Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
1 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.1 Introduo A maioria dos sucos ctricos contm uma grande variedade de componentes qumicos, predominantemente carboidratos. Carboidratos representam mais de 80 % do material solvel em sucos ctricos e desses, metade est na forma de sacarose. A outra metade constituda praticamente de Glucose de Frutose, como resultado de reaes enzimticas naturais grande variedade que quebram a sacarose. A densidade de uma Soluo Aquosa de sacarose misturada com iguais pores de Glucose e Frutose similar densidade de uma Soluo de 100 % de Sacarose. Devido ocorrncia de grandes quantidades de carboidratos nos sucos ctricos, utiliza-se, para medio de densidade, mtodos e escalas elaborados para solues puras de acar. Os componentes solveis dos sucos so denominados como teor de Slidos Solveis, apesar de serem determinados por, mtodos e escalas destinados solues de aucares. Os slidos no solveis, tais como cloud, polpa, etc., afetam a leitura de densidade. O termo Brix significa a expresso de porcentagem em peso de Sacarose em soluo aquosa. A densidade utilizada para fazer converses peso/volume de grande importncia, para calcular blendagens e formulaes, padronizar resultados de laboratrios e gerenciar inventrios. 1.2 - Princpio Nas indstrias de suco ctrico utiliza-se o mtodo refratomtrico para a determinao do Brix, visto que os acares so componentes principais da maioria dos sucos. O refratmetro possui escala com graduao para porcentagem de acar em peso, sendo que, os refratmetros de bancada podem ter temperatura controlada para 20 C ou ter as leituras corrigidas em funo da temperatura da gua/soluo circulante. 1.3 - Materiais e Equipamentos - Refratmetro (com escala em Brix); - Banho Termosttico (opcional). 1.4- Materiais - Esptula de plstico; - Papel fino ou algodo. 1.5. Procedimento - Limpar o prisma do refratmetro com gua destilada e secar com papel fino ou algodo. - Manter a temperatura da amostra o mais prximo possvel da temperatura do refratmetro, com tolerncia de 2 C. - Trabalhar com refratmetro 20,0 0,5 C, utilizando o modo de correo de temperatura. - Com auxlio da esptula, colocar a amostra sobre o prisma e aguardar aproximadamente 1 minuto para estabilizao da temperatura e fazer leitura. - Para suco reconstitudo, no necessrio o tempo de espera, podendo-se realizar leituras imediatas. - Caso a leitura no for realizada a 20 C, utilizar a tabela de correo (Tabela I). - Fazer a correo de acidez aps sua determinao, utilizando-se a tabela de correo (Tabela II). O valor encontrado somado ao Brix j corrigido para 20 C, obtendo-se o Brix final.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
2 de 96
Aprovao
25/03/2001
65,00 a 74,99
Subtrair da leitura de brix 10 0,50 0,54 0,58 11 0,46 0,49 0,53 12 0,42 0,45 0,48 13 0,37 0,40 0,42 14 0,33 0,35 0,37 15 0,27 0,29 0,31 16 0,22 0,24 0,25 17 0,17 0,18 0,19 18 0,12 0,13 0,13 19 0,06 0,06 0,06 Somar leitura de Brix 21 0,06 0,07 0,07 22 0,13 0,13 0,14 23 0,19 0,20 0,21 24 0,26 0,27 0,28 25 0,33 0,35 0,36 26 0,40 0,42 0,43 27 0,48 0,50 0,52 28 0,56 0,57 0,60 29 0,64 0,66 0,68 30 0,72 0,74 0,77
0,61 0,55 0,50 0,44 0,39 0,33 0,26 0,20 0,14 0,07 0,07 0,14 0,22 0,29 0,37 0,44 0,53 0,61 0,69 0,78
0,64 0,58 0,53 0,46 0,40 0,34 0,27 0,21 0,14 0,07 0,07 0,15 0,22 0,30 0,38 0,45 0,54 0,62 0,71 0,79
0,66 0,60 0,54 0,48 0,41 0,35 0,28 0,21 0,14 0,07 0,08 0,15 0,23 0,30 0,38 0,46 0,55 0,63 0,72 0,80
0,68 0,62 0,56 0,49 0,42 0,35 0,28 0,21 0,14 0,07 0,08 0,15 0,23 0,31 0,39 0,47 0,55 0,63 0,72 0,80
0,72 0,65 0,58 0,51 0,44 0,37 0,30 0,22 0,15 0,08 0,08 0,15 0,23 0,31 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,74 0,67 0,60 0,53 0,45 0,38 0,30 0,23 0,15 0,08 0,08 0,16 0,24 0,31 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,76 0,69 0,61 0,54 0,46 0,39 0,31 0,23 0,16 0,08 0,08 0,16 0,24 0,32 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,79 0,71 0,63 0,55 0,48 0,40 0,32 0,24 0,16 0,08 0,08 0,16 0,24 0,32 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
3 de 96
Aprovao
25/03/2001
% acido 45.0 45.2 45.4 45.6 45.8 46.0 46.2 46.4 46.6 46.8 47.0 47.2 47.4 47.6 47.8 48.0 48.2 48.4 48.6 48.8 49.0 49.2 49.4 49.6 49.8 50.0
Corr 0.00 0.04 0.08 0.12 0.16 0.20 0.24 0.28 0.32 0.36 0.39 0.43 0.47 0.51 0.54 0.58 0.62 0.66 0.70 0.72 0.78 0.81 0.85 0.89 0.93 0.97 1.01 1.04 1.07 1.11 1.15 1.19 1.23 1.27 1.30 1.34 1.38 1.42 1.46 1.50 1.54 1.58 1.62 1.66 1.69
Corr 1.72 1.76 1.80 1.83 1.87 1.91 1.95 1.99 2.03 2.06 2.10 2.14 2.18 2.21 2.24 2.27 2.31 2.35 2.39 2.42 2.46 2.50 2.54 2.57 2.61 2.64 2.69 2.72 2.75 2.78 2.81 2.85 2.89 2.93 2.97 3.00 3.03 3.06 3.09 3.13 3.17 3.21 3.24 3.27 3.31
Corr. 3.35 3.38 3.42 3.46 3.49 3.53 3.56 3.59 3.63 3.68 3.70 3.73 3.77 3.80 3.84 3.88 3.91 3.95 3.99 4.02 4.05 4.09 4.13 4.17 4.20 4.24 4.27 4.30 4.34 4.38 4.41 4.44 4.48 4.51 4.54 4.58 4.62 4.66 4.69 4.73 4.76 4.79 4.83 4.86 4.90
Corr 4.94 4.97 5.00 5.03 5.06 5.10 5.14 5.18 5.22 5.25 5.28 5.31 5.35 5.39 5.42 5.46 5.49 5.53 5.56 5.60 5.64 5.67 5.71 5.75 5.78 5.82 5.86 5.89 5.93 5.96 6.00 6.04 6.07 6.11 6.15 6.18 6.22 6.26 6.29 6.33 6.37 6.40 6.44 6.47 6.51
Corr 6.55 6.58 6.62 6.66 6.69 6.73 6.77 6.81 6.84 6.88 6.92 6.95 6.99 7.03 7.06 7.10 7.14 7.17 7.20 7.24 7.28 7.31 7.35 7.38 7.42 7.46 7.49 7.53 7.57 7.60 7.64 7.68 7.71 7.75 7.78 7.82 7.86 7.89 7.93 7.97 8.00 8.04 8.08 8.11 8.15
Cor 8.19 8.22 8.26 8.29 8.33 8.37 8.40 8.44 8.48 8.51 8.55 8.59 8.62 8.66 8.70 8.73 8.77 8.80 8.84 8.88 8.91 8.95 8.99 9.02 9.06 9.10
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
4 de 96
Aprovao
25/03/2001
2) FONTES BIBLIOGRFICAS
USDA, 1985 e Intercit - Redd, J. B., Hendrix, C. M. Jr., Hendrix, D. L., Quality Control Manual for Citrus Processing Plants, Book I, Intercit, Inc. - 1986 - Pag. 3.
Ttulo do documento:Acidez
1) DETALHAMENTO 1.1) Introduo O teor de cidos uma caractersticas importante na determinao da qualidade do suco ctrico. Ele proporciona o sabor cido que considerado elemento necessrio para saciar a sede. Os cidos e seus sais repem o que foi gasto por nosso organismo em exerccios fsicos.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
5 de 96
Aprovao
25/03/2001
cidos em citrus so formados a partir do ciclo de cido ctrico, comum a todas as formas de vida. Esse processo respiratrio ( ciclo de Krebes) quebra os carboidratos em CO 2 e vrios cidos orgnicos. O cido predominante o cido ctrico. O cido mlico tambm est presente, representando cerca de 10 % de cidos. Diferente do cido ctrico, o cido mlico mantm um nvel constante durante a maturao. H duas maneiras bsicas de medir a acidez: a determinao simples de ons H + livres (pH) ou a medida padro do total de Hidrognio cido, dissociado ou no, atravs da titulao cido-base. O gosto cido dos sucos ctricos pode estar mais associado com medidas de pH porque o H + livre que interage com os receptores gustativos da lngua. Contudo, testes de maturao e correo de Brix so determinados preferencialmente por titulaes cido-base, as quais melhor expressam a presena do cido ctrico. 1.2)Princpio Uma simples titulao cido-base geralmente utilizada e o resultado calculado em funo do peso molecular do cido Ctrico. 1.3) Materiais e equipamentos - Bureta (capacidade de 25 ou 50 mL, graduao 1/10) ou titulador automtico; - Erlenmeyer ou Becker de 250 mL; - Balana; - Pipeta de 25 mL (para suco no concentrado); - pHmetro. 1.4) Solues e Reagentes - Soluo fatorada de Hidrxido de Sdio 0,3125N (PR.05.3.004); - Soluo de Indicador Fenolftalena 1,0 % (PR.05.3.028), se no se dispe de pHmetro.
1.5) Procedimento 1.5.1- Procedimento para suco concentrado: a) Em um Becker ou erlenmeyer, pesar aproximadamente 10 g de amostra; b) Adicionar cerca de 100 mL de gua destilada. c) Sob agitao ce com a utilizao do pHmetro, titular com soluo de Hidrxido de sdio 0,3125N at pH 8.2 0.1, ou adicionar algumas gotas de Indicador Fenolftalena e titular at a viragem de colorao do indicado 1.6) Expresso de Resultados
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
6 de 96
Aprovao
25/03/2001
0.1, ou adicionar
Nota: Frmula definida sobre um brix mdio para a amostra de 10,20 brix (densidade = 1,0409). Se utilizar 10 g de suco no concentrado para anlise, calcular da mesma forma que para suco concentrado. 3. FONTES BIBLIOGRFICAS USDA, 1985 e Intercit - Redd, J.B., Hendrix, C. M., Jr., Hendrix, D. L., Quality Control manual for Citrus Processing Plants, Intercit, Inc. - 1986 - Pag. 9.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
7 de 96
Aprovao
25/03/2001
2) FONTES BIBLIOGRFICAS USDA, 1985 e Intercit - Redd, J. B., Hendrix, C. M. Jr., Hendrix, D. L., Quality Control Manual for Citrus Processing Plants, Book I, Intercit, Inc. - 1986 - Pag. 21.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
8 de 96
Aprovao
25/03/2001
Peso do Concentrado 123.6 123.4 123.3 123.1 122.9 122.7 122.5 122.3 122.1 122.0
Nota: Esta tabela somente para facilitar a Reconstituio do suco concentrado. - sempre conferir o Brix reconstitudo pela refratmetro. Ajustando se necessrio. b) - SUCO DE LIMO Reconstitua para 5,7 % de acidez. Esta Reconstituio simples desde que se conhea a acidez do concentrado, Exemplo: Acidez = 35 % 100 35 x 5,7 100 x 5,7 x = = 16,28 35 Pese 16,28 gramas de suco concentrado e dilua para 100 gramas com gua; ou pese 162,8 gramas de suco concentrado e dilua para 1.000 gramas.
