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I Curso Regional de Capacitacin (Santiago de chile, 20/9-8/10/1993) organizado por el Proyecto AQUILA II y ejecutado por Fundacin Chile
DOCUMENTO PREPARADO POR EL PROYECTO GCP/RLA/102/ITA APOYO A LAS ACTIVIDADES REGIONALES DE ACUICULTURA EN AMERICA LATINA Y EL CARIBE AQUILA II
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INDICE
PERSONAL DEL PROYECTO AQUILA II PUBLICACIONES DEL PROYECTO RESUMEN INTRODUCCION 1. NUTRIENTES ESENCIALES EN ALIMENTACION ACUICOLA
Juan Jos Romero T.
1.1. PROTENA 1.2. ENERGA 1.3. LPIDOS 1.4. VITAMINAS 1.5. MINERALES 1.6. PIGMENTOS 2. ANALISIS PROXIMAL DE CALCIO Y FOSFORO EN HARINAS DE PESCADO
Lilia Masson S.
2.1. MATERIA GRASA 2.2. PROTENAS 2.3. CARBOHIDRATOS 2.4. CENIZAS 2.5. MTODOS OFICIALES AOAC PARA ANLISIS PROXIMAL DE ALIMENTOS 2.5.1 Humedad (slidos totales) Mtodo de la estufa al vaco 2.5.2 Fibra dietaria 2.5.3 Determinacin de calcio 2.5.4 Determinacin de fosfatos 3. ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETAVISIBLE
Sergio Valladares
3.1. INTRODUCCIN 3.2. CONCEPTOS BSICOS DE ESTRUCTURA MOLECULAR 3.3. ORBITALES MOLECULARES Y ENLACE QUMICO 3.4. RADIACIN ELECTROMAGNTICA (R.E.) 3.5. PARMETROS ONDULATORIOS 3.6. PROPIEDADES CORPUSCULARES DE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA 3.7. ESPECTRO ELECTROMAGNTICO 3.8. INTERACCIONES ENTRE LA MATERIA Y LA ENERGA RADIANTE (E.R.) 3.9. ABSORCIN DE LA RADIACIN 3.9.1 Absorcin molecular 3.9.2 Espectro de absorcin 3.9.3 Medidas cuantitativas de la radiacin - Ley de Beer
3.9.4 Medicin experimental de la absorcin 3.9.5 Limitaciones a la aplicabilidad de la Ley de Beer a) Desviaciones qumicas b) Desviaciones instrumentales 3.10. APLICACIONES DE LAS MEDICIONES DE ABSORCIN DE RADIACIN ULTRAVIOLETA
Y VISIBLE
3.10.1 Especies absorbentes 3.10.2 Explotacin analtica a) Especies qumicas absorbentes que contienen electrones , y b) Absorcin en la que participan los electrones d y f c) Absorcin por transferencia de carga 3.11. INSTRUMENTACIN 3.11.1 Breve descripcin de los principales componentes de instrumentos convencionales a) Fuente de energa radiante b) Sistema selector de la longitud de onda de trabajo c) Recipientes para la muestra d) Deteccin de la radiacin e) Procesadores de seales e instrumento de lectura 3.11.2 Esquema general de los sistemas pticos de espectrofotmetros 3.12. ANLISIS CUALTITATIVO Y CUANTITATIVO 3.12.1 Tcnicas cualitativas 3.12.2 Anlisis cuantitativo 3.12.3 Procedimiento en el anlisis cuantitativo 3.13. CURVA DE CALIBRACIN 3.14. OTRAS APLICACIONES 3.14.1 Anlisis de mezclas 3.14.2 Titulaciones 3.15. BIBLIOGRAFA 4. ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA
Blago Razmilic
4.1. INTRODUCCIN 4.2. FUNDAMENTO TERICO 4.3. INSTRUMENTACIN 4.4. APLICACIONES 4.5. INTERFERENCIAS FSICAS 4.6. INTERFERENCIAS QUMICAS 4.7. INTERFERENCIA DE IONIZACIN 4.8. INTERFERENCIAS ESPECTRALES 4.9. ANLISIS CUANTITATIVO 4.10. BIBLIOGRAFA 5. PRINCIPIOS BASICOS DE CROMATOGRAFIA
Blago Razmilic
5.5.1 El gas portador 5.5.2 Sistemas para introducir la muestra 5.5.3 Horno para la columna 5.5.4 Columnas 5.6. FASES ESTACIONARIAS 5.7. CROMATOGRAFA GAS-SLIDO 5.8. ANLISIS CUALITATIVO 6. AMINOACIDOS ESENCIALES ROL Y DETERMINACION DE LISINA, METIONINA Y CISTINA DETERMINACION DE LISINA DISPONIBLE
Emilio Castro C. Laura Avila
6.1. INTRODUCCIN 6.2. EL CONTENIDO DE AMINOCIDOS EN LOS ALIMENTOS 6.3. AMINOCIDOS ESENCIALES 6.3.1 Rol de los principales aminocidos esenciales en nutricin acucola a) Arginina b) Lisina c) Metionina d) Triptofano 6.4. DETERMINACIN DE AMINOCIDOS TOTALES 6.4.1 Consideraciones fundamentales 6.4.2 Etapas 6.4.3 Anlisis cuantitativo especfico para lisina, metionina y cistina 6.4.4 Determinacin de lisina disponible a) Ventajas b) Desventajas 6.5. BIBLIOGRAFA 7. DETERMINACION DE LA DIGESTIBILIDAD DE LA PROTEINA POR METODOS IN VITRO TORRY A.O.A.C.
Emilio Castro C. Laura Avila
7.1. INTRODUCCIN 7.2. IMPORTANCIA 7.3. CONCENTRACIN - PEPSINA VS SENSIBILIDAD - DETERMINACIN 7.4. CORRECCIN DEL CIDO 7.5. VARIABILIDAD DE LOS RESULTADOS 7.6. FACTORES QUE INFLUENCIAN LOS RESULTADOS EN EL TEST DE DIGESTIBILIDAD 7.6.1 Grado de molienda 7.6.2 Tipo de agitador utilizado 7.7. BIBLIOGRAFA ANEXO 1 TEST DE DIGESTIBILIDAD DE PEPSINA A.O.A.C. 971.09 ANEXO 2 TEST DE DIGESTIBILIDAD DE PEPSINA TORRY 8. LA DIGESTIBILIDAD COMO CRITERIO DE EVALUACION DE ALIMENTOS SU APLICACION EN PECES Y EN LA CONSERVACION DEL MEDIO
AMBIENTE
Juan Antonio Manrquez H.
8.1. INTRODUCCIN 8.2. DETERMINACIN DE LA DIGESTIBILIDAD IN VIVO 8.3. MTODO INDIRECTO PARA LA DETERMINACIN IN VIVO DE LA DIGESTIBILIDAD 8.4. APLICACIN DE LA DETERMINACIN IN VIVO DE LA DIGESTIBILIDAD 8.5. BIBLIOGRAFA 9. DETERMINACION IN VIVO DE DIGESTIBILIDAD DE ALIMENTOS E INSUMOS ACUICOLAS A TRAVES DEL METODO CON INDICADOR GUIA DE LABORATORIO
Juan Antonio Manrquez H.
9.1. PRINCIPIO DEL MTODO 9.2. RECEPCIN DE LA MUESTRA (ALIMENTO COMERCIAL O INSUMO) 9.3. PREPARACIN DEL PIENSO EXPERIMENTAL SEMI-HMEDO Y DEL CONTROL 9.3.1 Materiales 9.3.2 Procedimientos a) Preparacin de piensos a partir de alimentos comerciales b) Preparacin de piensos a partir de un insumo, p. ej. harina de pescado c) Preparacin de pienso control 9.4. EVALUACIN DE LOS PIENSOS CON TRUCHA ARCOIRIS 9.4.1 Materiales 9.4.2 Procedimiento mantencin de estanques 9.4.3 Procesamiento de las muestras 9.5. ANLISIS QUMICO DE PIENSOS Y MATERIAL FECAL 9.5.1 Materiales 9.5.2 Preparacin solucin digestiva 9.5.3 Preparacin de curva estndar de cromo con dicromato de potasio 9.5.4 Determinacin del xido crmico 10. CRITERIO DE CALIDAD PARA MATERIAS GRASAS UTILIZADAS FRECUENTEMENTE EN LA NUTRICION ANIMAL Y DE PECES
Lilia Masson S.
