Trabajo de Ascenso 2006

REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE BIOANLISIS CTEDRA BACTERIOLOGA CLNICA
AISLAMIENTO DE AEROMONAS EN VEGETALES TIPO HOJA QUE SE COMERCIALIZAN EN MERCADOS DE MARACAIBO
Trabajo de Ascenso para optar a la Categora de Profesora Titular. Lic. GRESLEIDA RINCN VILLALOBOS,MSc.
Maracaibo, Abril de 2006
Aeromonas en vegetales tipo hoja
AISLAMIENTO DE AEROMONAS EN VEGETALES TIPO HOJA QUE SE COMERCIALEZAN EN MERCADOS DE MARACAIBO
Lic. Gresleida Rincn Villalobos C.I.: 7.755.760 Direccin: Urb. La Vega, Edificio 1J, apto 3-3 Telfono: 7176621 Direccin electrnica: gresle61@hotmail.com
Rincn Villalobos, G.; 2006
Este
jurado
aprueba titulado
el
trabajo
de de de Lic.
investigacin se
Aislamiento en la mercados Profesora
Aeromonas en vegetales tipo hoja que comercializan que Maracaibo,
Gresleida Coromoto Rincn Villalobos, presenta ante el Consejo de la Facultad de Medicina, en cumplimiento con los requisitos establecidos en el artculo 17 del Reglamento del Personal Docente y de Investigacin de la Universidad del Zulia, para optar a la categora de Profesora Titular. Maracaibo, Abril de 2006 Jurado: _______________________________ Nombre: C.I.: _______________________________ Nombre: C.I.: _______________________________ Nombre: C.I.:
Rincn Villalobos, G; 2006
Rincn Villalobos, Gresleida Coromoto. Aislamiento de Aeromonas en vegetales tipo hoja que se comercializan en mercados de Maracaibo . Trabajo de ascenso para optar a la categora de Profesora Titular. Universidad del Zulia. Facultad de Medicina. Escuela de Bioanlisis. Maracaibo, Venezuela. 2006. 29 p.
RESUMEN
El consumo de vegetales en la poblacin ha aumentado, ya sea por razones dietticas o econmicas; sin embargo, a pesar de su alto contenido nutricional, los vegetales frescos son transmisores de microorganismos con significado clnico en salud pblica, tal es el caso del gnero Aeromonas. Estas bacterias producen una gran variedad de factores de patogenicidad, tales como: hemolisinas, citotoxinas y enterotoxinas, las cuales la relacionan con la produccin de una amplia diversidad de infecciones humanas intestinales y extraintestinales. Debido a lo antes mencionado, la finalidad de esta investigacin es determinar la frecuencia de especies de Aeromonas en muestras de vegetales que se comercializan en la ciudad de Maracaibo. Para tal fin se analizaron un total de 300 muestras de vegetales frescos tipo hoja (100 lechugas, 100 cilantro y 100 perejil) recolectada en dos mercados de Maracaibo. Para el aislamiento de Aeromonas, se utiliz agua peptonada alcalina (medio de enriquecimiento) agar almidn ampicilina y Dnasa-azul de toluidina ampicilina agar (medio selectivo). La identificacin se realiz empleando pruebas bioqumicas. La frecuencia de Aeromonas fue de 22.33%, siendo A. caviae la especie ms recuperada 74,63%, seguida de A. hydrophila 23,88%. De las muestras positivas 35.00% se recuperaron de cilantro, 28,00% de lechuga y 4,00% de perejil. El 24,66% de los aislamientos se obtuvo en el mercado A y el 20,00% en el mercado B. Con relacin a la distribucin de especies por mercado y vegetal, A. caviae fue la ms aislada. Estos resultados evidencian que los vegetales tipo hoja que se consumen frescos en nuestro medio, presentan elevados niveles de contaminacin por Aeromonas.
Palabras clave: vegetales frescos, Aeromonas, lechuga, cilantro, perejil.
Direccin electrnica: gresle61@hotmail.com
Rincn Villalobos, Gresleida Coromoto. Aeromonas isolation in vegetables type leaf expended in markets of Maracaibo. Reseach work to opt for the category of Titular Professor. Universidad del Zulia. Facultad de Medicina. Escuela de Bioanlisis. Maracaibo, Venezuela. 2006. 29 p.
ABSTRACT
The consumption of vegetables in the population has increased, either for dietary or economic reasons; however, in spite of its high nutritional content, fresh vegetables are transmitters of microorganisms with clinical meaning in public health, such it is the case of the genus Aeromonas. These bacteria produce a great variety of pathogenicity factors as: hemolysins, citotoxins and enterotoxins, which relate it with the production of a wide diversity of intestinal and extraintestinal human infections. Due to the before mentioned, the purpose of this investigation is to determine the frequency of species of Aeromonas in samples of vegetables that are marketed in the city of Maracaibo. A total of 300 samples of vegetables fresh type leaf (100 lettuces, 100 cilantro and 100 parsley) gathered in two markets of Maracaibo, were analyzed. For the isolation of Aeromonas, peptonated alkaline water (medium of enrichment), ampicillin starch agar and toluidine blue ampicillin agar (selective medium), were used. The identification was carried out using biochemical tests. The frequency of Aeromonas was of 22.33%, being A. caviae the most recovered specie 74,63%, followed by A. hydrophila 23,88%. Of the positive samples, 35.00% were recovered from cilantro, 28,00% from lettuce and 4,00% from parsley. 24,66% of the isolations was obtained in the A market and 20,00% of the B market. Regarding to the distribution of species for market and vegetable, A. caviae was the most isolated. These results evidence that vegetable type leaf that waste away fresh in our mean, present high levels of contamination by Aeromonas.
