitroso, a bromouracila, o formaldedo, a nicotina. Vrios tipos de cncer podem ser produzidos por alteraes ocorridas nos cido nuclicos; por isso os mesmos agentes mutagnicos podem ser tambm cancergenos. Sntese O RNA (cido ribonuclico) o cido nuclico formado a partir de um modelo de DNA. O DNA no molde direto da sntese de protenas. Os moldes para sntese de protenas so molculas de RNA. Os vrios tipos de RNA transcritos do DNA so responsveis pela sntese de protenas no citoplasma. Existem trs tipos de RNAs: RNA mensageiro: Contm a informao para a sntese de protenas. Os RNAm representam cerca de 4% do RNA celular total. RNA transportador: Transporta aminocidos para que ocorra a sntese de protenas.

Os RNAt correspondem a 10% do RNA total da clula, e so denominados de adaptadores. RNA ribossmico: Componentes da maquinaria de sntese de protenas presente nos ribossomos. Os RNAr correspondem a 85 % do RNA total da clula, e so encontrados nos ribossomos (local onde ocorre a sntese protica). Todas as formas de RNA so sintetizadas por enzimas (RNA polimerases) que obtm informaes em moldes de DNA.

O RNAr produzido pelo DNA da regio organizadora do nuclolo e, associado a protenas, vai constituir os nuclolos. Depois passa ao citoplasma para formar os ribossomos. O RNAm leva para o citoplasma as informaes para a sntese das protenas. Existe um tipo de RNAm para cada tipo de cadeia polipeptdica, que vai constituir uma protena. O RNAm transporta a informao gentica na forma de cdons, copiados do DNA; um cdon consiste em uma seqncia de trs nucleotdeos. O RNAt move-se do ncleo para o citoplasma, onde se liga a aminocidos, e deslocando-se at os ribossomos. Apresenta regies com pareamento de bases, que lhe conferem um aspecto de "trevo de trs folhas". Cada molcula de RNAt apresenta uma extremidade que se liga a diferentes tipos de aminocidos e uma regio com uma seqncia de trs nucleotdeos, o anticdon, que pode parear com um dos cdons do RNAm.

Biossntese das protenas Os vrios tipos de RNA, transcritos do DNA, que vo participar da sntese de protenas, deslocam-se do ncleo para o citoplasma. O RNAr, inicialmente armazenado nos nuclolos, passa para o citoplasma e , associado a protenas, forma os ribossomos, que se prendem s membranas do retculo endoplasmtico. Os ribossomos dispem-se enfileirados, constituindo os polirribossomos ou polissomos, junto dos quais as protenas vo ser sintetizadas. Cada polissomo tambm denominado unidade de traduo, pois permite a sntese de um tipo de polipeptdeo. O RNAm move-se para o citoplasma e vai ligar-se aos polirribossomos. Ele formado por uma seqncia de trios de nucleotdeos, que correspondem a diferentes aminocidos. Cada trio um cdon, e os diferentes cdons determinam o tipo, o nmero e a posio dos aminocidos na cadeia polipeptdica.

O RNAt desloca-se para o citoplasma, onde se liga a aminocidos, deslocando-os at pontos de sntese protica. Numa determinada regio, a molcula de RNAt apresenta um trio especial de nucleotdeos, o anticdon, correspondente a um cdon do RNAm. Uma das extremidades da molcula de RNAt s se liga a um tipo de aminocido.