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ACCIN DE LOS AGENTES QUMICOS SOBRE LAS BACTERIAS

NDICE:
1. CONCEPTOS GENERALES 2. DESINFECTANTES Y ANTISPTICOS

2.1. FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE 2.2. DETERMINACIN DE LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE

3. TIPOS DE DESINFECTANTES

3.1. AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA 3.2. AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS 3.3. AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES

BARRA DE EXPLORACIN: Microbiologa General

1. CONCEPTOS GENERALES

Existen ciertas sustancias qumicas que influyen negativamente sobre las bacterias, pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes: bacteriostticos: cuando impiden el crecimiento bacteriano; bactericidas: cuando destruyen (matan) las bacterias. En general, si no slo nos referimos a las bacterias, sino a cualquier tipo de microorganismos, hablamos respectivamente de agentes microbiostticos y microbicidas. Ahora bien, para una misma sustancia qumica, la lnea de demarcacin entre un efecto microbiosttico y otro microbicida depende muchas veces de la concentracin de dicha sustancia y del tiempo durante el que acta. )Cmo podemos saber que un microorganismo est "muerto"? El nico criterio vlido es la prdida irreversible de la capacidad de divisin celular, es decir, de la prdida de viabilidad, y se suele comprobar empleando tcnicas con placas de Petri (es decir, confirmando que no crecen en medios slidos adecuados). (Pero ni siquiera esto es garanta de que una bacteria "no viable" est "muerta": hay bacterias viables pero no cultivables. Como se ve, demostrar que una bacteria est "muerta" es algo bastante complicado). Antes de proceder al estudio de las diversas molculas que pueden afectar el crecimiento y/o la viabilidad de los microorganismos, veamos unas cuantas definiciones bsicas. Agentes esterilizantes son aquellos que producen la inactivacin total de todas las formas de vida microbiana (o sea, su "muerte" o prdida irreversible de su viabilidad). (Tambin existen agentes fsicos esterilizantes, como ya vimos en los dos captulos anteriores). Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo qumicos) antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos (infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos casos suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear slo sobre materiales inertes. Agentes antispticos son sustancias qumicas antimicrobianas que se oponen a la sepsis o putrefaccin de materiales vivos. Se trata de desinfectantes con baja actividad txica hacia los tejidos vivos donde se aplican. Quimioterpicos son compuestos qumicos con actividad microbicida o microbiosttica, con una toxicidad suficientemente baja como para permitir su administracin a un organismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos permanece estable un cierto tiempo a concentraciones tales que los hace eficaces como antimicrobianos dentro del organismo. (Estudiaremos los quimioterpicos de sntesis y los antibiticos en el tema 20).

2. DESINFECTANTES Y ANTISPTICOS
Como se recordar cuando tratamos el tema del calor como agentes esterilizante, la muerte de una poblacin bacteriana se poda representar como una curva exponencial, expresin de la cintica de primer orden. Este tipo de cintica tambin es aplicable a la muerte microbiana cuando se aplica un agente qumico a una concentracin suficientemente alta: Sin embargo, cuando se aplican menores concentraciones del agente, se pueden encontrar cinticas diferentes, expresables como curvas sigmoidales: Como se ve, hay un margen en el que la curva sigue una cintica de primer orden, pero dicha cintica no se puede extrapolar: obsrvese que a tiempos prolongados la curva se hace casi paralela al eje de abscisas, lo cual indica que queda una fraccin de clulas viables.

2.1. FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE


Concentracin del agente y tiempo de actuacin La concentracin para obtener un determinado efecto, as como el rango de concentraciones en que se puede demostrar un determinado efecto, dependen de: tipo qumico del desinfectante, tipo de microorganismos a eliminar, mtodo de ensayo del efecto. Existe una estrecha relacin entre la concentracin del agente y el tiempo necesario para matar una determinada fraccin de la poblacin bacteriana, segn la siguiente expresin: Cn t = K, Donde C es la concentracin del agente, n es el coeficiente de dilucin (una constante), y t es el tiempo de actuacin Esta ecuacin nos dice qu relacin existe entre la variacin de la concentracin del agente y el tiempo para matar una fraccin de la poblacin microbiana. Por ejemplo: los fenoles poseen un coeficiente de dilucin n=5 6; ello implica que aun pequeos cambios en la concentracin provocan cambios