2) FONTES BIBLIOGRFICAS Citrus Hand Book, , PG. 6.18.1
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
9 de 96
Aprovao
25/03/2001
Consiste na recuperao do leo, destilando-se uma amostra de suco por arrase com lcool isoproplico, e na titulao com Bromato-Brometo de Potssio (Mtodo Scott). O leo Essencial da casca da laranja composto de 90 % por DLimonene, o qual possui em sua molcula duas insaturaes (-C=C-) capazes de sofrer adio estequiomtrica de bromo. O DLimonene consome bromo da soluo titulante e o volume gasto de Brometo-Bromato de Potssio ser proporcional ao teor de leo da amostra. 1.3 - Materiais e Equipamentos - Dispensete ou pipeta de 10 e 25 mL; - Erlenmeyer de 250 mL; - Becker de 100 mL; - Pipeta volumtrica de 25 mL. 1.4 - Solues e Reagentes - lcool Isoproplico; - Soluo de Indicador Metil Orange 0,1 % (PR.05.3.017); - Soluo de Brometo-Bromato de Potssio 0.0247N (PR.05.3.014); - Soluo de cido Clordrico 1: 2 (PR.05.3.009). 1.5- Procedimento a) Pipetar 25 mL da amostra e transferi-la para um balo de destilao de 250 mL. b) Adicionar 25 mL de lcool Isoproplico e destilar at recolher, em um becker, uma poro entre 25 e 30 mL de destilado. c) Adicionar ao destilado 10 mL de HCl 1:2 com indicador. d) Titular o destilado, sob agitao, com Soluo de Brometo-Bromato de Potssio 0,0247N at o desaparecimento da cor. e) Descontar a interferncia de eventuais contaminantes do lcool Isoproplico, realizando uma prova em branco, ou seja, gua destilada no lugar da amostra. 1.6- Expresso de Resultados O resultado expresso como mL de leo/100 mL de suco reconstitudo. Sabe-se que: 1 mL Soluo 0,0247N de Bromato = 0,001 mL de DLimonene; Temos ento um fator de multiplicao 0,001. Como o resultado dado em funo de 100 mL de suco e usamos apenas 25 mL, temos um fator de multiplicao 4. Finalmente 0,001 x 4 = 0,004 A porcentagem de leo (v/v) ento obtida pelo clculo: (volume (mL) de Soluo de Brometo - Volume (mL) Branco de lcool) x 0,004.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
10 de 96
Aprovao
25/03/2001
USDA / RESEARCH, N.C Scott Redd J.B Hendrix D.L, Qualit Control Manual For Citrus, Processig Plants; Intercit INC. 1986 ______________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
11 de 96
Aprovao
25/03/2001
A pectina pode formar sais denominados pectinas. cidos Pcticos so substncias pcticas compostas, na maioria das vezes, por cidos poligalacturnicos coloidais e essencialmente livres (grupos carboxila no esterificados). Seus sais se denominam pectatos metoxlicos. Relao com Viscosidade, Clarificao e Geleificao: Pectinas com alto grau de metoxilao provocam elevao de viscosidade e geleificam combinando-se com sacarose e cidos. Por outro lado, pectinas com grau de metoxilao reduzido provocam baixa viscosidade e geleificam combinando-se com metais polivalentes. A clarificao a conseqncia inevitvel da ao enzimtica contnua, ao provocar total desmetoxilao ou degradao da cadeia de pectina. Surgem os cidos Pcticos e possivelmente seus sais, os pectatos. Enzimas Pectinolticas (Enzima Natural) A Pectinaesterase uma enzima natural da maioria das frutas. Com o desenvolvimento da maturao a enzima participa decompondo as substncias aglutinantes entre as clulas nas paredes celulares, fazendo com que o tecido fique menos consistente. Um bom exemplo da atividade enzimtica espontnea que, se deixarmos um suco recm extrado em repondo prolongado, sua viscosidade diminuir sua clarificao, atestando a atividade da enzima natural. Inativao da Enzima: Dentro do processo industrial a enzima deve ser inativa quando no se desejar baixa viscosidade ou a clarificao do suco. O processo mais comum para se obter a inativao atravs do calor, pois o aquecimento, a certa temperatura, provoca a desnaturao da protena anulando a sua atividade. 1.1- Princpio Consiste na adio de pectina ctrica a uma amostra de suco, criando as condies timas para a ao enzimtica. Os steres metlicos das cadeias de pectina sero gradativamente hidrolisados a radicais carboxlicos livres, os quais provocaro a queda de pH de forma proporcional intensidade da atividade enzimtica. 1.2- Materiais e Equipamentos - Becker de 100/150 mL; - Pipeta Graduada de 1,5 e 10 mL; - Pipeta Volumtrica de 20 mL; - Proveta Graduada de 50 mL; - pHmetro. 1.4- Solues e Reagentes - Soluo Padronizada de Hidrxido de Sdio 0,05N (PR.05.3.007); - Soluo de Hidrxido de Sdio 0,3125N (PR.05.3.004); - Soluo de Pectina Ctrica 1,0 % (PR.05.3.027). 1.5- Procedimento a) Pipetar 20 mL de amostra e corrigir o pH para valor entre 7,8 a 7,9 com soluo de hidrxido de Sdio. b) Adicionar 40 mL de Pectina Ctrica 1 % com temperatura prxima a 30 C.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
12 de 96
Aprovao
25/03/2001
c) Corrigir novamente o pH, agora para 7,8 - 7,9, com Soluo de Hidrxido de Sdio. d) Adicionar, a seguir, 1 mL de Soluo de Hidrxido de Sdio 0,05N e medir o tempo consumido para que o pH retorne a 7,8. Nota: Todas a etapas devem ser realizadas com a amostra sob agitao. 1.6- Expresso de Resultados A atividade da Pectinaesterase expressa como a quantidade de miliequivalentes de NaOH neutralizados por minuto, por mililitro x 10-4 V1 x N x 10 4 P.E.u. x 10 4 = , onde: T x V2 V1 - Volume de NaOH adicionado (mL); N - Normalidade da soluo de NaOH; T - Tempo gasto para o retorno do pH a 7,8; V2- Volume da amostra (mL). Nota: Estes valores podem ser convertidos em tabela 2- Fontes Bibliogrficas Rapid Method After Joe Winoker - Redd, J. B., Hendrix, C. M., Hendrix, D. L.; Quality Control for Citrus Processing Plants, Intercit, Inc. - 1986 - Method 20, Pg. 54.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
13 de 96
Aprovao
25/03/2001
Se baseia na comparao visual da amostra de suco contida em um tubo de ensaio com tubos padro com cores bem definidas. Os padres da escala USDA para suco de laranja se compe de seis tubos coloridos codificados: 0J1 - 0J2 - 0J3 - 0J4 - 0J5 e 0J6. A tabela apresentada a seguir, correlaciona estes cdigos com notas para a cor do suco. Padro USDA 0J6 0J5 0J4 0J3 0J2 e 0J1 no de cor 36 37 38 39 40
Para efetuar a comparao da cor colocam-se os tubos padro e as amostras em um suporte pintado em cinza claro opaco e recebendo a iluminao de uma lmpada tipo luz do dia (7.400 K). Observa-se a cor colocando-se em um ngulo de 45 em relao aos raios de luz. Como no desenho: FIG:08 OBS. Este mtodo subjetivo e pode apresentar variao nos resultados dos testes efetuados por dois ou mais analistas.
1.2- Medio objetiva da cor: Um diagrama para as cores: qualquer cor pode ser obtida, pelo menos aproximadamente, a partir da combinao das trs cores bsicas (vermelho, amarelo e azul), adotadas pela comisso Internacional para Iluminao (CIE Comission Internacionale de LEclairage). A proporo com que entram as cores primrias numa determinada cor, identificada por trs nmeros chamados valores tristmulos dessa cor. Representando os valores tristmulos num grfico cartesiano, pode-se construir um diagrama que representa as diversas cores do espectro. Essa representao , contudo, incmoda, pois tal diagrama tridimensional. FIG. 09 Se, porm, os valores tristmulos de cada cor, x - y - z, forem divididos pela soma dos trs, obtm-se os nmeros: x x = x +y+z y y =
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
14 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.3- Equipamento: - Colormetro para ctrus, marca HUNTERLAB, modelo D45-2 Procedimento: O aparelho vem acompanhado de um tubo padro para ser calibrado. Depois insere-se um tubo com a amostra, seleciona-se num conjunto de teclas o parmetro desejado e efetua-se a leitura em um painel digital. As orientaes do fabricante do aparelho para sua operao so as seguintes: Operao do instrumento - Verificao peridica e ajustes Verificao da fonte de voltagem Cada fonte de voltagem de lmpada deve operar conforme sua voltagem especificada. A voltagem para lmpada instalada em seu instrumento est impressa na placa no lado direito da unidade ptica. Uma inspeo dever ser feita periodicamente para assegurar se a voltagem continua inalterada. Operando uma lmpada acima de sua voltagem especificada, encurtar significadamente sua vida. ( tecla S = tenso 6.3 ). a- Se o instrumento est em standby ( tecla STBY comprimida para baixo) aperte-a para solt-la. b- Comprima a tecla y, espere at o valor de y aparea no digital e estabilize. (15 - 30 min.) c- Comprima a tecla S e observe a voltagem da fonte no display digital. Se o valor que aparece no display no for o mesmo do impresso na placa presa unidade tica, introduza uma pequena chave de fenda no orifcio de acesso ao ajuste da voltagem, localizada ao lado direito das teclas, e faa ajustes at aparecer o valor correto. 1.4- Padronizao do instrumento por meio dos azulejos Aps a fonte de voltagem ter sido verificada o instrumento deve ser padronizado. O procedimento de padronizao como segue: a- Selecione o suporte para os azulejos e prenda-o unidade ptica. Verifique se os prendedores ficaram firmes. b- Selecione o padro calibrado branco (azulejo branco) suprido com o instrumento e coloque-o no suporte. Sempre posicione os azulejos de modo que eles fiquem bem centrados, em p, seguros nessa posio pelo dispositivo apropriado. Nota: importante que os padres sejam mantidos limpos e tratados com cuidado. Eles precisam ser guardados na caixa quando no esto sendo usados. Estejam seguros que os padres esto limpos antes de comear a calibrao ou medidas de amostras. Se necessrio lave-os com detergente e enxge-os com gua quente. Nunca deixe um azulejo calibrado no suporte. Um azulejo branco no calibrado suprido para ser mantido no suporte durante o perodo de standby. c- Comprima a tecla y. d- Gire o boto y at que o valor de y do azulejo branco calibrado aparea no display digital. e- Comprima a tecla x. f- Gire o boto CR - x at que o valor de x do azulejo branco calibrado aparea no display digital.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
15 de 96
Aprovao
25/03/2001
g- Comprima a tecla z. h- Gire o boto cy - z at que o valor de z do azulejo branco calibrado aparea no display digital. 1.5- Ajuste da reflectncia zero da escala x, y, z. Este ajuste particularmente necessrio aps alteraes da fonte da lmpada ou ajuste de lentes. Se assegure que as lentes esto limpas antes de fazer o ajuste de zero. a- Coloque o padro branco no suporte de espcimes e padronize o instrumento nos valores de y, x, z. b- Substitua o padro branco pelo azulejo negro. Observe se este azulejo esta perfeitamente limpo. c- Comprima a tecla y. d- Usando uma pequena chave de fenda suprida com o instrumento, ajuste a leitura no display digital a + 00,0 atravs do orifcio y zero ref. adj. (ver esse orifcio ao lado do boto y). e- Comprima a tecla x e ajuste a leitura nos display a 00.0 atravs do orifcio x zero ref. adj. ao lado do boto CR - x. f- Comprima a tecla z e do mesmo modo ajuste a leitura no display digital a - 00.0 atravs do orifcio zero ref. adj. ao lado direito do boto CR - z. g- Repita os passos de a at f at que o instrumento no necessite de nenhum ajuste, isto , no display digital se leia os valores de y, x e z do padro branco e o valor de 00.0 para y, x e z do azulejo negro. 1.6- Medidas de amostras - Ajuste do zero ( nota: esta verificao dever ser feita diariamente). a- Remova o suporte de azulejos e prenda o suporte para tubos de amostra. b- Desconcerte um terminal da lmpada, remova a cobertura do suporte do tubo de amostra que nenhuma luz entre nele. c- Ajuste o zero de y, x, z. d- Reconhece o terminal da lmpada, remova a cobertura do suporte do tubo de amostra e de tempo para a lmpada se estabilizar. 1.7- Calibrao com padro 0J4. a- Coloque o padro 0J4 no suporte de modo que o parafuso ao lado do tubo se encaixe na fenda do suporte do tubo de amostra. b- Comprima a tecla y. c- Ajuste o boto y at que o valor de y do padro 0J4 seja lido no display digital (27,1). d- Comprima a tecla cy (Nota: A padronizao precisa ser feita nessa ordem, o boto cy-z ajustado aps o de y). e- Gire o boto cy-z at que o valor de cy do padro 0J4 seja lido no display digital (80,6). f- Comprima a tecla CR. g- Gire o boto CR-X at que o valor de CR do padro 0J4 seja lido no display digital (33,8). h- Comprima a tecla N e leia o valor no display comparando-o com o padro 0J4 (37). i- Remova o padro 0J4 retornando-o ao seu estojo.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