10.1. INTRODUCCIN 10.2. COMPOSICIN EN CIDOS GRASOS DE LAS MATERIAS GRASAS DE USO HABITUAL
EN CHILE
10.2.1 Materias grasas preferentemente saturadas 10.2.2 Materias grasas preferentemente monoinsaturadas 10.2.3 Materias grasas preferentemente poliinsaturadas 10.2.4 Estructura de los lipidos (esquema) 10.3. CAMBIOS QUE SE PRODUCEN EN LA ESTRUCTURA DEL TRIGLICRIDO (TG) O
MATERIA GRASA NEUTRA POR AGENTES EXTERNOS Y QUE PRODUCEN DETERIORO AFECTANDO SU CALIDAD
10.3.1 Hidrlisis del TG (rancidez hidroltica) 10.3.2 Oxidacin de los cidos grasos insaturados constituyentes del TG (rancidez oxidativa) 10.3.3 Alteracin trmica. Deterioro por altas temperaturas
10.4. FUENTES DE MATERIAS GRASAS PARA ALIMENTACIN ANIMAL Y PECES 10.4.1 Calidad biolgica 10.4.2 Calidad qumica a) Requerimientos de cidos grasos esenciales b) Principales signos de deficiencia en cidos grasos esenciales en peces (mala formulacin de la dieta) c) Principal fuente de energa en la alimentacin de peces-aceite de pescado d) Criterios de calidad del aceite de pescado 10.4.3 Calidad biologica a) Caractersticas de aceites de pescado utilizados en dietas de peces b) Empleo de antioxidantes 10.4.4 Principales efectos nutricionales y fisiolgicos adversos que puede presentar un aceite deteriorado, principalmente oxidado, incorpordo a la dieta de salmnidos 10.5. CONCLUSIONES GENERALES 10.6. BIBLIOGRAFA 11. CRITERIOS DE CALIDAD DE MATERIAS GRASAS TRABAJO PRACTICO
Marcela Zamorano R.
11.1. DETERMINACIN DE LAS IMPUREZAS SEGN NORMA CHILENA OFICIAL (NCH 107) 11.2. HUMEDAD Y MATERIAS VOLTILES 11.2.1 Mtodos de desecacin en estufa 11.2.2 Mtodo de destilacin Markusson 11.3. ACIDEZ - MTODO OFICIAL DELA AOAC 11.4. INDICE DE PERXIDO - MTODO OFICIAL DELA AOCS 11.5. INDICE DE ANISIDINA 11.6. INDICE DEL CIDO 2- TIOBARBITRICO (TBA) 11.7. COMPOSICIN EN CIDOS GRASOS CONTENIDO DE EPA Y DHA (CROMATOGRAFA GAS-LQUIDO) 11.8. DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE COLESTEROL MTODO OFICIAL DELA A.O.A.C. 11A ANALISIS PROXIMAL EN HARINAS DE PESCADO TRABAJO PRACTICO 11A.1. ANLISIS PROXIMAL 11A.2. MUESTREO 11a.2.1 Molienda - Muestreo del producto 11a.2.2 Molienda - Mezclado 11A.3. PORCENTAJE DE HUMEDAD 11A.4. PORCENTAJE DE GRASA 11a.4.1 Mtodo de extraccin con acetona 11a.4.2 Mtodo de Bligh and Dyer 11A.5. PORCENTAJE DE PROTENA 11A.6. PORCENTAJE DE CENIZAS 11A.7. DETERMINACIN DE FIBRA CRUDA 11A.8. DETERMINACIN CALCIO (MTODO ESPETROFOTOMTRICO) 11A.9. DETERMINACIN DE FSFORO (MTODO FOTMTRICO) 11A.10. BIBLIOGRAFA
12.1. INTRODUCCIN 12.2. PRINCIPALES MICOTOXINAS Y SU CLASIFICACIN 12.3. AFLATOXINAS 12.3.1 Clasificacin 12.3.2 Estructuras de las aflatoxinas 12.3.3 Caractersticas y propiedades fsicas 12.3.4 Caractersticas qumicas y fsicas generales 12.3.5 Produccin de aflatoxinas 12.3.6 Efecto txico a) Antecedentes generales b) Toxicidad en peces c) Reglamentacin y lmites permisibles 12.4. FUSARIUM TOXINAS Y OCRATOXINAS 12.5. ACIDO CICLOPIAZONICO 12.6. OTRAS MICOTOXINAS 12.7. COMO REDUCIR EL IMPACTO DE LAS MICOTINAS EN NUTRICIN ACUCOLA 12.7.1 Deteccin en las materias primas 12.7.2 Buenas prcticas de manufacturacin en la planta de alimentos 12.7.3 Adecuado manejo del alimento en la granja 12.8. BIBLIOGRAFA 13. PROBLEMAS EN LA CUANTIFICACION DE MICOTOXINAS Y NIVELES DE CONTAMINACION EN MEXICO
Juan Carlos Medina B. Eliezer Castillo
13.1. RESUMEN 13.2. INTRODUCCIN 13.3. PROBLEMAS EN EL ANLISIS DE MICOTOXINAS EN GRANOS Y ALIMENTOS
TERMINADOS
13.3.1 Muestreo 13.3.2 Eleccin del mtodo 13.3.3 Estndares de referencia 13.3.4 Extraccin de micotoxinas 13.3.5 Purificacin y limpieza de los extractos 13.3.6 Deteccin 13.3.7 Cuantificacin 13.3.8 Confirmacin 13.4. CONTAMINACIN CON MICOTOXINAS EN INSUMOS Y ALIMENTOS TERMINADOS EN MXICO 13.5. EVALUACIN DE ALUMINOSILICATOS IN VITRO 13.6. CONCLUSIN 13.7. BIBLIOGRAFA 14. DETERMINACION DE MICOTOXINAS POR MEDIO DE ENSAYOS INMUNOQUIMICOS
Juan Carlos Medina B. Eliezer Castillo
14.1. INTRODUCCIN 14.2. DESARROLLO DE LOS MTODOS INMUNOQUMICOS 14.2.1 Radioinmunoensayos (RIA) 14.2.2 Inmunoensayos competitivos de enzimas ligadas (ELISA) 14.2.3 Ensayos cualitativos rpidos 14.2.4 Columnas de inmunoafinidad 14.3. EVALUACIN DE ENSAYOS INMUNOQUMICOS 14.4. CONCLUSIONES 14.5. BIBLIOGRAFA 15. NUTRICION ACUICOLA Y CONTROL DE CALIDAD UN ENFOQUE INTEGRAL
Julio Achupallas J.
15.1. INTRODUCCIN 15.2. CONTROLES DE CALIDAD 15.2.1 Propuesta de controles 15.3. CONTROLES DURANTE EL ALMACENAMIENTO 15.3.1 Factores que inciden en el almacenamiento 15.3.2 Indices de deterioro de almacenamiento 15.4. CONTROLES DURANTE EL PROCESO DE FABRICACIN 15.4.1 Tamao de partculas 15.4.2 Mezclado 15.4.3 Acondicionamiento y aglomeracin 15.4.4 Tratamientos finales 15.5. CONTROLES DE PRODUCTO TERMINADO 15.5.1 Retroalimentacin y constatacin 15.6. CONSIDERACIONES TILES PARA LA FORMULACIN 15.6.1 Generalidades 15.6.2 Composicin nutricional de cada ingrediente 15.6.3 Restricciones tcnicas 15.6.4 Estabilidad 15.6.5 Atractibilidad-Estabilidad 15.7. SUMARIO 15.8. BIBLIOGRAFA ANEXO 15.1. - ANALISISDEL TAMAO DE PARTICILAS ANEXO 15.2. - INDICE DE HOMOGENEIDAD DEL MEZCLADO ANEXO 15.3. - INSPECCIN DEL PROCESO DE ENFRIAMIENTO ANEXO 15.4. - RECORD DE PRODUCTO TERMINADO ANEXO 15.5. - COMPOSICIN Y DISPONIBLIDAD DE AMINOCIDOS PARA BAGRE DE
CANAL EN INGREDIENTES COMUNES ANEXO 15.6. - COEFICIENTES DE DIGESTIBILIDAD APARENTE DE AMINOCIDOS PARA PENAEUS VANNAMEI ANEXO 15.7. - COEFICIENTES DE DIGESTIBILIDAD APARENTE DE MATERIA SECA Y DE PROTENA PARA PENAEUS VANNAMEI ANEXO 15.8. - COEFICIENTES DE DIGESTIBILIDAD APARENTE DE ALGUNOS INGREDIENTES SELECCIONADOS PARA TRUCHA ARCOIRIS ANEXO 15.9. - PELLETABILIDAD DE INGREDIENTES COMUNES PARA ALIMENTOS
16. CALIDAD FISICA Y QUIMICA DE LOS ALIMENTOS PARA PECES Y SU IMPORTANCIA EN EL CULTIVO DE PECES
Mara Isabel Toledo D.
