Dinmica de Poblaciones Humanas Unidad N 2.

Equilibrio Hardy-Weinberg
Traduccin (resumida) del captulo 2 del libro Human Population Genetics de John Relethford (2012).Wiley-Blackwell, New York. I. FRECUENCIAS GENOTPICAS Y ALLICAS Antes de abordar la definicin, derivaciones y aplicacin del equilibrio Hardy-Weinberg, debemos aclarar algunas ideas bsicas para medir la variacin gentica en una poblacin, especficamente la idea de frecuencias genotpicas y frecuencias allicas. a. Clculo de frecuencias genotpicas Partamos de un modelo bsico, un locus hipottico con dos alelos, A y a. Cuando existen dos alelos, existirn 3 genotipos: AA, Aa y aa (proporciones mendelianas 1:2:1.). Supongamos que los dos alelos son codominantes, por lo tanto, podemos advertir la diferencia entre la gente que posee esos 3 genotipos. Imaginen que visitamos una poblacin y analizamos el genotipo de 150 personas, obteniendo los siguientes nmeros: personas con el genotipo AA = 54 personas con el genotipo Aa = 72 personas con el genotipo aa = 24 Para obtener las frecuencias genotpicas de esta muestra poblacional, simplemente dividimos el nmero de cada uno de los genotipos por el nmero total de la muestra: AA = 54/150 = 0,36 Aa = 72 / 150 = 0,48 Aa = 24/150 = 0,16 Aunque pueda parecer obvio en el presente ejemplo, es importante despus de calcular las proporciones de cada genotipo sumarlas y confirmar que el resultado es 1 0,36 + 0,48 + 0,16 = 1 Si bien en gentica de poblaciones expresamos las proporciones en frecuencias, noten que podramos tambin hacerlo en forma de porcentajes al multiplicar cada proporcin por 100: AA = 36%, Aa = 48%, aa = 12%, y que la suma es igual a 100%. Ahora, resulta til considerar otra caracterstica de las frecuencias genotpicas. Supongamos que retornamos a visitar esta poblacin y escogemos una persona al azar sin conocer su genotipo individual. Cul es la probabilidad de que esa persona posea el genotipo AA? La respuesta es 0,36 (o bien 36%), la frecuencia genotpica, porque este nmero tambin representa el nmero de veces que un evento especfico ocurre (54 personas poseen el genotipo AA) dividido por el nmero total de eventos (las 150 personas muestreadas). b. Clculo de frecuencias allicas Como pueden ver, es fcil estimar la frecuencia relativa de cualquier genotipo, simplemente hay que dividir su nmero por el total de todos los genotipos. Ahora bien cmo se calcula la frecuencia de un alelo? Cul es el nmero de alelos A y el nmero de alelos a en la poblacin hipottica antes descripta?

Dos alelos Tomando el ejemplo anterior. Dados los siguientes genotipos AA = 54, Aa = 72 y aa = 24 Cul es la frecuencia allica relativa de los alelos A y a? Comencemos contando el nmero de alelos A, recordando contarlo dos veces en el caso de los genotipos AA y una en el caso de los genotipos Aa. Tenemos 54 (2) + 72 (1) = 180 alelos A. Repetimos el procedimiento para el nmero de alelos a: 72 (1) + 24 (2) = 120 alelos a. As, obtenemos que la poblacin hipottica tiene 180 alelos A y 120 alelos a para un total de 300 alelos (150 personas con dos alelos cada una). La frecuencia relativa de A ser 180/300 = 0,6 y la frecuencia relativa de a ser 120/300 = 0,4. Como sntesis grfica de lo anteriormente realizado, en la tabla siguiente hacemos una lista del nmero de alelos Ay a y el nmero total de alelos para cada genotipo, y realizamos la suma de cada columna. Genotipos AA Aa aa Total Individuos 54 72 24 150 Alelos A 108 72 0 180 Alelos a 0 72 48 120 Total de alelos 108 144 48 300

