LA CLULA VEGETAL

I. OBJETIVOS Observar e identificar la clula vegetal e identificar sus partes: Pared celular, membrana celular y organelos citoplasmticos Profundizar el conocimiento de la unidad anatmica y fisiolgica que es la clula Observar en su medio a clulas vivas y clulas muertas Observar los diferentes plastidios: cloroplastos y leucoplastos Conocer la estructura y funcin de los organelos presentes en la clula vegetal II. FUNDAMENTO Siendo la clula la unidad morfolgica, fisiolgica y gentica de todo ser vivo, podemos afirmar que el estudio de los componentes, funcionamiento de la clula y la diversidad de sus agrupaciones; determinan la diferenciacin de tejidos y rganos ms o menos especializados. As mismo, nos permite descubrir y entender los beneficios y utilidades que puede brindar la diversidad del Reino Vegetal III. MARCO TERICO LA CLULA: Es la unidad fundamental de la materia viva. En la unidad vital, morfolgica, fisiolgica y gentica. Los primeros conocimientos sobre la clula datan de 1665, fecha en Robert Hooke publico los resultados de sus observaciones sobre los tejidos vegetales, realizadas con un microscopio construido por el mismo que llegaba a unos 50 aumentos. En su obra Micrographia describi con detalle el tejido que forma la corteza del corcho y observo que estaba constituido por una serie de celdillas, similares alas de un panal de abejas, alas que bautizo como clulas (del latn cellulae = celdillas, cuartitos). Durante el siglo XIX, gracias ala mejora de las tcnicas de preparacin microscpica, se pudo estudiar las clulas con detalla y observar diversas estructuras en su interior. As, en 1831 Brown descubri en las clulas vegetales un corpsculo al que denomino ncleo Cuatro aos ms tarde, Flix Dujardin propuso que las clulas no eran estructuras huecas sino que contenan una masa homognea en su interior, de composicin viscosa, ala que denomino protoplasma.

Estos y otros hallazgos fueron dirigiendo el pensamiento cientfico hacia un postulado esencial: que todos los seres vivos se encuentran constituidos por clulas. Fueron el botnico Mathias Schleiden en 1838 y el zologo Theodor Schawn en 1839 quienes propusieron esta generalizacin fundamental conocida como teora celular. TEORA CELULAR: El trabajo de los investigadores del siglo XIX sent las bases para el desarrollo de la teora celular. Siendo los postulados los siguientes: 1. La clula es la unidad estructural bsica de todos los seres vivos: todos los organismo estn formados por una o mas clulas.

2. La clula es la unidad funcional de los seres vivos: ella realiza todos los procesos, reacciones qumicas y funciones que permiten la vida.

3. La clula es la unidad de origen de todos los seres vivos: toda clula proviene de otra preexistente 4. La clula es la unidad gentica de los seres vivos: ella contiene el material hereditario que se necesita para regular las funciones celulares. Este material es transmitido por la clula madre a las clulas hijas

CARACTERSTICAS DE LA CLULA: La clula es la unidad mas simple conocida con capacidad para realizar las tres funciones vitales: nutricin, relacin y reproduccin por si misma; es decir sin necesidad de otros seres vivos. Todas las clulas tienen en comn las siguientes caractersticas: Formadas por molculas biolgicas( carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos) Utiliza ADN como material hereditario Posee membrana celular, citoplasma y organelos Obtiene energa y nutrientes del ambiente

PRINCIPALES DIFERENCIAS ENTRE CLULAS ANIMALES Y CLULAS VEGETALES Estructura Pared celular Aparato mittico (Huso acromtico ) Centrolos Vacuolas Metabolismo Mitocondrias Cloroplastos Clula animal Ausente Astral Presente Vacuolas pequeas Hetertrofo Presentes Ausentes Clula vegetal Pared celular constituida por celulosa. Anastral Ausente Vacuolas grandes, puede ser una grande central Auttrofo Presentes Presentes