16.1. RESUMEN 16.2. INTRODUCCIN 16.3. COMPORTAMIENTO ALIMENTARIO 16.4. ESTMULOS EXTERNOS 16.4.1 Estmulos visuales vs caractersticas fsicas del alimento 16.4.2 Estmulos qumicos vs caractersticas qumicas del alimento 16.5. ESTMULOS INTERNOS 16.5.1 Estimulacin cerebral 16.5.2 Estimulacin energtica del alimento 16.5.3 Estmulos metablicos y hormonales 16.5.4 Estmulo gastrointestinal 16.6. CONCLUSIONES 16.7. BIBLIOGRAFA 17. DETERMINACION DE INDICES DE CALIDAD FISICA DE ALIMENTOS PARA PECES
Mara Isabel Toledo D.
17.1. DUREZA 17.2. FLOTABILIDAD 17.3. COHESIVIDAD EN TRMINOS DE PORCENTAJE DE FINOS PRODUCIDOS 18. LABORATORIO DE FORMULACION DE DIETAS COMPUTARIZADAS PARA PECES FUNDAMENTOS TEORICOS
Julio Salazar V.
18.1. INTRODUCCIN 18.2. PROGRAMACIN LINEAL 18.2.1 Antecedentes generales 18.2.2 Planeamiento del problema de P.L. 18.2.3 Mtodo Simplex a) Algoritmo Simplex b) Problema dual c) Anlisis de sensibilidad 18.3. NUTRICIN ACUCOLA 18.3.1 Necesidades proticas 18.3.2 Necesidades de energa 18.3.3 Necesidades de minerales 18.3.4 Necesidades de vitaminas 18.4. DISEO DE MODELOS DE FORMULACIN 18.4.1 Recopilacin de informacin de materias primas 18.4.2 Recopilacin de informacin de recomendaciones nutritivas 18.4.3 Estructuracin del modelo 18.4.4 Generacin de frmulas 18.4.5 Validacin de frmulas 18.5. BIBLIOGRAFA
19.1. CARACTERSTICAS GENERALES 19.2. CARGA DE SFC 19.3. CARACTERSTICAS DE LA PLANILLA SFC 19.3.1 Comandos de desplazamiento 19.3.2 Comandos de edicin 19.4. CARACTERSTICAS DE LA SOLUCIN DE SFC 20. BASES DE DATOS PARA FORMULACION DE DIETAS
Julio Salazar V.
21. AMINAS BIOGENICAS-NUEVOS INDICADORES QUIMICOS UTILIZADOS COMO CRITERIOS DE CALIDAD EN HARINA DE PESCADO
Mnica Galleguillos A.
21.1. INTRODUCCIN 21.2. MECANISMOS DE FORMACIN DE LAS AMINAS BIOGNICAS 21.3. DEGRADACIN AMINOACDICA 21.4. POSIBLES EFECTOS DE LAS AMINAS BIOGNICAS 21.4.1 Histamina 21.4.2 Putrecina y cadaverina 21.4.3 Tiramina 21.5. INDICES DE ESTADO DE FRESCURA DE LA H.P. DE ACUERDO AL NIVEL DE AMINAS
BIOGNICAS 21.6. DETERMINACIN DE AMINAS BIOGNICAS 21.7. BIBLIOGRAFA
22. EL METODO BIOTOXICOLOGICO COMO INDICADOR DEL CONTENIDO DE MOLLEROSINA EN HARINAS DE PESCADO
Mnica Galleguillos A.
22.1. INTRODUCCIN 22.2. LA ENFERMEDAD EN LAS AVES 22.3. LAS EROSIONES DE MOLLEJA Y VMITO NEGRO 22.3.1 Etiologa 22.3.2 Mecanismo de accin 22.3.3 Control 22.4. METODOLOGA DE ANLISIS 22.5. BIBLIOGRAFA 23. FABRICACION Y USO DE PREMEZCLAS VITAMINICAS EN ALIMENTOS PARA PECES
Javier Garrido D.
23.1. INTRODUCCIN 23.2. VENTAJAS PRCTICAS DEL USO DE PREMEZCLAS 23.3. FABRICACIN DE LAS PREMEZCLAS VITAMNICAS 23.3.1 Ingredientes
a) Vitamina A (Sinnimo: acetato de retinilo) b) Vitamina D c) Vitamina E d) Vitamina K (Sinnimo: K3 MSB -Menadione Sodium Bisulfit) e) Tiamina (B1) f) Riboflavina (B2) (Sinnimo: lactoflavina) g) Piridoxina (B6) h) Cianocobalamina (B12) i) Acido flico (Sinnimos: folacina, cido pteroilglutmico) j) Biotina (Sinnimo: vitamina H) k) Inositol (Sinnimos: inosita, mioinositol, mesoinositol) l) Niacina (Sinnimos: cido nicotnico, nicotinamida, niacinamida, factor pp) m) Acido pantotnico (Sinnimo: d-pantotenato de calcio) n) Cloruro de colina (Sinnimo: vitamina B4) o) Acido ascrbico (Sinnimo: vitamina C) 23.3.2 Control de calidad 23.3.3 Produccin 23.4. BIBLIOGRAFA 24. VITAMINAS C Y COLINA EN NUTRICION DE PECES-FUNDAMENTOS DE SU ROL Y DETERMINACION
Emilio Castro C.
24.1. INTRODUCCIN 24.2. ANTECEDENTES GENERALES 24.3. VITAMINA C 24.3.1 Historia 24.3.2 Esencialidad 24.3.3 Funciones positivas 24.3.4 Requerimientos 24.3.5 Sntomas de deficiencia 24.3.6 Formas de cido ascrbico 24.3.7 Determinacin de vitamina C en alimentos para peces a) Determinacin de cido ascrbico libre b) Determinacin de vitamina C polifosfatada 24.4. COLINA 24.4.1 Historia 24.4.2 Funciones positivas 24.4.3 Signos de deficiencia 24.4.4 Mtodo de determinacin de colina 24.5. BIBLIOGRAFA 25. PIGMENTOS CAROTENOIDES -ROL NUTRICIONAL EN ESPECIES SALMONIDEAS Y FUENTES DE PIGMENTACION
Emilio Castro C. Gonzalo Mena L.
25.1. INTRODUCCIN 25.2. ANTECEDENTES 25.2.1 Generalidades 25.2.2 Metabolismo de los carotenoides
a) Absorcin b) Transporte c) Metabolizacin y excrecin d) Depsito muscular 25.2.3 Factores que afectan la pigmentacin a) Generalidades b) Factores fisiolgicos c) Factores dietarios 25.2.4 Funciones de los pigmentos carotenoides en salmnidos a) Generales b) Reproductivas c) Inespecficas 25.2.5 Insumos pigmentantes a) Crustceos b) Vegetales c) Pigmentos sintticos 25.3. BIBLIOGRAFA 26. METODOLOGIAS UTILIZADAS EN LA DETERMINACION DE LA PIGMENTACION Y PIGMENTOS EN TEJIDOS PELLETS
Emilio Castro C. Csar Seplveda S.
26.1. INTRODUCCIN 26.2. LOS PIGMENTOS Y LA PIGMENTACIN DE SALMNIDOS 26.2.1 Propiedades qumicas 26.2.2 Isomeria a) Geomtrica b) Optica 26.3. ANLISIS Y EVALUACIN DE LOS PIGMENTOS Y PIGMENTACIN DE LOS
SALMNIDOS
26.3.1 Tabla de colores 26.3.2 Colorimetra por reflactancia 26.3.3 Anlisis por cromatografa de alta resolucin a) Preparacin de estndares y curva de calibracin b) Preparacin de las muestras 26.4. CONSIDERACIONES FINALES 26.5. BIBLIOGRAFA 27. PROBLEMAS EN LA CUANTIFICACION DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES EN PREMEZCLAS Y ALIMENTOS TERMINADOS 27.1. INTRODUCCIN 27.2. MUESTREO 27.3. ESTNDARES DE REFERENCIA 27.4. HIDRLISIS ALCALINA Y EXTRACCIN 27.5. MTODOS CROMATOGRFICOS 27.6. VARIACIN ANALTICA 27.7. CONCLUSIONES 27.8. BIBLIOGRAFA
28.2.1 Nitrofuranos 28.2.2 Quinolonas 28.2.3 Oxitetraciclina 28.3. PREPARACIN DE MUESTRAS 28.3.1 Camarones 28.3.2 Salmones y catfish 28.4. PREPARACIN DE SOLUCIONES DE REFERENCIA 28.4.1 Oxitetraciclina 28.4.2 Nitrofurazona y furazolidona 28.4.3 Acido oxolnico, nalidxido, piromdico, flumequina 28.5. EXTRACCIN DE ANTIBITICOS EN TEJIDOS 28.5.1 Extraccin de residuos de oxitetraciclina en msculo de salmn 28.5.2 Extraccin de nitrofuranos en camarn 28.5.3 Extraccin de quinolonas en tejidos de catfish 28.6. DETECCIN 28.7. LMITES DE DETECCIN 28.8. CONCLUSIN 28.9. BIBLIOGRAFA 29. ANTECEDENTES SOBRE PATOLOGIAS DE SALMONIDOS EN CHILE
Patricio Bustos S.