Key words: fresh vegetables, Aeromonas, lettuce, cilantro, parsley.
e-mail: gresle61@hotmail.com
NDICE DE CONTENIDO Pg. Resumen Abstract ndice de tablas Introduccin .........................................................................................................8 Materiales y mtodos.........................................................................................13 Poblacin.................................................................................................13 Muestras..................................................................................................13 Procesamiento de las muestras..............................................................13 Anlisis estadstico..................................................................................14 Resultados y Discusin......................................................................................15 Conclusiones......................................................................................................23 Referencias Bibliogrficas..................................................................................24 Anexo.................................................................................................................28
NDICES DE TABLAS Y GRFICOS Grfico 1. Porcentaje de positividad de Aeromonas spp en muestras de vegetales tipo hoja.....................................................................................................................15 Grfico 2. Distribucin de especies de Aeromonas spp en muestras positivas......17 Grfico 3. Porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el vegetal analizado..19 Grfico 4. Porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el mercado analizado...................................................................................................................20 Tabla 1. Distribucin de especies de Aeromonas en los mercados analizados......21 Tabla 2. Distribucin de especies de Aeromonas en los vegetales analizados......21
INTRODUCCIN
A nivel mundial la demanda de vegetales frescos y listos para consumir se ha incrementado notoriamente en los ltimos tiempos, esto puede ser, en primer lugar, al alto contenido de nutrientes que estos poseen, y en segundo lugar a que contribuyen a la prevencin de enfermedades cardiovasculares y gastrointestinales
6, 22, 23 .
En el mismo orden de idea y apartando los beneficios que producen los vegetales a nivel de la salud, otra causa del incremento en el consumo de los mismos, es su bajo costo, su amplia variedad y su gran disponibilidad, ya que estos son expendidos en supermercados, abastos y mercados populares
7 .
En los ltimos aos se ha observado un incremento de las enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) asociadas con la ingesta de vegetales frescos. Se han reportado infeccin tifoidea relacionada con el consumo de celery y berro 8. En Arabia Saudita Listeria monocytogenes y Yersinia enterocolitica se aislaron en un alto porcentaje en lechuga, repollo, zanahoria y papa 8. E. coli O157:H7 se ha asociada a infecciones por el consumo de ensaladas de repollo y championes salados. Las estadsticas epidemiolgicas indican que el apio, los tomates, la lechuga, el repollo crudo, la zanahoria y el cilantro son los vegetales ms implicados en brotes de gastroenteritis 3.
Las epidemias causadas por ETA asociada con el consumo de frutas y vegetales en ciudades industrializadas son infrecuentes. Sin embargo, en aos recientes, la frecuencia de brotes epidemiolgicos asociados con el consumo de estos productos, se ha incrementado en estos pases, como resultado de los cambios en los hbitos dietticos y el incremento de las importaciones de alimentos
8, 26, 35 .
Rincn Villalobos, G.; 2006
En los pases de Amrica Latina y El Caribe el Sistema Regional de Vigilancia Epidemiolgica de las ETA (SIRVETA) notific la existencia de 102.842 casos de enfermedades por alimentos durante los aos 1995 - 1998. De igual forma durante el ao 2000 se reportaron ms de 500 brotes por ETA
21 .