LA CLULA VEGETAL Los vegetales son organismos multicelulares compuestos de millones de clulas con funciones especializadas, las cuales pueden diferir bastante en su estructura. No obstante todas las clulas vegetales tienen la misma organizacin bsica de eucariota; contienen ncleo, citoplasma, y organelos subcelulares (sistema de endomembranas, lisosomas, peroxixomas, mitocondrias) y una membrana plasmtica que marca los lmites de la clula. Ciertas estructuras, incluyendo el ncleo, puede ser perdido durante la maduracin, pero todas las clulas vegetales comienzan con una composicin similar de organelos. Adems contiene estructuras propias, singulares de la clula vegetal que no se encuentran en las clulas animales:

Pared Celular: Es la caracterstica ms distintiva de las clulas vegetales. Entre la importancia de la pared celular tenemos que: limita el tamao de la clula, evitando su ruptura debido a la obtencin de agua por la vacuola; juega un papel muy importante en la absorcin, transporte y secrecin de sustancias y sirve de lugar para la actividad lisosomal o digestiva de la clula vegetal. Su componente ms caracterstico es la celulosa, sta a su vez se compone de molculas de glucosa. El marco de celulosa que se encuentra en la pared celular est asociado con una matrix de molculas no celulocticas que son: hemicelulosa, sustancias pectnicas, lignina (sirve para aadir rigidez a la pared), cutina, suberina y ceras, estas ltimas tres son sustancias grasas que se encuentran en la pared exterior y tejidos vegetales. La cutina y la suberina actan en conjunto con las ceras protegiendo a la planta de desecacin. La pared celular vara grandemente en espesor, dependiendo del rol de la clula en la planta y tambin de la edad de la clula individual. La pared celular est compuesta de 3 capas, lamela media, pared primaria y pared secundaria. a) Lamela media: Est compuesta de sustancias pcticas. Esta es difcil de distinguir de la pared primaria, especialmente en clulas donde la pared primaria es gruesa. b) Pared primaria: Esta capa de celulosa se deposita antes y durante el crecimiento de la clula. Esta pared primaria adems de celulosa contiene hemicelulosas, pectinas y glicoprotenas. Adems la pared primaria puede lignificarse (esto es almacenar lignina). El componente pectnico le imparte propiedades elsticas a la pared, lo que permite que la pared primaria sea elstica. Las clulas que estn activas en divisin slo contienen pared primaria, estas clulas pueden perder su forma celular especializada, dividirse y diferenciarse en nuevas clulas. Por esta razn estas clulas con pared primaria estn envueltas en cicatrizar las heridas de las plantas adems del proceso de regeneracin.

c) Pared secundaria esta se deposita por el protoplasto dentro de la pared primaria. Esto ocurre luego de que la clula ha dejado de crecer. La celulosa es ms abundante en las paredes secundarias. Las sustancias pectnicas estn ausentes al igual que las glicoprotenas. Dentro de las caractersticas de la pared secundaria es que son rgidas y su matrix est compuesta de hemicelulosas. La importancia de las paredes secundarias en clulas especializadas es que funcionan en conduccin de agua. En estas clulas el protoplasto muere luego que la pared secundaria ha sido depositada. Membrana Celular: Es una delgada lamina que envuelve a la clula y la separa del medio externo. Esta encargada de : Controlar el paso de las sustancias que entran y salen de la clula Detecta cambios externos a la clula y reacciona ante ellos Permite la comunicacin entre clulas Favorece la adhesin entre las clulas Sirve como superficie para diversas reacciones qumicas

Mitocondria: Es el organelo responsable de respiracin. Al igual que los cloroplastos est rodeada por dos membranas. La membrana interior est pegada y forma lo que se conocen como las crestas. La importancia de stas es que aumenta el rea superficial disponible para llevar a cabo ms trabajo en menos espacio. La cantidad de mitocondrias en la clula vara dependiendo de la demanda por ATP de la clula. Las mitocondrias se encuentran en constante movimiento dentro de la clula, para as proveer el ATP necesario en el sitio necesario. Las mitocondrias son organelos semiautonmicos ya que contienen los elementos necesarios para la sntesis de sus propias protenas