Tabla 3.3. Efecto de los ligantes sobre los mximos de absorcin asociados con transiciones d-d Tabla 4.1. Temperatura mxima de distintas llamas Tabla 5.1. Soportes en Chromosorb ms utilizados Tabla 5.2. Mezcla de 10 solutos utilizada por McReynolds Tabla 6.1. Contenido de aminocidos en algunas materias primas de uso acucola Tabla 6.2. Aminocidos esenciales para salmnidos (requerimiento dietario) Tabla 6.3. Aminocidos esenciales para peces no salmnidos (requerimiento como porcentaje de protena dietaria) Tabla 7.1. Harinas de pescado - Especificaciones de calidad Tabla 7.2. Ring test para la determinacin de la digestibilidad in vitro Tabla 8.1. Composicin del alimento semi-purificado Tabla 8.2. Requerimientos de los alimentos para salmonidos en Dinamarca Tabla 8.3. Digestibilidad de alimentos experimentales no contaminantes Tabla 10.1. Composicin en cidos grasos de los aceites vegetales comercializados en Chile Tabla 10.2. Valores habituales de acidez libre de las materias grasas Tabla 10.3. Valores habituales de rancidez oxidativa Tabla 10.4. Composicin en cidos grasos de algunas materias de origen animal y vegetal Tabla 10.5. Inclusin estimada de aceite de pescado en dietas de peces Tabla 10.6. Evolucin de la formacin de cidos grasos libres, FFA e hidroperxidos I.P. en el aceite contenido en dietas almacenadas hasta seis meses a diferentes temperaturas sin y con adicin de antioxidantes BHT Tabla 10.7. Composicin en cidos grasos de aceites de pescado usados en alimentacion de peces Tabla 10.8. Resumen del anlisis proximal y aporte calorico de truchas y sus respectivas dietas Tabla 10.9. Principales cidos grasos en materia grasa extrada de truchas y sus respectivas dietas
Tabla 10.10. Efecto del nivel de materia grasa dietaria en la composicin corporal de la trucha vs el porcentaje de grasa de la dieta Tabla 10.11. Contenido graso, distribucin de cidos grasos en la materia grasa de salmn y truchas cultivadas en Chile; aporte de EPA y DHA por 100g de filete fresco Tabla 10.12. Composicin de harinas de pescado de diferentes procedencias Tabla 11.1. Mtodos de determinacin de la humedad en materias grasas y aceites Tabla 11.2. Determinacin de la muestra en relacin a la cantidad de cidos grasos libres en la materia grasa Tabla 12.1. Algunos de los principales metabolitos txicos producidos por hongos contaminantes de los alimentos Tabla 12.2. Efecto dietario carcinognico de las aflatoxinas a las truchas arco iris Tabla 12.3. Lmite mximo permisible en distintos pases del mundo para aflatoxina B1 y aflatoxinas totales Tabla 12.4. Lmites mximos de contaminacin por aflatoxinas en alimentos e ingredientes de uso animal Tabla 13.1. Concentracin de aflatoxinas en ppb en muestras individuales Tabla 13.2. Ensayo de recuperacin de aflatoxina B1 (contaminacin natural) Tabla 13.3. Efecto del tiempo y del sistema de extraccin para aflatoxina B1 (contaminacin natural) extractante metanol-agua 80 Tabla 13.4. Anticuerpos contra micotoxinas Tabla 13.5. Comparacin de resultados de seis sistemas cualitativos contra la columna de Holaday-Velazco Tabla 13.6. Relacin de resultados falsos de aflatoxinas Tabla 13.7. Evaluacin de un sistema ELISA para deteccin de aflatoxinas en muestras de sorgo Tabla 13.8. Ensayos de exactitud (porcentaje de recuperacin de aflatoxinas y zearalenona) Tabla 13.9. Estudio de precisin de mtodos analticos para cuantificacin de aflactoxina B1 Tabla 13.10. Comparacin de inmunoensayos contra HPLC Tabla 13.11. Evaluacin de un sistema ELISA
Tabla 13.12. Contaminacin con micotoxinas en alimentos terminados Tabla 13.13. Contaminacin con micotoxinas en maz Tabla 13.14. Contaminacin con aflatoxinas en maz, en los Estados Unidos Tabla 13.15. Contaminacin con micotoxinas en gluten de maz Tabla 13.16. Contaminacin con micotoxinas en sorgo Tabla 13.17. Contaminacin con micotoxinas en pasta de soya Tabla 13.18. Evaluacin de aluminosilicatos Ensayo realizado in vitro Tabla 14.1. Anticuerpos contra micotoxinas Tabla 14.2. Sensibilidad de los sistemas ELISA para ensayos de micotoxinas Tabla 14.3. Comparacin de resultados entre un sistema ELISA y la cromatografa de capa fina (aflatoxinas) Tabla 14.4. Comparacin de resultados entre un sistema ELISA, una columna de inmunoafinidad y capa fina (aflatoxinas) Tabla 14.5. Comparacin de resultados entre los inmunoensayos y la columna de Holaday Velazco para la determinacin de aflatoxinas Tabla 14.6. Comparacin de resultados de aflatoxina B1 Sistema ELISA vs HPLC Tabla 14.7. Comparacin de inmunoensayos contra HPLC Valores promedio Intervalo Tabla 14.8. Comparacin de resultados inmunoensayos contra HPLC Tabla 20.1. Composicin qumica de alimentos zootcnicos ecuatorianos Tabla 20.2. Anlisis qumico proximal de alimentos para langostinos (pre-cra, crecimiento y engorda) Tabla 20.3. Requerimientos de aminocidos para salmones y truchas Tabla 20.4. Composicin de alimentos para uso en acuicultura Tabla 20.5. Composicin de dieta para alimentacin inicial de salmones Tabla 20.6. Composicin de dieta para crecimiento y reproductores (salmones) Tabla 20.7. Recomendaciones nutricionales para alimentacin inicial de salmones Tabla 20.8. Composicin de alimento de truchas
Tabla 21.1. Aminocidos y aminas biognicas Tabla 24.1. Requerimientos vitamnicos recomendados/requeridos para mxima ganacia de peso para diferentes especies Tabla 24.2. Requerimiento de cido ascrbico por salmondos Tabla 24.3. Signos de deficiencia de vitamina C en salmnidos Tabla 24.4. Formas de cido ascrbico utilizadas en alimentos acucolas Tabla 27.1. Vitamina A - Peso de la muestra y concentracin esperada Tabla 27.2. Variacin de resultados - Vitamina D3 en alimentos y premezclas Tabla 29.1. Costos y su incidencia Tabla 29.2. Agentes patgenos bacterianos causantes de mortalidad Tabla 29.3. Enfermedades parasitarias descritas en Chile Tabla 29.4. Enfermedades detectadas en salmnidos en Chile - husped, ubicacin geogrfica y terapias ms comunes
Figura 8.1. Relacin entre el Coeficiente de Digestibilidad Aparente (CDA) y el Coeficiente de Digestibilidad Real (CDR) en funcin de la ingesta de alimento Figura 15.1. Formulacin y fabricacin de alimentos - Etapas y factores Figura 15.2. Temperatura y humedad relativa a las cuales crecen los hongos ms importantes en alimentos Figura 21.1. Formacin de las aminas biognicas Figura 26.1. Estructura de algunos carotenoides
Diagnstico sobre el estado de la acuicultura en Amrica Latina y el Caribe Sntesis Regional La enseanza de la acuicultura profesional en Amrica Latina y el Caribe con nfasis en la licenciatura Situacin actual del cultivo de algas agarofitas en Amrica Latina y el Caribe en Amrica Latina y el Caribe Diagnstico y control de enfermedades bacterianas en camarones de cultivo Parsitos de peces cultivados en aguas interiores - Claves para su diagnstico diferencial
Memorias del III Curso Bsico Regional de Capacitacin en Planificacin y Gerencia en Acuicultura (Caracas, 5/1020/11/1992) INFORMES SOBRE LAS ACTIVIDADES DEL PROYECTO: I Marzo - agosto de 1992 II Septiembre '92 - febrero'93 III Marzo - agosto de 1993 IV Septiembre'93 - marzo'94
Nota El nmero indicado entre parntesis se refiere a la numeracin progresiva de los Documentos de Campo publicados por AQUILA I. En efecto, estos trabajos, aunque re visados y editados por AQUILA II, fueron elaborados en los ltimos meses de la fase precedente, y no fue posible publicarlos en ese perodo a causa de la improvisa interrupcin de las actividades.
