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ALOINMUNIZACIN
Diagnstico de aloinmunizacin Exposicin a antgenos eritrocitarios 30 sistemas / 257 antgenos
(DANIELS, 2005)
ALOINMUNIZACIN
Inmunogenicidad del antgeno D > K > c > E > Fya > Jka Origen tnica Frecuencia de los antgenos Frecuencia de las transfusiones
(MOREIRA et al, 1996; GIBLETT, 1961)
Dia (?!)
Clase Ig
Autoinmune
Sistema Rh (004-ISBT)
Genes RHD e RHCE (cromosoma 1) Caractersticas
C/c 103ser>pro
E/e 226pro>ala
D
C
NH2 COOH
85
68 80 29 98
92
27 96 22 98
c E e
417 aa
Caractersticas
Clase IgG, raramente IgM activa complemento RT / DHR AGH Imunogenicidad Frecuencia% Cauc. K k Kpa Kpb Jsa 9 100 2 100 <1 100 africanos 2 100 <1 100 20 99
COOH
antgenos
597 281 193 Jsa/Jsb (Pro/Leu)
NH2
Jsb
Caractersticas:
Fya/Fyb (Gly/Asp)
NH2
Anti-Fy3
antgenos
42
Fya Fyb
COOH
Fy3
El fenotipo Fy(a-b-) en africanos es debido a mutaciones de punto 33t>c, em el stio GATA1, que impide la expresin eritride del alelo FYB (gen Fy).
Caractersticas:
Efecto de dosis (Jka) Classe IgG Activa complemento RT / DHR AGH y enzima
Antgenos Jka
NH2 COOH
Jkb
Jk3
74
100
49
100
Genes GYPA e GYPB (cromosoma 4) 43 antgenos GPA importante para la expresin de Wrb
M Ser Ser Thr Thr Gly 1 N Leu Ser Thr Thr Glu
Caractersticas:
T. A. y AGH. ( IgM e IgG) RT e DHR (rara) Efecto de dosis Sensibilidad a enzimas (excepcin Ag U)
Tripsina
1 5 -quimiotripsina
antgenos
M N S s U
Frecuencia%
Dadores 78 72 55 89 100 africanos 74 75 31 93 100
65
Glicoforina A
131
Glicoforina B
Ena
Mk
100
100
100
100
Antgenos
400-408 NH2
Dia
COOH
La expresin de
Wrb
depende
de la presencia de GPA.
caractersticas
antgenos
108 117
265
Doa/Dob
Asn/Asp
Hy Gya
AloiNmunizacin: Riesgo / frecuencia 2,6% - 8,4% receptores eventuales + 60% receptores crnicos Persistencia del anticuerpo (26% / 10 meses) Anticuerpos Kidd: < tiempo de deteccin 30 60% RTH
(HEDDLE et al, 1995; REDMAN et al, 1996; ISSIT & ANSTEE, 1998; SCHONEWILLE et al, 2000; CHARACHE et al, 1990)
Tubo
Gel centrifugacin Microplaca (?)
