Tratamento de Agua na

ndstria Farmacutica
Faculdade de Cincias Farmacuticas
Dep. Tecnologia Bioqumico-Farmacutica
Curso de Tecnologia Qumico-Farmacutica
Dissertao
para obteno do grau de Mestre
Alzira Maria da Silva Martins
Orientadora:Prof. Titular Dra Thereza Christina Vessoni Penna
Identificao e verificao da
resistncia aos sanitizantes dos
microrganismos presentes na gua
destinada ao abastecimento pblico
e em diferentes pontos de um
sistema de purificao .
Introduo:
Aplicaes da gua:
gua potvel
gua industrial
gua purificada
gua para injetveis
Principais contaminantes da gua
Contaminantes particulados
Contaminantes inorgnicos
Contaminantes orgnicos
Contaminantes microbiolgicos
Parmetros microbiolgicas da gua para abastecimento pblico
Caractersticas qumicas da gua para abastecimento pblico
(Portaria n 1469 de 29/12/200)
At 250mg/litro em on sulfito Sulfatos
2,0mg/litro em cloro residual Cloro residual
At 250mg/litro on cloreto Cloretos
At 0,3mg/litro em ferro Ferro
At 10mg/litro em nitrognio Nitrognio ntrico
At 10mg/litro em oxignio Oxignio consumido
Entre 6 a 9,5 pH
At 1000mg/litro Slidos dissolvidos Totais
Cheiro de cloro levemente perceptvel/ agradvel Odor
Lmpido Aspecto
Ausncia em 100 mL Coliformes Totais
Ausncia em 100 mL Escherichia coli ou coliformes
termotolerantes


gua purificada Limites
Condutividade < 1,3uS/cm
TOC < 0,5mg/L
Bactrias < 100UFC/mL
gua para injetveis Limites
Condutividade < 1,3uS/cm
TOC < 0,5mg/L
Bactrias < 10UFC/mL
Pirognio < 0,25UE/mL

Determinao de padres de qualidade de gua,
segundo a Farmacopia
gua de alimentao Ponto 1
Filtros Multimeios Ponto2
Abrandadores Ponto 3
Filtro de Carvo Ponto 4
Filtro de 5 micras Ponto 5
Osmose Reversa Ponto 6
Deionizao continua Ponto 7
gua Purificada Ponto 8
UV- Ponto 9
Filtros de 0.05 micras Ponto 10
Pontos de Uso Ponto 11,12,13
gua de alimentao Ponto 1
Filtros Multimeios Ponto2
Abrandadores Ponto 3
Filtro de Carvo Ponto 4
Filtro de 5 micras Ponto 5
Osmose Reversa Ponto 6
Deionizao continua Ponto 7
gua Purificada Ponto 8
UV- Ponto 9
Filtros de 0.05 micras Ponto 10
Pontos de Uso Ponto 11,12,13
Sistema de gua purificada da Edwards Lifesciences Macchi
A Edwards Lifesciences Macchi fornece na linha
cardiovascular uma extensa gama de produtos e servios
divididos em 4 quatro grandes reas.
Cirurgia Cardaca
Cuidado Intensivo
Perfuso/CEC
Vascular
LAVAGEM DE
COMPONENTES
LAVAGEM DE FILTROS TESTE DE ESTANQUEIDADE
Pontos de uso
Agentes qumicos utilizados na higienizao dos subsistemas de tratamento de gua
Ajuste de pH 30 Unidade de Deionizao 0,3 0,5 cido
clordrico
Ajuste de pH 30 Osmose Reversa 2,4 0,5 cido ctrico
Ajuste de pH 30 Osmose Reversa
Deionizao Continua
12,8 0,4 Hidrxido
de Sdio
Declorinao 90 Filtros multimeios
Abrandadores
Filtro de Carvo
4,0 1,0 Bissulfito
de sdio
Desinfetante 60 Tanque de gua purificada
Linha de distribuio aos pontos
de uso
11,9 0,5 Hipoclorito
de sdio
Desinfetante 01 Pontos de amostragem(externo) 7.2 70,0 lcool
Desinfetante 180 Osmose reversa
Unidade deionizao
2.1 PAA(0,4
5%)+H
2
O
2
(2,2%)
Minncare
aplicao Tempo de
contato
(minutos)
Ponto de uso Valor
final do
pH
Conc. de
uso (%)
Agente
qumico
Material e Mtodos
Amostragem: Todos os pontos foram sanitizados com lcool 70%,
seguido pela coleta em sacos estreis de polietileno
Filtrao: As amostras foram submetidas ao mtodo de filtrao de
membrana 0,45 um. Incubadas em meio TSA 35C/72 horas
(contagem total), em meio m Endo Agar Less 34,5-35,5C/22 horas
(coliformes total)
Isolamento
Contagem das colnias
Subcultura das colnias
Colorao de Gram
Indol
Oxidase
Identificao
BBL Crystal
API 20 NE
Substratos enzimticos e
bioqumicos. As reaes so
baseadas na habilidade do
microrganismo em metabolizar o
substrato, provocando alterao
de cor do indicador de pH.
composto por 20 microtubos (8
testes convencionais e 12 de
assimilao).
As reaes durante o perodo de
incubao, se traduzem em
rinsagens espontneas coloridas e
reveladas por adio de reativos.
Nos testes de assimilao as
bactrias crescem se forem
capazes de utilizar o substrato
correspondente.
Eficcia dos desinfetantes
Concentrao inibitria mnima(CIM)
A avaliao do espectro da ao do agente qumico quanto a
resistncia dos microrganismos realizada atravs de diluies,
onde determinada a menor concentrao inibitria mnima.
Tempo de reduo decimal (Valor D)
o intervalo de tempo necessrio para a reduo de um ciclo
logartmico de uma populao microbiana quando em contato com
agentes desinfetante ou esterilizante.
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
U
F
C
/
1
0
0
m
L
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1
0
1
1
1
2
1
3
pontos de amostragem
Contagem total de heterotrficos (UFC/100mL)
RESULTADOS
Resultados
% de bactrias identificadas
Microrganismos N colnias
%de identificao
Pseudomonas aeruginosa
25 32.05
Pseudomonas picketti
18 23.08
Pseudomonas vesiculares
10 12.82
Pseudomonas diminuta
09 11.54
Flavobacterium aureum
05 6.42
Pseudomonas fluorescens
04 5.13
Acinetobacter lwoffi
02 2.56
Pseudomonas putida
02 2.56
Pseudomonas alcaligenes
01 1.28
Pseudomonas paucimobilis
01 1.28
Flavobacterium multivorum
01 1.28
Contagem Total
78 100.0