RESUMEN El I Curso Regional Terico Demostrativo de Capacitacin en Control de Calidad de Insumos y Dietas Acucolas fue organizado por el proyecto FAO AQUILA II y ejecutado por Fundacin Chile en Santiago de Chile, del 20 de septiembre al 7 de octubre de 1993. El programa desarrollado en este evento fu impartido a un grupo de 10 becarios latinoamericanos previamente seleccionados de acuerdo a su formacin profesional, experiencia laboral y efecto multiplicador, que realizarn en sus propios pases de las enseanzas post-curso. El presente documento rene la totalidad de las clases impartidas por el grupo de profesionales encargados de preparar y dictar el curso.
INTRODUCCION
El control de calidad de los insumos y dietas acucolas constituye uno de los principales factores de xito en la explotacin comercial de especies acucolas. El programa de capacitacin tcnico-demostrativo desarrollado en este curso tuvo el propsito de actualizar los conocimientos sobre las tcnicas analticas y bioensayos ms utilizados en el control de calidad de los insumos y dietas acucolas en Latinoamrica y de motivar a los seleccionados becarios de tal forma que diseminaran los conocimientos adquiridos en sus propios pases. La verdad es que este curso constituy todo un desafo ya que nunca antes se haba realizado una actividad similar, al menos en Latinoamrica. Los resultados tan exitosos alcanzados en este curso quedaron avalados por la evaluacin realizada por todos los participantes y la propia FAO, a travs del Proyecto AQUILA II. Quisiera finalizar agradeciendo muy sinceramente a FAO-Proyecto AQUILA II, por la iniciativa y por el financiamiento aportado para llevar a cabo este evento, y muy profundamente la motivacin, entrega y comunicacin de conocimientos que hicieron cada uno de los profesionales que prepararon las clases tericas y las demostraciones prcticas: Juan Jos Romero, Lilia Masson, Sergio Valladares, Blago Razmilic, Laura Avila, Juan Antonio Manrquez, Marcela Zamorano, Macarena Izaurieta, Francisco Ahumada, Juan Carlos Medina, Eliezer Castillo, Julio Achupallas, Mara Isabel Toledo, Julio Salazar, Mnica Galleguillos, Javier Garrido, Gonzalo Mena, Csar Seplveda, Patricio Bustos y Luz Mara Escudero. El Director del Curso Emilio Castro Campos M. Sc. Jefe de Proyectos Nutricin Acucola Recursos Marinos Fundacin Chile.
1.1. PROTENA
La Tabla 1.1. indica los requerimientos de los 10 aminocidos que se consideran esenciales para salmones. Hay tambin otros diez, que no se consideran esenciales por cuanto los peces los sintetizan a velocidad suficiente y son, como se ver ms adelante, una conveniente forma de obtener energa metablica, que cuesta suplir a los peces mediante otros nutrientes. Tabla 1.1. Requerimientos de aminocidos esenciales para salmones AMINOCIDO
Arginina Histidina
% EN LA DIETA
2.4 0.7 6.0 1.8
% PROTENA DIETA
Isoleucina Leucina Lisina Metionina (1) Fenilalanina (2) Treonina Triptofano Valina
(1) sin cistena (2) sin tirosina
En condiciones practicas, con los ingredientes usualmente disponibles, el aminocido cuyo requerimiento resulta ms difcil de satisfacer es la arginina. Esta situacin, que no es frecuente al balancear raciones de otras especies se debe probablemente a que por el hecho de que los peces excretan directamente como amonaco el nitrgeno excedentario (90% del nitrgeno excretado por los teleosteos es NH3), no opera activamente el denominado ciclo de la urea, que en mamferos genera abundante arginina. Una caracterstica de las necesidades de protena de los animales acuticos que llama la atencin es su alto requerimiento. Efectivamente, en agricultura animal los niveles ms altos llegan a 2022% como en el caso de broilers, en sus primeras etapas de crianza; en cambio, en salmones van de 4552% y en juveniles de turbot llegan a 70%. Con dichos niveles empleando los ingredientes normalmente disponibles se satisfacen los requerimientos de los aminocidos ms limitantes. Igualmente sorprendente resulta que los abalones, que son pastoreadores de algas con muy bajo tenor de protena por su alto contenido de humedad, demuestren mejores crecimientos con dietas de 39% de protena. La explicacin parece radicar en que los animales acucolas por lo antes dicho al no necesitar gastar energa en desintoxicar los productos excretorios del metabolismo de las protenas, evolutivamente se han adaptado mejor a dietas de alto contenido en esta. Los terrcolas debemos conjugar molculas ms complejas y no txicas como la urea o cido rico (aves y reptiles), para deshacernos del nitrgeno excedentario, lo que es costoso en trminos de energa bioqumica. En peces juveniles, en crecimiento activo, los requerimientos de protena son ms altos que en aquellos en etapas ms avanzadas de crecimiento, por lo cual, los alimentos de los primeros contienen normalmente porcentajes mayores de protena.
1.2. ENERGA
Para formular raciones, al igual que en otras especies de produccin intensiva, la energa y la protena o mejor dicho los aminocidos, son las dos variables ms importantes a balncear y la energa es con frecuencia el ms costoso de suministar. La energa, esencial para mantener una serie de reacciones vitales, es un atributo extremadamente importante contendia en los enlaces qumicos de los alimentos. Al criarlos intensivamente en cautiverio, se logra que los peces tengan una rapidsima tasa de crecimiento; as por ejemplo un salmn aumenta 2,500 veces su peso, en el
perodo en que se le engorda, desde alevn de saco hasta su beneficio. Ello equivale a un novillo que debera pesar 112 toneladas al trmino de su comparable perodo de engorda. Este irrefrenable impulso de crecimiento de los peces los hace muy propicios para emplear en su produccin dietas de la ms alta densidad energtica obtenible ya que no se enceban (no depositan grasa en exceso), sino la aprovechan en su ms rpido crecimiento. De otra parte, el precio del producto obtenido es alto y justifica emplear estrategias de alimentacin que busquen mxima productividad ms que mnimo costo. Como se seal antes, la energa pueden proveerla las protenas, grasas o carbohidratos. El cuadro que sigue indica que hacen un muy distinto aporte. Energa metablica (Mcal/kg)
Carbohidratos Protena Grasa 1.6 3.9 8.0
Los almidones o hidratos de carbono, que como se ve, son muy mal aprovechados, pueden incluso tener efectos perjudiciales, lo que ha hecho denominar a los salmones como diabticos marginales. Efectivamente, se ha observado que el empleo de almidones en alimentos de salmones produce acumulaciones patolgicas en el hgado de glucgeno, polmero de glucosa que se almacena en hgado y msculo y sirve como metabolito de reserva. En la fabricacin de alimentos comerciales, conviene emplear carbohidratos porque son habitualmente ms baratos y ello permite rebajar el costo por kilo. El problema antes mencionado se evade incorporando almidones poco aprovechables como el afrechillo de trigo, que por estar infiltrado de fibra cruda, tiene baja digestibilidad. Naturalmente que la solucin es un engao, porque se est incorporando un ingrediente de relleno, que es mayormente excretado, perjudicando la eficiencia de conversin de alimento y aumentando los problemas de contaminacin. Desgraciadamente, para el piscicultor esta diferencia en calidad es difcilmente perceptible ya que por la dificultad de regular el suministro, al real consumo de los peces, normalmente se malgasta mucho alimento quedando confundida la mejor eficiencia. Otra caracterstica interesante de la nutricin energtica de los peces, es su condicin de poikilotermios, es decir, no gastar energa en mantener la temperatura del cuerpo. Los que llegan al mximo como eficiencia son los peces bentnicos como turbots o lenguados, que adems no gastan energa en moverse, sino cuando de comer se trata. Naturalmente que esto los hace mucho ms eficientes como convertidores que otras especies de cultivo industrial, que gastan 20% o ms del alimento que consumen con fines homeostticos. Es por eso que los Productores de pollos parrilleros se sienten muy ufanos al lograr eficiencias de conversin de 2.2 kg de alimento por kilo de aumento de peso, mientras los acuicultores en salmnidos hablan con toda naturalidad de relaciones de promedios 1.61.8. La aparente paradoja termodinmica de lo ltimo se explica por la diferencia en el contenido de humedad y de grasa entre los alimentos y el cuerpo de los peces.