Frecuencia relativa de A = 180/300 = 0,6 Frecuencia relativa de a = 120/300 = 0,4. La suma de ambos alelos es 1, con lo que corroboramos que las cuentas estn bien hechas. Dado que en gentica de poblaciones se usan a menudo frecuencias allicas, utilizamos smbolos para referirnos a las diferentes frecuencias. Por convencin, se usa el smbolo p para referirse a un alelo (generalmente el ms frecuente) y q al otro. En el ejemplo anterior, p es la frecuencia relativa de A y q es la frecuencia relativa de a. Usaremos esta notacin de aqu en adelante. En trminos matemticos, podemos expresar la suma de frecuencias allicas usando la siguiente frmula: p+q=1 ecuacin 1 Ntese que esta relacin nos permite predecir una de las frecuencias allicas si conocemos la otra, ya que, usando una simple propiedad algebraica, vemos que p = 1- q q=1p ecuacin 2

Estas relaciones pueden ser intuitivamente obvias pero, como vern ms adelante, nos permiten manejar de manera simple la mayora de los clculos de la gentica de poblaciones. Ejemplo real Para ejemplificar el clculo de frecuencias allicas a partir de datos tomados del mundo real, vamos a usar los datos tomados del estudio de protenas sanguneas realizado en poblaciones de la provincia de Jujuy (Demarchi et al. 2000). Uno de los sistemas polimrficos analizados fue el locus de las haptoglobinas (HP), una protena que se encuentra en los glbulos rojos, es codificada por un gen localizado en el cromosoma 16 y posee dos alelos: HP*1 y HP*2. En la localidad de Tilcara, se obtuvieron muestras de 39 voluntarios y se encontr el siguiente nmero de genotipos: HP*1-HP*1 = 19 HP*1-HP*2 = 18 HP*2-HP*2 = 2

Las frecuencias genotpicas, como ya sabemos, se obtienen dividiendo el nmero de cada genotipo por el total de la muestra: HP*1-HP*1 = 19/39 =0,487 HP*1-HP*2 = 18/39 = 0,462 HP*2-HP*2 = 2/39 = 0,051 Ahora calculemos el nmero de cada alelo. Tendremos para HP*1 = 19 (2) + 18 (1) = 38 + 18 = 56 alelos, y para HP*2 = 2 (2) + 18 (1) = 4+ 18 = 22 alelos. Teniendo en cuenta que hay un total de 78 alelos (39 x 2), las frecuencias relativas sern para cada alelo sern: HP*1 = 56/78 = 0,718, HP*2 = 22/78 = 0,282 Expresado en una tabla podemos ver de forma grfica: Genotipos HP*1-HP*1 HP*1-HP*2 HP*2-HP*2 Total Individuos 19 18 2 39 Alelos HP*1 38 18 0 56 Alelos HP*2 0 18 4 22 Total de alelos 38 36 4 78

Frecuencia relativa de HP*1 = p = 56/78 = 0,718 Frecuencia relativa de HP*2 = q = 22/78 = 0,282 Ms de dos alelos Gran parte de la teora de la gentica de poblaciones se construy sobre el modelo de un locus simple con dos alelos. En el mundo real, sin embargo, hay muchos loci (en particular los marcadores del ADN) con ms de dos alelos. Cmo podemos computar frecuencias allicas en tales casos? Para loci donde todos los alelos son codominantes, permitiendo la identificacin de cada genotipo, la respuesta es simple contamos el nmero de alelos en la misma manera. El ejemplo siguiente muestra el cmputo para un locus con tres alelos. Cuando tenemos tres alelos, llamamos a cada frecuencia allica p, q y r (cuando hay ms de tres alelos, es usual usar la letra p con un subndice para los diferentes alelos, ej. p1, p2, etc.). Salzano et al. (1985) obtuvieron datos sobre 216 amerindios Pas Novos de Brasil sobre el locus GC (conocido tambin como protena de unin a la vitamina D), ubicado en el cromosoma 4. Salzano y colaboradores colectaron datos sobre seis genotipos asociados a tres alelos: GC*1F, GC*1S y GC*2. Genotipos GC*1F-GC*1F GC*1F-GC*1S GC*1S-GC*1S GC*2-GC*1F GC*2-GC*1S GC*2-GC*2 Total Individuos 43 75 32 34 21 11 216 GC*1F 86 75 0 34 0 0 195 GC*1S 0 75 64 0 21 0 160 GC*2 0 0 0 34 21 22 77 Total alelos 86 150 64 68 42 22 432

Frecuencia relativa de GC*1F = p = 195/432 = 0,451 Frecuencia relativa de GC*1S = q = 160/432 = 0,370 Frecuencia relativa de GC*2 = r = 77/432 = 0,178 3

Ntese que la suma de las tres frecuencias allicas no da exactamente 1.0 (0,451 + 0,370 + 0,178 = 0,999). Esto es debido a un error por redondeo. Si expresamos las frecuencias con 4 decimales veremos que, efectivamente, suman 1.0 (0,4514 + 0,3704 + 0,1782 = 1). Un mtodo alternativo El mtodo utilizado hasta ahora es conocido como conteo de alelos (allele counting method) porque se basa en contar el nmero de diferentes alelos en todos los genotipos. Otro mtodo de clculo para las frecuencias allicas se basa en las frecuencias genotpicas. Volviendo al primer ejemplo usado, tenemos el locus con dos alelos, A y a, en una poblacin hipottica de 150 individuos con los siguientes genotipos: 54 AA, 72 Aa y 24 aa. Cuando contamos los alelos, encontramos 180 A y 120 a, dando frecuencias allicas de p = 0,6 (180/300) y 0,4 (120/300). Existe otra forma de calcular las frecuencias allicas. Primero, se computan las frecuencias genotpicas como anteriormente se mostr: fAA = 54/150 = 0,36 fAa = 72/150 = 0,48 faa = 24/150 = 0,16 Note que hemos asignado el smbolo f para referirnos a frecuencias genotpicas y usado subndices para referirnos a los diferentes genotipos. Ahora podemos computar la frecuencia del alelo A sumando la frecuencia de los genotipos AA a la mitad de la frecuencia de los genotipos Aa. De la misma forma, podemos computar la frecuencia del alelo a sumando la frecuencia de la mitad de los genotipos Aa a la frecuencia de los genotipos aa. Esto es ms fcilmente expresado en trminos matemticos que en palabras (por eso usamos smbolos): p = fAA + fAa /2 q = fAa /2 + faa ecuacin 3

cuando introducimos las frecuencias genotpicas reales de nuestro ejemplo, obtenemos las mismas frecuencias allicas que con el mtodo de conteo de alelos. p = 0,36 + 0,48/2 = 0,36 + 0,24 = 0,6 q = 0,48/2 + 0,16 = 0,24 + 0,16 = 0,4 Ntese que este mtodo puede no dar exactamente el mismo resultado que con el del conteo de alelos si uno no computa las frecuencias genotpicas usando suficientes espacios decimales para evitar problemas de redondeo. II EQUILIBRIO HARDY-WEINBERG A principios del siglo XX, los genetistas comenzaban a comprender las leyes de la herencia y el origen de nueva variabilidad a partir de la mutacin. Sin embargo, dado que la evolucin es un proceso que se desarrolla a travs del tiempo, era necesario indagar cmo se comportaba la variabilidad presente en una poblacin a travs de las generaciones. Si en una poblacin existen, por ejemplo, dos alelos para una misma caracterstica que estn presentes en una determinada proporcin y en ciertas combinaciones genotpicas, se modificar esta proporcin en la siguiente generacin, luego del proceso de reproduccin sexual? Esta pregunta fue respondida, en 1908, por G. H. Hardy, un matemtico ingls, y por G. Weinberg, un mdico alemn., trabajando de manera independiente. Hardy y Weinberg mostraron que las combinaciones que resultan del proceso de apareamiento y reproduccin, que ocurre en cada generacin en los organismos diploides, no involucran un cambio en la 4

composicin general del reservorio gnico. Para demostrar esto, propusieron un modelo terico que permite examinar el comportamiento de los alelos en una poblacin ideal en la cual rigen cinco condiciones: 1) No ocurren mutaciones; 2) No hay migracin; 3) La poblacin es lo suficientemente grande como para que el azar, por s mismo, pueda alterar la frecuencia de los alelos; 4) El apareamiento entre individuos es al azar y 5) No hay seleccin natural Qu es exactamente la ley de Hardy-Weinberg y porqu es tan importante? En el nivel ms bsico, el equilibrio Hardy-Weinberg es una expresin matemtica que describe la frecuencia genotpica esperada en una nueva generacin a partir de las frecuencias allicas. Recordemos como los cuadrados de Punnett son usados para computar la distribucin genotpica esperada en la descendencia a partir de los genotipos parentales. Hardy-Weinberg proporciona una forma de extender esa idea a la poblacin entera. Imaginemos un locus con dos alelos, A y a, donde p es la frecuencia de A y q es la frecuencia de a. Tanto Hardy como Weinberg mostraron de manera independiente, que las frecuencias genotpicas esperadas en la generacin siguiente son Frecuencia genotpica esperada del genotipo AA = p2 Frecuencia genotpica esperada del genotipo Aa = 2pq Frecuencia genotpica esperada del genotipo aa = q2

ecuacin 4

Por ejemplo, si conocemos que p = 0,7 y q = 0,3 en el pool gnico de la generacin parental, podemos calcular la distribucin de genotipos esperados en la prxima generacin, como Frecuencia genotpica esperada del genotipo AA = p2 = (0,7)2 = 0,49 Frecuencia genotpica esperada del genotipo Aa = 2 pq = 2 (0,7) (0,3) = 0,42 Frecuencia genotpica esperada del genotipo aa = q2 = (0,3) 2 = 0,09. La utilidad de predecir los resultados en la prxima generacin puede ser ilustrado con un tipo ms especfico de pregunta. Por ejemplo, imaginemos que la frecuencia de un alelo recesivo perjudicial es de 0,01 y queremos saber cuntos nios nacern con dos alelos recesivos, y por lo tanto, con una enfermedad gentica. En este caso, Hardy-Weinberg permite una respuesta rpida: q2 = (0,01) 2 = 0,0001, lo que cual es 1 en 10.000 descendientes. Igualmente, podemos calcular la proporcin esperada de heterocigotos que no tendran la enfermedad pero seran portadores: 2 pq = 2 (0,99) (0,01) = 0,0198, lo que equivale a 198 en 10.000 descendientes. El equilibrio de Hardy-Weinberg y su formulacin matemtica han sido un valiossimo fundamento para la gentica de poblaciones. A primera vista, esto parece difcil de comprender, dado que es prcticamente imposible que las cinco condiciones requeridas por el modelo para que el equilibrio se mantenga se cumplan en una poblacin natural. Si bien las frecuencias de los alelos en las poblaciones naturales siempre estn cambiando, sin la ecuacin de Hardy-Weinberg no sabramos cmo detectar el cambio, determinar su magnitud y direccin, o describir las fuerzas que lo determinan. Sin embargo, si podemos identificar el genotipo de los individuos de una poblacin, podremos estimar las frecuencias

gnicas y comparar estos datos con el modelo de Hardy-Weinberg. Si hacemos esto durante varias generaciones, podemos representar con exactitud en un grfico los cambios que estn ocurriendo en el reservorio gnico y, en funcin de ello, investigar las causas. III. BASES MATEMTICAS DEL EQUILIBRIO HARDY-WEINBERG Teniendo en cuenta las frecuencias allicas p y q, la ecuacin 4 nos permite predecir las frecuencias genotpicas esperadas en la prxima generacin De dnde viene esa ecuacin? Hay varias maneras de responder a esta pregunta. Hardy y Weinberg utilizaron mtodos diferentes para responderla. A. Una prueba simple Aqu demostraremos las proporciones Hardy-Weinberg usando un modelo simple de probabilidades para frecuencias allicas. Dados dos alelos, A y a, los posibles genotipos en la prxima generacin son AA, Aa y aa. Como obtenemos el genotipo AA? La respuesta es que cada progenitor contribuye con un alelo A. Expresndolo de otra forma, cul es la probabilidad de que un hijo obtenga un alelo A de un progenitor y un alelo A del otro? Dado que p representa la frecuencia de A y es la probabilidad de que un individuo herede un alelo A, la frecuencia esperada para un genotipo AA en la prxima generacin es p veces p, = p2. Qu sucede entonces con el genotipo Aa? Esto puede suceder en una de dos formas. El padre puede contribuir con un alelo A y la madre con uno a o, por el contrario, el padre puede contribuir con el alelo a y la madre con el A. La probabilidad de que suceda la primera situacin es p veces q = pq. La probabilidad de que ocurra la segunda situacin es q veces p = qp, lo cual, debido a la ley conmutativa del lgebra es igual que pq. As, la probabilidad de recibir un alelo A de un padre y uno a de la madre o lo contrario es pq + pq = 2pq. Por ltimo nos queda por considerar el genotipo aa. La probabilidad de obtener ese genotipo se calcula como la probabilidad de que ambos progenitores contribuyan con un alelo a, lo cual es q veces q = q2. As como las frecuencias allicas deben sumar 1.0 (p + q = 1)), lo mismo sucede con las frecuencias genotpicas
p2 + 2pq + q2 = 1

Estas proporciones son las frecuencias genotpicas esperadas bajo el equilibrio HardyWeinberg. En la Tabla siguiente se muestra la lgica usada para demostrar estas frecuencias. Clculo de proporciones Hardy-Weinberg Genotipo del hijo
AA Aa

Alelo del padre

A A a a

Alelo de la madre
A a A a

Probabilidad
p x p = p2 p x q = pq q x p = qp q x q = q2 = 2 pq

aa

En la figura siguiente se muestra la relacin no linear entre frecuencias allicas y genotpicas. A medida de que p se incrementa, la proporcin de homocigotos AA se incrementa geomtricamente, y la frecuencia de homocigotos aa disminuye en la misma proporcin. Ntese que la frecuencia de heterocigotos Aa se incrementa hasta que p llega a 0,5, despus de lo cual la frecuencia de heterocigotos disminuye. Por ejemplo, cuando p = 0,6 y q = 0.4, las frecuencias genotpicas en la prxima generacin son AA = p2 = 0,36, Aa = 2pq = 0,48 y aa = q2 = 0,16.

B. Qu significa equilibrio? Hasta ahora, hemos comenzado con una poblacin parental con frecuencias allicas p y q que utilizamos para calcular las frecuencias genotpicas esperadas en la prxima generacin. La siguiente cosa que necesitamos saber es la frecuencia de alelos en la generacin siguiente. Aqu utilizamos los smbolos p' y q' para referirnos a las frecuencias allicas en la descendencia, utilizando el smbolo primario (') para diferenciarlas de las frecuencias allicas parentales (p y q). Podemos calcular las frecuencias allicas de la progenie a partir de sus frecuencias genotpicas mediante la ecuacin 3 con las frecuencias esperadas de la ecuacin 4. Es decir, para calcular p' tomamos la frecuencia esperada del genotipo AA y le sumamos la mitad de la frecuencia esperada del genotipo Aa. p = fAA + fAa /2 = p2 + 2pq/2 Cuando despejamos p en esta ecuacin y cancelamos el nmero 2 del denominador y el numerador, obtenemos p = p2 + pq, y debido a que p + q = 1, obtenemos que p = p. Podemos hacer lo mismo con el alelo a y obtendremos que q = q. En otras palabras, no ha habido cambios en las frecuencias allicas entre las dos generaciones. Este es el equilibrio Hardy-Weinberg, que significa ausencia de cambio. Podemos continuar el proceso usando las frecuencias allicas de los descendientes para calcular las frecuencias genotpicas de los sus descendientes. Debido a que sern iguales que las de sus padres, las frecuencias genotpicas esperadas sern las mismas. Una cosa importante para recordar es que aun si la poblacin no est en equilibrio Hardy-Weinberg al comienzo, ste ser alcanzado en una sola generacin. Si una poblacin esta en equilibrio Hardy-Weinberg, las frecuencias allicas y genotpicas permanecern sin cambios a travs del tiempo. Es de particular inters el equilibrio en las frecuencias allicas, dado que la evolucin ha sido definida precisamente como cambio en las frecuencias allicas. El principal uso del equilibrio Hardy-Weinberg es proporcionar una base para explicar el cambio. Hardy-Weinberg nos proporciona una prediccin de lo que ocurrir bajo ciertas condiciones. Por lo tanto, cuando en realidad S 7

vemos cambios a travs del tiempo, sabemos que uno o ms de los supuestos subyacentes del equilibrio Hardy-Weinberg no se cumplen. Como tal, podemos usar el equilibrio HardyWeinberg como modelo nulo de diferentes escenarios para proporcionarnos pistas sobre de que forma la evolucin est actuando. Todos los conceptos bsicos de la gentica de poblaciones discutidos en este curso parten del supuesto de equilibrio y a partir de all surgen las preguntas sobre que pasar bajo diferentes condiciones. Como tal, el modelo de equilibrio es una herramienta poderosa para desarrollar modelos evolutivos. Supuestos del equilibrio Hardy-Weinberg En primer lugar, se supone que se trata de una especie con reproduccin sexual. Tambin se supone que cada generacin es discreta y no se solapa con ninguna otra generacin. En otras palabras, nadie de una misma generacin se aparea con alguien de otra generacin. Un supuesto clave del equilibrio Hardy-Weinberg es el apareamiento al azar (panmixia). Esto significa que la probabilidad de obtener un genotipo determinado es puramente una funcin de las frecuencias allicas y la aplicacin de las leyes de la probabilidad, descritos anteriormente. En realidad, el supuesto de de apareamiento al azar puede ser violado de dos maneras. Una excepcin al apareamiento al azar es la consanguinidad, el apareamiento entre individuos estrechamente relacionados. Esto se refiere en general a apareamiento entre parientes cercanos, como entre hermanos, tas y sobrinos, tos y sobrinas, y primos cercanos. En virtud de la consanguinidad, la probabilidad de que alguien sea homocigoto se incrementa debido a la relacin ms cercana, de la que existira al azar, entre los padres. Otra forma en la cual el apareamiento al azar es violado es cuando hay una preferencia en la eleccin de pareja de acuerdo con el genotipo. En nuestro hipottico ejemplo, esto significa que alguien con genotipo AA prefiere unirse a otro que tiene el mismo genotipo, por lo que AA x AA se unirn con mayor frecuencia que la esperada al azar. Uno de los supuestos del equilibrio Hardy-Weinberg es que los apareamientos son debidos puramente al azar y no hay preferencias de eleccin de pareja debidos a su genotipo. sto es cierto para muchos rasgos, pero no para todos (a nadie le importa, por ejemplo, el grupo sanguneo de su posible pareja). A veces las personas eligen pareja de acuerdo a similitudes fenotpicas (y por lo tanto, al genotipo subyacente), lo que es conocido como apareamiento selectivo positivo. Algunos ejemplos en humanos incluyen seleccin basada en similar color de piel, peso, altura, etc. As como en el caso de la consanguinidad, el apareamiento selectivo positivo incrementar la proporcin de homocigotos. Las desviaciones del apareamiento al azar conducirn a frecuencias genotpicas diferentes a las esperadas bajo equilibrio Hardy-Weinberg. Sin embargo, estas desviaciones no cambiarn las frecuencias allicas de la poblacin. La violacin de los otros supuestos si cambiarn las frecuencias allicas. Uno de esos supuestos es que no hay mutacin. En nuestro ejemplo tenemos un locus con dos alelos, A y a, y el equilibrio Hardy-Weinberg supone que esos alelos pasaran a la generacin siguiente, pero que ninguno de los alelos A mutar en a, ni que los alelos a mutarn en A, o que ningn alelo existente mutara en un nuevo alelo. Si ese supuesto es violado, entonces habr cambios, aunque pequeos, en las frecuencias allicas. Ejemplos y detalles sobre estos cambios sern tratados en la prxima unidad. Otro supuesto del equilibrio Hardy-Weinberg es que no existen cambios en las frecuencias allicas debidos a errores de muestreo. Esta idea, es una extensin de la teora de la probabilidad que propone que una muestra no puede representar el universo muestral del que es tomada. En trminos de la gentica de poblaciones, la deriva gnica es el cambio en frecuencias allicas que ocurren debido a errores de muestreo que, debido al azar, las

frecuencias allicas en cualquier generacin no son probablemente las mismas que en la generacin previa. El equilibrio Hardy-Weinberg supone que no existe deriva gnica. Como se ver ms adelante, los efectos esperados de la deriva gnica dependen del tamao poblacional (cuanto menor la poblacin, mayor el efecto de la deriva.). Equilibrio HardyWeinberg supone que no hay deriva, debido a que la poblacin es infinitamente grande. Aunque esto claramente no es posible, en trminos prcticos puede ser traducido como que la poblacin es suficientemente grande como para que el impacto de la deriva no sea perceptible. El equilibrio Hardy-Weinberg tambin supone que las probabilidades de supervivencia y reproduccin no dependen de un genotipo determinado. En otras palabras, alguien con el genotipo AA no tiene ms o menos posibilidades de sobrevivir y reproducirse que alguien con genotipo Aa o aa. El equilibrio Hardy-Weinberg supone que no hay seleccin natural. En realidad, hay veces que un genotipo podra tener una mayor probabilidad de sobrevivir y reproducirse que otros genotipos. Si un genotipo es representado en la prxima generacin ms frecuentemente que lo esperado bajo equilibrio Hardy-Weinberg, entonces las frecuencias allicas cambiaran. Por ejemplo, imaginen que individuos con genotipos AA tienen ms oportunidades de sobrevivir y reproducirse que otros genotipos. Esta seleccin resultar en ms individuos con genotipos AA que los esperados, y ms alelos A. De esta forma, la frecuencia de A se incrementar, mientras que la de a disminuir. El ltimo supuesto del equilibrio Hardy-Weinberg es que la poblacin es cerrada y que no hay migrantes llegando desde otras poblaciones. Este supuesto significa que no hay flujo gnico entrando en la poblacin. Lo que sucede genticamente en una poblacin no afecta lo que sucede en otra. El efecto del flujo gnico sobre las poblaciones ser discutido ms adelante. Ntese que los cuatro supuestos (ausencia de mutacin, seleccin, deriva, flujo gnico) corresponden a las cuatro fuerzas evolutivas. Todas ellas implican cambios en las frecuencias gnicas. Usamos el equilibrio Hardy-Weinberg para establecer una base y entonces cambiar uno o ms de esos supuestos para predecir niveles y direcciones de cambios microevolutivos. IV. Aplicaciones del equilibrio Hardy-Weiberg El propsito del EHW en este curso es establecer una condicin base ausencia de cambios en genotipos y alelos que permita suponer lo que suceder cuando uno o ms de los supuestos subyacentes de EHW no se cumplan. Existen tambin otros usos para EHW. A. Detectando desviaciones del EHW En principio, podemos poner a prueba la hiptesis de equilibrio comparando las frecuencias genotpicas observadas y las esperadas. Imaginen que visitan una poblacin, toman una muestra y encuentran los siguientes genotipos para el locus hipottico que hemos estado usando: AA = 40 Aa = 32 Aa = 8 Estos nmeros corresponden a los genotipos observados. Podemos ahora calcular las frecuencias esperadas bajo EHW. En este ejemplo, usamos el mtodo de conteo de alelos y encontramos que hay 112 alelos A y 48 alelos a, para un total de 160 alelos. Esto significa una frecuencia de p = 112/160 = 0,7 y de q = 48/160 = 0,3. Ahora usemos el EHW para predecir las frecuencias genotpicas: AA = p2 = 0,49, Aa = 2pq = 0,42, y aa = q2 = 0,09. Para finalizar, 9

multiplicamos esas frecuencias genotpicas esperadas por el nmero total de la muestra (n = 80) para obtener los nmeros esperados: AA = 39,2, Aa = 33,6 y aa = 7,2. Nuestra comparacin de nmeros observados y esperados se presenta en la tabla siguiente: Genotipo AA AA aa Total Nmero observado 40 32 8 80 Nmero esperado 39,2 33,6 7,2 80

Si la poblacin est en equilbrio, entonces el nmero de genotipos observados debera ser igual al de los esperados. Redondeando (para trabajar con probabilidades matemticas, pero con la imposibilidad biolgica de fraccionar personas), esperamos ver 39 individuos AA, 34 Aa y 7aa. Despus de redondear, vemos que hay un individuo con genotipo AA ms que lo esperado, dos individuos Aa ms y uno menos de lo esperado con el genotipo aa. Est la poblacin en equilibrio? Aunque los nmeros esperados no son exactamente los mismos, estn bastante cerca. El tema del HWE se reduce aqu a una cuestin estadstica. Es la diferencia entre los valores genotpicos observados y esperados estadsticamente significativa? Qu tan probable sera tomar una muestra de 80 individuos y obtener estas pequeas desviaciones debidas al azar? Si no es estadsticamente probable, entonces podemos decir que la poblacin no est en HWE. Para responder esta pregunta en trminos estadsticos podemos realizar una test chi-cuadrado. El test chi-cuadrado es un mtodo utilizado en estadstica para comparar frecuencias numricas. El estadstico chi-cuadrado, que se indica con el smbolo 2 , se computa usando la frmula

2 = (O E)2
E O se refiere aqu al nmero de genotipos observados y E al de esperados. La diferencia entre genotipos observados y esperados es elevada al cuadrado y dividida por el nmero esperado. El smbolo griego es usado en estadstica para denotar sumatoria. En este caso esto significa llevar a cabo la misma operacin sobre cada genotipo y entonces sumar los resultados. El valor resultante debe ser comparado con una tabla estndar de valores chicuadrados para un valor dado de probabilidad, el cual es el nivel de significacin estadstica que usamos para poner a prueba la hiptesis. La discusin de este concepto est ms all de los objetivos de este curso, pero en bioantropologa se usa generalmente un nivel del 5% (p < 0,05) para probar la hiptesis. Como se mostrar en clase, las frecuencias observadas en el ejemplo no son significativamente diferentes a las esperadas en una poblacin en equilibrio HW. Sin embargo, esto no significa que no est ocurriendo evolucin, sino que el nivel de cambio de frecuencias que se estn produciendo no es detectado en una muestra tpica. B. Hardy-Weinberg y alelos dominantes El mtodo de conteo de alelos funciona solamente cuando los alelos son codominantes. Si un alelo es dominante y el otro es recesivo, el mtodo no funciona. Para ver esto, consideremos la sensibilidad gustativa a la PTC, un rasgo en humanos que recesivo, que implica la posibilidad de degustar el qumico PTC (feniltiocarbamida). Algunas personas pueden degustar este producto qumico amargo y otros no. La gentica de la degustacin de PTC

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puede ser explicado a partir de un modelo con dos alelos, un alelo dominante sensible (T) y un alelo recesivo no sensible (t). Usando este modelo, los genotipos y fenotipos son: Genotipo TT Tt Tt Fenotipo sensible sensible no sensible

En este caso, npo tenemos forma de contar todos los alelos. Si alguien es no sensible, sabemos que esa persona tendr un genotipo tt y que deberamos contar en ese caso dos alelos tt. Sin embargo, si alguien es sensible, todo lo que sabemos es que ese individuo podra tener un genotipo TT o bien Tt, y por lo tanto no sabemos si contar uno o dos alelos. Este problema puede ser resuelto asumiendo que este locus est en EHW en la poblacin que estamos estudiando. Si consideramos que p es la frecuencia del alelo T y q la frecuencia del alelo t, y asumimos que la poblacin est en equilibrio HW, podemos describir las frecuencias fenotpicas como Frecuencia de sensibles = frecuencia de TT + frecuencia de Tt = p2 + 2pq Frecuencia de no sensibles = frecuencia de tt = q2 Dado que la frecuencia de no sensibles es q2, podemos calcular las frecuencias de q como la raz cuadrada de la frecuencia de individuos no sensibles. Una vez que obtenemos q, podemos computar p = 1 q (ecuacin 2). Veamos un ejemplo. Giles y colaboradores (1968) obtuvieron en Ticul, un pueblo de Yucatn, en Mjico, una muestra de 1374 individuos sobre sensibilidad a la PTC, encontrando 1257 sensibles y 117 no sensibles. La frecuencia de no sensibles es de 117/1374 = 0.085. Calculamos la raz cuadrada de esta frecuencia para obtener la frecuencia del alelo t: q = q2 = 0,085 = 0,292 Podemos obtener la frecuencia del alelo T entonces como p = 1 q = 1 0,292 = 0,708 En los casos en los que hay dominancia podemos calcular las frecuencias allicas siempre y cuando asumamos que la poblacin est en equilibrio HW.

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