Resultados
Concentrao inibitria mnima
0,06 0,50 1% Minncare
(acido peractico+ H
2
O
2
)
0,06 0,25 0,5% Hipoclorito de sdio
0,1 0,3 0,4% Hidrxido de sdio
0,03 0,078 0,5% Bissulfito de sdio
2,18 17,5 70% lcool
0,16 0,16 0,5% acido clordrico
0,125 0,25 0,5% acido ctrico
E. Coli
ATCC 25922
Pseudomonas
aeruginosa
identificada
(%)
Agente qumico
5
9
8
6
9
6
4
Valor D
(min)
0.98
0.98
0.94
0.95
0.95
0.92
0.97
R
2
30 1.27-0.1808 1% Minncare
(acido peractico +
H
2
O
2
)
54 1.50-0.1063 0.5% Hipoclorito de
sdio
48 2.22-0.121 0.4% Hidrxido de
sdio
36 2.02-0.1619 0.5% Bissulfito de
sdio
54 1.71-0.103 70% lcool
36 2.32-0.1502 0.5%Acido clordrico
24 1.77-0.244 0.5% acido ctrico
6log
10
Log N=
Log N
0
-1/Dt
Agente qumico
Resultados
Valor D - Pseudomonas aeruginosa isolada e identificada
Resultados
Valor D Eschericihia coli ATCC 25922
24 4 0,90 1,11-0,24 1%Minncare
(acido peractico+H
2
O
2
)
24 4 0,99 1,16-0,22 0,5% Hipoclorito de sdio
30 5 0,94 1,81-0,19 0,4% Hidrxido de sdio
30 5 0,97 1,77-0,20 0,5% Bissulfito de sdio
36 6 0,98 1,31-0,17 70% lcool
24 4 0,98 1,50-0,24 0,5% Acido clordrico
42 7 0,95 2,05-0,12 0,5%Acido ctrico
6log
10
Valor D
(min)
R
2
Log N=
Log N
0
-1/Dt
Agente qumico
Discusso
Hipoclorito de sdio
Valor D
CIM
P.aeruginosa = 0,25%
E.coli = 0,06%
Hipoclorito de Sdio 0,5%
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
0 2 4 6 8 10 12
tempo de contato (min)
L
o
g

(
U
F
C
/
m
L
)
P.aeruginosa D=9min
E.coli D=4min
Minncare
Valor D
Minncare 1%
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
0 1 2 3 4 5 6
tempo de contato (min)
L
o
g

(
U
F
C
/
m
L
)
P.aeruginosa D=5min
E.coli D=4min
CIM
P.aeruginosa = 0,50%
E.coli = 0,06%
Concluses
A Pseudomonas aeruginosa foi a bactria com
maior % de identificao e maior resistncia ao
cloro.
O Hipoclorito de sdio na concentrao 0,5%/
60min, mostrou-se adequado para sanitizao
dos reservatrios de gua, linhas de distribuio e
pontos de uso.
O Minncare
R
na concentrao de 1%/ 180 min,
mostrou-se adequado para sanitizao das
membranas de osmose reversa e unidade de
deionizao.
As bactrias gram negativas no fermentadoras
de glicose, se mostraram adequadas para
monitorao da sanitizao em sistemas de
tratamento de gua.
Em guas tratadas a anlise para P.aeruginosa e
faz necessria, pois sua presena marcante e
tambm por sua capacidade de formar biofilme,
que causa interferncia em processos
farmacuticos e hospitalares.
O procedimento de higienizao de tanques de
armazenamento da gua do abastecimento
pblico e sistemas de tratamento de gua devem
ser rigorosos, de forma a assegurar a ausncia de
microrganismos patgenos e pirognio