En Argentina entre los aos 1993 y 2002 ocurrieron 152 brotes que ocasionaron 3.309 casos y 4 muertes; mientras que en otros pases de Amrica Latina se produjeron durante el mismo periodo, 6.324 brotes que provocaron 228.579 casos y 314 muertes 21. Sin embargo, en los pases en vas de desarrollo solo el 2% de los brotes de ETA fueron relacionadas con el consumo de frutas y vegetales entre lo aos 1995 - 1996, este bajo porcentaje puede ser consecuencia de fallas en los registros sanitarios
25 .
Los factores relacionados con brotes de ETA por consumo de vegetales tipo hoja son: la proliferacin de microorganismos patgenos debido a fallas en los procedimientos habituales de lavado los cuales no son capaces de reducir significativamente la carga microbiana, la contaminacin por heces de animales, el uso de estircol como abono, el riego con agua residuales y la exposicin al medio ambiente durante el transporte
8, 19,28
Es de gran importancia considerar que los alimentos de origen vegetal tipo hoja que se consumen frescos, juegan un papel importante en la transmisin de enfermedades entricas, puesto que sirve de vehculo de: salmonelosis, clera, fiebre tifoidea, shigelosis, listeriosis, amibiasis, giardiasis y ascariasis. Los sntomas varan segn el tipo de microorganismo; sin embargo, la mayora de ellos producen manifestaciones similares, tales como: nuseas, vmitos, calambres abdominales, fiebre y diarrea entre otras, comprometiendo de esta manera la salud del individuo y en algunos casos el deterioro en el crecimiento infantil 34.
Dentro de los microorganismos que producen enfermedades transmitida por alimentos, las bacterias son un grupo importante a considerar, debido a la resistencia que ellas poseen a las condiciones adversas del medio y a su adaptabilidad para mantenerse viables hasta que lleguen al consumidor.
Entre las bacterias patgenas aisladas a partir de productos frescos se encuentran: Listeria monocytogenes, Especies de Clostridium, Bacillus cereus, Salmonella, Shigella, Especies de Aeromonas 6, 7, 9, 13, 17, 23, 31, 34. Campylobacter, Escherichia coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Especies de Vibrio, Yersinia enterocoltica y Especies de
Los miembros del gnero Aeromonas, son bacilos Gram-negativo que producen una gran variedad de enzimas extracelulares (proteasas, Dnasas, Rnasas, elastasas, amilasas, lipasas, entre otras) y poseen diversos factores de virulencia como: hemolisinas, citotoxinas y enterotoxinas. Son ubicuos en ambientes naturales como suelos, ros, lagos y mares. Se ha documentado su presencia en aguas potables, aguas residuales y en una variedad de alimentos frescos incluyendo vegetales (alfalfa, brcoli, coliflor, lechuga, cilantro, perejil, espinacas), carne (de res, cerdo, pollo y ovejo), productos marinos y lcteos 7, 8,11.
Las especies del gnero Aeromonas se han asociado con la produccin de una amplia variedad de infecciones extraintestinales tales como: celulitis, infecciones de heridas, septicemia, principalmente en pacientes inmunosuprimidos; as como tambin infecciones urinarias, meningitis, endocarditis y neumonas. Sin embargo, su papel como agente productor de enfermedades gastrointestinales transmitidas por alimentos sigue siendo motivo de controversia
22 .
10
Los episodios diarreicos producidos por especies de Aeromonas se presentan de cuatro maneras: (1) cuadro agudo con diarrea acuosa asociado con vmito y fiebre; (2) forma disentrica caracterizada por la presencia de sangre y moco en las heces e importantes dolores abdominales; (3) gastroenteritis crnica que implica una duracin del cuadro clnico superior a 14 das; (4) cuadro semejante al clera donde se presentan heces con una consistencia de agua de arroz
14, 22,24
Las especies ms aisladas en enfermedades diarreicas son: A. hydrophila, A. veronii biovar sobria y A. caviae, siendo esta ultima la especie que se recupera con mayor frecuencia en las heces de pacientes con cuadros gastrointestinales, especialmente en nios menores de cuatro aos. En la regin zuliana, el porcentaje de aislamiento de A. caviae oscila entre 40-50% 15, 27.
Segn datos publicados por la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) la transmisin de los microorganismos patgenos directamente a travs del agua y de los alimentos, constituye una de las principales causas de morbi-mortalidad por enfermedades gastrointestinales en muchos pases en va de desarrollo.
En las ltimas dcadas como consecuencia del desarrollo de nuevos mtodos y tcnicas de aislamiento e identificacin de patgenos bacterianos en alimentos, la recuperacin de especies de Aeromonas ha incrementado significativamente.