muy acentuados en el tiempo para lograr un mismo efecto: as, si reducimos la concentracin de fenol desde un valor dado a su mitad, necesitamos emplear 64 veces ms de tiempo para conseguir matar una misma proporcin de bacterias. En cambio, los hipocloritos (constituyentes de las lejas) tienen coeficiente n=1, lo que se refleja en que pequeos cambios en la concentracin requieren pequeos cambios en el tiempo de aplicacin. Finalmente, y refirindonos al tiempo, no todas las bacterias mueren al mismo tiempo, ni siquiera cuando se aplica un exceso del agente (repsense los grficos anteriores). pH El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado de ionizacin del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan mejor a travs de las membranas biolgicas, y por lo tanto son ms efectivos. los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos; los agentes catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos. Temperatura Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10 grados supone duplicar la tasa de muerte. Pero con el fenol, la subida de 10 grados representa multiplicar por 5 o por 8 la eficacia. Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la poblacin microbiana Segn la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los hipocloritos mejor que otras bacterias; Segn la fase de cultivo; Dependiendo de la presencia de cpsulas o de esporas (suelen conferir ms resistencia); Nmero de microorganismos iniciales. Presencia de materiales extraos La existencia de materia orgnica en el material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta negativamente a la potencia de los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de tipo desnaturalizante de protenas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos inactivos en cuanto a su poder desinfectante y/o esterilizante.

Los principales mecanismos por los que se pierde actividad son: adsorcin (o sea, absorcin superficial) del desinfectante a coloides de protenas; formacin de complejos inertes o poco activos; unin de grupos activos del desinfectante a protenas extraas. Ejemplos: los agentes mercuriales se inhiben por sustancias que lleven grupos sulfhidrilo (-SH). las sales cuaternarias de amonio se inhiben en presencia de jabones y lpidos. Por lo tanto, para el empleo eficaz de muchos desinfectantes hay que contar con este factor, determinando previamente el gasto de materia orgnica inerte, o calculando la potencia neta del desinfectante en presencia de la materia orgnica.

2.2 DETERMINACION (EVALUACION) DE LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE


La determinacin de la actividad desinfectante de un determinado agente es necesaria para conocer su posible eficacia. El mtodo primario que se viene empleando desde hace muchos aos es comparar la potencia del compuesto a ensayar con la de un desinfectante-tipo o estndar, que por motivos histricos es el fenol. Coeficiente fenol o coeficiente fenlico: consiste en la siguiente relacin mxima dilucin del desinfectante que mata a un microorganismo en 10 min, pero no en 5' ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------mxima dilucin del fenol que mata a ese microorganismo en 10 min, pero no en 5 min. En los EEUU, la Administracin Federal de Alimentos y Medicamentos (F.D.A.= Food and Drug Administration) emplea un test oficial para desinfectantes en condiciones

normalizadas, usando una serie de cepas bacterianas concretas, cuya susceptibilidad al fenol se conoce exactamente: una cepa concreta de Salmonella typhimurium una cepa de Staphylococcus aureus una cepa de Pseudomonas aeruginosa El mtodo consiste, en esencia, en lo siguiente: 1. un cultivo de una de estas cepas se diluye 10 veces (1/10) en sucesivas diluciones del desinfectante problema, y se dejan a 20 minutos; 2. de cada una de las diluciones se siembran alcuotas, a los 5 y a los 10 minutos, en placas de Petri provista con un medio de cultivo adecuado; 3. se determina el coeficiente fenol segn la frmula que hemos expuesto; 4. una vez determinado, se recomienda usar concentraciones 5 veces superiores a las indicadas por el coeficiente fenol. Limitaciones de este mtodo: El coeficiente fenol slo es indicativo cuantitativamente en desinfectantes qumicamente similares al fenol, y que tengan coeficientes de dilucin (n) parecidos. Aun cuando conozcamos el coeficiente fenol de un compuesto, su valor indicativo se limita a las diluciones que se hayan empleado en la determinacin. Hay que atender a las condiciones de valoracin, ya que como dijimos antes, la presencia de materia orgnica supone una merma del poder real de desinfeccin. Para solucionar algunos de estos inconvenientes se han puesto a punto otros mtodos de valoracin: Prueba de la concentracin equivalente Consiste en determinar la concentracin del desinfectante a ensayar que ejerce el mismo efecto sobre la bacteria de referencia que otra concentracin de un desinfectante-tipo (estndar). Determinacin de la toxicidad del desinfectante Como se coment anteriormente, no todos los agentes esterilizantes son aptos como desinfectantes de tejidos, ya que pueden presentar efectos txicos. Por ello, siempre que se intenta introducir el uso de un nuevo compuesto

desinfectante, hay que evaluar su potencial txico, mediante el llamado ndice de toxicidad, que es el cociente entre el poder desinfectante y el poder txico