Las Vacuolas: Son caractersticas de las clulas vegetales. Estn rodeadas por una membrana llamada tonoplasto y llena de un lquido llamado savia celular. El agua es el componente principal de la savia celular pero adems contiene sales, azcares y protenas. Con la vacuola se desarrolla la Presin de Turgor (presin que ejerce el movimiento del agua dentro de la clula). La Presin de Turgor es importante para mantener la rigidez de la clula. El tonoplasto juego un papel importante en el transporte activo de ciertos iones hacia el interior de la vacuola retenindolos all. Esto hace que en la vacuola se almacenen grandes cantidades de iones. Las vacuolas tienden a ser cidas, por ejemplo, las vacuolas de las ctricas son cidas y responsables del sabor amargo de la fruta. Las funciones de las vacuolas son: almacenar productos del metabolismo (por ejemplo protenas de reserva en semillas), remover productos secundarios txicos (ejemplo la nicotina), almacenar pigmentos solubles en agua como las antocianinas (color azul, violeta y rojo) que son responsables del color azul y rojo en muchos vegetales, frutas y flores; adems las vacuolas estn envueltas en el rompimiento de macromolculas y el reciclaje de sus componentes dentro de la clula. Organelos enteros pueden ser depositados y degradados por las vacuolas. Por su actividad digestiva se compara con los lisosomas en clulas animales. La cantidad de vacuolas en la clula depende del grado de madurez de la clula, mientras ms madura o diferenciada est la clula, menor cantidad de vacuolas encontraremos en ella. En las clulas maduras la vacuola puede ocupar hasta un 90% del volumen

El Retculo Endoplsmico: Es un sistema de membranas tridimensional presentes en clulas eucariticas que divide el citoplasma en comportamientos y canales. La abundancia de este organelo en la clula depende de: el tipo de clula, actividad metablica y estado de desarrollo. La funcin principal del Retculo endoplsmico es servir como un sistema de comunicacin dentro de la clula (intracelular). Tambin es responsable de la comunicacin entre clulas adyacentes (comunicacin intercelular) a travs de plasmodesmos (hebras citoplasmticas que se extienden de una clula a otra a travs de la pared celular). Otra funcin del Retculo endoplsmico es el lugar donde se lleva a cabo la sntesis de membrana dentro de la clula.

El Aparato de Golgi: Es el trmino que se utiliza para agrupar a todos los dictiosomas o cuerpos de Golgi en la clula. Los dictiosomas estn compuestos de sacos en forma de discos (cisternas) agrupados unos sobre otros y los cuales se ramifican en una serie compleja de tbulos. Los dictiosomas estn envueltos en secrecin; sin embargo los productos secretados por ste no son necesariamente sintetizados completamente ah. Por ejemplo los dictosomas secretan glicoprotenas (carbohidrados + protenas) la porcin proteica se sintetiza en el Retculo endoplsmico rugoso y luego pasa al dictiosoma donde se sintetiza la porcin de carbohidrados para luego ensamblar la glicoprotena que ser secretada. Los dictiosomas tambin estn envueltos en la sntesis de la pared celular en plantas superiores.

Los peroxisomas: Son orgnulos delimitados por una membrana, que a veces presentan inclusiones cristalinas en su interior debido a la gran cantidad de enzimas que llegan a contener. Deben su nombre a que las primeras enzimas que se descubrieron en su interior fueron las peroxidasas. Los peroxisomas, a pesar de que pueden formarse desde el retculo, tienen la capacidad de dividirse mediante su crecimiento y estrangulamiento. Esto ocurre fundamentalmente durante la divisin celular. El proceso es llevado a cabo por el citoesqueleto y por protenas motoras, ayudados por puntos de anclaje a ciertos lugares de la clula

Los Glioxisomas: Los glioxisomas son una clase de peroxisomas que slo existen en clulas vegetales. Poseen enzimas del ciclo del cido glioxlico que es una variante del ciclo de Krebs de las mitocondrias que permite sintetizar azcares a partir de grasas. Es indispensable en semillas en germinacin.

