TEST HIV

FUNDAMENTO
En base al test HIV (virus de inmunodeficiencia humana), siguiendo la tcnica establecida para su dicha realizacin, ejecutaremos la prctica de laboratorio Test de HIV del sub-modulo Realizar pruebas inmunohematologicas con la participacin del equipo de trabajo establecido, conociendo as el proceso de la prueba ya mencionada.

GENERALIDADES
VIH significa el Virus de Inmunodeficiencia Humana. VIH es el virus que causa el SIDA, el Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida. Este virus se pasa de una persona a otra por medio del contacto de sangre a sangre o por va sexual. Una mujer embarazada que est infectada tambin puede pasar el VIH a su beb durante el embarazo o el parto, al igual que al amamantar o dar pecho. Las personas con VIH tienen lo que se llama infeccin del VIH y se les conoce como VIH positivas. La prueba positiva del VIH no significa que la persona tenga SIDA. Sin embargo, la mayora de las personas que estn infectadas con el VIH tarde o temprano desarrollarn el SIDA. Desde el principio de la epidemia del SIDA, los casos de hispanos con SIDA han sido desproporcionadamente altos. Aunque los hispanos representan el 13.7% de la poblacin, representaron el 18.4% de todos los casos de SIDA en el ao 2000. CARACTERSTICAS GENERALES DEL VIH El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) pertenece a la familia de los retrovirus, subfamilia lentivirus (1). Estos virus tienen una serie de caractersticas especficas que son determinantes en la compleja patogenia de la infeccin por el VIH: - Gran diversidad gentica (virus ARN) y genoma muy complejo (lentivirus) - En su ciclo vital hay 2 fases: virin infectante (ARN) y provirus (ADN). Esta fase intermedia de integracin en el genoma husped le permite prolongados periodos asintomticos (latencia), a pesar de una viremia persistente. - Se replica mediante un mecanismo inverso al habitual en los virus ARN. El papel fundamental lo juega una enzima llamada transcriptasa inversa (TI). - Sus clulas husped son los linfocitos CD4+, macrfagos, clulas nerviosas de la microgla y clulas dendrticas residentes en mucosas (clulas de Langerhans). ESTRUCTURA y GENOMA Envoltura externa: capa lipdica que contiene 72 prolongaciones glucoproteicas (gp120 y gp41) que juegan un papel fundamental en la unin con la clula husped. Nucleocpside: protenas (p) y cido nucleico estructurados de fuera a dentro como una matriz (p17), y un "core". Este ltimo forma una cpside cnica (p24) en cuyo

interior se encuentra el genoma viral (2 cadenas idnticas de ARN unidas por la p7) y protenas con funcin enzimtica (transcriptasa inversa, integrasa, proteasa) o reguladora. Esta estructura est codificada por un genoma muy complejo del que se conocen 3 genes estructurales: gag (matriz y cpside), pol (enzimas), env (envoltura) y 6 reguladores (vif, vpr, vpu, tat, rev, nef) de otras funciones entre las que destacan la infectividad y liberacin de viriones.

CICLO DE REPLICACIN Unin de la gp120 del virin con el receptor CD4, presente en los linfocitos Th (CD4+), macrfagos y alguna otra clula (2). Se requiere la unin simultnea a un correceptor de quimiocinas que en los linfocitos es CXCR4 y en los macrfagos CCR5. Algunos virus podran utilizar ambos correceptores. Actualmente se estn investigando frmacos que inhiban la unin virin-husped. A continuacin se produce la fusin (gp41), penetracin y denudacin de la cpside: el ARN queda libre. La transcriptasa inversa utiliza este molde y fabrica una doble cadena de ADN que emigra (translocacin) hacia el ncleo de la clula donde queda integrado en su genoma. Los dos grupos de frmacos inhibidores de la transcriptasa actan a este nivel. Lo caracterstico del VIH es que una vez integrado en el genoma de la clula husped puede replicarse masivamente (viremias altas) tal como ocurre en la primoinfeccin y en los estados finales, hacerlo de forma controlada (viremias bajas persistentes) o permanecer latente (presencia del virus sin replicacin: provirus). En la infeccin por el VIH ocurren estos tres hechos. Cuando existe replicacin, el provirus ADN transcribe su molde a ARN. Este emigra hacia el citoplasma, "construye" nuevos viriones que se ensamblan y liberan. Los frmacos inhibidores de la proteasa actan a este nivel.