3. TIPOS DE DESINFECTANTES
Se suelen clasificar de acuerdo con su mecanismo de accin: A) AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA

1) Detergentes

a) catinicos b) aninicos c) no inicos

2) Compuestos fenlicos

a) fenol b) cresoles c) difenilos halogenados d) alquilsteres del para-hidroxibenzoico e) aceites esenciales de plantas

3) Alcoholes

a) etanol b) isopropanol

B) AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS

1) Acidos y bases fuertes 2) Acidos orgnicos no disociables

C) AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES

1) Metales pesados

a) mercuriales b) compuestos de plata c) compuestos de cobre

2) Agentes oxidantes

a) halgenos b) agua oxigenada c) permanganato potsico d) cido peractico

3) Colorantes

a) derivados de la anilina b) derivados de la acridina (flavinas)

4) Agentes alquilantes

a) formaldehido b) glutaraldehido c) xido de etileno d) -propionil-lactona

3.1. AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA CELULAR


Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los desinfectantes tensioactivos (detergentes) daan la integridad estructural de la membrana (es decir, la disposicin ordenada de lpidos y protenas), de modo que interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico; Salida de pequeas molculas de la clula. 3.1.1 Detergentes (= desinfectantes tensioactivos o surfactantes) Los detergentes sintticos, al igual que los jabones, contienen una porcin hidrofbica (normalmente una larga cadena lipfila) y una porcin hidrfila (un grupo polar), lo cual les permite formar micelas en solucin acuosa, as como formar capas que cubren y solubilizan molculas hidrfobas. Segn sea la porcin hidrfila, los detergentes se pueden clasificar en: detergentes inicos: detergentes catinicos (grupo activo con carga positiva)

detergentes aninicos (grupo activo con carga negativa) detergentes no inicos (no suelen tener actividad antimicrobiana). 3.1.1.1 Detergentes catinicos

Son los detergentes ms potentes en cuanto a su actividad desinfectante, siendo activos contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Los principales son los llamados compuestos de amonio cuaternario: Sales de amonio cuaternario, sobre todo aquellas que van como cloruros o bromuros. Su frmula general se puede representar as: Los cuatro sustituyentes (R1 a R4) del N son cadenas de hidrocarburos variados. Las sales de amonio cuaternario ms activas son aquellas que tienen tres grupos alqulicos cortos y un grupo alqulico largo: cloruro de cetilpiridinio, cloruro de benzalconio Mecanismo de accin: La porcin hidrfoba penetra en las membranas, mientras que el grupo polar catinico se asocia con los fosfatos de los fosfolpidos, provocando alteraciones en dichas membranas, reflejadas en la prdida de su semipermeabilidad, con salida de metabolitos de N y P desde el citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar al interior celular, con un efecto secundario de desnaturalizacin de protenas. Su actividad se mejora a pH alcalino. Son rpidamente bactericidas a concentraciones muy bajas (del orden de una parte por milln, 1 ppm), siempre que en el material a tratar no exista materia orgnica. Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo que se pueden emplear como desinfectantes y antispticos de la piel. Se emplean igualmente en la desinfeccin de material de industrias alimentarias.Su actividad se ve neutralizada por jabones y fosfolpidos, precipitando en su presencia.

3.1.1.2. Detergentes aninicos Con grupos carboxilo como porcin hidrfila:

jabones saponinas sales biliares cidos grasos disociables Con grupos sulfato como porcin hidrfila:

dodecilsulfato sdico (SDS), tambin llamado laurilsulfato sdico sulfonato de alquilbenceno Mecanismo: Provocan una gran disrupcin de membranas, con efectos de lisis. Son activos sobre todo a pH cido, prefentemente sobre bacterias Gram-positivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya que stas quedan ms protegidas por la barrera del lipopolisacrido de la membrana externa. Usos: Cuando los detergentes aninicos se combinan con cidos, se logran desinfectantes sanitarios muy potentes (debido al efecto sinrgico de ambos componentes) y de rpida actuacin (unos 30 segundos).