Tabla 1.2. Materia seca y grasa en los alimentos y el cuerpo del salmn MATERIA SECA
Alimento Cuerpo salmn 8590% 2040%
GRASA
1530% 510%
El mayor contenido de materia seca y de grasa del alimento lo hacen nutricionalmente mucho ms concentrado que el cuerpo del pez y por tanto se requiere menos peso de alimento que lo que el pez aumenta de masa.
1.3. LPIDOS
Debido a la temperatura del agua, en alimentacin acucola, los lpidos empleados son aceites, por su temperatura de fusin. No slo aportan nutrientes esenciales o sea molculas que no se pueden sintetizar o lo son a velocidad insuficiente en el cuerpo del pez, sino son tambin son una fuente muy concentrada de energa comparativamente la ms barata. Ello hace que los fabricantes de piensos se esfuercen por hacer una mxima agregacin de estos a sus alimentos. La limitante est dada por el tipo de procesamiento que se sigue para elaborarlos; para conseguir la ingestin de una racin balanceada-completa y para evitar ensuciar el agua, lo que es causa de enfermedades, conviene que los piensos para acuicultura sean aglomerados. Hay bsicamente dos procedimientos para hacer comprimidos: la peletizacin y la extrusin. Las mezclas que se aglomeran mediante presin, no pueden contener demasiado aceite porque resultan demasiado lubricadas y pasarn por los dispositivos sin resultar suficientemente compactadas. Es por ello que normalmente en la fabricacin de alimentos acucolas, se pulveriza externamente los aglomerados ya formados. La consistencia fsica del alimento extrudo permite agregar ms aceite mediante pulverizacin que la del producto peletizado, logrndose dietas con 30% de aceite versus el 20% que se logra, como mximo, en los alimentos pelletizados. Tecnologas modernas permiten agregar aceite en caliente. Los mamferos tenemos requerimiento de los llamados cidos grasos esenciales, porque no somos capaces de desaturar ciertos enlaces en posiciones estratgicas de cidos grasos de 18 carbones. Los lpidos de los peces contienen cidos grasos de cadenas ms largas, con 2022 carbones y tampoco tienen la maquinaria enzimtica para introducir dobles ligaduras entre los carbones 3, contados desde el extremo omega (COOH); pasan a ser esenciales para ellos el eicosapentaenoico o EPA (20:5) y el docosahexaenoico o DHA (22:6). En la alimentacin silvestre, los peces consiguen suficiente suministro de estos cidos grasos de la ingestin de fitoplancton, en donde configuran ms del 50% de sus lpidos. Actualmente, se estn logrando avances notables en la larvicultura de especies marinas de cultivo mediante la manipulacin de tales PUFA's, o n-3(HUFA's). Se logra mejorar la supervivencia de ciertas etapas juveniles, que hasta hace poco no superaba
un 5%, y que era un gran freno para el desarrollo del cultivo industrial de algunas especies marinas. Aparentemente, los cambios metamrficos causan demandas explosivas de estos cidos grasos que tienen estructuras moleculares nicas para formar membranas biolgicas. Los larvicultores estn buscando altas relaciones en las concentraciones de DHA/EPA, incluso hablando del cido malo, refirindose al EPA y del bueno, refirindose al DHA. Los humanos tampoco podemos sintetizar cidos grasos 3, y obtenemos grandes ventajas con su ingestin ya que se reduce la incidencia de enfermedades cardiovasculares (infartos, arritmias, arteriosclerosis, trombosis) y se previene enfermedades inflamatorias como la artritis. Afortunadamente, las harinas de pescado, empleadas liberalmente en Chile para la fabricacin de alimentos para acuicultura, son muy ricas en cidos grasos esenciales. Es necesario tomar precaucin extrema respecto de la calidad de los aceites de empleados en la fabricacin de alimentos para peces ya que estos son muy sensibles a intoxicaciones causadas por lpidos oxidados y/o a minsculas contenidos de residuos de solventes empleados en su extraccin. De otra parte, los aceites de pescado sufren per-oxidaciones autoaceleradas que los deteriora irreversiblemente, situacin difcil de pesquisar mediante anlisis qumico, a menos que se conozca la evolucin en el tiempo de los indicadores del proceso de enranciamiento. La siguiente mltiple y variable sintomatologa ha sido descrita en salmnidos, atribuible a la ingestin de lpidos oxidados: crecimiento retardado, pobre conversin de alimentos y mortalidad aumentada, oscurecimiento de la piel y escamas, letargia, fragilidad de eritrocitos, anemia microctica, bajo hematocrito y reducido contenido de hemoglobina, hgado graso (amarillento, con acumulacin ceroide) y dao muscular.
1.4. VITAMINAS
En peces, las funciones primarias de las vitaminas son similares a las cumplidas en otros animales. En su mayora, las vitaminas del complejo B son requeridas para metabolizar carbohidratos, protenas y grasas y las liposolubles (A,D,E y K) aportan configuraciones nicas a precursores de molculas irremplazables en qumica biolgica. El cido ascrbico o vitamina C es esencial slo para humanos, primates, cobayos y peces. El inositol y la colina son componentes estructurales de ciertos tejido especializados. La Tabla 1.3. contiene una recopilacin personal del rango de los niveles de suplementacin recomendados por diversos autores. En muchos de los casos, el requerimiento no ha sido objetivamente determinado y son ms bien derivaciones de las exigencias determinadas en otras especies. Adems, en todos los casos, ignora el aporte de vitaminas que hacen los macro-ingredientes del alimento. Tabla 1.3. Niveles de suplementacin vitamnica recomendados Ingrediente Salmn
Tiamina 1015 1012
Carpa
Riboflavina Piridoxina Pantotenato Niacina cido flico B12 Mio-inositol Colina Biotina Vit. C Vit. A (U.I.) Vit. E (*) Vit. D
525 1020 4050 150200 610 0.0150.020 300400 600800 11.5 100150
300400
200300 500600
4050 1,000
En la Tabla 1.4., se seala una dosis prctica de agregacin en ingrediente activo por kilo de alimento seco corriente, bajo condiciones normales. Tabla 1.4. Dosis prctica de agregacin en ingrediente activo por kg de alimento seco corriente Ingrediente
Tiamina Riboflavina Vit. B6 cido pantotnico Niacin cido flico Vitamina B12 Colina Biotina Vitamina C Vitamina A Vitamina E Vitamina D3 Vitamina K
Debe tenerse presente que varias de las formulaciones comerciales de vitaminas no tienen una concentracin 100% activa; as por ejemplo, los suplementos de biotina slo tiene 1% activo. Adems, la potencia vitamnica sufre deterioro durante el procesamiento (calentamiento causado por la extrusin o peletizaje), por el contacto con ingredientes de la dieta (minerales, tiaminasas de los tejidos de peces), almacenaje (oxidacin) y solubilizacin en el agua. La vitamina C es muy sensible al calor, estimndose que por el producido en el procesamiento, slo se conserva un 6070% de su tenor original. Hay formas de cido ascrbico que son ms resistentes a dicho deterioro, como son aquellas recubiertas en silicona o los polifosfatos. El altsimo requerimiento de vitaminas E y C es una situacin muy peculiar de la nutricin vitamnica de los peces. Para vitamina E se recomienda en salmones 30 mg/kg dieta, lo que es 10 veces mayor que lo que se emplea en otras especies. Ello se entiende por la accin como antioxidante biolgico de la vitamina, doblemente importante por el alto nivel de lpidos que constituyen su dieta y para evitar la saturacin de las dobles ligaduras de los cidos grasos crticos antes mencionados. En vitamina C, tambin se usa megadosis, lo que es aparentemente un absurdo debido a su extrema solubilidad, lo que hace que toda cantidad excedentaria se pierda de inmediato. Lo interesante es que en este caso, lo que se busca de la vitamina es su accin anti-stress, situacin a que se son muy expuestos los salmones por haber sido slo recientemente sometidos a cautiverio. Para enfrentar ese riesgo, conviene mantener literalmente pasando por el cuerpo de los salmones un torrente de vitamina C, para tener el organismo activado cuando sobrevenga una emergencia. La Tabla 1.5. indica los sntomas causados en peces, por deficiencias vitamnicas. Tabla 1.5. Sntomas de deficiencias vitamnicas en salmones Depresin crecimiento Otros sntomas