En Venezuela, diversos estudios han confirmado la presencia de Aeromonas spp en productos de origen vegetal, lo cual evidencia el papel de estos alimentos como vehculo de transmisin de este grupo bacteriano. Sin embargo, en la regin zuliana son pocas las investigaciones realizadas con este propsito; por lo tanto, la finalidad de esta investigacin fue determinar la frecuencia de aislamiento de especies de
11
Aeromonas en muestras de lechuga, cilantro y perejil que se expenden en mercados populares del municipio Maracaibo.
12
MATERIALES Y MTODOS
Poblacin La poblacin de esta investigacin est conformada por tres vegetales tipo hoja: Lechuga (Lactuca sativa), Cilantro (Corinandrum sativum) y Perejil (Petroselinum sativum), los cuales se expenden en el mercado Unicentro Las Pulgas(A) y en el mercado municipal Santa Rosala (B) ubicados en la ciudad de Maracaibo.
Muestras Se analizaron un total de 300 muestras (100 lechuga, 100 cilantro y 100 perejil), provenientes: 150 del Mercado A y 150 del Mercado B. Las muestras fueron recolectadas al azar y colocadas aspticamente en bolsas plsticas estriles, posteriormente fueron transportadas en condiciones de refrigeracin al laboratorio de la Ctedra de Bacteriologa de la Escuela de Bioanlisis de la Universidad del Zulia, para su procesamiento bacteriolgico.
Procesamiento de las muestras Preparacin de las muestras.
Las muestras se prepararon siguiendo las recomendaciones establecidas por la Comisin Venezolana de Normas Industriales (COVENIN) en la normativa N1126-8916, la cual se describe brevemente a continuacin (Ver anexo 1). Se homogenizaron 10 gramos de cada muestra en 90 mililitros de agua peptonada alcalina pH 8,6 (medio de enriquecimiento) con la ayuda del equipo Stomacher 80. Este homogenizado se incub a 35C por 24 horas, en aerobiosis.
13
Anlisis Bacteriolgico
Transcurrido el periodo de incubacin se inocularon dos medios selectivos para el aislamiento de especies de Aeromonas (agar ampicilina almidn y agar DNasa azul de toluidina ampicilina), los cuales se incubaron por un perodo de 24-48 horas a 35C. en aerobiosis. Posteriormente se seleccionaron las colonias que presentaron caractersticas compatibles con las de este gnero, colonias azules con halo rosado en el medio agar DNasa azul de toluidina-ampicilina y colonias amarillas con halo claro en el medio de agar ampicilina almidn. A partir de stas, se sembraron los medios de Triple Azcar Hierro (TSI), Lisina Hierro Agar (LIA) y agar nutritivo (AN) en placa, se incubaron por 18-24 horas a 35C. en aerobiosis oxidasa por el mtodo de Steel
35 5 .
Transcurrido este tiempo, se practic en la placa de A.N. la prueba de . A partir de combinaciones de TSI y LIA compatibles con el gnero Aeromonas y oxidasa positiva se procedi a la identificacin de gnero y especie, mediante la aplicacin de pruebas bioqumicas recomendadas por Abbott, S y col.1. Anlisis Estadstico El anlisis estadstico de los datos fue realizado utilizando el paquete estadstico SPSS (Stadistical Products of services Solutions), versin 10.0 para Windows (SPSS Inc., Chicago, Estados Unidos). La presencia de Aeromonas spp en los diferentes vegetales y mercados estudiados, fue comprobada mediante la prueba de Kriskal Wallis (prueba no paramtrica), con un nivel de significancia de 0,05.
14
RESULTADOS Y DISCUSIN
En la actualidad la presencia del gnero Aeromonas en vegetales que se consumen frescos, como frutas y vegetales, constituye un riesgo para la salud pblica, debido a que se ha demostrado la capacidad que tiene este patgeno emergente de producir factores de virulencia asociados con brotes de gastroenteritis.
En el grafico 1 se muestra la distribucin porcentual de Aeromonas spp en los diferentes vegetales tipo hoja analizados, detectndose 67(22,33%) muestras positivas y 233(77,67%) negativas para este grupo bacteriano.
Grfico 1 Porcentaje de positividad de Aeromonas spp en muestras de vegetales tipo hoja.
233; 77,67%
67; 22,33%
Positivas
Negativas
Estos hallazgos coinciden con estudios realizados por diversos autores, quienes refieren porcentajes de aislamiento similares. Brion D. y col
12
, recuperaron Aeromonas
spp en 27,38% muestras de ensaladas de vegetales adquiridas en expendios de comida rpida. De igual forma, Raybaudi R. y col 29, reportaron 19,60% de positividad a partir de vegetales empacados en bolsas de polipropileno y Herrera, M y col
15
20
en un
estudio realizado en vegetales frescos en la ciudad de Maracaibo obtuvieron un 19,30%.
En otras investigaciones se han detectado altos porcentajes de aislamiento de Aeromonas spp en estos alimentos. Arias M. y col
7 ,
durante una dcada en Costa Rica,
analizaron la presencia de agentes patgenos en productos alimenticios y hallaron 42,70% de muestras positivas para este grupo microbiano en vegetales frescos. Por su parte, Nishikawa y Kishi
24
y Rodrguez C. y col
32
publicaron porcentajes de aislamiento

