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TESTE DE ELISA

Disciplina: Imunologia

Turma: Farmcia

Professor (a):Lucas Nogueira

Turno: Noite

Acadmico: Ana Beatriz Farias

SOBRAL Maro de 2013

Os mtodos imunolgicos desenvolvidos para quantificar a concentrao de antgenos e anticorpos, por apresentarem grande sensibilidade e especificidade, tornaram-se tcnicas padronizadas para pesquisa e aplicaes clnicas e entre esses mtodos, um dos mais usados o Elisa. O Elisa se baseia na identificao de anticorpos e ou antgenos, por anticorpos marcados com uma enzima, de maneira que esta enzima age sobre um substrato e a reao faz com que o cromgeno (microrganismo que produz colorao no meio onde se encontra) mude de cor. O produto da reao, alm de colorido, insolvel para no difundir do local da formao. Foi inicialmente desenvolvido por Engvall & Perlman e por van Weeman & Schuurse, posteriormente, muito utilizado como teste diagnstico em varias doenas. Quando o sistema imunolgico do corpo encontra um antgeno especfico (por exemplo, uma protena caracterstica na superfcie de um vrus ou bactria), os anticorpos que so especficos para o antgeno interceptam-no com uma ligao fsica a ele em uma "chave e fechadura", neutralizando assim o antgeno. O Elisa uma tcnica fundamental para avaliaes imunolgicas e bioqumicas, utilizada para detectar o antgeno ou anticorpo em uma amostra, com base em interaes anticorpoantgeno. Se um antgeno (ou da mesma forma, um anticorpo) detectada, um sinal produzido na forma de uma mudana mensurvel. Para avaliar a presena de um antgeno especfico, em uma amostra, um "teste de Elisa pode ser realizado da seguinte maneira: Uma soluo de anticorpo, que especfico (isto , tem reconhecimento exclusivo) ao antgeno putativo, imobilizado em uma superfcie slida em um poo de uma placa de microtitulao. aplicado em seguida amostra a ser analisada condies que permitam o antgeno ligar-se aos anticorpos imobilizados especficos. O material no ligado lavado, e o antgeno ligado reconhecida mais uma vez em condies de ligao com a adio de uma soluo de um segundo anticorpo especfico para o mesmo antgeno, que desta vez acoplado ou ligados a uma enzima que catalisa a converso de seu substrato a uma forma detectveis e possivelmente quantificvel. Esses anticorpos ligados a uma enzima que esto vinculados ao complexo antgeno-anticorpo imobilizado so resistentes a ciclos de lavagem e, finalmente, o substrato adicionado e incubado de modo que a enzima pode catalisar a converso do substrato para o sinal de deteco do antgeno especfico . Elisas costumam empregar qualquer um substrato cromognico ou um fluorognico, que produz uma cor ou fluorescncia, respectivamente, aps a converso pela enzima ligada ao segundo anticorpo.

A reao desenvolvida, freqentemente, em microplacas contendo vrios poos onde so depositados os reagentes. Mas H vrias maneiras (mtodos) de se

processar o ensaio imunoenzimtico. O mtodo competitivo mais usado para identificao de antgenos, mas pode tambm ser empregado para a deteco de anticorpos. Neste mtodo primeiro se adsorve o anticorpo no poo da microplaca. Aps a adsoro do anticorpo, uma soluo que possivelmente contm o antgeno adicionada sobre os anticorpos adsorvidos. Em seguida adcionado o antgeno marcado com uma enzima. Os poos que no possuem o antgeno primrio (da soluo problema) aderido ao anticorpo ficam coloridos, enquanto que os poos que possuem antgenos aderidos aos anticorpos no mudam de cor. Exemplos de patologias que tem como base o mtodo Elisa so: HIV, Hepatite C e B

Referncias :
http://www.portalfarmacia.com.br/farmacia/cursos/cursos_detalhes.asp?id=75>. Acesso em: 01 dez. 2008. http://www.patologias.net/2010/05/teste-elisa-2/