Los Plastidios: Son parte caracterstica de las clulas vegetales. Cada plastidio est rodeado por una membrana doble. Dentro de esa doble membrana tenemos el estroma que es la substancia acuosa contenida en el plastidio. Los plastidios se clasifican de acuerdo al tipo de pigmento que contengan.

a. Cloroplastos : Contienen clorofila y pigmentos carotenoides. Es el sitio donde ocurre fotosntesis. La estructura interna del cloroplasto es como sigue: En los tilacoides encontramos la clorofila y pigmentos carotenoides. Un grupo de tilacoides forman las granas, estas ltimas estn conectadas con otras granas por tilacoides intergranas. La funcin de los cloroplastos es llevar a cabo fotosntesis, pero adems estn envueltos en la sntesis de aminocidos y cidos grasos, as como proveer un espacio temporal para el almacenaje de almidn. Los cloroplastos al igual que las mitocondrias son organelos semiautonmicos ya que poseen su propio DNA y ribosomas para sintetizar sus propias protenas. b. Cromoplastos: Son plastidios pigmentado que no poseen clorofila pero sintetizan y retienen pigmentos carotenoides. Estos son responsables de los colores amarillo, anaranjado y rojo de las flores, frutas y races. Los cromoplastos se desarrollan de cloroplastos ya existentes por medio de una transformacin en la cual la clorofila y las membranas internas desaparecen, dando lugar a una acumulacin de carotenoides. Esto ocurre, por ejemplo, al madurarse las frutas. c. Leucoplastos: Son plastidios no pigmentados. Entre sus funciones tenemos que algunos sintetizan almidn, estos se llaman amiloplastos, otros producen aceites y protenas. Si los leucoplastos se exponen a la luz se convierten en cloroplastos. d. Proplastidios: Son plastidios sin diferenciar, pequeos, incoloros y se encuentran en reas meristemticas de races y tallos. Son los precursores de los plastidios antes mencionados.

CELULA VEGETAL
ORGANELO Pared celular Membrana celular Ribosomas Retculo endoplasmtico liso Retculo endoplasmtico rugoso Aparato de Golgi FUNCION Proteccin, forma, estabilidad y soporte Controla , y detecta el paso de sustancias hacia el interior de la celula. Sntesis de protenas Sntesis de lpidos, almacenamiento, transporte de molculas y detoxificacin celular Sntesis, almacenamiento y transporte de protenas Procesamiento empaque y distribucin de materiales celulares. Forma a los lisosomas, peroxisomas y glioxisomas

Vacuolas Peroxisomas Glioxisomas Mitocondrias Plastidios Leucoplastos Cromoplastos Cloroplastos Membrana nuclear

Almacenamiento de sustancias de reserva y de desecho Degrada el agua oxigenada Convierte cidos grasos en azucares Respiracin celular Almacenamiento de sustancia de reserva ( almidn y grasas) Almacenamiento de pigmentos coloreados Fotosntesis Encierra la cromatina comunicada al ncleo con el resto de la clula

IV. PARTE EXPERIMENTAL 4.1. MATERIALES:

De la ctedra

Microscopio ptico

Lugol

Hojas de Elodea

De los estudiantes: Cebolla

Tomate

Papa

Lamina porta objeto

Lamina cubre objeto

Hoja de bistur

4.2. METODOLOGA:

OBSERVACIN DE UNA CLULA VEGETAL Desprender las catfilas de las cebollas y extraer la telita de la cara interna

Extenderla en una lamina porta objeto

Aadirle unas gotas de agua y luego unas gotas de Lugol

Cubrir la muestra

Observar al microscopio a mediano y mayor aumento

OBJETIVO DE MENOR AUMENTO

OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO

OBJETIVO: 3,2/0,10 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 3,2 X 20X = 64 X

OBJETIVO 40 / 0,65 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 40 X 20x = 800x

Diferenciar el ncleo, pared y membrana citoplasmtica Ncleo

Pared

Citoplasma

La posicin del ncleo es siempre la misma? No, la posicin del ncleo de la clula es diferente esto depende del tipo de clula y segn la materia acumulada en ella