14
superiores al 50,00% en productos vegetales. Adems, Callister y Agger 31,30% de Aeromonas spp en brcoli y Bolivar, R. y col
10
aislaron
en un estudio realizado en
agua de consumo obtuvieron un 32,00%. En contraste, otros estudios indican una baja frecuencia de recuperacin en ensaladas de vegetales (6,10%) y espinacas (5,20%) 8.
Por otra parte, la literatura mundial indica que existe un variado grupo de alimentos en los cuales pueden aislarse especies de Aeromonas, dentro de estos se incluyen: pescado fresco y congelado, agua potable, leche cruda y pasteurizada, pollo crudo, tortas y postres con cremas, mayonesa y ensaladas
11
. Esta amplia gamma de
fuentes de aislamiento indica que existe una diversidad de fuentes de contaminacin, dentro de las cuales, el agua, las heces de los animales, as como los manipuladores de alimentos, juegan un papel primordial como vehiculo de transmisin de enfermedades gastrointestinales.
Aunque
existen
claras
evidencias
que
asocian
Aeromonas
spp
con
enfermedades diarreicas, son pocos los datos publicados en los cuales estos microorganismos han sido directamente asociados con gastroenteritis transmitida por alimentos
15 . .
Altwegg M. y col
en 1991, describi un brote de gastroenteritis por
consumo de cocktail de camarones. Se han reportado otros brotes, siendo el ms notable el reportado por Abeyta C. y col 2, en 1986, en donde hubo 472 casos asociados al consumo de ostras en Louisiana, Estados Unidos.
16
Es importante sealar que el papel de Aeromonas spp como agente productor de gastroenteritis sigue siendo controversial, principalmente debido a las dificultades para establecer diferencias significativas en la rata de portadores entre personas sintomticas y asintomticas. No obstante, su presencia en alimentos de consumo fresco, tales como frutas y vegetales, representa un riesgo potencial para el desarrollo de infecciones intestinales, ms an si se considera su capacidad de producir factores de virulencia como: enterotoxinas, citotoxinas y hemolisinas.
La identificacin bioqumica de Aeromonas spp aisladas indico que 50 (74,63%) de los microorganismos recuperados corresponden a la especie A. caviae; 16 (23,88%) son A. hydrophila y 1 (1,49%) A. veronii biovar sobria (Grafico 2).
Grfico 2 Distribucin de especies de Aeromonas spp en muestras positivas.
16; 23,88% 50; 74,63% 1; 1,49%
A. caviae
A. hydrophila
A. veronii biovar sobria
Estos resultados coinciden con los publicados por Rodrguez, C y col 32 , quienes en un estudio realizado en muestras de vegetales empacados aislaron A. caviae en 49,10%, A. hydrophila en 29,90% y A. veronii biovar sobria 10,50%; Por otra parte
17
Guevara, L y Daz, R.
18
, en vegetales crudos reportaron A. caviae en 43,75%, A.