16 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.8- Medida de amostras de suco importante que o regulamento USDA (United States Departament of Agriculture) ou outro aplicvel, seja seguido quando manuseado espcimes para medida de cor (i. ; temperatura, brix etc.) mantenha um conjunto de tubos de amostra que tenham a mesma leitura e sempre coloque o tubo no suporte na mesma posio. (Isto reduzir discrepncia causada por variaes de vidro). Mantenha a vidraria limpa. a- O instrumento precisa sempre ser padronizado com o tubo padro 0J4 antes de medir uma amostra de suco de laranja. b- Coloque o tubo de suco na posio indicada para o tubo. c- Comprima a tecla CR e registre o valor CR. d- Comprima a tecla cy e registre o valor cy. e- Comprima a tecla N e registre o valor N. O valor de N a cor da amostra. Tambm pode ser obtido atravs de CR e CY, pela equao: N= 0,165 CR + 0,111 CY + 22,51 - Reconstituir o suco concentrado para 11,5 brix a 20 C e acertar a temperatura para 26 C { + 0,5 C}. OBS: Para suco natural, apenas acertar a temperatura transferir o suco reconstitudo para um tubo de Colormetro com tampa. Precaues de Segurana: Deve ser tomadas precaues de manuseio com o tubo de leitura para evitar-se a sua quebra dentro do aparelho. Observaes: Lmpada: A lmpada GE 1460 te uma vida de operao aproximadamente 150 horas. Se quando fazendo medidas ou padronizaes a leitura se torna errtica ou comea ser incoerente, a lmpada est provavelmente se aproximando do fim de sua vida til e dever ser substituda. 2) FONTES BIBLIOGRFICAS Itercit Inc., Hontercab ______________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
17 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
18 de 96
Aprovao
25/03/2001
- Becker de 1000 mL, com cerca de 10 cm de dimetro (fundo); - Fonte de Iluminao. - Padres Fotogrficos. 1.4- Padres Fotogrficos Desenvolver padres fotogrficos que reproduzam as condies de suco em termos de defeitos. Responsvel: Gerente do Controle de Qualidade. 1.5- Procedimento a) Em um becker de 1000 mL, preparar aproximadamente 700 mL de suco reconstitudo. b) Deixar em repouso de 5 minutos no mnimo. c) Observar o fundo do becker e avaliar os defeitos encontrados, comparando-os com os padres fotogrficos estabelecidos. Para tanto, deve-se iluminar o fundo do becker com luz suficiente para tornar os defeitos bem perceptveis. ______________________________________________________________________
1.6- Expresso de Resultados A anlise de defeitos compe o Score do suco, contando no mximo 20 pontos, os quais so atribudos aps comparao com os padres fotogrficos, como segue: Estado Vendvel Blendagem Reprocesso
20 Hesperidina Pto preto Ou Marrom Pequeno Mdio Grande Unidades 5 3 0 0 05 19 06 a 10 04 a 05 02 0 06 a 10 18 11 a 20 06 a 10 03 a 4 1 11 a 20 17 > 20 > 10 > 04 > 01 > 20
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
19 de 96
Aprovao
25/03/2001
. Filamento de polpa e Albedo no sero diferenciados ( acima de 18 unidades j reprova o produto ) . Ponto preto e marrom classificados por tamanho ( ver figura 1 ), pontos pretos / marrons. . Filamento/ fragmento metlico / Geleia a presena j reprova o produto. . Cristais a presena no reprova o produto. 2- FONTES BIBLIOGRFICAS Citrus Hand Book - January 1985 - Part.9. Intercit Inc. 1986 _________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
20 de 96
Aprovao
25/03/2001
As amostras devem ser identificadas de acordo com os objetivos estabelecidos para a avaliao sensorial, no havendo, portanto, obrigatoriedade para codificaes especficas. Preferencialmente, realizar as avaliaes duas horas antes ou depois das refeies. A ordem de apresentao das pores pode ser ao acaso, diferente para cada provador, para no influenciar os resultados. O nmero de amostras a ser apresentado em cada sesso depende: - A natureza do produto que esta sendo avaliado; - A intensidade e a complexidade da propriedade sensorial que est sendo julgada; - A experincia do provador. 1.2.3- Degustadores Os membros da equipe devem gozar de boa sade e serem dispensados quando gripados. Nota: Aconselha-se aos Degustadores no fumar, ingerir bebidas alcolicas e alimentos muito temperados ou especiarias, nem perfuram-se antes da realizao das avaliaes. 1.2.4- Tcnicas para uma Boa Degustao Fase Visual: examina-se, se necessrio, o aspecto e a cor do produto; Fase Olfativa: aspira-se o produto diretamente pela via nasal, primeiro sem agit-lo e, em seguida, agitando-o para fazer ressaltar o odor. Fase Degustativa: coloca-se o produto na boca, saboreando-o e, ao mesmo tempo, absorvendo ar para jogar o sabor e o aroma pela via olfativa retronasal. Logo, cospe-se ou traga-se o produto segundo o caso. Ps-Fase: espera-se alguns instantes para perceber novamente o gosto e estimar sua reminiscncia. Assim so detectados certos defeitos que passam desapercebidos no primeiro momento. Nota: Se o provador engole ou no as pores, o resultado no deve ser afetado. 2- Procedimento a) Reconstituir o suco para Brix entre 11 e 12, com gua isenta de sabor estranho, lmpida e inodora. A temperatura ideal da gua est entre 15 e 25 C. b) Colocar um pouco do suco na boca, procurando espalh-lo sobre toda superfcie da lngua (item 1.2.4). c) Avaliar o equilbrio entre os sabores doce, cido, amargo e salgado na composio do sabor e avaliar: c.1) A presena ou no de sabor estranho (off-flavor- normalmente tipo cozido, adstringente (que amarra), picante, muito amargo, oxidado, passado, fermentado e outros) atribuindo ao batche a codificao N- Normal ou A Anormal, realizada pelos Analistas Autorizados. c.2) A definio do score de sabor para efeitos de classificao do produto, realizada pe Degustadores Oficiais. Nota: As nestas atribudas para a definio do score de sabor esto descritas na tabela 1. e) Pode-se estabelecer amostras de referncia para produtos ou lotes em especfico como maneira de auxiliar a avaliao dos mesmos. 3- Expresso de Resultados Quando, alm da verificao de presena de sabor estranho off-flavor e definio do Score de Sabor, for aplicvel a determinao de um Flavor Score (USDA), classificar o sabor do suco de acordo com a nota de sabor atribuda ao mesmo, que compreende os seguintes parmetros:
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
21 de 96
Aprovao
25/03/2001
Nota: O Score de Sabor permite uma classificao de sabor especfica, utilizadas internamente para auxiliar o planejamento de combinaes de produtos. 4) FONTES BIBLIOGRFICAS IFU Analyses n 25
- Suco B:
Sabor
= 36
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
22 de 96
Aprovao
25/03/2001
O suco A teria comercializao segura ao passo que o suco B receberia restries pois apresentaria um sabor pior. 2) FONTES BIBLIOGRFICAS IFU _____________________________________________________________________
1.3- Materiais e Equipamentos - Centrfuga de laboratrio; - No mnimo 2 Tubos de 50 mL ou 15 mL, graduados, de fundo cnico.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
23 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.4- Procedimento a) Encher dois tubos de centrfuga (para cada amostra) at a marca de 50 mL (ou de 15 mL) com o suco na concentrao desejada e coloc-los na centrfuga, de forma que a carga fique balanceada. b) Ajustar a velocidade para a rotao desejada e centrifugar por aproximadamente 10 minutos, mantendo a centrfuga fechada. O objetivo manter estvel a leitura da velocidade da centrfuga no display, com variao mxima de 100 rpm. c) Retirar os tubos e verificar a leitura, em mililitros, no topo da camada de polpa. 1.5- Expresso de Resultados Fazer a mdia das leituras dos slidos depositados nos dois tubos e multiplicar por dois. % Polpa = Mdia do volume depositado x2 2- FONTES BIBLIOGRFICAS Flrida Dept. of Citrus - Redd, J. B.; Hendrix, C. M., Jr.; Hendrix, D. L.; Quality Control Manual for Citrus Processing Plants, Intercit, Inc. - 1986 - Pg. 37.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
24 de 96
Aprovao
25/03/2001
Pesam-se 13,57 gramas de concentrado e diluem-se a 100 mL com gua destilada. 2- Zerar o espectrofotmetro a 530 mm usando gua destilada 3- Ler a % de transmitncia do suco reconstitudo 5- MEDIO DE TRANSMITNCIA 5.1- Posicionar a chave (7) do equipamento e T. 5.2- Ajustar 0 % no indicador, girando o boto (3). Ao levantar a tampa do compartimento de amostras um diafragma fecha-se automaticamente protegendo o detetor. 5.3- Com auxilio do posicionador (13), colocar a cubeta contendo o branco de maneira que esta fique alinhada com o feixe de luz. 5.4- Ajustar 100 % T com o boto (14). 5..5- Posicionar sucessivamente as amostras com (13) de maneira que interceptem o feixe de luz. 5.6- Ler no indicador (1) o valor em transmitncia. 6- LEGENDA DO APARELHO: 6.1- Indicador digital. 6.2- Chave para lmpada de tungstnio 6.3- Ajuste 0 % T 6.4 - Chave para lmpada de deutrio 6.5- Ajuste do ponto decimal 6.6- Ajuste de sensibilidade 6.7- Chave de seleo de transmitncia, absorbncia ou concentrao 6.8- Ajuste para leitura direta de concentrao 6.9- Reter (fixa o valor no indicador digital) 6.10- Contador do comprimento de onda 6.11- Boto de varredura do comprimento de onda 6.12- Seletor da lmpada - A e B 6.13- Posicionador de cubetas 6.14- Ajuste de 1005 t/zero Abs
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
25 de 96
Aprovao
25/03/2001
Ttulo do documento: pH
1- DETALHAMENTO 1.1- Introduo O pH de uma soluo aquosa o co-logaritimo da concentrao molar de ons H +, os quais provm da frao dissociada dos cidos nela dissolvidos, sendo a principal causa do sabor azedo que lhe peculiar. O equipamento mede a diferena de potencial existente entre a superfcie da membrana, onde ocorre adsorso dos ons H+, e a meia clula de prata/cloreto de prata, convertendo o sinal em milivolts para o correspondente em escala logartmica. O pHmetro deve ser instalado em local apropriado e longe de fontes de vapores corrosivos. 1.2- Materiais e Equipamentos - pHmetro; - Becker de 100 a 150 mL. 1.3- Solues e Reagentes - Soluo KCl 3M 1.4- Procedimento a) Preparar a amostra de acordo com a diluio desejada.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
26 de 96
Aprovao
25/03/2001
b) Certificar-se que o eletrodo est limpo e abastecido com soluo de KCl 3M. c) Ajustar a temperatura de leitura do equipamento da amostra. d) Mergulhar o eletrodo no recipiente contendo a amostra sob agitao e realizar a leitura. e) Quando no utilizado, manter o eletrodo imerso em soluo de KCl 3M. 2- FONTES BIBLIOGRFICAS FMC- Redd, J. B.; Hendrix, C. M.; Jr., Hendrix, D. L.; Quality Control Manual for Citrus Processing Plants, Intercit, Inc. - Book I - 1986 - Pag. 22
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
27 de 96
Aprovao
25/03/2001
de acares so bastante uniformes. Por outro lado os sucos ctricos contm quantidades suficientes de clcio para formar geleia com as pectinas com baixo grau de metilao degradadas pela Pectinaesterase. Submetendo-se o suco a um tratamento trmico eficiente durante a concentrao consegue-se estabilizar o concentrado com respeito geleificao. 2.1- Tcnica: Coloque uma lata contendo a amostra em uma estufa temperatura de 26,1 a 27,2 C e mantenha durante 24 horas. Retire a lata, abra, deixe o concentrado escoar lentamente Grau de Geleificao 0 1 2 3 4 Caractersticas completamente fluido, sem partculas de geleia Fluido, mas com pequenas partculas de geleia ou grumos fluido, mas com grandes partculas de geleia ou grumos geleificao ao ponto de que, ao ser removido, uma poro de concentrado retm o formato da lata. geleia slida retendo o formato da lata, quando removida.
