UIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR CENTRO DE CINCIAS DEPARTAMENTO DE QUMICA ANALTICA E FISICO-QUMICA DISCIPLINA: QUMICA ANALTICA III PROFESSOR: FTIMA

GOMES

RELATRIO ESPECTROFOTOMETRIA

ALUNO: RAIMUNDO JEOVAN G. DO MONTE

MAIO 2011

1. OBJETIVOS
Determinar fsforo por colorimetria relativa; Determinar ferro em calcrio Mtodo da Ortofenantrolina; Determinar o teor de casena no leite, pela adio de Biureto.

2. INTRODUO
A Colorimetia e a Espectrofotometria podem ser conceituadas como um procedimento analtico atravs do qual se determina a concentrao de espcies qumicas mediante a absoro de energia radiante (luz). A variao da cor de um sistema com a mudana da concentrao de um componente base da anlise colorimtrica. A cor , usualmente, devida formao de um composto colorido pela adio de um reagente apropriado ou inerente ao constituinte que se deseja analisar. A intensidade da cor comparada com a intensidade da cor que se obtm com o mesmo procedimento pelo tratamento de uma amostra cuja quantidade e concentrao so conhecidas. Na anlise espectrofotomtrica usa-se uma fonte de radiao que alcana a regio ultravioleta do espectro. Para isso, escolhem-se comprimentos de onda de radiao bemdefinidos e com largura de banda de menos de um nanmetro, o que exige um espectrofotmetro, um instrumento mais complicado e, conseqentemente, mais caro. A luz pode ser entendida como uma forma de energia, de natureza ondulatria, caracterizada pelos diversos comprimentos de onda (( lambda), expressos em m ou nm) e que apresenta a propriedade de interagir com a matria, sendo que parte de sua energia absorvida por eltrons da eletrosfera dos tomos constituintes das molculas. Uma soluo quando iluminada por luz branca, apresenta uma cor que resultante da absoro relativa dos vrios comprimentos de onda que a compem. Esta absoro, em cada comprimento de onda, depende da natureza da substncia, de usa concentrao e da espessura da mesma que atravessada pela luz. Atravs da Lei de Beer, intensidades da radiao incidente e emergente podem ser relacionadas com as concentraes do material presente na soluo. A Lei de Beer dada por: A = bc, onde A Absorbncia constante b- distncia percorrida pelo feixe luminoso atravs da amostra c- concentrao da soluo absorvente Como normalmente usam-se cubetas de 1 cm de comprimento, a equao fica:

A = c Ou seja, a absorbncia da luz a cada comprimento de onda diretamente proporcional concentrao da soluo contida na cubeta. Esta linearidade deixa de ocorrer a concentraes muito elevadas da substncia, podendo nesses casos diluir previamente a amostra a medir. A equao A= bc mostra que a absorbncia depende da quantidade total de substncia absorvedora que h no caminho tico atravs da cuba com a soluo. O conjunto de solues de nmeros 1 a5 constitui o que se denomina curva de calibrao ou curva padro, indispensvel para determinar concentrao de qualquer soluo,desde que conhea sua absorbncia. Na plotao do grfico absorbncia versus concentrao, teremos uma reta., como j era indicado pela Lei de Beer, que permite calcular concentraes graficamente. Na maioria das anlises espectrofotomtricas, importante preparar um reagente branco contendo todos os reagentes, mas com o constituinte em anlise substitudo por gua destilada. Tambm importante usar uma srie de padres para estabelecer uma curva de calibrao. Os padres devem ser preparados pelo mesmo procedimento usado nas amostras desconhecidas. A absorbncia da amostra desconhecida de diminuir dentro da regio coberta pelos padres, de forma que no haja questionamento sobre a validade da curva de calibrao.

3. RESULTADOS E DISCUSSO 3.1- Determinao de fsforo Reaes de cor PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 24H+ (NH4)3PO412MoO3 + 12H2O (NH4)3PO412MoO3 + cido ascrbico Azul de molibdnio O azul de molibdnio no tem composio exatamente definida, mas percebeu-se que medida que aumentou a concentrao de fosfato, a cor se mostrou mais intensa. A espcie colorida tem funo linear Soluo extratora AlPO4 + 2H2O + 6F- AlF63- + PO43- + 2H2O FePO42H2O + 6F- FeF63- + Po43- + 2H2O CaHPO42H2O + 6F- CaF42- + PO43- + H+ + 2H2O O fluoreto forma complexos incolores solveis. AlF63-

F2F63-

+ H3BO3 Fe (BF4)3

CaF42Na preparao da amostra de mucilon, usamos uma soluo extratora de fsforo (NH4F + HCl), pois esta contm fluoretos. O cido brico (H3BO3), forma fluoboratos Fe (BF4)3 e evita que se tenha outro tipo de reao com amostra, podendo influenciar na cor. 3.1.1 Clculo concentrao de fsforo na amostra em ppm Como a intensidade da cor da soluo amostra, ficou na faixa de 0,8 a1,6 ppm da soluo padro de fsforo, mais aproximada da soluo de 0,8 ppm, ento estipulamos que soluo era aproximadamente 1,0 ppm. Assim, tendo 1,0 ppm ---------------------1000mL X ppm ---------------------50mL X = 0, 05 mg de fosfato

0,05 mg de fosfato ----------------------- 94,97 g de PO42X (fsforo) ----------------------30,97 g de P X = 0, 0163 mg / 5,018 x 10-4 Kg (farinha) = 32,48 ppm de fsforo na amostra Assim, pode-se determinar a concentrao do fsforo em ppm. No mtodo da colorimetria visual, como a observao depende muito do analista, a margem de erro pode ser bem elevada, devido a capacidade de distinguir cores, da fadiga visual ect.