3.1.1.3. Detergentes no inicos

No tienen actividad antimicrobiana, pero algunos tienen empleo en otros campos de la Microbiologa: los steres del cido oleico (bajo nombres comerciales como CarbowaxJ, Tween-80J) pueden adicionarse a medios de cultivo para evitar la formacin de grumos y favorecer el crecimiento disperso de ciertas bacterias (como Mycobacterium tuberculosis); adems el oleico puede estimular el crecimiento.

3.1.2. Fenoles Son rpidamente bactericidas a bajas concentraciones, causando:

daos a membranas, con prdida de constituyentes citoplsmicos; inactivacin irreversible de oxidasas y deshidrogenasas de membrana; desnaturalizacin de protenas. Tienen baja solubilidad en agua, por lo que se emplean en frmulas que incluyen agentes emulsificadores (jabones) que, adems, aumentan su actividad. 3.1.2.1. Fenol

El fenol o cido carblico, histricamente uno de los primeros desinfectantes en usarse, slo se emplea en la actualidad como patrn para ensayar el poder desinfectante de otros compuestos. A partir del fenol se pueden lograr desinfectantes con mayor actividad antibacteriana y con menor toxicidad sustituyendo hidrgenos del anillo bencnico por radicales alqulicos o por halgenos. H aqu algunos ejemplos:

3.1.2.2. Cresoles

Son los alquil-fenoles. El radical alqulico puede estar en posicin orto, meta o para, dando respectivamente el ortocresol, el meta-cresol y el para-cresol. Normalmente se emplea la mezcla de los tres, denominada tricresol. Se obtienen por destilacin del alquiltrn de carbn, y se emplean como emulsiones de jabn verde bajo los nombres comerciales de LysolJ y CreolnJ. Se usan como desinfectantes de material de desecho bacteriolgico y como desinfectantes de la piel.

3.1.2.3. Difenilos halogenados

El hexaclorofeno (hexacloro-orto-difenilmetano) es bacteriosttico a bajas concentraciones (sobre todo contra

cocos Gram-positivos), incluso incorporado en jabones, pasta de dientes y cosmticos. Algunas marcas comerciales incluan hace unos aos este compuesto, hasta que se comprob que su absorcin por la piel, sobre todo inflamada, puede causar neurotoxicidad e incluso, toxicidad sistmica, por lo que en la actualidad ha dejado de usarse.

3.1.2.4. Alquilsteres del para-hidroxibenzoico

Actan de forma similar a los alquilfenoles, pero no son txicos, debido a que al ser ingeridos, se hidrolizan rpidamente, dando el inocuo para-hidroxibenzoato. Se emplean como conservantes de alimentos y de productos farmacuticos.

3.1.2.5. Ciertos aceites esenciales de origen vegetal Desde la antigedad, y de modo emprico, se vienen usando algunos aceites esenciales de plantas aromticas como conservantes y antispticos, ya que como se ha podido comprobar, contienen varios compuestos fenlicos:

el timol (de Thymus, los tomillos); el eugenol se emplea en odontologa como antisptico. 3.1.3. Alcoholes Los alcoholes desorganizan las bicapas lipdicas penetrando en la regin hidrocarbonada de los lpidos. No afectan a las endosporas, por lo que no son esterilizantes. Su accin desinfectante mejora conforme aumenta la longitud de la cadena aliftica de los alcoholes, hasta aquellos con 8 a 10 tomos de carbono (C8-C10), ya que los alcoholes de cadenas ms largas de C10 tienen una baja solubilidad en agua. 3.1.3.1. Etanol (CH3-CH2OH)

Se emplea en desinfeccin de la piel antes de inyecciones cutneas, as como en desinfeccin de los termmetros clnicos, siempre que se deje el tiempo suficiente de contacto. Es ms efectivo en soluciones acuosas entre 50-70%, ya que para su mejor accin se implica la intervencin del agua. A 100% de pureza es poco efectivo.

3.1.3.2. Isopropanol

Es menos voltil y ms efectivo que el etanol. Se emplea igualmente en desinfeccin de termmetros. Sin embargo, su efecto txico (narctico) es mayor y ms duradero que aquel.