20
hydrophila en 33,07% y A. veronii biovar sobria en 4,69% y Herrera, M. y col
en
vegetales frescos encontraron A. caviae en 75,86%, A. hydrophila en 20,69% y A. veronii biovar sobria en 3,45%. Sin embargo, contrasta con los resultados comunicados por Brion, D. y col
12
, quienes reportan en productos vegetales con

30
mnimo procesamiento, un mayor porcentaje de A. hydophila (82,60%) sobre A. caviae 8,70%.; igualmente, estudios realizados por Revete, M y Daz, R en ensaladas de frutas con mnimo procesamiento recuperaron A. hydrophila en mayor porcentaje que A. caviae con valores que oscilaron entre 62,55% y 37,50%, respectivamente.
A pesar de los avances en las tcnicas de aislamiento e identificacin bacteriana, las especies predominantes tanto en muestras clnicas como provenientes de agua y alimentos siguen siendo A. caviae, A. hydrophila y A. veronii biovar sobria
Estudios publicados a nivel regional sealan a A. caviae como la especie mas frecuentemente aislada de muestras de heces de pacientes con gastroenteritis
27
, esta
similitud con los patrones de recuperacin a partir de los vegetales analizados, nos permite inferir que el consumo de vegetales frescos vendidos en mercados de la localidad, constituye una fuente potencial de adquisicin de patgenos intestinales por los consumidores.
El porcentaje de aislamiento de Aeromonas spp segn el tipo de vegetal estudiado se refleja en el Grafico 3. En 35,00%(35) de las muestras de cilantro se recuperaron especies de Aeromonas; mientras que en lechuga y perejil el porcentaje de positividad fue de 28,00% (28) y 4,00% (4) respectivamente, diferencias que resultaron estadsticamente significativas (p=0,000).
18
Grfico 3 Porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el vegetal analizado.
100 90 80 70
Porcentaje
60 50 40
28; 28,00%
72; 72,00%
30 20 10 0
35; 35,00%
65; 65,00%
Lechuga Positivas
Cilantro Negativas
4; 4,00%
96; 96,00% Perejil
Estos resultados son contrarios a los reportados por Monge, R. y col cilantro (30,00%).Igualmente, Herrera, M y col
20
23
quienes
aislaron un mayor porcentaje de Aeromonas en lechuga (52,00%) en comparacin con obtuvieron un mayor aislamiento de este patgeno en lechuga (36,00%) que en cilantro (18,00%). Adems, otros autores refieren diferencias significativas en la distribucin de este grupo microbiano en vegetales. As, Raybaudi, R. y col
29
reportaron porcentajes de positividad de 93,30% y
33,30%, para clery y repollo, respectivamente. Por otra parte, es importante sealar que el aislamiento de Aeromonas spp en las muestras de perejil analizadas fue notablemente inferior (4,00%), al obtenido en los especimenes de cilantro y lechuga.
19
Esta diferencia significativa de aislamiento de un vegetal a otro puede estar relacionado a diversos factores, tales como; la adherencia del microorganismo a la estructura del vegetal, el contacto directo de las hojas del alimento con el aire, el suelo y el agua, la irrigacin de los vegetales con aguas no tratadas, la sustitucin de fertilizantes qumicos por estircol, las heces de los animales, la manipulacin por los trabajadores, los insectos, las tcnicas de cosecha, las condiciones de transporte y la temperatura de almacenamiento inapropiada.
El grfico 4 permite apreciar el porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el mercado analizado. Puede observarse que el Mercado A presenta un 24,66% (37) de aislamiento y el Mercado B un 20,00% (30); diferencias que no resultaron estadsticamente significativas (p>0.05). Los porcentajes de aislamiento de especies de Aeromonas son similares en ambos mercados; lo que puede indicar que las condiciones sanitarias son semejantes en los mercados analizados. Grfico 4 Porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el mercado analizado. 80 70 60 50 40 30 20 10 0
37; 24,66 % 120; 80, 00% 30; 20,00% 113; 75,34%
Porcentaje
Mercado A Positivas
20
Mercado B Negativas
La distribucin de las especies de Aeromonas en los dos mercados analizados puede apreciarse en la Tabla 1. La especie aislada con mayor frecuencia en ambos mercados fue A. caviae.
Tabla 1 Distribucin de especies de Aeromonas en los mercados analizados

