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em equinos: uma doena negligenciada e emergente

Equine lyme-simile borreliosis: a neglected and emerging disease


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Borreliosis de lyme-simile en caballos: una enfemidad olvidada y en ascencin

RESUMO: A Borreliose de Lyme-Smile uma zoonose transmitida por carrapatos dos gneros Amblyomma e/ ou Rhipicephalus, anloga Borreliose de Lyme do hemisfrio norte porm tipicamente brasileira, causada por espiroquetas do complexo Borrelia burgdorferi de morfologia atpica. Possui carter altamente mrbido e recorrente em humanos e capaz de desenvolver muitas complicaes sistmicas tais como afeces articulares, cardacas, oftlmicas e neurolgicas. uma infeco pouco diagnosticada e estudada nos equinos nacionais, especialmente em seus aspectos clnicos e teraputicos, porm o crescente nmero de diagnsticos em humanos sugere a hiptese de que os equinos possam atuar como reservatrios e transportadores da doena. Unitermos: borrelia, carrapatos, infeco, espiroquetas, Elisa, PCR ABSTRACT: The Lyme-Simile Borreliosis is a zoonosis transmited by the ticks Amblyomma and/or Rhipicephalus, equivalent of Lyme Borreliosis of north hemisphere, however tipically brazilian, caused by spirochetes of complex of Borrelia burgdorferi with atipical morphology. It has a highly morbid and recurring characteristics in humans and is able to develop many systemic complications such as joint, cardiac, ophthalmic and neurological disorders. Its an infection rarely diagnosed and studied in the national horses, especially in their clinical and therapeutic aspects, but the growing number of diagnoses in humans suggests the hypothesis that horses can act as reservoirs and carriers of disease. Keywords: borrelia, ticks, infection, spirochetes, Elisa, PCR RESUMEN: La enfermedad de Lyme-Simile es una zoonosis transmitida por garrapatas del gnero Amblyomma y/o Rhipicephalus, similar a la enfermedad de Lyme en el hemisferio norte, pero tpicamente brasilea, causada por espiroquetas del complejo Borrelia burgdorferi con morfologa atpica. s muy morbosa y se repite en los seres humanos y es capaz de desarrollar mltiples complicaciones sistmicas, como los trastornos articulares, cardacos, oftalmolgicos y neurolgicos. Es una infeccin poco diagnosticada y estudiada en los caballos nacionales, especialmente en sus aspectos clnicos y teraputicos, pero el creciente nmero de diagnsticos en humanos sugiere la hiptesis de que los caballos pueden actuar como reservorios y transmisores de enfermedades. Palabras clave: borrelia, garrapatas, infeccin, espiroquetas, Elisa, PCR

Roberta Carvalho Basile* (basile.roberta@gmail.com) Doutoranda em Clnica Mdica Veterinria - Univ. Estadual Paulista (UNESP) - Jaboticabal, SP Renatha de Almeida Arajo Doutoranda em Clnica Mdica Veterinria - Univ. Estadual Paulista (UNESP) - Jaboticabal, SP Matheus Henrique M. Silva Mestrando em Clnica Mdica Veterinria - Univ. Estadual Paulista (UNESP) - Jaboticabal, SP Guilherme de Camargo Ferraz Prof. Dr. de Farmacologia Veterinria e Fisiologia do Exerccio Equino - Univ. Estadual Paulista (UNESP) - Jaboticabal, SP Virgnia Nazario Bonoldi, Elenice Mantovani: Doutoras em Cincias da Faculdade de Medicina Universidade de So Paulo, SP Natalino Hajime Yoshinari Prof. Dr. de Reumatologia Mdica Prof. Responsvel pelo LIM-17 Faculdade de Medicina Universidade de So Paulo, SP Delphim da Graa Macoris Prof. Dr. Depto. de Clnica Cirrgica Fcav/Unesp - Jaboticabal, SP Antonio de Queiroz-Neto (aqueiroz@fcav.unesp.br) Prof. Dr. de Farmacologia Veterinria e Fisiologia do Exerccio Equino, Prof. Responsvel pelo LAFEQ - Univ. Estadual Paulista (UNESP) - Jaboticabal, SP
* Autora para correspondncia