Vitamina A Vitamina D3 Vitamina E Vitamina K Tiamina Riboflavina cido pantotnico Niacina Biotina Piridoxina Vit. B12 cido flico cido ascrbico Mio-inositol Si Si Si Si No Si Si Si Si Si Si Si Si Ojos protuberantes Huesos frgiles Anemia, retencin de liquido, muerte Anemia, coagulacin retardada Hiper-irritabilidad, convulsiones Cataratas Agallas deformes Lesiones a la piel Convulsiones, nadar errtico Anemia Clulas sanguneas alteradas Lordosis, escoliosis, hemorragias, anemia
1.5. MINERALS
Los peces consiguen directamente del agua los minerales que requieren para su crecimiento. Sin embargo, los niveles indicados en la Tabla 1.6., han sido demostrados como convenientes por diversos autores. Tabla 1.6. Niveles de minerales requeridos para el crecimiento Elemento
Calcio Magnesio
mg/kg dieta
2,700 400500 400 500700 6,0007,000 4,5008,000 6,000 6,800 7,0008,000 2,900 150 170 1530 3 1213 0.070.38 0.61.1
Especie
Congrio japons Carpa Congrio japons Trucha arco iris Carpa Bagre Salmn atlntico Red sea bream Trucha arco iris Congrio japons Red sea bream Congrio japons Carpa, trucha Carpa, trucha Carpa, trucha Trucha arco iris Salmn chinook
Fsforo
Una situacin de desbalance mineral que se produce tambin, en cerdos. Los cerdos sufren de paraqueratosis, un sndrome asociado a deficiencia de zinc, que se produce frecuentemente en la prctica al emplearse alimentos muy altos en su contenido de calcio, como es el heno de alfalfa. Ambos minerales comparten un mismo sistema de absorcin y se produce una competencia excluyente. En salmones se produce un cuadro de desprendimiento de retina que se cura con suplementacin de zinc; ello es probablemente porque al darles dietas con abundancia de harina de pescado, les estamos dando demasiado calcio. La Tabla 1.7. result til para diagnosticar patologias nutricionales inducidas por deficiencias, desbalances o toxicidad de componentes del alimento, que naturalmente van acompaadas tambin de tasas de crecimiento y conversin reducidas y de aumentos en la mortalidad. Tabla 1.7. Patologas nutricionales inducidas por deficiencias, desbalances o toxicidad de componentes del alimento CONDICIN
PATOLGICA
DEFICIENCIA
Triptofano, magnesio, fsforo, vit. C
TOXICIDAD
Plomo, cadmio, vit. A, aceite oxidado de pescado
Escoliosis/Iordosis
Metionina, triptofano, zinc, magnesio, cobre, selenio, manganeso, vit. A, riboflavina Lisina, triptofano, zinc, riboflavina, inositol, niacina, vit. C Colina, inositol, cidos grasos esenciales cido pantotnico, niacina, cido flico, vitaminas A y E Riboflavina, cido pantotnico, niacina, tiamina, inositol, vitaminas A, C y K
Colina, aceite oxidado de pescado Plomo, vit. A Aceite oxidado de pescado Aceite oxidado de pescado Aceite oxidado de pescado
1.6. PIGMENTOS
De los aproximadamente 300 tipos de pigmentos carotenoides que existen en la naturaleza, los salmones slo pueden aprovechar la astaxantina y la cantaxantina que slo difieren de los dems en el emplazamiento de grupos hidroxilos en los anillos benznicos. La astaxantina y la cantaxantina son los que le confieren al salmn su color sui generis, bajo condiciones de cultivo que es lo que le da su valor exclusivo. El salmn bravo obtiene fundamentalmente astaxantina de crustceos que ingiere o cuyos carotenoides han sido incorporados por componentes anteriores de la cadena trfica. En el salmn criado en cautiverio, estos deben ser incorporados al alimento ya que de otro modo se obtiene una carne blanquecina. Hasta hace muy poco se crea que los pigmentos en salmones slo tenan dicho inters cosmtico, para obtener la coloracin tpica. Incluso, la observacin emprica de que los huevos de mejor coloracin rojiza tienen mejor incubabilidad se atribua a que los depredadores por tener visin defectuosa en esa longitud de onda, mejora las posibilidades de supervivencia, lo que se habra fijado evolutivamente como carcter conveniente. Sin embargo, hay informacin reciente que demuestra que los carotenoides tienen accin antioxidante parecida a la de la vitamina E, que es muy importante en la viabilidad de ovas y alevines.
evaporar el ter en bao de agua bajo campana. Secar el matraz a 100C por Precauciones: 30 minutos, enfriar en desecador y pesar inmediatamente cuando el matraz alcance la temperatura ambiente. Repetir el secado y controlar peso constante.
2.2. PROTENAS
(NITRGENO TOTAL) MTODO KJELDAHL DIGESTIN CIDA DESTILACIN CON ARRASTRE DE VAPOR EN MEDIO ALCALINO.
catalizador se recomienda actualmente la mezcla de sulfato de cobre y Precauciones: sulfato de potasio, en lugar de sales de mercurio y selenio, por problemas de toxicidad. Digestin el peso de la muestra se toma de modo que el amonaco recolectado en el destilado represente entre 0.020.04 g de nitrgeno. Los factores ms usados son: 6.25 general 5.70 harina de trigo 6.38 productos lcteos. Ejemplo: muestra declarada: 44 g de protena en 255 g de muestra, o sea tiene: 0.1725 g de protena/g de muestra
Factor: 5.70 Concentracin final de nitrgeno en el destilado: 0.03 Tamao de muestra necesario:
2.3. CARBOHIDRATOS
En general se calcula por diferencia.
Aplicacin: a productos que declaran anlisis proximal. se determinarn los valores para protena, grasa, humedad y cenizas y se Procedimiento: expresan en base a gramos. Se resta del peso total declarado en gramos, la suma se los gramos de protenas, grasa, humedad y cenizas y se obtiene los gramos de carbohidrato en los gramos de muestra declarada.
2.4. CENIZAS
cuando los alimentos se calientan a temperaturas de 500600C, el agua y otros constituyentes voltiles se eliminan como vapores y los constituyentes orgnicos se queman en presencia del oxgeno del aire a dixido de carbono (CO2) y xidos de nitrgeno que se eliminan junto con el hidrgeno y el agua. El azufre y fsforo presente se convierte a sus xidos y si no hay suficientes Principio: elementos alcalino trreos, se pueden perder por volatilizacin. Los constituyentes minerales permanecen en el residuo como xidos, sulfatos, fosfatos, silicatos y cloruros, dependiendo de las condiciones de incineracin y la composicin del producto incinerado. Este residuo inorgnico es lo que constituye las cenizas. Precauciones: si la muestra es slida, quemar previamente antes de colocar en la mufla. Si la muestra es lquida, evaporar a sequedad y en seguida quemar para llevar a la mufla. Precalentar la mufla a la temperatura recomendada, generalmente 550C y luego transferir las muestras quemadas en los correspondientes crisoles. Calcinar por un perodo no inferior a 4 horas (granos y forrajes pueden ser de dos horas) si no se alcanza en este tiempo, se puede dejar calcinando toda la noche. Retirar las muestras con mucha precaucin, para evitar prdidas.
Principio:
3.1. INTRODUCCIN
La espectrofotometra de absorcin molecular ultravioleta visible, comnmente llamada espectrofotometra UV-VIS, tiene una larga y continua historia en el campo de la qumica analtica. Esta tcnica est basada en la medicin de absorcin de radiacin U.V. o visible por determinadas molculas. La radiacin correspondiente a estas regiones del espectro electromagntico provocan transiciones electrnicas a longitudes de ondas caractersticas de la estructura molecular de un compuesto.
se forma cuando dos tomos comparten uno o ms pares de electrones. La mayora de estos enlaces abarcan dos o tres pares de electrones. As dos Enlace covalente: tomos forman un enlace covalente simple cuando comparten un par de electrones; un enlace covalente doble, dos pares de electrones y un triple enlace tres pares de electrones. CH3 - CH3; CH2 = CH2; CH = CH
O.A. pi ():
Adems de los electrones y , muchas molculas orgnicas contienen electrones que no forman enlaces. Estos electrones no compartidos se representan en el smbolo . Figura 3.1. Transiciones electrnicas entre orbitales , , y .