2.2- Observaes: Atravs de observaes na prtica pudemos notar que as variedades mais sujeitas a estes tipos de problemas so: 2.2.1- Em primeiro lugar a laranja lima devido ao pH alto. Durante o processamento a atividade enzimtica se processa intensamente no suco desta variedade e se tornam necessrios alguns cuidados especiais para evitar a clarificao e a geleificao do produto. Podemos citar alguns: Operar com presso mais baixa nas extratoras e finishers; reduzir o tempo de residncia do suco em tanques; produzir um suco com teor mais baixo de polpa; controlar rigidamente a pasteurizao do suco durante a concentrao. 2.2.2- Outras variedades de meia estao tambm esto sujeitas a estes problemas, principalmente apresentam geleificao em pequenos graus. Sucos de Hamlin produzidos com frutas expostas ao frio (geadas) geralmente apresentam graus de geleificao. 2.2.3- Estes problemas so mais raros nas variedades tardias (pra, natal e valncia). 3- FONTES BIBLIOGRFICAS IFAS, FLORIDA DOC, Intercit Inc. 1986 Citrus Hanb Book
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
28 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
29 de 96
Aprovao
25/03/2001
Nota: A soluo alcolica de Alfa-Naftol, a soluo aquosa de hidrxido de potssio e Creatina e o regente Diacetil devem ser mantidas em geladeira. 1.5- Procedimento 1.5.1- Anlise a) Com o auxilio de uma proveta, colocar 300 mL de suco reconstitudo no balo de destilao, adicionar cerca de 3 mL de anti-espumante (ou Luftal), algumas prolas de vidro e destilar at recolher uma poro de 25 mL. b) Pipetar 10 mL do destilado para um erlenmeyer, adicionar 5 mL de Soluo Alcolica de Alfa-Naftol e a seguir, 2 mL de Soluo Hidrxido de Potssio e Creatina. Nota: Fazer o branco para cada amostra, colocando 10 mL de gua destilada em lugar da amostra. c) Agitar a soluo durante aproximadamente 15 segundos e, aps acionar o cronmetro/relgio. d) Aps 60 segundos, efetuar a leitura da absorbncia a 530 nm contra o branco de gua destilada. 1.5.2- Curva Padro a) Diluir 0.1 g de Diacetil em 1000 mL de gua destilada, em balo volumtrico de 1000 mL, e homogeneizar a soluo. b) Pipetar 10 mL desta soluo e diluir novamente para 1000 mL com gua destilada, em balo volumtrico de 1000 mL (0,010 mg/mL - soluo padro). c) Adicionar as seguintes quantidades da soluo padro (0,010 mg/mL) em tubos de ensaio: Nota: A soluo alcolica de Alfa-Naftol, a soluo aquosa de hidrxido de potssio e Creatina e o regente Diacetil devem ser mantidas em geladeira. 1.5- Procedimento Nota: Quando da adio da soluo de Alfa-Naftol e Creatina, agitar vigorosamente por 15 segundos. Aps, aguardar aproximadamente 1 minuto (cronometrado) e efetuar a leitura 530 nm em espectrofotmetro (absorbncia). d) Fazer o branco para cada amostra, colocando 10 mL de gua destilada em lugar da amostra. Nota: Por ser crtico o tempo para leitura, deve-se realizar 1 concentrao conhecida de cada vez. Deve-se, tambm, preparar 1 branco de cada vez. e) Traar a curva padro, relacionado as leituras com as respectivas concentraes, ou substituir a curva por fator colorimtrico (regresso linear). 1.6- Expresso de Resultados Diacetil (ppm) = (Leitura x Fator Colormetro) / 12 Nota: O fator colorimtrico prprio de cada aparelho, sendo obtido pela elaborao de uma curva padro a partir de concentraes conhecidas de Diacetil. 1.7- Segurana
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
30 de 96
Aprovao
25/03/2001
O contato de Alfa-Naftol com as mos ou o equipamento provoca manchas e por isso deve ser evitado. Sendo possvel, utilizar dosador do tipo bico de papagaio. 2- FONTES BIBLIOGRFICAS W.Hinson, W. G. C. P. C. - Redd, J. B., Hendrix, C. M., Jr.; Hendrix, D. L.; Quality Control for Citrus Processing Plants, Intercit, Inc. - 1986- Method 45, Pg.93.
n uma constante para cada material e definida como a viscosidade deste material. dv/dx o gradiente de velocidade, a medida da velocidade na qual uma pelcula intermediria move-se em relao a qualquer outra. isto define o cisalhamento (deslizamento de partculas) do material em teste; pode ser chamado de grau de cisalhamento e indicado pela letra S. O termo F indica a fora por unidade de rea, requerida para produzir a ao de A cisalhamento, chamada de fora ou esforo de cisalhamento e indicado pela letra f. Desse modo: f=nS
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
31 de 96
Aprovao
25/03/2001
Newton afirmou que todos os materiais tem uma dada temperatura, uma viscosidade que independente do grau de cisalhamento. Assim para mover o fluido duas vezes mais rpido, ser necessria a aplicao de uma fora duas vezes maior. Considere os dois grficos seguintes: FIG.11 O primeiro mostra que a relao entre o esforo de cisalhamento (F) e o grau de cisalhamento (S) uma linha reta. O segundo mostra que a viscosidade permanece constante mesmo quando mudamos o grau de cisalhamento. Os fluidos que se comportam segundo o grfico 2 so chamados de Newtonianos sua viscosidade constante. Como exemplo podemos citar o leo lubrificante. Existem fluidos que no se comportam desta maneira; neles a relao F/S no permanece constante, isto , quando se aumenta o grau de cisalhamento, o esforo de cisalhamento no aumenta na mesma proporo. Desse modo a viscosidade se altera quando o grau de cisalhamento alterado. Estes fluidos so chamados de no-newtonianos. A viscosidade um fator importante durante a concentrao de sucos ctricos, especialmente na produo de concentrados de densidade alta, devido perda de eficincia de certas operaes quando o produto se torna viscoso. um item importante tambm no dimensionamento de bombas. Um suco muito viscoso mais difcil de ser diludo e se torna um problema para o consumidor. A viscosidade transmite tambm indicaes sobre a estabilidade fsica do produto, que um fator importante de qualidade. Por estas razes se efetua o teste de viscosidade dos sucos ctricos. Viscosidade Dinmica ou Absoluta A viscosidade absoluta definida como a fora tangencial atuando sobre a unidade de superfcie de qualquer de dois planos paralelos separados pela distncia unitria quando o espao entre elas est cheio com um lquido e um dos planos move-se em relao ao outro com velocidade tambm unitria. A unidade usual de medida de viscosidade absoluta o centipoase (cP) que vale um centmetro de poise (P). Poise a fora de cisalhamento de um dina por centmetro quadrado necessrio para produzir um grau de cisalhamento de um segundo inverso. O equipamento mais usado para determinao da viscosidade absoluta em indstria de sucos ctricos concentrados o viscosmetro Brookfield Modelo LVT. Basicamente, o aparelho gira um cilindro ou um disco, em velocidade constante e uniforme, mergulhado na amostra. Essa rotao determina uma fora necessria para vencer a resistncia que a viscosidade do material oferece ao movimento de rotao. Como os sucos concentrados de citrus so fludos no-newtonianos que apresentam propriedades tixotrpicas, alguns parmetros devem ser fixados para se ter uniformidade nas condies dos testes e reprodutividade dos resultados. Na determinao da viscosidade do suco concentrado de laranja fixamos os seguintes: a = Temperatura 30 C b = Rotao = 12 rpm c = Haste (spindle) = n o 3 d = Tempo para leitura = 1 minuto aps ligar o aparelho. e = Recipiente para o suco = copo Griffin de 600 mL, forma baixa, contendo suco at a marca de 500 mL. Adaptado com haste no 3 e regulado para 12 rpm o fator para clculo da viscosidade em cP 100. A escala do aparelho de 0 a 100, mas devemos procurar utiliz-la entre 10 e 90, portanto a faixa coberta por esta regulagem do aparelho 1000 a 9000 cP. Para anlise de suco sem viscosidade fora desta faixa usar outros spindles. prefervel no mudar a velocidade (rpm) de modo a manter o mesmo grau de cisalhamento, a no ser que seja especificado pelo cliente. Os fatores da converso da leitura em cP constam na tabela abaixo. No rotao por FATORES Minuto
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
32 de 96
Aprovao
25/03/2001
COMO FAZER A LEITURA a- Estabilize a temperatura do suco no valor desejado. Para isto, deve ser usado um banho- de gua; procure evitar agitao do suco. b- Nivele o aparelho com os dois parafusos do trip, tomando como referncia o nvel de bolha do aparelho e lig-lo corrente eltrica. c- Adapte o protetor da haste. d- Mergulhe a haste na amostra at cobrir a marca de imerso. Esta operao deve ser conduzida de tal forma que no se permita que as bolhas de ar fiquem aderidas a haste. Isto pode ser conseguido introduzindo-se a haste na amostra lentamente, com certa inclinao. e- Rosquei a haste na rosca suporte, segure com a mo esquerda e com a direita, rosquei a haste com o movimento no sentido horrio. f- Verifique se o aparelho mantm o nvel. g- Pressione a alavanca da trava para baixo. Ela est localizada atrs do corpo do aparelho, logo acima do cabo. h- Ligue o aparelho, solte a alavanca da trava simultaneamente ligue o cronmetro. Quando completar um minuto pressione novamente a alavanca da trava e quando o ponteiro estiver em trnsito pelo visor, desligue o aparelho. 1- Faa a leitura. Suponhamos que, o aparelho adaptado para o suco de laranja como descrito acima, a leitura foi 45 A viscosidade absoluta da amostra : 45 x 100 = 4.500 cP. O aparelho est preparado para operar em 110 volts e com a variao de 70 a 130 volts no ocorrer variao de velocidade, desde que a freqncia (ciclagem) no varie mais que 0,3%. Se a haste estiver corroda ou deformada acarretar leitura falsa. Tambm haver incorreo se ela no estiver bem centrada no corpo de prova. VERIFICAO DA TENSO DE MOLA a- Monte e nivele o aparelho; b- Sem mergulhar em qualquer lquido, com um ligeiro e delicado toque de dedos na haste da mola, flexione o ponteiro em direo do nmero 100 da escala. c- Deixe a mola retornar a sua posio anterior, com sua prpria fora. d- O viscosmetro estar correto se aps o balano da agulha o ponteiro estacionar em cima do ponto zero da escala ou prximo a este, NUNCA acima de 20. e- Se estacionar acima o nmero 20 o aparelho dever ser enviado ao fornecedor para correo do problema.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
33 de 96
Aprovao
25/03/2001
f- Faixas de viscosidade e no de spindle indicado para cada uma e fatores para a velocidade de 12 rpm: VISCOSIDADE ( Cps) 100 a 400 250 a 2.250 2.000 a 9.000 8.000 a 50.000 0 a 50 No SPINDLE 1 2 3 4 10 FATOR 5 25 100 500 0,5
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
34 de 96
Aprovao
25/03/2001
_____________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
35 de 96
Aprovao
25/03/2001
Grau de Cisalhamento a medida de deformao sofrida ( deslizamento ). Esforo de Cisalhamento a fora requerida para provocar a ao de deformao. N ( Viscosidade) = Esforo de Cisalhamento Grau de Cisalhamento A viscosidade do suco varia com o grau de cisalhamento. Os sucos ctricos concentrados so fluidos nonewtonianos que apresentam propriedades tixtrpicas, ou seja se for batido , a viscosidade cai em funo do aumento do grau de cisalhamento; aps certo tempo, readquire as condies iniciais em funo do rearranjo de sua estrutura interna. 1.3 Materiais e equipamentos Banho de 250, 500, 600 ml Banho-maria de 150 ml, ou viscosmetro Brookfield ; Cronmetro; Termmetro;
1.4 - Procedimento Brookfield a) Acertar as temperatura do suco para 30 +- 2 C. Para isso pode ser utilizado um banho de gua, evitando-se agita, evitando-se agitao do suco. b) Transferir aproximadamente 500ml de amostra para um Becker de 500ml . c) Selecionar o spindle e a rotao do aparelho, visando a obter leituras ao redor de 75. d) Mergulhar a haste na amostra at cobrir a marca de imerso. e) Deixar estabilizar por aproximadamente 1 minuto a leitura. Mitchel a) Diluir o suco concentrado para 42 Brix. b) Acertar a temperatura para 28 C +- 2 C. c) Dispensar as camadas superiores ( que ainda conteham bolhas de ar). d) Colocar o viscosmetro no suporte e embaixo deste um copo de 250ml. e) Vedar o orifcio interior e encher com o suco ( 150ml ). f) Deixar escoar o suco do aparelho e simultaneamente ligar o cronmetro, anotando o tempo quando terminar o escoamento. 1.5 Expresso de Resultados Mitchel O resultado deve ser expresso em segundos, representando o tempo que o volume de suco ( 150ml ) levou para escoar pelo Viscosmetro Mitchel. Brookfield Multiplicar a leitura pelo fator prprio do Spindle e rotao utilizados, que consta da tabela a seguir . A unidade usual o centiPoise ( cP ). RV1 RV2 RV3 0.5 200 0.5 800 0.5 2000 01 100 01 400 01 1000 02 50 02 200 02 500 2.5 40 2.5 160 2.5 400 04 25 04 100 04 250 05 20 05 80 05 200 10 10 10 40 10 100 20 5 20 20 20 50 50 2 50 8 50 20 100 01 100 04 100 10
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
36 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
37 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
38 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
39 de 96
Aprovao
25/03/2001
O resultado da anlise expresso diretamente em mg de vitamina C por litro de amostra no display do equipamento. 1.6- Cuidados Nas determinaes feitas em suco reconstitudo, utilizar amostras recm diludas. 2- FONTES BIBLIOGRFICAS Reviso do mtodo de J. koch, 18/05/1967, por S. L. Hunter, 15/08/1974., IFFJP 1964, Method 17.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
40 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
41 de 96
Aprovao
25/03/2001
2.4. Preparo da curva padro - A partir da soluo estoque de prolina 100 mg/L, preparar diluies a 5, 10, 25, 40 e 50 mg/L. - Pipetar 1 mL de cada soluo e proceder como uma anlise de amostra. Traar uma curva de concentrao de prolina x absorbncia, que deve dar uma linha reta passando pela origem. - Calcular as absortividades parciais de cada diluio dividindo a absorbncia lida pela concentrao. - Calcular a absortividade mdia que a mdia aritmtica das absortividades parciais.