OBSERVACION DE CLOROPLATOS Desprender una hojita de Elodea, colocarla en una lamina porta objeto con una gota de gua y cubrir la muestra

 Observe la pared celular, membrana celular, cloroplasto y ncleo. Realice la observacin a mediano y mayor aumento

OBJETIVO DE MENOR AUMENTO

OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO

OBJETIVO: 3,2/0,10 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 3,2 X 16X = 51,2x

OBJETIVO 10/ 0,25 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 10 X 16X = 160x

Observe el proceso de Ciclosis dentro de la clula

CICLOSIS: Movimiento circular interno que recorre el citoplasma en las clulas vegetales, arrastrando los diversos orgnulos.

 OBSERVACIN DE LEUCOPLASTOS Corte laminas delgadas de papa

Colquelas en una lmina porta objeto con unas gotas de agua y una gota de Lugol. cubra la muestra

Observe a menor y mediano aumento OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO.

OBJETIVO DE MENOR AUMENTO

OBJETIVO: 3,2/0,10 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 3,2 X 16X = 51,2x

OBJETIVO 10/ 0,25 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 10 X 16X = 160x

Que color obtienen los grnulos?

Al cortar la papa se rompieron las clulas pudiendo as observar el almidn esparcido Los grnulos de almidn se ven de color morado debido a la reaccin con el Lugol Se ven las clulas de almacenaje de polisacridos.

OBSERVACIN DE CROMOPLASTOS Cortar la cascara de un tomate, lo mas delgada posible

Extenderla en una lamina porta objeto con unas gotas de agua y una gota de Lugol. Cubra la muestra

Observar al microscopio a mediano y mayor aumento

OBJETIVO DE MENOR AUMENTO

OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO

OBJETIVO: 3,2/0,10 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 3,2 X 16X = 51,2x

OBJETIVO 10/ 0,25 AUMENTO TOTAL: AT=A obj. X A oc. = 10 X 16X = 160x

V.

CUESTIONARIO 1. Pigmentos en la industria alimentaria Los pigmentos son sustancias naturales que brindan los colores que poseen los alimentos. Es un material que viene incorporado en la textura misma, que refleja la luz de diferentes formas, generando a nuestra vista, distintos colores y tonalidades. Los pigmentos adems de existir en forma natural, pueden tambin sintetizarse y obtenerse qumicamente, para ser aplicados en la industria tanto en alimentacin, como en pinturas, barnices, cosmticos, ropa, etc En sentido estricto, solo sera natural el color que un alimento tiene por s mismo. El que se incorpora se obtiene de materiales biolgicos no alimentarios (por ejemplo, plantas o insectos) o bien se forman espontneamente al calentar un alimento, como es el caso del caramelo. Los colorantes naturales son considerados, en general, como inocuos y las limitaciones especficas en su utilizacin son menores que las que afectan a los colorantes de sntesis

Algunos de ellos son: Flavonoides: son los responsables del color amarillo Carotenos: pueden obtenerse una variedad de colores del amarillo al rojo, pasando por el naranja. En esta clasificacin, se encuentra el rojo del tomate (licopene o licopeno) y el betacaroteno (de donde se obtiene la vitamina A). Taninos: Son compuestos fenlicos, de los que se obtienen colores desde el amarillo al marrn (ejemplo: vino tinto) Antocianos : Son un grupo amplio de substancias naturales, bastante complejas, formadas por un azcar unido a la estructura qumica directamente responsable del color. Son las substancias responsables de los colores rojos, azulados o violetas de la mayora de las frutas y flores. Usualmente cada vegetal tiene de 4 a 6 distintos, pero algunos tienen prcticamente uno solo (la zarzamora, por ejemplo) o hasta 15. No existe una relacin directa entre el parentesco filogentico de dos plantas y sus antocianos. Los antocianos utilizados como colorante alimentario deben obtenerse de vegetales comestibles. La fuente ms importante a nivel industrial son los subproductos (hollejos, etc.) de la fabricacin del vino. Los antocianos son los colorantes naturales del vino tinto, y en algunos casos permiten distinguir qumicamente el tipo de uva utilizado. Son, evidentemente, solubles en medio acuoso. El material extrado de los subproductos de la industria vincola, denominado a veces "enocianina", se comercializa desde 1879, y es relativamente barato. Los otros antocianos, en estado puro, son muy caros. Los antocianos son substancias relativamente inestables, teniendo un comportamiento aceptable nicamente en medio cido. Se degradan, cambiando el color, durante el almacenamiento, tanto ms cuanto ms elevada sea la temperatura. Tambin les afecta la luz, la presencia de sulfitos (E-220 y siguientes), de cido ascrbico y el calentamiento a alta temperatura en presencia de oxgeno. El efecto del sulfito es especialmente importante en el caso de los antocianos naturales de las frutas que se conservan para utilizarlas en la fabricacin de mermeladas. Se utilizan relativamente poco, solamente en algunos derivados lcteos, helados, caramelos, productos de pastelera y conservas vegetales