Especie de Aeromonas Tipo de Mercado
A. caviae
Positivas (%)
27 (54,00) 23 (46,00) 50 (100,00)
A. hydrophila
Positivas (%)
10 (62,50) 6 (37,50) 16 (100,00)

Positivas (%)
0 (0,00) 1 (100,00) 1 (100,00)
Negativas (%)
123 (49,20) 127 (50,80) 250 (100,00)
Negativas (%)
140 (49,29) 144 (50,71) 284 (100,00)
Negativas (%)
150 (50,17) 149 (49,83) 299 (100,00)
Mercado A Mercado B Total
De los 50 aislamiento de A. caviae obtenidos en este estudio 27 (54,00%) se recuperaron de muestras provenientes del Mercado A y 23 (46,00%) del Mercado B. Con relacin a los 16 cepas de A. hydrophila, 10 (62,50%) fueron halladas en el Mercado A y 6 (37,50%) en el Mercado B . A veronii biovar sobria solo fue encontrada en el Mercado B. Tabla 2 Distribucin de especies de Aeromonas en los vegetales analizados
Especie de Aeromonas Vegetal
A. caviae
Positivas (%) 22 (44,00) 26 (52,00) 2 (4,00) 50 (100,00) Negativas (%) 78 (31,20) 74 (29,60) 98 (39,20) 250 (100,00)
A. hydrophila
Positivas (%) 5 (31,25) 9 (56,25) 2 (12,50) 16 (100,00) 21 Negativas (%) 95 (33,45) 91 (32,05) 98 (34,50) 284 (100,00)