3.2. AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS


3.2.1. Acidos y lcalis fuertes Son activamente bactericidas, debido a sus grupos H+ y OHdisociados, respectivamente. En principio, su actividad es proporcional al grado de disociacin, pero algunos hidrxidos son ms potentes de lo sugerido por su mero grado de disociacin, debido a la accin txica directa que puede ejercer el catin metlico. Existen ciertas especies bacterianas que resisten relativamente bien la accin de bases fuertes. Tal es el caso del bacilo tuberculoso. Esto se aprovecha para aislarlo y purificarlo: se lica un esputo de enfermo sospechoso en una solucin 1M de sosa (NaOH) y se deja 30 minutos antes de sembrar. Bajo estas condiciones, prcticamente slo sobrevive el Mycobacterium tuberculosis. 3.2.2. Acidos orgnicos Los cidos orgnicos, que son poco disociables, ejercen su efecto en cuanto molculas intactas (sin disociar), que penetran a la clula. El cido benzoico y el cido srbico se usan ampliamente como conservantes alimentarios.

Ciertos cidos (como el actico, lctico, propinico) aparecen en alimentos fermentados, actuando como conservantes naturales. Estos mismos, as como el ctrico se pueden aadir a otros tipos de alimentos, para prolongar el periodo de posible almacenamiento de los productos. 3.2.3. El cido brico se ha usado como conservante (a veces ilegal) de alimentos, as como en oftalmologa.

3.3. AGENTES MODIFICANTES DE GRUPOS FUNCIONALES DE PROTEINAS Y DE ACIDOS NUCLEICOS


Esta amplia clase de agentes se caracteriza, en general, por los siguientes efectos: alteran grupos que forman parte de los centros activos de enzimas y otras protenas; alteran grupos funcionales de cidos nucleicos, componentes de pared y de membrana. Como ya vimos en la clasificacin de agentes desinfectantes, dentro de este grupo se distinguen a su vez: 1. 2. 3. 4. metales agentes tinturas agentes pesados oxidantes de colorantes alquilantes

3.3.1. Metales pesados Las sales solubles de Hg, As, Ag, Cu, etc, "envenenan" la actividad enzimtica formando mercptidos con los grupos -SH de la cistena. Tambin interaccionan con -NH2, -COOH y radicales fosfato. Los ms efectivos son los derivados del mercurio y de la plata (actan a menos de 1 ppm). 3.3.1.1. Mercuriales. Se vienen usando desde antiguo en Medicina.

Cloruro de mercurio (HgCl2). En solucin al 0,1% fue muy usado como desinfectante potente, pero es muy txico, y apenas se emplea en la actualidad. Compuestos orgnicos de mercurio (como el MercurocromoJ, la MercrominaJ, el Mertiolato): No son totalmente fiables como desinfectantes y presentan cierta (aunque baja) toxicidad, pero se emplean mucho como antispticos de la piel y de heridas. Sales de fenilmercurio. Son potentes inhibidores no slo de bacterias, sino de levaduras, hongos y algas. Se usan especialmente en el control de posibles contaminantes microbianos (p.ej., bacterias oportunistas del gnero Pseudomonas) en productos farmacuticos, cosmticos y oftalmolgicos.

3.3.1.2. Compuestos de plata.

Bien sea en forma de sales solubles, o en preparaciones coloidales, los compuestos de plata se usan ampliamente como antispticos, aunque estn restringidos, al tener efectos irritantes y custicos. Nitrato de plata (AgNO3). Es muy bactericida frente al gonococo (Neisseria gonorrhoeae), y por ello se usa habitualmente para prevenir la oftalmia gonoccica del recin nacido. Coloides orgnicos de plata. En ellos los iones Ag+ se van liberando lentamente. Tienen efectos bacteriostticos, y encuentran su principal aplicacin en oftalmologa. Cremas de nitrato de plata y sulfodiazina de plata. Usadas para el tratamiento de quemaduras, han reducido notablemente la mortalidad derivada de las grandes quemaduras.

3.3.1.3. Sales y compuestos de cobre.

No tienen aplicacin en Bacteriologa Mdica, pero se emplean en Agricultura para el control de hongos y algas.