2.5- Procedimento da anlise - Pipetar 1 mL de amostra diluda a 11,1 0,1 oBrix para um tubo com tampa, seguido de 1 mL de cido frmico e 2 mL de soluo de ninidrina. Agitar bem o tubo aps cada adio de reagente. - Colocar o tubo num banho de gua em ponto de ebulio por exatos 15 minutos. O nvel da gua (sempre em ebulio) deve estar acima do nvel do liquido no tubo. - Resfriar o tubo com gua a temperatura ambiente por 5 a 10 minutos. - Adicionar 10 mL de acetato de n-butila no tubo e agitar bem para promover a extrao da cor para a fase orgnica. - Filtrar a amostra num papel de filtro hidrofbico contendo uma esptula de sulfato de sdio anidro. - Aps 15 minutos transferir o filtrado (fase orgnica) para uma cubeta e coloc-la no espectrofotmetro com comprimento de onda a 509 nm. - Fazer a leitura da amostra contra um branco preparado da mesma forma que a amostra, apenas substituindo a soluo de ninidrina por ter Monometlico de Etileno Glicol. 2.6- Resultado - A concentrao de prolina na amostra a relao entre a absorbncia lida pela absortividade mdia. SA diluio tambm deve ser considerada no clculo. - Conc. Prolina (mg/l) = Absorbncia lida x Diluio / Absortividade mdia. 3- Observao Prolina H2 C H2 C CH2 CH - COOH
N H 4- FONTES BIBLIOGRFICAS Mtodo descrito por S.V. ting and R.L. Rousseff- florida dep. Of citrus ______________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
42 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
43 de 96
Aprovao
25/03/2001
Determina-se o teor de pectinas no suco de laranja pois est diretamente ligado a outros aspectos do produto como, viscosidade e tendncia a geleificao. 2.- Mtodo. 2.1- Equipamento; 2.1.1- Espectrofotmetro para leitura a 525 nm; 2.1.2- Balana com preciso de centigramas; 2.1.3- banho-maria ; 2.1.4- Centrfuga. 2.2- Reagentes. 2.2.1- Soluo de cido galacturnico; 2.2.2- Soluo 1 N de hidrxido de sdio (PR.05.3.003); 2.2.3- Soluo de Carbazol (PR.05.3.039); 2.2.4-- cido Sulfrico D = 1,84; 2.2.5- Etanol Absoluto; 2.2.6- lcool etlico 95 %; 2.2.7- lcool etlico 63 % (PR.05.3.040); 2.2.8- Soluo de Oxalato de amnio. 3- Tcnica 3.1- Extrao das fraes de pectina 3.1.1.- Extrao da frao solvel em gua Pese 16 gramas de suco diludo ou 4 gramas de suco concentrado num tubo de centrfuga com fundo cnico. Se for suco concentrado, adicione 12 mL de gua destilada. Adicione lcool etlico a 75 C at a marca de 40 mL e coloque em banho-maria por dez minutos agitando ocasionalmente com basto. Lave o basto com 10 mL de lcool. Centrifugue durante quinze minutos a 1150 g (clculo de rpm da centrfuga no mtodo de polpa suspensa). Decante o lquido sobrenadante adicione. Repita usando lcool 63 %. Depois de decantar o liquido com basto com ponto de borracha. Lave o basto com gua at a marca de 35 mL e agite vigorosamente durante 10 minutos. Complete para 40 mL e centrifugue. Transfira o sobrenadante par balo volumtrico de 100 mL. Repita a extrao colocando a 2 a poro no mesmo balo. Guarde o precipitado. Adicione ao balo 5 mL de soluo 1 N de hidrxido de sdio, complete para 100 mL, homogeneize e deixe quinze minutos em repouso antes de iniciar o processo colorimtrico. 3.1.2- Extrao da frao solvel em Oxalato de amnio Ao resduo do item 3.1.1 adicione 5 mL de soluo de Oxalato de amnio e disperse com basto. Lave o basto com soluo de Oxalato at a marca de 35 mL e agite durante 10 minutos. Complete para 40 mL e centrifugue. Transfira o sobrenadante para balo de 100 mL. repita a extrao. Guarde o precipitado. Adicione ao balo 5 mL de soluo 1N de hidrxido de sdio, e complete, homogeneize e deixe 15 minutos em repouso antes de iniciar o processo colorimtrico. 3.1.3- Frao solvel em hidrxido de sdio Transfira o resduo do item anterior para balo volumtrico de 100 mL. Adicione 5 mL de soluo 1 N de hidrxido de sdio, complete para 100 mL e homogeneize. Deixe em repouso 15 minutos com agitao ocasionais e filtre. 3.2- Processo colorimtrico
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
44 de 96
Aprovao
25/03/2001
Pipete 2 mL de extrato e coloque 1 mL em cada um de dois tubos de ensaio 25 x 200 mm. Adicione ao tubo de amostra 0,5 mL de soluo de Carbazol e ao tubo do branco 0,5 mL de cido etlico purificado. Adicione em cada tubo 6 mL de cido sulfrico (tempo para adio = 7 segundos) e coloque em banho-maria a 85 C por 5 minutos. Retire e esfrie durante 15 minutos. Determine a absorbncia a 525 nm, zerando o espectrofotmetro com a prova em branco. 4- Clculo: Calcule pela equao a massa de AGA g/mL presente na amostra. % AGA = g AGA/mL . volume de diluio (mL) g amostra . 10.000 mg AGA/1 . amostra = g AGA/mL . volume de diluio (mL) volume amostra (mL)
5- Elaborao do grfico e deduo da equao Prepare a soluo de cido galacturnico monohidratado do seguinte modo: Pese 0,1205 g do reagente analtico (seco a vcuo 5 h, 30 C) dissolva e coloque num balo volumtrico de 1000 mL. Adicione 0,5 mL de soluo 1N de hidrxido de sdio e dilua para 1 litro. Homogeneize e deixe em repouso durante a noite. 1 mL = 100 g AGA. Prepare solues de 10, 30, 50 e 70 g AGA/mL diluindo 10, 30, 50 e 70 mL da soluo anterior para 100 mL. Desenvolva a colorao de cada soluo como indicador no item 3.2, e determine a absorbncia. Deduza a equao como indicado no mtodo do Diacetil, relacionando absorbncia com a concentrao de AGA em g/mL. 6- FONTES BIBLIOGRFICAS Citrus Fruits and ther Products -1986
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
45 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
46 de 96
Aprovao
25/03/2001
Fazer leitura de cada uma das solues em fotmetro chama. Com os resultados obtidos traar a curva padro de sdio. 5- Preparo da amostra A amostra para analisar ser o sobrenadante do tubo da analise de polpa (PR.05.2.011). 6- Procedimento no aparelho Abrir o ar regul-lo para Lb/ 1 N Ligar o aparelho. Destravar o galvanmetro. Acender o gs e regular as chamas at que formem cones bem ntidos. Colocar em posio o filtro para determinao de sdio. Zerar o aparelho com gua. Depois de zerado o aparelho, colocar a soluo padro, Colocar em posio o filtro para determinao de sdio. Zerar o aparelho com gua. Depois de zerado o aparelho, colocar a soluo padro. Utilizando o boto Sensitv padronizar a soluo para 100 %. Tornar a zerar o aparelho com gua e padronizar, a 100 %, com soluo padro, e assim sucessivamente at que o aparelho estabilize. Colocar a amostra e fazer leitura.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
47 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
48 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
49 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
50 de 96
Aprovao
25/03/2001
Nota: Caso sejam utilizados mais que 20 mL de soluo NaOH 0,25 N na titulao, repetir a anlise adicionando 15 mL de soluo de formaldedo ao invs de 10 mL ( item c). 1.6- Expresso de Resultados Nmero de formol : quantidade em mL de NaOH 0,1 N necessrios para neutralizar a queda de pH, provocada pela reao do Formaldedo, em 100 mL de suco. O fator de multiplicao 10 decorrente da utilizao de 25 mL de suco em vez de 100 (4x) e da utilizao de NaOH 0,25 N em vez de 0,1 N (2,5x): No Formol = mL NaOH 0,25 N.10 O nmero de Formol pode ser convertido para Amino Nitrognio pelas frmulas: No Formol x 1,4 = mg Amino Nitrognio/100 mL suco a 11.5 Brix No Formol x 1,3384 = mg Amino Nitrognio/100g suco a 11.5 Brix No Formol x 0,1164 x brix conc. = mg Amino Nitrognio/100g suco concentrado 1.7- Cuidados Caso sejam executadas vrias anlises consecutivas, verificar o pH do formaldedo entre uma anlise e outra, corrigindo sempre que necessrio. 2- FONTES BIBLIOGRFICAS IFFJP Analysis - Method 30 - 1984. _______________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
51 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
52 de 96
Aprovao
25/03/2001
FONTES BIBLIOGRFICAS INTERCIT INC. 1986, EOA (1) Kesterson, J.W. Hendilikson R.E Brayyok J- Boletin Tecnico Yez 1971
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
53 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
54 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
55 de 96
Aprovao
25/03/2001
Tempo de reao antes da titulao para algumas variedades de frutas: Variedade Minutos
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
56 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
57 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
58 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
59 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
60 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.3 MATERIAS E EQUIPAMENTOS - Bureta ; - Erlenmeyer ou Becker ; - Pipeta volumtrica de 10 ml. 1.4 SOLUES E REAGENTES - Soluo de cido clordrico 0,5N em PQ.CQ. 02/A60 - Soluo de fenolftaleina 1% - PQ.CQ. 02/A42. 1.5 PROCEDIMENTO a) b) c) d) e) Pipetar 10ml da soluo de HCl 0,5N em um Becker ou erlenmeyer. Adicionar algumas gotas da soluo de fenolftaleina no beqer ou erlenmeyer. Preencher a bureta com amostra da soluo de hidrxido de sdio. Titular a soluo de HCl 0,5N com a amostra de NaOH at atingir o ponto de viragem ( leve colorao rosa ). Registrar o volume de NaOH gasto na titulao.
1.6 EXPRESSO DOS RESUTADOS O resultado da determinao obtido atravs do seguinte clculo: % Hidrxido de Sdio ( p/v ) = V1 x N x 4 ______________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
61 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
62 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
63 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
64 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
65 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
66 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
67 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
68 de 96
Aprovao
25/03/2001
Obs.: pode ocorrer separao em duas camadas na proveta, na parte inferior uma camada mais opaca composta pelo suco mais slidos insolveis (polpa, pectina, etc.), na parte superior um liquido translcido, podendo clarificar o suco, isto , ocorre atividade enzimtica clarificando-o. 3- Fontes bibliogrficas FMC/USDA Redd, J.B,; Hendrix, D.L ,; Quality Control manual For Citrus Processing Plants, Intercit, Inc 198 pg. 50 mtodos 16 e 17. _____________________________________________________________________
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
69 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
70 de 96
Aprovao
25/03/2001
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
71 de 96
Aprovao
25/03/2001
= % de estabilidade da turbidez
5 Fontes Bibliogrficas
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
72 de 96
Aprovao
25/03/2001
8- Dosagem : Pese exatamente 1,0g previamente dessecada a 105 C durante 4 horas . Transfira para um frasco erlenmeyer de 200ml e dissolva em 10ml de gua. A seguir junte 75ml de ter etlico e mais 0,2 ml de alaranjado de metila ( 0,1g de alaranjado de metila , completar para 100ml com gua destilada). Titular com soluo de cido clordrico 0,5N agitando vigorosamente at que a camada fique permanentemente corada de rosa. 9 - Calculo Cada ml de cido clordrico 0,5N corresponde a 0,07205g de C 6H5COONa. Exemplo : Ml gasto = 13,5 Ento: 13,5 x 0,07205g = 0,9726 x 100 = 97,26%
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
73 de 96
Aprovao
25/03/2001
Sucos primrio de frutas ctricas normalmente contm de 500 a1500 ppm de flavonides. Sucos de laranja, limo e lima contm Hesperidina, um composto que no apresenta sabor mas que causa problema quando precipita como uma partcula branca cristalina. Sucos de grapefruit, por sua vez, contm Narigin ao invs de Hesperidina, que aumenta o amargor percipitivel do suco, o que prejudicial a sua qualidade. O suco de um espectrofotmetro, para medida do grau de cor amarela endietilenoglicol alcalino fornece a medida para a quantificao dos flavonides. O teste de Davis , como o mtodo conhecido, fornecer resultados 1.5 2 vezes maiores que os teores verdadeiros, determinados por HPLC. 2- Equipamentos - Centrifuga com acelerao de 4000g - Espectrofotmetro - Tubos de ensaio - Carvo ativo - Terra diatomcea - Sistema de filtrao a vcuo com funil de Bucher 3- Reagentes - Dietileno Glicol - NaOH 4 M - Hesperidina - Narigin - Formamida 4- Procedimento 4.1- Preparao de amostra : A amostra, que foi armazenada a temperatura ambiente, agitada durante 3 minutos,. ento centrifugada por 20 minutos a 4000g. o sobrenadante usada para medida. 4.2- Medida Misturar 0,2 ml do sobrenadante com 10ml de dietileno-glicol a 90% e 0,2 ml de NaOH 4N em um tubo de ensaio, medir a colorao amarela resultante depois de 30 minutos em espectrofotmetro a 420 nm . O branco deve ser preparada da mesma forma, usando gua ao invs de NaOH. 4.3 - Calculo Os resultados so lidos na curva padro. Para avaliao necessria que as medidas correspondentes sejam repetidas com os mesmos reagentes em solues - padro de hesperidina ( ou narigin ) .Para este fim, a hesperidina ( ou narigin ) purificada de acordo com Pritchelt e Merchant atravs da rescritalizao com formamida. Para dissolver a hesperidina ( ou narigin ) em gua , varias gotas de soluo de NaOH deve ser adicionadas . 4.4 - Notas : Se as solues utilizadas forem frescas, a curva padro deve ser checada. O teor real de hesperidina e narigin so menores e podem ser determinadas por HPLC.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
74 de 96
Aprovao
25/03/2001
4.5 Rescristalizao da hesperidina ( ou narigin ) com formanida : A formanida deve apresentar uma reao fracamente cida quando em soluo aquosa a 50%. Por outro lado, acidificada com pequenas quantidades de cido actico ou frmico. Preparar uma soluo altamente concentrada ( aproximadamente 6% em peso) de hesperidina ( ou narigin ) em formamida por aquecimento a 80 90 C, tratar a soluo com carvo ativo por trinta minutos e filtrar atravs de terradiatomcea. Diluir o filtrado com o mesmo volume de gua destilada, deixar em repouso por algumas horas para que ocorra a cristalizao. Separar os cristais por filtrao, lavar com uma pequena quantidade de gua quente e ento com isopropanol. Onde necessrio, repetir este processo( ponto de fuso terico dos cristais brancos : 261 263 C ). 5- Fontes Bibliogrficas IFF JP Analysis 199
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
75 de 96
Aprovao
25/03/2001
3 Procedimento 3.1 Preparao das solues reagentes 3.2 - Dissolver o contedo do frasco n 1 do kit em 10ml de gua bidestilada 3.3 Dissolva o contedo do frasco n2 do kit em 45ml de gua bidestilada 3.4 Use a suspenso como fornecida pelo kit n3 3.5 Use a suspenso como fornecida pelo kit n4 Observao : As solues 1 e2 so estveis por 4 semanas a (+ 4 C), ou por 2 meses ( -20C ). O contedo dos frascos 3 e 4 do kit so estveis por 1 ano a (+4 C ). 4- Preparao da amostra 4.1 Diluir o suco a 11,2Brix 4.2 - transferir 1,0ml para balo volumtrico de 100ml e completar o volume com gua bidestilada . 5 Reao Enzimtica Condies 1 Comprimento da onda : 340nm ( zerar com ar ) 2- Temperatura da reao : 20 25 C 3- Cubeta : 1 cm percurso ptico 4- Volume total da cubeta : 3,20 ml e 3,40 ml Para executar o ensaio siga as instrues abaixo:
Pipete amostras as Glucose / Frutose Branco da amostra Amostra Sacarose Branco da amostra Amostra 0,2 ml 0,1 ml 1,0 ml
Soluo n1 --------------------0,2 ml Soluo amostra -----------------------------------No misturar, incubar por 15 minutos a 20 C - 25C Soluo n 2 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
76 de 96
Aprovao
25/03/2001
O cido D- Isocitrico ( D- isocitrato ) descarboxilado por oxidao pela nicotinamida Adenina Nucleotdeo fosfato ( NADP ) em presena da enzima Isocitrato- Dhidrogenase ( ICDH ). D- Isocitrato + NADP + ICDH 2 Oxoglutarato + CO2 + NADP +H + ( 1 ) A quantidade de NADPH + formada na reao ( 1 ) estequiomtrica com a quantidade de D Isocitrato . O NADPH + determinado atravs da absorbncia 340 nm. 2- Mtodo 2.1 - Reagentes Kit da Boehinger- mannheim GMBH cat . n 414.433 para 30 determinaes. 2.1.1- Soluo tampo pH 7.1 composta Dissolva o contedo do frasco n2 com todo o contedo do frasco n1 do kit. Essa soluo contm imidazol para pH 7.1, NADP ( Aprox. 45 mg ); Sulfato maganoso ( 10 mg ) e estabilizastes. Pode ser guardada por um ano a 45 C. 2.1.2 Solues ICDH Dissolva o contedo do frasco n3 em 1,8 ml de gua bidestilada. Esta soluo contm aproximadamente 5u ( 2mg ) de ICDH , estvel por 4 semanas a 4 C ou por dois meses a 20C. 2.2- TCNICA 2.2.1- Dilua as amostras conforme a tabela d diluio . filtre as solues turvas. Solues fortemente coloridas podem ser tratadas como segue: Ajuste o pH de 25ml de amostra filtrada para 7.0 a 7.5 com solues hidrxido de sdio 2m, com gua bidestilada para 50 ml e deixe temperatura ambiente por aproximadamente 10 min. Adicione 0,5g de PVPP ou Bentonita. Agite 1 minuto e filtre use o filtrado lmpido ou levemente colorida . G/L de cido Isocitrico Diluio na amostra bidestilada < 0,50 0,51 5,0 > 5,0 com gua Fator de diluio 1 10 100
---------1+9 1 + 99
Se a concentrao de cido Isoctrico na amostra for menor que 0,03g/l , o volume de amostra pipetado para a cubeta pode ser aumentado at 2 ml, desde que o volume de gua seja diminudo na mesma proporo de modo que o volume total seja de 3,05 ml. 2.2.2 Ensaio enzimtico Os parmetros que devero ser observados no ensaio so seguintes : Comprimento de onda : 340nm Cubeta : 1cm de percurso ptico
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
77 de 96
Aprovao
25/03/2001
2.3 Clculo Determine as concentraes de cido isoctrico da mesma forma como descrita para o cido ctrico, calculando o valor de A ( delta A ), e aplicando na equao que ser um pouco diferente daquela do cido ctrico pois os volumes de amostra e total no iguais . A equao : V . PM . PF.( A ) C= E. b . v . 1000 3.05 x 192.1 x x f 6,3 x 1 x 1000 x v
C=
Se o volume de amostra for aquele recomendado para o ensaio ( 0,1 ml ) a equao fica : C = 0,93 x a x F x g/l cido isoctrico anidro. 3 - Observao As causas de serros so as seguintes; Altas concentraes de ons de ferro ( 0,08 ug/cubeta ) interferem no ensaio, pois causam turbidez. Se estiverem presentes ajuste o pH da soluo para aproximadamente 8,0, deixe em repouso por 5 minutos, filtre e reajuste o pH da soluo para 7,0 a 7,5 se necessrio. Altas concentraes de ons sulfato ( 3,0 ug/cubeta ) causam falsa reao devido composio do NADPH. O valor exato da absoro pode ser calculado por extrapolao das absorbncia ) A2 no momento da adio do ICDH na cubeta. 4- Fontes Bibliogrficas Citrus Fruits A-D Their Products USA - 1986
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
78 de 96
Aprovao
25/03/2001
1 - Detalhamento Na reao catalisada pela enzima corato liasse ( CL ) o cido ctrico ( citrato convertido a Oxalacetado e acetato. Citrato ( Cl ), oxilacetato + acetato. ( 1 ) Na presena das enzimas Malato- Dehidogenase ( MDH) e lactalato Dehidogenase ( LDH ) o piruvato, so reduzidas a AL Malato e L- Lactato, respectivamente pelanicotinamida Adenina dinucleotideo reduzida ( NADH ). (2 ) ( 3 ). Oxilacetato + NADH + H MDH L Malato + NADA ( 2 ) Piruvato + NADH + - LDH L Lactato + NAD ( 3 ) As quantidades de NADH oxidadas nas reaes ( 2 ) e ( 3 ) so estequimtricas com as quantidades de citrato. O NADH medido no comprimento de onda 340 nm. 2- Mtodo 2.1 Reagentes Kit da Boehinger Mannheim GMBH cat. N 139076 para (3 x 10 ) . Determinaes 2.1.1 Soluo tampo pH 7,8 de Glicilglicina composta . Dissolva o contedo n 2 em 0,3 ml de gua destilada. Esta soluo : Glicilglicina para pH 7.8, Malato de Hidrogenase ( Aprox. 2,84 u ) , NADH ( Aprox. 6mg ) e estabilizantes. Ela suficiente para 10 determinaes e estvel por 2 semanas a 40C ( em geladeira ) por 4 semanas a 20C . 2.1.2 Soluo de Citrato-liase Dissolva o contedo do frasco n 2 do kit em 0,3 ml de gua destilada. Esta soluo contm Citrato-liase ( 12 u = 50 mg ), estvel por um semana 40C o por 4 semanas a 20C. 2.1.3 Soluo padro de cido ctrico 2.2.1 Preparao da amostra Remova a turbidez natural dos sucos de frutas misturando 10 ml da amostra com 0,1 g de PVPP ( Polivinilpolipirrudina ), agite por 1 minuto e filtre rapidamente, use p filtrado lmpido e levemente colorido, neutralizando setor necessrio. A clarificao carrez no deve ser usada devido baixa recuperao do cido ctrico no suco clarificado. 2.2.2 Performance do ensaio A quantidade de cido ctrico na cubeta dever abranger uma faixa entre 4 mg e 80 ug. Desse modo a amostra dever ser diluda para concentraes entre 0,02 e 0,4 g/l pela seguinte: % cido ctrico Diluio com gua Fator de diluio na amostra destilada
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
79 de 96
Aprovao
25/03/2001
Se a concentrao de cido ctrico na amostra estiver abaixo de 0,02g/l, volume de amostra na cubeta poder ser aumentado at 2,0 ml. Necessrio o volume de gua dever ser reduzido na mesma proporo de modo que o volume total na cubeta seja 3,02ml. 2.2.3- Ensaio enzimtico Os parmetros que devero ser observados no ensaio so os seguintes: Comprimento de onda = 340nm Cubeta = 1,0 cm de percurso ptico Temperatura = 20C a 25 C Volume total na cubeta = 3,02 ml Para executar o ensaio siga as instrues do quadro abaixo: Pipetas para as cubetas Soluo 2.1.1 gua bidestilada Amostra preparada Prova em branco 1,0 ml 2,0 ml ------Amostra 1,0 ml 1,8 ml 0,2 ml
Homogeneize e aps 5 minutos determine as Absorbncias A1 B A1 A Inicie a reao pela adio Soluo 2.1.2 0,02 ml 0,02 ml Homogeneize e aguarde 5 minutos para que as reaes se completem Determine as Absorbncias A2 B A2 A Soluo Padro de cido ctrico -----0,05 Misture, aguarde o final da reao ( 10 minutos ) e determine as Absorbncias A3 B A3 A
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
80 de 96
Aprovao
25/03/2001
2.3.1 - Amostra Determine as diferenas entre as Absorbncias ( A1B A2 B ) para prova em branco e ( A1 A - A2 A ) da amostra AA = A1A - A2A AB = A1B - A2B Subtrair a diferena das substncias da prova em branco da diferena das absorbncia da amostra. A = AA - AB Se for obtido um valor negativo para ( AB), ele deve ser adicionada a ( AA ) para obter ( A ). A equao geral para Clculo das concentraes a seguinte. C= V. PM . F. A E. b .v. 1000 Concentrao ( g/l ) Volume total na cubeta ( ml ) Volume da amostra ( ml ) Peso molecular ( g ) Percurso ptico (cm ) Coeficiente (-1 ) de absoro (-1 ) do NADH a 340nm = 6,3 ( 1 . mmol x cm ) Fator de diluio da amostra
C = V = v = PM = b = E = F =
C=
A x F v
C=
A x F v
Se o, volume de amostra for aquele recomendado para o ensaio ( 0,2 ml ) a equao a seguinte: C = 0,46404 A x A x F g/l cido ctrico anidro
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
81 de 96
Aprovao
25/03/2001
V x PM x P E x b x v x 1000
CP =
CP = 1,8722 x P x g/l cido ctrico 3 Fontes Bibliogrficas Normas Analticas do Instituto Adolfo Lutz - 985
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
82 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.1 Equipamentos 1.1.1 1.1.2 1.1.3 Balana com preciso de centrifuga pHmetro Agitador magntico
1.2 Reagentes 1.2.1 1.2.2 Soluo de formaldedo 37% Soluo 0,05 N de hidrxido de sdio
1.3 Tcnica Pese 10 g do suco concentrado num becker de 100 ml com gua destilada e transfira para volumtrico de 100ml. Complete com gua destilada. Pipete 10 ml para 100ml , adicione gua destilada at35ml, adapte ao pHmetro e adicione soluo de hidrxido de sdio at pH 8,4 homogeneizando com agitador magntico. Adicione 15ml de soluo de formaldedo e titule com a soluo de hidrxido de sdio at pH 8,4 . Volume gasto ( ml ) = B. 3- Clculo 2.1 Clculo no suco concentrado
Nitrognio animo ( mg/100 g conc. ) =
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
83 de 96
Aprovao
25/03/2001
Os polifenis e os bios- flavonides contribuem de forma indesejvel a adstringncia de sucos ctricos. Eles tambm podem resultar em escurecimento do suco durante o processo e estocagem. Nveis semi-quantitativos destes componentes podem ser determinados pela medida espectrofomtrica nas faixa da luz ultravioleta e da luz visvel. Este procedimento pode ser usado tanto para suco bruto quanto para o suco tratado pela tecnologia combinada de membranas e resinas absorventes. Sub-produtos geralmente apresentam teores de polifenis e bio-flavonoides de cerca de 2 a 5 vezes superiores que os de um suco primrio. Os precursores do escurecimento em Sub-produtos apresentam- se em teores de 1.2 1.5 vezes maiores que em sucos primrios. 2- Equipamentos. Espectrofotmetro
2.1 - Procedimento: 2.1.1 - Diluio da amostra Ajustar a amostra de suco a 10 brix com gua destilada ou deionizada. 2.1.2 - Preparao do branco: 1ml de gua destilada + ( 9ml etanol 95% ) 2.2.3 - Preparao da amostra para bio-falvonides e polifenis: 12345ml amostra a 10 brix 5ml ( gua destilada ) Tomar 1ml da mistura acima e adicionar 9ml de etanol a 95% Filtrar atravs de papel de filtro analtico Watman GF/A. Ler a absorbncia do filtrado nos seguintes comprimentos de onda : 280 nm para bio-falvonides 325 nm para polifenis
2.3.4 Preparao da amostra para Precursores de escurecimento: 1 5ml amostra a 10 brix + 5ml etanol 95% 2 Filtrar atravs de papel de filtro analtico Watman GF / A. 3 Ler a absorbncia etanlica deve ser testada rapidamente, ou mantida ao abrigo da luz at ser analisada. Valores usuais de absorbncia, 9325nm so: Suco primrio Pulp Wash Core Wash Pell Extract 0,65 1,10 1,00 2,00 1,80 3,00 2,50 6,50
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
84 de 96
Aprovao
25/03/2001
3- Fontes bibliogrficas Citrus Up Granding Products da koch Menbilane Systems, Inc. da Koch Menbilane Systems, INC.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
85 de 96
Aprovao
25/03/2001
Na presena da L-malato Dehidogenase ( L-MDH ) , o cido L-mlico . ( L Mlico ) oxidado pela Nicotinamida Adenima Dinucleotdeo ( NAD ) e Oxalacetado ( 1 ) . o equilbrio desta reao tende para o lado do equilbrio em favor do Oxalacetado. Na reao catalisada pela enzima LAspartato na presena de Glutamato ( 2 ). L-Malato + NAD L-MDH oxilacetato + NADH + H (1) Oxilacetato + L- Glutamato GOT L-Aspartato + Cetoglutararo ( 2 ) A quantidade de NAD formada estequiomtrica com a concentrao do L-Malato. Aquela medida no comprimento de onda 340 nm. 2 Mtodo
2.1 Reagentes Kit da Boeringer Mannhein GMBH cat. n 139068 para 340 nm. 2.1.1 Soluo tampo pH 10.0 composta O frasco n 1 contm 30ml da soluo , com Glicilglicina para pH 10.0 ; cido L-Glutmico ( 440g ) e estabilizantes. estvel por um ano enquanto mantida a 4C . 2.1.2 Soluo de B-NAD . Dissolva o contedo do frasco n 2 em 6ml de gua bidestilada. Esta soluo contm 210 mg de B-NAD, estvel por 3 meses a 4C e por 2 meses a 20C. 2.1.3 Soluo de GOT O frasco n3 contm 0,4 ml de soluo de Glutamato-Oxilacetato Ttransaminase, com 160 . estvel por 1 ano a 40 C. 2.1.4 Soluo de 1-MDH O frasco n4 contm 0,4 ml de soluo de L-Malato de Hidrogenase, com 2400 . estavel por um ano a 40 C. 2.1.5 Solues padro de cido L-Mlico 2.2 Tcnica 2.2.1 Preparao da amostra
Remova a cor das amostras muito coloridas misturando 10ml com aproximadamente 0,1g de poliamida em p ou PVPP, agite por 1 minuto e filtre. Use o filtro levemente colorido. 2.2.2 Performance do ensaio
A quantidade de cido L- mlico na cubeta dever estar entre 2 g e 20 g . Portanto, a amostra dever ser diluda para uma concentrao de cido mlico entre 0,02 e 0,002
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
86 de 96
Aprovao
25/03/2001
G/l de cido L-Mlico Diluio com na amostra bidestilada 0,20 0,21 - 2,0 1 + 9 2,1 - 20,0 1 + 99 1 + 999 - 20,0
Se a concentrao de cido Mlico na amostra for baixo de 0,02 g/l, o volume a ser pipetado para a cubeta dever ser aumentado at 1,0 ml , e o volume de gua reduzido na mesma proporo. 2.2.3 - Ensaio enzimtico
Os parmetros que devero ser observado no ensaio so : Comprimento de onda : 340nm Cubeta : 1 cm de percurso ptico Temp .da reao : 20 a 25 Vol. Total na cubeta : 2,22 ml. Para executar o ensaio siga as instrues do quadro seguinte : Pipete para as cubetas Prova em branco Amostra 1,00 ml 0,20 ml 0,90 ml 0,01 ml 0,10 ml A1A 0,01 ml A2A 0,05 ml A3A
Soluo 2.1.1 1,00 ml Soluo 2.1.2 0,20 ml gua bidestilada 1,00 ml Soluo 2.1.3 0.1 ml Amostra preparada -------Homogeneize, e aps 3 minutos, determine Absorbncia A1B Inicie a reao pela adio de Soluo 2.1.4 0,01 ml Misture, aguarde o final da reao ( 5 10 min. ) e determine Absorbncias A2B Sol. Padro de cido L-Mlico -----------------Misture, aguarde o final da reao ( 10 min. ) e determine as Absorbncias A3B 2.3 Clculo 2.3.1 Amostra
Determine o valor de ( A ) como descrito no mtodo de cido ctrico. A equao para clculo a seguinte.
C=
V x PM x ( A ) x f E x b x V x 1000
V = 2.22 V = 0,1
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
87 de 96
Aprovao
25/03/2001
x ( A ) x F
V x Pm x P E x b x v x 1000
X P
Cp = 0,9663 P ( g/l cido L-Mlico anidro) . A concentrao cido L-Mlico padro dever ser igual ao valor anotado na ampola desta soluo . 3- Fontes Bibliogrficas IFF J P- Analysis 1995
DETALHAMENTO
1.1 Introduo
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
88 de 96
Aprovao
25/03/2001
A demanda qumica de oxignio expressa a quantidade de oxignio capaz de ser absorvida pela carga orgnica da amostra, por meio de reao entre um agente oxidante e a amostra em condies padro. 1.2 Princpio Muitos tipos de matria orgnica sofrem oxidao degradativa por aquecimento com uma mistura de cidos Crmico e Sulfrico. Adiciona-se a uma amostra, quantidades conhecidas de Dicromato de Potssio (K2Cr2O7) e cido Sulfrico (H2SO4) e o total de matria orgnica oxidvel, medido pelo equivalente de oxignio, ser proporcional ao Dicromato de Potssio consumido. L-se ento, em espectrofotmetro o valor de absorbncia da amostra contra um branco, encontrado o valor o COD atravs da aplicao da leitura numa curva padro previamente preparada. 1.3 Materiais e Equipamentos Bureta de 50 ou 100 ml; Balo volumtrico de 100 e 1000 ml; Becker de 100 ou 150 ml; Proveta; Balo de Destilao de 250 ml; Conjunto de Destilao; Pipetas de 0.1, 2, 5, 10, 15 e 25 ml (pode-se usar bico de papagaio); Erlenmeyer de 125 ml; Cubetas de vidro tico ou quartzo com 10 mm de passagem de luz ou tubos para espectrofmetro; Espectrofmetro;
1.4 Solues e Reagentes Soluo padro de Etanol absoluto 0,2% (2 ml de etanol absoluto diludos com gua destilada para 1000 ml); Soluo de Dicromato de Potssio 0,25N (PQ.CQ.02/A41); cido Sulfrico Concentrado.
a) Destilar 25 ml de uma mistura de 25 ml amostra/25 ml gua. b) Tomar 10 ml e transferir para um erlenmeyer de 125 ml. c) Adicionar 5 ml de Soluo de Dicromato de Potssio 0,25N e, sob agitao, adicionar vagarosamente 15 ml de cido Sulfrico Concentrado. d) Deixar em repouso por aproximadamente 10 minutos e aps, resfriar em gua corrente por cerca de 5 minutos. Fazer a leitura de absorbncia a 650 nm, em espectrofotmetro, contra um branco no qual se usa gua destilada no lugar da amostra. 1.5.2 Curva-Padro a) Diluir 2 ml de etanol absoluto de 1000 ml, com gua destilada (soluo padro). b) Adicionar as seguintes quantidades da soluo padro em bales volumtricos de 100 ml:
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
89 de 96
Aprovao
25/03/2001
Nova Concentrao
112 ppm 224 ppm Completar os 336 ppm volumes dos bales 448 ppm com gua destilada e 560 ppm homogeneizar 672 ppm 784 ppm 896 ppm
c) Pipetar 10 ml de cada uma das concentraes conhecidas para erlenmeyers, adicionando 5 ml de Dicromato de Potssio 0,25 N e 15 ml de cido sulfrico concentrado, sob agitao, em cada um deles. d) Manter as solues em repouso por cerca de 10 minutos temperatura ambiente. Aps, manter os erlenmeyers por aproximadamente 5 minutos em gua corrente. e) Realizar as leituras em espectrofotmetro (absorbncia) 650 nm contra um branco (10ml de gua destilada em lugar dos 10 ml da concentrao conhecida). f) Traar a curva-padro, relacionando as leituras com as respectivas concentraes, ou substituir a curva por fator (regresso linear). 1.6 Expresso de Resultados Atravs da elaborao de uma curva padro obtm-se um fator de multiplicao e um coeficiente de correo da curva que, em funo da leitura de absorbncia da amostra, indicam a demanda qumica de oxignio (COD) em ppm. Absorbncia x Fator +- Coef. Variao = COD ppm
1.1 Introduo
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
90 de 96
Aprovao
25/03/2001
A separao ou clarificao provoca uma sensao no atrativa no suco de laranja prejudicando seu aspecto. Para o suco de laranja ser considerado apto, no deve apresentar sinais de sedimentao das partculas em suspeno. 1.2 Princpio Determina-se o grau de separao do suco, pela medida do volume ocupado pela polpa fina aps um perodo de repouso de quatro horas. 1.3 Materiais e Equipamentos Proveta de 100 ml.
1.4 Procedimento Transferir 100 ml de suco reconstitudo para uma proveta de 100 ml. Deixar em repouso por quatro horas temperatura ambiente. 1.5 Expresso dos Resultados Considerar o volume lido na proveta, referente ao nvel de sedimentao da polpa, como separao e expressar em mililitros.
DETALHAMENTO
1.1 Introduo
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
91 de 96
Aprovao
25/03/2001
Devido sua elevada viscosidade, o suco concentrado capaz de manter bolhas de ar no seu interior, influenciando a determinao da densidade aparente do mesmo. A quantidade de ar no suco no deve ultrapassar valores crticos que possam afetar sua aparncia ou estabilidade. NOTA: Esta metodologia pode ser aplicada a outras amostras que no de suco concentrado. 1.2 Princpio Determina-se a porcentagem de ar pela diferena entre a densidade relativa terica e real da amostra. Pode-se tambm determinar qualitativamente a presena de ar em amostras de suco concentrado atravs de anlise visual. 1.3 Materiais e Equipamentos 1.3.1 1.3.2 Anlise com Picnmetro Termmetro de vidro; Picnmetro (balo volumtrico adaptado); Dessecador e Estufa de secagem; Becker de 150 ml / 250 ml (opcional) Balana Analtica ou Semi-Analtica Anlise Visual Frasco de 250 ml (mnimo); Material de superfcie lisa para escoamento do suco.
1.4.1.1 - Picnmetro a) Obter o peso do Picnmetro vazio e seco, aps ter sido mantido em estufa entre 100 C e 120 C por mnimo 3 horas e esfriado em dessecador. b) Pesar o picnmetro com gua destilada a 20 C +-0.5. c) Registrar o peso do picnmetro vazio e o peso do picnmetro com gua destilada para utilizao em determinaes posteriores da densidade relativa de amostras. 1.4.1.2 Amostras a) Pesar o picnmetro com amostra a 20 C +-0,5 C e registrar o resultado. 1.4.2 Anlise Visual a) Tomar uma amostra de, aproximadamente, 250 ml de suco concentrado. b) Espalhar a amostra gradativamente sobre uma superfcie lisa e visualizar a presena de ar com o auxlio de uma fonte de luz. 1.5 Expresso dos Resultados
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
92 de 96
Aprovao
25/03/2001
1.5.1
Calcular a densidade relativa da amostra de acordo com a expresso abaixo: Onde: D= ca D = Densidade relativa (peso especfico); ba a = Massa do picnmetro vazio e seco (em g); b = Massa do picnmetro com gua (em g); c = Massa do picnmetro com amostra (em g). Determinao de % de ar na amostra: % Ar = (Dx100) 100 P 1.5.2 Anlise Visual Onde: D = Densidade relativa da amostra P = Densidade relativa do suco sem ar, funo de brix e temperatura.
Tratando-se de uma anlise qualitativa, comparar a amostra ao Padro Visual para a determinao do percentual de ar em suco de laranja concentrado, o qual define o mximo de ar visual aceitvel, sendo: a) Quando for necessrio definir um valor numrico aproximado: Amostras com quantidade de ar visual entre 0 e 1 %, expressar o resultado como < 1 %; Amostras com quantidade de ar visual entre 1 e 2 %, expressar o resultado como < 2 %; Amostras com quantidade de ar visual entre 2 e 3 %, expressar o resultado como < 3 %; Amostras com quantidade de ar visual superior a 3, expressar o resultado como > 3 %;
b) Quando for necessrio definir um situao de aproveo: Amostras com quantidade de ar visual inferior a 3 %, expressar o resultado como N (Normal); Amostras com quantidade de ar visual superior a 3 %, expressar o resultado como A (Anormal); neste caso, o resultado da anlise visual deve ser confirmado pela anlise com picnmetro.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
93 de 96
Aprovao
25/03/2001
A presena de clulas em algumas formulaes de suco concentrado acrescenta ao produto um carter de frescor muito apreciado por ser semelhante ao suco no concentrado e recm extrado manualmente. 1.2 Princpico Determina-se a quantidade de clulas no suco pela pesagem da polpa retirada em um apeneira. 1.3 Materiais e Equipamentos Peneira de Ao Inox 20 mesh (600 micra); Balana; Becker.
1.4 Procedimento a) Secar a peneira e obter a tara da mesma na balana; b) Utilizar a frmula abaixo para calcular a massa de suco concentrado necessrio para se obter cerca de 500 ml de suco a aproximadamente 11,5 brix: Massa de suco concentrado (g) = 6014 brix do concentrado
c) Transferir a massa de suco concentrado calculada para um becker e completar o peso para 523 g com gua destilada; d) Diluir o suco e pass-lo vagarosamente por uma peneira de 20 mesh; Nota: No necessrio medir o brix do suco diluido. e) Deixar a peneira com o contedo de clulas retido, ligeiramente inclinada, por cerca de 3 minutos para drenagem; Nota: Retirar, levemente, o excesso de lquido da peneira com papel absorvente. f) Determinar o peso do contedo de clulas retido. 1.5 Expresso dos Resultados Clulas (g/1) = Peso Contedo de Clulas x 2
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
94 de 96
Aprovao
25/03/2001
As substncias pcticas so diferenciadas como pectina (gua Solvel), Pectato de Clcio (Oxalato Solvel) e Protopectina (Alcali Solvel). Essas substncias pcticas podem ser extradas pelo uso de solventes apropriados e serem determinadas juntas ou separadamente. 1.2 Princpio As substncias pcticas so precipitadas juntas pelo lcool. O resduo total serve tanto para a determinao de pectina total como, depois de extraes apropriadas, para a determinao de pectina gua-solvel, pectina alcali-solvel. Carbazol e cido sulfrico so adicionados aos respectivos extratos e a cor avermelhada produzida medida em espectrofotmetro. 1.3 Materiais e Equipamentos Estufa vcuo; Balana analtica; Centrfuga; Banho-Maria; Agitador de tubos de ensaio; Espectrofotmetro; Becker; Bales volumtricos de 100 e 1 000 ml; Buretas manuais de 25 e 50 ml; Pipetas graduadas de 1, 2, 10 e 25 ml; Tubos de ensaio de 20 x 150 mm; Tubos de centrfuga, de vidro, com parede grossa, graduados, de 50 ml; Proveta de vidro, graduada de 100 ml; Erlenmeryers de 500 ml; Bastes de vidro; Bastes de vidro com ponta de borracha; Papel filtro qualitativo 18,5 cm de dimetro; Termmetro; Cubetas de vidro tico ou quartzo com 10 mm de passagem de luz ou tubos para espectrofotmetro.
1.4 Solues e Reagentes Soluo de Ethanol 95 % - PQ.CQ.02/A25; Soluo de Ethanol 63 % - PQ.CQ.02/A26; Soluo Padro de cido Galacturnico PQ.CQ.02/A20; Soluo de Oxalato de Amnia 0,75 % - PQ.CQ.02/A30; Soluo de Hidrxido de sdio 1N PQ.CQ.02/A08; Soluo de Carbazol PQ.CQ.02/A31; cido Sulfrico Concentrado.
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
95 de 96
Aprovao
25/03/2001
a) Com auxlio de bureta, tomar 10, 20, 30, 40 ,50, 60 e 70 ml de Soluo Padro de cido Galacturnico em bales volumtricos de 100 ml, completar o volume com gua destilada e homogeneizar. Estas amostras contm, respectivamente 10, 20, 30, 40, 50, 60 e 70 m g/l de cido Galacturnico. b) Adicionar em tubos de ensaio as seguintes dosagens: Carbazol Branco Amostra 1 ml 1 ml Carbazol 0,5 ml Ethanol Absoluto 0,5 ml cido Sulfrico 6 ml 6 ml
Nota: Realizar um Branco para cada concentrao de soluo padro. c) Fazer tambm um Branco do Carbazol, como segue abaixo: Carbazol Branco gua Destilada 1 ml 1 ml Carbazol 0,5 ml Ethanol Absoluto 0,5 ml cido Sulfrico 6 ml 6 ml
d) A adio do cido Sulfrico dever ser feita no tempo aproximado de 7 segundos, com agitao. O uso de uma bureta conveniente. e) Imediatamente aps, colocar os tubos em Banho-Maria a 82/84 C por cerca de 5 minutos e ento, deix-los esfriar por aproximadamente 15 minutos (esfri-los em gua corrente conveniente). f) Efetuar imediatamente a leitura em espectrofotmetro a 526 nm, contra o Branco. O Clculo para encontrar o fator : (Leitura da amostra Leitura Branco amostra) (Leitura Carb. Leitura Branco Carb.) = D E Leitura. g) Traar uma curva padro com os D E das concentraes feitas ou encontrar um fator atravs da diviso de concentrao conhecida pelo seu D E leitura. Calcular o fator mdio para todas as concentraes conhecidas. 1.6 Procedimento a) Pipetar 15 ml de suco reconstitudo para um tubo de centrfuga e completar o volume para 45 ml, com Ethanol Absoluto cerca de 95 %, aproximadamente 75 C. b) Deixar o tubo em Banho-Maria a 82/84 C, por cerca de 10 minutos, agitando ocasionalmente com um basto de vidro. Lavar o basto de vidro com 5 ml de Ethanol Absoluto a aproximadamente 75C, completando o volume para 50 ml. c) Centrifugar a cerca de 3.000 rpm por aproximadamente 15 minutos. O sobrenadante ignorado, enquanto que ao precipitado adicionado 45 ml de Ethanol Absoluto cerca de 63 %, a aproximadamente 75 C. O resduo macerado e diludo dentro do tubo de centrfuga, com o auxlio de um basto de vidro com ponta de borracha. d) A amostra novamente deixada em Banho-Maria a 82/84 C, por cerca de 10 minutos, com agitao ocasional com um basto de vidro. e) Aps este tempo, lavar o basto de vidro com 5 ml de Ethanol Absoluto cerca de 63 % a aproximadamente 75 C, completando o volume para 50 ml e centrifugar por cerca de 15 minutos aproximadamente 3.000 rpm. f) O sobrenadante novamente ignorado, ficando o resduo, para extrao de pectinas gua Solvel, Alcali Solvel e Oxadato Solvel. Nota:
Identificao
Data
Reviso
Folha
MN.MEL.OO1
Descrio
23/03/2001
96 de 96
Aprovao
25/03/2001
Para determinar Pectina Total, diluir o resduo com gua destilada e passar para balo volumtrico de 100 ml, adicionando 5 ml de NaOH 1N e completar o volume com gua destilada. Aguardar cerca de 15 minutos, filtrar a amostra em papel filtro e prosseguir como em Procedimento com a curva Padro, usando Ethanol Absoluto, Carbazol e cido Sulfrico. Pectina gua Solvel: a) Arrastar o resduo do tubo da centrfuga com +- 30 ml de gua destilada para um becker de 100/150 ml. Nota: Utilizar basto de vidro com ponta de borracha para arrastar resduo aderido na parede do tubo. b) Agitar com agitador magntico por 10 minutos e passar a amostra para o tubo de centrfuga, lavando o becker com gua destilada de modo a completar o volume para 45 /50 ml no tubo de centrfuga. c) Centrifugar a aproximadamente 3.000 rpm por cerca de 100 ml, com o auxlio de uma pipeta volumtrica de 10 ml de ponta fina. d) O sobrenadante colocado em balo volumtrico de 100 ml, com o auxlio de uma pipeta volumtrica de 10 ml de ponta fina. Nota: Esta retirada do sobrenadante da extrao de Pectina Solvel em gua realizada cuidadosamente, de modo que o resduo do tubo de centrfuga no seja tocado. Esta operao realizada somente nesta extrao. e) Repetir o mesmo procedimento anterior, adicionando gua destilada ao resduo, deixando-o em agitao por cerca de 10 minutos. Centrifugando-lo por 15 minutos 3.000 rpm (aproximadamente) e colocar o sobrenadante no mesmo balo volumtrico de 100 ml. f) Com a amostra do balo volumtrico (sobrenadante) ser determinado Pectina de gua Solvel. g) Do resduo remanescente ser feita a extrao para determinao de Pectina Oxalato Solvel. Pectina Oxalato Solvel: a) Com o auxlio de Soluo de Oxalato, transferir o resduo para um becker de 100 ml, com +- 30 ml de Soluo de Oxalato. Nota: Utilizar basto de vidro com ponta de borracha para arrastar resduo aderido na parede do tubo.