Positivas (%) 1 (100,00) 0 (0,00) 0 (0,00) 1 (100,00) Negativas (%) 99 (33,12) 100 (33,44) 100 (33,44)) 299 (100,00)
Lechuga Cilantro Perejil Total
En cuanto a la distribucin de especies de Aeromonas en los vegetales analizados, llama la atencin que A. caviae aparece como la especie mas frecuentemente aislada en los vegetales tipo hojas analizados, con 50 aislamientos distribuidos de la siguiente forma 26 (52,00%) en cilantro, 22 (44,00%) en lechuga y 2 (4,00%) en perejil .Las 16 cepas de A. hydrophila recuperada corresponden 9 (56,25%) a cilantro, 5 (31,25%) a lechuga y 2 (12,50%) a perejil. El nico aislamiento de A. veronii biovar sobria fue en una muestra de lechuga (Tabla 2).
Es importante destacar que la prevencin de la contaminacin de los vegetales frescos por patgenos microbianos debera ser un objetivo comn de cada una de las personas involucradas en los procesos de cultivo, cosecha, transporte y comercializacin; a fin de garantizar la inocuidad de estos productos alimenticios y minimizar el riesgo de enfermedades transmitidas por alimentos al consumidor.
22
CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos en esta investigacin ponen en evidencia que los vegetales frescos tipo hoja que se comercializan en los mercados populares de la ciudad de Maracaibo, constituye un vehculo de transmisin del gnero Aeromonas con predominio de la especie A. caviae.
La elevada frecuencia de especies de Aeromonas en muestras de vegetales tipo hoja (particularmente en cilantro y lechuga) y su posible asociacin con cuadros gastrointestinales, evidencia la necesidad de tomar medidas para minimizar los riesgos microbiolgicos que estos alimentos representan para el consumidor, as como, de realizar estudios de mecanismos de patogenicidad de este microorganismo y sus posibles implicaciones en cuadros diarreicos asociados con el consumo de vegetales frescos.
El aislamiento de especies de Aeromonas fue notablemente superior en las muestras de cilantro en comparacin con los especimenes de lechuga y perejil, este hallazgo indica las variadas fuentes y oportunidades de contaminacin desde el campo hasta el consumidor; por tal motivo, es necesario establecer niveles mximo permisibles de Aeromonas spp en productos vegetales, a fin de garantizar un adecuado control microbiolgicos de estos productos.
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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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ANEXO
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Muestra Homogeneizada 90 ml agua peptonada alcalina + 10 gr. del vegetal. Incubar 18-24 horas, aerobiosis, 37 C (Enriquecimiento)
Sembrar en medios Selectivos
Agar Dnasa Azul de Toluidina Ampicilina
Agar Ampicilina Almidn
Agar Dnasa Azul de Toluidina Ampicilina
Agar Ampicilina Almidn
Incubar 18-24 horas, aerobiosis, 37 C
Incubar 18-24 horas, aerobiosis, 37 C
Oxidasa (+)
+ Bioqumica secundaria para Aeromonas
Bioqumica primaria
Anexo 1 Esquema diagnostico del gnero Aeromonas

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REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE BIOANLISIS CTEDRA BACTERIOLOGA CLNICA

AISLAMIENTO DE AEROMONAS EN VEGETALES TIPO HOJA QUE SE COMERCIALIZAN EN MERCADOS DE MARACAIBO

Maracaibo, Abril de 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

AISLAMIENTO DE AEROMONAS EN VEGETALES TIPO HOJA QUE SE COMERCIALEZAN EN MERCADOS DE MARACAIBO

Rincn Villalobos, G.; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Aislamiento en la mercados Profesora

Aeromonas en vegetales tipo hoja que comercializan que Maracaibo,

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Palabras clave: vegetales frescos, Aeromonas, lechuga, cilantro, perejil.

Direccin electrnica: gresle61@hotmail.com

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Key words: fresh vegetables, Aeromonas, lettuce, cilantro, parsley.

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Rincn Villalobos, G.; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

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Aeromonas en vegetales tipo hoja

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Aeromonas en vegetales tipo hoja

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Procesamiento de las muestras Preparacin de las muestras.

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Aeromonas en vegetales tipo hoja

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Aeromonas en vegetales tipo hoja

Grfico 1 Porcentaje de positividad de Aeromonas spp en muestras de vegetales tipo hoja.

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

estudio realizado en vegetales frescos en la ciudad de Maracaibo obtuvieron un 19,30%.

durante una dcada en Costa Rica,

publicaron porcentajes de aislamiento

. Esta amplia gamma de

en 1991, describi un brote de gastroenteritis por

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Grfico 2 Distribucin de especies de Aeromonas spp en muestras positivas.

16; 23,88% 50; 74,63% 1; 1,49%

A. veronii biovar sobria

Aeromonas en vegetales tipo hoja

, en vegetales crudos reportaron A. caviae en 43,75%, A.

hydrophila en 33,07% y A. veronii biovar sobria en 4,69% y Herrera, M. y col

, quienes reportan en productos vegetales con

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Grfico 3 Porcentaje de positividad de Aeromonas spp segn el vegetal analizado.

96; 96,00% Perejil

reportaron porcentajes de positividad de 93,30% y

Rincn Villalobos, G; 2006

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Aeromonas en vegetales tipo hoja

Tabla 1 Distribucin de especies de Aeromonas en los mercados analizados

A. veronii biovar sobria

Mercado A Mercado B Total