3.3.2. Agentes oxidantes Los efectos de los agentes oxidantes que se tratan a continuacin son la inactivacin de protenas enzimticas (convitiendo los radicales -SH en disulfuros -S-S-). Adems, los ms potentes tambin atacan radicales amino, el grupo indol (presente en el triptfano), y la tirosina. 3.3.2.1. Halgenos.

Son bactericidas muy tiles y muy potentes. El iodo no tiene parangn como desinfectante de la piel, y el cloro no tiene igual en el tratamiento de aguas. Yodo: Aparte de su efecto oxidante, se combina irreversiblemente con residuos de tirosina de las protenas. Sus principales presentaciones son la tintura de iodo y los iodforos.

Tintura de iodo: es una mezcla de 2% de I2 + 2% de IK en alcohol de 70%. Su mximo efecto bactericida lo tiene a pH<6. Es un magnfico antisptico de la piel, de hecho el mejor de los conocidos, pero tiene un efecto doloroso y custico en heridas abiertas. Iodforos: son mezclas de iodo con agentes tensioactivos (detergentes), en los que stos actan como portadores del iodo, al que van liberando lentamente, sin provocar irritacin. Tambin se emplean en desinfeccin de instalaciones de industrias alimentarias.

Cloro. El cloro fue uno de los primeros antispticos en usarse (antes de conocerse su mecanismo, e incluso antes de que se supiera el autntico papel de los microorganismos en las enfermedades infecciosas). Holmes (Boston, 1835) y

Semmelweiss (Viena, 1847) lo introdujeron en la prctica de los mdicos y matronas para impedir la transmisin de la sepsis puerperal, que era contagiada de mujer a mujer por las manos de los doctores y de las parteras, y que era una notable causa de mortalidad de mujeres durante muchos siglos. El cloro se presenta bajo las formas de Cl2 (gaseoso), hipocloritos y cloraminas. El efecto desinfectante se debe a la liberacin de cloro libre (Cl2); a su vez, el Cl2 reacciona con el agua para dar cido hipocloroso, que a pH cido o neutro es un oxidante fuerte: Cl2 + H2O ---------> ClOH + H+ + Cl(ClO)2Ca + H2O ----> Ca++ + H2O + 2 ClO(ClO)2Ca + 2H2O ---> Ca(OH)2 + 2 ClOH La disociacin del cido hipocloroso depende del pH (se realiza a pH<7) ClOH -------> H+ + ClO-

Cloro gaseoso: a 1-3 ppm se usa en la cloracin de aguas para bebida y de aguas de piscinas. Su actividad se ve muy influida (mermada) por la presencia de materia orgnica; por ello, se suele determinar la demanda de cloro del agua a tratar. Descontada dicha demanda, el cloro gaseoso mata rpidamente (15-30 segundos) a slo 1 ppm.

Soluciones de hipocloritos: hipocloritos de sodio, de calcio o de litio. A 200 ppm de cloro se usan ampliamente, ya como lquidos (lejas), o en polvo, en industrias alimentarias y lcteas (para desinfectar el equipamiento y maquinaria que ha de entrar en contacto con los alimentos a procesar), en restaurantes, hoteles, hospitales, etc.

3.3.2.2. Agua oxigenada.

El perxido de hidrgeno (H O ), en solucin al 3%, se us en otro tiempo como desinfectante, pero est 2 2 actualmente en desuso, debido a que algunas bacterias son resistentes, por la posesin de catalasas y peroxidasas. Adems, en desinfeccin de heridas abiertas su efecto es muy pobre, porque el agua oxigenada es descompuesta por la catalasa tisular.

Se emplea en la desinfeccin de lentillas blandas, dejando tiempo suficiente de actuacin. Tambin, en desinfeccin de superficies inertes y equipos quirrgicos.

3.3.2.3..Permanganato potsico (K MnO ). 3 4

Al 1%, se usa como antisptico uretral.

3.3.2.4.. Acido peractico (CH -CO-O-OH). 3

Es un fuerte agente oxidante. En forma de vapor se usa en la esterilizacin de cmaras de cra de animales libres de grmenes.

3.3.3..Tinturas de colorantes bsicos

Algunos colorantes derivados de la destilacin del alquitrn de carbn, sobre todo los trifenilmetanos y las acridinas, no slo tien las bacterias (recurdense las prcticas), sino que tambin actan como antibacterianos, incluso a pequeas concentraciones. Los colorantes bsicos son los ms efectivos.