Introduo A Borreliose de Lyme (BL), ou Doena de Lyme (DL), foi descoberta nos EUA em 1975 ao serem identificados casos de artrite idioptica juvenil ps exposio a carrapatos. O agente etiolgico da BL foi identificado em 1982 por Willy Burgdorfer, sendo ento denominada Borrelia burgdorferi1, apesar de pesquisadores europeus j conhecerem diferentes aspectos desta enfermidade. Define-se a Borreliose de Lyme como uma zoonose encontrada nos EUA, Europa e sia, transmitida por carrapatos do complexo Ixodes ricinus, causada por espiroquetas do complexo Borrelia

burgdorferi sensu lato, causadora de inmeras manifestaes clnicas sistmicas2 em humanos e animais domsticos, incluindo os equinos. Existem ainda quatro grupos de enfermidades distintas causadas por borrelias, a citar: a febre recorrente epidmica humana, causada pela B. recurrentis; a borreliose aviria, que promove um processo anemiante febril e grande mortalidade em aves e provocada pela B. anserina; a borreliose bovina, que acomete bovinos e equinos provocando quadros de anemia, causada pela B. theileri e o aborto enzotico bovino, que acomete bovinos e cervdeos, sendo determinada pela B. coriaceae3.

Borreliose de Lyme no Brasil A primeira pesquisa da BL em humanos no Brasil foi realizada por YOSHINARI e colaboradores4, porm o primeiro caso no pas foi diagnosticado somente em 1992. O crescente nmero de casos identificados evidenciou diferenas entre a doena que se desenvolvia no hemisfrio norte em relao ao Brasil5,6,7,8. Sob o aspecto epidemiolgico, no Brasil no h ocorrncia suficiente de carrapatos do gnero Ixodes de forma a poder classific-los como vetores preferenciais do agente. Clinicamente, apesar da ocorrncia de sinais tais como o eritema migratrio (caracterstica patognomnica da DL) e das complicaes sistmicas habituais, a enfermidade brasileira cursa com recorrncias, especialmente se o tratamento com antibiticos iniciado aps trs meses do evento da infeco. A pesquisa de anticorpos anti-Borrelia americana ou europia, apesar de relevante para o diagnstico, resulta em ttulos baixos e oscilantes. Constata-se ainda que os doentes no Brasil apresentam alta frequncia de anticorpos dirigidos contra diferentes constituintes celulares. Dessa forma, a enfermidade identificada no pas denominada Doena de Lyme-Smile (DLS) ou Borreliose de Lyme-Smile (BLS), de forma a diferenci-la da forma clssica da doena9. Ainda com relao s diferenas entre a forma clssica e brasileira da doena, pesquisas realizadas no Laboratrio de Investigao em Reumatologia do Hospital das Clnicas da FMUSP (LIM-17 HCFMUSP) mostraram a ocorrncia de microorganismos com estruturas morfolgicas semelhantes a Mycoplasma spp, Clamydia spp e espiroquetdeos sem flagelos no sangue perifrico de pacientes com DLS (Figura 1). Porm, foi constatada sorologia negativa para Mycoplasma spp e Clamydia spp nestes indivduos, sugerindo-se ento uma diferena morfolgica entre a B. burgdorferi e o microorganismo identificado como possvel agente causador da BLS2. Alm disso, os testes sorolgicos especficos para a identificao da B. burgdorferi sensu lato norte americana ou europeia apresentam baixa sensibilidade quando aplicados aos pacientes brasileiros10. Assim, define-se a Borreliose de LymeSmile como uma zoonose transmitida por carrapatos dos gneros Amblyomma e/ou Rhipicephalus, tipicamente brasileira, causada por espiroquetas do complexo Borrelia burgdorferi, de morfologia atpica tanto nos hospedeiros vertebrados quanto invertebrados. Possui carter altamente mr-

bido e capaz de desenvolver complicaes sistmicas ao longo de sua evoluo, determinando o surgimento de enfermidades crnicas, especialmente neurolgicas e articulares, acompanhadas de manifestaes de autoimunidade2. Esta doena tambm foi denominada como Sndrome de Baggio-Yoshinari (SBY) em humanos. A Borreliose de Lyme nos animais Alm da identificao da BL em humanos, esta enfermidade foi reconhecida como capaz de infectar animais silvestres e domsticos. Nos EUA, o agente est amplamente disseminado em roedores e cervdeos, os quais atuam como reservatrios naturais. Os animais domsticos, tais como os caninos, bovinos e equinos, comportamse como agentes transportadores dos vetores. Diferente da infeco subclnica nos animais silvestres, o agente capaz de pro-

vocar manifestaes da doena nos animais domsticos11,12,13. No Esprito Santo, foi identificada uma importante associao entre a ocorrncia de casos de SBY e a presena de capivaras, sugerindo que os carrapatos que parasitam estes roedores podem participar do ciclo epidemiolgico da doena em humanos14. SALLES e colaboradores15 observaram que equinos expostos a carrapatos possuem maior frequncia de soropositividade para B. burgdorferi cepa G39/40 nos testes Elisa indireto e Western blotting, quando comparados queles com controle rigoroso de ectoparasitas. Borrelias viveis j foram encontradas na urina de equinos saudveis em uma regio endmica dos Estados Unidos16, alertando para a possibilidade de transmisso do agente por vias de contato, tal como ocorre com as leptospiras, alm da picada do carrapato.

Figura 1: Borrelia burgdorferi em microscopia eletrnica

Figura 2: Cultura Borrelia burgdorferi em BSK

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PROF. DR. NATALINO YOSHINARI

No Brasil, estudos15 detectaram a ocorrncia mdia de 9,8% de equinos soropositivos no estado do Rio de Janeiro, sendo que em Seropdica foi encontrada frequncia de 42,8%. Identificou-se ainda que a ocorrncia de anticorpos homlogos antiBorrelia em equinos nos municpios de Trs Rios e Vassouras17 foi de 28,4% e no Belm do Par18 foi de 26,7%. Em bovinos, um estudo19 identificou a ocorrncia de 54,9% de animais soropositivos. Em ces, pesquisadores obtiveram soropositividade em 48,25% dos animais testados20. A ocorrncia da BL em veterinrios de animais silvestres de aproximadamente 6,4% de soropositividade21. Epidemiologia A infeco geralmente adquirida por meio de larvas ou ninfas de carrapatos que se aderem aos animais, sendo que o DNA da B. burgdorferi sensu lato mais frequentemente encontrado nas fmeas. A espiroqueta transmitida entre os carrapatos pela forma transestadial, transovariana e ainda, ao estarem aderidos ao mesmo hospedeiro, mesmo que no ocorra carga bacteriana suficiente para a infeco deste. Uma vez que o carrapato est aderido ao hospedeiro e engurjitado, as espiroquetas migram atravs do mesentrio e hemocele, atingindo as glndulas salivares cerca de 18 horas aps o incio da adeso. O ciclo completo da B. burgdorferi na natureza ainda desconhecido22. Patogenia B. burgdorferi capaz de se evadir do sistema imunolgico dos hospedeiros vertebrados e estabelecer infeces crnicas resi-

dindo em alguns tecidos especficos por longos perodos de tempo - pele, fscias, tecido perineural e membranas sinoviais23. Esta espiroqueta possui atividades de estimulao celular e imunolgicas prprias, as chamadas lipoportenas de superfcie exterior (outer surface lipoproteins - Osps). OspA e OspB estimulam os linfcitos B e a produo de citocinas pelos macrfagos e clulas endoteliais24, resultando na penetrao das espiroquetas atravs do endotlio vascular. Os neutrfilos tambm so ativados pelas OspA de maneira similar ativao realizada pelo LPS (lipopolissacardeo de bactrias gram-negativas). A B. burgdorferi tambm capaz de promover hemlise mais intensa em equinos do que em outros animais25. Alguns pesquisadores tambm afirmam que a infeco por B. burgdorferi reduz dramaticamente os nveis de retinol por um mecanismo ainda desconhecido, promovendo uma deficincia transitria de vitamina A. Esta vitamina promove a modulao da sntese de IL-12 e IFN, predispondo a uma resposta inflamatria excessiva, o que explicaria a artrite aguda provocada pela Doena de Lyme26. Sinais clnicos A BL pode provocar manifestaes clnicas em equinos tais como febre e letargia27,28, artrite29,30, claudicao31, rigidez muscular32, abortamento33, meningorradiculoneurite e encefalite34,35,36, uvete29,30,37 (Figura 3) e morte prematura de potros38. Uma possvel explicao para que haja um leque de manifestaes to vasto a alta probabilidade de co-infeco com outros patgenos, como o Anaplasma phagocytophilum e a Erlichia equi39.

Tcnicas de diagnstico O diagnstico mais comum da infeco por B. burgdorferi em cavalos realizado pela deteco de anticorpos. Os mais frequentes so os testes de imunofluorescncia (IFA) e ELISA, sendo que este ltimo apresenta maior sensibilidade em equinos40. Testes de especificidade para IFA e ELISA revelaram mnima reao cruzada com antgenos anti-Leptospira41. Em geral, devido lenta multiplicao destas espiroquetas no hospedeiro, os ttulos de imunoglobulina G (IgG) podem levar de 3 6 semanas para serem detectveis e de 8 16 semanas para atingirem seus picos de mxima concentrao23,15,42. Porm, como a especificidade dos testes IFA e ELISA ainda questionvel, dado um resultado positivo, este deve ser comprovado por meio de um segundo mtodo. Geralmente adota-se o uso de Western blotting para deteco de anticorpos contra antgenos especficos da Borrelia43 ou ainda o PCR para deteco direta do agente, sendo este o teste com mais alta sensibilidade e especificidade40,42. Diagnstico diferencial A grande variedade de sinais clnicos torna amplo o diagnstico diferencial da doena, dentre os quais pode-se citar: polirradiculoneurite por encefalomielite protozoria equina (EPM)44, uvete reccorrente equina por leptospirose ou Onchocerca cervicalis45, arritmia paroxstica idioptica, poliartrites, miopatias por esforo, abortamento por herpesvirus equino (HVE-1), febre e letargia por babesiose ou erliquiose. Formas de tratamento O tratamento realizado com oxitetraciclina (6,6 mg/kg, IV, a cada 12 h) durante trs semanas se mostrou eficaz em equinos quando comparado ao uso de doxiciclina (10 mg/kg, VO, a cada 12 h) ou ceftiofur (2,2 mg/kg, IM, a cada 12 h) em pneis infectados experimentalmente32. Somente a oxitetraciclina promoveu resultados negativos tanto na cultura quanto no PCR de tecidos (linfonodos, pele, fscias musculares, membranas sinoviais, pericrdio, meninges) ao final do tratamento. A oxitetraciclina pode ainda ser administrada (5,0 mg/kg, IV, a cada 24 h) por quatro semanas, com alta eficcia na eliminao da borreliose de Lyme em equinos42. Consideraes finais A Borreliose de Lyme-Smile uma doena pouco estudada e diagnosticada nos equinos nacionais. Porm, as pesquisas realizadas at o momento demostram que sua

Figura 3: Equino com uvete apresentando opacidade de crnea, epfora, blefaroespasmo e hiperemia conjuntival
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frequncia de ocorrncia bastante relevante. Dada sua importncia devido s mltiplas manifestaes clnicas e tambm por ser uma zoonose, esta doena dever se tornar cada vez mais mapeada e tratada. O controle dos vetores e o tratamento dos equinos infectados no se restringe somente ao negcio do cavalo, pois a manuteno de animais infectados se reflete em uma questo de sade pblica. 

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Agradecimentos: s colegas Dra. Virgnia Lcia Nazario Bonoldi e Dra. Elenice Mantovani, colaboradoras do Laboratrio de Reumatologia (LIM-17) do Hospital das Clnicas da Faculdade de Medicina da Universidade de So Paulo. O laboratrio est disponvel para a realizao da sorologia em equinos. e-mail: yoshinari@lim17.fm.usp.br

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