(nm)
<200 200500 160260 250600 -
(L mol4cm-1)
104 102 103 10 103
Ejemplo
Hidrocarburos saturados Alquenos, alquinos aromticos H2O, CH3OH, CH3CL Carbonilos, nitro, nitrato, carbonilo.
Unidades de
Angstrm Nanometro nm Micrometro m 10-10m 10-9m 10-6m (rayos X; UV en el vaco) (UV-VIS) (IR)
cm
3 10-11 3 10-9 3 10-7 3 10-5 3 10-3 3 10-1 3 101 1021 1019 1017 1015 1013 1011 109
Hz
3.3 10-4
3 103
107
naturaleza de esta interaccin depende de las propiedades de la materia y puede dar lugar a la transmisin, la absorcin o la dispersin de la radiacin. FENMENO
Transmisin Dispersin Absorcin
EXPLOTACIN ANALTICA
Indice de refraccin Reflexin. Efecto Tyndal. Nefelometria Molecular, atmica
Como consecuencia de las interacciones entre los fotones y las partculas absorbentes, la potencia del haz disminuye de Po a P. Por lo tanto la transmitancia T de la solucin es la fraccin de radiacin incidente transmitida (o no absorbida) por la solucin segn:
donde:
concentracin en moles/l
qumico; instrumental.
La Ley de Beer es slo aplicable a soluciones en las que las interacciones dependientes de la concentracin de las molculas o iones son mnimas. Concentraciones alts alteran las absortividades molares y por lo tanto conducen a una relacin no lineal entre A y c.
a) Desviaciones qumicas
Cuando las especies absorbentes experimentan asociacin, disociacin o reaccin con el solvente originan productos con caractersticas absorbentes distintas de las del analito. Un ejemplo tpico se observa con soluciones de dicromato potsico no amortiguadas, en las que existen los siguientes equilibrios: Cr2O7+H2O 2HCrO4 2H+ + 2CrO4-2 A casi todas las longitudes de onda los valores de del ion dicromato y las dos especies de cromatos son muy diferentes.
b) Desviaciones instrumentales
Radiacin policromtica: Radiacin el requisito bsico para el cumplimiento de la Ley de Beer es que la radiacin incidente sea monocromtica. Dependiendo de las caractersticas tecnolgicas del sistema ptico del instrumento ser ms o menos accesible poder utilizar en forma prctica una radiacin una radiacin limitada a una sola longitud de onda. la radiacin dispersa suele diferir considerablemente en longitud de onda con
dispersa:
respecto a la radiacin principal; adems puede alcanzar el detector sin haber pasado a travs de la muestra.
Identificacin proximal de los grupos funcionales en una molcula. Mtodo bastante selectivo para el anlisis cuantitativo de compuestos cuyos enlaces producen absorcin.
Conviene considerar tres tipos de transiciones electrnicas que permiten explicar porqu algunas especies pueden absorber energa radiante. Estos tres tipos son:
Ejemplo
C6H13CH = CH2
Disolvente
n-Heptano
mx (nm)
177
mx
Tipo de transicin
13,000 *
Alquino
C5H11C=CCH3
n-Hexano
Carbonilo
n-Heptano
n-Hexano
Amido Agua Azo Nitro Nitroso Nitrato CH3N=NCH3 CH3NO2 C4H9NO C2H5ONO2 Etanol Isooctano ter etlico Dioxano 214 339 280 300 665 270 60 5 22 100 20 12 * * * * *
Los iones y complejos de los 18 elementos de las dos primeras series de transicin son coloreados en uno de sus estados de oxidacin o en todos ellos. Dependiendo las caractersticas colorimtricas del complejo; del tipo de ligando (agente complejante) y del estado de oxidacin. Tabla 3.3. Efecto de los ligantes sobre los mximos de absorcin asociados con transiciones d-d mx (nm) para los ligantes indicados Aumento de fuerza del campo de unin Ion central
Cr (III) Co (III) Co (II) Ni (II) 1370
6CI
736
6H2O
573 538 1345 1279
6NH3
462 435 980 925 456 428 909 863
3en(1)
6CN380 294 -
Cu (II)
794
663
610
3.11. INSTRUMENTACIN
Los instrumentos que miden la absorcin selectiva de la radiacin en las soluciones se conocen con los nombres de: colormetros, fotmetros y espectrofotmetros. Hoy en da es pertinente diferenciar los instrumentos segn su sistema de deteccin: detectores simples (convencional) o detectores multicanal (arreglo de diodo). Algunos de los diseos bsicos de los instrumentos usados en la medicin de la absorcin de Energa Radiante se ilustra en el siguiente esquema: Figura 3.6. Diagrama de bloques de diferentes tipos de instrumentos de medicin de la absorcin molecular
Ambas lmparas producen un espectro continuo entre 160375 nm y deben emplearse ventanas de cuarzo en los tubos: ya que el vidrio absorbe fuertemente en esta regin del espectro electromagntico.
Es la fuente ms comn para la zona del visible e infrarrojo. Esta lmpara es til para la regin entre 320 2,500 nm.
Color filtro
Azul Verde azuloso Verde amarillento Anaranjado Rojo
Color solucin
Amarillo Rojo Violeta Azul verdoso Verde azuloso
(ii) Espectrofotmetro: utilizan un complejo sistema ptico de seleccin de longitud de onda (sistema monocromador). el cual consta de variados componentes tales como:
Estos instrumentos pueden seleccionar longitud de onda en forma continua y en algunos casos con precisin de dcimas de nm. Por lo tanto, es posible obtener en forma continua el espectro de absorcin de una molcula.
La longitud ms comn para el trabajo en las regiones UV-VIS es 1 cm (otras son: 2, 5 y 10 cm).
d) Deteccin de la radiacin
Dispositivo electrnico llamado transductor que convierten la energa radiante en una seal elctrica.
Requisitos: Responder a la E.R. en un amplio intervalo de . Respuesta lineal. Detectores de fotones: Celdas fotovoltaicas. Fototubos.
Poseer elevada sensibilidad. Tiempo de respuesta rpido, etc Tubos fotomultiplicadores. Diodo de silicio.
Drogas Vitaminas, etc Compuestos (especies inorgnicos: absorbentes) Compuestos no absorbentes Derivatizacin (Por ej.: formacin de complejos coloreados).
b) Principales caractersticas:
Alta sensibilidad: Absortividades molares 105 Intervalos de concentracin 10-4 a 10-6M. Selectividad: seleccin de la longitud de onda en la que el nico componente absorbente de una muestra sea la sustancia que se determina. Precisin y exactitud: dependiendo del nivel de concentracin es posible lograr valores menores que 1% de error relativo.
Separacin del compuesto de inters (precipitacin, extraccin por solvente, cromatografa, etc). Derivatizacin si es necesaria.
En el espectro de mono haz, se va alternando la medida de la absorbancia entre el disolvente (blanco) y la solucin que contiene la muestra en la medida que se va variando gradualmente la longitud de onda. En el espectro de doble haz, la operacin descrita anteriormente es posible hacerla automtica y simultneamente.
Para ello los instrumentos disponen de sistemas con microprocesador que permiten una fcil y expedita obtencin de la informacin. Mediante estos instrumentos es posible hacer barrido de longitudes de ondas en determinadas zonas del espectro y a diferentes velocidades.
La excepcin a esto ltimo la proporcionan los espectrofotmetros de Arreglo de Diodos ya que dada su configuracin es posible obtener el espectro de absorcin en un amplio rango de longitudes de onda (200800 nm) en fraccin de segundos. Una vez establecida la longitud de mx. (mxima sensibilidad) se prepara la curva de calibracin.
r es un parmetro estadstico que da cuenta de la calidad de la curva de calibracin y se denomina coeficiente de regresin. En anlisis cuantitativo se considera buena una curva cuando su valor de r es mayor que 0.99.
A partir de estndares puros de las especies X e Y se obtienen, por separado los respectivos valores de las absortividades molares de X e Y. Luego quedan como incgnitas las concentraciones de X e Y a ambas longitudes de onda y se resuelve el sistema de ecuaciones. Figura 3.10. Espectros de absorcin mezcla componentes
3.14.2 Titulaciones
Las titulaciones espectrofotomtricas son otras aplicacines mediante las cuales es posible determinar constantes termodinmicas tales como de formacin de complejos metlicos, etc
3.15. BIBLIOGRAFA
Hewlett Packard. 1988. The Diode-Array Advantage in UV-VIS Spectroscopy. Publication No12 - 55948912. Inge, J.A. Jr. and Crouch, S.R. 1988. Spectrochemical Analysis. Prentice Hall International, Inc. Skoog, D.A. y West, D.M. 1984. Anlisis Instrumental. 2a edicin. Ed. Interamericana.