En general, su mecanismo depende de su afinidad hacia los grupos fosfato (cidos) presentes en las nucleoprotenas.

Encuentran su uso como antispticos de lesiones dermatolgicas, infecciones de la piel y pequeas heridas.

Su principal inconveniente es que muchos de ellos se inactivan en presencia de suero y otras protenas.

3.3.3.1. Colorantes de trifenilmetano:

son derivados de la anilina. Entre ellos se encuentran el verde brillante, el verde malaquita, el violeta de genciana, el violeta cristal y la fuchsina bsica.

Son muy selectivos hacia bacterias Gram-positivas, sobre las que son efectivos a slo 0,2-2 ppm. En cambio, las Gram-negativas suelen ser resistentes, debido a su membrana externa.

El efecto antibacteriano se debe a la pseudobase, que es ms lipfila que el respectivo catin, y bajo esa forma accede al interior celular, donde se une a los grupos fosfato de los cidos nucleicos.

3.3.3.2. Colorantes derivados de la acridina (llamados flavinas, por su color amarillento -Lat: flavus-)

Los ejemplos tpicos son la acriflavina, la proflavina y la tripoflavina. Interfieren en la biosntesis de cidos nucleicos (intercalndose en la doble hlice del ADN) y protenas. Son bactericidas y bacteriostticos sobre una gran diversidad de bacterias.

A diferencia de las anilinas, ejercen su accin tambin en presencia de materiales como suero, pus, etc.

Su uso principal es la antisepsia de heridas.

3.3.4. Agentes alquilantes

Son agentes esterilizantes, activos tanto sobre clulas vegetativas como sobre esporas, que ejercen su efecto letal por su accin alquilante de protenas y cidos nucleicos.

3.3.4.1..Formaldehido (HCHO).

La alquilacin la produce reemplazando hidrgenos lbiles de ciertos grupos qumicos (-NH , -OH, -COOH y 2 -SH), produciendo:

hidroximetilaciones condensaciones (entrecruzamientos).


Usos comerciales:

como gas, en la descontaminacin de habitaciones; como formalina (solucin acuosa al 35%); como paraformaldehido (polmero slido de 91-99% de pureza).
La formalina se emplea para preservar tejidos, en lquidos de embalsamamiento, y al 0,2-0,4% en la preparacin de vacunas de virus.

3.3.4.2.Glutaraldehido.

Es menos txico y ms potente que el formaldehido, y no se afecta por materiales con protenas.Cada vez se emplea ms como esterilizante fro de instrumental quirrgico. Es el nico recomendado para esterilizar equipamiento de terapia respiratoria.

3.3.4.3. Oxido de etileno.

Tiene un efecto similar al del formaldehido: Sustituciones y entrecruzamientos irreversibles en grupos amino, sulfhidrilo, etc., de protenas. Tambin reacciona con grupos fosfato y anillos nitrogenados de los cidos nucleicos.

Es un agente empleado como esterilizante gaseoso, aunque es de accin lenta. Se emplea cuando no se puede recurrir a la esterilizacin por calor: esterilizacin de material de plstico, drogas, ciertos productos biolgicos, equipamiento electrnico. La operacin se realiza en cmaras parecidas al autoclave. Sin embargo, es un mtodo caro y exhibe ciertos riesgos: presenta accin vesicante y toxicidad para el hombre (mutgeno y carcingeno).

3.3.4.4. -propionil-lactona.

Es 25 veces ms activa que el formaldehido. Acta como gas en presencia de 80-90% de humedad relativa, aunque es poco penetrante.

BIBLIOGRAFIA
FRANKLIN, T.J., G.A. SNOW (1989): Biochemistry of antimicrobial action (4th edition). Chapman and Hall, Londres. Para los contenidos del presente tema, se recomienda el captulo 3.

MAURER, I.M. (1969): A test for stability and long-term effectiveness in disinfectants. Pharm. J. 203: 529534.

MYERS, T. (1988): Failing the test: germicides or use dilution technology? ASM News 54: 1921.

actualizado el 17 de agosto de 1998

1998 ENRIQUE IAEZ PAREJA. Prohibida su reproduccin, salvo con fines educativos.

Se agradecen los comentarios y sugerencias. Escrbame a eianez@goliat.ugr.es

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