Castilho, 1997
Fenotipo Nulo
Efecto de dosis
negativo
interferencias
Auto + Aloanticuerpo(s)
complemento
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
RECURSOS IMUNOHEMATOLGICOS
Panel de identificacin AGH X Enzimtico Fenotipificacin / genotipificacin Adsorcino Selecin clulas o tcnicas
Congelamiento de hemates
Nitrgeno lquido
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 1
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 R1wR1 R1R1 D + + C + 0 E 0 + Rh c 0 + e + + Cw 0 0 Kell K 0 + k + + Duffy Fya 0 + Fyb + + Kidd Jka + + Jkb 0 + M + 0 MNS N 0 + S 0 + s + + n de la muestra: resultado LISS 1+ 1+ ENZ 0 2+
Obs
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 1) Identificacin en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 rr rr rr rr rr rr auto D X C X + + + + 0 0 0 0 0 0 + + + 0 + 0 0 0 0 0 E 0 0 0 + 0 + 0 0 0 0 Rh c X e X 0 0 0 + + + + + + + + + + 0 + + + + + + Cw + 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Kell Duffy
a
MNS
resultado LISS 1+ 0 1+ 1+ 1+ 1+ 1+ 1+ 0 1+ 0
Obs
K X k X Fy X 0 + + 0 0 0 0 0 + 0 + + 0 + + + + + + + + + + + + 0 0 + + 0
Fyb + 0 + 0 + + + + 0 +
Jk X M X N S X s X X X 0 + + 0 + + + + 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + + + + + + 0 0 0 + 0 + 0 + 0 0 0 + + 0 + + + 0 + + + + 0 +
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 1) Identificacin en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 3 4 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 D X C X + + + + + + + 0 E 0 0 0 + Rh
w
Kidd Jka + 0 + +
b
MNS
c X e C X K X k X Fy X X 0 0 0 + + + + 0 + 0 0 0 0 + + 0 + + 0 + + + + +
Fyb + 0 + 0
Jk X M X N S X s X X X 0 + + 0 0 + + + + + + + 0 + 0 + + + + 0
5
6 7 8 9 10 11
rr
rr rr rr rr rr auto
0
0 0 0 0 0
+
0 0 0 0 0
0
+ 0 0 0 0
+
+ + + + +
+
+ + + + +
0
0 0 0 0 0
0
0 0 0 + 0
+
+ + + + +
+
0 0 + + 0
+
+ + + 0 +
+
+ 0 + + +
+
+ + + 0 +
0
0 + + + +
+
+ 0 0 0 +
0
0 0 + + 0
+
+ + + 0 +
1+
1+ 1+ 1+ 0 1+ 0
0
3+ 0 0 0 0 0
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 2
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 R1wR1 R1R1 D + + C + 0 E 0 + Rh c 0 + e + + Cw 0 0 Kell K 0 + k + + Duffy Fya 0 + Fyb + + Kidd Jka + + Jkb 0 + M + 0 MNS N 0 + S 0 + s + + n de la muestra: resultado Liss 1+ 0 ENZ 0 0
Obs
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 2) Efecto de dosis.
Paciente/donante:
Sistema fentipo 1 2 3 4 5 6 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 rr rr D + + + + 0 0 C + + + 0 + 0 E 0 0 0 + 0 + Rh c 0 0 0 + + + e + + + 0 + + Cw + 0 0 0 0 0 Kell K 0 + + 0 0 0 k + + 0 + + + Duffy Fya + + + + + 0 Fyb + 0 + 0 + + Kidd Jka + 0 + + + + Jkb 0 + + 0 + + M 0 + + + 0 0 MNS N + + + + + + S 0 + 0 + 0 0 s + + + 0 + +
n de la muestra:
resultado
Liss Obs
18 0 2+ 2+ 2+ 0 0
0 0 0 0 0 0
7
8 9 10 11
rr
rr rr rr auto
0
0 0 0
0
0 0 0
0
0 0 0
+
+ + +
+
+ + +
0
0 0 0
0
0 + 0
+
+ + +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
+ + +
+
+ 0 +
+
+ + +
0
0 0 +
0
+ + 0
+
+ 0 +
2+
2+ 2+ 0 0
3+
3+ 3+ 2+ 0
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 3
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 R1wR1 R1R1 D + + C + 0 E 0 + Rh c 0 + e + + Cw 0 0 K 0 + k + + Kell Kpa 0 0 Kpb + + Duffy Fya 0 + Fyb + + Kidd Jka + + Jkb 0 + M + 0 n de la muestra: MNS N 0 + S 0 + s + + resultado Liss 3+ 3+ ENZ 4+ 4+
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 3) antgeno de alta frecuencia poblacional.
