MTODOS DE CONTAGEM BACTERIANA

Contagens Microscpicas Totais Mtodos Turbidimtricos Mtodos de Contagem Bacteriana Atividade Metablica Determinao do NMP Viveis Contagem em Placa Contagem em Membrana Filtrante

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MTODOS DE CONTAGEM MICROSCPICA

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MTODOS DE CONTAGEM MICROSCPICA Principais Caractersticas: Contam clulas vivas e mortas; Mais adequado para amostras liquidas; A amostra deve possuir pouco material particulado; Populao deve ser elevada; Mais fcil para culturas mono-microbianas e de clulas isoladas; No adequado para bactrias mveis; Rpido e com resultados imediatos; Resultados podem bastante ser influenciados pelo executor;

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS

Diretos A turvao da amostra bacteriana determinada espectrofotometricamente; Mtodos Turbidimtricos Por Comparao A turvao da amostra bacteriana comparada visualmente com padres;

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS - DIRETOS maior a transmitncia Quanto menor a quantidade de bactrias menor a absorbncia

Leitura

Curva Padro

maior a absorbncia Quanto maior a quantidade de bactrias menor a transmitncia

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS - DIRETOS

DO

Curva Padro

Leitura

Contagem de Bactrias / mL

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS - DIRETOS

Principais Caractersticas: um mtodo de contagem indireto; Contam clulas vivas e mortas; Mais adequado para amostras liquidas; A amostra no deve possuir particulado; Populao deve ser elevada; Rpido e com resultados imediatos;

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS - POR COMPARAO

Escala de McFarland

Tubo da Escala
0,5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Quantidade de Bactrias x 106 bactrias /mL

150 (1,5 x 108) 300 (3,0 x 108) 600 (6,0 x 108) 900 (9,0 x 108) 1200 (1,2 x 109) 1500 (1,5 x 109) 1800 (1,8 x 109) 2100 (2,1 x 109) 2400 (2,4 x 109) 2700 (2,7 x 109) 3000 (3,0 x 109)

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MTODOS DE CONTAGEM TURBIDIMTRICOS - POR COMPARAO Principais Caractersticas: um mtodo de contagem indireto; Contam clulas vivas e mortas; Mais adequado para amostras liquidas; A amostra no deve possuir particulado; Populao deve ser elevada; Rpido e com resultados imediatos; Resultados dependem do operador; Resultados imprecisos;

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MTODOS DE DETERMINAO DA ATIVIDADE METABLICA Vitamina + Cultura = Crescimento Carboidrato + Cultura = Fermentao Biomassa Dosagem de cidos

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Fonte de Energia + Cultura = Bioluminescncia

Dosagem da Luz Emitida

Principais Caractersticas: um mtodo de contagem indireto; A populao determinada a partir da Atividade Metablica das clulas; Aplicaes bastante especficas;

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MTODOS DE DETERMINAO DO NMERO MAIS PROVVEL

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Tabela especfica para os volumes utilizados 10 ml 1 ml 0,1 ml

Resultado Negativo Resultado Positivo

NMP = 110 bactrias / 100 ml

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MTODOS DE DETERMINAO DO NMERO MAIS PROVVEL Principais Caractersticas: Contam clulas vivas; um mtodo de contagem estatstico; um mtodo TRABALHOSO; um mtodo DISPENDIOSO;

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CONTAGEM DE VIVEIS EM PLACA

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Diluio Seriada na Razo 1/10

Contagem de Colnias

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CONTAGEM DE VIVEIS EM PLACA

Tcnica de Espalhamento em Superfcie (Spead-Plate)

Tcnica de Espalhamento em Profundidade (Pour-Plate)

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CONTAGEM DE VIVEIS EM PLACA

Tcnica de Espalhamento em Superfcie (Spead-Plate)

Inculo de 0,1 a 0,5 mL; Possibilita o uso de Meios Opacos; No existe choque trmico devido ao meio de cultura ;

Inculo de 1 a 5 mL; Tcnica de Espalhamento em Profundidade (Pour-Plate) No possibilita o uso de Meios Opacos; Deteco difcil de colnias no interio do meio de cultura Existe choque trmico na adio do meio de cultura;

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CONTAGEM DE VIVEIS EM PLACA

Contagem de Colnias X Inverso da Diluio da Amostra X Fator de Correo de Volume do Inculo

Determinao da Contagem de Unidades Formadoras de Colnias na Amostra

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CONTAGEM DE VIVEIS EM MEMBRANA FILTRANTE

Permite a Anlise de Grandes Volumes

Meio de Cultura