3.2- Determinao de ferro em calcrio Mtodo da orto-fenantrolina Mtodo da 1,10 Ortofenantrolina (reao com Fe2+ na presena de acetato de amnia formando complexo avermelhado). Nos mtodos espectrofotomtricos, no se mede a absorbncia de uma soluo pura da espcie de interesse. Faz-se reagir uma soluo de ons fosfato com molibdato para se produzir um composto de cor amarela, do qual medida a absorbncia. Na determinao Fe3+ pela ortofenantrolina, necessrio reduzir aquele ction a Fe 2+, para que este reaja com a ortofenantrolina para produzir um composto de cor vermelha. Agente redutor Fe Fe2+ com cloridrato de hidroxilamina 5% em meio cido.

Fe2+ + ortf. (ort)3 Fe2+ ( ph3-6 ) rendimento 100% Concentrao, 0,5 2,0 3,0 4,0 ppm Absorbncia, A 0,12 0,43 0,53 0,63 Tabela 1: Dados das solues padro de ferro em calcrio. 5,0 0,63 6,0 0,63 amostra 0,33

Grafico1: Absorbncia x Concentrao Data B

0.70 0.65 0.60 0.55 0.50

Absorbncia (A)

0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10 0.05 0.00 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0

Concentrao (ppm)

Os pontos quinto e sexto, foram retirados devido ao desvio que existe na Lei de Beer, pois o Fe uma grande molcula e os centros absorventes esto muito prximos. Quanto maior a concentrao maior a absorbncia, desvio negativo da Lei de Beer. Equao da reta Y=A+B*X A= b1c, onde b 1=1, temos c = A/ , e corresponde ao coeficiente angular, assim temos: Parameter A B Value 0,08673 0,14243

------------------------------

-----------------------------Substituindo temos, C = Y A/B C = 0,33 0,08673/0,14243 c = 1,708ppm Assim, substituindo este pelo fator de diluio, temos: Fator de diluio 250/25=10 1,708 * 10 = 17,08mg A partir de uma regra de trs simples, pode-se determinar a massa contida em 250 mL, 17,08 mg ----------------- 1000 mL X (mg) ----------------- 250 mL x = 4,27 mg = 4,27 10 -3 g

Assim se a massa pesada foi de 0,5g, temos: 0,5 g ----------------100% 4,27 10 -3 g ---------- x (%) x = 0,854% de Fe Verificamos que a porcentagem de ferro na amostra foi de 0,854% 3.3- Determinao do teor de casena no leite (pela adio de Biureto). O ...C \ NH
COR VIOLETA

R / \ H

O \ NH

R C ... / \ H

C C

Cu2+ NH / .... C O \ / C R H / C O NH H \ / C R ...

O Cu2+ em meio alcalino forma-se este complexo, cuja intensidade da cor proporcional concentrao de protena na amostra. Pelo valor terico, temos que no leite ninho o valor nutricional foi de 6,8g em cada 26g. 20% de protena e 80% de casena. Esperamos aproximadamente 30 minutos, para que ocorresse a complexao. Tabela 2: Dados das solues padro de casena no leite Concentrao, ppm Absorbncia, A 500 0,08 800 0,11 1000 0,14 1200 0,16 1500 0,19 amostra 0,11

Grfico2: Absorbncia X Concentao(caseina no leite) Data1B

0.20

0.15

Absorbncia (A)

0.10

0.05

0.00 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600

Concentrao (ppm)

Equao da reta Y=A+B*X A= b1c, onde b1=1, temos c = A/ , e corresponde ao coeficiente angular, assim temos: Parameter A B Value 0.00818 1.2618E-4

------------------------------

-----------------------------Substituindo temos, C =Y A/B C = 0,11 0,00818 / 1,2618 10-4 c = 807 ppm Assim, substituindo este pelo fator de diluio, temos: Fator de diluio 10/2 = 5 807 * 5 = 4035 ppm Assim, verificamos que a concentrao real da caseina no leite foi de 4035 ppm Sabendo que a massa pesada foi de 0,5016 g, temos 26 g de leite ---------------6,8g de protena 0,5016 g --------------- x(g) x = 0,1312g

0,1312 g--------------- 26 g de leite x(g) ---------------1000g de leite x = 5,046g de casena no leite

Verificamos que tivemos uma faixa de erro no valor real, de aproximadamente 26%, comparado com o valor terico, este erro pode ter ocorrido devido a erros na preparao da amostra e/ ou na leitura no colormetro.

4. CONCLUSO

Na determinao de fsforo por colorimetria, a quantidade do elemento presente na amostra determinada pela intensidade da cor da soluo comparada com de uma soluo padro. Este mtodo apresenta uma faixa de erro muito grande. Pois o resultado obtido depende da observao do analista , que pode ser prejudicada devido fadiga visual. Verificou-se que, a partir das equaes das retas ( absorbncia x concentrao), podemos calcular as concentraes tanto de ferro em calcrio como a de casena em leite. Observou-se que o ferro aps a concentrao de 4ppm apresentou desvio negativo a lei de Beer.J a casena obedece lei de Beer, porm o valor encontrado foi diferente do valor nutricional, devido a erros no procedimento. Verificou-se a importncia de se fazer o ajuste de zero do equipamento, visando diminuir os erros.

5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
KOTZ; TREICHEL. Qumica e Reaes Qumicas. Volume 2. 3 Edio. Editora: OHLWEILER. Anlise Qumica Quantitativa. Volume 2. 5 Edio. Editora: LTC. VOGEL. Anlise Qumica Quantitativa. 5 Edio. Editora: LTC. Rio de Janeiro, RJ: LTC. Rio de Janeiro, RJ: 1998. Rio de Janeiro, RJ: 1974. 1992.