Paciente/donanter: Sistema fentipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 rr rr rr rr rr rr auto D + + + + 0 0 0 0 0 0 C + + + 0 + 0 0 0 0 0 E 0 0 0 + 0 + 0 0 0 0 O Rh negativo Rh c 0 0 0 + + + + + + + e + + + 0 + + + + + + Cw + 0 0 0 0 0 0 0 0 0 K 0 + + 0 0 0 0 0 + 0 k + + 0 + + + + + + + Kell Kpa 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Kpb + + + + + + + + + + Duffy Fya + + + + + 0 0 + + 0 Fyb + 0 + 0 + + + + 0 + Kidd Jka + 0 + + + + 0 + + + Jkb 0 + + 0 + + + + 0 + M 0 + + + 0 0 + + + + n de la muestra: MNS N + + + + + + 0 0 0 + S 0 + 0 + 0 0 0 + + 0 s + + + 0 + + + + 0 + resultado LISS 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 0 ENZ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 0
Fenotipificacin: Kp(a+b-)
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 3) antgeno de alta frecuencia poblacional alo-adsorcin con rr
Paciente/donanter: Sistema fentipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 rr rr rr rr rr rr auto D + + + + 0 0 0 0 0 0 C + + + 0 + 0 0 0 0 0 E 0 0 0 + 0 + 0 0 0 0 O Rh negativo Rh c 0 0 0 + + + + + + + e + + + 0 + + + + + + Cw + 0 0 0 0 0 0 0 0 0 K 0 + + 0 0 0 0 0 + 0 k + + 0 + + + + + + + Kell Kpa 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Kpb + + + + + + + + + + Duffy Fya + + + + + 0 0 + + 0 Fyb + 0 + 0 + + + + 0 + Kidd Jka + 0 + + + + 0 + + + Jkb 0 + + 0 + + + + 0 + M 0 + + + 0 0 + + + + n de la muestra: MNS N + + + + + + 0 0 0 + S 0 + 0 + 0 0 0 + + 0 s + + + 0 + + + + 0 + resultado LISS 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 0 0 0 0 0 0 ENZ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 0 0 0 0 0 0
Anti- Kpb, - D, - C
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 4
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 R1wR1 R1R1 D + + C + 0 E 0 + Rh c 0 + e + + Cw 0 0 K 0 + k + + Kell Kpa 0 0 Kpb + + Duffy Fya 0 + Fyb + + Kidd Jka + + Jkb 0 + M + 0 n de la muesstra: MNS N 0 + S 0 + s + + resultado Liss 2+ 1+ ENZ 0 0
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 4) antgeno de alta frecuencia poblacional.
Paciente/donante: Sistema fentipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 R1wR1 R1R1 R1R1 R2R2 rr rr rr rr rr rr auto D + + + + 0 0 0 0 0 0 C + + + 0 + 0 0 0 0 0 E 0 0 0 + 0 + 0 0 0 0 O Rh negativo Rh c 0 0 0 + + + + + + + e + + + 0 + + + + + + Cw + 0 0 0 0 0 0 0 0 0 K 0 + + 0 0 0 0 0 + 0 k + + 0 + + + + + + + Kell Kpa 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Kpb + + + + + + + + + + Duffy Fya + + + + + 0 0 + + 0 Fyb + 0 + 0 + + + + 0 + Kidd Jka + 0 + + + + 0 + + + Jkb 0 + + 0 + + + + 0 + M 0 + + + 0 0 + + + + n de la muestra: MNS N + + + + + + 0 0 0 + S 0 + 0 + 0 0 0 + + 0 s + + + 0 + + + + 0 + resultado LISS 2+ 1+ W 1+ W 1+ 2+ 2+ 2+ 1+ 0 18 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 3+ 0
Fenotipificacin:Fy(a-b+) M-N-S-s-
PATOLOGIAS Anemia hemoltica autoimune en caliente / frio. Enfermedad hemoltica del recin nacido Reaccin transfusional hemoltica Anemia inducida por droga Poliaglutinacin