Xantofilas : (Flavoxantina, Lutena, Criptoxantina, Rubixantina, Violoxantina, Rodoxantina, Cantaxantina) Las xantofilas son derivados oxigenados de los carotenoides, usualmente sin ninguna actividad como vitamina A. La criptoxantina es una excepcin, ya que tiene una actividad como vitamina A algo superior a la mitad que la del beta-caroteno. Abundan en los vegetales, siendo responsables de sus coloraciones amarillas y anaranjadas, aunque muchas veces stas estn enmascaradas por el color verde de la clorofila. Tambin se encuentran las xantofilas en el reino animal, como pigmentos de la yema del huevo (lutena) o de la carne de salmn y concha de crustceos (cantaxantina). Esta ltima, cuando se encuentra en los crustceos, tiene a veces colores azulados o verdes al estar unida a una protena. El calentamiento rompe la unin, lo que explica el cambio de color que experimentan algunos crustceos al cocerlos. La cantaxantina utilizada como aditivo alimentario se obtiene usualmente por sntesis qumica. La cantaxantina era el componente bsico de ciertos tipos de pldoras utilizadas para conseguir un bronceado rpido. La utilizacin de grandes cantidades de estas pldoras dio lugar a la aparicin de problemas oculares en algunos casos, por lo que, con esta experiencia del efecto de dosis altas, se tiende en algunos pases a limitar las cantidades de este producto que pueden aadirse a los alimentos Estos colorantes tienen poca importancia como aditivos alimentarios directos. nicamente la cantaxantina, de color rojo semejante al del pimentn, se utiliza a veces debido a su mayor estabilidad. Son en cambio muy importantes como aditivos en el alimento suministrado a las truchas o salmones criados en piscifactoras, y tambin en el suministrado a las gallinas. El objetivo es conseguir que la carne de los peces o la yema de los huevos tenga un color ms intenso. El colorante utilizado en cada caso concreto depende de la especie animal de que se trate, y suele aportarse en forma de levaduras del gnero Rhodatorula o como algas Spirulina, ms que como substancia qumica aislada

NOMBRE Curcumina

OBTENCIN Rizoma de la crcuma (Curcuma longa)

APLICACIN Color amarillo intenso (curry). Confituras, mermeladas, etc. Embutidos picados (crudos y cocidos)

EFECTOS Baja absorcin en el intestino, Toxicidad reducida. En algunos experimentos realizados con animales se han observado efectos teratgenos. Se han sealado respuestas alrgicas en sujetos que han consumido bebidas con este colorante.

Cochinilla Carmn cido carmnico

Hembras del insecto Dactylopus coccus, parsitos de algunas especies de cactus

Color rojo muy variable, utilizndose en conservas vegetales, mermeladas, helados, productos crnicos y bebidas alcohlicas y no alcohlicas.

Clorofilas

Algas

Color verde caracterstico aplicado a chicle, helados y bebidas refrescantes Productos de bollera, repostera y helados. Bebidas de cola y alcohlicas (ron, coac, etc) Fabricacin de embutidos Bebidas refrescantes Productos de repostera, helados y derivados lcteos dirigidos al pblico infantil. Bebidas refrescantes, conservas vegetales y mermeladas, conservas de pescado

Baja absorcin intestinal.

Caramelo

Calentamiento de azcar (sacarosa y otros) Capsantina: pimiento rojo y del pimentn Licopeno: tomate Remolacha roja (Beta vulgaris

Carotenoides

El 50% del caramelo son azcares asimilables. Dosis de hasta 18 g/da tienen un ligero efecto laxante Absorcin intestinal muy baja

Rojo de remolacha Betana

Baja absorcin intestinal. El colorante absorbido se elimina sin cambios por la orina

2.

Tcnicas para la extraccin de pigmentos

Mtodos de separacin de pigmentos: a) Separacin de pigmentos vegetales por separacin simple. b) Separacin de pigmentos vegetales por cromatografa sobre papel.

a.

Separacin de pigmentos vegetales por separacin simple.

Elementos: Mortero - Embudo cribado -Kitasato - Papel de filtro - Tubos de ensayo - Alcohol - Tetracloruro de carbono - Hojas de espinaca o Acelga - Bomba de vaco. Objetivo: Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica sencilla de fases.

Tcnica: 1. Lavar las hojas de espinacas o acelga, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el solvente extractante (acetona). 2. Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso. Fotografa 1. Filtrar con un embudo, papel de filtro y bomba de vaco. Fotografa 2

Fotografa 1 Fotografa 2 3. Pasar el filtrado en dos tubos de ensayo (a y b) en partes iguales. El tubo a se lo dejar para trabajar con el espectroscopio en un lugar sombro. 4. Al tubo b, se le agregar tetracloruro de carbono y luego se lo agitar por unos segundos. Se lo dejar reposar en una gradilla por 10 minutos.(Fotografa 7) 5. Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin o afinidad con los solventes.(Fotografa 8)

Fotografa 7

Fotografa 8

Al observar el tubo de ensayo donde se encuentran los dos solventes, vemos dos zonas (figura B), que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca o acelga. Segn su grado de solubilidad con el alcohol y el tetracloruro de carbono se reconocen estas zonas heterogneas y no miscibles en este orden: 1. clorofila a + b + Tetracloruro de C. 2. xantofilas y carotenoides + Alcohol

Figura B

b) Separacin de pigmentos vegetales por cromatografa sobre papel. Elementos: Mortero- Embudo cribado -Kitasato - Papel de filtro - Tubos de ensayo Acetona - ter de Petrleo - Hojas de espinaca o Acelga - Cloruro de CalcioBomba de vaco - Capilar o Pipeta Pasteur - Vaso de precipitado. Objetivo: Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica compleja de cromatografa en papel. Tcnica: 1. Lavar las hojas de espinacas o acelga, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el solvente extractante (acetona). Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso. Fotografa 1. 2. Filtrar con un embudo, papel de filtro y bomba de vaco. Fotografa 2 3. Pasar el filtrado en un tubo de ensayo, colocar 3 a 5 perlas de Cloruro de calcio. Dejar reposar de 5 a 10 min. 4. Tomar con un capilar o pipeta el sobrenadante del tubo anterior. Sobre un rectngulo de papel de filtro de unos 15 centmetros de ancho por 10 centmetros de alto doblado en V (para que se mantenga en pie) se traza con lpiz, una lnea de siembra a 3 cm de la base. Sobre la lnea se realizan de 5 a 8

pasadas con el capilar cargado de pigmento dejando entre cada pasada que se evapore acetona. 5. Se coloca el papel ya sembrado en un vaso de precipitado que contendr el solvente separador (ter de petrleo), dejndolo unos 5 a 10 min. Fotografa3 6. Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin o afinidad con el solvente. Fotografa 4

Fotografa 3 Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o zonas (figura A), que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. Segn su grado de solubilidad con el ter de petrleo se reconocen estas bandas y en este orden: clorofila b clorofila a xantofila carotenos

Fotografa 4

Figura A Este es el aspecto final de la cromatografa obtenida con las hojas de espinacas o acelga

VI.

BIBLIOGRAFA

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