SIDA El SIDA es la expresin patolgica ltima de la infeccin por el VIH. El virus destruye el sistema inmunolgico lo que facilita la aparicin de infecciones oportunistas que causan la muerte del enfermo. - Inmunidad humoral. Se producen anticuerpos frente a casi la totalidad de las protenas estructurales y reguladoras del VIH. Los ms "protectores" son los anticuerpos neutralizantes frente a la gp41 y el dominio hipervariable V3 de la gp120, aunque existen datos discordantes sobre el papel de los anticuerpos en la evolucin de la enfermedad. La interaccin de la gp120 con los receptores de los linfocitos CD4+ induce cambios conformacionales en la envuelta del virus facilitando la exposicin del dominio V3 para su interaccin con las quimiocinas. Estos dominios estn ocultos en la conformacin nativa de gp160 lo que les hace inaccesibles a la accin de los anticuerpos neutralizantes. Algunos postulan que los anticuerpos neutralizantes pueden facilitar la infeccin al actuar como opsoninas que recubren las partculas virales facilitando su fagocitosis por monocitos-macrfagos que seran de esta forma infectados. El VIH produce disfuncin de la respuesta de las clulas B caracterizada por activacin policlonal, hipergammaglobulinemia y ausencia de respuesta especfica. - Inmunidad celular. En pacientes seropositivos existe una expansin clonal de linfocitos CD8+ con actividad citotxica (CTL) dirigidos frente a diferentes protenas estructurales y reguladoras del virus. Esta respuesta es intensa y completa y acta como filtro en la seleccin de variantes vricas. De hecho, los mecanismos de variabilidad gentica del VIH actan bajo la presin selectiva de la actividad CTL. Adems de esta respuesta especfica, existe una respuesta inespecfica (no restringida por el sistema HLA) de tipo ADCC (citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos) y una actividad citotxica natural por las clulas NK. La actividad antivrica de todas estas clulas es ms intensa en los estados asintomticos de la infeccin, por lo que su mantenimiento se considera un factor de buen pronstico. Por ltimo, los linfocitos CD8+ liberan factores que inhiben la replicacin viral. Estos factores parecen ser diferentes quimiocinas que competiran con el virus para ocupar los correceptores de los linfocitos CD4+. Se ha relacionado la resistencia a la infeccin por el VIH con la produccin de niveles elevados de una de estas quimiocinas (RANTES).

TECNICA
TEST HIV MUESTRA: Suero TECNICA DE TOMA DE MUESTRA: Puncin venosa

Procedimiento:
1.- Colocar 0.5 l de suero en el cassette del test de HIV. 2.- Enseguida colocar 3 gotas del reactivo del test de HIV. 4.- Dejar reposar durante 10 min.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS.

TEST HIV

MATERIAL Aplicador Test HIV (cassette)

EQUIPO -

REACTIVOS Buffer HIV

INTERPRETACION:

Positivo

Negativo

RESULTADOS:
TEST HIV NEGATIVO (-)

CONCLUSION:
Concluimos que gracias a la prctica realizada, obtuvimos el conocimiento correcto de la realizacin de la prueba Test HIV, con el cual el resultado obtenido fue negativo; as como la informacin sobre el virus de inmunodeficiencia humana y su expresin patolgica que es el sida.

BIBLIOGRAFIA
EL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA. INMUNOPATOGENIA Alvaro Pascual Hernndez y Jos Luis Corral Arias VIH Y SIDA Alianza Nacional para la Salud Hispana 1501 16th Street, NW Washington, DC 20036-1401 http://www.hispanichealth.org