causas IgG / IgM / IgA / Complemento Sistema Rh y utros Incompatibilidad sangunea materno-fetal Error tcnico Aloanticuerpo en bajo ttulo a-metildopa Coloides Reaciones inflamatorias
investigar Caracterizar a Ig y Complemento Identificar el Ac (tipificacin y elucin) Identificar el Ac (Elucin e IAI) Historia clnica Historia clnica
DIFICULTADES
Presencia de auto-anticuerpos y complemento Ampla reactividad Interfieren en la investigacin e identificacin de aloanticuerpo
Investigacin
AGH monoespecfica (IgG e C) 32% dos pacientes con AHAI presentan aloanticuerpos
Hemates I II Auto
LI 3+ 3+ 3+
AGH 1+ 2+ W
INVESTIGAR HISTORIA TRANSFUSIONAL RECIENTE REALIZAR C.D. (reaccin hemoltica transfusional o auto-inmune) REALIZAR AUTO-ADSORCIN EN FRIO
3+ 3+
W 2+
3
4 5 6
R1R1
R2R2 rr rr
+
+ 0 0
+
0 + 0
0
+ 0 +
0
+ + +
+
0 + +
0
0 0 0
+
0 0 0
0
+ + +
+
+ + 0
+
0 + +
+
+ + +
+
0 + +
+
+ 0 0
+
+ + +
0
+ 0 0
+
0 + +
3+
3+ 3+ 3+
1+
2+ W W
7
8 9 10 11
rr
rr rr rr auto
0
0 0 0
0
0 0 0
0
0 0 0
+
+ + +
+
+ + +
0
0 0 0
0
0 + 0
+
+ + +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
+ + +
+
+ 0 +
+
+ + +
0
0 0 +
0
+ + 0
+
+ 0 +
3+
3+ 3+ 3+
1+
2+ 2+ W
3+
Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag
Ag
Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag AgAg Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Remocin del auto-anticuerpo frio con lavado de los hemtes con Nacl (0,9%) a 37C
AgAg Ag
Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Remocin del auto-anticuerpo frio con lavado de los hemtes con Nacl (0,9%) a 37C
AgAg Ag
Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
AgAg Ag
Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Auto-adsorcin en frio 4C
n de la muestra:
resultado LI 0 W 0 1+ 0 0 AGH 0 2+ 0 2+ 0 0
7
8 9 10 11
rr
rr rr rr auto
0
0 0 0
0
0 0 0
0
0 0 0
+
+ + +
+
+ + +
0
0 0 0
0
0 + 0
+
+ + +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
+ + +
+
+ 0 +
+
+ + +
0
0 0 +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
0 W 0 0
0
2+ 2+ 0 0
Hemates I II Auto
LI 0 0 0
AGH 2+ 2+ 2+
n de la muestra:
resultado LI 0 0 0 0 0 0 AGH 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+
7
8 9 10 11
rr
rr rr rr auto
0
0 0 0
0
0 0 0
0
0 0 0
+
+ + +
+
+ + +
0
0 0 0
0
0 + 0
+
+ + +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
+ + +
+
+ 0 +
+
+ + +
0
0 0 +
0
+ + 0
+
+ 0 +
0
0 0 0 0
2+
2+ 2+ 2+ 2+
Ag
CDP
Ag
CDP
CDP
Ag
Ag
CDP
Ag
CDP
CDP
Ag
Ag Ag
CDP CDP Ag CDP
CDP
CDP CDP
Ag
CDP
Ag
Ag
CDP
Ag
Ag
CDP
Ag
Disociacin del auto anticuerpo con Difosfato de cloroquina (CDP) 20% en PBS (pH 7,2)
Ag Ag
Ag
Ag
Ag Ag
Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag
Ag
Ag
Dissociacin del auto anticuerpo con Difosfato de cloroquina (CDP) 20% en PBS (pH 7,2)
AgAg Ag
Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
AgAg Ag
Ag
Ag
Ag Ag Ag Ag
Ag
Ag Ag Ag Auto-adsorcin a 37C Ag
Tcnicas de congelamiento
Sueros raros y anticuerpos contra antgenos pblicos
Referencias bibliogrficas
DANIELS, G. Human Blood Groups. Oxford: Blackwell Science, 1995. 737p. VERGELEN-TYLER, V. (Ed.). Technical Manual. 13. ed. Bethesda: American Association of Blood Banks, 1999. 798p. DANIELS, G & BROMILOW, I. Essential Guide to Blood Groups. Oxford: