QUINTA EDICION

INMUNOLOGIA

ROITT " BROSTOFF " MALE

Prologo
La quinta edicicin dc himunolnzfia sc ha actualizado significatiyamente a pesar dc que solo hail tranSCttrrid() dos arias desde la edicion anterior . Se hail reyisadcr y amphado los capitulos dc la edicicin anterior para adaptarlos a Icrs pcrmanentes cambios cn csta matcria . Sc hail rcorganizado asimisnto todos Icrs capitulos sabre las respucstas inntunitarios mcdiadas por cclulas N, pcrr anticuerpos a etectos dc incluir los conccptos actuates sabre las respucstas THI/TI12 . Entre otras incorporaciones, cabc Llestacar ]as nucyas sccciones sobrc las citocinas, las cclulas ascsinas naturales y los mecanismos dc senalizaci(in intracclular en los linfocitos B N, T. Sc hail rcorganizado los capitulos para ajustarlos a Irrs modernos carnbios N, se ha cubierto con mayor antptitud Cl terra de las inniunodeticicncias, clue en esta edici<'rtt se aborda en dos capitulos: uncr dedicado a ]as inmunudeficicincias printarias y otr<s a las sccundarias . Sc Iran rcyisadu amplialrtcnic Icrs apcndiccs y glosarios, y se ha duplicado cl tamanu dc la tabla de las citocinas, que actualmcntc alcanza IL-18. Se lean discirado una serie dc iconos claye para facilitar la utilizacion dc la obra . At inicio de each capitulu sc resumes los concel)tos fitndamcntales que se abordan en el mismo y al final se introduces una serie dc preguntas que deben scryir de base para un analisis en protundidad del tenia cn cucstion . Se emplcan -epigrafes tclegraficos a to largo dc todcr cl to%t0, en los cuales se recogen los conceptos fitndantcntalcs que se abordan coil cietallc cn el . tCxtO . Sin embargo, hemos mantenido una dc las caracteristicas mas importantes dc esta obra, segun nuestro criterio : una clara descril,ci(')n dc lens principios cicntificos clue subyaccn en la inmunerlogia clinica, integrandolos con la liistcrlcrgia, la patolo ' gia y- coil ejcniplos clinicos . il)cscamos a nucstros lectures bucna suerte en Cl estudi<r dc csta matcria'. Ivan INI. Roitt Jonathan Brustuff David K. Male

Iconos que se utilizan de forma habitual en todo el libro neutrofilo (IM) eosinofilo basofilo megacariocito

linfocito celula plasmatica celula presentadora de antigenos niacrofago eritrocito celula dendritica celula asesina natural <== se convierte en

""

antigeno antigeno procesado bacterial virus plaquetas

anticuerpos

molecula CPH de clase I molecula CPH de clase II CD8

CD4

69y4,;i

mastocito celula de Langerhans cclulas interdigitantes

r r
Y

receptor de las cclulas T

de Fc
receptor

complemento carbohidratos inhibe ;'destruye

%.j

capilar

4- estimula ;'promueve

Los editores dc csta obra hail recibidt> cl magnifico respal (to del equipo dc Publicacion, edicicin y (fiscnu dirigido por Dianne Zack, Louisc Crosye, Pete Wilder, Linda Herrrcll y

Cathryn Waters, bajo la direccion sicntpre marayillosa dc 1~iona 1-crlck' .

Colaboradores
Dr. Frances R . Balkwill Biological Therapies Laboratory Imperial Cancer Research Fund Londres, R . U . Professor Ross St . C . Barnetson Department of Dermatology University of Sydney NSW 2050, Australia Professor Peter C . L . Beverley Edward Genner Institute for Vaccine Research Compton Berkshire, R . U . Dr . Janette E . Bradley Department of Biological Sciences Salford University Manchester, R . U . Associate Professor Warwick J . Britton Department of Medicine Royal Prince Alfred Hospital Camperdown NSW 2050, Australia Professor Jonathan Brostoff Department of Immunology University College London Medical School Londres, R . U . Dr. Ranjit K . Chandra Janeway Child Health Centre St . John's Newfoundland Canada Dr. Anne Cooke Immunology Division Department of Pathology University of Cambridge Cambridge, R . U . Professor Marc Feldmann Kennedy Institute of Rheumatology Hammersmith Londres, R . U . Dr. David Gawkrodger Department of Dermatology University of Sheffield Royal Hallamshire Hospital Sheffield, R . U . Professor Carlo Enrico Grossi Department of Immunology University of Genoa and National Institute for Cancer Research Genova, Italia Dr. Tony Hall Thallia Pharmaceuticals 69132 Lyon Cedex, Francia Professor Frank C . Hay Division of Immunology St . George's Hospital Medical School Londres, R . U . Dr. John Horton Department of Biological Sciences University of Durham Durham, R . U . Professor Ian V. Hutchinson School of Biological Sciences University of Manchester Manchester, R . U . Dr . C . M . Lockwood Departament of Medicine School of Clinical Medicine Cambridge, R . U . Professor Peter M . Lydyard Department of Immunology University College London Medical School Londres, R . U . Dr. David K . Male Department of Neuropathology Institute of Psychiatry Londres, R . U . Professor Tony Nash Department of Veterinary Pathology University of Edinburgh Edimburgo, R . U . Dr. Michael J . Owen Lymphocyte Molecular Biology Laboratory Imperial Cancer Research Fund Londres, R . U . Professor John H . L. Playfair Department of Immunology Middlesex Hospital Medical School Londres, R . U . Professor Norman Ratcliffe School of Biological Science University College of Swansea Swansea, R . U . Professor Ivan M . Roitt Institute of Biomedical Science University College London Medical School Londres, R . U . Professor Fred S . Rosen Department of Pediatrics Division of Immunology Harvard Medical School Boston, EE .UU . Professor Graham Rook Department of Bacteriology University College Lonclon Medical School Londres, R . U . Professor Michael Steward Department of Clinical Sciences London School of Hygiene and Tropical Medicine Londres, R . U . Dr. Janice Taverne Department of Immunology University College London Medical School Londres, R . U . Professor Malcolm W . Turner Immunobiology Unit Institute of Child Health University of London Londres, R . U . Professor Mark J . Walport Division of Medicine Imperial College School of Medicine Hammersmith Campus Londres, R . U . Dr. Olwyn M . R . Westwood School of Life Sciences Roehampton Institute London Londres, R . U . Professor Ian Weller Department of Sexually Transmitted Diseases University College London Medical School Londres, R . U . Professor D . C . Wraith Department of Pathology and Microbiology School of Medical Sciences University of Bristol, R . U .

Introduction al sistema inmunitario

" Ell sistema inmunitario ha evolucionado pare protegernos frente a los agentes patogenos . Algunos de estos, coma los virus, infectan a celulas individuales ; otros, entre los gtte se encuentran muchas bacterias, se multiplican extracelularmente en el interior de los tejidos o en las cavidades corporales . " Entre las celulas qua median las respuestas inmunitarias se encuentran los linfocitos y los fagocitos . Los linfocitos reconocen los antigenos presentes en los agentes patogenos . Los fagocitos ingieren los agentes patogenos y los degradan . " La respuesta inmunitaria consta de doe faces . En la primera fase, el antigeno active a los linfocitos que to reconocen espectficamente ; en la fase efectora, dichos linfocitos se encargan de organizar una respuesta inmunitaria, tras la que queda eliminada la fuente de antigenos . " Especificidad y memoria . Son dos caracteristicas principales de las respuestas inmunitarias adaptativas. La respuesta del sistema inmunitario frente a un antigeno determinado es mas eficaz si ha existido al menos una exposition previa a dicho antigeno . " Los NO ocitos ejercen If unciones especializadas . Las celulas B sintetizan anticuerpos ; las celulas T citotoxicas destruyen las celulas infectadas par virus ; las celulas T colaboradoras coordinan las respuestas inmunitarias mediante interacciones directas con otras celulas o mediante la liberation de citocinas, que inducen la sintesis de anticuerpos por parte tie las celUlas B . " Los antigenos son molecules que son reconocidas por los receptores de los linfocitos. Los linfocitos B SUelen reconocen molecules de antigeno intactas, mientras que los T reconocen fragmentos de antigeno en la superficie de otras celUlas . " Para que se produzca ell proceso de selection clonal as necesario que determinados linfocitos reconozcan ell antigeno. Una vez reconocido, se produce la expansion clonal y la diferenciacion de las celulas efectoras y de memoria . " Ell sistema inmunitario puede presenter anomalies . Estas pueden dar lugar a inmunodeficiencia, hipersensibilidad o enfermedades autoinmunitarias .

\ucstro entorno ContiCnC una cnormc \- aricdad tic agentes intccciosos I : \ irus, bacterias, liongos, protozoos y parasitos pluricclularcsl . Todos cllos Iwcdcn prmocar cntcrmcdadcs v, si sc multiplican sin ctnau-crl, pucdcn crrnducir a la nutcrte del or` ;anisim) Ittresped . La inasrwia do las inieccioncs que ctmtracn los indjti duos nornaalcs son do corta duracitin y apenas titian sccuclas . Esto se fiche a la action dcl sistema I'll nntrutario, que combatC a dichos agentes intccciosos . Como I()s inicrororganismos se prcscntan do t6rinas naun di tcrsas, es neces.aria una Bran saricdad tic respuestas innnuaitarias pare podcr cnti- cntarsc a tt)LIOS ell()" . En primer lugar, sc cncucntran las tictcnsas extcrnaS dcl organisnao, que constitus en cficaces barreras trentc a la nia\oria do Itrs 01-g :ulisnaos, nnn poctrs do hws cuales consigucn atratcsar la picl intacta 1 .1 i . Sin cinbargca, muchas tie cllos eonsigucn aicccicr al organismo a trat -es tic los cpitchos gastrointestinal o urogenital . Otros son capaccs tic jn fcctar la nasotaringe los pulntones . Algunos, comb los que hrovocan el paludisino o la hepatitis B, solo pucdcn intcctar cl organisino si penctran directamentc en cl torrents circulattrrio . La cficacia do la respuesta inrnunitaria ticpende en Bran naedida del lugar ell dontic sc hay a producido la intcccitin V ticl tipo tic agcntc hatogeno inahlicatio . La hrinacra Bran ditercncia cs la que exists entrc los patogenos que imadcn las celulas del Irttcshetl y los que no son capaces do haccrlo . - Redoes Iris virus c algunas bacterias a. protozoos sc rehroduccn en Cl interior tic las celulas dcl hucsped, por to que cl sistema innrtinitario tithe reconocen v dcstruir dichos celulas intectadas para erradicar la intcccitin . JIUCIaas bacterias y ttxios los parasitos superitrres \iten en los tejidos, en los liquidos corporalcs o en otros cspacios cxtracclularcs, por to que las respuestas trente a cstos hato,cnos son considerabIcnicnte ditcrentcs . Sin embargo, a to largo del CUt- SO tic una intcccitin, los p:tttigcnos intracclularcs ncccsitan atrasrsar la sangrc \ los liquidos tisularcs para Ilcgar hasty sue celulas diana . En csc ino inento pucdcn set- atacados por los elenicntos del sistema innnt nitario que normalincnte sc ocupan do los parasites extracclulares i ._fin. 1 .2i . En cstc capitulo sc cxplican los cicnacntos bdsicos del sistcrna inniunitanor a de I:is respuestas inmunitarias, que sc estudiaran con rnds profundidad en los capitulos 2-20 . El sistema ininunitano puctic prescmar dhrrSas anornalias, que Conduces a la apari-

citin do rcaccioncs inmunopatol6gicas, a, clue se estudiaran en la segunda harts tic cstc lihro . Sin embargo, has riot hater hint- apic cn que la fitncjtin principal del sistema ininunitario cs eliminar los :mcntcs intccciosos \ rcducir al minima los danos causados por h s injsnuas .
INMUNIDAD ADAPTATIVA E INNATA

La prinicra fast do cualquicr respuesta inniunitaria consists en cl reconocjmicnto del patcigeno o del material cxtr.aiao, pare poder iniciar dcshucs una reaction dcstinada a climinarlo . :A grandcs ras gas, las respuestas inmunitarias sc huctien tiit idir en dos categorias : las respuestas inmunitarias innatas ~o no adahtatitasl s . las

Defensas externas lisozima de las lagrimas y otras secreciones comensales piel barrera fisica, acidos grasos, comensales elimination de particulas par peso rapido del afire par los cornetes nasales bronquios secreciones mucosas, cilios acido cambia brusco de pH intestino comensales arrastre de los microorganismos con el flujo de orina

bajo pH y comensales de la vagina

Fig . 1 .1 . La mayoria de los agentes infecciosos a los clue se ve expuesto un individuo no consiguen penetrar en su organismo, sino clue son detenidos por una serie de barreras bioquimicas y fisicas . El cuerpo humane tolera diversos organismos comensales, clue compiten eficazmente con numerosos patogenos potenciales .

Introduccidn al sistema inmunitario

Pat6genos intracelulares y extracelulares vaso sanguineo bacteria fagocitada superficies mucosas celula infectada por virus
9 e s

, 0 --W--

00,

bacterias sobs % el epitelio parasitos sarHrll " -ieus tejidos corporales bacterias tisulares cavidades corporales

parasitos intracelulares

Fig . 1 .2 . El sistema inmunitario debe reconocer los agentes patdgenos y reaccionar frente a ellos en muchos lugares diferentes . Por ejemplo, los virus necesitan invadir las celulas para poder reproducirse, mientras quc los protozoos como Plasmodium spp . (paludismo) y Trypanosoma cruzi (enfermedad de Chagas), y las bacterias como Salmonella typhi, atraviesan por fases intracelulares . Algunos protozoos parasitos (p . ej ., los tripanosomas africanos) viven en la sangre, mientras que muchos de los grandes parasitos pluricelulares se alojan en tejidos u organos (p. ej ., las tenias) . Mochas bacterias colonizan las superficies epiteliales, y pueden invadir al huesped y reproducirse en sus tejidos .

rcspuestas inmunitarias adaptatit as . La dif%rcncia nuis importante quc cxistc cntrc amhos tipos tic respuesta cs quc Las reshucstas inmunitarias adaptativas prescntan tma alta especificidad con rcspecto a un detcrtninado pattigcno . Aticnaas, ]as rcspuestas innatas no se modifican teas ht csposicitm repctida a un determin ;tdo agcntc inteccioso, iientras que la intensidad do las rcspuestas adaptatisas aunacnta al it aumcntando en ntintcro tic cxpo~siciones al mismo agcntc pattigcno : el sistema inntunitario adaptatiso "" recucrda ,, al agcntc infeccioso, y es capaz de impedir quc pro\ogtte una cnfcrntcdad . Por ejemplo, en cl trio do cntcrnicdades como el sarampi6n \' la diferia, so: produccn respuest ;ts adaptatjsas yuc intiucen una inmunidad trente a la cnfcrmcdad que persists durantc el rcsto tic la \ ida dcl individuo . Por tanto, las dos caracteristicas principales tie las rcspuestas innumitarias adaptatjsas son la especificidad y la mcmoria . Las celulas yuc participan principaltnente en las rcspuestas inmunitarias son los ICLICOClt0S, true los quo: se distinguen ditircntcs tipos . Fagocitos y respuestas inmunitarias innatas. Un grupo importanto tic Icucociros son las celulas tagociticas, cntre Las yuc SC cncucntran los naonocito, . Itis macr6fagou y los politnortimttdcarcs ncutr6filos . Estas celulas SC corer a Ios nticroorganismos, los ingicrcn Y los dcstrutcn . (,omo Ios sistenms tic reconocimicnto title utilizan son primitjtos y carcntes tie espocificidad, y ICS I)ermitcn unirse a una amplia variedad tie productos microbianos, estos ICUCOCitOS stm mcdiadores tic reshucstas inmunitarias innatas . Su minion CS tin- ntar una printrra linca tic detensa f- cntc t la jnt ctjcin . Linfocitos y respuestas inmunitarias adaptativas . (>tro grupo inipolrtantc do ICttto>citos nom Ion linfocitos . I .a participa chin tie cstas celulas es cscncial en todas las rcspuestas inmunitarias adaptati%as, ya quc reconocer tic turma espccifica patoigenos indn idualcs, indcpcndicntemente de quc cstos se tocaliccn cn cl interior tie las celulas dcl hucspcd o cn cl exterior tie las mismas,

cn los Ijyuidos tisularcs o cn la Sangre . Lxisten diNcrsos tipos de lintbcitos, pero todas cllos se pueden encuadrar dentro tic dos catcgorias hasicas : Ios llnf()citOS T ~ o celulas T j c los linfocitos B (o celulas 13 ) . Las celulas B combaten a los pattigenos extracelulares y a sus productos nacdiantc la produccjtin do ;ulticuerhos, cs ticcir, moleculas quo: reconocer y se unen especiticamente a una tictcrminada molecula diana, denominatia antigeno . LI antigcno I)usde scr una molccula I,resente en la superficic de un agente patogcno o una tOXilla producida por el mismo . Los linfocitos T ejercen una scric tic acciomrs nris \ ariada . Algtmos so: encargan tic controlar CI dcsarrollo tic Ion lintocitos B \ la production tic anticucrpos . Otros cstablcccn intcracciones con las celulas fagocitic ;ts y les ;n udan a ticstruir los agentes patogenos quo: han ingerido . Tambien cxiste un tcrccr grupo tic lnfocitos C yuc rccontocen destruven las celulas infectadas por virus . Interacciones entre linfocitos y fagocitos . En la pr .ictica, cntre los lintocitos los tagocitos so: cstahlccc ttrA scric tic interacciones importantes . Por ejemplo, hay fagocitos cncargados do ingerir los antigenos v mostrafos despucs a los hnt6citon T, transfornaados en conapuestos quitnicos quc estos ultitnos son capaces do reconocer . Este proceso se denomina presentation de antigenos . A continuation, los linfocitos f liberan factores solubles (citocinas) quc actin an a los fagocitos y pronauO cn la dcstruccioin tic los pat6genos ingerido~s . Por otra parts, los anticucrpos libcrados por los linfocitos B permitcn a los fagocitos reconocer con mayor cficacia a los agentes patogcnos i_hq. 1 .3'I . Una tic las torSCCUCr cias tic codas estas interaccioncs es yuc la naavona tic las rcspuestas inmunitarias frettte a los organismos infccciosos consiste en una comhinaci6n de disersas reshucstas, algunas tic naturaleza innata y otras adquirida . En las primeras fases tic la infection predomin ;tn [as reshucstas inn .uas, pcro man adclante, los linfocitos comienzan a dar lugar a rcspuestas adaptati\as . A partir de esc momento <, rccucrdan- al pat6geno, por to yuc Si en CI titturo CI indi\ iduo ruelve a sufrir una infecci(in con el mismo pat6geno, las rcspuestas scran mas rapidas y eficaces .

Celulas del sistema inmunitario Los fagocitos ingieren y degradan antigenos y microorganismos patogenos

Interaccion entre linfocitos y fagocitos

linfocitos fagocitos faeilita el reconocimiento lp antic eru so

activacion

presentacion de antigenos

Fig. 1 .3 . Los linfocitos B liberan anticuerpos que se Linen a los patogenos y a sus productos, con to que facilitan su reconocimiento por los fagocitos, que se Linen a los mismos mediante su receptor Fct . Las citocinas que liberan las celulas T activan a los fagocitos, que destruyen el material ingerido . A su vez, los fagocitos mononucleares son capaces de presentar los antigenos a las celulas T, con to que estas se activan .

Fagocitos mononucleares. 1.1 g,rupo neas mtp()rcuttc tic :c lulas tagociticas tic % itia Lira hcrtcnccc a la estirpc tic los tagocitos mononucleares. ioti;u cstas cclulas proccdcn dc las Mulls madrc do la nlcdula ()sea, v su tnisioin CS capturar, ingcrir % ticstruir particular, cntrc ]as quc sc encucntran los agcntcs infecciosots . Para olio, sc encticntran situadas estratcgicanlentc en lugares cn los quc ticncn neaeorcs posibilidatics dc capturar clichas particulas . Por cjeneplo, las cclulas de Kupttcr rccubrcn los sinusoitics hepaticos, .e traces do los quc tluN c la sangrc, neicntras quc las cclulas A sincrialcs r- CCnllr-ere la car idad sinovial 1 fta. 1.5). Las cclulas dc csta cstirpc quc circulan cn la sangrc sc dcnominan neonocitos . En un neonncnto tlado, cstas cclulas neigran hacia los tcjidos, cn dondc sc transtorne :ue cn neacroitagos tisularcs . Estas cclulas prescntan antigenos a Its lintitcitos T neue eficazmcntc, aunquc la celula clue dcscnlpena con near or cficacia csta titncion dc presentacion dc antigenos a las celulas'I- en reposo es la eclula ticiedritica intcrdigitantc i s. cap. 2) . Polimorfonucleares neutrofilos. ()trot grupo inepon-tantc dc cclulas fagocitjc .e s s<tn Irtti Ptfinlotrtonuclcarcs ncuu-ofilos, yuc SC sudcn ticnoneinar scncillanlcntc ncutroflos o P;s1\ . Los ncu trrifilos soil los ICntOcitOS mss abundantcs cn la sangrc, e . proccden do los nlisnlos prccursores precoccs quc los neonocitos V los nlacrofagos . :M igual quc Iris neonocitos, ante cicrtos cstineulos migrate hacia los tejidos, pert a difercncia dc epos son celulas de id :t coma, yuc ingirrcn Ives sustancias cstraflas, las destruVen v, a Co lltinuacicin, nrticrcn .

CELULAS DEL SISTEMA INMUNITARIO

Las rcspucstas inneunitarias estan nlediadas por ditcrscts tipos dc . cclulas e por ]as neolcculas solubles tiuc sccrctan . Aunquc los litlfocitos son cscncialcs cn totias las rcspucstas inneunitarias, tanlbicn intenicnen otras tipos dc cclulas, ~-a sea trulsiniticndo sefiales a his lintitcitos o respondicndo ante las citocinas sccretadas por los linfocitos I - o los nlacrofagos . En la fqur-rt 1.4 se nluestran ]as principales cclulas \- neolceulas yuc inter\ icnen en las rcaccioncs inneunitarias .

Existen dos tipos principales de linfocitos encargados del reconocimiento especifico de los antigenos: las celulas B y las celulas T

Lots lintitcitos strn Lts iini :.ts :i'IUIJs :.th;tces tic rc:()M'crr cspc:if cateectttc a los agclucs patogenos, \', por Canto, epos Soil lots ctlcar gatios tic iniciar ]as rcspucstas inneunitarias adaptatis-as . Todos los lintitcitos proccdcn tic ]AS celulas madrc dc la needula ores, pcro

Resumen: Componentes del sistema inmunitario

leucocitos celula elula B linfocitos lirrfocito granuloso grande fagoclto mononuclear fagocitos celulas auxiliares otras

celula T

neutrofilo

eosinofilo

basof-I(-:

mastocito

plaquetas

ae'ulas tisulares

sv~v
v

,ivrv

mediadores anticuerpos
solubles

citocinas

complemento

mediadores de la inflamacion

interferones, citocinas

Fig. 1 .4. En esta figura se muestran los componentes principales del sistema inmunitario, y se indica cuales son las celulas que producen los diferentes mediadores solubles . El complemento se sintetiza fundamentalmente en el higado, aunque los fagocitos mononucleares simetizan pequenas cantidades del mismo. Observese que cads celula

sintetiza y secrets solamente un conjunto determinado de citocinas o mediadores de la inflamacion. Ademas, dos tioos de celulas dendriticas tienen imp_Qrtancia para la presentacion de antigenos a los linfocitos .

Introduction al sistema inmunitario

Fagocitos de la estirpe de fagocitos mononucleares

los lintiacitos T maduran cn CI time, micntras quC IOS lint6citos B maduran cn la propia mcdula ()SCa i;Cn lo, mamilcros adultc,s i . Celulas B. ('ada cclula B Csta programada gcneticamentc para codifiCar un receptor dc supcrficic CSI)CCifiCO dC un ;uatigcno dctcr-

celulas de la microglia cerebral

minadl,. Una \ez quC HIM cclula B rCCO 11000 a su antiigcno especi liCO, ,C naultiplica y sc difcrcncia, dandta lugar a cclulas plasmaticas quc son capaces dc producir grandes cantidades dc una forma so111111C dC la nuaICCUla dCl rCCeptor, quC 1,uCLiC SCr sCCretada. EStas molcculas se dcnominan anticucrpos . Son gnrxlcS "IuCOprotcinas quc SC CnCUCntran cn la sanprc \ cn Ios liquidos ti,trIarCS : CUn10 son practicameruc idcnticas al receptor original, son capaces dc unirsC al antigcno quC acti\() inicialmcntc a las celulas B.

macrofagos residentes en los ganglios linfaticos y recirculantes celulas madre precursoras de la medula osea

Fig. 1 .5 . Muchos organos contienen celulas fagociticas procedentes de los monocitos sanguineos, quc proceden, a su vez, de la mcdula osea . Los monocitos escapan del torrente circulatorio y emigran hasta los tejidos, donde se convierten en macrofagos . El conjunto de celulas fagociticas presente en los diferentes tejidos se denomino antiguamente sistema reticuloendotelial, pero en la actualidad se piensa quc todas estas celulas pertenecen a la estirpe monocitica .

Celulas T . Hay \ arias tipos dc cclulas 1, Cada uno dc los cualcs cjcr :c ditcrcntcs tuncioncs. Gnu dc Ios grupos interacciona cent la, cclula, 11, \ pronauC\c su naultiplicacioin, ditercnciaci6n \' la sintcsis do anticucrpos. ()tro grupo intcracciona con los fagocitos mononuclcarcs, a\-udandoles a dcstruir los patogcnos intracclularcs. Estos dos grul,os tic cclulas T sc dcnominan cclulas T colaboradclras i Ttt, dcl inglc, T-helped . Un tcrccr grupo dc cclulas T sc cncarga dc dcstruir ]as Celulas dcl Itucspcd infectadas por virus u otros agentes par6gemas intracelulares . Este proceso sc dcnomina citotosicidad, por to quc cstas cclulas T sc dcnominan cclulas 1 citot6zicas i Tt l . En Cualquicra dc los trcs casos, para quc las Celulas T sc acti\ cn tiencn quc rcconoccr a su an tigcncl, pero solo son capaces de hacerlo Cuandca dicho antigeno sc prc,cnta cn la supcrficic dc la otra cclula por ] .is dencaminadas naolcculas ( TH . I'ara cllo, utilizan un receptor cspccifico, dcnominado receptor dc anti,,cno dc la, Celulas T I F('R, dcl imglcs T-0rll )-eceptor) . Esta ntol000la csta rclacionada, tanto en Ihncia'm coma en estrUCtura, Corn Ios ;ua6CUerpos dc supcrficic dc las Celulas B, quc tambien dcscnapcnan cl papcl dc rcccptorcs dc antigcno . Las cclulas T cicrcen sus CtcCtOS HCn nacdiantc la lil,cracic'an dc protcinas SOlublcs, dcnominadas citocinas \ cncargadas dc la transmisitin dc scnalcs a otras Celulas, o bicn mcdiante intcrwcioncs dircctas con earns Celulas . I-:n la ,felura 1.6 sc rcsumen las funcioncs principalcs dc Ios linfocitos .

Las celulas citotoxicas reconocen y destruyen otras celulas quc han sido infectadas

l la\ algllnos tlp<ri & :CIUlaN CapaCC, dC 1h'stl llll' a otl',a\ :CItIIaS, sicndo probablcnacnte ],is cclulas I -t la, ma, map,rtantcs dc cstc ~~ruho .

Resumen: Funciones de

los

linfocitos

f~>presentacior detigenos an

TH

citocinas

production de anticucrpos

organismos intracelulares en Ios rnaCrrifagos

celulas infectadas por virus y algunas celulas turnorales

Fig. 1 .6. Las celulas B producen anticucrpos, mientras quc las celulas T colaboradoras (TH) son estimuladas por las celulas presentadoras de antigenos (CPA) y por las celulas B para producir citocinas, quc controlan las respuestas inmunitarias . Tras su activacion, los macrofagos destruyen los microorganismos intracelulares. Las celulas T citotoxicas (TO y los linfocitos granulosos grandes (LGG) pueden reconocer y destruir celulas diana pertenecientes al propio huesped.

Mediadores solubles de la inmunidad

tos, (Acno111inatto% linl()Cilt)% gr,lnuIOsos grant1cs i I .GG i, yuc CS capaz do tictcctar las pcculiaridadcs supcrfciales do tliccrsas cclulas tunuoralcs ydo I as cclulas intcctadas poor \- irus . Los I.G(i t1anan cstas cclulas liana, pero, al contrarioo yuc Ia% cclula% I*( , re sultan muc cficaccs cn cl rcconoocilnicnto tic cclulas yuc carccen o hen pcrttitlO %us nulecuLI% ( l'l l . E,,tc tip) tic acticitiad so: sucIc denominar :nticidati acsina natural \K, dcl inglo uatrrrrt1 killrrl . fanw loos ntamitagoos conlo I(o,, 1 GG puccicn rccoal0ccr dcstruir algtlnas celular liana Io patoigcnoo%i yuc hayan %idol 1-c cubicrtas prcciamcntc con anticuerpos cspccifco% .

Linfocitos granulosos grandes. E\istc un grupo do lintioci-

Polimorfonucleares eosinofilos . I :stc cs ton grupo do Icucoocitos cslcci .llii,uioos, yuc sc s1ICICII dclmminar sintploncntc coosi ntifil0n, c,lh .ltcs 01c assay ti,ui,lr a kor grander 11,lr :isitoos c\tracc lularc%, conlo loos csyuirtoomanas .

Txias Otas cclulas darlan a %us difercntcs oobjcti\o s nlctiiantc 1 .1 liberacioin cn la proximitlact tic loos mismoos tlcl contenidoo tic %us gr :inuloos intracclularcs . LAS cclulas citootoo\ic ;t% liberan tanlbicn otras moolcculas dahinas quo: no x alnlaccnan cn los gralmho% .

sistcma inmunitario. Poor cjcnlplo, dctcrminados microorganisnlo% actican cspontancanlcntc cl sistcma ticl complcnlcntoo, a tratc% tic la dcn0u11in:ula %Ia altcrnatica, ciando lugar a una tcaccion de nattiraicza innata c incspccifica . Coomoo consecucncia do c%ta acticacioin, cl mit:r(mrgani%mo yucda rccubicrto tic molecular dcl complemento, to yuc conduce a Sit tagoocitosis . EI sistcma dol conll,lcnlonto tanthicn 1)ucdc set acticatioo poor anticuerpos uniti0os ,t la sulxrficic old 1latoogcno ipoor ht -\ia clasica-), partici panda, cn cstc caso, en una rc%pucstA :ulal,tatica y cspccifica . I.:l acticaci(in dcl coomplcnlcnto cs tlna rcaccicin en c,ncacla, en la yuc catia ono do loo% coomp(mcntc% actua %ccucncialmontc m)brc cl siguicntc, do una forma parccida a comoo actua cl sistcma do cuagttlacioal do la Sangre . Una ccz acti\adoo cl complcntcntoo, ca sea poor la \Ia clasica oo poor la altcrlmtica, sc lil,cran pcptittios capaccs tic cjcrccr las siguicntos accioncs : " ()pmmizacion do micnooorganisnloo%, pare tacilitar 1-u calotacioon c dcstrucci(in intracclular por parts tic Ion tagocito %.

La inflamacion esta bajo el control de celular auxiliares

Otrascdulas acnl .111 t~1lll~r IIlrd,,rl()t .ls tic h1 ntll .lnl .uiorn,+u umiom principal cs (% . mar adclantc) ,itracr a los ICLICo nil( os % a loos nlctliad0 oros SOIu111CS do la innltulidatt haci,t his ccrcamas ticl puntoo tic inlcecioon .

Bas6filos y mastocitos. f-:ua% cclulas c%tan rcl,lctas do gnuml()%

quo: co nticrun dilcrsor% nlcthadoorcs yuc proonmcrcn la intlanlacioin en loos tepd0s circundantes, I,,,too% nlediatiorcs soon liberados cuando la CCIuIA I-CClhc MIA SCIIAI dctcrminada. l ambim son capaccs tlr sintotizar y sccretar cierto% mediatio ores yuc C01111-01 .111 Cl curs, tic Lts respuestas innmnitarias . I .os ma%tocitos sc encucntran situadoo% cn las prminudader tic Ion caste %anguincos do torn()% loos tciido%, c algullo % do lo% mcthadoorcs yuc lilxran cjcrccn su ctccto %oobrc la% cclula% prcxntes en hts 1laredes ca, .'sculares . I .os basofilos cunlplcn tunciooncs parocidas a I,t% do los nlastoocit(^, hero se trata tic cclulas circulanics.

" Atraccioin tic Ion tagoocitn hacia loos lugarc% do infccci(in lyuiIllloot,l\Is I . " At11t1Crlflw dol tlujoo san9uinco Ilacia CI lugar cn d0nldc SC ha proulucidoo la actitacioin, c ;uuncntoo tic I,t pcrnlcabilichtl cal~iI,tr frcntc a las Inoolcculas plasnl :itica,, . " Inclucci(in de dc%pcrtccto% en la% mcntbranas plasniatica% tic ]a', cclula%, la% bactcrias granlncgati\aas, loo% virus rccubicrtoo% u otro% oorganismos yuc hayan proococadoo I,l aailacioin . ,i su tcz, esto 11n1CC c c011ducir ,l la lisis tic la cclula oo t1cl \irus atcctatioo, con la coon%it;,uicntc rccuccioin tic la cantidatl tic particular intcccioo%as. " I .ilxr,tcio on do mar nutliadowes intlanlato nio n 1>,or party tic Io n masto citoo% . Estas tuncioonc% c%tan repro%cntada% csqucntaticanlcntc cn la,~qura 1.- c %cran o%tudiatlas con details cn cl capituloo 4.

Resumen : Funciones del complemento

( complemento

Plaquetas . Las playucta% tambicn pucclcn sccrctar nlctliatloorc%

do Lt mll.u11acion cuando %on acticada% cn cl proceso do tromN);;rncsis oo ctt presencia tie conlplejos antigcno-anticucrpO .

r'

MEDIADORES SOLUBLES DE LA INMUNIDAD

En las rc%puc%tas innlunitarias inter% - icnen nxolcculas do natura leza nun tli\crsa . Entrc cllas sc encucntran Ion anticuerpos y Lis citocinas, yuc I,roxiuccn ION IIIIIiwClt(w5, asi corm() nlnlclrs Otras nlolccula% quo: so: pucdcn cicicciar noornlalmcntc cn cl %ucroo. l a concentracion serica tic algana% do cstas prootcmas ;ulmenta r,ipidamcntc en cl curs, do la% inlcccioncs, poor ho yuc sc cicnominan protonas tic talc aguda. Una do cllas c% la prootcina ( : rcactica i PCR!, ct110o nombre sc dcbc t su capacidad pare unirsc a la prootic IOS ncum0C000% . Fsta union, yuc sc ticnomina oollsotcina ( ; nizaci(wn, t:tcilita la ingcsti('on tic las bactcrias poor parts tic low', la gocitos i t. hR . 1 .MI . Sc disc quo: Ia,, nloolccula% yuc pronltteccn la fagocitosis, coomo los anticucrixos, cl complemento y la protein:) C. rcactica, sc comporlan (onto opronina%.

bacteria% 1 . Isis I,

"40
!

1cc c'c t . fagocito 2. quimiota~ __ 7l

vo~
0*4 bacteria% 3. opsonizacibn ___ .

Las proteinas del complemento son mediadores de la fagocitosis, controlan la inflamacitin e interaccionan con los anticuerpos en el proceso de defense inmunitaria EI ,lItrrIIJ dc l k ()Ill} " Icntcnt' r i o nest a tic url,t% ?11 pro )tcums sell. .%,

coca tiinciom prmcih .tl is trontrtolar la intlamacion . Los di%tinto % conlponclms intcraccioman clttrc si y con ootrcws clement,,, ttel

Fig. 1.7 . 1. El sistcma del complemento es capaz de lisar las membranas celulares de mochas especies bacterianas . 2. Los productos del complemento que se liberan en esta reaction atraen fagocitos hacia el lugar en donde se ha producido la misma (quimiotaxis). 3. Los componentes del complemento recubren la superficie bacteriana (opsonizacion), con to que los fagocitos pueden reconocer a las bacteria% e ingerirlas . Estas reacciones pueden ser desencadenadas bien por la capacidad intrinseca del complemento para reconocer algunos componentes microbianos, o bien debido a la presencia de anticuerpos unidos a la superficie del microorganism, .

~itroducci6n al sistema inmunitario

1 ::1 tcrntino citocina SC aplica .t tin gr:ut nunuroo cic moleculas di 1CI'CntCS. CLiVa misic'm cs transmitir senales crurc cclulas Cn CI cur s(t do una rCSpuCstt innatuaitaria . I(tdas ]as citocinas soil protcinas o peptidos, t. algunos IICSall adctsados 1/6carcs (gltrcoprotcitms . Las citocinas sc puccicn clasificar era distintos grupos Ias yuc sintetiZan los linfocitos SC StiClert denorninar linfocinas . A continua ci6n, sc conuntan hrcwmcntc Ias principal" clascs dc citocinas . Interferones (IFN) . Estas citocinas soil "pccialnicntc importantcs tiara c\itar la discminacion do: cicrtas infcccioncs Siricas. Algtim os intcrteroncs ( IFNc1 c 11=\j3 } son prctdUCidos por la propia cclula intcctada; otro, cl IFN j, Cs prcrducido por detcrrninadas cclulas T acti\adas . Lets IF\ induccn rcsistcncia ti-cntc a lots Virus ell ]AS cclulas dc los tcjidos no infcctados I; .fa. 1 .8) . Sc produccn ell [as fries inicialcs dc la intcccioin ~. constituvcn la primera linca dc dctcnsa tiCnte .t nurchos virus.

Las citocinas son mol6culas diversas que transmiten serfiales entre los linfocitos, los fagocitos y otras cclulas del organismo

Resumen: Interferones (IFN)

antigeno

Interleucinas (IL) . Las intcrICUCinas Soil tin CStCrlSO grupot dC ci, tocinas idCSkj, 11, 1 a IL-1 ;+ quo: soil producidas tundanacntalntcrttc poor la . cclulas T, aunquc los tagctcitcas m(tnonuclcarcs algunas cclulas tisularcs tambien produccn algunos cic cllas. Ejcrccn firnciones rtltn \ariadas, per(-) la ntisi6n dc la macoria dc cllas es inducir la multiplicacioin y difercrnciaci6n dc otras cclulas . Cada intcrleucina act6a sohrc till tipo dC cclulas COIICretct, que CxprCsan Ios rcccptoorcs adCCUados part era inICrlcucina . Factores estimuladores de las colonias (CSF). l,os lacuorcs cstinaatladon-CS dC Ids Cctlotnias i ( :SF, dcl inglcs colorrrstimtrdatill r1 filttorsi interviencn ell la nnrltiplicacio,n \ iilcrcnci .lci6n dc Ias cclulas naadrc do la rnedula circa \ . dc Ion prccursorcs dc los Icucocitos sam(Itdneos . La protpoorcion do Icos distintos tipos dc cclulas que Se produccn ell tin monacrnto dads, dcpcnde, en parts, dc la proporci6n de dilcrentes C .SF prcsentc . A1 :;uncts ( .SF tallahicn protnuc\'cn prooccsos dc ditcrcnciacion postcriorcs, quC SC prodUCCrt una \ -CZ (file IX, c%IUlas hall abandonado la mcdula 6sca . Otras citocinas. EMIT cstas SC CnCuCntran Icos tactores dc necrosis U111101 -al, 1'\Fu t FNFP I del inglcs turrwrcr 111-i rosis /'actcn-}, c CI tae tcor dc crccimicnto transt6rnaador +; TLiFj3, del inglcs ti-1711.y in-miuq growth /actorl, que ejercen discrsos ctcctos, aunque soil CSpCCIaImente impoorttntcs cn las reaccioones inflam:uoorias v Citot(')sicas .

Fig. 1 .8 . Cuando las cclulas del huesped son infectadas por virus, pueden producir interfer6n . El interfer6n u iIFNO y el interfer6n 13 (IFN1t1 son producidos por diversas cclulas; el interfer6n y iIFN -tl, por algunos tipos de linfocitos T, activados por el antigeno . Los interferones ejercen sus efectos sobre otras cclulas del huesped, en las que induccn resistencia frente a la infecci6n virica . El IFN;- posee, ademas, muchas otras propiedades .

Resumen: El anticuerpo : tin adaptador versatil

nii( :rr :bro 1

microbio 2

FI ,~i+t 3 rl i i , 'iun especifica

ausencia de uni6n

Los anticuerpos se unen especificamente a los antigenos y, a continuaci6n, actuan como mediadores de otros efectos secundarios
I .((s tires ,11111c
III

Ict-poN -1h, del inglcs autilzodicsl, dcnonainadoas tans naunooglohulinas {,Igl, soon tin grupo dc moleculas scricas producidas por Jots linfocitos B. De licclao, como sc ha indicado anteriornacnte, sc trata dc Ias tin- mas setIubICS dc los receptorcs do antigeno do Ias cclulas B. -FOdo1 Icos antiarcrpos prcsentan la misnia estruCtura hasica, pert la region por la (file sc uncn al antigeno es proopia dc cada uno de calos . En gcncral, each :u1ticuer pot SC puede unit dc t6rnaa especifica a tin 6nicct antigeno . Nlicntras que una partC cic la naolecula dc anticuci-po SC Line al antigeno i'la region Fah, del inglcs li-a~rxrntarrtirteu hindiucfl, otras rcgiones interaccionan con dicersos clenaentos del sistcma inmunitario, como los tagocitos o alguna dc Ias moleculas del complcnacnto . Fs decir, los anticuerpos act6an como adaptadores dotados dC una Bran sersatilidad, sicndo capaces dc Ccntjuntar varios clemcntos del sistcma inrmmitario con ohjcto dc recconcocer a agcntcs pat6gcnos cspccificos y a sus prcxlurtos +,tin. 1 .9j . La regi6n dc la ntolccula cic anticuerpo quC interaCCioxaa corn Ias cclulas del sistcma inmunitario sc dcnonaina rcgicin Fc . Los netitro'dilos, Icrs naacr6fagos y otros fagocitos mononuclcares pctseen en sir supcrficic recrptores dc Fc . POI- tantot, Si tin anticucr-

activaci6n del complemento en presencia de Fc

Fig. 1 .9. Cuando tin microorganismo carece de capacidad intrinseca para activar el complemento o para unirse a los fagocitos, el organismo dispone de unos adaptadores muy versatiles: los anticuerpos. Cada individuo puede sintetizar millones de anticuerpos, capaces de reconocer los microorganismos mar variados . Asi, el anticuerpo de esta figura se tine al microbio 1 a traves de su regi6n de uni6n al antigeno (Fab), pero no es capaz de unirse al microbio 2. La regi6n Fc puede activar el complemento o unirse a los receptores de Fc de las cclulas del huesped, sobre todo de los fagocitos .

Respuestas inmunitarias

po se tine a tin pat6geno, Itts tagocitos se pueden unir al ntisnto mediantc sits receptores Fc . 1>c csta manes, cl Itattigcno pucdc ser ingcrido fit ocitado ) v destruido en cl interior del tagocito . Sc dice que Cl antiCUCrpo se cornporta COrtto una opsonina . Los fagocitos pueden rcctntocer particulas opscnizatias por cl Contplenicnto activado (C3b ;l o por anticucrpos, pero la tagocitosis es especialmcntc eticaz Cttando cstan prcscntes ambos tipos tic mo. 1.1(1) . lccula i_/g

Resumen : Opsonizacion
fagocito opsonina union

ANTIGENOS
Originalmente, se aplico el tcrmino antigeno a cualquier molccula capaz do inducir la prodUCCicin tic anticucrpos espcciticos por parte do las Cclulas B (el tcrmino proccde del inglcs, antthod% , 7cucrator, gcncrador tic anticucrpos) En la attualidad cl tcrntino . se utiliza en tin sentido rt1LIC110 mil arnplio ) se aplica a cualquicr nwlcCUla que pueda ser reconocida especificamcnte por Cualquicra dc los clcnicntos del sistcma innrtmitario ad aptativo,

3 anticuerpo ++

cs decir, las Cclulas B, las Cclulas T o ambits. Las molcCUlas de anticuerpo no sc linen a la partictda Completa tie agente intcccioso . Segtin sit csliccificidad, cada uno dc los anticucrpos sc unc solantentc a una dc las ntuchas nt0IcCUlas ialltigenos i prcscntes en la supcrficic del micrtxtrganisnto . Ptredcn ezistir discrsos anticucrpos trente a tin rnisnto pat6geno, cada uno dc los Ctrales se unrsa a tin antigeno ditcrcntc do la supcrficic del mismo . (lada anticuerpo se tine a Un .t rcgirm concrcta do la molccula tie antigeno, que se denontina epitopo. Un antigeno concreto puecic contcner diferentes epitopos o tin conjunto dc epitopos repctidos iJIr7 . 1 .11' . Los anticucrpos son espcciticos dc tin cpitolxt, no do la nxtlccula dc antigeno contplcta. En cl capitulo 8 sc ezplicari c6mo sc las arrcgla cl sistcma inmunitario para gcncrar la Bran divcrsitiad dc ntolcculas dc anticuer Ix) necesaria para que tut indisidu<t sC pucda enfrentar a todos Irrs a69010s tiifCrCrltC% :t h,s IIUC sC trri C\I)ucsto a to largo de sit t ida.

anticuerpo y fraction Cab del complemento

Fig. 1.10. 1. Lo s fagocitos poseen capacidad intrinseca para unirse directamente a las bacterial y a otros microorganismos, pero la fuerza de esta union aumenta mucho si las bacterial hall activado antes el complemento . 2. En ese caso, se habran unioo a C3b, de tal forma que los fagocitos se pueden unir a las bacterial a travel de sits receptores de C3b. 3. Los organismos que no activan el complemento, o to activan en poca medida, pueden ser opsonizados con anticucrpos (Ab), que se pueden unir a los receptores de Fc de los fagocitos . 4. Los anticucrpos tambien pueden activar el complemento, y, cuando el microbic, esta opsonizado simultaneamente con anticucrpos y C3b, los fagocitos se Linen al mismo con gran eficacia .

El reconocimiento del antigeno es la base de todas las respuestas inmunitarias adaptativas

I a~ trl .ila,'t :.utrhicn urn tapaCes tic rcc()jjc)CCr .utti~, cnos, pero reconocen :utugrmrs que sC titrntan cn cl interim tic cicrtas Cclulas r que stn expucstos en la superficic tic las ntisntas cn forma dc pequenos tragnrcntos pr)lipepticiicos . Por cicntplo, una cclu la huespcd que sutra una inteccion s inca espresara pcqucntts tragmcntos do protcinas siricas en sit supcrfcie, por to gtre sera reconocida do inntediato por Ias cclulas T citottixicas . Los fragmentos tic antigeno son prcscntados en la supcrfcie cclular por tin grupo dc ntoleculas especializadas . Estas nit lcculas cstan codificatias cn 1111 conjunto dc genes denoniinado ccnlplejo principal de histocontpatibiliciad { ( :PH i, por to clue sc dentnninan moleculas CPH. Las celulas'i' rcconoccn a los pcptidos antigcnicos asociatios a estas molcCUlas CPI 1 mediantc sits receptores cspecificos dc antigeno ~,TCR ;s {hq . 1.1?1 . Se debt teller sicntprc prcsentc que los antigenos inician e impulsan todas las respuestas innrtinitarias adaptatisas. El sistcma inmunitario Ira esolucionado de tal forma que cs capaz tie reconocer antigenos, tic ticstruirlos v dc chntinar sit fucnte dc proce dencia bacterial, Cclulas intectadas con s irus, etc. i. Una s ez que el antigeno tiesaparece, la rcspucsta ininunitaria sc intcrruntpe .

Resumen : Antigenos
antigeno anticuerpo

RESPUESTAS INMUNITARIAS
Recordentos que una rcspucsta ininunitaria consta dc dos ftscs: 0 Reconocintiento del antigeno . " Reaction para erradicarlo. En las respuestas innttinitarias adaptatis as, las Cclulas cncargatias de reconocer al antigeno son los fntitcitos, v cl proceso que hate csto positble es la selection clonal .

Fig. 1.11 . Las mole : iil :js a.u: in(jucen la production de Ab se Ilaman antigenos. Cada molccula de Ag posee determinantes antigenicos, denominados epitopos. Los epitopos de tin antigeno (Agt) suelen set diferentes de los de otro (Ag2) . Algunos antigenos (Ag3) poseen epitopos repctidos . Los epitopos son estructuras moleculares capaces de ser reconocidas pot los Ab y los receptores de las celulas T del sistcma inmunitario adaptativo . Cada anticuerpo receptor reconoce tin epitopo concreto, y no al Ag completo . Hasta los microorganismos mas sencillos pueden presentar muchos Ag diferentes, que pueden set de naturaleza proteica,lipidica o glucidica.

Introduction al sistema inmunitario

Reconocimiento del antigeno por las celulas T

Seleccign clonal de celulas B seleccion inducida por el antigeno

molecula CPH que presenta el peptido peptido antigenico unido a la molecula CPH receptor de la celula T que reconoce el conjunto CPH?peptido

Fig. 1.12. Las celulas T reconocen antigenos que se forman en el interior de otras celulas, como peptidos viricos procedentes de celulas infectadas . Para ello, se Linen especificamente a los peptidos antigenicos expuestos en la superficie de las celulas infectadas, que son presentados por moleculas codificadas por el complejo principal de histocompatibilidad (moleculas CPH) . Las celulas T se sirven de sus receptores especificos (TCR) para reconocer la combination concreta de molecula CPH y peptido antigenico . AI contrario que las celulas B, que reconocen tin fragmento del antigeno completo, los epitopos que reconocen las celulas T estan formados en parte por la molecula CPH y en parte por el peptido antigenico .

celulas plasmaticas

celulas de memoria

production de anticuerpo 2 Fig. 1 .13. Cada celula productora de anticuerpo (celula B) esta programada para sintetizar tin unico anticuerpo, que se situa en su superficie y actua como receptor del antigeno . El antigeno solamente se Line a aquellas celulas B que posean el receptor de superficie apropiado (en este ejemplo, la celula B n. 2) . Asi, se promueve la proliferation y diferenciacion de estas celulas, que dan lugar a celulas productoras de anticuerpos y a celulas de memoria, que persisten durante mucho tiempo . Todas las celulas que surgen en este proceso son especfficas de tin mismo antigeno .

La seleccion clonal consiste en la proliferation de las celulas que reconocen tin antigeno especifico

( :acid lillti'Citcr it .t NC .t and CCItlld li () HIM cCIuLI I - Csta prcwra ntaclo gcnctic:uncntc para reconocer practicarrncnte do forma csclusic a a till iulico antigcno . El sistcma inmunitario cn conjunto PuCdC reconocer especificamente miles do: antigcnos, do: tal torma quc los linfocitos quo: rcconozc :ut tin antigcno dctcrntinado dcbcn constituir una fraccicin mintiscula dcl conjunto total do: lintocitos . Por tanto, ~coimo cs posible gcncrar una rcspuesta inmunitaria adccuada trcntC a tin agClltC illfcCCioso? La rcspucsta cs que, cuando till antigcno Se unC a Ids CSCdSdS celulas capaces do: rcconocerlo, dichas celulas iniiian till proceso de proliferation n1asisa . AI cabo do: pocos Bias, su numcro cs Suficicntc como Para cjcrccr and rcspuCStd innwnitarid cficaz . Es dccir, cl antigenic se Iccciona Ion clones do: Cclulas quc soft CapaCCS de unirsc a el ~_ prornunecr su proliferation, Ctt tin proceso denondinado seleccion clonal ;frf. 1.131 . FSloc Ocurrc canto cn cl caso do: Lts celulas B como cn CI tic Ids celulas I' . Cabc prc1-Iuntarsc como Cs POsib1C quc el sistcma innntnitario , scpa . , que anticuerpos cspcciticos ra a ncccsitar a to largo tic la cida do: till indiciduo . En rcalidacl, no to sabc . El sistcma inmunitario genera anticuerpos quc' pucden rcconlocer unit cnormC c aricdad dC antigcnos, induso antes do: enccntrarse coon IcIS ntisntos . hludtos do: cllos nunC1 scrap utilizddos Pard ciCfcndcr al indisiduo trcntc a una intcccicin . Sin embargo, dada cl Sit Bran numcro do: organismos inlccciosos v capacidad para n1odificar sus antigcnos mediante mutaciones, la prescncia do: todos

cstos anticuerpos cs ncccsaria, aunque pucdc scr quo: nunca so: utiliccn . Los lintocitos quo: 11 :111 sido Cstinurlados mcdiantc la union a sit antigcno especifico iniiian los primcros pasots quo: conduces a la dis isicin CClular . Fn primer lugar, ezprcsdn rcccptorcs quo: Its permitcn responder a Ices citocinas proccdentcs dc otras Mulls, inductoras do: la proliferation. En al ;11unos Cdsos, los propios lint()citos secrettn lintocinas . \ormaltnente se produCCn c :u -ic~s Ci clos do: division antes do: la ditcrenciacicin cn celulas illaduras, till proceso controlado tambicll por Ids citocinas . Por cjentplo, las celulas 11 C11 tast do prolifcracidn tcrminan madurando, dando lugdr a celulas plasmaticas produCtctras do alltiCucrpos . Algunos do: los nucc os linfocitos pcrduran induso cuando sc ha supcrado la inlcccion, \ qucdan disponihlcs Para tolscr a scr cstintulaclos cn caso do: quc se suelva a producir tin nuecoc Cncucntro eon cl mis mo antigeno . Estas celulas se cicnominan celulas tie memoria, ca quc rccucrdan a su antigcno CSPCcifiCO . Las celulas do: memoria m,>> I :t c!c la inntunidad a largo plaza tiCntc a tin patogcno 'ictcr :nin .td(,-

EI sistcma inmunitario dispone de diversos mecanismos efectores para enfrentarse a la inmensa cantidad de patogenos diferentes

td sistcrn.t inmunitarioc hucdc ~lcaruir a I()s l" atcwcmrs do lit -Crsas formas, coda una oic las ctralcs sc ddapta al till() dC trltcCCIUn V a la talc (ICI Ciclo c ital c1Cl organismo infccti\ o. Estos mccanismos do: dctcnsa SC suclcn dcnommar sistcnms ctcctorcs.

Respuestas inmunitarias

Fig. 1 .14. Microfotografia electrdnica del proceso de fagocitosis . En estas microfotografias se muestran los diversos estadios de invaginacion, que culminan en la internalization durante el proceso de fagocitosis . Despues de unirse con una particula opsonizada, las celulas fagociticas la van incorporando en su interior de forma gradual mediante la emision de seudopodos (1-3) . que posteriormente se fusionan (4) y el microorganismo es endocitado en un fagosoma (5). (Por gentileza del Dr. A. Stevens y profesor J . Lowe .)

Neutralization. I .a ncutralizacicin cs uno dc Ios sistcmas cfcctorcs nri scncillos \ ,c basa cn yuc Icas anticucrpos p11CLICn dCStruir ciertos pat(igcnos sinapicrncntc mecliantc la unicin a los nais mos. Por cjcmplo, los anticucrpos frcntc a Las proteinas dc la cubicrta czterna CAC At11(), rlnOCir115 I IgCntes C.u(s<uates del rcsfriado i inapiclcn yuC Las particular c iricas se unan a las Cclulas c1el hucspccl \ Las intcCtcn . Fagocitosis. ( on naas trccucncia, CI papcl principal do I()% anticucrpos cs la acticaci(~n dcl complcmcnto o la ops(mizaci(m dc [as partiCtrlas, yuc pronr11cvc su ingcsti<m por paric do los tagocitos. Lhaa crz que las Cclulas fagociticas SC 11nen a 1111 microbio ops(mizado, 10 rodcan ntcdiante la cmisiain dc scudlrpokios . Es tos se uncn finalnactlte cntrc si, Con to yuc CI microorganismo pcnCtra Cn la cclula tagucitica ICnIIIaCitoSIS), yucdando confinado 1 .14) . Los tagocitos pucdcn en cl interior dC un tag(),oma tratar cl material ing,Crid(r CIC chsrrsas mantras. 1 1 01- cicnaplo, los naacreitagos reclucen cl oxigcn(( molecular \ clan lugar a Corn pue%tos rCaCtiVos CIC oxigcn(~ {( :R(yuC son sccrctaclos laacia cl interior dcl fagosoma . Los ncutrcifilos conticncn lactoterrina, yuC forma complej(rs Coil cl hicrro \ pri\a a ]as bactcrias dc dich(~ metabolite cscncial . Finalnacntc, I(rs granules \- los lisosonaaas cc lularcs se fusionan Con cl ta' .;os(maa, c CrtiCnCIO al interior dcl naisnao sus cnzinaas a . dando lugar a un tagohsusonM, Cn lara O intCrior sc di ;_;icrc cl material fagocitado i_/it . 1 .15 15). Los mccanismos implicado, sc cstudian Ccm CctalIC Cn los capitulo, 10 y 17 . Reacciones citotoxicas y apoptosis. l .a s rcaccioncs Clio to .sicas son sistcmas ctcctorcs dirigicl((s Contra Cclulas ccnrapletas, que suelen scr cicnaasiad(r grancics come para Ixrder scr t:ag(rcitadas. La cclula diana cs rCC(>nOCida CiChido .a la prcscncia tic anticucrpcas uniclos a su supcrficic o mccliantc lo, IVR cspccificos do Las celulas T. F:n Las rcaccioncs citot(rxicas, las celulas at reso ras c.lCian SIAS granules s(rbl-C la cclula diana, al Contrari(r yuC Cn cl case ,1c la tagocitosis, Cut yuc cl contcnid(r dc lee mismos sc vicrtc cn el lag(rsoma. l .os gratn(I(rs dC Las Cclulas I Citotcisica,

COntiCnCn MIX, moleculas denenaainadas PCrtiarinas, Clue scan capaccs dc taladrar la nacrnbrana cmcrna dc la MULL diana . I DC tiarnaa parccida, Icas anticucrpos unidos a la supcrficic CClular put den acticar el Ccnaaplcnacnt(r, dC mantra yuc perlin-c la nacnabrana plasnaatica . l Algunas celulas CitoteiXiCas tambien srm Capaccs dc transmitir una scnal a la CCIUIa diana yuc IaaCC yuc Csta iiltinaa prOCCda a atrtodcstruirsc I un pr()ccso dcnonainado apoptossl.

Fagocitosis formation del fagosoma lisosor , ~ i :ai u( :( :icin y digestion

fagocitosis

fusion del lisosoma

liberation de productos microbianos

Fig. 1 .15. Los fagocitos acuden al punto de inflamacidn atraidos quimiotacticamente . Alli se unen a los microorganismos mediante los receptores inespecificos de su superficie celular . Si el microorganismo esta opsonizado con un fragmento del tercer componente del complemento (C3b) yio con anticuerpos, los fagocitos tambien se pueden unir mediante sus receptores de Cab yio Fc (v . fig. 1.10) . Cuando se activa la membrana del fagocito, se forman metabolitos de oxigeno con propiedades antimicrobianas, y el agente infeccioso es confinado en un fagosoma que se forma por union de los seuddpodos emitidos por la celula . Una vez atrapado el agente, los lisosomas se fusionan con el fagosoma, dando lugar a tin fagolisosoma en cuyo interior el agente infeccioso es destruido. Los productos microbianos no digeridos pueden ser excretados al exterior de la celula .

Introduccion al sistema inmunitario

INFLAMACION
Lts cclulas del sistcnaa intnunitario sc cncucntran distrihuid Is ell tcxio cl crcganismo, pcro cuando se prodUCC una intcCCii) I cs prcciso conccntrar dichas cclulas v sus prodUCtos ell Cl lugar de infcccioin . Este proceso sc naanificsta cn tOrnta do infamacion . Las tic trcs caractcristicas principales la inflamacion son: " AUmcnto del fIUjo sanguineo haiia la zona infcctada . tic " Aumcnto do la permcabilidad capilar dchido a la rctracci()n lax CelUlas cndo)tcliales. DC esta fi)rtna, pucden cscapar do lox tic capilarcs moleculas mas grandcs to habitual, to quc tacilita cl transportc tic lox mcdiadorcs solublcs tic la inntuniclad pasta cl fi)co tic intccci6n . " Jiigraci6n tic lox Icucocitos dcsdc lax senulas hasta lox tcjidos ad a acetates al loco . Fn lax fries mas tcnapranas tic la inflanaacion .,on especialnacntc abuntlantcs Icn ncutr()filos, pcro ntis adclan. tc tanabicn migran haiia la zona infcctada monocitos s linf xitos.

Quimiotaxis y migracion celular. El control tic la migracion tic celular dcpcndc tic la adlacrcncia tic lax Cclulas al cndotclio lox tcjidos inflamatios ipasinacntaci6nl . Esta adlacrcncia se produtc dcbido a la intcraccidn entre lax nauicculas tic la superficic tic lox ICUCOCitOS Cola otras quc aparcccn cn lax cclulas cndotcliaIcs una vez quc son activaclas (fn . 1.16) . Cuando Ilcgan a lox tcjidos, Ias cclulas migran haiia cl foco tic infccci6n nacdi,uuc un proceso de atracciln quimica denominado quimiotaxis . Los fagocitos migran actin anunte cn prcsencia de gradicntes tic concentraci6n tic tictcrtninadas nu)I%culas (quinaicxacticas i . (:,,a, un ti-agmento tic uno tic lox conaponentes del conaplcnacnto ifrf. 1 .1 'i, cs especialmente actin o cn cstc scntido, N, atrac tan to a to,, ncutrofilos comp a lox monocitos. A lox pocos minutos tic tic aplicar ( :Sa in rim en la base una ampo~lla, se obscrsa chino lox ncutr6filos comicnzan a adhcrirsc al cndotclio tic lax vcnulas rcgionalcs . A continuaci6n, lax cclulas sc dcforman to suficicntc wino para po dcr introdUCirSC entrc lax Cclulas endoteliales, Y se clesplaz :ua a to largo LIc la nactnhrana basal tic cstos microsasos hasta alcanzar to ,, tcjidos. Todo cstc proceso sc denomina tiiapcdcsis, \ sc dcscribiri detalladamcntc cn cl capitulo 5. DEFENSAS FRENTE A AGENTES PATOGENOS EXTRACELULARES E INTRACELULARES
Esta claro quc lax rcspucstas inmunitarias frcntc a agcntcs patcigenos extracclu]arcs c intracclularcs dct,cn scr considerablenacntc difcrcntcs . CUando cl sistcna :a innaunitario actua contra agcntcs pat6gcnos extracclulares, su objctiso cs dcstruir al propio agents V neutralizar sus productos . Por cl contrario, Cuando sc tic trata tic agcntcs intracclularcs, cl sistcma dispone don estratc Bias cliferemes . Las Cclulas T pucden dcstruir a la Cclula infcctada i,citotoxicidad) o pucden actisar a la Cclula para quc sea clla

Fig. 1.16. Microfotografia electronica de barrido an la qua se observan leucocitos adheridos a la pared de una venula an un tejido inflamado. .16 .000. (Por gentileza del profesor M . J. Karnovsky.)

Quimiotaxis

misma la quc inacti\c al agcnte patogcno . For cjcmplo, csto tiltitno OCUrrc Cuando lax cclulas l' colaboradoras sccrctan citocinas quc actisan a lox macr6fagos para quc dcstrusan Ion organismos quc ban capturado mcdiantc cndocitosis. ( :ono, muchos pat6gcnos atrasicsan por fascs infra v extracclulares a to largo (let ciclo infcctiso, en cada monaento rcsulta mas apropiado un mecanisnu) detertninacio . Por cjetnplo, cl virus tic la poliotniclitis se desplaza a to largo del torrents sanguinco para in teCtar sus Cclulas diana. En csta tasc tcnaprana tic la intcccicin, lox inticuetj)os son un mecanisnao de detcnsa mtty cficaz . Sin embargo, Cuando la iniccci6n va cstd cstablccida, cs nccesario quc lox lint<)Citos'I'c ticstrUyan todas lax cclulas quc hayan rcsultado intcctadas . Es tic la indccir, lox anticuerpos son utilcs para rcducir la disc nainaci6n tcccicin y para csitar rcintcccioncs posteriores por el mismo virus, pcro una srz quc had Cclulas intectadas es imprescindiblc la intcrI-o i- 1it7 . I.M . Estas cursriemcs tichcn scr tcncic'nt tic Ion Ilnti~iiUn lemd,)s en itiem,t .) is Irnw,a ;it discitar sacumts : .'itacs

Fig. 1 .17. En la zona inflamada, lax lesiones tisulares y la activacion del complemento provocadas por el agcnte infeccioso estimulan la liberacion de mediadores de la inflamacion (p . ej ., C5a, un fragmento del complemento y uno de lox peptidos quimiotacticos mas importantes) . Estes mediadores se difunden hasta lax venulas adyacentes e inducen la adhesion de lox fagocitos circulantes a las cclulas endoteliales. Los fagocitos emiten seudopodos entre dichas cclulas endoteliales y disuelven la membrana basal. A continuacion, abandonan lox vasos sanguineos y se mueven a to largo de un gradiente de concentracion de mediadores quimiotacticos haiia la zona de inflamacion (quimiotaxis) .

Inmunopatologia

Reacciones frente a patogenos extracelulares e intracelulares

Principio de la vacunacion

complenurr,

0 rir"a

inticuerpo

respuesta de vacunacidn anticuerpos, infeccidn natural primaria 1r,'xuiae

respuesta de anticuerpos secundaria

1n"r inmunidad - " adgwrida

desli,i :

infection -

replication virlca

de

.i'.'111

kr ~ odor a

infertada

respuesta de anticuerpos

Fig. 1 .18. Frente a los diferentes tipos de infection, son utiles diferentes formas de actuation del sistema inmunitario, como se observa an esta infection virica . Los Ab y el complemento son capaces de bloquear la fase extracelular del ciclo vital, y pueden promover la fagocitosis del virus. Los IFN producidos poi las celulas infectadas transmiten sehales a las no infectadas, e induces resistencia al virus, que solo se puede multiplicar an el interior de celulas vivas ; las celulas Tc reconocen y destruyen las celulas infectadas antes de que se produzca una replication masiva .

ME 1

Fig. 1.19. Principio de la vacunacion, ilustrado con el caso de la inmunizacion con el toxoide difterico . Mediante modification quimica de la toxina de la difteria se obtrene un toxoide carente de toxicidad, pero que conserva sus epitopos . Tras la vacunacidn con el toxoide se produce una respuesta primaria de Ab frente a dichos epitopos . Cuando se produzca posteriormente una infection natural, la toxina volvere a estimular a las celulas B de memoria, que desencadenaran una respuesta secundaria de Ab frente a los epitopos correspond ientes mas rapida e intensa que la primaria, con to que neutralizaran la toxina.

VACUNACIbN Uno de los campos cn los quc los estudion innttmol6gicos hall tenido una repcrcusi()n m:is inntediata N satistactooria Ira sidoo cl relacionado coil la xacuttacioin . EI principio dc la sacunacilnt SC hasa cn dos tic los clentcntos claw tic la inmunidad adaptatixa, . concretantcntc en la cspeclttcldad t en la mcntoria del sistema inmunitarie . Las celulas tie memoria pcrmitcn a dicho sistema ticscncadenar una rcspttestJ illmunitaria ntttcho mas cncrgica cuando u produce una exposition a tin antigeno prcs iantenie coono cido . Esta respuesta secundaria sc produce mas rapidamcntc x cs ntas eficaz yue la respuesta primaria . El objctim yue se pcrsigue en cl discfio dc lacunas cs la mo dificacitin dc tin patogeno o de sus toxinas, dc tai tiorma yue rc sullen inocuos, pcro sin pcrdcr sus propicdades antigenicas . F%to cs posible poryue Ios anticuerpos x las celulas T reconocen detcrminadas partcs dc loos antigenos, los epitopos, y no al organisnto ni a la toxina complcta . Por cicntploo, considcrcmos la vacunacioin limit a la dificria . La bacteria causantc dc la ditteria produce una tooxina clue tlestruce las celulas tnuscularcs. La tooxi-

INMUNOPATOLOGIA Dc to expuestoo hasta el memento cabria deducir que el sistema inmunitarie reprcsenta una vcmaja incucstionablc . No cabe ducla do yue las anomalias de cualyuicra dc sus coomponentes aunlentan cl riesgo dc yue cl indiciduoo contraiga infccciones, pcroo otros componcntes dc[ sistema pttedcn compensar parcialntentc dichas anomalias . Esta claro yue Cl sistema inmuni tanor yue conooccntes se ha ticsarrolladoo dcbido :t una intcnsa prcsio',n esolutisa poi parts tic lo.,, organismos infccciosos . Sin embargo, has ocasioncs cn las yue cl propio sistema inmunita riot cs cl c:uta:uttr tic ctttcrmcdatics o do otras consccucncias no descablcs (J1q . 1,20) . En general, Ios fallos del sistema pucden ser do tics tipos di trrclltcs: Reacciones inadecuadas frente a autoantigenos: autoinmunidad. F11 irrnthCiO 1)CS non-ntales, Cl ,istcnia inmunitarie re conocc a trrdtrs Iris anti, reacciona frente a cllon,

na pucdc wr moxiificada mctliante tratamicnto coil tormalcichiclo, de tai mantra yue tnmtenga sus epitopos pero picrda su tooxicidad; el toxoide obtcnidoo se utiliza como %acuna (a=q. 1 .19) . Tantbien es posible atenuar agentcs intcctixos coomplctos, cootno cl virus do la poliemiclitis, de tai mantra que censcrxcn sus pro picdadcs antigcnicas pcro picrdan su pategcnicidad . La sacun,tcio'n sc cstudiara mas a fiondo cn cl capitulo It).

micntras yue Ion tcjido% dcl organismoo stn considcrados -pro pies  N respetadoos . En cl capituloo 1-L se dcscribcn Ions ntecanismos title pcriniten distinguir to propio dc to ~~no propiw, . Cuando cl sistema pre soma una reaction frente a comp nciucs propios, se produce una entcrmcdad autoinnumitaria . La artritis rcumatoide v la anemia perniciosa son ejcmp1on tic cnferntcdades autuinmunitarias t ~ . ca 1) . 2 8 i .

Introducci6n al sistema inmunitario

cuadamcntc las intcccioncs . Estos trastornos sc dcmtminan inntunodeficiencias . Algunos soil dclcctos hcrcditarios quc se manificstan porn dcsptlcs del nacimicnto, Inicntras quc otros, comp cl sindromc dc inntunodcficicncia adquirida iSIDAj, aparcccn postcriormcntc ~; \ . cal,s . 21-22 ) . Respuesta inmunitaria exagerada : hipersensibilidad . En alt,tmas Iliasillncs, las rcaccicmcs innttlnitarias son dcsprIIpIIrcion-1- con respcctcl al ciafo yuc puede prosocar cl agcnte path gcno . AcIcmas, cl sistenm innttlnitario puede desencadenar una respucsrt frente a un antigcno inofcnsivo, coma L111 .1 nt0ICCtIIa de alimelutl . Las rcacciones inmunitarias yuc sc produces puCLICn provocar Iris problcmas quc cl pat6gc no o cl antigcno, s - cn cs tos casos se dice quc se Ira IVoducido una reaccion dc hipersensibilidad 1's . caps . 2 ;-26 ), por cjcmplo, Lis nutlcculas do Id superficic dc los granos dc poles son rcconocicias com" nntigeltos por ciertos indkiduos, en los quc provocan ochre del limo o asma . Finalinente, ha\ ocasitmes en las yuc Cl sistema inInunittlio actua normallncruc, pcro las respuestas clue genera stlponcn un inccm\ -cnicntc cn cl :imbito dc la mcdicina modcrna . I .os cicmplos Irris importantes dc cstas rcaccioncs son los problcmas rclacionacios con las transfusiones sanguincas s- cl rechazo dc cirganos . En cs tos casos, es prcciso comparar cuidaclo samcntc los tcjidos Lie] do nante y del receptor, dc tal forma clue cl sistema inmunitarro dc cste Ultimo no rcaccionc frente a la s ;ulgrc transfundida o el tejido implantado . Sin embargo, todos cstos problcmas son cl pcquctio prccio quc had yuc paler por un sistema organico escncial, imprcscindiblc pare la protcccitin del indiciduo ti*cntc a las intecciolics .

tc un dctccnl do ctIAyuicnt do IIIS clemcntOI~ ( I C I sistema inmunitaritl, CI indiiduu puede no SCI- capaz dr cllmbatir aclc-

Respuesta inmunitaria ineficaz: inmunodeficiencia . Si cxjs

Resumen: Fracaso del sistema inmunitario

hipersensibilidad 1 17

~ I

SISTEMA INMUNITARIO oQJE0O ,

infeccion

---_-_

inmunodeficiencia

autoinmunidad

0 ajeno propio

40

autoantigeno

Fig. 1.20. Los defectos del sistema inmunitario pueden scr de tres tipos: hipersensibilidad, inmunodeficiencia y autoinmunidad . Los dos
primeros son debidos a respuestas exageradas o insuficientes, respectivamente . La autoinmunidad es debida a un defecto en la discriminaci6n entre to propio y to ajeno en el proceso de reconocimiento inmunitario .

En algunas ocasiones, los individuos presentan ciertos defectos geneticos quc impiden quc sus linfocitos puedan desarrollarse . 4Que consecuencias son las quc piensa usted quc tendra este defecto? ZPor quc ha desarrollado el sistema inmunitario a to largo de la evoluci6n tantas formas diferentes de defensa frente a los agentes pat6genos?

" Los individuos pueden sintetizar anticuerpos quc no reconocen a ningtin agente pat6geno conocido . ZQue ventajas presenta este hecho? Para evaluar el estado del sistema inmunitario de un individuo, se suelen obtener linfocitos o fagocitos a partir de su sangre . Explique en terminos sencillos cual es la funci6n quc desempenan los leucocitos sanguineos .

Cleflulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

Muchas celulas de diferentes estirpes estan adaptadas para Ilevar a cabo funciones especializadas en la respuesta inmunitaria. Los linfocitos B y T expresan receptores de antigenos especificos, asi como otras moleculas de superficie (marcadores) que son importantes para la elecucion de sus funciones. Las celulas presentadoras de antigenos son necesarias para que las celulas T respondan frente a los antigenos . Los linfocitos B reconocen los antigenos nativos sin necesidad de que sean procesados y presentados por otras celulas. Existen subpoblaciones funcionales de linfocitos T con actividades colaboradora, supresora y citotoxica . " En la sangre circulan celulas fagociticas con marcadores de superficie especificos (monocitos y granulocitos), que tambien estan presentes en los tejidos (p . ej ., celulas de Kupffer del higado) . Los eosinofilos, los basofilos, los mastocitos y las plaquetas intervienen en la respuesta inflamatoria .

l .as cc lulas tic I sistcntt inmunitario tic l'lrman a partir do I as cc lulas madrc pluripotcncialc% . mc(hattte dos Bias do ditcrcnciacion priluipalcs Jiif .? 1' : " la cstiq)c linlitidc da lugar t Itrs linfocitos . " La cstirpc micloidr da Itivar a lo" tagocitos ~lmtmocitos, ntacniftgtn ncutrtitilos y y a otras rclulas . Los linfocitos pueden ser celulas T, 8 o NK Ias Cclu l .as ties tlascs principal" tic lintitcittl, srn Ias celulas I Ias 11 . l as ti lulas I w desarrollan a partir tic sus hrccursorcs cn cl timo, Iientras quC Ias celulas li tic los nralmfcrtts sc ditcrcncian cn cl higado fetal t. cn la medula osca tic Ills adultot . En la" as'cs, Ias celulas B sc ditcrcncian cn tin organt~ especial, la balsa de Fabricio . Estos tirganos cn ltK (]tic SC dllcl-CnCian los lintitcitt~s se dcn()minan organos linfoidcs central" o primaries. En clltls, los prccur . sores tic Ias celulas B s T adquicren la capacidad para recontlcer antigens, mcdiante la adquisicion tic receptores tic suherticie cspccifices.

I*AINIC HIM tcrccra p()blacitm tic hllli)tllt>s tlllc n() ccprcsan receptores tic dim-cm), \ tluc sc dclunrtinan celulas ascsinas 11 .1 tural" \K, dcl ingles naturnl killtrS . I as celulas \K proceden do prccurs,rcs linfi)idcs tic I .t medula tSsca, c sc pucticn distim uir \.'I, por su Capacidad para lisar t*LInCiONlalIIICntC tic Ias CClulas 11 cicrias liners cclularcs cultisadas tic CCIUIas tUItltrraIC,, in rirrn x, sin scnsibilizacitin prcS is ! aunquc II() st>n Cal, .tccs tic lisar celulas proccdcntcs dc tumor" rccicn c\tirpadtlsi . ,\Iorfilh)gicantcntc, cstas rclulas prCSelltan CI aspCCto de linfocitos gralnlltlstn grand"

( I_GG, \ . m.is adclantc}.

Los fagocitos pueden ser monocitos/macrofagos o granulocitos polimorfonucleares I .tis tagocltt~s tambien mm tie dtiS clascs dltcrcntes, h)s Itlernt>Ci . Losmair(')lagos t los gralmloCittrs PNlmtn 6ilnuClc;urs . Fattn 1116;unatts 17etieelt till nilclco caractcnstico, lobulado s, do tin'ma irrci lat (ptlhnu'wficol . Sc di\idcn .t su ccz Of nCUtrcSfilos, basofilos C()sillofilos, cn fiutcitrrl tic la rcsI,UCSta quC prCSCntan ',us granul()s

Origen de las celulas que intervienen en las respuestas inmunitarias plaquetas v vv_ celula madre hematopoyetica a

macrofago

monocito

celula de estirpe dendritica

celula productora de anticuerpos e .ila o celula plasmatica asesina natural (forma final)

Fig. 2.1 . Todas las celulas hematopoyeticas proceden de las celulas madre pluripotenciales, de las que se derivan dos estirpes principales; una de ellas da lugar a las celulas linfoides y la otra a las mieloides. La celula progenitora linfoide comun tiene capacidad para diferenciarse en celulas T o B, segtin el microentorno en que se desarrolle . En los mamiferos, las celulas T se desarrollan en el time, mientras que las celulas B se desarrollan en el higado fetal y en la medula 6sea posnatal . No se conoce con certeza el origen de algunas de las celulas presentadoras de antigenos (CPA), si bien se sabe que proceden de celulas precursoras hematopoyeticas . Las celulas NK proceden tambien posiblemente del progenitor comun de celulas linfoides, que madura en el higado fetal y posteriormente en la medula osea posnatal . Las celulas mieloides se diferencian dando lugar a las celulas comprometidas que se muestran a la izquierda . Los eosinofilos, neutrofilos y basofilos se denominan conjuntamente agranulocitoso .

Celula_~ que intervienen en la respuesta inmunitaria

citoplasnnaticos trente a los colorantcs acidos n . hasicos utilizados ell tnitroscorpia . Adc mas, cstos tres tipos Lie Celulas cicrcen ditcrcntes tinntiomcs ctectoras . I .os nnas InInncrosos soil los ncutr6filos, ticnomnin .td(s tannbicn PM\ Ipolinnorfimuclcares ncutrofil(sl, yuc constituycn la mayona tic los Icucocitols circulantes (globulos HanCos sanguineos), alrededor del 60 a 70% en adultos . Celulas complementarias A(iCnIAN tic I(rs lint(,tio,s t, lors fagocitos, en cl sistenna inntttnitario ~ mICr( Icnc t .ur1111Cn una scric tic cclulas connplcnncntarias : " ('clulas prcscmadoras tic antigenos ((TA), due prcscntan los antigenos a las cclulas 'f y B . " Hayuctas, yuc intervicncn en la coagulaci(in y en los proccsos intlannatorios . " .Nlastocitos, Clue ticncn sinnilitudcs cstructuralcs v tinncionales ,on loos polimortintuclcarcs basoifilos ell ciertos t1pos tic inflaInac ion (\ . Cal) . 23) . " ( clulas cndoxcli .ilcs, yuc cxprcsan nnol&alas capaces tic reconorccr .t Ions leucocitos circulantes, coil to yuc controlan la Circulation distrihuci(m tic los rnismos . LINFOCITOS I .os linfocitos se protiuccn a diario ct1 grandcs c .ultidades cn los 6rganos lintuidcs ccntrtlcs o primarios (c l titno y la nnedula 6sca tic los adultors ( . -Mgunas tic cstas cclulas migran hasta Ios (irganos lintuidcs sccundarios (bazo, ganglion lintaticos, amigtialas y tcjidor lintiridc asociado a nnicosts) a teases tic] torrents sanguinco . Un scr hunnano adultor normal potSCC LAWS 10 : CcIuLts linfoicics, y cl comjunto del tejido lintiridc rcprescnta aproximadanncntc tin 2"tic del pcur corporal total . Las cclulas lint oidcs ccmstituncn alrccictior del 2(176 tic los leuc(x itors circulates tortalcs . MUChas cclulas lintuidcs tnaduras son tic vida larga, N' pucdcn pcrsistir Co(nno cclulas tic nncnnonia durante \ .trios aiurs o incluso ducnntc toda la soda LICI individLIO . Los linfocitos son morfologicamente heterogeneos 14)s linti~titl,s tluC sc orhNCr(an to till 11(kils s .ui1ulnt") c()[nctnd(n1 .tl IIrCSCntall III ut dI\CrM)s Ltnralh), h Itl tint dC dlantctroIy mortoloopas . Ha\ dltcl-ClICIas en CuAntor al c()lunncn rclAtisor Lie] nucleo- v cl citoplasma (cociente N :( : ), la forma del tnIClco la .NN 2 .2) . prcscncia o auscncia CIr granulos azur(')filos ( . Niccliantc rnicroscorpia y una tinciom llcrnatol(Igica clasica, tic conxr la tincion (iicnua, sc pucdcn obscrsar don tipos nnortol(igicos tic linfocitos ell la circulaciom . Unos son rclativanncnte pcclucnos, carecen tic granulos \ prcscntan tin cociente \ :(' ele\acior . Los otros son ntas grandcs, I,rcscnt :ul tin mcnOl' COCicntc \ :( ;, conticncn granulos azurofilos intracitoplasrnaticos y se ticnorminan linfocitos granulosos grandcs I LGG) . Los LGG no sc dchen confundir coin los granulocitos, los nnonocitos ni sirs preCursorrcs, Clue tambicn conticncn granulos azurofilos . Celulas T sanguineas en reposo . La nnavoria tic cstas cclulas csprcs .ut rcccpto,rcs I Alabcta i CCIuLns l' a(3 ; \-. rnas ,aiclante) ) pucdcn adoptar Cualtluicrd tie las don mortologias conncntadas . La nna( ona (95':6) tic las cclulas T colaboradoras I Ti i, del ingles T helptr-l y una alta proporci(in ( 50%) tic la% cclulas - h citototxicas (T( 1 soil de tipo pcyueflo (no granulosas y con tin alt(- cociente \ :(') . Adcmas, posccn una cstrLICUIr.t Citoplastnatica dcnomtinada ~, cucrpo tic Galk, clue csta formada Ixrr una acumulaciom tic li sosotnas primarios auciados a una g()tiCUla lipidica . El cuerpo tic Gall sc dctccta tacilmcntc nncdiantc cl cstudio citocluinnico tic las enzitnas lisosontalcs y mediante Inicrosco(pia clcctrornica (fip. 2.3) . Mcnos del 5% tic las Celulas Ttt s, tin 5(t'%, Lie las cclulas '1'( prescntatl cl otro aspecto Inortotl6gico . h.stas cclulas Inucstran Inorf6logia LGG, ell la title sc obscrsan limrsomnas disperses ell todo cl citoplasma y urn aparato tic Golgi bicn dcsarrollado I.fq. 2.-I) . En ratoncs no se observan Celulas T( coin tnortulogia L( ;G .

()tra subpoblaciun tic Celulas'1' yuc presenta aspccto LGG es tic Iintotitos - f gannnna/delta (cclulas T -,16) . Ell lo% Ixrhlaci(in la tcjid(s lintuidcs, cstas cclulas prcscntan una mortirlogia dendntic .n (_/p. 2 .S) ; cuandor sC CUltisan in 170-0, SC adlnicrcn al sustrato nurcstran ditercntcs cannbios nxrrt6logicos (/ q . 2 .b) .

2 Fig. 2 .2 . Heterogensidad morfologica de los linfocitos. 1) Los linfocitos pequenos carecen de granulos y presentan tin nucleo redondeado y tin alto cociente N :C . 2) Los linfocitos granulosos grandes presentan tin cociente N :C menor, tin nucleo dentado y granulos azurofilos an el citoplasma . Tincion de Giemsa . (Por gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J . Lowe .)

Fig . 2 .3 . Ultraestructura de una cblula T no granulosa . La microfotografia electronica muestra el cuerpo de Gall IG) caracteristico de la mayoria de las celulas T en reposo . formado por lisosomas primarios y Line goticula lipidica lflechal . .10.500. Reeuadro : El cuerpo de Gall se observa tambien mediante microscopia optica y tincion para esterasas inespecificas, en este caso en forma de tin unico opunton . X400 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edition, Milan : EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Lintocitc ~,

Celulas B sanguineas en reposo . Estas cclulas no prcscntan

CLiCr-1)0s (IC (;all Ill rrrrn- li)loeia I .(.16, . ski citoplasnia cst:i replc. :n algunas to dc monorriht)s()mas tiispcrsos ~ aislaclos (ft,H . ?.,7;1 . h ocasioncs, sc cnCUCntrall CCILILS B acti)adas en la circulacioin yuc prcsentan kill reticulo encloplasniaticu rugoso ell Case cie (icsarroIlo iJuq . 2.81 .

Los linfocitos se pueden identificar de acuerdo con una serie de marcadores caracteristicos
LOS

Celulas NK. A I igual title las cclulas T -;ii v clue algunas cclulas

1-( , rststs cclulas se caractcrizan lxrr ski nu>rti)logia 1 .( ;G . Sin embargo, prcsentan una nra\ or c:uuidad dc gMILL los azurcifilus yuc las cclulas granu1rrsas'f .

lint<)Citos (asi coma utros ICHCOCitOS} CXprcsan kin Bran nunicro dc rnolcculas dc supcrficic ciitcrcntcs, yuc SC puCdcn utilizar para distinguir i,o marcar-) Lis distintas poblacioncs cclularcs . 1:.n Ia aCtualidad, nnrdtos dc Cstos marcadores celulares pueden sex (ietcctados medi :utte anticucrprrs 1ttorl0C1c)1YtICS cspecificc)s . Se Ira dcsarrollado Lilt mctodo~ sistcrnatico dc non1CnClatLira, dcnominado~ sistcma ( :1), ell cl clue cl tcrmino (:D ~dcl inglcs cluster dcshination, c1enominacion dc grupo ;i ciesigoa grupos {chrsters) do IllticuCI-I)OS nionoclonales, cada una dc los ctraICS SC unc CSpccificarrtcnte a kin determinado marcador Mill it-. El sistcma (:I) surgioi de los estudios cart anticucrpos monoclonalcs proccdcntcs tirndarncrnalmcntc dc ratoncs fl-CntC a :urtlgCnos ICUCOcit .MOS Ittr nianos . Eaton cstudios sc IIevan a cabo en multiples laboratc)rios distribuidos par todo cl mundo, y en una serie do reuniones dc trahajo intcrnacicntalcs sc csttblcccn ],is caractcristicas dc union LiC cacia :urticucrpo monoclonal con ],is ditcrcntcs poblaciontes ICUcocittrias, asi coma cl peso molecular dc los marcadores . 1)e acuerdo con estas critcrios, Ios anticucrl)os nxmoclonales do ca ractcristicas parecidas sc agrul)an conjuntantcntc, se Ies asigna kin 1111111CI- o ( ;1) . Sin Cmbargo, en la actualidad es co sturrnbre utilizar cl niuttcro ('1) para cicsignar a la molccula tic marcador yuc r- econoce each una tic los grul,os Lie anticucrl)os ntonoclentales j en Cl apcndicC sC illCluoc una lista dc marcadores ( - 1)) .

Fig. 2.4 . Ultraestructura de una celula T con morfologia granulosa. Los granulos electrondensos y negativos en la tinci6n de peroxidasa (lisosomas primarios IPLI) son tipicos de estas celulas. Estan dispersos a to largo de todo el citoplasma, encontrandose algunos de ellos en las proximidades de on aparato de Golgi (G) bien desarrollado . Se observa la presencia de muchas mitocondrias (M). ,10.000 . Recuadro : Mediante microscopia optica y tincion citoquimica frente a la fosfatasa acida, se observa kin patron de tincion granuloso. .400 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edici6n, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2 .5 . Morfologia dendritica de celulas T ,, o procedentes de las amigdalas. Esta poblacion de celulas T se encuentra situada principalmente en las regiones interfoliculares dependientes de celulas T. Observese la morfologia dendritica de las celulas . Anticuerpo anti-y(i de las celulas T e inmunoperoxidasa, " 900. (Par gentileza del Dr . Favre, publicado en EurJ Immunol 1991 ;21:173, con autorizaci6n .)

Fig. 2 .6 . Modificaciones morfol6gicas de celulas T -b elonadas in vitro. 1) Las celulas se adhieren al sustrato de forma parecida a coma to hacen los macrofagos . ,6.000 . 2) Las celulas se alargan, formando ur6podos, y separandose dos filopodos polares. " 2.000 . 3) Formaci6n de placas adherentes en los extremos

terminales de los fil6podos. x20 .000 . (For gentileza de los Dres . G. Arancia y W. Malorni, publicado en EurJ Immunol 1991 ;21 :173, con autorizaci6n .)

celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

Aunque en algunas ocasioncs CS jail definir los marcadores tic csta manes, esto no sien)prc es posihlc . L'n marcador puecic scr till marcador tic maduracion en una linca cclular v tic acti) -acion en otra . Par ejcmplo, las CClulas 11 madttras I)icrdcn cl marcador CD 10 presents en las celulas 13 inntaduras, atuttluC to rcCUpcr:tit cuando se lCtivan /iq . 12.14) . Aticntas, cn algunas ocasianes las cclular u pressman una baja concentrtci(')tt do ntarcad(~rcs do ~~actitacion-, \ Sit ntimcro aumenta tras la aCti),ICi(in . Un CjC(ttplo tic este tenonteno to constitu) c cl incrcmcnto en la exprcsion tic Ids mOICCUlas del Complcjo principal tic IustOCompatihilidad do class II i C PH 1 cn los monocitos tras la acti) acion coil IFN7 .
Los marcadores celulares se pueden agrupar en ((familiar Las nta1CCulaS tic 1 .1 su1)crficic cclular sc I)ucdCn :t rup :u- Cn un,t

Fig. 2.7 . Ultraestructura de una celula B en reposo . Estas celulas no contienen cuerpos de Gall of granulos . En el citoplasma se

observan ribosomas dispersos (R) y fragmentos aislados de reticulo endoplasmatico rugoso (E) . El sistema lisosomico de Golgi de la celula B se desarrolla solamente tras la activacidn de la misma .
x 11 .500 .

Fig. 2.8 . Ultraestructura de tin blasto de celula B. La caracteristica principal de las celulas B activadas es la maquinaria celular para la sintesis de inmunoglobulinas, compuesta por el reticulo endoplasmatico (E), polirribosomas libres y el aparato de Golgi (G), encargado de la glucosilacion de las inmunoglobulinas .
7.500 .

Los marcadores molccularcs tamhicn sc pucdcn clasificar scgun la informacion que ofrccen acerca tic la celula . Par ejcmplo : " Los marcadores tic linca, quC son caractcristicos tic una detcrntinada linca cclular, por cjcmplo (:D3, que solo se cncucntra Cn las cclular 1-. " Los marcadores tic maduracion, que se expresan transitoria mcnte durante cl periodo tic diferenciacicin celular, por cjcm plo CD I, (]tic solo se cncucntra ell Ids celulas timiCas en proceso do dcsarrollo, I)cro no cn las celulas T ntatittras . " Los nrarcatiores tic actitaci()it, por cjcmplo cl receptor tic tactor tic crecimiento tic baja afiniciad tic las celulas T i receptor do II .-2, ( :1)251, title solo sc cxpresa cuando la celula ha silo Cstinutlada por tin antigeno .

uric de lamilias dilerenics clue, dcsdc tin I)tmto do )istt etoiuti vo, probablcmentc proccden tic unos pocos genes anccstrllcs . Entrc cstas familiar, yuc se tiistinguCll por Sit CstruCtura molecular, se CnCUCntran Ios siguiCntCS grupos principalcs : " La superiamilia tic las ill nttutoglobuhnas, que Csta torntada por molcculas coil caracteristicas estructurales parccidas a ]as de Las inmunoglobulinas . En esta tamilia sc encticntran CD2, CI),;, ( :1)4, (1)R, ( :PH tic clascs I \ II y nntchas otras . La tamilia tic las intcgrinas, Compucsta por molcculas hctcro. t- P . Dcntro tic csta tamilia dimcric :ts t6rntacias por cadcnas u se distinguCn una scric tic suhtantilias, todos los micnthros tic una deterntinada subtantilia comparten la misma cadcna j3, diferenciandose tinicamente cn la cadcna u . La cadcna 13 de una tic Cstas sul)tamilias i ]as intcgrinas (i, I cs ( ;D I . Esta cadcna sr puedc encontrar asociada con CD I I a, CD 111), CD I lc o LID, dand(t lugar a los antigcnos linticita rios tic su1)crficic LFA-1, Mac- I f ( :R3 ), pl50,95 f CR4'E o ul)j3  quC sc cilciiciitrail coil freatcncia en los leticocitos . Fit otra suhfamilia +; las integ,rinas (3 + j, la cadcna [3 cs ( ;1)29, que tamhicn sc puecic asocial- con ctitcrcntcs cadcnas a, v a la yuc I)crtcnCCCn los marcadcn- CS VI .^1 i,del inglcs ven late activation, ictivaci()n ntuv tardia) . " Las sclcctin .ts f E, I, Y P h ; , clue son cxprcsadas POI- ICLICOCitO', f I .) o por celulas cttdotclialcs acti) alas ( F v I) ) . Pl-esentan una Cspccificidad tic ti1)o Icctina tircntc .t ditcrsos azticarcs pcrtcnccicntcs a glucoprotcinas tic meml)rana altamcntC glucosiladas, por cjcmplo CD43 . L( protcoglicanos, entrc ION quC se cncucntra CD44, que ticnen )arias sitios do tmiott para gluc(tsamin(tglucan( sumo cl condroitin sulfato . En otra tamilia tic marcadores Ccluhu-C, SC inClutcn la su1)Crtiunilia del latl(~r de necrosis tuntoral CI-NF, del inglcs tlomw nrcrocio f~ctorj v cl tactor tic crccimicnto ncrvioso +; NGF, del inglcs nerve itrntvtlj tiuctnr - }, la supcrtamilia tic lectinas tic ti1)o (1, coma CD23, y la tie rcccl)tores transmcmhrana, COMO Cl tic IL-6 . Cabs dcstacar quC cstos marcadores cxprcsados por los linIoCitOS SC puecien detectar tamhicn en celulas tic otras estirpes, coma CD44 (clue SC suck expresar en celulas epitclialcs) . Las molcculas tic superticie (marcadoresI sC pucdcn detectar utilizando coma sondas anticucrpos fluorcsccntcs +,hq. 2 .1) . F.ste cs el funclamento tic la tccnica de citomctria tic flujo, quC sil-s- e para haccr rcCUCnt(ts \ separar la% CClulas tic aCUcrdO Con Sit tamaf o y con sit intensidaci tic flu()rcsccncia f \ . cap . 29 Y, )' que Ira ret olucionado Ios estudi(~s s((brc Ias pohlaci(mcs do tclulas linli(idcs .
celulas T Las celulas T se pueden distinguir segun sus diferentes receptores de antigeno Id mCj()r m .~rcati(tr tic las lincas celulares T es cl receptor tic Ias CClulas I i l (-R 1 . Hov cn dia, se conocen dos tipos tic I ( :R hicn dcfinidc(s ; una Cs tin hctcrodimcro CompucstO POI- clos polipcp-

tidas ((,t ) X31 unidcn por enlaces clisulturo, cl otro prcscnta una cstructura parecida, pcro los polipcptidos clue to imegran son lof t . 61 . Ambos receptores sc encuentran asociad(s coat tin conjun

Linfocitos

Detec. marcadores eel. T mediante inmunofluorescencia

otros critcrios ; asi 5-1 W6 dc [,is cclulas - F circulantcs cxprcs:ui niarcadorcs do cclula NK (( :1)56, (:1)57 \ CD I l b/( :l)181, pr( ducicndo I I A pcro no It, 2 ~pr(iliterando dchilnicntc cn prcscncia do anrigcn(x i . minigcno% . Los linfocitos T uji tambicn se pueden clasificar de acuerdo con las citocinas que secretan I .a diccrsid .a d hrnci(mal do I ;as cclulas l tambicn Ira yucd .id(, dcmostrada mcdiantc cl cstudio dc los patroncs dc iccrccii>n dc ci tocinas dc ditcrctaes clones de cclulas I'll . lauto ell Ios rat(mcs como en lo% sores hunian(,s, se hall dCSCUbicrto dos grupos dc clones dc Milks l' ( :I)4 - . I .a subpoblaci(in Tilt sccrcta IL-2 e IF\ ,, micntras clue la suhpohlacion 'fH2 sccrcta II . 4, 11, 5, IL-6 c IIA0 {fl(J . 2.10; v. cap. Ill. I.a s celulas I'H I Ilcvan a cabo di\crsa, tirncioncs rclacionadas cots la citotoxicidad v Ias rcacciones infhanaat(trias IoCACN . En consccucncia, cstas cclulas soil inaportantcs ell la luclaa contra los pauigenos intracclularcs, cntrc Ion yttc SC cncucntran sirus, bactcrias i . parisit(s. Las cclulas TI12 estintttl .u a con nraaor cficacia a Ias cclulas Ii para clue pr(dilercn y prodttzcall anticuerpos, por to clue So funci6n principal es la luclaa contra los naicroorganisnios dc c ida librc (inmunidad humoral ) . En la . /itjura 2.11 sc imicstra un rcsunicn dc Ios principalcs nwrcadorcs dc Ias cclulas T up ell laumanos v ratoncs . Las celulas T ,i son especialmente abundantes en las superficies mucosas y la epidermis murina I-IN cclulas l ';6 .tln(nd;ua cspcci,tlnuntc cn Ion cpitch((s nlui()i(rs, COIISUtrnCrt SUI0 una pcyucna harts sic Ias cclulas I circulantcs. 1:11 los ratoncs, I :a mat(aia LIc los lintucitos intraepitclialcs ( LIF s(na cclulas 'l Mi \ cxprc'sata (:1115, un tnarcador yttc no se suck cncontrar en la naaVW'ia tic has cclulas dc este tip(( circulalltcs . SC

antigeno especifico de Ias celulas T;

antigeno comtin

antigeno especifico de Ias celulas Ti

antigeno comtin

Fig. 2.9 . Los anticuerpos monoclonales de ratbn dirigidos contra un antigeno especifico de una subpoblacion de celulas T citotoxicas (Tc) se uniran a dichas celulas, pero no asi a las celulas T colaboradoras (TH; por ejemplo, CD8) . El anticuerpo unido se puede detectar mediante anticuerpos frente a inmunoglobulina de raton unidos a una molecula fluorescente . Esta tecnica permite identificar y recontar las subpoblaciones de celulas T.

to de cinc(t polipcptid(rs, cl c(nriplcj(> CD3, clue est:i tin-niand(, cl conaplcio receptor dc Ias cclulas h fconiplejo 1-CR (;1)3 ; i . cap. 71 . Aproxinaad :unentc, un 90-95 )%, dc Ias celulas T Bangui ncas son dcl tipo uj3, micntras Clue cl 5-10`%, rcstantc cxprcsan yd . Ciertas celulas T (iii expresan CD4, mientras que las demis expresan CD8 Las cclulas I ulS is burden subdixidir ell d(rs 1)(,H .wi((ncs dire rcntcs, clue no l,rcscntan supcr`x>sici(in entre Si : HIM sul,pohlaci('m poscc cl marcador ( ;D4, y colabora ,> o actua conlo indtlctorade [as rcspucstas intnunitarias Ch 1?, rnictnras que la otra subp() blaci(in poses el naarcador ( .I)5 c . ejcrce una fiuaci(in prcd(mainantcnacntc citotoxica i Cc l . ('onao Ias cclulas I' ('1114 - rcconoccn a sus antigcnos cspccificos asociados con nao1CCttlas C.PH dc class 11, micntras que las cclulas T (:DS' reconocen antigcnos asociados con nao1cCUlaS CPI I dc class I {\ . cap . 7), la prcscncia do

Subtipos funcionales de celulas T

('1)4 o (DS linaita (rcstringci Ios tip(rs dc celulas con los yuc pucdcn intcraccionar Ias cclulas 1' 1_f?q . 2.111 ;1 . I'll pequcno porccntajc dc Ias cclulas up not cxprcsan ni CD4 Ill ('D8, Ago yuc succdc ell la mayor parts dc hts cclulas T y(i eirculantcs . Pocas cclulas T yo circulantes exprcs .ua ('D5, :a ditcrencia de Ias tisul .ircs. Existen diferentes subpoblaciones funcionales de celulas CD4' y CD8' (( ji Ta se Iw nacno(mad(( yuc, a nitcl nu,rti,l()gic()_ un 95"i dc Ias cc lulls 1' ( :D4' N un 51f%6 tic [as cclttLIS - I ( :1)8' SOIL linti,cit(ts PC yucf os no granulosos . Estas suthpotblacioncs NC pucdcn subdic- idir a NIL acz ell subtipos fiuacjcntnlcs ell tiuacf6n do la cxprcsion Icn(,tipica dc CD28 s CT1.A 4. La cxpresiim dc (;11128 por Ias cclulas l ( :D4 - h:ICC yuc se t'mIGa una sefial c(testinattlad(>ra cuall do sc rec(m(icc cl antigeno sobrc has cclulas'I uji, cvitando asi la ancrgla yuc SC pr(x1uci6a tras la uni(Sn do 'IVR con Cl antigeno solo . Estas cclulas tambicn cxprcsan CTLA-4 dcspucs de (]tic (:11125 sc hall unido con sus ligandos 117-1 1CD80 ;i y B?-2 C('11156'i, prcsentcs ell Ias cclulas prcscntadoras dc .tntigcno y la intcraccicm do csta na((ICcul :a corn I(,s naisnaos hoalld(ts pcrnaitc rccucir la tunci(in tic Ias cclulas I . Adcna:is Ias cclulas '1 uj3 cx prcsan distintas isotixnaas del .uati~"cno ICUCOCItarlo conaitn i (:11145 ) . Sc considera clue es CD451Z(), en lugar de (:111451Za, cl yuc sc rch oona con la actiiaci(in cclular I, .I clasifcaciun dc 1()s subtipos do cclulas 'I utji tambicn sc ha rCAizado atcndicnti() ;a

Fig. 2.10 Las celulas T expresan TCR de tipo Iii o uji. Estas celulas se dividen en los subtipos CD4 y CD8, segun reconozcan antigenos (peptidos) con CPH de clase II o I, respectivamente . Las celulas T CD4 se subdividen a su vez en TO y TH2 en funcion de sus perfiles de citocinas. No hay evidencia de que las celulas T f(; y las celulas T CD8, all tengan un perfil de citocinas definido .

Celulas que intervienen en la respuesta irlmttllltaria

Marcadores superficie celulas T humanas y murinas CD45RO CD45RA TC C C: . CD28 " .

I

cns

-D4f=L3T4i
TH

CD5f=Ly-1 I (CD7) s en sec ; humanos

todas, las cilulas T i (Thy-11 solo en ratones

~:D8f=Ly-2,31

Fig. 2.11 . Hasta la fecha, la molecula CD7 solo ha sido detectada an la especie humana, mientras qua Thy-1 es especifica del raton. Los marcadores qua figuran entre corchetes son los equivalentes murinos de los marcadores humanos . La mayoria de estas moleculas pertenecen a las moleculas de adherencia de la superfamilia de las inmunoglobulinas .

Celulas B Loll lintircit  ~ I ; constimycn cntrc el 5 y cl 15',%, del Cornjunto de linfimt(,s,ir, [+),tines, v sc caractcnzan porr la prcsencia tic innttinooglohulinas tic superficic . Estas innrtmooglohulina% marcadora% Soil sintctizada% porr la propia cclula \ %c encuentran imertadas en la mcntbrana cclular, en dorndc acttian conic, rcccptoorcs cspeciti Cots de antigcnos . Los reccptorcs puedcn set- dcteciados cn la superficic tic las CCIUlas madUras ntc(liante anticucrp)s marcados Coil %ustanCia% fluorc%ccntc% y cspccifii( , s do la innuutooglobulina tic la espccir cn cstudio. (uando Ias iclulas tic tirlcn corn innrtrnortluorcsccncia, sc obsena sobre la cclula B ulla tluOl_CSCCnCia Coil aspecto ~ , allUlar- Ifrrt . 2.121 . Los antiiucrpos divalcntcs tren tc a Ias innrtinoglobulinas tic cupcrficic SC UnCll a I(r% rcccptoorcs tic superficic \ los entrclazan, dando lugar a , parclic%- do innurnoglobulina distribuiclos poi la superficie cclular. ( :uando [as ce lulas soil soonicticlas a calentamicnto, la maoria tic Cstos Complcjors Sc dcsplaza a to largo tic la superficic cclular v sc acunttlla en tin extrcnto de la irlula, obscrv:indosc cntoncc% una c%Pccic de , ^caperuza-, I % .1!q . 2.12, rcciradrnl . Una vez tirrmada c%ta cape . ruza, la inllttnt(rglobulina penctra en cl interior de la irlula, don tic cs dcgradatia . Este trno~ntcno dc timnacion tic caper-Was SC obscna tarnhien en cl casoo tic otras glucooproteinas tic superficic, tanto en Ias iclulas B coma en otras tipos de cilulas. El complejo areceptor de las celulas B La ntav()Ir,t tic I :ts iclulas B Itturtut :ts tic s.tngrr lxritrrica cxpresan dons isotilxn tic innttrnorglorhttlina sorhrc sot %UperficiC, IgN1 C li;l) tic I:v. cap . 61 . I'ara una cclula 11 concrcta, Ion puntos union al alltigeno do combos isotipoo% soot identicos. \Mono% de till 105 . de las celulas circulanics cxpresan Ig(_i, IgA or IgE, aunquC cste tipo tic Celulas si title se encticntran en mayorcs Cantidaclcs cn dctcrminados lugarcs del organismo, comoo lxor cjemplo ]as Celulas pro ciuctoras tic IgA tic la nttICor%a intestinal . l a innumoglohulina %c CnCUCntra asociada a otras ntolcCUla% tic la superficic tic la cclu la B, titrmando cl -contplcjo receptor tic antigeno tic Ias Celulas B ( It( - It, del inglcs B ti11-autigeu receptor) . F,stas moleculas ,acecsorrias- Soil hcterodintcro% tic Igu ((*1)79a i c lg(i i ( .1)79b i, uni T11Cdi .mIC CTIIACCI di .(rlti,If, !IC! CI- 1 1, 41 71,71 1 1 i1 1 TC 1,1,7,7i, III AT)

Ita ticmostrado que Ias cclula% ('ll8 - -! oi prc%cntan till rcpcrtorio tic rcccptorc% tic celulas T dirigido timdantcntalntcntc trcnte a tictcrininados antigcnos bactcrianos of I,irales (supcrantigcnosl, porr to que sc supone que Cstas Celulas pucdcn dcscmpcfIar till papcl intportanic cn la protccci('m tic Ias supcrficics nurioosas del (orgallisnlo. Las celulas T comparten algunos marcadores con celulas de otras lineas 11 .1%ta CI ntoanCttt0, lICtttor% dC%,r'lto ali;ti+u)s tic for% 111,11-tdorrCs :Clularcs \ rcccptorcs espctrti :oos tie antmcno que Caractcrizan a I .ts subpoblacionc% de Celulas F. Tatnhicn cxistcn cicrta% moleculas de superficic que se cxprcsan en toodas Ias Celulas I' I m:trcadorrcs pan-T), y que se Cncucntran tatrthicn cn otras lincas cclttlarcs . l'n burn cjcntplo tic loos ntismos soil los rcccl~torc% tic tic critroocitos carncro i ('I)2 ~ . /n riro t . cn circunstancias norrntaIC%, la n10ICCUla ('D2, juntoo Coil cl Contplcjo T('R-('l).i v otras glucoprotcinas tic ntcnthrana, colahora ell la acti\acilrn tic Las celulas T mediante sot union a till ligando aciccuado. Sin embargo, ( I)2 se encUcntra tambicn aproximadantcntc en cl 75"s, de Ias cclula% \K (a).3 . ()tra molrcula, relacionada Con la acti\-aci(in de Ias Celulas T, (:l)5, %e Cxpresa en codas Ias Celulas - I' %' Cn una subp(olilaci6n de celulas B. AunquC ( :1)5 SC pIICdC unir a (I)72, no %c sahc Con cencza si c%tc cs cl ligando fisioologico cn Ias cilulas 11- ('1)7 aparcce cn la mayoria de la% cilulas \I; %. T. En el apCndiCe SC inCluvC una lista C()Inplcta tic towia% Ias mooleculas ('1) tic 1 .1% Celulas T, algimas tic Lt% Wales aparcccn tambicn cn otras Celulas tic origcn Itentatopoyctico . Las celulas '1 nttrrinas cxprcs,tn marcadorc% parccidos a Ions tic Ias celulas T hurnanas . Celulas T supresoras Aunquc cxistcn ,taros indicioos tic la cxistcttcia do Cc1Ula% T suprcsorras Cl's i cspccificas tic antigcno, no cs probable que cotnstituvan una subpoohlati(in indclmndicntc t ni\cl timcioonal . Sc Ita ohsrrvado quc canto Ias cclula% -I CI)4' coma Ias ('l)8 - pucden sttprimir Ias rcsptic%tas innttinitarias ; este ten6meno x ptiedc producir ntcdiantc citotozicitiad dirccta trcntc a ]as celulas prescntadooras tic antigrnor%, ntcdiantc cit(rcinas -sultrcsoras ,, iv . rap. 11 l, poi I,t rcg,ulaciom ncgativa tic la transducci(in de la seial )cite ("I . raccioon entrc LA--1 v sus ligandos; v. arcs) o a craves de una red idiotipica (\ . cap. 13).

Fig. 2.12. Celulas B tenidas para detectar Ig de superficie . - Cs+.rla6 L + ;~d+  duds ~-+, d+o;v-lyhi ila~+t~,r:+(tt muestran una fluorescencia de superficie anular a la luz ultravioleta en frio . En el recuadro se ve una redistribution polar (xcaperuza) del anticuerpo cuando se incuba con We a 37 C . " 300. Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edition, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Linfocitos

el caso do los componcntcs indis idualcs dc I conlplcjo TCR-CD3, participan en I(rs fell'rnlenos de actn -acioin cclular . Otros marcadores de las celulas B y subpoblaciones de las mismas Las CClul.ts B 11Ur11,ULIS 1 la, n1urmas Czhrcs :ul tanlbicn ((u -(n nrucadores (kii, 2.13) . La masoria dc las celulas B poses antigenos Cl'H dc class 11, quo: son importantcs en los proccsos do colaboraci6n con las cclulas T. Estas molcculas dc class II son I A o I-E en cl rat6n, y los antigenos HLA-Dp, 1)L \ 1)R en los sores humanos . En ]as cclulas B sc suelen cncontrar receptores do los conlponcntcs del complcnlcnto CA) (( :R1, CD351 y C ;3d (CK2, CD21 +, yue tambien cstan rclacionados con la actisacicrrl . t posiblcnicntc con cl ascntamicnto- do las cclulas . Las intcraccioncs do ((19/( :1)21 con cl compicniento asociado con antigeno docnlpcilan un papcl cn la acti\aci61l dc las celulas B inducidas por antigeno a ti-as cs del receptor dc an6arcrpos yuc ligan antigenos . Ademas, posccn receptores para la region Fc do las IgG cx6gcims f Fcyltll, CD32), yuc dcscmpcnan alg6n papel en la transinision dc scnalcs negatisas a las celulas B . Los principalcs marcadores utilizados en la actualidad para identifcar las cclulas B humanas son ('1)19, CD20 v CD22 . ()tras molcculas caractcristicas do las cclulas B Immanas son C:D7 2 78 y ( :D"'2 . La molecula CD72 tambien ha sido detectada en cclulas marinas i L1 b-2 ), junta con 11220, 1.111 .1 \arialitc dc CD45 i Lvh- Jl do: alto peso molecular (220 tidal} . CD40 CS una con las inter n101ccala inlportante dc ]as celulas B, rclacionada . _ft 11 .5 ;1 . accioncs especificas onus las cclulas T v B l \ . Las celulas B sc pucdcn dis idir en dos subgrupos, B-1 6Mac1 , Cd23 ) y B-2 i Mac- I , CD23' ) . La mayor parts de [as cclulas 13-1 nulestran cl marcador CD5 (L1 I ), prcscntc cn-iginalnlcntc solo en Ids cclulas T, cu1'a tunci6n en [as cclulas B sc ignora, aunyue se asocia corn cl receptor - de la cclula B i BCRI \ pucdc estar inlplicado en 1,1 regulacion do la actil aci6n de dichas celulas . Las Moths B-1 producer de tirnm espontanea los dcnominados anticucrpos naturales, yuc comprenden tanto anticuerpos antilrletcrian0s CUr110 anticuerpos contra autoantigcnos, como ADN, IgG Fc, fostcllipidos y componentcs del citoesqueleto . Estas cclulas se encuentran principalniente en la sangre lulmana neonatal 1- cn la can idad pcritoncal dc los ratoncs, y csistcn indicios de

que se diferoncian a trascs do: una sria distinta yue las cclulas B comcncionalcs ,, del subtipo 132 . Ademas del marcador CD5 de las cclulas T, las cclulas B nnrcstran marcadores do otras lincas cclularcs, coma C:D40 do: algunas celulas dcndriticas . Celulas asesinas naturales (NK) Las cclulas ascsinas naturalcs NIA i c~,nstitulcn Cl 1S'yo dc los linfolcit(1s s,u1gujnoos, s n(( C\hrcsu( I, rCCCptores dc antigeno dc cclulas B iii T. Marcadores fenotipicos de las celulas NK La nlaloria de Ion anti;(cnos CIC suhertiCIC yuc sc dctcctan en las celulas NI< mcdiantc anticucrp((s nu~no(d(malcs aparcccn tamhicn en [as cclulas T o en los nloru)cit(rs,/ nlacro'~taL~os . En la,lirtllr-a 2 .1-1 se ntticstran los principalcs matcadoi-cs dc ]as cclulas NK humanas, asi como las celulas quo tamhicn los posccn . para idcntificar las celulas NK cn poblacioncs lint6citarias puriticadas SC SUCIC11 utilizar antictlcrpos nlonoclonales fronts a (11)16 f FcyRI I I ;I . C: D 16 participa en una dc las s- ias do activaci61l de las cclulas N K, , tanlbien se e\presa en los neutr6filos, algunas n1acrotagos ~ en algunas cclulas T yc& En los granulocitos, CD 16 SC cncucntra tijada a la mcnlbrana cclular mcdiante un venlace tirst:ltidilinositol glicano (1'I( ; ) , nlicntras T y(i yuc las cclulas NK exprcsan la torah transt11cnihrana do: la molecula . ()tro marcador importantc dc las cclulas NK cs CD56 . una n1olccula do adllcrcncia lioni6fla pcrtcnecientc ,1 la supertamilia de las in munoglobulinas ( N CAM J . l:n la actualidad, los critcrios para idcntificar una cclula NK 11un1ana son la ausencia dc C,D3 en prcsencia de CD56 1 ./o ( :D16, aunyuC en un pcyucfo porcentajc dc las cclulas T se pucden rcconocer anlhos marcadores . Las celulas NK en reposo tamhicn ezpresan la cadcna (3 del receptor dc IL-2, un receptor- de afinidad intermedia v 70 kdal dc peso molecular, v la cadeoa 7 transductora dc se-ill, connin para cl receptor de IL 2 y otras receptores de citocinas . Pot- tanto, la cstinxrlaci6n dirccta con IL-2 pros- oca la actin-acidn dc las cclulas NK . Es intercsantc cl 1lecho do yuc las cclulas T coil morfologia cs dccir, las cclulasT yii 1. una parts dc las cclulas T (a(i (DS-, tamhicn esprcsan cste receptor de 70 tidal . lodas estas cclulas respoiiden ante la II .-2, adquiricndo propicdades citot6sicas inespecifi

Marcadores de superficie de las celulas B peiifericas humanas y nltxrlas raten

Igs , CD 40

Marcadores de superficie de las celulas NK humanas marcador

CD16 i;I
1.

ser humano ;1' Ig" Igs CD40 Celula B *~

~`

otras celulas quo to poseen

unrt i~incru~ :R . :~ili.ilas T, algunas macrofagos

81111

gr3n,ilocitos,

I gu Igl ; Ly2 [C0721 CR1

CD11b CD2" CD7 CD8 CD56 CD57 IL-2R (cadena li) KIR KAR

granulocitos, monocitos, algunas celulas TB todas las celulas T todas las celulas T algunas celulas T una minoria de celulas T algunas celulas T celulas T activadas y en reposo algunas celulas T ?

', :HLA-D UN CD22 ' At CR1 (CD35) j~'`'*CR2 (CD21) CD72 s-F- RII (CD32)

CR2 B220ICD451

Ly-1 ICD51 Fc-; RII

Vv1 E-R

Fig . 2 .13 . Muchas de estas molcculas son hom6logas; se muestran coloreadas de la misma manera . Los equivalentes humanos a las molcculas murinas se muestran entre corchetes (f 1) . B220 fue denominada previamente Lyb-5 . Las cadenas Igu e Igli se asocian con la inmunoglobulina de superficie (Igs) y dan lugar al complejo receptor de las celulas B . Los n6meros CD se muestran entre parentesis .

'expresado en el 10-80% de las celulas NK . Fig . 2 .14 . Ninguno de estos marcadores es especifico de una linea celular . KIR : receptores inhibidores de las celulas asesinas; KAR : receptores activadores de las celulas asesinas .

Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

cas, t . sc dcnoniinan colcctitantclltc Celulas ascsinas actiradas poor fin tocinas i LAK, dcl ingles lrrnphokine activated killer) . I as celulas LAK destrutrcn la, celulas tunttrrdICS j0ccncs t, tin cspcctro ntas an,111itr tic celulas ncoplasicas quo: las Celulas NK en rcposo . L'na ditcrcncia importantc cntre las Celulas NK humanas ~murinas es la prescncia cn estas ultimas dc mcnos granulos azurcifilos, pero dc macho manor tarnaflo . En la /itrura 2.1 i sc nurcstra trn rcsuntcn do hos principalcs marcadores tcnotipicos tic Las cciulas NK nTtrrinas .

Activacion de las celulas B y T

fcctatias porr virus. No sc Conocc con tictallc cl mCC;utisnto ntc di,urte cl quo: estas celulas reconoccn a sus objetitos. Los diatiniors subtipos dc celulas NK cspresan nttolcculas do la supcrfamilia tic Los Ig que rcg,ulan su aCticMad -ascsina-. Algunos prOdLlCtOs tic Itss alclos do Class I dcl (:PH pucdcn prostegcr a ]as celulas diana dc la mucrtc, micruras que otros la t-acilitan, do estc modo, la interaccioin dc loos -rcccptoores inhibidorcs dc Lis Milks ascsinasnt f KIIt, del ingles killer cell inhibitory receptors, Como p58, p,'01 Coil Itrs ligandtss do Lfivcrsas mtrlcculas tic) CPH dc claw 1 i .-1, B t, ( ;) czprcsadas pore las celulas diana las prostcgc dc scr ass sinadas posy las CCltrlas NK, micntras que, posy el cosntrario, Ios ," rcccptores actitadosrcs dc la ,, cciulas asesinas ") (K-AR, dcl ingles killer cell aitiratory ricrptots, conic p;0 . I , ;0 .2, ;0 .3, csprcsados por ]as celulas NK pucdcn intcrdctuar tambicn con Ion prtxlucttss dc ditcrsos alclos dcl CPH sobr -r las CdUlas liana, intcraccioncs quo: pucdcn ptsr si soles o junto Coil otras, conic CD2/ITA-1, dctcrrninar Ia actit :tci(Sn dc las celulas NK . I'or Canto, I :ts Celulas K-62, que sc suclcn cniplcar para los cstudios dc la funcion NK, nts CXprcsan molcculas CPH, carecicndoo por Cllo dc ligandos para Ion KIR, pero prcacman I,FA I, to que permits quo: Lis cc. lulas NK (1)2 Los ascsincn . ('onto Los celulas NK cstan equipadas corn al mcnos tin KI R propio, las cciulas propias normalcs no sort lisadas por Its NK autoilogos, sicndo has modificacioncs que sc produccn cn los ligandos tic CPH cspccificos para los KIR en las CcluLts rumoralcs cn dcsarrollo o inlcctadas poor virus [as responsabics tie la lisis ntediada par celulas NK dc las mismas . LaIS celulas NK tanibicn son capaccs tic unirsc a dianas rccubicrt.ts con anticuerpos Ig(;, mediantc su receptor tic IgG (Fr;RI I1 :( , D 16), t' do dcstruirlas . Esta prtspiCCIad sc dcnoniina ci tOtOXiCldad CCluhtr dcl)cntlicntc dc allticucrpos i . (VDA') . Las celulas NK acti\adas fbcran imcrfcr6n-Y (IFNyj \ otras citocinas ip . cj ., II .-1 v Gill-( 51~ i, yuc pucdcn scr importantcs cn la rcgulaciun tic la hcmopot esis y cn las rcspucstas illntunitarias . Marcadores de superficie de las celulas NK marinas marcador -h,ti, t , Lyb-5 (B220) NKM 2B4 Fc7Rlll* Asialo-GM1 CR3 (CD11b, CD18) Ly49a, Ly49c otras celulas qua to poseen
i elulas T

Funciones de las celulas NK I t luncisill Iisiorlug]CA kie has celulas NK consists en rcconoccr v dCStruir tictcrmilladas Celulas rumoralcs (f%7. 2 .M \ celulas in-

I as CCIULIS I c I> sc aCtit an Cu :utdor NC uncrt a stns Anti gcnos cspcCificoos . Lay :clulas h necesitan "\cr ., al anti Clio asociado a ntoIccults ('1111 tic las celulas prcscntadoras tic antigcnos, micntras yuc I :ts celulas B soil capaccs dc unirsc a antigcnos librcs, pero suclcn ncccsitar la colaboraci6n de las celulas f para scr actitadas, salvo cn cl caso de ciCrtoss antiigcnos pohmcriCOS o nttr1000las Coil cap.tcid;td intrinsrca mitttgenica. Para que sc produzca la actnaciosn do Las celulas l' c B, adcntas dc la union cspccifica dcl antigCllto a Itrs rCCCptores tic las celulas T t . B, es precise la intertellcioin tic otras mo1000las tic supcrficic, cosmos CD28 para las cciulas T (\ . cap. 11 ) . La acticacioin t, la prolitcracioin inducidis por cl alltigcllo SC SUCICn producir en los tcjitios linf6i(ICS, t. pucdcn scr obscrc adas in vitro cultit ando linfocitos cn prcscncia dc till agen tc actieador. Entrc esters agcntcs SC cncuCntran : " I.1 antigcnos quo: rcconoccn )ors receptorcs strperficiales .

" AntICUerpos n1rn10Clon1ales frente a (D .i- CCR. " Lcctinas (coma la fitohcmaglutinina iPHA, dcl ingles phvtohaerngrLqlutinin), concatahrm A (Con .-1}, mit(igcno do hicrba carmin (P1trtM, dcl ingles pokeweed mitorficu} . Las Icctin ;is soil proxcinas dc torigrn tcgctal y bactcriano, capaccs de unirsc a los hidratos tic carbono . Algimas dc cllas actitan los . linf ocitos mediantc cl entrcCruzanticllto dc Icos B('R o los IY :R . t SC ticnominan mittigcnos I inductorcs de la proliteracion ) . Sc crcc quo: la cstimulacitin in vitro dc los linliocitos mediantc mitoigenos cs una sinufacicSn bastantc ficicciigna dcl proccso tic cstimulacioin . producidos por los antigcnos cspccificos . La 1'H .t la ccsncacali rw A cstinrtrlan los lintiocitos I' humanos t . tic rat6n, micntras que cl lipopolisacdrido I ITS) cstinutla I ;ts celulas B dc rat6n t- P11A1 cstimula las celulas hunianas Cantor 11 canto T v. ,ha. ? 1 L. . La utilizaci6n dc cstos agemcs in vitro ha Scrtido para dc. ntostrar quo: la actitacion dc las CdUlas T t B conduce a la for. misntas, sicndo csta la macion tic citocinas t tic rcccptorcs dc [as sepal dc partida para quo: se inicic cl ciclo vital do hss clones scIcccicsnados (prolifcraci6n i, que conduce finalntcnte a la ntadu. racioin Y a la produccioin tic celulas cfcctoras t de rncntooria . Aim. 1 .1-11 1 .211) . Las Celulas dc nicnioria rccorren cl sistcnia cirIv culatorio t, sc terminan alojando cn las regiorncs dc Itts tcjidtrs lintiridcs dcpcndicntcs dc celulas 1 to B, cot doncic pcrmancccn prcparadas para responder a una nucta cXposicioin al illisnto antigcnos .

. La intcracci6n cntrc till linfiocitos en rcposo c tin alltigcno dcscnctdcna una scric dc acontccinticnttss bioqu ntiCOS tcnipranos, yuc conducen a la forniaci6n tic ~ , scgundos mensaicros ,, en cl

La sepal de activacion es transmitida por segundos mensajeros

celulas B subtipo de celulas T celulas T activadas algunas celulas T, granulocitos, algunos monocitosimacrofagos granulocitos, monocitos celulas T

*expresado en algunas celulas NK marinas, pero no en todas. Fig. 2.15. Aunque algunos marcadores aparecen tambien en otros tipos de celulas, se ban descubierto marcadores especificos de esta linea celulas. Fig . 2.16 . Una celula NK IN) unida a una celula diana (T). 4.500 . (Por gentileza de los Dies . G. Arancia y K. Malorni, Roma)

Linfocaw;

scnu tic la cclula li rl 1 . I'.strn mcnsajcrus induccn canlbios ,1 ni lel del A11\ cellular . Varias bias inlportantes estan implicadas ell la actitacirin lintircitaria, auntiuC sc dcscrmo ccn los dctallcs do las mismas hasta cl Inomlcnto . El agcntc cncargado dc iniciar cstas rcacciorncs do sebalizacir5n, que EUnSIStert en un aunlento del nlctabulismo dell tbstatidilinositol, cs un compontente cclular dc pcndicntc tic GYP (u protcula G i, tantu ell I :IS celulas T Colno Cn [as 11 . Comrr comsccucncia tic dichas rcaccirmcs, sc produccn drrs mcnsaicros sccundarios, cl I ,4,a-tritustato tic inusitol i I P3) v cl diacilgliccro~l (1)AG i . El I P3 pro\oca la libcraci6n dell ('a" alnlaccnatlr " cn cl interior tic la cclula, nlicntras que ell diacilgliccrol activa la protein cinasa (' . /unto coil otras cinasas, la protein cinasa (' tilstirrila una scric tic nlolccul3s tic supcrticic, lo yuc pru,rl::r I,I intiucciun tic .tlgunrls taa(nrs dc transcripciral Co 11 la :onsiguicn1C actitacion dc cictcrininados genes. AI purl ticinpo dell cncucntro cntre lrn lintirtitrrs T c cl antigeno, sc csprcsan una scric tic molecular tic supcrficic, conur gp39, % rc :cptorcs do citocinas, corrnu II .-2 . Las intcracciones tic cstas nloleculas Iletan a la prolitcracic n t maduracir,n do Iris lintircitos . La diferenciacion de las celulas B da lugar a celulas plasmaticas y a celulas de memoria Iras la a:ntacion dc Ias :clidas I ~ 11, per Iln nuor :n,~ ~~ uit .ul tigcno, sc obscrcan una scric dc taractcristicas tilt raCStr- uCturAICS prupias dell prriCCsu tic dilcrcnciaci6n i t. fires. 2.8 1, 2.18) . Finalnlcntc, machos tic I(rs blastos dc celulas I; nl :titlran Vdan lu gar a :CILILlr prrnluctOras tic antictICrPrrs, title 001110"llall I'll I'll ,() c x tcrininan con%- irticndo cn celulas plasnlaticas totalnlentc titterenciadas. En alguno% blastos B no apareccn Ias cistcrnas dell rcti :ulrr rnti(rplasm:iti:rl rugosrr. Estas celulas SC CncuCntr .ul situadas cn Iris :Cntrcts gCrn1in.11CS, 1. SC t1cnra11inan :CIUIaS tic Irrs ccntrOS tillicularcs o CCntrricitos jt..fit) . 2.191 . ('uando sc obscrta nlcdiantc microscopia riptica, cl citriplasma do Ias celulas plasnlaticas prcxnta un i%l)ccto bas(ifilo ; Csto sC detx a [as grantlcs cantidadcs do Alt\ gLIC crrllticnc, quC la cclula Csta utili/andrl para la sintesis tic allti :uCri,os en cl reticulo en doplasinatico rugoso i /irt . 2.2(11 . :1 nilrl ultracstructural, cs fiCcucnte que cl reticulo cndrrplasnlaticu prcScnte una disl)Osicirin paralcla (1?rf . 2 ._'1 i . Es rartr cncontrar celulas plasinaticas circa lames, ca clue constitu\Cil nlcn(n dell 0,1"G, tic la poblacion lintir citaria total . Suclen cstar crmfinadas cn los rlrganos Iintilitics x . cundarios 1 en lus tcjidos, aunque tal11bICI1 son abundantcs en la mcdula ()Sea. Los anticucrpos producidois prlr una cclula plas-

matiia crmcrcta sun tic una soda cspc :ilicidad 1 . dc una uni:a clasc tic illllltllloglobill1I1a . I .aS innlunoglobulinas SC l,ucdCn rlbSertar en cl citoplasma do las celulas plasnlaticas mediante tinclorllC% coil anticucrpo% c%pccificos marcado% coil Su%tanclas tluorcsccntes I hrh '-31 . I .a t - ida do las celulas plasnlaticas cs corta, tan s6lo tic unos cuantos dial ; sc dcstrul,cn nlcdiante un procCtirl tic apoptosls (hr/ . 2.23) .

Fig. 2.18. Ultraestructura de los blastos de celulas T. Los blastos de celulas T, clue aparecen tras la estirnulacion con un antigeno o un mitogeno, son grandes celulas con un extenso citoplasma, que contiene diversos organulos, entre los que se encuentran mitocondrias IMI y polirribosomas libres . Los blastos pueden ser no granulosos 11) o granulosos 121, segun la presencia o no de granulos electrondensos (G) . Observense tambien las goticulas lipidicas (L) dell blasto granuloso. "3.200 .

110

2 Fig. 2.17. Blastogenesis linfocitaria inducida por mitogeno/antigeno. Las celulas T y B humanas que se muestran habian sido estimuladas mediante mitogeno de hierba carmin . 1) Aumento de la basofilia dell citoplasma y aumento dell volumen cellular . 2) Los cromosomas se condensan durante la division cellular y se observan claramente . Tincion de Giemsa, .1 .500 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edition, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.19. Una celula pequena de un centro follicular . Estes celulas presentan (it) citoplasma extenso repleto de polirribosomas (P), con escaso reticulo endoplasmatico rugoso (ER) y sin apilamiento de las cisternas (disposition paralela dell reticulo endoplasmatico) . Observese ell gran nucleolo (N) situado en position excentrica sobre la cubierta nuclear . Esta celula, clue puede ser una celula B de memoria, tambien aparece como celula tumoral en determinados linfomas de tipo centrociticocentroblastico . 8.500 .

Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

Fig. 2.20. Morfologia de las celulas plasmaticas. Las celulas plasmaticas maduras presentan un nucleo excentrico y una gran cantidad de citoplasma basofilo, debido a la abundancia de ARN, necesario para la sintesis proteica . La region clara paranuclear corresponde al Golgi . Tincion de May-Grunwald-Giemsa, :1 .000 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.21 . Ultraestructura de una celula plasmatica . Estas celulas presentan un reticulo endoplasmitico rugoso (E) dispuesto de forma paralela . En las celulas maduras, estas cisternas se encuentran dilatadas debido a su contenido de Ig . Tambien se observan mitocondrias (M) . " 5.000 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.22. Tincion inmunofluorescente de la Ig intracitoplasmatica de las celulas plasmaticas. Las celulas plasmaticas humanas, fijadas y tenidas con Ab ftente a IgM humans marcados con fluoresceina (verde) y con Ab frente a IqG humans marcados con rodamina (roja), muestran una intertsa tincion intracitoplasmatica . Estas celulas solo suelen sintetizar una clase o subclase (isotipo) de Ig como demuestra la diferente coloracion adquirida por las dos celulas. .1 .500 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edicion, Milan : EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.23. Muerte por apoptosis de una celula plasmatica . La vida de estas celulas es corta, siendo destruiclas mediante apoptosis (suicidio celular) . Veanse las alteraciones de la cromatina nuclear, caracteristicas del proceso. .5 .000

Marcadores de activacion de los linfocitos l), ,,C iniCia 1 .1 C\I)I-C%i(')Il de 1101,I) ( .uami(> sC :lCli\ .ut Lts celulas - 1 \ supCrfi6C, :tuntcntand(, tanahicn la cxdo CiCrtas nu(ICCULas do prcsion Lie otras nutleculas +IC \-a sc cxprcsal,an prccianacntc . Entre cstos naarcadorcs dc acti\aci()n sc encuentran naoIccUlas dc adhcrencia, clue permitcn tnaa intcraccilm rnds cficaz coil otras celulas, N' rccept(rres do tactores de crecimicnto N' ditcrenciaci(in, precisos para la prolitcraciun . dilcrcnciacilm cclular . P(tr cicnaplo, el recept(n- LIC IL-2 (11, 2R), que se express tras la acti\.tci(m de [as celulas 1", esta liarnaado por tres subunidades. I .a s ccell I(tlas l rcposo pcncen la Unidad y (('1)134}, rnaientras que algunas celulas h en rcposo del tipo LGL tanthicn cxprcsan ('D122, la cadena Ii (id receptor-, tras la activaci6n, se induce la sintesis dc la subunidad (z f ( :D25), con to que se tbrma un reccpt(ar lactcrotrinacrico dc 11 . 2 R dc alta atinidad . En las celulas l'

actisadas, se induce transitorianacntc la sintesis do la naolecula gp39 f ('1)401 . ), v sc cxprcsan t:unbicn los rcecptores dc ti-annstcrrina i ( ;D?1, importante para la prolitcraci6n i, ('D38 \ ('D69 . ell las tries iniciales dc la ontogcnia de Estos inarcadorcs aparccen l as celulas T, pcro dcsaparcccn durantc la lase dc dcsarrollo ell el

tinto (v. cap. 12 i . En las celulas T huntanas aparcccn naolcculas (TI I do class 11 durantc las tries tardias del proccso do actixaci(in, pero estas molecular no sc encuentran en las celulas T nau rings. Las c lulas T v ]as Celulas dcn(mainadas -Celulas dc rncnaoria cxprcsan (-D29 fcadcna (31 dc VI .V como marcador do .tctis :uiGn nanV tardio . Pot tanto, la tunci6n de rncnaoria dc la pohlaci(Sn celular (:1)4'('1)29' podria ser debida al aunacnto dc la cantidad do Cicrtas na0I000las dc adlacrcncia inducido por la actisacitin, que tacilitaria la intcracci(m con otras Celulas Cuando cl animal se \UClsa a encontrar con cl antjgeno .

Fagocitos mononucleares

Lime los marcadorcs dc activacion dc [as cclulas B sc encucntran los rcccptorcs do I1,-2R tic alto afnidad, asi como otros receptores dc lactc~res do crecinticnto v ditcrenciacicm, coma I1 .- .,, IL-4, IL-5 c I1 .-6 i v. cap . 1W . Todos cstos rcccptorcs han sido clonados N secucnciados . Tambien sc dctcctan rcccptorcs dc transferring (( :1)'1'i altos concentraciones de molecular CPfI do membrana tic class II . En las cclulas B actisatias tuun:uuts N marinas se detecta tambicn la prcsencia dc C :I)2 (FcsRl1, un receptor do IgE dc baja afinidad), quc induce la prolifcracicin tic dichas cclulas . CD38 aparece ell Ias cclulas plasmaticas totalmentc diferencigdas s . en los ccntros germjnalcs I'asi coma en Las tries nt3s prccoces Lie] desarrollo dc las cclulas B), aunque no sc cncucnir :t en las cclulas B Iwmanar maduras . A to largo tic todo cl proccso do ditcrenciacion de las cclulas B, las molecular antigc no 1 dc la cclula plasmatica (PCA-11 solo sc encucntran en la Case dc cclula plasmatica . Las cclulas dc mcmoria prcscntcs ell los ccntros gcrminalcs dc los toliculos sccundarios (x . Cap . 121 no cxpresan Igl) dc supcrticic ni Cl)22 . Entre los marcatio rcs do actixgcion dc las cclulas NK sc ell cuentran ]as moleculas ( :PH dc class II .

FAGOCITOS MONONUCLEARES
El sistema fagocitico moncntuclcar cumplc dos fimcioncs principales, coda una tic las cuaICS CS Nevada a cabo por oil tipo dc cclulas proccdcntcs dc la mcdula circa : " !si :urcifagos fagociticos , protesionalcs ,~, cuya naision principal cs chmjnar particular antigcnicas .

" Cclulas prcscntacioras dc antigcno (CPA), cuya misicin cs ingrrir, proccsar prrrrntar los antigcnos a las cclulas T . En cl pasado, la red dc macrcilagos fagociticos tlrularCS, junta con las cclulas endotchales, foe denominatia "<sistcnta rcticulocnciotclial- iSRE'I . Los macrofagos fagociticos sc encucntran ell muchos <irganos (_?0. 2 .24'), v pucdcn scr localicados mcdiantc la invec skin por tia intravcnosa tic particular do carbono, quc ciucd :ul dcpositadas en los tcjidos quc conticncn dichas Mid is ifc1 . 2.2 .51 . En su proccso dc difcrcnciacion, las cclulas progcnitoras nucloidcs dc la mcdula ()sea don lugar prime ro a promonocitos v, m :is tardc, a los monocitos sanguincos (;s-. cap . 12) . Estas cclulas circulantcs atrasicsan [as parcdes dc los vases sanguincos y sc dirigen a los difcrcntcs organos \ SiStem1S tisularcs, en doncic sc transturman en macrofagos . Los nacnxxitos prcscntcs en la Sangre Manta na Pressman un tamano mayor i; 10 18 pull do di5ntctro,i quc Cl tic los hnlOcitos . Gcncraltncntc, su nuclco dens forma dc hcrra2.20} . En dura, y suclcn contcncr LCnuCS gramdos azurcifiloS cuanto a su ultracstructura, los monocitos poscen membranes irrcgularcs, un complcjo dc Golgi Hen dcsarrollado y muc1ios IiSOSOmas intrtcitoplasmaticos fJirf. 2.27) . 1 : %tos lisosomas conticncn pcroxidasa \ discrsas hidrolasas acidas, quc son intpcn-t :uitcs ell cl proccso do dcstruccicin intracclular dc los microorganismos . Los monocitos/macrdfagos sc adhicrcn a [as supcrficics dc vi Brio y pListico, y tagocitan actjcatrtcntc organismos in ritrro, c incIu50 cclulas tumoralcs . La adlicrcncia v la ingcsti()n por los monocitos sc produccn cuando [as cclulas se tu1Cn a los organismos :t travcs dc rcccptorcs esl,ccializados . Los rcccptorcs SC puCLIcn unir a cicrtoss Iudratos tic carbono dc la pared Molar nucrobiana, o a las IgG y cl complcmcnto quc rccubrcn al microorgaitismo .

El sistema fagocitico mononuclear monocitos sanguineos circulantes cclulas de Kupffer del higado
Shdt : ci SIf1t~E+1-l :id

mesangio intraglomerular del rin6n

macr6fagos alveolares de los pulmones

hepatocito `celula de`1 \, ~Kupffe-

cclula endotelial del capilar

macrdfagos de las serosas microglia cerebral r U1'UI YJI UI

Pociocito macrofagos de los senos esplcnicos macrofagos senos gangl. linfaticos

membrana basal fibras ,e,

-fibras refculares capilar

macrofagos

Fig. 2.24. El sistema fagocitico mononuclear comprende a los

monocitos sanguincos y a los fagocitos quc residen en los tcjidos o se encucntran fijos sobre la superficie endotelial de los capilares sanguincos . Estos macrdfagos se denominan cclulas de Kupffer en el higado, y en el rin6n se Ilaman cclulas mesangiales

intraglomerulares . Los macrdfagos alveolares y de las serosas (p . ej ., los peritoneales) son ejemplos de macrdfagos ndmadaso . Las cclulas de la microglia cerebral penetran en el cerebra alrededor del momento del parto, donde se diferencian, convirtiendose en cclulas fijas .

Celulas clue intervienen en la respuesta inmunitaria

L S

Fig. 2.25. Las particulas inyectadas por via intravenosa quedan localizadas an el sistema reticuloendotelial . Se inyectaron a un raton por via intravenosa particulas muy pequenas de carbono y, cinco minutos despues, se le sacrifico . El carbono estaba acumulado en los organos en los que abundan los fagocitos mononucleares, es decir, en los pulmones (LI, el higado (VI, el bazo (S) y en zonas de la pared intestinal (G). Tambien se muestra el color normal de los organos en on raton control (izquierda).

Fig. 2.26. Morfologia de un monocito . Los monocitos sanguineos presentan un nucleo caracteristico con forma de herradura, y son mas grandes que la mayoria de los linfocitos . Tincion de Giemsa, " 1.200 .

Marcadores celulares de macrofagos/monocitos 1 (), nlonocitors,'n1acrc'rfa"os 11un1,111os i . mini(  PoSCCn rcceP-

u n-cs de ntanonil-turorsil i NIM, que sc uncn a k)s aztical-CS tic 1 .1 stlpcrficic tie Icrs micrcxrrganismos v cic las CCIU1JS Corhoralcs t1ctcrioradas, conao por cicnlplo eritrocitos cmcjccidos . Otros re ccptorcs do azucarcs son Icrs rcccptorcs Para N-acctil glucos .trnina . Las cclulas yuc 11,111 sutrido cl proceso tic apoptosis son climinatias nlcdiantc los rcccptorcs tic tbstatidilscrina tic los nionocitos/macrofagos, entire otrors . listas cclulas tanil,iin Czprcsan CD14, tin receptor tic la protrina tijadorra do liporporlisac,iridor (111P, del inglcs lipupnllsaccliariiYc-hindirrR prateirt ), title suck Cstar prcscntc en cl sucro 1, rccubrC a las hactcrias granincgativas . Los n1acrulagos y nloalocitos posccn tanlbicn tires rcccptorcs ditercntes dcl dornlinio Fc do Isis IgG: " 1~cyl(l iC64) en las cclulas humanas, que prcscnta una alta atinitlad por la IgG. Estc receptor cs an :ilogo al Fcyltlla murino . " 1~c IRII (CD32), de atinidad intcrmcdia y cquivalcntr al rccePtor Fc;l(1111/1 n11trino . " Fc,R111 i('1)16'1 o Fcyftlo i cn cl rat6n), tie baja afiniclad y prcscntc solo cn una subpoblaci611 tic monocitos. Estos rcccptorcs tic Fc probablenicntc cumplcti difcrcntcs cotic mctidos, entre los yuc sc cncucntran la iniciaci6n los proccsos do dcstruccioin cstracclular, la opsonizaci6n 1, la tagocitosis. Otro receptor iniportante p:u-a la ingestion tic microorganismos cs cl receptor del complcnicnto CR1 l receptor tic (:311, CD35 is: cap . 4 j . I?ntrc IaS ntolcculas cncargadas tiniti:uncntalnicntc tic la adllerCncia V do la acmaci6n so: encuentran cl receptor del coin Memento (at3 (rcccptorcs ('3bi, (:1)116/CD18, Mac 1), clue csta prcscntc cspccialmcntc cn los mact-61agos activados, cl antiUCno IilAcional ICUCOCitariO 1ITA, dcl inglcs It'll uln~te liorlctinrl autigen, ('DI 1a/CDl8), p150 .95 fCD11c,,^CI)1S1 tEn hts \artculas intracitoplasmaticas Lie los niacr6tagos se encucn tran tanto ITA-1 conlo pl50 .95, yuc sc czprcsan rapidamcntc tras 1 .1 actn'actlrn . AIgUnOS Illonocltos/nlacr6tagos poscen antigcnos (TI I do clasc 11, yuc son importamcs a la hora tic prcscntar Icrs antigcnos a las cclulas T. F.n los nrurotagos actisados t:ultbicn Cxiste un receptor dcl dominio Fc Lie Lis IgE : de haja afinidad i FccRI1, CD23 ) . Otras molcculas clue se cncucntran en los macr(rlagos hunianos soil CI)13, CD15, CD68 v X'LA-4 ICD29,^CD4S)d,~ . Fs preciso hater hincapic cn que ninguno de

Fig. 2.27. Ultraestructura de un monocito. Se observa el nucleo con forma cie herradura (N), las vesiculas pinociticas (P), los granulos lisosomales fL), las mitocondrias (M) y las cisternas aisladas de reticulo endoplasmatico rugoso (E). " 8.000. (por gentileza del Dr . B. Nichols, publicado en J Cell Biol 1971 ;50:498, con autorizacion .)

los marcadorcs nicncionado hasty cl montcnto cs cspccifico tic Csta IinCJ cclular, .ntnyuc F-C,VRI CS un niarcador n1uV r til. En cl ratoin, los marcadorcs cspccificos tic linca soil F480 1 160 kdal cl receptor do critrocitos tic carnero iSER, del inglcs sheep er.vth. rurrte- receptor)-, no se debe ccmlundir ecru CD2 1 t cl receptor tic critroblastos i EbR) . En la pqura 2.28 sc indican los principalcs marcadorcs tic loss monocitos, nlacr('')fagos humanos t . nrttrinos . Adcnais de todas cstas molcculas, Icrs monocitos y Icrs macroitagos tambicn posccn rcccptorcs tic citocinas, contro 11, 2, IIA c IFNy . Por tailor, I :is timciorncs quo: IIcun a caho los ntonorcit()S los macr6tagos Pucdcn scr cstimuladas por la action do las citocinas sccrctadas por las cclulas T sobrc cstos rcccPtcn-es . Fstos ntonocitcrs/macr6fagos actii ados, a Su trz, son capaccs tic prorducir citocinas, CntrC ]as que SC cncucntran loss intcrtcroncs, la 11, I \ Cl TNFu f, cap. 111) . I -amhicn prOdUCCn ccmlPoncntcs dcl coniplemcnto, prostaglandinas, Productos rcaCti\OS dcriiados del osigcno t . 6rddo nitrico . Los monocitos \', cn mcnorr nlc dida, los tnacr6fagos maduros se parcccn a los ncutr6filos cn Ml contcnido en pcroxidasa, que inactisa CI pcrcixicio do hidroigcno-

Celulas presentadoras de antigenos

Resumen de los principales marcadores de superficie de los monocitos/macrofagos murinos y humanos

CD11a/CD18 CD11b/CD181CR3) CD11c/CD18 uD/CD18 CD13 CD14 CD161FcIRlll) CD17 CD25 (IL-2R - cadena (s) CD31 CD15 CD321FctRll) CD35 (CR1) CD64 (FcvR1) CDw65 CD68 MFR FciRllb/c* FcvRlo* F40/80* CPH clase II *exclusiva de celulas murinas CD36

Celulas presentadoras de antigenos

piel

celula de Langerhans

celula camuflada migrando

Fig. 2.28. Muchas de las moleculas CD no se has definido todavia en las celulas murinas. MFR: receptor de manosil-fucosa .

CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENOS

Las ('RA constitusCn una poblaci6n leucorcitaria hetcrogcnca, con una cstraordinaria capacidad innlunorstin1ulante . Algunos dcwnlpcnan tin papel cstncial en la inducciCrn dc la actividad fitncional tic las celulas - 1'H; otras establecen conuinicacicin coil otros leucocitos . I .as ('PA abundan cspccialtncntc cn la picl, los ganglios ]in taticos, cl b:vo, Cn cl wnor () debajo dc las nlucorsas s- en cl timo i firt. ? .?9l . I .as (PA aryuctipicas son Ias celuas dc I angcrhans tic la picl . E%tas celulas migran cn forma dc ~-cclulas camulladas ., a traces tic lots sasos linfaticos atcrcntcs hasty la /ona paracorrtical dc los ganglios linfaticos regionales . En csta /crna, dichas celulas intcractuan con Muchas celulas 'I- Y pawn a tlcnonlinarsc celulas interdigitante% i_/iq. ?.3(ll . I -ata migraciun ccrnstitu_sc tin cticaz mecanistno de transports del antigeno dcsdc la picl v Ia% ntttco %as hasty las celulas Ttl situadas en los ganglios linfaticos . Las (TA conticncn grandes cantidacics dc moleculas ('PH dc class 11, yuc son escnciales para prcwntar los antigenos a las celulas 'I 'l I . ()try poblacion cspcciali/ada dc (:PA son las celulas ticndrificas tirlicularcs, yuc sc rncucntran cn Ins tirliculos xcundarios dc las zonas dc celulas B de los ganglios linfaticos, del bazo v del tcjido lintiridc asociado a Ia% mucosas CH .A\I I . Son capaccs de presentar antigenos a las celulas B V ccnutitus,cn una poblacion de celulas no migratorias yuc ti)rnlan una red cstable mediantc Cl cstablecitniento dc firmer unioncs intercclularcs dc tipo tlcsnlo soma . ('arcccn dc n10IccuLts (PI I de class 11, pcro SC uncn a los antigeno)% a tr .tscs dc los rcccptrrres del complcmcnto ((D3S c CD21 i, nlctfiantc Icrs cualcs intcraccionan coil los innt1u1orcortnplejos ( icosomlas i . Tanlbicn czpresan reccptorcs para Fc . En cl centro germinal de Icrs tt)liiulo3 secundaric)s dc CCIUIas B sc Ila descrito rccicntenlentc otro tipo dc (IRA, la celula dendritica tic centro germinal con ( :PH tipo II (del inglcs cfertuinal centre drudritic iCll), yuc, a ditcrcncia dc Ia% celulas dendritica% fir licularcs, %ors tnigratorias c intcractuan coil [as celulas T cuando region paracortical (region dependiente ~ de celulas T)

macrofago celula dendritica folicular en el centro germinal celula dendritica interdigitante

timocito red epitelial macrofago celula medular interdigitante

Ilegan al centro germinal . El limo tanlbien conticne CPA, dcnonlinadas tambicn celulas intcrdigitantcs, sicndor cspccialtncntc abundantcs cn la medula del tnisnlo . El limo ticnc una Bran importancia para cl dcsarrcrIlo c maduracicSn dc las celulas T, _y parecc yuc las CPA yuc coil ticnc dcsctnpehan algtin palicl cut la eliminaciern de las celulas T rcactlvas frcntc a autoantigcnos. Este proceso tic denotnina , sc leccilm ncg,ttisa ,, (v, caps . 12 \ 14i .

Fig. 2.29. Las celulas presentadoras de antigeno (CPA) procedentes de la medula osea se encuentran en los tejidos linfoides, en la piel y en la mucosa . Las CPA cutaneas son las celulas de Langerhans, quo estan en la epidermis y se caracterizan pot la presencia de unos granulos especiales Ilos granulos de Birbeck, con forma de raqueta) . Se tree quo estas celulas, ricas en moleculas CPH de clase II, transportan los antigenos procesados por las via% linfaticas aferentes (en donde se encuentran en forma de celulas camufladas) hasta la region paracortical de los ganglios linfaticos regionales . AM establecen interdigitaciones con las celulas T. Estas celulas interdigitantes~-, situadas en las regiones del ganglio linfatico dependientes de celulas T, presentan el antigeno a los linfocitos T colaboradores . La presentation a las celulas B es Ilevada a cabo por las celulas dendritica% interfoliculares, quo estan en los centro% germinales de los foliculos de celulas B. Algunos macrofagos quo se hallan en el cortex externo y en los senos marginales tambien pueden actuar como CPA. En el timo, las CPA aparecen como celulas medulares interdigitante%.

Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

La mayor parte de las ( .P9 sc originan cn la mcdula dsea, antique no SC C(an(ale su Celula progenitoria . Asi, 1([0 dias dcspucs de un trasplantc dc mcdula ()sea (% . Cap. 27), todas las Celulas dc I ingerlians epidcnnicas del receptor sc habran sustitui(i(( por cc

lulas del donantc . Tras Id CStItnttlaciUn in ritra Coil GM ( :SF e 11 .-4, los na(mocit(~s pierden su capacidad tagocitica y sc transtiirman cn unas cficicntes Celulas prcscntadoras dc antigeno con CPH class II v mortologia dcndritica . Es probable que las Celulas IuliCUlarcs dendriticas dc los t61 CUlos primarios y secundarios no se origincn en la mcdula tisca, postulandosc una naturalcza tncscnquimal dc Las rnisnaas . Las Celulas B prcscntar un alto cotatcnido de moleculas CPH de class 11 I cspccialmcntc tras su acti\aci6n ,o, por to quc son ca paces de procesar prcscntar antigenos cspecificos a Las Celulas I' I aCtiaadas) (~ . cap. I 1 ) . La fiwrra 2.31 rccogc algunos dc los marcacorcs prcscntas en l.as divcrsas CPA. Las Celulas somaticas ajenas al sistenaa innutnitario no SUCICr cxprcsar ra101000LIS CPH dc claw 11, pero algunas dc class (que ratinocitos, epiteho tiroidco, cndotclio) pucdcn set estimuladas por citocinas conto cl IFNy y cl TNFu, adquiricndo capaCidad para prcscntar antigenos . Esta inducci(in dc la exprcsibn ~<inadeCu : cla,, dc moleculas dc claw 11 PUCdC set- una dc l as causal (Ie algunas entermcdades autoinnaunitarias v dc los procesos intlamat(arios de larva duration .

POLIMORFONUCLEARES, MASTOCITOS Y PLAQUETAS

Los granUIOCitos polinaorfontic]cares (dcn(mainados frccucntenacntc -granUIOCitos o 4'MN>~,~ corrcsponden principalmeitte a los neutrofilos, clue sc prodUCCn en la mcdula ()sea a una vclocidad de 7 milloncs por tninuto, v xivcn poco ticmpo (2-3 dias ;i cn comparacion con los monocitos/macr()tagos, qUC pueden per durar durante mcscs o atios. Los granulodtos Constituven Cl 0070% del Conjunto de ICUCOCitOS sanguincos normalcs, v tambien se enCUCntran cn los tcjidos . AI igUal clue los monocitos, I(n PMN son capaccs dc adhcrirsc a ]as Celulas cndoteliales clue rccubrcn los

Fig . 2.30. Ultraestructura de una celula interdigitante (CID) an la region de Celulas T de un ganglio linfetico de rata . La celula establece contactos intimos con las membranas de las Celulas T vecinas. El citoplasma contiene un sistema endosomico bien desarrollado y no se observan en el mismo los granulos de Birbeck caracteristicos cle las Celulas de Langerhans cutaneas . (T = nticleos de las Celulas T; I = n6cleo de la CID; M = membrana de la CID.) }2 .000 . (Por gentileza del Dr. B. H. Balfour.)

Marcadores de las diferentes Celulas presentadoras de antigeno

Celulas c6lulas dendriticas Celulas de foliculae Langerhans interdigitantes CPH clase II Fc-fR (CD32) FcfR (CD64) CD35 (CR1) CD21 CD2 CD4 CD1a CD40 ENE Fagocitosis + + 7 Elevada + + + Elevada

CDCG

ce1ulas B

nacrdfagos Fig. 2.31 . Las Celulas de Langerhans ICL'I, las Celulas dendriticas interdigitantes (CDI), las Celulas dendriticas del centro germinal (CDCG) y los linfocitos B a que clan lugar contienen una Bran canticlad de moleculas CPH de clase II, para establecer comunicaciones con Celulas T CD4-. La expresion de CD4 en algunas CPA puede explicar que se infecten por VIH (v . cap. 22). Los macrofagos (M) expresan niveles bajos de moleculas del CPH de clase II para la presentation de antigenos y son basicamente Celulas fagociticas. Las Celulas dendriticas foliculares (CDF) presentes en los foliculos primarios y secundarios no expresan el CPH de clase II, pero tienen niveles elevados de FcyR, CR1 y CR2, que les permiten atrapar a los inmunocomplejos (icosomas) para su posterior presentation a las Celulas B. ENE : esterasa no especifica .

+ Baia

Baja

Elevada

Polimorfonucleares, mastocitos y plaquetas

1a%os sallgulncos I margillaii6n I \' do e\tral'asarsc i deslizarse eIl tre dichas cclulas 1 salir del 1 ascl sanguinco ; 1 . Jtr7 . 1.1-) . Este proccso sc e1cnonlina diapcciesis . La adhcrencia se debe a la prcscncia cn cl granulocito do rcccptorcs clue rcconoccn ligandos situados cn [as cclulas cndotclialcs, t es inducida por los agcntes quimiotacticos, como la 11, 8 i:1 . cap. ;) . Los granulOCitos no mucstran ninguna especificidad intrinscca por lcls antigcnos, pcro dcscmpciran tin papcl importantc cn la protcccioin fi- cntc a los microorganismos durantc cl proccso do intlanlacicin aguda iaCtuando gcncralnlentc do forma sincrgiCa Con los antiCL[crpos v cl complemento ) . Su htncion prinfit ocitosis . La extrema sensibilidad a las intccciones cipal es la do Ios indiciduos Cu\a cantidad do granlfocitos SC cncucntra reduCida, asi como cn aqucllos clue padccen cntcrnledacics gencticas poco f-ccucnics en las clue no had cxtralasaci()n como rcsPucsta a Ios cstimulos quimiotacticos, es una cicmostracicSn palpable do la inlportancia do cstas cclulas.

zilna). Los granulos sccundarios (espccificos I conticncn lactolcrri na 1 lisozinla . Ademas en cnzimas v lactoterrina, los granulos coil tienen tanlhicn concentraciones elel adas do proteinas antibioticas, como dctcnsinas, scprocidinas, catclicidinas 1 protcina inductora do pcrnlcabilidad cn las bactcrias Ii 111'1, del inglcs bacterial pcrrncability indircinq protein) . I .os microorganisnlos ingcridols qucdan

Neutrofilos Los ncutroflos constituvcn mss del 95t, do los granulocitos cirCuhultcs . 1'rcsrnt .ln un niiCICO nlultilobulado caractcristico 1 un dianxrtro do 10-20 tin (figs. 2.321 ?331 . l-:ntre Ios at entes quimiotacticos para Ios neutreifilos se enCucntran tragnlentos proteinas clue se liberan cuando se produce la actil,lci()n del complenlento ip . ej ., (' .;a l, tactores procc dentes do Ios sistcnlas fbrinolitico 1- do ]as Cininas, sllstancias prodIlCidas por otros Icucocitos o pclr las plaquctas v dcterminados pr()kluctos bactcri,ulos . LOS cstimulos quimiotacticos induccn la nlarginacicin 1adIlCrcnCia a Ids cclulas cndotclialcs) 1 la diapcc1csis de Ios ncutrcifilos . En Cl Capitulo 5 SC C(mICnta ell cletallc cl procCacl do cxtra\asaci6nl . LOS ncutr(ifil(ls Cunticncn un gran nunlcro do proteinas antibioiticas alntlccnadas cn dcls tipos principalcs do granulcls qiq. 2 .33, . Los grallltlcn primaries (.aZUr<ifilos) son lisosomas quc contiencn hidrolasas ;icidas, nlicloperoxidasa 1 nulranlidasa liso-

Fig. 2.32. Morfologia de un neutrofilo. Se observa un neutrofilo maduro con su caracteristico nucleo multilobulado y con granulos neutrofilos en el citoplasma . En una de las celulas se reconoce con facilidad el (palillo de tamboro (cromosoma X inactivado), clue confirma clue la muestra se ha obtenido en una mujer. Tincion de Giemsa x1 .500 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.33. Ultraestructura de un neutrofilo . El citoplasma de un neutrofilo contiene granulos primarios (P) y secundarios (S), siendo los primeros (mas electrondensos) los menos abundantes . El nucleo (N) es multilobulado (flecha) . Las flechas indican los pores nucleares. .17.500 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.34. Un neutrofilo clue ha fagocitado Escherichia coli (E). Se observan numerosas bacterial denlro de los fagolisosomas . Observese clue la celula esta desgranulada casi por complete, pero todavia se observan algunos lisosomas (flechas) en proceso de fusion con los fagosomas. K15,000. Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

Fig. 2.35. Morfologia de los eosin6filos. Destaca el ndcleo bilobulado y los granulos eosinofilos en el citoplasma . Tecnica de Giemsa . " 1 .000 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.36. Ultraestructura de un eosin6filo humano . El eosinofilo maduro contiene granulos IGI con cristaloides en el centro . N: nticleo; RE : reticulo endoplasmatico ; P: poros nucleares " 17 .500 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cols . Atlas of Blood Cells : Function and Pathology, vol. II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

confinados ell unaS s aCUOlas dcnominadas fagosontas, quo sc trtSiontan con los lisosonras dando lugar a lagolisosonias (ha. 2.34) . ('uando los ncutr6filos son actinados prn' ill nuutttCOmhlcjos a trascs dc %us rcceptorcs Nq, tambien sc pucdc producir la It11craci6n al cspacio Cxtl-JCClular dc granulos V Sustancias citoell t6xica, . Estc puedc ser un mccanismo patoginico intportantc I .ts Cnlermedades debidas a la presencia dc ill mun000mplCjor, comp la hipcrscnsibilidai dc tipo 111 (\- . cap . 25).

I .oiti C(,I1t()IilooS Sanguincos Itttrt1.Ulos SUCICII prcscntar un n6CIC0 I)il(~I)uLIdoo . una grail cantidad de granul()S citoplasntaticos, que Ell insc tiiicn Con colorantes :icidos, como la cosina ll?q . 2.35'1 . dis iduos sailor, no alcrgicos, constitu\'Cll cl 2-5",b dc IOS IC000Ci-

Eosin6filos

tOS s.utguinCOS . Parece quC soil capaces dc fagocitar y destruir mi0roorganismos, aunquc csta no Cs Su fttnCi()n Principal. LOS granulos dc los CosinoifilOS tnaduros soil organulos rodcados dc ntenillrana, con ttna region central de naturalcza cristaloidc que prescntt dilerente opacidad Irentc a lots clectroncs que la ill atriz quC la rodca (/ia . 2.361 . Hay diNersor Cstintttlo>s quC pro\oocan la dcsgranulaciorn (IC IOS COSInUfi1OS . En CStC prOCCSO, IOS gr.inul0S intracClul .u-CS SC fusionan con la ntcntbrana plasmatica y libcran cl contcnido dc los gninulos Itacia cl Cxtrrior. E%tt CS la unica forma en quC cstas cclulas pueden utilizar cl comtcnido~ de Sus granulos para atacar a dianas grander, como lots esquistosontntlas, imposibles dc tagocitar ifq. 2. .i -I . ()tro mccanismo cmplcado cs la prodUccion de pro duCtos rCacti\oS dcri\ados dCl oxigeno. Se crcc que los co~sino~fi-

Fig. 2.37 Muerte de un esquistos6mula por un eosinofilo . En la imagen un eosinofilo (Eoh se Line a un esquistosomula opsonizado de Schistosoma mansoni (S) . Observe el material electrondenso Ipuntas de flechal en la interfase, que contiene MBP y ECP. Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicion, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.38. Morfologia de un bas6filo . En este frotis sanguineo se observa un basofilo tipico, con sus granulos de color violeta azulado intenso . Tincion de Wright, - 1 .000 .

Polimorfonucleares, mastocitos y plaquetas

los, nictliantc cstc mccanismo, tjcscmpctian tin papcl cspccializaell do la inniunidad trcntc a los Iiclinintos parisitos (~ . cap. lfi) . I .os cosinofilos son atraidos por dctcrininados productos,

Bas6filos y mastocitos

a Lis csquistciscirnulas llarsas de esquistosontaI recubicrtas coil IgG o IgE, v sc desgranulan, lihcrando una toxina dcnciminada p- otcina basica principal- (AMP, del inglcs Major basic protein i . ell Esta tuxina sc localize cl ccntro cristalino del granUlo, a ditcrencia dc otra sustancia t6xica, dcnominada protcina cati6nica del cosindfilo (E(:I', del ingles crrsinopbil cationic pi-otein), title sc localize en la ni :uriz del mismo. Len cosin6filos tamhicn lihcran hist;uuinasa y arilsullatasa, yuc inactisan la Itistunina v la sustancia do reacci6n lenta de la anatilaxis (SRS-A, del inglcs slow reactive suboauce nl'ampl~vlaxis) producidas por Ices mastocitos . ['or tanto, los ctectos tic los factores de los cosinofilos son I :t atcnuaci6n tic las rcspucstas inilamato6as i . la rcduccioSn tic la migraciun do granulocitos liacia cl Itigar dc la im aNi611 .

como cl factor quimiotactico dc cosinoSfilos dc la anatilaxis E(TA, del inglcs cosiuopbil cbcmotartie,/actor of auaphrlaxis;l, yuc libcran las cclUlas T, los mastocitos y los hascifilos . Sc UnCn

prcscntar una scric tic propicdadcs idcnticas a las tic los basbfilos . Has' dos 6l,os tic mastocitos ; los mastocitos tie la mucosa i \LNt(', del ini;lcs MUcosel rrrnst cell), title se encuentrui en los cpitclios ntucoscn, \ los mastocitos del tcjido conjuntito I ( :Get(:, dcl ingles conncrtivc tlsUnc Mast edit . Parecc quc la proliteracic'm tic Ios !11\1( : CS dcpcndiente tic cclulas 1, micntras quc la dc lo" (1 I'M(' no to cs . Anibos tipon tic nttstocitos sc pucdcn ohscrvar mccliantc micrciscopia ciptica, tras la 6116611 con colorantcs basicos i_ftf. 23y) . 1,0% basrifilos sanguineos maduros prcseman granulos rccuhicrtos por mcmhranas, distribuidos alcatoriamcntc en Cl interior tic la cclUla ;_/iq . 2.-111) . I .os granulos do Ices bas6flos . dc los mastocitos conticncn hcparina, SRS-A, histamine t F(T :1 . 1?I estitlurlo yuc cicscncaticna la tlcsgrallulacicin tic los COSi n6filcis Y los mastocitos suck ser tin alcrgcno {till antigcno quc profit-oca una rcacci611 alcrgica ) . fare yuc esa i oeuvre, cl alcrgcno debe set- capaz tic entrclazar las molcculas tic IqE : unidas a la ,it pcrticic del mastocito o del bas6filo a traces tic sits rcccptorcs del dominioi Fc do las IgE dc alta atinidad { Fci:Rl j . La ticsgranttlacic'm dc los hascifilos y los mastocitos cs sicinpre masis a, libcrandosc simult:incanicutc todos Icn granulos dc la cclula . Para cllo, Ios gri nulos a fusioman en cl interior del citoplasma >, a ccmtinuacioin, sit contcniclo cs cxpulsado rapidamcntc hacia el exterior fjin . 2.41 ; . Algunos t1e los mccliadorcs quc sc libcran ell cl pro ccso tic ticsgranulaci6n, como la histamine, son los causantes tic los sintomas nocims dc la alert ia . Sin embargo, Icn h:uofilos tanlbien cjcrccn fimciones bencficiosas, cntrc las yuc poetic yuc sc encuentre sit participacian en Ices proccsos inimmitarios trente a Ell parasitos. la Pmrrw 2 .42 sc mucstran lo" principalcs marcadorcs tiincionalcs dc los granitlocitos t . Ices mastocitos .

1,.1 -uitid :id dc ba-fit- circulantcs cs nmi peyucha, ccmstitut cub, mci , tic] 11,2'', del conjunto total tic lcucocitos _2_3SY . l,cis mastr~citars, yuc no sc cncticntran ell la circulaci61l, suclen

Plaquetas

Fig. 2.39. Aspecto histol6gico de tin mastocito humano de tejido conjuntivo . En esta microfotografia se observa el citoplasma azul oscuro, repleto de granulos de color violeta. Tincion con azul Alcian y safranina, .600 . (Por gentileza del Dr . T. S. Orr.)

I ..is playuctas sanguincas, adcnias de descmpcf ar till papel en la cc,aguldcir n tic la sangrc, tamhicn intersicnen en Las respuestas inniunitarias, cspccialntcntc en la intlamaci6n . Proccdcn tic los megacariocitos dc la mcdula 6sea, t, tanibien conticncn granulos (Aq. 2.-13) . Un adulto normal produce 10" playuctas diaries, dc las cualcs una media del 30"i, son sccucstradas por cl bazo . Exprcsan nuilcculas (;PH tic class I rcccptorcs dc IgG f Fc.RI 1), asi como rcccptorcs dc IgE do baja afnidad (Fcr:Rl1 ; ( :1)33) .

Fig. 2.40. Ultraestructura de los bas6filos. Observese el nucleo segmentado ft y los grandes granulos citoplasmaticos (G) . " 11 .000 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol . II, segunda edicibn, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Fig. 2.41 . Desgranulaci6n de tin mastocito. Se produce la fusion intracitoplasmatica de los granulos antes de quc se descarguen sits contenidos (flechas! . "5 .000 . Adaptado de D ZuckerFranklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edition, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

ldcmas, los mcgacariocitos s las plaquetas posccn receptores para cl lactor VIII \ para otras moleculas rclacionadas ion su tun cion ;uiucnto, como cl complcjo Gpllb,/IIIa I(l)41) t cl comhlcjo Gplb/Gplx (;('1)42 i . EI complcjo Gplih %'IIIa cs una CI_ toadlicsina quc SC unc al tibrin6gcno, a la tibroncctina y a la vitronectina . Ademds, tanto este complcjo como el complej() Gp lactuan comu) rcccpto~rcs dcl lacto~r wm Willcbrand . I .a s plaquetas posccn tamhien otro receptor do s itremcctina,

( :l)S 1 . Para la activaci6n do l :ts plaquetas son imp)rtantes tann~ los reccl7torca como las moleculas do adltercncia . Gras la Icsi(Sn do las celulas cndotchalcs, Las plaquetas sc adhicrcn a la supcrficic cndotclial dcl tcjido vascular danado . A continuaci6n, sc agrc gan y libcran las sustancias contcnidas cn dogs tipr~s do granulos, entre las quc se inclUVcn In scrotonina v cl fibrinugcno. Estos facto>rcs .uimcnt111 la pcrmcabilidad capilar, actiran cl complcmcnto t, cn consccucncia, atracn ICUCOCitOS hacia I1 zona .

Marcadores funcionales de los granulocitos y mastocitos humanos marcadores de la superficie celular C5aR + + + + CR1 iCD351 + + + + 'd'LA-4 CR3 -FA 1 (CDllb) iCD11a) iCD49d) + + + + + + + + + + + ND se encuentran CD13 y CD14 (que se expresa en poca medida). Ademas, estas celulas tambien expresan moleculas glucolipidicas, como el hapteno Lewis X (CD15) y la lactosil ceramida (CD17) . El contenido enzimatico de los granulos presenta variaciones cualitativas segun el tipo de celula . (ND: no determinado .) F~-H-1 ;CD32) + + F, Pill (C 16) f c, RI F'' all (CD23)
peroxidasa

tipo de celula neutr6filos eosin6filos basofilos mastocitos

granulos
f `Sfatascl

acida

f"sfatasa

alcaiina

Fig. 2.42. Los neutr6filos, los eosinofilos, los basofilos y los mastocitos responden quimiotacticamente a C5a, por to que todos ellos deben poseer el receptor correspondiente . Todos poseen receptores de C3 y expresan las moleculas de adherencia LFA1 (CD11a) y VLA-4 (CD49d) . Tambien expresan FcvRll (CD32) y FcyRlll (CD16) . Solamente los basofilos y los mastocitos poseen el receptor de IgE de alta afinidad (Fci:Rl) . En algunas granulocitos se encuentran algunas otras glucoproteinas, entre las que

Fig. 2 .43. Ultraestructura de las plaquetas. Secci6n transversal de una plaqueta en la que se reconocen dos tipos de granulos (G) y haces de microtubulos en cada extremo de la celula (MT) . .42.000 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edici6n, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988 .

~Cu61es son las subpoblaciones funcionales de linfocitos T y como se pueden diferenciar? " ZPor que es necesario que en las respuestas inmunitarias participen tantas celulas diferentes?

" ~Que moleculas utilizan los linfocitos : a) como receptores de antigeno ; b) para interaccionar entre ellos y con otras celulas? ZC6mo se denominan cada una de las diferentes familias de moleculas?

LECTURAS ADICIONALES
Levy O. Antibiotic proteins of polymorphonuclear leukocytes . Eur J Haematol 1996,56263-77 . Moller G, led) . Accessory molecules in the immune response . lmmunol Rev 1996,153 Peters JH, Gieseler R, Thiele B, Steinbach F. Dendritic cells: from ontogenetic orphans to myelomonocytic descendants. lmmunol Today 1996,17:273-8 . Playfair JHL. Immunology at a glance, 6th edn . Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1996 Razin E, Pecht I, Rivera J. Signal transductior in the activation of mast cells and basophils lmmunol Today 1995 ;16:370-3 Reth M. The B-cell antigen receptor complex and its coreceptors . lmmunol Today 1995,16 310-13 Roitt IM . Essential ln-iunology, 9th edn. Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1997 . Romagnani S. Lymphokrne production by human T cells in disease states. Annu Rev Imr,wcol 1991 12 :227-57. Wardlaw AJ, Mogbel F. ' = Fnsinophils: biology and role in disease, Advlmmano+ 60 -1 266.

El sistema linfoide
Los organos y tejidos linfoides pueden ser primarios ~centralesl o secundarios (perifericos). Los organos linfoides primarios son el timo y la medula osea . Los linfocitos se diferencian a partir de celulas precursoras en los organos primarios, pero a continuacion migran a los organos y tejidos secundarios, en los que ejercen sus funciones . El sistema linfoide secundario esta formado por el bazo y los ganglios linfaticos . El sistema de mucosas esta formado por el conjunto de tejidos linfoides asociado a mucosas (TLAM) . Las places de Peyer son uno de los principales organos de contacto inicial de los linfocitos con los antigenos que entran al organismo a traves de las superficies mucosas. Los organos linfoides protegen las distintas zones del organismo : el bazo responde a los antigenos transportados por via sanguinea, los ganglios linfaticos to hacen a los antigenos transportados por la linfa y el sistema TLAM protege a las mucosas. Los linfocitos no son fijos. Se desplazan continuamente por el torrente circulatorio hacia los tejidos linfoides, retornando despues a la sangre a traves del conducto toracico .

Las celulas quo: participan en Its respuestas innaunitnrias se cncucntran organizaofs tOrnaandoa tejidos a- organos, corn Objet() LIc Ile),ar :a cabo sus tirnciones con la rmixinm cficacia . El conjunto, dc estas estructuras se denomina sistcnt.t linl~oi~lc .

cesaria la prcscncia dc ntacrut;agOs fagociticos, celulas presoratado)ras de anti`~oso) s . celulas '1 t. 11 maduras .

LOS TEJIDOS LINFOIDES SE PLIEDEN CLASIFICAR EN PRIMARIOS Y SECLINDARIOS

El sistcntt lintc)idc cst.i formadoa por lintbcitos, celulas acccsorias (naacroitagos \- celulas PrcscnUdOras do nntigcno} ~-, ell algunos tejidos, celuLaS cpiteliales. Pucdc ester organizado en tm. nta de organos cnCAPSULtd0', aislados o consistir en acunatalacioncs .Ic tejido linti)idr datum) . I,Os Principales organos \- tcjidOs lintiaidcs sc clasifican en primarios (centralcs) a . secundarios {pcritericos1 i,y1a . 3.1I. clrgdnUS llstOidCS hrint.trion sown Ices lugarcs CFI los yuc sc prodarce naaaoritariantcntc la lmtopoccsis fdesarrollo dc Ices lintocitos ; . Fit cllos, logs linfocitos sc difcrcncian a partir do las celulas nrxlrc linfoides, prOlitcran s . den lug:u -, finalntentc, a celulas maduras tuncionalcs . En los ntantiteros, las celulas '1' maduras en cl timo, micntras yuc las celulas 11 maduras cn cl higado dcl tcto x, cn la medula osea ( \. cap. 12 i . i I .as celulas 13 dc Ias arcs sc dcsarrollan cn tin oirgano cspccializado, dcnominado balsa do Fabricio .j En los organos lintiaidcs primarios los linfocitos adquicrcn sit rcpcrtorio do rcccptoarcs cspccificos dc antigcno, yuc utilizaran postcriormentc pare entrentarse a Ices antigenos con que se cncucntrcn a to largo dc sit existencia . Las celulas son scIcccionadas dc tal forma que prcscntcn tolerancia a los auto:uttjgenos, por lo yuc, cuando son liberadas hacia la periteria, scilo son capaccs de reconocer antigenos extranos . El timo es tambien Cl lager cn el quo: Las celulas T aprcndcn a reco)no)ccr las ntolcculas ('PH propias is- . cap . 12). Tantbien csisten ct idcncias dc yuc alguna parte del desarrollo lintocitario sc produce fires dc los Organos linfoides primarios.
Loos

Principales organos y tejidos linfoides organos linfoides primarios organos y tejidos linfoides secundarios anillo de Waldeyer (adenoides y amigdalas)

Organos linfoides primarios

timo medula osea

jtejido linfoide asociado 1 los bronquios I

gengi,ns linfaticos

medula osea bazo - nodulos linfoides ganglios ., mesentericos c:s

place de Peyer tejido linfoide urogenital

yanylios linfaticos

Organos linfoides secundarios

ticos i-1os tejidos asociadoas a mucosas (TLAM ), etttre los que se cncucntran las amigdalas \ Las places dc Pcacr del ilcon . Los Or ganos linfoides secundarios proporcionan a los linfi)citos tin elltorno en cl yue estos pucdcn intcraccionar cstre si, con las celulas acccsorias y con loos antigenos . Para que se produzca una rcspucsta inntaanitaria cn los organos linti)idcs secundarios es tic

LOS organos lintiaidcs sccunclarios son cl baz(), los ganglios linta-

Fig. 3.1 . Los organos linfoides primarios son el timo y la medula osea . En ellos maduran, respectivamente, las celulas T y B. Las respuestas inmunitarias celulares y humorales se produces en los organos y tejidos linfoides secundarios (perifericos). Los organos linfoides secundarios se pueden clasificar segun la region corporal que protegen . El bazo responde principalmente a antigenos transportados por la sangre . Los ganglios linfaticos ejercen respuestas inmunitarias frente a los antigenos que circulan en la linfa, y que hall sido absorbidos previamente a traves de la piel (ganglios superficiales) o a partir de las superficies mucosas (ganglios profundos). Las amigdalas, las places de Peyer y otros tejidos linfoides asociados a mucosas (recuadros azules) responden frente a antigenos que penetran a traves de dachas mucosas. Observese que la medula osea actua coma organo linfoide primario y secundario .

El sistema linfoide

ORGANOS LINFOIDES PRIMARIOS

Las celulas T se desarrollan en el timo El tintor dc Icrs marttitcros Cs un orgatl() bilcrlnrlado, situador en la cat idad tcrracica, pen Cncim;t dcl ccx:lzcSn r Icrs grandes,asps Sanguincos. Cada uncr do Strs dos Icibulos principales csta compucsto a su vez do lobulillos, scparados entrc si por trabeculas dc tcjidcr conjuntico . En each into de estos lobulillos, las celulas linli>ides 1 tintcrcitos i SC enCUentran reparticias entire una zona cortical cxtcrna v una ntcdula intense i;fuf . .i .2) . En la zona cortical se agrupan dcnsarncntc la mavoria dc Icrs tintocitos rclatisantcntt inntadurors en fasc dc prolitcracicin ; las Ccltdas clue SC CnCUCntran en Lt medula son ntas ntaduras, to clue intplica quo Cxiste un gradients dc diterenciacicin desde la corteza hacia la medula . Lots timorcitos mcdularcs maduros cxpresan (;1 44, rnientras quC lors tirnocitos corticales no . Este receptor, clue se Line al hialuro nato \ a otros cornponcntes dc la matriz cstracclular, SC cnCUCn tra cn toclos Icrs lintircitcrs circulantes, pcro no cs c\Prcsctdot por lox lintoCitcrs fijcrs . En Cl SCrt0 do Icrs Icrbulillcrs CsistC una rCd LIC

Cclulas epitcliales, cluC es neces:tria para clue sc produzca cl procCsor dc difcrcnciacicin ctt cl clue Las celulas pretimicas prcrcedcntCS dC la rtt dula (tsca sc transtixntan cn linfircitos'I maduros . Los lobulillos del timo contienen tres tipos de celulas epiteliales En Icrs lobulillos del tinur sc puCdCH distinguir al mcnrts trcs tilers ditercntes dc Ccltrlas epitcliales, dc acuerdo ion su distribuCicin, . cstruCtura, funcioin t fenotipo . Son las celulas epitclialcs nodriza cxtcrna, las celulas cpitcliales corticales, clue tirrdc la corteza man la red epitelial, v las celulas CpitCIia1CS ntcc1ulares, quo se suelen disponcr cn forma de agregados i \-. cap. 12 h. En los lobulillos

tic] tinto tantbicn se cncuentran celulas dendriticas interdigitan. tcs f CI)I ) t ntacr(ifagos (ambos proccdcntcs dc la medula osca), . especialntentc Cn la zona limitrolc entrc la corteza t l :t medula . La produce a tralas celulas hacia N , dcsdc cl tinto se circulaci()n dc ,cs dc I :ts \'dill :% dc cndotclio alto IVEAi rcgionalcs . Lis Celu las cpitclialcs, las < a)I y Icrs macr6lagos cxpresan ntoleculas ( I'H, . quC son csencialcs pare cl dcsarrollo t sclcccicin dc las celulas 1-. En la ntcdula del tinto sc suelcn encontrar corptisctfos do Hassall. No sc conocc su funcicin, pcro parece clue contienen cc lulas epitelialcs ciegcneradas, ricas en CitetqucratinaS do eletado

peso molecular. FA tinno dc Icrs mantderos Cxpcrintcnta tuns imolucibn a to largo del ticrnpo. En logs sores huntanos, la atrotia contienea cn cl ntontento clc la pubertad, y prosiguc a to largos dc toda la vide del individuo. La imolucioin tintica se inicia en la zona cortical, clue pucdc Ilcgar a dcsaparcccr totalrncrttc, auncluc sigan pcrsisticndo restos mcdularcs . I.a atrodia cortical esta rclacionacia coil la scnsibiliclal dc Icrs timorcitos corticalcs a los cstero :des. Por cllo, todas las Cil-CUnSt.ut0a> ell las clue sc prodUCCn Cl0.tcicrnes agudas dc la concentracicin dc estcrcdcs, conrto por cjentplo durante cl entbarazo o en situacioncs dc cstres, prontucven la atrofia del limo . Sin embargo, es posiblc clue durante la tide adulta sc sigan produ cicndo linlucitors T en cl tinier, aunquC en peclucfias cantidadcs . Fig. 3.2 . Corte de timo, en el clue se observe la estructura lobulillar. En esta seccion transversal se aprecian las dos zonas principales de un lobulillo timico : una corteza externa de celulas inmaduras IC) y una medula interna de celulas mas maduras (M). En esta tiltima se reconocen cuerpos de Hassall . Tincion con hematoxilinaeosina -25. IPor gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J. Lows .)

Lugares de desarrollo de las celulas B

Las celulas B de los mamiferos se desarrollan en el higado del feto y en la medula osea de los adultos I .orti lintircitcrs li sc ticsarrollan dircctamcme cn los islotes do cc lines Ittntatupcttctlcas i_)iH . .;.4Y quo' SC CnCUCntran en cl higado del letet N' en la ntcdula ()sea dcl tcto del adultcr . La medula ()sea

Fig. 3.3 . Timo atr6fico de un adulto. La involucion timica se caracteriza por la sustitucion por tejido adiposo (TA) . Se observa una marcada disminucion de la corteza, mientras clue todavia se reconoce una medula menos celular (M). (Por gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J . Lows .)

Fig. 3.4. Medulla osea . En esta biopsia se observa la medula osea hematopoyetica (MO) en los espacios clue separan las trabeculas oseas (T). Parte del espacio esta ocupado por adipocitos . (Por gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J. Lows .)

Organos y tejidos linfoides secundarios

do Icrs %crcs humanos adultcrs, edemas dr constituir Cl lugar cn cl yuc Sc dcsarrollan las cclulas 11, conticnc cclulas L maduras y ahundantCS cclulas plasmaticas . Por trnto, la medula ()sea dc los sacs luurtancrs tanlhicn cs un importantc cirgano linlilidc sccund.trio . En las as -cs, Icrs linfircitos B sc dcsarrollan cn la balsa dc Fabricio, un cirgano ccrmPucsto por plicgucs cn Ios yuc Sc IOCa lizan unos f)liculos con cortcza v medula .

/ ORGANOS Y TEJIDOS LINFOIDES SECUNDARIOS

Lna s'cz COnClnldo cl dcsarrollo dc Icrs lintocitos cn Icrs organos lintuicics primarios, dichas cclulas migran Iracia Ios tcjido% pcri briars scauui :tricrs . 1-:ntrc cllos Sc cncucntran organos cncapeulados con una organization compleja (cl hazo v Icrs ganglicrs lintaticcrsl s acunudacicnles nor cncaPSUladas dc tcjido linfoidc . La moor parts del tcjido linfoidc no orranizado sc cncucntra aso ciad) .3 IaS mucosas, \ Sc dcnonlina tcjido linfooide asociado a n1u
C(" .ls ~ I I_\\11 .

LIc CCtorma dc foliculo% primarios no CStinlulados ,, (agrcgados , B sirgencs) o foliculos secundarios "" cstinlulados> , {en los quc aparccc un ccntro germinal corn cclulas dc mcmoria) (:hn.v. 3.6 r 3.,-1 . Los centros gcrminalcs arntiencn tanlhien cclulas dendri. ticas tbliatlurcs t mairut:tgos fagocifcos . En la rcgjcin marginal ila zona yuc rccubrc al manta dc Ic t(rlicttlos sccundarios'i SC cncucntran macr6tagos csliccializados \ una suhl,ohlacion especial dc cclulas 11, yuc rcspondcn a antiecnos indclrcndicnics del timo dc tipo 11 i polisacaridos) . Los macr6tagos ~ las cclulas dcndriticas tcrlicularcs prcscntan Ios antigcnos a ]as cclulas B cjcl hazo . Las celulas li t . otros lintiocitos cntran v salon lihrcntcntc sic la CI .P a trascs dc los capilarcs proccdcntcs dc las artcriolas ccntralcs yuc irrigan la regi6n marginal . Algunos lintircitos, cspcOalnlcntc Ios plasnloblastos cn tasc dc madurau6n, pucdcn atra\csar la rcgj6n marginal y alcanzar la pulpa roja a trascs dc cicrtOS Pucntcs.

Los 6rganos sistemicos y ell sistema de mucosas desempetian diferentes funciones en los procesos inmunitarios fI Ii .VC) responds ante I))s :mti1en))s transportados por la Sangre,
sic lorma yuc Icrs pacicntcs cSPlcncctontizados rcsultan nlucho

ntas scnsibICS a Icrs Patdgcnos yuc circulan por cl torrcntc San guinea, micntrus yuc Ic>s g:ulgliOS llntatiCOS Protcgcn :tl organismo frcntc a Ios antigcnos clue transpcrrta el sistema lintatico, procedctttcs do la picl o dc supcrficics intcrnas . En ambo)s casos, las rCSpue>tas trcntc a Icrs anfgenos consistcn cn la sccrcciiin do anticucrpos hacia la circulation \ cn rcSpuCStas locales mcdiadaS por celulas . Por cl contraho, cl sistema do mucosas cjcrcc una protcccicin ficntc a Ion antigcncrs clue Pcnctran directamcntc cn cl organisnlo a tra\'cs dc Icrs cpitclios nlucosos y cn cl sc produce cl primer encuentro (iniciaci6n) entre el antigcno yuc penctra por las supcrficics n11tcosas \ las cclulas innluncs . Asi, se suclcn cncontrar tcjido" IintiriLICS ascrciados a las supcrficics yuc rctubren cl tracto intestinal {tcjido lint6ide asociado al intestino, o TLAI ), el tracto rcspiratorio (tcjido lintbidc asociado a Icrs boon quips, o TIL1B ) o cl tracto gcnitourinario . En cstos casos, cl principal mccanismo ctcctor cs la sccrcci6n dirccta dc IgA I It"As) scrhrc la supcrficic del cpitclio nluCOSO en cucstioin . No o cs sorprcndcnte yuc la mayor parts del tcjido lint<)idc yuc conticnc cl en-1,anisrno (>50"G) tirrntc parts del sistema do nutccosas, es1,eci.t1

Fig. 3 .5 . Corte de bazo, an el qua se observe el armaz6n reticular de la pulpa roja . Se ha usado un colorante especifico de la reticulina, y se aprecian las fibres anulares (R) que sujetan las celulas endoteliales de los sinusoides venosos. ~stos poseen una pared discontinue, que permite la libre penetracion del plasma y la penetracion selective de celulas procedentes de los cordones de pulpa roja (C) en so luz. x125 .

mcntc del TI .A L ra quc csta cs una do las vies mss importantc dc pcnetraci6n de antigcnos externos, ni tampoco yuc la IgA sea la innltmo"Iothulina nlas abundantc.

Los organos fnfoides sistemicos

El bazo

FI baz() NC encucntra situadrr ell cl cuadrantc superior izyuicrdo del ahcfnncn, dctris del cstdmago v prcSximo al diafragnla, mjdc 13 x 8 cm c pcsa cntrc 1811 \ 250 , en cl adulto . Esta rodcado cxtcnormcutc poor una ciPSUIa tbrnlada por fibres dc colagcmo, yuc pcnctra en cl parcnquinta del cirgano en forma dc trabcculas cortas . Estas ultinlas, junta con una red reticular, constituscn cl soporte cn cl yuc sc asicntan las dis'crsas cclulas quc conticnc CI cirgano (fij. .i-iy . El bazo conticnc dos tipos principalcs dc tcjido, la pulpa raja ~ la pulpa blanca .
La pulpa blanca .

I :1 pulpa blanca csta fornl:ala por tcjido linti)i&, I,t nla\crr parts del curl csta dispucsto alrcdcdr)r dc una artcri))la central, \ yuc sc cicnomina cape linfoicic periarteriolar .,.6i . I a ( TP conticnc zc)nas dc celulas T v zones dc cclulas B ; ],is cclulas '1 sc cncucntran situadas alrcdcdor dc la artcriola central ; las cclulas 11 sc pucdcn encontrar organizadas en

Fig. 3.6 . Corte de bazo, an el qua se observe un agregado linfoide an la pulpa blanca . Se observa on foliculo linfoide secundario, con centro germinal (CG) y manto (M) rodeado por la zona marginal (ZM) y la pulpa roja (PR) . En la zona adyacente al foliculo se observa una arteriola (A), rodeada por el manguito periarteriolar de tejido linfoide (PALS, del ingles periarteriolar lymphoid sheath), constituido de forma predominante por celulas T. Observese que la zona marginal solo aparece por encima del foliculo secundario . (Por gentileza del profesor I . Maclennan.)

El sistema linfoide

Esquema de la organization del tejido linfoide en el bazo cordones esplenicos (de la pulpa roja)

centre germinal

sinusoides venosos de la pulpa roja

Fig . 3 .8 . Sinusoides venosos y cordones de la pulpa roja . Los macrofagos, tenidos con catepsina D en esta imagen, se asocian con las paredes de los sinusoides (S) y se distribuyen per todos los cordones esplenicos (CE) . (Per gentileza del Dr . A . Stevens y del profesor J . Lowe .)

Fig . 3 .7 . La pulpa blanca esta formada por manguitos linfoides periarteriolares (PALS), quo suelen contener foliculos linfoides . Esta rodeada por la region marginal, con abundantes macrofagos, CPA, celulas B de recirculacion lenta y celulas INK. La pulpa roja esta formada por sinusoides venosos separados por cordones esplenicos . La sangre penetra en los tejidos a traves de las arterias trabeculares, que se subdividen en numerosas arterias centrales. Algunas terminan en la pulpa blanca, irrigando los centres germinales y el manto, pero la mayoria se dirigen a [as rcgiones marginales o a sun proximidades . Algunas ramas arteriales penetran directamente en la pulpa roja y vierten su contenido en los cordones esplenicos. Los sinusoides venosos drenan la sangre hacia las venas de la pulpa, que desembocan finalmente en las venas trabeculares y la vena esplenica .

La pulpa roja . Este tejido csta tormado por sinusoides y cor clones celulares, yuc Conticnen macrotag(~s rcsidentes (J q. 3 .8), eritrocitos, plaquctas, granulocitas, llnf()CitOS N' numerosas celulas plasmaticas . ()bscrycsc yuc, aciemas dc las funcioncn inmunitarias yuc cicscmpcna, cl haze canStitttyC tanillicn un rescryorio dc plaquctas, eritrocitos N. granulocjtos . Aciemas, cl bazo CS Cl lugar en clue son destruiclas las plaquctas V los eritrocitos enyejecidos, en un proccso clue sc Ileya a cabo en la pulpa roja y se cienomina hemocateresis ,, . foclo esto es posihlc gracias a la organization vascular del bazo ( .lFq. ,3. ). Las arterias ccntraIcs se cncuentran rodcaclas por la (:LP y clan lugar a capilarcs arterialcs clue vierten ski contenido en los cordones dc Lt pulpy roja . l)c csta mantra, las celulas circulantcs Ilegan a cstos cordones y qucclan atrapadas cn cllos . Los macrotagos reconocen y tagocitan a las plaquctas y eritrocitos em ejecidos ; las C61LIlas sail guineas quc no son ingericias destruidas pucdcn rctornar a la circulation sanguinca atraycsando los oriticios clue determina cl enclotclio discontinue en las paredes dc los sinusoides ycnosos (f{q . .3 .8), nticntras clue cl plasma tluyc libremente a traves do dichas paredes .

Ganglios linfaticos y sistema linfatico Lon ganglion linlaticc,s fOrman parts de una red clue filtra los antigcnos conteniclos en cl liquid( interstitial do Ion tcjiclos y en la IinE1 durante cl transports tic cstos Iiyuiclos dcsdc la pcriteria hasta cl conducto toracico Y Ion rcstantcs concIuttOS colcctorcs principales I,fb) . 3 .9l . Los ganghos linfaticos sc SUCICn encontrar situados cn los puntos dc ramification de los yasos linfaticos . Exisrcn dcrcrminadas zonas clue drenan rcgiones supcrficialcs N profunclas del organismo, come cl cucllo, las axilas, las ingles, el ntcciiastino y la cayidad abdominal, en las quc sc obserya una acumulaticin cstratcgica dc ganglios linfaticos . Los ganglion linfaticos que protegen a la pie) son supertiicialcs, y sc denominan ganglion sutkutancos . Los ganglio,, linfaticos protundos, clue protegen a las ntuCOsas rcspiratoria, digestiya y genitourinaria, se denominan ganghos yiscerales o protunclos . Leis ganglion linfaticos humanos prcsentan un ciiamctro dc 2-10 mm, son redondcaclos o con forma dc rincin \ prcsentan una dcprcsion, cicnominacia hilio, cn la zcnla dc cntrada y salida do los Lanes sanguincoL . La linta Ilcga hasty el ganglio linfatico a traycs dc yarias ~:isas linfaticos aferentes, v sale dcl mismo a traves dc tin tinico yaso lintatico cfercntc, situade en cl hilio . Los ganglios linfaticos tipicos cstan rodcados por una cdpsula dc colageno (fiq . 3 .101 . Los diversos contponentes celularcs se cncuentran dispuestos sobre un armaz6n dc trabeculas radiates ) fibras de reticulina . l'n ganglio linfatico conticnc una regicin dc celulas B (c6rtcxl, una regicin do celulas T (parac()rtex') y una mcdula central, en la yuc aparcccn cordones cclularcs quc contienen celulas T, celulas B, celulas plasmaticas y macrofagos (figs . 3 .11 y 3 .12) . La region paracortical conticnc gran canticiad de ( :PA (eclulas interdigitantes), clue expresan actiyamcnte antigcnos do supcrficic (TH cic claw 11 . Estas ( ;PA proccdcn do la picl (celulas do Langerhans ) o dc ]as mucosas (celulas dcndriticas ), transpor tanclo hasty cl ganglio los antigenos proceclentes dc la superficie intcrna o extcrna del organismo (/!q. 3 .1 .3'1 . I a mayor parts del tejido linfoide sc cncucnrra en las rcgiones cortical y paracortical . La mcdula tambicn conticnc at-go dc tejido lintoicle, quc tbrma cordones soparados por scnos lint kicos (mcdulares) que desembocan en cl scno terminal, a partir del coal surge el yaso linfatico cfcrcntc hl?q . .3.12) . LOS sends linfaticos SC cncucntran rccubicrtos dc celulas fagociticas, espccialmente en la region modular. C;uando la linta tluyc tlcsde Ion vases atcrentes hasty los cterentes, estas celulas tugociticas capturan las particulas antigenicas contcniclas en la misma y ],is transportan hasty el tejido linfoicie del ganglia linfatico .

Organos y tejidos linfoides secundarios

El sistema ganglionar linfatico

conducto toracico

vasos linfaticos

Fig. 3.10. Corte de un ganglio linfatico . El ganglio linfatico esta rodeado por una capsula de tejido conjuntivo, y se divide en tres partes principales : C, el cortex (region de celulas B) ; P, el paracortex (region de celulas T), y M, la medula, que contiene cordones de tejido linfoide (region de celulas T y B en la clue abundan las celulas plasmaticas y los macr6fagos) . Tinci6n hematoxilina-eosina, x10 . Adaptado de D Zucker-Franklin, Greaves MF, Grossi CE y cots . Atlas of Blood Cells: Function and Pathology, vol. II, segunda edition, Milan: EE Ermes, Filadelfia : Lea and Febiger, 1988.

Fig. 3.9 . Los ganglios linfaticos se encuentran en los puntos en que confluyen los vasos linfaticos, y forman una red que drena y filtra el liquido interstitial que penetra en los espacios tisulares procedente de la sangre . Pueden ser subcutaneos o viscerales, drenando estos ultimos los tejidos profundos y los 6rganos corporales internos . La linfa alcanza finalmente el conducto toracico, que desemboca en la vena subclavia izquierda, volviendo de esta forma a la circulaci6n.

Esquema de la estructura de un ganglio linfatico

centro germinal de un foliculo secundario

Fig. 3.11. Estructura histoldgica de un ganglio linfatico. En este torte tenidos para demostrar la localization de las celulas T, se observa el cortex (C) el paracortex (P) y la medula (M). Estas celulas son mar abundantes en el paracortex, aunque unas pocas se localizan en el centro germinal (CG) del foliculo linfoide secundario, en el cortex y en los cordones medulares (CM) (por gnetileza del Dr . A Stevens y el profesor J. Lowe).

Fig. 3.12. Bajo la capsula de colageno se encuentra el seno subcapsular, revestido por celulas endoteliales y fagociticas. Los linfocitos y los Ag procedentes de los espacios tisulares prdximos o de los ganglios linfaticos adyacentes penetran en el seno a traves de los vasos linfaticos aferentes. EI cortex es una zona de linfocitos B, que se organizan en foliculos primarios y, sobre todo, secundarios (con centro germinal). El paracortex contiene principalmente celulas T. Cada ganglio linfatico dispone de sus propios vasos arteriales y venosos. Los linfocitos procedentes de la circulation penetran en el ganglio a traves de venulas especializadas de endotelio alto (VEA) presenter en el paracortex . La medula contiene celulas T y B, asi como la mayoria de las celulas plasmaticas del ganglio linfatico, dispuestas en cordones de tejido linfoide . Los linfocitos solo pueden abandonar el ganglio a traves del vaso linfatico eferente .

El sistema linfoide

El c()rtcx conticnc agrcgacios do: cclulas 11, furntando foliculas primarios o sccandarios, nticntras clue [as cclulas T sc Cn cucntran situadas principalntcntc cn cl paracortex . Por tame, cuando una zona do la picl o Lie un :l ntuco)sa se sc cyucsta a un antigcno dci,cndicntc cic Crlttl :ts 'I I t'. C,tp . 1 l i, Celulas I' del parac(irtcs Lie lo ,, ganglios fntaticos quc drcnan diclta zona pro literan aCtic :uncntc . ()tro Iteclto LIuC Licnutcstra quc Las Celulas 'f Sc cncucntran situadas ell csta region cs quo: los pacientcs con aplasia congcnita del timer (sindronte do: DiGcorgel presentan un nuntrro Lie cclulas paracorticales inlerio)r al normal . Este misnw fencimeno se ohsrn a en raumes o rates cong,cnitantente atinticos i'~LIcsnudos ," ') o sontctidos a timcctornia ell cl ntontcnto do su nacimrenio . 1 .()s ti)IICUlos SCCUndarios de los ganglios linlatic()s estintulados p()r antigcnos posccn ccntros gerntinalcs . Soil parCCidos a los Centros gorminalcs do: las rcgioncs do: cclulas B do: las ( .LP csplctticas del'Fl-1(%l . Las cclulas Lie] ccntro germinal ptrcdcn scr grandcs () poquCnas, SC cicnorninan ccittroblast()s \ crntrocitos, rcspcctis .unentc . Las cclulas 13 en tase do: pr()litCraci()n do: los ccntro
JS t . %r

gerntinalcs prCSCntan una ti)rnta nuclCar bicn (icfinida I hCndida, frcnrc a no hcnLliLla}, (]Lie sirte pare diagnosticar cicrtas crtterntcdaLICS lint6proliteratius malignas, canto los lintcnna> ccntrociticosccntr()bl .istico)s quc sc originan ell cstas Celulas . 1 .()s ccntros gerntinalcs cstin r()dcad()s par un nt :utto do: III) focitos f Vin. 3 .141 . Las CcltrlaS li do csta capa i /iy. 3 .15) conticncn gr:auks CantiLl :ulrs de Ig11 r IL ,I) LIc supCrfiCic . En la 111 .1 , 01. p.u--

tc do: Icrs tolicul(r, sccundarios, cste manta o Corona So: Cncucntra cngrosada ell diroccicin a la rilnula ciCl ganglia (,l?e. .1 .15) . Los to liculos sccundarios conticncn (TA (iendriticas tOIiCUI :trcS (/ip. 3 .16), algtrttos iliac rotagos ~`.t)1 . ,i.l - ;~ ~' eecascn litttotcitos'1' ( :1)4' quc intcraccionan coil las Celulas Llcndriticas del ccntro) germinal i;s . cap . 21 . Parccc quc tcxlas estas cclulas, junta Com I()s ntacrolagos Cspecializados do: los scnos ntarginalcs, cicsentpeflail un PapCl ell la% roshucstas dC las cclulas h \, CspCCialmCntC, Cn CI desarrollo Lie las cclulas 11 do mentoria, quc probablontcnte cs Ia hutciorn principal do I()e ccntros gerntinalcs- !En cl cap . 12 so: describe coil ntas detallr la organizacio)n cclular de los ccntros gerntinalcs . )

Fig . 3 .13 . Celulas interdigitantes en el paracortex de un ganglio linfatico . Las cclulas interdigitantes dendriticas (CDO forman contactos entre si y con las cclulas T paracorticales . (Per gentileza del Dr. A . Stevens y del profesor J . Lowe .)

Fig. 3.14 . Estructura del foliculo secundario . Se observa un ccntro germinal de gran tarnano (CG) rodeado de la zona del manta (M).

Fig . 3.15 . Distribution de las cclulas B en el cortex del ganglio linfatico. Tincion inmunohistoquimica para inmunoglobulina de superficie de las Celulas B en la quc se observa coma estas se concentran en el foliculo secundario, el ccntro germinal (CG), la zona del manta (Mi y entre la capsule y el foliculo (zona subcapsular, ZS) . En el paracortex (P) se reconocen escasas Celulas B con predominio de las Celulas T (v. fig. 3.11) .

Fig . 3.16 . Corte en el quc se observe el patron de Celulas foliculares dendriticas de un foliculo linfoide secundario . Este foliculo del ganglia esta tenido con un anticuerpo monoclonal frente a las Celulas foliculares dendriticas marcado con enzimas .

Organos y tejidos linfoides secundarios

El sistema linfoide de mucosas

Los :tg

rrgadon pie tcjido linti,ikic no cncapsulado soil cspccialmcntc abundantcs cn la lamina III-01M .1 V C11 la submucosa tic Ios tractos gastrointestinal, rcspiratorio \ genitourinario Ic . ri~f . 3.1) . Las cclulas linfirides se pucdcn encontrur comp at, rcgldos ditusos o estruCturacias cn forma de ganglios aislados o agrupados, quc conticnen ccntros germinates f toIiCUIOS secundarios I . Las amigdalas tic lo ,, scrcs huntanos Conticnen una cantidad considerable de tcjido lintoidc, quc cn mochas ocasioncs hresentan fOlICUIOS SCCUndar10S con zcmas T intcrpucstas coil \cnUlas tic cndotclios altos . Ha* trcs tipos fundantcntalcs do amigdalas : las palatines, las faringcas (aticnoidcs) y las lingua Ics, quc ConstituNCn cl anillo tic Waldcycr (tiq . 3.1). En la tigura 3 .18sc nntestra un carte histoldgico tic una amigdala lingual . l?n los bronquios V Cn CI traCto 9CnitOUrinario tambicn sc cncucntran acunxIIaCioncs parccicias tic tcjido hnticic . Los cpitclios rcspiratorio, gcnitourinario y digcstitos contiencn Cdtr las dendriticas, que ticncn la mjsi6n tic ingerir, transporter y

Tejido linfoide asociado a mucosas (TLAM)

proccsar Ios antigenos hasty Ios ganglios linfiticos do drcnajc . En la lamina propia tic la pared intestinal SC enCUCntran acU mulaciones tic tcjido linfoide, quc suclcn alcanzar la submttCosa . Estas aCUnurla6onCs i)Uedcn adt~ptar tornta tic nodulos solitarios gFt7 . .3 .19) o nodulos agreg:tllos, ctmx> en rl apcndj cc ~J?q. 3.?0' . I as placas tic PcNcr sc localizan cn cl ilcon distal . EI cpitclio intestinal Icpitclio asociado a I<ts fOliCU)OS, EAI'i quc rcCUbrc la ,, placas tic Pcs cr CS Un cpitclio cspccializado, quc permitc cl transportc de lo} antigcnos liacia cl tcjido linfoide . Esta rnision cs Ilevada a cabo por cicrtas cclulas cpitclialcs, ticnominaci :ts cclulas  M dcbido a la prcscncia tic nurncrosas microvcllosidadcs cn Su Strpcrficic Ituuinal IJ~q . 3 .?1 ;~ t quc sc localizan cntrc los cntcrtrcitos . l :stas cclulas icmticnen protundas imaginacioncs tic la membrane plasmatiC,t basolatcral, quc for . mail incaginacioncs en ]as quc se alojan linfocitos ft ). 1 ., Celulas (icndriticas s- macrtitagos IJ q. .3 .22) . Los antigcnos s- los microorganisntos cntran por cstas imaginacioncs Ilacia cl tcjido linfoide nuICOSO organizado subVaCCntc al cpitclio . Las cclulas M no sc localizan tic forma cxClusita cn las places do Pcvcr,

Fig. 3 .17 . Macr6fagos del centro germinal . En esta imagen, tenida con tecnica de inmunohistoquimica para catepsina D, se reconocen varios macrofagos en el centro germinal (CG) de un foliculo secundario. Estas cclulas, que fagocitan los linfocitos B apop16ticos, se denominan macrofagos con cuerpos tingibles (M) . (Por gentileza del Dr. A. Stevens y del profesor J . Lowe .)

Fig . 3.18. Estructura de la amigdala lingual . La amigdala lingual se localiza en el tercio posterior de la lengua y corresponde a acumulaciones de tejido linfoide (L) con grandes foliculos secundarios asociadas con unas protundas invaginaciones en forma de hendiduras determinadas por la mucosa (flecha) . Alrededor de la amigdala se reconocen glandulas salivates productoras de moco (GS) . Las caracteristicas descritas son compartidas por todos los tipos de amigdalas . (Por gentileza del Dr. A. Stevens y del profesor J . Lowe.)

Nk,
Fig . 3 .20 . N6dulos linfoides an el apendice humano . 1) Apendice de tin nino de 10 anos, en el quc se observan nodulos linfoides de gran tamano que alcanzan la submucosa . 2) Apendice de un varon de 36 anos, en el que se observa una importante disminucion en el tcjido linfoide, con desaparicibn casi complete de los foliculos linfoides . Estas imagenes demuestran la atrofia por envejecimiento del tcjido linfoide, que no se limita al apendice . (Por gentileza del Dr . A . Stevens y del profesor J . Lowe .)

Fig . 3 .19 . Un n6dulo linfoide aislado an la pared del intestino grueso . Este nodulo se localiza en la mucosa y la submucosa de la pared intestinal (flecha) (por gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J . Lowe .)

El sistema linfoide

Organizaci6n estructural de una place de Payer

Esquema de una celula M en ell epitelio asociado al foliculo intestinal

epitelio asociado al foliculo

vellosidades

enterocito

linfocitos B y T

centre germinal Fig . 3.21 . La mucosa intestinal hace protrusion en una zone libre de vellosidades . El epitelio de superficie contiene celulas M y se denomina epitelio asociado al foliculo . En la region profunda de la mucosa se reconoce tin acumulo de foliculos secundarios con centres germinales de gran tamano, rodeados per celulas interfoliculares de celulas T, en las qua hay celulas interdigilantes y venulas de endotelio alto . La zona en forma de copula localizada entre el epitelio asociado al foliculo y la zona folicular contiene principalmente celulas B, sobre todo celulas de memoria .

celula dendritica Fig . 3.22 . Observe la presencia de linfocitos y aislados macrofagos (MO) en el bolsillo intracelular . Los antigenos endocitados atraviesan este bolsillo en su camino hacia el telido subepitelial .

rcconociendose cn las acumulacicntcs de celulas linlitidcs en otras Iocalizacioncs . I .as rcspucstas innutnitarias hutnoralcs a niscl do la mucosa son principalmente dal isotipo IgA . Las IgA de secrccirin son 111105 anticttcrpos capaccs do atras - csar la% mctnbranas ntttcosas, intpidiendo dc csa titrnta la penetraci6n tie los tnicrcxtrganisntos inlecciosos I,fiq . 3.23t, Linfocitos de mucosas Wk nt .ts tic] tcjid(, IiitG nttc cstrttcturado clue constituye el sistema I I - .\ .\I, l .n nMO ksas &l cstc~ntago, los intestines delgtdo y grucsti, I(t, tractos respiratctrios superior c interior N carets cirganos, conticnen tambicn grantics cantidadcs tic linfocitos %, celulas plasnl :iticas . Fetus llnfi)Clt(tS cstan situad< en CI tcjidct centjunti\ct yuc fitrma la lamina propia %, en el scno dal tcjidct cpitclial . Lets linfocitos dc la lamina propia ( LIT Y son principaltncntc celulas T actisadas, pero tatnbien sc obscr a la prcscttcia de nunicrctsas celulas B acti\adas N' celulas plasm.iticas . Fstas celulas plasmaticas sccrctan principalmente IgA, yuc atra\icsa ]as celulas cpitcliales %, cs libcrada a la luz dal conducto cn cuesticin i fiq. 3.131 . Lets linfocitos intracpiteliales (1 .1 E) son principalmente celu . las T, clue prcscntan caracteristicas tcnotipicas difcrcntcs dc las de lo ,. LIT (fiq. 3 .1-1) . La matoria dc ]as celulas T LIT \ 1 .1E pcrtenccen a la subpctblacic'tn C1)45 1t() tic celulas dc ntcntutria . Apcnas respontlcn a la estinutlacicin con anticucrpo% trcntc a Cl)3, pent pucdcn scr actis ados pctr otros medics I p . ej ., a traves dc (I)2 et ('11128) .

I .a cadcna u I IMI,-I (( :1)103), una intcgrina, net csta pre scntc cn las cclulas'I' circulantcs ell rcposo, prat sc c\prcsa dcs pucs tic la cstinutlaci6n con fitoltcntaglutinina ( I'ILA ) . Los anti cucrlxts frame a csta ntolecula acttian come rnitcigcnos, c induccn la czprcsicin dc la cadcna u dc los rcccptorcs dc 11 . 2 dc baja ati nidad i CD25) en las celulas T tic sangre periterica . H,\1L-I es un .t cadcna u pcrtcnccicntc a la Etmilia de las intcgrinas, yuc SC tine a una cadcna 1 1 7 dando lugar al lictcrodinicrot ul INIL-I/R-, una intcgrina tluc cxprcsan los LIE y otros leucocit()s actisados . Sc sabc yuc Icts LIE libcran citctcinas, cntrc las yuc se cncuentran cl 1t=\ ;/ c 11 .-5 . Sc ha sugcrido yue los LIE, pueden cstar cncargados tic la dctccciun de celulas propias nuttantcs o intcct .t d .ts pctr s irtis .

CIRCULACI6N DE LOS LINFOCITOS

Ya so: ha csplicado cl tlcsplazamiento tic los lintitcitcts dcsdc los tcjidcts linfoicies primaries a Icts secundarios . Una \cz yuc alcanz .t n Icts tcjidos secundarios, Icts lintitcitos no sc linutan a permancccr alli ; mucoss tic cllos se dcsplazan dc tin ()rgano lintoidc a caret a traves de la sangrc r de la linta ( = f e. 3.15) . Los linfocitos abandonan la circulacion sanguinea a traves de las venulas de endotelio alto Aunyuc alguntts lintitcitos abandiman la circuLtcitm sanguinea a trascs tic tcnulas not cspccializadas, ell la mayoria tic Icts ntamitcrcts cstc prctccso tnurrc a traves do una zona espccializada dc la%

Circulacion de IQs linfocitos

Transporte de la IgA a traves del epitelio de las mucosas

IgA

superficie abluminal

superficie luminal

Fig. 3.23. Los dimeros de IgA de secretion llgAs) son secretados hacia la lamina propia por celulas plasmaticas situadas en la region intestinal, y se Linen a los receptores de membrana para varias Ig de la superficie interna (abluminal) de las celulas epiteliales. A continuation, el complejo receptor de IgAs sufre un proceso de endocitosis y es transportado a traves de la celula, unicfo aun a la membrana de las vesicular de transporte, que se fusionan con la membrana celular de la superficie luminal, donde se liberan los dimeros de IgA unidos a un fragmento del receptor denominado componente secretor . Es probable que este componente proteja a los dimeros de IgA frente a las enzimas proteoliticas del exterior de la celula .

Diferencias fenotipicas entre los LLP y los LIE humanos tipo de celula linfoctos cit. la lamina propia linfocitos intraepiteliales TCR ulS TCR ;-o CD4 CD8 Fig. 3.24. En general, el fenotipo de los linfocitos de la lamina propia (LLP) es parecido al de las celulas que circulan en la sangre periferica . Los linfocitos intraepiteliales (LIE) presentan una proportion mas elevada de celulas T ;6, y el numero de celulas de esta subpoblacion que expresa CD8 es mayor, posiblemente por tratarse de celulas activadas.

950

50

70~

30'_,

60-90%

10-40%

--= 10%

70%

Circulacion de linfocitos a traves de organos y tejidos linfoides sistemicos

vase lirlfatico afcr'nte

Fig. 3.25. Los linfocitos se desplazan a to largo de su torrente circulatorio y penetran en los ganglios linfaticos y en el TLAM, con la colaboracion de las celulas endoteliales especializadas de las venulas poscapilares (VEA) . Despues abandonan los ganglios a traves de los vasos linfaticos eferentes, atraviesan otros ganglios y, finalmente, penetran en el conducto toracico y son devueltos a la sangre en la vena subclavia izquierda (en los serer humanos) . Los linfocitos penetran en las regiones de pulpa blanca del bazo a traves de las regiones marginales, pasan a traves de los sinusoides de la pulpa roja y abandonan el bazo a traves de la vena esplenica.

El sistema linfoide

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Fig . 3 .26 . Parac6rtex de tin ganglio linfatico, con una venula de endotelio alto (VEA) . Los linfocitos abandonan la

circulacion y penetran en el ganglio a traves de las VEA. Hematoxilina-eosina x200 . (Por gentileza del Dr . A. Stevens y del profesor J. Lowe .i

Fig . 3 .27 . Microfutografia electr6nica con una venula de endotelio alto an el paracortex de tin ganglio linfatico . Cerca

de la lamina basal se observa tin linfocito (L) saliendo de la luz (Lu) de una VEA. La VEA esta rodeada parcialmente por una celula adventicia (CA) . CA = celula adventicia; Lu = luz; L = linfocito. x1 .600 .

ccnulas POSCapilarCS, t1rnontinada t cnula tie Cnd(ttclio alto " VLA i_litfs. 3.2h v .i .2-i . Estas \enulas SC CnCUcntran principalnienic cn cl parac()rtc\ de los ganglio, linlaticos, c\isticndo tamhiua algunas en CI c(irte\, PCr(t no en In mctiula. AIgun()s lint()CitoS, tiuttlamcntalntcntc Cclulas 1', pcnctran en los ganglions lintaticots a tra t es do los casos lintaticos alcrcntcs, no a tras'es do la . \'PA; esta cs la tia principal de Ilcgada del antigeno a los ganglion lintaticos . Adcnris de en Ices ganglions linfatico,, cafe tip) dc yell, sc localiza en cl 11 .\M x: ell cl Limo . .

casot dcl intcstin() con las intcgrinas a4V title nicefiall la adltc rencia de los linti)citos coil Its VEA tic las placas de Peer, que cxprcsan Mat1CAo\1-1 . Este papel sc dentuestra en stones sin kunt-kout ), en I(ts que se altera tic fotrnta imp(trtantc la lo t'gcn macioin del T1,.\I . La circulacion de los linfocitos expone al antigeno a tin gran mimero de ellos Las cclulas liitiiddCs tie I()s ganglkn lint ;itions rctotrnan a la cirCUlaci6n a traces tic Ions usos lintaticos ctcrcntcs, CLIVO cotntcnido sc tierte finalmCntc ell la \rna Sut)Chtxia izyuicrda "t tra\cs del contiuCto toraCiCo . (;ada ltora sc pr()ducc la rccirculacioin tie apr(txim;ttiantcnic el 1 2'o del cotnjunton total de lintocitos . Este proccso permits que tin gran ti(IniC('(t tic lint()citon CspCCifiCos tic till antigeno dctsrminado cntrc ell C(tntaCt(n C011 Cl JlliSl110 ell Cl till Crocntotrno tic Ion (irganos linti)itics peritcricots . Est(t es especial mentc importantr debido a la nutnotespcciticidad de 1aS cclulas lintinides, \a que cl nuniero do linfocitos capaz do reconoccr a till antigen(, dctsrminado es limitatlo . En condicioncs normalss, los linlitcitos circulan continuamente de ono a Intro gangli(t, pent cuandon till antigeno pcnetn en lo ganglions lintaticos tic till animal scnsihilizado prc\iamcntc fFCnte a diCh(t antigeno, la circulacion qusda interruntpicia tran sitorianicntc, aproximatianicntc durantr 24 horas. 1)s csta tinrma, los lintitcitos especiticos de] antigen(( qucdan rctenidos prcfcrentemcntc en Ions ganglion linfiticos (Itie drenan la pucrta do entrada del antigeno . I .a s cclulas hlastiCas non rCCirculan, sin(, que pcrmaneccn fijas en till lugar ticterminado . Ions tirganon Vila tic Las difcrencias cntrc cl sistcnta TLA(\1 lintoidcs sistcmicos cs que I:ts cclulas lintoidcs asotciadas a nnic(n sae circulan principalmcnte a traxes cicl sistema lintiti(ic tie rrttiC(nSas . ASI, las celula, lilltitidcs Cs6nx(ladas tic I :ts placas do I'c\cr atra\icsan Ions ganglio, lintaticos rcgionalcs ( s(m tcrtidas aI torrents circulatorio, Pero retornan rapidan1Cnte a 1 .1 lamina propia tic] intestino (h9. 3.2(11. Fsta recirculacioin csl,ccifica cs posihlc debido a clue las cclulas lintoidcs rcconoccn molcculas do atiltr"ts cc rencia tic tipo -adrcsinas- cxprcsadas cspccificamcntc por 1 Ittlas cndotcliales tic ]as \entiIaS poscapilarcs de 1 .1 nrticosa, N qus ito Se enCUC(uran presrntcs en las VI :A do los ganglio% lintaticos (v antes ; . I'm- ello, la c%tiniulaci(in antigcnica en una zona tic la mucosa induce una rcspuesta tic antiCUCrp(n title atccta predor niinantvmcntc al l l .:\ .\1 .

Las VEA controlan la circulacion de los linfocitos I Is \- I . .\ cst,in ICcoihiCrLu tic Ccloilas CndottClia1CS coibic,ts . St :u cclulas sC CIMICn,r .ui "tttitadaS c C\hrcsan dicCrsas nt((lccul;ts tic at111etYnCIA, que not .t11arCCCn en las cclulas CndotCliales pl:utas \ en rcposo propias tic las scnulas normalss . "not de I()% niccanismos tie icti\ .ici()n de ]as cclulas endoncliales es la produccioin ,t ni\cl local do citocinas, conic cl IE\", la II .- I y el I'\1 . : I-as cclulas cndotehaICS se puCden acti\ar y dar Itigar a VEA en loos lugares en los que exists till proceso inflaniatorio cronicon, conic( pow ejcmplo en la pill o en la mcmhruaa sino\ial, en l as que norm :tlmcntC no c\istc CSte tipo tic cclulas. .\ sit \ -cz, esto ptle tic pro\-ocar la dCUmulaCi6n Lie sut)p(thhtcionCS CSI)Ccificas de Ill) fitcitots T en la zona en que Se Irut litrniado ],is \'E,\. Las moleculas que e\prcs ;ut ]as celula% CndotslialCS aCti\adas pePtenCCCn a la %upcrtamilia do las inmunoglohulinas, comp en cl caso tic WA(\I-1 (('1)5-k?,WA(\t-2(CI)1021o\'( :A(\1-1 (( :1)106i,oa la tamilia tic las sclcctinas, comp por cjcntplo la sclectina E. i ELA(\1-1 : (;1)62E Y ~ . la sclcctina P (( ;1)62P1 . La sclcctina 1' sc alntaccna en Ios cucrpos do \Vcibcl Paladc tic las cclulas cnd(ttcIi,IC%, Cs transpotrtada rapiciantcntc hacia la supcrfcic cclul:u" cuando Se produce la actiucion f x- . Cap. La m(nlecula ( ;11144, una protcina do 90 kdal que c\prcsan t(td(ts los Ieucocitos, de "Cml)Cita till Impel tundamcntal en la adltcrcncia do Ions Icucocitots a las VEA . SC cree que CntrC 1(ns Iint'()Citos V LIS Celulas ent1otCIiaICS SC CStah[CCen \arias intcraccioncs receptor-fgantlo tlitcrcntcs, que SirxCn par, dirigir los lintitcitos hacia Ios organ(ns diana . Estas interacciones Se pronducen mcdiante una, ~~adrcsi na%-" c\prcsada, potr las cclulas cndotclialcs, co(m(o \fad('A\1-I ptCSCntC en Ions Cnd(ttclio% en Cl tejidot intestinal of V( : .\\1- 1 tic oxras ccltfas entiotclialcs . Las molccttlas I)rcsclltcs ell Ions hnllttl tots tanthicn rcsulrtn tLntlantcntalcs par, dirigir do tin"nta selcc in a hts lintitcitos hacia cicterntinados ()rganos, como sucedc ell cl

Circulacion de los linfocitos

Circulacion de los linfocitos a traves del sistema linfoide de mucosas placas de Peyer, bronquios y otras mucosas rnucosa

Fig. 3.28. Las celulas linfoides que son estimuladas por un antigeno en las placas de Peyer (o en los bronquios o en cualquier otra rnucosa) migran a traves del coriducto toracico hastaefforrente circulatorio y, a continuation, alcanzan la lamina propia (LP) del intestino y, probablemente, otras mucosas cercanas o alejadas del lugar de contacto initial con el antigeno . De esta forma, los linfocitos estimulados en una superficie rnucosa se pueden diseminar a to largo de todo el TLAM de forma selectiva . Este proceso viene mediado por determinadas moleculas de adherencia en los linfocitos y las VEA mucosas .

~Por que necesitan los mamiferos un sistema linfoide altamente especializado mientras que los animales inferiores pueden sobrevivir sin el? ~Por que es importante la recirculacion de los linfocitos a traves del sistema de mucosas y de que moleculas se sirven estas celulas para poder Ilevar a cabo este proceso? ~En due se parecen y diferencian los sistemas linfoides de mucosas y sistemico? ZEs mas importante uno que el otro para la supervivencia?

~En que se diferencia el sistema linfoide de otros sistemas corporales, como el respiratorio o el reproductor? (iPuede set necesario que repase el funcionamiento de los demas sistemas corporales en un libro de texto de fisiologia!) ~Que celulas accesorias contienen los tejidos linfoides y para clue sirven? ZCuales son las funciones de los tejidos linfoides primario y secundario?

LECTURAS ADICIONALES
Butcher FC, picker LJ . Lymphocyte homing and homeostasis. Science 1996 ;272 :60-66, Hogg N, Ber,in C, Structure and function of adhesion receptors in leukocyte trafficking . lmmunol Today 1995 ;16 327-30 . Kuby J Immunology 3rd edn . Cells and Organs of the Immune System New York : WH Freeman and Co . ; 1997 47-83 Playfair JHL . Immunology at a Glance. 6th edn . Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1996 . Roitt IM . Essential Immunology 9th edn . Oxford : Blackwe I Scientific Publications, 1997

El co mplemento
El sistema del complemento forma parte del sistema inmunitario innato, y a to largo de la evolucion ha desarrollado mecanismos para distinguir to propio de to ajeno . El factor clave que permite esta discriminacion es la presencia en los tejidos del huesped de molecules reguladoras que inhiben la activacion del complemento . Existen dos vies principales de activacion del complemento, la via cltisica y la via alternativa . La via cltisica conecta el sistema inmunitario adaptativo (anticuerpos) con el sistema inmunitario innato (complemento), a traves de la union a los inmunocomplejos de C1q . En el plasma se produce una activacion continua cal ralenti de C3, que origina el continuo deposito de pequenas cantidacles de molecules de C3 sobre las superficies propias y ajenas. Las molecules reguladoras promueven el catabolismo del C3 depositado sobre las superficies del huesped, interrumpiendo el proceso de activacion del complemento. Por el contrario, el C3 depositado por la activacion al ralenti en superficies extranas, que carecen de molecules reguladoras, active la via alternativa del complemento . Las proteinas C3 y C4 del complemento poseen un enlace tioester inferno, que les permite unirse covalentemente a grupos amino e hidroxilo . Este es un paso clave para la activacion del complemento en las zones de inflamacion . El sistema del complemento posee dos sistemas de amplificacion . El primero se denomina ((cascade enzimatica inducidatt . El estimulo inductor es la union de una pequena cantidad de molecules C1q, que desencadena la activacion secuencial de una serie de cimogenos (proenzimas), que clan lugar a la escision de un gran numero de molecules de C3 . " El segundo mecanismo de amplificacion as un circuito de retroalimentacion positive, denominado circuito amplificador, que se inicia con la escision de un pequeno numero cle molecules de C3 para dar lugar a C3b . Esta tiltima molecule interviene en la formacion de la enzima C3 convertasa, que es capaz de escindir muchas mis molecules de C3 . Las celulas del huesped contienen molecules capaces de inhibir este circuito de amplificacion, transformando Cab en productos inertes. Por el contrario, el proceso de amplificacion sobre superficies extranas no puede ser detenido . Los mecanismos efectores del sistema del complemento se pueden dividir en cinco grupos: 1) opsonizacion de microorganismos para facilitar su fagocitosis ; 2) destruccion litica directa de los microorganismos; 3) atraccion quimiotactica de leucocitos hacia las zones de inflamacion, y activacion de los mismos ; 4) procesamiento de inmunocomplejos, y 5) induccion de respuestas especificas de anticuerpos, err primer lugar facilitando la localizacion de los antigenos por parte de los linfocitos B y de las celulas presentadoras de antigenos y edemas reduciendo el umbral para la activacion de los linfocitos B . " Los microorganismos patogenos hen desarrollado mecanismos de resistencia frente al sistema del complemento y, en algunos casos, utilizan el propio complemento para incrementar sit patogenicidad . El sistema del complemento puede intervenir en la patogenesis de las enfermedades cuando es activado sistemicamente in vivo con gran intensidad, o cuando su activacion es debida a autoanticuerpos unidos a los tejidos del huesped .

INTRODUCCION
El tcrtnino ~, complcincntw, file utilizado poor prinlera ccz por Eltrlich pare describir la actisidad scrica que " 'conlplcnlcnta` la capacidad tic los anticuerpos pare lisar las bactcrias . El dcscubrimicntot de esta :ctitidad scrica de naturaleza tcrntotlabil se SUCIt anibuir a Bordct l 189D), :wnyuc alt' atios Motes Nuttall ha116 ticscrito una actkidad scrica parccida . En 1907, Fcrrata ticntostro que cl complcinento podia set- separadot cn do" con11Poncntcs mcdiantc tii :ilisis loci sucrot trcntc a aqua acitiulatla . 1)c cst:t forma SC obtcnia un prccipitado do cuglohulina V una tracciitn ltldrosolublc tie albtintina . I .i actk'idad del complentcntot solo sc ntanitcst :tba en Presencia tic cstas Loots f'raiiicntes, a las title Ferrata denominoi picza intcrntctfia (('1 ) \ picza final 1(12) . bias ramie, Saclts \- (>nlorokott tictnostrarotn clue Cl CCt1Ct10 tic cobra inacti taba otro contponcntc tlel cotntplenlento i ( :' .; h \ Gordon dCNCLI brio un nucto coil tponentc clue era inestablc en Presencin de :intoniaco i ( - 4? . El orden en clue sc descitbricroil cstos componettcs no coincide corn cl orden en title rcaccionan cn la rcalidad, to clue constitute la raioin de la aparcnte talta tic logica del sistcnta tic nor tucnclatura que sc utilize ell la actualidad . La nomenclature del sistema del complemento es compleja hit la notmcnclatura dcl sistema del cotnplcntcnto, sc asigna un ntintcrot a coda una tic las protcinas de la sic clasica N Lie] contplcjo de ataguc a la menibrtna, que rcacciotn .ut en CI siguicnte orden :

CIcl, CIr, ('Is, C4, ( :2, ( :3, ( :,, (10, ( ;7, ( :8 y ( ;9 . Mochas do cstas proteinas son cimogcnos, cs dccir, procnzintas que SC ,tctis,ut cuando soon cscindicias . La forma cnzint :itica actisa sc distinguc de su prccxusor mcdiantc una linca que se traza sobrc sit nor tacion, por cjcntplo, ( ;lr. Los productos de la escision tic las protcinas del complcntcnto se distingucn tic las ntolcculas do [as title procctien mcdiantc sufijos literalcs ; poor comeniot, sc asigna la lore ., a  al tragntento tic mcnor t:unaito producidot en la escisicin t . la Ictra .,b  al tic ntator t .unaiio ; por cjctnplo, ( :3a y me(' ;b . i ( :? CS una e\cchciint t csta rcgla, ya clue cl fragntento nor sc clcnontina C2b v cl nlator ( :2a .,i Las protcinas do la sic altcrnatita sc tlcnominan ~,factotrcs "-, t . sc idcntifican coon una unica Ictra . Por cotmenio, -factor- sc puco induso se pucdc cnnitir, tic tai forma title Cl de abrc\ oar a 4actot BI, sc pucdc rchrcscntar conto "F11'. o sintl,lcmcntc conto <, B" . I .aS protcinas rc`,uladotras sc dcsignan n1etiiantc abrcs iaturas que suden proccder de un nonlbrc rclacionado con alguna acti \- idad titncitmal do la ntolccula : pot cjcntplo, cl factor acclcrador do la tlrgradacioin i 1)AF, tic] inglcs deem , acrelcratimgthrtori accIcra la degradacioin tic la comcrtasa C3 do la \ia clasica . I .os receptorcs del contplentcntot se nomtbran segiut cl li~gando al (]tic SC Utlett 11) . cj ., receptor do ( : ;a ) o mcdiantc cl sistema tic CIcnctntinacitin de grupots i( :I)) . Tanibicn csistc un sistcnta [III mcrico pare lots rcceptorcs tic Ios principales tragnicntos tic ( : ;, clue se cicnon1inan reccptorcs tlcl coniplenicnto tic lox tillos I a 4 i ( :Ill a ( :I(4, del inglcs rmuplirueut receptm:o . La lamentable con

El complemento

sccucncia dc todo csto cs Clue en la actualidad Ita% rcccprores Clue denetminan pasta dc tees forma% ditcrenics : cl receptor dc ( :3h se ticnotnina indistintatncntc receptor tic ( :3h, ('RI \ C1)35 .
SC

Las proteinas del complemento se pueden agrupar en superfamilias I .as proteinas do unit supcrtamilia ih . cj ., Lt suhCri .uttilia tic Icncs dc las innttrnoglotbulillas, \ . Cap . 6) comparten nuntcrosas caracteristicas estructuralcs t . fitncicmales . l)cntro del sistcma del complcntcnto hat nutchas proteinas quc SC pucdcn cncuadrar dentro dc tamilias tic cstc timer . La clasificaci6n en familias de las proteinas del complemento proporciona tin marco de trabajo adecuado para comprender sus relaciones estructurales y funcionales ('n rjcntpl() claret to constituycn las prcttcinas dc control del cetmplcntcntot i f(V ), tatnbicn dcnominatias reguladorcs dc la actitacic'tn del complemento iRAC) . Los mienthros Lie esta tantifa de proteinas son : " Factor H : una glohulilla plasmatica dc ccntfiguracioSn alargada . " I'rotcina fijadora tic ( :4 i (`4-hp, del inglcs ( :4-bindit(q pnttein una protctna plasmatic, hcptarttcrica con una callfiguracion ell forma de arafia . " Factor acelcrador do la dcgradacion (1)AF, ( :1)55 ;1 : una pro tcina dc menthrana unicia a la ntisnta ntccfiallte till peculiar -pie,, dc naturalcza fosfolipidica . " Cofactor protcico tic ntenthrana i :siCI', del inglcs membrane cofactor protein, CD461 : una protcina transmcnibrana yuc actua comet cofactor en la cscisibn dc C :3b . " Reccptores del cortplentento do tipo 1 I CR1, (*1)3, ;) .\- do tipo 2 f CR2, C1)21 Y : rcccptorcs celularcs coil dontinios transtncnthralla . Tocias las f( :( : cstan codificadas ell till conjunto tie gcncs estrcchantcntc ligado en cl cromosonia I . hcsc a la% aparcntcs ditcrcncias cntrc sus cstructuras, Codas estas ntolcculas coilticlicti till dorninio do unos 60 aminoacidos dcnominado sccucncia rcpctitita corta tic consenso (SR('( :) . Las SIZCC pucdcn aparecer nitrChas teccs err cada ntctlccuhi, V Cstan codificadas poor duties ]tctmcilogos dispucstos ell forma do talltlcnt . (1ollstituecll cl arnrazon cstructural tic each una do las ntolcculas, y pucdc clue tailibicil confieran a las misntas ski cspccificidad tic union . Estas scis protcims comparten tantbien una seek tic f tllcioncs ell la cascada del cotrtplcnicnto : cl factor H, (4-hp, DAI :, NUT t . CI(I incstahiliran lots C3 comcrtasas do las vias clasica \ altcrnatis- a, (Ah2a t . C .31-)Bb, rcspcctisantcntc . Algtmas tantbien cjcr cell otras funcioncs parecidas, aungtre no idcnticas . Entre ellas sc inCluten la inhibici6n tle la union cntre C :2 t . ( :4h t, cntrc cl factor B t. ('3b, la pronioci6n tic la disociacion cle ('2a t. ('41) v dc 1111 v ( :3b, e la lcti\idad canto cotactores del factor I, la cnzinta quc cataboliza ( :3h t . (4b . ()bscrscsc yuc csistcll otras ntolcculas yuc conticncn la SR('(', pent Clue net CstabICCCrt interaccioncs cent las prcttcinas del sistcma del cctmplentento, CtttrC ell3s se encuentrall cl reccpton tic I1 .-2, la (3_ ` ;lucoprotcina I t . cl factor XIII del sistcma tic cctaI'll ladon s ;utguinoa . La mayoria de las proteinas del complemento presentan una estructura ((en mosaica) Las haws trotlccularcs tic las rclaciontcs czistcntCS tlcntrot tic cstau tamilias sc pan conotcidot teats la clonacioSn tic skis gcncs . En la actualidad Sc crce yuc a to largos dc la csoluci(Sn SC h :tit ido produ cicndot duphcacicntes tic exones, clue se pan -harajado- entrc los difcrontrs gcncs . Estcts scgrncntots duplicados tic .al)\ hart ido emlucionando inciclmtdicntcmcntc, t . en muchas ocasioncs hail mantcrudo cstructuras y lirncioncs cstrcchanicntc rclacionadas, auncluc en alguncts casos Iran dcsaparccido cicrtas actiiidadcs pan aparccido otras .

Aiuchas prcttcinas del sistcma del complcntcnto cstan torntadas por tin ", niosaicw , dc csoncs proceticntcs dc otras tantilias . l'ctr cjcntplo, C I S, rata cnzinta dc la i ia cl : sica, conticne esoncs proccdcrtes tic la tamilia dc ]as scrin csterasas t. tic la tamilia dcl receptor dc las lipoprotcmas tic baja dcnsidad f Ll)L-B ), ask Como till cot- tot dominio rcpctiti\o dc conscnso procccictttc sic la supertamilia do proteinas dc control del complemento . 1)c It misnia forma, ( 6, ('7, ('S \' C9, los contponcntcs del complcio dc atayuc a la ntenthrana capaz dc titrmar porn, ell la ntisma, prescntan caractcristicas comuncs con la pcrtiwina _t con la protcina catio nica dc los cosinofilos . El complemento es una de las principales Was efectoras de la inflamacion El sistcmm tic] complemento forma parts del sistcma inntnnitario innato y csta tormado por ntuchas proteinas yuc actuall ell tornta dc cascada, ell la clue coda cnzinta cataliza la rcaccion do la siguicntc . F.) componcntc nt5s iniportantc cs ('3, cuva concentraricin Sangguinea cs del orden dc la dc digtutas inllrtutoglobulinas (1-2 nig/all . Las dos vias principales dc actitacion del complemento rcfcjan ]as rcspucstas inntunitarias innatas t . aclaptatiias . La tia clasica conecta el sistcma del complcntcnto con Cl sistcma illntunitario adaptatiio, mediantc las intcracciones entrc los ill ntunocomplcicts t- ( : I q . La via altcrnati\ a f innata) se actit a ntediantc la union alcatoria dc ('3h a la supcrfcic dc los microorganismos . Las tirnciones in viva del utmplemento se pucdeu comprcndcr ntejctr cstudiando las cntcrmcdades relacionadas con cl deficit tic [as ditcrcntcs prcttcinas dcl sistcma . Lets individuos con estos deficit i \-. cap . 2 I I present .tit una mayor susccptibihciad a dos tipos do enfertnetlatics : ]as infcccientes recurrcrttcs por bactcrias piogcnicas I tormadoras dc ahscesots h [as enfermcdades caracterizadas por la produccioin do autotanticucrpos e inlltirttocctlltplejos . Estas ohscrucioncs sugicrcn clue cl complcntcnto dcscnipcha till Impel ell la defensa frente a las bacteria% y ell la climinacioin do litIll unotcontplcjos, cuta pcrsistencia prosctca cntcrrncdatlcs autoillmunitarias y mcdiacias pctr ill ntunoconplcjos i~ . cap . 25) . Las consocuencias dc la actitacioSn del complerrentot soil : " ()Isontiiaciom . " Acticacioill do lots ICUCOCitos . " Lists tic Ias cclulas liana 4 .1) . Opsonizaeion . Este proccso consiste ell cl reolrbrinticnto por parts dc las prcttcinas del complcntcnto sic la supcrficic dc la diana . A continuacion, las cclulas tagociticas con rcccptores pats estos contponcntcs tic] CorttPICrt1Ctt10 SC pucdcn unir a dicha liana, actiursc dctcrtninar la endocitosis o fagotcitosis dc la mismm . Activacion de los leucocitos. Lets polintortitnuclearcs \ los nttcrotagos potsccn rrcrptotrcs cspccificos dc I,cyucitos fragnictttot,s dc las promnas dcl contplcincntot yuc sc libcran ell Icts alrcdcdotrcs dc la liana durantc la cascada del complcnncnto . Estos tragtncntos sc dititndcn, alcjandosc tic la liana, t al unirsr a las cclulas cfcctoras cstinutlcut su ntot- illticnto celular oricntado fyuintictt .tsie',~ t sit aCtli'aClon . Lisis de las celulas diana. 1:1 pulltct final tic la Cascada Lie] cons plcrnctao cs la inccrcion do till -cnchute- hidr6tobo ell la hicapa llpidica do la nctnhrana tic la cclula liana . F,sta insercion prat -or ca till dcseclnilihnot ctsnuitico title conduce a la lists dc la ccltrla . El complemento es capaz de distinguir entre to propio y to ajeno Aungtie of Otntltlcntcntot titrnta harts del sistenYa innurnitario innato, a lot Iarvot dc la ctolucion ha tlcsarrollado ntecanismos para clistinguir lo propio do to ajeno . El factor clat- c ell la discriniinacicin cntrc lot propio t. to ajeno petr parts del comple

Activation del complement

memo Cs la union rapid, . masi,a dC (:3h a las CstruCturas Cxtranas, c<nno lots microganismos o Ioa ComPICjots illnlunita rios, mieniras Clue las supcrficics del Irrrcsped clucdan protegidas l,otl' n10lcculas CIC mcmhrana gL1C inpiticn corn gran eficacia clue sc dcpotsite ('3h .

La via clasica es activada principalmente por inmunocomplejos 1 . .1 sia clasica Cs Cl mctanisnut lHIKL111i11,11 tic acti,aCloin dC1 0111 l,lcmentot mCdiadd potr allticuCrpOS /ia. 4. .ij; cl printer conlplc )o enzlnatlco lie CSta cascada Cs C 1 . La activation se inicia tras la union de C1 a tin inmunocomplejo (I cs tin cotmplcjo pcntanutlccular dcl,cndicnic dc ('a' , titrma. do por Mid iulica 111o1000la ( : l tl, dots molcculas ( : I r t otras dots molcculas (GIs iait7. 4.41. El primer paso dc la via clasica cs la

ACTIVACION DEL COMPLEMENTO t.a cascada ticl complemento sc pucdc actnar dc trcs fornias di fcrcmcs, cicnornimadas via clasica, \ is por Icctinas via altcrnati ta . fI-ottias cstas sins comciuccn a la finmacioin dc una concrtasa quc cscindc (1 dandot Itrgar a C3a v ( :3h. Este cs cl Paso clasc dcl proccso do actuation dcl complcntcnto (jirf. 4.21. La con-crtasa tic la s is clasica y dc las Icctinas esta tormacia por una combination dc ('4 y (2, (Ab2a, nlicntra~c la tic 1 .1 \ia alternatua CS una combination tic ('3 \ Fli, ( :3hlib . El ('3b Clue gcncran CStas den cnzimas SC unC a la mcmhrana dc la cclu.1 tirentc dc production C1c la th:ula se COniertC ell una 11u0 (.3b (por cllo esta talc tic la cascada sc cicnonlina circuittt do amplificacion ) . Lots don tipos dc (:3 con\crtasa pucdCn set- transfornlados en una (;5 coMCrtaSa metiiantc la adicion tic una mo1CCUla adicio nal dc (:3b; (: ; con-crtasa cataliza cl primer paso dc la cadCna dc rcacciones tout cotndUCC a la fi,rmacioin dc Ion COmplCjos dC ataquc a la mcnilrana.

union dcl anticuu- po a dots o teas dc los sets dominios globularcs tic CI q . C I q sc Line con gran at idcz a los dominion 0112 1 pertenccientes a la region Fc ~ dc las molcculas dc IgG agregadas ell forma dC innttmotconrll)lCjos . I ambicn sc hucdC Unir a lots dominiots (aa . 1 dC una Link, molecula dc I,4:\i, cup configuration sc haca moxlificadot desdc la forma , platia- a la forma do

metiiantc la union a till antiigeno . Sc tree clue ]as mUItil,ICS ullioncs dc los dominion globularcs dc C 1 q a lots contplcjos quc conticnen I-G of I,M pro\oca tin Camhio contitrntacional en el complcjo (:1 . Este cambio time conic primer, cotnsecucncia la dtrtoactuaciorn (mecliantc autotc :ttalisis) dc una do ]as molcculas (Ar, t . &spots tic la otra, dando Itrgar a dos cnzimas actit as (' I r. :A cotntinuacioin, cstas dos cnzimas cscindcn las dos nutlcculas tie (:Is, Clue sc translorman en las scrin cstcrasas actuas (Is.

Las tres funciones biologicas principales del sistema del complemento en la inflamacion fagocito Comparacitin de las vfas clasica y alternativa del complemento complejos antigenofanticuerpo (adaptativo)

bacteria C3

C3

microorganismos

VIA CLASICA opsonizacion COMPLEMENTO C3a

VIA ALTERNATIVA (innata)

C3b

activation

C5-C9 secuencia final Fig. 4.2 . Las dos vfas conducen a la formation de una C3 convertasa, Clue transform, C3 en C3b, el paso fundamental de la via del complemento . A su vez, C3b activa la secuencia litica final del complemento, C5-C9. El primer paso Clue conduce a la fijacion de C3 en la secuencia clasica es la union entre tin antigeno y su correspondiente anticuerpo . En la via alternativa no es necesaria la presencia de anticuerpos, ya Clue esta via se inicia tras la union covalente de C3b a los grupos hidroxilo de la membrana celular del microorganismo . La via alternativa proporciona inmunidad ((innata)) inespecifica, mientras Clue la via clasica, Clue probablemente representa tin paso evolutivo teas reciente, constituye tin enlace con la inmunidad adaptativa .

celula diana

fagocito

Fig. 4.1 . 1) Opsonizacion (recubrimiento) de microorganismos e inmunocomplejos, de tal forma Clue puedan ser reconocidos per las celulas Clue expresan receptores del complemento. 2) Lisis de celulas diana. 3) Activation de los fagocitos (macrofagos y neutrofilos) .

El complemento

Activadores del complemento microorganismos virus bacterias otros polianiones (especlaImerite cuando se encuentran unidos a cationes), PO,,' (ADN, lipido A, cardiolipina), SO,' (sulfato de dextrano, heparina, condroitin sulfato)

inmunoglobulinas

otros

via clasica

complejos con IgM, IgG1, IgG2 o IgG3

retrovirus murinos, virus de la estomatitis vesicular muchos microorganismos grampositivos y gramnegativos

Mycoplasma

via de lectinas complejos con IgG, IgA o IgE (con menor algunas celulas eficacia que en la via infectadas por virus clasica) (p . ej ., VEB)

grupos de manosas terminales tripanosomas,

Leishmania,

via alternativa

muchos cepas de organismos grampositivos y gramnegativos

muchos hongos

sulfato de dextrano, eritrocitos heterologos, hidratos de carbono (p. ej ., agarosa)

Fig. 4.3 . En esta tabla se enumeran los activadores de las vias clasica, por lectinas y alternativa .

Estructura de C1 subunidad C1q

region rcecti'~a<<~ de

C1q intacto

unoglobulinas

cabeza globula del extremo carboxilico secuencias tipo colageno (cads una de 80 aminoacidos)

Clq

Fig. 4.4. Cada subunidad de Clq presenta forma de Y y cada rama termina en una cabeza globular (1) . Clq esta formado portres subunidades de este tipo unidas entre si (2, 3) . Cada una tiene seis cadenas polipeptidicas, por to que la molecula completa de Clq contiene 18 de estas cadenas . Los receptores de las regiones Fc de las IgG estan en las cabezas globulares, dispuestas formando un

anillo en la molecula completa de C1q . En disposition longitudinal con respecto a la molecula de Clq se situa una unidad (6) formada por dos moleculas de C1r y otras dos de C1s (4, 5) . Los centros activos de C1r muy proximos, en el centro del anillo . La cohesion del complejo C1 depende de la presencia de Call . (3 y 5 segbn Ross, obra citada, reproducido por gentileza del Dr . N. Hughes-Jones .)

Activacion del complemento

La via de lectinas es homologa a la via clasica, pero se activa sin la participation de anticuerpos ( Iti pCrrCnCtc a una l .u)1ili .1 tic lo. ctinas dcpcndicntc, tic C:tlcio do

m)min ;1das CcrlcCtinas I IcctinjS tic] coLigcnos. ()tro)S nlicnlhn)S d: c,ta t :unilia tic I)roneinas son 1,1 lcctin .t tijad(n,t tic nlanam) i \11;1 ., tic] ill'-d" mnunuu-hindlurr Iraiul, tamhicn dell()n)inat1a protein, fijadora tie man:tm) is\1111', tic] inplcs iuaunan-uindinrt i) ;*ut1lJ1 i, la ctaM1utinitta ],u Ill( 4011,1S .-1 c l) dcl sul- tactalitc poll nxntar. l :t \IRI . 1)resentc en sutra) Se I)uCdC utlir ,t gruI ,on Loll let minalcs tic I :l sullcrfiic n1 .utt)sas dc las bacteria", sicndo) Capai tic inter .cCio)nar dCSpuc, tin 1111, scrip pro)tcinasas dau)min;uias \1ASI, t \1 .51'2 " dcl in , lcs alltl' assuihttt tf ,iriui prwtiiuasr, ,c roll prwCulasa ;t,Omad,t a M11P 1, )\IASP, NIASP2 prcscnt.ut una CS \IASI, tructur;1 :tnahwj a ('Ir 1, ('IS : la intCracCiom cntrc )NI1;1' ( IS, t ,\L1SP2 c, 1)arccid .1 ,l la title CStabICCC ( :ly eon ('It omducc a la aai) acioin do Ia ci,1 cLisica en auscncia do ;ulticucrp)S . ('Itl t,ln1l" iCn Cs C,11Mi tie mlif-SC dil-CCtanlCntC Cn ,11iscncia tic anticucrp)s a .tl ;"unos nlicrcrcrr~anisnun, CntrC l0S yuc SC cnuICrt tr .t n I<n miCO)I)I ;tsnras alguncn rCtr0ciruS i; :utntluC no) CI \"ll l i .

patibilidad . ( :uand() So: acti)an, ( .4A rnuestra l1rcteroici.i 11(w la union Corn grrlIN), amino), C1 .111do) lug,ar a Cnlaccs tiler anlida, micntr,ts title ( 41 se tine prctercntenlcntc a ;grup)s Ilidn)silo a tra)CS do cnllccs tills, ester. Por tanto, ( 4:\ Sc unc principalnlcntc a Ices grupo)s ,minor dc las pr()tcmas, micntraS (]Lie ('411 Sc line S(A)rc tc)dor a 1t)S 1,r-uIn)S hitlro),ilcr de Ices hidl-,ltoS Lie C .11-1101`10 .

El C4b de superficie actua como punto de union par, C2, to que da como resultado la formation de la C3 convertasa de la via clasica

.\ co nttirlttaOoin, of ('41) tic s ;il,Crfc iC .1 .111 .1 011111) hunter tic union paua cl cin)cigen() ( :2 . l'na ccz union, ( ? NC Collcicrtc ell till SH', n- ato) par.l ("IS, \ CS CNCintiitl() lil)crando (:2t) . El scgtncttto grail do ( _ 1 ; pcrm .mcce unidO) a ( -11) tin- mando cl ctnnl)icjor (Ah2a, la ( : .; trwctrt,tsa tic la ci,) tl :isit,t,

El C3b generado por la C3 convertasa se puede unir covalentemente a moleculas de las superficie" celulares ( .; 1,CrtC1lCtC ,) HIM t.unih,t tic 1,rc)tCiilaS yuc e\I)Crinlcntan 1111,)

C1 escinde C4 y genera C4 activado I .,) prcrtcina ( 4 del Complcmemcr Conlticne

till enlace tioester intcrno) dcntro) tic una SCCUCllCi,t title hrCSCnt,t 1111 ;1 Bran lunnorlor` ;ia Con 1111, scCUC11Ci,t dc cluc tamhicn ContIC11C tin cnlacc tio)es ler i) . IMi, adcl,uttC 1 . ( uand0 ('Is esCltltie ( 4, Sc pro Oucen dos ti;tgmentos : ( 4a i (]Lie I)OSec ligera, pn )Pietiatics anafilwc'rsicas t t . tin compucsto intcrmcdio) inestal)le tie ma\,w tamano, ( :4h* . e Fl ell ;tsterI CO dCllOta ()Lie ,C trata tie un .l nu)Iccula incstah1c, la quo: cl punto tic union nacicntc SC Cncucntra Cn cstado actitado) . 4 :1 Ion 1)c)CO)s milisrgundo)S cst.l tl1)>1CCUIa C\I)Crin)cnta tin ataquc nuclo) Sit filo poor pane tic alguno tie to', ,_rLAIrxrs LItlint1CO)S Sitt),ldo)s en prorzimidad. La nlator parts tie ('41)* CS IlidrolizaCio [lot- Cl aqua, dantlo) lutar a i(41) ii dc inacti)c)i . Sin cmh;u- go, (`4b* tamhicn

puccic tixnlar cnlacc% cmalcntes Con grul)ots amino) () Ititlrorxik) 1,crtcnccicntcs a hs molcctllas tic LIS SupcrfeiCS CCllllarCS, titledando) .un,11Tldo a LIS nlisnltS ell liwma de ( 41) tie sul)Crficic . t-.eiSten do,, isotipos de (4, (;4 .), 0411, codificados por gales disl)ucstos ell Onticnl dcntro tic] complCio principal tic histocom-

Activacion del enlace tioester de C3

transh>rmaCicin I)OStradLlCCionl,tl 1)()Co) 01[111111 . E,t.l transtinn),lCioin CO I)SiSte en la tiWnrlciorll tic rill ClILICC tio)cstor ontlC una gluL1llllrla una cistcina situad .l s 11111 - COCa una tic o)tra, corn Chilli nacic)n de anrcmi ;cc) . taste cnlacc CS ntet ;test,lblc, ) cl grn1)(r Carhomih) clectrofilo :i)ido do CICCtnmCS, ( :- () ' Ccl cnlacc tier Set- atacad() poll' grul)()s nuClC(')til()S do)nadorc, do ester pucde CIcctnnIcS i, C()IIw Ion grnp)S IIlotI . ()\ iI() () urIin() tic I as pro )tcinas C llidr,uo)s de C.uINMO ldVlCClltCS . Esta rcacciom pcrtnitc a unirsc co)\alcntcnlcntc a csas nu)Ieculas ; . /iht . 4. .S' . 1 .a CScision protcolitica do ( 3,t a partir del emu- en)o) amino) tie C,uali/Ab 1)on- la ( 3 Com1- crtasa, pro\()Ca till 1 .1 CadCna u tic cambia conti)rmacio)nal que incsi .lbiliia consicicrahlomcntc cl cn IaCC tioester InICrnr) . FStC CllI :lCC a COnriCrtc :111))111 ell tin I)unto) Lie union nacicntc dCntro dC ( :3t)*,) I)rCSCnta una grin tcndCn Cia a rcaCCionar Con ;~rulurs nuClcofil()S ad\accntcs . Al igual ciuc ell cl caste tie ('4*, la nmlowi,1 de (:3b* rcacci(ma con aqua, lion) partc tie] mime) tamhicn se rule ;t proteinaS c 1lidrators tic cart)cnu) I)ro)>inun ill punts) tic acticacion . (:onto Lts (:3 C()lnortasa" ,tlclcn 'let' gCncratias Sol)r'C SUI)crticiCS I)CrtCl1CCicntcs a CStl-HCtutaS IjCnas o ell innunlOCoUnPICj()s, Cl dcllc'~Sin) tic ('ill) sc conccntra t.unhien SohrC CS,IS nliSmas ic)n .ts. A c()ntinuaCion, CI ( .;b UtlidO SC Coil\icrte en till 11110() to Co tic lCti)- aCio Il (let Con1I)ICnlcnto) n1C diantr cl circuit() tic amplification tie la via altcrnati) a ; ) . nla% ado I ;ultC ) I_l,rt. 4.li ;~ .

C3a

La aCti) ;lcio)n dC Lt ct .1 CLANIC,t Csta rogulacla en ta~sc liquid, plc diantc dos mccanism)s . El primcm tic cllos cs cl inhihidow dc ( l , . unit Senn protcasa inhil)iciort scrpina i yuc Sc unc ,t ( It ) Is 1 I()s inaCtiva . ell EI set, ,undo ) mec,lnisnu) co)nsistc cl hloquco tic Lt t(')rnllCio Lie (Ah2a, L1 ('3 C()mcrttsa tic la,ia clasica . La liwnlaciorn tie cSt.l ell cnzinla trio liquid, no Cs tin [)r()CCS() cticiCntC, debido a la prC (let sencia t.teto)r I ) tie la pro)teina fjadcn'a tie ( :4 i ('4-6111, (]Lie :IC tuan cox)rdinadamcnte t . dcgr,tdan ('41) . Adcniis, ( 4-bl) induce

La activation de la via clasica esta bajo el control de tin sistema regulador muy eficaz

Fig. 4.5 . La cadena a Lie C3 contiene tin enlace tioester entre una cisteina y una glutamina. Tras la escision de C3 en C3a y OW, el enlace queda inestabilizado y al mismo tiempo se torna muy susceptible al ataque nucleofilo por parte de los electrones de los grupos-OH y-NH 2, to que permite a C3b que pueda formar enlaces covalentes con proteinas e hidratos de carbon(.

la disociacioin dc ( :2a a partir dc C4t)2a . La activation do la via clasica tamhicn csta rettulada median Sit tC tin n1CC,tnisnl0 title illll)idc la union (let Con1[`o1Cl1lCl11() .1 1 .1 intervienen perfiCie Lie vas cclulas del hucspcd . I-:n csic pn)c"o vas protculas Lie control del complentcnto W('(~, cntrc Lis title Sc cncucntran cl tilCton :uClCradon tic la de graciacicin 1) :111 , C1)SS ), (,RI ~ C1)351 v- cl cofactor protcico do mcnlbratm ~M(P, (11-1()1 .

I?stas nlolcculas actual Lie la siguicntc ti)rma i:/id . 4. -) : " Inhit)cn la union do (:2 a (:41) (I)AF c) CRI ' . " Prcnrtueven la -acelcracion tie la degradacion " , es ciccir, la dis()Ciaci(in tie ( :2a )' (141) 11),11 o (A1' . ell " Aawn como cotactorcs cl proccso dc degradacio)n dc ('4h poi- part(tel tactor I JI(P o) (RI t .

El complemento

La via clasica

C1s

PCls C4 C3

Clr- "Clr

C2

C4b2

Mgz

.`

C4b2a

Cab*

C3b

Fig. 4.6 . Tras la union de C1q a los inmunocomplejos, C1r cataliza su propia activation y la de CIS. A continuation, C1s escinde C4 para formar C4a y C4b', uniendose inmediatamente este ultimo a proteinas o hidratos de carbono adyacentes. El C4b de superficie se une seguidamente a C2 en presencia de Mg'- . C1s escinde C2b a partir de este complejo, dejando unido al mismo el fragmento C2a. (Observese Clue en el caso de C2 la nomenclatura es inversa a la habitual, siendo C2a el

fragmento de mayor tamano . Se ha propuetto modificar la nomenclatura para mayor claridad, pero en este libro utilizaremos las denominaciones originales .) El complejo C4b2a es la C3 convertasa de la via clasica . En este y en los siguientes diagramas de este capitulo sobre el complemento, las reacciones enzimaticas se indicaran con flechas rojas.

La via alternativa del complemento se activa espontaneamente

La activation al ralenti genera continuamente pequenas cantidades de C3b* en el suero El cnlacc tio~cst,r inicrnci d, la molccula ( ;3 nati\a SC puCCIC hi(lrcilizar cspontancamcntc cn presencia dc aqua, generando una tiirnia aCtiyada (iC ( ;3 cicntmtina(la (*3i . Esta attiyaCion plasma_ tica cspomtanca dc ('3, dc pcgUCfa magnitud pcro constants, sc (icnomin .t actiyaci(in al ralcnti . A continuaci(in, ('3i actua coma punro C1c union pare sl factor R f x .tir) . 4.81, dando lugar a (;3111 . ,'Estc proccso cs analogo a la union cntre (:2 \ C4b; r. f:q. 4.9.Y EI factor B 1.11100 a ('3i CS cscin(hdo p(1-Cl taCt(li- 1), libcrando lia. El citmplejet (- 3iRb resUltantc, quo: pcrmanece en fast liquicia, es la ( : .; com- crtasa dc la via alicrnati(a (fiq . 4A . Las proteinas dc control dcl complcmcnto impiden que cl ('a'h ligado a las supcrficics dc ]as cclulas aUt61ogas inicic cl circuito do amplifictCitin .

Sin cnilbargo, en trio do Clue se encucntrc situaCio cn las hrozinljda(jcs ds una supcrficic pertenecicntc a una estruciura ajena, coo la mcnilrana dc una cclula hactcriana, SC tinC coy.t1cntcmcntc a la misnra c jnicia cl circuito dc amplificaci6n dc la via alternatiya. En la . ftuprra 4.9sc mucstra un rcsuincn dc los c<imponcntcs % la actiyaC1611 (iC las yias clasica Y pear Icctinas y alternatiya dcl complemento. Los microorganismos proporcionan superficies ((protegidas)j a Cab [ .,is superliocs que attiyan CfiCazmentC CI t(ntII)ICntcnto sC (iCnominan supcrficics protsgi(ias 4.1?) . EI tcrmino " , protcgi (la,, quicrc dccir yuC CI ('3h unido a las mismas csti a salvo dc la d(: graklacion protcolitica . I as supcrficics ajcnas, comp las mcmhranas hactcrianas, ofi-cccn protcccidm, a ('3h, dCHCIO a quo: cn csos lugares ('3h pr,senta mayor afinidad por cl factor B que por cl tactcir 11, [-or to quo: es mas probable que tin-nte una comcrtasa cstablc . Adcmas, Las supcrficics ajcnas carcccn (1c las protcinas rcguladoras (ICI hucspcd qus impiClCn la attiyati6n CjCI a>mplcmcnto. Aunquc no sc comprcnc1c totalmcntc cualcs son los rcquisitos Cstructurales CC9cttrs para qUC Utla SUpcrficic sC CnCLICntrc protcgida, parccc Clue la composicicm do hidratos dc carb(mo cs un factor important, . I .a presencia do azucarcs icidos, Como cl aciLlo sialico, parccc quo: protegc a [as mcmhranas propias ti-entc al dcpdsito dc ('3h amplificado . A la Ut116n initial do una m(dccula do (- 3h a una supcrficic pnxcgi(1a sit uc un paso dc amplificaci6n, qus da conx~ rcsulta do la union Cic inuchas mas molcculas d, (:3b a la misma super ficic. I .a clay, para que sc pr(xluzta CStt rapi(b amplificacii'in dc ('3h radica cn la titrmaci6n (1c una ('3 ConyCrtasa (iC supcrficic . El circuito de amplification de la via alternativa es un mecanismo de retroalimentacion positiva El ('3h do suhcrticic NC une al factor 11, (iando lugar a (' .;1,1 -) . EStC ci~mpICjo c(ntstituyc Un stistrato Iru- a Cl factor 1), una scrin cstcrasa qus cscindc cl factor li y fbcra tin pcqucfto ti-agnlcnto del mismo, Ila, quctlanclo ('3hllb unido a la supcrficic . El Coin plcjo (:3bBb SC Chsotia con hastantc tapi(1cz, a no sci' gtic sea cstabilica(1o mcdiantc ht union dc propcr(fina (1'h, (undo lugar al ;~ nnhli j  ( 3bRbl'. 1-'stt Cs la ('3 conycrt.tsa C1c supcrficic (1c la via Jltcrn .uiya .

('onto csta comrrtasa actua cn tasc liquida, la mayor parts dc ('3b' gcncrado lxor ('3i11h cs hidroliza(1o c inactiyaklo por cl apua .

Regulation de las C3 convertasas

inhibition de la asociacion (DAF, CR1) promotion de la disociacion (DAF, CR11 promotion del catabolismo ICR1, MCP)

Fig. 4.7 . El factor acelerador de la degradation (DAF) y CR1 inhiben la asociacion entre CO y C2, y promueven la disociacion del complejo C4b2a. CR1 y el cofactor proteico de membrana (MCP) facilitan la escision de C4b por parte del factor I (FI) . Estas mismas moleculas controlan las interacciones entre C3b y el factor B, mediante mecanismos parecidos.

Activacion del complemento

Activacion al ralenti de C3

C3

C3 convertasa

23668 0
Fig. 4.8 . El enlace tioester de la molecula nativa de C3 se hidroliza rapidamente en presencia de agua, formando CI IC3(Hz0)], que se une al factor B en presencia de Mg" . Tras la escision de B por parte del factor D, este complejo da lugar a una C3 convertasa en fase liquida, que puede escindir directamente C3 en los fragmentos C3a y C3b.

Efectos analogos de las Was clasica, por lectinas y alternativa

VIA CLASICA y POR LECTINAS~ inmunocomplejos C1q C1s MASP MBL Carbohidratos

VIA ALTERNATIVA

C4

C3 activacidn al ralenti

t. Cob C3b

de membrana

de membrana -

B Cts MASP C4b2a l

- ;a

C3

C3bBb

C3b

C4b2a3b C5 convertasa de la via clasica

C3bBb3b C5 convertasa de la via alternativa

Fig. 4.9 . Las vias clasica y alternativa generan una C3 convertasa : C4b2a (en la via clasica) y C3bBb (en la via alternativa) . En la secuencia clasica, C1s es activado por inmunocomplejos y escinde a C4 y a C2 . Los fragmentos menores, C4a y C2b, se pierden, mientras que los componentes de mayor tamano dan lugar a C4b2a. C4 y C2 tambien se pueden activar por MASP, una proteina de la via de las lectinas analoga a Cls. En la via alternativa, el C3b de superficie (generado mediante activacidn al ralenti) se une al factor B, que es escindido y libera el pequeno fragmento Ba . El fragmento mayor , Bb, permanece unioo formando C3bBb. Este complejo transforma mas C3, generando por tanto un circuito de retroalimentacion positiva . Las superficies activadoras, por ejemplo las de los microorganismos, estabilizan C3b, al facilitar su union al factor B. Esta actividad promueve la activacidn de la via alternativa del complemento. Las C3 convertasas de ambas vias se pueden unir a mas C3b, dando lugar a las C5 convertasas . Estas activan el siguiente componente del sistema del complemento, C5 . La C5 convertasa de la via clasica es C4b2a3b, mientras que la de la via alternativa es C3bBb3b

El complemento

El circuito de amplificacion de la activacion de C3 C4b2a de superficie C3igUde activ . ralenti proteasas exogenas

Fig . 4.10 . C3b puede see generado por la C3 convertasa de la via clasica, C4b2a, o por la C3 convertasa de la via alternativa . A continuacion, C3b forma tin complejo con el factor B en presencia de Mg 2- , sobre el que acttia el factor D . Como consecuencia de esta interaccion se libera Ba y el complejo se transforma en la C3 convertasa de la via alternativa, 0686 . A su vez, este complejo enzimatico puede actuar sobre nuevas moleculas de C3, cfando lugar a mas C3b . Por tanto, se establece tin circuito de retroalimentacion positiva, que amplifica la activacion inicial del complemento .

(3l)Bbl' cscindc mochas m ;is ntctlcculas tic ( :,; ; la IctcalizaCititt Lie la com-erttsa IYtCC title los fragn)cntos (:3 h' generados cn cstc proccso ticndan a unirsc a la superficic protcgida prc~xima, 110 a 0111-01, lugarcs f:Jztl. -1.1111 . ()l)scr)cse que cl circuito de amplificacion taml)icn actiia c tlando ( :3b sc deposita como consecuencia Lie la actit acicin penla via clasica ~ dcl)cndicntc Lie anticucrl)osi . La activacion de la via alternativa y del circuito de amplificacion se encuentran sujetos a mecanismos reguladores La tctn :ICion Lie la via altCrnati)a en LISC IftiuidA, en dcnidC ( :3b no sC unC a las supcrficics, csti cstrccltantcnte regulada ['or protcinas parccidas o idcnticas a I :u protrinas dc control del cctmI)ICntCntec LIuC inhibcn la acti,tcicm de la tia clasica . FI tactor H, cc~difcado pctr tin micntbrct Lie] conjunto Lie genes IWA c lur mologo a ( :+- hp, prontttc\ -e la disociacion Lie lab tanto ;t partir dc ('3j coma Lie (*M) . EI factor H tantbicn acttia canto colactor del tactor I cn la dc , raclacictn dc ( :3i v ( :3b ~.tq. 4 .11) .

Degradacion de C3b

- _C3c

Fig . 4 .11 . El factor I escinde C3b en tres puntos, para liberar C3c y dejar C3dg, tin fragmento de la cadena u que permanece unido al sustrato . Las dos primeras escisiones estan promovidas por el factor H, MCP o CR1, y producen tin compuesto intermedio iC3b . La tercera escision esta promovida por CR1 .

La regulaci(in del mccanisn)o de amplificacion cs import .tnic para cl liucsl,cci, ya clue sc trata Lie tin mccanisnur dc retroalinicntacicin positjt -a title, Lie no ser comtrolado, no sc intcrrumpiria Itasta CIue Se agotaSC terdo cl ('3 . ( La esistcncia Lie cstc mcCanismo se descubrio Of till pacicntc Coil tin deficit tic reditarict dc la enzima reguladora, cl tactctr 1 . Al carcccr del mismo, su circuito Lie amplificacion Irabia firncionadc~ ininterrumpitiamcntc last, qUC todo su ( ;3 scric(r sc labia transtormado ell ('31) .) T :utto 1)AF conto ( :RI acclcran la disociacic'm (let ('3t)III) locals/ado sabre las mcmbranas Lie cclulas autcilctgas, pronto) iendo la disociacion dc ( :3b (let complejo . ( :RI y ART acttian ano cofacrctres elf la cscisicin dCl factor ( ;3h p(n' partC Lie] factor I it . )int . 4. .`1 . Estas rcaccioncs soft exactantcntc igualcs a ]as actitidades tic control qUC ejerecn DAF, iNI('I't Gill sabre el cetntI)Icjct (Ab2a de la \L, clasica Cuando cste SC CnCUCntra unido a las file ntbranas celularcs . Fn rcsuntcn, la rcgulacioin Lie[ dcstincr del ('3h unido a Sul)crficies es cl tactor criticcr clue permitc al sistcnta del complemcnto distinguir cnirc to propict \ to ajcno . EI ( :36 unido hue Lie c(trrer dots tipos tie suertc ditcrentcs : " An)plificaci6n . ('3l) aCttia C(trtt(r I)unto dC Union para cl factor li, da lugar a una cam crtasa e indUCC CI dCI)()Sitct do n)as ( .31) sot)rc la ntisnta superficic . " Inhibicion . ( :3b cs catabolizado por cl factor I coil la intert cnci6n de ono de estos tees cofactorcs : cl factor H ( plasma ticot'l, ( :Ill o M('I' ( ntcntbrana) . La naturaICZl Lie la SuI)crficie a la que SC CnCUCntra unido ('31) es cl tactctr yuc LiCtcrrnina CLIA do estas does \ias se aCti)a iJiq. 4.121 . La I)rCSCnCia Lie n1etlcculas intrinsCCas conut DAF, ( :KI \ NI('P sctbrc I :u superficics propias, cspecialntcntc sctbrc las mcmbranas cclularcs, intpidc coil Bran Ctccti)- idad la tortnacion dc ( :3 concertasas . Por cl contrario, I ;ts SUI)Crficies e\traftas, Comet, p01cjentplo, I ;ts mcmbranas Lie las cclulas bacterianas, constitutcn till rcllrgio para ( :31), \a que ell cstos ptlMOS CI factor 11 I)rCSC11 to nra\or afinidad pctr ( :3b flue cl factor H . Por tanto, CI dcpcni to dc tlnas pocas molcculas tic ( :3l) sabre unit superficic ajena ticnc coma consecuenc ia la fitrnracion tic la (13 con\crtasa Lie la via altcrnati)a, ('3bltbl', que Cs rC1atiamentC (stalk C indLICC CI deposit- dc ntas n1o1ccnIas Lie ('31) en Sus alrcdcdorcs .

Activation del complemento-IN

La fase final de la activation del complemento es la formation del complejo de ataque a la membrana I 'l trio final do la ,icti( .(tic iii ;Io 1,1 c,1sr .1(ia cicl conlplcnlciit(r

Cs la liirmacion dcl conlplcj() dc atayuc a 1 :1 mcnlbrana C( : :\\I) me diantc la cscisioin rnxinl,iticn Cc (-.5, una protcina lionuil()ga a (,; 1 . ('4 pcr(i quc carccc dcl enlace ti((estcr intcrno . tiara quc ( :S pucda scr cscindidoi por la ( : ; con\crtasa, sc l, ('S comcrtasa dc dchc cncontrar unicio prcsianxntc a la tie clasica cs tin c<lnlhlcjcl tic trcs n101eculus, ('4b2a3b, cn cl clue ( :31) se encuentra unido co, -alcntemente a ('4b . ( :5 se tine sclccti\',ucnte a la convcrtasa porquc Cl Valor tic sit czlnstantc dc asociacirm a ctando cste sc encuentra unido a ('4b es n1aior quo: si esta unido a otras nio lcculas do [as sul,crficics cclula rcs . La ( :a comcrtasa dc la tie alternarka tanlbicn cs till c()lllplcjo tdmOICCLoIar, C31,I0h3b, cn cl (luc una tic las n1cilcculas do ( :31, sc encuentra unida co1valcntcnlcntc a la otra . La cscisi()n do ('S libcra cl pcquctio tragmento pcptidicoi ('Sa, clue cs ima potcntc ;ulafiloml\ina .

Las n1olcculas hiciroti(bas que sc POlinlcrizan V gcncran p(, ros cn I:ts nlcnlhranas constituscn tut nlccanisnro citoto\ic(( has tantc frccucntc . LOS linfilcit0s dcsti-utcn ,a sus celulas diana incdiatltc la insertion cn sus nlcnlbratlas do una molecule formation do poros ticnonlinatia pcrfiri-ina (v. cap . 91 . l a l,crforina prcscnta hon1ologia cstrnctural con ('9, 1 . los granulos do los cosinofiIos tanlbien conticncn n1olcculas purccidas ilas protcinas citi('inicas dc los cosinofilos l . Dctcrininadas to\inas bactcrianas, coma 1 .1 cstrcptolisina (), tainbicn son molecules formadoras do poros .

La formation del complejo de ataque a la membrane se encuentra sometida a regulation para reducir la (lists reactive))

Una \cz tilrrttado cl ctmil, lcjoi hitlr<ifiib(i ( SI)(,-, so: pucdc inscrtar cn o tras nlcnlbcuias Mulares pro\imas a la superficie soibrc la quc sc hu producido la activation dcl complcnlcnto . En caso dc no cstar sonictido a rcgulatio ll, cste proccs(r tic -lists rcacti, a-~ poidria tcncr consccucncias noci\as pare los tcjidos propi(1s dcl Inicspcti . C5b67 puede ser inactivado en fase liquida F\istcn di,crsas prom nas quc inhil,cn la lists rcactisa mcdiantc su uni()[1 a ('Sh67 cn la fast liyuida, antes (IC yuc sc uma a ],Is n1cn1branas do celulas propias . Dc cntrc cllas, la inas al,undantc cs la prmcina plasnlatica S, dcn(mlinada tambicn,itroncctina . Esta tilrmu cl complejo S('5b6?, quc no cs capaz tic inscrtarsc cn [as bicapas lipidicas . l :a uni('on tic ('O o dc las lipopr(itcinas dc baja dcnsidad i LDI .I a ('Sb67' cn la fast liquida tanlbicn da Illgar .1 till conplcjo incapaz do inscrt :u- sc cn la,, nlcnlhranas .

El complejo de ataque a la membrane se forma mediante el ensamblaje no enzimatico de C5b-9 El rcsto dcl proccso dc kirinaci(m dcl ( .\,\I cs dc naturalcza no enzinlatita . CSI) se tale a ('6, dando lugar a ('5b6, quc a c(nltinuaciiln SC unc a ('7 formando cl compIcj() ('5667 f /i,7- 4.13} . la union a C'- transforma al complejo Iiidrofilo cn till complejo, llidrlituho, coon tcn(icncia a inscrtarsc cn ] .is bicapas lipidicas . ('8 : dcspucs sc suman un(1 a uno llassc unc a cstc conll,lcjo, al quo ta 14 nlonoinlcros dc ('9, tom to yuo yucda tilrmado tin '~cllchutc- litico o molccula tilrnlatiora do h(n-()s, yuc tile ()hscr\ada por prinlcra trz cn microtimigratias clcctromicas por 1 lunlphrcy t . Dournr,isllkin l;hq. -1.1 .;1 . Aunquc al unit-so: ( :8 a ('5[161 una pcqucila proportion do celulas expchnlcnta lists, cl principal inductor dc la misnla cs cl conlponcntc C'9 polinlcrizado . ~, ()bscrccsc quc Cl complejo ('5b6789 SC suck representar coma C5h-9, Ion c(mlplcj()s pre,iOS SC I,ucdcn abrctiar tic la nlisnla turnla, por ejcnlplo, CSI,-8 .1

Las celulas del huesped poseen proteinas de membrane quc las protegen frente a la lists inducida por los CAM

Sc sabc dcsdc Hate ticnlpo quc los critrocito(s apcnas c,pcrin1(. n tan lists cn prcscncia dc comldcnlcitto honio l()g), pct-() si qtic soon lisados facilinentc por cl complemento pr()ccdcntc tic otras cspccics . Esto cs ticbido a la prcsc ncia dc cicrtas protcinas cn la mcnlbrana dc I :ts celulas dcl 11ucsl,cd, yuc las protcgcn trcntc a la lists dirccta inducida por los CAi\i . Sc hull icicntificado> d(w protcinas que inter icncn cn cstc proccso do rcstricci(in por cspccic .

Regulation del circuito de amplification

C3

C3bB

superficie propia

,I

superficie protegida

Fig . 4.12 . Para que se active la via alternativa es necesaria la presencia de superficies protegidas. ((Protegida)) quiere decir que el C3b unido se debe encontrar a salvo de los ataques proteoliticos . El C3b que se ha conseguido unir a una superficie activadora se Lone a continuation al factor B . De esta forma se genera la C3 convertasa de la via alternativa, C3bBb, que inicia el circuito de amplification . Sin embargo, cuando C3b se encuentra unido a superficies propias, se ve favorecida la union del factor H, que promueve la inactivation de C3b por parte del factor I . Por tanto, la evolution de las reacciones de la via alternativa depende del factor que se una a C3b, el B o el H . Ademas de este mecanismo, las membranas de las celulas propias contienen una serie de proteinas que inhiben la activacidn del complemento (v . figs. 4 .7y 4 .141 .

El complemento

La via litica

Fig. 4.13 . 1) C5b se tine a C6 y C7 y da lugar a C5b67, de naturaleza hidrofoba y que contiene tin punto de union que le permite fijarse a las membranas plasmaticas proximas a la zona de reaction . C8 se une a este complejo y penetra en la membrana, seguido de insertion y polimerizacion de una serie de moleculas C9 para generar el complejo de ataque a la membrana (CAM). 2 y 3) Microfotografias electronicas del complejo de ataque a la membrana . La lesion en forma de embudo (3) esta provocada per tin complejo C5b-9 humano incorporado a membranas liposomicas de lecitina . " 234.000 . (Por gentileza del profesor J. Tranum-Jensen y del Dr. S . Bhakdi .)

(:1) ;,9 cs una protcina quc Sc LtnC a Las nactnbranas a Iraacs do pie dc naturaleza glucotitstialipidica . Esti ampliauaacntc distrilutida cn las tnctnbranas cclularcs, SC unc a la', n101cCUIdS L1c ( :){ yuc sc cncticntran tin- mall(lo harts do ccamhlcjcas ('5b-h c inlubc la inscrcicin s cl dcsplcgado dc ( ;9 cn las tncnabrataas ccluLu'cs ( :fill . -1 .1-1) . F.si,tc otra protcina, cl factor lioni6loi dcl inglcs homoklons ristriction fitrrnrl, yuc prcscntl une tcti\- idad jrarccicla a hcro hntbablcnacntc jnlaibc naas dctlil tncntc la inscrci6n dc ('9 . HRF CS una hrotcina dc 6S kdal SC cttcncia dcsconocida, quc tantbicn se Line a las nacnabranas mcdiantc till pit glucotiastialipidico . ()bSCI'VCSC (]tic las cclulas ion nticleo I;CO11I(7 [as dcl sistcma inmunitario dcl hucspcd ) Son tnucho m;is resistentes yue IOS critrocitos trentc a la lisis nacdiada por cl complemento, a a yuc Son cahaccs dc chtninar actiaantctac ILZs ('A41 mcdiantc endocitosis N c\ocitosis dc los fragnaentcrs de nacnabrana quc Ices cuntengan .
till

CD59 inhibe la union de C9 a C5b-8

RECEPTORES DEL COMPLEMENTO

Nluchos dc los ti-agnacinos dc Ias protcinas dcl complemento yue SC gcncrall duratttC cl hrOCCSO Lic acti\aCi(in, SC In C11 a rcccptorcs eshccitjcos situados sobrc la Suhcrtjcic do Its cclulas dcl sistcnra illtnunitario. ~,StC CS till ntcc :utismo importantc dc tncdiaeicin dc Ices ctcctois fisic~lo` ;iccts dcl cLmaplenactno, cntrc Ices yuc sc cncuentran I ;a ingcsticin dc particulas opsonizadas \" la acti\acioll de Its cclulas poNcccioras dc los rcccptorcs .

C5b , C7D59 .C C8

Fig. 4.14. CD59 se tine a las de C8 que se encuentran formando parte de complejos C5b-8 e impide la union de C9 y asi la formation de CAM .

Keceptores dell complemento

Existen cuatro tipos de receptores de fragmentos de C3 unidos covalentemente

Flay trc` hntdtmors dcns .ufts dc ( .~ JCn(tmin .1dots a cctcs mctm)s ()I,s()niz .ultcs) quC Sc ttnCn :r las mCmhranas tic lds CCIULts dianx ( :3h, I(',' I, c C3 dg . Sc conoccn cuatro rCCCI)torcs distintos dc cstos fia('mCtttOS OpSOniz:tntes, yuc sc dcnonutmn rccclrtores LICI ContplCnten[O tie tipos 1 a 4 1CRI, (1t2, CIZ3 \' CR4) ; cn la /iwtnr 4.1 .1 sc mucetran sus ligandos y su distribuci(in Cclular. CR1 desempefia multiples funciones biological como receptor de C3b e )C3b Li primcra rcaccioin tic union til(tlar dcpcndicntC dcl c(mtplcmcnto quC SC OhSCn() fiIC 1111 fcn(')meno yuC m;is tardc sc hi dcn(tnrinatio ,, ,ttihcrcncia Innttmitaria . . . Eli csta rcaccion, los tril,att05(1maV u Otros mia-OhiOS OhSOnizadOS C(m anticucrpos s. complcmcnto sc adhicrcn ;t Lis hlayuctas dc los rocdorcs \ a los eritrocitos tic los ltrimatcs . EI rccept(tr C:uts,uuC do Cstas rcacciotncs do union cs (.RI dcnominado tamhicn rccclito r do adhcrcncia inmunitaria, rcccptor tic C3hi'(Ab o (1135!1 . Sc crcc yuc (:RI dcscml)cha Cuatro funciones fisiologicas : " Actua cotnut receptor (tp,onizantc cn lots neutrofilos, tnomoci tots t nr,ICrOtagots, ntctliandot Lt CnLIOtntsis o la fagocitosis p(w partC do las Cclulas yuc han rccihitio prcian1cntc Icts CStin1tt los adccuados i,fui. -1.161 . " Actira como cofactor dcl lactor I cn la rcacci(in dc cscisi(in dc ( :3h 1mra dal- lugar a i( 3b, t. cn la subsiguicntc escisi(')Ii dc i( ;3 h lmra dal- lugar a ('3c s C3dg . Es pr(tbahlc quo cl factor l I sc ;t m;is imPortantc quo CM como Cofactor cn la rcacCioin tic CSClSioin tic ( :3h a IM -0 Cn CI prOCCSO tic Cscisi(in dc cstc ultimo sc crec yuc (.RI cs cl tmico cofactor czistcntc . Estos funciones tic C,RI pr(ttcgen a las Cclulas Propias trentc al sistcma dell cotmplcmcnto .

" Es Posihlc yuc CI CRI prcscntc cn los eritrocitos o cn Lr5 l,laquCtas iscgim la cspccic) sirsa para Capturar los innTtmocomplejos o las hnCtc6as <tpsuniiacios N- trasladarl(ts ILrSIa las Cclulas tic] sistema fagocitico mononuclcar fijo (f7 . 4.1 T) . " (:R1, juntO con CR2, hucdc actual- canto rcccptor mcciiadotr dc la actitacion dc los linlitcitos 13 . CR2 es un receptor relacionado con la activacibn de los linfocitos B, asi como un receptor dell virus de Epstein-Barr (R? '( 021 . ,c cncucntra cn lo, linlitcitos 11, cn las ccluhts ticndritic .rs titliculalCN \ cn dctcrminadas Cclulas cpitchalcs, sm li ganLIOS Sctn IC3b, C3cig, l I:N(x s . cl virus do Epstcin-Barr fVI:B ) . Pal- CCC yuc Cn las CcI11las 11 CR2 actua como receptor acccsorio tic .tntiCUCrpos Cn la aCticacion tic Ias rcshuCst.i s innnuiit .u- i .ts CspcCiliCas . La union dc iC36 ct C3tig a CR2 rctlucc cl unthral ncccs,triot para yuc I .t ()culmciotn dc lots recclrtotrcs csltccificos tic antigcno tic las Cclulas B, lots .uttiitIcrpos do mcmhrana, dCscncadcnc la acticacicin cclular. Por olio, lots inmtulocomplcjos, quC conticncn antigcno cntrccruzado t- Complemcnto, actn an Las CcIuLtS B cant ntis Clictci:t yuc CI ;utti"ttot aiSLUIO.

Opsonizacion y fagocitosis opsonizacion union fagocitosis

Receptores de los fragmentos dell componente C3 dell complemento receptor ligandos distribution cellular celulas B, neutrofilos, monocitos, macrofagos, eritrocitos, celulas dendriticas foliculares, celulas epiteliales glomerulares celulas B, celulas dendriticas foliculares celulas epiteliales cerv y nasofaringeas

complemento `, bacteria

C3b )C3b C4b

11

celula fagocitica

C~R

Fig. 4.16. Fases de la ingestion de una particula (p . ej ., una bacteria) opsonizada con C3b o C4b.

CR1 (CD35)

C3b > )C3b C4b

CR2 (CD21)

)C3b, C3dg, virus de Epstein-Barr, interferon u )C3b, zimosan, algunas bacterial . fibrinogeno, factor X, ICAM-1 )C3b, fibrinogeno

CR3 (CD18/CD11b)

monocitos, macrofal , neutrofilos, celulas f . celulas dendriticas foliculares

CR4 (p150-95) (CD18+CD11c)

neutrofilos, monocitos, macrofagos tisulares Fig. 4.17. Adherencia inmunitaria. Se observan bacterias tenidas con fluoresceina y opsonizadas con anticuerpos y complemento adheridas a eritrocitos humanos. Esta reaction es debida a la union entre las molecular de C3b, )C3b y C4b que recubren a la bacteria con CR1 . (Par gentileza dell profesor G . D. Ross .)

Fig. 4.15. Receptores de los fragmentos dell componente C3 dell complemento. CR1 se une con mar fuerza a C3b que a )0b . Estos receptores permiten a las celulas ingerir particular o inmunocomplejos recubiertos con ell fragmento adecuado .

El complemento

La prillcipal acticl(Iat1 fisiotpatotlogica tic ( :I(? sc dchc .t stl capacidad para actuar como receptor c1cl \'E13 . La distrihucitin tic tisular in l4ro cats \irus coincide coil la tic (R?, \- se tree \'Eli yuc Cl pellets ell I ;ts cclulas ntc(ii .tntc sit union dirccta ;t (R2, sin ncccsitiati tic (]tic intcncnga Cl sistcllla Lie[ colllplc ntcnto . CR3 y CR4 son miembros de la familia de (bi z-) integrinas leucocitarias, tin conjunto de molecular de adherencia Has intcgrinas Icuo)citarias sons Itctcrotiintcf-O" yuc comticncn utta cadcna I3 i; ( .1) I S to mum a toxins CIlas V una Lie lax tics catICltas ,t yuc se contoicn ('DI la, I Il\ \ I ICi . l.a illtcgrina ICttCOCltarla ( :1)18 I la sr ticno)mina I,F:\-1 idcl in glcs Itntphorrtc,Iitnctitrurrtrnciatcd 171101101 trpc I, anti, eno rclaciontado corn cl fiutcionamicnto lilltitcitario tie tip( I 'E, ( .I)1 S ;' I It, es ( R; v CD181 lc cs CR4 itanthicn dcnunlillado 1)1511 .()5). A sit Lc/ ' cstas tics ntolccttl;u l\crtcncccn a una %upcrtanlilia tic rcccptorcs Lic supcrficic y nu)Icculas tic atlltcrcncia rclaciom ;uIon CStl - llCttira1n1ClttC cntrc Ni, do la quo tanthien son llticnthros IOS rcccptorcs tic fil,rtrncctina \- \- itroncctina f protci na S h, asi comer cl receptor tic fil\rinogono tic lax playuctas . I .a tmi(in tic cstos rcccptorcs a sus ligantlos CS tin proccso clepcntiicntc tic ( "tz' . CR3 (CD18l11b). Sc cncucntra ell Its cclulas do cstirpc micloi tic es un,t in1I)Ort ;utte ntolccula receptora v tic acillercncia . Illter\ icne ell la fagocitosis tic lax particular opsotllizadas con i( :31,, v talltbiell sc comporta Cont(t una ICttllta, pudicntio ullirsc a tti\crsos hidratos tic carboto . Algtunts lc\'adUras, cntrc his quo: sc cncucntra Stucharnrntccs ccrivisiac, asi coil)() ()trots microon-ganisntos conlo Stapl~rhtcncctrs cpidcrmidis c Histoplasma capsulatrtnr, se illicit dircctamcntc a ( ;R . cn ausellcia tic colllplcmcnto . ()rros ligandos tic CR3 soil cl fibrinogclm, cl factor X c 1( A)\1-l . CR4 (1)150.95, CD18/11e). Es cl receptor mcnos conociclo do cstc grupo, pcro tic ha denx)straclo qLlC SC title .1 W.31) Lie 1`61-111a C1chcntiicntc tic ( :a'' . Talltbien SC tine :tl fibrin6gcn0 c intcr\icnc en la atillcsioin tic lox monocitos y ncutr(ifilos al cndo)tclio) . Sc cncucntra en cclulas tie cstirpc lllicloitlc \- lillfuide, L, L's c\presad(> on grandcs catttitlakIcs por Ios macr(ifag(ts risulares, ell dondc puctie quo actilc c(rltto tin intportantc receptor tic lax particular opsonizadas con i(3b .

Otros receptores del complemento se unen a las colectinas

tic ha tlcscuhicrtot una molccula tic 'll kdal quo: sc tine a la coda parccitla al co)Iagcno i\ . fist . 4.41 tic ( :Iq, asi corm() a (trots micnttic hros Lie la tamilia lax cotlcctinas, comic) 01131 . . Este receptor se cncucntra ell lox polinlorfonticlcarcs, monocitos, nlacr-6Etgos, cclulas ti, playuctas v cclulas cntiotclialcs. Not cc sahc coin ccrtcza tu .ilcs soil sus tiulcioncs fisiologicas, pcro l\uctic yuc promuc\a la ingestion tic immmoxomplcjos opsonizatios coil (:ly or tic bacteria', rccuhiCrtas tic Mill .

EFECTOS BIOLOGICOS DEL COMPLEMENTO

Los ctcctos hiologicos dCI conlplclticnto sc pucticn Lilticiir ell lox quo ,()it hcneticiorsos para cl ltucsltcd N' lox titre son no)ci\()s para cl misnlo . Los principalcs ctcctos hcncficio,sos son: " Colahoracioin ell la ticstruccion tic nticroori-~anismos . " Flintinacion clicicmc tic illntunotcontl\Icjots . " Inc uccion Y potcnciacioin de lax rcspticstas tic ;tnticticrpots . El complemento) puctic set- nocico para cl Itttcspccl ell cii\crsas circunstancias : " (uancio) Sc acti\a sistemicantclae ;t grin cscala ; por ejclnplo, ell la sepsis por granttlegati\ ors . " ( :u,utcio SC actixa ticbidor :1 nccronis II\tilal- ; po)r CjCl1lplO, kill rantc till infarto de nliocardio . " ( :uallCio se actica ticbitiO a tuta rcspucsta autoinmuttitaria fi-cntc ;t lox tcjidos tlcl httcsl\ct1 . El complemento promueve la destruccion de microorganismos l.,t potcnciacioin tic la (lcstrucci(tn t1c microxtrganismos sc Ilc\a a call() tic dilercmcs nraneras : " t\lcciantc la gcncr,tci('m do an ;tfl(no\inas, yuc atmtcntan la pcrntcahiliciacl vascular y l,crmiten do csa forma cl acccso a la zona tic intcccion tic otros componcntcs tic la rcspucsta inflatnatoria . \tcdiantc I ;t otpsctnizaci6m tic micr<torg;utisnuts, yuc tact ita sit tagoxitosis. " :\tcdiantc la inscrci()n de cotmplcjos tic ataquc a la menlbralla cn lax nlcnlhrallas ccluhll-cs de lots nlicroorg"allisnlos .

Los receptores de C3a y C5a pertenecen a la superfamilia de la rodopsina, tin conjunto de receptores acoplados con proteinas G

I 1 .t\ ti"s I\cyucnos fragnlcntots I,roccdcntcs tic pr()toin ;ts dcl 'Wnplclltento, (:3a V (15a, yuc puccicrt desencacicrmr la Lies tic granulacio)n lox mastocitos, y yuc SC CIcnonlillan anatil(ttic toxinas. Los ctcctos lax anafilotoxinas ( : .a y (: ;a sc cichcll a sir union a Lictcrntinados rcccptorcs cspeciticos . Los rcccptorcs tic (:5a se cncucntran cn todas lax cclulas do cstirpc title Ioidc {ncutrotilos, cosimiflos, bas()flos, masto)citos, nutno)citos y ntacr(Aagos ;) . Los rcccptorcs tic ('3;t \ (;5 ;t pcrtcncccn a la supertamilia tic la roxiopsilla, till grupo do rcccptorcs acoplaclos con protcinas (i \ yuc se caractcrizan por una estructura en tin- nta tie sirImitina con sicte ciontiniots transmcmhrttta Lie maturaleza hi til-Oti)ba . presenttn un ;t cstructura honuSloga a la tic di\-ersors rcccptorcs mccliadorcs do scitalcs quimiotacticas, optic Ios quo: sc cncucntra Cl receptor de f=41ct-l,cu-l'hc iquc se tine a peptidos do origon hactcrianol \ lots rcccptorcs do Ins quimiotcinas, II, S \ ANTES . Eras sit unio'm al receptor, (: ;a es ingcricio \ rettucido a fragnlcntos peptitiico% irtacti\Yts ; cite es tilt mec,nliNlno Importantc tic cn la rc-ulaci61l c limitaci(in do la activiclad ('5a .

Las anafilotoxinas son potentes inductores de la inflamacion I .a acti\acion dcl sistcnta Lie] complement() ti,t Ittgar a la fitrnrtciot tic lax anafilotoxinas CSa ~- C."a . Sit misioll fisiol(')"ica cs atracr a lax cclulas infl ;unttorias Itacia Ins zontas tic inf:mlati6m, asi coxno acti\ar suti ntccanisntos ctcctorcs. La administracioin sistcntica Lic (- 5a o) una actiucion irttra uscular imcnsa dcl complcmcnto, coma la quo SC proxiucc ell I(ts casos tic sepsis poor hactcrias (grantncgatitas, puCCIC pro\ -(tear corlapso cardicnascular \ hroncocslxisnto) ; csta situaci(n hrcscnta till cicrto parccido con - la anafilaxis, y tic alli cl tcrntino attatilotot\ill;t . Efectos de C5a. (' ;,t cs till potetttc acti\ ador de toclos lots tipos tic cclulas tic cstirpc micloicic ((ia . 4.18) . Fierce ctcctos quinti(>cinctic()s \ quintio)t;icticos Soho .ON nctltroifil()s . En sit prcscncia, cstos tiltinlos so: desgranul;tit \ rc action rl ostallido rcspirato)l-i(), to yuc Ilc\a a la protiucci(Sll do ratiicalcs libres do oxigcno. Tallthicn NC acti\ a Cl ntctahohSMO LICI aciCIO dl -dLjUiC1(')lliCO Lie Sit', ntenthr;utis, colt ht c(rllsiguicnte prorcluccioin tie prostagl ;utdilms \ cicos;moicics . La c\prcsio)n tie nt(tlcculas tic adhcrencia ell la superficic cclular auntcnta, to quo facilita la adltcsi(in al cnd(ttelio \-ascular r/itt. 4.10)1. Lots monocitos \ I(ts macr(ifagos rcsponticn tic tbrnta parccida, \- aticntas scerctan II--I c I1 .-6. Los ha-

Etectos biolbg 1cos dal complemento

s6filos s, los mastocitos sc cicsgranulan s. libcran histamine y otrots mccliadorcs t asoactims . ( :omet ctu1secuoncia dc csta actitaci6n celular, ec produccn ctcCtcts indirectos sabre los sasos senguincos, con aumento tic le pcrnlcabilidad capital-, asi como sohrc la musculature lira, quc sc ccartr ;lc . ( : ;a tanlhicn I,uctic actual- tic forma sincrgice cent carets mediadorcs tic la intlemacion, pctr cjcmplo, la prctduccioin do It,- I pctr parts do los nutnocitos cs cstimulada do forma sincrgicu por Ins asociacioncs tic (:5a con l I-\a o coil cnciotoxina .

nlcntot do las cclulas fagociticas . Dc csta forma sc promucw la climinaci61l v cicstrucci6n tic las bactcrias v dc los inmunttcttmplejos . Adcma, do inducir la t3gocitosis, la unicin a los rcccptorcs del complemento do los ncutrctflos, lots nlonocitos y lo, nlacr6titgos tamhicn cstimula la csocitosis do granulos quc conticncn cnzinlas protcoliticas, asi como la producci6n tic radicalcs lihrcs tras la inducciotn del cstalliclo rcspiratorio 3 iq . -1 .191 .

Sentivida de C5a . ( 5a persists durente 111u1 poeot tienlpot cn la

El deficit dal complemento esta relacionado con un aumento en el mimero de infecciones

Cs

orculacion, cotnut cabs cspcrar dada su potentc actividad prointl .imatoria. La cnzinra circulantc carbozipcpticiasa N cscinde la at ;-inina del Csu- Cnlo carbosilicot tic ( :5a, dandct lugar a dcs- .ArgC ;a, sine actilidad hiol0g,iCa CS macho 111CI10S aCUSad .1 title 1 .1 dc ( : ;,1, aunyue siguc Iursc\cndo importentcs propicclndcs clui nliotacticas . l.a union al rccrptctr tic (:5 .i ce seguide tic una r:ipida ingestion (let ligando, sicndct stmictido cstc inmcdiatanacnte a un proccso do prcttcolisis intracclular cn cl quc sc gcncran tragn1cnttts inactilos,

Efectos de C3a . ('3a

Cs mUC11tt nlcnos actico quc ( :5 .1, \ su rcccptor cs dmintot et do (15a . Induce una ligcra agrcgacion tic los neutroiti]Os 1. pronlucs c cl cstalliclo rcspiratorio . At contrario quc (' ;a, apCtrls prcscnta I,rOhicdatlcs tluinlicttacticas. ()hscr,tesc quc las anafilotosinas no se produccn S6lo cuant1o SC lCtisa CI complcn1entct, sing tambicn cuando SC acti\an otros sistcmas cnzinlatico~s clue Cscinden dil-CCtamCntc ( :3, ( :-I v C5 . AIgunas dc cstas cnzimas son la plasmina, la calicreina 1, las

cnzinlns lisosonttnlcs tisularcs c Icucocitarias i cshccialnicntc la clastasa do los neutrofilos 1, asi como protcasas bactcrienas conxt la gingipaina l ~ producitia por Y. sTintTivalis y rclaciotnade coil LIS cntcrnlctfatics pcriodontalcs) .

Las fitncictncs fsictlcigicas Conlo opsonina c b:lctcriolisina del Complcmcnto SC 11aCCn - idcntcs Cu :uldo so : anelizen dots deficit hcrctliterios humanos . funtot cl dclicit do lots cotmpotncntcs tic la cia clasice x (' ; comma cl tic le familia dc rcccptorcs (;R3/(R-I,% I .EA 1 proxiuccn on csl,cctrtt tic inteccitlncs por bacterms pioacnicas parecidtt. 1-:I 11Cdlo tic title CI dcfieit tic la ttpsonina y cl dcfieit del receptor acarrccn Las nlisnlas consccucncias CICmuestr:1 claranlcnte quc CI romplen1entet dcsenlhci1e un IMpcl importentc cn la dcstruccioin dc cstas bactorias mcdiantc fagoci tosis v dcstrnCCl6n intracclular . Por cl contrario, los dcfieit sic Icts contiponcntcs (let ( AM stilo sudcn cstar rclacionados con un ;1 nla\ tn- suseeptibilichd f-cnte a las intcccicnles coil Nrisscrrii: mcuiniritidis. Esto sugicrc clue la dcfcnsa del hucsped treats a cstas hacterias, clue sc caractcrizan poor su capacidad pare sohrcs - it- ir cn cl mcdio intracclular, sc base cn su lisis cn cl plasma mcdiada por cl corlplcmcnto . Parsec clue cl complemento no es ten inlportante cn la dctcnsa treats a ]as intccciones \ iricas, en la clue las cclulas T ticnen un Impel cicstacado . El deficit dcl complemento no cst.i rclacio nado con una nlalor susccptibilidad a las infcccioncs siricas .

El complejo de ataque a la membrane interviene tambien en las respuestas inflamatorias

siSLl sC

Una vez fijados Cab y Cob, actuan como opsoninas facilitando la fagocitosis .

. La union :o\a1cntc tic ('3h t ( 41 , a 1,1s bactcrias t a Ios innutnoconlplcios gCner,1 ligandos pare los rcccptorcs del ctmlplc-

El Inulttt tic tredicictnal sabre cl CAM cs quc trat,l tit' sistema pera dcstruir Ins cclulas mediantc la tormacic'tr1 tie canales y la consiguicntc lisis . Sin embargo, cn Io% 61timos anon sc Ila ohscrsado quc Lts cclulas coil nticlco, conic, por cicnlplo, las del sistCnM innlunitario dal huespcd, son rclatisanlcntc rcsistcntcs a la
Lill

Efectos biologicos de C5a y dcs-Arg-C5a

1. activacion de los neutrofilos 2. adhesion de los neutrofilos

3. migracion y quimiotaxis de los neutrofilos

contraccion de la musculature lisa y aumento de la permeabilidad vascular

i .

.t

.1

S. desgranulaci, de los mastocit-.

Fig. 4.18. C5a provoca: 1) la activacion de los neutrofilos, 2) el aumento de la expresi6n de molecules de adherencia, 3) la migracion de los neutrofilos y la quimiotaxis, 4) la activacion de los monocitos y 5) la desgranulaci6n de los mastocitos, clue a su vez induce la contracci6n de la musculature lisa y el aumento de la permeabilidad vascular.

El complemento

Funciones de C3 al eliminar y destruir bacterias 1 . union a CR1 de los eritrocitos y transporte hasta el sistema mononuclear fagocitico 2 . formation de complejos de ataque a la membrana y lisis

ganismo SCa un pattSgcnO sup()iae clue cs capaz tic burlar, al menus en harts. Icn ntec ;trisnt((s de Lietcnsa ticl huCSI)CLI . Algunas bacterias inducen el deposito de Cab y de los CAM en lugares en los clue no pueden ejercer sus efectos Dctcrmiittclas bacterias gramncgatjVas, yuc posccn grardcs cubicrtas lipoopohsacandicas cntrclazacl.1s mcciiante enlaces (), actiVan cl complemento, pcro tic tai forma clue la union coValente do C3 V la irscrcionl do Its CAJ1 se produce e11 NL)aanCS alcjad.1s tic la membrana ccl alar de la bacteria, pctr lo yuc la opsontizacicin V la lisiS no son posiblcs . 1:.11 cst()s casctti pucdc set- util la res puesta jnnnu)itaria adaPtatiVa nted1aCia [lot- anticucrl)oS bactericid.1s, Va yuc de est,t tl)trla Lt actiVaci(in tie] c(nrplentent(t Sc dirigc Iracia cstructuras bactchanas en las yuc si es p(tsihlc proV(tcar 1 .1 opsonizacion \ la lisis. Otras bacterias poseen cubiertas celulares resistentes a la opsonizacidn l .\istc una scric tic nticroorg:uaistno . title se cnh-cntan al coil) I,lemcntot nrCCiiantc 11toleculas tic stlpetficic yuc in)l)jdcn 1 .1 acti tic Vacion pot la Via alicrnativa v la ampliticaciitn dcl dep(5sito ('3. I'or cjcntplo, dctcrminadas ccl,as sic lt ;aclerldS grampositiVas sc ditcrcrtcian tic sus congcncrcs no pat(igcno(s poor la presencia sic Lima capsula rica en .icidos si .ihccs . Etta% capsulas prontxlctrn ha uni(in do ('3b al tactor H, cn lugar tie al factor 11, ht clue ConduCC al Catal'olisnao tie (.' ;l) .

4. fagocitosis e induction del estallido respiratorio

3. union a los receptores del complemento de las celulas fagociticas

Fig . 4 .19 . El C3b unioo a las bacterias en forma Lie C3b o iC3b : 1) se Line a CR1 de los eritrocitos, clue transportan a las bacterias

a to largo del torrente circulatorio, 2) acttia como foco para el deposito de complejos liticos de ataque a la membrana sobre la superficie de la celula bacteriana, 3) se one a los receptores del complemento de las celulas fagociticas clue, a su vez, 4) activan a ]as celulas fagociticas induciendo la fagocitosis, el estallido respiratorio y la destruction de las bacterias.

lisis mccliatia pot hos (', :\ :\1 ; estot cs dchidol principalmentc a la prcwnci,a tic molcculas rcgulacioras Como (:1)59, pCroo t:urbier a clue Lts celulas Soil capaccs tic cnclocitar V esocitar loos tiagmentos tic ntcmhran ;a title conticncn CAN1 . :dun asi, las pcrturhacioncs inducidas en la ntentbrattt port la prCscncia tic CantidadCS suhlCt.alcs do ( : :\\1 pucdcn cstinrttlar la sccrcci(')rl v cl ntctabolisnu) del acido~ aracluid(inico, actjVar cl mctabolismo o.sidatntt (t inciucir la lihcraci(in tic granulos tt citocinas poor parts do las cclttl :u dcl sistcnta innntnitario ids actlcrdoo tom las pr(tpiCC1aClcs irn.a t.tS tic Cada tttLa i . Estas rcshuCstas puCCiCn tcncr importancia ell I :t anaplifiCJCion tic la resltuCSta intlAnlAtaria cn I :ts /elms en yuc sc product la actiVaciur dcl Complctncntct.

Algunos microorganismos expresan moleculas clue inhiben la activation del complemento ()tea cstrategia utilizada ptor loos ntiCroobi(os para but-l,11- la, rCSlxtes Las del complcnacnto cs la csptCSi('on tic motlcullas rcL,1ulad(nas in Itihidtn -dS . parecicias a ]as title cshrCsan sits lattcspedes. Sc c(tnocen tiescic hate ticntpo molectllas tie nticrcxtrgarisrttos coil capacidad . receptora tic Fc, cant(), pttr cjenaplo, 1 .1 protcira .A estaflococica t ItallazgO rccicnte es Cl recept(n tic Fc tic tnuchos Itcrpc%Virus . Vii yuc cl Virus tic] herpcs simple tatrtbicn csprCs;a un,a nactlccula reccptora del complcmcnt(), la glucopromna C. Cnndida a1Liraus ( - l(3; esta tiltinra tambicr csprcsa nt0ICCUlas p;u-CCidas .1 ('R.? prescnta hamalogia antiL_'cniCd coil Cl (:113 I)uma11a . 'lctCias cstas rtolcculas puc(icn protcgct a Ion tnicro oorganisnus trentc a las cctnSCcucncias habituates tic 1 .1 lijacio~n tic lots anticucrpos \ del cent) plcmcnto . I'or ejcrapla, impiden title los rcccptorcs opsonizantes Lie Las celulas lagoocitiCas del ItucspCCi rcc(t11ozcut ],IS IgG () ('3 . ()tea estrategia consists cn c\presar nxtlcculas rrgulaoi()ras title inltiban la actiucioin del complctncnto) . pot cjctnplo, los tripanoso . ma', czprcsan 1111 .1 n10I000Ia parccida al DA[ t otra parccida a . I(ts esyuistosomas comsi~gucn cl mismo ohje('1)59 micntras clue tit(( mt fi,nti Lt c.)htacitm del DAF del httcsped .

Determinados microorganismos utilizan el sistema del complemento para potenciar sus mecanismos patogeneticos

Los microorganismos patogenos resisten los ataques mediados pot el complemento

I , .as intcracci(wC , late" rl sisten)a dcl ContplCntcnto V I()s 1111'roo (a'g .anisnt(n NC huCdCn Cornsidcrar Cl rcsulttdo tic un :t inCCsantc hatalla CVolutica . Al it cVolucionatado cl sistclna del complcmcntitle to, prohablcmcntc impulsado pctr la prcsi(mt ,clcctiVa cici- ccli Lts crtcrn)CdadCS inlccciosas, los nticroxtrg :utisntos hall ido dcsarro)llandoo mccanisntots tic protcccion ti- cntc al misnto, V cr al gunos trios incluso sc hail aproccchado tic cl, intcgrandttlo cn sits propios mecanismos pato~"ctrcticoos . Dc hcclto, cl title 1111 or-

I _t hcttctraci(in en las celulas dcl Ituesheti Cs Lilt has( r kWill 1,11i C11 1 .1 patoogcncsis tic las infccciomcs \frfcas . Sc Coonoocett uriots Virus yuc utilizan nu)Icculas rclacionacias con cl sistcnw dcl complcmcntto tmidas a mcmbranas como receptores clue Its pcrmitcn acccdcr a las cclulas ; cntre cllos sc ettcuentran cl \irus tic El,stcin-B .1rr, yuc title al cootacto(r pro sc Line a ( R2 : cl tirus tic] sarampion, yuc se . dcterminadts virus ECHO, membrana ('1)46 t tcico de I NUT, Y, clue se uncn al tactor acclcradorn- Lie Lt dcgradaci(in i D.-U, ('1)55 1 . ()tros virus acccdcr inclirccianuntc a las celulas mcdiantc los anticucrpos ~ cl C,)b yuc lo,s rcctlhrc . Hare cll()s sc encuentran los flaVI\irus I ittcluidot Cl Virus del dCrgLIC}, Clue soil capturaclos p(ar I(os rcteputrcs tic Fc tic Ion nt :acr(')tagos cuandot sc cncucntran rccuhicrtcts CIc :uaticuctp()s, ) Cl Virus LACI \ilo occitlcntal tsars) 1aticjrusy, clue se une a (.1(.i a traVCS clcl ('3 dcpositadot NOhrc Las l,articulaS tiricaS .

Efectos biologicos del complemento

El complemento desempena tin papel accesorio importante en la induction de las respuestas inmunitarias

EI sistcm .1 )ICI conTtplcntcnto coolabora Cn la prescntacio'tn dc I(n antigcnos a ] .is cclulas prcscntadoras do :uttigeno .- :a las cclulas R ~;jr, 4201 . Por cjcntplo, cl transports dc los inmunocomplejos hasta los controls twrminalcs de Ios ganglios lintatiCtts, Lilt proccso csCncial para la fortttatl(Itt dC las tclttLIS 11 de nICnt(n- ia, Csta mcdiado por cl contplcmcnto . Las cclulas B y las ('PA posecn divCrsos rcccptorcs del cull) plcntcnto : " I.as cclulas I~ posccn ('RI, yuc sc Line ;) (;3h v a i(',36, v ('I(2, " Los mcn)ocit(~s t . los ntacrofagos posccn (Al " Las eclttlaS dCttdritIt1S toliCUlarcs son ]as )micas cclulas Cn Ias quc sc halt CnCOntrado ION tres rcccptorcs i ( Iil, (:1t2 v ( :IZ3 i . Lots sores humanos coil deficit I)Crc(iitario tic (;3 silo nntcstran ligcras anontalias dc la sintesis dc anticucrpos . Sin cnthargo, cl deficit tic ('2, ('.3 () (:4 en los cohas as atccta notablctncntc a [as respuestas dc amicucrpos printanas) SCCtmdarias fentc a doses innttu)izantcs hajas dc antigcnos dcpcndicntcs dc cclulas T. Estc I)Ccho sugicrc quc cl comtplcntcnto (Icscntpciia tin l) :)PCI acccso)rio cn la indUcci(in dc respuestas dc anticucrpos adecuadas, aunquc no cs abso)lutatttcntc cscncial .

clastasa ), los radicalcs hhrcs) pucdcn Proxcuar shock Pulntonar dchido a sus cti:ctos sohrc cstos vasos . Este sindror ic sc car;tctcriza por la Prcscncia do cdCnta pulntonar intcrsticial debido .) Ic sioncs dc Ios PCqucftos xasos sanguincos, tin cxudado dc ncutr(itilos en los alxcolos c ltipoxemia arterial . I .a circulation cxtracorpo rca dc la sangrc a traxcs dc ntaquinas cardiopuln1cn)arcs o A travcs dc mcml,ranas dc dialisis dc cu protiu)o puCde provocar la actiraci()n del complenicnto acotttpanada do una IcuCCtpenia transitoria, gtic sc tree clue cs debida a la agrcgadcin do los ncutr()lilos Cn lots pulmoncs . La necrosis tisular activa el complemento Lt,s ICSI()IICS tistilaris pr(rcOCA1as I,or la nCCronis isqucntica tatnbutt I'HCdcn utic .t r CI C(onthICtr1Cnto C in(juCir cl dept~sito tic grancics Cantidadcs dc ( :ANI . En modclos dc intarto dc miocardio se ha Cot1SCIttido (ICtnostrar cl papcl fisiopatologjco dc la actiracicin del complemento tras la isqucntia tisular, to quc Cuando sc climina plc) iatncntc cl complemento cl tantanut dc la ICCi('m tisular Cs incn()r. Rccicntcntctttc sc I)a dctnotstradot quc tras la infusion dc (:R I soluble reconillinante se obscrxa Cl ntisnto CtcCto .

El complemento desempena tin papel destacado en el procesamiento de los inmunocomplejos

L .n la dccada dc 1940, I Icidclhcrgcr (oI" scr(t) quc cl c(uttplcmcnto inhibia la t<n- rnaci(in dc rocks cn los prccipitados (iC inmunocomplcjos . Id tamano) tic las rcdes dc inmunocontplcjos sc tc atcctado por ntuchas (ariablcs, cnu-c las quc sc cncucntran : " I a conccntrtcion dc los rCactivos (antiatcrpo y antigcnol . " I .a afinidad tlcl anticttc rpo por su antigeno . " I .a ) alcucia del anticucrpo y del antigeno, s icndosc far orccida la turntaciori dc grantlcs rcdcs ell Icn casos cn quc ]as \- alcncias son altar. La sea clasita (1cl complemento inhibc la tormacion do precipitados dc intnun(ocottnplcjos Cn cl plasma . Dc la misnm forma, la acti(aci(in dc la via altcrnatjt- a hucdc disobcr los innttutoconr I,Icjos que \a hall prccipitado, incluso aunquc sc hacan dcpctsitado sohrc los tcjidos . Para Cllo cs nccesaria la incoi)oracion cot talsnte do ( : .; a las rcdcs dc los inntunocontplcjos . La utti it dc (:3 dcstruv'c cstts redcs al rcducir la probahilidad dc quc CI anticucrpo sc una a Icts cpitopos del antigeno, htnit:utd(t asi la posi. bili(1 ;td dc titrmar gr :utdCS rcdCS is\ . Cal, . 25)

Funciones de C3 en el procesamiento de inmunocomplejos

1.

reduction del tamano de la red

2. union al receptor CR1 de los eritrocitos y transporte hasta el sistema mononuclear fagocitico

En ccaidicioncs normalcs, la actit aciom del ccnttplctncnto por parts do los innrtmocomplcjos es bcncficiosa . LOS innttutocontt plejos tutidos a (; ; sell clitnittados cficazntcntc dc lets tejidots \ de la circulaci(in por los rnonocitos otros tagocitos ffill . 120) . Sin cnthargo, cn dctcrminadas circunstancias sc sigucn prodtICicndo orandcs cAntidadCS tlc ill n)unocontp1Cjos . En cstos casos, la acti \.)chin dcl com)plcntcntot pucdc rcsultar nociva, c(uno ocurrc sn la CIId(oCar(litIS 1%)ctCri : I la Suuda V cn CI I,L:S .

El complemento es importante en la patogenesis de determinadas enfermedades

La activation sistemica del complemento genera grandes cantidades de anafilotoxinas En algunas cirCUnstanCias, las comsccucncias de la actixacioin err rite (ld CoMPICtttCntot son nOCi\-as en luear cic bC11CtICiOSaS ~Ati . 4. '1 i . Id cstado do shock gtte pucdcn pros Ocar las bactcrictnias por bactcrias gramme-atjcas Sc dc bc cn parts a la actn acion del con)plcntcnto por parts dc la cndotoxina . Sc prodUCCn gran. title in(Iutc la dCtit aCi(Sn \- tissdcs CantidatICS tie ('3a t (`Ja, to los ncutrofilos, lets basolil(n \' Icts ntastocitos. La grtnttlacioSn dc agrcgacioin intrasaxular dc Ios ncutr6filos protoca la cct.tgula chin t. el dcliositor dc embolus en la ntiCrocjrCUlacio'n) Pulnt0n,u-. Los productos dc his ncutrcifilos centre Icn quc SC encucrttran la

4. localzation por pane de las cclulas B, las cclulas dendriticas foliculares y las CPA

3. ingestion y degradacion del antigeno por parte de las cclulas mononucleares fijas

Fig. 4.20. C3 se Line a los inmunocomplejos y 1) reduce el tamano de la red del complejo ; 2) promueve la union de los inmunocomplejos circulantes al receptor CR1 de los eritrocitos, quc transportan dichos inmunocomplejos a to largo del sistema circulatorio ; 3) promueve la captura de los inmunocomplejos por parte de las cclulas mononucleares fagociticas fijas, to que tiene como consecuencia la degradacion del antigeno, y 4) promueve la localization del Ag lei forma de inmunocomplejo) por parte de los linfocitos B y de las cclulas presentadoras de Ag, entre las que se encuentran las cclulas dendriticas foliculares especializadas de los ganglios linfaticos.

El complemento

La actitacitm del crtmplcrrcnnt cs una causa importantc dc Icell sirmes tisulares [as cnferntetladcs ntciliadas por innttrnr)crnn plcjos . Estos complejos sc I)ucdcn torntar en Iris tejidos, por cjcntplo ell los ghnttcrulos dc pacicntcs con autoanticucrpos frcntc a ell los quc sc tbrman illlas mentbramas hasalcs glontcrtrlarcs, III unrrcrtntplcjrts en Ios glontcrulrts ; ell la ntiastcnia grace Irrs ell inmunocomplejos sc titrinan I :ts placas motoras tcrminalcs . CO)mr> Q)111000Cnlla do l a prcscnua tic aut<rutticuerpOs trcntc a Iris rcccptores dc acctilcolum c. cap . 2-t I . Por otra parte, Iris inntu-

La activacion del complemento puede provocar lesiones tisulares tras la formacidn de inmunocomplejos in vivo

El complemento en la patogenesis de enfermedades

1 . shock pulmonar

y colapso vascular

activacion sistemica del complemento

nocomplcjos circul :uttcs Itnrcdcn gtredar atrapados ell las parcdcs LIc lo, \:sots s.utguineos f \ . cap. 2S'i . I'or cjcrrtplo, en la crtdocarditis bactchana la cahula cardiaca intectada sc com-icrtc en una tircntc dc innnmrxomplejos quc sc dcpositan en los rinones c en otros Icchos micrrrcaseularcs . En cstas cntermedades, cl cr mplcntcntr~ induce la inflantacirm mediante drrs mecanismos principalcs: Lots Ictrcrnitos acticados son atraidos hacia las zonas dc dcp<r %Ito do ill rrtunocrnTnplcjos hr,r las anafilcatosinas producidas en CstOS lugarcs, V SC trttcrt a ION inntumOcrrtttplejrt, a traces do ('3b \ (4b. Esic cs cl mccanisto dc ],is Icsioncs quc aparcccn ell cl sindrome ell mrnlclos c\pcrintcntalcs dc dc Goodpasturc, Set- inltibida por cl ago csta cnferntcdad, la inflamacir'm I,uCic tamicnto del contplcntcnto o do los ncutrcitilos . Los complejos dc ataquc a la mcnthrarm (CAM 'I prococan Icsioncs ell ]as rnjsmas, lo clue cstinurla la sintcsis dc prrtstaglandinas a partir del dcido araquidtinicrt . Este cs cl mecanismrt dc [as Icsirmcs quc aparcccn en la nctritis mcnthranrtsa, quc puccIC set- inducida ccpcrintcntalntcntc me diantc anticucrlxts dirigidos crnttra uttigcnos suttcpitchalcs . La inflatttacicin no se ce atcctada poor cl agotamicnto de los neutrciflrrs, pear esta totalntente inhibida en animales con deficit dc (' ; . i Sc crcc clue la mcntbrana basal artita COn10 una barrcm ti siolr'lgica clue impide la csudaci(in dc ION ncutr6tilos, de tal lorn"t quc la intcnsa I)rotcinuria sc deb\ al deprisito dc complejos dc .tt.tquc a la mctnbrana . ;l

prostaglandinas, leucotrienos

3. activacion de los neutrofilos y los monocitos

Fig . 4 .21 . El complemento puede intervenir en la patogenesis de

enfermedades mediante: 1) la producci6n sistemica de anafilotoxinas, por ejemplo, tras un episodio de sepsis por gramnegativos; 2) la inserci6n de complejos de ataque a la membrana en las celulas del huesped, clue provoca la activacion celular y la estimulacibn del metabolismo del acido araquid6nico de las membranas, y 3) la fijaci6n de C3 a inmunocomplejos localizados en los tejidos, clue origina la acumulaci6n y la activacion de los leucocitos tisulares y circulantes .

4C6mo se impide clue el sistema del complemento dane a los tejidos del huesped? ZCemo se inicia la activacion del complemento? Si un nino padece un defecto congenito de factor H, Zque efectos se producirian en la accion del complemento? ZQue enfermedades podria sufrir ese nino?

~Cuales son los mecanismos efectores del complemento? ZQue es el enlace tioester interno de C3 y C4 y clue importancia tiene para el sistema del complemento? ~Cuales son los mecanismos clue hacen clue el complemento se active sobre las superficies extranas? ~Que interacciones se establecen entre el sistema del complemento y los microorganismos?

Efectos biologicos del complements

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Mig racion celular e inflamacion

La inflamacion es una respuesta en la que se produce tin desplazamiento de leucocitos y moleculas plasmaticas hacia regiones de infeccion o de lesion tisular . Sus principales efectos son el aumento del flujo sanguineo hacia la region, el aumento de la permeabilidad vascular frente a las moleculas sericas de gran tamano y la migracion de leucocitos a traves del endotelio vascular local en direccion a la zona inflamada. La migracion celular es tin fenomeno complejo, que depende de las poblaciones celulares implicadas, de su estado de activacion y de las interacciones que establecen dachas celulas con el endotelio de los diferentes lechos vasculares del organismo. El estado de activacion de las celulas determina en parte su patron de migracion : los linfocitos en reposo o virgenes tienden a migrar a traves de las venulas de endotelio alto hacia los tejidos linfaticos, mientras que los linfocitos activados tienden a migrar hacia los focos inflamatorios. / Las moleculas de adherencia que controlan la migracion de los leucocitos pertenecen a familias relacionadas estructuralmente : las moleculas de adherencia celular (MAC) de la superfamilia de genes de las inmunoglobulinas, las selectinas y sus correspondientes ligandos glucfdicos, y las integrinas . Las moleculas endoteliales de adherencia son inducidas por citocinas. La expresion de moleculas de adherencia en los leucocitos depende de la poblacion celular implicada y del grado de diferenciacion de la celula . / Las moleculas quimiotecticas son importantes tanto para dirigir la migracion celular como para inducir el inicio de la migracion de los leucocitos adheridos a las superficies endoteliales . / Los mediadores inflamatorios que liberan los mastocitos, las plaquetas y los leucocitos en el curso de las respuestas inmunitarias o tras una lesion tisular regulan la permeabilidad vascular y el aporte sanguineo, en colaboracion con moleculas procedentes de los sistemas enzimaticos plasmaticos .

En corndici()nes n0rmales, Ic)s ICncoCitOS sc dcsl)lazan a Ir) largo) do t(uios los tcjid()s cicl organisms) ~; las celulas yuc conticnc la sangrc son las quc sc cstan desplazando cn tin n)onacnto ciado desdc tin tejido a otro), . Cada p()hlacion celular time su l)t()pio) p,ttr()n do dos)lazamietm) . Fsc patn)n tambicn c1cl)cnde dcl grads) dc ditcrcnciacio)n acti)-acion dc [as celula, : " LO, fagocitos, CS dccir. lots ncutro')filos \- h)s mon()cit()s, aban

" Aumento del riego sanguineo cn la zona atcctada, coil cl c()nsig,uicllto :urn)Cllto dcl :al)()rte de ICUC()Cltos v na0Iectrlas sericas. " Aumento de la permeabilidad capilar, yuc pcrtnitc la csu dacioin do las I)nxcinas sericas l)rccisa> p:u- a cl c()artr()I dc la in Iccci( ;n ianticucrIN)s, conaplcntent(), cinin()gen()s, etc . i .

cioras de :uuit;on(rs ('PA' . . Los linfocitos virgenes migran descic cl titno) \ la nacciula (')sea hacia Ion tcjidon lintoidcs scctrnciario)s l na )ci acticados lu)r su unigono corrcspottadicntc Ias celulas I sc ticndcn ) cicsplazar hacia zrnaas CIc intlanlaci()n (fill . i.l r, nuelltras yuc Lts celulas B Ias celulas I do ntctn()ria sc acunaatlan cn otros tejidos linli)idcs . Las celulas dendriticas, c()nu), por cjenapl(), las celulas dc Lan,crhans dc la picl, procccicn origutaltncntc dc cclulas ill acirc dc la mcdula osca que sc dcuplazan host a di)cr%()s (ir anos Una acz title cal)nu- an till antigen(), migran .a Ion -anglu)s lilttatic()s locales para prcscntirsch) a Lu cclulas'F (*1)4 - . Uno dc los ()bjctic()s do cstas naigracioncs cs pro)p()rcionar a los linlucitos especific(n cic till antigen() detcrrninado la oportunidacl dc cno)ntrark). EI clrcnajc lintatico) la naigraclo n ICUCOCltarla garan titan cl transportc laastt h)s ganglit)s lintaticos cic Ios lillfocit()s, [as ( :PA )' los antigenos pr()ccdentcs cic tejidos iniectaclos () inflamados, micntras title los antigcno)s yuc circulan cn la sangre soil capturados por cl bat(). Fl illicit) dc la expansion clonal dc los linfocitox cspccificos dc antigeno sc produce cn lots tejidos linli)idcs searnclarios, antes dc quo Ias celulas scan liberadas a la circuhaci(Sn a tras cs de I()s casos lintatic)s efercntes ii_lilt. S.?} . A partir dcl naonaento en que se
I,

dnn.u) la nae(Iula (')sea a naigran la .xi:a I()s tejidos l)critcric()s, Cs pecialnacntc hacia z()1aas intectadas () intlanaad;as . 1)ur :u)te su ciclo cit.tl, 1()s ncutr()til0s 110;111 a CAN) tin unit() (icsl)laz .tmicnto), micntras que I()s nu)nocito)s se tr ;uasti)rman cn macro Lagos y puccicn \()I\cr a la ciriulacion y dirigirsr a I()s tejidos linfi)i(Ics secundari()s, en d(nadc acnian c(atao celulas presrnta-

" Aumento de la rnigtaci6n de leucocitos hacia Ion tejidos atcc-

ettcucntran en cl torrcntc circl,dato rio, la migracion dc Ias celulas dc pendo (Ic la czprcsi()n dc rno)Icculas do acilacrcncia cn cl end()tcho) : Cn Ias rcgioncs infamadas of endotelio) osl)rcsa moleculas dc adlacrcncia capaces dc scr reconocidas po)r loll recepto)rcs dc los linfocitos acti)ados o por los ttgocitos, yuc mm capaccs cic atracr otras celulas Ilacia cstas toms . Las rcaccioncs tisularcs (Iuc sc produccn como respucsta a Ias Icsioncs tisularcs o a Ias inteccioncs sc dcnonainan rcacciones inflanaatorias . Sc caractcrizan por:

Fig. 5.1 . Interacciones de los linfocitos con el endotelio. En la microfotografia electronica de barrido (1) se muestra una celula T activada por su antigeno uniendose in vitro al endotelio de la retina . La celula migratoria se tine al endotelio y a continuacion emite seudopodos, para localizar tin punto de migracion adecuado en el mismo. (Por gentileza del Dr . J. Greenwood.) La microfotografia electronica (2) muestra tin linfocito adherido al endotelio cerebral en las proximidades de una union intercelular, perteneciente a tin animal con encefalomielitis alergica experimental . La adherencia precede a la migracion hacia las regiones inflamadas a traves del endotelio . (Por gentileza del Dr . C. Hawkins.)

fJjgracion celular e inflamacion

( uandO SC l)roducui respucsta% innttmitarias en [os tejidos conlo respucsta ,t till cstimulo antigenico~, ]as ditcrcntcs pohlacionc% cc lularcs suclcn it ap :u- ccicntlo en taSC% succsis as . El tipo tic celulas prcsentc, su ahundancia rclatisa \ Cl momenro> en quc acudcn a la zenta dchcndc p6ncihdlmctle de la naturalcza del cstimulo an tigenico y tic la rcgiom atcctacia . E.n gcncral, los ncutroifilos soil las

Recirculacion de los linfocitos y de las CPA

medula osea

timo
celulas fagocitos dendriticas mononucleares

c\oltrciom tic una rcaccioin illtl :unatcn-ia agtrda tlepentic tic la Po%ibilidad do climinar cl anti gcno o cl agcntc intccciosoo. (arando csto no es posihlc, la rcacci6n intlanruoria c\oluciolla hacia la cronicidad . En cstos casos cscascan los ncutrhhlos, pcro sc acunurlan grandcs cantid : tics tic celulas'l' ('I)4 t . do tago~citos montmuclc,u- cs . Las rcaccioncs trcntc a ]a% cntcrmeclacics parasitarias (p . cj ., la es(Iuistosomiasis) SLIClcn it acompanadas tic una acunrtrlacicin CIc COSIn0fil0%. I-:stos ultjntos, jullto con lots hastifi Io>s los ntacrotagos, taml,icn ahtrndan cn l :ts parches hromquiales despuis tic tin episoclio tic alma .

primeras celulas que apareccn cn los locos tic inflamacioin aguda dchida a proceso% intccciosos. 1)nrantC %arias dial son Cl ripe tic cclula prcdominante . A partir del primer dia coomicrvan a actidir a la zona intlanrada fagocitos n1OnonLICICaYeti ~. algunos lintucjtos . Por ultimo, Ilcgan las celulas T (:I)8' s. algunas cclula% B. La

PATRONES DE MIGRACION CELULAR

Figura 5 .2 . Los linfocitos virgenes de los tejidos linfoides

primanos, coma la medula osea, migran hasta los tejidos linfoides secundarios, es decir, el bazo y los ganglios linfaticos . Las celulas presentadoras de antigenos (CPA), entre las quc se encuentran las celulas dendriticas y los fagocitos mononucleares, tambien proceden de las celulas madre de la medula osea . Estas CPA penetran en los tejidos, capturan los Ag y los transportan hasta los tejidos linfoides, en donde se los presentan a las celulas T y B. A continuacioin, los linfocitos activados abandonan los tejidos linfoides y se acumulan preferentemente en regiones infectadas o inflamadas.

celulas migratorias, clue les permitcn cstahicccr interaccioncs coil cl cndotclio, las celulas tisularcs o Ia matrix cxtracclular, c cn partc poor di\crsas nt0lcculas soluhlcs tin capacidad para transmitir scnales (quimiocinas y otras mo1CCUla% quimioricticas ;~ . Loos patrones tic migracioon cclular son complcjois, \ not solo dependcn tic] tipo do cclula, sine tamhicn tic su grado tic ditcrenciacicin t actit aci6n . Adcmas, Cl cndotclio vascular cs tlitcrcntc ell las distintas rcgiontcs tlcl organisnto, till liccho quc t:unthien atccta a los tcnoimenos tic migracio'm . Eli concrcto~, Lts tenulas tic cndootcho alto i VF 1 quc SC cncucntrall en Its tejidos lintui ties seculldarjos son notahlemente *A ditcrcntcs tie las clue %c en cucntran cot cl resto tic tejidos no lintioides ,;\ . cap. 3 i . El cndotclio tic Ices pcqucnos \asos (]tic irrigan lots tejidos no lintititics tamhicn ptrcdc tariar macho tic till tcjido a ctroo, t . ell totlos los casos cn quc Sc produce una rcspucsta intlamatoria las molcctilas prcscntcs ell cl endortcho~ c%tin scmictidas a nloniulacion a nnel to cal . El tipo tic celulas clue migran a tra\cs tie Ios ciiferentes Ie chos cndotchalcs dcpcndc sic rodos cstoos tactorcs . En general,

El proceso tic migr:uioin Icucoxitaria cetnsta tie dos tales principales. En primer lugar sc produce la union clltrc las CeluLts circa ]antes N. cl cntlotcho tascular, quc sa sci;uitla tie] ticslizamicnto do dichas celulas clltrc Las celulas endo~tcliales o a tra\cs tic las mismas i hq. ti .3). En la sc'untia talc, una \cz atra\ esado cl cndotcho, las celulas migran hacia la region intcctatia or intlamada, guiadas poor cNtimtdo% quimiotacticos . Estos proceso% cst.i n controlados ell parts par las mooleculas tic adhcrcncia tic la supcrficit: tic las

Fig . 5 .3 . Las tres fases de la migraci6n de los neutr6filos . 1 . Un leucocito polimorfonuclear adherido al endotelio capilar . 2 . El leucocito penetra entre las celulas endoteliales . 3 . Un neutroifilo que

ha atravesado el endotelio. En algunas ocasiones el proceso completo se denomina (diapedesis . " 4.000 . (Por gentileza del Dr. I . Jovis.)

Moleculas de adherencia intercelular

la nti,, racirrn tic los leucocitos a tratcs ticl endotelio dCPCndC tic la carga superficial tic Ias cclulas yuc interaicionan, tic Ias fuerzas tic cizallamiento hcntodinamictt prcsentcs cn cl Icclto xascular do la cxprcsion tic un conjunto tic cclulas tic adherencia C0111plcntcntarias, tanto cn I<n ICUCOUTUS ittmtt en cl endotelio. for todo cllo, la ntigracitin tic los ICUCO Citos se produce cn ]as t cnulas, yuc son los t ;tsts ion mcnrn- cart a superficial, cstan strmctidos a tucrias tic cizallantienttr rclati\ .uttcntc &hales \ cxprc,an scIcctit ;tntentc ntolcculas tic adltcrencia iair7. 5.41.

La migraci6n de los linfocitos hacia los tejidos linfoides no se Ileva a cabo de la misma forma que la migraci6n hacia regiones inflamadas

I-~~~ kitti~ou~s adrrptan distintos patrcmcs tic migration Cn Lts ditcrcntcoeases tic su citlo Vital. Por cjcnaplo, [as cclulas I en rtposo ticndcn a ntigrar a era\ cs tic las VEA hacia los tcjidos lintititics sccundarios, micntras yuc las cclulas f activacias ticndcn a migrar hacia los tbcos intlantatorios . Acicmas, cxistc una migraci6n scIcitita hacia rcgirmes detcrminadas . Por cjemplo, los lint6cittts invcctados obtenidos a partir tic placas tic Pet cr ticndcn a acuntularsc cn cl intcstino, ntientras que si procccicn dcl bazo sc acumulan prctcrcntcnacntc cn estc organo . tic La migraiitm hacia k>s ganglios lintaticos, las placas . Peter y los tcjidtts lintoitics mucosales sc produce a tratcs do Ias VEA It . cap. iS . Ilasta cl 25'%, tic los fntocitrrs que penetran Cn un ga,ho linfatico a tratcs tic los eases s;utguincos pucdcn scr rctic linfocitos tCnIdOS por Ias VEA. Por cl contrario, la proportion tic que circulan a tratcs otn"os tcjidtts \ atraticsan cl Cndt>tclio tic normal tic las rcnulas hrs mismos cs ntininta . Sin embargo, este baja grader tic migration time una Bran intpttrtartcia, t a yuc pcrmitc a Iris linfocitos cigilar todu cl organisnto ~- auntcnta cxtraordinariantcntc Cu ;utdo Sc desarrolla una reaction infanrttoria . for tanto, Ias VEA son rt1M' importantcs a la hora tic contra [.it la rccirculao(m tic Irts lintocitrts . \orntalnuntc solo sc cn

Cucntran en Irrs tcjidtts lintoidcs sccunda6os, I,cro tanthicn a tiwnran cn las regiones cronicantentc intlanruias . L;IS iclulas lint6itics do las VEA prcscta;tn tort tornaa peculiar, V exprc,,ut ditcrentcs conjuntos tic ntolcculas tic adltcrencia sultatadas y altantcnte glucosiladas, yuc SC tmCn a ]as cclulas T circulantes v las dirigcn hacia Its tcjidos linfoicics . Estas ntolcculas no son Ias ntisntas yuc irnunrlan la migraci6n hacia los tocts do infantaci6n aguda . Aticntas, I :ts VEA tic los ditcrcrries tcjidtts lintiridcs cxprcsan ditcrcntcs conjuntos tic ntolcculas tic adhcrcncia . En concrcto, las tic Ias cclulas ut0lceulas tic :adltcrencia yuc induCCn la ntigracitin tic ntut >sas s, a Irrs [as fctcr, a los ganglios lintaticos a plains do dena.is ganghos lintaticos son ditcrentcs cntre si . Antiguamente ;~, \sc ticnontimi a cstas ntolcculas adrcsinas vasculvcs (\ . hag . () . su Cxprcsidn cn las difcrentes VEA hate posihlc yuc cacia lintitcjto sc desplacc hasty cl tcjido linfoitlc adccuado .

La migraci6n esta controlada por los leucocitos y por el endotelio

I .a migracititt tic IOS ICtrO>:iu~s ista c(Wtn>lada hr~r Id', ntolcculas . ICLICOCitoS, 1)01- Id tic adltcrencia dcl endrrichtr t tic 1()S cstos ICLICOCitOS y por la prcsencia do ctpacidad migratoria tic agcntcs quimiotacticos . Para contprcndcr la complejidad \ la varictiad tic Its patroncs tic migraci6n cs ncccsario conoccr Its nuntcrosos factor- que nxttiulan cste proccso. Entrc cllos sc Cncuintntn : " El estado de activaci6n de tos linfocitos o de los fagocitos: la Cxprcsitin tic itto1000Lu tic adltircrncia su atinidad tuncirtnal varia Begun el tipo tic cclula, % depcndc tic si ha sido actitatia prcxiantentc por un antigcno, por cittrcinas o peer intcraccioncs cclularcs . El tipo de moleculas de adherencia expresadas por cl eu dotelio vascular : ester ticimntic tic la region anatuntnca t tic 1 .1 cstintulacitin prccia por citocinas. Las moleculas quimiotacticas y Ias citocinas presentes en el tejido : los rcccptorcs arnt ditcrentcs Cn Cada Pohlaciitn ICU ioiitaria, tic tal kx- ma que algtmos agentcs yuintiotacticos ac Wall SCICctix:uTtente sabre cictcrtninados tipos cclularcs. AMC', tic cxplicar yuc papcl dcsenapcf an los ditcrentcs tipos tic rta01CCUlas tic adltcrencia en hts naccanisntos tic migration cclular, Cstutii:u-cnurs su natutaliza t. su distribucitin .

Migration de los leucocitos a traves del endotelio

las fuerzas de cizallamiento y las cargas elevadas dificultan la adherencia -

MOLECULAS DE ADHERENCIA INTERCELULAR

I AS nto1Ciulas tic adhcrcncia intCrcclul .u- son protc nas tic ntcnt brana yuc pcrntitcn ,t Lis cclulas intcraccitntar mutuanainte . Es trecucntc yuc estas moleculas atraxicsen la ntcnabrana v sc entic cucntren unidas al citocstluclcto cclular, tal turner clue al ntotcrsc la cclula Ids puida utilizar para adcluirir intpulso apo~andose ctrbre rnras cclulas o sobrc la ntatriz cxtracclular . En rnuclurs cases una molccula do adltcrencia se pucde unir a ditic tic xersos lig,andos, ntctjiantc la utilization difcrentes PUrttos tic union . Aunquc la afinidad union cntrc una molccula tic adhcrcncia t su fgandcr suclc scr baja, la a\iticz tic la interaction pucdi scr alta, dcbidtr al agrupamicnto tic Ias MOICCULts Cn la SUPCrlICIC cclular . I .as C IULas pueden modular Bus interaccittnes con cclulas tic tic torte tip), Ya sea ntccliantc la modification tie[ nunaertt ntolcculas do adhcrcncia prcscntc cn su superficie o nactliantc la rnodificacitin tic su afinid:ui;a\idcz (fire. i. ;;, h .xisten dos mantras Cn yuc Ias cclulas pucdcn modificar cl grader tic cxprcsion tic Ias ntolcculas tic adltcrencia : n1UCIL7S cclulas alntaccnan (,randcs c;tntid:tties tic cstas ntolcculas cn \rs culas intrrnas, yuc pucdcn scr transportacias hasty la superficie cclular en cucstirm tic minutes cttando la cclula sc actina . Ed otrrt sistcnta consists Cn sintctizar I ;ts ntolcculas t . transptrrtarlas hasta la superficie MULL, un proccso yuc strclc durar \arias horns .

vdnula

capilar 4 0--

--_!-_ L -777w-71

fuerzas de cizallamiento debiles

endotelio

carga baja

moleculas de adherencia

migraci6n

Fig. 5.4. Los leucocitos que circulan a traves de un lecho vascular pueden interaccionar con el endotelio de las venulas mediante conjuntos de moleculas de adherencia de superficie . En [as venulas las fuerzas de cizallamiento hemodinamicas no son elevadas, la carga superficial es menor que err otros vasos y se expresan selectivamente moleculas de adherencia . Con estimulos adecuados, despues de la adhesion se puede producer la migraci6n .

Migration celular e inflamacion

Modulation de la adherencia leucocitaria

Moleculas de adherencia de las celulas endoteliales integrinas que actrian como ligandos LFA-1 y CR3
v

LFA-1

VLA-4, LPAM-1

LPAM-1

= u,l/3,

VCAM-1 ICAM-1 MAdCAM-1

ausencia de adhesion

ICAM-2 Fig. 5.5 . Existen cuatro formas de potenciar la union de los leucocitos al endotelio. 1. Mochas celulas almacenan moleculas de adherencia, que pueden ser transportadas rapidamente a la superficie celular . 2 . Las celulas endoteliales presentes en las regiones inflamadas pueden sintetizar nuevas moleculas de adherencia . 3. La afinidad de algunas moleculas, como LFA-1, puede aumentar tras la activation celular . 4. La reorganization de las moleculas de adherencia de la superficie celular puede dar lugar a la formation de actimulos moleculares de alta avidez . En la practica, cada celula puede utilizar simultaneamente varios de estos mecanismos, y los cambios de afinidad pueden ser posteriores a la interaction initial entre las celulas.

celula endotelial Fig. 5.6 . Moleculas ICAM-1, ICAM-2, VCAM-1 y MAdCAM-1, en las que se observan sus dominios de tipo Ig . En la parte superior se enumeran las integrinas a las que se unen . MAdCAM-1 tambien posee un segmento altamente glucosilado, que se one a la selectina L.

SC 11 .1 identifiC ;uiot unit canticiad sor-prendentcntcruc grandc Cic moleculas dc adherencia yuC intcrsicncn cn Lots proccsos dc nii graciotn dc his Icucocitots . Sin embargo, utdas cllas SC pueden cla sificar cn cuatro familias yuc sc encucntran rrlacionadas cstrUCturalmentc . La migration cs tin proccso complcjo, y a to largo cicl rnisnlo intcrs iCncn Ciis crsos conjuntos tic moleculas LIC 1dhcrcnCi,1.

Integrinas

Varias moleculas de adherencia del endotelio pertenecen a la superfamilia de genes de las Ig 1 .3 nr()ICCUl,1s dC at111CrC 1101 Ci 1111,11 I MM I it AM I i moICCUl.1 tic acilicrcncia intcrcclular, dcl inglcs iurcvccllularadbc~iuu molccrrle'I, ICANI-2, \'( :A,\t-I fi\LA( sasCU1 .u,dCI inglcs r'n;CrrhlrCCllrtlr:radrA\Ci(;\NI-1 i MAC- I aCircsin .t LIC ntLICOtsas, dcl hesion ruoltcuh Y .,glcs ruxcusal rrr!lrcsion rrllrrlararthcsinu urolecrrlo,l prrtrnrcrn a Ia int supcrtamilia dc gents dc las innnuutglohulinas . 12txios los micmbros dc csta tamilia son exprcsados o pueden ser inducidos en cl cndottCliot saSCUlar . ICANIA poscc cinco dominios c\tracclularcs ; los dots dotminios dcl cxtrctno amino prcscntan honlologia cstrUC coral cots his dots donliniots cstracclularcs dc 1(AM 2 . NVA1\1 1 poscc scis dominios cxtracclularcs, sI Cs Una molccula multiI,IC Con dominion tic til,o inmunog,lobulina f. q. ,z bl . Las integrinas de los leucocitos intervienen en la adhesion al endotelio y a la matriz extracelular I ,u intCgrirrts cor1lstitu\Cn un 11111)(a LrntC grulto dr nutlccul,x LiC ,ttillcrcncia yuc sc cncucntran presentes en nlucluts tipos dc CCIU las, cntrc las yuc sc cnctrcntran los leucocitos . Cada micmbro dc csta Bran tamilia dc moleculas csti tornado 1101- Clos pttlil)epti(iots iu V [3 i Unidtts cntrc si dc titrma no Cott alcntc, cad,t Unot dc lots CU,1Ies atrasiesa la menlbrana dc ladot a Ladot. La tamilia se pucdc di idir cn trcs M111611111 6S, scgiin la cadcna 13 ; lii, (t, 1 . 13 3 ) yuc f trtnc parts (IC la molcarla . Rccicntcmcntc sc 11 :111 rcalizado hallazgos yuc indican yuc cl acoplamicnto cntrc Las cadenas rx s, 11 no cs tan prcciso cotnlo sc pcnsit cn un principio. A gratttics rasgos, la, (3,, integrinas inters icncn cn la union dc Lis celulas a la nlatriz cs tratrlular, las (3 . integrinas en la union dc Itts ICUCOC1tO5 al endo-

expresion
OP.IIlIi15

I,

hrjro11I :I5ros

celulas T activacias, plaquetas VLA-3 "f . VLA-4 11,13, laminina, colageno, fibronectina VCAM-1, fibronectina fibronectina rinon, tiroides linfocitos, algunos fagocitos algunos leucocitos, plaquetas ampliamente distribuida

CR3 U1 0 2 CR4 "x(32

C3b, Cob, ICAM-1 Cab, Cob, ICAM-1 ? macrofagos

Fig. 5.7 . En la parte superior se muestra la estructura general de Una integrina, consistente en don cadenas unidas de forma no covalente. En la tabla se indican las propiedades de algunas de las integrinas que intervienen en la union de los leucocitos al endotelio y a la matriz extracelular .

lVloleculas de adherencia intercelular

Who o a otras Cclulas inntunitarias v Ias (3 ;-intcgrinas i;cito~adlicsinasj en Ias intcracciomes cntrc Ias Plaquetas v los ncutrofilos en ]as zonas intlannadas o en Ias qUC SC lian proxiUCido Icsicmcs sas:ulares . Sin embargo, se Conoccn \ arias exccPciontcs t estc esquenta sintplificado, v sc ltan dcscubicrto cadcnas (3 adicionales (p . ej ., l3_) . (ads cadena (3 SC Pucdc asocial- a cads una tic Ias discrsas cadonas u, dando lugar a difcrcntes MOICCUIas do adltcl-cn Cia. Las integrinas sc linen con sits ligandon gracias a los caiioncs disalcntcs . Asi, I .FA-I f una intcgrina ox, 1'1 ; SC suck cxprcsar ell los leucocitos en cstado de baja afinicl:al, pero cl atnmcnto cn la coil Sit afinidad \ . CI aunncnto ell Centracion tic Alg- has clue auntcntc la conccntracioSn cic ( :a=' dctcrntina una reclistribucioin do la intcgrina cn la SUPCrfiCiC CClular, producicndo Parches dc la nnisma Cuu n1,11\01' afinidad . En la -/iquva .i.-sc nutcstran algunas do Ias intc` rn .;s
yuC

time liacia Ios ganglion lint :iticos pcrifcricos . Sin embargo, la Sc lectina 1 . tannbicn se PucdC unir a oMAdCAM-1, expresado Porr Ias VEA nttncosas . FstAS molcCUlas glucidicas, que sc han dcnominado dC una forma nun CXPrcsi\ a adrcsinas vasculares (address cn inglcs cs dircccion), abAndan principalnrtcntc en Ias VEA do los tejidos linfoicics, Pero tantbicn Pucdcn set- inducidas en otros lugarcs durantc los procesos inflamatorios cronicos ia?q . 5.9'I . Las selectinas E \ I' que SC cxprosan en el cndorclio actisado SC Linen al sialil-glticido \ do I .ccsis asociado a ( ;1)15, clue CSta prCSCntc en 111nC110S lCUCoriltos . Fstas selectinas tren :ut :t los leuC(iCltOs durantc la Primer, tISC LiC to migraci611 (fa . ti .lfl).

utilitait I . ICti000it(,s } ,ara nIMLTW .

Las selectinas son un grupo de molcculas de adherencia de los leucocitos y del endotelio, que se unen a hidratos de carbono

1 .1 sclcCtina P, Folio, his SCICCtimas sc Cncucntr:ui Lt wlcctina I C\Prcsadas rCSpccti\amcntc Por Ias Cclulas Cndotclialcs y Por Ias platiuotas, "IS] coimo la selectina L, que cxpresan algtuto~s leucocitos ; ;fiq . 5.,4} . Sc trata do molcculas transntcntbrana con una scric do dominios cxtracclulares liomologos a los quc apareccn en [as protcinas do control del complcnrncnto (p . cj ., cl factor H) . La re gion cztracclular conticnc un donninio rclaciomado coil cl factor do crccintiento cpidcrmico ( EGF, del inglcs c~rjderrrral gromtlr torl, \ otro dominio cn cl cxtrcmo amino con propicdadcs Parecidas a Ian quo: Posccn Ias lectinas ( cs dccir, ctpacidad para unirso a hiciratos do carbono) ; csta cs la razoin Por la quc sc cicnominan selectinas . (:onto es Ioigico, ton ligandos t los quc sc Linen Las Sc lCCtlnas Conticnen sustitu\rntcs do naturalcza glucidica .

Los ligandos glucidicos de Ias selectinas pertenecen a diversas glucoproteinas de los linfocitos y del endotelio

dl- Ias selectinas Pucdcn pcrtcncccr a citLos ligando, tersas pnacin :ts . l0a- ejempk~, ti>;p-?U0 quc CxprCsan Ias VF.A contlCne numerosos liidraton oie carbono, unidos nxdiante Cnlaces (), title NC Line[) a la SCICCtina 1 . tic los lintixilOS \ dirigcn a CSIOS til-

Fig . 5 .9 . Adresina mucosa sobre ell endotelio. En esta microfotografia inmunoelectronica se ha Ilevado a cabo una tincion para que MAdCAM-1 quede destacado como una linea oscura (flecha) que bordea la superficie luminal. Se trata de celulas endoteliales cerebrates procedentes de un caso de encefalomielitis alergica experimental cronica y recurrente, inducida mediante la inmunizacion de ratones Biozzi AB(H con proteina basics de la mielina. (Por gentileza de los Drs. J. K. O'Neill y C. Butter, con el permiso de Immunology 1991 ;72: 520-25 .)

Modelo de adhesion leucocitaria en tres fases

Selectinas
ligandos glucidicos expresados sobre: plaquetas, endotelio, neutrcif,los IcuCocitna VEA, endotelio

dominio de tipo lectina

selectina P plaquetas, endotelio

selectina E endotelio

selectina L leucocitos

Fig. 5.8 . Estructura de tres selectinas . Todas ellas poseen dominios de tipo lectina en sus extremos, que les permiten unirse a los carbohidratos de Ias celulas quc se enumeran en la parte superior . Tambien comparten otras caracteristicas estructurales .

Fig. 5.10. En esta figura se muestran Ias tres fases del proceso de adherencia leucocitaria en el caso de un neutrofilo, aunque si se tratase de otro tipo de leucocito Ias molcculas de adherencia implicadas no serian Ias mismas . 1) Captura: el neutrofilo es frenado cuando se desliza Por el endotelio, mediante la interaccion entre la selectina E y la molecula CD15 del leucocito . 2) Estimulacion: una vez capturada, la celula es estimulada . Esta estimulacion puede sec mediante la interaccion directs con Ias molcculas de la superficie del endotelio o mediante quimiocinas u otros factores quimiotacticos presentes en el mismo. 3) Fijacion : la estimulacion induce la sintesis de integrinas (CR3 y LFA-11, que se unen a Ias molcculas de ICAM-1 inducidas en el endotelio .

Migracion celular e inflamacion

s MECANISMOS DE MIGRACION CELULAR FI protceut de migracion dc loos Icucolcitos a tratcs dcl cncoxclio cotnsta dc \arias tascs succsi,as . En la fttwra 5 .10sc ill ucstran las trcs printcras . " Captura : Icts Icucocitos sots fircnados .1 Su paso potr la \-cnula, y tras cicslizarsc por la supcrficic del emlotclio son rctcnidos S(tI,r'C 1 .1 ntisnta . Fstc prOccs0 tic captura ticl,cnCic dc [as intcracciotncs yuc sc rstahlcccn cntrc IA S sclcctinaS \ nt0lctuhts yuc calnticncn Itidrators cic carbono . Estimulacion : lus ICUCOCitOS capturados ticncn la uportuni clad tic rcsl,()Iuicr a Ias citocinas, t loo agentcs quimiottacticos ,1 Lts moleculas (IC 1 .1 sul)crficie entiotcli .tl \ de la ntarriz cxtr,tcclular. E,tas intcracciones pucticn actilar la celula y pro gr :tmarla para migrar. Fijacibn N' activation : sc produce una regulation positi\ a dc la A1111 I :ui de ]AN ituegrinas Icucocitarias, Clue SC linen a Ins mole culas cncorclialcs dc adherencia celular c inician cl proccs(t tic nti,,racion . Migracion : Ias cclulas cntran cn contacto con la ntcntbrana basal mcdiantc la utilizacion dc otro cotnjuntol de moleculas tic adltcrcncia, v migran hasty la region subcmiotchal . lligesticin : SC lillcran cnAmas yuc cligicrcn cl colagcno t. otron componcntcs tic la ntcnlbrana basal, to clue pcrnlitc a Ias cclu Ias intcrnarsc en cl tcjido subyaccntc . Las moleculas de adherencia controlan la union intercelular y la migracion a traves del endotelio oat ca1il 1111(1 tic lox til,Os tic ItuAimicntol celular intercicnen chtcrcntcs moleculas tic adltcrcncia . Migracion leucocitaria en los procesos inflamatorios. l .o 1s nrutnitilois ',(al ldS I,rintcras cclulas yuc 1tt1(ICn 11,tcia Ias rcgiotncs tat infl :urnaciorn a ;;uda, protccso yuc cst;i controlado cn cicrta me tfcia l,or 1,1 induction potr parts do ] .is citotcinas dc Ia sintcsis dc seIcctina 1 :, cn Ias supcrficics cndotclialcs tic cstas rcgioncs . La cs611111lacion in ritro tie] endotcho con citocinas como cl factor dc necrosis tuntoral (x +'I'VEuj o la intcrlcucina 1 +IL-11 inciucc la cxprcsiotn dc sclcctina F tras un lapso dc tictnpot dc 4 12 horas, I,Cr0 una scz tralISC(lrrlclas 24 horas cl proccso do sintcsis sc illtcrrun1hc ( . /irl . 5 .111 ; csta 111olccula sc dctccta ill rir) duranre [as tries inicialcs dc los proccsos intlalnatorios . Las cclulas transtccLati :ts con CI L~cn do la sclcctina F cxprcsan grulcIcs canticlacics (1c CSta n101eCU11 v sc uncn filcrtcnlcntc a 1os ncutr(ifilos . Estos hccl1(ts sugicrcn clue la captura dc los ncutrotilos circulantcs por mcdio dc la sclcctina F. cs un paso cscncial cn cl proccso cic migracion . ()tros tactorcs importantcs ell la Inigracicin do 1os ncutroifilos, los lintbcitos los mon0citos soil Ias I3, integrinas I,FA-1 \ ('1 3, yuc sots cxpresadas [-,or lots leucocitols s. sc uncn a Ias MAC cnti(tTC11aICS pcrtcnccienrcs a la supcrtamilia genie, dc [as inlnuno g10hulinas . I .FA-1 sc unc a I(AMA c ICAM-2, ambas cyrcsa clas por Ias cclulas del cn(icttclio s,tScular. La cxpresiottt ill ritro dc ICAM 2 por parts dc Ias cclulas cndotchalcs cs constitutiva, v sc ha sugeridot clue csta ntolecula cictcrmina el grado do union tic Ion lintocitots a coda un() do IOS tipos do endotclio ell to)tttil(IUnCS norntalcs . Por ejentplo, cl (nciotcho cerebral c\presa I,ccluctras canticiacics dc 1(ANI-2, por to clue cn conclicioncs nornlalcs la migracion celular a tr:lccs dc dicho cndotcliot cs cscasa . Potr cl cotntrariot, cl cttdottchot normal conticnc pcquchas cantiCialcs dc I(' .\N1-1, hero la c\prcsi(Sn tic csta molccula puctic SCI_ induti(ia por citocinas (1 \Fox, IL-1 c IF\ ;, , scgtin la cspccic) . La cxprc sion do ICAM 1 in vitro cs inducida tras 8 96 horas dc exposiciotn, pcriodot do ticntpot quc coincide con la Ilcgada dc los monotcitos t . do lots lintocitos a Ias tacos infatnatorios (Jtq . 5.11) . Las fiHICIUnCS tic (A ." ell la acunn111d(in LIc fagocitos Sc hail do: ducido mcdiantc cstudios ill giro, cn Icts clue SC ban utilizadot an titucrp0s frrntc a ('R3, Clue inhiben la migracion dc los filgoci-

tots . Es notable cl hech(t tic yuc I(ts I,acientes Clue padeccn CI Sindrontc dc adltcrcncia Icucocitaria dctcctuosa iALl)l, clue eontracn grt,-cs intccciOnes dChl(10 a 1110111,11ias ell la ac(ln1ulaci()tt dc fagocitos, careccn dc toclas Ias (3_ intcgrinas ( ITA-1, ( :R3, CM h . CM, recotnocc una region tic I(ANI- I cliteretttc a l1 yuc rcconocc I RV I . La c\prcsion cic \'( :A\1-1 t:utthicn CS inducida cn [ .is regio lies infanla(ias c ill ritru, aparccicn(io apro\inradantcnte al Inislno ticmpo quc ICAM 1 ifrt . ; .II i . 1 ;'sty nutlccula sc line .11 .1 integrina \'LA 4, prcscntc cn algunas poblaciones linfocirarias, t . tantbien se line (ic forn1, scleCtivl coil IctS basoifil(ts t . cosin()filus, desclnpcitando un papel importantc cn las rcacci(ntcs alcr,icas . Sin embargo, cxistcn sutiles tlitcrcncias en Ias citotcin :ts clue in ciutcn la c\prcsi(m tic sclcctina F, 1(1 :11\1 1 t \'( : \\i- I cn las ciitcrcntes cspccics N cn los distintots Icchos vasculares . Esto pcrntiic clue la migracion celular 1 travcs cicl cntiotcho cn cl turSO . tit' IUS Ii1ti<)ti .l)u' u~ttlamat()t.ll t. S Iucda c'tital star. S( t . 11c't1d,'1 .l alma 1'e?-'rl lacion fina, coil to clue NC ccnIS1guc un flujo ordenadol dc las ditcrclacs poblacioncs cclularcs . I .a union tic los lintocitos al cndoxclio puctic set MOCiul :uia ntc(ii :ultc :ulticucrl,0S ti -cntc a las m01Icw = 'las tic atihcrcncia (1c' Ito Imti>' lit(t s (t cicI Fr(}I( (lid( tclu asi 101110 ntcdi :ultc 1,1 utilizaciotn tic nt0lcculas dc adltcrcncia solublcs, to yuc podria cncontrar aplicacioncs cn cl tratanlicnto do cntcrntcdades cn Ias clue Sc produces acuntccimient(1S inntu nol, .ttol<igicos . Migracion leucocitaria normal. Sc cicbc distinguir cntrc Ias moleculas cicscritas en cl parrafit anterior, quc controlan In ntigracioin do ] .is cclulas hacia los tocots in1at1tatotrios, t . a(JLlCIIlS title controlan loss desplazanticntos normalcs tic los lintocitos . Lots Jintociros 1 irgcnrs csprcs:tn sclcctina L, yuc acs pcrmitc unirsc a 1os ligand(ts gluciclicos dc Ias VLA dc los ganglion lintaticos ntucos0s c . peritcricos . Una ,cz rctcnidos cn Ias \'F .\, lots linfocitos n1igratotrio,s pucdcn utilizar 11 integrina (x,j1_ (1 .1'.\1\1-1 I para unirsc a la nto1ccula \IAti(ANI-I tic [as \"E(' dc Icts ganglios lintaticos ntucusos (t tic Ias placas tic Pct cr. Conio la exprcsiotn dc v f;tt(n -ccr lu migracion hacia los tcjidos lint0idcs nulcotsalcs, nticntras clue a,(1 ; i VIA I 'l ticndc a unirsc a la molecula \'( : .\1\1-1 dc

Expresion e induction de las moleculas endoteliales de adherencia estimulacion enclotelial

Fig . 5 .11 . En este grafico se m(lestra el curso temporal de la induction in vitro de diferentes moleculas en cclulas endoteliales de vena umbilical humana, tras la estimulacion con TNF(u .

mecanlsmos de mlgracion celular

Ias cclulas endoteli :tlos acticadas 0 .1 la fillroncctina tiNtlI :tr, la expresirin de rua u otra dc estas molcculas perinite dirigir .1 los lintocitos tirgcncs llacia los tcjidos Iintitidcs \' a Ias cclulas 7 acticadas hacia Ion titcos inflaniatorios . Interaccion entre los leucocitos y la matriz extracelular. l na ccz clue its cclulas has atra-stc1o) cl encloiteho, t . 11,111 pcnctradct en lots tcjidos, interaccioman om las protcinas dc la rna triz extracclular i colagenor, lantinina, fihrontectina, etc . i c cum las cclulas tlsulai'CS . ( :candor los lintctcitos airtndonan cl caso sanguinco picrden Ia cxprcsion tic L-sclectina, quc t`,t net cs ncccsarias ntcdi :uuc escision cnAniatica . EI tenortipo tiincional dcja de scrcl de tln :t cclula circulante, t. se CormiCItC ell Cl tic una cclula adaptada al nlocinlicnto en Cl SCnO do los tcjidos . \9uchas tic Ias nurleculas coil [as yuc Ion ICLietr(Itots cstablctcn intcraccioncs coil la matriz cxtracclular pcrtcncccn al grupo do Ias 11,-intcgrinas, Sc clcnonlinan antigcnos nniv tardios i VIA, del ingles rer.l latr ar1tirtcnsy, c -a quc tlicron dctcctados poor printer, ccz cn la supcrficic dc hnlitcitos cn taSCS n111\ axanzadas do su proccso dc acticacicin . En la acnialidad SC (1010111111 :111 molcculas VIA a codas Ias pcrtcncciontcs al -,ruilor do I:ts ji,-intcgrinas, aunyuo la nia.oria tic cllas no sots cxprcsadas cxclusicanlcntc por tin lircitors . } .n cstc grupo sc incltrccn los rcccptorcs del corlageno ~VIA-? c VLA ;i, do la lantinina ALA-3 c VIA-61 r tic la fihroncctina I<TA-3, \'I .A--} t. \'I .A-Sl . EI 11ccho do yuc alguirts do cstas ntcrleculas aparczcin cn tascs tardias tic] proccso (1c acti caciun dc los lintircitos stigicre clue Ias cclulas sc ditcrcncias do acucrdo con tin prograina bier cicfiniclo, y quo : la capacidad para interaccionar con la nratriz extr :uclular CS una tie Ias tiltinlas propicdadcs yuc adquicrrn . Las molcculas quimiotacticas induces la migracitin y controlan la direccitin del movimiento de los leucocitos Las intcgrinas clue utilizan Ion Icuotcitors par, nligrar a trarcs (let cndotclior se pucdcn cncontetr cyuestas en la supcrticic de la telula o almaccnadas on granulos title pucdcn scr lihcrados cn diclla stipcrficic, pcro no suclcn scr tiutcionalcs, sino clue prccisan una serial actic- adora proccdcntc del cndotcho . Esta scnal pucde proceder dircctantcntc dc la cclula cndoteli al of pucde pro-

emir (1c molcculas libcradas cn los tcjidos N capturadas po~stc riornicntc por cl endotcho . Muchas de estas nuilcculas transmisoiras do scnalcs ticncn tarrnbicn propiedades yuinliotdcticas . h:ntrc cllas se cncucntran CSa, cl leuCottricno B + i ""'1141 x di%rrsas ci tocinas (1c bajo peso molecular, denominacias colecti\antcntc qui miocinas i- tip 5 .12) . <uinliotaxis net cs sinoninio dc quirrlioicincsis : la quinlicttaxis cs la migracion dirigicia dc Ias cclulas cn cl scntido tie tin t;ra tlionte tie concentracihn de una sustancia quin1iottactica, mientras quc la quirniocincsis net cs tin proccso dircccional . Para quc s0 produzca la nrgrLci6n dircccional, la cclula fiche scr capaz tic rrspondcr a IOts gradicritcs del nicdiador yuinliotactico, cs dccir, riche pcrcihir ditcrcncias dc conccntraciOSn tic[ order del 0,1ffi, clue soil las quc cxistcn entrc los c\trcnws anterior \' posterior tic la cclula nligratotria . El proccso de quintiotcineais, clue induccn nlcdiadorres conxt la hist;unina, consiste ell una cstinnilaci(tn global tic la mete-iliclad celular . Quimiocinas. Las quimiocinas soon tin grupcr dc al menus 25 cit()cinas de pcqueno tamano ttjadoras dc licparina, entrc Ias quc W cncucntran IIA \ R-1\TES . hstas molcculas soil lill0radas cn los htcos dc inflamaciorn 1 . sc pucdcn ligar coil los grupos do 11c11 :u-in sultatoo presenter en [as supcrficics endortchalrs . 1 :,1 antigenor del grtrptt sanguincct Dutth DAR(,, quc sc expresa Lie tctrn1,1 sclcttica ell e1 cndOrtclio ccnular, tanlhicn Sc liga coil nluchas citocinas . AI unirsc al cndortcho pucdcn estinnilar a una cclula quc hala silo capturada poor Ias sclcctinas, acticando sus inicgrinas . Aunquc nurclras quirniocinas son sintctizadas purr 101 Icuco citos, el cndotcho produce in ritr0 I I .-S t. MCP I i protcina (1uimiot:ictica par, IOts nlacr0itagos 1, del inglcs macrrtphagc rhcmotaitir protein 1R), cula sintcsis :tunlenta tras la acticacioin de[ endoteho por [as citocinas prointlamatorias . Las yuirniocinas r otras n1ctlcculas yuin1iot :icticas dcscritas nuts adclantc acttian a trar cs de rcccptorcs scrpcntina-, con scgntcntors transiricnlhrana . Los distintos rcccptorcs sc distribu\en do tarts, sclcctix a ell (iCtCr'r11ir1ada5 poblaciones leu(otiitarias, heclto gtio oxplica, .t1 me nor cn partc, la SClccticidad do la accicin dc Ias distintas quinliocinas . Poor cjcnlplo, MIP-lei i;protcrna inllanlatoria nlacrotagica 1(3, del ingles marrophgqc iuthtuiruruar_Y protcirt 1(3 :1 cstinlula tie ti>rma sclectixa a Ias cclulas 1' C :I)S - . Algunas yuimiocin;ts inrcdcn cstimular CCIULts, otras ticncn propicclados quimiotacticas \ otras acttian de anlbas turmas . No so: sabc por yuc c .xisten tantas quiinittcinas clitercntcs, pero cs probable yuc sircan par, controlar selcttic :urientc la n1igracicin Lie los lcucocitots tanto en la supcrficic cndottclial conlo dcntro de Icrs tcjidos . Otras molcculas quimiotacticas . Ha\ tula scric tic inotlcculas coil prorpicdadcs quintiotacticas par ;( Itts neutr()tilors v lots nlacroIagors iatr7. 5.1?) . Estos dots tipos dc cclulas ticncn rcccptorcs dc tMct-I .Ctt-1'11o It.1\11 .13 i . Estois rcccptorcs sc Linen a pcpticlos cuco cxtrcntcr amino sc cncucntra bloyucado por una t<trnlilnlcticrnina . Corno los procariotas 111 . cj ., las bactcrias) sicnlprc inician cl proccso de traducciitn coil cstc arninoacido, nlicntras yuc los cucariotas not, su Prescncisl inlplita la prcscncia Lie hactcrias, Ita cia [as yuc sc dcbetl dirigir los Icucocitos . LOS ncutroitilos \ lots macrotagos tanibicn ticncn rcccptorcs tie (',;a ~' do 1 .113-,, clots contpucstcrs yuc sc gcncran ell las rcgioncs do intlanwcioin i; ( :5a tras la acticacibn tie] complcincnto c. I:I'13 i tras 1,1 acticacion Lie chccr%,ts cclulas, csl,cci .ilntcntc nlacrortavos v mastocitos) . Adcnris, Ias nlorlcculas goncraclas poor cl SISICma tic cotagulaciOm s;utguilira tanlhicn atracn a ltrs lagocitos, sobrc todo cl peptide 11 de la ti hrina t. la tronlbina . Candor sc actican Ias prinicras cclulas quc Ilegan al titco inIlan1atorio, 11ucclcn a su \rz atracr a oxras . Por cicnlplo, la I I .-8 lihcraia por Ion ntonocitos actix ados cs cluimiotactica part los lieu trotilos ~' basoitilos . Dc la inisnla titrnra, la actiraciom do Ion inacrorlagos cstimula cl nlctabolisnio del acidor aracluidoinico, coil 1,1 iornsiguiento libcraciotn del LT13 i .

Molecular quimiotacticas factor C5a caracteristicas peptide de 77 aminoacidos procedencia extremo amino de la cadena to de C5 procariotas mastocitos, basofilos, macrofagos of ecto sobre

f.Met-Leu-Phe tripcptido con el extremo amino bloqueado LTB, metabolite producidoenel metabolismo del acido araquidonico por la via de la lipooxigenasa proteinas de 10 kdal

neutrofilos, eosinofilos, macrofagos

Chemokines IIL-8, MIP-u, MIP-111, RANTES, etc .)

Fig. 5.12. En

diferentes poblaciones leucocitarias

efectos selectivos sobre diferentes poblaciones leucocitarias

esta tabla se enumeran Ias molcculas con propiedades quimiotacticas para diferentes poblaciones leucocitarias, segtin los receptores especificos clue expresen . Algunas de las quimiocinas son quimiotacticas, mientras clue otras tienen propiedades activadoras .

Migration celular e inflamacion

INFLAMACION
La inflamacion cs la rcacciiut dcl organisnto frentc a Ja invasion por parts dC tin agcntc infccci(no), ti -Cntc a till Cstillnllo anti` .;cniCo o incluso simplcntciac fi- cntc a Icsioncs tisicas. Adcnlas do la cs tinulIaCioin dC la migracioin celular, que sc ha dcscrito cn las sec cioncs antcriorcs, Ios tows inflamatorios atracn tantbicn molcClllaS scricas . AI contrario que en cl caso sic la migration celular, yuc sc produce ;t traces (IC I ;ts \cnulds, la c\uCiacion scrica sc produce principallnclnc a traces dc Ios capilarcs, cn dondc la presi(in satlguinca Cs ntaVOr . Estos acomccimicntos cstan sujctos a dos mccanism(ls rcguladorcs : " h :I ;ttlIlICnt() (icl ap(n- IC sanguinco local . " 11 aumCnto do la permeabilidad capilar . FI aumento dc la 11crlneabilidad capilar sc dcbc a la rctraccion dc las celulas cnd()tclialcs, aunquc tantbicn cs probable que in tcrVcngan proccsos do transports cn cesiculas a traces dcl Cndotelio. De csta forma pucdcn atra\csar cl Cndotdi() \ alcanzar cl ti)CO inflantatorio ntc)Icullas rclatic;uncntc (-'randcs, clue cn Condicioncs normales no scrim capaces do haccdo, cntrc las que se Cncuctttran Ios ;tnticuerpos, CI Complentento \ otras nlolcculas do sistcntas crlzinlaticos plasntiticos .

na ; serot()nina 1, yuc producen \asodilatacion \ aunlcntan la per nlcabilidad Vascular . (Machos dc Ios cfcctos proinflamatorios dc (;,',a \ ('Sa soll dChld()s a Sit capacidad pare descncadcnar la libel-aci(n) dC lo, granulos do ]ON mastocitos, stab dcnlucstra cl ilCCho de quC dichos cfectos pucdcn ser bloqucados con antihistalninicos . Los mastocitos \ ION basofilos CollSllttl\'CI1 taltlbien una Via me(liantc la que cl sistema innnutitario adapt;ttl\o pucde dcscncacicnar Ios proccNON inflaniatorios i la IgE scnsibiliza a cstas celulas dc tai forma que ION antigcnos cspccificos passim in dUCir la liberacioin sic Ios granulos 1 . Fn la firjrrra 5.14 sc mucstran his intcraccioncs cntrc cstos sistemas . [ .ON mastocitos tamhicn

Mediadores inflamatorios
mediador histamine procedencia mastocitos, basofilos efectos aumento de la permeabilidad vascular, contraccidn del musculo liso, quimiocinesis aumento de la permeabilidad vascular, contraccidn del musculo liso liberaci6n de mediadores a partir de las plaquetas, aumento de la permeabilidad vascular, contraccidn del musculo liso, activation de neutrofilos quimiotaxis de neutrofilos

I I (icsarr()II() ~JC las rc .lcci()I)CN illf alllat()rias rst,1 c( )IItr()I .)(I() p(tr las (luimi(I'( )r hr( )dllct()s dc I( ,s sistemas Cniimatio)s I)lasnlaticos \ p()r ntcthad()rcs \-as()aCtiVOS yuc hl\cran Ios lulc()Citos i;(ir1 5. 13') . Los dilcrcntcs tipos (ic rcacci()ncs intamatorias cstan controlados por difcrcntcs mcdiadorcs . Los mcdiadorcs dc acci(in rapida, co)mo las amines Vaso)actiVas \ Ios productos dcl sistcnla dc la cinina 1 \ . alas adclantc I, nlouitlIall las respucstas inntcdiatas . (alas adclantc, como consccucncia do la sintcsis do otros ntcdia(I(n-cs Colllo Ios ICtiCOtl*iCllOS, SC actutullall \ SC aCtjVan ()tras relines . Una VC/, gtlc Ios Icuc()cit(>s alc.utzan la zona infcctacia o intlantada, lillcran mccliadorcs yuc controlan la postCrior ACIIIIIU lacion \ activaci(Sn dc otrts celulas. Sin embargo, cn las rcacci() acs intlamatorias iniciadas por cl sistcnla inntunitario, cl control global dcl proccso depends dcl propio antigcno), dc la misnla forma que controla la respuesta inntunitaria Cn St . I'or Cllo, las cclulas que SC acunTttlan en Ios procesos intccciosos cr()tticos o cn las rcaccioncs ;ultoinnttulitarias (Cn ]as (111C It() C% POSRAC Ch minar conlplctanlcntc cl antigcno ) dificrcn bastantc dc las yuc sc aeunmlan cn Ios ptintos cn que cl cstimulo antigenico desaparccc rapid;uncntc. F\istCll Cuatro sistemas cnzint,itio )s plasmaticos yuc (icscntpcf all papclcs itltportantcs cn ht homc(masis \ cn cl control dc la inflamacion . Son cl sistenta dc la coagulaci(in, cl sistcnla fibrinolitico (plasnlina), el sistcnla dc la cinina \ cl sistema dcl complcnlento . E?n rttuChos senti(i()s, CI sistema (Icl complenlciao actua coma etll acs cntrc cl sistema inttttntitario \ Ios tenointcnon intlamatorios (\- . cap. 41 . El sistema (ic la cinina genera Ios mcdiadorcs bradicinina \ lisilbradicinina kali(Eina ) . La bradicinina es tin nontapcptido con p(xicrosas pr()picdadcs \-asoactiVas, yuc dilata [as Vcnulus, aunlcnta la pcrnlcabili dad \aSCUlar C induce la conttracci(in do la lnusculatura lira . La bradicinina sc prcxiuCC tras la actiVacion (icl factor dc Hagenlan XI I ) del %istcma dc coagulation sanguinea . micntras que I ;t kalidin ;t cs g,encrada tras la actiVaci()n tic] sistema dc la plasmilm () p()r ht accioin dc ] .is enzintas yuc libcran ION, tcjidos (lattacios .

La inflamacion esta bajo el control de las quimiocinas, Ios sistemas enzimaticos plasmaticos, las citocinas y Ios productos de Ios mastocitos, las plaquetas y Ios leucocitos

5-hidroxitriptamina (5-HT, serotonina) factor activador de las plaquetas (PAF)

plaquetas, mastocitos (roedores) bas6filos, neutrofilos, macrofagos

factor quimiotactico de neutrofilos (NCF) IL-8 C3a C5a

mastocitos

monocitos y linfocitos componente C3 del complemento componente C5 del complemento

localization de polimorfonucleares y monocitos desgranulacion de Ios mastocitos, contraccidn del musculo liso desgranulaci6n de Ios mastocitos, quimiotaxis de neutrofilos y macrofagos, activation de Ios neutrofilos, contraction del musculo liso, aumento de la permeabilidad capilar

bradicinina

Sistemas enzimaticos plasmaticos.

sistema de la vasodilatation, contraction del cinina (cininogeno) musculo liso, aumento de la permeabilidad capilar, dolor sistema de coagulacidn aumento de la permeabilidad vascular, quimiotaxis de neutrofilos y macrofagos vasodilatation, potenciacion del aumento de la permeabilidad vascular inducido porla histamine y la bradicinina quimiotaxis de neutrofilos, sinergia con PGE, an el aumento de la permeabilidad capilar contraccidn del musculo liso, aumento de la permeabilidad vascular

fibrinop6ptidos y productos de degradation de la fibrina prostaglandina E, (PGE,)

via de la ciclooxigenasa, mastocitos via de la lipooxigenasa, mastocitos via de la lipooxigenasa

leucotrieno By (LTB,)

leucotrieno (LTD,)

D,

celulas auxiliares .

Fstas celulas . cntrc Las que sc cncucrttran I()s mastocitos, Ios b;ts()filos \ las plaquetas, soil inlportlrltCS Il1Cltics dc Ios mcdiadorcs Vasoactivos Ilistantina \ ;-Itidro\itriptanti

Fig. 5.13. En esta tabla se enumeran Ios principales mediadores inflamatorios que controlan el aporte sanguineo y la permeabilidad vascular o modulan Iris movimientos celulares.

una fucntc importantc de mcdiaclores inflantatr~rirn de rcaccio>n Icnta, cntrc Irn quc SC encuentran los Icucotricnos, la" pros , taglandinas s los tromboxanos (s . cap. 23) . I .as playuctas taurthiCm puccicn scr acticaclas par cl sistema innTtrnitario, sa sea par iniuunrucntlplcjus o par cl factor actis-ador Lie placluctas i, PAF clue pruduccn Icn ncutrofilos, Icn bascifilos s Icrs macrcitagos . Sc crec quc cstc hccho ticnc importancia en las rcaccioncs do hiperscnSoil

Sistema inmunitario en procesos inflamatorios agudos

sibilid:Id de tipos 11 s' 111 .

Citocinas . ESIOS compucstos tantbiCn son imlxlrtantrs en la rran,ntisil;n do whales cntrc I :Is CClulas ell cl curse de las rcsixicntas ill flamatorias. En ISIS tries inicialcs la', CCIUIas tisularcs ell I :IS quc Se csta producicndo la rcaccicin inflantatrlria pucdcn libcrar citocinas cumo 11, I c 11 .-6 . Una s'cz clue Ion linfixitos s' las cClulas n1or1OnUCIcarcs acudcn a la region inflamada, pucdcn ser actin- ados par los antigcnos s liberar citocinas propias f 11, 1, TNF, 11 .-4, IF\y), clue cstimulan atin mss la migracien cclular mcdiante Sun cfcctos sabre cl cndotcho local . Otras citocinas, canto IL-S, son quimiotacticas rI es6nuri.uttes do Ian celulas clue acuden a la rcgiiin intl :unada .

Si se pudiese obtener un raton qua careciese de un gen funcional de VCAM-1, Zque consecuencias tendrfa este defecto sobre la migracien de los linfocitos y sobre la migracien de los neutrofilos? Si se inyecta C5a purificado en la base de una ampolla, ~como se modificaran los

mediadores inflamatorios

desplazamientos locales de leucocitos, el flujo

sanguineo y la permeabilidad vascular? ~Cuales serian los mecanismos implicados? La indometacina es un farmaco que inhibe la formacion de prostaglandinas y leucotrienos . ~Que efectos tendra sobre una reacci6n inflamatoria? ~Por clue?

trasplantes de riven, ~cuales de estas moleculas endoteliales de adherencia seria interesante analizar : selecting P, selecting E, VLA-4, ICAM-1, ICAM-2, LFA-1, MAdCAM-1? 4Por que?

Durante una investigacion sobre los procesos que ocurren durante el rechazo cronico de los

Fig. 5.14. El sistema inmunitario adaptativo modula las respuestas inflamatorios a traves dal sistema dal complemento. Los Ag (p . ej ., procedentes de microorganismosl estimulan la produccion de Ab par las celulas B, entre los que se encuentran las IgE que se unen a los mastocitos, y las IgG e 19M que activan el complemento, que tambien puede ser activado directamente a traves de la via alternativa . AI ser estimulados par un Ag, los mastocitos sensibilizados liberan los mediadores contenidos en sun granules y eicosanoides (productos dal metabolismo dal acido araquid6nico, entre los que se encuentran las prostaglandinas y los leucotrienos) . En colaboracidn con el complemento (que puede estimular a los mastocitos mediante C3a y C5a), los mediadores inducen inflamacion local, facilitando el acceso de leucocitos y de moleculas de los sistemas enzimaticos plasmaticos.

LECTURAS ADICIONALES Baggiolini M, Dewald P, Moser B. Human chemokines an update Annt : Male DK Cell traffic and inflammation . In : Male DK, Cooke A, Owen M, Trowsdale J, Champion BR (ads) . Advanced Immunology . 3rd edn .

Rev Irnnlunol 1997,15: 675-705 . Davies P, Bailey PJ, Goldenberg MM, et al The role of arachidonic acid oxygenation products in pain and inflammation . Annu Rev Immunol Eonet K, Kaldpan EP, Anderson A0, et al. Orchestrated information transfer  -derlying leukocyte endothelial interactions Annu Rev Immunol Harrier ME . VLA proteins in the integrin family : structL,res, functions ano their role on leucocytes . Annu Rev lrnmunol 1990 ;8:365-400 . Hynes R0 . Integrins. versatility, modulation and signalling in cell adhesion Ceh 1992,69 11-25 1996 16.479-83. 1996,14 155-77 . 19842,335-58.

London Mosby, 1996 Proud D, Kaplan AP . Kinin formation: mechanism and role in inflammatory disorders . Annu Rev hnnwnol 1988 ;6 :49-83 . Shimizu Y, Newman W, Gopal TV, et al. Four molecular pathways of T

tion connitors J Cell Biol 1991,113 :1203-12 . Springer ->, Adnesion receptors in the immune system . Nature SprTr, Traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration : the multistep paradigm Cell 1994 ;76:301-14. 1990,346 -125-34.

cell adhesion to endothelial cells Roles of LFA-1, VCAM-1 and ELAM-1 and changes of pathway hierarchy under different activa-

Lub M, van Kooyk Y, Figoor CG Ins and outs of LFA-1 Immunol Today

Anticuerpos y sus receptores

Los anticuerpos (Ab) circulantes reconocen los antigenos (Ag) en el suero y en los liquidos tisulares . Hay cinco clases de anticuerpos : IgG, IgA, IgM, IgD e IgE . Las inmunoglobulinas (1g) estan formadas por una unidad basica que contiene dos cadenas ligeras y dos cadenas pesadas . Las cadenas pesadas son diferentes en las distintas clases de inmunoglobulinas . Las IgA y las IgM se presentan como oligomeros de la unidad tetracatenaria . Las cadenas se encuentran plegadas dando lugar a regiones aisladas, denominadas dominios . Las cadenas ligeras tienen dos dominios, mientras que las cadenas pesadas pueden tener cuatro o cinco dominios, segtin la clase a que pertenezcan . Las Ig se pueden reducir a fragmentos mediante escision proteolitica, de utilidad experimental y terapeutica . A partir de una molecula de IgG, la papaina origina dos fragmentos capaces de unirse al antigeno (Fab) y un fragmento Fc, y la pepsina y un fragmento Rab'I 2 de mayor tamano, que contiene los dos puntos de union al antigeno . Los puntos de union al antigeno estan formados por regiones hipervariables . En los dominios V de cada cadena ligera y pesada existen tres regiones hipervariables . El plegado de estos dominios hate que dichas regiones se agrupen en los extremos distales de la molecula, dando lugar a los dos puntos de union al antigeno de cada molecula tetracatenaria . Todos los anticuerpos son bifuncionales . Ademas de unirse al antigeno, los anticuerpos son capaces de Ilevar a cabo una o mas funciones efectoras . Estas actividades biologicas (p . ej ., la fijacion del complemento o la union a determinadas celulas) dependen de panes de la molecula alejadas de los puntos de union al antigeno (casi siempre en la region Fc) . Las celulas mononucleares, los neutrofilos, las celulas NK, los eosinofilos y los mastocitos expresan moleculas receptoras de inmunoglobulinas . Estas moleculas interaccionan con las regiones Fc de diferentes clases de Ig y promueven actividades como la fagocitosis, la destruction de celulas tumorales o la desgranulacion de los mastocitos . La mayoria de estos receptores de Fcf pertenecen a la superfamilia de [as Ig, y presentan dos o tres dominios extracelulares de tipo Ig .

El recunotitnicnto tic Icts Ag esrranos Cs Lt picdr.t angular tic las rcspucstas intnunitarias adaptatitas cspccificas . En cstc proccso ; s. los recep intcrcicncn tios tipos tic molctulas ditcrcntcs, las I` torts tic Ag tic las celulas T (TCR) I.lir7- 6.1 i . Estas nurlcculas sc caracterizan por su discrsidad y su lutcrogenciciad is-. cap . 8) . Se Ita detnostrado que I a Production tic Ig v LC .R capaces tic reconoccr a muchos A~' ditcrcntcs CS posihlc gratias a un tuntplc jo proceso de rcordcnati<m de genes, Los receptores tic ],is celulas T sc cstttdiaran ton dctallc cn cl taPitulo i . Las Ig son tin grupo tic glucoproteinas yuc se cntucntran prcscntes cn cl suero s, en los liyuidos tisulares de todos los nta mifcros . Algunas sc encucntran fijAdAN a 1 .1 superticic de las CCIu las B, cn dontic actiian conr reccpttrrcs tic Ag cspecificos . t )tras ilos anticuerpos Ab) sc cncuentrarn cn cstacio lihrc cn la sangrc y en la hnta . Para tluc Ias celulas li sc dcsarrollcn t. tics lugar a celulas productoras tic anticuerpos i CPA i, dcnuminadas tambicn tdulas plasnriticas y ctpaccs do sccretar grandcs cantidatics tic Ab, cs ncccstrio que sc produzca un contacto entre las celulas 13 t, el Ag . I ,, Celula plasmatica ,, cs cl tcrmino histologico que sc aplica a LIS celulas productoras tic Ah que se cntucntran en la sangrc y cn los tcjidos .) La innttutoglobufna unicia a la mcmbrana do las CIIUIaS B prccursoras prcsenta la tnisma espccificidad tic 11111()11 que los Ah yuc producira la correspondicntc cclula productora do Ab tras cl proccso tic maduraci6n .

Resumen : Moleculas de reconocimiento de antigenos anticuerpo receptor de antigeno de las celulas B receptor de antigeno de las celulas T

INMUNOGtOBULINAS : UNA FAMILIA DE PROTEINAS

En la macona tic los mamitcros SLIPCriorCS SC lian idcntificado cinco clases ditcrcntcs tic Ig, cuntrctantcnte IgG, IgM, IgD e Igli . Estts clases sc ditcrcncian cntrc si cn cuatro a su tamano, carga, composicion tic aminoacidos v contcnido tic hidratos tic carhono . Adcntas tic [as ditcrcncias csistentcs entrc las distintas clases, las Ig tic tuda una do lus clases son muv hctcrogcncas . Dcsde cl punto do tista clectrotoretico, las Ig tarnhicn nrxtestran una estraordinaria hctcrogcncitiad, aharcando un csPcctro yuc sa dcsdc la traction ,t hasta la traction cx dcl suero normal (jirl . 6 .2 ;1 .

Fig . 6 .1 . Los receptores antigenicos de las celulas B y T derivan posiblemente de un antecesor combn, perteneciendo ambos a la superfamilia de las inmunoglobulinas . El receptor principal de las inmunoglobulinas esta constituido por dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) identicas . Ademas, unos componentes secundarios (Iga e Igli) se asocian de forma estrecha con el receptor principal y se piensa que to acoplan con las senales intracelulares . Los anticuerpos circulantes muestran una estructura identica al receptor de antigeno de las celulas B, pero carecen de los dominios transmembrana e intracitoplasmatico . El receptor de las celulas T muestra una portion ligadora de antigenos constituida por una cadena a y una li (o una y y una ;i), que se asocian con otros cuatro peptidos transmembrana ( ;,, ,i . : : y Q, distintos a nivel estructural de las cadenas del receptor .

71

 Anticuerpos y sus receptores

Las Ig son moleculas bifuncionales ( .111 .1 nl'l1ccula tic Ie c, hitun :i~u1 .11 1'11 .1 rcg,ioll tic Ia nlolccula C, :al)ar tit' tln1r,C .11 .\ , n11critra, tin : -ira region ciercc las dcnonlin,lda, funciorncs Ctctto ras . Entri Cst .h llltlnlas ,C CI1CLIC11 tran la union tic I .l Ig a Icrs tcjidos dcl hucsped, a divcrsas celul .1% de[ sistcnla innlunitarioa a '11gunas cclulas tagociticas v .11 primer colnponcntc 1, ( l y 1 tic [a via da,ica tic] complenlcntor' . La clase y la subclase a la que pertenece una Ig depende de la estructura de su cadena pesada 1 .1 r,trH :tura basi :a tic tonlas I :u nloIciulas tic Ig cst :i tirrnlatia ho 1r 111  :atlelrl, polilrclrtidicas fgeras iticnticas, . den cadenas polipcptidic,ls pcsacias iticlnicas, unicias cntrc si Inediantc enlaces di%ultLro i fR. b. . ;l . I .a clue l. la subclass do una nlodccula dc Ig depcllclc dcl til,o dc :adcna pcsada quo: content subda,c% dc Iv( ; hunlana i IgGI, Ig62, IgG3 c Ie(i41 poscen Ia% :adcnas pcsad .t% 71, y2, y3 N'74 , tluc dificren ligeralncntc en tic ,i, aunyuc toxl :u clla, I)ucdCll set- omsidcradas cadenas 7 . La abundancia rclatiya dc cad .( un .l tic la% cuatror subclascs tic IgG hunlana 1 Ig(i I -Ig( ;41 es dcl lrb, 23, 7 %. 4':, ., rc%pcctiyamentc . Tanlbicn cyi,tcn subclases tic 1g .A hunlana I I~gA I c 11,A2)), pcro no sc conorcn %ubdascs dc Igl) ni Igl-. . Esta hctero gcncidad dc las Ig, yuc pcrlnitc clasificarlas en CIaSC, y stlbdases, ,c ticnormina %ariabilidad isotipici . I'arccc quo: las subclascs do Ig aparciicron cn ta,c% rccientcs tic I .l cc olueioin . A%i- ] .is %uhclascs tic Ii, G 11U1111t1d ,1 a1 ditcrentc, tic la, cu .unl ,ubda,C, tit' IgG 111ut'in .1 1111c lC '(m(I:t 11 Cada clase de Ig ejerce diferentes funciones littias la, 11;,1n1 ~;lutotl~nltrin :l,, pcnl,u Coultt'nid() t'n Ilidr.ltll> tic carbtm1, (n:ila cnirc cl ? , dc la, cl 12 14" tic Lt, IgM, lid) c IgE . 1-.n 1 .1 liolura 0 .4 ,c rcstuucn las propicdadc% ti%icoyuilnicas de las Ig . dc o w,tituvc cl 70 75'%G Lie ]as Ig tortalcs . 1 .1% IgG CtrnSl,tC11 en una tin COCfiCICIItC tic scdinlenta11111, .1 cnodccula tctracatcnaria corn :itrn tic 7S y 1-16 .11()(1 daltons dc pe%o molecular. Sin embargo, Ias protein .(% IgG 3 %orn ligeranlclnc may ores yuc las do las otra% sub clascs ; csto es dcbidor a Ia presencia tic la cadena 73, title cs algo nl,is pcsada . Los anticuerpos de Base IgG, yuc sc enCucntran anlplianlcntc distribtlidors en loss conlpartimicnto% intra y ovtravascular, ,on los prcdorminantcs cn Ias re%puc%tas innnlnitarias sccundaria%, v Ios unioo% Line prc%entan actividad frenic a la% tovinas . Las IgG proredcntc% de la madrc comficren innlllnidad al recicn nacido durantc los primcros Inescs de villa . E%to c% dcbido a tlic, en loss scrcs hunlanos, [as nloldcculas dc Ig(i tic toxi .]s las sul):la,cs son capaccs Lie au'a\csar Ll placenta, perr to title cl rccicn nacido adquicrc un alto grado dc innlunidad pasiya . IM algunas c%pccic%, como of ccrdo, Ia% Ig m .]tcrna% %olalncntc son transferida% ,l ,u% crias despuc% dcl parto I1or mcclio de la lecllc, que conticnc una% IgG capaccs tic scr absorbidas sclcctivanlcntc en cl tractor gastrointestinal . tott .lles . La Inoiccula c% tin pontanlcro de la estructura tctra-itcnaria basica . Call .( una dc la% cadena% pesada% present .] un peso molecular Lie 65 .1)00 daltorns, aproryiln :ulanlclnc, y I :t molccula complcta time tin peso molecular tic 970 .111)(1 daltcnls . La IgM sc cnctientra cornfinada ell cl espacio intrauscular, y cs cl anticucrpo quo: aparece cn mayor cantidad en las ta%c% tetnpranas dc I .l rc%ptic%ta inlnunitaria, sicndor tiCCUCIue %u prcseniia en la ., rcspucstas trecite a nncroxlrganismos intecciosos antigcnicalnetl tc Conllllcjos .
11 .1,

[net. () tic Ia unidad tetracatenaria basic .(, pero en la m .aoria dc (ors Inanliterors Lis IgA scricas son principallncntc polilncrica,, aparc:icndor sohrc toxlor ell forma dc tlinleron . l as I ;~ .1,onl 1 .1, Ig predominantcs cn Lls ,ccrciio iic% %cronitlco%a% como la saliva, cl valor% troy, I.l Icche y las sccrcciornes traclucorbrornquialcs y gcnitorurinarias . I .a NA Lie sccrccio',n i IgAsi, title pucdc pertcncccr a ctlalyuicra dc las subdaxs ( IgAI o IgA2 h, pero Llut' %uclc scr IgA2, %c prcscnta gcncrallnentc cn la tornla dintcrica I IS, 1' tionc un 11c%o molecular do 385 .000 dalton% . Abunda en las %ecreciones se rornlucosa%, en dorndc sc cncucntra as(riiada a otra protein .], dcnonljnada comlxrnclac secretor.

IgD. suponc nlcnors del 1% tic Ias Ig plasnlaticas toltalcs, pcro

.11.11 :,

a1111ntt .1 en las nlclnbranas dc nlucllas cclulas 11 . \o r sc sabe bjen la fiulcio)n biologic.] cucta tic la% Igl), pcro pucdc yuc dc

Distribution de las principales inmunoglobulinas proteinas

IgG. I ., la 1nas abumiamc en cl sucl'or 1lumanor norrlnal, en don

Fig . 6 .2 . Electroforesis de suero humano en la qua se reconoce la distribucibn de las cuatro clases principales de inmunoglobulina . Las proteinas scricas se separan en un campo electrico en funcion de su carga y se clasifican como (fl, (z 2, R y -f, en funcion de su movilidad . (La IgE muestra una movilidad parecida a IgD, pero no se puede representar cuantitativamente por su bajo nivel serico .) La IgG muestra la mayor heterogeneidad en la carga, mientras que las restantes Ig tienen una movilidad mes restringida, limitada a las regiones li y casi'I .

Resumen: La estructura catenaria btisica de las inmunoglobulinas

IgM. Supone aproyimadalncntc cl 10% dc Ias innitulorglobuli-

,A C 7-1 C cadena pesada

IgA. ( on%tituyc cl 15 20'%. de las II; scricas hunlana, . hat Ions scrcs
hi11nano rs, Inas dcl 811% do la IgA %c cncucntra cn forma tic nion6

Fig. 6 .3 . La unidad de una inmunoglobulina se compone de dos cadenas polipeptidicas ligeras identicas y otras dos cadenas pesadas identicas unidas mediante enlaces disulfuro (rojo) . Observese la position amino IN-) y carboxi (C-) terminal an las cadenas peptidicas .

Estructura de los anticuerpos

Propiedades fisicoquimicas de las clases de inmunoglobulinas humanas

propiedades cadena pes da concentraci6n media en suero (mg1ml) constante de sedimentaci6n peso molecular (x 10') semivida (dias) % de distribuci6n intravascular de carbono 9 7s 146 21 45 2-3 3 7s 146 20 45 2-3 tipo de inmunoglobulina IgG1 IgG2 IgG3 13 1 7s 170 7 45 2-3 IgG4 .le 0,5 7s 146 21 45 2-3 IgM
N

IgAl
U.

IgA2
u2

IgsA
u .iu z

IgD

IgE

1,5 19s 970 10 80 12

3,0 7s 160 6 42 7-11

0,5 7s 160 6 42 7-11

0,05 11s 385 il trazas 7-11

0,03 7s 184 3 75 9-14

0,00005 8s 188 2 50 12

Fig. 6.4 . Cada inmunoglobulina tiene un tipo de cadena pesada caracteristico, de modo que IgG posee cadenas ;, IgM cadenas Fr, IgA cadenas u, IgD cadenas ii e IgE cadenas r: . Las variaciones en la estructura de la cadena pesada de una clase de inmunoglobulinas determina las distintas subclases de las mismas . Por ejemplo, la IgG humans se subdivide en 4 subclases, en funci6n de los tipos de cadena pesada . Las propiedades de cads inmunoglobulina son distintas . Observese que en las secreciones, IgA aparece en forma de dimero (IgAs), asociada con una cadena proteicadenominada , componente secretor. La concentraci6n serica de IgAs es muy baja, mientras que su nivel en las secreciones intestinales puede resultar muy alto .

o de hidratos

senipcf1cn algun papal en la ditcrcneiaciiin do: los lintocitos inducida par cl Ag. IgE. AungUC of suero conticnr pc~ca IgE, est,t Ig SC CnCUCntra ell la supcrficic do: los bas6flos v los mastocitos do todos los indivjduos ; tanibicn sensihiliza Las celulas do: algutras nnICOSas, . CUtno la Conjuntiya V las nttICosas nasal s bronquial . Pucdc que ell csta Ig descmpei1c algdn papal la dctcnsa trcntc a Ios liClmlnell los paiscs dcsarroll .idos so: suck asociar mss tos parasites, pcro con las cntcrnicd;uies alergicas, coma el asma o la fchro dcl hcno .

ell ra (uno la rcgicin variable y otro en la region constante) (fill . 6A . En la cadena pesada (y), quo: midc cl dohlc quo: la cadcna ligera, aparcccn cuatro enlaces do cste tipo . ('ads enlace diSUlturc~ genera un bUCIC peptidica> ric 60-70 aminoacidos. Cuando sc comparan las sccucncias do: aminoaCidos tic diCIl0S bucICS, se obscrra un sorprcndcnte grado do hontologia entrc cllas. En escncia, esto quicre decir quo: cads cadena peptidica do: Ig esta

Resumen : La estructura basics de IgG1

ESTRUCTURA DE LOS ANTICUERPOS

El modclo tctr .watcnarir~ IMSICO dC las molcudas dC Ig ' fl) . b. .i i So: bass en la prescncia do: dos tips ditcrentes do cadenas polipcptidicas. la cadena do: mcnor tamauio (ligera) presents un peso moICCUlar do 25 .000 daltons v aparece en todas las clases do: Ig, micntras yuc la cadom do: mayor tantano (pesada) time Un peso n1olccular do: ell cads una do: 50.000-7'.000 daltons v su estruCtttra cs ditcrcntc las dases o subclases de Ig . Las cadenas polipcptidicas se encucntran unidas entrc si mcdiantc enlaces co\alcntcs v no co,llcntCS .

cadena pesada (450 residuos)

So Ira den1()strado yuc Las cadenas ligcras do la ma\oria de los \ertchrad0zs pcrtcnccctt a uno de dos tipos difcrcntcs, dcnominados kappa ( t: ) y lambda (i.') . Estas dos formas so: dcnotninan isotipos . Cualquicr tipo de cadena ligera se I,ucde contbinar con cualquicr tipo do: cadena pesada, pcro en una moleCUla concreta de ill nnmoglohuhna antbas cadenas ligcras son idolticas entire si, al igual yuc OCUrrc con ambas cadenas pesadas . Hitschntann, Craig \ otros inyestigadores dCSCLII)ricrott en 1965 yuc ell las cadenas ligeras SC puccicn distinguir dos regio ncs ditcrcntcs . La mitad LiC la cadena corrcspondicntc :d cztrento carboxilico (aproximadamcntc Uttos 107 amino:icidos) presenta una composici(in constante, con ligeras excepcienes debidas a difcrencias alotipicas o isotipicas (v . mss adclantc ), s . se dcnomina region CI I constantc:hgcra ), micntras yuC la mitad corrcspondicntc al cxtrcmo amino mucstra una variabilidad do: se cuenci .1 nu(Cho mayor, y se ticnonnina region Vi (variahlcaigera ;i .

Todas las cadenas ligeras contienen una region variable y una region constante

-_-,,

"1

cadena ligera 1212 residuos)

Las IgG presentan una estructura de Ab tipicos La nuolccula do IL ,G SC Inicdc considcrar cl Ab ,tipico ,, (.fill . 0 . .51 .

Prescnta dos enlaces diSUIt6ro intracatenarios en la cadena ligc-

Fig. 6.5 . El extreme N-terminal de IgG1 se caracteriza par la variabiliciad en la secuencia (V) tanto de la cadena pesada coma de la ligera, to que se denomina regiones VH y Vt, respectivamente . Et resto de la mol6cula presenta una estructura relativamente constante (C) . La porci6n constante de la cadena ligera se denomina CL, mientras que la de la cadena pesada se subdivide a su vez en tres regiones distintas a nivel estructural : CH1, CH2 y CH3. Estas regiones globulares, estabilizadas mediante enlaces disulfuro intercatenarios, se denominan dominios . El sitio en el que el antigeno se une con el anticuerpo se localiza en los dominios variables. La zona de (,bisagra)) es un segmento de la cadena pesada localizada entre los dominios CH1 y CH2 y es la flexibilidad de esta zona la que permite que dos sitios de union de antigenos operen de forma independiente . Existe una disposici6n pr6xima de los dominios, salvo en el case de CH2 (v . fig. 6.7). En los dominios CH2 se unen moleculas de hidratos de carbono.

Anticuerpos y sus receptores

compuesta do una serie sic regiones glohulares con cstructuras sect]ndaria s tcrciaria (plegamientoi nann parscidas. I'.StO se na11CS tra en la Agrrrn 6.6, tontando coma cjcntplo una cadena ligera . Los bucks pcptidicos formados por los enlaces disulfuro ConStit11a'Ctt la porcion central de tin dominio dc unos 110 antimricidos . Tanto en Ias cadenas pesadas conau~ cn las ligeras, cl primcro dc cstos dominios corresponds a Ia region \-ariablc, VI I 6. -1 . Las cads nas pesadas dc IgG, IgA ~, \'I , rcspcctivamcntc (:It2 y. CO, gttc e It .,I) Conticncn otrrx trcs dominios, En las CaniCnas tt la region constants dc la cadena . Constituarn V t ; haa- un dominior adicional, situado dcspucs de () I I (~ . /iq. 6.101 . Asi, los cxtrenaos carboxilicos do las cadena, pesadas dc IgiM c IgE (dcnominados Cp-l s' (aAt son honaologos al dominio CH .,

Plegamiento basico de la cadena ligera extremo N 96r'

(ail,

extremo C

Fig. 6.6 . Los dominios de la inmunoglobulina comparten un patron de plegado similar en la cadena ligera, constituido por varios fragmentos de cadena polipeptidica rectos, paralelos al eje largo del dominio. En la cadena ligera existen dos dominios : uno constante y otro variable . Dentro de cada dominio, la cadena polipeptidica se organiza en dos capas, orientadas en sentidos contrarios, con muchas cadenas laterales de aminoacidos hidrofobos entre las mismas . Una de las capas tiene cuatro segmentos (marcados con flechas blancas), mientras que la otra tiene tres (marcados con flechas negras), y ambos se unen mediante un enlace disulfuro unico (rojo) . El plegamiento de los dominios VL determina que se expongan las regiones hipervariables en tres asas distintas, aunque cercanas . Se identifica con un numero un residuo de cada una de las regiones hipervariables .

dc las 1gG (( ;y~ l . Mcciiantc cstudios cristalograticos con raos \ sc han obtcnicio datos s(Ahrc la cstructura dc la n101eC111a complcta dc las It G, to clue ha laccho p )sihlc construir 1111 csquclcto do .tonaos dc carbono sic la naakcula_ asi conto nurdclos atomicos dc la misma gcncrados por COMI)utadc~ra I;lig. 6.,1') . En silos sc obscrra due presenta forma dc Y \ Lie T, extrcnao confirmado mcdiantc

microscopia clcctrimici . Los dominios honiAilogos dc Isis cadenas ligeras v pesadas sc cncucntran cnaparejados a to largo dc la region Fah 4 conao sc naucstra cn la/q .6.,-1 . l.os dominios Cy ., de las Cadcnas I,ssa das y tambicn sc cncucntran enaparcjados cntrc st, Hero no asi los dominios CY2, quo: sc cncucntran separados POr IOS sustituycntcs glucidicos . Pose al parccido estructural entrc lo, difercmes dominios, las intcracciones entre silos presentan notables ditcrencias. I'or cjent plo, los dominios variables sC aSOCian nrttttramcnts a travcs dc Li-

Estructura de IgG1

antigeno

antigeno

Fab

cadena pesada (450 residuos)

Fig. 6.7 . Un modelo para IgG1 en el que se muestran los dominios globulares de las cadenas pesadas (H) y ligeras (L); se puede apreciar que los dominios CH3 estan juntos, mientras que los CH2 estan separados . Las unidades de hidratos de carbono (azul) se localizan entre los dominios CH2. En esta figura (y posteriormente en la 6.10) no se muestran los enlaces disulfuro entre las cadenas H y L.

Fig. 6.8 . Modelo generado por ordenador de la proteina Dob IgG1 humana privada de la zona bisagra . Dichas proteinas carecen de la flexibilidad que caracteriza a las moleculas de IgG normales . Su rigidez permite realizar determinaciones estructurales con mayor resolucion . Se muestra una cadena pesada en azul y otra en rojo, mientras que ambas cadenas ligeras se representan en verde. En azul claro se observan los hidratos de carbono unidos a la porcion Fc de la molecula . Este modelo sugiere que las interacciones entre los dominios Cy2 son debiles y las presentes entre los dominios Cy3 son fuertes. La estructrura de esta inmunoglobulina fue determinada por David R. Davies y cols . Pros Nall Acad Sci USA 1977 ; 74) . Los graficos de ordenador fueron elaborados mediante el sistema desarrollado por Richard J. Feldmann en el National Institutes of Health .

Estructura de los anticuerpos

minas ti>rnrtdas Iu,r tees segmcntoos cada una, micntras clue los dominios constantes se asocian ntcdiante laminas coml,ucstas de cuatno scgntcntos . i En la /iq. 6.6 sr mucstra la cstructura do: Lts I ;i minas de lox dominios Lie Ias cadenas ligcras. ) EI ntadcloo do IgG I quo se mucstra en la figznvt 0. SC puede aplicar a todas las inmunoglobulinas cn general; sin c nlbargo, cada una do: las clases y subcl;tscs diticre Lie Ias dem,is en I,cyucitas detallcs . IgG. En cl case do 1 .1 IgG 111,1111,11M, las cuatro subclascs dificrcn ligcr,unciue cntre si en cuanto a su secucncia do aminoacidos. I _a nutoor parte de Ias ditcrcncias so: conccntran cn la rcgi()n do: bisagr,l, (undo lugar a distintas disposicioncs do: los enlaces distil tiiro intcrcatcnarios clue SC tin-nran ctarc las cuatroo protcinas . I .a ditcrencia cstruitural iris notable es la gran longitud de la region do: hisagr;t do: la It G3, a h quo SC dehc Sit n1arar I)cso moIccular v, proobablcnlcntc, h,u'rc Lie sus propicdacics biologicas caracteristicas ~_/?tf . 6.9) . IgM. I-ts Ig~i ltuntanas se stiCICn encontrar en fi,rnla Lie pcnt .inter(o do la estructura retracatenaria basics tl?q. (,.1()) . l.as cadenas tt de la IL,,,\l se clitcrcncian Lie las cacicnas "I en so secucncia de anlinoacidos, asi como cn la prcscncia en las prinlcras de tin dontinio adici(nt,tl en la regi(Sn constante. I ..ts suhunidacics del pentinteroo se encucntran unicias entre sj p(,r enlaces cliNult6ro quo: Sc ti,rnun cntrc Ios dominios ( tt3, v posiblcmcntc ntcdiantc cnla ces disulturo cntrc Ias pcptidos de I S aminoricidos clue constituren cl c\trenio carboxilico, Lie la cadena . La molccula co,nlplcta lot1SIStC en una re` ;i()n central dcnsa dcuie la clue se prot-cctan una cspccie do brazos, conic, so: ha podico comprohar mcdi ;ultc microh,togratias clcctronicas . En Las nticroti,togratias Lie anticucrpos Ig .\l uniclo,s a Ilagclos hactcri;ulos so: ot,scr, a yuc las mo(Icculas adoptan forma Lie -, cangrcjo^ i/ia . 6.11') . 1?sto sugicre quo la region de union entrc los dontinioos ( :u2 t. ( :N3 cs flexible, aunquc na I)rcscnta 11on1ologi .1 estrucnoral um la rcgi(in do: hisages do Ias It G. Parccc quo Ias modificacioncs estructurales quo se produccn cuando Ias mo,lcCULts adooptan la co,nfurnlacioin de -cangrcjc,- cstan rclacionadas con la actit-acioSn del complcnlcnto par parts do las Ig :M . Las n1(dcculas do: Ig :NI prescntan otras dos caracteristicas cspcciales : la abundancia de nx(Icculas de Oligasac ;irido unicias a la cadcna u t la presencia do una cadcna pcpticiica adicional, la cadcna 1 idel inglcs j)initirt, union), quo so: crcc quo intcnicnc CI el proccso de polinurizacion I,rctio a la sccrcci()n do: la ntolccu la por parts do: la cclula productora de Ab . La cadcna J cs tin dog minio parccido ;t las ill finds coil 13,^ ,tn1inoricidors . CAL ntolccula de IgM conticnc una cadcna /, unida mccii;into tin enlace disulfuro a Ias pcptidos de 18 anlinoacjdos yuc constitu-

ten cl extrcnlo do: cada uno do: los mononneros . El enlace So: es tal,lccc coil la pcnultinta cisteina de cada uno de csio,s pcptido>s . En ausencia do: cadenas 1, se lta ohsercado quo la t6rma nias cstable do LAS IgM CS la forma hcxamcrica . IgA. Las cadenas u contienen a;-2 antino,icidos, repartidos cn cu ;ttr() dontinio,s : Vi 1, Cal, (u2 v Cu..3 1 ;/iq. 6.12) . AI igual quo Ias IgM, Ias IgA POSCCn tin pcptido adicional de 18 aminoacidos Cut cl cxtrento carboxilico, cu,o pcnultinta antinoricidoo cs una cisteina a la quo se unen cosalcmcmcntc las cadenas J para furmar dintcnx. En Ias microti,rogratins clcctronicas Lie dintcros do IgA Estructura de la IgM humans

Fig. 6.10. Las cadenas pesadas de IgM tienen cinco dominios con entrecruzamiento mediante enlaces disulfuro entre los dominios Cu3 y Cto4 . En la figura tambien se reconocen las cadenas laterales de hidratos de carbono (azul) y la posible localizacion de la cadena J. En la IgM no se observa una region de bisagra extensa, pero se puede producir la flexion a nivel de los dominios CN2.

Estructura de la IgG3 humana IgG3

VH C-61

tIIIII111I111111 C"/ Fig. 6.11 . Microfotografias electronicas de Ias moleculas de IgM. 1) En solucion libre, la 19M de reno adopta una morfologia estrellada tipica . 095.000 (por gentileza de los Dres . E. Holm Nielson, P. Storgaard y el profesor S-E . Svehag) . 2) Anticuerpo de tipo IgM de conejo (marcado con flecha) clue muestra una configuracion en cangrejo,, con una estructura central anillada parcialmente visible unida a tin virion de poliovirus . .190 .000 ipor gentileza del Dr . B. Chesebor y del Prof . S-E . Svehag).

Fig. 6.9 . Estructura de la cadena polipeptidica de la IgG3 humana, en la clue destaca la region de bisagra elongada,

Anticuerpos y sus receptores

sc ohscr a yuc Ias molo:cttlas presentan fin'ma dc doll1c Y, lo clue suo;icrc quc los nton6mcros sc linen por sus cxtrcmoos a ti-,i% es dc [as regiooncs CO de sit cxtrcmo carhoxilicor i:J7rf . 6.1 .,') . La derma prcdotnin :uttc dc la IgA de sccrecio5n IgAs i cs una molccula coil tin CtleliCICntC do ,coiimentacion dc I IS (peso molecular dc 380.1)()() daltoons ) . La molccula contpleta csti fiorma da poor dots unidadcs dc IgA, cl compooncrac secretor (p . In . . '0 .000 daltonsl s una cudcna I i p. m. 15 .000 daltons J ll!~ . 6.14) . No esti clam conic sc Linen entre Ni la ditercnics cadcnas. Fl componcnte secretor nor cs sinteiizadoo poor las cclulas plasmaticas, conto ocitrrc corn las cadcnas J, sino poor las cclulas epitclialcs . Las IgA, en su forma dimcrica estahilizada por la cadcna I, son sccrctadas

por las cclulas pLISIMiticts suhnrucos:is, s-a IInCIl al coml,ooncntc stcretoor al atraxes,ir las capas dc CCIuLas el,itcli ;tles . IA Union del coonlponcnte secretor facilita cl transporte dc la IgAs haste Lie secreciones, \. cicrce till cfi'ito protector frcnte a los agentcs prootcooliticos. La class dc IgA quc pre(lonnina ell SLICro CS la IgAI :tprorximadamcnte el 90% de IgA), igual yuc succdc ell las sxcreciorncs nasalcs, la saliva, la Icchc s . la,, Ligrimas (?0 195'!,, do la IgA total) . Sin cmhar~-o cn cl colon predormina IgA2 iaprooxinudamcntc 60'''i, del total dc Ig .A ) . Muchos dc los microoorganismos yuc lta hitan rn Ios traetc,s respiratoorio . gastrointestinal hall adapta do al entorno producen prootcasas (Iuc CSCindCIl la IgA) .

Estructura de la IgAl humana

IgD. Las lgl) rcl,rcscntan ntcnoos del 1"dc las inrnunogloohtilinas scricas tootalcs . Estas protcinas son m;is scnsihlcs a la prootcblisis quc las IgGI, IgG2, IgA c IgM, presentando ademds una tendencia a cscindirse espontancamcntc . Parsec yuc shire Las cacICnaS of solatrnente cxistc till enlace disullitror .\r clue conticnen

Estructura de la IgA secretora humana (IgAs)

region de bisagra

cola peptidica de 18 residuos

Fig. 6.12 . Este diagrama muestra la estructura de dominios de IgA1 y la posible localizacion de las unidades de hidratos de carbono (azul) . Se puede apreciar la existencia de tin fragmento de 18 residues en el extreme carboxi terminal (caracteristica comtin con IgM) y la region de bisagra.

Fig. 6.13. Microfotografia electrdnica de los dimeros de IgA. Esta morfologia de Y doble indica clue las subunidades monomericas se Linen en sus extremos C-terminales a nivel del dominio Cu3 (por gentileza del Prof . S-E. Svehag) .

Fig. 6.14. El componente secretor de IgAs rodea posiblemente al din,ero y se enlaza mediante dos puentes disulfuro con el dominio Cu2 de tin monomero de IgA. Se necesita la cadena J para unir ambas subunidades.

Funciones efectoras de los anticuerpos

grandcs cantidatics dc hidratos dc carbono en forma do miiltiplcs sustituycntcs oligosatarfdiccs tJic7 . 6.ISY . IgE. Ell la . ~grrra 6.16se muestra la cstructura de las IgE. EI mayor pcmr molecular do las cadcnas r. 172 .500 daltonsh sc dcbc al mawt miinctvt dc :urtinoicidos 1550, apr(rximadamcntc i, yuc sc cncticntt:ui rcpartidos en cincct dttminios (\'t1, (a : l, C12, 0.3, y Ce41 .

suclcn scr cspccificos do cada Lino dc los doncs dc cclulas B iidio tipos priyadtny, pcro cn algunas ocasioncs son contpartidos pttr yaritts dttttcS do las ntismas f idiotiptts ptiblicos, dc reacci61l cruzada tt rccurrcntco) .

/ FUNCIONES EFECTORAS DE LOS ANTICUERPOS

atkitigentt . En La funcion principal de till anticuerpo CS unirse a algunos casos, csta ullitin proyoca tin ctccttt dirccto, pttr cjcmplo ncutralizando toxillas bactcriallas tt impidicndo la pcnctracion tic los virus cn las cclulas . Sin cmb.u -go, la intcraccitin cntrc cl anticucrptt ~ cl antigcntt It() suck toner CUt1SCCtiCltilaS a ntt scr yuc cn trcn cn jucgo funcioncs -ctcctoras sccundarias (x . Jyjs. 6.1'y 6.18j . I .a actiyacion dcl sistcnta kid complcmcnttt cs Lilltt tic los mccanismtts cfcctorcs ntas imp(wtanics dc las molcctilas tic IgGI c I;-G3 . El sistema del complcmcnto CS tin comhlcjo colljullttt do
Sit

LAS DIFERENCIAS DE SECUENCIA ENTRE LAS MOLECULAS DE ANTICUERPOS PUEDEN SER ISOTIPICAS, ALOTIPICAS 0 IDIOTIPICAS
Variabilidad isotipica . I .(,~ ~ , ;cncs tic iaN \ ariantcs isotillicas sc cncucntran hrcsclltcs cn tttdos Itts intiiyiduos sands tic una de tcrminada cspccic. Por cjcmplo, cl gcnoma humallo conticllc los genes dc la, cadcnas yl, y2, y3, y4, la, u1, a2, S. c. h y i., por to yuc son isotipos . Variabilidad alotipica . Fstc tcrmino sc rctierc a la Variabilidad ,,Cnctic :t yuc existe cntrc Ion intliyidutts do ti1llt misma espccie, dcbido a la prcscncia dc ditcrcnics .Helots cn kill mismo lttCtls. Pttr cjcmplo, la Variants dc I~;li3 dcnttmillada G3nu b- ) sc caracteri za por la prcscncia dc una tenilalanina cn la posici6n 436 dc la cddcna pesada y3 . Esta y :u-ialltc not SC cncucntr :t cn tttdtts hts indiciduos, por to ytic COnStitti\'C Lilt ahttilxt . Lots ahttipos suclcn scr debidos a la prcscncia dc varianics dc ]as regimes constantcs dc
las cadcnas pcsatias .

Estructura de la IgE humana

Variabilidad idiotipica . La yariabilidad dcl dominitt yariahlc, cspccialmcntc tic skis rcgioncs alt :uncntc yariahlcs, dcnominadas hipcryariables, da lug.u .t Itts idiotipos . Los idiotipos dctcrmin :ut la cspcciticidad dcl [)unto do union al antigcno . Los idiotipos

Flab'),

Estructura de la IgD humana

- Fc

Fig. 6.16. La IgE se puede escindir de forma enzimatica dando origen a los fragmentos F(ab'):, Fc y Fc'. Destaca la ausencia de region de bisagra.

Resumen: Funciones efectoras seleccionadas de [as clases y subclases de anticuerpos humanos funciun efectora filaciort del (:omplomento (via clasica) transferencia placentaria union a la proteina A estafiloc6cica union a la proteina G estreptoc6cica Fig. 6.15. Este diagrama muestra la estructura de los dominios de IgD y ski caracteristico gran numero de oligosacaridos . Tambien se aprecia la region de bisagra y las colas octapeptidicas cortas . Fig. 6.17. Estas funciones efectoras se asocian con diversas partes de la region Fc . La transferencia placentaria de IgG en el hombre y el transporte intestinal en los roedores vienen mediados por tin receptor parecido al CPH de clase I (v . fig. 6.23) . inmunoglobulina 'gG1 IgG21gG31gG41gM IgA IgD IgE ++ + + + +

Anticuerpos y sus receptores

protcinas scricas quc intcr\icncn CI) la's rcaccioncs inflanratoorias i t . cap . ; ) . Una ccz clue sc ban unidoo al antigcno, las I :g,\I, Ig(; I c IgG3 soon capaces do acti)ar la cascade del Coan1)I(2nacnto. Parecr yuc las IgG2 actj)an cl coomplcmcnto coil mcnor cficacia, mien tras clue las IgG4, IgA, Ig1) (' IgE no to acti)an en absoluto . I .us It, intcraccionan tic ti orinas mua di)ecsas coil ditct-cntcs tipos dc celulas 0. 181. Estas intcraccioncs sc prooducon a traces dc rccc1)torcs dc All yuc sc oitcuciatr:ua on la su1)crficie tic didaas cclul,as.

RECEPTORES DE ANTICUERPOS
Existen tres clases de receptores de IgG en la superficie celular

I .tro rcecl)toorc' dc IgG sent los niceliaclorcs dc di\crsas funciooncs olccton-:is . Sus .tcti)'idadcs l)ioloigicas se supcrl)onic I cntrc si c sun dcscncaticnadas poor cl ctatrccruranaicntoo yuc proo)ocan la" inIII uiOglohulinas adccuadas. Las princilmIcs tunciooncs cn la" yuc imcnicncn son la EZgocitocis, la citOtosicidad cclular- dcpcndicnte do :uiticuorl)us, la lil)cracio)n do mcdiadoorcs \ In cstinmlacion tic ha prescntacioon dc antit;onos. F:n la actualidad, sc ctnloccn trcs grupos do receptores do Ig(i IlUmana on la su1)crfcic cclul .u- : FcyRl)(1)64), FcyRII I ('D32 h v 1-c ;RI I I CD 1() I . TOdo os cllos so: caractcrizan 1)or 1)rc scntar dominios cxn-acclularcs yuc nauestran uma ctnasi(Icral)IC hoonaooioogia con las rcgiOnes \ do LIS innautaugloohulinas, cs dccir, pcrtonoccn a la s{r1)orf :unilia de LIS inrnun0gloohulinas, al igual yuc I cuR, ill) receptor cs1)ecificoo LIc Its ni0lcculas de IvA. Propiedades y distribucion de los receptores de IgG El receptor Fc/R1 i CD04 i sc unc con alta afinidad i; 10' 10' M ? .t loos ntontimcros tic Ig(~, %n distribucion no cs tall C()IIIo la dc los otroos rcccl)torcs . 1-.1 rcccl)toor FcfRl l i (:1)32) csta amplianiciuc distribtri(1o cntrc los distintoos til)Os CIc cclula y, cn much :% dc cllas, cs cl tinicoo receptor quo: se expresa. Se ono con haja afinidad i < I fl .\t i c\ clu,i) :uncntc a Its IgG quc sc cncuentran forinando complcjus o poolinicrizacias . l . c;RIII iCD16) csta altamcntc glucosilado, ~' so: c.xprcsa en forma dc nioolcculas quc abarcan un amplio rango do pesos nao Iccularcs (50 .01)0 3() .(111(1 daltons) . FcyRlI[a cs cxpresadoo poor Ion nracrcitagos, las celulas \h y aalgunas celulas T, c intcracciona t:uito con la Ig(; mononicrica conio con la yuc SC cncucntra fiormandoo complcjoos iafinidad 3 x Itt M j . LI Fc!RIl11) unicio a NO cs cxprcsado solanicntc Por Ios grantilocitos t. prcscnta una baja afinidad 1)or Las IL G i<10 ht') .

Los receptores de IgG constituyen un grupo heterogeneo loos ircs rc(cl)toorcs do Fc ; pucdcn dar lugar t 12 is(cti)rmas, \ sc lit doscrito) la existencia dc poolinioorfisnrt) 'citctico Cant" cn cl caso dc Fc -gRI I como cn cl do I : c,,Rl 11 . Adcmas dc csta lictcrugcncidad intrinscca, czistcn indicios do quo: los rcccptorcs soil ex1)resados cn la superficic celular en fiorma do complcjos, as0ci ados t otras caticnas . I lasta la tcclia, se han idcntificadoo dos cic cstas cadcnas, cn conal)Icjoos receptores no o rclacioonado s: " FcyRI sc puctic asociar con dinicros dc cadcnas y unidos cntrc Ni mcdiante cnlaccs diSnlfllr- t), tcnomcno clue tanibicn SC ob scr) :a on cl c:%to do Fct:Rl . " FcrRl f la se puctic asociar con cstoos ntistlios dinicros tic cadcnas y, coil dimcros dc cadcnas L dc Ion conal)Icjo)s T( .R o con hctcrodimorosy-1'. Adcnias do: inipcdir la dcgradacioin dcl contplcjo FcyRI I la cn cl re ticuloo cndoplasntitico, 1)arccc yuc cstas cadcnas asoociadas son cscncialcs cn cl pro ceso do transduccitm dc scnalcs . En cl casoo do FcyRl l lb ligado ,a PIG, quo: como sc ha indicado se encucntra asoociadoo a PIG, sc coo quc noo soil nCCCslrlds Its ctdcnas ,I ni las ; I /iq.

En ha Actutlidad SC coonorcn door ti1un Jitcrontos dr rrcrlxonrs cc lularcs dc Igl; 0.201 . Los mastocitos ) . los hasofilos 1)osccn cl receptor tic IL,, . do alto afinidad f FcsRI ), yuo cs Cl reccl)toor do IgE clasicoo, > . Estc receptor liortna partc do la strpcrfamilia gcni ca do la, innum0 ,1h>hulints CS hastantc difcrcntc dcl receptor dc Fc do Lis IgE tic haja afinidad i Fco- ;Rl I i, t1uc sc cncucntra en Ioos Icucoocitoos v en los linfi)citos. El receptor LIc haja afinidad no proccdc cculutix :u)acntc do la su1)ertanifia dc I :is innttua0t;loohulinas, sino yuc prcscnta una considerable hoomoologia con discrsas Iccti MIN dc on-igon ,utint .tl, cornrioo h Icctin,a fijadora do man0s,a i .\I1)1 .1 . F6 : RI es el receptor de IgE de alta afinidad FtERI prcscnta una cstructura tett;uncric.a i \. - h<<) . 0.2111 . l a cadcna u. 45 kdal j SC oncucntra glucosilada c yuoda cx1)uosta cn 1 .1 sulvrfit :ic celular. Laos _lb ti-onte a la cadcna u impidcn la union do las IgE al receptor, Vpucden desoncadenar la liberaci6n do histamine a Imi-tir do basoifilos dc ratuncs Icuccrnicoos . Es probable quc los hiciratos do carl)oono proteian a Ia cadcna a fi-cntc a los agcntcs pro tcoliticos scricon, conao ocurrc cn cl cast) dc mochas Mras protoinas do nicnibrana . Sin embargo, no cs I)rol)al)Ic yuc ciidtoos laidratos dc carbonoo do la cadcna u tengan rclaci()n alguna coal la union dc las IgE v la liheracioon dc liistamina nudiacia Door ]as naisnias . La irnica cadcna JI kdal I t . las do .,, cadcnas ;~ (9 kdal ), cs tas dos ultinaas unidas nicdiantc cnlaccs disulfuro, soon coml)o-

Las IgE se unen a dos tipos diferentes de receptores Fct :

Resumen: Funciones de union de las inmunoglobulinas humanas receptor celulas mononucle res Fc,RI Fc ;Rlla Fc Rllla FctoR FCCRI1 FcQR neutr filos F c- , Rlla F(:,Rlllb Fc,tR masto itos/ Fu RI basoflos + + + + (+) ++ + + + Fig. 6.18. Todavia queda por definir una compleja familia de molecules receptores capaces de unirse con las inmunoglobulinas (en esta tabla se recogen algunas) . FctiR se expresa en las celulas B activadas, pero no en las celulas T o los monocitos . Fco:RI1 tambien se expresa en los eosinofilos, las plaquetas y los linfocitos B y T. inmunoglobulina IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IyAl IgA2 IgAs IgD IgE

Estructura y funcion de los anticuerpos

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ncntcs cscncialcs del conaplcio rcccl)tor U07- So" "Cccsal- ias 1 1 .11-a Clue cl reccl)tor sc cxl)rese en I .a strperficic celular, \ I)ucdC yuC do SCnrl)ClICrt algina I)apcl cn la transduccion dc scnalcs . I'll receptor intcracciona con cl c\trcmo distal do [as cadcnas pcsadas dc [as IgE, CS dCCir, Con rcgionC." I)crtcnCCicntcs a Ios dominion (:r:2 o 0:3 . Esta intcracci6n cs altanacntc csl)ccifica, ;1:. Cs natl\ alto) (apr() \ cl \al()r dc la co)nstantc dc union dc I .a I` cimadanacnte 1(l" NI ~ ). Se tree title III la union cntre el coniplejo receptor _V una IgE, mono\alcntc ni la do una sofa naoIcCUla dc IgE Con un sustrato r'CStl4art sutiCicntc I)ara actisar :t Ios naastocitos o los basofilos, \a quc no) da Iugar a la libcraci(In dc histanaina . Para quc SC dCSCnC7dCnC la dcsgranulacioin cs ncccsario quC CI antigCnc) u 0tras na0I000las cntrccrucen \arias molcculas do IgF: unIClas a la sul)CrfiCic CClular. l)arccc yuc Icn hidratos dc carbonao unidos a la I)rol)ia IgE no timer iniportancia cn Cuanto a la intcracciom Con EcsRl . Se crcc quC cl unioo papcl quC descnapcnan cst.i rclacionado con la

SCCrCcion dc las IgE a Iru- tir dc las cclulas B . Hasta hacc poco ticnapo, sc l)ensaba quc cl receptor tic IgE dc alta afinidad aparecia C\clusi\anaente en l(). nrastoCitos \ en los basi)filos, I)cro hay datos recicntcs quc indican quc ],is cclulas dc Langerhans las cclulas madre POC1rian poster tanibicn estc receptor. Fc :Rll es el receptor de IgE de baja afinidad Id Fo :RlI (( l)2 .; s dc l()s hnti)Citnrs launaano)s ?4S kdal l prescnta l .as caracteristicas til)iC .as tic Una na0I000la dC ha ,UI)CrfiCiC CClular, Cs dccir, un dominio) tr:uasnicinbrana, l)cro time la Iru-tiCUlaridad dc quc SC CnCUentra co)locado en pcnici6n in\crtida con rcsl)ccto a la mcnibrana CClular, I)roycct:indone cl Cstrcnio carboxilico) hacia CI mCdio) cstracclular (\: fiq . 6.2111 . AI conrrario quC otro)s rcceptorc. tic Fc . 1-ciAtIl no I)crtcnccc a la sul)Crtuilia de las innaunogl()hu liras, sing a UIta sulvrtanafia I)rinaiti\a dc lectina." dc origcn animal . E,n la actualidad sc han idcntificado, clonado \ SCCUCnciado dos h)rnaas dc Fcz:Rll lium ;uao . Sc ditcrenCian unicanicntc cn la region citoplasmatica, cs Liccir, cn cl cxtrcmo amino), naicntras yuc sus donainios cxtracClulares son idcnticos. I c) :RI la cs cxprcsado Constituti\anacntc por ]as CCIUlas B, micntras (]Lie la CV l)rcsioin dc FccRI II) Cn las cclulas T, Cclulas B, nt()n()Citos \ Cosinofilos cs dc naturalcza inCiUCihIC, sicndo acti\ada l)or la Citocina IL-4 . Las Ccluhrs 11 \ los monocitos dc Icn indi\iduon Cont CCCCnta, asi como los lint')cito)s de los pacicntcs con ficbrc del hero, sucIcn cyrcsar cantidakics anornialmcntc clc\adas dc Fct:Rl 11).

Resumen: Interacciones entre determinados receptores fagociticos y las inmunoglobulinas

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LOS ANTICUERPOS

La estructura y funcion de los anticuerpos puede ser estudiada mediante su fragmentation con proteasas I.a p:rl, .aima, una I)r()tcasa Cie o6t[Cn \Octal . CsCindC la n1NCCUI.a dC I~,l ; Cn I,t rri;ioii) dc Nsagra situada cuu- C Ion dominion ('pl \ (',;,2, Receptores Fc de IgE

FCr:Rl

Fci.RII (CD231 dorr)inio Lie homologia de lectina

` _A-- - -

Fc-,.,Rlllb (CD16)

Fig. 6.19. Las estructura ." del receptor Fcy humano Clue se muestran en la imagen corresponden al FcyRI (expresado por los monocitos), Fc;,Rlla (expresado por monocitos y neutrofilos), FcyRllla (expresado por los monocitos y ligado como una proteina transmembrana normal) y Fc;-Rlllb (expresado por los neutrofilos y unioo mediante un enlace de membrana con fosfatidil inositol glucano (PIG). Cada receptor pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas y expresa dos o tres dominios extracelulares parecidos a estas. En la actualidad se sabe Clue varios de estos receptores existen en forma de complejo con diversas subuniclacies unidas mediante enlaces disulfuro. Tanto Fc , Rl como Fc-1RIIla se asocian con dimeros de la cadena y descritos originalmente como parte del complejo FCCRl de alta afinidad (v . fig. 6.20) . Tambien se ha demostrado Clue FcyRllla se asocia con dimeros de la cadena ; presentes en el complejo TCR-CD3. En el caso de Fc -(Rllla, estas subunidades se pueden asociar como homodimeros (y=r o )o heterodimeros (y j y parecen esenciales para la expresion de superficie y la transduccion de senales. En las interacciones de Fc1Rl parece Clue el receptor se une con una zona estructural cercana a Leu 235 en el dominio CH2, presente en IgG1, IgG3 e IgG4.

Fig. 6.20. El modelo de Fm:Rl propone una estructura tetramerica constituida por una cadena u con dos asas parecidas a las de las inmunoglobulinas ligadas entre si mediante enlaces disulfuro . La cadena (i tiene dos porciones extracelulares cerca de las dos cadena ." y, unidas mediante enlaces disulfuro (rojo) . La cadena )x resulta fundamental para la union de IgE . El modelo de FCr:RIl es hipotetico y se basa en los datos de secuenciacion y en la homologia con las lectina ." animales . La escision mediante proteolisis puede fberar varios tipos de factores Clue se ligan con IgE, incluida una molecula ' CD23 soluble de 23 kdal, Clue contiene un dominio lectina . Esta ' escision se inhibe por IgE, to Clue explicaria la aparente estimulacion de la expresion de FCCRll en los linfocitos cultivados en presencia de IgE.

) TAD DE ESTUDICS SUUL, .-.kES " cuaurlruN CAMPO 4

Anticuerpos y sus receptores

tructura c firncicin coil la do otros subfia(mentos, Como pFc' .

ciandoo lugar a dos fragmcnuos idcnticcos Fab icicl inglct anthirn hindintj, union al antigcno) c a till fi-agmcnto Fc icristalizahlc) . Estos ti-agntcntos gcncraclos poor la papaina hall silo cxtraordinariamcntc atilcs cn los Cstudicos sobrc la cstructura S lunciin do las mcolcctilas Lie anticticrpo, sa quc cn cllcos yucdan scparadas la rcgic'n Fah, poor la clue CI anticucrpo sc unc al antigcno, do la rcgic'n Fc, Lie la clue dcpcndcii l :ts tiutcioncs etcctcoras, Como la fijaci'm del comPICmCntco o I :t union a los lltoncocitos . La region Fc tanibicn cs importance cn cl prtoc"oo Lie transfcrcncia a traces do la placenta . Cuandio sc soometc ,t Icos anticuerpos a digestion priolongada con papaina, sc ohticnc adcmas till tragmcntco Lie dcgradatiill do la region LICncomillado ftagmcnto Fc . Fn la lignra 1 .31 sc mucstran al guncn do Icos puntoos princil,alcs do rscisioon cnzim:itica . La l,epsilla CS otra Cnzinta quc tambicn Itt rCSUltado titil cn los cstudios accrca do la cstructurt y fiincibn tic los anticuerpos, y quC cscindc la,, IgG cn dos fragmentos principalcs : cl fragmcnrco Ffah'r  yuc a grandcs rasgos csta formado poor las dos rcgioncs Lie Fah unidas mcdiantc la rrgiiSn bisagr:t, cl tr :tgnuntco pFC', clue corrcspondc al dominio C:y3 do la molccula . Sc conocen muchas otras enzimas capaces tie escindir la mcolccula Lie IUG . Glla ch ;'csfi6n hrcsc con tripsina tic tiagmcntos Fc tratacitos prc\ iantcnte coil acidos da lugar a la scp:traciont del dominio Cy2 ; cl aislamicnto do cstc fragmentto ha pcrntitido ccomparar su Cs

muestrun una extratordinaria , ariahilidad_ Estos segmcntos sc dcnominan rcgiones hipcr\ariablcs ~- sc cncucntran situaclos cn las proximidadcs Lie los aminoacidos 30, 50 \, 95 girt. 6.32) . Conuo estas regimes ltipcrs :u-i ;tblcs soon las clue clan lugar al punto de union al antigcno, cn algunas ocasioncs tambicn sc dcnominan rcgioncs cictcrminantcs do la complcmcntaricdad { RDC; ) . Los scgntcntos pclotidicos intcrcalados entrc colas sc dcnominan rcgiconrs cstructur:tles ( RE I . En [as rcgioncs V dc las cadenas ligcras y pcsadas cxistcn trcs RDC f RDC1-RDC3,1 y cuatro RE i RF. I RF4 j . ( El origcn de csta hipervariabilidad sc estudiara coon dctAIIC ell CI Cap. 8 .1 Las rcgioncs variables Lie las cacicnas ligcr:ts ~- l)csadas SC cnCucntran plcgadas do ttl donna quc ]as rcgioncs hipcr\ ariablcs clue clan situatlas ntut pr6xintas cntrc si, dandoo Iugar a una supcrficic a la quc SC Line cl antigeno . Fstas regioncs estan situadas, aproximacianacntc, cn los dohlcccs tic [as cacicnas pcptjdicas 1 . iit. 6.61.

Las secuencias hipervariables del punto de union al antigeno permiten a los anticuerpos unirse a una amplia gama de antigenos

DCnir,o dr las rr,iomcs c .tri .thlt's tic Lts :30"las pcsaths t hgcr.ts cxistcn cicrrt>s scgmcnroos l,oolipCl,tidjcaos Lie l,oca Icongiru(i yuc

AI contr.u- io yuc CH CI t;tuo LIC Icos lnutttos dC uni(M al :uttil"C1W Lie Icos anticutrptos, quC lucnm dCscubiernos r,tpid .uncntC, la ItocaliiaCicin exacta tic la nla\Y)rl :l cic las fiincioncs etcctoras dcntro tie la Cstructura tic los antiCLicrpos ha rcsultado muclao mas ccnrtl,licatia . lrliCialmentC, SC obtusicrcn clatcos l,rcocisicnI'll CS mcdiantc Cstudicos 11c, ados a :aho coil ti-agntcntos proccdcntcs tic la digcsti(Sn cnzi ntatica * mcdiantc cxpcrimenuos de inlubici6n coon peptidos, pcro los as - :vices fucrton mtn Icnttos It,ta la intl-o iuttion Lie las CccnitaS de nuuagcncsis dirigida . Fsta tccnica perntiti6 a los imestigaticn -es modificar sciccti amcntc los aminoacidos Lie cicrtas posicioncs tic

En la actualidad se conocen muchas de las regiones que ejercen las funciones efectoras de los anticuerpos

Escisi6n proteolitica de la IgG1 humana

Flab') Z

Variabilidad de aminoacidos en la region variable de las cadenas ligeras de inmunoglobulina

peptidos de bajo peso molecular

OOOO OOOO

pFc'

variabilidad 150--

100

PEPSINA 50

puntos de escisi6n secundarios por papaina

75 FR1 CDR1 FR2 CDR2

100 posici6n

FR3 CDR3 FR4

43
70 J

Fc

Fig. 6.21 . La pepsina escinde la cadena pesada de IgG1 humana en las posiciones 234 y 333, liberando dos fragmentos Flab') y pFc' . La acci6n progresiva de esta enzima reduce el fragmento central a peptidos de bajo peso molecular . La papaina rompe la molecula a nivel de la zona de bisagra (residuo 224), liberando dos fragmentos Fab y tin fragmento Fc . La acci6n secundaria sobre el fragmento Fc a nivel de los residuos 341 y 433 libera Fc' .

Fig. 6.22. La variabilidad se calcula comparando las secuencias de muchas cadenas individuales y, para cada posici6n, equivale al cociente entre el nbmero de aminoacidos distintos en esta posici6n y la frecuencia del mas frecuente de los mismos . Las areas de mayor variabilidad, de las que se encuentran tres en el dominio VL, se denominan regiones hipervariables . En algunas secuencias estudiadas se hall encontrado aminoacidos adicionales, pero en este ejemplo se hall eliminado para facilitar la comparaci6n y su posici6n se indica mediante flechas. Las zonas sombreadas en amarillo corresponden a regiones de hipervariabilidad (RDC) y las mas hipervariables se serialan en rojo . Las cuatro regiones estructurales (RE) se marcan en amarillo (por gentileza del profesor E. A. Kabat) .

Estructura y funcion de los anticuerpos

la caticna polipcptidica, comprobando tic csa ti,rnla la inlportat cia do aminoacidos concrctos con rcspccto a tuncioncs sonorous . L'na do las prinlcras imrstigaciones en la clue sc utilizo esta tccnica ttno [)Or- objcto cstudiar la actitacioin CICI coml,lcnlcnto por parts dc las IgG . En los printcros CsttldiOS t- a sc labia intuido quo: cl subcoonlponacnte C ICI do ( :1 intcraccic,naba coil cl dominio ('y2 do la, Ig('1. Sr utiliz(') la nttltagcncsis diri ,.,ida para localizar cl punto do union de ( ; I q, quo resultoi cstar comPucsto por trcs tic las cadcnas latcralcs do C-,t2, Glu 318, 1,\- s 320 Lys 322 . Parece clue esta Cstructura clc anlinoacidos inter\ ions cn todas las interaccioncs cntrc Lts n1olcculas do ( : l q v tic IgG . En cl caso do la IgM, parccc quo: cl complcmento so: actit a mcdiante un nlccanisnlo ditcrcntc . La IgNt circulantr libre, quc prcsenta una conti,rlnaci6n cn ti,rma tic cstrclla, cs totalntcntc incapaz tic acti, ar el contPlcnlento, mientras quc Cn cl nlonlcnto ell quo: sc unc a un 111tigcno SC Con,lCrtC en un l,ouCntc actin odor. FCinSteln cols . stlgiriercm yuc ell Cl l,roscso do unicin de la It \I a un antigeno lx,limcrico o reticular, l ;ts unidatlcs ha,' yuotl :111 ticsplaza tias do su plano original, dando lugar a la coiltornlaci6n denonli nada do cangrcjor , clue sc obscr,a Cn la microscopic clcctro>nic .1 C t'. hq (z ll ; . Estos cambios contorlnacionales podrian poner al dcscubierto un anillo de p111ttOS do union a ( : I q clue, cn la cont'0n- n1aCioin tic cstrclla de la Ig11, se cncontranto cscondidos, dcbido a la cstrcclta t ustaposiCiCnl entre las uniclaclcs . Sc crcc quo los aminotitle ocuacidos implication soil His 430, Asp/Gh -132 \ . Pro 436, del dominio 0113 analoga a la propucsta en pan una posici6n dentro CI Caso CICI punto do unicin a ('IC] tic] dominio ('Y2 tic les IgG . Las n1olcsulas do IgG intcraccio,n:u1 tom 1111 :1 :unplia ganta de rcocptorcs cclularcs do Fc . 1 .01, CSCtltl1U5 Ilct ado,s ;t cabo con nnctagcncsis dirigida sugicrcn clue cl receptor Fcyl(I tic alto afini lad do los nlonocitos intcracciona con una cstructura situacia alrcdcdor tic una lcucina quo ocupa la posicioin 235 tic la cadcna pcsa da do la 1 ,,(i, cntro of dominio ( :y2 t . la rcgion do bisagra . En CI monalento actual so: haul analizado con grin rcsoluci6n [as interacciones cntrc la IgG matcrna v la Fcl(n parccida al CpH de class 1 csl,resad ;t cn cl cpitelio intestinal tic la rata rccicn na silo (, . jiif. 6.23j, title sr croon similarcs a I :ts clue sc producer entre cl analogo en la placenta hun1 :uta hFCRn \ la Ig( ; materna . Fc cntra cn contacto con FCRn sobrc todo cn la tuna tic union entro los dominios CI 12 y ( H3, hacicndo quo: SC supcrponga cl punto do union dc In protcina A . Es probable yuc trcs o cuatro,

residuos tie histiclina rcsultcn tundanlcntales en este prolccso, do forma cluc la cargo tic las histidinas podria czplicar quo: IgG so: ]Iguc coil FLAIL con un [III do 6,5 (el l,rcscntc en la Icclte ingerida l se sucltc coil pH 7,5 (CI Salli I'ara Cl esttuiio tic Ion puntos tic interaccion entre las moleculas tic IgE t. los rcocptorcs FcrRI do lots nlastocitos, o los reccl,torcs Fct .RlI de ] .is cclulas 11, so ha trtilizacio otra tcuuca tic illgcnicria genctica . SC han sintctizado pcl,tit]os rccontbinantes clue contiencn secuencias iticnticas a I :ts do las cadenas t: %, despucs SC ha cictcrnlinado su capacidad part inhibir ],is intcraccioncs coil lo,s rcocptorcs do IgE . En cl caso dc las intcraccioncs con FcrAl, sc ha k,calizado un pcptido tie 76 aminoacitios clue se ezticnde a to largo, do la union cntrc ('a;2 v ( ;r;3 iJia. 6.24i clue parccc scr escn vial . I'or cl contrario, Fct;Rll parccc quc rcconocc una Cstructura fbrmada por aminoacidos pcrtcnccientcs a los dominion ( :1 ; ; tic ambas cacicnas f 1?r1 . 6 .25) . 1 .a intcracci6n cntrc la proteina A tic Smpln,loroccusaurcrrst - la regiom Fc do las IgG tanil,icn 11a sido cstucliada coil cicrto dculle . I .os baton obtcnidos su"icrcn quc Cl punto tie Union SC CnCLIClltra situado Cn cl tiagtncnto Fc, en la region do union cntrc Cy2 v ( .,f3 .

Fig . 6 .24 . Presunta localizaci6n del punto de uniin del receptor de los mastocitos (Fc; RI) en la IgE humana . Los dominios Fc clue se muestran en la imagen son, de arriba a abajo, Ct:2, Cc:3 y CiA La supuesta localizaci6n del pcptido implicado en la union se muestra en forma de un segmento blanco, clue se extiende desde el residuo Gln 301 a Arg 376 (reproducido con autorizacion de Helm y cols ., 1988).

Fig . 6.23 . Las principales interacciones entre la FcRn del intestino de la rata recien nacida y la Fc de la IgG materna (derivada de la leche) se muestran mediante diagramas FcRn (los dominios 111, 112, 113 y l12m se muestran en rojo, verde claro, morado y gris, respectivamente) y Fc (los dominios CH2 y CH3 se muestran en azut y amarillo) . Los principales residuos en los clue se produce el contacto de FeRn (dominio Loll, 90 ; 112, 113-119 y 131135; 11 Z m, 1-4 y 86) se representan como estructuras ocupantes de espacio (reproducido con autorizacion de Ravetch y Margulies, New tricks for old molecules . Nature 1994 ;
372 :323-324) .

Fig . 6 .25 . Presunta localizaci6n del punto de uniin de las celulas B (FC~ :Rll) en la IgE humana . En este modelo del Fc de IgE se muestra Cs2 en la parte superior, Cr:3 en el centro y Co:4 en la parte inferior . Se cree clue los residuos Lys 367 y Val 370 de ambas cadenas s (indicados con flechas blancas) contribuyen a la estructura critica del punto de union (reproducido con autorizacion de Vercelli y cols ., 1989).

Anticuerpos y sus receptores

Las moleculas de anticuerpo presentan diversidad estructural en las regiones denominadas constantes . ~Como se manifiesta esta diversidad y club ventajas proporciona al huesped? Se tree clue las inmunoglobulinas han evolucionado a partir de una proteina initial clue equivalia a un unico dominio . ~Que papel puede haber desempenado la duplication genica a to largo de la evolution para dar lugar a una moll capaz de

Ilevar a cabo funciones de alta complejidad y compuesta de varios dominios? Se han descubierto muchos miembros de la familia de receptores Fc7 . Basandose en su estructura combn, explique comp se puede conseguir clue sus interacciones con las inmunoglobulinas sean mas eficaces . ~De clue forma esta ayudando la biologia molecular a la localization de las regiones de las inmunoglobulinas de las clue dependen las funciones efectoras? ZEn clue sentido superan estas tecnicas a las clue se utilizaban previamente?

LECTURAS ADICIONALES Burmeister WP, Huber AH, Biorkman PJ, Crys'al structure of the complex of rat neonatal Fc receptor with Fc. Nature 1994, 372 :379 . Burton DR . Antibody : the flexible adaptor molecule . Trends Biochem Sci 1990 :15 :64-9. Con ,ao DH The low affinity receptor for IgE . Anna Rev Immunol 1990 :8623-45 Davies AC, Schulman MJ IgM - molecu ar requirements for its assemoly and function . Immunol Today 1989 ;10 :118-22, 127-8 . Davies DR, Metzger H . Structural bass of antibody function . Annu Rev Immunol 1984,187-117, Duncan AR, Winter G The binding site for Clq on IgG . Nature 1988,332 :738-40. Duncan AR %'oof JM, Partridge LJ, et al Localization of the i site for the human high-affinity Fc receptor on IgG Nature 1988,332 563-4 Feinstein A, Richardson N, Taussig MJ- Immunoglobulin f exihi itv i- coin plement activation- Immunol Today 1986 ;7 :169-73. Hahn GS Antibody structure, function and active sites In : Ritzmann SE led) Physiology of lr?ununog~obulins Drognostic and Clinical Aspects New York : Alan Less Inc, 1982 .193-304 Helm B, Marsh P, Vercelli D, et ai The mast cell binding site on human immuroglobulin E . Nature 1988,331 :180-3 . Kerr MA The Structure and function of Human IgA Biochem J 1990 ; 271 :285-96Ki ia , Pv1, Russell MW Function of mucosal immuroglobulins In Ogra P, Pv^estec<y J . Lamm ME, et al. (eds) . Handbook of Mocosal immunology. San Diego Academic Press, 1994 :127-137 . Moller G led) . Immunoglobulin D structure, synthesis, membrane representation and function . Immunol Rev 1977 ;37 .
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REFERENCIA EN INTERNET Antibody resource page http^vvw-them ucsd .edu/faculty/goodman/antibody.html/a b page .html

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH d

/ El receptor de antigeno de las celulas T (TCR) es ttna glucoproteina heterodimerica (tuji o -;oil cuyas cadenas se encuentran unidas entre si mediante enlaces disulfuro, y que permite a las celulas T reconocer una gams muy amplia de antigenos. Se encuentra asociado en la superficie celular con tin complejo de polipetidos denominado colectivamente CD3. / El complejo principal de histocompatibilidad (CPH) codifica dos conjuntos de proteinas de la superficie celular de naturaleza altamente polimorfica, denominadas proteinas CPH de clase I y clase II . El TCR up reconoce al Ag procesado en forma de fragmentos peptidicos unidos a moleculas CPH I o II . Tanto la molecula CPH como el peptido antigenico interaccionan con el TCR. " El plegamiento de una molecula CPH da lugar a tin surco de union con el peptido. En el se acoplan los peptidos procesados previamente por la celula, para ser presentados a las celulas T. Las moleculas CPH de clase I solo pueden acomodar peptidos de 8 o 9 aminoacidos, mientras que ]as moleculas CPH de clase II se pueden unir a peptidos de mayor tamano . " En los surcos de union con el peptido existen bolsillos de union, que acomodan distintos peptidos segun el haplotipo. El alto grado de polimorfismo de las moleculas CPH, unido a la capacidad de una celula determinada para expresar diferentes moleculas CPH, hate posible la presentation a las celulas T de muchos peptidos antigenicos distintos por una sola celula .

RECEPTORES DE LAS CELULAS T

El rCtottniImictito tic Icts antigenos I,or I,artc'ic Lts Celuhs I' cs CnCial I,,tra la jlliCi .t6cin X- rCgtiLtttcitt LIe un,t rcspucst :t inmuniuria clit,ti. Una partic importantc tic los trabajos SIC IM cstjga(ion Sohrc cl ,istcma inmunit,uir~ sc Ita Ccntratio cn I :t ttaturalcia k]cl rcccptor sic laS Celulas I- yuc pcrmitc cl rcconocimicnto cshCtifiu> LiC I0S :tntigCnOS .
C

El complejo receptor de [as celulas T TCR

1 .1 rc :cptorr dc I .h celulas I { I (' R, tjCI inglcs 7'-itll rcoy)tur'i fitc tjcfilli(io~ % Purilicatlo purr prinicnt cCZ n1Cthantc ht utilization LIC antiCUCrhcrs CSI,CCifiCOrs ticntC a una moICCUla CsI,CCjfiCa dC tin Cloll tic Cclulas'I . SC dcnominu'I ( :R u1i, kICNtjo a yuc Sc ttat;tl,a tic un) moletuLI ItCICrctdlnteriCa CcrmI)uCSt,1 tic una C:ttictra u rm-,t ji, unidas ctarc si mcdi .uuc tilt enlace kiisulfuro . Dc l6rtna inticl,ctWicnte t partir do hihlio tcCas do :11)\c sc ,dislaron cicrtrts `CnCS a Irx (]tic SC atribu\'o la auiificaii0n t1c LIS C.uiCn,ts (id I ( :It, s'a (]tic Crui CXPrcsatios por ,tlgullos Clrax-s pCro no pear otros. LA sccucnCict tic :uninoaCitlos (ICLitlCiLla t P,11- tir dC ht NCCUCnCia tic nudcutidOrn tic Cstu~s gcncs Coincidja Con la sCcticllcia partial ohcnid .t .1 I,artir tic IX, I,rotCjttas CCR a ~. [i I,urifiCatfaS mCdi,ur1C la will I,lCicin (IC :urtiCUCrj  ,s nunut :ltntalCS. asi, mCtli:uttC t]os tetniCaS thtercnICS NC CctnSiguio i IICgar a idcntif1Car HIM tttltim,t Cntid:tti . Jtas :nICLuttC, SC aisle; till Scguntlu til,o do - I - ( :R, dcnominatlo ;ti .

as"Ciatias IiSI:antctttc trot tin C(mjunto do I olipepticio~s, LICncnni ratio C()ICCti\amCnlC ( 1)i . Esta aSociacicnt cs ncccsaria tiara yuc CI CcmII,ICjo I (R SC C\111- "C Cn la SuI)CrhCiC CClular. LOS Comho ncntcs (Ic (1),; no mticstran,ariahilidad tic anunoicitios alguna CntI-C las dilerCIHO CCIUIas 1', I)N- lo (IuC n() huCtlCn gcncrar Id CaraCtcriuiCa tii\Crsiaati tic Icas'I ( :R . POI CI Cotntt :tric>, es HIM pro bAbIC tluC CI :oml,ontcntC CI),, tic IOS I ( .It SC,t nCCCS.tri() para 1 .1 tl-AIISLItiCClon tic la Scn,tl, traN Cl rcconcuimicnto tic] antigeno hor partrtc tjcl IY .R hctcrodimerico . ('1)3 cst,i ccmtpucsto I,or 4 poljI)el ,titiorS, ticn<miinatlcts'f . li, t : V -; . I amhien Sc ha rcCCmoCitlct unit tirrma Cscintlida tic _ dcncnninatla ti . hi la,/irjura -.l sc inucstra la organi/acicin dCl Complcjo IVR.

El complejo CD3 se asocia con las formas uji y ;(i del receptor de las celulas T I t . ti);maS rc1', , - c i dC1 rCCChtor do las CduLu I Sc cncucntrut

: segment( tra isrrnembrana

Fig.

7 .1 . Cada una de las cadenas u y li (o ;" y M del TCR constan de dos dominios extemos, V y C, de tin segmento transmembrana que contiene aminoacidos cargados positivamente y de una cola citoplasmatica corta . Las dos cadenas estan unidas entre si per tin enlace disulfuro situado en la parte mas proxima a la membrana de sus dominios C. Las cadenas "t. b y t ; de CD3 estan compuestas de tin dominio externo C de tipo inmunoglobulina, tin segmento transmembrana que contiene tin aminoacido cargado negativamente y una cola citoplasmatica de mayor longitud . El complejo incluye tambien tin dimero ;~ . rlrl o q-" . Hay diversos datos que indican que el complejo TCR(CD3 se encuentra en la superficie celular en forma de dimero . Las cargas de los segmentos transmembrana son importantes para el ensamblaje del complejo . En la figura se muestra una posible disposition de las cadenas, en la que las cargas opuestas se encuentran rr :utrtill :adas-

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

l .as cadcnas 7, o \' t: tic ('1)3 soon loos prooducton tic trcs l;cttcs cstrccharncntc ligacios, y sus SCCUCrlcias primanas Cstan Claranlcntc rclacionadas . Loll polipcptidoos pcrtcncccn a la stipcrtamilia tic las innnmogloohulinas, \ ca(1a till() (1r dkos coonsLl tic tin ti(nninioo C\tcrno, al yuc Sit uen una rCL;ion transnlcnthrana una cola citoplaslnatica nitr\ conscr%ada tic al menos 4(t arnin(racidos . Una caractcristica peculiar tic las rcgioncs transnlcnthrana cs yuc toalas cllas conticncn till aminooacido cargadoo negati\anicntC, Cn lugar do scr totalincntc apoolarcs . El gc n tic (a)3 ~ sc cncticntra cn till croonlosonla distintor dcl yuc cor11ticnC CI Colltplejoo (111 .; ;nit; N' Ion POI iPCptitiors \ y(is no guardan rclaci(in cstructural . Las cadcnas \ su producto tic cscisi(in 11 Cstall ConnpuCStas tic tin pctIticno dorninioo c\tracclular tic tan Sol() 9 alltilloaiCidors, tin segnlcntoo transnncnthrana, yuc conticnc tin arninoacidoo cargado ncgaii\anicntc, y una larga cola citooplasrnatica . El c\trcnuo carhozilicoo tic] dornlinio citooplasntatiCO do ( :1113, 1l cs 43 arninooacidon ntas largo yuc cl tic ('l)3 Z . Las caii sc tincn cntrc %i ntediante enlaces disultilro, tirrrnandoo dintcros . Sc cornoccn trcs tiornlas dintcricas 1l - tl
LA CslCyuionnctria (ICI Con1PICjo 1'( It, asi l(rr11U 1 .1 fin-nta cn yuc sc tree yuc intcraccioonan las cadcnas tic ( :1)3 corn Ion lictc r(xiirttcroos up o 1S, sc c\plican nias adclantc .

dcrnostradoo t1tic Icrs aminooacidoos cargadoos c1tic aparccen Cn las rcgioncs trarurncnlbrana soil cscncialcs para cl cnsamhlajc do los comtplcjon T('R, asi conlo para su e\presioon en la supcrficic ceIttl,lr . Proobablcntente, Ctittr Cs debid0 a la fornlaci6n tic pares ioonicos o cnlaccs tic hidr(ogcnoo cnirc loos anlinooacidos basicoos yuc conticnen Ion I)cptidos IV It till c los arninooacidos acidos conplcmentarioos tic la% cadcnas ('111,3 cn cl Solo tic la hicapa lipidica . Prohablenlcntc, los doominios c\tracclularcs tipo innitinoglobulina tic Ion - IVR lull oo yti) y do ( :1113 (^h 6 y r) tanibicn sc Cncucntran asoociatlos . Fit cooncreto, se tree yuc l(rs donlinioos l' tic Icrs l (-1t uji cstan v ociadoo, tic tirrrtta inn parccida ,1 la tic los dorninios \'t i,'V1 tic las molcculas tic innitlnoglohulina, pcrmiticncio la aproo\intaci(in tic las leis rcgiooncs hipcrcarial\Ics yuc

Receptor de antigeno de las celulas T

140 ;0 kohl ; \ una stibunidad l3 i ;5 47 kdal l, unidas cntrc si rrediantc enlaces distiltilroo . En la figure -.1 sc rnucstrall las ca ractcristicas cstructurales dcl hctcrodinlcro till . ( :aria cadena po lipcPtidica csta compticsta tic d(rs doominios tipo innltinorg,ltrhtilina, tic tintos 110 arninooacidoos cada unO, \ SC cncuCntra anlarrada a la mcntbrana plasrnatica mcdiantc till pcptido transnlcnthrana, yuc sc cncucntra ullicloo a %it cCZ a una coorta cola citoplasmatica . Las ditcrcncias do peso molecular cntrc Las cadcnas or \ It hurnanas sc ticlvn a la P1-CSC1lCia tic nia\or cantidad tic hidraton tic car honor unidon a los grupoos N do la cadena u . No sc ctrnoocc la tint cion tic cstors Itidratoos tic carbono . tic Ion T( :R sc 1 ..1 \ ariabilidad do la %ccticncia tic anlinoacidos cncticnira coonccntrada cn los dominion del c\trcrno amino tic los PoolipCptitlos a \ It, yuc son hortuoloogoos a los dominion \ariahlcs tic las inmunogloohtilinas . Ell las cadcnas (3, Cstc donlinio alai axiific,ldoo lxor wgnlrntoos gcnicoos rcoorticnadon \', I) \ 1, )' ell las cadcnas cur por wgrttcntoos gcnicos V \ ) i \. cap . R i . EI analisis tic las sccucncias de loos dominion V tic difcrentcs 7'( R ha ticnlostr,ldoo yuc c\isten unas zoonas cn yuc la \ariabilidad cs rclati \ - anlcntc mayor, yuc corrcspoondcn ,1 las regiones Itipcr\ ariables tic las inntunoglohulill :u, CICnonillatlas tanlbicll rcgiorncs cictcr. ntinantcs tic la complcrncntaricclad (R1)O FI enlace disultirroo yuc unc a la% cadcnas tit \- It sc cncticntra situado cn una Secucncia Pcptidica coonlprcndida cntrc cl doonli nio constants \ cl pcptidoo transnlcnthrana . Una caracicristica PC What- tic las rcgioncs transnlcnthrana tic las cadcnas ur \ It cs I :1 prcscncia tic arninoicidoos cargath,s l\oositi\amcntc I \ . ./ig. .l'. . SC 11 .1 atribuido a cstos arninooacidos cargados alguna tirncioin cn cl cnsamhlajc c transpoorte intracclular dcl complejo T( It . El ,1n,ilisis mediantc iristalogratia coon ra\os \ h,1 1\crrnitidoo tictcrininar la cstructura triclintcnsioonal tic Icrs donsl'('R. En la /;gnat -.? sc mucstra la CSI ruCtura tic] '1'( It rcstringida para moIcculas dcl ( :PH do claw I . En csta CstruCtura las cadcnas u \ /3 se plicgan aclooptandoo tin,1 coontitrntacitm parccida ,1 la rcgi(in Fab tic los anticticrpos . Ell CI C,1Pitulo 9 %C allaliza la importaneia quc ticnC Csta Cs(r"UCtUra para cl rCC(rllOCinliCnttr tic ant1gclltrs .

El heterodimero TCR ooli constituye la unidad de reconocimiento del receptor El I ( It (/It Cs tin licicrodintcro tiorn1 .1doo 1 .  r u11.1 suhunitiad u

Estructura del complejo receptor I l c .1 .yrii''nictrio \ 1 .1, 1111 r.1c do ones c ntrc las suhuniclacics com11(,11c11tc\

dcl Cw11plcl~ , I ( R llan ~Itioo Cstucliadas C\hausti\"amcnic . Nlctiiantc c\Pcrinlcntos tic 1ntitagcncsis in rinro, se ha

Fig . 7 .2 Estructura tridimensional de TCR uli . Representation con cintas del 2C TCR . La cadena u se ha representado en azul (residuos 1-213) y la li en verde (residuos 3-247) . Los filamentos It se representan como flechas y se enumeran en funcion de la convention empleada para el plegamiento de Ig . Se muestran los enlaces disulfuro de cada dominio y del puente intercatenario COOH terminal (las bolas amarillas corresponden a 3tomos de azufre) . Las RDC se indican por orden numerico 11 a 4) en cada cadena . Adaptado de Garcia KC, Degano M, Stanfield RL y cots . An uji T Cell Receptor Structure at 2 .5 A and its orientation in the TCR-MHC complex . Science 1996 ; 274 :209-19 .

Antigenos del complejo principal de histocompatibilidad (CPH)

tier lugar al punter do union coil cl antigemo (firs . ,-.2) . En cl caso de las cclulas '1 ', cstc punto de unison tambicn debt scr capaz do unirsc a rcgioncs tic I1 molccula ( :PH yuc prcsrnta Cl anrigeno . Es probable quo: cl complejo L( .R/CI> ; se cncucntrc ell la superticic celular ell torma do una cstructunt altanlcnte organizada . Las dctcrnlinacioncs cstcyuionlctricas ban ciemostrado yuc cl conlplcio maduro corttICnC riots col)ias tic ( :I)3u, v quc la rclaci<in cntrc cl ntimcro do molcculas del Itctcrodintcro u(i s' (1)31; es do I :1 . Esters oohscrvaciooncs, t . Ia deternlinaciein del l)cs() molecular del complejo T( .R-CI)3 ell diSO111Clon, sugicren tin nlodclo tic T( :K del tipo I ulil  ';, ii, r: ', . Ell este modclo dis'aIcntc, yuc cs cl quo: sc nurostra ell laAaura %.1, las cargas positit :ts ncgati\as transtnenlbrana sc encuentran cyuilibr;uias exactanlentc .

d ;tst I V I I cl sicas, aunyuc cxistcn cscasoos datos yuc allot, cn yur cstt timcicin sea general a toda la pohlaci6n . 1)e toodoos Icos estudioos sobre la tiutcion tic las cclulas T vii se puedc dcducir yuc cstc tipoo cclul,1r inter)icnc ell las respucstas microbianas rcconociendo pcptidoos bactcrianos, quiz :i prcscnta tios con antigcnos del ( :PH no clasicos, o rcconociendo protcinas, coonuo la prcotcina del shock por valor, prtxittcidas por Ia,, cclulas ell las zoonas infectadas poor bacterial . Las cclulas T yS pttcdcn represcntar una prinlcra linca dcfcnsit'a, yuc limita la intecci11 hasta quc se }xtct1a organizar una rcspucsta innlunc cspccifica para CPH a era) cs do Los cclulas T uli .

El TCR,6 es parecido estructuralmente all TCR (ill I,(

ANTIGENOS DEL COMPLEJO PRINCIPAL DE HISTOCOMPATIBILIDAD (CPH)

yuC SC t1d)en loos rctlt :u(s tie ttjidoo, trances o Ijcnos constitu)cn una region tieno111inada cctn11)Icjoo l)rintipal tic 11istcxon11)albiIidad i; ( :PI 1) . Las cstructuras altanlcntc pohnxn-ficts do I,1 su})trficic crlular yuc d :u1 lugar a Icos rechazos sc dcnomin,1n antigcnos ('PH, t - a quo: fucron i(Icntificados iii cialmcnte mediantc aloanticucrpos producidos por ccpas cntiog .imicas tic ratoncs como rcspucsta .1 la illf)IL1111Z .1661) Coil Milks dr totters opal quo : tlitcrian gcncticanlcntc solo ell cl ('P11 . Mds tarde, se utilizaron anticucrpos esl)ccificos fi-cnte a molcculas co dificad :u ell subregiones del ('PH, obtcnidos mctliantc cruces de ccl)as cruiog.inlicas, corn Objctoo do ccnlscguir un 111,1})a tictalladot ticl (TH . EI (TI I humanoo, quc sc cicnomina sisttma do antigcncts Icucocitarios 11trn1anos ~ H IA, del inglcx hrrurrtn lcrn :nirtc autirttrr i, se cstudiot tic la misnla mantra . La nonlcnclatura rcilcja I .t forma ell quc lucron caractcrizacias cstas molcculas, cs dccir, crnlloo antigenos (Iuc pernlitian a lots aloou1ticucrl)os unirsc a lots ICncotl tos \ ticstruirlos . Poor cllo, aunyuc so: cicnominan antigenos, solo soon rcconocidos onto tales cuando %c exporncn a un sistcnla inmunitario ajeno, canto ocurre, por cjcnlplo, ell los trasplantes do organos . Ell la fpura -. .i se rnucstra la or ganizacitin global tic los ( :1'H lu11n ;u1o 1. murino . Tanto ell el ( :PH murino eom() ell Cl 1luntanoo, sc hall identilicado gents title codifican ores clascs do mole colas dileremes f 1, 11 \ III ) . Las mctlcculas do clase 1 y do claw I I rcl)rcscntan cntidadcs bicn cictinidas cstructuralnicntc, cs dccir, aunyuc ell Cl ('PH csisten nxiltiples gents de claw I ) tic class 11, totlos los })rcxluctos dt los genes tic class I t . toodoos loos Pr'odtrctcos de Icos genes tie class 11 presentan una estructura 01011 :11 parccida . Poor cl contrario, la region tic class 111 contiene una co leccioin bastantc 1letcrogcnea do nuis tic 20 gents, entrc los titre sc cnctrcnn'an algunoos title coodifcan mo1CCULts tlcl sistcnti del conlplcnlcnto I C4, ( ;2, factor 11) 1_ algtmos yuc cst;in rclacicntados coil cl procesamicnto tic los antigenos . No csisten analogies ftrncioonalcs o estructuralts cntrc los productos do lots genes do class III \' ]as molcculas tic class 1 oo 11 . Poor canto, ell cstc capittrlo setla11lente SC dCStr"IbCn ai}tlCIl0S loci relacioonadoos coil la cs6nurlaci6n de los lintiocitos I flos genes c productos gcnicos tic las claws I ~' I I i .

l .a cstnitturt "loot)al tlcl 1(It ' (i is h .u'eciti .t .t la dcl I( ali, t' cada cadcn a csta lormada tamhicrt poor los doominitos \ (: cxtcrncos, un wgntcntoo tran%mcmbrana yuc coonticnc anlinoacidos c;trgados positiumcntc y una corta cola citoplasnt :itica . La cstructura global del T( At vii cs mas variable ell los scrcs humane,, yuc ell cl racoon . Las cadcnas ," \' (j 11u111,u1as puedtn cstar unidas por enlaces disulluroo o St l)ucden enconttrar ell forma de mone'mlcros ; la prescncia del enlace disultuno csti corrc lacionada coon la prescncia del cson tic la region u)nsranrc ( :72 cn lugar do ('iS1, 1a yuc solo ( ;';? coonticnc una cistcina . I V. la organization de los genes do Ios hCK ell cl ca}) . 8 .) El })cso mot lecular do [as cadcnas 'IV R y clue coonticnctt la region constants ( :';2 cs cariablc, dci)idoo a la duplicacioon oo triplicaci6n do cstc segundo cxon . No sc sake coal es cl signifcado biotl6gicoo do cs tas ditcrcncias cstructuralcs . En cl ratoin no SC 11 :111 tiCtcctadO tornms do TCR vS yuc not so cncucntrcn unidas mcdiantc enlaces disulfuro .

L OS It tti 1 ;tn( - litc)s t I()s

Las celulas T quc expresan TCR uli presentan una distribution diferente que las que expresan TCR

La localization anatoSmica do Ia,, doos tiormas do TCR es tiitcrcntc . Los T('R u(i aparcccn ell nl s del 9 ;'''F1 tic cclulas 'l peritcricas, asi conlo ell la nlamria do Its tinu)citos yuc ezprcs :ul 1Y'R . Poor el contrarioo, las cclulas T yuc exl)rcsan Cl rcecptcn- 'rc6 SC strelen encontrar ell loocalizacioones anatoomicas 111111 concrctas . Aunyur las cclulas I I ii CttnStittrt'cn una pequcf,1 parts do las ecltrl,1S -L del tinlo e do los organots llrlfotitiCS sccundarioos, abuncian cape cialnlcntc ell citrtos cpitclios, comet la tl)iticrnlis ell Icos ratoncs, pero not ell los scrcs humanos ), cl epitcho intestinal, cl utcro Y la lengua . l .as cclulas L 76 do each tcjido cpitcli,1l pertcncccn a ditcrcntes suI)Pohlacionts, yuc SC difcrcncian cstructuralnlcntc ell ]as regiones V yuo exl)resan . l .a tz})rtsicm tie tlitercntcs scgmentos gcnicoos V poor parte de las dilcreracs sul)l)ot)I ;tcioiles 76 Pucdc scr CttnSCCLICIlCia tic scr ontogcnia . Por cjcnlploo, las cclulas T v6 do la picl del stein i cclulas c}cndriticas cl)idcrntiCas o CI)E1 exprcs ;ut ozclusit,unente las rcgioncs \';r,; \- Vlil it . cap . 8 ;, micntras quo los lintiocitos intrat})itclialcs del c})itcho intestinal csprcsan casi exclusi)anlcntc VIS (sobrc: todo ell conlhinacioin con Vii4, V65, Vd6 oo V871 . Sc crcc yuc esters poblacioncs pucdtn surgir ell difcremcs fasts del desarrollo timico do las cclulas T.
t

SC dcscou1oott 1,1 natur,tleza tic loos lig :utd()s tic Its cclttl,u l _; o, aunque st 11 .1 ticnlostradoo yu(' reconlo>cen \arias antigc tms, tantot pcptiios cxogcnos Lconlo los l)cl)tidoos N-tin-miladoos do ]as bacteria,, ) conuo autoantigenos f conlo l,1s protein,1s del shock por valor )' los antigcnos del ('PI 1 do: class: I no cl :isicos, onto cl TI, murino o cl ( :1)1 hun1ano1 . 1',111111X11 sc 11a dcnlostradoo quc algunas cclulas T 705 nlurinas rcconoccn mctlcculas del (PI I do
l (OM .)

Reconocimiento de antigeno por las celulas T Iii

En la /irtrrra -.-1 sc nurrstra 1111 esytitnl,t tic la cslt'uctura tic Ins nlolccula, ( PH tic class 1 . Estin toonll)utst .u de una ctdcrm pcsada gltrcusilada 145 kcial'i asociada tic fOrmd no cotalcntc a la li_-nlicroogloobulina ( 12 kdal1, un })eolil)cl)tidet quc tunbicn se ell cuentra ell tiornla fbrt ell cl sucro . La cadena pesada de las molcculas CPH de clawe I presenta tres dominios extracelulares Las cadcnas pcsatfs tit dale 1 cst .i n coml)trcstas pew ti-c" dolllillk), txrr -;tcclulares, dcnoaltillados a, Icxtrernoo amino, u, - ) u ;, un ;t region transnlcnlhrana )' una cola citoplasm :itica . Cada ono tic lots trcs dominios cxtracclularcs conticnc tmos 90 amino :icidos,

Estructura de las molcculas CPH de clase I

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

Organization de los CPH murino y humano

complejo H-2 murino

sz

Ab Aa

Eb Ea

C4 Bf C2
caes(: ill

TNF

01 Q2
clase I

On

T1 T2

clase I

claw II

centromero complejo HLA humano

t"'- 1 1 ir+,rii-i ny DOB DQA DRB IDRA

Ir-se !II

clase I TNF

o telomero

DPB DPA

C4B C4A Bf C2

Fig. 7.3 . Diagrama en clue se muestra la localization de las subregiones de los CPH murino y humano, asi como las posiciones de los principales genes que contienen dichas subregiones . La organization del CPH humano, en el que los loci de clase II se

encuentran situados entre el centromero y los loci de clase I, es igual en todas las especies de mamiferos estudiadas hasta ahora. Estas regiones abarcan 3-4 Mbp de ADN.

Modelo de una molecula humana CPH de clase II intacta

est(rs dominios pucdcn scr scharaclos dc la supcrficie cclular ntcdianrc la cnzinta prutcolitica papaina. Los dominios u, y u; cunticnen enlsccs disttlttiro intr :uatenari(~s, cquc gcneran onus bu clcs dc t>3 86 antino :icidus, rcspectisantctttc . El domini(> u; cs Ixmuil((go coil los duminios ( ; dc Las inmun((gl()bulin .u . I .a par. tc eztracclular Lic la cadetm pesada de claw I csta glucosilacla, \ su grade dc glttcu,iLtci(Sn clcpcndc tie Lt cshccic s' del hahlutipu. La rcgi(brt tr.JISnlembr - ana cs prcdominamcmcntc Itidr()foba, crt.i cumpucrta por ?-5) .unin()icid()s \- atrasicsi la bicap.t lil,idica, ad((ptando prubablcntcntc un .t c(ntliguraci(m de he]1CC u. El (.1ominio cituplasntaticu cs dc naturaleza hidr6tila, consta dc 30 40 amin(xicidos y pucdc scr fosforilado in r ,h, o.

La 1i,-microglobulina es esencial para la expresion de las moleculas CPH de clase 1

I .a jl,-microglobulina li,m 1 do Ios arcs human()" n o i's pniinror/icrl, hero cn lus ratoncs cs dinuirfica Tuna unica ditcrcncct en cl aminuacido cn posici6n S ;, ) . Su estructura cs anahwa a la dc till dominio (: dc inmunoglobttlina . Esta molecula sc asocia tambicn coil varias cstructuras rclaci(madas coil las moleculas dc clasc I, como, her cjcniplu, coil lo.,, productos dc lus gents ('l)1 c1cl crontusoma I humano 'v coil el receptor dc Fc do Ias cclular intestinalcs dc los ratones rccicn nacidus, encargad(~ dc captar las nurlcculas dc IgG que c((ntler1C la ICCI1C . La ji,m es cscncial para la cyrcsion cn la supcrficic cclular dc todas las mulcculas dc cla sc I i; lus ratoncs inutantes que carccen dc i3_ni no esprcsan moIccul:ts dc claw 1 I .

Los dominios (z ( y (1 2 de las cadenas pesadas forman el surco de union con el peptido

Fig. 7.4 . Los tres dominios globulares (u,, u2 y (L 3) se muestran en verde. El dominio u 3 esta estrechamente asociado con la microglobulina (grid, tin peptido que no esta codificado en el H. La ji z -microglobulina se encuentra estabilizada por tin enlace disulfuro intracatenario (rojo) y presenta una estructura terciaria parecida a la de tin dominio de Ig . Los puntos aloantigenicos (en donde se encuentran los determinantes especificos de cada individuo) aparecen en los dominio" u, y u z, y este ultimo esta unido a una molecula glucidica (CHO). La papaina escinde la molecula en una zona proxima a la cars externa de la membrana plasmatica .

Mcdiantc tccnicas dc dilracci((n dc rac()s \ ha side hosit)lc de M - 1116411- las cstructuras tridimcnsi(malcs dc I :t hartc cstc rna I dw ntinius a :, u, ~, u ; t - 4i,m i do dircrsas ntulcctrlas humv1as de disc I i_fitj. 75). ( :omu sc habia predich(r, lus duminios u, r, P_m prcscntan tin hlrg :td(r ill)() innnrnuglobulina . Sin embargo, lain teracci(m (3,m u, nor c,-analogga a la intcracci(in entre h)s d(3mini(x constantcs clue sc obscru en lus anticuerp0s, sill() que la molecula de ji,m se encuentra sittrtdd haj(( lo ,, duminios u : v u, . 1.(n duminios (x, \ u, cstan dishuestus do tal mantra que dan lugar a una plataturnm dc ocho tramos 43 cn disposici(in antiparaIcla, s)brc lus clue se sittian dos helices u, tambicn en disposition antiparalela ((fiq . .fi) . F:I cnlacc disultirro del dominio u, conccta cl tramp 11 dcl cstrcmo amino coil la hclicc a del dominio a= .

rmuyenos oel complejo principal de histocompatibilidad (CPH)

Las helices a dc Ios dorlinios a, \ a, NC Cncucntran separadas poor un largo surco . AI Cstudiar la cstructura cristalina original dc la rnoolecula HLA-A2 sc dctceto la prescncia (IC una ~ , dcnsidad electronic, mas alto dc loo noornttl- a lo largo dc diduo surco, to qUC sugcria qUC SC lxnfia tratar del Pinto (IC union con CI an tigcno proocesadoo. Esta SUPosiCion SC Ita sisto rCtirt- iaLld hoe el hccho cic Clue Lt mas-ooria dc Ion aminoacidos clue gencran cl po lintorfisrno dc las moleculas dc clasc I, asi coontoo los cpitoopos dc Ids cclulas 'I - presentes en [ .is mismas, se encuentran situ .ufos en Ids prosimicfacfes del surco () Cn cl interior del nlisnloo i \ . .fill . .h ;1 . Las variaciones de la secuencia de aminoacidos modifican la forma del surco de union I .,t omtparacio'n cntrc las cstrucnrds dc I II .A :12 c. H1 . .A-As\68 ha Permitido comprendcr con mas daridad la base estructural (Ic la inrcraCCion Cntl-C IooS pcpticlos v los antigcno~s de claw I . HI .A-.12 c HI .A-Acs 68 sc diferencian ell Ids cadcnas latcralcs dc 13 dntinoaci(los: sciS en cc r , scis en a, c uno (posicioin 24 ;, clue intcr\icne en Ids interaccioncs con CDS ) en a- . Dirt dc Ids ditercncias clue aparcccn en (i t en (x, sc Cncucntran situaclds en l,osicioncs corrcspondicntes al Iondo y a Ids IMITCICS dcl surco cIc .d -. -i . Fstas ditercncias (fail lugar 1 union coil cl pcpticlo . a sir cos con una forma totalntente distinta, clue sc uniran, por tantoo, :t PCI'tido>s yuC Scrap tanlbicn toortlmcntC distintoos . Es intcrcsantC Cl I1CCIlO (IC yUC CI Surco It() CS una CSCrUCtU(-d lira, sing yuC prcsenta un;t scric dc protubcranci as \' bolsillos coon Ion clue puCdcn interaccio~nar Ids cadcnas Ltteralcs dc Ios aminooariCIOS I,flrf. ,:1i . Por cjcntplo, Ids cacicnas latcralcs o los c\trcm(os dc loos

La superficie superior de HLA-A2

Dominios extracelulares de una molecula CPH de clase I

Fig . 7.6 . Surco de union con el peptido antigenico de HLA-A2, desde el angulo en clue to , ve) el TCR. Los dominios u, y u, It estan formados por cuatro tramos antiparalelos, seguidos de una larga region helicoidal . Los dominios se emparejan y dap lugar a una unica lamina 11 de ocho tramos, sobre la clue se situan las helices u . Se destacan los aminoacidos en los clue existe un mayor grado de polimorfismo . Cinco aminoacidos de los tramos It centrales de la lamina Ii u,-u, quedan expuestos entre las dos regiones helicoidales, y es posible clue establezcan contactos con los peptidos antigenicos . Otros seis estan expuestos en las paredes laterales de las helices (rosa) . Hay tres situados en la cars superior de las helices (amarillo), clue puede clue entren en contacto directo con el TCR. Los coloreados de verde no se encuentran situados de forma clue puedan afectar a la union de los peptidos antigenicos . (Modificado de Bjorkman y cols ., 1987 .)

HLA-A2 y HLA-Aw68

Fig. 7.5 . Esqueleto peptidico de la molecula HLA-A2 . La lt lm establece interacciones con los tees dominios de la cadena pesada . Se observa claramente el surco clue forman los dominios ox, y (xz.

Fig. 7.7 . HLA-A2 y HLA-Aw68 se diferencian en 13 aminoacidos . Doce de ellos se encuentran situados en los dominios u, y u . Los diez aminoacidos diferentes ubicados en el surco de union ai peptido se muestran en color amarillo . (Modificado de Parham, 1989 .)

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

HLA-Aw68 y HLA-A2

Diagramas de cintas de dominios extracelulares de las moleculas de clase I HLA-Aw68 y de clase II HLA-DR1
HLA-Aw68 (clase I)

bolsillo 45 Met

holsillo 74 Asp

bolsillo 45 Met

5 156, 159,

160 ' -133, 1,17

-156, 159,

60, --- -- , 133, 147

HLA-Aw68

HLA-A2

Fig. 7 .8 . Diagrams esquenlatico que represents los surcos de union con el peptido de HLA-Aw68 y HLA A2 . En la figura se muestran tambien los bolsillos en los que se cree que se acoplan los aminoacidos de los peptidos antigenicos.

pcptid(tS Sc IIUCCen aCOlll :lt Cn don h(tlsill(ts que sc cncucntran situad(tS Ibaju la IICIICC CICI tl(nninitt u, 1,;1s lariaCI(tncs dc :uni n(QCid(ls en cl intcri(n LIcl SLIT- Cot puCCCn m()difiCar las posiCi(> ncs tir ktss lxtbl(s i;~ . /ir1 . -.1Y, Sicnd(t cst:l la h,ISC CslrtiCtUl"l1 de ] .is ditcrcnccls dc ,llinidad (Ic Illllt)I1 C(nl I()S l)chtid((s, t)c la, que dcpcnde, tl sit \cz, la Callacidad () la incipacidad para dcsarrollar una resllucsta innnnlit ll- ia .

HLA-DR1 (clase II)

h(s produLt',s dc 1(), ;;CitC, (it Au( II A %% I- cn CI rattm; 1)R, 111' l lX) cn l()s SCI -CS Ilunt,lnt>sY ,()n hctcnxiimcr((s Ctnttpucsttls tie Ca LICItaS glue( )11r()tCiC as I1CS,ldas ( tr 1 I. l1,10-as i 111. Las CJdenas u I1rcscntan tin I1estl nullccular tic ;() 34 kdal . l:.l do la, cadcnas li ()scila cilia 36-3() kdal, scLwn cl ktcus c(,nCret(l . I Ial- tlna srric dc dattx yuc indican yuc Ias Catlenas u . \ 1i prcwntan una cstructura gl()hal 11al-CCida . DiClla cstructura csta tcn nl1da p(Ir una party r\tracclular, C(m d(IS d(mlini(ls Cu p c (c  a 1i . l. (i_? . unitl,l nlcdiantc una CtrrtJ sCCUenCia I1el" titiiCa a LAW IC11t~t1 transnlrnil,rana tic ululs .;t) anlin(laCidos, cn CIIM csucnl() Sc cncucntra, tillalnlentc,
till

Estructura de las moleculas CPH de clase II Las moleculas de clase 11 presentan una estructura global parecida a la de las moleculas de clase I

d(mlinio Citoplasntatio) d( till(), 10-IS anlin((lCid()s, hts dOnlinitls u, l, 1i, son parccidos A d()nlini(( cc . dc LIS nlt>ICCLILIS d( C1aSe I t . a la ji,nl, presentand(, LIS CaraCtcristic;ts cstructtlral" dc I(ts donlini( ConStanles de la innuln0L;l(lbulillA . El donlinio 13 C(mtienc till cnlacc diullfur() quo: t1a Itigar a till l1LICIC dc 6-t amin<>,icid(,s . La ditcrcncia Cn I(), I,cs()S nl(tlccularcs dc Ias ctdcnas (I \' li do Class II w dcl)c ,()hrc tttdtl ;t ,it ditcrcntc grad() de glacosllaciun. Los t1()Illilli(tS u i , cr., l It, cst:in 11uc(Isil,ldt), .l ni\cl tic sun at(mlos tic \, Inicntras chic cl d(mlini(11i, not

2 Fig. 7.9 . Diagramas de cintas de los dominion extracelulares de los antigenos de histocompatibilidad HLA-Aw68 de clase I (1) y HLA DR1 de clase II (2). En los surcos de union se ha dibujado tin peptido acoplado . En estos diagramas se observa el parecido de Ias estructuras tridimensionales de los antigenos de clase I y It . Reproducido con autorizacion de Stern LJ . Structure, 2:245-51 .

I() csta . I aS Ill(t1000LIS tic class I I se enCtlcntran unid,ts a LlIIJ III(IlcCLII,l CoIrCC(httll"t, tlen()Illinad.l ('l)4 . LOS (studios de Illutagcnesis can HI .;1 DR1 sulirrcn clue la uni(in Sc Ilr()dLICC a tlatcs dcl donlinitt 1i . . Sc CI -CC yuc la asoCiaci(Iu cntrr ( D4 \ cl ct)mplcjo lY R cs ncccsaria para captor I,l nutlccula p56'', yuc sc till( :I la parts Cit(tplaslnaticl dc ( D-1 e iniCia 1 .1 aCticACicin tie Ids CCI111aN l'.

En el surco de union de las moleculas CPH de close 11 se pueden acoplar peptidos de mayor tamario

Ell la aCtu :llidad, Sc C()In,C( Ll cstrtktlira t6dilllensitntal lic la III() ICCLII :I HIA DR I, quo: Il .l rcsultadt> scr parccida a la dc LIS nl()lcCLILIS (TI I tie clan( I f P(7 . .(~' . l'na dc Ias djlcrencias ennc anlbas CS (uc cn LAS fornlas Cristalin :ts dc I I I A DR I Sc Its dctCCtad()

till dinler() drl Iletcr(ttlinlert, 115 . Al 1111,11 yuc OCLII IC (:[I CI Cas() tic It)s antilCIwN tic Close 1, I(), pCptldtls SC Illicit a I :l I1,(tlettlh adopLantlt> una amlin macion c\tcndida. Sin Cmb;ugo, CI sul-Co dc Ias nl(tlcculas dc class II cs ntas abirrt(t yuc (I tic LAS ti( Class I, 1)()]N) quc pucdc ac(Inxtdar pq,tidt,s dc ma,\ or tantano +_lias. .lfl

Organizacion genica del CPH

Union al peptido de las moleculas de clase I (H-21K b) y de clase II (HLA-DR1)

Enlaces de hidrogeno con la cadena principal del peptido acoplado HLA-827 (clase 1)

HLA-DR1 (clase II)

~ .51b Q ,~53 _ - _

GIn1L9,,0 0"~

Asrn,62

Asnu69

Arg(,76

~ H 2K (clase 1)

- ---- HLA-DR1 (clase III

Fig. 7.10. Vista superior de los surcos de union con el peptido de antigenos de clase I (H-2K'') y de clase II (HLA-DR1), en la que se muestra la disposicion de los atomos de carbono (z . Se aprecia claramente el parecido entre ambos, aunque tambien se perciben algunas diferencias. Algunas de estas diferencias son el motive per el que las moleculas de clase I acomodan peptides mas cortos (8-10 aminoacidos) que las moleculas de clase II (>212 aminoacidos) . Imagen reproducida con autorizacion de L. J. Stern, Structure, 2:245-51 .

Fig. 7.11 . En esta figura se muestran los enlaces de hidrogeno que se establecen entre la cadena principal de un peptido y las moleculas de clase I (HLA-B27) y clase II (HLA-DR1) . La diferencia principal entre las dos distribuciones de enlaces de hidrogeno es que en las moleculas de clase I los enlaces se concentran en los extremos del peptido, mientras que en las de clase II se encuentran distribuidos a to largo de todo el peptido. Reproducido con autoriracion de L. J. Stern, Structure, 2:245-51 .

v ,".I1 i . L:ts caractcristicas estructurales del punto cic union de los antigcnos tic class I I sc 11an (icsciti-ado mcdiantc la dctcrnli Lie n:tciirn do la estructura cristalina un complejo entrc I II .ADRI v un pclltido Licrivado del s irus de la gripe (v. 1.111 . Sc hall ohscrvado claranlcinc Ios b()lsill()s Lie] punto cic union cn los yur sc acoplan cinco cadcnas lateralcs tic] pel)tido, to clue Ira he oho posible explicar la cspccificiciad pcptidica de HLA DR1 .

ORGANIZACION GENICA DEL CPH Loci murinos de clase I

I I ( 1 , 11 dci rato~n sc dcm),itima locus 11 2 . Las regioncs que codific.ln I(~s gcncs .ic class I \ tic clasc II se dcsignan coil Ictras . Por cjctnplo, las moleculas CPI 1 Lie claw I cst.i n codificadas cn la rc;cnicos SOIL r11uv poligion H-2K . Los genes (.PI I v los loci i morficos, \,triando entire Ins ditercmcs ccpas tanto cn cl n61llcro do ,cncs c(nn(r cn sit cstructura . Para distinguir los Iraplotipos, sc asigna al ( :PI 1 Lie coda cepa 1111 supcrindicc. Por cjcmplo, la ccpa BALB/"c poses un llaplotipo H-2" . El CPH del raton (H-2) contiene tres loci de clase l, pero

el ntimero de genes de clase I depende del haplotipo 111 1111 t;enOl111 .1 nlurino Imploide existcn unos 30 ,,cncs dc ciase I .

Lsrc numero varia se gun el Iraplwipo do las ditcrcntcs ccllas cn-

dogamicas. Los genes de class I codifican los loci H-2 cl sicos, Hen (ictiniclos scrologicanlcntc, dcnonlinados H-2K, H-2D v H-21 . . Sc it nora la iniportancia yur tlenCn la ntivoria do los rcs tames genes, clue se cncucntrarl situad(rs en las rcgioncs ()a, Tla v :s'1 (fitj . 7.121, si bicn es posible clue dcsencadencn el proccso Lie actin-aci<in dc Ias cclulas T, mcdiante la intenrncion Lie la nlolccula ()a-2 . La orgarlizacion dc la rcgi()n H 2 K cs parecida en todas Las ccpas clue sc hall estudiado . (onticne do,; genes de class 1, dcnolminados K v K2 iv.7.121 . 1-:I gcn H-2K coditica cl antigenol H-2K, (title cs expresado per casi todas las cclulas N CS lacil Lie Olctcctar Scroloigicantcntc, mientras clue la expresion del 'cn H-2K2 cs mucho niSs sariablc v dcpcndc de la cepa cstudiada. Los Implotipos f1 2` \ 11 2'' prcscntan un nLinlcro oiitcrcntc de genes de claw 1 cn la revi()ii H-21),/H-2I . ".12) . Ell la region D/L del gcnon1 .1 Lie los ratoncs BALB/c i H-2'1 sc cn cucntran situados cinco genes Lie class I . Dos do cstos genes codifican los anrigcnos H-2D' v H2L', clue son dctcctablcs mediantc tecnicas scrologicas . En la region c(tmprcndida entrc los genes H-21)' proximalcs v los 11-21," distales apareccn otros trcs genes de class 1 . Sc Lienominan 1)2 .' , 1)3' \ D4", v no Sc COnOCC su hmcion . En la re gion H-2D de los ratoncs B 10 (112'') solamcntc sc ha cncontrado un gen de class l.

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

Genes de la region de clase I en el raton

H-2a

,1U
K2,, K

H-2K

H 7D

TI ;i L IQ11, 02 Q4-10 Tll-17 737' T18 Tl-10

, (clase II)-(clase III)

D'I p2-4

H-2

iclase ID-(clase III)

Fig. 7.12. Organizacion de la region de clase I del CPH de dos haplotipos, BALE/c (H-2") y B10 (H-2 6 ) . La region de clases II y III separa las regiones H-2K y H-2D . Los parentesis indican espacios

intercalados para alinear los alelos de los dos haplotipos . La region Tla contiene el mayor ntimero de genes de clase I, aunque no se conoce sit funcion.

Las regiones Qa, Tla y Mcodifican moleculas CPH de clase I ((no clasicasn Las rcgi(tttcs ()a, - I'LL ' M u((1itiCan ttntlcculas C(tn una CstrttCtura parccida a las ntolccul .ts C}c Clan I dcscritas h :uta ahora. En algunas 0CasionCS sc ban dcnontinado moleculas dc Class I atipicas. El locus La ocupa unas 200 kh del AD\ situado ell cl Cxtrcntct distal dc H-2D ;'I . trj. 7.12) . Esta rcgicin uxiifica las moleculas (),t-2, 3, 4 V ;i, clue son detcctables serol(Igicantente, C inclusc tin conjunto do cntrc ocho (BALB/c 1 y dicz i B 10 } gcncs dc class 1. Aunquc la region - I'la rnurina file dCSClit)icrta inicialntentc por codificar el antigcno 'FI . i del ingles rbvruus leukaemia, let] cernia timica i, ha rcsultado SCr la quc Co110erlC tin 111,1\01- nuntCret de genes de claw I, ;tsi como la quc presenta ntavor minter() dc difercncias organizatit as cntrc I(ts haplotipos B 10 v BALB/'c {\, hq . -.12) . La region ,b1 esti situada cntrc las regiones K \ A, v contiene una %cric dc ~-enes dc class I, denominados M I Est(ts gCnC,s l,rCuin .ut tin baj(( ~rad(t tic lxtlinun (ism(t .

sc cncuctnran otros genes do ilasc I, quc l)Ltcdcn scr la \crsicin Inun :u1a dC I()s ;(1Cncs ()a, TIa t _\I tntn-intts .

IILA-A, HI .A 11 t HI-A-(, ( ;ada locus cctdifca la cadcna pest da de tin anti_9Cno CPH dc class I clasico, y la region contpieta sc csticndc a to largo dc 1,3 milloncs dc bases tic ADN U~q . 71 .31 . Sin enth:ug(t, tin analisis ntas dctallado dc esta region ha resclado la existencia dc ntitltiplcs genes adicionales tic close 1. I'ucde quC Ios genes HI ..A -1 -:, F \' -G codifiklucn protcinas (- I'I I tie ClaSC I, habicndose identificad() cl producto del gen HI .A-G ell celulas citotrofoblasticas cztrasill(-)sitarias placcrttarias, a las quo: se crec quc Pr(ttege del ataquc dc ],IN celulas \I; matcrnas (s . cap. 10 ;1- En las prosintidaLiCS Cic los genes HL :A-( ; t. }{I,:A A

En los sere\ humanos existen tres loci de clase I La region tic claw 1 htinttn .t Conticnc trcs I()CI - tien(rmin ;ttl(ts

Las cadcnas u c jl sic la,s nurlccula. do: class 11 murinas cstan codific.tdas pctr genes indepcndicntes, situados en la region I del cornplejo H-2?.1-1) . Los genes Ab s . Aa codifican las cadcn;ts 0 y a de la ntolccula A. Dc la ntisnta hunt,, los genes Eh t Ea codifican las do ,, cadcnas dc la nto1000la E. f La ncmtenclatura dc Ios g(!nCS indiCa ell primer lugar CI 1000S en quc SC Cncuentran t a C0rltlntiaei(tn la cadcna quo: codifican .) Sc han clonado otros Cuant(ts genes a ~' b dc claw 11, CM-Os productos protcicos no se conoccn . l'no dc doss, Pb, Cs till scu(iogcn, rnicntras quC taros dos, denontinados ()b ' EI,2, son potencialntentc firncionalcs . EstOS 6161110S genes prCSCnt3n tin bajo grado do p0limorfisnw ~son transcritos, aunduc n() SC sabc si soil tradUCidOS . Sc ha c(tnstruido tin mapa quc abarca practicarncntc toda la region H-21, quc Csti ligada a la subrcgi()tt H-2K dc Class 1. Los ratoncs dc los haplotipss h, s, f t q no cxprcsan pr()duct0s I -h: do Class II . Lets haplotipos b v s no transcribcn cl gcn 1 : a, pcro prCsentatt e(ntecnrraci(mcs Citoplasmaticas rntrntalcs dc cadcnas Eb . l.(n r.u()ncs do: I((s haplotipos fs Cl n() sintctii,ut cadcnas E.t ni Eb .

Los genes murinos de clase II se encuentran en la region H21

Los genes humanos de clase II se encuentran en la region HLA-D

La re i(nt I ILA 1) t(tnticnc gcncs dc al nutt((s NCis C.tdcnas a dicz CadCnas (i dC rn(tiCCULts ( PH dc class I I i s. ,jiov 7141 . Los prodUCtcts I,rinCipalcs CIC la rCgi(nt (IC CIdSC II humana SC Cncucntran codificad(ts Cn trcs locus, DR, DL y DP, pcro tambien SC hall (ICSo:trl)iCl-1,U mr(ts genes adici(tnalcN . La fantilia DR esta

Genes de la region de clase I humana

genes principales de clase I otros genes de clase I Fig. 7.13. La region de clase I humana se encuentra situada entre el telomero y la region de las clases II y III . Ademas de los genes quc codifican los antigenos del trasplante clasicos (HLA-A, HLA-B y 30 92 J A P5 3 70 80 21

J--1

HLA-C), se ban detectado otros cuantos genes de clase I, quc pueden ser homologos a los quc aparecen en la region Tla/Qa murina . En esta region tambien se encuentran otros genes quc no son de clase I .

Organizacion genica del CPH

Genes de las regiones de class II humana y murina

region de class II murina

region de class II humana '

1321A2 131'A1' DP

DMA DMB!
I I\TAPL

LMP2 1 LMP7 TAP1

funciones de procesamiento de antigenos Fig . 7.14. En esta figura se muestra la disposicion de los genes en los CPH humano y murino . Se indican los genes homologos entre ambas especies . Los genes de class I y de class II que se expresan se muestran en color narania, mientras que los seudogenes se muestran en color amarillo .

compuesta Por tut unico gcn a i DIU i a . hasty nuevc genes (i f l)RB1 - 9'1, enter los que se encuentran algunos scudogenes . Este locus presenta ditersas ordenaciones gcnicas . Las tatnilias 1)Q y DP contirnrn cada una un grn Pare cadenas ct v otro para Cadcnas (3, yuc son cxprcsados, asi condo Lilt par dc gems adiciot nalcs quC Puccicn scr funcionalcs o no . AI igual yuc ocurrr con sus 11on1ologos merinos, las cadenas a DR, DQ \ DI'sc asctcian cn las cclulas principalniciltc coil Las cadenas li de su prctpitt locus . I .os Prttductos LIC Icts genes DPA1 a DPBI SC asocian dando lugar a [as mctlcculas dc class II HI .A-1)P, que SC Purden tictcctar medctntr anticuerpos csprcificos . Dc la misma tornla, D()A I y D()B l codifican los antigcnos HL :1 DQ . La organizacibn tannafio dc la rcgicin DRB es ditcrrnte rn los distintos haplotipos flirt . 715 ;, siendo tambicn ditcrrnte CI numcro dc cadenas fl yuC sc rxprcsm . El IOCLiS DRB2 cs tin seudogcn . Lets loci DRB1, DRB , s, DR14 w suCICn CxprcSar . I .os genes DPA2, DPB2 ~ DQB3 surlcn see scudogcncs, Por ht yuc no a expresan . Por rl contrario, los genes DNA, DOB, DQB2 c DQA2 si quC Purdrn scr tiuaiionalrs . l .a region tic class II t :unhicn conticne genes yuc cO difiC ;u1 protcinas yuc intcrticncn en la presrntaciun sic antigcncts, Pcro sus yuC no SOIL cxpresadas rn la supcrficir cclular . EStos "Cncs productos se cstudian cn cl capitulo 9 . Sc ha cictcrnlinado Cl ordcn dc todos los genes I-ILA tic class 11 yuc sc conocrn nacdiantc tccnicas dc trazado dc maPas gencticos dc grin tanlaflo . Esta rcgihn aharca unas 1 .(10(1 kh dc ADN, \ cl ordcn \ la ()I.ientaci()n~Lic Ios ditcrcntcs loci son parccitios a los sic Ios loci laonldlogos yuc aparcccn cn la region Lic class 11 tnurina . El polimorfismo del CPH se concentra en el surco de union con el peptido y en las proximidades del mismo Lt ;a dc Lis caraitrristi : .n h .isi :as dcl ( PH cs cl alto -r .ulct do polimorfsnlo i; variahilidad Cstructural i do Ids 1ctlcculas yuC cOt difica . El Polimorfismo no csta rcPartido regularnlente a to largo dc todo cl CPH . Los antigcncts dc class I ()a, '1 'la v iii Prcscntan un polinaortisnlct nlttcho mcnor yuc los antigcnos clasicos dc claw I L, 11 . En el apcndicr I SC inclu)r una lista tic las rspc cificidadcs do las distintas \ sriantcs alclicas de los antigcnos dc claw h 11 .

En cada naolccula concreta dc class I o II, Icts Polinlorfsmos estructur,iles sr concentran rn ciertas regiones de la nletlccula . I .a tariabilidad de la secucncia de aminoacidos en los antigcnos sic class I sc conccntra cn tees regiones principales dc los dominios a, y ct, . ParcCC yuC Cl donlinitt a ; SC Cneucntra 111LIC110 nals conservado. En Its mctlcculas dc class 11, rl grade dc sariabilidad ticPCnc1C tic la Subrcgi(in y dc la cadrna poliprptidica . Por cicniplo,

El ntimero de loci DRB es diferente en cada haplotipo

DR 1, 10, 103 (grupo DR1) DR15, 16 (grupo DR51) DR3, 11, 12, 13, 14 (grupo DR52) DR4, 7, 9 (grupo DR53) DR8 (grupo DR8)

B9 -

B9

Fig . 7.15. El numero de loci DRB es diferente en cada haplotipo . Asi, los individuos con el haplotipo HLA-DR1, -DR10 y DR103 presentan la disposicion que se muestra en la linea superior . No todos estos loci clan lugar a ARNm de cadenas DRIi .

Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

la, cadcnas mas polin16rficas sun I)R(i y I)()(), micntras quc cl polimorfismo do las cadcnas L)pp cs Ago mcnor. I)Qrr prcscnta polimorfismo, micntras quc las cadcnas I)Ra sun prbctica ntcntc inNariablcs, v Serb sc conoccn dus alclos do las cadcnas I)Ru . 1 :,n las prrblacirmcs cxug;imicas, cn Isis quc lus individuus posccn dos haplutipos dcl (~PI 1, SC pucdcn producir 11tolcculls hihridas do class 11, con ii na cakicna pcrtcnccicntc a coda ha plutipo. Esto genera una di\crsidad 1611 mayor do las ntulccu las cxpresaclas .

I .a mavoria do his amino,icidos pulintoSrficos do los antigc nus do erase I v I I est5n situaclos cn I :t parts superior do 11 molecula, cn cl protirndo surco gtrc constitu\c Cl puntu do UIli(')Il Coil cl peptido. Asi, la variabilidad SC encucntra concentrada casi totalntcntc cn la hasc do dicho surco o cn ],is parcdcs latcralcs do las IlCllccs a cxpucstas al interior dcl surco. Las consccuencias de cstn a.u11tu1,16611 .1c antinuicidos polimorficos con rcspectu al recrmocinticntu do los antigcnos por h:u- tc do Ids celulas T sc cstudiari con rnis dettllc en CI capitulo 9.

El surco de union con el peptido de una molecula de clase I es capaz de albergar a un peptido de 8-10 aminoacidos. ~Existe alguna razon por la Clue la evolucion no haya antigenicos de 3 o de 30 aminoacidos?

desarrollado moleculas CPH capaces de albergar peptidos

AI contrario Clue los receptores de las celulas B, los receptores de las celulas T suelen ser de baja afinidad, y solo reconocen a los antigenos cuando se encuentran formando complejos con moleculas de clase I o de clase II . Existen moleculas accesorias en la superficie de las celulas clue tambien son

La determinacion de la estructura tridimensional de las moleculas de clase I y II ha Ilevado a un conocimiento sugerido Clue las respuestas inmunitarias podrian ser profundo de la manera en Clue se unen a los peptidos. Se ha

esenciales para Clue las celulas T puedan interaccionar con las celulas diana. Estas moleculas ejercen diferentes funciones. ~Que otros procesos, aparte del reconocimiento de los antigenos, se producen cuando una celula T entra en contacto con una celula diana infectada por un virus?

estimuladas o inhibidas mediante tratamientos con peptidos el conocimiento del sistema de union CPH/peptido en el desarrollo de estos peptidos terapeuticos?

capaces de unirse a las moleculas CPH . ZQue utilidad tendria

En el surco de union con el peptido de una molecula de

clase II se pueden acoplar peptidos de mayor tamano Clue en el caso de una molecula de clase I . ZQue ventajas puede tener este hecho?

LECTURAS ADICIONALES
Bentley GA, Manuzza RA The structure of the T cell antigen receptor . Annu Rev Immunol 1996 ;14:563-90. Biorkman PJ, Parham P. Structure, function and diversity of Class I major histocompatibility complex molecules . Ann Rev Biochem 1990,59:253-88 Bjorkman PJ, Saper MA, Samraoui B, et al. The structure of the human Class I histocompatibility antigen HLA-A2 . Nature 1987 ; 329 506-12Bjork ,nan PJ, Samraoui B, Bennett WS, et al . The foreign antigen binding site and T-cell recogritic-r regions of Class I histocompatibility antigens . Nature 1987 ;329512-16 . Bodmer JG, Marsh, SE, Albert FI), et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 1994 T sse.e Antigens 1994,44 1-18 Brenner MB . MacLean J, Dialynas DP, et al . Iderti`i~:ation of a putative second T-cell receptor . Nature 1986 ;322 1 Brown ,1H, Jardetzky TS . Gorga JC, et al, Three-dimensional structure of the human class II histocompatibility antigen HLA-DR1 Nature 1993 ;36433-9 . Carosella ED, DaLsett J, Kirzenbaum H : HLA-G revisited Immunol Today 1996,17 07-9 Clevers H, Alarcon B, Wileman T, et al. The T-cell receptor/CD3 complex a dynamic protein ensemble . Annu Rev Immunol 1988 ;6 :629-62. Garcia KC, Degano M, Stanfield RL, et al. An up T cell receptor structure at 2 5A and its orientation in the TCR-MHC Comp?ex Sc~ence 1996 ;274209-19 . Garratt TPJ, Saper MA, Blorkman PJ, et al Spec , ficity pr shets 'or the side chains of peptide antigens in HLA-w68 . Nature '98934Z692-6 , Green NM . The sem otics of charge . Nature 1991,351 349 Hass W, Pereira P, Tonegawa S. Gamma/delta cells. Annu Rev Immunol 1993,11 637-85 . Koop BF, Hood L. Striking sequence similarity over almost 100 kilobases of human and mouse T-cell receptor DNA . Nat Genet 1994 ;7 :48-53Lefranc M-P, Rabbitts TH The human T-cell receptor y (TRG) genes. Trends Biochem Se~ 1989 ;14:214-18. Madden DR, Gorga JC, Strominger L, et al The structure of HLA-B27 reveals noran-~er self-peptides bound in an extended conformation . Nature 199' 353 321-5 Manolios r, _ctoumcur F, Bonifacino JS, et al. Pairwise cooperative and inhib tort' interactions describe the assembly and probable structure of the T-cell antigen receptor EMBO J 1991 ;10 1643-51 . Neefjes JJ . Momburg F, Hamerling GJ . Selective and ATP-dependent trans ocatlon of peptides by the MHC-encoded transporter . Science 1993 ;261769-71 . Pov, is S-1, Trn,^,,sdale J . Human major histocompatibil ty ccn- plex genes, Beh' ng Inst Mitt 1994 :94:17-25 . Raulet DH, How ,(6 T cells make a living . Curr Biol 1994 :4 :246-51 Salter RD, Benjamin RJ, Wesley PK, et al A binding s to for the T-cell co-receptor CD8 on the u; domain of HLA-A2 Nature 1990 ;34541-6 Sloan-Lancaster J, Allen PM . Altered peptide-ligand induced partial T cell act vat o,i : molecular mechanisms and role in T cell biology . Annu Rev lmmuno~ 1996 ;14:1-27. Stern LJ, Wiley DC Antigenic peptide binding by class I and class II histocompatibility proteins . Structure 1994,2 245-51 Stern LJ, Brown JH, Jardetzky TS, et al . Crystal structure of the human class II MHC prote r HLA-DR1 complexed with an influenza virus peptide. Nature 1994 :368 :215-21 Weiss A, Littman DR Signal transduction by lymphocyte antigen receptor . Cell 1994,76:263-74 Williams AF, Barclay AN . The immunoglobulin superfamily - dornains for cell surface recognition Annu Rev lm,munoi 1988 ;6 381-405

La generation de la diversidad
El sistema inmunitario as capaz de reconocer a muchos antigenos (Ag) y de responder ante ellos, mediante la generation de una Bran diversidad tie anticuerpos (Ab), producidos por las celulas B, y de receptores de Ag, expresados por las celulas T. Las inmunoglobulinas (Ig) constan de cadenas ligeras y pesadas . Las cadenas ligeras pueden see K o i . El numero de posibles puntos de union con el anigeno es igual al producto del numero de cadenas ligeras y el numero de cadenas pesadas. Las cadenas ligeras de las inmunoglobulinas estin codificadas por segmentos genicos V y J . Las cadenas pesadas tambien estan codificadas por segmentos V y J, pero la diversidad es aun mayor, debido a la presencia de segmentos genicos D. La diversidad se genera mediante la recombination de un numero limitado de segmentos genicos V, D y J, que da lugar a tin numero enorme de dominios variables . Las cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulinas sufren modificaciones estructurales despues de la estimulacion antigenica, en un proceso denominado mutation somatica . Este fenomeno no ocurre en el caso de los receptores de las celulas T. / Los TCR son generados por cuatro grupos diferentes de genes : los genes u y Ii son expresados por la mayona Lie las celulas T perifericas; los genes y y ii, por una subpoblacion de celulas T timicas y por una pequena poblacion de T perifericas . / La diversification de los receptores TCR se produce tambien mediante la recombinacicin de segmentos genicos V, D y J, existiendo ligeras variaciones que dependen del locus implicado . / La recombination de los segmentos genicos V, D y J esta controlada, al menos en parte, por dos genes activadores de la recombination IRAG-1 y RAG 21, tanto en las Ig como en los TCR . / Ademas de las combinaciones simples de las regiones V, D y J, existen otras fuentes de diversidad de los TCR y de las inmunoglobulinas, como la diversification en las regiones N, la variation en las junturas y la presencia de multiples regiones D . / La conmutacion entre [as diferentes clases de Ig se produce mediante la recombination de los genes VDJ con diversos genes de la region C, y mediante diferentes sistemas de elimination de intrones isphcingl del ARN .

La capa :idad del sistcma inmunitario para reconoccr a Iris antigcno% dcpcndc do to% anticuerpos productdos por l :ts celulas 11 s, do los receptores tic antigeno que cxprcsan las rclulas T . Aunquc la hernia cn que la% celulas l N Lis celulas B reconocen a loos anti gcnos son bastante diferentes, anibas pohlaciornes cclularcs sort capaccs tic rccrrno :cr una antplia ganta do anngcnos . Pest a [as difcrcttci:ts cntrc Ices anticuerpos s, los receptores do Ias celulas T, los proccso . celuhtrcs N' molccularcs Line gcncran la discr%idad tic antlxn tipo% do ntolcculas son min, parccidos . IM cstc capitulor sc cstudia la tin- ma en que cl sistcma inrnunitanor genera una enorrmc di%crsidad do anticucri "o% y tic rcccpton-c% tic antigeno do las celulas T (hCR, del ingics T icll receptors), catia throe tic cllos colt una esprcifi:itlatl ,tntigcnica difcrcntc . l .o% .utti:uctpo% l,rcscntan una noiahlc divcrsidad, N prorporcio ran tin numero do puntos do union diferentes suicientc ctmto par.) rccontrrccr lo% millomcs tic dermas antigcnicas prcscntcs cn cl entrrr no . :Adcmas, cada dasc tie anticucrpo prscc una region cte:arra caracteristica, tic tal forma que las IgE . Ixor cicntplo, %orn i .y,aies tic unirse a los receptores tic F : tic Irr, ntastorcitos, micntras que hts Ig(i son wpa:es tic unir%c a Irr% tagocitors . Sc ha cstimado que cl numero do anticuerpos diferentes que produce tin indisidur~ es nta)or que cl numero tic todas las dcrnas proacinas junta% . 1)c Itcato, cl numero, tic ant icuCIixrs que I,rerduvimc,% CS tnasor que CI niu11cro tic gcncs (Iuc conticnc nucstro gcnoma . ;( onlor cs posiblc gcncrar scrnciantc tic %cnidad? IA)% co):chtors aCCrca do la sintcsis tic anticucilxrs h,tn cambiado cornsidcrablcntcntc a lo largo del tiernpo, pcrorc%,Arrprcndcntc Irr 11111(110 Chic %c accr:o Ehrlich cuandor cmutcioi so teoria tic la% cadenas iatcrales a principios tic cstc siglo qiq. 8'.l ) . Su con:cptor tie la selection inducida Ixrr cl antigeno %c aproxinta ha%tantc al coilccptcr ntodcrno tic sclcccicin clonal, cxrcpto por cl hc:lto tic que cl opinaba que cn cada celula cxisnan %anon rc:cptorcs tidcrcntc% .

TEORIAS SOME LA SINTESIS DE ANTICUERPOS

Despucs de Ehrlich, la situation sc Inio mas contusa . I .os prorblcnt% surgicrrrn dcbido a que sc contcnzarorn a %intctizar machos

Fig . 8 .1 . Teoria de las cadenas laterales de Ehrlich . La combination de un antigeno IAg) con un receptor sintetizado previamente por las celulas B (que en la actualidad se sabe que as un anticuerpo) desencadenaba la production y secretion por parte de la celula de mas receptores del mismo tipo . Aunque an el diagrama se observa que Ehrlich penso que una misma celula era capaz de producir anticuerpos capaces de unirse a diferentes tipos de antigeno, es evidente qua previo tanto la teoria de la selection clonal como el concepto de que at sistema inmunitario puede generar receptores antes de establecer contacto con el antigeno .

La

gereracion de la diversidad

ccmrptrcstos or~-anicos nut)-cu, c_ I .andstcincr file dcmostrandco yut cl sistcnta innrtrllitarico cr .t capaz tic rcaccionar trcntc a cada uno dc cllos, producicndo anticucrpos especificos. No o se creia 1)osiblc yuc cl sistcma inmunitario hul)iesc sidco c.tpaz, mcdiantc scltccicrrt natural, tic conscn- ar los genes dc todos estos anticuerpo% dirigiders Irente a compuestos artificialcs sintctizados rccicntcmcntc. Ftito Ilcm al dcsarrofo dc la hip6tesis instructi) a, SCgun la cual una nuolccula dc anticucrpcr flexible scria ntodilicada por cl antigcno, dando lugar :a till punto de union conIPlemen tario. Con cl CSPcctactrlar ticsarrollo do la hiologi.t n10lccular a to largo dc ]as dccadas dc 1950 v 1960, la hipotcsis instructix- a sc hizo insosteniblc, )a clue yucdo claro yuc cl mccanismo mcdiantc cl yuc sc tcndria quc Ilc) :u- a cabo la su1)ucsta -instruction- scncillarncntc no c\istia . Los ccmccptos sc imirticron dc nucco, las tcorias sclectiras x- olx icron t ganar adcptos, proponicndo li nalrncrttc Icrnc y Burnct la tcona tic la sclccci6n clonal . Scgun csta teoria, cada lint6cito produce tin unioo tipo dc innnrnoglcr l)ulina, y cl antigcno ,clcccioona \ cstimula las cclulas yuc produccn cl ti1)o tic in numcrglohulina aciccuado. Sin embargo, csta tcoriu no cxplicaba cl problem.( dc la di)crsidad dc los anticucr-pos . Una solution consistia cn acimitir (Iuc txistia till gen independicntc par:( cada :uttitucr1)0 es1)ccifico . Fsta solution prescntaba tin problenra inntediato . Se subia quo: las caticnas [it eras presentan tint secuencia dc antincoacidos ) Ariabic cn la mitad dc la cadcna, micntras yuc la otra mitad Prcscnta unit secuencia constants ; tic la misma forma, ]as caticnas pcsadas presentan )ariahilidad cn un :t cuarta parte dc la cadcna, micntras yuc cl rcsttr cs constants. Fn C.tso do yuc cxisticscn tallLos genes, ~ccinto era posible clue cstas secuencias constantes Iire stn imualcs cn todcrs cllcrs? I)rt)er) BCnnett 1)ropusieron una solucicin a cstc problcnta, sugiricrulco yuc las partcs constantcs ) )ariables dc las cadcnas estaban codificadas pcrr genes diferentes, quc cxistian solamente uncr co Limos pcocos genes yuc codificaban las rcgioncs constantcs i :( :1, micntras clue Ix, rrgicrncs )ariablcs Iran coditicadas pcrr una gran cantidad dc genes diferentes . ;Altora la tcoriu t'u solo tcnia yuc cxplicar como cr :t posiblc scmcjantc multiplicidad dc regiones xariablcs! Para intcnttr solucionar estc problcma tic la di) crsidad, sc ProIrtrso cl conccpto dc

nnitaiic'm son) .itica, xgiin el cual tin numcrco rclatnamcntc pcclucno dc genes dc las cclulas gcrminalcs tta lugar a milt )eos genus nttrtacios a to largo dc la tida cicl indi)iduo . Tambicn sc sugirio cite podia cxistir tin cicrto nuntrro dc scgntentcos genicos yuc SC rcconil)inari.tn I).tra dar lugar al gen V completo . I)urantc cl cortc v reconstruction ticl AI)\ sc podian insertar nnCxoS nuclctitidos cn los cxtrcmos scuicmados aumcnt :utdo .tun nras la ) ariabilidad, Icn6meno quc sc cicrnonina dis crsidad cn la region porque la secuencia no once codificada en [as cclulas gcrntinales . Otra po sibilidad cs quc no sc tratc de una nurtacic5n, sinO do la utilizacilon do tin panel do seutic>genes Para modificar la% secuencias cicntro dc la region variable mcdiantc tin proceso dc Conti-sicin genica . Dc csta mantra, sc abrian cinco caminos posiblcs fi -cntc al problcma dc la gcncracion dc di)crsidad : " I a nnrltiplicidad dc genes dc la region V to Las cclulas germi nalcs. " La nrtttaci6n somatica . " La rccombinaci6n somatica cntrc Icos clcntcntos qut ccnnl)oncn tin gen dc la region V. " I .a cc)mcrsicin genie:( . " La aciicicin dc nuclc6ticios . En la actualidad, sc sabc yuc cstcrs cinco mecanismos intcr icncn cn la gencraci6n dc di\crsidad cn lcos rnamitcros l;fH. R. .3) . Es intcrcs .mtc cl Itccho dc yuc cn Icrs tiburoncs la di)crsidad surgt exclusi)amcnte det)ido a la cxistcnci.t de tin Bran nunxro dc genes clue ccxiifican anticucrpos, sin yuc sc produzca cn esta especic la recombinaci(rn somatica, micntras yuc cn las axes cl numcro c1c gcncs yuc codifican anticucrl)os CS mtn' I)cyucfo, pcro cl grado dc comersicin genica cs nun clc)ado jx . cap. 15) .

VARIABILIDAD DE LAS INMUNOGLOBULINAS

Las illntunoglcobulirras estan compucstas dc cadcnas hgcras 1)t sadas; las cadcnas ligcras pucdcn scr tic tipoo h o i.. Conlo practicamente cualyuier cadena ligera se Puccie tombinar con cualyuicr cadcna pcsada, cl ntimcro tic I)osihlcs 1)untos tic union coon cl :urti('cnco Cs igual al 1)roducto (ICI niimtr0 do catitnas I)csadas

Generation de la diversidad de anticuerpos

1 . multiplicidad de genes

2 . mutation somatica V

4. Conversion genica

15 . Adicion de nucleotidos

fpn V2 . .OVni recr~ l lV

+seudorregiones

+J1 12 Jn l +nucleotidos recumbmacion

I J2

II

proteinas de la region V Fig. 8.2 . Se hall propuesto cinco mecanismos mediante los cuales el sistema inmunitario genera diferentes regiones V en las cadenas H y L de las Ig : 1) Multiplicidad de genes . Existe tin gran numero de genes diferentes (V1-Vn), y cada uno codifica tin dominio V distinto . 2) Mutation somatica . En la ontogenia de las celulas B se producen mutaciones del gen V initial, clue dan lugar a genes diferentes en cada clon de celulas B. 3) Recombination somatica . Existen tin cierto numero de segmentos genicos (J1-Jn) clue se recombinan y se unen a la parte principal del gen de la region V. Este fenomeno se produce en la ontogenia de las celulas B, y conduce a la production de una proteina con elementos codificados por diferentes segmentos genicos. 4) Conversion genica . Se pueden copiar diversos fragmentos de ADN de una serie de seudorregiones V en la region V para modificar la secuencia de ADN. 5) Adicion de nucleotidos . Cuando se cortan las regiones V y J, se pueden insertar nucleotidos antes de unirlas en las clue se codifiquen aminoacidos adicionales . Los cinco mecanismos intervienen en la generation de la diverslclad de los Ab de los mamiferos.

Variabilidad de las inmunoglobulinas

t cl ntimcro dc cadenas li,~cras . 1'artc tic la c - ariahilidad dc la estructura dc ],Is ill nrtrn0L;lohulinds SC tlehc a las intcraccioruc Cn ire estas dos cadenas polipepticlicas ditcrcntes . Por cicmplo, si ezisten 10' cadenas ligcras ojitcrcntcs, cads una (IC Ids cualcs Cs Capal . dc unirsc con cuAyuiCra tic la,, Ifl' cadenas pcsaclas ditcrcntes, tcoricarncntc son posiblcs 10' anticucrpos coil ditcrcnte csl,ccificiciad . Para cada Lit)() tic ION tilx>s CIc CICICIMS Csistcn me canismos t1c diccrsificacio'm indCPCndicntcs, ca yuc cstan codificadas cn cromosornas ditcrcntcs i,fq. ,1'..3). Ell polirnon-Iisnto do Ids innurnoglohulinas sC dcbc a cariacior rtes cn zomas mut discrsts dC 1 .1 m<,Iccula ,411. ,"'.-f) . 1-:n primer lugar cstudiarcrnos la variabilidad idiootil,icd, Cs c1ccir, la yuc ',it[--C como consccuencia dc la xariab)lidad dcl Iwnto tic union corn CI anti ,cno . habat \ Wit analizaron las rcgjoncs variables a partir dc las sccucncia, tic arninoaciclos dc muchas cadenas IiL;cras \ pcs:tdas. Utilizarom comer tircntc dc antictrcrpos itlcrtticos cclulas do snit

localization cromos6mica de los genes del CPH y de los receptores de antigeno peptido IgH rat6n 12 16
r:

Ioma )Cnr11oreS dC cclulas 11 monoclonalcs productoras dc anticucrpo i . t)bscrc iron yuc la , ariabilidad dc la% cadenas litcrsu i. sc co>nccntraba cn tl-CS rcgiomCS hil,cnv- iahlcs, rodcaclas porr una scric do aminoacidos c,tructuralcs yuc prescntaban pocas sariacioncs . Estas rq~iomes hipcrcdriablcs sc cicnominan rcgioutcs dctcrminantcs dc la complcn,cntaricdad f R1)( . ) \, Como sc ha dCr11oStI- ddo Postcriormentc, spin Ix, yuc cstal,lcccn cl conltactor toil cl antigenoo . Los estudio~s iniciales tirerom Ilex :ttlos a Cabo en ratomes, una especie cn la yuc nacnos cicl 5)'%, dc Iors antiCzrcrl,os ContiCllen ca clenas -1 ., por lo yuc la di\crsidad cs mcnoor . i Esto cs clebitio al pe qucfiur n6ntcro dc genes Vi, c1cl raton, s Dc csta tirrma, 12 sccuencias dc cadenas i. dc entrc ]as 19 yuC SC Cstudiaron resultaron scr idcnticas, micruras yuc las otras , sol :uncntc ditcrian cntrc Ni v dc la secuencia pro tortipiCa Cn tutus pocos aminoacidos) hr7 . R-i'i . 1)c la misma mantra, la variabilidad tic Las cadenas pesadas tantbicn sc conccntra cn trcs rcgiornes hipcrvariablcs, czisticndor una cicrta \-ariabiliclacl residual a ambors Iado~s do las RI)( : (fq. S.G1 . l as rcgiomcs cstructurdICS tic las cadCn:ts PCSadas I Ids sccucncias situadas cntrc Ias Rl)( ) sC puCcICn cl :tsificar cn gr - t~ptrs, scgirn CI parccido o icicnticiad tic sus sccucncias (;Jiq. ~1'. -) .

ser humano 14 115, 16) 22 2 14 7 7 14 6 15 Variabilidad de las cadenas ligeras i. cambios de bases con respecto a la secuencia 7- prototipica posici6n 0 25 50 75 100 proteina de mieloma SAPC 178 1r -HOPC 2020 LI SAPC 176
RPC 20

6 14 6
13

TCRu TCRj3 TCR ,f TCR6

14 17 2

CPH b2-microglobulina

---- T/

-1--14
-

Fig. 8.3 . Los numeros indican la localization cromos6mica de los genes de los diversos peptidos en los seres humanos y en el raton. Todos los loci estan completamente separados, con la unica exception de la cadena 6 del receptor de las celulas T (TCR), en el mismo loci que la TCR(s .

2
1

Y 5444 PC 5060 variabilidad 150 -

Y 5606

Variabilidad de la estructura de las inmunoglobulinas

W;

1 . isotipica

2. alotipica

3. idiotipica

100

25

50

75

100 posici6n

Fig. 8.4 . Todos las inmunoglobulinas presentan la estructura tetracatenaria basica . La variabilidad de las mismas es de tres tipos: 1. La variabilidad isotipica aparece en la linea germinal de todos los miembros de una misma especie, dando lugar a las cadenas pesadas (to . 6 .7. o;, u), a las cadenas ligeras (Igx, i.) y a las regiones estructurales V (subgrupos). 2. La variabilidad alotipica se debe a la existencia de diferentes alelos dentro de una misma especie. 3. La variabilidad idiotipica se debe a la diversidad de los puntos de union con et antigeno (paratopos) y, en concreto, esta relacionada con los segmentos hipervariables .

Fig. 8.5 . Secuencias de aminoacidos de siete proteinas i.1 de mieloma murino . Las posiciones amarillas indican identidad con la secuencia prototipo (MOPC 104E), mientras que las marcadas en rojo corresponden a las diferencias. Derecha: n6mero de modificaciones de bases del ADN necesario para que se produzca la correspondiente alteration en la estructura de aminoacidos. En la parte de abajo se muestra un grafico de Kabat y Wu, en el que se representa la variabilidad de las cadenas ligeras, expresada como el cociente entre el n6mero de aminoacidos detectados en una cierta position y la frecuencia del aminoacido mas reiterado en esa misma position (comparese con cap. 6) . Flechas: lugares en los que aparecen aminoacidos adicionales en algunas de las secuencias estudiadas .

La generation de la diversidad

Variabilidad de las cadenas pesadas

variablei- 150 dad de las cadenas pesadas 100 50

totIJIMCtttC clifcrenCiada, eino yuc Clucthn separadots por UtIOS 1 .500 pares de bases. Enti-C los scgntentos \' t . ( : se cncuentra situado tin pcclucno tranio dc Al)\ dcnortninado set mcnrot I ticl inglcs joiuittq, union), que cn ]ON CrOMO-,alma-, rcordenados Cst.i UnidO directantcntc al seg,mcnio \' . ~ El set mcnto> J no sc tlchc confundir con la cadcna J clue aparccc cn Ias IgM \ Cn ]ON ditncrOs tic IgA . ;~

Estructura del sistema de cadenas ligeras . El scgntcnto gc

20

40

60

80

100 120 position

Fig. 8.6 . En este grafico de Kabat y Wu se observa que la variabilidad se concentra en tres regiones del dominio variable de las cadenas pesadas.

RECOMBINACION DE LOS GENES DE INMUNOGLOBULINAS Los segmentos genicos V y J de las cadenas ligeras se recombinan para dar lugar a tin gen que codifica el dominio V

(-On la iia ~xi.iccio~~t : c la , tccnicas ~irl - \I)\ rcomthin .tntc, sc pudoi Cntln-cndcr cl anahsis Lie lots genes clue CodifiCan loss anti cucrpos. ,A rain de CStttN Cstudios, se descubrioi que Ias rcgioncs constantcs v sariablcs dc Ias cadenas lit rras est n cotdifiCad;ts pOr dots scgntcntos indcpcndicntcs do :'\l)\ . En Ias cclulas que not produccn .tnti000rho%, CNIOS SCgmcntos QCt11COS SC Cncucntran ell l)Ouici0 IICS nIUV distantcs dcntro del cronutsontt, nticntras yuc ell Ias ccluhs (]Lie Si clue Ion produccn los scgntcntOS Sc cncucntran m.is pro'tsimos . Sin embargo, los dos scgmcntots gcnicots not sc llcgan a unir dircctantcntc, ni sigUicra cn Una Cclula 11

potcncialntcnte filnciomalcs, 10 muestran cictcctos Ides t 25 sotn Scud0gcncs . I)urantc cl proceso dc dilercnciacioin tie las cc IUlas linl6idcs sc produce tin rcorcicnamiento del AI)N dc mode yuc unot do lo', genCS \' se title coil unit dc ION cincot genes 1, dc manes que se puccictt ol,tcner unas I50 reggiones cariablcs dc Ias cadenas r: 130 > ;,) . Cacia scgmcnto \' \a prcccdido pots Urta SCCUCnCia SCna1 o hdcr, que COtlSIStC en ttna Corta SCCUCnCia hidrottitb.t cncargada tic dirigir la cadcna hacia cl retiCUlo Cnttoltl:tsnt.iticot . 1 . :t %CCUCnCia IIIICr CS C%Cindid:t ell diCho rCtiCUIO cndOplasm tit:O V, a Coil till UaCioin, la ntotlccula cs proccsad :t a trascs dc ht via do %CcrCCio'nt intracclular . El lOCUs del gin }. ItLiIMttttt ContiCnc tin grupo tic gcnCs \', perct each UIIO Lie JO-, ? genes C: sc acompann de Lilt tinicot gen J. Sin embargo, cl ltrOCCSO do rccotntbinaciom \'-J cs parccido al clue sc ha descrito part Ias CadCnas rc ff11 . 5' .91. Tras la rcotrdcnacio'tn, siguc c\isticndo tin intr6n (sccucncia intCl-C:tl :tti :t no codifcadorai cntre lots genes I s. cl gen yuc co difica la region (:. A COntinuaci6n, todo cete scgntcnto c1c AI)N !oicsdc cl lidcr hasta cl c\trcntot del ;gcn incluidots lots introncs i cs transcritoo t . da IUgar a ARti nuclear hcterotgcnco iAR\ltn), cs dccir, AR\m no procesadot . N'US tardC, SC IICta a Cabot cl proccso do Chntinaci6n tie introncs lsplici ;Jgl, ObtcniendotSC tin AR\nt clue pucdc scr traducido para dar 1Ugar a protcinas.

niCo \'K Cotdific :t la rrgiottt \' Lie I .ts ctt]Cn .x ligCr;ts Lie ;uttiCUcrp0S, h.tsta CI :urtimriciCIO 95 inclusitc, Cl scgtncntot gcniCO Ir< codifica CI rCStt) de la region \' ~flt . 8A, Solo C\Istc lull gctt para la region constants, pero en los hombre-, dc ION '6 gCncs de \'t;, 35 salt

El grupo VHIII de cadenas pesadas humanas

estructura position 1 1 ^~
i

RDCI 20
I 30 1 35 36 il_i

estructura
40 I 50 52 53 I ! I

RDC2
65
I

L TEI

EV0LVES000LV0PGGSLRLSCAASGFT F S T S A V' Y BRO YYNIMN TUR IR V L S S POM L TIL V Mu WAS DI IM! 1"" SL _S

wLvR QI AI PI GI K G L E W! V G W R Y E G S S L T H Y A, V S V Q G SIA I G-TIIAIGjDj~Y, Sjik GI I , Z G LL ~,LVFS , VT K - IQ E'A K,

NI Di

~! DI

-! V_ S Z SI ! IN SI FYTE F, L

TRGGLE

AI

Fig. 8.7 . Esquema en que se comparan los 65 aminoacidos del extremo amino de seis mielomas humanos del grupo VHIII con la secuencia prototipica TEL Los aminoacidos identicos a los clue aparecen en TEI se muestran en color amarillo ; los aminoacidos clue difieren de los que aparecen en la misma position en TEI se

muestran en rosa oscuro . Dentro de tin mismo grupo, la mayoria de las diferencias se concentran en las regiones determinantes de complementariedad RDC1 y RDC2 . La tercera region hipervariable no se muestra en la figura .

Recombinacion de los genes de inmunoglobulinas

Los segmentos genicos V, D y J de las cadenas pesadas se recombinan para dar lugar a un gen que codifica el dominio VH r~ ir,>> I-rri .thlc do Ltti ' .xlci .u pcsldas tambicn csti codificada pr~r ~cgntcnurs'i, nii<~s din embargo, cn cstc caso sc gcncra

uno discrsidad adicional, dchido a la csistencia do un tcrccr scgmcnto gcnico 1) (dis crsidad ) i;/itf. N .10) . El ugmcnto 1) Cs nntr s ariahlc, canto cn to rclatiso .tl nuntcro do codoncs coma a la sccucncia do }arcs do bascs. En los anticucrpos quc SC UnCn al dc .\trano, cste segntcnto csti compucsto por dos aminr~:icidrrs ; cn

Produccion de cadenas ti en humanos Fig. 8.8 . Durance la diferenciacion de las celulas pre-B se produce la recombination de uno de los diversos genes Vrc del ADN de la celula germinal (V1-Vn), que queda apuesto al segmento Jr< (Jr<1-JK5) . La celula B transcribe un segmento de ADN a un transcrito de ARN primario, que contiene uno secuencia interpuesta de gran longitud con segmentos J adicionales e intrones . Este transcrito se procesa a ARNm mediante la reunion por elimination de intrones (splicing) de los exones y es traducido por los ribosomas a cadenas kappa (k). En la imagen el ADN de la celula B se representa en marron claro, el ARN en verde y los peptidos de inmunoglobulinas en amarillo . Sdlo se muestra uno de los multiples reordenamientos posibles .

CK

V2

V3

Vn

2 13' ;4' .5

ADN de la linea germinal ADN de la celula B [_ Ca

V2 '114 J5]

LV2

41[J5

por-A

primario ARNrn cadena kappa

' V2

4 Gc

poh-A

VK

CK

Produccion de cadenas i. en humanos

I , 11-'-

:01r .

Vt ~

Vn 1

J1

C1 I

J2

C2 I IJ3I''~ C3 ADN de la celula B

LJ4 C4

J5

C5

JG [C6

J7

C7 Fig. 8.9 . En la diferenciacion de las celulas B, uno de los genes Vi. de la linea germinal se recombina con su correspondiente segmento J, originando uno combination V-J . El gen reordenado es transcrito, dando lugar a un ARN primario que contiene intrones (segmentos no codificadores intercalados entre los genes), exones (que codifican la proteina) y uno cola de poli-A . Este ARN es sometido al proceso de elimination de intrones y da lugar al ARN mensajero (ARNm), que es traducido posteriormente para formar la proteina correspondiente .

IV

J2

C2

- ~V1

J2

C2

ARN primario ARNm

V1

J2

C2

V1

i C2

cadena lambda

Recombinacion V-D-J en humanos VV3 -!, Vn D1-D30 JO J116

t

I ---j

L--

V~ 3

genes CH de ADN de la linea germinal

ADN de la celula B gen V-D-J funcional

Fig. 8.10. En el loci genico de las cadenas pesadas se recombinan tres segmentos, para dar lugar a un exon (gen V-D-J) que codifica el dominio VH . De los mas de 80 genes V, unos 50 son funcionales, mientras que los restantes son seudogenes. En las celulas B uno de los genes V se recombina con uno de los treinta segmentos D y uno de los seis segmentos J, produciendo un gen V-D-J funcional.

La generaci6n de la diversidad

los que se linen a fostitrilcolina se insertan Itasta oclto antimr,tci dots, los anticucrpos antilcuno ctreccn dc "to: scgntcnto . Atictnis, NC I)ucdc f6rrnar una rctioin 1) do ntat()r tantano motlianto la in scrviorn do multiples segmentos 1) . l.a region 1) I)ucdc scr Icida se grin trcs pautas tic ICCtUra ditcrcracs, sin yuc se gcncrcn codoncs de intcrrupcion do la Icctura, to yuc hacc yue Sit al, (n- Mcion a la diccrsidad sea atin nt .ttor. Vista la tcclta se hall dctcctado .;ll scgrncruon 1) ell la ,, lincas gcrrninales . En el cromosonta 14 So: cncuontran 87 scgntcniw V1t, do los yuc al menos 32 con-rcsl)ondon .t scudorgcncs . Rcsulta intcrcsantc yuc, adcntas, sc cncucntrcn go tics VI I y I) adicitmalcs en Ion cromosontas 15 y 16, alguIM de los cuales poxiria scr tiutcio)nal, atrnyue todasia nor existen c\- idcnci ;n do yuo ct)ntril)ut .ut ntas a la di)crsidad . La unittit ntcdiantc rccotntbinacioin tic los scgntontos V, D v I do Ias cadcnas pcsadas CS una do ]as tircntcs principalcs do tariabilidad cn la region tictcrntinantc tic la contplententaricdad lil)C3, yuc CS una parts esmcial del pun to) tic union con cl antigcno . En algtutos sistcntas, coma la fantilia tic los anticuorl)os antidcxtrano, cast today Ias difcrcncias cntrc Ions :utticucrpon so cornccntran en dicha region .

son actnos carcccn tic cclulas T y It maduras, t- a yuc no son capaces tic sinteticar rcceptores tic ]as cclulas T ni innnutogh)btrlinas, rcspectkamcntc . Sc ha demostrado quc la intcrleucina-7 11 .-7 'l, una citocina quo: produccn algunas cclulas tic] cstronta tic la ntctiula ()sea, rclula of grado) tic c\prcsion tic los ;~cncs R;\G I y It-W-2 . Loos cstudios con sustratos tic A1)\ sintctico)s quc conticncn sccucncias Itcl,ta V nonatttcr'lcas, junta) corn sccucncias no crnp,u- cjaxias tic 1 2 c 2 .3 , l,asos t. I( .-\(i 1 s 1t-\G2 purific ;ttios, hall dcnaostrado yuc cstas I,rotcinas intertiencn ell la toWmacion tic] complcjo sinaptico cntrc dons RSS. La printcra fasc dc cstc I)roccso consists cn la union dc R,A(i-I con la sccucncia nonantcrica para yuc postcriorntcnto Io Raga RA(;-2, yuc no SC pue tic ligar al ADN po)r si solo, cerca tic la sccucncia no cntparojada (do: scparacion Y dc 12 bases. Dcspucs SC prodLICC la sinapsis cntre Ias sccucncias not cntparcjadas dc 12 v 23 bases. Este prtrccso ptrede set- mcdiado poor cl complcjo 1Z'\(i I RAG-2 en la sccucncia net cntparcjada do 12 bases del no)ttantcro of por cl contl)Icjo 1L\G 1 ell la sccucncia do 23 bases del nonantoro. Dcspucs do la union, sc produce la cscision dirigida por Ias secuencias heptantcricas en los hntitcs cntrc [as rc ,ioncs codificadoras V (1)j-j v los hcptarltcros . La cscision comicnza introducicndo una pcyucria soluci6n do continuidad en Ias pro)xintidadcs del cstrcmo ;' del hcptantcro scital y do la region codificadora . Esta zona se cam ierto lucgo Secuencias de recombinaci6n 2

Las regiones V se reordenan y expresan de forma programada, durante la primera fase de la vida fetal
( :uando

so : inrnuniza a ditcrcracs anintalcs coon cicrtos antq cru)s durantc la s At octal o al poco ticntpo Lie[ nacinticnto, la capacid:td do rcspucsta frcntc a cada antigcno aparcco cn till montcnto) de tcrntinado, for quo: sugicrc la cxistcncia tic till proccso de dcsarror Ilo prograntado . Ell la actualitlad, sabcntos title CIL ]()S 1101111,11-0 C11 primer lugar cntran on jucgo Ias rcgioncs V may prtiximas a Ias rcgioncs 1, sicndo notable cl Itcclto dc quo: la sccucncia do V6-1, cl gcn V tnas pro')sintor, cs tinica )- csta Neil conscr ada . En Codas Ias espccics do primates estudiadas csistc una irnica copia dc estc gcn, t, dcntr() do una misnta cspccic no sc ohscr)an tariacio)nes de la sccucncia. Entrc los sues hunwnors Y taros primates solantcntc )arias Lilt 2"i, dc l()s nucloo)tid()s, Este rcpcrtorio total c()titiClIC una clotada cantidad tic auto:ut ticucrpos, lo) quo: sugicrc yuc la autOinnutnidad podria scr dcbida, al men(),, ell parts, a anonnahas cn cston protccso)s prcliminarcs . En lots tuntorcs tic Milks 11 inntaduras tantbic SC ohscrt a una abuntiancia :utorntal do deterntinados segmentos V, aparccicndo 20 segrncnto)s V cn cl S5"'i, dc ],is Icuccntias lint6citicas cronicas .

cadena kappa

cadena pesada

La union de los segmentos genicos esta controlada por secuencias situadas en los flancos de los genes V, D y J

I .) rc :~nt~l)itr,r~it;n do Ion scgntctttos gcnicos CS tin aconttc :itttirtr to, cscnoal l) .rra la e.cncracioin dc genes futtcionales dc ] .is regl(mcs tArial,lcs Lie Ias cadcnas ligeras v pcsadas. Sc cntpieza t conoccr cl ntecanisnto exacts) mcdiantc cl cual se Ilct a :t caho esta rcconnbin.tciiin, ;tl ltaherse descuhicrto secuencias yuc IMI- 000rt actuar c()nur schalcs dc rcconthinacibn (fiq . 8'.11) . 1'na do cstas sccucncias se cncucntra -corricnte abajw" (3'j Lie lots scg,ntcntos gcnicon V 1) . (~onsisto ell cl hcptantcr() (ACA(i IY; of tin analogo tic] ntisnto, scguido por till cspaciador CLIVA sccucncia tit.) NC Ila cortiSCI-Vado )-, a continuaci6n, cl non.intcro) ACAAAAACC () tin analog( del mismo . Inntcdiatantcnte -Cotrncntc arriba- i; 5'~ do todon Ion scgntcnto', 1) \ I do Ias lincas gcr minales, sc cncucntra la sccucncia scnal corrcsporndionte, forntacia tanthicn por tin nonantcro v till hcptantcro scparados por una sccucncia no Comer\ada (23 bases'). la sccucncia heptantcrica t. nor nantcrica quo: se cncucntra a continuaci6n dc till scgntcnto VI-, \'11 o 1) cs complcntcntaria corn la quo: precede al scgntcnto) It , 1) o /H con cl yuc sc recombina . Los trantos do bases no cmparcjatias, una Lie 12 bases do lontgitud t, cl ()it- () dc 23 bases, 10 title corl-cspoliclo: a una v don \trcitas coniPlotas tic la doble ltclice, rcspccti\'atncntc . EI proceso do rccornbirlaci6n csti controlado, al ntcnors ell parts, poor dots genes acti,adores de la reco)ntt,inacion i RA(i-I c RAG-2, del inglcs rccomhinrttiort raclirottin~7 i7crrc~) . Sc ha ticntostrado yuc Ias ratones ell Ion yuc Ias genes IL\(i-l v IL,W-2 no

m exones . intrones : secuencias no E emparejadas z citosina

adenosina

c-t guanosina o timosina

Fig. 8.11 . Se ha propuesto que los acontecimientos recornbinatorios que se produces al unirse los segmentos V y J (cadenas ligeras K) (1) y V, D y J (cadenas pesadas) (2) son facilitados por el reconocimiento por parte de RAG-1 y RAG-2 de lay secuencias de bases de los intrones que se encttentran a continuaci6n de los extremos 3' de V y de D y lay que precedes al extremo 5' de J y de D. La secuencia de los espaciadores de 12 y 23 bases no esta conservada, pero si to esta su longitud, que corresponde a una o dos vueltas de la helice del ADN, de forma que lay secuencias hepta y nonamericas aparecerian en el mismo lado en lay dos helices del ADN, permitiendo la interacci6n de lay proteinas RAG.

Recombination de los genes de inmunoglobulinas

por action tic las protcinas ICNG en una rotura tic doblc cadcna, yuc genera una zones pares tinalizar la codificaci6n . In vitro sc pucdc tisualizar cstc teno)ntcno dc torte con t;tcilidad, micntras quc in riro sc tc con mat-or dificultad, aunyuc tambicn SC produce, dada quc se introtiuccn ntas nlOdlfieaeionCS cn la Z011 .1 antcs dc la union iJia. 8'-1Zi .

El punto en que se unen los segmentos genicos V y J puede variar ligeramente

l .a cnstcntia do ligeras tarrtciontcs cn cudnto) .t Los I)()sicio)ncs vii quc sc rcctnnl)inan Ion segntci)u)s genera aun n)as ditersidad . Por cicn)plo, cl antinoacido 9; de una cadena ligera n suck estar codificado por cl ultimo codbn dc[ scgmcnto ,,ci ico \' ; cl anainoacido) 9(i suck cstAr codifie:tdo po)r Cl primer triplctc ticl scgntento Ih . Sin embargo, cn algunas ocasioncs, cl antinoacitio yuc oittpa la posici(Sn 96 csta ctxiifitado por un triplctc hibrido, ti)r. ntado por ht segunda t la tcrccra base, o silo por la tcrccra, dcl prin)cr triplctc dcl scgmcnto) Ih, t . la printcra o dos prinxras ba-

acs tic] intrtin contiguu al cstrrmo ;' dcl scgmcnto genies) \'' I`Ji i . 8.13'1. Esic tcnointcno pro\ oca t ariacioncs dc la sccucncia dc anunoacidos . Es cs idcnte yuc pares quc sc prt)duzca una cadcna ligcra tiutcional, no sc dchcn proxlucir dcsplazanticntos do la pall to tic Icctura; si Ios segmentos sc ttncn fucra dc fast, los anti cucrpos yuc sc producer no SOIL fil.1116011,11CS. En less cadenas pesadas Sc pucdcn producir imprccisioncs parccidas .tl unirsc Ios scgmcnttx gcnicon 1) t . Ill, pudicndo) rcsul ./in 8.14) . Adenaas, czistc una i tar atcctados hasta 10 nuclctitidos . cnAnta, la tlesozinudcotidil transferasa terminal, yuc CS capaz tic inscrtar unos cu .tntos nucle()tidos entrc los segmentos 1) t . III o \'I I t . 1), sin la colaboraciom dc un ntt)Idc ifrt. ,").1Z) do ADN . La adiri6n de estos nuclc()tidos \ se (JCtt()ntlna ditersidad de ] .I rc gitin \ . 1-;n los ratoncs, la acti\idad de la cicsoeinuclcotidjl traps tcrasa terminal atmtcnta con la toad, por to yuc cn anintales adultos sc oltscrt an segmentos N tic Bran Itntgjtud . Dcbjdo a esto, la t :u'iabilidad dc less rcgiones 1) pucdc llcgar a scr- tan grantic yuc los scgnxntos genicos 1) originales pucdcn scr irrcconocibles .

Mecanismo de la recombinacion V-D

Escision

Escision

v
91
-IT I

AIG',A T

17 TI A

ITAFCITA I9'12 7 ATGAT

13
bAT` f~TI. A l T ACITA ATGAT 7 23 9 1 9 12 7

formation de la horquilla

~!,Aii`, T 1I

1 1~-( IA ~C T'IA~
All IAITJ

rotura en una cadena

resolution de la horquilla adicion de region N

irG,ATATATACITA tT T!A~'IT AT A T GAI,TJ

lGAGATATGCC AC;TA _ C' A IC T',, C G G T T'GA- T

union y relleno ~G',A GI A T A T G CPC A T',, Ai~ TI A

F1 T'C~T A T A C',,,G',,GIT'A TIGtAT

union y relleno

Fig. 8.12 a) Tras la sinapsis de less secuencias de less senales de recombinacion ISSR), less dos SSR son cortadas con el ADN interpuesto y se unen en sus extremos terminales para conformar un ADN circular aislado (b) . c) Los extremos de less dos hebras de cada region codificadora se unen de forma covalente para formar una estructura en horquilla, estructura que se rompe introduciendo un espacio en una de less cadenas, en un punto aleatorio, mediante la action de una endonucleasa . d) Los huecos en la secuencia son completados mediante sintesis de ADN y se ligan los dos extremos . e) La rotura del ADN de una de less dos cadenas determina la formation de secuencias palindromicas (p), que amplian el tamano de la region juntural (indicada con un recuadro azul) . Se consigue una diversidad todavia mayor mediante la adicion de nucleotidos (diversidad de la region N) por action de una deoxinucleotidil transferasa terminal, fenomeno que se produce sobre todo en los reordenamientos de less cadenas pesadas, pero se puede oar en ciertos subtipos de cadenas ligeras (f).

La generation de la diversidad

Diversidad de cadenas ligeras generada mediante recombination variable ADN de la cldck C C 'T G . I linea germinal
rec

TL G

ADN ombinado ptoteina i

95

T G 'IG
96 95 Pro

Pro tTrp I
PC 2880

PC 661,' .:

I Trp

96

95 FPro
PC

96 Pro

- 1410

Fig . 8 .13 . Las secuencias Vx21 y J1 de la linea germinal se pueden recombinar de diferentes maneras, dando lugar a lax tres secuencias de aminoacidos diferentes que aparecen en lax proteinas PC2880, PC6684 y PC7940. PC2880 contiene prolina y triptofano en las posiciones 95 y 96, debido a un proceso de recombination en el extremo del codon CCC . En PC6684, la recombination una base mas abajo da lugar a la presencia de prolina y arginina . En PC7940, la recombination dos bases mas abajo del extremo de Vt:21 da lugar a dos prolinas .

Los r,ttorncs colt inmunrklcficicncia contbinada grave N 'ID ' del inl;lc% sari n - combined immuut , d(f cirate! no prokiucen cclu la%'I III R tmtcionale%, dcl)idor a anonlali .v, cn cl procc%o tic re conthinacioin \'-( I))-j .

MUTACION SOMATICA
Los genes de lax cadenas pesadas de inmunoglobulina sufren modificaciones estructurales despues de la estimulacion antigenica I ,it nult .utontrs %onn .ltit.t% yuc ,lununt .lrt .ul la divcr ~i .i .1 .i .1ntttuCrl)os .t lo largo dc la %ida do un indi%iduo ha %ILItr nlotito dC tliSttl%lort durantr inucho ticnlpo . ('onto sc h:1 tisar ,tntrriorrtncntr I v . /irf . 1.,ii, 1 :1 mavon -i:t tic I :u wcurnii .1s ticl %istcnla dc cadenas ligeras II nIttrinas sore idcnticas, c\isticndor tinicanlcnte pcyuciia% variaciornc% en lax regionc% dctcrnlinantes dc la cornlplcmcntarictlad, yuc (]all lugar t un total dc oelur %ccucncias . Sin cntbart;o, sorlanlcnte %c ha cncontrado ull wgntcntor genitor VIA en coda genornla haploitic, yuc coincide corn la principal sccucncia protortipica cormtin ; larr canto, la apariciortl dc codas lax variances do csta sccucncia ha tic scr dchida a nttrtaeior ties %onlatica%, cn lax quo: rc%ulta su%tituida una %ola haw . Tanthicn %c hall dctcciado mtttaciones sornaticas en lax cadena% ligeras k en lax cadcna% pcsadas .

Fate coitccpto x ha %i%to rctorzado por lor% c%tudios Ilc%ados .t cabo ion un .t tamilia do anticucrl)o% capacc% tic unirw al antigcnor f tstitrilcolina . Se hall wcucnciado to talincntc lox wginento% \'I I dc l9 anticucrpos tie CstC til)or . 1)ICZ dC Cllr r% I)rCSentall 1111.1 sccucniia identica i~~prototipica-1, micntras tluc lox otrors nuccc diticren dc c%ta sccucncia cntrc unit v ocllo aminoacido%. El gc noina de la eclula germinal sorlantcntc conticnc la %ccucncia --pro r totipica ,, , to yuc indica quo la% otra% sccucniia% dcbcn hahcr sttrgidor Como conwtucncia tic nt1itacioncs %olltaticas (fiq . 8 .15) . Es soa ,prendente yuc toklas lax niutaciones sc dctcctaron ell innuuloglorbulinas dc 1 .1% clascs Ig.\ c Iv(', for yuc %ugirrr yur la% nuttaciotnc% cstan as, rtiadas coil 1,1 tonnu1t .1tion Cntrc lax ditercntcs cla%C% t1C illnttrnoglorbulinas . Logicatncntc, %cran sclccciornada% la% cariantcs sontaticas quo: prcwnten unit mayor atinidad porr cl ,111 tigcno, conlo sc 11 .1 observador ell cl trio tic Ion anticuct-lurs tfcnic t titstin -ilcorlina, en lox yuC Ias variantcs prcwntan mavorr,tfillidad yuC lo% Allti"ICrl)oa akiiliCAtlor% Cn la linea germinal . F\isten algunor% datos tluc indican quo la rcgioht del .-11)\ yuc to kiifita la rcgiorn variable I)uCtie prcuntar una% taws de nnttacioll cspccialnlcntc clcvadas . Pctr cjcnlplo, al cxaminar lax SCUtcncias dc nuclcotido rs tir clo ts :tntiiucrhr n :ultitintm ilic rlina I idiotipo 'I1 5 ), sc ha ohservador title prcxntan nuntcrosas nuttaciollc% coal re%pcito a Lt %rcucncia tic la linen germinal (en la pnrtcula \116 :" %c hall encontrado nuuaciones ell cl 3,8'% . de lax bast%t . Estas al)arccen unto ell lox intrones conto cn lots exotics tic la region V, l)cror no en lax sccuCntias contiguas, for yuc intplica yuc la region \', cn cornjuntor, prcscnia una tasa dc nurtacion cspciialmcntc alta IJ?r1 . 8.Ihi . Sc produce nnitacion sontatica cn lots ccntro% gcrininalcs, tic for 01,1 yuc sc dctcrnlina la %upcr%I%cncia tic la% cclulas que hall produodcr anticucrlms dc ntavor atinidad . Este proric%o sc descrihr ell dctallc Cn cl capitttlo I I v dcl)cntic dc lax cclulas h v de lots ccntros l;crtninales, cantor sc tlctnucura ell lox ratoncs atimicols yuc care cell tanto dc la% icltrl .1%'I - armor (IC lo% ccntro % gcrininales v ell 1 .1% rana% yuc Ix)sccn cclulas T, lxror no ccntros gcrminalc%, no ntontrando ninglunt do Io% don inaduracioxt por afinidad . Por cantor, la diver%idad (IC Itn Anticucrpos surge a distinurs III vrlrs . En primer lugar e\i%trn nliiltiplc% gcnc% \' yuc SC rCCtrIII binan eon Ion wgineino% I % l) . La imprccisilm tom yuc %c producen cstos Icn6rncno% dc rccorntbinacion introduce iwcvas variacioncs . ()l)%cr%c%c quo: la cstructura dc la printrra \ wgunda region hil)cr%ariahlr cst .i n cordificada% intcgranlcntc p(rr lots gents tic I .I linen gcrininal . RI)( : 2 Ilene una Bran diversidad corditica da Cn cl gcnoma, inicrnr .1s tluc RIX'-I sc (lit crsifica ntctliamc nuttaci(in %onlatica v RD( -3 coma resultador tic la recorntbutacioin . ('.onto practicantcntc omalyuicr catlcim ligcra sc pucdc cmparcjar con cualtlt6cr cadena ltcsada, la gran cantidad dc corntbin,trionlc% ,1 slur l)uctlrn d :u lugar :unIICnta catraorrdinarianicntc 1 .1 diversidad lfi4 . S .1-i . Prohaldcntcntc, to llil)Crntutacioin scnnatir .1 da lugar solanlcntc al 5" tie la variahilidad total do: lax %ccuCncias, l)cror ha%ta un 90"  tic la% ielttlaS It prcwtttan gents \'II quo: hall c\perintcntado algun til)o do nttitacion sonlatica .

Diversidad de cadenas pesadas generada mediante recombination variable

VH D

, 5101 A AG , AT
M603 M167

LT_A LCIT A CIGG- T]A'~ T A' TAJTAIC,GIGT~~dTAC

~TACT I,! GIG1T AC C - TGIGTA'IC t

T

AC AAAlT A ,GIA iGIA

T~GA .rT,, A JGIGI

T A A T A G C,, T A C'T~T

G G G T A

2 i Tyr Arg _ Asp Ser- Tyr Tyr Gly S107 M603 M167 A, ct
AM

Tyr

Tyr Tyr

e;I, C, 1 , ,

Ser

TrP Trp

Tyr
1$r

Thr

Arg - Atip

Ala i Asp

Asn I Ser I Tyr - ) Phe I Gly - Tyr

Fig . 8.14. Se muestran la secuencia de ADN (1) y la secuencia de aminoacidos (2) de tres cadenas pcsadas cle antifosforilcolina . La recombination variable de las regiones V, D y J de la linea germinal produce variaciones (color naranja) en lax secuencias de aminoacidos . En algunos casos (p . ej ., M167) parece que hay insertados codones adicionales . Sin embargo, estas inserciones siempre son de multiplos de tres bases, por to que no afectan a la pauta de lectura.

)gloounnas ae otros vertebrados

Mutacidn somatica estructural

111"'IFiD-1 -

HV1 :10 r

estructural
I

HV2
50
NU

estructural
70 80 90

10

20

100

EV . KLV.ESGGGLVOPGGSLRLSCATSGFT. FSE)F~MBA'VROPPGKRLEINIAASH^, " :.

.'FVt.ASVKGRFIVSRDTSOSILVLOMNA . LRA. E()IAIVYCARD T

HPCM1 FHPCM2 HPCM4

HPCM3 L HPCM5'1 IgG HPCG8I HPCGllI HPCG121 HPCG13[ HPCG14[ Fig. 8.15. En esta figure se comparan las secuencias de aminoacidos de las regiones VH de cinco anticuerpos IgM y cinco anticuerpos IgG antifosforilcolina procedentes de hibridomas, con la estructura primaria de aminoacidos codificada en el ADN de la linea germinal T15 . Las posiciones que coinciden con las de la linea germinal se muestran en amarillo ; los que existen diferencias de aminoacidos se muestran en color rose . Tambien se indican las regiones hipervariables (HV1, HV2) . Solamente se observan mutaciones en las molecules de IgG, y aparecen tanto en los segmentos hipervariables como en los estructurales .

0 DIVERSIDAD DE LAS INMUNOGLOBULINAS DE OTROS VERTEBRADOS Los tiburones poseen tin repertorio limitado de inmunoglobulinas

Mutaciones on el ADN de dos genes VH de T15

VH

JH

Jl12

EI(icsarr(III(,tittlll r:l , rrt(wi(Iamplil,,itanntu:rp"lieshit,nlm inll)Ort,uttc cn la c\0lucion tic I(rs \rrtcbrad()s, habicndO solo cionad0 cl problcrna cada grupo tic forma tlitcrcntc . En Ions elasmobranquios, cntrc 1()s quc sc cncticntran Ion tiburoncs N las ratic \as, los genes la% cadcna% pe%ada% sc dcsarr()Ilan tic la mjsma los tic la% cadcn:u ligcr.t% i. tic los ratones. Existc una fimna yuc unidad b:isica \'It l)Iil-Dtl2 1II ('II yuc sc repitc \arias \cces, Ivro c()nto Ices Icn(')mcnon de rccombinaci(')it SC 1)r(xiuccn 6uticanlcntc dcntro tic cada una tic c%t,t% unidadcs, I()% dilcrcrucs %cg memos gcnicos no %c pucden rccombinar cntrc si. Esto da lugar .) 1111 rL'I'trt(,ri(I I'Ast .Intt IIIIIIIALI(I

M603 HV1 HV2 HV3

Las aves utilizan la conversion genica para diversificar tin repertorio bastante limitado
11
11

Fig. 8.18. ADN de dos anticuerpos antifosforilcolina con el idiotipo T15. Las lineas negras indican las posiciones en las que se hall detectado mutaciones con respecto al genoma de la linea germinal . Existe tin gran nOmero de mutaciones en los intrones y exones de ambos genes, pero especialmente en la segunda region hipervariable, HV2. Por el contrario, no se observan mutaciones en los genes que codifican las regiones constantes .

iw . Fit cl sisicnla tic iatic0as llgeras sol:uttrntc c\istc till segnunt0 gcnic0 \', till() I \ Lint) ( ; . ('(m las cacicnas pesadas ocurrc alga parccido, c\i%ticndo solantcntc till scgntcnto V \ tin() / . Aunque aparcccrl trn(ts 16 segmentos llti, la% secuencias tic todos cllos son mu\ parecitlas, por I() yuc contribu\cn poet a la gcncracion tic dilersitiad . I)csc a cstas importantcs limitacioncs, cl 11()11() I)ucdc dcsarrollar rcspuestas cficaccs tic anticuerpos, di\crsificando secucncialmente MIS n10IcCULts tic anticuerpo .  (orrientc arriba- dcl gcn \'l se cncucrttra una region yuc c0nticnc 25 secuencias parccidas a VI , pcro yuc carccen tic c\on lidcr, rcgi(nt promotora \ la% caracteristicas secuencias tic hcpt5 nlcro-cspaciad()r n()namcro ncccs,uia% pare la rcorticrT,tci(~n \' 1. I'Mos scudogcncs n() soil intitilcs, sino que SC utilizan cn till 1)r0ccso tic con\ersion genica cn cl yuc sc inscrtan fragment()% dcl xud0gcn cn la region \1 . \iablr . Este CS tin proecso continuo, que siguc ocurricntlo dcspucs tic yuc las MILLts B ha\an al)antic donado la bursa; .t I() largo tic la \ida una cclula B sc pucdcn pr(xfucir nuiltiples procesos tic con\crsi6n .

0~J111-n1(n- Cl LIL III III Itn(,,I(,i~ ulln .I . tstr.u1111III.IrL11rItnt c pcquc-

utlrarilI

LIIIL tl

ti11Hr(In-tl 1"III,~ 1""tt

u1I

IIII11trr(I dC

40lts

Siete mecanismos de generacion de diversidad en

los anticuerpos

1. multiplicidad de los genes V en las lineas germinales 2. recombinaciones V-J y V-D-J 3 . adicion de nucleotidos en N 4. conversion genica 5. imprecisiones en la recombinacion 6. mutaciones puntuales somaticas 7. diversidad de las cadenas pesadas y ligeras Fig. 8.17. Como cada mecanismo se puede producir en conjuncion con todos los demas, las posibilidades de aumento de la diversidad se multiplican en cada fase de la sintesis de inmunoglobulinas.

La generation de la diversidad

En cl locus gcniuo tic Cadcn:ts 1lcsatias SC l,rtxiucen tincintc' nos parccidl~s, c\isticndo hastt 1()(1 sc11d11gcncs \'t I yuc .uucnt .u1 la divCr51d .1d mcdi .!I :tc nlcc :Imtinu  pit cc+n\crsitin parccidcn.

" GENES DE LA REGION CONSTANTE DE LAS CADENAS PESADAS

l'odas I :ts Claws tic illntunoglobulina utilizan CI ntisnuo Cctnjuntc, do genes tic regiones variables . Cuando una Celula madura productlrra sic anticuerpos conmuta la class do innrtutoglobufna yuc prcoducc, lus canlhios yuc SC I,rtxiLICCn atcttan scd:unclac a la rcgicin constants do la, caticnas l,csadas . Esto se Ira dcntostrado ntcdiantC Cl cstudi<r do tniclonras dohlcs, cn los yuc sc Cntucntran sinnlltancdnttntc Cn CI SUCrt1 dcts til,os tic antitutrl,os ntum()C111 nalcs. Sc ha ohscrtado due los anticuctpos IgM C lqG tic utt paCicntc coil nticltntta multiple pc>SCcn I :Is nlisntas C:uiCnas [items . 1 las mismas rcgicntcs x'11 ; ]as iinicas nultiificacicntcs aparcccn Cn hs regiones constantes, yuC connttitan cntrc It \ ";. 1)c la misnla forma, cn la supcrficic tic los lintiodtos sc suclett cncontrar sinn11tancantcnrc IL ,M r IgD ; cn cstr C.tso la Csl,ctifitidad tic 111111',11 colt cl antigeno tanthicn es identica, pest :t Lt ditcrtnti .t tic Class. 1OLIOS Ices gCnC" tic la', rci'i0ncs COtlSlalttC, cstan situados '<COrricntc abajw, do 1Js scgntcntos , cnicos I. En cl rat61l, C.xis tc tin gcn l,ara cada 111111 tic 1115 isotillus IgM, IgE C IgA I :p . c t . till gcn Y l,ara Cada uno do loss cuatro tfitcrcntcs isoripos tic IgC, . 8.IM. "<Corricntc arriba tic los genes p ~-el, y2a, .;2t, t y3) se cncucntra HIM SCCucntia conntutadora !S, del ingles smitrhl, title tambien ,1parcce ~~corricntc arril,a,, tic cada unoo do Ills dcntas genes tic 1-Cggioncs constantes (C\CCpto 8, i, . ,1', M. En la Jiqura I1 .33se nttlcstran Ices genes ( : del locus IgH humano v ]as tormas tic conmutacion tic class.

nlis(tril ), C I)CCiallnentc cn to rcl:uit rl a la rct;ulati+m tic sus alcttipus . AtutyuC los Ccntcjos POSCett 111LIC110S genes VH, m:is del 80`sl ; dC Ids ccltlLts B utilizan CI gcn \'1t m :is prozimo al segntcnul D. Iia\ datrrs rccicntcs quo: indican clue los concjos taml,icn podrian utilizar cl ntecanisnto tic comcrsi(in genica para djscrsificar cstc Un1CO p,Cn \'if .

Los conejos podrian utilizar la conversion genica para diversificar su repertorio de anticuerpos I .1~ inmunc+'l++hulinas do lus Cclncills 11,111 ccn1st1tui,ill sicntl,rC tin

Es posible que los seudogenes tambien intervengan en la diversification de los anticuerpos de los seres humanos

Al,,;untx scgnuntl ls t;cnitlls It s . j NC hrc'scntan tambien Cn 6111,11111 tic sCUd0gCnts . F:n Lt .t, tu.Ilidad, 1-1 CXistCnCla tic pro ccso>s do conwrsio'n genica cn la generacicin tic regiones V cn los scrcs htlnta nos Cs tin ICma csl1CatlatiV0 t. do intcrcs .

Las ovejas y otros rumiantes diversifican sus anticuerpos mediante mutation somatica [,(IN runli:ultcs Csprcsan 1111 .1 I,In1ilia tic 'Cnts \'I 111niC,1 c1ur,ultc
t. 111 X'11

~+~1n,itiC :1 .

ci1LI, hCDI01nsi"uCn Ji\Crsid,n1 IIlCdi .u1tC MW inttnsa nut

Genes de las regiones constantes de los ratones

genes de las rer. ii Fig. 8.18. Los genes de las regiones constantes del raton estan situados 8,5 lob pcorriente abajoll del segmento V-D-J recombinado . En el inicio de cada gen C (excepto C(i) hay una o varias secuencias conmutadoras (circulos rojos), que corresponden a una secuencia situada en el extremo 5' del gen It. Esto permite que cualquier gen C se recombine con V-D-J . Parece que los genes 6 utilizan las mismas secuencias conmutadoras que los It, pero que en la production de IgD, el segmento de ARN correspondiente a la transcription del gen u es eliminado. Los genes C (que en u y ,,,,2a estan ampliados en la parte inferior) contienen 5, stantes '!2, 1,, 3,

ID IJ

5',

C1i ;C21

C3

C4

M1

I-

M,

y YZ6

C2

--

intrones que separan los exones de cada dominio IC1, C2, etc .) . Los genes ,,,, poseen tambien tin exon independiente que codifica la

region de bisagra (H, del Ogles hinge), y todos los genes contienen uno o varios exones que codifican la Ig de membrana (M).

Maduracion de la respuesta inmunitaria y conmutacion de clases

antigeen~o primario ' respuesta de anticuerpos IgM antigeno secundario .. IgM maduracion IgG genes

I+

~~J perdidos

IqG

ARN primario 2

ARN primario V-D-J y3 ARNm

respuesta primaria

respuesta secundaria tiempo

Fig. 8.19 . 1) Tras una inyeccion initial de antigeno se produce una respuesta de anticuerpos que son principalmente de la clase IgM; la respuesta que sigue a una segunda inyeccion de antigeno es predominantemente de la clase IgG. En la figura se muestra el mecanismo subyacente a esta conmutacion de clases (derecha). 2) Eli la respuesta primaria se transcribe la region V-D-J junto con tin gen p. Una vez eliminados los intrones durante el procesarniento

del ADN, se obtiene ARNrn que codifica IgM de secretion. Durante el proceso de maduracion se produce una recombination de la conmutacion de clases entre la region de recombination Sp y una region de conmutacion situada ,corriente abajoll (C-f3 en este caso). Despues se elimina la region interpuesta previa formation de tin bucle, con deletion de las regiones interpuestas y union de las dos regiones conmutadoras .

Regulation de la sintesis de inmunoglobulinas

La conmutacion entre clases se puede producir por recombination genica o debido a diferentes sistemas de elimination de los intrones (splicing) del ARNm

la coi~ : :nut :tcicm enlrc cl .tses CS tin aCOntCCInlIClrle~ inapoml .antc Licntro tic. otcso tic rnaduracicin dc Las respucstas innaunitarias, y Puede it aconnpanada o precedida por cicrtas mutaciones sonaati cas. En Primer lugar se transcribe tin scgmento conrplcto Lic ADN, quc comprcndc la rcgicin \'it rcconabinada \ quc se cxticntic has. ta las Leeiooncs constantcs S a la ; a ccontinuacion, Sc I,roxiucen dos naolcculas ditcrentcs dc ARNna, scgun cl sistcnaa tic elimination dc intrones utihzado ; antbas comtienen la rcgicin \"II, hero una do cllas contiene la rcgicin constants la y la otra la ti . P:urcc quc en algunas ucasiones Sc transcril,cn Coil juntantcntc segnacntos mucho ntis largos dc ADN, coil to yuc cl proccso dc clinainacilm dc intrones da lugar a otros clases dc inllrLmoglohulinas, todas CILas cull la misma rcgicin VI I (ftrr. S.ZO) . Este tenoimcno sc ha obscraado en cclulas yuc produccn sinnrltancamcntc Igal c IgE . Sin embargo, cs nays frccucntc yuc la connunacioin entrc clases sc dcba a till proccso do rccomhinacicSn cnu-c los punros S, to quc da lugar a la formation do tin 1111CIC V a la 6111111.16011 Lie Lill scgnlcnto do ADN, con la consiguicntc aproximacioin tic otra re gidn ( : al gcn V-1) j (fps. 8.19v 11 .?3) .

region (; dc las cclulas gcrn1inaIcs f firi . R.?21 . Sc crce quc la secuencia do Poli-.A cs imPortantc a la horn dc dctcrnaioar Clue ARN SC I,ruduce ell cl proceso dc transcripcicin, hero no se conocc cl mccanisnro suba accntc .

REGULAC16N DE LA SINTESIS DE INMUNOGLOBULINAS

Es idcntcmcntc, la rcgulacicin tic la sintcsis do innaunoglobulinas POI- Parts do I :as cclulas I,roductoras cs till proceso comillcjo. En l,rimcr ILI,;ar sc produce La rcordcnacioSn del gcn 1), yuc sc aproxima al gcn 1, a contill uaci(Sn sc line a ellos cl gcn V. En Las Molds lire-13 se Puedcn ohscrsar cadcnas u hicn COnStitUldaS en el

Las inmunoglobulinas de membrana y de secretion son producidas mediante diferentes sistemas de elimination de intrones del ARN procedente de la transcription de los genes de cadcnas pesadas

citolalasnta . Estas cadcnas rccicn sintctizadas pcrnaanccen unidas a las prortcinas Bill,%Gltl'-8 del rcticulo cndoplasnaatico> hasty yuc se asocian con una cadcna hgera . Las cclulas pre-B no producer taxicnas ligcras, pero si pcyuerias c:uatidAdes tie cadcnas scudoli . . gcras l,arccidas a Las ligcras 0.5 a V , -, ell ratomcs \ 1-1 1 cta launaanos), Clue sc asocian con las cadcnas la y lacrntiten yuc se transpoartcn cantidadcs I,cyuctias dc IgN1 hacia la superficic cclular. Sc ignore la tuncio'm tic cstas naoicculns parccidas a leNl, pero los ratones incapaces de producir estas cadcnas acudoligcras Inucstran una marcada disminucioSn ell los hntocitos B. La cadcna la estinrLrla al locus h pare clue cstc tratc dc Ilesar a cabo la rcorde-

Lt, in'rIunooi;l()llUlln :as tic nacnahran:t irctchtorrcs tic antigcno) sum idcnticas a las inrraarno"loohtrlinas tic SCLI -Ctlcna {anti(ucrPos) cxccptoo por cl liecho tic yuc I)caWcn tin tram<I adiciomal dc aminuacidos en el cxtrcnao carhoxilicoa dc coda cadcna l,csada . Por tanto, las inmunoglobulinas do mcmhrana son li ;,cranacntc nay cores yuc las dc secrcciona . Sus aminoacidos adicionalcs atraxicsan la membrane cclular \ sirccn Para fijar la naoalccula a la bicapa lipidica . ELL la IgM dc ntcnabrana, [)or cicmplo, exists tin tranao Lie aminoacidos hidro olobos I lipofilos l comprcndido entrc dos zones tic aminoacidos hicit- 6filos yuc SC sit6an a ambos Lados do la naernbrana ifiR. 8.?1 Y. Sc crce Clue Ion aminoacidos hidrci. inmcrsa cn cl fbbos adoptan la conformacicin dc una hclicc u scno dc la mcmhrana . Las inmunc>gloahulinas tic mcmhrana SC encucntran solanacntc ell Hernia dc cstructura tctracatcnaria b:i sica, sin yuc 601- 11101 mica Polimcros . ;lobulina se Ilcsa a La sintcsis dc las dons tornaas dc intntuao` cabo mcdiantc difercntcs sistcmas dc transcription del gcn tic la

IgM de membrana y de secretion : rattin secretion fps) T'556 G K + P T L Y N 563 V S L I M S D G G T T I membrane (tam) ( T) 556

Conmutacion entre isotipos mediante diferentes sistemas de elimination de intrones

ARNm de IgD V-D-J

ARN primario

enlace disulfuro

i~Y J 576

C 575

ARNm de IqM

V-D-J

FL

Fig. 8.20. Cada celula B produce Ab de diversos isotipos a partir de tin Onico ARN primario de gran longitud . En esta figura se muestra tin ARN primario Clue contiene to y 6. La poliadenilacion se puede producir en diferentes puntos, dando lugar a diferentes sistemas de elimination de intrones, con to Clue se obtiene ARNm de IgD (arriba) o de IgM (abajo) . Ademas, en esta region existen otros puntos de poliadenilacidn, de los Clue depende Clue la Ig producida sea de secretion o de membrana .

Fig. 8.21 . Las secuencias de aminoacidos del extremo carboxilico de las IgM de secretion y de membrana son identicas hasta la posicidn 556. A partir de este punto, la IgM de secretion contiene 20 aminoacidos mas. El aminoacido 653 (asparagina) esta unido a una molecule de hidrato de carbono; el aminoacido 575 es cisteina y forma enlaces disulfuro intercatenarios . La IgM de membrana posee 41 aminoacidos mas a partir de la posicidn 556. Hay tin tramo de 26 aminoacidos hidrofobos comprendido entre las posiciones 568 y 595, situado entre secuencias de aminoacidos cargados . Puede Clue este tramo hidrofobo atraviese la membrana en forma de dos giros de helice u. En el interior del citoplasma queda on tramo corto formado por aminoacidos cargados positivamente .

La generacion de la diversidad

IgM de membrana y de secrecidn

Fig. 8.22 . Esquema de una region de ADN que codifica IgM. Se muestran los exones de los dominios p3 y tt4 (H3 y 144) y el segmento transmembrana y citoplasmatico de la IgM de membrana (M) . La secuencia 3' que no se traduce estara en los extremos de H4 y de los segundos segmentos de membrana (S = codones de terminaci6n) . El ADN puede ser transcrito de dos formas . Si la transcripcion se detiene despues de S, el ARN con la cola de poli-A es procesado de forma que origina un ARNm correspondiente a una IgM de secrecion. Si la transcripcion no se interrumpe y se Ilega hasta los segmentos de membrana, en el procesamiento del ARN se eliminan los codones de los aminoacidos terminales y el cod6n de terminacion de H4, y en la traducci6n se obtiene una proteina con un extremo carboxilico diferente .

poli-A

nation V-/, v cn los casos cn quo cstc proccso no ticnc cxito, esa misma cadctm Cstintula al locus ~, . SC Suponc quc CSte fcnonun() SC prOducc rcpcticianicntc tanto en Ios cromosontas ntatcrnors contor cn los patcrnos, hasty (]tic SC coaisiguC un gcn tintcional o cl material genctico sc agota, cn tttVY) caso sC aborta la Cclula . Una srz yuc las regioncs V de una cclula yuedan construidas, to nor Sc tnoditican, cxcepto por [as sariacioncs tiuc pucdcn introducir las mutacioncs sont ticas. Sin embargo, aiut SC pucden pro dttCir conmutaciones entrc Ios ditcrentes isotipos, asi coma Ios cantbios yuc conduccn t la sintcsis tic inntunoglobulitm tic sccrecion Cuando la cclula sc actisa . Ln la liqura 8.?3 sc nutcstr.t un resumcn do Ios Itcchos c hip()tcsis rclatisos a cstc tettl :t .

Resumen esquematico de la sintesis de Ig

cadena pesada 1 . recombination D ~ J cadena ligera

Las cadenas de inmunoglobulina son traducidas y se dirigen al reticulo endoplasmatico

\ntcs tic Ilcc .t r a call( la sintcsis tic I0S ;uitiCUCrlx,s, cs nctcsari(, clintinar Ios introncs dcl AR\ primario . El principio y cl fin tic coda uno de Ions introncs prcscnta unas SCCUCnCias tic bases cspc cialcs, dcnominadas junturas tionadora \ accptora . Sc crcc yuc CSLas junturas intcraccionan ntutuantentc v corn ],IN ribonuCICOprotcinas ticl nudco>, dando lug:u - a la Clintinaci6n do Ios introncs la rCtntiom tic Ios cxtrentors hbres rcsttltantcs, con to quc se oil ticnc cl Alt\m . Por supHCstor, Cstc }1r(KCSO LICbC SCI- I1CVA(r a call() con la precision suticicnte para que I :t pauta tic Icctura del ARNnt nor Se s- ca atcctada . El AR\ ntcnsajcro do las itutiuno1-lohttlinas cs truiucido s Ios pciltidos nacicntcs son transporrtntlos hasty CI reticulo endoplasmatico, asocibndosc ntls tardc ] .is cadenas pesadas coil las ligeras ,1.?4i . Las torntas tic ntcmbrana \ do secrecion tic las innutnoglobulinaS son proccsadas tic ditcrcntc torma, do tnancrt quC a1C.utccn sus ctttplazanticntos correctos, aunque Ios mccanisntos implications cn cstc proccso, no sc conoccn coil (ictalic .

primer antigeno 9. IgM de secrecion

10 . conmutaci6n a IgG, IgA o IgE Fig. 8.23. Sintesis de inmunoglobulinas . Las celulas pre-B intentan recombinar los segmentos D y J de las cadenas pesadas, que despues se recombinan con un segmento V para originar un gen funcional de cadenas pesadas V-D-J, que es transcrito junto con los genes Ft y ti y traducido, con to que se obtienen [as cadenas de membrana ft yo . La cadena m induce recombinaciones en los loci de cadenas ligeras . En cada caso, la celula intenta construir cadenas funcionales utilizando el cromosoma materno o paterno, hasta que to consigue o hasta que se agotan los genes no reordenados. Cuando no se consigue sintetizar una Ig funcional, el clon es eliminado. Las celulas B virgenes expresan IgM e IgD de membrana . Tras la primera estimulacion antigenica, la celula puede sintetizar IgM de secrecion; tras la estimulacion por un antigeno dependiente de celulas T, y con la colaboracion de estas ultimas, la celula puede conmutar la clase de Ig producida, dando lugar a IgG, IgA o IgE. Este paso suele it acompanado de mutaciones somaticas en los dominios V.

GENES DEL RECEPTOR DE ANTIGENO DE LAS CELULAS T

La regi611 dcl T( :R yuc se uno al complcjo antigeno-( :I'li cs ge ncrada p(rr cuatro gnu})ors de genes ditcrentcs . Lots grupos do gates of \ ji son cxprcsati0s por la matona do las celulas T pcritcricas, micntras quc I(ts genes y y S son cxprcsadors por tma Subltoblaci6n tic Cclulas f dcl tintor v por unit poblaci6n minoritaria tic Cclulas T peritcricas . Estas cadenas sc asocian corn las cadenas y, 6, e V ' do la molccula ('l)3 para dar lugar al TCR connpicto f v. ca}, . 7 ).

Genes del receptor de antigeno'de las celulas T

La dispusicic'm g,cncral do los genes dcl 1( :R Cs nttn' parccida a la dc I :ts cadenas pesadas dc ill n1tuluglulndina . 1)cstaca Cl hcchu dc clue los genes S del f(R cstan Sit uado)s u1 cl ccntru dc los gcncs a t. POSCCn Sus prupios Conjuntos dt SCgnlcntc gcnicos 1) . 1 \ C + lit. 8.23S1 La diversificacion de los genes de los TCR se produce por recombinacion de los segmentos genicos V, D y J, con pequenas variaciones en cada locus concreto La cadets (t cs aparcntcmcntc scnolla, cxccptu por el hecho dc Se encucntra intercalada la Cadcna d. Al slue Cntrc Sue I ci V set nlcnto Vu. igual clue en cl Ic)cus n, sl dcsplazamicnto ds tin Sintesis de inmunoglobulina de secrecion

liasta till scgnlento Jti. da lugar a una rcgi6n variable completa . 1.a dis- crsidad se % c aunlentada considcrablementc debiclo al gran nunlcro de scgnlentos / . Fn el locus li se Cncucntran doe conjuntos dc genes 1), 1 v ( : . la mamria dc los gcncs V(3 cstan agrupados conjuntanlcntc, pcro uno dc cllos A'P 14) SC cnCUCntra situadu ell el cxtrcmu 3' del to cue . I a duplicacic)n conjunta do Dl3, Ili v (3 sc dcbi6 producir en alguna dc las prinlcras tascs dc la cvolttci6n dc lus mamitcrus, t a clue CSta presents tallto en Icx ratc)nCS coil)() ell Icrs SCI-CS huntanc)s . F.n cl pruccso dc (IlliCm SC genera una Bran discrsidad, w clue adcnlas dc las rc))rdcnaciuncs V 1)-/ tambicn son pc)siblcs ]as unioncs V I v V-1)-1)-I . his scgnlentus 1) sc pucdcn utilizar cn cualcltiiera dc sus tl-CS IMutas dc lCCtttra posiblcs, lo yue Ccn1fcrC aiut una macor di\ crsidad a Ias cadenas li . La disposicic'm dc los loci dc cadenas i en el rat6n y cn Ios se rcs liumanos cs cunsidcrablcnlcntc ditcrcnte . El IOCUS nwrino nnicstra till sorprendcnte parecido coil cl locus dc cadenas ligeras (uno dC CIIOS tin scudogcn 1, do anticucrpo, coil cuatru gcncs cada uno dc cllos asuciado a tin gcn / v cntrc uno v cuatro genes Vy . No cxistcn genes 1) . 1=.n Icts scrcs hum:utos cxistcll ucho genes Vy, -currictue arriba ,~ (i'1 dc Ios ctiales se encucntran trcs genes J-1 Y cl printer gcn (;y ; a suntinuacicin aparcccn otras do,, genes I,,, y, fnalmcntc, cl gcn (_%2 . I .as imprccisiuncs en la unilm dare V t. /, junto con las inscrcioncs cn 1aS jullturas, coil trihtocn

a la gcncracicin dc discrsidad . Fl lows ii file dcscubicrto cuandu Sc cstt)diaba cl Ic)CUS a . Auncluc cs rclatisantcntc scncillu, sa clue solanlcntc cunticnc cillco genes V6, due 1)0 V %Cis Iii, Se calcula c1ttC l,uedc dar lugar a 1 .(114 cadenas o difcrcntcs, dcbido a la inlprccisi6n dc las unioFig. 8.24. El ARN mensajero de una cadena pesada de secrecion abandona el nucleo y penetra en el citoplasma, en donde se tine a tin ribosoma (1) . La secuencia lider IL) es traducida y se tine a la proteina reconocedora del lider (SRP, del ingles signal recognition protein), con to clue el proceso de traduccion queda interrumpido (2). El complejo SRP-ribosoma se desplaza hasta el reticulo endoplasmatico (RE), en donde la SRP se tine a una proteina receptors clue se encuentre libre en la superficie del RE (3). Entonces se reanuda la traduccion, y la cadena naciente atraviesa la membrana y penetra en el reticulo endoplasmatico (4). La secuencia lider es eliminada y la cadena se combina con otras cadenas H y L para dar lugar a una subunidad de Ig (5). Entretanto, el reticulo endoplasmatico da lugar a una evaginacion y, finalmente, a una vesicula de transporte, mientras clue determinadas enzimas (E1) anaden hidratos de carbono (azul) (6). En el aparato de Golgi, otras enzimas lE2) modifican los hidratos de carbono y, finalmente, la molecula completa es secretada al exterior mediante pinocitosis inversa (7).

Genes de los receptores de las celulas T V (-100) locus de cadenas : 1 Va t

u y i1

V,11-5)

D121

J,(6)

J  (-100)

I-201 locus de cadenas (9 locus de cadenas 'l - V4 -

D 1

J 1171

D2 D JI J

J  2(7) ,1 Cat V,,14

Jr1

--

/- V 3

!= -- C,3 -/ /- C,2

J.2 '- V,2

-J4 -/ /- V11 _

Fig. 8 .25. El mecanismo de recombinacion de los genes de los TCR es parecido al de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas . En la figura se muestran los genes de los polipeptidos cull y yo de los receptores de las celulas T marinas. Los loci de la cadena 6 estan

incrustados en el locus u, y el locus de cadenas 11 aparece por duplicado. Los tiltimos genes de cada grupo Jji y V-,/3 son seudogenes . '

La generacion de la diversidad

nes, la inscrci(in do arninoacidos adicionalcs y la utilizaCi6n LL 1(rs gene+ 1) en Lts tics I)aut :u tie lCCttrr,t I)osit)Ics . Parccc clue loll ruccanism(rs dc rcconthinacion do los genes tic Ios 1 - ( It son parccid(rs a Ios tic las cclulas B, ya Clue los genes sc cncuentran Hantlucados por sctucncias hCptamcro-( 1 2 o 23 ba ,cs)-nonamcro similarcs . I,as cnzinnas Clue catalizan la% rcordc nacioncs cn las cclulas B \ . 1' son igualcs o mm parccitlas, Sc ha dcIIIUStr-aCio c\perimcntalmentc quc Ios gCIWS 1)j3 V 1-,' tic 10" 1'C :It transtcctados a cclulas B se pucticn rcordcnar corrcctamcntc . I .a rcgi(in \ rsti cspccialmrntc ticsarr(rllada y ctrl :ilun-;t cn gran meclida ell 1 .1 gcncraCiorll Clc diycrsiCiad . Aunquc cn cl cant tic las ill nttrnogl(rhulinas las nttttacioties sontaticas gcncran una c(rnsidcrahlc diycreidad, csto no ocurrc cn cl caso dc Ios genes tic los 1('R Esto pucde sc- r dchido al int pcratiyo dc Clue I :ts cclulas 'I' mantcngan la tolerancia hacia Ios ail tigcn(is 1)1-01)i( Is y rCC()11(rzcan ]as nt( )ICC111as (PfI .

Inlilt] noglohulinas, ell dcrndc cl rcl)crtoritr posiNc CS yari(rs or de magnituCJ mayor clue el mrntcro tic celulas 11 Clue I)ucdcn Ilcgar a scr producidas .
(JCIICS

" ~C6mo se puede enfrentar un genoma finito a ulna cantidad practicamente infinita de antigenos? 4-Que es una mutaci6n somatica y como puede afectar positiva o negativamente a las respuestas inmunitarias? Compare el polimorfismo de los anticuerpos y el de las moleculas CPH dentro de un mismo individuo y en el conjunto de la poblaci6n . 4C6mo pueden haber influido los microbios en la evoluci6n del sistema inmunitario? 0 Si un animal carece de los genes activadores de la recombinaci6n (RAG-1 y RAG-2), Zque efectos cabe esperar en cuanto a la generacion de la diversidad y en cuanto al sistema inmunitario en conjunto? Tras la estimulaci6n antigenica, iclue modificaciones de los genes clue codifican los anticuerpos dan lugar a la maduracion de la afinidad de los anticuerpos clue se observa en las respuestas inmunitarias? ~Como se pueden seleccionar los genes de los anticuerpos en los clue se hall producido mutaciones ventajosas? ~Que ocurre con los clones en los clue se producers mutaciones perjudiciales?

MAGNITUD DE LA DIVERSIDAD y I, la c iycrsiticaciorn cn las rcgiones N, [as yariacioncs cn los pun

La diycrsidad dcl)ende dc las corttbinaciones tic ]as regiones %', 1)

tos dc union y la niultiplicidad dc las rcgioncs 1) . La distanci3 r\acta cntrc Ios c\trcmos tic \' y J ell las lincas gcrminalcs CS \-ariable ; ell cl caso dc \'(3 cs tic unos 6 15 aminoacidos, nticntras Clue cn cl caso tic \'u cs dc 3- ;' arnin(ricid(rs . Hunkal)illcr \ Hood hall ettimado quc CS I)(isihle sintctizar unas 4,4 x 10 , ' formas di fcrcntes do \'ji y units 8, ; x 1(1 . - f6rntas do \*-i . Estos im -cstiga dorcs indican quc, 31111 ell cl : .is() dc quc solantcntc Cl 1"o do las sccucncias codifiqucn protcinas yiablcs, scria posihlc la c\istencia tic 2,9 x 10=' rccept(rrcs difcrcntcs . Sup(rnicntlo Clue cl 99'%, dc estos tiltintos tircscn rcchazados por rcconoccr autoantigcnos (r por otros (ictcctos, scguiria sicndo posiblc la c\istcncia tic 2,9 x 10"' - 1-( :R n)1rrin(r" Chtcrentcs . ('onto a ht largo do la yida tic tin rat6n abandonan cl tirno nicnos do 10" tintocitos difcrcmcs, SC plantca I ;t duda tic hasta Clue punto cs alcatoria ht generacion de rcccl)torcs . Este rnisrno problenm sc prcscnta en cl caso tic las

LECTURAS ADICIONALES
Apoasamy PM, Kenniston TW Jr, Wenq '', et al Interleukin 7-induced expression of specific T cell receptor gamma variable regions in murine fetal liver culture . J Exp Med 1993 ;178 .2201-6 Austen BM, Westwood OMR Protein Targeting & Secretion Oxford IRL Press, 1991 Berens SJ, Wylie DE, Lopez OJ Use of a single V . i family and long CDR3s in the variable region of cattle Ig heavy chains Internal lmmunol 1997;9 :189-199 . Blackv,ell `K, Alt FW, Mechanism and developmental program of immuncgioLUin gene rearrangement in mammals . Annu Rev Genet 1989;23,605-36 . Black C, Hiranta M, Lenhard-Schuller R, et al A complete immunoglobulin gene is created by somatic recombination Cell 1978 ;15 :1-14 Chang B, Casali P The CDR-1 sequences of a major proportion of huroan germline Ig Vn genes are inherently susceptible to amino acid replacement- lmmunol Today 1994 ;15-367-73 . Davis MM, Bjorkman P,1 - -cell antigen receptor genes and T-cell recognition . Nature 1988 :334 395-402, Difilppantonio MJ, McMahan CJ, Eastman QM, et al. Schatz DG RAG-1 mediates signal sequence recognition and recruitment of RAG2 in V(DiJ recombination . Cell 1996,87 :253-62 . Haas W, Pereira P, Tonegawa S . Gamma/Delta cells . Annu Rev lmmunol 1993 ;11 :637-85 . Harriman W, Volk H, Defanoux N, et al Immunoglobulin class switch recombinations . Annu Rev If rimunol 1993 .11 361-84 . Hiom K, Gellert M . A stable HAG 1-RAG2-DNA complex that is active in V(D)J cleavage Cell 1997,88 65-72 . Honjo T, Alt FW Immwroglobufn Genes. London Academic Press, 1995 Hunkapiller T, Hood L . of the immunoglobulin gene superfamily . Adv lmmunol 1990,44 1-63 Leiden JM . Transcriptional regulation of T cell receptor genes . Annu Rev lmmunol 1993,11539-70Levv s S%1 The mecnanisnn of V(D)J joining : lessons from molecular, immunclogical and comparative analyses . Adv lmmunol 1994 ;56 27-150 . Owen M,J, Lamb JR, Immune Recognition . Oxford : IRL Press, 1988 . Pascual V, Capra aD HLrilan immunoglobulin heavy-chain variable region gene ; ;t : r~~ation, polymorphism and expression . Adv lmmunol 199 - :49 ' 74 . Rast JP, Andersor, , .'K, St , ong SJ, et al. u, li, y, and 6 T cell antigen receptor genes arose early in vertebrate phylogeny . Immunity 1997 ;6-I1 . Spanopoulou E, Zartseva F, 11'ang F, et al . The homeodomain region of Rag-1 reveals the paral el mechanisms of bacterial and VIDIJ recombination Cell 1996 ;87 263-76 Wu TT, Kabat EA An analysis of the sequences of the variable regions of Bence Jones proteins and myelome light chains and their imphcat ons for antibody complementarily . J Exp Med 1970 ; 132211-50 .

Reco nocimiento de antigenos

" Los anticuerpos son altamente especificos con respecto a la conformacion tridimensional del epitopo . " La afinidad de un anticuerpo es un magnitud que indica la fuerza del enlace que se establece entre el punto de union del anticuerpo y un epitopo determinado . La afinidad funcional o avidez de dicha interaccion depende tambien del nbmero de puntos de union que existan en el anticuerpo, asi como igualmente de la capacidad de este ultimo para reaccionar con multiples epitopos del antigeno . " Las celulas T reconocen antigenos asociados con moleculas CPH de clase I o 11 y expuestos an las superficies celulares . Los fragmentos peptidicos que se producen en el procesamiento del antigeno se Linen a los surcos de las moleculas del CPH . " Las moleculas CPH de clases I y 11 presentan peptidos procedentes de antigenos endogenos y exogenos, respect ivamente . Una vez que ha sido procesado, cads tipo de antigeno se encuentra con las moleculas CPH y se Line a ellas en diferentes regiones intracelulares . " Los peptidos qua se unen a [as moleculas CPH de clase I se producen an el citoplasma, debido probablemente a la actividad de un organulo intracelular, el proteosoma . Los peptidos son transportados a traves del reticulo endoplasmatico por un transportador de la familia ((ABC)) . Entonces, el complejo ternario formado por la cadena pesada de clase I, la l12-microglobulina y el peptido se desplaza hasta la superficie celular. " Los peptidos qua se unen a las moleculas CPH de clase II proceden de antigenos exogenos que, tras el proceso de endocitosis, son procesados an un compartimiento endosomico/lisosomico . Las moleculas de clase II forman un complejo con la cadena invariable Ill) y son transportadas a traves del aparato de Golgi hasta un compartimiento endosomico de naturaleza acida, en donde se disocian de li y se Linen al peptido . " Los complejos peptido/molecula CPH presentes en la superficie celular pueden ser reconocidos por los reccptorcs especificos de las celulas T. Sin embargo, para que las celulas T se activen son necesarias otras interacciones, en las que intervienen diversas moleculas accesorias .

antictlcrpos y los reccptorcs dc antigeno dc las celulas T JCR, del ingles I'-cell receptor) l,rcscntan mUCIMS caractcristicas commies . Ambos posccn rcgioncs variables (V) y constantcs i;C), y los prtnccsos dc rccomhinaci6u gcnica que dun lugar a los dominion cariahlcs f a l,artir dc Ions srgmcntos gcnicos V, I) t j 'l son similarcs (s . rap . 8) . Sin embargo, cl sistcma clue utilizan las celulas B p.tr :t rrconxrcrr a lo>s antig,cnos CS nrtls ditcrrntr dcl yuc utilizan las celulas 1'. Los anticuerpos reconocen a Ions antigenos en su forms srn1trh1c o cuando SC cncuentran cxpucstols sohrc les supcrficics cclularcs, pcro sicmprc en su confonrmaci6n nativa, micntras que Ion reccptorcs dc la% celulas T solantente reconocen antigenos asociados a moleculas ( :PH s, cxpucstos sohre las su Ivrficics cclularcs . Los antil;cnos yuc reconocen IaS celulas T sucIcn habcr silo dcgradadon o procesado prcviamcntc, dc tal t6rnu que cl cictcrminante que reconocc cl I( - R solamentc reprcscnta un pcyuciul Iragmento dcl anti gcno om- iginal . Otra difcrcncia ca,trc Ion anticuerpos s' lox 7( :R cs yuc los an tietlerpos pueden adoptar don forntas (reccptorcs dc antigeno dc [as celulas B c anticuerpos cic secrecion l, micntras que los '1'( : R sicmprc soil moleculas intcgralcs dc mcmhrana . Los anticucr1,cn sccrctados soil cscncialmcntc moleculas hifuncionalcs, la funci6n principal dc Ions dominion V cs unirsc con cl aruigcno, micntras que los dontinios ( : intcraccionan coil reccptorcs dc los tejidos tic] hucspcd o con cl complcntcntol . En cstc cdpitulo SC explica C6111o SC forman los puntos dc union coil cl antigeno en los dominions corrcspondicntcs dc los ail fcucrpos ~ Ion T(ai, asi como la fin- ma cn que estas estructuras interaccionan con antigenos csl)eciticos o coil complejos antigcno(',f11 . Fstas intcraccioncs scan cl tilndamcnto dc la cspccificidad cic las rcspucstts innuuutarias adaptatisas .
1 .0%

rcgloncs lnteracclonan dc tlnrma especifica coin cl antlgcno i.prf . 9.l). Ions aminoacidos pcrtcnccicntcs a las rcgioncs cstructuralcs no suclcn formal- cnlaccs con cl annimx, . Sin clnhargo, soil cscncialcs para yuc los dominios V SC phcgucn corrcctamcntc, asi como para ntantcncr l :t intcgridad catructural dcl punto dl- union . La union cntrc cl antigeno v cl anticuerpo sc dchc a la formacioin do nuiltiplcs cnlaccs no cocalcntcs cntrc cl antigeno s- los aminoacidos Lid ptuttcn do union . Si sc considcran aisladamcntc, cstas fucrzas atractisas (cltlaccs do hicir6geno y tLicrz ;u clcctros taticas, dc Van dcr 1Vaals c hidr6fohas) son dchilcs cn conm1,aracion coil Icx cnlaccs cosalcntcs . Sin embargo, conic sc cstat)Icccn multiples intcracciomcs, la cncrgia total dc union cs clcsada .

El punto de union de los anticuerpos

cadena pesada

1135:

' H1
903

H3

- 1111% 1 1 05 / --' 2

30

UNION ANTIGENO-ANTICUERPO Los anticuerpos establecen multiples enlaces no covalentes con el antigeno

LOS CStudlor5 cic Ion do~minio~s \' do hos .tn6cLirr11oos mcdi .uuC Iris talogratia dc rasons X 11 .111 dcnuostradoo yuc Ids rcgiomcs hipcrsariablcs Is . ca11 . h) SC cncuclurAn :U;rupaclas cn cl c\'trcmo cic Ices lira/o% Fah I s -. cap . 6), cicrtos aminoacidos yuc aparcccn cn cstas

Fig . 9 .1 . La molecula de antigeno se aloja en un surco formado por las cadenas ligeras y pesadas, denominado punto de union al antigeno . El ejemplo que se muestra esta basado en estudios cristalograficos con rayos X de una IgG humana (la proteina del mieloma NEW) unida a %-hidroxil-vitamina K . El antigeno establece contacto con 10-12 aminoacidos de las regiones hipervariables de las cadenas pesadas y ligeras . Los numeros indican los aminoacidos que establecen contacto con el antigeno .

Reconocimiento de antigenos

I .a tucrza tic tm cnl,lcc n(~ c(rt alcrltc dcpcndc cn gran mcdida de la distancia f d i yuc scpara a IOS grupos inlplicados ell la interaccion, Fri cl caso dc las fuerzas clcctrostaticas, In tircrza cs proporcional a I /d=, nlicntras gttc ell Cl caso do ]as hrcrzas dc Van der Waal .s didla hrcrza es proporcional a I/d . P(rr tanto, para

Las conformaciones del antigeno diana y del punto de union son complementarias

simultincantcrac \arias enlaces no covalentcs . Si cl antigeno \ cl punto tie union soil complcrncntarios cn cstc sentido, la energia de union sera stificicnte desde tin punto dc vista tcrmodillinlico coma para contrarrcstar la tendencia :1 rompcrsc tic] enlace . Por cl contrario, Si Ids nttbCS clcctronicas del antigeno del anticuerpo sc solapan, aparcccn hrcrzas tic repulsion do naturaleza cstcrica, quc son imcrsanrcntc proporcionalcs a la duodccima po tencia tie la distancia guc separa a anlbas nubes clectronicas : F u I /d'= . La cspccificidad tic una nlolccula dc antiCLICI-PO Coil respccto a tin antigeno conlcrcto \ su capacidad para distinguir diIcrentcs anti,;cnos (Acpcnticn cn gran mcdida de estas titcrzas, la quc la mas minima (Ice\-iacion tic la forma ctomplcnlcntaria idtinca tcndra coma consccucncia una rCCIuccion do la cncrt;ja total tic union, dchid(r al Attncnto tic las hrcrzas tic repulsion \1 a la disnlinuciol tic las fuerzas do atrlcci()ii f jtr). 9.3). :11 estudiar las intcracciones entre la lisoAnla v cl fragmcnto Fall do till anticucrI,o tirntc a la misma, sc ha obscnadoo quc las supcrficics del epitorpo del anti,cno tie] punto do union stn

Para quo: cl tictcrminantc antigcnico f cpitopo) 1. cl punto de union del anticucrht> IaratOPOi se combinen 9. .i) cs ncccsaria la prcscncia do agrupacioncs at(imicas adccuadas ell [as rcuioncs tic] antigeno v del anticuerpo guc cstablcccn la intcrac cion, \ cl punto de union debo teller una tornla cn la title cl epitorp(r cncajc corrcctamcntc, de tal nlancra guc SC pucdan t01-n1,11-

yuc ostdS titcrzas Ilcgucn a rcscstir una cicrta inlportancia, los grulxrs cntrc Ices guc sc cstablccc la interaccion sc deben cncontrar situados mill prosirnos cl unit del otro (a cscala nrolccular)

conlplcnlcntarias. I .sta c((mplctncnttricclad sc csticndc alas ally do las regiones IliIlenarial)lcs . Has 1 aminoacid(rs del anticuerpo quc cstablcccn intcraccioncs coil 16 anlinoacidos de 1 .1 lllctlc cula tic lisozima f iuf. 9.4) . Todas ] .is rcgioncs hipcnaria tiles tornlan parts del punto tic union, aunque parccc yuc 1 .1 mas inlportantc cs la tcrccra region hipcrlariabic, coditicada por cl tranlo V 1) 1 del gon tie cadenas pesadas. Ester pucdc set debido a la major lariabilidad guc genera la rccornbinacion de los segnlcntos \', 1) N J .

i ;/ia . 9.?) .

l.a tircrza del cnlacc guc sc cstab1CCC Cn11C tin ,tntlgi~U~ c tin allticuerpo, sc tlenonlina afinidad del anticucrp() . Es el resultado de sumar t(~das las titcrzas dc atraccion v tic repulsion guc sc hall mcncionado anteriornlcntc (~fr1 . 9.5} . La interaccion cntrc cl punto tie uniein tie] all tictrerp0 V Cl antigeno SC pucde CSCtrdlar ticsde till punto tic sista tcrmodinamico. Para nadir la alinidad dc till unico puma de union cs ncccs;u- io utilizar tin antigeno nlenolaIcntc, o incluso tin unico cictcrnrinantc antigcnico aislado fun hapteno) . ( :ono each unor do los enlaces no Cot -alentes guc sc hn - nlan cntrc Cl anticucrlut y cl epitopo( is reversible, la combimlcitin global cntre cl anticuerpo ~ cl antigeno tanlbicn debe scrlo ; par tanto, SC Iurcdc aplicar a dicha rcaccitin I :1 Icy do accion tie maws V detcrnlinar su constants do equilibrio h. F.sta constants tambicn se dcnomina constants do afinidad f.hq. 9.61.

La afinidad de tin anticuerpo indica la fuerza de tin solo enlace antigeno-anticuerpo

La avidez de tin anticuerpo indica la fuerza total de la interaccion entre el anticuerpo y el antigeno
C(nr(I :.t1Lt

Fuerzas de atraccion intermoleculares anticuerpo antigeno

unidad tic ulticucrpo tic cuatr(( cadenas pcptidit,n conticnc doe puntos de union con Cl antigeno, los anticucrpos pucdcn rcaccionar corn Itts antigenos dc forma polilalcntc . Adenris, los antigcnts tarnhicn pticden set monmalcrucs i haptenos ;i o polisalcntcs ip . cj ., los microorganismosl . La fucrza stn la yuc tin :urticucrho pofsalcnte SC LtnC a till antigen() Pollulcnte sc den(ltnina a\idez, para ditcrcnciarla tic la afinidad, guc sc rcficrc a la union cntrc till solo dctcrnrinantc antigcnico V tin .I .a axidcz tic tin anticuerpo stn Union iuliCO I)unto tic rcspecto a tin antigeno dcpende tic la afiniciad do each una do IOS PHIL toe tie union par Its dcterminantes del antigeno, t::uando ambos punt(>s de union del anticuerpo sc pLICCIcn unir al antigeno, la

Buen ajuste buen ajuste paratopo del anticuerpo

y mal ajuste
mall ajuste

i ~exclusioo, del agua/ Fig. 9.2 . La naturaleza de las fuerzas que Linen el Ag al Ab hace preciso que los grupos que interaccionan esten may proximos . Los enlaces de hidrogeno son puentes de hidrogeno que se establecen entre atomos adecuados. Las fuerzas electrostaticas se deben a la atraccion entre grupos con cargas opuestas situados en las cadenas laterales de doe proteinas diferentes . Las fuerzas de Van der Waals se deben a interacciones entre nubes electronicas (representadas coma dipolos oscilantes) . Los enlaces hidrofobos (que pueden aportar hasta la mitad de la fuerza total del enlace antigeno-anticuerpo) se deben a la asociacion entre grupos no polares de naturaleza hidrofoba para evitar el contacto con el agua . La distancia entre los grupos implicados en la interaccion quc da lugar a una union optima depende del tipo de enlace .

alta repulsion-baja atraccion Fig. 9.3 . Un buen ajuste entre el determinante antigcnico y el punto de union del anticuerpo hace posible el establecimiento de mochas fuerzas de atraccion intermoleculares, mientras que la posibilidad de quc aparezcan fuerzas de repulsion es pequena . En cambia, cuando el ajuste no es buueo sucede to contrario . Cuando las nubes electronicas se superponen se generan intensas fuerzas de repulsion que son capaces de contrarrestar cualquier fuerza de atraccion de pequena magnitud.

Union antigeno-anticuerpo

atidcz es ntator yuc la soma do las afinidadcs . Esto cs dchido a yuc CS ncccsaria la ruptura sinutlt.inea de todt~s los enlaces antigenoanticuerpo para yuc sc produzca la disociaci6n I fin. tl.'1. En las situacioncs fisiologicas normalcs, la acidcz suck tencr main importancia clue la .tfinidad, ca yuc los antigeno,, yuc se encucntran cn la naturalcza son polisalemes. Sin embargo, la me dicta precisa dc la afinidad Ittptencr :ut6cucrpc~ es nuis titil para comprcndcr la naturalcza inntunctyuintica dc las reacciones an6geno-anticuerpo . Cinetica de las reacciones antigeno-anticuerpo l.a mcdicla dc la .tfinidad do I()s anti :ucrpos sc Ilct .t t caber en ccntdi :i(ntcs dc cyuilibrirr . I a ,tfinidad rcprcscnta la tcndcncia kit los anticucrpos a ktrmar cotmpicios cstablcs con CI .111tigc1lo. Sill

embargo, en una grut cantidad dc actinidadcs hiol6gicas dc los anticuerpo,, la cinctica cic la rcacci<in tambicn pucdc scr importantc. La cinctica cstudia las constantcs {tool's i I dc la rcacEi,_ cicin directa rwlocidad de asociaci6n 1 v h, (s } de la reacciun int ersa i s clocidad dc disociacioin l . I'M cl cquilibrio, cl cocicntc entrc cstas don constantes CS igual t It constulte Lie cquilihrio 0 afinidad del anticuerpo . Sc ha afirmado yuc las ditcrcncias dc afinidad se deben principalmente a ditcrencia,, cn la sclocidad de diso ciacitin, pert t sc ha dcm<~strado reciciuentente yuc la afinidad tambicn dcpendc do la tclocidad dc ascaiacil~n. Asi mismo, existen datos recicntes yuc sugicren yuc la seIcccion \. la cstimulacicm do las cclttlas B a to largo c1c la maduI".6011 do una rcspucsta do anticucrpos dcpcndcn tanto dc la srclocidad con clue los 111 icucrpos se uncn al antigeno iselecci6n cinctica) coma dc la 1Lerza de dicha uni6n fsclcccidn tcrnu~di n:intica I .

Afinidad de los anticuerpo,, buen ajuste 1 mall ajuste

alta atraccion-baja repulsion

alt. repulsion-baja atraccion

afinidad = `_ de fuerzas de atraccion y de repulsion

Fig. 9.5 . La afinidad con la que un anticuerpo se one al antigeno es igual a la soma de las fuerzas de atraccion y de repulsion que existen entre ambos. Un anticuerpo de alta afinidad implica un buen ajuste, mientras que ono de baja afinidad implica un mal ajuste .

Calculo de la afinidad de un anticuerpo las reacciones antigeno-anticuerpo son reversibles Ab Ag AbAg aplicacion de la fey de action de masas
a ~u'isla'ite ~ .1e ey, I Lrrv

viene

-~ ~' i'iclaal .

dada por

Fig. 9.4 . Ell complejo Fab-lisozima . Arriba : La lisozima Iverde) se one a las regiones hipervariables de las cadenas pesadas (azul) y ligeras (amarillo) del fragmento Fab del anticuerpo D1 .3 . Centro : El complejo separado, en el que se observa el actdo glutamico en position 121 (rojo) . Este aminoacido encaja en el centro del surco que Forman las cadenas pesadas y ligeras . Abajo: Las mismas moleculas tras una rotation de 90. Se observan los aminoacido,, que entran en contacto e intervienen en el enlace antigenoanticuerpo . (Por gentileza del Dr . R. J. Poljak, Science 1986; 233:747-53, con autorizacion .)

[AbAg] (Abl (A91

K-

Fig. 9.6 . Todas las reacciones antigeno-anticuerpo son reversibles . Por tanto, es posible aplicar a estas reacciones la fey de action de masas y calcular la afinidad del anticuerpo (que viene dada por la constante de equilibrio K) . (Los corchetes significan la concentration de los reactantes.)

Reconocimiento de antigenos

Afinidad y avidez Fab IgG IgG IgM

Especificidad, reactividad cruzada y ausencia de reactividad reaccion especifica

'1'111

anti-Y

1
1

ausencia de reaccion

 ii

Y anticuerpo valencia efectiva del anticuerpo valencia del antigeno Fab 1 1 IgG 1 IgG n 10` avidez IgM .Sts 10 tiepitL:rtc% Y comun n AgC ausencia de epitopos comunes

10" 10 constants de equilibrio ILIMI definicidn de la union afinidad afinidad

10' 10 ventaia de la polivalencia avidez afinidad intrinseca afinidad funcional

10 1,

Fig. 9.7 . La union polivalente enlre tin Ab y tin Ag (avidez o afinidad funcional) provoca tin considerable aumento de la estabilidad, de acuerdo con la constants de equilibrio, en comparacion con la union monovalente simple (afinidad o afinidad intrinseca, a la que en esta figural se le ha asignado tin valor arbitrario de 10' UM ') . En ocasiones, esta consecuencia de la polivalencia se denomina pefecto bonificativo . Como se observa en la figura, la energia de union de las IgG puede ser 10'veces mayor cuando se utilizan ambas valencias (puntos de union), y la de las IgM se pueden multiplicar por 10' cuando se Linen al antigeno de forma polivalente .

Fig. 9.8. La especificidad de los antisueros es debida a la accidn conjunta de una poblacion de diferentes moleculas de Ab (anti-X, anti-Y y anti-Z), dirigidos frente a diferentes epitopos (X, Y, Z) de diferentes moleculas de Ag . Tanto el Ag A (AgA) como el Ag B (AgB) contienen el epitopo Y. Un antisuero frente a AgA (anti-XYZ) no solamente reacciona especificamente con AgA, sino clue tambien presenta una reaccion cruzada con AgB (ya que reconoce los epitopos Y y X'). El Ab no reacciona con AgC, ya que no existen epitopos comunes.

Especificidad y reactividad cruzada radical (R) sulfonato arsenato carboxilato

ESPECIFICIDAD Y AFINIDAD DE LOS ANTICUERPOS

Las rcaccioncs an ti'xno-anticuerpo pueden ntostrar ttn alto gra fl do dc especificidad . I'or cjenlj,lo, Ios :ultictlcrpcts cntc al tjrtK . clef saranipiun se uncn a) nlisnu, t cctnficren innuulidad f-cnte a diclia cifernlctlad, pcro no sc c(tartbinan coil otros tirtrs ip . cj ., III cjcrccn ningun ctccto protector f cntc a cl dc la poliomielitis) Icts inisnlos . La especificidad dc tin antisuero cs igual a la SLIIIM dc Icts ctcctos de coda 11110 do l0s anticucrpcts clue contiene dicho antisuero . La poblacion do anticucrpcts pucdc contencr nitichos IrtrStopos, each 11110 (IC lo , cualcs cs capaz dc rcacciollir coil . dc till iones difcrcntcS till epitopo ditcrcntc, ct inclus0 coil rc mismo epitopo L_/it1 9.8). Sin cnlh,irgo, cuando algunos dc Ices cpjtoluts do tin antigeno A apareccn tanlbicn cn otro ;uttigcnct 11, partc do I(ts anticticrpos dirigidos contra A tanlbicn rcacciona1- 111 c(r11 li . F.stc fcnonicno w cicnctntina rcactitidad crlrada.

wt-* wt: -0:

tetraedrico tetraedrico plano

Los anticuerpos reconocen la conformaci6n global de los antigenos

h.\Ncn yttc 1'1,(X,111 yuc Icts .utticucrlxn rcc(rnocclt la colt figuracicin global LIc till cl,itopo, c 110 grupos quilnicos concictos qia. 9.91 . Lets anticticrpos scat capaces dc manjtcstar una notahlc especificidad, :tsi como dc reconoccr I,cqucitas ditcrencias cn la scclicncia priniaria dc aminoacidos, cn la carga, en la configura ci(in uptica .\ cn la conforniacicin cstcrica dc Icts antigenos pr0 tcicos 9.111'1 . LIna dc las consccucncias dc esta especificidad es gttc nttlchos anticuerpos se uncn solanlciac a anti genos Ilatjtas o a fragmcntos tic antigeno clue conscrsnn su estructura tcrciaria to suficientc C(tm0 l,ara podcr cstablcccr las multiples intcraccioncs neccsarias para la titrntacic~n dcl enlace . Esta especificidad pucdc ser prob1cmatica cuando se prctendc prodtlcir anticucrpcts para la rcalizaci61l do pruebas inmtino-

Fig. 9.9 . Un antisuero frente al isomero meta del aminobenceno sulfonato (el hapteno utilizado para la inmunizacidn) se mezcla con los isomeros orto y para del mismo compctesto, asi como con tres isomeros (orto, meta y para) de dos antigenos parecidos pero no identicos: el aminobenceno arsenato y el aminobenceno carboxilato . El antisuero reacciona especificamente con el grupo sulfonato en posicion meta y presenta una reaccion cruzada (aunque de menor magnitud) con el sulfonato en posicion orto . Ademas, tambien se observan debiles reacciones cruzadas del antisuero con los grupos arsenato y carboxilato en meta, pero no en orto ni en para . El arsenato es mayor que el sulfonato y contiene tin atomo de hidrogeno mas, mientras que el carboxilato es mas pequeno . Estos datos sugieren clue la configuration del antigeno es tan importante como los grupos quimicos clue contiene .

Especificidad y afinidad de los anticuerpos

16gicas . Para Ilctar a caho unit inntuniZICi(ill, SUClc srr ntas scn estrucCillo sintctizar antigcnos Polipeptidicos Cortos Con una tura primaria ConOCida yuc purifcar la cantidad ncccsaria tic antigcno nativo . Sin embargo, IOS :utticuerpos ti-snte a Ios poliPcptidos sint tICOS no se SUCICII unir bien ill dc una ntancra prcdccible a la forma n:tti\a LiCI antigcno .

Se pueden producir anticuerpos de diseno modificando los genes de los anticuerpos

Especificidad de configuracitin
antisuero lisozima antigeno .~bucle,- peptidico
aislado

-~bucle,, reducida

Ia hiologia molecular ha ahisrto cantinos yuc perntitcn pr()(iucir antiCUcrpos mrnt()CI(malcs fAbin) do una dcterntinada cspcciticidad, afinidad c isotipo de ill ntttnoglolnIlina . Es PosibIC obtcncr gcncs (IC anticucrp(rs Liuc Contcngan, [Nor Cjcmplo, do ntinios V nntrillos sobre regioncs (: ltUlttanaS . Esto termite a Ios ill rttun(ilogos CI dcsarrollo dc anticuerpos Con una cspecificidad Lictcrntinada cn ratoncs, y la posterior transtrrencia ds diclta esl,ccificid :td a anticuerpos humanos. El Abm resultants es poco anti`,enico tiara Io, ,errs humanos, por to yuc pusdc srr administrado a los pacientes. Sc pusdc incluso trahajar a ntcnor escala, transfiricndo regiolICS detcrntinantes dc la complcmentaricdad ( ltl)C ;de una especic a las regioncs cstructurales do Ios dontillios V de otra . Tanthicn SC Pucdsn ntodificar amino:icidos CO IICrCt(iti Liel Punt(r Lic uni(Sll Para al1tttenL11 - la afinidad de Un antkucrI, rr _hR.9 .111,

En los puntos de union polifuncionales se pueden acoplar epitopos diferentes

anti-lisozima anti-(, bucle)) + + + + + +

Fig. 9.10. La molecula de lisozima posee tin enlace intracatenario (rojo) clue genera tin bucle en la cadena polipeptidica . Los anticuerpos frente a la lisozima completa iantidisozima) y frente al bucle aislado (anti-abucle))) son capaces de distinguir entre ambas estructuras . Ninguno de los dos antisueros reacciona con el bucle aislado en su forma reducida lineal . Esto demuestra la importancia de la estructura terciaria con respecto a la especificidad de los anticuerpos.

Lrr Lrt:-.rr ,ic Lru uitim~  ait)ti SC IhUl ()tIlcnld(r d.1Cr),ti yuc sugic rcn yuc HIM nIOICCUIa de anti :UCrt)o puc(ie ',Cl- C(nnplctnentaria Coil rcspcCto a \ariots antigcnos ditercntes . I.a uniiin de estos alltit enos es de tipo compctitiso, y parsec Clue se produce ctt dice 9.12;1 . rcntcs rcgirmes Licl punto Lie union La cspccificidad do una pohlaci(in dc anticuerpos no se debe a quc C.lda antiCUSrpo rcaccionc CXClusiVamclltc con cl antigcno inductor' . Sin cnthargo, si todos Ios integranrcs do: till Cmjuntu numeroso dc anticuerpos polifuncionales diterentcs tienen cn contain tin I,untc~ do union a till cicterminado antigcno A, la rcactividad ncta trente a A de este conjunto de anticuerpos es clc\'a da, micntraS yuc frcnte al rcsto dc antigcnos es baia . Por Canto, la cspccificidad I)ucdc scr till tcn(mtcnrr poblacional, cs decir, till parintetro medio caractcristico del C(rnjunto dc antictici-pos Clue

conticnc tut antisuero (/iq . 9,13 .

Anticuerpos de diseno
3

RDC rnurinas

fenilalanina

dominios estructurales y C humanos

Cr2 ~ ;orninios C humanos C,3 Crl3

Fig. 9 .11 . Es posible separar los genes de tin dominio V de raton e incorporarlos a genes C de origen humano, y transfectarlos despues a una celula clue, a partir de ese momento, produce anticuerpos quimericos murinoihumanos (1). Tambien se pueden transferir exclusivamente las RDC clue se desee a otra region

estructura( (2) . La afinidad del punto de union se puede modificar provocando mutaciones puntuales en el ADN de los bucles hipervariables (en este caso se muestra tin cambio Phe por Lys) (3).

Reconocimiento de antigenos

Puntos de union polifuncionales

punto de union polifuncional
antigeno

Especificidad de los antisueros

receptores eel. B se unen al Ag especificidad de los anticuerpos especificidad antisueros

anti C Lanti-A anti D estimula la ' " production de Ab anti E anti-A anti-E anti-G L
I I

anti-A anti-C anti-E anti-G a~

anti-D~

anti-A L_ anti -H exclusion de la menadiona exclusion del DNP

anti-14-

Fig. 9.12. El punto de union de un anticuerpo se puede unir a mas de un determinante antigenico . Por ejemplo, el Ab 460 presenta dos regiones diferentes en el surco de union, que se encuentran a una distancia de 1,2-1,4 rim. El Ab se Line al hapteno menadiona o al hapteno DNP. La union es competitive, es decir, la union de uno de ellos impide la union del otro . Los puntos de union que son capaces de unirse a mas de un determinante antigenico se denominan puntos de union polifuncionales.

Fig. 9.13. La especificidad como fenomeno poblacional . Un irnico antigeno (AgA) se puede unit a molecules de Ab de celulas B diferentes, especificas no solamente de A, sino tambien de otros Ag (C, D, E, F, etc .) . Por tanto, los receptores de las celulas B poseen puntos de union polifuncionales. Cada celula B estimulada pot AgA produce un Ab que no solamente es especifico de AgA, sino tambien de otros Ag . Como todas las celulas B estimuladas son especificas de AgA, pero no todas son especificas de los demas antigenos, la concentracion de Ab frente a AgA sera elevada, pero no asi la concentracion de Ab frente a los demas antigenos.

Un anticuerpo de alta afinidad suele set mas eficaz que uno de baja afinidad

I .a :tliniti .td tic 1 .1 union nor C(m,titMC s(rLtrt1CrrIC una Cucstioin tie inlCrcs JC(rritor, t ;t yuC la tfinidaci \ la asi(icz afcctan a las propictiatics fisjologicas s, patorlogicas do lo% anticticrpos . Los :uuicticrpos tic alta afinidad son na :is CficacCS yuC los dc baja afinidad cn ditcrsas rcacciornes hiol(yicas ifo. 9.141 . En anina,alcs dc Cspcrimentaci(in, sc ha obscn- .trio clue Ios ConnPICjox antigeno-antiCUCrpor (iuc ContiCnen antiCUCrpos dc baia afinidad perm :uaCCCn mas ticntpo en 1,1 Circul :tcion, sc acunrtfan cn la mcnahrana basal tic los glonicrUlos rcn:ilcs s, pro\-ocan anomalies tic to fiuacion re nal . Los coniplcjoa do alts afinidad son chminados ni .i s r:ipida mentc dc la circulacioin, se acuntulan en cl ines,tngior renal \ nor afcctan practicanicntc a la funcion renal .

I .,a afinidad dc Ios anticuerpos frente a la ntaNoria tic Ioos antigCnors tiependicnies dc celulas 'I aunlCllt .1 a lo largo dc la rcspucst :t inmunitaria, \ CSte CtcCto SC pucdC ConSeguir tambien me diantc cictrrminados protocolos dc inniunizacion . for cicntplose puCdC potCnuar I :t aP :UleIO ll de urbpohlacioncs dC antiCUerpos dc alta afinidati mcdiante la innaunizacion coil antigeno t: IF\ 9.151 . E.Clslen kii\Crzors adsu\antcS capaccs dc .aumCntar la cantidad dc MaticuCrpos pr(xIuCida, pero porn% dc cllos prcscntan la prorpicdad dc aunacntar tambien la atini&td . ('01110 la afinidati inflate notahlCnacnte en la eficacia hiologiCa tic los anticuerpos, cl lF\y pucdc scr un adt Lit .site inap(rrtantC ell Ios procedimicnt()S CIC \- acunaC10n .

Determination de la afinidad de un anticuerpo

Ventajas de los anticuerpos de alta afinidad

hemaglutinacion hemolisis fijaci6n del complemento anafilaxis cutanea pasiva : " actividad bactericide " neutralization de toxinas " actividad opsonizante elimination inmunitaria del antigeno lesiones a las membranes neutralization de virus capacidad de protection frente a bacterias y virus in activation de enzimas destruction in vivo de eritrocitos D' Fig. 9.14. Reacciones biologicas en las que los anticuerpos de alta afinidad son mas eficaces que los de baja afinidad .

Esistcn tarioa nwt((d(rs pare tlrtrrntiir:tr la ;atjnidati s, la atitlcz . ]'*n todos los hr((cCdiiuICiru(s sr Utilize Algiin sistertta cot cl que CI :uatjgeno y cl anticuerpos Sc encucntran en cyuilibrio : Ab + Ag AbAg . Sin Atcrar cl cyuilihrio dc tlicho sistenm, sc rnidcn las cantidades dC antigeno librc s . dc antigeno aconaplCiatio . Esto sc pucoic lacer tic t arias ti antes. Sc pucdc scparar cl antigeno, librc del antigeno Unido mediante nictosdos fisicos, como la di :disis, la filtraci(in a tra\cs tie un gel, In CCntrihrgaci()n o la prccipitaci(in seIccti\a . I-anibicn sc puetien mcdir las modificaciosncs dc las proIcicdadcs dc fluorcsccncia del antigeno ic(rraaplCjldO o LICI :uaticucrpo. Los datos ohtcnitios ntctiiantc cStos sistemas Sc analizan nac diantc la aplicacion dc la Icy de accio'in dc masas, con to clue se ob time la constants de equilibrio f afinidad} h: IAbAgI IAt, IIAgI ell donadc IAb:1gj CS la CornccntraCi(in tic antigCllo Cn derma (ie . complejo, IAg] cs la conccntraci()n dc antigeno Mire a JAI, I cs la concentracion dc puntos tie union Coil CI :uatiV,cno yuc SC encucntran lihrcs cn cl cquilihrio . ('candor la rnitad tic los puntos de Urtio)n sC Cnulcruran ocupadoss pot cl antigeno, IAh1 = IAbAgI, pot for yuc K - l ;"I Ag I . Fn otros palabras, CUando un ut6CLierpo cs dc alta atiiitiad (tom nn talor tic h cletadoi, Lt naitad tic sus

Estructura de los antigenos

puntos tic uni(in tiucdan ocupacl(s potr molcculas tic antigeno cn prrsrncia tic una pcyticfta conccntraciom tic cstc ultimo, nticntr.ts yur para quo: ocurra to mistno cn CI iastt tic tin anticucrl,o tic haja afinidad, I :a concentraci(in tic tnugcnot debc scr nnIClut tnaN(r.

cyuilibdo (K I tic la rcaccion cs indcl,rntfcntc tic I :t contccntr :tcioin tic sustrato . Esto not es cicrto en la rcacci(in cntrc till antigcno N, till antisuero . Por cl c(nttrario, la cotnstantc K tic una potblaci(nt tic anticuerpos cs tic naturalcza hctcrotgcnea . t)urantc tnucho tictnlxt u stll)uso yuc las afinidades tic ](is anticuerpos hrrsrlltes cn cu :at yuicr :uttisuero sc :ajust ;th :tit a MIA (iistrihuciotn gaussiana i normal) . Esta suposicion Ita rcsultatio wr 1 .11" . Sin ctnhargo, tic lilrtna allroxintada, sc t1clinc la atinitlati nlctiia tic la l,otblaciun tic anticucrlxts tic tin sucro , i~,) contot la inscrs .l tic la conccntracion tic antigeno libre en cl cyuilihrio cttantlo se encucntran ocupados 1 .1 tnit .ui tic los punt(ts tic uniiin colt Cl antigeno : K1( = I/jAg,,1  ,1 . (11 .1101 SC rstutii,a Lt constantc tic cyuilihriot tic la rcaccictn entrc tin antisuero t . till antilwno, sc obticne una distribuci(in tic sal()rcs tic K i afinidades ( not gaussiana ( . /iq. 9. 1())La heterogeneidad de la afinidad es dificil de comprobar de forma experimental \(i is p(siblc ticstnbir ntatcnutitanWill C tic to lnaa cucta 1 .1 It(, trr,(cncitiad (it- la atinitiad, to titir no sabrnaots corn certcza si la distribucion tic Las afinidades tic his anticucq)os tic tin antisuero

La distribucion de las afinidades de los diferentes anticuerpos que contiene tin antisuero no es de tipo gaussiano ( u .and() has Cniinlas IM craccioll,ul corn stts sustrauts, la C(tnStattIC tic

concreto rs normal, scsgatla, binuxial o I,olinxtdal . fara cl CALdio tic ha ltctcrogencidad sc hall utilizadot sofisticatfts analisis in htrnuticos tic las cur%as tic asociaciom, hero toalas cstas aproxitnaciolncs sc han h:tsatio, cn cl sul,ucstot tic yuc 1,1 tiistrihuci6n CS normal . Sc ha prolntesto l till scncillo sistenta experimental para cl cstudio o tic la hetcroL,CnCldad yuc not sc basa cn dicha stil,osiciun . (()nsistc cn naezdar, cn unas placas tic microtitulaciotn re%cstidas tic antigeno, una disotlucioin tic anticuerpo a una dilution adccuatia cons una scric tic tiisoluei(nlrs tic antigeno librc thluidas tic litrnta scriada . I1?I alnigeno libre intl,i(lr la uni('ul (id antiCUcrl,() t . rl ,antigeno tic las I,Iacas . 11)c esta mantra se hurtlr calcular cl porccrnaic tic inhibicioin a each una tic [as concctttracioncs tic alltigcnot librc r dctcrtninar la concrntracion molar yuc I,roc()ca una inhibiciotn Lid 50'%, I1, ; i . A continuacion, sc calcula cl I,crccntil tic inhibiciom corrcspondicntc a cada cotnccntracio'tn tic :antigeno It brc, \ Ills \alorcs ohtcni(lo>s se traslatian t till histotgranaa I,ara analizar la hctrrogcnridatl . A partir tic cston \ alorcs so: I)uc(ic calcular till paralnctro matenlatlco (indicc tic Shannon) yur Inidc la hctcrogrnriti,ttl . I,os talorcs clc,ados indican unit Bran disl,crsi()n tic has afinidatirs, micntras Clue Ion s :alorcs bajos indican I() contrario .

ESTRUCTURA DE LOS ANTIGENOS

I;I niuncro total tic anticuerpos (iitcrcntes esl,ctificots para tin ntisnlot :ultIgeno yuc SC I)ucdc I,r()ducir CS clcs :ui(t, to yuc lots antigcnos son cstrutturas tridinacnsiotnales yur I,rrscntan not Chas conhguracloncs t1ilcrcntcs a las cclulas B . Nluchas s-ecrs, Its ditcrentes anticucrlxts trente a till tnistno antigeno sc uncn a cpi tic dicho antigeno . Por Willis, tlur so: superponrn rn la sulpcrficir Ianto, exlstcla (iifct - clltcs antictlcrp(ts ttllc reconoccll tllla region alltigcnica drtcrntin :ttha tic la m(tlccula, hero yur not SC uncn rxaCtalllcntc al ntisnto cpitol,o .

Maduracion de la afinidad in vivo

extraction de sangre on la faille initial afinidad 1~1 50

Los epitopos inmunodominantes aparecen en regiones expuestas y flexibles del antigeno

Auntluc Cs ll((sil,IC hr,011cir IlltiCLICrh(os fCntC .a lu .trIIC ;unCnIC cu,ahlt11t r h .trtC tit 1111 JIntUCn(), Cst(1 no) Cs I((tluC s11Clc (K Urrir cn

25

Heterogeneidad de la afinidad
afinidad creciente afinidad creciente

extraction de sangre on fases tardias afinidad 1%1 50 .

IFN

porcentaje 100 del total de anticuerpos 1%1 (escala logaritmica) 15

anticuerpo monoclonal

25

afinidad creciente

afinidad creciente afinidad del anticuerpo (K) Fig . 9 .18 . En este histograma se muestra una distribucion tipica de las afinidades IK) de los Ab de tin antisuero frente a tin detern,inante antigenico, en comparacion con la afinidad unica con la que se tine tin Ab monoclonal a su determinante antigenico . Observese que las afinidades de los Ab del antisuero no se ajustan a una distribucion normal .

Fig. 9.15 . Se inmunizaron ratones con antigeno IAg) solo o con una metcla de Ag y 30 .000 unidades de IFNy (Ag . IFN ;,,) . La afinidad de los Ab se midio al poco y transcurrido cierto tiempo de la inmunizacion . Los ratones a los que se administro IM,, produjeron Ab de mayor afinidad (barras oscuras) que aquellos a los qua solo se administro el Ag, tanto en la fase initial de la respuesta como en las fases tardias. (Adaptado de Holland, Holland & Steward (1990), Clin Exp Immunol82121-26 .)

Reconocimiento de antigenos

el curse dc unit respuesta inmunitaria . 1 .(1- habitual cs yue cxistan cicrtas rcgioncs del anti gcno cspccialmcntc anngcnrcas, a las yuc SC Line Ia nt :noria dc IOS :utticucrpos . Estas regimes, denominadas rcgi0ncs inmunOdomin.uttCS del antigcno, SUCICn cstar situadaS ell zonas cxpucstas dc la supcrficic exterior del antigcno, V cspccialmcntc cn zonas en las yuc cxistcn bucks polipcptidicos clue carecen de Mid cstructura tcrciaria rigida . lat algunas ocasioncs, las rcgioncs inmunodominantcs del anti gcno coinciden con las R0r1aS supcrficialcs tic la niolccula clue presentan mayor mOVilidad . Esta obscrVaci(in ha Ilcxado a Ios innTtrnfllogos a sospcchar yuc la intcrdCCi(in Cnn'c CI anticucrpo y CI antigcno no implica un acoplarnicnto rigido con una C0lttplcntcntariedad perfecta cntrc Ids firrntas del anticucrpo v cl antigc no . I'ucdc yuc C.xista una cicrta f1cxibilidad, tanto cn el cpitopo del antigcno C(>mo cn Ios bucks hipervariables del anticucrpo, yuc optimizana la cncrgia C1c unidn. Esta posihilidad ha Sido confirinada rotundantcntc It1Ct1i :uttC CI Cstudio cristalogralico coil 1-a yon 1 del complcjo yuc I'Orntan Fab y el antigcno ncuraminidasa . Los diVersos factores implicados en la complemcntaricclad se han cxplicado anteriormcntc (V. J=rfs . 9.2, 9.3V 9.41 .

CStUdiaban las respuestas C1c Ids CcluldS T Cit0t(rxiCas murinas fren9.l _i . Iran cstc cxpcritc :t celulas diana infectadas por Virus mcnto sc dcmostrci yuc las celulas T citot(ixicas (T( i de un ani mal infectado Con un Virus pucdcn dcstruir CelUlas del mismo Irtplotipo H 2 intcctadas corn cl Virus, pcro no soil capaccs dc dcstruir celulas do otro haplotipo, aunyuc cstcn intcctaclas con cl mismo virus . l!na tie [as Vcntaias clue proporciona estc sistcma dc reconocimiento dohlc cs yuc, al reconocer al antigcno virico solamentC tUMICIO SC CnCUCrnra asociado Corn un uttigcno (TH, los rc ccptorcs dc Ins Cclulas * 1 * ( nor ciucdan bloqucados por cl Virus libre . Ann ntas importante cs cl hecho tic yuc, mediante Cstc SiStcma, las celulas I pucdcn distinguir cntrc antigenos intracclu larcs V cxtracclularcs . En cl case tic I:tS celulas T colaboradoras ) -h) r, del inglcs Thelprr}, yuc rce(ntocen a I(IS :mtigCnos asoCiados Coil 11101cCUlas (TI I dc clase I I en celulas comp Ios macrofagos s. Ids celulas B. Ios principios dc reconocimiento rcstringido por cl (11'i I son parccidos. En cStc case, las Inolcculas dc class II C()nStitLIVCn un sistcma dc C(nnuniCaci(in more las cclul:u 1,rcscntadoras genos (come Ios rnacr(ifay;os ) V las Cclulas Ti i .
tic

anti-

RECONOCIMIENTO DEL ANTIGENO POR PARTE DE LAS CELULAS T

Las celulas T rcconoccn a Ios anti, ;cnos unidos a las Cclulas y aso citdos coil ntolcculas (TH. LAS nt01cCUlas (TH do class I y l I actuan conx~ sistcmas orientaciorcs tie las CelUlas T. Este fen()meno sc dcn(anina rcstriccirin (-PI I . El cxperimcrno claye Line dcnu)str(') la c\istrncia dc la rcstriccidn (PH SC 1100 a Cab(( Cu .uid(( tic

PROCESAMIENTO Y PRESENTACION DEL ANTIGENO Los antigenos son procesados antes de ser presentados a las celulas T

Restriction CPH de las celulas T citotoxicas

celula infectada per un virus

celula infectada por un virus

Lds rcSpuCataS CIC antiCUCrpos \ I :ts rcao i(mc . inmunitarias mcdiaclas p(Ir celulas suclcn it dirigidas h- cnte a dctcrrninantcs del antigen(, distintos . Por ejcmplo, las Cclulas B Inurinas rcconoccn un cpitopo del cxtrcmo amino del glucagon, Inielnras yue ]as celulas T rcconocen deterrninalnes proximos al extreme carboxilic(~ dc esc mismo c(>mpucsto i_fi(f . 9.M . Esto cs debido a que I(rs antigenos no son prcsentados por las molcculas (:PH de la supcrficic cclular coma protcinas intactas, sine coin(, pcptidos pr000Sad0s . Las Cclulas clue proccsan cl antigcno dc esta forma pucdcn scr Cclulas espccializadas prescntadoras do antigenos [as Cclulas T, o celulas i CPA,', capaces dc estimular la tliVisi()Il do del organismo infectdddS 1101- 1111 Virus, en CUVO case se comierten en lianas para [as celulas 'f( . El procesalnicnto del antigcno consiste en su reducci(in a tragmcntos PCIltidicos . Asi, la ` ;ran nunoria dc cpitopos yuc rcconoccn I :IS celulas 1 - soil fragmctnos proccdcntcs tic una cadcna pcptidica, clue 1labitualmcnte no son rcconocidos por cl sistcma ininunitario cuando torman parts do la protcina intacta .

Los epitopos de las celulas T y B son diferentes reconocimiento reconocimiento destruction

ausenCia de
L11
.1 , (; ,[ ,

rd',1 +++

17 18 +

respuesta de anticuerpos estimulacion de linfocitos respuesta (ie HTR

Fig. 9.17. Destruction de celulas diana infectadas por un virus y restriction segun el haplotipo. Se infecta a un raton del haplotipo H-2' con un virus y se aislan las celulas Tc producidas . Se determina la capacidad de estas celulas T para dcstruir celulas H-2 y H-2" infectadas con el mismo virus . Las celulas Tc destruyen las celulas H-2',, pcro no las H-2` . La celula T reconoce una cstructura especifica formada por la asociacion del producto H-2K (o H-2D) de clase I y el Ag virico (es decir, un complcjo virus/H-2K) . Como control, se somete a ambos grupos a un tratamiento con Ab antivirus, que no estan sometidos a restriction por el haplotipo, sino que reconocen a los virus en proceso de gemacion : las celulas infectadas de ambos haplotipos son destruidas en presencia de Ab anti-virus y complemento .

+++

Fig. 9.18. En esta figura se muestran las respuestas inmunitarias frente a dos peptides del Ag glucagon . Los Ab (respuesta de celulas BI se dirigen fundamentalmente a epitopos situados en el extreme amino, mientras que el peptide 18-29 del extreme carboxilico estimula las respuestas de celulas T, entre las que se encuentran la estimulacion in vitro de linfocitos y la respuesta de hipersensibilidad de tipo retardado (HTR) in vivo .

Procesamiento y presentaci6n del antigeno

Solanlentc una peclucila parts dC Ios fi-agnrcnios pcptidicos pro ccdenres de un antigenr> protcico sc pucden unir a una mo1ectrIa CPH dctcrruinada . Adcmas, las diferemes molcctdas CPIs sc Linen t difcrcntcs grupos dc peptidos . Por cicnlplo, cn cstudios cn quc sc ha utilizado un antigeno, 1 - irico quc cs rcconocido por cepas dc ratones dc ditcrcntcs haplotipos (es decir, quc poseen di tcrcntcs n101CCU1as C :PH I, sc Ita obscr\'ado quc [as celulas TH do each uno de Ios haplotipos reccrnlcen difcrcntcs peptidols proccdcrltes del antigeno (fib. 9 .191 . Esto dcpcndc en gran nlcdida de la capacidad dc coda peptido Para unirsc a una n101ecula CPH de class l l concreta . Antes de unirse a las moleculas CPH, los antigenos son degradados parcialmente y dan lugar a peptidos EI proccsamicnto dc Iris anrigcno>s para dar lugar a peptidos ca paces do unirsc a las moleculas CPI I se produce en cleterminados organulos intracclularcs (_i q . ) .20i . Para Iles ar a cab) cstudios dc luboratorio n0 cs nccesario yuc las CPA dcgracicn los anti genos, sine quc se pucden utilizar peptidos sintcticos . Esta

posibilidad do utilizar peptidos do secuencia conocida listos para cl uso- ha pcrntitido a Ios imcstigadorcs idcntificar Ios cpitopos clue reconoccn celulas f con ditcrcntcs espcciticidatics IAq. 9.211 . Tambicn cs posihlc im- cstigar la inlportancia rclatisa dc Ios ditcrcntcs anlinoacidos de un cpitopo concreto, sustituycndo Ios aminoacidos de ]as difcrcntcs posicioncs . Mcdi,tntc estos tccnicas sc ha conscguido dcrnostrar quc Ios peptidos 1, Ios antigenos (PH dc class I s II a Linen directamcntc . La conlparacion cntrc Ios ctectors do la sustitucicin sic anlinoacidos sohrc la unicin a las moleculas CPH y la reactisidad do Las celulas t 11a pcrtnitidor dckiucir quc aminoacidors cstablccen contact) con la nlolcctda CPH \ cu :ilcs 10 llaccn con cl rcccptor dc ]as celulas T. Por cicnlplo . un peptido formado por Ios anlinoacidos 52 61 do lisozinla dc clam dc lluc\o dc galling cs rcconocid0 por celulas T restringidas poor H-2-IAA . Este pcpti do se Line a ] .is moleculas IA", v Ios datos ohtcnidos indican quc cxisten trcs aminoacidos de este peptido quc interaccionan con la n101ccula CPH dc class Il 1 . otros trcs quc CstaI1ICCCn contact) con cl WIt .

Peptidos antigenicos frente a las celulas T en la proteina represora i. N 1 10 20 30 40 50 60

70

80

-iH
90

102 Fig. 9.19. Diversidad de peptidos

810 SMiJ

s v
o

va = % d e hibridomas clue reconocieron tanto la proteina corn) el peptido

antigenicos con respect) al CPH de clase II . Los ratones fueron inmunizados con la proteina represora i. . Se estudi6 la reactividad de los hibridomas de celulas T generados a partir de celulas de estos ratones frente a un panel de peptidos clue abarcaban la proteina completa y se solapaban unos con otros . Las posicioncs de los peptidos antigenicos se muestran en azul oscuro . En todos los casos existia un peptido inmunodominante, aunque en algunas cepas de ratones se detectb mar de un peptido antigenic) . Adaptado segun los datos de Roy y cots . (1989) .

Procesamiento de antigenos

Peptidos proteicos clue estimulan las celulas T peptido

secuencia de aminoAcidos 102-118 132-145

hemaglutinina del virus de la gripe Ag de superficie del virus de la hepatitis B expresi6n del antigeno en la superficie celular pre-S del virus de la hepatitis B FMDV VPI precursor de la espicula del virus de la rabia
Fig. 9.20. Los antigenos ex6genos son ingeridos por las celulas

109-119 130-140 302-313 38-52 95-109 140-154 120-132 141-160 32-44

presentadoras de antigeno, siendo degradados despues en compartimientos intracelulares especializados por un conjunto de enzimas proteoliticas . Los peptidos antigenicos se asocian con moleculas CPH de clase II en vesicular clue se Linen al sistema endocitico en su camino hacia la superficie celular.

Fig. 9.21 . Serie de peptidos clue se sabe clue estimulan a

las celulas T, procedentes de diversas proteinas . Para estimular celulas T especificas se pueden utilizar peptidos sinteticos clue correspondan a una parte de la secuencia completa de aminoacidos de un Ag proteico . Generalmente, solo uno o unos pocos peptidos de una proteina poseen propiedades estimulantes .

Reconocimiento de antigenos
aminoscidos . Estos pclpticios "naturales sc lian podido dcfinir con mayor precision dc la clue se espcraba . Se 11an secucnciado una scric dc pcptidcts yuc SC Linen :a dctcrminacfas moleculas (TH, Y tic ha detectado cn cllos la prcsencia dc aminctacidos caractcristiccts f unct cn cl cxtrcnto carboxilico del pcptido s- caret cn las proximidades del cxtrcmo amino) . Estos atninoacidots per mitcn clasificar a ION pcptidcts scgtin las ntctlcculas ( :1'H dc claw 1 coil las yuc NC pueden unir (Jiq. 9. 2r~ . El analisis dc la Cstructura tridintensictnal tic x arias nutlcculas tic close I ha pcrmiticio ticternlinar la signification de estos rcsiduos cctnser, -adots ohtenCr una images nitida dc la situacicin del pcptido ell CI surco dc union . Los cxu-cnuts del surco do union del pcptido cstan ccrrados . hiclao pcptido SC Cncucntra en titrma tic tadena extentiida dc nuexe amin<riciLlcts I; sin adoptar , una cstructura dc 11elicc o 1, con sus cxtrcmos dirigicios hacia amhos extrcnaos del surco . Algunas dc las cadenas latcrales se proycctan hacia los bcalsillos prcscntes en la region xariable dc la cadCna pesada dc class 1 v se torntan nuntcrosos enlaces dc hicirogenot cntre ION amirioacidos dc la molccttla de close I e Ins de ION pcptidcts IocalizaLlcts a lo largo dc la naisma . En conct-ctct, la tirosina yuc se SUCIC Iocalizar en cl extrenut \ terminal tlel Itcptidct V una lisina cc nscrxacia cn CI surco dc union dc claw 1 cstahilizan la union del pcptido . La zona central Liel pcptido protruyc hacia cl cxtcrictr del surco, prcscmando cstructuras distintas al TCR. Esta imagcn cs concordantc coil las cstructuras caractcris ticas clue se hall obscrvado cn ION cxtrcmos dc ION pcptidcts cluidcts a partir do nutlcculas tic class I . El analisis de la cstructura tridimensional ha cicntostrado clue cl surco tic union al pcptido do ION antigcnos dc Base I I cs parccidct al anterior. En cstc surco tanihicn aparcccn una scric dc bctl sillos dc union, aunquc la localizaciitn dc Ices mismos cs algo distinta quc en las mctlcculas dc class 1 . Una ciitcrcncia fundamental cntrc anabas Cs quc Cl surco dc class 11 no csti cerrado cn su cxtrcnto, do forma yuc ION peptidos ligados al mismo sobresalcn por los extrcmos del surco . Este dato cxplicaria quc ION peptidos cluidos a partir dc las mctlcculas do class 11 suclan scr mss largos, coil ntas dc I5 anainoacidos . Sc loan idcntificado amincticidcts conscrxados tie atnarrc ell ION pcptidcts tic class 11, aunque rcsulta mass diticil reconetcerlos yuc ell ION dc class I petr ION cxtrenuts irrcgul:ares la disrrihucioin mass regular tic lets enlaces clue anclan cl pcptido coil CI surco tic union dc class III:l c1 . 9.?3'I . ()tra ditcrcncia cscncial sc Iocaliza cn Icts cxtrcntos del surco dc union del pcptido, ya quc en Icts antigcnos tic class I las intcraccictncs entre ION cxtremos tcrminalcs amino \ carhoxilico hacen clue cl pcptido qucde dentro del surco, micntras quc cn las ntolecUIas dc chase I I ION pcptidcts Ituccicn sobrcsalir del surco .

ESTRUCTURA Y ENSAMBLAJE DE LOS COMPLEJOS MOLECULA CPH/PEPTIDO

F; I punto de union coil Cl pcptido de 1111 .1 molccula (I'H presents dixcrsos bolsillos, lacmiiduras, crestas, protuberancias c dcprcsioncs . Su tctpctlogia concreta dcpcndc ell parts tic la n :uuraIcza do ION aminoscidos prcscntcs en cl interior tie] surco, pear to yuc It() Cs la nlisma en ION dltCretttCS hnplctril1cts . La union del pcptido ticpendc dc I .1 naturtleza dc las cadcnas latcralcs del mismct x do su cotnplcntcntaricciad Coil Cl surco tic union dc la nlctIccula ( :1'H . Algunas dc las cadcnas latcralcs do ION atninoacidos del pcptido cluccian oricntacias hacia cl exterior Lie] surco, tic tal turns, yuc puedcn cntrar en contacto con el T( :R i ~ . cap . .' l . l,a a-Ciacioin pcptidct0'(TH sc Ilex :, a caho cn organulos intracclulares espccificos, \ la interaccicin dc Icts peptidos Coil ION antigenos tic claw 1 s' 11 sc produce en ditcrcntcs zonas dc la celula .

Los peptidos se fijan al surco de union de las moleculas CPH mediante aminoscidos de amarre caracteristicos

sccucnci .11 Icts pCptidon 1-.11 i .t attualid,td, cs posihlc Itttriticar yuc Iran sidct gcncrados pear un .1 celula, a hall unioo a molccu I :ts ('I'1 I V 11 .111 ducdado cxpucstos en la supcrficic cclular . F.ntrc cstos peptidos no solantcntc sc cncucntran peptidos cxcigcnos procccicntcs tic antigcnos ingcricios o dc particulas x iricas, sino tatnbicn mctlcculas propias producidas en cl interior dc la celula et ingcridas mediante endocitosis a partir dc ION liquidos extract lularcs . Sc hall purificado y sccucnciado pcptidcts propios Cluidcts a partir tic tnolcculaas Cl'l I do class 1 . Medi.utte este sistema, cc ha cicmostrado yuc cstos peptidos csran lormados pctr nUCt'C

Peptidos quc se unen a las moleculas de close I

surco de union en clue se alojan los peptidos antigenicos

Las moleculas de close I se asocian con peptidos sintetizados endogenamente

Fig . 9 .22 . Estructuras especificas de alelo en peptidos eluidos a partir de moleculas CPH . Se inmunoprecipitaron moleculas de close I de los haplotipos H-2K1 y H-2K'. Los peptidos unidos a estas moleculas fueron purificados y secuenciados . Los aminoscidos habituales de una position determinada se hall denominado aminoscidos de amarre dominantes. Los clue aparecen con una cierta frecuencia en una position se hall denominado afuertes . Las posiciones en las clue no se muestra ningun aminoscido son las clue ocupan diversos aminoscidos con frecuencias parecidas entre si . Se ha utilizado la nomenclatura de aminoscidos de una sola letra . En el diagrams se representa una vista superior del surco de union CPH de close I, y se indican las posiciones de amarre de cads haplotipo .

1)i\Crsos cstudios 11,111 dcmctstradct yuc las cclulas 1 rr~u-ingitia, [lot- ntctlcculas dc ciasc 1 f cclulas '1*( ' ) rcconoccn :t los aulngcnos cndoigenos sintctizados cn cl scno do la celula diana, micntras clue ]as cclulas T restringidas por mctlcculas dc close 11 f cclu Las TIt } rcconoccn antigenos cxogcnos . Sc pucdc inducir una rcspucsta rcstringicia por moleculas do class I o Lie ,last II n1cdiantc la ntanipttIAcicin tic la Localization do una proteins . heir cictnplo, la laentaglutinina del xirus tic la gripe i I IA i, 1111 :, glucoprctteina asociada a lass n1en11traalas Lie las cclulas del 11ucsped, solanacntc SuCle inducir una Licbil rcspucsta dc cclulas Tc . Sin ctnbar-c t, Ni sc induce la sintcsis de I IA citoplasmatica n1cdiantc la clCICCicm do la sccucncia del A1)\c yuc cctdifica cl pcptido lider Lie] cxtrcmo amino dc la n1etlcrul .a, se produce una intensa rcspucsta dc cclulas *1*( . De la misnm titrma, la introduction dc ox-ctalhuntina en cl citoplasnta tic una celula diana lmcdiantc tecnicas tic shock osmc'>tico ;l da lugar a la apaticion dc cclulas fc Lie 0x-cquc I-CCOIIOCC11 la oxoalbuntina, micntras quc la adici(Sn rcspucsta do cx(Sgcna d :t lugar cxclusixanuntc a una albuntina cclulas'III .

Estructura y ensamblaje de los complejos molecula CPH peptido

Estructuras especificas de alelo en peptidos eluidos a partir de moleculas CPH de class II

DRB'0401

DR81'1101

-1 vV

2 3 4 _5 M

T L

6) T8 9

posieidn
i1 2 3 4 M L V K 5 6 7 R

aminolcido de amerre dominants aminoacldo de amerre fuerte

8 91

Fig. 9.23. Se purificaron e incubaron moleculas HLA-DR de dos haploopos (DRB1'0401 y DRB1'1101) con una biblioteca de peptidos (generados en el fago M13) . Tras varias fases de selecci6n se identificaron y secuenciaron los peptidos que se unian eficazmente a las moleculas de class II . Los aminoacidos que aparecian con una frecuencia superior al 20% se muestran como aminoacidos de amarre dominantes . Otros aminoacidos que aparecieron con bastante frecuencia se muestran como ~ , fuertes~, . Los datos hall silo extraidos de Hammer y coos . (1993) . En el punto de uni6n de las mol6culas de class II se pueden acoplar peptidos de mayor tamano qua en el de las moleculas de class I .

tic cstc proccso. Esta cstructura cs tin complcjo constituidoo poor 12-11 al1bt1lllclatICs dlstlntas \' en cl sc produce la acti\clod protcolitic .l nlas impoortante a nivcl citoscilicoo . Los prooteosomas pressman di%crsas acti\idedcs tic tipo Cndoopcptidase y dcgra dan prootcinas dcSllallll- aIIZadas 0 ligadas a ubiquitinas haste Iihcrar l,cl,tidos tic S IS anlinoacidos ila ubiquitina Cs una proltcina title sir\ -c para marcar a ootras protcinas (]Lie ticncn que ser degr,aiadas i . Los coomponentes tie] pro>tcoostrn,l SC c0difican cn dos genes, IAII'2 \ IAll'7, loocalizados en cl (TH \ cu\a c\ prcsicon sc VC eunlemade poor 11'\y . Los prooductos protcicoos dcsl\Llzan %ubunid,ldcs estructurales dal prootcos .onl,l . Vila scrlC tie datos ohicnldo% a partir tie Cattldlo~s toil dlanas gcnlcas \ coil inllibidoorCs tic loos protcoosoril,ls h,ln cstablccidoo tluc IAil'2 \ IAlP7 inter\iCnen en Cl prootesanliclltoo tie loos peptidos para 1 .1 \ia tic class 1 . :( - oonioo atra\icsan los peptidos producidoos poi loos protcoosc_ ntas~cl REIQ Los prooductos tic dogs genes, TAM \ TAP2, ad\e ccntcs a Lo\II'I \ IAII'2 (/ir7. 9 .24), ftinci0nall conloo till hctcroo dinlcro tic transports, gtlc trasloca los pcl\tidos llacia la luz dal RER. TAI'I \ TAN pertcncccn a la tamilia tic transpoortadorcs AB(' % K locahzan cil CI REAR . Sc Ila demostrado que microsonlas eislados pueden transporter pchtidos IlaCia la luz dal RE R, pcro csta capacidad tic transports noo se oobscr\a en \esiculas prcp,lradas a partir tic Cclulas dcficitarias pare TAN o hAI'2 . 1 .:1 transportc alas cficaz sc rcaliza ion peptidos tic ti -l ; aminoacidos \-, aunque estc tanrailo sc partir al ideal pera loos sitios tic union de CIeSC I, indica que SC nCCcsitan retoortes adicioonales . 1lato % recientcs indican title Ills distintos conlponcntcs de Csta \ i,l tic proccsamicnto cstan asociadoos canto tisica conloo filntion,llntcntc . 1'or cjrmplo, los coanplrjon 43,-mitroglobulina-cla se 1 reticn sintetizados se esocien coil TAI' cn cl RER \ la disc_ ciaci6n sc produce cuando se transpoorta el ris-Goolgi . Cabs suponcr que esta coompartintcntalizacioin tic los clcnlentoos dal proccsamlcnlo aunlcnlc la eflcacia tic la cargo dal l.cpllcloo sobrc tic la Cclula prcsent:uloora antigeno . I)espltcs tic set- transpoort,uloos al RER, Ion peptidos sc aso cian coon inoolcculas tic class I i. /ut, 9.25! . Fsta tllll()ll cs corllpllca da \ cn cola cstan iniplicado s th,tl "cromcs, tocllioo la calncsina. Loos cllallcro ones tacilitan \ dirigen la li orniacion tic tin contplejo caticna pesada tic class 1 (1, nlicrogloohulin;l-llcptitloo estahle, title se [)Lie tic trenspoortar Ilacia le superfiCie Cclular . Los complejoos tic class 1 sin pchtidoo sort incstahlcs, loo title permits asegurar yue solo loos Cttmplcios ionic, .I ni\C1 tilluiorl,tl huCd .ln intCl'Attuar coon los T(R .

Los proteosomas son organulos citoplasmaticos que degradan las proteinas citoplasmaticas Auilyuc CI Cns:unhIajC tic loos tlltigCIIOS tic class 1 se hroodtlCt to cl rcutuloo cndooplasntatico rugoso i RERI tie la CCIUIA, los Pcl,tic I .ls prootcinas citosolicas. tit]oos tic class I sc gcncran ,l partir Fl prootcosonla cs tin organul0, que partitipa cn cl peso initial

Genes CPH relacionados con el procesarniento y presentation de antigenos

H-2

Ob Ab Aa'Eb!

Eb2

Ea

ILMP2 'TAP1 I LMP7 TAP2 --~ LMP2 JAP1 LMP7 TAP2 D~ Fig. 9.24. Los genes qtie codifican el peptido transportador (TAP) y los componentes dal proteosoma (LMP), tin organulo compuesto de multiples subunidades, se encuentran situados en las regiones de class II, tanto en los _atones como en los sere, humanos.

HLA

82'A2 B1 A1,

ADN

DOB

B2 A2' 8,3

B1 A1

B1

82

83

A -

DP

DM

DO

DR

Reconocimiento de antigenos

Ensamblaje de los peptidos enddgenos y los antigenos CPH de class I

proteosoma proteina reticulo endoplasmatico rugoso -

r micro- I globulina
l; -

Fig. 9.25. Via propuesta para el ensamblaje del complejo antigeno-CPH . Los antigenos citoplasmaticos son procesados por los proteosomas, dos de cuyas subunidades estan codificadas en los genes LMP-2 y LMP-7 del CPH. Los peptidos son transportados por dos miembros de la superfamilia de transportadores ABC, codificados tambien en el CPH (TAP-1 y TAP-2) . En el RER, los peptidos antigenicos se asocian con las cadenas pesadas de class I y con la 02 m. Los chaperones moleculares, como la calnexina, se asocian con complejos de class I ensamblados parcialmente . A continuation, las moleculas de class I estabilizadas son transportadas hasta la superficie celular (fig . 9.26) .

Its taticnas u \- 11 tic lost 11 sc cncticittran cn cl Rh.R unidas a till polipcptidc( tlcnontillado caticna inc,triahlc i Ii i, Esta protcina csta codifictdd Iu0r tin g,cn ajcno al (TI I . 1 :.1 c()nnl)lcjo (fl5-li Cs tr;utsportad(r a trascs dcl aparato tic Golgi hasta tin compartimicnto cndosomic(( o lisosumico dc naturaleza acida, c- n dcntdc sc dis(uia Ii . El contplcjo ull pcrmanccc cn cstc compartinticnto durdntc 1 3 horas, antes de alcanzar la superficie celular. Hat- dat(~s czpcrintcntalcs yuc stigicrcn yuc la disoci :xi6n dc Ii ticl complcjo u(i cn cl cntorno acido dcl compartimiento cndo,untico/li>0s(intico tatilita la union tic] peptido. A-(mto cncucnn-all I(rs peptidos antigcnicos proccdcntcs dc hcI)tId(is cxlrgcnos a las moleculas (TH do class II cn cl tom partinticnto ,tdecuado- I'ara contcstar a csta prcgunta CS ncccsaricr considcrar cl itincrario intracclular quo: sigticn la, moleculas (I'll . L'na tcz sintctizadas cn cl RER, tanto las nurlcculas tic class I c(nno las do class II son tramp(n'tatias a traces del aparato tic G(>Igi, las primcras tmidas a till peptido antigenico y las sc gundas a la cadena invariable . Las moleculas dc class II sc Wild tan tic has tic class I cn cl reticulo de la card mans dcl aparato dc Go~lgi . A cuntinuaci(m SC uncn al c(>ntpartin)icnto cnd(rmSntico/lisos(mtico, nticntras cstc Sc ticsplazd hacia la mentbrauta I,I;ts ntatica . Fstas \csicuhts son difercntcs tic los end(>s(rmas ~' lisosomas convcncionalcs, pal- ccc que cstin cspccializadas cn cl transpot-tc c incorpo raci6n tic Ids moleculas tic class I I ~,,/p . 9.?61 . I'll impcn- tantc atancc ha side la rccicntc idcntificaci(in tic] c(rmpartimicnto srsicular cn cl yuc SC pr()Litiic la carga tic pep tidos cn los antigcnos tic class II . Las tcsiculas dcscritas, dcnominacias \III( ., comp :u-tcn caracteristicas tic cnd(rs(nrt :u \ lisosontas . I)rcscntan tin tsI)ccto cn cdpd tic ccholla c(m Cl nticroscopio clcctrlmico, Ixn- la prcsencia dc multiples cstructuras tic ntentbrana . Sc ha dcntcrstratio yuc la molecula Hl ..\ l)\I dcscnlpcna till papel fundamental en la carga tic pchtitlcrs sabre [,is nu(ICculas tic class II . La rnetlecula H1 .A-l)\l es parecida a las tie class 11 s . csta urnstituitId I,or HIM cacicna u otra 11, c(rdificadas por I(rs gcncs l)\1 :\ t, 1)\iB tic la region ('1'H tic tlasc 11 . En las lincas cclularcs carciucs dc Ios gents DMA (( 1)\IB, ION anti` ;cnos tic class II Son inestablcs t las cclulas no I)ucdcn prcwntar lit proccsar prcrtcinas . (lrando Sc purifican I(rs antigenos dc claw II tic cstas celUlas nurtantcs \- se cxtrdcn Ios pcptid(n ligatl(rs, Sc (rb scrca yuc cstan c(mstituitios pot tin I)cptido do la pr((I,ia cadcrta imariabic, dcnontinado (TIP ( :peptido im -ariablc as((clatio a Ids

Las moleculas de class II se unen a peptidos exogenos en tin compartimiento endosomico

Itinerarios intracelulares propuestos para las moleculas CPH relacionadas con la presentation de antigenos
expresion on la superficie antigeno endocitosis ' !,r --endosoma primario vesicula dg transports 14 , `, procesamiento del antigeno " ~M superficie eel(: ar ` !FVesicula MIIC el antigeno ~ desplaza /,i .. a li de la molecula
urn

Clase 1

vesicula de almacenamiento de la' molecula de class Il -,

s

endosomailiposoma tardios

Clase If

reticulo de la card trans del aparato de Golgi !

Fig. 9.26. Las moleculas de class I recien sintetizadas se unen al peptido 111. Las moleculas de class II se asocian con Ii en el RER (2) . Ii impide la union al peptido y contiene secuencias que permiten a la molecula de class II abandonar el RER. Las moleculas de class I y II se separan despues de atravesar el aparato de Golgi (3) . Las moleculas de class I se dirigen directamente a la superficie celular (4). Las moleculas de class II penetran en tin compartimiento de naturaleza acida, denominado MIIC, en donde se unen al peptido procedente del antigeno exogeno y el peptido CLIP, que ocupa el surco de union, se disocia (5).

Estructura y ensamblaje de los complejos molecula CPH peptido

MOlcctrlos do class 11, dcl inglcs class 1 rrrcnciatcd iurariani pcptidc'I . In ritru sc ha dcnu~strado quc H1 .A-I)M catalila la diso. ciaeirSn do ('I .IP dc las n1olcculas dc class 11 con pH :icido t taunion cilita la dc Iris pcptidos antigcniccrs . Fs prohablr yuc kts antigenos csrrgcnos pcnctrcn a Las cclulas prewntatioras dc anti receptor o cn tasc liquida 1 . I a dcgradacicin enzim.itica dc las pro-

tcinas endocitadas sc producc cn los compartinlicntos cndos<irnico,/lisosonlico v los I)cptidrrs sc transficrcn a Its n10IcCUIaN dc class 11 n1ediantc un proccso catalizado por HI,A I)M, yuc tictcrnlina la dise~ciacirin dc la cadcna invariable en cl estadio cn cl yuc sc cru/an 1,1s vias hiosintcticas s . endcrcitica . Postcriornlcntc cstos complejos do class II recicn tetrnlados son transportados llacia 1 :1 superficie celular.

0 ~Que es un epitopo? ZQue tamano tiene un epitopo? ZPueden superponerse los epitopos? ~En clue region de un antigeno proteico cabe esperar clue se encuentren situados los epitopos? ZQue tipos de aminoacidos se suelen encontrar en los epitopos? Si se dispone de un anticuerpo monoclonal frente a un antigeno con una estructura definida, ~como se podria determinar cue parte del antigeno es reconocida por el anticuerpo? ~Es la especificidad de un anticuerpo una caracteristica claramente definida de cada anticuerpo o depende del contexto en clue actue el anticuerpo, ya sea en condiciones fisiologicas o experimentales?

~Es mas especifico frente a un antigeno un anticuerpo monoclonal clue un antisuero polivalente? Los peptidos presentados por los antigenos de clase I o de clase II no se distinguen por sus estructuras,

sino por los lugares intracelulares en clue establecen contacto con el antigeno CPH. ZQue ventajas proporciona este hecho al sistema inmunitario?

~Que utilidad tiene el conocimiento de las vias de presentacion de antigenos en el campo de diseno de vacunas de naturaleza peptidica?

~Que efectos pueden tener las mutaciones o la presentacion de antigeno?

variaciones geneticas en los genes TAP o LMP sobre

LECTURAS ADICIONALES
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Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

Las citocinas desempenan kin papel central en la regulaci6n positive y negative de las reacciones inmunitarias y en la integration de las mismas con otros cocnpartimientos fisiologicos, como los sistemas endocrino y hematopoyetico . Las estructuras microbianas se reconocen en las primeras fases de una reaction, cuando las respuestas inmunitarias akin se encuentran en fase de desarrollo . La liberation de citocinas es el factor que determina la respuesta . La respuesta inmunitaria especifica esta dirigida por las celulas T colaboradoras ITHI, que liberan y responden a diferentes perfiles de citocinas, con to que activan diversas respuestas efectoras . Las celulas TH1 estimulan la activation macrofagica, mientras que las TH2 estimulan la production de anticuerpos . La activation de kin efector inadecuado puede impedir que se elimine el patogeno y producir patologias inmunitarias cronicas . Las respuestas de tipo TH1 y TH2 se inhiben entre si . " Las celulas T citot6xicas reconocen los antigenos presentados en las molecules CPH, mientras clue las celulas NK reaccionan frente a las celulas que no expresan CPH de close I . La citotoxicidad es mediada por diversas interacciones cclula cclula directas, por citocinas y por la liberation de proteinas de los granttlos, entre las que se incluyen las perforinas y las granzimas . " Los macr6fagos activados se estimulan pare motor a los microorganismos que hen endocitado mediante la production de oxigeno reactivo y de productos derivados del nitrogeno . " Cuando las reacciones mediadas por celulas se prolongan indefinidamente, ya sea debido a la imposibilidad de erradicar la infection o a la incapacidad para eliminar kin antigeno persistente, se forman granulomas o se produce una reaction inflamatoria cronica que destruye los tejidos . Los fenomenos inmunopatologicos pueden ser debidos a las lesiones microvasculares inducidas por la secretion excesiva de citocinas o a la destruction directa de celulas esenciales .

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El termino -innntnidad tnediatia p(or ccl alaso- I I\1(' i file acuita do ooriginaltnentc pare descrihir reacciones locahzacfas trcntc a cierton organistn(os, generalrnente patogcnos intracclularcs, ntcdiadas lute lint6citos v tagocit(os en lugar dc poor anticuerpos ( in tnunidad ltuttt(oral ) . En la actualidad, se utilize ell kill scntido ntas general pare reterirc a cualquicr respuesta ticntc a oryanismos o cclttlas tuntoralcs en la Clue Icn anticuerpos desc ntpcrian kin papcl sccundario . Sin embargo, net CS posihlc cstudiar las rcspucstas mccliadas por celulas y las rnctliadas pcrr anticuerpos tic t6rtna totaltncntc indcpcndicntc . Las celulas participan cn la iniciaci(in dc Ias rcspucstas dc antic uerpos, s_ Icn anticuerpos ionstitusrn kin ncso imprcscindihlc en algunas reaccioones rncdi .alas por celulas . AdernAs, cs porno probable que sc produzca cualtluicr rcaccion tncdiada por celulas cn a>tsencia total dc anticuerpos, yuc puc(Icn ntoodificar de diccrsas tiorrnas las rcspucstas cclularcs . Por cicntplo, la furntacicn dc cornplcjos antigeno-anticuerluo err cl curs) tic una respuesta inmunitaria conduct t la liberation tie tragrncnteos do coomponentcs del complcntcntoo ion propictiatics quintiotacticas, Clue faroreccn la acuntulacioin tic celulas N la intlamaci6n local . Los anticucrlun tamhicn pucdcn stn it onto lazo do union entre los antigenos v Ias celulas, ,t teases dc I(os rcccptores cclularcs dc Fc, ntodtrlando de esta tiortna Ias rcspucstas cclulares . Fat el trio dc Ias Midas tagociticas t, tic Ias celulas ascsinas, Icos anti cucrpos tamhicn I,ucdcn actuar C(ntt(t sinculo tic union con skis dianas . En resuntcn, la rcspucsta inntttnc coordinada se base cn la cotnunicacion cntrc los dircrsos Icucocitos intplicados en Ias mismas v entrc cstos y [as cclttlas tisulares . I .a comunicaciotn cntre Ias tclulas del sisterna intnunc se pro duct tanto rnediantc interacciconcs directas cclula-cclula, en la title participan ]as ntolcculas tic utipcrficic dc Ias mismas, como ntediante citocinas . Estas u1tintas soon proteinas mcnsajeras, nrcdiadorcs solublcs tic la c(ornttnitaci(in intcrcclttlar, Clue tornian, junto con Ias horntoonas N Icos ncurotransntisores, kin sistenta tic Icnguajc quinticeo, title rcgula Cl dcsarrollo, la reparation tistdar v Ias rcspucstas inntttncs CIe los corganisntos ntulticclularcs . Las ci tocinas proporcionan, dc titrnta paralcla a Ias scitalcs producid .ts

por contact(t cclula-cclula o cclula-antigeno, una red que con trola las rcspucstas inntuncs innatas v cspccificas, incluidas la illflantacioon, la detensa trcntc a la intcccicon siral, la prodifcraci(in tic clones tic cclULu T t It cspct'ifiCOS r la rcgulaci0n tie skis titn cicttcs . CITOCINAS Y SUS RECEPTORES 1 .as citocinas son protcinas pequcitas 18-80 kdal dc pest ntolCeki lar I, Clue suclcn actuar tic forma autocrina (sobre la rnisma cclula prcxluctura) o paracrina i soobre celulas ccrcan,w . 1 a pryxlucci(in tie estas luotcntcs molecular suck ser transitoria s' sc rcgtda tic forma estrecha . F;n la acrualidad SC Cot1OCC hastante ntas tic 100 citoci nas huntanas distintas, pcro sc sigucn ticscuhricnd(o ntas coon Bran sclucid,td . las CltOCirt,IS SC trttlrt con rcccptores especificos dc la nrcnthrana ccltdar, dcxrtcadcnandoo una cascade dc rcspucstas inr plicadas en la inttuccioon, arnpliaci(in o inhibici(in tie una serie dc genes regulaclos poor citocinas a niscl nuclear . I,a neontcnclatur,t tie I :ts citocinas rs IIILIV sariada, licclio clue no rcsulta sorprendcntc t a clue ban sidoo descubicrtas cn tntae dir -crs)s Stnbitos dc la \lcdicina, gttc \- .kit dcsdc la inntunologia, la s-irologia %. la hcntatologia a la biologia celular o la oncologia . Sc pucdcn incluir como citocinas Ias intcrlcucinas (title SC suclcn cnuntcrar como II, I a ll .-18), los intcrtcroncs I' IFN ), los facto rcs cstinutladorcs tie colonies (CSF, dcl inglcs eohni'vstirurrlatir~q firctorl, cl factor de necrosis turnoral fTNF, del inglcs tumour necrosis firetor), los factorcs tic crecirnicnto y Ias quintiocinas (citocinas quitniotacticas) I,hq. 10.11 . El origcn do parts do la contisi(Sn gcncratla poor csta nontcnclatura cs yuc, .11 IIICrtOS ire vitro, Ias citocinas rcalizan discrsas tltncioncs (ccttto succdc toll ll .-6, t . fq . 1(l.?), loo title c\plicaria yuc la rnisma ntolecula se pucda aislar cn ditcrcntcs lahoratorios a travcs dc cspcrintentos nnn distintos . Para auntcntar la contusion, discrsas citocinas pileden c(ontpartir I :t rnisma fitnci6n . ()tea contplicacioon dcrisa do clue estas sustancias 110 tic suclcn prOducir ni actual' en s(tlitariO, sin) true 10 hacen en Cl e(ntcst(t tic una red contplcja ell la ettal

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

Las citocinas desempenan un papel central en la regulaci6n positive y negative de las reacciones inmunitarias y en la integration de las mismas con otros cocnpartimientos fisiologicos, como los sistemas endocrino y hematopoyetico . " Las estructuras microbianas se reconocen en las primeras fases de una reaction, cuando las respuestas inmunitarias aun se encuentran en fase de desarrollo . La liberation de citocinas es el factor que determina la respuesta . La respuesta inmunitaria especifica esta dirigida por las celulas T colaboradoras (TH), que liberan y responden a diferentes perfiles de citocinas, con to que activan diversas respuestas efectoras . Las celulas TH1 estimulan la activation macrofagica, mientras que las TH2 estimulan la production de anticuerpos . La activation de un efector inadecuado puede impedir que se elimine el patogeno y producir patologias inmunitarias cronicas . Las respuestas de tipo TH1 y TH2 se inhiben entre si . " Las celulas T citotoxicas reconocen los antigenos presentados en las moleculas CPH, mientras clue las celulas NK reaccionan frente a las celulas que no expresan CPH de close I . La citotoxicidad es mediada por diversas interacciones celula-celula directas, por citocinas y por la liberation de proteinas de los grantrlos, entre las que se incluyen las perforinas y las granzimas . " Los macrufagos activados se estimulan pare motor a los microorganismos que hen endocitado mediante la production de oxigeno reactivo y de productos derivados del nitrogeno . " Cuando las reacciones mediadas por celulas se prolongan indefinidamente, ya sea debido a la imposibilidad de erradicar la infection o a la incapacidad para eliminar un antigeno persistente, se forman granulomas o se produce una reaction inflamatoria cronica que destruye los tejidos . Los fenomenos inmunopatologicos pueden ser debidos a las lesiones microvasculares inducidas por la secretion excesiva de citocinas o a la destruction directa de celulas esenciales .

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El tcrnlino "" innltrnitlad mediatia porr cclulaso~ I IJI( I file acufla do onginalrncntc pare dcscribir reacciones localizadas trcntc a cicrtcn orrganisnlors, gcncralrncntr patogcnos intracclularcs, n,cdiadas pcrr lintircitos N, tagocitors cn lugar tic pcrr anticuerpos i in rnunidad luunorral i . En la actualiciad, sc utilize cn tin scnticto rnas gcncral pare rctcrirsc a cualquicr rcspucsta ticntr a oryanisntos o ccluh,s turnoralcs cn la yuc to% anticucrpos dcscnlpcrian utl papcl sccundario . Sin cnlbargo, nor cs I,crsiblc cstudiar las rcspucstas nlccliaclas por ccltfas t las n,cdi,ulas por anticucrpos tic fin- nla totalrncntc inticlscndicntc . L.l s celulas participan cn la initiation tic la% rcspacst .ts tic antic uerpos, ~- los anticuerpos icrnstitu%rn un ncxo intlrrcstindil,lc cn alt un :ts reacciones n,ctliatlas pcrr tclul .1% . Aticn, :is, cs pocor probable yuc sc produzca cualtluicr rcacci()n nlcdiatla por celulas cn atlscncia total tic anticucrlxrs, yuc puctlcn rnocliticar tic diccrs ts fornlas las rcspucstas cclularcs . Por cicnlplo, la tirrtacitin tic cornplcjos antigeno-anticucrpo crt el cursor tic una rcspucsta inmunitaria torltInCC a la liberation tic fragrncntos tic conlponcntcs c1cl cornlplcnlcntor corn propicciatics yuinlicrtacticas, que fa,oreccn la atunnrlaci(in tic tclulas N la intlanlaci6n local . Los anticucrlxrs tambicn puctlcn scrs it cornlo lazo tic uni6n entrc lo% antigenos N las celulas, ,l trascs tic los rcccl,tores cclula rcs tic Fc, nlotlulando tic csta turn) .) las rcspucstas cclularcs . Fn cl caso tic las celulas tagociticas ~ tic Ias celulas ascsinas, Icrs anti cucrpos tanlbicn puctlcn actuar tlrrllo sintulcr tic uni()Il Coil SIIS lianas . En resunlcn, la rcspucsta innn,nc coordinada sc base cn la cornunicacioin cntrc los discrsos Icucocitos inlplicados ell las nlisn,as v cntrc cstos y las celulas tisularcs . I .a tomunICatiorn cntrc las celulas dcl sistcnla innlunc sc pro duct canto rncttiantc intcraccioncs dircctas cclula-tclula, cn la yuc participan Lls rnorlcculas tic supcrticic tic la% rnisnlas, con,o nlcdiantc citocinas . Fates filtin,as soil proteinas nlcnsaicras, nlc diadorcs soltrbics tic la conltrnicaciom intercclular, yuc tornlan, junta corn las hormonal N Icrs ncurotransnlisorcs, un sistcnla tic Icnguajc quinliCO, clue rcgula Cl ticsarrollo, la rcparacioin tisular " las rcspucstas inrnuncs tic Icrs crrg:ulisnxrs nlulticclul :,rcs . Las ci tocinas proporcionan, tic tornla paralcla a las sciialcs procIuCIC1 .1%

por ccrntacto cclula-iclula o cclula-antiCcno, una rcd qtic coil trola las rcspucstas innttrncs innatas c cspcciticas, incluitlas la illtlanl :lci(rrr,, I :1 dCfCrh.l trcntc a la intccci6n siral, la proditeracilrn tic ckrnrs tic cclul :ts "1' c It rspct ifiicrs r la reg111 .16011 tic sus till cionlcs . CITOCINAS Y SUS RECEPTORES I .as citocinas son protcinas pcyucflas ( 8-80 kdal tic I)cso nlolct ular I, yuc suclcn actuar tic forma autocrina (sobrc la rnisnla celula protluctora) o paracrina i sorbrc celulas ccrcana% ) . l a protluccioin tic cstas portcntcs moleculas strclc ser transitorria v so: rcgula tic forma cstrccl,a . F;n la actualidad SC CUr1OCC bastantc nlas tic 100 tituci nas humanas distintas, l,cro so: sigucn ticscubricndo nlas aril Bran cclotid,,d . las CltOClrl,lti SC uIICrl corn rcccptcrrcs cspccificos tic la nlcnll,rana tclular, dcscrlcadcnando una c,ucada tic rcspucstas inlplicatlas en la induction, arnpliaciirn o inllibicicin tic una writ tic genes regulaclos pcrr citocinas a niscl nuclear . La r1tN,,cr1CLltttr - ,1 tic las titercinas CS rl,LIV variacia, hecllo que no rcsulta sorprendentc ca clue hen sicior descubicrtis cn nluc dis -crsors inlbitos tic la \Icdicina, yuc s- all dcsdc la innurnologia, la s -irologia v I :t hcOlatologia a la bicrlogla tclular o la oncologia . Sc puctlcn intluir conlo citocinas las intcrlcucinas (yuc SC suclcn cnuntcrar, wino It . I a It,- 18), los intcrtcrones I' IFN ), los tactorrcs cstin,uladorcs tic colonial (CSF, cicl inglcs colon.Vstiruulatinq facto), cl factor tic necrosis ttu0ral (TNF, dcl inglcs Innlour necrosis/actor), to-, factorcs tic crccirnicntor y la% yuinliorcinas )citocin .1% yuinliotacticas) ),/i4. 10.11 . El origcn tic parts tic la confitsi6n gcncracla pcrr csta nonlcnclatura cs yuc, al r11Cr10S in vitro, [a% citocinas rcalizan tliscrsas tlrncioncs (conlo succdc coil IL-6, t . /iq . 10.?), for tlnC c\plicaria yuc la rnisrna rnolccula so: puctla aislar cn ditcrcntcs latxrratorios a tras -es tic c\llcrinlcntt runs distintos . Para auntcntar la corntirsi6n, ditcrsas citocinas pucden corn,partir la rnisn,a firnci6n . t>tra conlplicaciein dcrisa tic clue Cst :U strstancias nor tic suclcn prOducir ill actual' cn s0litariO, silo yuc for llatcrl cn Cl Ccrtttcsto tic una rcd conlplcja en la coal

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

la prodUCCihn de 1111 .1 CitoCina ntordilica la prMItiCCI6n () 1 .1 rcs title otras . In viru una cclula no suclc c xponerse a una cit(rcina tinica, do forma yue s< pucde comparar cl sistcnta tic citocinas con tin altabct(r en cl clue cl comportamiento final do cada cclula ticnc tietcrminado por [as , palabra%- , yue sic exprcsett on Sit supcrficic . \Lis adclante se co~rncntan las titnciones principales do las citocinas t sits receptores cn la respuesta inntttnc, pcro ahora sc tan a intr(ducir los aspcctos basics do la biodogia do estas sttstancias .
p11CSU

Algunos citocinas frecuentes nombre interleucinas interferones actores e necrosis tumoral factores de crecimiento factores estimuladores de colonias quimiocinas abreviatura IL IFN TNF GF CSF ejemplos IL-1, IL-2, etc. IFNu, IFN(i, IFNy TNFu, TNFII NGF, EGF M-CSF, G-CSF, GM-CSF RANTES, MCP-1, MIP-111 I

Fig . 10 .1 . La nomenclatura de las citocinas refleja en parte la primera funcion descrita de las mismas y tambidn el orden de su descubrimiento .

Las citocinas y sus receptores pertenecen a diversas familias Anni1tiC ell ~4Cncral la sccucntia 1, \I)N () .1c .(mino~acid(~~ do la, tfstirntas Cit(kinas () grup(rs do las nu,nrts nurcstra cscau) parcCid(), czistcn algunas lurcas familias importantcs do citocinas relacionadas, destacando Its intertcr(mes alta, IFNu, a la title pcrtcnccen al mcnos 15 micntbros tiutcionantcs ; las yuimiocinas, con mas do 5(1 ntcdiadorcs dcscrjtos por analisis gcn(imico, t . las citocinas yue so: ligan con la stipcrtarnilia ticl receptor eel T\F . Sin cntbargor, Si se tiCnC en CtiCt1Lt la cstructura tridimensional do la% molcculas, rcsulta ma ,, sciuill() diCidir a Ias citocinas ell ~!rupos, yue presentan tun intportanic c(orrclaci(m en la cstructura t, en l,ts sccucncias tic sus receptores tic sup(rficie- La tamilia tic citocinas mas grandc so: ticnomina supcrtamilia do rccept()rcs do citocinas, se caractcriza potr una regi()n c\tracclular Con h<rnxtlogia cstructural tic unos 200 aminoacidos do longitud t . ,t clla pcrtencccn Ios receptores part 11 . 2, Il .-?, 11 . -1, I1--5, 11 . 6, 11, -', 11, 9, IL-12, cl factor cstimulantc tic colonists do granulo citots 1;G-( .SF I t . el factor cstintulantc tic colonias tic granttlocitos v mat- r(itag(s t.i,\IA :SF i, ademas tic receptores de tactorcs ctna acticidad no sc produce a nivcl inmunc, coma la hormona tic crccintiento of la prolactina . Una segunda tamilia tic receptores tic citocinas rclacionados turma parts do la supcrttmilia tic las innunoglobulinas y comprcnde receptores para t(d()s los tipos do I F\, adernas do los do% receptores para I1 .-I t \1 (SF . Una tcrccra tamilia tic receptores la constitmcn cl factor tic necrosis tuntoral u 17'\ F u), TNF )i i lintittoxina, I . F i t, tnta scric tic citocinas rclacionadas, comp cl receptor tic] lactor do etcc imicnto ncrs ipso t . Fas (('1119-5 ) i, quo: participa cn la nittcrtc cc lular.

Algunos efectos de la interleucina 6(1L-6)

IL-2, IL-2R, proliferacion, diferenciacion proliferacion de las celulas mesangiales ----

reactiva, etc .

proteina C Cr

respuesta de fase aguda

Fig . 10 .2 . IL-6 es una citocina tipica, en el sentido de que provoca diversos efectos en muchos sistemas orgdnicos diferentes . Ademas, IL-6 estimula la formacion y actividad de los osteoclastos, sobre todo despuds de la deplecion de estrogenos .

Citocinas y sus receptores

La tnavor paric do los receptores do las citocinas son glucor proteinas Lie mcnlbrana de ill)() 1, con tin ilnico dominio transnlembrarrl . Sin embargo, cl receptor funcioonal comprendc cn general dos on mas subunicladcs, compartidas poor dis-ersos corn plcjos receptor es do citocinas . (ion frecuencia Ias citocinas sc Iigan con una ulbunidad -prisad :r-- nurt cspccifica %, con otra  l , Liblica-, compartida con ootras citocinas rclacionnadas . Por ejcnll)l(), el cornplcio receptor de II . 2 comprendc 3 subuniciadeti I o, jt y yi, do las cualcs Il .-2Rli tambicn es contpartido con IL-I S c 10.31 . Dc la IL-2R-! tambicn to cs con 11 .-4, IL-7 c 11 . 9 misma funny I1 .-6RP I tambicn drnorninador g 1t 1301 CS utilizado por citocinas con)() LIF (factor inhibidor tic la ICnCCtnla, del in glcs leukarmin iuhibitorv liirtorl, la oncostatina oil c IL-1 1 . La rcdundancia luncioonal tic las citocinas se Pucde cylicar, al menus en parte, Ixrr la cxistencia tic suhunidadcs comuncs en cl receptor; asi cl cfecto de IL-6, 11 .-1 1 t. la oncostatina M sabre los licpatocitos, mcgacariocitos v ostcooclastos cs parecido v la utilize ci6n comun Lie 1 .1 cadena Il .-2R-r puc(Ie explicar la acciom corn)() factor de crecinlicnto Lie 1 :1s celulas 1- conipartida por 11 . 2 c IL-4 . Sin cnlltargo, cede citocina dcsarrolla una funcio I tinsel en cicrtos tilx)s cclularcs, yuc sc pucde cxplicar por la exprcsioat ditcrcntc do loos receptores pri%ados . Asi, 1-IF pucde niantcncr las celulas madrc enlbrionarias en fasc indifcrenciada, mientras que IL-6 no puccfc cjcrccr la misma accionn poryuc estas celulas no cxprcsan receptores pare clla . Las quimiocinas se 11nC11 to)clas a tin tilx) do receptores cs peciales, denonminados glucolsrOtcinas con sictc dontinios trails nlcnibrana por su estructura . Pocos receptores tic cstc grupo son especificos pare una yuimiocina tinica, sicncloo mas 1recLlCnte clue \arias conlpartan receptor . Fxiste tin receptor -promos cuo", Cl antigcno I)L1tA' de loos licniaties, coomlrtrtido por 11,11 Chas quinliOcinas l . que pucdc ester implicado cn la climinaci6n del exceso tic yuinliocinas en los locos inflanlatorios, pare coiltrolar \ localizar los mccliaciorc, Fntre los rcccptores de yuimiocinas tambicn se incluyc cl receptor rclacloonacio con Ions P-adrenergicos, Ion clue rictlc a confrmar cl so lapamiento cnirc

los sistcmas de citocinas N, otros sistonas do contunicacionn solubles Llel organisnio . La formacion con los receptores de citocinas active las vies de comunicacion intracelulares Los csiutfons soobrc transduccioin do scnalcs, juntoo cum Li hiodongia cstructural, 11 .111 unificad() 1 .1 bionlogia de las citoncina .s . t ada ccz sc conocc nlcjor la secuencia Lie reconocimicnios protcum protcina yuc rclaciona la union do una citocina en la supcrficie cclular Coil la actitidad a nixes intranuclcar de dixerWrs tactores do transcripcion . ('onto sc afirmaba antes, el printer pawl en la comunica cion ltor citocinas cs la agregacio n do los disersos componcntcs del receptor inducida purr la union del ligando . Las regionncs citoplasm .iticas tic cstas subunicladcs del rcccl)ton- intcractuan pare iniciar una cascade de scflales . La f-mila mas scncilla coorrcspomde a una surly molecule Lie receptor Line forma tin homoodimcro~ cuando) sc tine el ligando t una citocinas . Tanlbicn tin receptor pricado Ptredc determiner la hetero u honmodinterizacion do tin dominion publico de transducciein de scnalcs 10.4) . loodoos loos receptores Lie la supcrtanifia de Ions receptores tic las citocinas, junto con algtmos rcprcscmantes do otras fanlili,ls, sc asocian coil molecular dcnominadas clnasas Ianus ( lake . l a

Modelo basico de acci6n de las citocinas

citocina trimerizaci6n del receptor

Estructuras de los receptores de IL-2 e IL-4

vies de activaci6n

factor de transcripci6n

gen amplificador

Fig . 10.3. El receptor de alta afinidad de IL-2 esta constituido por toes cadena\ polipeptidicas, dos de las cuales lo. y 10 se Linen con la citocina, mientras clue la unidad y esta implicada en la comunicacibn celular . El receptor para IL-4 comparte la cadena y, pero tiene una cadena a especial para el reconocimiento especifico de IL-4.

Fig . 10 .4 . Se muestra tin sencillo modelo de la activacion celular por citocinas Ilas estructuras que se representan corresponden al receptor de IL-6). Las citocinas se ligan con su receptor celular e inducen la dimerizaci6n o polimerizacion de los polipdptidos del mismo, activacoo tin sistema de sehales intracelular (coma las cascades de cinasas), clue culmina en la produccidn de factores activadores de la transcripci6n, clue migran hacia el n6cleo y se Linen con [as regiones amplificadoras de los genes inducidos por la citocina .

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

actuation de ILts rcccptorcs Lie Las citocinas induccn la tosforjlacltlr1 Lie la tirosina V la acti\,tcio l Lie Jak, yuc cs ncccsaria para la matoria, aunyue no todas, de Lis fitnciones del receptor. l .a tuncilrn principal de la L40Cina CS nlcdiar en la agregacion concornitantc del receptor v dc las Jak. Postcriormente Ins cinasas Jak acoplan la uni6n del ligando con la firstirrilacion de las tirosinas Lie \arias protcinas do comunicaci6n, incluidas las trailsdUCtOLas de . scnalcs L las actuadoras Lie la transcripciom (Stat'I. Los dirneros de Star sc translocan al interior Lie] nticleo. donde sc Linen dircctanlcntc al ADN. 1il receptor Lie IFNLx es un cjcntplo de cstc tipo Lie transmision Lie senales ifr1. 10 .51 . Las tuncioncs solapadas, aunquc propias, Lie cada citocina rc fleian cl tipo de via dc conrtrnicacio>n intracclul ;u- inlplicada . Potr cjcrnplo, en las celulas - h, ll .-2, IIA c II, 9 cntplcan la cadcna II .-2% L. actian JAI L . Jak , I1 .-10 actual Jakl L, 1Lk2 r II_- 12 actu a JaIL2 c '1'L-k2 . I .a garna Lie rcspucstas do las Stat cs today it ntas amplia, Lie n1 :u1cra yuc cada citocina actua un grup0 distillto Lie las mismas, \ parcccn inlplicadas en ] .is respucstas tirncionalcs a las citocinas. Las citocinas tarnbicn cstinlulan Ia prolitcra6611 cclular a trat - cs de otras vias, sobrc todo la cinasa Rats/MAP. Algunas citocinas pucdcn actiar Lias yuc culminan en la nlucr-

tc cclular por apoptosis. Par-CCC que no s6lo Jak acti\a I ;ts Stat, sing yuc cstas sc pucden actuar por otras citocinas difcrcntcs . AII'Llnas citocinas, corno I NFcc c II, 1(3 no utilizan la L -ia JakStat, sino yuc actuan a micmbros Lie la tamilia Lie las cinasas MAP, aunlcntando~ Ia uni6n do tactorcs do transcripcioSn, canto APA, NFx13 c NFII .-6 con el AI)N . I-:I cnsamblajc Lie los receptorcs cspeciticos o corrpartidos de Ins quimiocinas produce en Liltimo tcrmino Cl ntotimicnto do la cclula, pero la, senates intcrnlc(iias inlplican a los rcccptorcs Lie Las prL>teinas Ci, la nto\iliz.tcion Lie scgundos nlcnsaicrors intratcclularcs, la rcolrganiraciun del citocsyuclcto, la t6rntacion de adltc rcncias tocalcs, la unionl L LICSLI1110 rt L . la cxtcnsion L, rctraccicirt de scud6podos yuc consigtren una migration directional. Algunas quimiocinas, corno RAN IT,S t N lll' la, ;utitan tam bicn a las Stat, to yuc inlplica una cornunicaciLm cruzada cntrc las Bias mcdiadas por la prortcina C ; y por Star . I.a im-cstigaci6n So brc las yuimiocinas csGi amsiguiendo yuc la confusa red de actuidaLics plciotrcipicas sc concicrta en Lilt sistcnta ntcjor cornprendido Lie regulado res, receptores vias intracelularcs do conllxmentes nnoleculares basadas en protcinas, yuc caracterizan las rcdcs Lie conlunicacio n intracclular .

Vias de comunicacion intracelular

Diferenciacitin de celulas TH CD4 "

IL-12 IFNy TGF(3, ,

TO

ti

celula de memoria

THP
IL 2

THO
11-2

TH1
: L-12

TH2

THM
IL 2

IFNy N TNFli IL-3

IFNy TFNR IL-3

Stat2 "p48 I

Stat1

!SRE

IL-13 GM-CSF TNFu GM-CSF TNF,f

IL-13 Grv1-CSF
TNFu

Fig. 10 .5 . Se muestra en un diagrama las Was de cornunicacion intracelulares activadas per IFNu . Las dos subunidades del receptor se activan cuando se Line IFNot, to que determina la activation y fosforilacion de dos cinasas Jak, Jakl y Tyk2, que a su vez fosforilan a Statl y Stat2. Estos dos factores de transcription forman un complejo con una proteina que se Line al ADN (p48), complejo que pasa al nucleo e induce la transcription de genes que codifican un elemento de respuesta al interferon IISRE, del ingles interferon response element) .

Fig. 10 .6 . Este diagrama ilustra la diferenciacion de ]as celulas TH murinas en diversos subtipos con un patron de production de citocinas particular . IL-12, IFNy y TGFj3 favorecen la diferenciacion de las celulas TO e IL-4 la de celulas TH2. El patron de citocinas determina clue funciones efectoras se activan .

Mecanismos de defensa no dependientes de celulas T

En ci rnnr1cnto actual cst .i tlarr> yuc Ias celulas III (=D-I pre scntan curs pcrfilcs distiruos tic producci611 dc citocina + FliI v CH21 y yuc estos pcrtilcs dcternainan cl tipo tic respuesta baSlta naediatia por cstc tipo cclular d_/iq. 10A . Entrc Ias citocinas tipicas do 'I'll I dcstacan IF\-;, I \F(3 e 11 .-2 ' cstc tipo cclular csta iniplicado en las roaccioones inflaniatorias rnctliatias por celulas . 'arias citocinas dc I'll I actisan rcaccioncs cit(x()xicas, intlanaatorias y dc hipcrscnsibilitiad rctardada . Por cl coontrario, las celulas Tt12 produccn IIA o IL- ; do karma caractcristica, prods ciendo acicmas con t'rCcuerlCla IL-6, II--9, 11 .-10 o IL-13 y estiraulan la produccioon de anticuerpos, solve todo IgE . Las citcxinas 11c hI 12 se ,radar con la Let ulaci<in dc Las respuestas alergica dc anticuerpos dc Bran ntignittrd . Las citocinas tic 'I'll I inhilen l :ts accioncs dc T112 y al contrarioo, poor to yuc la respuesta iraraaLIIIC suck set- dc tipo Ti I1 o TH2 {_/rq . 111.-1 . Recicrttcnacntr sc hail reconocido ditcrcncias en la supcrficie do Fill '. T112 . LAG-3, mienabro tic la supcrtainifa dc Ins innttinoglobulinas, sc asocia con I :as celulas 1'HI, naicntras yuc (1)30, tin naicmbro dc la tamilia del receptor dc TNF, sc expre sa ell rinclcs inucho nia'ores ell 'I t12 yuc ell Tl11 . La cleccioin dc TH I o F112 resulta timdanicntal par, yuc la innluniciad sea cficaz c parccc que multiples hactotCS coondicionan esta decisi()n, cntrc Ios quo: dcstacan : " El pcrfil tic citocinas' cl cyuilibrio tic las citocinas prooducitias ante tin antigcno . Poor ejenaploo, I1 .-2 es un poderoso cstimulo initial para la production dc IF\ , poor parte dc las celulas 1' Y \h ', en consccucncia, par, la diterenciacicin tic Ias celulas Tii1 . F.I IF\(z, proniutitlo en 1 .1, laser inicialcs tic Inca intccciun Viral, no cs solo tin potente inductor dc IL-12, sino que poetic haccr quc CI tenotipo do las celulas TII c:unbie de TH2 a Till, a ditircncia tic IIA yuc ta\orccc la diterericiacion dc tip0 TH2 .

La diferenciacion en subgrupos de TH es un paso fundamental en la selection de las funciones efectoras

" Dosis 11c :utti"cnoo . " Cclulas prcsemadoras do antigcno N - las citocinas quc produton . " DotaciCna gcnctica dal Itticspcd . " Actiridad tic I :ts naolecula,' hormonas cocstimuladoras prcscntes en el ambiente local . Este ultimo tenaa resulta tic especial interes . Las lae>rna0nas tic tipo glucocorticoidc, coma cl cortisol, aunicntan por cl cstrcs fisico o psicol(igico \ deterrninan la ditircnciacion hacia Ti 12 de la rcsloucsta . Los deri\ados tic la tiolaitlrocpiandrostcroona f DI IEA~ Sc oponen n este ctccto, ta'orccicndo la respuesta Ti 11 . Los ni'eles do csras horn,<onas sc rcgulan taruo a ni'el sistcnaico to1a10 MCCiiantc cl n,ctAaolisnao local ell Ios oirgtnos (liana, tic tiornta title cl cquilibrio cntre cl ccortisol' la DHEA a nircl tic Ices cirga nor linfiticos resulta fundamental dc rata al tipo de respuesta que se produce . Dado quc Ias rcspucstas innttuaos no sicnapre son polarcs, sc tree (]tic pucdcn cxistir otros subtipos dc "I'll . Sin crnbarg(r, los papclcs dc las rcspucstas ft l l V TH2 son distintos X pucdcn coon tribuir a la innaunopatologia . Fn cl nionacnto actual So: wrote un :a larga list, de cntcrmCLIaties caracterizadas en funciCna dc las funcioncs'I II . Entrc cllas, Ills trastornos inmtrncs organocslocci ficos, cl rccliazo agudoo old injerto, Ios ahortos tic rcpctici()n it() explicados' la esclcrosis multiple sc caractcrizan poor una respuesta dc tipo 'Ell l, putlictidose aislar clones do estc tipo cclular en Ios pacicntes atcctados, a ditircncia del asnaa pr(xlucido por polcn dc Ia hicrba o el lupus critcnaatoso sistcnaico, procesos en Ios yuc todos Ios clones cclulares SOIL tic tipo Ti 12 .

Las celulas T CD8' tambien se pueden dividir en subtipos en funcion de su expresion de citocinas

Selection de mecanismos efectoras por parte de las celulas

TO y TH2

MtrdMs ~dul,os ( DS cit(rt(ixicas tiabritan una scric dc citocinas parccidas a ]as tic *Y1 11, rnicntras yuc Ias yuc Ilroducen sustanoras s o suorccias dc tipo 1't12 intcnicncn en unciones regulatiora soras . La o1itcrciiciaci6n dc Ias celulas ('D8 - csta condicioaaada por cl pcrfil dc citocinas tic las cclular ( :DA', dc niancra quc IFN y c 11 .-1 2 tatorcccn la aparici(in dc T( l c IIA la dc lc 2 . Sin cnabargoo, tanto Ias celulas T( A conio '1 '( 2 pucdcn cjcrccr funtloIICS citot(ixitaS V natal- raacdiantc un naccanisnto dcpcn dicntc dc granolas (quc se cxplica naas adclantc ) .

de la production
ihibicion

inhibition de la proliferacimi

MECANISMOS DE DEFENSA NO DEPENDIENTES DE CELULAS T

La fagocitosis representa un componente esencial de la defensa antibacteriana
IL-4 IL-5
(11,111 parte tic la rcaccion tietcnska initial creme a Its naicroorganisnaos dcpcndc tic[ rcconocimicnto tic unOS t(nnp(ntcntcs nai crobianos habitUaICS por reccptores no rclacionados con Icos cspecificos par, antigcno prcscntes en las celulas R' T . Ha' nurnerosos coinponentes microbianos yuc c)crccr un efecto quiniiotactico sabre Ios fagocitos c hacen yuc se dcsplacen ;h,7 10.8 . Algunos do elks, coma ( hacia la zona dc la inteccion . la endotoxina dc Ias bactcrias, acti'an la sia alternativa del Corn Plcnaento, con la consiguicntc liberation dc ( : ;,a' ('3a . ()tros coo,nponentes nticrobianos son intrinsccanacntc yuitnioticticos . Es el c :so tic Ios fornail peptidos, que estinmlan direct ilicnte a Ios fagocitos a travcs dc sus reccptores par, cstos contponcntes bactcrianos habitualcs . La siguicntc fast ell la fagocitosis tic un organisinoo cs sat union a la supcrficic dc la cclula tagocitica . Esta union sc No: faciftada por la acti'aci(in del coniplcnaento y cl consiguicntc dcpcisito tic (:36, quc se pucdc unit .1 Ios reccptores CR3 dc Ios tagocitos . De la naisrna forma, si cl pat(igeno se encucntra rcarbicrto do anticuerpos, Ios reccptores dc Fc dcl fagcxito I,uckIcn colaborar en cl proccso dc captura .

activation de los macrofagos

mastot:ito

anticuerpos, incluida IgE Fig . 10 .7 . Las linfocinas producidas par las celulas TO y Trig activan diferentes vias efectoras . Ademas, las celulas TH1 fender a inhibit la respuesta TH2, y viceversa .

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

Funciones independientes de celulas 11 : fagocitosis

quimiotaxis cc+mplemento componentes y fragmentos quimiotacticos bacteria

.Algunos or. anismos cstan adaptaclos al entorno intracclular Iran dcsarrollado mccanisntos tic uni<in a cstructuras superb tic Ia madales tic tal tiirniu que, atinyuc la ingestion sc produce ncra normal, a continuation no son actisados his mccanisnaos antimicrohianos . Fstas tucstiollcs, am como la naturalc -ra de los mccanismos antimicrobianos mencicrn.ruios, se cstudiarin con teas dctallc ell
Cl

ca1)itulo 17 .

fagocito

lisosomas capture e ingestion

destruction

Otrc~ mccaniem<i inkichcndicntc tic CCIUIa . I \ tic anticucrhos c, la induccicin tic la liberation do citocinas pcir partc do los rna crcifat-os v tic otras celulas, ccmstituVc 1111 mctanisnto \itll ell las tic primcras tascs la infcccii~n . Parccc ytic Dodos los organismos imasorcs conticncn o liberan moicculas capaccs do descncadenar cstc tipo tic rcaccioncs (\ . cap. 17 i . Uno Lie los principalcs do tic incdiadorcs cs la cndotozina o sentadcnantcs do la lihcracio'm lipop0hsa:,iricic~ +, .ITSi. A tra\cs tic till complcjo sistema, Cl ITS tic mcmhrana de los Icticocltos y posiblcIlcga a Ices rcccptorcs tic las celulas cndotcliales, actisando las tinrcioncs ctecto mcnte ras :uiccuacias, scgun SC nutcstra cn la jpara 1 .".3 . Otros cimiponcntcs microbianos conscr\-ados tambicn sc pucdcn rcconoccr y m:utcjar tic la misma forma.

Los componentes microbianos inducen la liberation de citocinas

Fig. 10 .8 . La mayoria de los microbios liberan factores quimiotacticos para los fagocitos . Despues son ingeridos mediante fagocitosis y destruidos, sin que sea necesario ningun proceso adicional de activation del fagocito, todo ello favorecido por la activation de la via alternative del complemento, que no depende de la presencia de Ab .

Papel de las citocinas en las fases iniciales de la respuesta inmunitaria

reclutamiento de leucocitos

celulas tisulares

endotelio

productos microbianos

activation

mastocito

selection del tipo de respuesta

Fig. 10 .9 . El TNFu y la IL-1 liberados por los macrofagos y celulas tisulares resultan esenciales en la fase initial de la respuesta inmunitaria, ya que su action sobre las celulas endoteliales hate que se recluten leucocitos . Se necesitan las quimiocinas tanto para la migration leucocitaria como para la activation de las celulas atraidas. TNFu tambien active a los macrofagos y los neutrofilos y TNFu e IL-12 hacen que las celulas NK liberan IFNy, que aumenta aun mas la actividad microbicida . Por ultimo, las citocinas liberadas por los macrofagos y otras celulas, como los mastocitos, favorecen la production de una respuesta TH1 o TH2. Todos estos procesos pueden sticeder antes de que participen los linfocitos T.

Respuestas mediadas por celulas y dependientes de celulas T

Entre las citocinas libcradas por los murtitagos cn rcspucsta a los compoticntcs microbianos, TNFu e IL-12 posccn una cspccial intportancia . Esta talc precoz dc la liberaci611 tic ntediadorcs ticnc trcs tiincioncs cscncialcs, quc SC rntrcstran ell la fiiJrrra 10 . V. " Emio tie scnalcs a las celulas cndc~tclialcs para quc empiecen a rcclutar leucocitos . " Actisaci6n dc los tagocitos tisulares, para asegurar la rcsis tcncia innata~, micntras sc desarrolla la rcspucsta mcdiada por Ias celulas T . " Emiar algunas dc las scnalcs quc tictermintn CI tip() tic rcspucsta dc las cclula> T lrccc,.u'i,t l l : t l () f! 12 i .

RESPUESTAS MEDIADAS POR CELULAS Y DEPENDIENTES DE CELULAS T

Las citocinas yuc sc libcran en las primcras tares dc la intccci6n dctcrutinan en parts la naturalcza do la rcspucsta inntunitaria subsiguientc . Este Cs un camptr tic cstudio muy intportantc, en cl quc se trabaja intensatnentc en Lt aCtualidad . Antes dc abtn-dario . cerrt\icnc Cluuncrar 10s ditcrcntcs tipos dc rcspucsta mcdiada ptrr celulas yuc sc pucdcn producir, t, la forma ell quc W SCICCCicma 11110 u otro . En la ./ ill/11-11 10 .11 sc inciican las Illncirmcs mar intporttntcs dc ]as celulas inmunitarias actin as (cada cdula pucdc Iles ar a Cabo nt is tic una tuncicin i, y sc res.ilta el papcl organizatior central do las celulas 1' ( :D4' colaboradt~ras Ch i ) . Los discrsos tipos tic cttlaboraci6n cclular cst.i n mcdiados por ditcrcntcs subpoblacioncs do celulas Tii, yuc produccn ditcrcntcs ntezclas dc citocinas . Entrc Icrs efcctos secundarios dc la actisacitin do [as cclular F se cncucntra la hipcrsensibilid :ai retardacia con formaci6n dc granulomas (quC sc cxplica mar adclantc y cut cl cap . 17 i, asi corno los fen6menos inntunopatologicos ell clue resultan dariados los tejidOS ,i v . cap . 26 } . E\istcn cdul as T inhibidOras dc [as rcspucs tar, quC sc dcnominan celulas -E suprcsoras i celulas Ts, /ig. 10.I I l . Algunas de: estas celulas supresoras liberan la citocina moduladora TCiFji, V pucdc quc sc tratc dc s'crdadcrus cclular T ~, supresoras-, ; otras pucdcn scr sintplententc celulas rcgulddoras quc, en un tictcrtninado cxpcrimcntc~, inducen la C<,nnnltacic'rn Cntre la funci6n quc x Csta Cstudi :utdc, \  tr .t yuc n  sc c,ta midiendo .

Las citocinas resultan esenciales para el reclutamiento de los leucocitos

En la ~i~ZUrrt 10 .10 sc nTtlcstra cn dCtallc la SCCUCncia do accnttccimienters quc culmina con cl reclutamiento de leucocitos . En printer lugar, las citocinas haccn quC se exprescn las ntolcculas dc aditesitin sobrc las celulas endoteliales, responsablcs dc tiuc . se adhicran los ICUCC-rcitos dC una tOrnra laxa t cmpiccen a radar scgunda tasc las quimiocinas lito largo del endotelio . En una a beradas por las celulas tisulares V unidas a la supcrfiCie endotclial ticterminan la actitaci6n dc los 1C000CitOS, con la COnsiguientc actitacion tic [as intcgrinas, quc haccn clue ccsc cl numimicnttt , la adhcrcncia Icucocitaria . Posteric~rmcntc, los leucocitos ntigran hacia cl tcjido atratcsando cl endotelio . Las trcs fuss descritas antes sc ilustran en tios sindrontcs humanos . Los pacicntcs con dcficicncia dc adhcrcncia ICnCO Citarla dc tiptt I I ( LAD-I I, dcl in glcs h-ucacrre adhesion dc/icicucr) carccen del antigenrt sialil I .cstis S, ligando tic la E selectina, to yuc se traduce cn quc los ICUCtxiuts no pucdcn rtaiar. En otro pro ccso, cl LAD-I, falta la subunidad (3 (CD 181 dc las intcgrinas leucocitarias, to quC permite a los nCutrdfilos radar, pero no adherirse ni ntigrar . Ambos sindrontes se caractcrizan p(W tI-CCuCn tes inteccimncs .

Las celulas T colaboradoras deciden quc mecanismos efectores se deben utilizar frente a los patogenos

Its celulas I cc,laboradoras, ntctiiantc ,u intcracci(In Crnt celulas prcscntatic,ra, tic antigcnos clue portan Cn su supcrficic pCptid0s alAMc111COS 1s0ciados a 11t01000las (,PH de claw 11, dcscntpctian un papcl cscncial cn la cictcrminaci6n dc los epitopos ti-cntc a los yuc ira tlirigida una rcspucsta ituntntitaria (%,. cap . 9) . Sin entbar-

Importancia de las citocinas en el reclutamiento leucocitario

rodamiento Fig . 10 .10. TNFct, IL-1 y el lipopolisacarido (LPS) inducen la expresi6n de E-selectina y P-selectina endoteliales, quc interaccionan con los oligosacaridos de los leucocitos circulantes, hacienda quc su circulation se haga mar lenta y quc rueden a to largo del endotelio . Las citocinas tambien aumentan la expresi6n de ICAM-1 . Las quimiocinas, liberadas par los macrdfagos, celulas tisulares y endotelios, y quc incluyen MCP-1, RANTES y MIP-1u, se Linen al endotelio, donde activan a los leucocitos iniciados, aumentando la afinidad funcional de sun intcgrinas . ~stas interaccionan con su ligando, ICAM-1, determinando la firme adhesion de los leucocitos al endotelio . Por ultimo, las celulas atraviesan el endotelio y se desplazan a favor del gradiente de sustancias quimiotacticas . Los detalles del reclutamiento y los distintos tipos de molecular de adhesion y quimiocinas cambian de una poblacion leucocitaria a otra .

activation y adhesion

E-selectina P-selectina

TNF IL-1

" 40 _,

"

macr6fago

productos microbianos

celulas tisulares

-,eacciones inmunitarias mediadas por celulas

El papel central de las celulas TH en la inmunidad mediada por celulas antigeno

Reconocimiento de las celulas diana por las celulas Tc y NK

NK TCR CPH clase I receptor de NK

F -',

ausencia de CPH de clase I

Fig. 10 .12 . Las celulas T citot6xicas reconocen al antigeno procesado presentado sobre la celula diana por ]as moleculas CPH a traves del receptor de la celula T (TCR). La mayoria de las celulas Tc son CD8- y reconocen al antigeno presentado por CPH de clase I, pero unas pocas son CD4' y reconocen antigenos ligados a CPH de clase II . Por el contrario, las celulas NK presentan receptores inhibidores de las celulas asesinas (KIR), clue reconocen CPH de clase I sobre la celula diana e inhiben la citotoxicidad . Estas celulas emplean diversos receptores (receptores NK) para reconocer a sus dianas, incluidos CD2, CD69 o los anticuerpos unidos al receptor Fc (CD16) .

Fig. 10.11 . Las celulas presentadoras de Ag (CPA) presentan los Ag procesados a las celulas T colaboradoras (TH), con tin papel central en el desarrollo de las respuestas inmunitarias . Estas celulas reconocen epitopos determinados y los escogen como dianas . A continuaci6n, seleccionan y activan los mecanismos efectores adecuados . Pueden colaborar con las celulas B en la sintesis de Ab, asi como activar y suprimir las acciones de una grail cantidad de celulas efectores, como las celulas T citot6xicas JO, las celulas asesinas naturales (NK), los macr6fagos, los granulocitos y las celulas citot6xicas dependientes de Ab IK) . Todas estas celulas seran estudiadas mas adelante . Muchos de estos efectos estan mediados por citocinas, siendo importantes las citocinas procedentes de otras celulas, especialmente de los macr6fagos . A su vez, tanto las celulas T como las B se pueden ver afectadas por la presencia de celulas  supresoras (Ts) o reguladoras.

macroSfagos pucdcn tenor consecucncias negatkas, aunytlc se prodtlzcan antiCUCI-POS. En cste Capittll0 SC Conaenta la citotozicidad nictliada por Cclulas t . las rcsl,ucstas dc tipo, TH I mcdiadas por nmcr6tagos, micntras yuc la producci6n dc anticuerpos se aborda en Cl Capitulo siguicnte.

CITOTOXICIDAD MEDIADA POR CELULAS Las celulas T citot6xicas y NK son elementos complementarios en la defensa inmunitaria frente a las celulas infectadas por virus

go, C1tand0 CI SIStCIala llllaatlnlt ;al- 10 SC Cnfl- Cnta a llla 01- V ;alaiSna0 illtasor dcbc tomar una scgtlnda -dccisidn- ailn naas importantc : dcbc selcccionar los mecanismos efectores naas adectlaclos para combatir csa infccci6n concrcta . AungLIC pucdcn cxistir otros, los trcs patroncs dc rcspucsta naffs importantcs yuc sc pucdcn dar alltC till Cstfnntlo antigcnico son IOS siguiCIAcs : " ( itotoxicidad mcdiada por celulas T ('1)8' i. , l, (- ;) o linfocitos

grancics granulosos . " Actitaci(in dc los macr6fagos dirigida principalnacntc por las celula, TH I . " PrOdLIC66n dc anticuerpos por las celulas B bajo el control fundamental dc T112, cn la que Icas mastocitos y los cosillcifiIos sc comportan como cfcctorcs . Fsta dccisio>n ,, cs importantc, ca clue In acticacicin de mecanismos cfcctorcs inaciccuados, en lugar dc cjcrccr tin ctecto protector dente al pat6geno, puede pro\ OCar una mac'rnr susceptibilidad trcntc :tl naisnao . Por cjcmplo, cn till moddo do intcccicin por el \irtts dc la gripe, las celulas T cit0toixicas CjerCell tin etcc to, protector, miclatras yuc la lCtic' :lCioin dc los nlacr6tagos allmcnta la susccptibilidad . 1)c la misma tornaa, la acticacion dc Ion macrcithgos protcgc a los ratones f-cntc a Lcisl>manin major, micntras que las rcacciones yuc no conduces a la acticaci6n dc los

I a Citc,t,\i~i,i,i nacdiada I,o,r CClul., C  nstitua'c till nICCanisuu, tic dCfcns ;a tlll1t1 .1111Clatal fi- entC .a 1!ato,gCllos intracelulares, incluidoas Ion virus, algunas baCtcrias \- parasites. Esta actin idad la pucdcn dcsctnpcflat- s arias tipos dc celulas, sobrc todo Lts celulas - 1 c- , Las K c cn ocasioncs las celulas nticloidcs . 1:1 rccomocimicnto dc la liana cs distinto para ]as MILLIS Tr t' NK ifiq . 10 .131 : " Las celulas I citot6xicas reconocen antigenos cspeciticos f peptidos aisles sobrc Las celulas intcctadasl prcsctatados por moIco:ulas (TH. La nraa'oria dc las Te : soil ('1)S' ~' reconocen los antigmos prcsemados con CPH dc class I, ecru till 10". de las celulas I' Cirutoixicas rcstringidas por CPH son (1)4', reconcaCicndo antigenos asociados a ('PH de class 11 . " l .as Mtllas NK rccotu,cclt celulas yuc no cxprcsan (*PH de class 1 . EStIS CiLLILas utilizan canon receptores para reconocer sus dianas . Por cjcmplo, sc pucdcn unir con 1111 antiCtrcrpo ya ligado al antigeno sobrc la Milk liana a traces dc los receptores Fc (( :1)161, proccso que sc cicnomina citotoxicidad nacdiatia por celulas dcpendicntc de antiCUcrpo (Al)(V, LM inglcs antiboda~-depcudcru cell-wediate-d cYtotozicitY) o acticidad dc celula asesina i celula K, dcl inglcs killer) . La fuaciom man importantc dc las Cclulas T( cs climinar celulas infcctaelas pear eirus ie-. cap. 16i. (,asi todas las celulas nucleadas cxprcsan CPI I sic class 1, dc forma que cllando se intcctan por tin virus pucdcn presentar antigeno a Ids Cclulas TC ( :1)S', SC`jdta unos mecanismos yuc sc conacntan cn cl capitul0 9. I .as na0leculas ccltllarcs, parcialnacnte degradadas por los proteosonaas, soil transportadas al rcticulo cndoplasmatico, don-

Citotoxicidad mediada por celulas

Interacciones entre Tc y celulas diana

do CPH tic class I cn la ccl1tla Mfcctada, attnquc dichas celulas pueden set- reconocidas por [as celulas \K. Por este rnotim, se pucdc considcrar a [as celulas T( % NK como brazos comple nacntarios del sistcnla innaunc tinC controlan el dcsarrollo dc intCt:ct(Itacti \ iralcs etl l(as tcltdos . Las moleculas CPH de clase I inhiben la citotoxicidad mediada por las celulas NK 1-is celulas \K dcri\an tondamcntalnacntc dc I(le <" linfocitos graaldcs 'r :untlos(n+, I .G1,I, yuc rcprcscntan aproximadantcntr till tic los hnlocitos 11un1 :uaos cn sangre pcrifcrica . La nrt\or parts dc las celulas uK son ('1)3 C1)l6 - C1) ;;6 C1)94 - (\ . apcndicc 1 \ no conticncn rcordcnamicntos productitos do los genes del receptor dc Las celulas l . I .os expcrintentos inicialcs accrca dc la cspecificidad dc las celulas NK tienaostrar(m clue ciertos alotipos dc HI .A-C Iran genes dominames yuc detcrnainaban rcsis tcncias trrntc a la citotoxicidad por \K . I)CSdC cnt(naccs se laa dcmostrado yuc [as celulas NK rcctmoccn di\crsos alotipos ( .PI l, pcro clue cualquicra do [AS n1olcculas CPI I pucdc inhibir la t11UCf1C cclular, incluidos Agunos alotipos do los loci HIA-A \ HLA-B . Recicntemcntc sc laa obscr\ado un l1edao curi(rsO : la n1(alccula H I .A-G, cxprcsada dc tin1n1a cxclusi\a Ix>r cl trofoblasto placcntario, CS un inhibidor dominants dc las celulas NK clue dc tvrmina rcsistcncia fi- entc a tod(rs I()s tipos do cclula \K . I .as tclulas trotohlasricas son de origen feral c in, aden la circulaci6n matcrna cuando SC tornta to placenta, sicnclo consicicradas alogcnicas por la ntadrc al c()ntener genes (,PH patcrnos . En cstc ripo cclular la cxprcsibn dc k)s genes CPH csta rcgulada a la baja \ la c\l)rcsi()ia dc H I .A-( ; parsec lundamcmal part protcgcr a l a placenta del ;uaAluc dc las celulas NK . Ell cl rcconocimictao del ( .PH dc class I poor las celulas NK intcr\icncn dos tip(rs de moleculas f_/itf . 1(1.141 . Unoa cs una Icctina dc tipo C dcscrita por primcra )rz cn ratoncs 11x49} \ ratas . yuc parsec tenor su cqui\alcntc launaau1o cn la n1olccula CI)94 . El scgundo pcrtcnccc a la superfamilia tic [as inumcaglobulinas c inclu\c (1)158a \ CI) 1581), yuc SC unen con di\crsas moleculas HI .A-C; \ nutcsrran each ono dos dominios IgSF, \ la molccula })i0, con tees ti<mlini(as It SF . Este grttpo tic naolceulaS se dcs-

Fig . 10.13 . Algunos de los ligandos que pueden intervenir en las interacciones entre las celulas T citotdxicas y sus dianas .

de sc asocian con 111oleculas ( :PH dc class I \ postctiortnctttc .11can/an la supcrficic cclular . I)c cstc modo, coda cclula analiza sus pr(rpias moleculas \ las prcscnta para yuc las celulas - I'( ( :1)8' pucdan rc\isarlas . Las celulas pressman tant(a sus moleculas pro pits como los I)at()gcnos intracclularcs por cl misnlo nlccanistno . Sc ncccsittn m .is interacciones para estabilizar cl enlace e ntrc las celulas l'( \ la diana (_h9. 111.1 . ;1 \ adcnris pueden contribuir cn la dcstrucci6n dc la misma . Si in vitro sc ariadcn aalticucrI)os contra ('1)2 o ( ;1)3 dc la supcrficic tic T( , sc pucdc dcscncade nar la nuterte dc las celulas diana unidas a dicha cclula . Parece que la uni(in dc Agunos ligandos fisi(Ikigicos a cstas moleculas n1cdi.antc estc nlccanismo tantbicn acti\a las celulas '1( . Mpuios \irus f sobre todo hcrpcs ;i tratan tic cscapar del rcconocimicrtto p(rr las celulas T( , rcgulando a la haja la exprcsioin

Receptores inhibidores de las celulas asesinas (KIR)

Citotoxicidad mediada por celulas dependiente de anticuerpos

Fig . 10 .14. Dos tipos de moleculas se pueden comportar como receptores inhibidores de las celulas NK . p70, con tres dominios, y p50 y p58, con dos (CD158), pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas . Las lectinas especificas de tipo C, incluidas Ly49 en ratones y CD94 en hombres, tambien se comportan como inhibidores .

Fig . 10 .15. Actividad de las celulas K . Microfotografia electronica de un linfocito (derechal que ha capturado a una celula diana recubierta de anticuerpos (izquierda) . x2 .500 . (Por gentileza del Dr . P, Penfold .)

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

cribio en humanos, pero en cl nlonunt(r actual se ltan descrito analog(n cn stones.

I as cclula " NK sc Pucdcn unir c(ru skis dianas cnlplcando n1itltiples rc(cpt(ncs, c(rm(r C1)2, ('D16, ( .I)69 s rcccptorcs parcciclos a las Icctinas cnaparentados con los inhibidorcs dc la citotoxicidad . El receptor Fc, ('1716 . se liga con los anticucrpos unidos a las cclulas liana c media la A1)CC (firs. 10.151 . Lsta actiaidad se streIc cicnorninar dc tipo -ascsino ,~ i K, del inglcs killer), aunquc csta Ilincioin tambicn la rcalizan otras cclulas con receptores para Fc, comer Las celulas T. Aunque algunas cclulas naieloides exprcsan receptores Fc V nttrestran actin idad dc cclulas K, parccc clue los mccanismcrs I cmplcados para dcstruir las cclulas soil distintos a Ion cnlplcados p(rr las cclulas NK s' 1 I s'. m .is adclante h . Fntrc Las posibles dianas dc la actis -idad dc las celulas K dcstacan los antigenos s-iralcs sobrc ]as supcrficics cclularcs, has moleCUl ;Is CPH s' algunos cpitopos preserves ell Cumorts . hannl Icrs nlonocitos coin(), scgun algunos controvertidos trAbajos, Icrs IctrC(1CitOS pucdcn actuar contra dianas tumoralcs rcvcstidas pear anricuepos . AIL ,1111,1% cclulas micloicics i monocitos s cosi116filosi soil importantcs ctcctorcs cn la dcstrucci6n dc las csquistoscin1ulas rcs cstidas por anticucrpos ('s . cap . 18) .

Las celulas NK y K emplean diversos receptores para identificar skis dianas

Las cclulas'I cit(xoxicas, NK ~ K cmplcan diccrsos mccanisnaos para climinar skis dianas, quo inclu\rn la transrnisi6n dirccta dc scnalcs intcrcclularcs mcdiantc molecules dc supcrficic . Adcmas, mochas cclulas 1' citot()xicas ('I)8' y Ios linflcitos grandcs gra11ulU3os (cclulas \K c K'i conticncn granulos con protcinas en ski interior, yuc plied cn daf ar la cclula liana si se lihcran directarncntc contra ski n1011111-and cclular. l .a c(nnhinacicin do mccanismc,s cmplcada en cada cast) depends del tipo de cclula T( .
Los granulos de las celulas T citotoxicas contienen perforina y granzimas

La citotoxicidad es ejecutada por interacciones directas entre las celulas, por citocinas o por exocitosis de los granulos

Entrc 1 ;1s (iiscrs .as tornlas do tratanlicnt(r quo I()s innurn(rl  ,: :  . 11 ;111 ensacado ell ski luclaa frentc al cancer, una laa side actisar los lintcrcitos del propio pacicntc in r>itra con 11 .-2 s . s-OIsCr a infirndirsclos . Estas cclulas, procedentes dc la sangre o cl hazo, sc dcnon1inan cclulas ascsinas actisadas por citocinas (a LAK ;:del inglcs evmkine aetirated killer cells) . l)ichas cclulas naarestran manor citotoxicidad no rcstringida por ( .PH s parcccn deris-adas en ski mayoria dc cclulas prccursoras indistinguiblcs dc las NK, dc mancra clue las cclulas I .AK no reprcscntan una hnCa cclula) distint .1, sin() kin rrlult .td(, do la actsacilrn . FMC tip() tic celulas csta sicr(1<r cstu(f .td(, (,,nor tratamicnto del cancer lurman(1 .

Las celulas asesinas activadas por citocinas (LAK) guardan posiblemente relation con las celulas NK

L(rs L~r;ulul(rs do l;ts cc] ulas \K s - ( conticncn diccrsas pi (rtcinas, incluidas per tin'inas s granzirn;ts i cnzimas asociad ;ts ;1 I(rs gr ;intrlos) . I)espucs dc hgarsc con ski liana, la cclula T( dirigc skis gra nubs contra la mcmhrana yuc rcvistc la diann ; posteriormentc, cn una fast dependicnte del calcio, sc libcra cl contcnido dc los granulos laacia cl cspaci(a cntrc las d(rs celulas . La perforina cs una pr(ucina tilrmadora do poros naonomerica, yuc sc rclaciona a ni\cl cstructural s funcicn1al con Cl con1pcrncntc C9 del complcincnto . Las scsiculas tambicn conticncn una scrim csterasa, quo pucde participar en la tirrnraci()n del complejo litic(1 . En prescncia dc calci(r, leas m(1n(rnler(as dc per tlr61M SC uncn con Lt ralenlhrana do 1 .1 cclula liana, pcalinacrizando los canales transnaenahrana . La cclula 'C( sohres is e, a pcsar do ski cstrccho contacto con la pcrt6rina, s pucdc scguir chminando dianas nuts-as . Un pr(rtcoglucano dc las scsiculas (cl condroitin sultato .A) tambicn parccc implicado cn la dcfcnsa frentc a la autodcstruccioin, Va yuc sc pucdc unir a la perforina c inactis-arl a . Las granzimas son 1111 conjunto dc scrim cstcrasas i cnzimas l, quo tambicn sc libcran cuando se produce la exocitosis dc los granulos y quo sc actisan una scz libcradas . N( r rcsultan cscncia Its para la iit(1tOxicidad, ya yuc cclulas carcntcs dc las misnaas conscrs an la capacidad citotoxica . algmias dc las granzimas pucden interactuar coil las Bias intracclulares actisando los nlecanismos descncadcnantcs dc la ap(rpt(rsis s' la dcgradaci()n del Al)N .

Mecanismos de destruction mediados por granulos

celula citotoxica celula citotoxica

00 pertorina polimerizacidn enzimatica

" liberacidn de enzimas

canales de poliperforina celula diana 2

rig . 10 .16 . La celula linfoide citotoxica se desgranula, liberando perforina y diversas enzimas (granzimas) en las proximidades de la membrana de la celula diana . En presencia de Caz', la perforina se polimeriza y da lugar a canales de poliperforina en la membrana de la celula diana . 1) Las enzimas degradativas u otras sustancias texicas de la celula citotoxica pueden atravesar los canales de la celula diana, danandola (2) .

Citotoxicidad mediada por celulas

Mecanismos de muerte celular mediados por receptores

liberation de citocinas

TNF

apoptosis

muerte celular

Fig. 10 .17. La union del ligando Fas (Fast) en las celulas citotoxicas hate que se agrege Fas sobre la celula diana, asociandose con proteinas intracelulares (coma MORT-1) responsables de la initiation de una serie de acontecimientos que culminan en la apoptosis. Fas tiene cuatro dominios extracelulares (parecidos al receptor NGF) y tin adominio de la muerte>~ intrace :ular. La muerte celular tambien se puede codificar mediante TNF, que se liga al receptor TNF de tipo I (TNFR-I) perteneciente a la misma familial de receptores que Fas.

En la /r/Tln-a 10.10 sc nttlcstra C(Sn10 contril)u\Cn las proteinas granularcs a la cit()to)xicidad .

Ila ()bscr\ado) yuC ],Is ccltllas -Fo ( 1)-k I :)) ro)nticncn 1)crturjna \ lisan ]as dianas en auscncia do calci(), do: mantra clue cstls cc lulas doben cntplar otros nlcc :ulisnttx tic citotozicidad. Esta idea sc Ila confirmado en estudios con celulas l'( dcri\adas do rat()ncs dcficitarios 1)ara cl gcn do: la 1)crtin -ina, cn los clue la citotosicidad so: reduce, pcro no) desaparccc . hichos Ittllazgos Iran Ilc)ado a la identificacidn do tin ,rLlp() do: ntoleculas, clue pucdcn dcsencacicnar do forma dirccta la apo1)tosis, ctttre las clue destacan Fas ; i ) cl rcccl)t()r l'\1 flas ntas inal)ortantcs) v tambien i( - ll9 ; Ch ;0 ) (;1)40. El ligando do: Fas (Fasl . ;i so: cxprcsa ell las cClulas T C1)4' \ C1)8 maduras acti\adas. La uni(in do: Fas determina cl agrupanlicnt() do: ]as n10ICculas do Fas, su as(niaCio ll con una protcina intracitoplasnlatica, \1( )R F- I , N, en ultimo terming, la a1)olttosis do : la liana ( Fas aCtita tanthictl durantc Cl Cicsarrollo do: Ion linti)cit()s para c())ltr()1ar 1 ;1 su1)cr\i\encia (1C detCrnlinadas 1)oblacioncs cclularcs i . La cstructura dc Fas so: parcce a la del ro captor T\F, \a yuc anll)os COIttiC11Cn -d(nnini()s (iC nltlcrtc11 intracitoplasnraticos, 1)rcscntcs cn \arias 1)rotcinas implicadas cn CI control do: 1 :1 supcr\1\Cncia celular. Las \csiculas do: ]as cdulas'1 citot(i\icas talllhicn lnlcdcn coil. rcner I NFa \ linti)toxina ( L\F13'h, pen) estas citocinas no scnl respomsahlcs do forma aislada do la citotoxicidad, \a clue la mucr tc celular 1)n)ducida por I'NF tardy nlas (1C ;-4 horas (ticnlpo in\crti(1o 1)or las celulas l'( i . Sin cnthargo, la sinlilitud cntrc cl rcccl)tor TNF \ F:ts sugicrc quo : anlhos pucdcn COntl-IbUlr a I :1 citotozicidad { I?0. 1(1.1 .'( .
SC

La citotoxicidad tambien se puede controlar a traves de Fas o del receptor TNF en la celula diana

'I'NI - l1 tambien CC IYs1)Ull.saI)IC dC 111tIC11(ts CjCI111)I()S SIC I11LICI- tC (1c CCIUlas t11I11()raICS por naacr(itagos \ aetua en shict-gismo coil IFN "t dibcrad() por las celulas T o \k) cn la climinacion do tumoros SUSCCptil)Ics Uu7. 10 .l8;L La dcstrl1CCI(')n celular mecliada pen- citocinas SC Com1)roIICIC mal. SC 01-)SCI-\,l till allillClItO ell 1,1 acti\idad de la ciclo y la IiPooxigcnasas do: la celula diana, coil la consiguicntc libcracio)n do radicalcs Mires dcntro do: la misma; tambien se hhcran radicalcs libres do: las \ias do: transl)ortc do: clectroncs mitocondrialcs \- sc nx)ditica la sintcsis 1)rotcica. Las cclulas tnicloides 1)uedcn lil)crar nlediadorcs t(i\icos, clue so entplcan fi-cntc a los patogcnos fagocitacos, c inclu\cn dcri\ado, reactivos del oxigeno v cl nitrogcno (( : R() ) ('R N, v. cap . 1"

Las celulas mieloides emplean multiples mecanismos para eliminar sus dianas

Mecanismos que pueden intervenir en los procesos citotoxicos mediados por celulas mieloides
proteinas cationicas C3a hidrolasas r anion superoxido y otros compuestos reactivos del oxigeno (CRO) oxido nitrico (NO y otros CRN) factor de necrosis tumoral (TNFu) Fig. 10 .18. Las celulas mieloides liberan compuestos reactivos del oxigeno (CRO) y del nitrogeno (CRN), asi coma tambien proteinas cationicas, enzimas hidroliticas y proteinas del complemento. Dichos compuestos, actuando conjuntamente con las citocinas, pueden danar la celula diana.

Eli rcsunlcn, las celulas T( ('l)S' cntplean Canto) Fasl, coma liberaciom del contcnido do los granulos 1,ara Chnlinar sus dia nas, micntras clue las celulas T( ( :1)4 cntplean principalntcnte Fasl . \ la% Nh utilizan sus gr,inul()s . TNF 1)ur(ir c(nurit)uir a la citotozici(tad de cualyuicra dC Cstas cCIllIaS .

Reacciones inmunitarias mediadas por celulas Algunas funciones de los macrofagos son potenciadas tras ser expuestos a citocinas

4: EL PAPEL DE LOS MACROFAGOS EN LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS

L(rs macrtit:igos intct't'icnin cn todas las fases tic la respuesta in nutnitaria ij q. 10.l yl . En primer lugar, como s a sc lie senalado, constitut cn un mrcanismo protector do accicin rapida, yuc lntccic actuar antes de tluc SC ha\- a producidtr la anylificacibn ntc diada pcrr la,, celulas l' . :A r(mtinuaritin interticncn rn las prime ran fxsrs do actil . acion do la', celulas F, procesancto v prcscntando Io,, antigenos ( c. call . 9i . Finalincntc, tras ser actin ados pcrr las celulas I , participan in la Iase ctectora tic las reshucst :ts tnrdiaclas por celulas, cn cl(ntdc sr comportan romp celulas inflamatorias, antitumcrr .ilcs ~ antimicrohianas i , /iq. 10 .3(11 .

l ()s nxrn(riit(rs iifCLILtltICS soil capacrs tic drstruir algunos organisntos \ . c .th . I' ;1 . ('u.mCItt SC culti\ :tn iii I'11 ; 0, picrdcn Bran partc tic rata capaciciad, prro al ser rspucstos a citocinas, cspccialincntc a 11 ,\-r, la rccuperan, actiOnctosc adcnras otras ~iaS cicstructoras do las quc carcccn los monocitos normalcs . Esta actin acicin ," Lic los macrofagos mcdiada por lintitcinas cs ncccsaria pant que puccian tirstruir ntnihlas parasites intracclula rcs V celulas ttlmoralcs in vitro {liq . 1(1.311 . En cl cxpcrintcnto

clasico yuc demostro cstc ten()mrn() SC utilizar(m animalcs intttunizados con B(Y, i hacilos C alincttc-Gucrin, una ccp:t ne s- irulcnta kid hacilo (ic la tubercul(xis hosina) . Cuand(r sc cspu-

El papel central de los macrofagos en el sistema inmunitario defense inicial organismo presentacibn de antigenos funciones efectoras

Fig. 10 .19. Los macrofagos desempenan un papel en la respuesta inicial a las infecciones, antes de que acttien los mecanismos inmunitarios mediados por celulas T y B. Cuando se activan estos mecanismos, los macrofagos pasan a actuar como celulas procesadoras y presentadoras de antigeno. Finalmente, las celulas T responden a los antigenos y liberan citocinas que activan a los macrofagos.

El papel central de los macrofagos en la inmunidad y la inflamacion inflamacion y fiebre

IL iS

actividad antimicrobians deE :~~' :lien'e de ( :xir-tero , gO,, , -OH, ftipohalitos independiente de oxigeno lisozima, acidos, hidrolasas acidas, proteinas cationicas
H,O-,, 0 .., NO

prostaglandinas , mediadores y factores del proteinas complemento factores de secretados

r, 3r :i

- r' .r

IL

I , :i : :n

seleccidn del mecanismo a activar I1i0 L 12 " Ttl2 ~ THl

activation de los linfocitos I :r :nxaarnie:~itr~ y Frresentaci :(r~ de antiyeri,:ls (I FOC111, 1, 11 Ill 11, IL 1 reorganization tisular factores secretados, clastasa, colagenasa, hialuronidasa, factores estimulantes de los fibroblastos,factures angiogenicos losiones tisulares ^i hitlr-rlasas ac :das C3a, TNFn Fig. 10 .20. Los macrofagos y sun productos son importantes tanto en las fases de induction de la inflamacion como en la reorganization y reparation de los tejidos (izquierda) . En la parte derecha de la ilustracion se enumeran las funciones efectoras de los macrofagos. Estas funciones efectoras pueden provocar lesiones tisulares, como ocurre en las reacciones de hipersensibilidad retardada.

macrdfago

actividad antitumoral I':C :u, -:it-it-,, i ,i1,, factures toxicos H,0  C3a proteasas,arginasa, NO, TNFu

El papel de los macrofagos en las respuestas inmunitarias

sicron cstos aninialcs al dcri\ado proicico I)tuificado ( PI't), del inglcs 1'urifed Protein I)crirative; una mczcla n(, puriticada dc :uuigcnos cstinurlsntcs tic las Cclulas '1' I)rc)CCdCntCS tic .tlriobartrl-irrur trrbcrcrrlosis), yuedaron protegidot, tanibicn frentc a Lister-ill III onomt(`g01es, una bacteria no rclacicn1ada . Se Ilegc) .11 .1 ConCItrSI()n do (]tic ell la activacion dc lo)s niacr()I .igos intcrtiCnc una via csl)Ccifica dc antigeno, perm (Iuc cl aunxnto tic la acti\idad antimicrobiarm no Cs CSI)ccifiCO tiel cn -ganisnio Con CI que se Ilea :i cabo la inniunizacion . h .n csperinicntcn posteriores sc dcmostrd yuc al atlti\ar in rvtrn \ ell prcacncia dc [ill antigl: no adccuado ( p. Cj ., I'PI) i linti)Citos I1rOCCdCl1tCS tic kill ill tnunizador corn ltCG, se liberan methadores yuc aunientan la capacidad tic los niacr()tagos para dcstruir o inhibir Canto al org,uiisn)co inniunizante lom(r a otros or ,;anisnios no rclaciomados . ,Mis r .utic sc deniostro quc los mcdiadorcs implicadots cn cStC tin('meno crap linti)cinas .

La acri\acion tic lo)s niacrotag(rs Cs un fCnun1Cno conipICjo. 1,a Capacidad tlestructi\a dC los niacrof:iloos bents a algmon micron,rg;utisn1os aurnCnt,t tras Cl proccso do acti\acic)n, pero esto n() ocurrC con todos los micrcx~rganismos . Por Cjcniplo, la cxposici()n tic los monocitos liumanos a IF\y en solitario Its cap:tcita para dcstruir Lcgionclla, pcro faorccc cl crcciniicnto dc 11*i,cobacto-inm tubtr- culosis. Esta ccnnplejidad sc detx a \arios ntotn os : " 1 .()s nracrotagos acti\,idon I)ucdcn cjcrccr nunlCrosas f61160nes cfcctoras ditcrcntcs (fiq . 1(1,3(11 . Las tancicnics antiniicro)hianas se cstudiaran con mas detallc cn CI capitulo 17 . La cSttr .I)c nionocitos/niact.()fagoS cs nitt\ lictcrogCnea ; ]as Cc lulas obtcnidas en distintas zonas dcl organisnio dificrcn ell cucstioncs tall imporrtantcs comp la CXI)rcsi()n tic niolcculas do class II \ do receptor" de Fc, la capacidad tic rCSI)ucsta a las

Los macrofagos son heterogeneos

fnfocinas \- la producci()n dc pcroxidasa . Pcsc a todo, la niavoria dc los imcstigadorcs crccn quc solanicnic exists una cstirpc CClular dc rnacrutagos, y title su di\crsificacion sc dcbc a ditcrcncias en cl entcrrno N en la maduracic)n. " I as funci(mcs quc sc acti\an pucdcn no t1CI)Cnder ezclusi\anicntc del macrotago, sino do la <" niczclacomcrcta tic linti)cinas \ Cstinurlos intlamatorios a yuc csra sonicrido) . Se lia sttgeridc) yuc la actitaci()n w produce cn )arias tries v rcyuicre una SCCUCncia do estinitilos; pucdc clue cntrc cstcn cstirt1ulos SC Cl1CUentrcn las citocinas, la cndorto ,,ina, mcdiadorcs di\crs()s y rcguladorcs tic la intlaniacion . En cada una de las fasts SC pucdcn cxprcsir dilcrcntcs Iitncioncs ctcctoras, y sc produccn moditicacioncs caractcristicas del aspccto \ fisiologia dc los m.tcrofagos f /`ri. 1(1.23) . En algun0S casos sc nccesita n)as dC una SCf1al para dcsarrcr liar una tirncic)n concrcta . Por cjcniplo, los macrofagos nurrinot, ncccsitan dc la CstiniulaCi()n prinicro por II \y y luCg() porr l VFu para podcr producir ni\clcs clcados dc oxido nitric) (N()), toxico para [as baCtCriJS ) . lit, celulas tunioralcs flirt . 10 .22h . Result, mat, ditiCil conSCguir title Icr n1acrotagOS hunt.u1Os gCncrcn canticiadcs significati\as tic \() \ la ma\or l,;u to do auto, ITS title lo han c()nSCguiclor han eniplcado di)- crsos cstinmlos, conio la exposition a \arias citocinas v cl cntrccrttzamicnto do FcsRII (C1)23) . Len niacrotagos I)rcscntcs ell locos inflantatoriUS ell liun1anos cxl)rcsan cn ocasioncs una sintasa dc. uxido nitric() inducihlc ii\QS), per() ticnen ni\Cles mu\ bajos de tetraliidrobiooptcrina, un cofactor cscncial para la torniacion tic N'() . ( :onto) \() cjcrcc nluItiI)ICS fiutci(mCS no t()xicas en la transniision dc sciialcs, parecc yuc su tunciini toxica sc ticsarrcr Ila tundantcntalnicntc tras intcraccioncs coil pr()ductOs del sistema dc reduCCi()n tic oxigcno, con formation tic peroreinitritos, fcn()mcno clue sucedc do tbrnm cxclusi\a cn zonas intlaniatorias coil acti\idad fagocitita .

La activacion de los macrofagos

Fig. 10 .21 . Destruction de Leishmania por macrofagos activados. La destruction de Leishmania enriettii por macrofagos cle la ceps de ratones C57 es potenciada por las citocinas . Los parasitos ingeridos por los macrofagos son destruidos en 48 horas tras cultivar las celulas en presencia del sobrenadante de un cultivo de linfocitos que contiene citocinas (izq .) . En cultivos de control sin adicion de citocinas, los parasitos crecen sin restricciones (dcha.) . Tincion de Giemsa, 800. (Por gentileza del Dr. J. Manuel .)

Fig. 10 .22. Para que se activen los macrofagos pueden ser necesarias interacciones con diversas linfocinas y factores de origen microbiano . 1. Para que se produzca una liberation optima de TNFu por parte de los macrofagos es necesaria la activacion con IFNy, seguida de la exposition a componentes microbianos capaces de estimular la production de citocinas, como la endotoxina . Asi se produce suficiente TNFu para activar la via 2. 2. El IFN7 activa la via que conduce a la production de oxido nitrico, pero para que este proceso se inicie es necesaria la presencia de TNFu .

~'eacciones inmunitarias mediadas por celulas

El papel del calcitriol (1,25-dihidroxicolecalciferol) en la activation de los macrofagos humanos

FORMACION DE GRANULOMAS
En algtutas ocasio rtte% las respucstas mcdiaclas per celulas no coil sigucn crradicar un organistno intcccioso, o1 las sustancias antigc nicas not pucdcn scr clintinad .t> dCNdo a yuc son rcsistcntcs a la dcgradacioln u proncelen do colmponcntcs propios. En csos case , las celulas T- se sigucn acuntulandol v liherando citocinas, dando lugar a la tilrmaciun tic granulomtas . Los granulomas son tipicos tic las inicicioncs coil organjsntos cuyo ciclo Vital SC dc%arrolla, :tl mends en parte, intracclularrncruc i p . cj ., .11*wobactet-ium tttlrtrctrlosis, If hprac, Lt-ishmauia spp . c hstrrra Jnonoe_vtggencsl, asi coma tic la% provocadas poor organisnto% persistentcs \ do grail tantano fp. ej ., Ion 11uCVOS d(: Ion esyuistonomlasl . En Ion granulomta% es tillira la prcuntia tic iclulas dcriVadas tic Ion ntacrotagon, cutas tirniirmcs no soon hicn conocidas t cn trc IAN yuc sc encucntran iclulas cpitcliolicics V celulas gigantes tnultinucicadas hhq. 1f1,?ti) . Su tnolrftlogia sugicrc tluc el papcl yuc dc%cntpchan dchc scr sccrctor V no tagolcitico, t %c crec yuc proceden tic la cstinnilaci6n cronica tic loos rnacrrifagos por par tc tic las citocinas.

25-hidroxicolecalciferol

go

.-.J

Regulation negativa de los macrofagos h

capacidad tie liberation de oompuestos reactivos del oxigeno (CRO) y oxido nitrico

Fig. 10 .23. En los seres humanos la exposition a IFN7 provoca aumento de la expresion de la 1-u-hidroxilasa; ello permite a los macrofagos transformar el 25-hidroxicolecalciferol inactivo circulante en calcitriol, un ejemplo de circuito de retroalimentacion autocrino, que incrementa aun m6s el estado de activation de los macrofagos y reduce la actividad TH1 .

IFN;, MDF, CGRP, TGF10-3, IL-4

IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII11110-

una 1 u-1litinlsil,ls .1 . Lsta Cn1in1,t Its pernlitc transtilrtmar el 2S hidroxicolecalcitcrol in :utiVO1 circulante cn su tnetaho lito ac,_ too, cl l,_a tlthidnmicmlccalcitcnll idrrnnninado tanilticn Vitarnina I), o1 calcitriol l . Los macrutagos pouch rcceptorcs para cstc tomlpucsto, (juc cjcrce ctcctos actiVadorcs adi:ionalcs solhrc cllos . 10.23) . Tamhicn cjcrcc una inicnsa rctroalinlcruacioin ncgafig tita %ohrc loos linf tcito% Ill l, V pucdc scr unor tic Ion mecanismos yuc tienden a transtorntar una rcspucsta Tl I1 cn T112 cuando no Sc contsiguc rliminar rl h:tr .isiul V I,t rcslwrst .t ntetliada poor cclu 1,1s sc croonitica . I:sta %i,t ticne una cicrta importancia cn loos seres llumanos, Va yuc la pro tfuccion tic calcitriol cn 1,1 ,arcolidoosk V en la tuthcrtulonis puctic scr tan grandc yuc cl colntpucstO %C poetic ditundir (Icstlc la zona cn la yuc sc cncucntran Ion macrofagos ac tjtados Imsta la circulaci6n pcrifcrica, protocando hipcrcalrcntia .

El calcitriol interviene en la activation de los macrofagos humanos y en la regulation del equilibrio TH1rrH2 ( uandt~ lt  i11 .1 :n1t .1~~~, humano~s sc cyomin a IFN-/ csprcsan

Fig. 10 .24. La exposition de los macrofagos al IFN-t aumenta su capacidad de liberation de compuestos reactivos del oxigeno y de oxido nitrico. Existen otros factores que contrarrestan esta activation .

v o

1 Y y
y . ~ s

t Ate.
T

Las funciones efectoras de los macrofagos estan sujetas a regulation positiva y negativa

4p

.o .

1 .1mNet1 ctislCn dat'is 'Inc indl-111 'Inc loos nta:rotap)s,utitadols pucdcn scr dc,.1 :u%ad,  I- , l , rmNk tluc la pnntaglandina E cicria CNIC ctc:tol, t algunors tic lors nlctanisntos ctccto,rcs Iaunyuc not totiosl tanlbicn son scnsihlcc a Ion gluiocortiiodtirs. Rrcicntrntentc sc ha purilicado un tactor dcsactiVador do los tnacrcitagos (1\Il)F, tic[ ingle% ntanrophtroe dcactivatiug lhitori a partir tic un %ohrom dantc tic iclulas tuntorales . Estc tactolr bloyuca l,1 actiVacicin poor partc dcl IFN7 dcl autncnto tic la capacidad tic produccilm tic ( I(() t, cn cicrta mcdida, tic eisid0 rtilriie) (_lift. 10 .24) . ()trop com1IUCSUn yuc prcscntan propictiatics parecicia% soil ll---I, cl pcptido rclatiomadol coil cl gen tic calcitomina ,('Gltl', dcl ingots raliituuingctte )ihrtrd prptld,-I t la tamilia tic citonin,ls TGFji.

Fig. 10 .25. Reaction granulomatosa en la tuberculosis pulmonar . La region central de necrosis caseosa (en la que Bran parte de las estructuras celulares se encuentran destruidas) es caracteristica de la tuberculosis pulmonar (v . cap. 26). Aparte de ella, la histologia es la tipica de los granulomas atuberculoideso cronicos dependientes de celulas T. La lesion esta rodeada por un anillo de celulas epitelioides y celulas mononucleares. Tambien hay celulas gigantes multinucleadas, que se tree proceden de la fusion de celulas epitelioides (izquierda, " 170) . En la derecha se muestran las celulas gigantes (G) a mayor aumento ( " 270) . Tincion hematoxilina/eosina. (Por gentileza del Dr . G. Boyd .)

La red de citocinas

El amilisis do: I :ts cclulas 7' do los focos gr :anul()mau)sos indi ca quo: cl ccntro do: la ICSIoll Conticnc cclulas (.1)4', nlicntras quo: la pcriteria sc cncucntra ocupada por CelUIas CI)8', to quo: sugicrc yuc las cclulas ('1)4' I'tt') tiencn un ;a importuacia (lccisj)a 11 11,1 indUCCi(in do: la aCUnutlacj(in c acti\-acj6n do ()tr()s Ijnf()Citos t de nt :ur(itagos . (;uando cstos granulonlas SC Cultivan in vitro, se (hsersa quo: pr()ducen di)crsas citocinas. parsec yuc I) :u- a yuc sit cl granul(xrla alcancc na :isinao dcsarroil() .()ii ncccsarias Ias linlbcinas Tl l I * cl I'NF(z ; ell cl moddo nlurino do intcccio ll por cs quiswsonaa tunNcn soil prCCisas algunas CitOCinas '1'112 .

riasis V Id CSCICro515 Multiple). MUCIMS \ CCCS no Se conocc cl gra do rclatiso do inaplicaci(in do los posibles agcntcs jntccciosos N do la autoinmunidad Suhsiguicntc, coma oatrrc cn cl caso do: la dcstrucci(~n do: los islotcs do: Langerlaans del pancreas quc conduce a la diabetes insulinodcpcndiente . Lesiones ocupantes de espacio . F.I mcr() tantaf o do: un granul(naa pucdc scr n():i- para cl tuncionamiento do: I()s tejidos del IIUCSI)cd . ASI, I()s gr ;uaul(nn .n quc pro) oca .11. !elms pucdcn dafiar los nerv ios sobrc los quo: se forman, \ los grantdonlas en Ia retina () en el cerebro I)ucden Causar aua(nrlalias finteion .Iles . Secrecion excesiva de citocinas . La scct -cci(')ji csccsis a do ci u)Cin;u CSl,CCialnlcntr (IL' FN hi ! puCCIC pro)ocar el sindr(i n)c dcl shock t(icji(), necrosis licnac)rra` ;icas s. hI rcaccion do Sla)cat-tznt :ut, ;Isi :()1110 Contrfluir a la necrosis presents ell las /onas en yuc se prodUCC la rcacci(in mcdiada por Milks i lenunacno do: Koch I . Estos nIccanisnt(n SC cstUdian ell Cl Capitol() 17 .

INMUNOPATOLOGIA
Ezistcn detcrntinadas ocasioncs ell las yuc un :i respuesta nacdiada por cdulas cs la causantc do: parts o do tOd1S IaS ICSI()nCs tisularcs quc aparcccn cn cl curs() de una cnfcrnacdad intCCCiosa . Tanahicn pucdc dar lugar a reaCCi(mCS autc)innuinitarLts iAq. 10 .26Y . Estos mecanismos scrin dcsa-itos con dctallc en los capitulos 26 y 28 . Citotoxieidad. Las cclulas Citot(isiCas pueden dCstruir CdUlas ~iiama esen :i .tles l) ;u- ;I la Sul)eni)enCia del IlUCyed intccladas Coil )irus, :()11x), p()r cjcntplo, las cclulas del sistcma ncr\i()so central . Cuando sc pr(Oucc cste ten(')ntcno conto resl)ucsta a Un Virus yuc por si solo no prosoca un funcionamicnto anornlal ni la destrucci(in do: I :u cclulas inteCtadas, sc dice yuc las ICSiOlICS tisul.trcs son do: origcn inmunopat()Iogico .

LA RED DE CITOCINAS Las citocinas establecen una compleja red de comunicaciones entre las cclulas ,( ()n)() .i pucdc dcscittt;mar la compleja red do intcracci(mcs
cntrc las cjtoCinas \ entcnder su I)alicl in rive? 1 I genctic,t moIccular so: laa Comcrtid() en el arnta nias util para conscguir cste ot)jctiso, .\a yuc pucdc clintinar cl gcn do: una citocina o ;it re ccptor cn stones . Esta tccnica ha pcrmitido UnifiCar las imcstigacioncs sobrc citocinas. En la flyura 10 .2,"sc mucstr;ua algunas do las obsersaci(ntcs nlds iniportantes con csta tccnica, s()t)rc todo las relacionadas coil la inntunid.Id ) la intlanlaCiOll . AIL' I IS sit() cinas, con- to I1 .-7, IFNu v 1 NF(3 idcnominado tanibicn lint'() toaina h, rCSUltan tltndanacntales en el desarrollo dcl sistcma in-

Inflantacion

cronica. Las rcsl)ucst.IS mcdiad lS por cclulas puc(icn it dirigidas contra autoantigenos f () Contra intcccioncs crip.icas n() identificadas u organismos conacnsalcs), pro)ocando una inflatna(ion cronica quo : dana I()s tCjjdos (c01110 ()currc cn I :t ;Ir tritis rcuntatoidc, la cntcrnxdad (Ic ('rohn, la SMC()id(xis, la p,()

Mecanismos inmunopatologicos mediados por cclulas 1 citotoxicidad 2 inflamacion cronica de las articulaciones inliluno complejos PMN erosion del cartilago pannus cclulas T mediadoras de la respuesta cronica de la articulation macrofago membrana sinovial inflamada

muerte celular y deficit funcional

celula plasmatica

3 lesion ocupante de espacio

4 secretion excesiva de citocinas

nervio

anomalias de la funcion del nervio

citocinas

=E

shock colapso circulatorio necrosis hemorragica

Fig. 10 .26. Mecanismos inmunopatologicos mediados por cclulas . 1 . Las cclulas citotoxicas pueden destruir cclulas esenciales para la supervivencia del huesped infectadas por virus (p . ej ., neuronas cerebrales) . 2. La respuesta puede it dirigida frente a autoantigenos (o quiza frente a infecciones cripticas no identificadas u organismos comensales), to quc provoca una inflamacion cronica, como ocurre en el caso de la artritis reumatoide .

3. Un granuloma puede dar lugar a una lesion voluminosa quc ocupe mucho espacio, provocando anomalias en el funcionamicnto de tejidos sensibles proximos, como el cerebro, la retina o los nervios. 4. La production excesiva de citocinas puede dar lugar a diversos sindromes de lesion tisular, especialmente sindromes de shock toxico provocados por TNFu .

Reacciones inmunitarias mediadas per celulas

nulniiario anus dcl nacimicnto . I . .t auscncia do otras citocinas, emir 11 . 2, IIA, 11 . 12 c IF\p, sc ixonc do manificsto cuando Iris anlnlalc% strn surnctidos al , cstrc% ., do una intccci(n . En ratrones con cicticit do II .- 12 sc ha dcnioostrado la importancia do csta utstancia para la producci6n do IF\y ~ cn la% rcspucstas do hipcrscrtsihilidad tic tiixo rctarciado nornialcs { 1)1'H, del inglcs dr " httrd tire 1npcrirusitiritl, ) . La altcracir'on tic sarios genes do las citocinas cictermina Icsirmcs intcstinalcs parccidas a la cntcrmcclad inflamatoria intestinal, lo yuc confirm, yuc la region corporal nix, cspucsta .t I .t prcsiron antigcnica cs la mucosa intestinal . La importancia antiinflaniatoria do RlFIi sc cicinucstra cn ratones

corn dclicit para ht misma, yuc dcs,u" rrollan infamaciun multifocal . En Icon ratoncs yuc carcccn do la cacicna I1 .-2Ry sc ha dcmostrado la importancia do cstc receptor como moiccula publica do transniisi6n do %males, cmpleacia poor discrsas citocut.ts . Dodos los rcsultados obtcniclos ctt cstc tctna clchcn scr in tcrprctados con cuidado. Por cicmplo, no sc puccic dcfinir con prccisicon la importancia do una citocina cn un animal adulto, Si su carcncia durantc cl desarrollo liacc yuc cl sistctna intnunitario SC .t cicticitario . Sin cnthargor, parccc probahlc LIrtC una citocina dcsarrollc, cntrc sus titncioncs rctlundantes, una ro clo% mas cspccificas, yuc justititlucn su matitcnimicnto durantc la esolucion. En ratoncs coon dclccioncs para Ices genes Jak % Stat sc ha podidco ticmostrar la intpcn-t :utcia do cstAS n1olcculas (% . antes) . Por cicmplo, los ratoncs corn dcticicncia tic St :tt- 1 mucstran dctcctos . onus csixcificos cn I .ts rcspucstas a Itos IF\ct s y, soon nius %cnsia %us 111cs la% intcccioncs siralcs, macrotagos ptoduccn 6cido nitrico de forma ticticicnte % mucstran una respucsta do tipo I'112 ante las intcccioncs . Pcrr cl centraricr, la dclecicin Ittomocigota tic lak I resulta Ictal en cl montcnto del nacimicnto, ya yuc

Ratones con deficit de citocinas o receptores de las mismas citocina/receptor eliminado fenotipo del oaten

celulas B prrrnarias ' Alteraciones en los foliculos con anticuerpos y las zones marginales Muy susceptibles a patogenos intracelulares Resistentes al shock endot6xico TNFR-1 (p55) TNFli (linfotoxina) Sucumben rApidamente a las infecciones Resistentes al shock endot6xico Ausencia de ganglios linfaticos y de places de Peyer Alteraciones en la segregaci6n de celulas B y T en el bazo Aumento de IgG serica Aumento de la actividad de las celulas T y B 50% fallecen en 4-9 semanas 100% presentan enfermedad inflamatoria intestinal Inmunodeficiencia combinada grave Baia IgE, IgG1 Deficiencies en la producci6n de TH2 Intensa disminuci6n de las celulas linfoides timicas y perif6ricas Ausencia de celulas T r8 Retraso del crecimiento, anemia Enterocolitis cr6nica Especialmente susceptibles a los patogenos intracelulares Defectos en la funci6n macrofAgica Menor actividad NK esplenica y menor expresi6n de CPH Enfermedad inflamatoria multifocal Infiltrados mononucleares masivos en 6rganos como el coraz6n, los pulmones, el pancreas y el higado Alteraciones en la producci6n de IFN7 y alteraciones en la respuesta TH1. Respuestas de tipo DTH reducidas, con generaci6n normal de CTL y producci6n habitual de IL-12

Regulacion de la red de citocinas 1 citocina . antagomstas ctrl receptor

d
receptor sNi.ir .,

IL-2

2 citocina

~~

IL-2R ; IL-4 IL7AL-7R

IL-10

segundacitocina con efecto contrano

; ;~'--

IFN-J/IFNIR

TGFI1

IL-12

Fig. 10 .27. Los ratones -deficitariosu (knockout) ban aclarado las funciones normales de las citocinas . LTC: linfocito T citot6xico ; DTH: hipersensibilidad de tipo retardado. Esta respuesta inflamatoria se produce frente a la inyecci6n cutanea de un antigeno y esta mediada per TH-1 .

Fig. 10.28. Regulacion de la red de citocinas . 1) Las molecules hom6logas a las citocinas, que se pueden ligar al receptor sin determiner la transduccion de senales, se comportan como inhibidores por competici6n . Se ha conseguido clonar el gen de un inhibidor de este tipo frente a IL-1 . Tambien se produce la glucosilaci6n inhibitoria de algunas variances de estos mediadores. 2) Los dominios extracelulares de los receptores de TNF e IL-1 se pueden soltar de la membrana y se ligan con su citocina en fase liquida, to que impide que esta alcance los receptores de la membrane celular . 3) Otros mediadores, que act6an sobre receptores muy distintos, pueden determiner efectos contraries sobre la celula (v . tambien fig. 10.7) . 4) Algunas celulas expresan molecules que ligan citocinas (deceptores), que no activan la celula .

La red de citocinas

137

Ios ratentes no pucdcn ntantar V muestran altcracioncs en las seftalcs tic IL-7, con incapacidad para gcncrar linfitcito)s . Otros as pcctos lcnotipicos tic cstc proccso sc pareccn al sindromc tic innttutodcficicncia combinada grasc iS('ll)j, en ratones N huntanos . l a red do citocinas es controlada in rim por rata scric tic sis. 10.28i : tcntas i,4 tic " t.a producci61l una citocina concreta es transitoria r esta rcgulada tic forma estrccha . " Las citocinas pucdcn actuar tic forma sincrgista o antagonista . " Las citocinas induccn o inhihcn la producciitn de otros. tic su propio receptor " Las citocinas regulan la csprcsiom canto como de los tic otros citocinas . " Los antagonistas tic Ios receptores sc uncn a un receptor cspccifico, pcro no transmtcn schalcs. " Los -decepu)res,, se tmen con un ligando tic forma especifica, pcro no trutsmitcn scnalcs. " Los do)minios cztracelulares do los receptores tic citocinas sc tic citocinas solubles . En cl chntinan \ SC uncn a Las molcculas sucro y la orina so: pucdcn dctcctar rcccptorcs sctluhlcs para muchas citocinas, title SC proxIuccn mctliantc la ro)tura cnzimatica del dominio cstracclular tlel receptor ifrj. 10_0)) . El nitel tic prexiuccic n tic citocinas t. Ia magnitud tic la resPucst,t tamhicn so: pucdcn controlar a niscl gcnctico . Por clan plo, cicrtos alclos de los genes para TNE(t c It,- I ji se asocian con cicrtos proccsos inflamatorios, laccho Clue pucdc guardar rclacio'ttt ant dif~rencias en 1 .1 pn)duccio')n tic citocinas.

6rganos suck cstar mcdiada por citocinas, aunyuc cabs dcstacar tic yuc cl control suck scr local t . no sistcmico. Atlcntas estos cfcctos directors, cl sistcma innutnitario cst;i coordinado coil to,,, sistcrnas ners ioso y cndocrino ( \-. Cal) . 131. Por cjcntplo, compartc con cl sistcma nen-ipso la capacidad para transmitir whales a trascs del cjc hipot.ilanto hipoitisis suprarrcnalcs, ~a yuc discrsas citocinas como) 11, 1, II .-6 s . T\Lot cjcrcen cfcctos dircctos so-

brc cl hipotalamo o la hip6fisis . MUtltas cclulas del sisterna in munitario tamhicn cxprcsan receptores tic ncurotransnaisorcs, opjaccos y ncuropcptidos. En Cl apcndice I I I se enunteran las funcioncs coilocidas dc ]as. citocinas dCSCUbiCrtaS laasta cstc naomento I, apcndiccj . Los co rncntarios anteriore.s dchen lial,cr dcjado claro al lector yuc di

chots datos dcbcn scr intcrprctatios coil prccauci6n . Els probable tic mtport :utria quo: alguna tic las funcioncs ciuuncradas carczca fisiologica, va clue nttrchas do cllas sc Iran deducido a partir tic cxpcrimcntos in rill .o.

Receptores de citocinas solubles

citocina

receptor eliminado

La red de citocinas desempena multiples funciones biologicas

tic
ltd

. Cl firnciona scnalati() coon frCCuCncl,t yuc la Co,-olucitin t micntot dcl sistcma inmunitario sc parcccn en machos scntidos a Ios tlcl sisterna nen Torso. Por cjenlPlo, antbos sistentas poSCCn Catic aprendizajc v tic mentoria hasadas en la comunicapacidades . ci6n intercclular, t comparten nrtrchos nacdiadores, recclitorcs antigcnos . Amhos sistcmas prccisan una red interim do ccanunicacioncs capaz tic controlar cl sistcma c intcraccionar coil otros tic oirganos . Id sistcma ncni()so disportc un ~IcahlcaCIW, I:Ios ncrtiosl para comunicarsc coil Ic)s dcmas oirganos, pcro tamhicn utt liza cl cje Ilipotalanto) hipotfisis-suprarrrnalcs para transmitir sc nalcs a la lteriteria . Po)r cl ct)tvtrario, Cl sistcnt;t innttutitario esta contl)ucsto nras0ritariantcntc hor cclulas lihrcs, coil capaciCjad fir ticspl :tramicnto : Lts intcraccicntcs cclula MULL ,()It internli!cntcs, \ soii Ion Cstar rclacio)nadas corn Proccsots tic coattunicacicnt intcrn .1 tic] sistcma Pow cl commitio), la comunicacion coil otros

enzima de superficie

receptor de citocina

Fig. 10 .29. La separacion enzimatica del dominio extracelular de un receptor Ip . ej ., los receptores de TNF, IFNI, IL-6 o IL-2 (p55)I libera un fragmento de union . En el caso de TNF ly posiblemente en otros tambien) el receptor soluble conserva una gran capacidad de union y es capaz de neutralizar el ligando impidiendo que acceda a los receptores de membrana intactos. Cuando otros receptores solubles (como IL-6R) se Linen al ligando, el complejo resultante se puede unir a otra molecula receptora de membrana para producir senales.

~C6mo influye el reconocimiento inicial de un patugeno en el tipo de respuesta inmunitaria que se ejercera posteriormente contra el mismo? Por que la mayoria de las cclulas T citotoxicas reconocen epitopos presentados por molcculas CPH de close I, los cuales son expresadas practicamente por todas aquellas cclulas con n6cleo? ~Como se complementan entre si las cclulas T citotoxicas CD8 - y NO ~Producen los desequilibrios TH1lTH2 procesos inmunopatologicos cr6nicos mediados por cclulas que danen los tejidos?

Los ratones deficitarios para citocinas sirven para entender la red de citocinas y las molcculas de comunicacion intracelular. ~Que desventajas tiene este enfoque? Parece que las cascadas de transduccion de senales induccn tanto especificidad como plasticidad en las respuestas de las citocinas. ~Se puede explicar por este mecanismo la funcidn propia de cads citocina, o tambien tiene importancia la expresion de receptores? Existen al menos tres grandes familias de citocinas: las que se ligan con miembros de la superfamilia del receptor TNF, los interferones alfa, y las quimiocinas . ~Representan estas familias una evolucion sin control) o realmente tiene importancia funcional su numero?

Colaboracion celular en la res uesta de anticueraos

/ Para qua el sistema inmunitario se active y sintetice anticuerpos es necesaria, en primer lugar, una interaccion entre las celulas T y las CPA y, a continuacion, una nueva interaccion entre estas celulas T activadas y las celulas B . / Para quo se activen las celulas T es necesaria una interaccion especifica con el Ag, asi como la intervencion de molecules de adherencia celular y citocinas . La molecule estimulante accesoria mas potente es B7 (CD80 o CD86) . Si no hay estimulacion accesoria de las celulas T inexpertas tras la estimulacion antigenica, se puede producir tin fenorneno de anergia clonal . / La proliferacioon de los linfocitos es indirecta, y es debida a la induccion de la sintesis de receptores de factores de crecirniento tras la activacion celular. Los factores de crecimiento de los linfocitos (p . ej ., IL-2) son producidos principalmente por las celulas T. / Hay dos tipos de antigenos qua induces respuestas de anticuerpos : los antigenos dependientes de celulas T y los antigenos independientes de celulas T. Las respuestas inntunitarias secundarias inducidas por los primeros se caracterizan por la produccion de IgG y la maduracion de la afinidad . / Las respuestas inmunitarias primaries a antigenos dependientes de celulas T se caracterizan por la produccion de anticuerpos de tipo IgM de baja afinidad . En la respuesta secundaria se producen mas anticuerpos, de otra clase OgA, IgG o IgE 1 y que presentan mayor afinidad . / La seleccion de la clase de anticuerpo y la maduracion de la afinidad se producen ell los centros germinales de los tejidos linfoides secundarios .

La rcspucsta dc anticuerpos constitl yc la culminacioin do una scric ordcnada dc intcracciones molectilarcs y celularcs . " Las celulas T se actiyan al reconoccr cl antigeno que Ies pre senta una cclula prescntadora dc antigenos (('1'A) . " Las celulas 'I - H intcraccionan corn [as celulas B yuc Ies presentan tragmentos antigcnicos . " Las celulas B activadas prolitcran t. sc ditercncian, dando lugar a celulas productooras tic anticucrlul . " Sc pronluccn anticuerpos v, a continuacicin, se desencadenan diycrsas resputatas innttlnitanas, cn filncicin del tipo do anticucrpta producdo . En cstc capitu1o SC cxplican loss principios do la prcsent ; citn dc antigenos % la ctxtpcraci6n cntrc las celulas B y T, jUnto t colt algianas tic las mo1ectllas implicadas y sus consccucncias, entrc las yuc so: encuentran ht scleccicin dc claw, maduracion de la afinidad N , la memoria inllutnitaria .

pendc la secucncia do acontecinucntos Clue x produce a continuaci6n : si sc active tut nulncro suficicnte de celulas l' ('l)4 - colabtaradoras (Tic 1, cs practicantentc scgilro yuc so: acllyaran las celulas li o u prcxiucira tin tenoSrncno do hipcrscnsibilidad retardada . Por cl contrario, si la activacicin dc las celulas Tit no sc Ilea a dcscncadcnar st: dcs trrolla till tcnurncno dc tolcrutcia innttlnitaria (y. cap . 14 (, no sc prcxluciran nucvos acctntccinticlltos innumintrios . Hay diversos tipos de CPA H .n 111H, 111)s tlhN1s tic :clul.t1 ,dc prcscntar antigenos, acui .urtio ~ ntLts u tHr.l s segtn 1,1 h 1ntt,t t Cl lugar en yuc el sistema innulnit,trio yucda rxl)ucsto al lnttt ;cno iniciallncntc 11 .1) . Sc comidcra yuc las Milks dcndriticas intcrdigit3ntcs (('1)11, tluc abundan en las zones dcpcndicntcs dc celulas "I' dc los ganglion lintaticos y del baits, son las celulas coil mayor capacidad acti%adora tic las celulas'I ('1)4' en rcl)<>so . Las (11)1 cxprcsan granites cantidadcs do antigenos (TH dc class 11, yuc intcraccionan coil Ies receptores dc las celulas 7' (('I'('It} t. colt las molcculas CI)4 prcscntcs en las celulas T ('1)4' i colahoradoras i . Sin embargo, Ies macr6tagos x loos lintitcitos B tanthicn cxprcsan molcculas (1)H do claw 11, poor for (Iuc cstc no pucdc scr el mouivo tic la mayor cficacia dc has (1)I Corltt<1 celulas prcscntadoras tic ,uttigcnos . Las ('I)1 estan co,nsidcracias las (TA ntas intportantcs yuc intcnicnen en las rcspuestas innulnitarias primaries, ya yuc indUiClt la prolitcracion do las celulas T con mayor eticacia yuc cu ;tlyuicr otra ('PA . Dc ltccho, ha proliteracio'tn cs till peso claw, ya (]Lie nnlltiplica Cl n tlncro tic eclulaS T cspccificas trcntc al an ti gcno, pcro no cs cl unico acontccinticnto neccsario pare yuc so: inicic una rcspucsta do celulas f. Dc la misma forma, los monocitos sanguincos (las ('PA mcjor cstudiatias en los sores hum;tnos) son capaces tic inducir la proliteracicn y la actiyacioin dc las tilncioncs colabooradoras tic las celulas I'. Las celulas B tambicn se compoortan como CPA (sc pucdcn unir a till antigenos cspecifico, ingcrido y dcgradarlo, dando lugar a pcptidos que sc asocial cots ntttlcculas ('PH do class 111 . Poor oleo, cu .uttio las ccncentracioncs tic antigeno son nasty baj ;ts, [as celulas 11 sc com'icrtcn ell las ('PA ntas cficaccs, dchido a la alta afinidad de sun receptores do antigeno i IgNi oa Ig) i, ntientras yuc [as otras CPA scncillantentc no son capaces dc capturar una cantidad suficientc tic antigeno . Ademas, en las respucstas sc cundarias, en las yuc cxistc till tt6111Cr0 clcvado de celulas B cspccificas del antigenos, dichas celulas pucdcn scr unas tic Lis principalcs CPA . t-.n las /irtunrs 11 .? ) 11 . .+ sc clwlncran Las pro o picdadcs y tuncioncs tic ]as ('RN .

PRESENTACI6N DEL ANTIGENO A LAS CELULAS T

Procesamiento del antigeno 1 ,,,cstodl- Inmalc~ tlc Via \ N, rss,ll ticlttcKtr.trtllt que solo lllta pcyucna l ill .uttigciioo inyccta(io iiitcr%icnc cn las rcspucstas innttinitarias, sicndoa cl rcsto dcgradado y cxcrctado rapidatncntc . Esto sugicrc gLlC la prcscrttaciun dc Ies antigenos cs cl Paso lirnitantc do la vclocidad tic las rcaccio>ncs inmunitarias . Sr rnticntlc por prox'csamiento dcl antigeno la degradacilln del ntisnio para dar lugar a fragnicntos pepntticos, yuc yucclan unidos a molcculas ('PI I de class I of If Ix . cap . 91 . Esto% tragmentos son cscncialcs pare ticscncadcnar la acti%acioin dc las celulas T, ethos receptores rcconoccn l ;ts sccucllcias tic antin<a,icidos dc los pcptidos alojados en los surcos dc las molcculas ('PH, en lugar tic Icts dctcrrninaritcs "" contiarniacionales,, yuc reconoccn lots anticuerpos . Para qua se activen las celulas T es esencial la interaccion con las celulas presentadoras de antigenos La intent n~ m snore Ies teltthts T y tin grul)o hctcro~gcnco dc celli las, dcnonunadas colcctiyalncntc ~eclulas prcscntadoras dc antigc non ( ( :PA l, cs el ejclnplo mejor estudiado dc las intcraccioncs cclularcs del sistema inlnunitario . Es la primcra de estas intcracciones yuc sc produce teas la cxlx)sici611 al antigeno, t. dc stl rcsultado do

.olaboracion celular en la respuesta de anticuerpos

Localization de los antigenos asociados a CPA en los ganglios linfaticos regi6n seno subcapsular (marginal) fo iCL,~os y regiones de celulas B medula celulas presentadoras de antigenos macr6fagos de la region marginal antigeno persistencia del antigeno

polisacaridos de Ficoll

(TIJ

++++

celulas dendriticas foliculares

inmunocomplejos capaces de fijar el complemento

macr6fagos clasicos celulas dendriticas interdigitantes

la mayoria de los antigenos

regiones de celulas T Fig. 11 .1 . Representaci6n esgtrematica de tin ganglio linfatico (arriba, a la izquierda) : se muestran los vasos linfaticos aferentes y eferentes, los foliculos, la region cortical externa de celulas B y la region paracortical de celulas T. En cada zona predominan diferentes celulas presentadoras de antigenos (aunque las lineas de demarcaci6n no estan bien definidas), y cada una captura selectivamente Ag de diferentes tipos, que permanecen en la superficie de las celulas durante periodos variables de tiempo. Asi, muchos polisacaridos son capturados preferentemente por los macr6fagos de la region marginal, y pueden persistir en los mismos

la mayoria de los antigenos

++

durante meses o anos, mientras que los Ag ingeridos por los macr6fagos recirculantes de la medula solo persisten durante algunos dias o semanas. Observese que las celulas recirculantes ((camufladas ,, (celulas de Langerhans), que se tree que proceden de la piel, experimentan cambios morfol6gicos en el ganglio linfatico, transformandose en celulas dendriticas interdigitantes. Estos dos tipos de celulas, asi como las celulas dendriticas foliculares, perduran mucho tiempo y establecen tin contacto intimo con los linfocitos .

Presentation de antigenos fagocitos mononucleares receptor de Fc fagolisosoma

Durante la presentaci6n de antigeno a las celulas T se producen interacciones entre m6ltiples moleculas de la superficie celular f I dimcre~ (J \ li del RA rc0)nu>:c till pcptido especiticti alcrjadrr cn cl surcrr do union al pcptido do la molccula

antigeno
i~ir sl :v~ :ifir :

clase II ,eceptor

celulas B ,, -specifica del antigeno

dc scr recc,nocida ptrr cl T(R corrcspoildicntc . Sin crnl,argo, cn esta uiteracci(m tambicn intersienen otras nt<rlc :ulas . Estc ltecho SC ticscubrio al transtectar till .1l)\ complementario fAl)\c 1 que codificaha moleculas ( :PH humanas a fibroblastos merinos. Las ccltrlnS tic raton cxhrcsaban las moleculas ( :PH humanas v trill capaces tie attuar canter ('PA huntanas, pero Coil una rficacia hastante mcnor quc la do las cdulas que cxpresnn outs moleculas importantes . U'na tic cstas moleculas, la nurlccula de adherencia intercelul :u - 1 i ICANI-1, (ICI illglcs intorccllularadhesion molccrr lt), interacciona con cl antigeno lintocitario tirncional I I+A-1, dcl inglcs hwnphocvlc functional antigenl , yuc SC cncucntra prcscnte en todas las celulas innttrnitarias . Ctiando sc obticncn cc-

CPH . La CSPccificidad inmunitaria depencie de esta interacci6n, ~a que tin I)CI)tiLIO asoustlo Coil una mo1CCUia ( .PH de till haplotipo determinado tor nta una cstructura tinica, quC sr'AO pue-

celulas dendriticas pinocitosis

Fig. 11 .2 . Tanto los fagocitos mononucleares (1) como las celulas B (2) y las celulas dendriticas (3) pueden presentar antigenos a las celulas T colaboradoras (TH) restringidas por moleculas CPH de clase II . Los macr6fagos capturan los antigenos mediante receptores inespecificos o en forma de inmunocomplejos, los procesan y exponen los fragmentos resultantes en su superficie, asociados con moleculas CPH de clase II . Las celulas B activadas capturan los antigenos mediante sus inmunoglobulinas de superficie y los presentan a las celulas T asociados a moleculas CPH de clase II . Las celulas dendriticas expresan de forma constitutiva moleculas CPH de clase II, e ingieren el antigeno mediante pinocitosis.

Presentation del antigeno a las celulas 1

Celulas presentadoras de antigenos fagocitosis tipo

mono, :i :os

expresion localization de clase II

s .jngrc

fagocitos (linea monocitos/ macrofagos)

rnacrofagos

tejidos

macrofagos bazo y ganglios (-) - + + + reg. marginal linfaticos inducible eel. de Kupffer microglia cerebro piel tejido linfoide tejido linfoide constitutiva higado

para ( D28, otras whales cclcstirtiuladoras sustitu\cn a la cntitida por ( :D28 "117 . ( :1'LA-4, un ligando altcrnatiro para B7, CS un receptor inhibiclor clue limita la aitiVacl()n do las celulas T. DC estc 1110d(1, ('D28, clue se csprcsa de forma constittttis a, intcracciona cn tases inicialcs coil 1i7, actil- ando las celulas l', pcro postcriornl.cntc la rcgulacion ;tl alza do C"ITA-4 tic nia)or afiniciad limita cl gratin dc aitisaci(in, 1a clue C l 17 clisponible es captadot p(>r csta molecula I_I%n. 11-ii . La importancia de (I - I .A-4 se demucstnt cn ratomcs deficitarios para csta n1olccula, tltlC sufrcn it[) sindrome linfoprolifer.1tj\o agrcsico-1a gLic no pucticn inactjsar tic for
111 .1

celulas presentadoras de antigeno constitutivas y no fagociticas

eel . dendriticas interdigitantes (CDI) eel. dendriticas foliculares

celulas de Langerhans

cficaz a LtS celulas T en dis isi()n . I .a n1olccula ('D2 do las ccltllas'I t:unbicn intcrvicnc cn la actirucioll tic I ;ts nlistnas, ell conjullci(in con los T(:R. (`D2 CS un receptor del antigeno linfitcitario tiulcional 3 Y LFA-3 ), clue sc encuentra en muCIIAS celulas \ en todas las ('PA . La prcscncia tie LFA 3 etc los critrocitos tic earner() es la causa tic la rcaccion

linfocitos

tejido linfoide y puntos en celulas B y T clue se prod . reacciones inmunitarias astrocitos eel. foliculares cerebro tiroides teiido vascular y linfoide tejido conjuntivo

inducible

Principales moleculas queintervienen en la presentation de Ag

inducible inducible

celulas presentadoras de antigenos facultativas

endotelio fibroblastos

- 0++ inducible -

otros tipos en los tejidos adecuados Fig. 11 .3. Muchas CPA no son capaces de fagocitar Ag, pero los pueden capturar de otras formas, como mediante pinocitosis . Las celulas endoteliales, clue no suelen ser consideradas CPA, asi como algunas celulas epiteliales, pueden expresar moleculas de clase II tras ser estimuladas por el IFN-,." , por to clue tambien pueden actuar como CPA. Otro ejemplo son las celulas de los foliculos tiroideos, clue actuan como CPA en la patogenesis de la tiroiditis autoinmunitaria de Graves .

LFA-3

ICAM-1

claw II

07 -1,07-2 1,07 (CD80/CD86)

Fig. 11 .4 . Moleculas clue intervienen en las interacciones entre las celulas T y las CPA. Se muestran las diversas citocinas y el sentido en clue acttian .

Importancia de CTLA-4 en el control tie la activation de las celulas T

h11as nitu- inas yuc cxprcsan 1110I000las ( ;PH c 1CAbl I liumanas, su capacidad para actu .1r como ( :I).N IIUmar1;IS aunlentd ContiiclCrablententc . Eli Ia,Jir)ura 11 .-1 sc nnrcstran ]as n1(tlcculas cocsti andantes title sc coloccn, asi como sus corrcspontlictltes Iigandos do la supcrficic tic Las celulas - 1 . las 111olcculas corestinitrlanres mas potentcs clue se COnOCCn Sc tic nontinan 117 I D80j c 117-? 1('D86). Fstas protcinas son cxprcstdas do forma u>nstitutita p(rr las (:1)I, PCr(1 ell los r110 nocitos, las celulas B 1. probablcnlcntc cn otr.1s (:PA soil c-xprc sadas de cal ti,rn1a title Sit sintesis pucde SCI- rcgulatla positjca nlcntc . Son ligand()s tic ('D28 \' do ,it honiologo ("FL1 4, una nlolccula yuc SC exl)rcst cn ]as celulas' I' \ cuia sintesis se increnlcnta durantc cl pr()icso de actis-acion tic dicitas celulas . Sc lia dcniostraclo yuc la C%tinlul .1cion tic ( D28 auntenta \ prolomg,a 1 .1 sintcsis tic 11, 2 \- do otras citocinas y aticntas rcsulta cscncial para cc'itar cl desarro11) tic tolcrancia . A pesar do la importancia tic la intcraccion (:D28,, 117, los rat(mes deficitarios para ('D28 sigucn rcspondicndo tretne al antigen(), atlntluC necesitan do>sis nia\ores del misnlo, lo quc indica yuc ( :D28 no cs obligatorio, ill sjdujcra para [as celulas l' cirgrncs . Parccc quc en ratoncs clcficitarion

T activation division inactivation

Fig. 11 .5 . Antes de ser activadas, las celulas T expresan CD28, clue se Line con B7-1 y B7-2 sobre las celulas presentadoras de antigeno (como las celulas B) . Una vez activadas, las celulas expresan CTLA-4, un ligando de alta afinidad para B7, clue una vez unido a este impide clue las celulas T reciban mas senales activadoras .

Colaboraci6n celular en la respuesta de anticuerpos

dc t6rmacion de rosctas (rosctas F ;E, quc cunstitucoi cl principal Sistenla dC purificacion do CCIulas T :Mfrs dC la Ipatici(in de los allticucrpos nun(:)CIon1 :11CS . l_ts moIcCUlas dcl tipo, 13,7, Clue rcllicrzun las scfalcs proccdcntcs dc los'I CR c inducctt la actn- acioin dc las CcILIIaS T, SC hall clcnominado ~.sctraIcs sccundarias .. . Las celulas T cn rcposo llo pucdcn responder en Su uusencia, yucdando inactiudas cuando reconocen a sus antigenos sin gttc se pucda produCir cl proccso dc actisacion, lot quc conduce a 1111 .1 situaciorn dc tolerancia innlunitaria . Esta tolcrancia cs cspecifica, alectando sol amcntc a las cc lulas 'I'll yuc rcsp(mCien a till antigcllo deternlinado, s . se dcno, mina ancrgia Clollal . Ademas do las intcraccioncs (]Lie Sc Pr()(ItiCCtl ell 1 :1 supcrfiCic celular, las citocinas, yuc aCtu,u1 ;1 nisei local, tambicn intcrcicnen ell la acticaCion do las celulas T . Los principalcs cstudios Sc hall ccntrado ell la I I .-1 \ la II .-6, nlolcculas produridas por dc tcrnlinadas ( : PA, cntrc las yuc SC CnCUCntran los macroitagos . Las Crlulas F no, sicnlprc prccis:ul scr Cs6r1tttlaclas por cstas nlolcculas I no Son ncccsarias cuando laS celulas sc CnCUcntran 1 a cn fast cic division i . Sin embargo, la 11 . 1 c. la 11 . 6 induces en las rclulas T cn rcposo la cxprcsio>n dc rccuptorcs dc IL-2, cl lactor dc crccinlicnto do Ias celulas 1'. IL-2 tambicn intercicnc en cl proccso dc acticacicin dc las celulas T, ra yuc colabora cn la induccion dc la simesis dc IF\ y y cictertnina yuc las rclulas T c irgencs sc ditcrcncicn en celulas TI I I . 11, 15, producida por laS celulas prcscntadoras dc antigeno, tanlbirn pucdc inducir la proliteraiion tic [as celulas '1' Y result ., fundamental antes dc quc SC produz ca IL-2 . \licutras yuc la intcraccion cntrc las Crlulas T ('l)4" N , [as ('PA Ira sido, Cstudiada con dctallc, la intcraccion cntrc las Crlulas T (IDS" \ . las ('PA no sc cono,cc tan been . C .on110 una iinica Cclula cicndritica intcrdigitante ~'(]DIl sc pucde unit- a nlnrh8s celulas ,F, sc ha sugcrido yuc la acticacioin sc podria Ilcrar a cabo ell los agrcg .ldos dc Cclul .ls 1 ('I)4' 1 CD8~ yuc SC uncn a la supcrficic de una o \arias CD1 .

INTERACCIONES ENTRE CELULAS B Y T Las celulas T y B reconocen regiones diferentes de los antigenos A hnalcs do la decade dc lyoll \ prnmpi  ~ dc la dc 1970, los cs

Las cilulas prcscntadoras dc antigen(, ,C l)cICdCn articar con ral,idcz cn Ia rcspuesta innlunituria, por cjrml)lo por la propia cnticiad inllntnogcnica i colt)() las bacterias y alglmos \-irus) o por los Con1p(mcntcs adlus- antes dc una \aCUna . La prescmaci6n dc antigenos no cs unidil-CCCiornal . Las Ccl111as 1' aCtisadas liberal Cito~cinas, Como IF\ ;i adctnas (IC SCI) .,ICs Lie Sttperficic COtllo Cl ligando, CI)40, clue facilita la present.,cioin dc antigenos . I .as ( :PA acticadas cxprcsan m :is motlcculas ('PI I dc clascs I \ II, m ;is rc ccpto,rcs Fc \ m ;is n1olcculas dc adhesion Coctillmuladotras, in cluiclas 137-1, 117-2, CD I la/b/C, WA\I-I c R :A\i-3 . Fambicn pronluCCn nuntcrosas citocinas (II .-1, IL-6, T\Pui, cnzimas 1, o[r'o,s Mcdiado>rcs . La actisaciom dc los fntilcitos genera dos proccsos : la proli1rraClo)n CClul,u" V la dlfCrenclAClo"rn a Crlulas Ctectotras . h: n cstadio,s cic ditcrenciacio'n1 tardi0s, las Crlulas Ip . cj ., las Crlulas plaSmatiCas pucdcn Ilcgar :1 tai cspccializaci(n clue pierd .,n molecules cic superliric, conic, las dc Clasc II, sicndo incepaces dc responder a scftalcs rcgulad(,ras [it dc prolitcrar. FI cicstino dc Ion linli,citos yuc rcsp()ildcn trcntc a tin :u1tigcno cs c -ariablc . Algun0s PCrsistcn ntLICll0 tienlp0 comp rclulas dc mcmoria ; los cstudios do altcracioncs cromos6nlicas Icnlaces rruzados Lie AD\ yuc csitan las mitosisi cn celulas sanguincas dc lossupcrc'ic ientes dc Hiroshima Iran dcnlostraclo quc las rclulas dC mcmo6a puCdCn sobrc\is it mas dc 40 afios . ()tros hnt6citos nntcstran una s ida corta, hccho yuc justifica quc una estinrtt lacion antigcnica m(xicrada 11(1 determine aunxnto do tamano ganglionar, aunyuc gCncrC una rCSI,ucsta mcdiadI por Crlulas c anticuerpos eficez . Cede Fez se aCUnutl :u1 mas cletos sol,re la importancia dc la apolpto,sis en la clinlinacion dc celulas no cicscadas tras una rcspuCSta ill Ill kill it .lf-ia .

La presentation de antigeno afecta al curso de la respuesta inmunitaria

tudio>s Ile\ados a Cabo po,r \litchison t' otros imcstigado>rcs Con1 protcinas m(xiificadas yuimicamcntc dicron conlo fruto importantcs avanccs ell cl conocimicnto Lie las dicrrsas furICiones Lie l as celulas T v B . Para inclucir una optima rcSPucsta SCCUndaria do anticuerpos trcntc ., till haptcno { tin grupo yuinliCO pcyuCfio yuc Solo actitu wino innrttnogeno cuando se encuentru unido a una protein, portuciora,~, tin animal de cxprrimcntaCion dcbc ser innrtulizado Con una Connbillacioin hapten0 po~rtador %, posterior tncnte, set- cxpuesto de noel o a csa misnla Connbinacion haptcnoportador, no solo al nlismo hapteno . Este tenomeno sc dcnomina -clecto portador ,, . cuando sc nlanipularon las distintas poblacioncs cclulares en cstos expcrinlentos, sc demostro yuc las celu llS TH son responsables Lie reconocer el portador, micntras yuc ]as celulas B reconocen cl hapteno 11 .0! . Fstos resultados rccibieron confirnlaci6n posterior cuando sc ciCSrttbri6 yuc las celulas 13 cnlplean los anticuerpos par, rcconoccr cpitopos, tnicntras Clue [as celulas T reconocen anti genos proresados . 1'na dc las Consccueucias dc cstc fenomeno cs clue una celttla B yuc rCCOnOZCd tin cpitopo dcterminado pucdc rccibir aVuda dc celulas T cspccificis dc di\-crsos pcpticios portadorcs ditcrcntcs proccdentcs do tin mismo antigeno, sicnlprc yuc Ids Crlulas B pucdan prcscntar dichos pcptidos a cad, una dc las Crlulas T . Sc cree Clue en las rCSpucstas innlunitarias in riro, las Celu las T yuc intcraccionall Con las celulas B c induien la di\- isi()n v prolifcraci('n Lie cstas ultimas hall Sido Cstinutladas prcliamcntc por cl contacto con cl antigeno I)rcscntc cn otras CPA f p . cj ., las Crl11las dcndriticas ;~ . De acucrdo coil estas obscrcaciones, se 11a propticsto till csqucma basico dc intcraccioncs cclularcs en [as rcspucstas dc anticuerpos, yuc SC nlUCStra ell la /iqura 11.,,. SCgull cstc csyucnla, cl antigeno clue pcnctra cn cl organismo cs proccsado por cictcrtninacias Ccluhls \, a Con6nu ;1cion, prcscntado cn una lornla altaincntc innrttnogenica a las celulas TlI v B . Las ce lulas T no reconocen lox mismos detcrnlinantes antigcnicos clue las celulas B . Las celulas '1' proporcionan ayucla a ]as celulas B adeCuadas, cstirrtulanciolas par, yuc se ditcrcncicn y dkidan, clando lugar a Cclttlas productoras dc anticticrpo . Por rant(,, los dos proccsos nccesarios par, quc sc acticc una Cclula B soil : " La interaccio n del antigeno natico coil los reccptorcs Ig dc la Cclula B . " Scnalcs cstintttlalltCS PLOCedcntcs cic las celulas '1 'H yuc rcsponclcn al antigeno proccsado uniclo al CPH .

En las interacciones entre las celulas B y T tambicn intervienen moleculas coestimuladoras

\ICdiantC Cl Cultic'(, ~ 1,1 clonaCioll cic Crlulas l Cn prcscnCia dC 1ntigcnos, ('PA c I1 .-2, sc pucdcn obtcncr p,blaciorncN dc celulas 1 especifiras de tin antigeno concreto . 1)c cstt torn), cs poosible ob scrsar directanlcntc in vitro las intcraccioncs cntrc las Conjuntos Lie Crlulas F V 13 . Las celulas 1 se polarizan,l sus rcceptores sc coilcentral , en 1 .1 Car., clue sc enticnta a las celulas B . I as celulas 13 tambicn sc polarizes, v expresan I ., mavona do antigenoS Lie clasc 11 en ]as proxinlid,uics dc las celulas T. Las intcraccioncs cntrc cstos ,,ruI,os dc Crlulas sut;icrcn yuc cxistc till intcrcanlbio mask o dc informaci6n, clue Conduce a cios acomccimicntos impo,rtantcs dentro dcl Cirlo Vital de IaS Crlulas B : la indIICCi(in Lie la prolifcracion V la difcrenrieci(in, Clue da lugar a celulas ProduCtoras cic antiCUet1ao . La intcracci6n cntrc ]as Crlulas T y B CS tin IVOCCSC, bidircccional, cn cl yuc las celulas 13 presctuan cl antigeno a las Cilulas T \, a sit cez, reciben scnalcs pro,ccdentcs dc estas ultimas clue incIUCCtI sit dis- isio n \, ditcrcncie.cioin . La intcraccion principal, altamcntc Cspccifica, CS la yuc Sc produce cntrc Cl ComPlcjo naolcCtlla CPH cic clasc 11-antigen() v cl TCR ; csta intcraccion sc \c potcnciada por las intcraccioncs cntrc I .F:\-3 c . CD2 c IC : :141-1 o

Colaboracion celular en la respuesta de anticuerpos

contcntador LIUC 1 .1 intcraCCioin rntrc ] .IS ( :1'.\ t. I ;ts Cclulas T puctlr loin d(rs r(rnSCCUCrtrlas diamctralmcntc opacctts : la ,KtitaCio ll or la dcsactitaci6n i ancr`aia clonal i dc las cclulas I -. 1)c la misma for 111J, hat rnacha, (xasiones ell title las cclulas B SC tornan ancrgicas. Este Itccho cs intportantc, tai yuc la ntaduraciom tlc la afinid :td de las cclulas B ell cl cursor dc un ;t rrspircsta inntunitaria, dcbida ;t la rapid,t nrutaCi6n de los genes yuc CordifiCan Lts regiorncs tariablcs (IC los antiCUCII)oa, pordria dar lunar tacilntcntc ;t autotantiiucrlxx Lie alta aiinidad . La ancrgia clonal t otras fitrntas dc tolcrancia pcriterica corn (1n ntccanisnto intportantc para critar CI Licsarrollo tic cstos cktncs poxcnrialmentc noritcx. Sin embargo, no sc conoccn loss Cictalles nt0ICCUI .u'es sic cstc proceso.'I ampoco se sabc yue 41116611 dcsentpenan la Ig :\1 s lu Igl) i los receptor" dc antigeno dc 1 .1" cclulas Bl ctt estc proceso, sat yuc parece yuc antbots receptorcs son capaccs dc tr;uismitir antbos tipos dc seftal .

1(' AM 3 t ITA 1 i~~rt . 11 .8y . En cl procccor intercicncn tanthicn on,te nxrlcCUlas dc la supcrficic celular. Isis antigcnos dc supcrficic B--1 B?-2 tic las Cclulas B intcraccionan coil (:1)221, coil to . clue cl ARNnr tic las cclulas -F yuc codifiCa 1 .1 II, -2 s otras citorci nas Sc rstabiliza, \- cl emior dc scnalcs actitad(n- as sc prolonga. En la actualidad sc sabc ciuc la molccula ('1)40 transmits a las cclulas li la serial acticalora ntas potcntc, sicndo csta serial ;tint ntas intcnsa yuc la yuc sc transntitc a traces tic la ill nttutoglobulina tie superficic . I.a s Cclulas'' actitatf ;ts cxprcsan tr;utsitoriamrntc un ligando yuc intcracriona coil (:1)40, dcnomin:uio ('I)40L. 01)4(1 pcrtcnccc a la lamilia dc receptor" de TNF, micntras yuc ('1)4111 . c% un paricntc lejanot dc la Iamilia dc TNF. La inicraccion hacc yuc I :ts Ccluhts li inicicn CI COO cclulas, sicndo 1111, schAl fiutdalticntal par, CI Liesu-rctllct dc Iox Ccntr(ts gcrntinalcs t dc las rcspucstas tic anticucrpos frcntc a antigcnos ticpcndicntcs dc las cclulas T. El Silldl-0111C tic Infer IgM, ill) Cuadror dc irununoaleficicncia, sc dcbc a una mtrtacio'm do (')401 . t ell cl las cclulas l' not ccntsigucn atud,u . a las cclulas B, Con la cortsiguientc proxiuccion dc anticuerpos Ig\i tic baja afiniciad, sin poxicr pasar a producir anticuerpos tic nt .n(rr afinidad dc tipo IgG or IgA. 1)urantc las intcracciornes erase his cclulas 11 \ T, la IihcracioSn dc citocinas dcritadas do las cclulas I cosmos 11 .-4 Sc polariza hacia las cclulas 11 . 1 .a I I .-1 N la 11 .-6 yuc lihcran algunas Cclul.ts B A111101tan la cq,rcsilnt dc los rcccptorcs tic IL-2 tic I ;ts cclulas 'I . Sin cntbargo, conies solamcntc ah~tmas cclulas B I,rcnlUCen Cstas citocinas, cs probable clue la matoria dc las cclulas B s6lo paccian actitar cli Caancnte cclulaN T Cstinxrladas prc\ iantcntc or dc mcnutria . h,n imcstigaCiomcs Ilct,ttias a Tabor rccicntcmcntc sc ha obscrtado yuc las cclulas T ( :114' f marinas humanas i sc puccicn clasificar en tarias subpoblacioncs, scgun ]as citocinas yuc produccn it . cap . 10 " Las cclulas'- ('1)4' yuc produccn 11 . 2 c IFN-(, pcro clue nor produccn 11 .-4, sc dcnominan FH I, c son Isis principalcs causantes dc las rcspucstas tic hipcrscnsihilidad tic tipo rctardado. En cl rat(in, tanthicn pucdcn colaborar roil las Mulas 11 ell I'll prorducciun dc IgG2u, peso no en la dc: Id Cd ni Iv . : " l,as cclulas 'I - (;1)4' yuc produccn 11 .-4 c 11 .-5, pcro ciuc no proniucen IL-2 ni 11 : Ny, sc denominan '1'112 . En ratoncs son arias cclulas yuc colaboran milt cficamtcntc ell la producciun dc anticuerpos, cspccialntcntc It GI c IgE. " r\tUCIMS cclulas T, cspccialntcntc cn loss sores humanos, prcscnt:ut un pcrfil dc prordLICCio'm dc citocinas intermedior, \ sc dcnorminaut cclulas'1t(l . Sin embargo, cn loss scrcs humanos sc halt dcscrito cclulas l H 1 t TH2 clasicas, sobrc todo cn tcjidos cnfcrmos . La secreci6n de citocinas por parte de las celulas T y sus efectos son importantes para la activacion de las celulas B
llurant~ lay iirlCl-.lCCi(rncs CIttrC lts tc1ul;s'1 t B, I .s [ ,sinless pile dell sccrctar ditcrsas citocinas, clue cjcrccn potcntes acciones sr brr Ias cclulas B . Algunas dc cstas citocinas sons la It, 2, un in ductorr do la prorlileraciorn dc Ias cclulas B t 'F ; la 11 . 4, yuc actua en las primcras Eases dc la activaci6n dc la proliferaci6n sic las cclulas B; la II .- ;, yue cn cl rat(in (peso no en los sores humanosl . CS tut potente aCtitador Lie ],IS Cclulas B, t la 11,-6, yuc transmits intrns;ts Whales yuc promuctrn la cfitcrcnciacion dc las cclulas 11 i.l q . 11 .9, . I .as cclulas T tantbien produccn TNFu t TNF(i. EXisten dators yue indican yuc rstas nto1eCUI :s tanthicn soil im portantcs par, cl crecimientor dc las celulas 11 . ()tras citocinas chic actitan a las Cclulas B inClutrn l l .-1 I e 11 .-13, Cut, arri('m Sc parccc a la tic II .-4 . r\1a s adclantc sc C(mtcnta cn dctallc la impor tancia dc has citocinas en la actitaci6n dc las cclulas li y T.

Los antigenos independientes de celulas T no precisan la colaboraci6n de las celulas T para estimular a las celulas B

I as rc~l , m,t .m inmnni ; .wi .ts trcntc .t l .t m.tcorri,t (!r lon anti~enm depcndcn dcl Iccommmicnn, dc dich() antigen() tanto por parts dc las cclulas F conto por parts tic las cclulas B . Esters antigcnos sc tlcnomin;ut antigcnos dcpcndicntes de cclulas -f (T,f,., ) . Sin cnt-

Fases de la activacion y desarrollo de las celulas B

activacion

division celular

diferenciaci6n

IL-4 IL-5 (rat6n) IL-6 IL-10 IFN,

Las interacciones B-T pueden sec activadoras o desactivadoras (anergizantes)

I, ;t dcscripcioin 1-rah/add Irastd rstr momcnt(r de Ias intcraccio, nrs B T strgicrc yue la unica ccrnsCCUencia posible dc las misnms es la actitacio'm dc las cclulas B . Sin embargo, csto no cs asi. list Itcnto%

Las celulas B pueden sec activadas por el Ag o por celulas presentadoras de Ag (CPA), como los macr6fagos, en presencia de IL-4 e IL-1 . Esto provoca la expresi6n de receptores de IL-2 y de otras citocinas . La division celular es un proceso dependiente de IL-2, IL-4 e IL-5 (en los ratones) . En la figura se muestra solamente un ciclo de division, aunque en realidad se suelen producir machos de estos ciclos . La diferenciaci6n para dar lugar a celulas productoras de Ab (AFC) depende de la presencia de IL-4, IL-5 (en los ratones), IL-6, IL 10 e IFN, .
Fig. 11 .9.

Fase de la comunicacidn intracelular durante la activacion de los linfocitos

bargo, exists una pcyuciia cantidad Lic antigenos quc PUCdell aCti\ar lax iclulas 13 Sin yuc sea prCCisa la colaboracioin Lie lax cclulas T, a lox quc Se denon11in;t antigenos indCpenLiicntes de MULLS T IT,~,,1 . Los anrigcnos T, -, p,rscntan una scric sic propicdadcs conttnlCS i_h_4. 11 .101 . En concrcto, todos cllos soil grandcs polinlcros coil dctcrntinantcs antigcnicos rcl)ctido), . A altar conccntraciones, muchos dc Cllos son capaccs do actiur Clones tic iclulas B cspccitico)s do otros antigenos, Icnontcno yuc sc (Icnottuna acti)' :tiioin poliClontal Ll0 lax cclulas B; sin embargo, a baj;te conCCntracioncs Soil() -,oil CapaCCS tic actual- I :ts iclulas 11 especificas tic cllos misnx)s. Jluchts Lie Ios anti h- , ,()it cNpccialntcntc rcsistcutcs frcntc a la dcgradacidn `y la ntavorta son do origcii till crobiano) . Como hidratos do carbono bactcrianos fticstrano, Ictanol t . protcinas bactcrianas {flagelina o cndotoxinal . Las respuestas primarias de :utti000rpos lu Vitro frcntc a Its anrigcnos T , suclcn set- algo mar dchilcs quc lax yuc sc obscrcall frcntc a lox :uttiucnos T, , alcanzan sit inicnsidad maxima algo mas rapidanlcntc t. son fundantcntalntCntc dc ripo It !si. Sill Cill bargo, lax difercncias cntrc lax respuestas secundarias frcntc a :illtill Cnos 1,;,~' '1 son ntas aCUSndas . I .a s respuestas secundarias frcntc a lox antfgcnos 1 ,, son 111u\' pal -CCidas a lax respuestas primarias frcntc a Its mismos ; por cl contrario), lax respuestas scout darias frcntc a Its antigcnos T 1_ son mucho alas intcnsas quc lax primarias, t. suclcn scr do naturalCZa IgG iJirt . 11 .11) . Por tanto, parecc quc lox antigenos T ,, no induicn la rcslntesta do maduraii6n Clue sc obscr a en cl Caso dc It)s antigenos -I` ., . .,, r Clue ConLIttCC a la Commutaci(in a la ilasc IgC; y al auntento) dc fa afinieiad dc Ios alltiCUcrpos poryuC not Sc actita (:D40 . La indUCCiun Lie ntentoria por parts dc lox antigenos 1 , tantbicn CS rclatit animas hntitada . No sc comprcndc clarantcntc cual cs cl mccanisnto ntccliantc cl yuc lox antigenos T c1CsctlCALiCnan la rcsl)uCStt L1c celiflas 11 Sill nccesidad dc colaboracibn por parts Lic lax cclulas TH . Es proba hlc yuc la rstructura l)olimcriia do lox antigenos 'l , Its l)crmitt entrecruzar lox rcicptorcs dc lax cclulas B; cste pro ccso sc t cria lacilitado pin' sit rcsistcniia a la d0gradaci6n . La posibilidad do iniciar una rcspucsta innttinitaria sin neccsidad de yuc SC estaNCZc :ut Contplcjas intcraccioncs cclularcs ), por tanto, alas rapidantcntc, confrere una serif dc tcntajas para la supcrci)cncia dC tin organisnio . Muchos antigenos bactcrianos sc contportan dc Csta ti)rnta poryue son capaces do induCir la l)r0LIuCCimt do lax citocinas I IA, IL-6 TNFu pot- parts dc lox ntacroilagoN . La corta Liuracioin Lic la respucsta y la auscncia do pro)dLICCioin do Ig(, pucdc

tier dCbida a la .tuscniia tic u)cstimulacilm por ( :1)401, c dc IL-2, 11 . 4 c l1 .- ;, citocinas yuc produccn nornlalnlcnte lax cclulas T coma rcspucsta a lox antigcnt)S 1 . ,;:. Los Ag T,,,, suclcn actit- ar una subpoblacio)n dc cclulas B Clue cxpresan CD5 (B1 ), nlas pre) alcntc en cl pcritonco.

FASE DE LA COMUNICAC16N INTRACELULAR DURANTE LA ACTIVACION DE LOS LINFOCITOS

1?I Con1l)Icjo 1 C;R pucdc transmitir ntcnsajcs al interior dC la CCs, lax lula . l as molcculas inlplicadus en cstc proccso suit C;D3y . CdLlenaS ;; V tl ~ la cnrinta l) ;6i', LIHC sc cncucntra unida a lox dontinios intracelularcs L1c C:D4 c C'D8 ip56" significa cinasa lintbcitaria espcCifica dc 56 kdal, del inglcs 56 iv1al h , mphot_rte-Spccitic kirzase) . Ell la aCtualidad se sabc Clue lax iclulas B tantbicn ;M e IF;D do cxprcsan una tantilia dc molcculas Clue SC 111101 a lax I` supcrficic, intcr\inicndo 011 cl proccso dc trutsdLICCio)n do scnalcs () cap. 6) .

La activacion es iniciada por action de lax tirosina cinasas

V

El rccontocinticnto) dc tin a)tttl)lijo) anti~'cnt) ( PI I l)  r cl 'lY'R la union Lic nto1CCUlas COCStintuladoras dCSCnCaLiCn ;t till Sistcnta dc transmision dc scti ;tlcs dentro dC la CClttla '1 . Ut10 Lie 105 printcros acontccimicntos cs la fosti)rilacioin dc la tirosina, ntc diantc ti rosina cinasas dc la familla src, sohrc tOLIO Ick ligada a (D4 y tvn yuc tusfi)rila sccuencias diana I)rcscntcs en la Cadena (tambicn prcscntcs ell IG(x, Igfi y FgiR), tantbicn dentminadas sccuencias do actitaci()n do inntunorrcccptor basadas ell tirosina i, 1 I AM, del inglcs immuuorcccptor ttrosiuc-based aitiratiort urotilc' . La tirosina cinasa ZAP-70 s0 liga a I1'A41 t, sc Sit actica, acti)ando a tCZ a la ti)sfolipasa ( ; Clue descncadcna una tr,tnSttliSioSn Lte SCnalcs en la Cclula . Las scitales provia Chisica dc . ccdcntcs dC 1'( :R c (:1)28 cst;in intcgradas IJ~tj . 11 .121 t acti)an transcripci6n latcntcs (conlo NF-AT ) NFKBI, a lox ttctorcs dc prescntes en cl citoplasnta, clue nligran hacia el nuclco), LitinLlc actlian sobre lox genes necesarios para la actiNacioin do lax Celulas T, incluidos lox genes de IL .-2 e 11, 2R . DCSpttes do producirsc IL-2 sc inicia la dicisi()n cclular, tras su uni611 coil cl re ccptor .

Antigenos independientes de cclulas T antigeno lipopolisacarido (LPS) Ficoll dextrano levano poll-D-aminoacidos flagelina bacteriana polimerica Fig. 11 .10. Principales propiedades quc presentan en comun algunos de lox Ag independientes de cclulas T (T, ) mas importantes . Los Ag T,,,, inducen la producci6n degas citocinas 10, TNF e IL-6 por parte de lox macr6fagos . (Nota: tanto lox poll-L-aminoacidos como los mondmeros de flagelina bacteriana son Ag T,,,,, to quc demuestra la importancia de la estructura del Ag con respecto a la dependencia o independencia de lax cclulas T .) polimerico + +++ ++ ++ +++ activacion policlonal +++ + + resistencia a la degradation + +++ ++ ++ +++

C mparacion entre las respuestas inmunitarias se undarias in vitro frente a antigenos Tdep y T nd

exposi ion secundaria al antigeno cclulas formadoras de placasi 10' cclulas

Fig. 11 .11 . Las respuestas secundarias a los Ag T,, son mas intensas y generan mayor cantidad de cclulas productoras de IgG, de acuerdo con el n6mero de cclulas formadoras de placas (v . cap. 291 .

Colaboracion celular en la resptiesta de anticuerpos

l .n 1aNCClul .(~ B, l .t funci()n tic ( 1)3 CS rrtlizada IN(( I (~ C l`li, clue tanabicn PrCsentan secuCncias ITAM en sus colas Citoplasnaaticas . l .os enlaces ca-uzados tic las lg tic supcrficie actinan las cinasas tic la ell familia scr, sobrc todo h n cl case tic las celulas li, aunquc tana. hien h n s hlk. Ss k cs analoga a ZAP- ;'0 ell la CClula'I' \ se liga cola Lts I1 1M t6stitriladas do low c lgfi, activando una cascala tic Cinasas y provocando ht translocaci6n tic tactorrs do transcripciuaa nucleares analogos a logs dcscritos para Isis Cclulas T (Arf. 11 .13'h . La aCtn-dCioin tic la celula 13 tanabicn se \e aunacntada por cl Cona l)Icjo "~corrcceptor, compucsto por trcs proteinas : cl receptor 2 del conaplcnacnto (( :R2, ( :l)21 ), (J)19 y la diana tic anticucrpo

La activacion de las celulas B y T sigue unos patrones similares

las B come al conalplcmcnto (:3d a ( :R2, liroduciendo la tosforilacion tic la cola citoplasnaatica do (a19, quo tunhicn se une a las cinasas. Parccc hrobablc quo la hrcscncia do cstas cinasas ccrca del receptor tic las Cclulas B taciftc la activacion do las Cclulas B, so~bre todo en prescncia do una concentration baja tic antigeno .

antiproaliteratko i1'Al'A 1, (,1)81 i (tJq . 11 .1-1). Se sabe quo: Las celulas folicularcs dcndriricas rcticnen cl antigeno ell su supcrficic tic tic dtn-antc pcriodos prolongados ticnapo en forma inmunoconapleios ~ icosomas'I * clue Cl antigeno tic dichos contplejos se pucdc unir tanto a la innaunoglobulina tic superficic de las celu-

La sepal de activacion se integra tanto a partir del receptor antigenico come de las moleculas estimuladoras

Senales intracelulares en la activacion de las celulas T

CD45

CD4 complejo TCR

T(ulacm n() CNta Clar(, yuC ~C C(n~idCra HIM >CH.tl alttIgCniCd CtlC .u . Ell CI Caso do 1 .1 MULL 1 n(o ba>ta Con un IV R unicoo, hero cl nu mere exacto tic intcracciones pucdc depcndcr de L is seiaales cstinauladoras do otros fnhtcitos v del tipo \ cstado do actinacion do las Cclulas T quo: Sc descc cstinuilar . Las celulas T nutrinas hibritic das +resultantcs tic la fusion una celula T normal V una Celu la T tumo ral i sc actinan Con tacilidad s' para quo esto succda sc nccesita quo una (TA cticaz fun macrotagoi Ilcs-c naffs tic 60 conaplejos fi-agnacntos antigcnicos-('I'H do class l l, naicntras quo una CPA dcbil, C(nao un fibroblasto tic class II transfcctado, ncccsita 5 .000 complcjos tic cstc tipo . ESlndlos recicntes han sugerido que se neccsitan unas 8 .000 naotlccnlas tic T(At para intcraccionar con los complcjos (;fHl,eptido y actisar los clones tic celulas 1, segun se dcnaucstra por su perdida ell la supcrficic do las celulas T. (;onao las intcracciones T('R-(PH Son do baja afinidad, un conahlcio pcptido-('I'H

Ick dominii=

Sefiales intracelulares en la activacion de las celulas B

ZAP-70 l

activacion de los factores de transcription

i genes precoces intermedios -------------

gel de IL-2] -

Fig. 11 .12. La activacion de las celulas T conlleva la transduccion de senales desde el receptor de las celulas T y CD28 . CD4, asociado con el complejo TCR, se une a la cinasa Ick. Las cinasas se activan mediante defosforilacion, posiblemente a traves de los dominios fosfatasa de CD45 (antigeno leucocitario comun) . Entonces Ick puede fosforilar los dominios ITAM de las cadenas X . de CD3, to que les permite unirse a otras cinasas, incluidas fyn y ZAP-70 . Fyn activa la fosfolipasa C (PLC), que determina de forma indirecta la liberation del calcio intracelular que se Line a la calcineurina y activa los factores de transcription . Mientras tanto, ZAP-70, fyn y la cinasa PI-3 (PI-3K) (asociada con CD28) integran las senales a traves de la cascada de las cinasas citoplasmaticas, que tambien activan factores de transcription especificos. Estos factores se translocan al nucleo, donde activan los genes, incluidas los genes precoces intermedios)" de la division celular y el gel para IL-2 .

integration de las cascadas de las cinasas Fig. 11 .13. La activacion de las celulas B es parecida a la de las celulas T. Si se produce entrecruzamiento de la Ig de membrana (por un antigeno independiente de T), se activan las tirosina cinasas, incluidas Ick, lyn, fyn y blk, que fosforilan los dominios ITAM de las cadenas Iga e Igl3 del complejo receptor . Posteriormente estos pueden unirse con otra cinasa, Syk, que activa la fosfolipasa C, que actva sobre la PIP2 de la membrana generando IP3 y diacil glicerol (DAG), que activa la proteina cinasa C. Las senales de otras cinasas se transducen activando los factores de transcription nucleares.

Acciones de las citocinas sobre las celulas B y T

Complejo celula B-correceptor

complejo celula Bcorreceptor

Syk

.'avJPI-3K

podria actkar nairltiples TCR. Es posiblu que ]as cclulas T trarastorrn ;ad:as, cotnao ell Ion hibridoamas, neccsitcn mcnos actuation TCR. En prcscncia tic una serial COCStira1tilad0ra, corn, Id union tic Cl)28/B', basta con la actisaci6n c intcrnalizaci6n tic 1 .500 l ( :R para quo: sc actiarn los cl()iacs tic celulas T. Este tip() tic inlorniaci6n no csti disponiblc pare Ios antigcnos dcpcndicntcs tic las celulas T tluc actuan sobrc las celulas B, la unit>n tic tin antigeno indepcndicnte tic las celulas T coil tin solo rcCcptor no cs suficicrac, pcro no se dislxanc tic datos comparaI*Ics coil los descrit(ts antes para I ;as celulas T. Las intcracciomes con cl lit R o la inrnunoglobtrlina tic mcnabrana no pucdcn mcdiar tic forma aislada una sciral tic actin aci6n Positisa para las celulas T o B, c inCluso cs dudoso que results sufiCicntc Como) scnal ncgatita o tolcrogcnica . En cl naonacnto( actual se tree que la actitaci6n lintoidc exige una serie tic in tcraccioncs, cada una con .,it propia funci6n tic connrnicaci6n, tic niodo que las molcculas cocstimuladoras, conio ( :l)2, C1)I la/CI)18 no solo son rcsponsablcs tic la uniirra, sino que tambien participan cn la transnaisi6n tic sciaalcs a tra\cs tic Soils donainios citoplasmaticos . Sc sabc que la dclcci6n cxpcrinicntal del doniinio intracitoplasniatico tic (.I)2 intcrficrc con la actitaci6n, sin naodificar la funci6n tic adhcrcncia .

Fig. 11 .14 . El complejo celula B-correceptor estc constituido por CD21 (el receptor del complement, de tipo 2), CD19 y CD81, una molecula con 4 segmentos transmembrana. El antigeno que Ileva unido de forma covalente Cab o C3d puede determinar enlaces cruzados de la Ig de membrana con el CD21 del correceptor, reduciendo en gran medida la necesidad de antigeno para que se active la celula . CD19 se puede asociar con tirosina cinasas, incluidas lyn, fyn, Vav y la cinasa PI-3 (PI-3K, cf CD28 de las celulas T) y la formaci6n de enlaces cruzados en el receptor determinar fosforilaci6n de las cadenas Igu e Igli del complejo antigeno-receptor, con reclutamiento y activation de Syk.

Los mit6genos y los superantigenos tambien pueden activar a los linfocitos

Diferencias entre antigenos y superantigenos

antigeno superantigeno TCR

La actnaciorra do Las celulas I \ li se lia cst(rdiado mcdiauatc La urilizacio~n de nait()gcnos, unas naolcaIlas capaccs tic cstinurl .u - a lots linti)cito(s cn ausencia tic ;us correspondicntcs antigenos . La matic las Celulas '1' son cstinaxrladas por la ftolacnaaglutinina tic ( PHA, del inglcs pln-tobnctruiijgliitini;t), cstr.iida la alubia raja, tic tic la concana\ alina A i Con A), que procedc la semilla riciSit no . niccanisrno tic actuaci6n SC laa cstudiado a tondo, a . sc sabc que estos comptacstos se Linen a molcculas tic la supcrficic tic las celulas T Clue cstan rclaCionadas con cl proccso tic actisaci()n (p . cj ., TC,R v (:1)2 ) . tic Los superantigenos soil (Lima grup(t molcculas capaCC% tie actisar incspccificanacntc a las celulas 1 . I.a naacoria son tic origcn bacteriano, a . Cntrc Cllos SC cnCUCntran las cntcrotoxinas cstafilotic aititas f tausantcs tic alguno, tip( toxointccci6n alinicntaria ), la toxina tic] sindronic del shock t(ixico (causvatc del shock septicoL inducido p(ar tamp(>ncs ), la toaxina tic la dermatitis cxtoliatita \ algunas protcinas \iricas . Ions superantigenos sc until a las rnotlcculas (PI 1 tic class I I tic las ('PA a. son rcconocidos por Ions IVR, pero tic una forma ditercntc a condo soil reconociclos

los conaplcjos C:PH tic class II-antigeno . Los superantigenos so lanacnte interaccionan con la cadcna VIII del IVR, pero esto es sufcicnte para Clue Ins cclulas T sc acticcn (_fiti . ll .L5i . Scgun las condicioncs experimental", los etectos soil los naisnaos que provoca cl antigeno : o SC CICSCncadcna una rcslrtrcst.i innaunitaria o So: produce till tcnonicno tic anergia clonal .

reconocimiento del peptido antigcnico en el surco CPH: son necesarias Va, J(x, Vli, Dli y Jfi baja frecuencia de celulas especificas del antigeno (<0,01o)

reconocimiento irnicamente de Vii alta frecuencia de celulas especificas del antigeno (-10%)

M ACCIONES DE LAS CITOCINAS SOME LAS CELULAS B Y T

IL-2 es fundamental en la activation de las celulas T
I a pr(>lileraciom lint6citica Cs till pn(ccs(r c(miplicad(t C indirccto> . 1'()r CjcnII)k(, la cstinutllCi(in tic una CClula 1' por Lrtia ( :P.\ :ua hate title autoniaticanicntc los linti)citos prolitcren . Ulm intcraccioin cficaz coil TC :R hate que se I,roduZCl una cadcna p55(1 del rCCcptor LICI factor tic crecinaicnto tic la celula T IL 2, que, jun for con las caticnas p-/5I3 v Y, tornian till receptor tic alta afinidad ;lip I1 .16) . En todas las celulas l', la actuation dc'l'( :R ( para 11 . 2 . tambien indUCC la producci(in tic citocinas . En la maaoria tic la . Cclulas T CI)4' a- algtmas C1)8' se sintctiza tic forma transitorria 11, 2 durantc 1 2 dins . b,n estc pcriodo, la intcraccioin tic II .-2 tom Sit receptor tic alta afinitlad detcrmina crccinaicnto \ actisacio'~n tic las celulas T. La cxprcsi(')il temporal del receptor tic alta

Fig. 11 .15. Normalmente, para que los peptidos antigenicos activen los TCR, deben ser procesados antes. Sin embargo, los superantigenos, como las toxinas estafiloc6cicas, no son procesados, sino que se unen directamente a las molcculas de clase II y a Vli. Cada superantigeno activa tin conjunto de celulas T que expresan una cadena VII determinada. Esto depende del segmento genico Vli que utilise cada celula para codificar su receptor .

Colaboracion celular en la respuesta de anticuerpos

Estructura del receptor de alta afinidad IL-2

Proliferation de las celulas T

' IL-2 -li 75 kdal

55 kdal

afinidad a 10 1 M afinidad o -13 10 ' M afinidad fi muy baja de forma aislada numeros aproximados por celula en reposo activacion maxima cadena a 0 50 .000 cadena lt 500 5.000 afinidad 11 13 -10" M IL-2R

cadena 5.000 5.000

desaparicion tie los receptores

LI

Fig. 11 .16. El receptor de alta afinidad de IL-2 esta constituido por tres cadenas, cada una de las cuales puede unirse de forma debil por separado con IL-2 . Las celulas T en reposo no expresan la cadena u, pero una vez activadas Ilegan a expresar hasta 50 .000/celula (maximo), algunas de las cuales se unen con la cadena l3 para formar el receptor de alta afinidad de IL-2 .

Acciones de IL-2

activacion de las OlUlas NK

activacion de los monocitos

Fig. 11 .17. Las celulas en reposo no sintetizan citocinas inductoras del crecimiento de las celulas T (IL-2, IL-4 e IL-7), y expresan pequenas cantidades de receptores de estas moleculas. Se detectan algunos receptores de IL-4 e IL-7, pero no de IL-2 . Solo esta presente la cadena p75 del receptor de IL-2, que presenta baja afinidad . La activacion induce la sintesis de la cadena p55, que se une a p75 y da lugar al receptor de IL-2 de alta afinidad . La activacion induce la production y traduccion del ARNm de IL-2 e IL-4 . La secretion de estas interleucinas y su interaction con sus correspondientes receptores favorece el crecimiento. Esta estimulacion puede ser de naturaleza autocrina (sobre la propia celula secretora) o paracrina (sobre las celulas vecinas) . En ausencia de estimulacion antigenica, la poblacion de receptores de IL-2 se reduce, to que conduce a la finalizacion de la fase proliferativa de la respuesta.

NK

activacior,

promociorcl r la divisior

y,,

promotion de la division y ' , de la ! liberation de mediadores (p . ej ., IFNy)

Fig. 11 .18. IL-2 es producida por las celulas TH . Ademas de su papel esencial en la promotion de la division de las celulas T y en la liberation de mediadores como el IFN7, IL-2 tambien potencia el crecimiento de las celulas B. La activacion de los monocitos y de las celulas asesinas naturales (NK) son procesos importantes en la amplification de la respuesta inmunitaria . En los pacientes con carcinoma de celulas renales, los precursores autologos de las celulas NK pueden ser activadas in vitro con altas dosis de IL-2 (1 .000 Uliml), dando lugar a lineas celulares denominadas celulas asesinas activadas por linfocinas (LAK), que se utilizan en el tratamiento experimental del cancer .

atinidad para 11, 2 durante s6lo I seniana LIeshucs do la cstimulaciiin dCl 'IVR pcrmitc limitar cl crecimiento de Lis celulas T, to mismo yuc la ausencia de sen;tles pc>siti%as induce la ape~ptcrsis do ]as celulas sobrantcs . En la Jrgrrra 11 .1-sc resume CI I,r000SO do aciisaci(in de Ias celulas T. 11 .-2 es producida p<~r ]as celulas T (('1)4' sabre todo, aunyue las ( .I)8' V los linf(1C4l)s grandcs granulosos tambicn la pro~du ccn i. Actua sohrc un rant go rcstringido do celulas, Ilrincipalmcnte celulas T (dc todos Ices tiposl, para Ins yue constitu\'c cl factor do crecimicntr~ acti\adO r mas potente 11 .M . I;uTnhicn ac tua sohrc los I .G(i v Las celulas B, inducicndc~ su crccimicntc~ ~, di fcrcnciaci6n, y actisa a los mact-6fagos s- posiblcmcntc a I()" ()Ii gpdcndrocitos. 11.-2 SC utiliza cn Cl trttamicnto csl1crimcntal del

Acciones de las citocinas sobre las celulas B y T

cancer, cspecialnicntc cn cl cancer do celulas renales. LOS bcneficios clue aporta ell estas sitttaiitn,es Ixtcden set- dchidos a la acti tacion dc muchas celulas capaces dc ejcrcer acciones citotoosicas antic.uaccro,sas, coma, por ciemplo, Las celulas ascsinas actiVadas por linh,cinas ( LA1 ;, del ingles lastphokiuc-iiitit, attvl killer rt11sV . . 11,-4 actua CUn10 un factor dc crccimicnto debil dc I :as celulas T a se pucdc inducir su proxiuccion . La actitacioin dc IV K duntenta cl receptor dc sul,crficic para 11 . 4 . 11 .- 7 tatr hicn actiia sobre las celulas T, aunciuc inicialnicntc sc dcscribi(l conao> tin factor dc crccimicnto dc ],Is celulas pre-ti, sintctizado cot cl estronla dc la medula osca . La 11 . ' sintetizada cn cl cstroama del 61110 acttia sty tire Ios tinaocitoos a. es un tactor dc crccimicnto v actit-acion dc Lis cclttlas T _t un factor dc actit acion dc Ios macr()tagos . Ptiede clue cstos trcs factorcs do crccimicnto do ]as celulas T otros mcnos conocidos, conlo IL-9, 11, 12 c II .-l ;, pcrnaitatl Lilt fino control . del crecinlicnto t actitacioin de las celulas -L cn la rcsInicsta it)nitirlitarLl . IL-1 c II . 6 son Whales "'cocstinutlado,ras~- para la actisacion dc las celulas I mcdiada por cicrtas ( : PA fjiq. 11 . M. Un curioso loth cs que nadir ha cutlseguido dcmostrar quc Ins (;PA mas importantcs ell la actnaci6n de las celulas T, [as celulas intcrdigi tantcs (Icndriticas, produztan cstas citocinas, lo, yuc hacc pensar yuc csistcn otras molecttlas cotcs6nutladctras, co,t,o II . 12 1producida por las cclttlas dcndriticasl~ c I1 .-15 .

IL-3 cstinlula cl crccimicnto do Ion prccursorcs de todas has Itncas hcnlatopot cticas C critroidc, granulocitots, macr6tagos a, l,osiblctncntc, fnliocitosl . I-'na pcqucfa parts do la poblaci6n dc cclulas T i; las celulas (:1)-1 (J)S corn 1'(R ull i tamhicn rcspondcn a 11, 3.

La activation y la division de las celulas B es controlada por las citocinas de las celulas TH2

I,n1rc I,ts c4oocinas l,rooducid .as 1,()r Ias celulas T112 dcstacan 11 .-4, I1,-3, 1IL-10 c II . 13 . 11 .--1 (dCitorttltaada antes factor oic acticacion o ditcrcnciaci(Sn l do las celulas It h induce la actia- acit'n y ditcrcncieci6n do Ias celulas 11, tatorccicndo cn particular la production do Ig.(iI c IgE . Tambien actua sohrc las celulas T cott10 un factor do crccimicnto v ta\orccc la ditercnciacio"n do Ias celulas I it2, rct6rzando Ia rcspucsta poor anticucrpos, c inltibe la production de citocinas prointlamatonas, conao I1 .-I F\Fct por los niacrofagos. ('na production cxccsi\a do IIA

Acciones de IL-1 sobre las celulas del sistema inmunitario

pucdc participar ell las cntcrmedacics alergicas, nlcdi:uttc la pro duccioril do IgE . 11 . :+ sc comporta ctl loos scrcs Ilunaanos coma un factor dc crecinaicnto t. actisaci6n de cosinofilos, pero ell ratones tamhicn sit crccimicnto t. ditcrcnciaactita sobrc Ias celulas 11, inducicndo cioon . 11, ;, justifica la cosinotilia en 1 .1s cntcrnlcdadcs parasitarias . 11 .-6, oicnonrtinada antes factor do ditcrcnciaci6ii dc las Milas 11 to factor cs6nnrl:uate do Itts IICI,atot4tts, Cs producida en nttiCIaaS celulas, induid,ts las celulas 1', los macro'~fagos, las cclulas 11, los fibroblastos s . las cclulas cndotclialcs . Actim sohrc la matoria LIc Ias celulas, pcro parecc especialmcnte importante conic in ductor dc la difcrcnciacio n dc [as celulas li en celulas t6rinadooras dc anticucrpos !AFC's . A nivel hcl,atico, IL-6 cstimula I :a pro duccioon tic l,rotrinas do talc ;tguda, \- adcntas sc coonsidcra un importantc tactor dc crccimicnto, para cl nliclonta multiple, 1111 pro ccso ntalignoo dc celulas plasindticas .

Citocinas que regulan las respuestas inmunitarias

Ias tiuuiitas tamhicn puckicn omtndar cl oil  ) kic rcspucst,, cic ,,ids, . Fit este contestoo, 11 . 10 c 11 .-12 tiClICit una in11,oort,u1CLt especial . I1 .-10, denonainada tamhicn factor inllibido,r dc la sintesis do citocinas, inllibc la production do IF\y, la prcscntacion de antiL;etx,s t . la Production dc I1 .-1, II . 6 \ T\T oe boor parte dc Ios ntacrola ,n)s, tavorccicndo dc cstc ntodo las respuestas dc tipo Ti 12 v la activaci611 dc Ias celulas h. ll . 12 time lots ctcctots con

Fig. 11 .19. La IL-1 es producida por machos tipos celulares en respuesta a lesiones, infecciones o antigenos. Influye en muchas celulas y procesos : 1) Aumenta la actividad citocida de las celulas NK ; 2) Activa metabolicamente a los PMN, que se mueven hacia el sitio de production de IL-1 mediante quimiotaxis (flecha negra) . 3) A nivel endotelial, se induce la expresion de moleculas de adherencia y procoagulantes, aumentando la permeabilidad . 4) Aumentan la production de prostaglandinas y citocinas y la actividad citocida de los macrofagos . Tambien se estimula la quimiotaxis (flecha negra) . 5) Tambien se estimulan la proliferation de celulas TH, la expresion del receptor de IL-2 y la production de citocinas . 6) Se estimula la proliferation de las celulas B y su diferenciacion en CPA, regulada (7) por otras citocinas.

trariors a II .-10, ca clue ta%oirccc Lu rcsl,ucstas dc tipo'I'll1, actiaando, a los nlacrotagos t a Ias celulas \K . H IF\ "t se I,rooduce ell Ias cclul:u T actitadas \ \K . ( :icrto, grado dc actnacioin innwnitaria Race quc sc l,roduzra IF\ 1 aumcntc la funcio'm do ( :P:\ dc inuchos tipos cclul:u- 0, induidoo, los macr6fagos, Ios astrocitos, la microglia, cl cndotclio, v lo,s tintocitos, fcnointcno mcdiado en parts por la regulaciom -<al Aza  . . dc los ( PH dc claw 1 t 11 a los genes TAP con capacidad de actiaar a Ias celulas '1 . 1'anibien se produce una rcgulaciobtt "" al alza- dt Ias ntoleculas cocstinauladoras conto B? 1, 1 7-2 c ICAM -1 . Dc cstc modo, cl I1 . \ , actira CUtt10 una serial do rctroalintcntacion poositiva en nuich:as respuestas innitmitarias, pert, tamhicn inhil,c la prolifcracioin dc IAN celulas 1112, actiaa a los nlacn,tagos en general t, dc forma parad6jica, intcrhcrc con la induccioln do class 11 Lie Ias celulas 11 por I IA, faaorccicndoo Ias rcspucstas do til,o TI 11 . En la r grrr'n 11 .20 sc reSUt,teta Las propicdadcs tic IF\y . 1)cl mismo modo quc el IF\y, IF\ot c IF\ji ptcdert interterir con la prolitcracioin do ]as celulas ininunitarias c inhihir la indUCCl6rt dc class l I por I F\-t . AI inducir la difcrenciacion cclular, incluida Ia dc algunas lincas dc Icuccntia, I1 .-6 itlhibc su proolite raci6n . I l.-6 c I1 .-11 pitedcn inhihir la producci61 do citocinas proinflanratoori,ts por parts tic los nracroitagos, pero no do 6ornaa tan pootcnic co,mo IIA o II . 10 . II .-13 prcscnta nutchas dc Ias prol,ieol.toics inhihiclon' :ts dc lo,s nt :unifagos con I1 .-4.

Colaboracion cellular en la respuesta de anticuerpos

1.1 factor tic a-ccinucnto transtirrmantc fi i FGF-P I cs una t;tnlilia ce,nstituida llor CI-CS n1olcculas cstrcchanlente rclacimadas, tiuc cstimulan cl crecimicnto dcl tcjido cmjuntivo v la tornlacioSn tic colagcno, hero sc cc~mpc~rtan conlo inllihidorcs tic pricticatnctltc todas Lis tiulcioncs innnvnitarias v hcnlatt~pcrlcticas, sobrc todc~ Ni ilrtrccc antes tic Id actn -acion cclular .

dcbida al catabolizn1o natural de los anticuerpos, a Sit uniin al all tigcno, coil la ccntsiguicntc clinlinacion dc Ia circulacion i_/p. 11 .211 . Si exanlinanlt~s Ials rcspucstas hrintaria \ ,ccundaria, sc obscrla yuc difiCrCrl principalnunte en cuatro aspectos . Curso temporal. Ed tasc ttc I .1tCncla LIc Ias rcspucstas sccund,tri,ls CS MAN cccrta, \ LIS tnscs do nlcscta V do clisminucion dcl tituIc, sic antic ucrpc~s scan tic tnalor duracion . Titulo de anticuerpos. I .a s ccmcentracimes nlazinlas dc anti cucrpos cn Ias rcspucstas scauld l'ias son much, masorcs (general mcntc .list c, ntIS \Cics supctictrcs i yuc cn las rcspucstas primarias. Clase de anticuerpos. En Ids rcspucstas primarias los anticucrI,os m.is ahundantcs sign tic class Ig11, micntras yuc cn [as rcsllucstas sccundarias scnl principalnlcntc cie class IgG, Coil Callti datlcs nlul pcyuctias dc 11;\1. Afinidad de los anticuerpos. I .a afinidad de Itrs anticuerpos suck wr 1ll11cllt) nlaNor cn Ias rcspucstas sccundarias . Esto cs dc bide a la nladuracidn sic la afinidad . Fn Ia . /iaura 11 .22 sc conlllaran las caractcristicas do Ias rcspucstas primarias v sccundarias dc aulticucrllos. I)cspucs de la exposici()n a till antigen,, es posiblc detectar cclulas hrnxiuctoras tic atlticucrpct cn cl haze mediantc tccnicas dc fbrnlacic'm dc l1lacas I t-. cap. 2r)1 . Estos cstudios dcnTttestran quc Ias cclulas protluctoras dc anticuerlio aparcccn cn cl bazo aproxinradatnlente tin dia antes dcl aunlento dcl titulo tic anticuerpos cn cl sucro .

RESPUESTAS DE ANTICUERPOS IN VIVO

Los lvinlcros cstudios sabre ],Is rcspucstas do anticucrpc~s cstusicron rclacionados coil cl ticsarrollo dc anticuerpos cspcciticos cn allinttlcs inntullizados coil antigens T o 'l . { . f,rl la actualidad, nucstros conocimicntos sobrc cl ticsarrollo V nladuracic'm dc Ials cclulas 11 nus permiten ccmtprcndcr l:ls caractcristicals dc Ias rcspucstas innnulitarias ill virn do acucrdcr coil Ices accnttccimicntcc> cclularcs sublacentcs. l,as caaractcristicas do Ias rcspucstas dc anricucrpc~s ill viva rclacionadas con los acontccimicntos cclularcs dcscritos pasta cstc lllcrtlletltcr Scat : " 1_a potcnciacitin do lie rcspucstas sccundarias . " La coil nltttacitin dc isotipos . " La nl,tdurdciin dc la afinidad . " F.I ticsaarrollo dc Iat mcnloria . Sin enlb,u-g0, alguno, dc estas acontccimicntos solo lntedcn wr cxplicados contcnlplando la poblacicin dc cclulas B tic tornla global, l . no C,t11, una colccci(Sn do cclulas indisidualcs . _\ continuacion sc cxplican con dctallc los clcntcntos dc Ias rcspucstas dc anticucrpo, ill viva. Tras una prinlcra cxposicion a till antigen., exists una talc tic latcncia cn la quc no cs posiblc dctectar Ia llrcscncia tic anticutcipos . \ ccnttill uacic'm sc prtxiuccn una uric dc tries cn Ias quc Icrs titUl0S tic anticucr-po aunlcntln dc forma logaritmica pasta cstabilizarsc cn tin nl .ixinul, lucgo ccnlucnzan a disnlinuir . Esta disminucic'm cs

La conmutacion entre isotipos depende de las cclulas T

Acciones del IFN,~

A I() Iargc) tic Ias rcspucstas invnutvitarias dclxmdicntrs tlc :ClotLas I, se \a producicndo 1111 cantbitc llrogrc,im dc la claw de innutncrglobulina prccionlinantc cn los anticucrpos cspccificos quc Sc produces, auuncntaul.1o gcncr,llnlcntc la prctducciin tic Ig(i . Fsta CotltlltilllCi(ltl cntrc clascs no sc obscn a cn Ias rcspucstas indcpcndicnics dc cclulas T, en dondc la innttnloglobulina hrctlominantc sicnlprc CS dc class Igjjt . I .a coillnutaciin dc isotipos dcsdc Ig\I a IgG no C" till acoll tCCiIIIiCtlto alcatorio . Ias subdascs tic It;li (]tic pntduccn Ias ccLas cuatro fases de las respuestas primarias de anticuerpos

OTRAS CELULAS: antivirica (debill, anti proliferativa, inhibicion de la hematopoyesis

MUCHAS CELULAS: induccion de la sintesis de rrtoleculas CPH de clase I o II

exposic . al antigen . titulo de anticuerpos latpnela fase logaritmica meseta decadencia

activacion

activacion de los macrofagos, los granulocitos y las ----- ' eel. endoteliales F romueve la diferenciacion, inhibe la proliferacibn

tiempo Fig. 11 .21 . Despues de la exposicion al antigeno, se produce una respuesta inmunitaria quc consta de cuatro fases: 1 . Fase de latencia, en la quc no se detectan anticuerpos . 2 . Fase logaritmica, en la quc el titulo de anticuerpos aumenta logaritmicamente . 3. Fase de meseta, en la quc el titulo de anticuerpos se estabiliza . 4. Fase de decadencia, en la quc los anticuerpos son eliminados de la circulacion o catabolizados. El curs . temporal y los titulos quc se alcanzan en cads caso dependen de la naturaleza del estimulo antigenic . y de la naturaleza del huesped.

Fig . 11 .20. El IFN7 posee numerosas propiedades inmunorreguladoras . Sus actividades antivirica y anti proliferativa son de menor magnitud quc las del IFNu y el IFNIi. Adem6s, no es tan eficaz coma el IFNa en la induccion toe [as cclulas asesinas naturales (NK) . Sin embargo, es el inductor mas potente de la activacion de los macrofagos y de la expresion de moleculas de clase II en las cclulas tisulares. Tanto en estas coma en otras funciones acttia tie forma sinergica con el TNF(j y el TNFIS .

Respuestas de anticuerpos in viva

lulls plasnaatiCas soil ditcrcntes segue la naturalcza dcl CS6tttn10 tic Freund da inductor. Asi, en los stones, el adtucantc complcto lugar principalmentc a la produccirin tic anticuerpos IgG2, naicntras quc los antigenos protcicos prccipitados con aturnina dan IIIgar a respucstas IgG I .'Fambicn sc product la conmutacion a Iga o IvE, c [as cclulas yuc produccn cstas clascs tic innnuaoglobuli nas sC aCUnatrlan Cn Iors tcjidos linfoidcs asociados a natrtt~sas . Los ntccanisnaos naOICCUlarcs tic la COnItlulaClora cntre isotipos se tall dcfinicndo cada s -cz nicjor . Los reordenarnientos tic A1)N tic las cclulas I colahoradoras (:1114', tic dependen tic ]as scrialcs tic ( :l)4(), quc representa una renal las citocinas t dcl ligando~ fundanacntal . Las citocinas tic las cclulas T libcradas cn las prozitic las cclulas R dctcrnainan Cual sera el nucso isotipo scntidades Icccionado . En los ratoncs III tasorccc la conmutacion tic IgGI tic cclulas no I ) la ConnTtttaC IgE, el I GF(i (tamhicn dcrisado tic IgA c G2b cl IFNy tacilita la pro duccion tic I;;G2a . Las tion It

tic dcterminados citocinas tamhicn actuan inhibicndo la c\prcsitin isotipos, tic forma quc IL 4 inlaibc la production tic IgG2a. tic La conntutaci6n se basa cn una transcription dcl AI)N tic la nucta rcgion constantc, quc pcndicnic tic citocinas a niccl rcllcja cambios en la cromatina a dicho nitcl. Estos canabios prcceden a la rcconahinacion tic ]as rcgiomcs 5' connaattadas antcriotic los dorninios tic la rcgion constants rcs a los genes tic cada uno tic] isotipt tic la Cadcna pesada fJir1 . I La maduracion de la afinidad depende de un proceso de selection celular IA)s .uitiCL1Crh()~ hrttdOCidcrs Cn una respuesta ICCUind .tria IT Cr1IC .t tic Cclulas l' prcscntan una afinidad nac un antigcno dcpcndicntc dia superior a los producidos cn cl curso tic una respucsta prinraria . 1-:stc fcnomcno csta rclacionado ton la comnautaci6n entrc IgM c I L L ,,(", ca yuc Cn las rcspucstas IgN1 no sc observa una maduracioin tic la afinidad . tic maduracion tic la afinidad cs inscrsantcntc proEl grado tic porcional a la dosis tic antigcno adnainistrada: las dosis clct arias antigcno induccn una maduracion ntcnos aCUsada yuc las do~sis

Respuestas de anticuerpos primarias y secundarias i exposicion primana , al antigeno~ logdel100 .000 titulo deans- 10 .000 cuerpos 1 .000 100 10 1 -0 -1 0 ff
a,

l exposicion secundaria al antigcno L respuesta secundaria

respuesta primaria

14 4

21

28

35

42 dias

En la respuesta inmunitaria tipica quc sigue a una estimulacion antigenica secundaria, los anticuerpos aparecen mar rapidamente, persisten durante mar tiempo y alcanzan mayores titulos quc en el caso de una estimulacion antigenica primaria . Ademas, los anticuerpos son fundamentalmente de class IgG . (En las respuestas primarias la aparicion de las IgG va precedida de la de las IgM .)
Fig. 11 .22.

hajas i,hij . 11 .24i . SC ha sugcrido yuc, Cn prcsClICia tic hajas conccntracioncs tic antigcno, solanxntc Las cclulas 13 coil rccclitol-cs i ill tic alta afinidad sc tonsiguen unir a una cantidad suficicntc t c tigcno coma para podcr tiiaitiirse y ditcrcnciarsc. Sin embargo, cn prcscncia tie altar cantidadcs tic antigcno, cstc se PUCCIC unir canto a las cclulas tic alto afinidad conat a las tic baja afinidad, ticscncadenando la respucsta tic ambas. AungUC la cspeciticidad tic una cclula 13 concrcta no SC SUCIC naodificar, la atinidad del IlltiCLIcrpo producido por un clon sc tic Pucdc altcrar tondo resultatio tic la hipcrnnrtaciina sonaatica los genes reordcnados ~, \ . cap . S 1. Por canto, parcce quc la naaduraci6n tic la afinidad sc debe a dos pro~cesos ditcrcntes : " La gcncracion tic clones tic Cclulas 11 tic mayor afinidad nredi:uttc li,cras alteracioncs cn la estructura tic Ios anticuerpos tic la Cclula tic Las rcslaij :t . Estos caraahios sc proxluccn cn las cases tardias pucstas primarias trcnte a antigenos dependicntts tic cclulas T. tic Its " El antigcno indLICC la Csp:uisi(in SCICCtisa clones tic mator afinidad . La - hipcrnttitacioin somatica cn las cclulas productoras tic antiCuerpo Cs un acontccinaicnto frcCUCntC en el curso do las rcspucstas dcpcndicntcs tic Cclulas T, v cs un fcn6nacno importantc tom rcspccto a la generaciom tic anticuerpos tic alta afinitlatt . En

Conmutacitin de class

recombination : conmutacion de la class IgM - IgG2

VDJ

: OF)

CM

CD

f', CG3

I'-,

CG1

CG2

al

CG4

CE1

V CA2

cadena isotipo del anticuerpo

to

y3 IgD IgG3

-r1 IgG1

t(1

y2 IgG2

-r4 IgG4

t;

~Y2 IgA2

IgM

IgA1

IgE

Se muestra el locus de la cadena pesada de la inmunoglobulina humana (IGH). En fases iniciales se transcribe un gee VDJ y una cadena pesada tt de las cclulas B, en la quc posteriormente se eliminan los intrones para producir el ARNm de IgM . Bajo la influencia de las cclulas T y las citocinas, se puede producir la conmutacion de class, quc en la imagen se muestra como el cambio de IgM a IgG2 . Cada una de las cadenas pesadas, excepto CD (quc codifica IgD) viene precedida por una region de conmutacion . Cuando esta se produce, se observa una recombination entre estas regiones, con perdida de los genes C interpuestos, en este caso CM, CD, CG3, CG1 y CA1 (observese quc en este esquema se hall omitido los seudogenes) .
Fig. 11 .23.

Colaboracion celular en la respuesta de anticuerpos

CStC COntCzto, cs un aCOntCCimicnto normal %, bcncticitic) . Sin embargo, cstc mismo proccso potiria tsar lugar a la production de auu)anticucrpo% IgG dc alta afinidad, como, por cjcmplo, anticuerpos anti-.AI)\, yuc scrian sumamente n()Cn()S . Estc tipo) dc mtttiCiOncs SC ha Ohsert-adO CXI,Crimentalmcnte Cn CultitOS tisu-

lam Prolongado)s . No Sc s.)ht yuc pahcl puccic jugar en cl do sarrOl1O dC las CnfcrmCdaLits autoinmunit;uias mis Comuncs.

Maduraci6n de la afinidad
exposici6n primaria al anti9eno i afinidad 10 11 media del antigeno 109 (UM) 107 105 exposici6n secundaria! al antigeno
I

raja dosis de antigeno

IgG IgG

a 4a dos=1,

no

IgM

EI I,rOCCSO tic mad11raCion dC la afinidad dC las CClula, h NC pr() tiucc cn los centros gcrminales (lia. 11 .?.;), yuc dI,arCCCn Cn IOS gan~ghos lintaticos X cl 1),I/.o a Ios I)OCOS Bias tic una CstinntldCiOn ;uttigenica . Las CclULts 13, ;tctjs dLIaS por las CCIUlas T tnctiiantc la union dc (I)40, ntigran hacit Ices toliculos hrinranos, drntdc csiste Una dcnsa rcd dc celulas fi)IiCUlarcs dcndriticas . I'M cstc am bicntc sc prodLICC una rapida ditisi(Sn de las celulas 11, aconipanacia tic nnitaciein som.irica dc lo< genes Ig. Se scIcCCit)nan para sobrccicir ayuCllas celulas B Con rCCCptt)rcs tic alta afinidad mCLliantC la intcraccirin ticl anticucrpo dc supcrfiCic \- CI ComPICjo Cclula 13COrrcCCpun'Cent CI antigeno \- el con)pletncnto sc)brc la supcrficic tic las Cclulas ti)IiCUlarcs dCndritiCas . \IiClltr.ts all-a\ iCSan CI CCntrO germinal, las Cclulas B csprcsan 1111 qCn tiC supercis cncia hcl-2. Se Ctita yuc las Cclulas ccm IgG tic alta afinidad cntrcn cn apoptosis mctiiantc la unirm tic hcl-2, \rd yuC las Cclulas ton rcccptorcs dc haja afinidad nO Consigucn dicha union V mucrcn por apoptosis.

La activation de las celulas B se produce en los centros germinales

dias

Fig. 11 .24. Afinidades medias de las respuestas de Ab IgM e IgG tras la exposici6n primaria y secundaria a un Ag dependiente de celulas T. La afinidad de la respuesta IgM es constante a to largo de todo el proceso. La maduracion de afinidad de la respuesta de IgG depende de la dosis secundaria de Ag . Cuando las dosis de Ag son bajas se producers Ab de mayor afinidad que Cuando son altas, ya que los clones de alta afinidad compiten de forma eficaz por la cantidad limitada de antigeno .

La capacidad para dCSCncadCnar una rcspticsta secundaria dcpcndc dc la memoria innutnitaria . La ntcnioria cs cxh1Ottda cn cl hroccso dc t.ICUn.tcion . EI tiuuiamcntc) CClular dc la mcnu)ria inmunitaria cs la cxpansion dc las poblaciones linfocitarias cspccificas dcl antigeno n Ic) largo tic 1 .1 rCShuCSta primaria, do tal torma yuc aumcnta la cantidad dC ccIULIS B 1' Cn rcposo capaccs dc rcsi)omicr cn cl tUt11rO dente a csC ntisn)o anti geno . t.as celulas B dc mcntoria u)n Cualitatj\amCntC tIitCl-ClItCS dC las Cclulas B tirgenes ; Sinteti /,in Ig(; con mas rapiticz v suclcn posccr rCCChtorcs dC alta afinitlatI, dcbido a la sclcccic'm prOdLlCitia dUrantc la rcspucsta I,rimari,t .

Memoria inmunitaria

Desarrollo de las celulas B en los centros germinales

centro germinal

proliferacidn hipermutacion de Ig

restate conmutacion de clase

Fig. 11 .25. Una celula B entra en un centro germinal y sufre una rapida proliferaci6n con hipermutaci6n de los genes de inmunoglobulinas . El antigeno se presenta por las celulas foliculares dendriticas (CFD), pero solo las celulas B con receptores de alta afinidad compiten de forma eficaz por este antigeno . Las celulas B con inmunoglobulina de alta afinidad expresan bcl-2y evitan la apoptosis mediante su interaccion con las celulas T, a las que la celula B presenta su antigeno . La interaccion con las celulas T facilita la conmutacion de clase, de forma que el tipo de la misma depende del tipo de celula T presente, que guarda relaci6n a su vez con el tipo concreto de tejido linfoide secundario y el tipo de respuesta inmunitaria (TH1 frente a TH2) . Las celulas B abandonan los centros germinales para convertirse en celulas plasmaticas o celulas B de memoria (BM) .

Respuestas de anticuerpos

in vivo

No cs probable yuc Ias ielULts 'I' do n1cmoria Po SC-111 n'ich to rcs tic nlal(x- afiniclad yuc la, celulas - I' 1- irgcncs, \a clue cn es tas celulas no Sc produccn linlnncnos tic Npcr- nuitaciun . Sin c111bargo, Ias celulas C dc nlenu,ria pucdcn responder a do~sis nias bajas dc anti-ono, to quo inlplica clue su io>njuntol do rcccptorcs lcntrc los clue sc incluycn Ias nlol&ulas dc adhcrcncia) nctira coil nlalor clicacia . En Lt actUalidad sc sabc yuc la nlcmoria innluni-

taria no sic kict)c cxclusil anlcntc al aumcnto dcl nurncro dc celulas cspccificas . 1'an16icn sc produccn canlbios cn las propicdaoics do diCIMS cclOLls, i()n1U dcnnicstra CI 1lechol dc que sc dctcctin nlo~dilicaciomcs cn la c\prcsion do n10lccul,1s LIC la supcrficic cclular 1 dc citocinas . I .a s cclulas'I' ('I)4 - dc nlcnlon-ia sintctizan cito~ci nas m .is prcccru y nipidanlcntc .

~Que diferencias existen entre las interacciones de las celulas T con los macrofagos, con las celulas dendriticas y con las celulas B? ~Por cue son importantes la maduracion de la afinidad y la regulacion de las clases de inmunoglobulina con respecto al tipo y eficacia de una respuesta inmunitaria? ~Como controlan las celulas T estos procesos?

~Como se induce y como se regula la proliferacion de los linfocitos? ZPueden ser nocivas las citocinas? La mutaci6n gld afecta a CD90L, una molecula necesaria para la apoptosis de los linfocitos perifericos . ZQue efectos podria tener esta mutacion sobre el desarrollo de las celulas B en los ganglios linfaticos?

LECTURAS ADICIONALES
Brodsky FM, Guagliardi L The cell biology of antigen processing and prese^tation . Anrw Rev lmmunol 1991 ;9:707-44, Cantrell D- T cell antigen receptor signal transduction pathways- Ann,) Rev Inun~.no+' 996,14259-74 . Clark EA, Ledoetter JA . How B and T cells talk to each other. Nature 1994367 425-26 . Fearon DT Carter RH . The CD19, CR2/TAPA-1 complex of B lymphocytes linking natural to acquired immunity . Annu Rev lmmunol 1995 ;13127-49, Feldmann M, Brennan FM, Maini RN . Role of cytokmes in rheumatoid arthritis . Aonu Rev lmmunol 1996 :14397-40, Foy TM, Aruffo A, Balorath J, et al Immune regulation by CD40 and its ligand CD39 . Annu Rev lmmunol 1996 ;14 :591-617 . Lane P Development of B cell memory and effector function Corr Opin Immunol 1996 ;8,331-36 . Lenschow DJ, Walunas TL, Bluestone JA CD28/B7 system of T cell costimulation . Annu Rev Immunol 1996,14 233-58, Parker DC- T cell-dependent B cell activation, Annu Rev Immunol 1993,11,331-60 . Romagnani S . Cytokine prodiction by human T cells in disease states Ann,) Rev lmmunol 1994 :12,227-57 .

Desarrollo del sistema inmunitario

La mayoria de las celulas del sistema inmunitario proceden de las celulas madre hematopoyeticas El desarrollo de los diferentes tipos de celulas (estirpes celulares) depende de las interacciones entre las celulas y las citocinas . Las celulas madre linfoides se desarrollan y maduran en los organos linfoides primarios, mediante un proceso denominado linfopoyesis. Los linfocitos T que se desarrollan en el timo son sometidos a procesos de selecci6n positivos y negativos . / Las celulas B de los mamiferos se desarrollan principalmente en el higado fetal y, a partir del momento del nacimiento, en la medula 6sea . Este proceso continua durante toda la vida del individuo. Las celulas B tambien son sometidas a un proceso de seleccion en los organos en que son producidas . / La diversidad del repertorio de antigenos de los animales maduros se genera durante la linfopoyesis, mediante la recombinacion de segmentos genicos de los TCR y las Ig . / En los centros germinales se producen: prolderaci6n oligoclonal de celulas B, conmutaci6n entre clases de Ab, maduraci6n de la afinidad y desarrollo de la memoria inmunitaria .

12

l .a eficacia dcl sistema inmunitario depende de las interacciones cntrc ntnCl10S componcntcs celulares \ humoralcs quc sc desarrollan cn ditcrcntcs ntontentos a to lark, do la sida fetal y poco tientpo dcspues dcl nacimiento . Mochas de Ias celulas que participan cn las respuestas inmunitarias proceden do las celu-

las madre hematopoyeticas no difcrenciadas ii (\\H ) . AI scr sometidas a ftctores microambicntales, coma interacciones iclu1a-celula %, la presencia do citocinas soIUbles o unidas a ntembrana, estas celulas dan lugar a xanas estirpes cclulares 'j~,f . 12 .1) .

Origen de las celulas del sistema inmunitario timo

tejidos

tejidos

linfocitos recirculantes

celula interdigitante dendritica celulas presentadoras de antigenos Fig . 12 .1 . Todas las celulas que ven en esta figura proceden de las celulas madre hematopoyeticas . Las plaquetas procedentes de los megacariocitos se liberan a la circulacien . Los granulocitos y los monocitos migran hasta los tejidos desde la sangre . Los mastocitos se pueden encontrar en todos los tejidos . Las celulas B maduran en el higado fetal y en la medula osea de los mamiferos,

linfocitos

y las celulas T maduran en el timo . El origen de los linfocitos granulosos grandes con actividad NK no se conoce con certeza, pero quiza proceden de la medula osea . Los linfocitos pueden recircular por los tejidos linfoides secundarios . Las celulas de Langerhans y las celulas dendriticas actuan como CPA en los tejidos linfoides secundarios .

Desarrollo del sistema inmunitario

En Ions tctos Lie Ios nlamitcros las ( :rMH SC cncucntran en cl sawn \ itclino, en CI higado, en cl bazo \ ell la nicdula osea ; en condiciones nornulcs, dcspucs del nacimicnttr s- a lo largo dc la cida adulta su prcscncia yucda limitada a la mcciula osca . Estas (MH son capaccs dc renmarso a si mismas t, hajo la inllucncis Lie Llitrrsos tactores dc crocinliento ciitcrcnciacion prosentos en I :ts rcgiorncs 11cniatopmcticas, clan lugar a la nrayoria do las celu-

[as del sistema in n1unitario . A partir de las Cr\iH so: originan cuatro cstirpes cclularcs principalos: " I~;ritroicic icritrocitos) . " ,\lcgacariocitica I playuctas) . " \liclo idc ~ `~ranuiocitoS 1. tagocitos moncn1uclcarcs) . " I-intoitlc ihnlircitos) . La mayor parts, aunquc no toclas, I:ts cclulas prosontadords tic anti geno se onginan en pret ursores micloides. I .as cstirpcs naicloidc y lintoicic son escnciales para cl funcionanlicnto del sistema inmunitario.

cat'Cccn Cast tot.tln1cntr de CCltrlas innrtulitu -i :rs nladuras . t-Aistcn algtmos dators quc indican quo: la dctitidad de Ion ncutrcifilos, talorrada mcdiantc la Lictcrnlinaci6n do la capacidad tagocitica o gtrimiotaitica, CS n1cnor .t hr largo do la cicla total yuc ell la cid:a adulta . Sin embargo, csto puede scr dcbido, en parts, a la inenor conccntraci6n de opsoninas del sucro total, \ no a una c:tractcristica dc ],is prrpias cclulas . Para :LCtilarsc cn prcscncia dc opso nines, los nctrtr6filos tlcbcn intcraccionar dircctanlcntc con mi croorganisnlos y/o con I :ts citocinas producidas conic rcspucsta a los cstimulos antigenicos. Fstc Itocho podria set- la c.ursa de la mcnor antisidad Lie Ions neutrofilos cn las prinacras trios dc la cida . I'ara migrar a Ices trjidos Ios ncutr6filos tambien tlcbcn scr actit tdos pretianlcntc por citocinas v quinaiocinas .

Desarrollo de los granulocitos y los monocitos

celula madre hematopoyetica pluripotencial celula madre linfoide

CELULAS MIELOIDES
.1111,1116 aprtrxinlaI-a miclopoycsis so: inicia ell el higado ticl tcto 111 cian1CntC a las ,cis scn1 .u1as tic gcstacion. En Cstudios en yuc SC 11,111 cultitado in vitro colonias proccdcntcs tie cclulas madre inditiduales, se 11a demrrstrado yuc la primera celula progenitor a yuc dan lugar las (AI H cs la unidad tirrnradrrra do colonias f L FC i, qur a su 1 -cz peals dar lugar a granulocitos, eritrocitos, nxux>ci toss 1 . megacariocitos (L'FC GFAI!sl1- I-a nladuraciom Lie Estas cclulas sc produce bajo Inn ctccnrs do los tactorcs cstirnulantes do ]as colonias (CSF, del inglcs iolonr ctiruttlatiuq fhctat :o v do ditcrsas illtcrlcucinas, cntrc las yuc SC CncuCntran 11,-I, 11 .- ;;, 11 .-4, 11 .-5 C 11 .-6 i fit7. 1? .?) . Estas tactorres, quc son importantcs cn la rogulacion positisa do la llcnlatopowsis, proceden principalnlento de [as Milks del cstronla dc la mcclula ()sea, pcro tambicn soil proxiucidas pcrr las tirrnlas maduras do las cclulas nlicloidcs y linfoidcs ditcrcnciacias . Esistcn otras citcrcinas (p . cj ., I'GFJiI yuc pucticn (:jet scr una rc-ulacion ncgatica sorbro la 1lcrnatopowsis .

Los neutr6filos y los monocitos proceden de una celula madre comun

Desarrollo de los neutrofilos Lcra prcctu- sorcs tie Ions ncutrci1ilo, \' de los fagocitos ntononu . . AI it difcrcnciantiosc cstas cc dearCs son las cclulas L'FC G.1 IUIas a Icr larger Lie la \i :a quc da lugar a los ncutroiilon, atrasics :ul \arias trios nlortirlogicas hicn cictinidas . I-ors mieloblastos sc ditcrcncian en promiclocitos \ miclocitos, yuc nladuran \- soil libcrados a la circulation cn firrnia do: ncartr6filos . La ditcrcnciacicin unidirettionlal Lie las Celulas dcscic L!FC-GM pasta ncutrotfos maduros sc dcbc probablcnlcntc a la adquisicioin do rcccptorres de tactorcs do crccimionto y ditercnciaci6n espccifcos a Io largo dc las distintas lasts do dcsarrollo . lluranto Cl I,rotcso yuc Lid lugar a Ion ncutrcifiltrs nldduros, Cn Ids cclulas tan aparecicnclo \ dcsaparcciendo nlarcactorcs super ficialcs tic ditcrCnciaciirn C-hs . 12 .3j . I'or cjcnlplo, UFC-Gt\i cspresa nlOICCLlIaS (:PH de class 1I \ ( :D38, marcddorcs Lie Ios quo: carcccn los ncutroitilos maduros . ()tras n1olcculas de supcrficie adyuiridas duranic cl prorccso tic ditcrcnciaciirn corn ( :1)13, pcquCnas CantidadCS do ( :1)14, CD 1- Col haptcno l .clcis X l, la integrina 11 1 CD29, VIA-4 (cadena a Lie (1)49(ij, las imcgrinas . Icutotitarias ( :l)I la, b, c 1 ul) asocidtias a cadcnds 0, dc CD 18, . hrs receptores del complemcnto 1 los rcccptorres do Fcy CD16 ;, . .17 7, i t. . Es diticil dcternlinar la icti\i(,iad timciornal Lie los granul0C) tons cn sus ditcrcntcs cstadios do dcsarrollo, pcro parccc probable yuc la funcionalidad total solos SC adyuicra cuando la celula ha madurado conlpICtanlcntc . Esta conclusion SC basa en Cstutlios sobre Ices sistenlas inmunitarios total y neonatal, clue sc crcc quo:

Aa

Fig. 12 .2 . Las cclulas madre hematopoyeticas pluripotenciales dan lugar a unidades formadoras de colonias (UFC). UFC-GEMM da lugar a todas las celUlas sanguineas con la excepci6n de los linfocitos . Para que estas celulas opten por una de las cinco vias posibles de diferenciaci6n (es decir, para que den lugar a megacariocitos, eritrocitos [via BFU-El, bas6filos, neutrofilos o eosin6filos) es necesaria la intervention de IL-3 y GM-CSF (factor estimulante de colonias de granulocitos y macr6fagos), citocinas que tambien son necesarias en la diferenciacion subsiguiente entre granulocitos y monocitos. La diferenciacion de los eosin6filos a partir de las UFC-Eo es promovida por IL-5 . Los neutrofilos y los monocitos proceden de la action de G-CSF o MCSF, respectivamente, sobre las UFC-GM . Tanto GM-CSF como M-CSF y otras citocinas (como IL-1, IL-4 e IL-6) promueven la diferenciacion de los monocitos en macr6fagos . La trombopoyetina JP) estimula el crecimiento de los megacariocitos . (B = bas6filo, G = granulocito, M = monocito, Epo = eritropoyetina, BFU-E = unidades formadoras de estallido eritrocitario .)

C61ulas linfoides

Morfologia y marcadores de los granulocitos y monocitos en desarrollo

UFC-GEMM

marcadores CPH de clase II

CD13 CD14 C015 CD33 CD34

monocito

promonocito

UIU-ViV1

promielocito

mielocito

neutrofilo

Fig. 12 .3 . Las c6lulas de las estirpes de monocitos y neutr6filos se desarrollan a partir del precursor comun UFC-GM . La diferenciaci6n a to largo de cualquiera de las dos via% tiene como consecuencia la p6rdida de CD34 . Los monocitos conservan CD33

y las molecular CPH de clase II, quc desaparecen en los neutr6filos maduros. Los monocitos expresan CD14, que solo es expresado d6bilmente por algunos granulocitos, probablemente activados.

Las LT( GM quC tic MtCgran en la s'ia do los monocitos sc trans101-111,111 en printer lugar en n1onoblastos proliterantcs. F.%tos se ditercitcian cn promonocito% s-, finaltncntc, cn monocitos circulantes maduros. Se crcc que Icts monocitos circulames Ccnlstittttcn urta rcscna quo: sine para rccntplazar a los macr6tagos rcsidentes Cn los tcjidos, por cicntplo los ntacr(itagos altectlares. El C0ttjuntot dc totdots I(ts macroitago  sc dcnotmina sistcma ntotnotnuclcar fagocitico {\ . cap. 2 ) . Al igual yuc Icx ncutrofilos maduros, los monocitos t . Icx n1acr(itagos nlaclurcts Picrticn CI marcadotr (:1)34. Sin embargo, al contrario que Icts ncutritfilos, sigucn cxprcsando cantidadcs int portantes do ntolcculas CPI 1 tic class 11 ffia. 12 .31. EStAS m(tlccu las son importantes :a la horn do prcscntar los antigcnos a ]as celulas T. En Icts n1ctnOCitcts tanlbicn Puedcn aparcccr n1tICl1os dc Icx marcadores dc supcrficic do Icts ncutr(ifilos maduros I v f{q . 2.201') . Comp ocurrc coil los ncutrotilos, es diticil deterntinar la ca pacidad tUncional de lots monocitos en sus ditcrentes Cases de desarrolao . Sin embargo, Cstudios Ilcvados a cabo in vitro cctn detcrminadas lincas cclularcs dc mnutrcs micloides I yuc SC Crcc quc rcprcscntan Ciistintcts Cstadi(ts tic la ClitcrcnCidCion tlc Ios n1onocitos) indican yuc la cficacia tagocitica v la citotoxicidad ntcdiada por rcccptorcs dc Fc s6lo son optima% cn los tnacr6tagos maduros. Los monocitos dc Ics adultos \ lots rccicn nacidos pros dUCetl la CitOCIna II .-1 con la ntisma cficacia, pcro la potcnciacion dc tuncioncs inducicia pctr cl I I \y cs tncnor en los nlonocitots nconatalcs yuC en los dc Ics adultos.

Desarrollo de los monocitos

contras gernlinalcs dc los titliCUlos lintitides SCCUnclarios, Clue SC puodo ctriginar en clententos ntesenquintales . En cl nx ntcntot del nacinlicnto las (.DF ca CStan prescntcs en los t6hculos primarios tlc Ios cirgamts htltoitiCS Pcr66COS c, a ciifcrcncia dc otras APC yuc son moi(ilcs, ],is CDF son scsilcs. Las CPA aparcccn en cl tinto en trues ntus tentpranas dcl desarrollo, v su papcl cn la rcstriccio n CPH v cn la sclccci6n timica implica quc al menots una parts dc cllas dcbc Iraber alcanzadot la madurez en csc montcnto . Sin cnthargo, exta clam quc 1 .1 actis-idad CPA cn cstas tares tcmpranas toxlaria not cs optima . Petr cjemplo, las rata% rccicn nacidas no son capaccs dc iniciar una rcspucsta dc anticucrpcn frcntc a critrocitots dc carncro, a no scr quc se ICS intcctcn CPA proccdctttcs do indisiducts adultos (fin . 12 .4) .

EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO En las primeras fases de la vida la concentraci6n de componentes del complemento es baja

Las celulas dendriticas probablemente se desarrollan tambien a partir de las celulas madre de la medula 6sea

Adcmas do lu> macrotagos, la maVctria (IC Ids celulas prcscntador vas dc antigcnos ; (:P._\ l clasiCas, Cntrc las yuc se CnCUCntran las Celulas dendriticas titliCUlarcs_ las celulas de Langerhans x las celulas interdi` ;itantcs, SC Cncucntran presentcs Cn cl nlontcnto del nacintiCnto . Su origcn sigue sin cstar clam, ttutque es probable que la nla'oria de ellas protscnga dc las celulas madrc dc la tic dula 6sca . Una posibilidad cs yuc procedan dc la ntisma cclula precursor, ( :1)34' f (.'F( :-GEMMj. En esc caso, las diferencias mortitl(igicas, citoquimicas y fiutcionalcs sc dcbcrian a intlucncias microambicntalc,, locales, comot la prcscncia dc citotcimas . aun asi, tambicn cs posiblo quc Ins CPA proccdan dc otras celulas madre t . C(nlstitu\an una cstirpe ditcrente . Una excepci(')n dcstacada cs la Celulas titlicular ticndritica `(DFl, Iocalizada cn lots

FI sistcma del Conlplcrncnto Cs otra picza importantc del sistcma innlunitario innatot, dcscnlpcna tin papcl dc Bran importancia en la proteccio'tn trcntc a lots microorganismos. SC 11an tiesCUbicrto unas 30 protcinas plasntaticas pcrtcnccicntcs a cstc sist(:nta f \. cap. 4) . Estas proteinas aparcccn durante cl dcsarrollo del fctot, s . sc dctcctan antes quc Las IgM circulantcs ftia. 12_Sj . Su conccntraci(in en CI SUCI- 0 dC Icx rccicn naCidots %UPctnC CI St160%i, dC la sic un indis iduo ldUltO . EI Itechot do quc Ion comtpomctncs del complcntcnto aparczcan cn cl sucro antes yuc las Ig,\l indica yuc este sistcma, junto Cctn las celulas fagociticas, constituv() cl primer mecanismo dc protcccioin innlunitaria dc lots anintalcs, anterior al Ccsarrollo tic los antiCUCrpcts en Cl proccso ctolutisot . P(n- tantot, ell Cicrto scntitlo, la ontogcnia rctlcja la filogcnia.

CELULAS LINFOIDES
Estudios rccicntcs en ratoncs ban dcntostradot yuc cl precursor lintitidc comun sc origin, cn la nlitad caudal dc la csplactt(tpleura . Estas celulas posiblctncntc migran pctr t is circulatoria 1lasta cl saco sitclino v cicspucs lrasta los organos lintitides primarios, el limo c higado fetales, donde se com-icrten en celulas 11 s. Y. Los IItlfOCitOS nladuros migran hacia Icts tejidors linfoides secundarios, dondc pucden responder trcntc al antigCno .

Desarrollo del sistema inmunitario

Desarrollo del funcionamiento de las CPA extraction de F esplenocitos de una rata adulta inyeccion de esplenocitos de rata adulta y SRBC a una recien nacida determination de la respuesta de `ant icuerpos ' mediante el titulo de hemolisinas Clq C2 C3 C4 C5 1 . SRBC solamente 2 . esplenocitos ~adu'tos !+ CPA) 3 . esplenocitos adultos (- CPA) 4. timocitos adultos IgM SRBC SRBC SRBC SRBC 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 titulo de hemolisinas SRBC (109 2 ) 0

Desarrollo del sistema del complemento

componentes del complemento (50-60% de las concentraciones del adulto) J 4 IgM (1-2% de las concentraciones del adulto)

7 8 9 nacimiento 5 6 gestation (meses)

Fig . 12 .5 . Momento de aparicidn de los componentes del complemento en los tejidos fetales humanos . En el nacimiento, las concentraciones de la mayoria de los componentes del complemento alcanzan mas del 50% del valor normal de los adultos . Por el contrario, las Ig no se producen hasta mucho mas tarde .

Fig . 12 .4 . Desarrollo del funcionamiento de las CPA : procesamiento y presentacien de Ag . Se inyectaron a varios grupos de ratas recien nacidas eritrocitos de carnero (SRBC, del ingles sheep red blood cells) solamente (1), una mezcla de SRBC y celulas de bazo (con CPA) de ratas adultas (2), una mezcla de SRBC y celulas de bazo (sin CPA) de ratas adultas (3) o SRBC y timocitos de rata adulta (4) . La rata adulta era de la misma cepa quc la recien nacida . Se midis la respuesta de Ab en cada una de los grupos . Las ratas recien nacidas a las que se inyectaron solamente SRBC no produjeron Ab frente a este Ag . Sin embargo, cuando se les inyectaron conjuntamente celulas de bazo con CPA, si que se produjo la respuesta . Las celulas de bazo (sin CPA) y los timocitos tampoco fueron capaces de inducir la production de Ab . Esto demuestra que las CPA de las ratas recien nacidas no son capaces de procesar y presentar los Ag con eficacia .

naamiteros . Una tcz en el tinao y bajo la influcncia del inicrocntorno cpitclial, las celulas madre se cnapiczan a diterenciar para dar lugar a linfocitos timicos I'cicnoniinados tinaocitos) . Existe una cierta polenaica accrca dc si las celulas madre clue Ilegan al tinao son cclulas pre-T s no, es decir, si cstan prograntadas para comcrtirse en cclulas T antes dc Ilegar al timo . Aunque las celulas ntadre cxpresara ('1)i, cxisten bastantes datos clue indican clue soil Pluripotcnciales . Ell cstudios in vitro se ha conseguido generar grantilocitos, ( .PA, cclulas \K, ciaulas B v cclulas naieloides a partir dc los prcCUrssres licniatalxncticos prcscntes en el tinao, to que csnfirnaa clue la celula prctinaica originada en la medula 6sea t clue Ilega al tinao es mtiltipotencial . v
El desarrollo de celulas T se produce a medida que se van desplazando los timocitos desde el cortex hasta la medula

Las celulas T se desarrollan en el timo El tinu~ ,c dcs,trnrlh a partir tic la terccra (\ en :tlgunas espCcics tambicn la ctiarta i I)olsa tahngca, cn forma de tin rtidinaento cpitelial do origen ecto v endodcrinico que cs colonizado per cclulas rnadrc trail sportadas por la Sangre . Parece yuc soil ncccsarias rclatit-amcllte pocas Cclulas nradre para gencrar till cnorme rc perterio dc ccltilas T ntaduras con receptores dc antigens dc cs pcciticidad naut tariada . Hat do% capas tic tcjido cinbrionario clue intervicncn en la tornaacicm del entranaado timica, al incnos en el rat6n : el cctodermo del tercer stirco braquial, yuc forma cl cpitelio del cortex del tinio, t el cndcrdermo do la terccra holsa taringca, clue sc ditcrencia t da lugar al cpitclio tic la inedula del timo . Los estudios cxpcrinacntalcs indican clue la migration dc las celulas rnadrc hasta ell tints no cs tin process alcaterio, sing yuc cs dcbido a ,cflales gtriinicxacticas emitidas intcrmitcntcmcntc por el rudiments timica . Una tic dichas posiblcs scriales cs la (3? naicroglobtilina, tin csnaponcnte tlel (,PH de claw 1 . I'.n Iss p,ijaros las cclulas madrc cntran al timo cn dos o posiblcinentc trcs oleadas, pcro no sc sabe si dichas oleadas se producen cn los
El desarrollo se inicia con la inmigracion de las celulas madre

EI tim<~ csti di%idide~ cn Iol,tilillos . (lada uno dc ellos esta formader por una region cortical t una region naedular f v. cap . 3), cn las que se enctientran cclulas epiteliales, naacr6fagos y Cclulas intcrtiigitantcs proccdcntes de la medula coca y ricas ell antigenos ( :PH dc clasc 11 . Estos tres tipos dc Cclulas intcrtienen decisis, ainente en la diferenciaci6n de los lintocitos T y~ra . I2.b) . Par cjcnlplo, lax Cclulas epitclialcs cspccializadas dc ]as rcgiones pcrjtcricas del c()rtex i cclulas -nodriza "" del tinao) conticncn timocitos intracitoplasmaticos cn las vesiCUlas dc su citoplasma, sicndo posihlc yuc intcrtcn,,an cn el proccso dc education timica i X. mas adclantc j . La prinicra zona quc colonizan las celulas naadre proccdcntes de la medula 6sea cs la rcgjon subcapsular tic[ tinio . Estas Cclulas dan lugar a lintoblastos dc Bran tarnaho clue prolitcran actit :uaacnte, son capaces dc renovarse a si mismos t dan Itigar, finalnacntc, a la poblaci6n dc timocitos . Hat muC11os ntis lintoiltOS en fast tic desarrollo (85 90%l cn cl clrrtex del tinao yuc en la medula . Adcrnas, los esttidios firncionales y los naarvadarcs dc la sul)crficie CClular indican quc los timocitos corticales son mcnos naaduros que los timocitos medulares . Esto demuestra yuc las Cclulas corticales migran hacia la medula, cn dondc nt :uiuran . La mat- oria dc las Cclulas T naaduras abandonan el tinao a crates dc tcllulas poscapilares localizatlas cn la region clue limita el cortex t la medula . Sin embargo, pucde que existan otras vias dc Salida, Coma los t -asos linflticos .

Celulas linfoides

Posicion y estructura del timo

celulas interdigitantes

timocito cortical celula en destruccion macrofago con cuerpos tenibles septo epitelio cortical

corptisculo de Hassall

Fig. 12 .6 . El timo es un organo bilobulado y encapsulado, cada uno de cuyos lobulos principales se encuentra dividido por septos en lobulillos mas pequenos . El cortex contiene timocitos corticales, densamente agrupados y en fase de division activa, que se hallan inmersos en un armazon de celulas epiteliales que se extiende hasta la medula . La medula contiene menos linfocitos, pero mas celulas presentadoras de Ag procedentes de la medula

osea, tanto celulas interdigitantes como macrofagos . Los linfocitos en fase de desarrollo estan estrechamente asociados con las celulas epiteliales y las celulas interdigitantes, que son especialmente numerosas en la region limitrofe entre el cortex y la medula . El timo contiene unas estructuras epiteliales de aspecto espiral denominadas corpbsculos de Hassall, cuya funcion no se conoce .

AI igual que ocurrc cn cl desarrollo do Icn granulcacirc~, Icn 111nocitos, a to Lugca del proccuo que Ilesa desdc la celula m:ulrc h;tsta la cclula I'llradum aparcccn L dcsaparcccn discrsos m:u'cadorcs do ,, ditcrcnciacic~n "> Con inaportancia fiuacional . I :I analisis tic los genes clue codifican los reccptorcs Lie [as celulas I u(9 c 7c6, asi collao ell Icn Lluc otros estudios SC hall cuminado los cambios do los antigcnos Lie la supcrficic Lie la nrembrana, sugicren yuc en cl timo existcn al menos dos s'ias tic difcrcnciacicin do ]as celulas T. Noi Sc sabc si cstas dos sias son cccmplctamentc indcpcndicntcs, auncluc parece inns probable que diwrjan a partir de una via comull . Sol:unentc una pcqucna proporciun do lintixitos timicos maduros, mcncn' cic[ 1"6, cxprcsan cl T( :R ;, ti . (:asi todos los tinlLnitos Sc diterencian dando lugar a celulas ion TCR ufl, yue ccnlStitus en la masoria do los fntiicitos T 1 >9TI,i que se encnentran en los tcjidos linfoicics sccundarios s en la circulaci6n (c. caps . 2 ) 3' . Los analisis tcnotipicc>s hall dCm0Strado una scric Lie cambios sttcesisos a to largo del [VOCCSCi de maduraci6n Lie has celulas T Lic los antit;cnos do supcrlicic de la nicnibrana (kq. 12.'1. De fbrnaa simpflicada, cstas sariacioncs trnotipicas SC ajustall al siguiente naodelo trifasico .

El fenotipo de las celulas T se modifica durante el proceso de maduracion

Lie hrcilitcraciern CS cspccifico de la cstirpc de celulas T. Sill cmhargo, la predisposicic'm tic cstos timocitos tcmpranos a conscrtirsc en celulas T yucda dcniostrada por la cxistcncia Lie rcordcnacicmcs de los genes do las cadenas (3 do los TC R, asi ccnnc~ pcir la c\prcsi6n del iomplcjo asociado al IY'R I( D3'1 en cl citci plasma, :uimluc no en la mcmbr:uia .

Timocitos de fase 11(intermedios o comunes) . Lstc,s tinioOtcrs 0)itstituscn .tlrCkit'dol' dcl do la, celulas linf6idcs que ccmticnc CI Limo en ull mWuentc~ dAdc~- tic caractcriian por la al,aricicin Lie marcaLiorcs do supcrficic adicicmalcs, como ( :DI, asi como por la cxprcsion simultanca Lie (:D4 s ( .Dl; ell la misnaa celula (por to yuc se dcncnninan celulas -dcablcmcntr positisas " , 1, sicndo ncgatisos CD44 s (:I)25 . Ell cstos timocitos intermedicas sc rcordenan Icas genes yuc codifican la cadcna a do los C('R ; en la supcrficie cclular sc cxprcsan pcclucnas Calltidadcs de las Li()s cadcnas del receptor up, asociadas a polipeptidos Lie] complejo receptor antigenico ( ;D3 . Timocitos de fase 111 (maduros) . F'stos time>citos prcscntall imporramcs camhios fcnotipicos, cim-c los Lilac Licstacan la dcsaparicicin tic ('I)1, la prcsencia ell la ntcinbrana iclular Lie ( .`1) ; asociado con ulla Bran cantidad do TCR uji la diferenciacicill ell den stibpohlaciones celulares, una de las ctmlcs cxpresa C,D4 Y la otra C.DS i;positivos scncillos) . En csta fast, la masoria do Ices ti ntocitos carccell tic ('1) .;S v del receptor Lie transtcrrina,' son practicamcntc indistillguiblcs tic las celulas C maduras circul .utell tcs. Codas las celulas prcscntcs la medula cxprcsan cl receptor (11144, yuc sc crcc yuc csta rclacionado con la migration \- cl ascntatnicnto ell los tcjidos lintiiidcs pcritcricos. La sclcctina L tanabien sc cxprcsa en csta Case . La diversidad de los receptores de las celulas T es generada en el limo

Timocitos de fase I (tempranos). Esta talc SC Isucdc dis idir ell dos estadios . En IIrillcihio I .as celulas expresan CD44, CD25 . Son ('1)4 , ( D8 tCIuLas dohlcs nc` ;.ttirasl s 1(>S genes para 1'C:IZ 1 nwestran ccnafiguraciom do linca germinal . Fil cstc estadio las celulas pueden originar otras lincas Is'. .anrcs~. En CI scgundo cstadio ]as Celulas picrden ('D44, pcro %igucn sicndo dcabIC ncgatis as para (-D4 s- (:D8, con rccirdcllamiCllto Lie la cadcna (i del C(K Exprcsan ( :D3 dSOtladu do T('R citoplasmatico, pcro no do supcrficic v ya cst:in compromctidas para SCI - celulas T. Estas Celu Las cxprcsan CD ;', (.D2 s ('D;. Los marcadc>rcs do proliteraciein, como cl receptor Lie transferrina (CD7I I s ( .1)3 .S (un ell marcador prcscntc todos Ices prccursorcs Lie celulas Itcniatoposcticas ell has tries illiciales do diterenciacicm'i, tambien Sc cxprcsan ell esta Ease . ()hserscsc yuc ningumi do Ices marcadores

I,as celulas T ticncn que rronukCr una amplia saricdad do anti v,cncn difercntes . Icas genes do Icn IY :R cut s vi rxhcrimrnrua fcnomcnos Lie rcccmibinacic'm sennatica durantc su desarrollo ell

Desarrollo del sistema inmunitario

Maduracion de las celulas T humanas marcadores reordenamiento del gen TCR moleculas expresadas Tdt
CD44 CD25 CD3 yciTCR ul3TCR CD4 CD8 CD1 CD7 CD5 CD2 CD38 ` c6-ex del timo

fase pretimica

medula del timo fase III

fase I II -~
u

fase II

celulas T circulantes

Fig. 12 .7 . Expresion de marcadores en las celulas T humanas a to largo de su proceso de desarrollo . TdT (desoxinucleotidil transferasa terminal) es una enzima que se encuentra en las celulas madre del timo, es menos abundante en las celulas en fase II y desaparece totalmente en las celulas medulares. A to largo del proceso de diferenciacion aparecen varias glucoproteinas de superficie . CD1 ester presente en los timocitos corticales en fase II, y desaparece cuando las celulas alcanzan la medula . CD2 y CD7 (el marcador universal de celulas T) aparecen en fases muy tempranas del proceso de diferenciacion y se mantienen incluso cuando las celulas maduran totalmente . CD5 tambien aparece en fases tempranas y persiste en las celulas maduras. CD3 es expresado en primer lugar en el citoplasma de [as celulas en fase I (cito), y mas tarde en la superficie celular, al mismo tiempo que los TCR . Las cantidades de CD3 de superficie y de TCR u(i expresadas en la mayoria de celulas en fase II tienen pequena dimension, pero dicha densidad aumenta en la fase III . CD4 y CD8 se expresan de forma simultanea en fase II (doble positivo), pero durante la diferenciacion a celulas de fase III se pierde ono de ellos (positivo sencillo).

gar a los genes tirncionales dc los ditcrcntcs rerl unlit, yuc clan hit ccptorcs cic las cclulas'1 f\ . cap . 8) . Las cadcnas 13 y 6 cst5n coditicadas por segmcntos genicos V, 1 v J . Las cadcnas a v Y solo utiliz :ui segmcntos V ~ . J. Lots genes I'( R yuc sc reordcn,ut pri ntcro durante cl desarrollo dc las celulas T soil lets yue CodifiCan . las cadcnas t mas tardc to haccn los genes dc ],is cadcnas (3 v u. Mcdiantc la combinacioSn alcatoria dc Icts ditcrcntcs scgmcntos genicots sc cotnsiguc tin gran numcro dc reordcnacioncs produc .staS dan lugar a la cxprcsi6n dc ditcrcntcs sccucncias pep_ tiUS . F tidicas cn [as rcgioncs xariables dc amhas cadcnas dc lots T( R. Los timocitos cn Icts yuc SC pradUCen rcordcnaciotncs not productixas son cicstruidots . (;onto SUCCdc ell cl caso~ del receptor dc ],Is Celulas R, dos genes i genes dc actixaci2tn do la rccomhinacioin R.~(i-l ~. RAG-?? ticncn nlUClta importancia cn cl proceso dc rcorrdcnanticrao, que culmina en la producci6n de di\rcrsos reccptorcs antigenicos dc las celulas T (\ . cap. ' ) . Al principiot, las celulas solamcutc cxprcsan una PCCluCna cantidad dc 'IY :R ell su superficie . Esto ocurre en la zona situacia cntrc la region subcapsular y cl cortex czterno del timo, en dolldc las celulas prolitcran actixamcntc.

dus, junto con las recclttores subntgados dc 1 .11, Celulas Pre-R i o,. mas adclante ;i . ell la protliteracioin, maduraCion s sC1000ictn cn las prinicras Loses dcl dcsarrollo lint6citariot . En el timo se produce la seleccion positiva y negativa de las celulas T en desarrollo $eleccidn positiva . Las celulas l solo rconurccn lots pcptidoos ,tntigcnicots Cu .utdot soil prcsentados por CPA v sc cncucntran aso~ciadots a nxtlcculas dcl propao (.PH IN . caps . 7 \ 9 i . En rcalidad, las CCIt111S 1' rCCOnetCen do forma -dual- a los pcptidoS .ui tit cnicos )' a la region polintorfica dc las moleculas C.PH f CD4, yue apvccC ell algunas subPoblaciomes cic CdulaS T, tambien se litre a las moleculas dc claw 11, pero net a traxes dc su region polimetrtica > . La seleccion positica ~ dcnominada tambien educaCi6n timical garantiza yuc s6la SC sigan desarrollando los TCR que presentcn una afinidad ntodcrada Potr laS moleculas (;PI I propias . I lay datos yuc indictn quo: en la seleccion positixa intcrxiCnen [as celulas cpitehalcs dCl limo, yuc cn cstc caso se compotrtan como CPA 13 .8). l as celulas T quo: prcsentan afinidades mug alters o mug hajas pctr las ntalcculaS ( PH propias expert ntcntan un proceso dc apoptctsis'' urn destruidas ell cl cortex . I .t apoptosis cs un , stticiciio pro` ;ramado, hasado cn la actixaci6n dc nuclCasas Cndoigcnas yuc provocan la tragmcntaci6n del .A1\ i ;firi. 1?. 91 . Las celulas T Ccm rcccptorcs dc afinidad intcrmeciia no fi-m apoptctsis, Sino yue sothrcxisrn V Siguen madurando.
Su-

Formas alternativas de TCR durante el desarrollo Estudiots coat ratonus transgcniots hall dclnomradot yuc ell las tascs iniciaies do la ontogcnia Ias celulas I pucdcn cxprcsar torntas altcrnatixas Lid complcjo TCR, yue Pueden CStar impliCadas cn la transduccioin dc scnalcs yuC controlan cl dcsarrollo . Los dimcrcts TCR(3 sc asocian con (a)3 cn auscncia de TCRu, las cadcnas - l (Rli pttcdcn aparccer en la SupCrficie celular conto prettcititle net nas ligadas a P1 i P1 = tostatidil inotaitotl Y, sc asociali coil ('1.;. Las cadcnas - IY .RP dc superficie sc puccicn asocial- Corn tin coxnplcjo CD3 incctmpICtot yuc s6lo tienen Y, d s, s, pcrot sin ; y rl \ carcntc de cadcna 1(-Rot . Pctr ultimo, una gluCoprotcina de ,' kdal rccicntcmcntc descubicrta s, ligada a las cadcnas TCR(i cn las celulas pre-T pucdc scr la candidata cotnut -cacicna a suhro gadal, (cacicna u pre-T ; I . Esters reccptorcs podrian estar implica-

Seleccidn negativa . :\Igunas dC las celulas 1' yuC superan cl l,r()CCSCt dC SCICCLIoin PotSiti\-.t Pucdcn power rcccptorcs que rcconozcan compotncntcs propias net rclacionados con cl CPH . Estas celulas son climinadas mcchantc tin proceso dc ., sclcccicin ncgatiw-, yuC SC prodUCC ell la region m ;is profunda dcl Cortex, Cn la zona limitrote cntrc cl cortex y la medula, \ cn la propia medula . Los timocitos intcracciotnan con anti gcnos propias prcscntados Por [as Celulas intcrdigitantcs . S6lo SC PCrntliC Continual- CI proceso

Celulas linfoides

La restriction CPH de las celulas T se produce en el timo respuesta proliferativa de celulas T tras reconstitution I exposition, exposition a HL irradia- -con a HL en superficie de cion medula CPA para amhos osea b , k haplotipos prow+~rutoores respuesta proliferativa a las CPA de cada ceps progenitora II-2'' H-2r

timectomia de un raton b - k

trasplante de " timo fetal de haplotipo'--, conocido `

tipo de timo tipo de fetal raton trasplantado bxk _ bxk bxk bxk bx k bxk

k k (tratado con dG)

++ ++

Fig. 12 .8. Los ratones receptores (F,[H-2b x H-21 1) fueron timectomizados, y despues se les trasplantaron timos fetales de 14 dias de diversos genotipos. A continuation fueron irradiados para eliminar sus poblaciones residentes de celulas T, y despues fueron reconstituidos con medula osea F,, para proporcionarles celulas madre. Tras la estimulacion antigenica (hemocianina de lapa, HL) se determinaron para cada cepa progenitora las respuestas proliferativas de las celulas T de los ganglios linfaticos frente a HL presentada en la superficie de CPA. En algunos experimentos los

lobulos de timo fueron incubados antes del injerto con desoxiguanosina (dG), que destruye las celulas intratimicas de la estirpe macrofagoldendritica . Las conclusiones mas imporlantes fueron : 1) el entorno del timo es necesario para que las celulas T aprendan a reconocer al CPH y 2) las celulas dendriticas y los macrofagos de la medula osea (eliminados por tratamiento con dG) no son necesarios para este proceso. (Adaptado de Lo D y Sprent J, Nature 1986 ;319:672 .)

do tnaduracion a I((s tinlocitos yuc no rcc(,n((ccn anttucncn pro pios . H rcsto cxpcrinlcntan apoptosis \ son dcstruidos . Fst(u, asi conlo cl rcsto do IaN Cclulas apoptuticas gcncru{as Cn CI tinl((, Sot1 hlgocitlCios cn las pr(1tiuldidadcs dcl cilrtcx por ntaCr()tag((s con Cucrpos tcnihlcs . Rccicntctnctuc, se ha cicnlostrado cspcrinlcnt:tlnlctuc la esistencia de sclecci(in negatisa (cicnonlinada tanlhicn tolcranCia central ) n1e(ii :ultC CStlttiiOS Cn stones, cn los yuc a to largo cicl cicsarrolk( timico se han chnlinado cicrtas tittllfias Vji mcciiantc dctcrnlinados supcrantigcnos CnCV)gcnos 1'( . Ca[) . 13'I . T(-R .  ') [as cclulas En esta fase do: nladuracic,n iCD4' ('1)8" T comictuan a cxl)rcs.tr gt;u1dcs CantiC{aCIcs tic l`( at, N pict-LICn unodc los ntarcad(trcs ( :D4 (1 ('1)8, C(n1 I() yuc SC Comicrtcn cn .C.u1or~~. Estas Sulhtinlocitos ntaduros < " posititos para un S((I() nlal . pohl:lcioncs inticpcndicntcs do: cclulas ( :1)4- 1 ( :1)8' posccn rcccptorcs (ic ascnt:unicnto cspccializados i conic) (D44 I r se diri gcn a las rcgjotlcs t1C MILLIS 1' do: I(1s tcjidos litltoidcs pcritcricos, Ill dondc actuan principalnlcntc C(nr1(( cclulas I' nladUras -colaboradoras t, -citotoxicas>-, rcsl)ccti\ anlcnte. (\kilos dcl 5'%, do los rinlocitos Ilegan a ahancionar cl tinlo . F:I rcsto soil destriliCIOS cotno consccucncia do: los pr(tccsos do: sclcccicin (lint. 11 .1(I) o ante la inlp(xihiliclacl do cxprcsar rCCCI)an-rs t1r antigen(). Funciones de las moleculas de adherencia y de las citocinas en el desarrollo timico Sc ha dcnl((strac{o yuc la ad11CS1('(n CIc los tinl()Ciun en I)r(K CS(( tic n1aduracion :t I:ts Celulas cpitchalcs y acccs((rias cS C,Cncitl para cl desarrollo de ],is cclulas')' . Esta adllcsilm csta mediada por intcracciones cntrc n10IcCUlas de adhcrcncia c(mtplcnlcntarias, Como CD2 t. I.FA-3 iCD581 o I .FA-1 (( :DI la, CD 18} o: RAM- I

algunas Celulas 1' aut(u- rCaCthas puCdcn sohreti\ir, cs ncccsaricl un mccanisnlo adici(mal para csitar yuc pucdan atacar al propi(( (x ganisnlo . Los datos ohtcnicios recicntcnlcntc cn cxl)crinlcnt((, con stones transgenicos sugicren que la inaCticaci(in peritcriCa tic So, pucde IICSar las Celulas 1' aut(trrcacti\as (t()ICr,1tjCl, pCritcriCaI a call() mcc{iantc dos mccanismos ditcrcntcs : " Rcgtfaciiin ncgatisa do IOS IY .R \ LIC ('DS (Cn las cclulas cit(1toxicasl, do: tal tilrnla qUC las cclulas n(1 s()n capaccs tic in tcraCci(mar con los autoantigcnos diana. " Anervia, (ichido a la auscncia de scnalcs actinadoras SCCUndarias cscncialcs l)r(nedcntcs tic las cclulas Chum, por cjcntplo a tralcs do CD28 . La tolcrancia pcritcrica sc cstudiara con nias cictallc cn cl Capitt1lo 14 .

CD54 ~ . Fstas intcraccioncs indUCCn 1 .1 produccil)n tic Ian Citocinas . 11 .-1, 11--3, 11 .-b t (1`I-('SF, quo s()n ncccsarias para la nraduraci(in do: ] .is celulas 1 Cn cl timer. Los tinlocitos prcc((ces tanlhicn czprcsan rcecptorcs para 11 . 2. FSta CitoCina, junto C(1n otras n1olecttlas, pr(ltttLIOC la proffcracion cclular que se produce principaltncntc cn la rcgi(in SUbCapSUlar v cn cl c()rtcx Cztcrno . Algunas celulas T se desarrollan fuera del timo La selection negativa se puede producir en la periferia No todas IaS Celulas h Att(,rreaCth as son Clinlinadae Ciurantc CI . Prohahlctncntc csul cs tichido a yuC n(( (icsarrollo cn cl fins( todos los autoantigcnos son capaccs do: dcsplazaru a trascs do los tcjidos tinlicos . 1'ucdc yuc la harrcra cpitchal dcl tinlo tanlhicn inlpida cl .uccso a :tlgunos anrigcnos Circuluntcs. I'or canto, conto

2 Fig. 12 .9. Apoptosis de celulas tfmicas. 1) Se trataron cultivos de lobulos de timo fetal con anticuerpos anti-CD3 . De esta forma se simula la activation a traves de los TCR, por to que se desencadena el proceso de muerte celUlar programada (apoptosis). En esta microfotografia electronica se muestra la intensa concentration de cromatina nuclear en los n6cleos apoptoticos (A), que contrasta con la cromatina dispersa de los nucleon normales (N). (Por gentileza del Dr . C. Smith.) 2) El analisis del ADN procedente de celulas apoptoticas mediante electroforesis en gel de agarosa muestra el patron tipico, ordenado y en forma de escalera, a que dan lugar las bandas de fragmentos digeridos.

Desarrollo del sistema inmunitario

Diferenciaci6n de las celulas T y selecci6n positiva y negativa en el timo

vas o

nlr?SPngUir'a

4-8-_

4 8'

4,08' - -

celula nodriza del- timo

region subcapsular

reordenacion productiva del TCR

Desarrollo de las celulas T fuera del timo >unciur Id t;rut nra,orri .t dr Ids iclulas * 1'11(),C harden ditcreni tdr Cn auecnCid do un 61111) tunCional, SC ha ciCtCCtado un pcquciio ntintcro dc celulas mochas,eccs de origcn oljgoclonal ) ion Io15 tnarcadorcs caractrristicos do ],is celulas - I - cn r ;uoncs atimicos (<~desnudors- ;~ . No SC I,ttcdc e\duir la posibifciad dc quc cstos ratonrs pencan una acti,idad timica residual . Sin embargo, cada ,rz hay m ;is datos experinlcru;tlcs quc sttgirrrn CIUC, Cn ausencia .Ic tinao, Ios precursorrs do la mcdul;t 6sca sc pueden cstablecer cn cl cpitcho mucoso s. madurar, dando lugar a celulas 'I' funcirmalcs con T(,R yF, c hrobablcntrntc tambien con T( .R u13. La inlpo~rtancia quc I,ucdr tcncr cl dcs.trrrrllo r\tratinlico cn aninaalCS due poseen un tinlo normal teuia,- ia no csta clam .

reordenacion no productiva +4 - 8'CD3TCRR

cortex

nn

nn . 0 - PH .i, l,i

-I

no

I a ma,r>rra tic Ids celulas I prcscntc, cn sangrc ncc,itat ;t( slln ('l)4 ;RA', una obscr,-aci6n quc crmfirma clue aim rnr Iran csta blccido contacto con ningtin antigcno . Adcnlas, la production do IFNy ('v probablcnlcntc tambiul dc o tras citocinas) tras la c\poIds siCitSn do Ota1 MIA f ;1 cli,ccsos dntigenos CS nlcnor qur I ;t dr Ids cclulas T dc Ices adultos.

Las celulas T de los recien nacidos son inmaduras

..Igan

rec-nc autoartig1ii r- -

macrofago con cuerpos tenibles

no (selection negativa)

I .os ntamilcro,s carcccn dc un r~r~ano aisladrt rshrcdjor tiara llc sar a Caber la linlitho,csis dc Ids celulas 13 . Por cl comtrario, cstas celulas SC dcsarrollan directanterac en LA tejido hcnaatopoVetico dcl higado total I 'q . 12 .11;1 a partir dc ]as celulas madrc linfoides, a partir dc las 8-9 scnlana% dC gestacio'tn cn Ion SCI -CS humanos y de los 14 dias Cn los stones . Mas adclante se dejan dc producir celulas li cn rl higado, y cl ccntro dc produCCi6n pasa a srr la medula Osca durante Cl rcsto de la silo dcl indi,-iduo . Fsto tantbicn cs cicrto cn cl caso dc otras estirpcs hcntatohoscticas, conlo Ids clue dan Itrgar a Ion critrocitos, los granulocitos, los tlltntocitos N' ],is plaquctas. Existcn datos rccicntcs clue inciican quc Ions progenitorcs dc Ids celulas 11 sc cncucntran tambien cn cl trjido ontcntal dc Ion fetos murinos s . llumanos . Toda, is no sc sabc si estos progcniton- cs sic Ids Ccluhs 13 aparcccn :uucs o dcshucs dc Ion qur sc drtectan cn cl higado fetal .

Las celulas B de los mamiferos se desarrollan en la medula 6sea y en el higado fetal

Fig. bajc met esqt Drs. ocur mad inter inmi

So

%7

Fig. 12 .10. En este modelo las celulas T pretimicas son atraidas hasta el rudimento timico y penetran en el mismo . Proliferan bajo la region subcapsular y clan lugar a grandes linfoblastos, clue se replican y generan un conjunto de celulas clue comienzan a diferenciarse . Mochas de ellas estan asociadas con celulas nodriza del epitelio timico (TNC, del ingles thymic nurse cells), aunque el significado de esta interaction sigue siendo motivo de discusion. En esta region, )as celulas expresan en primer lugar CD8 y mas tarde CD4, ambos en bajas concentraciones . Tambien reordenan los genes de sus TCR, y pueden expresar pecluenas cantidades de los productos de estos genes en la superficie celular . Las celulas en maduracion migran hacia regiones mas profundas del cortex, en donde se adhieren a las celulas epiteliales corticales, clue son alargadas y ramificadas, por to clue disponen de una gran superficie para establecer contacto con los timocitos. Durante estos contactos, los TCR de los timocitos son expuestos a las moleculas CPH de las celulas epiteliales. Esto conduce a la selection positiva . Las celulas no seleccionadas experimentan apoptosis y son fagocitadas por los macrofagos . Durante la migration de los timocitos desde la region subcapsular hasta el cortex profundo, aumenta la expresion de CD3, TCR, CD4 y CD8. A continuacibn, se eliminan los TCR autorreactivos mediante el contacto con auto-Ag presentados por las celulas interdigitantes y los macrofagos presentes en la region limitrofe entre el cortex y la medula, en un proceso denominado selection negativa . Puede clue las celulas epiteliales de la medula tambien intervengan en este proceso. Finalmente se obtienen celulas clue expresan CD4 o CD8, clue se dirigen a la periferia a traves de vasos especializados situados en la region de union corticomedular . (Puede clue en el cortex tambien se produzca un proceso de selection -legativa, en el clue se eliminan las celulas cuyos TCR presentan una afinidad excesiva por las moleculas CPH propias.)

La production de celulas B en la medula osea no ocurre en regiones definidas Los prort~cmtoxcs dc Ids ccluhs B sr ACUHrul;ut CH la medula osea alrrdcdorr Girl hcriostio intcrnot dc hs laminillas oscas. (;ada ono dc cstos progenitorres puede clar lugar, desdr el Illollicillo L , -. la reordenacion dc Iols genes dc jnntiutoglobuljnas, a 64 celulas Ilijas. Est;ts ntigran hacia cl ccntro, dc la cacidad dcl 11LICSO csponjor

osea, rctict tnida dctlo rctict alL ;ir miofi tllo ti rinlet trol ;u IL-7 . procc

so*
4C lie,"

i IH

Fig. 12 .11 . Corte de higado fetal humano, an el clue se observan los islotes hematopoyeticos (IH)- Las celulas madre hematopoyeticas se reconocen en los sinusoicles (S) entre las placas de hepatocitos (H). (Por gentileza del Dr . A. Stevens y el profesor J . Lowe .)

Las c de se La nt nlcdu til11oL apopt medu I ;ts B clue si for to los gC

Ids B el baz, -oldu ,bt

C

Celulas linfojdes

Modelo de diferenciacion de las celulas B en la medula osea io a5

Ds OS

progenitores

pre-B

celula B inmadurafmadura

da as :cr t(1 . niIS

11

;on ita I dc po 1 dc

11c:Stas 'hilt ides, (os iticir ,cr la

Will

onto noCi ic los cjido si csic los urre :a osea rno dc c := la LIS hi )(xljo-

En esta microfotografia electronica de barrido a bajo aumento se observa la arquitectura osea y su relation con la medula osea . La cavidad recuadrada se ha dibujado esquematicamente a la derecha . (Por gentileza de los Drs . A . Stevens y J . Lowe .) 2) La linfopoyesis de las celulas B ocurre en ]as cavidades de hueso esponjoso, progresando la maduracion en direction radial hacia el centro (desde el periostio interno hacia el seno venoso central) . Las celulas progenitoras inmaduras adyacentes a la capa celular del periostio interno
Fig . 12 .12 . 1)

maduran y dan lugar a celulas pre-B, la mayoria de las cuales mueren y son fagocitadas por los macrofagos de la medula osea, que contienen cuerpos tenibles (con hematoxilina) . Las celulas que sobreviven siguen madurando y alcanzan el seno venoso central . La asociacion con las celulas reticulares y la presencia de citocinas como IL-7 son esenciales en todas las fases de maduracion de las celulas B . (Adaptado de D . Osmond y R . Gallagher, Immunol Today
1991 ;12 :1-3 .)

so t' son s'crtidas a la luz de tin sinusoidc t enoso. Ell la medula (,)Sea, las celulas B madur :ul ell estrccha a%ociaci6n con las celulas reticulares del estronia . Estas ultimas se encuentran cn Lis proximidaties del periostio interno N' adosadas al seno central, dondc sc denominan celulas reticulares adtentieias (_/iq. 12 .12 l . I as celulas reticulares posecn caractcristieas fenotipicas mixtas, prescntando al~-in parccido con los tibroblastos, las celulas endotclialcs y los miofibroblastos . Producen col :igerio dc tipo I\', laminina y el misnio tipo dc acting propio dc ]as celulas ntttscularcs liras . Ell czpcrintcntos in vitro se ha dcniostrad(t tluc las celulas reticulares coil trolan la ditercnciaci(in dc las celulas B mcdiantc la producci(tn dc IL-7 . Las celulas reticulares athenticias pucdcn inter\enir en cl proccso dc libcraci(in al SCno central do LIS celulas 11 nraduras . Las celulas B tambien son sometidas a procesos de selection yuc maduran en 1 .1 I .a ma,tria de Ia> ciltilas 11 int :is &I mctiula (isca no alcanzan nunea la circulation, sing que i,como los timocitos,i Sufi-en till proccso dc mucrte celular programada o apoptosis, y tcrminan sicndo fagocitadas por los macrhtagos dc la medula (isca . Sc ha sugerido que las intcr ciiuncs cntrc las celulas B y el cstrotna pucdcn cjcrccr tin tip( dc ,clccci6n positisa, que sirva para rcscatar dc la rnucrte eclular programada a till sector minoritario dc celulas B con rcordcnaciones pr(tductivas dc Ins genes dc innutnoglohulina . l .a selection neg,iti\ a dc las celu las B aut(trreactivas sc puede Ilc\'ar a cabo en la mctiula ()sea () cn d bozo, organo al clue sc dirigcn la mayoria tic [as celulas 11 rccicn -oducidas clurante la vitla total . Mcdiantc datos cincticos sc ha cstimado clue till raton pro diariamcntc unas j x 10 celulas B . Cwiio cl halo del rat(Sn

conticnc aproximadarricntc 7,5 x 10 celulas 11, una Bran proporci6n de [as celulas pr(tducidas debt morir, probablcnicntc en la Iase pre-B N' dcbido a rcordcnaciones no productiv-as dc los genes do los reccptores o a la presencia dc reccptores autorrcactitos para innwn()gl(thulinas . Las inmunoglobulinas son los marcadores caracteristicos de la estirpe de celulas 8 I .as celulas native linti)idcs, yuc c\presan - 1'd'1', pr()lit~ran, se difercncian ~, reordenan dc sus genes dc inrnunoglohuline i \ . cap . ti i, para d :tr Itrgar a celulas pre 11 yuc CXpr'CS :ui cadcnas pesadas )t en su cit(tplasma . Ah-utms dc estas celulas pre 11 tambien expresan pcclucnas canticiatics dc cadcnas u cn stt supcrficic, asociadas a cadcnas li , eras 'IStthroL,adas, V I f.. ~' i .5 (~ . nris adclantc, Ail . 1?.13 cn la yuc SC mucstra till modclo de la estructura del receptor dc la MULL pre 11 ) . En csta Ease del proccso va se ha pr(tducido la exclusion aMica tic Itts genes tie inmunoglobulina paternos o matcrnos . Sc tree clue las celulas pre-B cn fire dc diferenciacion dan lugar a otras celulas pre-11, nris pequenas . l'na X'ez yuc la celula R ha sintetiz :ulo sus cadcnas ligeras, yuc puctfen scr dc tipo is o i., qucda dctinida ya su cspccilicidad, yuc cs la dc su receptor tic antigeno IgN'IS . Por tanto, una MULL 11 S610 pLlc de Sintetizar tin anticucrpo espccitico, till dogma central dc la teoria dc selection clonal sobrc la production dc anticuerpOs . En la fast dc desarrollo pre-B tambien SC encucntran prescntes [as molcculas Iga c Igl3 I; ('DI 9a y b), asociadas a las inm inoglohulinas dc supcrficic . En la fgnra 12 .1-1 se mucstra till csyucnta dc la ditercneiacion de las celulas B, en el clue SC indurc int'trmaci(in acerca de la expresi(Sn dc las inmunoglobulinas y de algunas cttras molccul :ts importantcs .

:e madre as y el

Desarrollo del sistema inmunitario

Modelo de la estructura del receptor de la celula pre-B

VH

~6~Vprei

Cadena pesada i~

'Cp2
Fig. 12 .13. El receptor subrogado de las celulas B esta compuesto por una cadena pesada u y proteinas i.5 y V ,r (cadenas ligeras subrogadas) unidas entre si de forma no coXente. El 1.5 se une mediante enlaces covalentes con el dominio Cpl . Se ignora la funcion del receptor de la celula pre-B, pero (igual que el posible receptor pre-T) puede intervenir en fases iniciales de la diferenciacion, seleccidn y proliferation. Los puntos azules corresponden a sitios de glucosilacidn .

Diferenciaci6n de las celulas B celula madre linfoide celula pro-B (progenitora) celula pre-B celula B madura celula B activadai blastica

celula B de memOfla

eel. plasmatica (eel . productora d e anticuerpo)

ISacontec .1mientos geneticos

)
IgM', IgDde superficie

reordenamientos de [as cadenas u < -~ reordenamientos de las cadenas h/iconmutacion e hipermutacion de Ig production de V p,P-af}.5

IgG', IgA' de superfici e

Ig' citol)lasrnatica

moleculas expresadas Tdt CPH II CD10 CD19 CD20 CD21 CD22 CD23 CD25 CD38 CD40 CD72 PCA-1

Fig. 12 .14. Las celulas B se diferencian a partir de las celulas madre linfoides, dando lugar a celulas B virgenes, que en presencia de Ag se pueden convertir en celulas de memoria o en celulas plasmaticas. La localization celular de las Ig se muestra en amarillo . Los genes que codifican los Ab se reordenan durante el proceso de desarrollo de las celulas progenitoras . Las celulas pre-B solo expresan cadenas tr citoplasmaticas . Algunas pueden expresar dichas cadenas pesadas asociadas con cadenas ligeras subrogadas (fig. 12.13) . Las celulas B inmaduras poseen IgM de superficie, mientras que las celulas B maduras presentan otros isotipos de Ig . Ante la estimulacidn antigenica, las celulas B proliferan y, tras una

fase de proliferation, activation y transformation blastica, dan lugar a celulas plasmaticas o de memoria . Las de memoria y las plasmaticas se encuentran en tejidos linfoides diversos . La desoxinucleotidil transferasa terminal ITdt) es expresada en fases MY tempranas de la ontogenia. Tambien se muestra la secuencia de aparicion de otros marcadores importantes de la superficie de las celulas B. PCA-1 (el antigeno-1 de las celulas plasmaticas) solo se encuentra en las celulas plasmaticas. CD38 es un ejemplo de molecula que aparece en los progenitoras mas primitivos, desaparece y, finalmente, es expresada de nuevo en las celulas plasmaticas totalmente diferenciadas.

Celulas linfoides

Expresion de los receptores de citocinas a to largo del proceso de desarrollo de las celulas B
marcadores --B-GFR H-BCGFR IL-1R IL-2R IL- 3R IL-4R IL-5R IL-6R IL-7R Fig. 12 .15. Toda la vida de una celula B, desde la fase de celula madre hasta la de celula plasmatica madura, esta gobernada por las citocinas de su entorno. Sus citocinas son expresaclas por las celulas B en diferentes fases de su proceso de desarrollo . IL-7 desempena un papel importante en la iniciacion del proceso de diferenciacion de las celulas B. Actualmente, algunos de estos receptores se incluyen en la clasificacion CD (v . apendice) . celula madre linfoide __ celula pro-B Iprogenitora) celula pre-B celula B inmadura celula B madura celula B activadai blastica celula B de memoria celula plasmatica

A iu large tic la ontrr~cnia tic Lu Celulas B sc proclucC ulna Nrcnrrntic Cane cia tic rcoorticnacioncs tic loos genes tic innttntoglobulurts s bios tcnotipiccn parccida t Lt ticscrita cn rl caso de Ias celulas 1 . I- :is .CC I reordrnaeiunes tic Ills genes tic Ias c:uirnas pcsadas sc 1)roxit Sign en 10s pnogenitores de ]as celulas 11, \ ConstituNrn CI printer tic prrtrnrncii a la cstirpr B . A contI'll uaci0n SC I)roduCrn las rcordrnaciooncs tic los grncs dc ]as cadcnas ligcras cn Ias celulas pre B its tardias . Antes tic qtr sea I)oxibIC tirtect:tr innunnogler bulinas, ell la Supcrfcir tic Ias CClulas B SC CxprCSan dCtCI- ntlrtados ntarcadorcs, concretamcntc m010001as ('PI I tic daSC 11, (:1)19, CI)20, ('1)21, (:1)40 s- cl antigrnoo (' l) l tl i (A11A } . Este ultimo) ntarc,tdoor cs una rndopepticiasa nrurra nuns NCn CoIISCf_\ .Idl, title se exprcsa transitoriantcntc cn los progcnitorcs ntrnos ditcrcnciados tic Ias CClulas 11, antes tic quo: ap:u -ezcan Cn el citoplasnta Las cadc nas pcsadas u . ( Al .I A xuClxe :t scr Cxprcsatio) ell t1SCS nr.is asanz,t(fas tic Lt sida tic la celula B, en rl ntomento ell qtr Csta Cs ,tctis -a. 12.1-11 . ()tros ntarcatiorrs, coontoo (.l)23 s da poor el anti,,cno jut receptor tic I1 . 2 u h, soon propicn tic Ias CClulas B actis :ulds .

En las celulas B en desarrollo aparecen marcadores de superficie caracteristicos

tic ntancras tlitcrentcs. En antbos casos, cl tratannicntoo Coon ,ttttiCucrl)os anti IgM oo can antigcno Prowca la pcrdida tic Las Ig :\IN, qtr t1uedan recul,icrtas t- SUti -Cn tin proceso tic cii(iocitosis . Sill rntl)M-goo, tl CultiUrLIS, S 61o las CCIUIas 11 nt .uluras s- uClsrn a silltrtirar It Ms Ifiy . 12 .16''x . La poosibilitiad tic inducir 1 .1 pcrdida (ICI receptor tic antigcno dc ] .is CClulas h inm.tdurd stdurds Sugici-C qUC CStC tic indLICCitin tic toolerancia Cupodria SCI_ 11110 tic ION mecantam0s pcrioodoo tic dcsarrollo tic las CClulas 13 autoorrClCt1\as . rantc rl

Nueva sintesis de IgMs en celulas B maduras e inmaduras

cultivar durante 30-60 minutos y lavar

Para cl (Ics ;trr011oo initial tic Ias CCI111as 1; soil IICCCS.1riOS 1111a SC tic crccimicnto s ditcrcnciacion . I .os receptores tic tic t:nctorcs tic estos factoorrs soil cxl)rcsadcn -en ditcrcntcs Eases tic[ proCc%o tic dcsarrollo tic Ias celulas 13 . Para (]tic diCho I)rOCCSo SC iniCIC son necesarias 11--i, 11, 3 x cl factor do Crrcimicntoo dc CClulas B tic weight bajO peso nIOICCUIar I .I .-B( :GN, ticl ingles low molecular B-till gromtl> riuturl, nticntras quC Cn fases mAs a\jn/adas soil prccisoos otroos factorcs
12.15 h .

celulas maduras o inmaduras IgMs

recubrimiento y enclocitosis

Las celulas B migran a los tejidos linfoides secundarios, en donde ejercen sus funciones

celulas B

maduras

l.:u prinuras Celulas l ; yuc migr ;ut haCia los ganglioo,, lintatiCos s CI b:tz0 (a las 1' SCHIMMS, Cn loos scrCS Itunt,ut0S I soon IgMS' V pusccn un ntal-Cador dc CClulas f (( :1) ., } . En CI omICnto tct:tl Sr Estas celulas Iran drtrctitlo prcCUrsoores tic Ias CCIUlas B tantbicn cstan prescntcs cn el ntantO tuliCUlar tic los ganghos lin tdtico tic los adtnltos . Tras la cstinunlacion antigCniCa, Ias CClulas B nttdUras pucticn tic anti.,,ar a celulas B tic ntcnnoria 0 a CClulas I)rOCIUCtooras dar lu` tic antiCUCrcucrpo . I .as CClulas 1)IaSnt:itiCas C CClulas I)roductooras p) totalntcntr dilcrenciatias ; Sudrn carecrr tic in mtut0g10bUlina tic Supcrfcic ( Igs',, cusa ntision rccrptoora Ja no cs nccesaria. AI it ual yuC en CI Case) tic Cualquicr otra CCIuIA hcm.ttopoxCtiCa to)taltnente ditcrenciada, la sida tic Ias Milks plasnriticas cs corta, expcnintcntando linalntcntc un proceso tic apoptosis i s- . 114. 2 .23) . I-as CClulas 11 inmaduras s- maduras rCSpondcn a ION tntIUenos

celuflas B inmaduras

12

18

horas

24

Fig. 12 .16. Se incuban a 37 C y durante 30-60 minutos celulas B maduras (adultas) e inmaduras (neonatales) con anticuerpos frente a sus IgMs (anti-IgM) ; esto provoca el recubrimiento de la IgMs y su ingestion mediante enclocitosis . A continuation, se lavan las celulas para eliminar el exceso de antiinmunoglobulina. Como se muestra en el grafico, las celulas B maduras vuelven a sintetizar IgMs en el plazo de 24 horas, mientras que las celulas B inmaduras no son capaces de hacerlo.

Desarrollo del sistema inmunitario

Fn Lis a\cs la Iiirti(p(rrsis dc las CC lulas I ; 1'ri(rr .uias sC pr(KiuCr Cn kill organo Iinti)Cl)itclial Cicfinido, la holsa Lie 1-ahrici(r . 1-:I rudimCnt(r tic la h01sa SC Licsarr0lla como una C\aginaci()n ell CI ell_ docicrmo Lie] intestino posterior, quc CS col0nizaCia pot- celulas ntadl-CS transportadas 1101- \ia Nanguinea . Los C>tudios dc quimc ras cn p((Ilos haul indicad(r quo c\istc kin period( dc LCntana para la inmigracion dc las cclula% madre 1lacia la holsa, entrc low Liias l U 1-1 Lic la \-ida cmhrionaria i(: cap. 15 i. SC Ohscrran celulas pir0njnofilas, las posil)ICS celulas madre, en c(nttatct0 con las celulas Cpitchales . I .at ln-oliteracion Lie las celulas Lie la holsa Clan ori,en a la cortcia \ a la mcciula ell each IoIitki]o do la b(rlsa, quc pucdcn Scr c(f(ntiiadas s(fo p((1- una (r nt(n CSCasas CCIkiLrS madre .

Las celulas B de las aves se desarrollan en la bolsa de Fabricio

la B inmadura rzhrcsa en ski supCrficic cacicnas l1- asociadas a la cadcna ligcra disponihlc I h o ~. ). Las celulas Clue n0 c(msiguen rear denar skis genes do derma producti,a ezperimentan apoptosis. E.sta CS una do las razoncs 1101- ]as yuc soil dcstruidas tantas celulas prcli durantc cl proccso Lie dcsarrollo (\ . mar arriba i . Las celulas B in ntaduras quc prcscntan rc((rdcnamicntos dc las cadcnas ligcras que c(~difican receptorcs tic autocs1.ccificidad pucLicn scguir pr(ducicndo rc(rrLicnamicntos cn skis cadcnas ligcras icdicion clo rcccptorcs) . 1 a CXpresion CIC ]as CaLicnas l1- con cadcnas ligcris Suhrogadas antes Lie ]as c.uicnas pcsadas r< v i. ~ cn estacho pre-B 1 podria resultar tundamcntal en la SCICCC1Urt do las celulas B prccoces f \ . antes) . La generation de la diversidad de anticuerpos no es totalmente aleatoria l na lei ~]uc ski -tall pr(duocnd(( cadcnas ligcras r: la Ig11 dc supCrficic LIC la CCluIat B innlAdura l)LICdc aCtuar corm(( receptor fut. ci(m .tl tic antigen( Se p(rdria pensar quc la rcordCnaCi(in Lie 10s seg mcnt(1s \', 1) I ion las cadcnas pcsaciasj v V v I icn las caclcnas ligcrats i ell cl scno dc las cclu]as B cs kin Icn()ntcno aleatorio. Sin embargo, csistcn datos quc indican quc en los rat(mes, ratas' poIIos Csiste una wcucncia programada de desarrollo de anticttcrpos con cictcrntinadas cspccificidaLics 12.1 .7 . La producci('m C1c anticucr1,os, aunque cs kin tcnomcno difcrcntc ail rcconocinticnto del antigcno por partc dc ]a,, celulas B, dcpcndc tanto de las celulas T como dc las ('.l':1 . \o sc conocc cl mccanismo molecular Clue permite cstc dcsarr(rllo programad(o de la" ospccifi(:i(i .ILICS, pCr0 p1ICCic scr dchido a la utilirati(in initial do l0s SCgmCntOS gcnian V mar prosirttos a los scgntcntos l) 0 /, clcsplai nciosc clcspucs las rcc(mthinasas implicadas ell la dircccion .;' . Tamhicn es po',ible que SC pro du/ca algan ten(intcno dc sclecci()n negam a do determinados clones {prohablomentc dchido a la aparici(m Lie Clones autorrcacti\-osI .

DIVERSIDAD DE LA ESPECIFICIDAD DE LOS ANTICUERPOS

La diversidad de los anticuerpos se genera mediante recombinacion genica Loos genes do la rcgi(m \ .triahlk, C()Irrpucsto ,, dC ,Cgnlcnt(~s V, 1) Cst.i n presCntes en t(das las MULts SonlatiCas Lie Cada linea germinal concreta i;\ . Cal, . I ;1 . DUrantC las Cases in1CiaICS Lie] desarroll0 Lie las celulas 11, ]as SCCLICncias intcrcaIaulaS cntI-C 10S SCLuIICIlt0S Soil Clintinadas, I(1- CuC aproxintt cntrc si .t cstos does ;"cnos . Jlas tardc, d(rraittC la to%C JVC B, se producer ]as skibsiguientes re(ordenaci(oncs tic Io,, wgrnont(n V, 1) (' I dc la region tamable dc los genes dc CadCnas pcsadas IVII} ihn. 12 .14) . Fl gcn rccombinado dc cadcnas pcsadas cs c\prcsado junto ton CI gcn Cic cakicnas l,csaclas ft ell cl cit0plasma tic I .ts CCIuldS pre-B granLics . Estas celulas ln(ditcran acti \amtente \ reordenan skis genes V1-;, \ mar tardc, si Lis rcorcicnaci(oncs 1-i 110 hall tcniL]() cxito, skis genes V1 . . ('uand(r SC c(msiguc reOrClcnar CIC manCra pr0C1ucti\ -a kin "Cn Lie cadcnas ligcras, la cclu-

Desarrollo de la capacidad de respuesta inmunitaria

edad (dias) 0 1 2 3 4 7 10-11 14-15 20-22 28 7,3 Brucella 4,7 5,3 EC 0 0 0 2,9 5,4 EB 0 0 0 0 0 0,6 3,0 4,3 0 7,7 10,4 0 0 16% 70% 88% 0 0 HL 0 0 SSS~(( 0 0

Los linfocitos B CD5' constituyen una poblacion celular especial MLIClrts dC las celulas B quc aparccen en Ii,, primcras tascs Lie la (mt(ogenia C\pT-CSan (a)5 . I JS in In un0glOl,ulinas quc cxprcsan cstas tclulas B cstan codificadas por genes do las lincas twrntinalcs yuc no hall sutriCio aponas nuttad(ntes . Las tclulas B (.1)jpr()tiuccn tundamemalntontc Ig(M, per(( tarnhicn algo tie Ig(i c IgA. 1~:stos anticaierpos se dcn0minan anticuCrp(x naturalcs L_ Soil Lie hajaaViLiCZ, per( prcscntan la particularidad de set- polirrcactiLos . EI sucro Lie indis iduos adultos conticnc altar conccntracioncs Lic lo" mismos . I as celulas ('l)5' pucdcn responder crtcrgicamente frolic a Ion an tigcnos Y, r 1 -:tunhicn pucdcn inter cnir cn cl pre ocesarnicnto 1, presentarci(in tic antigenos t Ias celulas I*, \ prohahlejell [C Licscmpcnan algtm papCl en la t(olerancia V ell las rCSpLICStas CIC anticucrp0s. Entrc ]as tirncioncs quc so: hall propucsto para 1os antiCUcrpos naturalcs SC cncucntr:rn : printcra linca dc dctensa Ircntc a lo" micro0rganisntos, climinaci6n dc c(mlponcntcs propios cianad(n, c intcracciones en forma de -reel idiotipica ", con cl sistema inmunitario .

" DIVERSIDAD DE LAS CLASES DE ANTICUERPOS

Las celulas 11 pr"ducen anticuerpos dc cinco CLINCS principales: IgrM, IgD, IgG, Ig.A C IgF. Tamhicn csiStcn uratro subclascs do (los Lie I-A iv cap. 6) . Cad:r MULL plasmatica t0ta1r1tenIC ditcrcnciada pr(rccdc de una Celula B c(mcreta, y s6lo produce anticuerpos dc una claw 0 sul,clase .

Fig. 12 .17. Se inyectaron a ratas recien nacidas de diferentes edades cinco Ag diferentes (Brucella abortus, eritrocitos de carnero IECI, eritrocitos de burro [EB], hemocianina de lapa [HLI y polisacarido neumococico de tipo III [SSS  ,I) . A continuation se midieron las respuestas de Ab . Las respuestas frente a los cuatro primeros Ag estan expresadas como log, de los titulos de anticuerpos. Las respuestas frente a SSSi I estan expresadas como porcentaje de animales quc respondieron . Las cajas vacias representan experimentos no realizados . Observese como la capacidad de respuesta frente a diferentes antigenos aparece en distintos mementos, to que indica quc la aparicion de anticuerpos de una especificidad determinada esta programada previamente.

quc 11larCCCII CIurantc cl proccs(o tic cICSarroIIo son Ig .l CIC sul)CHiciC l (. mar arri ha ) . Mar tardc, so: cxprcsan otras clases dc inntunoglobulina . (MCLhantC CXperintent0s con j)(ollos () ratones tratados coon anti-

Las celulas B conmutan entre clases de anticuerpos mediante la recombinacion de los genes de cadcnas pesadas l,()S IvCcpuncs d1- antigeno Lic las primcras tclulas li

Diversidad de las clases de anticuerpos

cucrpos :trtil -It, se ha ConSCL;nido ticmostrar que Ias celulas que ex prcstn inmunoglobidinas distintas a Las Igt\t proccdcn de Mulls Iosecdoras dc IgNI, ta que Ios animates tratadtrs stn incapaccs tic producir anticuerpos tic ninguna dc Lis clases conocidas. Las clases t-subclascs dc anticuerpos \icncn tictcrminatias por Ices genes tic las rtgiones constantes, clue codifican las ditcrcntcs cadenas pesatias +;CII'I . h.stos genes cstin agrupatitu CI cl cxtrcino 3' ticI locus do cadenas pcsatlas tic innnnu,glohulina f lgii ;l, y aparcccn cn cl cromo soma 14 sigtticndo una sct ucncia tictinida. Las celulas li contnutan dexle It, ,M a otras clases o subclases tic inn1unoglobulilM median to un proceso do rccotribinacion cntre unas regiones conmutadorts altamentc repetitisas situadas cn cl lado 3' dc each gen ( :ii, con la subsiguiciae dclccitin dc Ios genes (ai intercalatios cntre cllas. Los dctallcs dc cStc proccso, que sc dcnonaina conmutacion dc iso tipos, se han cxphtado cn cl capitulo 8 . Algurras MULLS I; exprcs ii Ios isotipos IgM c lgl) cn su superficie . Esto es debidcr a un Sistcma difercncial tic chminaciin dc introncs dc Ios grandes AI(N nuclcares trlnscritos a partir dc los gCnCS ( .H .

Diferenciacion de las celulas B : diversidad de clases

tA
celula B inmadura celula B madura celula plasmatica

La conmutacion entre isotipos se produce durante la maduracion y durante la proliferacion

frobablcincntc, la crmnnitaci(~n more isotipos CS cspcCi :tlmcIuc intensa durantc la t .I,SC do prolitcracion. Sin embargo, tantbicn Sc puedc producir antes dc la exPosicitin a un antigeno cxtiucno, durante las prinicras tries tic exp:uasion clonal t. maduratiln tic Ias MULas B {- lirf. 12 .18;1 . Estt~ sc ha sabido dchido a gtic parts dc lors ciescendientes de Ias celulas I ; inmaduras sintctiz,ut anticuerpos do otras clases de inmunoglobulina, comb IgG c IgA. AL progre sar I :t difcrenciacioin tic Ias celulas B, SC CortliCnZ :l a sintetizar L,;l) de superficie, una Claw tic anticuerpos que se cntucntra casi cxclusitamcntc cn la nicnibran.t dc Ias celulas 11 . [AS ditcrcntcs claSCs do Igs tic una misma celula B pressman la misma cspccificidad antigenica, cs dccir, cxprcsan Ios mismos grncs dc rrgioncs V, aunque mas tardc sc puedc ;~cricrar diversidad adicional dcntro do un mismo doll mctfiantc tcnontcn()s do rnutacion somatica posteriorcs a la conmutacion entrc clases . Existcn pruchas dc que se puedc producir tonnttttaci(in cntrc CLISCS cn ausencia dc antigeno, ca que [as tclulas B tic Ios vertebrados criados en condicioncs gnotobioticas i practicamente ascpticas ), que apcnas cstan cxpuestos a antigenos exogcnos, can cxprcsando scrucnrialntentc Ios ditcrcntcs isotipos dc inmunoglobulina dc forma parrtida a la que se obsen a en Ios aninialcs dc control.

independiente del antigeno

dependiente del antigeno

Fig. 12 .18. Las celulas B inmaduras solo producen IgM, rrticntras que Ias celulas maduras pueden expresar mas de un Ab sobre so superficie, ya que tras la conmutacion entre clases persisten el ARNm y Ias Ig unidas previamente a la superficie celular . Durante la maduracion clonal tambien se expresa IgD. La maduracion se puede producir en ausencia de Ag, pero para que se produzca la diferenciacion en celulas plasmaticas (con poca Ig de superficie, pero grandes cantidades de Ig citoplasmatica), si que son necesarios el Ag y la colaboracion de las celulas T. Las imagenes muestran celulas B con IgM de superficie lverde, 1) y celulas plasmaticas con IgM e IgG citoplasmaticas (verde y rojo, 2) . Las IgM se tineron con Ab fluorescentes anti-ti y las IgG con Ab anti-9 conjugados con rodamina .

La expresion de un isotipo puede estar condicionada por el tipo de antigeno

Sc ha comprobado que tictcrminatios anti~gcnos indutcn rrs puestos tie anticuerpos cn Ias que prcdonnina un sierra isotipo tic innttmoglobuhna . Por cjcmp1o, los Ilidratos dc carbono tic Ias paredes bactcrianas dan lugar en Ios ratones a respucstas innaunitarias independicntes dc celulas T cn Ias que predominan logs anti cuerpos IgG.;, mientras que en Ias respucstas a Ias infcccioncs ciricas abundan rinds Ios anticuerpos IgG2a. Fn Ias respucstas dc Ios scrcs 111,1111.1110', frcntc a Ios polisacaridos, la subclase dc anti cucrpos predorninantc es la IgG2 . Estt sclecci()n de isotipos Sc puedc dcber a tins mccanismos ditcrcntcs : " Los clones dc celulas B seletcionadors pueden hahcr coil rntrtado pro iarncntc cntrc clases i_f<r1 . 12.18) . " La conmutaci611 puedc scr inducida de none como rcsultadO do la intcraccion con citocinas proccdcntcs dc Ias tclulas aces sorias r Ias celulas I'. En la ictttalidad, cxisten mUtbos datos que a\alan la participaeion do Ias celulas T y sus citocinas cn la eonnititacion de nnro entre isotipos . En cl raton, se ha dernostrado que ]as celulas T tic Ias rcgioncs inuctlsas cstinltilan prctcrcntcmcntc la produccit n de I~0 . IIA induce la toxanrtttadtin tic MULL ,, B actis-atias policlonalmcntc (mctiiante lipolpcrlisac:irido, I,PS) al isotipo IgG I, 12 .191 . con la supresiun sinrtdrinca do Ios isotipos rcstantcs De forma parecida, I l .-a multiplica cntrc cinco y dicz srces la

Regulacion de isotipos por parte de las citocinas de las celulas T murinas

isotipos de inmunoglobulina IgG1 IgE IgA

TH

sitocinas IL-4 IL-5 IFNy

IgG3 1

IgG2b 1

IgG2a

TH2
TH1

T = 1 .

T = 1

I T .j,

1 .

Fig. 12 .19. En esta figura se muestran los efectos del IFNj (producido por las celulas TO) y de IL-4 e IL-5 (producidas por las celulas TH2), que dan lugar a on aumento (T), a una disminucion ( " ) o no producen cambios (_) en la abundancia de celulas B de tin isotipo determinado, tras la estimulacion in vitro con lipopolisacarido (LPS), on activador policlonal . IFN,., induce el isotipo IgG2a, mientras que IL-4 induce anticuerpos IgG1 e IgE. IL-5 estimula la secrecion de IgA.

Desarrollo del sistema inmunitario

cantidad do IgA protducida, ,in atcctar a 1 .1 l1roducciom dc lots Lie m,is isotipos, micntras yuc cl II~N7 Otinaula la, rcsltuostas Ig62a, suprinlicndo Las del rcsto Lie isotipos . Es interesantc clue 11 .-4 c IF\7, yuc actiian conxt citoninas rcguladon- as reciprocas ell la cxpresioirn do los isotipos Lie anticucrpos, prctceden Lie ditcrentcs subpol11acioncc Lie celulas Tit . En cl ratdn, las celulas Fail produccn IF :Sy, micntras clue ],Is celulas T112 producer II .-4, 11 .-5 c ll .-10 i,l'. cap. 10'i . Rccicntenacntc a han Licscrito suhpothlacioncs parccidas en Icts NCI-CS 11un1anos, \ NC 11 .1 LiCill0strado clue la 11 .-4 proccdcntc do las celulas T csta rclacionada coil la Riper protducci61l dc Igl" en Ion indicICIuos at0lliCOS il l' . cap. 211 . I a sCCuencia Lie aparicioin Lie las claws Lie innttulon lol,ulina en las celulas B a to largos do su proccso do dcsarrollo sc rctleja en la" ell inntLmLtglol1ttlinas yuc sc dctcctan cl sucro dc tctos \- recien nacidos tuutl:ulos . I-IS IgM Se sintetiz ;ul antes Lie[ nacinlicnto, micntras clue LIs IgG V 1 .1% Iga comicnzan a apareccr alrcdedotr del mcmicnto tic] parto (/irf . 12 .201 . Las IgG sericas not alcanzan las concentracioncs propias do Ion adultoti hasty la clod tic 1-2 anus, ell l Las IgA tardan aun nix; alcanzarlas .
r

Lie nas de cllas o a su sah-acioin l .I misma. I.a s celulas con rcccppotr torcs Lie alta atinidad cl antigenot extrano scan rcscatadas de cstc proccsot do apoptosis por cl antigcno prcscntadot potr Lis celulas dendriticas tolicularcs do los centro, gcrnlinales . .A continuaciom sc Licsctibira con ntis detallc cl proccso csboell zadot cl parratit anterior. I,as celulas li cspccificas do :uatigcno yuc colonizan los t6liculos lintoides prinru- ios son cstiflit] ladas pear cl antigeno, dan lugar a blastos Lie celulas B. Lt no o unos 110cots blastos de estc tipo tcrnainan pear tormar un centro germinal Lie celulas 11 prolitcratl a alta Lclotcidad, I2.?/) . Lots hlastcn dandot lugar a una poblacioin do unas 10' Milks ell L71 pla/o dc 3-4 dial . Al cuarto dia, las celulas SC transforman en ccntroblastos, yuc ctrecen de innumoglohulina Lie supcrficic . Estas celulas migran hasty cl polo interno Lie] titliculct secundatiot, en donde d:ul lugar a In zona oscura del ccntro germinal . his centrohlastos sc transtorman en centrocitos, clue expresan Lie 111100 inmunoglo 11ltlina tic supcrticic y ocupan la zona Nasal clam del control gernlinal . l :n cstc periodo se produce 1.1 conmut ;Icioin do clascs . Sc

11111 DESARROLLO DE LAS CELULAS B DE MEMORIA

C-uando ]as celulas B son actil ; clas por cl antigcno icon la colabOi:tcioin do [as celulas T l, pucdcn madurar I. transtitrnaarsc en celulas productoras de anticuerpo, l. llnalnicntC en celulas Plasmaticas tottalincnte ditcrcnciadas, of pucdcn dar lugar t celulas Lie memoria. En la actualidad, sc disponc Lie hastantcs dates yuc in ell dican clue [as celulas B do memoria sc dcsarrollan Ion controls gcrminalcs Lie dixcrsos tcjidos lintitides i 1 . caps . 3 l, I I i . Las celulas It cycrintcntan en cstots ccntro, una intcnsa Ilipcrmutaciotn de loos genes do las regiones variables Lic los anticucrIlots, un PI-0 cesrt clue PUCCIC conducir a la LicstrucciLln por apoptosis do algu-

Esquema de la organizacitin de un centro germinal

CCILil3

cfe iremoria

precursor de celula plasmatica (celula roduct, de anticuerpo)

Inmunoglobulinas en el suero del fete y del recien nacido

nocimiento

Ig I% de la concentraci6n del adulto)

80

10 12

meses Fig. 12 .20. Las IgG del feto y del recien nacido proceden exclusivamente de la madre. Esta IgG materna desaparece a los nueve meses de edad, momento en el cual el nino ya elabora sus propias IgG. El recien nacido produce sus propias IgM e IgA, ya que los anticuerpos de estas clases no son capaces de atravesar la placenta . A los 12 meses de edad, las concentraciones de IgG del nino alcanzan el 80% de las propias de un adulto, las de IgM el 75% y las de IgA el 20%.

Fig. 12 .21 . Las funciones de un centro germinal son proliferation clonal, conmutacion de clase de Ig, hipermutacion somatica de los receptores de Ig y seteccion por antigeno . En este modelo, el centro germinal esta compuesto de tres zonas principales, una zona oscura, una zona basal clara y una zona apical clara. Estas zonas estan ocupadas predominantemente por centroblastos, centrocitos y blastos secundarios, respectivamente . En el foliculo penetran blastos primarios de celulas B, que poseen inmunoglobulina de superficie (Igs') come receptor y salen del mismo transformados en celulas B de memoria o celulas productoras de anticuerpo . Las celulas dendriticas foliculares (CDF), con capacidad para presentar antigenos, se encuentran situadas principalmente en las dos zonas mas profundas, y la destruction celular por apoptosis se produce fundamentalmente en la zona basal clara, en la que tambien se encuentran los macrofagos con cuerpos tenibles . Los recuadros azules son icosomas en las CDF. (Adaptado de I . M. Roitt, Essential Immunology, 7.' ed . Oxford : Blackwell Scientific Press, 1991 .)

Desarrollo de las celulas B de memoria

tree quc a lo largo do este 11crir~do~, v tras la estimulacicin por cl an tigcno prcscnta(lo por ] .is cclulas dcndriticas t6licularcs, sc prods ccn hipcrmutacirmcs do los gcncs do Las rcgiones sariablcs do los anticucrpos en la cclula R . Los ccntrocitos sc encucntran cstrcchamcntc asociados a ]as cclulas dcndriticas folicularcs i CDI~ 1, mc. diante interaccioncs establecidas entrc ITA-1 (( ;1)I la/( :D18 h s \'LA-4 6ntcgrina a. a (3 . , CD49d^''( :1)29} do los lintocitos c IC:ANI-

1 f CD541 N' N'( :A\I-1 i; ('D106 ) do las CDF. Las interaccioncs con ccntrocitos dotados do rcceptorcs do alta ahnidad frcntc al antigcno prcscntado por Lis CDF dan lugar a blastos sccundarios, quc abandonan los fbliculos sccundarios cn tirrnta do cclulas de me moria o do prccursorcs do cclulas plasntaticas . Cuandcr nor sc producen intcraccioncs centrocito-CDF, sobrc\ ienc la nttru- tc cclular programada i apoptosis) .

~Que factores son necesarios para el desarrollo de los granulocitos a partir de las celulas madre hematopoyeticas? ~Que diferencias existen entre el desarrollo de las celulas mieloides y el de las celulas linfoides? ~Por que es necesario que sean diferentes? III ~Cuales son las Eases principales del desarrollo de las celulas T en el timo?

" ~Cuales son los principales parecidos y diferencias que existen entre el desarrollo de las celulas T y B? " 4Por que es tan importante la muerte cellular por apoptosis en el proceso de desarrollo de los linfocitos? ~Cuales son las funciones principales de los centros germinales?

LECTURAS ADICIONALES
Anderson G, Moore NC, Owen JTT, et al. Cellular iiteractions in thymocyte development . Anna Rev Immunol 1996,14 73-99. Karasuyama H, Rolink A, Melchers F Sxrogate light chain in B cell development. Adv lrnrnunol 1996 :63:1-41 . Kisielow P, von Boehmer H. Develop "riert and selection of T cells, facts and puzzles . Adv Immunol 1995,5&87-209, Robey E, Fowlkes BJ Selective events in T cell development Annu Rev Immunol1996,12 :675-705Wagner SD, Neuberger MS . Somatic hypermutation of immunoglobulin genes. Annu Rev Irnmunol 1996 ;14441-57 .

Regulacio n de las respuestas inmunitarias

IIII Las respuestas inmunitarias esaan sometidas a diversos mecanismos de control, que sirven para que el sistema inmunitario retorne al estado de reposo cuando la respuesta frente a on determinado antigeno se hace innecesaria . III El desenlace de cualquier respuesta inmunitaria depende de muchos factores . Entre ellos se encuentran la naturaleza del propio antigeno, la dosis y la via de administracitin y el trasfondo genetico del individuo que responde al estimulo antigenico . Las inmunoglobulinas pueden modular positivamente las respuestas inmunitarias, ya sea actuando como anti-idiotipos o mediante la formacion de inmunocomplejos . Tambien las pueden modular negativamente, enmascarando los determinantes del antigeno o eliminandolos, con la consiguiente reduccion del estimulo antigenico . Las celulas presentadoras de antigeno pueden afectar a las respuestas inmunitarias, dada su capacidad pare coestimular a las celulas T . Las celulas T pueden regular las respuestas inmunitarias . Los estudios de transferencia demuestran que las celulas T CD4` pueden atenuar subsiguientes respuestas inmunitarias . Las celulas T CD8- tambien hen sido implicadas en este proceso . La produccion de citocinas por pare de las celulas T influye en el tipo de respuesta inmunitaria inducida por el antigeno . " Entire los factores geneticos que afectan al sistema inmunitario se encuentran tanto genes asociados al CPH como otros ajenos al mismo . El sistema neuroendocrino ejerce una cierta influencia sobre las respuestas inmunitarias . Por tanto, los factores geneticos que afectan a este sistema tambien afectan indirectamente a las respuestas inmunitarias.

Las rcspucstas inmunitarias, Coil)() CodO S Ios sistemas biologicos, estun sujetas a diversos mecanismos tie control . Estos mecanismos sirscn para que cl sistema inmunitario retornc al cstado de re poso cuando la respuesta fi- cnte a un antigeno detcrtninado se hace innecesaria . l?na respuesta innumitaria clicaz cs cl resultatio de las interacciones entrc cl antigeno Nr un conjunto tie celulas inmunitarias :ompctcntes . La naturaleza cualitatis .t y cuantit :uisa de las rcspucstas inmunitarias dclientic tic mucltos I'actorcs, c ntrc lasque SC encuentran la forma ~, la sia do administracitin del Ag, la naturaleza de las celulas prescntadoras do antigeno iCPA1, cl trasfondo genetico del individuo ~- Ios antcccdcntcs de c .eposi Lion pres -ia al propio :uuigeno o .t cualquicr otrt~ antigeno que prcscntc rcaccioncs cruzadas con cl mismo . Los anticucrpos cspecificos t :uul,icn pueden modular la rcspucsta inmunitaria frcnte a un antigeno . Algunos do cstos factores sc han estudiado detalladamentc cn otras partcs tic cstc libro (s . caps . 10 v 1 1 ), Y aqui solo sc mcncionar:in brcscmcntc .

t'na rcspucsta inmunitaria eficaz es la que consiguc climinar cl antigeno del organismo . .A continuacion, Ios lintocitos retornan a su estado tic reposo, ya clue para clue continue la prolifcracion tie las celulas T y B es necesaria la prescncia pcrsistentc del antigeno . Sin embargo, algunos antigentw (p . cj ., Ios de Ios micrtnorganisnu~s intracelularesi no son climinados con tanta cficacia, provocando una rcspucsta inmunitaria pcrsistentc que puc tic teller conSCCuCnt as patologicas {\' . cap . 261 . Las dosis elevadas de antigeno pueden inducir tolerancia l as dosis rout cic\ad :t,s tic .mtli,cm) suclen inducir tolrr.uui,I c, hccifica ell Lt's celulas 1, algunas VCCCS tambien en las celulas l3 . Se Ita dcnu~strado que la administracitin de antigcnos a ratoncs recicn ndcidt~s sucle cicterminar tolcrancia a Ios mismos, lieclio que se puctic cxplicar por la intnadurez del sistema . Sin etnbar go, sc ha demostrado recicntemcnte clue Ios ratoncs recicn nacidos pueden desarrollar rcspucstas inmunitarias eficaces (fq. 1 .3 .11 y que la ausencia de rcspucsta se puede atribuir no a la inmatiurcz do las celulas '1 ', sing a la dcs\iaciOSn innuuic por la coal una

REGULACION POR EL ANTIGENO

Las celulas 'h 13 soil actin alas por el antigeno teas una intcraccion adecuada Coil sun receptores csptcificos de antigeno . En el caso do ]as celulas T, en esta interaccion no inters icnc ell propio antigeno, sino peptidos antigenjcos procesados unidos a molcculas CPI I de clase I o fI ('s . cap . 9) . Se ha demostrado que tanto la naturaIcza do un antigeno como la dosis Nr la via de administracitin influtcn prof und:unente cn la naturaleza do las respuestas innnuti tarias inducidas . La naturaleza del antigeno influye en el tipo de respuesta inmunitaria inducida 1.0s ditcrclucs intigcrloN induccn difcrcntcs tipos tic rcspucstas inmunitarias . Los antigcnos polisac ridos tic las c :ipsulas bactcrianas suclcn inducir rcspucstas IgN'I, micntras clue las proteinas pueden Liar lugar a rcspucstas jnnumitarias mediadas por celulas o humoralcs . I-t)S organisnu~s intracclularcs, cntrc los que se cncuentran algunas bacterias, parisitos N virus, induccn rcspucstas intnunit :trias mediadas por celulas, micntras que Ios antigent,s pro teicos solublcs induccn rcspucstas humoralcs . 1::xisten agcntcs, como la silice, clue tambien induccn rcspucstas innrtmitarias mediadas por celulas .

Efecto de la dosis de antigeno sobre el tipo de respuesta inmunitaria frente al virus de la leucemia murina ufp 0, virus Citotoxicidad :;t, spuesta TO (IFN,-) antiviral Respuesta TH2 (IL-4)

1 .000

ao

so

2a

ao

so

so

Fig . 13 .1 . Se infectaron ratones recicn nacidos con 0,3 o 1 .000 unidades formadoras de places (ufp) de virus y se miditi la respuesta T citottixica (TC) frente a las celulas infectadas por virus junto con la produccidn de IFN-,., (citocina de TH1) e IL-4 (citocina de TH2) en respuesta al virus . Los ratones infectados con baja dosis de virus desarrollan una respuesta de tipo TH1 y quedan protegidos . Las unidades empleadas son arbitrarias .

Regulation de las respuestas inmunitarias

cittrcina tic Ill)() lI not prtrtcctt>ra dtrmina sohrc I :t rcspucsta protcctt~ra dc tipo 1 . Sc ha demostrado tine Its antigenos polisacaridos indehcndicntcs tic celulas T administrades :t grantics dosis gencran tolcrancia dc l :tp Moths 11 . La tolerancia \ Itts rnecanisrnos suhtaccntes a la misma sc cstudiaran en cl capitulo 14 .

Se Ila demtstradtt que la tia dc administracitSn dc nn antigeno in date sabre la rcspucsta innurnitaria t onsiguientc . Los antigenos administrados pttr sia subcutanea tt intradermica cicscncaticnan tma reslrucsta innrtmitaria, micraras quo: hts :ufministrados por ti .t intratcntsa, oral tt cn forma dc ACT - OSttICS hucdcn pro\ocar tolcrancia e una cttnnltrtaciint cntrc kin tipo dc rcspucsta dc Cc lulls t (' l)4- t. otro . POr ejentplo, los rOCClores clue Iran sitltt alimcntatltts con otttalbimuna tt protcina hasica LIc la miclina i PBNl i no responden eticazrnentc :t una e.spctsiciitn posterior al antigeno corrcspondicnte . Adeinas, en cl casts dc la hlIM, los animates LlttCClan prtxcgidos tirentc a la cnccfllttmiclitis alcrgica experimental IEAE), una cntcrmcti:ui autttinmunitaria . Este tcrt6merte ptredc teller interes part cl trat :unicnto dc las entcrmc dudes alcrgicas ; sc Ira dernttstradtt rccicntcntentc que la admi nistracitin pttr via oral do kill cpitopo tic] alcrgcno I)er hl proccdcntc do los acaros donrcsticos, due rcconoccn ]as celulas h, puctic inducir tolcrancia al antigeno contplcto . (;omo mccanisntos CIc csta induccitin dc tolcrtncia sc hall propucsto 1 .1 ancrgia la dc,tiacitin innurnitaria .

La aparicion o la no aparicion de una respuesta inmunitaria puede depender de la via de administration del antigeno

(:uando cl antigeno sc administra cn forma do aerosol sc obticncn rcsultados parccidos. Los cstuciios Ilct :tdos a caho ell ratones hall dentostrade yue la administraci(n1 cn forma dc aerosol de kin pcptido cnccl litttgcnico inhihc Cl dcsarrttllo tic la LAE yuc suclr inducir la administracion conccncional ipor t is suht tttanca) del pchtido (,fir) . 13Z. Estc tcncimcno puctic teller impli cacioncs tcral)cuticas, ~a que la inhihicitin dc la rcspucsta not se It mica al antigeno adntinistradtt en aerosol, sing que aharca a otros antigcnes capaccs dc pro ducir FAE. Un claro ejcinplo dc la influcncia tic las t- ias tic administracitin sabre cl rcsultado tic la rcspucsta innrtrnitaria cs la intcccicin con cl virus tic I1 atritancningitis lint2tcitaria f NVML ) . Los ratones a hts yuc sc adrninistra por tia subcutanea Cl pcptido junco loll adtvt ante incomplete dc Freund cicsarrollan inntunidad trcntc al 1'(' 11 .. Sin embargo, la imcccitSn rcpctida dcl mismo peptitio 1101' Via intrtperitoncal induce tolcrancia cn hts animates, yuc a partir do cntonccs no son c:tlwccs do chminar Cl t irus i` fill . 13 .31 .

0 CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENOS

I .a naturaleza tic las ('I'A quo: prcsentan inicialmcntc cl antigeno tarnhicn puctic dctcrminar si sc dcsarrolla una rcspucsta innumitaria tt kin tcncimcno tic tolcrancia . part Clue la actixaciiat dc la% celulas T sea cficaz, cs prccisa la cxprcsion dc rnttICCuLts cttcsti mulantcs sabre la superlicic de la (TA Is'. cap. 11 i . Asi, la pro: scnt citin por partc dc Las celulas dentiriticas o tic Its macr6tagtts-

La administration de antigeno en forma de aerosol modifica la respuesta inmunitaria

Inactivation de las celulas T especificas del VCML inducida per peptides

tratamiento previo exposition al virus determination

peptitio en

peptitio en adyuvante

determination de gravedad de' la enfermedad

gravedad de la EAE

5 4 3 2 peptitio intranasal 2 dias despues de la induction de la enfermedad dia 4 4 6 8 logo del titulo de virus 0 dia 10
I'll

control

20 40 60 80

de citotoxicidad especifica del VCML

Fig. 13 .2 . Los ratones fueron tratados con ulna dosis unica en aerosol de 100 mg del peptitio (aminoacidos 1-11 de la proteina basica de la mielina), o solamente con el excipiente . Siete dias mas tarde se administro el mismo peptitio per via subcutanea, esta vez asociado con kin adyuvante. Las caracteristicas de la EAE Clue desarrollaron los animates sometidos a tratamiento previo fueron diferentes Clue las de los de control .

Fig. 13.3 . Los ratones fueron expuestos a VCML o inyectados con 100 mg de peptitio del VCML . El peptitio se administro junto con adyuvante incomplete de Freund per via subcutanea (s .c .) o en forma de tres dosis intraperitoneales (i .p .) . Los animales fueron infectados con el VCML (dia 0) . El cuarto dia se determine el titulo de virus en el bazo . Los animales Clue habian sido tratados previamente con el peptitio subcutaneo o con VCML habian producido Ab neutralizantes y, per consiguiente, eran inmunes frente al virus; per el contrario, los animates tratados con el peptitio per via i .p. no desarrollaron inmunidad . El decimo dia se determine la actividad citotoxica de las celulas T de los ratones . Se observe la presencia de celulas Tc especificas del peptitio del VCML en los ratones Clue no habian recibido tratamiento previo . Por el contrario, esta actividad estaba ausente en los ratones tratados previamente con el peptitio i .p .

Regulacion pot el anticuerpolu

quc c\presan grancics cantidacics dc ntolcculas ('I'1 1 do Chase 11 \ do ntolcculas tocstinullanres, pro\-oca una intensa activacion de Ias cclulas T (\ . /irr. 11 .-1) . Aclcnt:is, la interaccio'm Clare 0)4(11 . do ias cclulas 'f aCti\ddas \ ('11140 tic las tclulas dcndriticas rcsulta cscncial para la pr()duccioin de una Bran cantidad do I1 .-12, ncccsaria para ubtcncr una rcspuesta TI i I efcaz. Sin embargo, Si of antigcno Cs prculltado a Ias tclulas l- por (.1' .-1 -no prolcsi(I nalcs "~, incapaccs tic transmitir scnalcs cocstinnllantes, no sc produce una rcspuesta . I'()r ejentplo, CUMICIO las CCIUIaS T \irgcncs sun c\puostas :t tin ,antigcno prcscntado pttr cclulas 11 en rcposo, .;una, Ninot clue Ias cclulas sc \ uel\ en to I no se produce rcspuesta dl, Icralncs . l .os ad\u\antcs I,uCCIcn facilitar ]as rcspucstas inntunitarias, al indtlCir on Ias cclulas (PA la c\prcsi(in do altar calltidaSC ha ties do nto1CCUlas CTH \' cocstimulantcs . Esta obscr\jCj(in dcntostrado en recicntcs Cstuciios c\pcrintentalcs, title hall comprobado quc es ntis taCil indLICir tolcrancia ell los anintalcs rc cicn nacid(IS . I .os anintalcs son r"isicntcs a la indLICcion do EAI': tras la administracion tic I'BNI en ati\'11\- antc do Freund incompleto durantc cl pehodo neonatal, heclto atribuible al dontinio tic la rcspuesta T112 . Corno la EAF esta mecii:uia por una rcspuesta Tlil, la rcspuesta l'tt2 Itro\ia frcntc a MINI intpidc yuc sc dcsarrolic una rcspuesta patologica . F\pcrintclaos rcalizados coil ratoncs ltcntbra rcucn nacidos a los yuc se in\cctahan cclulas tie bazo do machos sits quo: dc sarrollaran una rcspuesta tic cclulas T citotoi\icas !: (:'T(' I frcntc al antigcno masculine H-1" hall dcmostrado la importancia dc Ias cclulas dcndriticas cn la iniciacion sic cste tips, do rcspuesta . Sin tic 1111 embargo, Cuando se ill\CCtan tanthicn cclulas cicildriticas rcspuesta citomacho a Ias laclnbras, se dcsarrolla una ACCUada toi\ica cspccitica para H -T .

La capacidad dc Icts anticuerpos administrados tic forma pa Si\a para CstintLIlar (I suprimir las respuestas innurnitarias ticnc Cicrtas COIISCt11CllClas \ apl1Cacionos Clinicas : " Algtutas vacunas (1). cj ., las dc la par(Itiditis y cl sarantpion i no Sc SUClcn administrar a niiaos ntcnotrcs tic till alio . Esto cs do hidol a Ias CIC\,ILI .I, c(Incentracioncs dc IgG I,r()cedente, dc la madre durantc al mcnos scis ntescs ticspucs tic] parto ; la prcscncia dc csta Ig( ; adtluirida tic tilrnaa p,tsi\a en Cl nt()Iccnttl'IC

la \acunacio'm pro\()caria cl des;u - rollo tic una rcspuesta innaal nitaria inadCCUada en cl nifu(. " En casos do incompatibilidad Rhesus (Rh), la administracion dc anticuerpos anti-Rhl) a nradrcs Rh intpidc la scnsihiliz,aci(m printaria dchida a Itrs critr()citots MI . I,r(>CCdcntcs tic] Blew, pr()hahlcntcntc mediantc la clintinacioin del anti~'ClIO C\ trano Ilos Crltrocitos tetalcs) del torrcntc tlrCtllatcll'IC) Ittater-

no (\". tap. 24',) . I,os ntcc .uaisnuls mcdiante los yuc los anticucrptts modulan Ias rcspucstas inntunitarias no sc cotnprenticn ell sit totalidad . Sc crec quc la cstinuIlaci()n dc la 6lrntaciCtrt tic placas pear parts de Ias Igr\1 I,uCLIC set- dchida a dos tccanisntos : set- capttl" I.os ittmuIIOContplcjc,s yuc to11tiClICIa Ig\i PUCCIctt radols por Ios r'cccl,torcs tic Fc o de C3 tic [,is (,ILK \' proccsa dots con ntavor cficacia quo: cl antigcno aisladu. " I .os innuuttrCctMPICjos (]tic C(tIltiClICII 1111\1 pueden cstimular una rcspuesta anti-idi(ttipiCa fi- cntc .a la 1g11, yuc antplificaria la rcspuesta inntunitaria . (' Los anti idiotipos SC Cstudiarnn ntis adclantc, cn csrc misnrt) Cal,itultl . 1

Los anticuerpos IgG pueden suprimir la sintesis de IgG especifica

SC C((M)CCII \,nibs sistCntas nICdlantc I()s
yuC

REGULACION POR EL ANTICUERPO

Sc Its dentostrado yuc los anticucrptts cicrcen Lilt Centred roar rctroalintenracion solve Ias rcspucstas inntunitarias. I,a adntillistrati(in pasi\ a dC anticuerpos Ii ,4M \ tin antigcno cstimula sclccti\antentc I :t rcspuesta innnrnitaria Ircntc a esc anti gcno, nticntras yuc Ni rl anricucrpct es tic la Clare IgG se produce la suprCSitm tic la rcspuesta . Este ten(inteno sc dentostr(S originalntente corn anticuerpos policlunales, pcro ha side confirttradol llIcdiantc la utilizacion tic anticuerpos ntonoclonalcs tf(7 . 13.-11 .

prilltir Lt sintcsis dc anticucri,(I,

Las IgG hUCdClI

NLi-

Bloqueo por anticuerpos. El antiCUCr1,0 administrad() p:tsi\antcntC sc unC al antigcno, ell C(I11a1,otcnCla Coil Ias cclulas 13 1-;11 esto Case, Ias consecucncias tic la prcscncia del an tiCUerp(t tirltrntlCn en ,,ran nICdida tic sat COIICCntraci()tt \ tie su afinidad por cl antigcno cat rclaci()n a la alinidad do los rcCcptoLes dc ]as cclulas 11 . S(Sht la', cclulas 11 dc alta afinidad c(nnl)itcn CUn c\ito pot' Cl antigcno . Este naccutisnto Cs inCICI,Cndicntc do la rCgi('tll FC Licl anticucrl,(I . Entrecruzamiento de receptores. SC SAbC t,unbicn yuc Ios :uttiCUCrI)()s IgG piCScntan tin ctcCto, yuC Cs dcpcndiCntc tic Las rcgi(Incs Fc . Sc pan Ilccad() .a c.th() c\pcrintcntos yuc dCHILICS tran quc Ias inntuno(Iohtllinas pucdcn inhihir la ditcrcnciaciotn dc las CCILIIas B mctliantc cl Cnrl'cCruzantiCnto dc has receptores tic antigcno COIL los receptores do Fc ( Fc/RII ;~ dc I .t propia cclula i\-. iia . 13 .5} . Fn estc casts, Its ;tnticucrpos pueden rcconoccr epitolpols diferentcs yuc los receptores tic la Cclula 13 . Cuando Ias dosis de IgG not son SufiCicntcs para inhihir Cony plctantcntc la produccion dc antiCUCI-I,os, induccn 1111 aunicnto Lic ht alinidad nICCiia tic Ios attti000rp()S; esut CS tiCHdo a yuC ScIIA mcntc Ias tclulas B coil receptores tic alta afiniclad pucdcn cotm pctir Con csitct COIL of antiCUcrpo adquiridol tic forma pasi\a para unirsc al antigcno . Por cllo, sc crec yuc la rctroalintcntacion cicrcida por Ios :uatiCtlcrpos es tin importantc factor inductor LICI . 13.61. proccso dc ntaduraci(in tic la afinidad (/u1

Control pot retroalimentacitin ejercido por anticuerpos

cclulas 10 5 formadoras de placa pot bazo

104

103 -tiempo transcurrido desde la inmunizaci6n (dias)

Fig. 13 .4 . Se administraron a los ratones IgM monoclonal anti-EC leritrocitos de carnero), IgG anti-EC o excipiente puro (control). Dos horas mar tarde, todos los grupos fueron inmunizados con EC. Las respuestas de anticuerpos quc se observaron a to largo de los cuatro dias siguientes fueron potenciadas pot la IgM e inhibidas pot la IgG.

Los inmunocomplejos pueden potenciar o suprimir las respuestas inmunitarias

d, 1'. Una tic Ias fornras en yue I(ts ;uttiCUCri,os C Igr\1 ntotItrl,tr Las respuestas inntunitarias cs tin mecanism() dcpcndicntc do Fc, yuc requicrC la fitrnticicin dc inntunocontplcjos con cl antigcno . Estos inntunocontp[Cjos pucdcn initibir () accntuar [as rcspucstas inntunitarias (-/uj. 13.,-i . :\l acti\ar cl contplcmcnto, I()s inntunocontplcjos sc pucdcn localizar mctiiantc la interaccioln ton ( :1(2 en Ias cclulas kllicularcs dcndriticas. Am sc

Regulation de las respuestas inmunitarias

Supresion de las celulas B dependientes de anticuerpos bloqueo por anticuerpos entrecruzamiento de receptores

Retroalimentacion de la maduracion de la afinidad por Ab dia 1 anticuerpo pasivo l . dia 2 antigeno dia n determinac . afinidad .' y concentr. anticuerpos

I h

coneiri

titit,trlr;

, conejo control concentracion 2 de anticuerpos (mg/ml)

Mr

contro~

afinidad 10'emedia (LM) log

Fig. 13 .5 . Bloqueo por Ab . Las dosis altas de Ig soluble bloquean las interacciones entre el determinante antigenico (epitopo) y las inmunoglobulinas de membrana de las celulas B. Asi, las celulas B no son capaces de reconocer con eficacia al Ag . Este mecanismo de bloqueo de receptores tambien impide la activation de las celulas B. Las celulas B con receptores para otros epitopos no resultan afectadas. Entrecruzamiento de receptores . Los Ab a bajas dosis inducen el entrecruzamiento de los receptores Fc de una celula B y sus receptores de Ag, actuando como puente el propio Ag . El receptor FC-yRllb se asocia con una tirosina fosfatasa (SHP-1), que interfiere con la activation celular por las tirosina cinasas asociadas con el receptor antigenico . Las celulas B pueden ser activaclas, pero no son capaces de sintetizar Ab . Todos los anticuerpos frente a distintos epitopos del antigeno actban mediante este mecanismo.

Fig. 13 .6 . Efecto de los anticuerpos adquiridos de forma pasiva sobre la afinidad y la concentracion de los anticuerpos secretados . El dia 1 se inyectaron anticuerpos (anticuerpo pasivo) a uno de los dos conejos. Ambos conejos fueron inmunizados con antigeno el dia 2 y, mas tarde, se cleterminaron la afinidad y la concentracion de los anticuerpos producidos frente a dicho antigeno (dia n) . Estas determinaciones demuestran que la adquisicion pasiva de anticuerpos reduce la concentracion de los anticuerpos producidos, pero aumenta su afinidad .

podria tacilitar la respuesta inmunc mantcnicndo la titcntc Lje antigcnO . CR2 tambicn SC csl -csa cn las cclulas B V, CUmo SC lia dcntostrado que la union dc (:IL1 ion IgMni ictica las cclulas B, ]as intcraccioncs do los innitinocomplcjos coil CIi2 cn cl complcjc~ celula B-corrcccptor c con Igm podria amplificar la rcspuesta in1111111C cspecifica . Las rospucstas inmunitarias dc I()s pacicntcs Coil tumcn-cs rtra lignos SUCICn ser dcbilcs, \' sc Ira pro~pucsto que cstoi pucde ser debido a la prcsencia dc inmrtno complejoos circulantcs tormados por anticuerpos ~ antigenos proccdcntcs dc Ids cclulas tumorales .

REGULACION POR LINFOCITOS

La regulation cn scnticlo positis- o dc las rcspucstas inmunitarias por parse dc las cclulas T, mcdiantc su actin idad colaboradora, cs un hecho indiscutible . Por otra parts, cl tipo dc ayuda que aportan TH I o - FH2 ;~ intluye en la naturaleza dc la respuesta innru nitaria, tar orccicndo [as rcspucstas humorales o [as mcdiadas por cdulas . Adcinas, csistcn prucbas conduscntcs do yuc las cclulas f tambicn son capaces dc regular negatisamente la', rC5pue5 US inmunitarias (fig. 1.3 .8).

administraci6n dc altar dosis de un autoantigcno ~ grncralmcnte cn torma soluble o no agr"adal impide que Cl proceso autoinmunitaric~ siga adelante . Por cjeniplo, se ha dcmostrado yuc l as cclulas T ('D4' impidcn cl dcsarrollo dc autoanticucrpos f- cntc a tiroglobulina (liq. I.i .yy. AcIcmas, la administration de anticuerpos anti -CD4 I'que bloqucut la presentation dc antigenos mCLfada por MOIcculas CPH de claw I I ) al mismo ticmpo que la dosis dcl inmuncigcno i tiroglobulina , no silo impide cl dcsarrollo dcl proceso autoinmunitario, silo que tambicn induce la prolilcracion de una poblacion do cclulas T (:l)4' que Puede translcrir tolcrancia especifica a receptorcs virgenes I:firz. 13 . /0). Los mecanismos exactos mcdiantc los que la% cclulas T cjcrccn estos cfcctos ncgatisos no cstan aclarados totalmcntc . Sin embargo, rccicntcmcntc sc hail Ilc%ado a cabo cycrimcntos yuc sugicren que la production dc citocinas como TGFR, IL-4 r IL-10 por parts dc las celulas TH pucde suprimir partial o totalmentc una respucsta inmunitaria .

Las subpoblaciones de celulas TH intervienen en la regulation de la production de inmunoglobulinas

Las celulas T CD4' pueden impedir la induction de la autoinmunidad

Ell nnrchos nrutoielo>s cspcrinrrnt.ll0 dc- cnti-rmcd,td auto~inmu nitaria sc ha obscrsado yuc las cclulas - f ( :l)4 - generadas tras la

I .,t produccio>n oic discrs :rs citocinas 1)(,r l"trtc dc l .a ditcrcittcs subpoblaciones do lintocitos Ttt f ('D4 - i proporciona una c .spli cation para cictcrntinadas obsenaciones relacionadas con la rcgulacicin dc la sintesis dc IgF: . Se ha demostrado que esiste una regulacioin cruzada entre las subpoblaciones 'fit, dc tal forma que la scci-ecirin do IF\y por parts tic las cclulas Till inhibe la ca-

Regulacibn por linfocitos

Efectos reguladores de los inmunocomplejos

pacidad tic respucsta do las cclulas T112, mientras quC la IL 10 producida por las cclulas -1112 reduce la expresiim de 11, c II . 12 por partc do las (TA, to quc a su %,cz inhibc la actk-acion tic las cclulas 'l'ti l . Adcmas, la cxprcsiiin dcl rcccl,tor do alta afinidad IL- 12 R, ncccsaria para cl tlcsarrollo do las Cclulas Till, sc sr atcct:ttia por el tipo do citocinas dominantcs . Id II .- I2R do alta Anidad csta compucsto do dos cadcnas j3l c (12, quc scilo SC cxprcsan juntas cn las Cclul:u'1111 . La caticna (il Sc cxl)rcsa tanto cn las cclulas 1- I I1 conto Tt 12 s' la cxpresir'm do j32 sc attn a por (FN-,,, c inhibc pin- 11 4 . Sc ha dcmostrado quc cl tipoi tic I - ti quc prc-

Celulas supresoras en la tolerancia inmunitaria dia 0 Tx medula " I osea dia 30 -* esplenocitos LCT .

Fig. 13 .7 . Los inmunocomplejos pueden inhibir o acentuar una respuesta inmunitaria . Inhibition : Cuando un receptor de Fc de una celula B se entrecruza con un receptor de Ag mediante un complejo Ag-Ab, se transmite una senal a la celula B que impide que se inicie la fase de sintesis de Ab . Puede que las IgG adquiridas de forma pasiva actuen tambien de esta manera . Acentuacidn: Los Ab unidos a los receptores de Fc de una celula presentadora de Ag facilitan la presentation del Ag a las celulas B; en este caso el mismo efecto realizan los receptores del complemento (CF12) de la celula folicular dendritica (CDF) . Puede que las IgM adquiridas de forma pasiva actuen de esta manera .

procedencia de los esplenocitos EC normales ninguno EC tolerantes

-W __ - -

__-7-777-

__ _-

respuesta de anticuerpos frente a EC el dia 44 Fig. 13 .8. Se reconstituyeron con celulas de metiula osea ratones timectomizados e irradiados previamente. A los 30 dias fueron colonizados de nuevo con timocitos y esplenocitos, y expuestos a eritrocitos de carnero (EC) . El dia 44, los ratones receptores a los que se habian transferido esplenocitos activados con una dosis inmunogena de EC presentaban una intensa respuesta. Los que no habian recibido celulas de bazo presentaban una respuesta moderada . Finalmente, los que habian recibido celulas procedentes de ratones en los que se habia inducido tolerancia a los EC (mediante la administration de grandes dosis de Ag) no respondieron, to que demuestra que las celulas procedentes de los animales tolerantes habian suprimido activamente la respuesta del receptor.

Transferencia de tolerancia mediante celulas T CD4' exposition , determinaanticuerpos . induction de transferenci8II anti-CD4 r de los - cion de la tolerancia de celulas ~ (eliminacion ' receptores con Tg de bazo a Tg+ LPS - de anti-Tg de celulas T)

ELISA 0,8 especifico DO,,_ 0,6 -

tolerantes, sin celulas CD4 Fig. 13 .9 . Se inyectaron a los ratones 200 mg de tiroglobulina murina (Tg) para inducir tolerancia . (Tambien se incluyo en el experimento un grupo de control en el que no se indujo tolerancia .) Parte del grupo tolerante fue tratado in vivo con Ab anti-CD4, para eliminar las celulas CD4' . Se transfirieron celulas de bazo de cads uno de estos tres grupos (no tolerantes ; tolerantes ; tolerantes y carentes de celulas CD4') a receptores singenicos irradiados . A continuation, se expuso a los receptores a tiroglobulina murina y LPS y se midio la respuesta de Ab anti-Tg mediante una prueba de ELISA (v . cap. 29). El tratamiento con anti-CD4' elimino la capacidad para transferir la tolerancia .

50

100

reciproco de la dilution del suero

200

400

800

1 .600

Reyulacion de las respuestas inmunitarias

Supresion inducida por CD4 de la tiroiditis alergica experimental (TAE)

tratamiento tiroiditis

Prevention por parte de las citocinas de la colitis inducida en ratones scid

celulas celulas T CD4' CD4', 45RB"' CD4', 45RB"' CD4', 45RB"' anti-IFN7 anti-TNFa IL10 IL4 0 25 50 75 100 tratamiento % de incidencia de colitis

Tg y adyuvante

Ab anti-CD4 no destruc. de lascelulas (2 mg)

CD4', 45RB"' CD4', 45RB"'

Fig. 13 .10. Los ratones inmunizados con 50 mg de tiroglobulina murina (Tg) desarrollan tiroiditis y Ab anti-Tg . Cuando se les inyecta durante 11 dias tin Ab monoclonal anti-CD4 incapaz de destruir las celulas CD4', pero capaz de bloquear las interacciones entre CD4 y las moleculas de clase II, los animales no desarrollan tiroiditis . Los esplenocitos transferidos desde estos animales tratados impiden que los ratones receptores irradiados desarrollan tiroiditis tras la inmunizacidn con Tg . (Los ratones inmunizados que reciben celulas T control si que desarrollan la tiroiditis .)

Fig. 13.11. En esta tabla se muestra la incidencia de colitis en ratones tratados mediante transferencia de diferentes poblaciones celulares . Los ratones a los que se administran celulas T CD4' no fraccionadas quedan protegidos frente a la colitis. Cuando se les administra una fraccibn de celulas CD4 que expresan grandes cantidades de CD45RB (CD45RB'*,), si que desarrollan la colitis. Sin embargo, cuando se administra a la vez a los animales anti-IFNy o anti-TBFoz, la incidencia de la enfermedad se reduce . IL-10 (pero no IL-4) tambien es capaz de modular la enfermedad en estos animales . Esto sugiere que el IFN y el TNFu intervienen en el desarrollo de la colitis, y que IL-10 puede inactivar las celulas efectoras,

ciontina dcpcndc cicl IF\ox clue tasorccc cl dcstrrollo dc 1-111, induso en prcscncia Lie II,-4 y la ncutralizacio>n de 11 .-12 . for ttnto, ht acticacitin sclcctis a delas celulas Ti i l o l*112 pucric conducir .t dilcrcntcs respuestas c tectoras . La manipulacion sclccti\ -a dc estos respuestas pucric resultar irtil para cl tratamiento Lie 1 .1 alcr ,ia .

pucstas inmunitatias no 1-cgguladas, Io yuc sttgicre que la regulation de las respuestas inniunitarias por parte dc las celulas TH2 C.D4i pero no por ]as celulas TI 11 C:D4 1 cs till proceso fisiologico normal, \ . no tin artcfacto 1. ;.11) . Fsietcn datos yuc indican yuc cl TGF(3 pucric intcrsenir ell la rcgulacion (IC la colitis, scgun SC nulestra en la frlura 13 3. 11, hccho compatible con la obsersacicin dc colitis cn Ion stones cicficitarios pdra csta sustancia.

Las celulas T CD8' pueden transferir resistencia y tolerancia

Sc Ila demosn'ado ciuc las CClul1S T CD8' tambien intcnicncn en la regulacion dc [as respuestas inmunitarias . Sc hall encontrado celulas T C ;D8' ell Ios bazos dc animales en los clue se: habia illducido tolerancia fccntc a la I'BM mcdiantc la administration kid antigcno~ poor via oral I, mas arriba). Fstas celulas pueden transfcrir resistencia fi-cntc a la FAF. in vine. Fstas celulas T no solo su primer las respuestas Lie celulas F ti- cnte a la PBM in vitro, sino~ ]as yuc tambien suprimcn pasisantctuc respuestas frcntc a otros antigcnos no rclacionados . Sc crcc yuc cstc cfecto csta mcdiado por TGF[i .

0 MODULACION IDIOTIPICA DE LAS RESPUESTAS

La tolerancia a los ;uttoantigeno~s sc adquicre durante la ontogcnia (\ . cap. 12 }. Sin embargo, durante cl pcriodo neonatal las conccntraciones tie las rcgiones tie union dc los receptores dc antigeno Lie [as celulas B y T son dcnrasiado pcgLICnas comp para gcncrar tolerancia . Dc la misma lorma, :ulnquc cn CI sucro sc dctcctan anticucriuos, silo Sc ciesarrolla tolerancia a [as rcgiones Fc, ]as unicas yuc prcscntan una conccntracicin suficicntcyuc son mentc clctacia ; no sc desarrolla tolerancia ti-cntc a los detcrtni nantes do Ix, cadenas pesaclas y ligeras yuc confiercn al anticuerpo la cspccificidad dc union Aantigeno . Por tanto, each receptor dc celulas F each illntunoglobulina son inmunogcnos cn virtUd do sus sccuencias cwlusicas, yuc sc Licnominan idiotipos. Los anticucrpos yuc sc forman f-cntc a cstos punto~s de union al llltigcno SC CIcnoaninan anticucrpos anti idiotipo, .- soil capaces dc modificar cl cttrso do I :ts reacciomes inmunitarias. Los cieterminantes idiotipitos pueden estar codifcados en los genes do Ias regioncs \' dc la linca germinal, o pueden ser ge. nerados mcdiantc los procesos dc recombination s mutation que cian lugar a los clcmcntc tuncionalcs dc las rcgioncs V (c. cap. 8 i .

La regulation de las respuestas inmunitarias por parte de las celulas TH2 CD4' es tin proceso fisiologico normal

Sc ha 1)ue~tuo en ducia cl papcl fisio~logico dc cstos mccanismos regulado>res nuciiados por celulas f C'D4- o (;F)8' . Sin embargo, cl hallazgo tic yuc [as celulas T C ;D4' capaces dc lrenar los procesos autoinnutnitarios se encucntrtn presentes en animales normales no nranipulados Ita dada motivos para pcnsar Liuc si yuc inter icncn en los procesos hontcostaticos normalcs . Ademns, se Ita obscrca do clue cuando sc climinan las celulas TI12 C . .D4' dc ratas y rato ncs, yuc normalmcntc sintctizan IL-4 c IL 10, sc produccn rcs-

Modulacion idiotipica cle las respuestas

Idiotipos asociados al punto de union con ell antigeno

anticuerpo frente a un idiotipo ajeno al punto de union anticuerpo frente a un idiotipo del punto de union

Modulacion de los idiotipos per los anti-idiotipos

semana 0 anti-Id 146 semana 6 antigeno NP-GP semana 8 deterrninacion de anticuerpos sericos

inhibition de la union

Fig. 13 .12. Un suero anti-idiotipico puede contener Ab dirigidos contra diversas regiones de la molecula de Ig . Las regiones pertenecientes al punto de union son idiotipos asociados a este . La union de los anti-idiotipos a estos tiltimos puede ser inhibida por el hapteno. Los Ab frente a los idiotipos no asociados al punto de union no son inhibidos por el hapteno.

tratamiento previo con 10 pg de anti-Id tratamiento previo con 0,1 pg cle anti-Id idiotipo 1461ugr'ml) Fig. 13 .13. En el memento 0 se inyectaron a los ratones 10 mg o 0,1 mg tie anti-idiotipo (anti-Id) frente al Ab 146, especifico del grupo nitrofenilo (NP) . A las 6 semanas se expuso a los animales a NP unido a un portador, globulina de pollo (GP) . Dos semanas mas tarde se determinaron los titulos sericos de idiotipo 146 (diagrama de barras) y de anti-NP total (no mostrado). Los ratones tratados previamente con 10 mg de anti-Id mostraron una supresion del idiotipo 146, mientras que los ratones tratados con 0,1 mg mostraron un aumento de la produccion del mismo, aunque las concentraciones totales de anti-NP fueron parecidas en ambos.

control

Los cpitopos inmuncigcnos situados cn cl punto do uniint o en sus alrcdcdorcs sc dcnontittan idio~to~pots (hr1 . 13 .121 . lei-tic propuso la cxistcncia en cl organisnto dc una red inmunitaria clue intcracciona ntediantc cl reconotcimiento de los idiotipos . Scgun .Sit teoria, cuando un antigeno induce una rcspucsta do anticuer pos, cl anticuctpo producido inducira a su xez una rcspucsta antiidiotipica contra si mismo. Esta hipotesjs CS n1usr atractisa descic un Punto dc sista conceptual, pcroo todasia sc dchatc acaloradantentc cl papcl clue pucdc cicsempcriar una red idiotipica de estc tipo en cl control dc las rcshucstts innrttnitarias no,rnrales .

Las interacciones idiotipicas pueden estimular o suprimir las respuestas de anticuerpos

Supresion de las celulas B inducida por anti-idiotipos

anti-Id (anti-T15) 1 > PC en un portador 'L determination de anticuerpos

l .dhten hastantcs dates yuc indican yuc Ion anti-idiotipos pucden afcctar a la cantidad do cada uno dc lo ,, idiotipos prcscntcs cn una rcspucsta inmunitaria . Porr cjcntplo, cuandot se expose a ratones de la cepa ('57131 /6 al hapteno nitrofenilo i,\I'}, los anintalcs produccn anticuerpos pertcnccicntcs a unos pocos idiotipos concretos, conto, por cjcntplo, cl idiotipo 146. Los anti-idiotipos frente a cstc anticuerpo (idiotipo 1461 pucden estinudar o suprimir la produccion dc idiotipo 146 cuando los ratones s'uchen a ser cxpucstos a N11 conjugado con una protcina portaciora . El efecto clue sc ohscrca depende dc la cantidad dc :/it) 13.13'1 Cs cspecifico dc csc idio1 anti-idiotipo administrado . tipo cn concrete, va clue la concentration total tie anticuerpos anti-\P apcnas sc modifica . Hat clue cicstacar cl hccho dc yuc las cantidadcs dc anti-idiotipo utilizadas cn cstos cxpcritncntcn Sc cncucniran en cl range fisiologico normal dc dctcrtninado~s anti cucrpos idiotipicots, to yuc sugicre que la regulation idiotipica pucdc dcscrnpcfar algtin papcl in riro . Fstots fenontcnos tantbien sc has obscrsado en otros sistcmas idiotipicos . Los clectos que SC produccn cuando sc administra un antiidiotipo durante el periodo neonatal son espcctacularcs, y pucden pcrsistir durante toda la x ida del indis iduo . 1'or cjcntplo, la capacidad dc los ratones recien nacidos part iniciar una rcspucsta anti-fostorilcolina sc reduce extraotrdinariantcntc tras la inycccion dc anti-idiotipo frente a I'15 f 115 es cl principal idiotipo prcsentc cn las rcspucstas frente a t'(tstorilcolina h. Esta situacicin se prolonga durante s arios nteses . tMas tarde, en las rcspucstas dc estos ratones frente a litsfitrilcolina predominan las inmunoglohulinas distintas dc I'15 I:/iq. 1.1 .1-1) .

tratamiento anti-Id 1. ac! . . t-i , sin wit -I,I 2. adulto, dir : ', alta dosi, ir : a'rt' III 3. recien sac- d-, dia 42, baja d ,, -! cle avil I :I :jresion temporal supresion largo plazo

Fig. 13 .14. Ratones tratados previamente con anti-idiotipo frente a T15, durante el periodo neonatal o bien cuando ya eras adultos. A continuation, fueron inmunizados con el hapteno fosforilcolina (PC) unido a un portador. Se determine la concentration total de Ab frente a PC, asi come el componente T15 de la respuesta (color mas oscuro). Los ratones adultos normales presentaron una buena respuesta frente a PC, en la que predomino T15 (1). Los ratones adultos tratados previamente con anti-idiotipo presentaron una supresion temporal con perdida del componente T15, que explica la reduction de la respuesta anti-PC total (2). Los ratones tratados con anti-idiotipo durante el periodo neonatal experimentaron una supresion a largo plazo de sus celulas B T15-, pero compensaron esta supresion con la produccion de celulas especificas T15- (3).

Regulacion de las respuestas inmunitarias

MODULACION NEUROENDOCRINA DE LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS

Sc sabc dcsoic hacc tierrtpor Clue las situacitnes generacioras dc cstrcs pucden conducir a la strpresilm do las funciones inmunitarias, por cjemplo reduciendo la capacidad para recuperarsc cic una intccci6n . Sc trata de una prucba indisctrtiNC do la interconcxioin cxistente cntrc los sistcmas ncrvioso, cndocrino c inmunitario . A grandc% rasgos, los dos mccanismos principalcs mediantc Ios Wales Ios acontecimientos gtre 0Qrrren en cl SNC . pucden modular Us respuestas inmunitarias son (,hq . l .il :rl : " I,a mayoria dc Ios tejidos lintirides cstan incrsados directamente por cl sistema simpatico, ctnas prolongacioncs alcanzan Canto a Ios s-asos sanguincos clue los atrasicsan comer a los propios litttocitos . " El sistcntt ncnioso controla dirccta or indircctamcntc la procluccion dc \arias hormonas, sobrc todo dc corticostcroidcs, ltormona del crccimicnto, tiroxina \ adrenalina .

Interacciones neuroendocrinas con el sistema inmunitario

I,os linfocitos cxpresan receptorcs dc nurcltas horntonas, ncurotransmisorcs \ ncuropcptidos, entre Itrs clue se enarentran los do cstcroidcs, catccolaminas iadrcnalina \ noradrcnalina), encc falinas, cndorfinas, sustancia P V peptic! o intestinal \asoacti\o f VIP, dcl inglcs rasnactire ittteatirttrl peptiticl . La cxprcsion dc los mismos y la capacidad do respucsta es distinta ell las diferentes subporblaciones dc lintircitos N, monocitos, dc Cal forma clue el efecto dc Ios discrsos transinisorcs dcpcndc tic ],is circunstancias concrctas en clue actuan . Sin embargo, ttno CIc Ios mccanismos dc control mas importantc cs cl mcciiado por Ios corticostcroiCics, las enclorfinas _\ las encetalinas, compucstos clue son libcracios ante cl cstrcs t quo posccn propicdadcs innuuursuprcsoras In riro . PI clecto concrcto dc las cndorfinas itt vitro s aria nrtrclur scgtin Cl sistcma c\pcrimcntal y ]as dosis utilizalas ; a algimas conccntraciones actuan como inrnunorsuprcsorcs, micntras quo a otras cs6rnulan Las funcioncs inmunitarias . Sin embargo, Sc sabc quo Ios corticostcroicics actuan como un sistcma dc control pox retroali mcntacioin dc Las respuestas inmunitarias . Sc Ila obscr ado clue Ions propiors linfbcitos pucden responder aI factor liberador dc la corticotropina secrctando M : - FH, clue .a su scz induce la libcracion dc corrticostcroidcs . Sc Ila dcmostrador clue Ios corticostcroidcs inhibcn la proxluccioin ofc citocinas por las TI 11, micntras quo rcspctan la respucsta TH3 . 'fambicn sc ha obscrvado Clue aumentan la production dc 'IGFIi, Clue inhibc la respucsta inm initaria . Se crcc clue loss ba jos nis'cles dc corticorsteroides presuntas cn las ratas dc I,ess'is corn tribuwn a la suscclxibilidad do csta ccpa a un anrplio numcro do cntcrmcoiades autorinIVtuncs inducidas t, tras la induction tic LAE cn Lis mismos, la recuperation espontanca se acompafia (1c un incrcnrcntor ell Cl niscl do CorrtjCoStCroidCN ~ la suprarrcnalcctoniia impidc dicha rccupcracioiu . La intportancia LIc Ios corticostcroiolcs cn la susccptibilidad global a las cntermcdacics sc dcnurcstra tanibicn ell ratas PVC ;, quo strCICn scr rcsistcnccs a la EAE, pcro sc ~uclsen susccptiblcs tras la CxcreSIS Cc la suprarrcnal . I .a rclacio'rn entrc los sistcmas ncurocndocrino c inmunitario no es unidirectional . Se ha deniostrado Clue las citocinas, sobrc todo IL-I c ll,-6, actuan como moduladorcs bidircccionalcs cn la conuuucaci6n cntrc Ios dos sistcmas . F.stas citocinas actuan sobrc la hormona libcradora dc corticotropina i CliF'I, cstimulando asi la production do corticocstcroidcs suprarrcnalcs . I1 .-I cs sintctizada por Ios macroifagos c IL-6 por Ios linfocitos T, pero adcmas ambas son producidas por ]as neuronas \ las cclulas glialcs y por cclulas hipofisarias y suprarrcnales, to clue confirina su iniptrrttncia comer ntctiiadorrcs bidircccionalcs en Lis respuestas free tc al estres .

CONTROL GENETICO DE LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS

Se sabc desdc hacc ticmpo clue la capacidad para gencrar una respucsta innurnitaria trcntc a cualquicr antigcno concrcto cs difercntc cn ctda indis iduo . Los patroncs tamiliarcs do susccptibilidad a Cmwncbactcritim dipbtherim , sugiricron quo la rcsistcncia o la susccptibilidad a dicho nucroorganisnio podian scr rasgos dc naturalcza licrccitaria . Esta propuesta se confirino cu,uido sc conrprobo quo ditcrcntcs ccpas dc cobayas prescntaban ditcrcntes patrones dc rcsistcncia a la ditteria, e Clue esta caracteristica era de naturaleza hcreditaria . Sclcccionando ccpas do cobaya con alta y con haja capacidad dc respucsta, Fjord-Scheibcl demostro en 1943 yuc la produccio'n dc antitoxina frcnte a la dificria se cncucntra bajo cl control do un uniar gcn, clue sc transmitc como rasgo mcndcliano dominantc . Este cstudio tire cl primcro cn quo se demostrci Cl caracter doniinante dc la alta capacidad dc respucsta . El 90%i, dc los dcscendicntcs de printera gcncracion dc dos animalcs con alta capacidad dc rcspuesta resultaron ser pro ductores dc toxina, mien tras Clue en cl caso dc animalcs coil baja capacidad dc rcspuesta fiieron niccsarias cinco gencracioncs dc

Fig . 13 .15 . En el diagrama representado en la figura pueden verse algunas de las conexiones clue resultan posibles entre los sistemas endocrino, nervioso e inmunitario . Las flechas azules representan conexiones nerviosas ; las flechas rojas representan interacciones hormonales, mientras clue las flechas blancas corresponden a presuntas conexiones cuyas moleculas efectoras no son conocidas .

Control genetico de las respuestas inmunitarias

cruces endopnlic(1s para clue el 90(% dc to,, indisiduos prcsentasen haja capacidad (1c respucsta. Los haplotipos CPH influyen en la capacidad de respuesta frente a un antigeno ( on cl desarrollo dc las cepas cnd(~ganli, .u (ic r,it(rncs sc hizo posihlc analizar coil mat or rigor las influcncias gencticas, s, se Ilego a la CUrtelUsi6n dc clue los taitores gencticos influs en de iicrta forma en la capacidad do respucsta innntnitaria . Por cjcinplo, las cepas (Ie ratorICS con dlfCrerltCS 1laplotipos ('PI I prewntan distinta capacidad para dC%Crlcadcrlar- una respucsta dc anticuerpos trentc a dctcrminados antigcnos I jiq . 13.1 h} . Este tenomcno depende dc las n1olcculas CPH do class 11, y cs cspccifico para each antigeno i una cepa coil alta capacidad dc respucsta trcntc a cicrtos anti gcnos pucdc presentar haja capacidad dc respucsta frentc a otrosj . Mas tarcic, sc dcmostru clue Ios genes del (-PI I fs . caps . , s. 91 inftuscn dccisisamcntc ell las rcspucstas trcnte a los agentes inlecciosos. Existen genes ajenos al CPH clue tambien influyen en las respuestas inmunitarias Lu los iiltin1os Aiios SC 11 .111 Producido inlPortantis Js :ulics cn estc canlpo : se hail descitracio las estructuras CIc l .IS n1olccula, (TH de claw I v 11, sc hail dcscuhicrto losaminoaciclos clue coil ficren pohrnorfisnlo al CPH, s- sc Ila cstudiado su influcncia sobrc la uni6n con los pcptidos ; sc ha conscguido nionitorizar cl rc-

pcrtorio dc cclulas T, nlcdiantc cl dcsarrollo de rcactisos c mctodos inolccularcs para la dctccci()n do los'IVR; sc hart cicsarroIlado stones transgcnicos ; todos estas asances hail prosrocad(~ una avalancha do infilrnlaciun sobrc la titrnla ell quo : los factorcs -cncriios afciran a las respuestas inmunitarras . Sin rmhargo, los taitores gencticos clue nlodifican [as respuestas inn1tinitarias no sicnlprc cstan rclucionados coil cl CPH . Por cjcirlplo, la innlti nocicficiencia combinada grace se debe a la ausencia del gcn dc la rccornbinasa, v cl deficit de adllcrcncia Icucocitaria a n1trtacioncs en cl gcn dc la integrina P_, clue irrpicic la cxprcsi()n do LFA 1, . (R3\('1-',4 Todas las respuestas inmunitarias en las clue es necesario el reconocimiento del antigeno pot parte de las celulas T estan controladas pot genes ligados al CPH ( ~~nu> W 11J indic,ld(~ CH capitulos antcrioris, las rcspucstas in munitarias dcpcnden do la activaci(in de clones dc lint6citos . Vas iclulas l solo rcc(moccn tin antigeno cuando lcs cs prcscntado cn tirrnia dc pcptido as(xjado a n1olcatlas do dace I o II del corn plejo principal dc histocompatibilidad f ( :PH 1 . Por cjcrlnplo, las iclulas I'( (AJS' espccificas de la glui(lprotcina VCML solo lisan las celulas diana infectadas coil cl virus pr(>cedentes de un rat(m de una icpa eon las inismas n1(rlcetrlas (.PH de claw I Ifq . 1.1 .1'1 ; esta capacidad dc reconocimiento se adquicre duranto la onto genia (,hR . 13.181 .

Diferencias en las respuestas de Ab de distintas cepas

Restricci6n genetica de las celulas Tic infeccion del raton -~ ' con el virus . aislamiento de las celulas T
~`

ceps H-2

C57L C57BL'6 C3H.SW 129/J BALBic

A.BY

determinacion de la ' capacidad litica de j, celulas diana infectadas

H-2

C57BL+'Ks _, B10.D2 DBA'2

virus

cepa del raton

region H-2

porcentaje de celulas diana de cada haplotipo lisadas

NZB

H- 2.

CBA C3H/HeJ C57BR;'cd C58/J B10.BR i 50

10

20

30

40

60

70

80

antigeno unioo (%) Fig. 13 .16. Se administro a 15 cepas de ratones una dosis estandar del Ab sintetico (TG)-A-L . Las respuestas de Ab se expresan como la capacidad de union al Ag del suero. Los animales del haplotipo H-2'1 presentan alta capacidad de respuesta, los del H-2 una capacidad intermedia y los del H-21 baja capacidad de respuesta . Sin embargo, existe un cierto solapamiento entre las capacidades de respuesta de los diferentes haplotipos, to clue indica clue los genes asociados a H-2 no son los 6nicos clue controlan las respuestas de Ab.

Fig. 13 .17. Se comprobo la capacidad de las celulas Tc ~j-ratones adultos (cepas A.TL, CBA y A/J) de los haplotipos H2', H-2^ y H-2'' para destruir celulas diana infectadas con virus. La cepa A.TL es H-2KI, H21` y H-2D ', y sus celulas solamente destruyen celulas diana infectadas con el virus de la coriomeningitis linfocitaria (VCML) cuando ambos tipos de celula comparten los haplotipos H-2K o H-2D". Esto demuestra clue las celulas T citotoxicas antiviricas estan sometidas a restriccion de clase I (observese clue la citotoxicidad frente al VCML depende sobre todo del locus H-2D) . En contraste, en los ratones A.TL infectadas pot el virus Sendai la citotoxicidad depende principalmente del locus H-2K . La infeccion de los ratones CBA con el VCML confirma la importancia de la restriccion genetica en estas respuestas . La infeccion de los ratones A/J con el VCML confirma el hallazgo de clue la citotoxicidad frente al VCML es maxima frente a celulas diana con el mismo H-2D . Los diferentes virus se pueden asociar preferentemente a diferentes moleculas CPH H-2 K o H-2D para formar dianas para las celulas citotoxicas.

Regulaci6n de las respuestas inmunitarias

Especificidad de las celulas Tc

irradiaci6n, implantac . I' provocaci6n con virus ` de celulas del donante i l ' de la vacuna anblisis de las celulas Tc

nlcntc ayucllas Cclulas diana portatioraS do Ios ntisnlos :ultigcnos ell ( :PI I clue C\istClI ell cl tinlo Clue Ila nraduradoO la cdllla f. Este hall :lzgo, juntoo con wroos datoos, sugirioo clue las Cclulas T cll proccso do niadur-,tcioin soon cdUCadaS para reconocer cl antigcno ell soOhnicntc cl ccmtc\to ( .PH Ilcsuttc orlginalincntc ell cl tulio . Los cxpcrinicntos Ilc\ados L cLbo coil ratooncs transgcnlcos hall hCrnutldo conoccr cstc proccsoO coon mss dctallc, \a yuc Ila sltio ' lcl 1sIl ' oflte`llc `r Lnnntlcs do c~tc tI Il) tot l1It os yU C 11 Ill l\orla

experimento 1 3 4

procedencia de las celulas del donante IA 6) rri,difa -1 -c- ;, medula 6sea bazo bazo

receptor A B A B

citotoxicidad frente a: vacuna A + + + + + + vacuna B

dc laS CelulaS T pcsccn un unicoo F(A c%pccifico do un anti ono dctcl nLln :tdoo . I-,sic ,lntigcnoo t:unhlen pucdc srr e\lorcsado Co lno un transgen . 1)c csta forma sc sintplifica cl anallsls, \-,L yuc las celulas 1' in\cstigadas rcprcscntan a la Ina\(ma, \ PuedCn ser rcco nocidas ntcdi:ultc anticucrpon doonootipiCOOS, o cspccificos sic \(3

Fig. 13 .18. Se irradiaron ratones receptores (tipos A y B) y entonces se reconstituyeron con linfocitos (celulas de la medula 6sea o del bazo) de ratones donantes A x B. Asi se obtuvieron animales quimericos, en los que los linfocitos eran del tipo del donante (A , B) y el resto de los tejidos del tipo del receptor . Las quimeras fueron expuestas al virus de la vacuna ; se extrajeron celulas T del bazo y se determin6 su citotoxicidad frente a celulas de tipo A y de tipo B infectadas con el virus de la vacuna (denominadas vacuna A y vacuna B en la figural . Los ratones reconstituidos con celulas de medula 6sea lA - B) solo pueden destruir celulas diana infectadas del mismo tipo que las del receptor (1 y 2) . Los linfocitos maduros procedentes del bazo de ratones (A - BI pueden destruir canto dianas de tipo A como de tipo B, independientemente del receptor (3 y 4) . Esto es debido a que las celulas madre inmaduras procedentes de la medula 6sea son (educaclas)l en el timo del receptor, por to que solo pueden reconocer Ag asociados a moleculas CPH del mismo haplotipo que el receptor. Sin embargo, las celulas maduras procedentes del bazo del donante hall sido sometidas al proceso de educaci6n timica . En la mayoria de los casos, para que se produzca la educaci6n timica de las celulas del donante es necesario que el donante y el receptor compartan un haplotipo de la region de clase II .

N13 CS un donlillio \ariablc dCl C0ntplcjOo I ( R i . DC CSta 111 .1110"i SC pucdc obtClICr un rat6n transgenico cu\as celulas I- cxl)rcscn principalnicntc cl 'IY :R sic un coon dc celulas To (1)S' clue rCCo1toCC a una g1LI000protcma tie] \'CM1, prcscmada poor una 1110leCUla H-21)', dc class I, pudicndoo ser utilizado cste raton para cicnioostrar la cxistcncia tic] proccso sic sclcccion positi\a . El TCR dc cstoOs aninialcs transgenicos sc pucdc dctCCtar nicdiante la Lill Iizacio ll do anticucl-pos cspCCificos frente a \I3S . Las clitcrcntCS nlolccul :u CPI I cjcrcert ditercntCS cteCtorS sobre cl dcsarroollo dc las celulas - I' CI)S' maduras quo : c\prcsan cl TCR transgcnico ihn. 13.19) . I .a sclcccion poositi\a dc [as celulaS I (I)S' yuc utilizan la Cadcnd \(iS del TCR transgenicoo solo sc produce ell los ratcxlcs yuc cxpresan la nioolecula H-2", Esto tiCnnlcstra yuc cstc receptor No)]() cs sclcccioonadoo positi\anacntc en rlte,ncs yuc expresan cl haplwipoo (TH aCiCCUaC1cO . I .a scIcCcion positi\a sc produce en las celulas cpitclialcs tic la rcgi6n cor tiCal del tinu) . Sc CrCC yuc loos pcptitios yuc median la SClcccirnt l,ositi\a son pepticios proopios, yuc a cnCLlCntran en CI 611100 en ConCliCitlnCS n:Lttu- alcs .

Las celulas T que reconocen autoantigenos son seleccionadas negativamente en el timo

El ITIVI -tcll -10 CIC Cclulas T pcritericas dclocndc Canto tie] rango dc autoanti,(cncls conlo dc NIL capacidad para unirsc a los di\crsos antigenos CPH . La capacidad de loos peptidos para unirsc al CPH dcpcndc do las sccucncias dc aminoacicios tic los puntos de union dc ]as moleculas (TH . Sahcntos yuc la mayoria dc anti noacicios polinthrficos tic las nlolccuIas CPH NC enCLIcntrall siell tuaclos cl surco sic ullicill COIL CI lvptido . Por canto, cl grail polilnoortisnuo dc secuencia yuc prescntan las moleculas ( :1'H cjcrcc una podcrosa intlucneia sobre la union a Ices pcptidos y, ell cell SCCUenCia, sobre la acti\ -acion dc las celulas T. Ln la actualidad sc sabc yuc las Cilulas 'I- soon soonictidas durantc ski dcsarrollo ell cl time) a coos proccsos dc sclcccioOn : " Sclecciom positi\a, hasada ell las inreraccioncs cntrc los - IY'R \' cl ( PI I Lie] cpitcho Cortical del tinlo . " SCICCC16I1 negari\a, Collltol ConSCCLICnCia dc las intcracciones dc alta afinidad cntrc Ices T(A \ los ccnnplcjos ('PH pcptidoo pre scntacios ell la mcclula del 61110 pcOr CCIuIAS proCCCicntes dC la ntc(Iula ()sea.

I .,1 C\istencia dc hnoccsoo, dc Sclccciom ncg,tti\a llictiiantc clinunacicin clonal sc Ila c1clnoOstrado en expcrinlcntos ell loos quo: sc 11 :u1 utilizado anticucrpoOs nionoclonalcs csi ccificos frente a las cadcnas \'I3 dc Ios'1 CR murinos . Mcdiantc csta tccnica c% posiblc oictcctar \ rccoontar [as celulas li yuc POSCClt 1('R coon una Cadcna \'Ii cictcrntinada, ,lsi conioo dcnlostrar yuc Ion ratontcs yuc cxprcsan I-E soil capaccs dc climinar I .1 poblaci611 dc celulas T \'III7a- del tinlo. La prcwncia dc celulas f \'I3l'a* ('1)4' ('1)S' \ la ausencia dc celulas nt,aiuras \'jil- :1" ( :I)-1 - o \'f31 'a' (:1)S , sugicre Clue la ClintinaCioin SC III -OCIUCC ell la last do niaduracioin dc ],is celulas 1 ell yuc cstas aun soon dooblcntcntc poositi\as i(l)4.Sc ha cicnloostradoo yuc para clue sC prOCIuzca I :1 chntin,l C1)8-i cioon no o basta coon clue sc express I-E, sinoo yuc aLIcntiS CS nCCC saria la expresioll do un lig:utd() end()l;eno .

Los superantigenos pueden provocar la eliminaci6n de grupos completos de receptores de las celulas T

Las celulas T son seleccionadas positivamente en el timo para que sean capaces de reconocer los antigenos presentados sobre moleculas CPH propias

h)s I,rinlCr()S Cstudion Ilc\adors a Caboo en Cstc CMIIIx) suponi,111 la cjccu:ioin tic protocolos Contl,lcjos, collsistentcs ell titncctmttia, irrathacion, rCCCOnStituci6n dc la nledtlla 6sea \ trasplantc dc onto cap. 12). 4lediantc estas tecnicas sc cicill OStr0 clue lds Cclulas Te soon altanicntc cspccificas, siendo capaccs tic destruir sola-

Fil cl tinl(O Jc .ll uil.l s Ccpas dc ratoates sc climinan en hl()yue grupos ioOttlplcrtOs dc Cclulas 1 portacloras do TCR . Poor cjcnlplo, ell los stones yuc c\prcsan cl antigeno sccundario CstimuIantc tie lintiOcitos MIN 1' \ dcterminadas moleculas CPH dc clasc 11, son climin :uias IaS CclulaS I - \' IiO" \- \'11S . I' Jt17. 1.1 .2 )1 El hcchoo dc yuc CI antigeno 1\tls sea rCCon0Cic1Oo p(I- tanlilias CoInplct .l s tic celulas l' cs cl nloti\o tic la intcnsa rcapucsta prolifcrati\l Clue SC ohScr\d Cuando sc Culti\an CoItjuntantentC Cclulas Ccnt c1itcrcntes \11s . Adeni:is, cste tenomtcno dcmucstra yuc dcternti nadoOs antigenos afectan a todas las CCIuI:LS T yuc cxprcsan ruia dcterminada caticna VIi ;Jio7 . 13.21) . Estos antigenos capaccs dc intlucir rcspucstas dc scnicjantc intcnsiciati SC c1cnonlirtan SLIPCrantigcn()s, \ puedcn Scr dc ori;rnoO, loos superanngrnon no sr aCOlOl :ul ell "en Cnt1cogcnoo 0o c\() cl Surco dc union ,11 pcptido do las nto1000laS CPH, sinoo que sc

Control genetico de las respuestas inmunitarias

Selection positiva en el time alto CD8

perfil normal

destrucci~:~ri
CD,:* CDCD3 CDT 82--CD4' 1 CDJ 6 111

control

CDh CD3

bajo alto

CD4 CD8 CD3 1-14%

~~ u

bajo

balo

alto

bajo

alto CD4

Fig. 13 .19. Se obtuvieron timocitos a partir de ratones transgenicos portadores de tin TCR de una celula T CD8' clue reconoce al VCML asociado a molecules H2 1 ' . Se analizaron los timocitos mediante tin citometro de fluorescencia para determiner la expresion de CD4 y CD8. A to largo del proceso de desarrollo normal, las celulas CD4 CD8 se transforman en CD4`CD8', y finalmente mueren o den lugar a celulas CD4-CD8- o CD4-CD8' . En tin raton control Ino transgenico) la poblacion mayoritaria es CD4-CD8', apareciendo tambien en menor canticiad celulas CD4-CD8- y CD4- CD8' . En los ratones transgenicos clue expresan el alelo H-2", las celulas T son seleccionadas positivamente en el timo, dando lugar a una poblacion CD4 CD8' mucho mayor . Esta selection no se produce cuando no esta presente el alelo H-2b correspond iente.

Linen dircctamcnte a la ntolccula tic class 11 v a la cadcna li del TCR iv . cal, . I I I . Un Cjcmplo tic tin aupcrnntigcno cxogcno cs la cntcrotoxina cstafilococica B i SEB, tic] inples stapl~vlococcal cnteroto.xfu R) . I.aS Cclulas T nturinas title rcsponden a cste antige no poneen Las cadenas x'(33 o \'[38. I.os antigcnos Mls constitu)rCn una class do superantigenos endogcncls f t . cap. 1 1 l . Sin cmhargo, cn la aCtualidad sc sahc yttc Ios antigenors MIN do Cu :ilquicr ccpa tic ratem ticncn dctcrlninatlos por la prcscncia tic] )irus en dcSgcno del tumor dC manta nttlrino f Vl ~IM \t ), c(nlificado ell la large rc~,i6n tic rcpcticionex tic[ extrcnto 3' del gcnonia tic dicha ccpa . Ha) Itt11CIIOS \ I \IM difcrcntcs, \ each ccpa do ratcin s(ilo Conticne algunos en su ~'cncnT1a . EStos supcrantigutos cndoigenos Son cxprcsndc en cl tint() ~- l)ro)ocan la climinacioin (Sclcccioll ncgatixa h do las Cclulas T gLIC expresan T( *R con Vli3, \'13() o x'138 .1 . I .os ratones transgenicos, clue SC 11,111 tlescrito ell la secei(in anterior ~cttros transgCt)CS cosdifican la,, cadenas a ) . (3 tic till TCR CspccifC(s tic la glLlCOproteina V(M1, amscjada a H21)'1 talnhien hall scrtido para comprol)ar c6mo hucdC afectar la Se Icccio'ttt timica a la capacidad dC tin animal para dcsarrollar una rcsl)ucsta innnlnitaria cn fases nias ataniadas tic Lit )ida . ( ;uando se intccta a Icts ratones con el x'( :!111, durante cl periodo neonatal, dcsarrollan tolcrancia trCntC al rjrus Se Cont)icrtcn en posr tadorcs tic] misnio). Al csantinar las pohlaciomcs tic Cclulas T cn tic fast LICSarrctllo tic cstos ratones, sc ot)scr\a 1 .111 .1 inil)ortantc reduCej6n tie] n6nicro tic celulas l (;1)4'('1)8', I(1 . tiuc SLIgicrc clue la chntinaci()n CI(mal tic las celulas I' se ha producido t1urante las lasts inicialcs tic l .1 ontor-cnia (;fitf. l.i .??) . I'(n- tant(t, cl rcpcrton- io de Cclulas h pcritericds clue rxl)rcs,t tut indiciduo puC tic set amoldado Cantor nicciiantC wlcccion positiva conic negati \- a 1.1.?,31, coil las consiguicntes CottsccLICncias solve las rcsI)LICSt.t5 Illniunitarlas . Existen genes ligados al CPH clue controlan las respuestas frente a las infecciones SC IM dCntostradot (]tic dctCrntin,tdo, gcncs lit;ad(ss .1I (TH dcsentpcit :111 tin I)al)CI ell las respuestas inniunitarias Ircntc .t los agcntcs inlccciosos, asi conio ti- cntc a lo, autoantigcnos. En al gttn0S Cases CI gCn implicado pcrtcnccc al CPH, prro Se tree (]tic ell otras ocasioncs sc trata tic genes clue ajntl)ICntcntc SC Cnctrcntran ligados aI (TH .

Elimination de las celulas B per parte de los superantigenos region V 1'a VP6 Vl18 .1 VI33 VIi3 V118 V1111 antigeno reconocido I E, fth'ic, _,- , E Mls-1d Mls-la Mls-2 SEB SEB I-E, peptide poblac . de celulas T clue expresa la region V ~,i;', 12,4/0 7,5% 4,1% 5,7% 18,9% 5,0% tras induccidn de tolerancia por elimination clonal
i17i, :

Reconocimiento de Mls-1a por parte de las celulas T

VI18 .1

0,3% 0,30 0,1% 1,2% 0,0% 0,5%

VIi8 .2 0 20 i 40 60 80

del conjunto total de hibridos clue reaccionan con H2s(Mls-1 a

100

Fig. 13 .20. Los superantigenos pueden provocar la elimination clonal de las celulas T clue expresan determinadas cadenas V11. El numero absoluto de celulas T clue utilizan una determinada cadena Vii es diferente en las distintas cepas de ratones . Se muestran ejemplos de los porcentaies de celulas eliminadas clue se hen observado en determinadas cepas; aunque las cifras absolutas pueden variar entre dos cepas diferentes, el fenomeno se produce en Codas ellas. (SEB = enterotoxina estafilococica B.)

Fig. 13 .21 . Gran cantidad de celulas clue expresan V118 .1 reconocen Mls-1 . Se generaron hibridomas de celulas T mediante la fusion de blastos de ce1LIlas T (clue expresaban VI18 .1 o Vl18 .2) procedentes de ganglios linfaticos de ratones B10.Br (Mls-1 1 ) con una variante de timoma de celulas T BW5147 (clue no expresaba Vrr ni V19 . Se separaron estos hibridos mediante la utilization de Ab frente a Vj18 .1 y (con fines comparatives) frente a V118 .2 . A continuation, se comprobo su reactividad frente a Mls-1" asociado a molecules H-2` . La gran mayoria de los hibridomas clue presentaban reactividad frente a este Ag expresaban V1i8 .1, y solo unos pocos expresaban Vl18 .2 . Este hecho indica clue el reconocimiento de Mist , se realiza preferentemente a Craves de V1i&1 .

Regulation de las respuestas inmunitarias

Tolerancia frente al VCML en ratones transgenicos

animal infeccibn respuesta mimero de timocitos transgenico neonatal primaria anti-VCML (VIi8A) per VCML anti-VCML CD4'CD8 CD8' MIA;-1' Ml s-1' Mls-1r + +++ + normal normal bajo normal bajo bajo

Selection positiva y negativa en el time

timocitos CD4*CD8* alta afinidad por moleculas CPH de clase I propias estroma timico poblacion de celulas seleccionada

Fig. 13 .22. La induction de tolerancia en ratones transgenicos es diferente segtin el Ag utilizado . Se determine la capacidad para iniciar una respuesta proliferativa y citotoxica frente a celulas infectadas per el VCML cle ratones transgenicos que expresan TCR especificos del VCML en un contexto H-2D . Como este TCR tambien expresa VIt8 .1, es posible comprobar la influencia cle la presencia de Mls-1 sobre la capacidad para iniciar este tipo de respuesta primaria frente al VCML . Los ratones tambien pueden ser infectados en el memento del nacimiento con VCML y se puede valorar el efecto de la exposition neonatal al antigeno que reconocen los TCR transgenicos. En los ratones que expresan Mls-1 se observa una reduction partial de la proliferation y de la citotoxicidad, asi come una desaparicion total de la respuesta cuando son expuestos al Ag especifico durante el periodo neonatal . El analisis de las poblaciones de celulas T de estos animales inclica que los ratones tolerantes al VCML poseen cantidades francamente reducidas de timocitos CD4'CD8' y de celulas T CD8' maduras. Cuando son expuestos al superantigeno endogeno (Mls-1a), solo se produce la elimination cle las celulas T CD8' maduras. Esto sugiere que diferentes Ag pueden inducir tolerancia de las celulas T en distintas fases de su proceso de desarrollo .

baja afinidad per moleculas CPH de clase I propias

afinidad nula per moleculas CPH propias baja afinidad per moleculas CPH de caase II propias alta afinidad per moleculas CPH de clase II propias Fig. 13 .23. Los timocitos CD4 - CD8' interaccionan con el estroma del time, que expresa moleculas CPH de clase I o de caase II asociadas a peptides propios. Los clones con alta afinidad por las moleculas CPH cle caase I o II propias y los que no son capaces de reconocer las moleculas CPH propias son eliminados. Los clones con baja afinidad per las moleculas CPH propias de caase I son seleccionaclos y pierden el marcador CD4, convirtiendose en celulas T CD8' . Los clones que interaccionan debilmente con moleculas CPH de caase II propias maduran y clan lugar a la poblacion CD4' .

La susceptibilidad de los ratones frente a la infection per Trichinella spiralis se ve afectada por el locus I-E

Los prinicros dates indicatn()s dc .IuC CiCrtos tgCncs intcgr.tntes ell del ( :PH i Is-] s Ts-?) I)OCiian cuar implicudo> las rcspucstas ell trcntc a Ios parasite)', sc obtus icron Cstudios su)hre la susccptibilidad frcntc a 'b-it -hint-11a spiralis . J*S CUri0s() que Cstc 11CC11o ell tucsc cictectado un organisnlo dc gran complcjidad antigcnica, que incluso puede exprcsar ditcrentes antigcnos en las distin sit tas fasts de ciclo vital, sicndo prcsemado coda lint) de ellos por diferentes (TA . j Ctrando sc inlcctan ditcrentes cepas reconlhinantcs dc ratc)n con T spir'nhs, sc observa quc la rcsistcnCia () 1 .1 SUSCCIltibilidad se 1c atcctacia por cl locus I-E . Parece quc lax celulas (]Lie expresan I-F . Soil susceptible', (fiq. 13 .24) . Se ha deell tcctado otro , ligado al (-PH quc tan1bien influl'c en lax respucstas trcntc a 7: spi)-alis. Este iiltinu) gcn no csta codificado por el (TI I, sine clue sc trata do un gen en desrquilibrio dc li gamicnt() quc sc dcnomina y:c-2 y SC Cncucntra situado ell lax pro\inlidadcs dc lox genes TGIF .

El locus I-E tambien influye en la sensibilidad frente a Leishmania donovani

El cstudior de I()s 11al,lc)tipos HLA 11un1:ux)s auxiad~u .1 1,1 3nco1i :1 let grave paludisn1o ha deniostrade) quc el 11ap1))tipo HL:\ ( DRB I' 1 302-I)LBI 0501), fretucntc Cntrc lox llabitantes de Africa occidental, pcro rare) en otros grupos ctnicos, ejerce un etecio protector trcntc a lax consecucncias lctales de la infection pen' I)Grsm))rlirrrrr faJeiparurrr . Sc ha conlprobado que DRBI * 1302 se line a diferentcs pcptidos clue DRI)1 * 13(1 I , dehido a lina ditcrcncia dC un iinico anlino .icido en la cadena 13 . Es nttn probable quc cstc 11cc11o influla en lax rcspuCStas ti- Cnte a1 agcn tc causantc del paludisnlo .

Determinados haplotipos HLA confieren protection frente a Plasmodium falciparum

1c ha dente)strad() que la subregion I-l-. tunhicn inihnc en 1 .1 stis crptibilidad trcntc a Lrisbmania donnrani . En cxpcrinientos en quc sc utilizaron ratones congcnicos H 2 se obser\() quc lox ratones quc cxprcsaban 11, n() Bran capaces de conlhatir la lcishell cstc Ic n1aniasjs sisccral . La in1pljcacicin Lie[ PrexluCto de I-E 110111010 SC denu)str() n1CCfantC la utilization dc anticucrpos ell anti- IF, cusa prcscncia sc obsersd una cstjn1ulacion dc la clinlinacion dc lox par.isitos, al contrario que en el case dc los anticucrpos anti I A, que no produicron cfecto alguno . Acicnl :is, la insertion dc un transgcn I-E en ratones clue carecen del mismo reduce la capacidad dc la cepa original para elintinar lox pa(let rasites hji;ado \' Lie] bazo .

Existen genes ligados al CPH quc tienen gran importancia en la susceptibilidad frente a lax enfermedades autoinmunitarias Asociaciones con genes CPH

I . .1 di .tbCtcs n1Cllitus insuliiu)dCpcnd1Cnte i D~IMID ;, it[) a cntcrn1cdad lUtOinnitinittria en la que lax celulas beta del pancreas son dcstruidas por celulas del sistenla innuulitario, Csti asociada con lox 1laplotipos I II .A-DR3 r HL .A-DR4 . Dc liccht), h)s hete-

Control genetico de las respuestas inmtlnitarias

Susceptibilidad frente a Trichinella spiralis ceps del ratdn 810.1313 B10P 1310 .13111 1310 BMS B10.M B10.Q haplotipo H-2 k p r b s f q expresion de I-E + + + indice de fenotipo de resistencia resistencia 0 22 33 63 100 104 105 sus sus sus res/int res res res

title sc hart detectado) cntrc cntcrn1Ctladcs \ CI ( .PH scan dcbidas a genes tic estc rip(), rclacio)nados coil la protcolisis s. cl transportC tic j)CI)tidos antigcniCOS hasta las ntolcculas CPH, para yuC ptredan scr prcscnt:ttlo .t la, cclulas dCl sistcnta irottunita-io) .

l .ts respuestas inntunitarias tantbicn Cstan t(mtn)la(1 .ts ho>r .~lgu no)s ~Cnes :tjen(n,I la region ('P11 . Sin embargo, rsu)s grncs sueIcn prcscntar ntcnos polintorfisnto clue loo genes (;PH, por to clue Contributcn ell incnor mcdida title cllos a I :ts sariaciones dc

Muchos genes ajenos al CPH tambien modulan las respuestas inmunitarias

Fig. 13.24. Asociaci6n entre el haplotipo H-2, la expresion de las moleculas I-E en la superficie celular y la Susceptibilidad a la infection por Trichinella spiralis. El indice de resistencia es el numero de parasitos tras una inoculation estandarizada, tomando como referencia las cepas 1310 .1313 (susceptible = 0% de resistencia) y B10.S (resistente = 100% de resistencia) . 1310 muestra una resistencia intermedia .

TNF~ y nefritis Idpica supervivencia 100

I'b)

80

rocigotos HL.A-1)13,;/4 son I()s intiiritiuos tiuC l,rCscnt:tut kill ries'r oracs o n~ 'ginak-s sc tletrct .u. (tn ell go nt :isinto. Atrnyut Ias asotiat DR, dcbido al dcscquilittrio tic ligainicnto dichas asociacioncs sc encucntran situadas rcalntente en DQ . El analisis gcnctico a njt- cl molecular ha pcrmitido estttdiar coil mas cictallc cstc tell()ntcno, y parecc title ell Ios indit idu0s tie raza blanca la principal asociacion sc Cstablccc coil 1)QBI 0 ;02 . En di\'Crs()s ,rup(n ctnicos la artritis rCUntdtoide sc asocia principalrncntc a HLA-1)134 o DRI, per() la asociaci6n corn I IIA DQ es debit . hodasia no cola clara la torntd en title estas asociacio)nes co>nficren suwcpti bilidad, pcro cs posiblc yuc cxistan ditcrcncias tic repcrt()rio dcbidas a loo proccsos do sCICCCi(in I)()sitio()S ~' ncgatisos do tliccrsosgcncs do claw II, () clue I()s Cpito)p()s tic Las bactcrias o Virus inductorcs tic la cntermcdad sc unan prctcrentcntcntc a deter ntinada, rtto1000las (TH . El analisis do Lis scCucncias do amino acidos do loo surco)ti tic union al pcl)titlo tic HIA-DR4 t . DR I apop esta 6ltima hip()tcsis, \, . yu(: SC Ira dCntostrakIO la I)rcscncia do aininoacido)s tom dilircntcs cargas en Ios subtipos HI .A-DR susceptibles t. rcsistcntes . Asociaciones con la region CPH ()in, (jcmpk) tic drsC(Jtlilibrio) tic ligantiCnto Vicnc daclo por la ,t~o)ti .tci()n do Li aut(rinmuniclad dc k)s rato)ncs f NZI; x NZ\1' )F, ion cl Itaplotip() H-2' dcl progenitor NZXV. Sc Ira dento)strado) iontundCntcmcntc clue csta asociaci(in no cs dchida a ningun gn CPI 1, sin() al gcn 1'\Fu, yuC SC CnCUCntra cstrcclt :uncntc ligado a loo genes ( :PI I . I :I :tick) NZW T\Fu da lu ;ar a la pro)duccion tic I)cyuCri :u cattid :n10 CIC I - Vlru . ('wand() la cotnccn tracioin do csta citocina cs rnas or, loo ratones clUCCIan protegidos licntc a la netritis I6pica f_/irt. 1., .2,;' . Asociaciones con genes relacionados con el procesamiento Rccicntcincntc sc hall iticntificado otrr)s g,cncs lig,ati()s al (API I qac PuCdCH intlUir en l :IS rcsl)ucstas innuutitarias . Esto s genes Cstan intplicad()s cn 1 .1 protlucci6n I por protcolisis I c en cl transporte tic tragirtentos pcptidicos a partir del antigen(). Scat genes polintorficos, to clue acarrca contsccucncia> luncioma1c, Por cjcntplo, la nnlltipliCidad tic ti)rmas alcliCas del 1()cu, 1inr i yuc co)diti ca la protcina TAP2 } tic Ix, ratas atccta a la incorporation tic loo pcptidos a Ix, ntolcculas ('PI I do claw 1, 1() yuc a ski tcz atccta al reconocimicnto) tic ]as molcculas tic class I Conn() aloruttigcnos. Potr Canto, Cs lxniblC yuc Cl nu)tio-o tic all,
I

i tatones con 100 proteinuria 80 111.1 60 40 20 2 0

Fig. 13 .25. 1) Veinte hembras de raton (NZB - NZW)F, fueron tratadas con TNFa murino recombinante . En la figura se compara ski supervivencia con la de controles F, ajustados con respecto a la edad y el sexo . 2) Frecuencia acumulada de proteinuria significativa (==300 mg/dl) en ratones (NZB , NZW)F, tratadas con TNFu y en los controles.

Papel de loo genes ajenos al CPH en la resistencia frente a las infecciones organismo Mycobacterium lepraemurium Salmonella typhimurium M. tube rculosis Listeria monocytogenes Rickettsia tsutsugamushi resistente cepa DBA'2J C3Hi'HeJ DBA2J CBA, C3H B10 .A B10 .D2 B10.BR AKR SWR BALB ;'c ~aplo,[pu d k d k a d k k q d susceptible cc()a BALBiGJ C3H+'A B10.D2, BALB,?c B10. BR AJ DBA2, BALB/c CBA, C3H C3H, CBA DBA, 1 DBA`2 haplotipo d k d d k a d k k q d

Fig. 13 .26. Las diferentes cepas de ratones presentan distinta resistencia a los organismos enumerados . Diferentes cepas con el mismo haplotipo CPH pueden ser susceptibles o resistentes ; asi, el haplotipo CPH no es el unico factor clue determina la resistencia a las infecciones.

Regulacion de las respuestas inmunitarias

1 .1 stts:cptibilidad tic una pohlacion trente a las enterntcttades . I'rx a toxior, sit intlucn:i :t en alt unas enterntedacics :ttil(rlnrttUrtl t.trias, alcrgicas y cn cicrtos proccsos intccciosos cs intiiscutil)IC ,1i17. 13 .?(ti . Porr cicniplo : " Los individuos coil tlctcctos del contp()ncntc ( ; ; tic] :ortttplcntont(t ntticstran unit ntaaor susccptihilidad a las infecciones l)a:tCllanas \U11 .1 prcdispcrsicioSn a padcccr cnterntcdacics ntcdiat]as purr innurnocotntplejors . " tic Ita ticniostradtt title la alta producciorn dc IgF en algunas to ntilias propcnsas .t la alcrgia csta asociada coil la prcscncia do till -'ell dc la atopia- situatio ell Cl crontosoma hu111.uur 1 I q.

Algunos genes no ligados al CPH afectan a la susceptibilidad frente a las infecciones

Maerofagos . F tas cclulas cicsenipcilan lunciorncs csenciaics en rl sistrma innnrnir :u -iu . 1'or cllor, tars genes Clue rcgulan sit actitidad puctien intluir en cl cursor dc rtt :It15 rCSInicstas III ntunitarias . I'll bUCrt cicniplo dc estc tipo tic control gcnctico del tuncionamirnt(r do los macr<'rtagos cs cl gcn 1-4),'ItYi''Riq. Este gcn controla las respuestas inicialcs dente a Lcishmania dolxrralli, S111mw1C/h7 . 1rphimurium, AlYcnbai to rium Iruris, 111. Icprac1r111rillm a .1-1 . iurr11ci11111ari. Fierce sits ntiiltiplcs ctectos en las tries inicialcs dc la . cstinnl1acibn t nail- aciom tic Ios ntacrofagos, t cntrc cllos so : en cucntran ; " ltegulaciorn positica del cstallidor oxidatico. " 1atimulacion tic la actiticiad antiturttoral . " Estinuilacion tic la acti\idad antinticrobiana . " Regulaciin positita dc la czprcsi()n tic inolcculas ( .PH tic cla-

nuu'intt c11 cl cronursonta 1?, a. sc crec yuc codifica Ios propiors antigenors CPH tic claw 11 . Los onros genes han sidor localizacios cn taros crontosontas, pcro sit idcntidad V sits flinaonCS en la tictcrntinacirn dc la susccl)tibiliciad o la rcsistcncia todat is no sc conoccn . Cuando se introduce en tin ratcin cl get) hnfitpr(tliterati) -o i lpr'~, cl animal dcstrrolla till sindrontc dinico caractcristico, Coil sistcntc en la prcscncia dc anticucrpos anti ,AD\, factor reuntatotidc, innttuto :ontplcjos :irculantcs t glonicrulomcti- itis . Lets ,atones tantbicn prOcnccn atlcn(rpatias, dchido a la cspansit5n dc las cclulas 1 (D4 (,1)S pcritcricas . Fstas :clulas T no Soil tic rtattrralcza n)onttdon:tl . sill(, clue disponcn tic dltcl-CIACS T(R. Sc su:;irioi inicialntcnte title cl sindrontc cra dchidot a algtin tictccto drl 1)n> :cso tic srlr :cioin ncgatica, pcro no se conttprcndia :onto tin gcn conic, Ipr podia ntccliar este ctcctot . Rcciententente sc ha dcntostrador que los ratoncs con cl gen lprprcscntan till tictccto tiel antigeno CD95 o Fas, que csta coditicado por, till gen del cromoscnna murinor 19 . FI antmcno Fas cs una pro tcina transtitle intcraccionicntbran.t, dc la supcrlantilia tiel receptor FNF, na con CD951 . o Fast . tictcrntinando la nurcrtc celular programada of ,apoptosis- . CD9;1 . pcrtcnccc a la tamilia tlel factor tic crecimicnto neniosor ;'nccrosis tumoral. EI tictccto del antigeno Fas dobido a la nititacilm tic lpr pronoca anornahas en cl proccso dc apoptetsis . Sin embargo, no p:u -c:c yuc cstc tictccto, lfe :tc a la wleccio5n negatisa ni a ]a generacio'rn en cl tinur do till rcpcrtorior normal tic cclulas T rnaduras poxiti\as para till solo marcadori% IA iticntcincntc, Fas cs solantcntc trio, de lox ligandos yuc in

sc 11 . title ell Cl Recicntomcnte se Ita iticinifcador cl gen .10,amp, (:onto Nrampc(niifica una pro caturn pordria corrcspondcr :t Bol. tcina tic ntcnibrana honnoiotga a [as prootcinas do transport: yuc se :UOCCrt, se Ila sugcritio clue puccir estar intpli :ado cn cl traits port, tic N(), al interior del fagolisosoma, tacilitando la destrLi :C1Urt do los nticroorganisnttts intracclularcs . Sill cnihargo, Ilasta yuc no SC denttrcstrc com inccntcniciuc ntcc iantc transfcccion o transgcnesis clue :\rampcoditica cl produ:to Bc11, esta afirntacicin es puramente ftipotctica . Biozzi gcnero cios lineal dc ,atones con tiitcrcntc capaciciad dc rcspucsta frcntc a los antigcnox critrocitarios ntediante cru.stos ratoncs dc MOM con alta a . ces cndogamicos sclcctiros . F haja capacidatt tic rcspucsta sintctiz :tit diterontcs catttidadcs tic :tttticucrpos tras la eeposi :icin a Lilt antigonor. Las ditercncias que prescntan ,o halt Atrihuitio a (litcrcncias gcllcticas tic la acti\ idad Las dcrs ccpas ranthicn dificrcn nortal)Icntcntic lors macrotagos . tc ell sit capacitiad dc rcspucsta dent: :t las intcccioncs parasitarias, fcn(mtcno clue no sicntprc csta corrolacionado con la :anti 13.?71 . dad de anticuerpos yuc sintetizan

.n la actualidad so: crcc icricncn cn lo% proccsos tic apoptosis. F clue cste defector prowca una expansion pet-itcrica dc las cclulas T doblcntcntc ncgati\as, asi corntot una acclcraciirn del sindrome autoinnninitario . El tietcCttr tic la apoptorsis tanihicn se cxpre: sc acu11ttrl :ur cclulas B autorrcacti\as sa en Ins cclulas B, pcrr for quo ell la pcritcria . ()tros CStUdlots sugicrcn title cl gcn -i1Li, yuc Lid lugar a till ti-notipo autoinmunitario parccitior al dc los ratcntcs /Pr, "Ipr pucdc cjcrccr sits ctcctos mcdiante tin ntccanisinor parecido . Se ha pro pucsto yuc la protcillA :odificada por illd cs till li('ando cictcctito del antigeno Vas . Asi, los ratoncsgld, j71d yuc no cxprcsan cl . ligandor prcsentan tut t1ctecur dc la apoptosis tic Las cclulas B t T .11 &S . El gen pcrilericas, ~- rollan la enterntcciad autoininunitaria ,1ild esta situatio en cl croinosoma 1 del raton . por to yuc constitut- c orret cjentplo do: gen ajcno al (:Pi I que atecta al tirrtcionanticnto tic] sistcnta inmunitario. Fn htrntall05 SC han descricor sindronics parecidos, rclacionados coil dctcctos cn la acti\'idad t tintoon ,ic Vas.

Eosinofilos .

Estas cclulas descmperian till Lapel important: cn Ias respuestas del hucsped finite :t las infecciones parasitarias . Sc Ila denurstracior clue cl grAlo tic cosinolilia (]tic a1).trccc tras ulla intcccioSn dell : cictcrntinado gencticantcntc, ol)scnandorsc notablcs ditcrcncias cntrc distintas cepas enciogamicas dc ratoncs. . Fn Ion corbacas t en las otoj .ts sc han obscnado fer16ntenos parecidos, cxisticndo una huena corrrC1,16011 cntrc la rcsistcncia a . la intcc:i(in por ncniatodos a cl ;grader tie cosinofilia .

Respuesta de los ,atones de Biozzi a las infecciones parasitarias

organismo T cruz ; P. berghei P. yoelii L. major S. inansoni Biozzi altos resistente resistente resistente susceptible susceptible Biozzi bajos susceptible susceptible susceptible resistente resistente

Algunos genes ajenos al CPH tambien afectan al desarrollo de las enfermedades autoinmunitarias

Rccicntcntcntr sc hall Iteclto grancics .at :tees en la localizaciun do logs loci title controrlan la suscc1,tihilitiad licit: :t 1 .1 diabetes 111C Vitas ittsulinodcpcndicntc ~ DM 11) ~, una cnternicdad autoinntunitaria . Eaton CSCtidiOS sc hall Ilc\ado a Cabo utili/ando la ccpa do ratoncs Not), que dcs.trrollan cspontancantente una enterntedad :uttorillntullital'i .1 p:ue:ida :t 1 .1 D,\IID 1111111111a . Sc hall icicntificador al ntcnos l5 loci (Icnicos cn lors ratoncs Not) i Lid-1 a Lii. Solo, Lino dc Ion I(rcus I Idd-l y so: cncticntra ligacior al CPH

Fig. 13 .27. Las respuestas a las infecciones parasitarias de los ratones de Biozzi son variables y no dependen de que sit capacidad de respuesta sea alta o baia .

Control genetico de las respuestas inmunitarias

Las secuencias retroviricas endogenas modifican el repertorio de cell T que expresan los ratones. ~Cuales son las consecuencias biologicas de esta modification? ~Por que ha conservado el sistema inmunitario a to largo de la evolution tantas formas diferentes de regulaci6n de las respuestas inmunitarias?

Los ejemplos de regulation que se han expuesto en este capitulo se han deducido a partir de modelos

artificiales . ZEs posible averiguar si estos mecanismos actuan en un individuo intacto normal?

LECTURAS ADICIONALES
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Tolerancia inmunitaria
Los mecanismos de tolerancia son necesarios porque el sisterria inmunitario genera de forma aleatoria una graft cantidad de receptores especificos de antigeno, algunos de los cuales son autorreactivos ; la tolerancia impide que se produzcan reacciones frente a los tejidos del propio organismo . La tolerancia timica central frente a los antigenos propios (autoantigenos) se adquiere mediante la elimination de las celulas T en fase de diferenciacion que expresan receptores especificos de antigeno con alta afinidad de union a los autoantigenos intratimicos. Las celulas T autorreactivas de baja afinidad, asi como aquellas que poseen receptores especificos de antigenos que no se encuentran en el timo, maduran y pasan a formar parte del conjunto de celulas T perifericas . La tolerancia postimica frents a los autoantigenos se adquiere mediante tres mecanismos principales : las celulas T autorreactivas circulantes pueden ignorar la presencia de los autoantigenos, por ejemplo cuando los Ag estan en tejidos y no se encuentran expuestos a la circulation, o bien pueden ser eliminadas o se pueden tornar anergicas, quedando incapacitadas para responder . Tambien se puede mantener tin aparente estado de tolerancia frente a los autoantigenos mediante la desviacion inmune . " La elimination de las celulas B se Ileva a cabo en la medula osea : las celulas B en fase de diferenciacion que expresan inmunoglobulinas receptores de superficie con alta afinidad frente a antigenos de superficie propios, son eliminadas antes de que abandonen el lugar en que se ban desarrollado . " Las celulas B y T autorreactivas pueden evitar ser eliminadas an la periferia disminuyendo su ntimero de receptores antigenicos . La tolerancia artificial puede ser inducida mediante diversos metodos, que se utilizan en la practica clinica para evitar el rechazo de trasplantes y para el tratamiento de las enfermedades autoinmunitarias y alergicas .

14

INTRODUCCION
L.t tolerancia innatrn4aria CS tin cstado tic auscncia tic rcspucsta hcntc a tin antigeno detcrtninadu ; cs inducida por la cxposicitm tic toprcia a dicho antigeno . Se ncccsitan mecanismos actiVos lerancia para pre\cnir I :ts respucstas intlarnatorias trente a naiiltiples antigenos inocuets clue alcanzall las n)ucosas intestinal o respiratoria cn cl airs o cl alinactuo . Sin ctatbargo, cl aspccto nt :is itnportantc tic la tolerancia cs la Attotolcrancia, yuc intpidc clue cl organismo dcscncadcnc rcspuestas innaunitarias contra sits propios tejidos . En principio, dicho atacluc scria posiblc, ya clue cl sistenaa inntunitario genera tie tornaa alcatoria una Cnornac cantidad tic receptores especificos tic antigenos iV. cap . 8 h, algunos tic los Wales pucdcn prcscntar rcactiVidad dente a antigenos propios . Por cantos, ]as celulas portadoras de estc tipo tic receptores deben sercliminacias, titncional is fisicanacntc . La autorrcactisidad sc impitic nacdiante pro)ceso)s que octarrcn durantc cl dcsurrollo eclular, t . no csti pro granaada gcncticantcntc . Asi, micntras yuc los aninraICS laonaodgoticos tic dos cc pas histoincompatiblcs A V 11 rccliazan los injcrtos tie picl proccdetacs de la otra ccpa, sus dcscendicntcs hibridos F, I que cxprcsan los antigenos de amhos progcnitorcs) no rcchazan la pie] tic tipo A ni B, cn los laonaocigotos do la generation F, Vucl tic rcclaazo do los injcrtos tic picl tic la Vc a aparcccr la capacidad cepa contraria . Queda clam), por tanto, que la aptitud para distinguir entrc to prtipio y lo) ajeno sc adquiere durantc cl ticsarrollo : desdc tin punts) Lie vista inmtrnolcigico, to propio>- incluVc todos los epitopos l; dctcrntinantcs antigcnicos I codificados por cl All\ tic each indicitiuo, micntras yuc ctialyuicr otro cpi topo es considcracio ajcno . Sin embargo, no cs la cstructura tic una nto1ccula PIT SC to que tietCrtlalna si sera consider;ada propia o ajcna . F.xistcn otras caracteristicas no estructuralcs tic tin cpitopo que tanabicn soil irnportantcs . Entre cllas SC cnCucntran : " El momctito en yuc los lintocitos son cxpucstos al cpitopo por prinacra Vcz. " El Itigar en cl que se produce la exposition . " La naturalcza tic las celulas yuc presentan los epitopos. " El ninnero de linfocitos yuc resposaaden a los cpitopos .

Historia

ticnapo ticspucs Lie] ticsctihrimiCnto tic la Cspccificidad tic anticucrpos, sc comprenditi clue dchia cxistir tin ntccanisnao para csit :u- la pruducciraa de autoanticucrpos . A principit)s tic sight Ehrlich acuiaci cl tcrinino , horror ;ttttotoxicus-, clue implicalia que dcbia cxistir till -plan rcguladc,r , que impidicsc la prodUcCil)n de autoanticucrpos . En 1938, Traub indujo tOICrallcin cspccifica cn rattmcs mcdiantc la inoculation intrautcrimt del Vi tits tic la corionicningitis linf )citaria, ht que (JAM lugar a una intccciiin que pcrsistia durantc toda la Vida . Al co)ntrario clue hrs ratones normalcs, cstos ratoncs inoculadt)s no prtxlucian anti cuerpos ncutralizantcs cuando craft cxpucstos al Virus a to largo tic su \ida adulta . En 1945, ((wen afirnao clue en tin tinico laucspcd podian cocxistir celulas con antigenos propios \ ajcnos, a raiz tic till < , cxpcrimcnto tic la naturalcza- con tcrncros gcnaclos bicigtiticos . Estos aninaalcs intcrcamhian sus celulas lacnaatopoVcticas 1 celulas madre) a traVes tic los Vasos sanguincos conauncs do la placenta, por ht yuc cada till() de Cllos posse los ntarcado rcs critrociticos tic anabos . ()sccn ohscrVo yuc los anin)ales prcSit sentahan tolerancia a [as celulas cxtranas a to largo tic Coda Vida, V clue no Iran capaces tic dcsarrollar respucstas tic anticucrpcas ti-ente a los antigenos critrocitarios ajcnos . Esta obscrsacioin IIcVti a BUrnCt V Fenner a proponcr que CI nton)ento tic exposition era tin factor critico en Id detcrn)inacitm de la capacidad tic rcspucsta y, por tanto, cn cl rccono)cirnicnto do los antigenos ajcnos . Esta hipotcsis parecia loigica, ya clue Cl sistcnaa inmunitarios sc suclc cntrcntar t todos los conaponcntcs propios antes cicl nacinaicnto, no rcstilta cxpucsto a anti~-enos ajcnos laasta dcspucs del n)isnao . La ticntostracion experimental no SC ct)nsiguio) 1)asta 1953, cuando tMedawar V cols . inclujcron tolerancia inn)unitaria ircntc a alolnjerto% ( injcrtos hetcro , CnCU1 genencamcntc, pct) rcaliza dos entre individuos tic una tnistna espccicl do picl cn stones, n)cdiantc la invcccion do celulas alogcnicas durantc cl pcriodo neonatal 14 .1,x . Burnct pudo cncajar pcrtcctanrcntc estc to 11C>mcrto ell su tetiria de la selection clonal i 19 :17), clue afirnaa que tin cletcrtninado inmtmocito i una cclula B o 1' control) es sclcccionado por cl antigcno v prolifcra, ciando lugar a tin clon tic celulas hijas, tocias cllas toll la tnisnaa cspecificidad . 1)c acucrdt)

loco
los

Tolerancia inmunitaria

coil ski tcoria, los antigcnos yuc sc cncucntran dcspucs del naciInicnto actitarian clones cspccificos de linlocitos, inictitras clue los antigcnos clue sc cncucntran antes del nacintiento climinarian a Ios clones espccificos f- cntc a cllos nusntos, a los clue liurnet LIC11rt111ji16 -clones prohihidotso~~ . Esta tcoria inlplica title todo el repcrtctriot innuulitario dcbc scr gencrado antes del nlonlcntot del nacimicntot, port ell Ia actualiciad sabcnlos clue la ditcrenciacio ll de Ios lintotcitrts sc prolonga dllrante una buena pane tic la \ida adulta . Por tanto, cl factor clat- c ell la cictcrininacidn tic la capacidad dc rcspucsta net cs cl grado tic desarrollo tic] indit itluo en cl montcnto ell yuc cs cxpucsto al antigcno, sino cl grado do u1aell tlurcz del lintitcito . Esta sugcrcncin tiic ltcctla por Lcdcrbcrg 1959, en ,,it nlrtdifcaci6n tic la tcoria do sclccciun clonal : los linf tcltlts innladtlros title ciltran ell contacto coil cl ailtlgcno .tie tc -

rian sontctidos a kin proceso de , allorto clonal, micntras clue las cclulas maduras schan activatlas . Ahora is sabc yuc cl rccicn nacido cs ininunoconlpctente \ quc ell cl se puede inducir tole rancia frcntc a dctcrntinados antigcnos porquc cl tipo dc rcspucsta inntunitaria cs distinta a nitcl taincional ell cl recien nacido y cl adulto . Potr cso, la antes ticnontinatla -tolerancia . puccic coriespondcr eon cjculltlos tic cstc tipo tie dcs neonatal , tiaciinl innttulitaria,, fl . mas adclantci. Lots trascendentalcs descuhrimientos dc la decada tic 1960 dcntostraron la contpetcncia ininunitaria tic Iris lintocitos, cl Par pct esencial del limo ell cl desarrollo del sistcnla innlunitario t. la cxistencia tic dots suttpothlacjontes coordinadas tic linfocitos, las cclulas T v 11 . Estos ticscubrimicntos establccicron ],is bases para la im cstigacion dc los nlccanisnlos Inolccularcs dc gcncracion de tolerancia .

INDUCCION EXPERIMENTAL DE LA TOLERANCIA La tecnologia de transferencia gcnica ha permitido estudiar la tolerancia frente a aytoantigenos verdaderos

I I,lsta IlaCC Poco, ell lots CSttldlots c\pcnmcntalc~ tiolamclltc era pwiblc inducir tolerancia artificial : se inotculahan antigcnos o cclulas ajcnas a lots aninlales c se estudiaball las rcspuestas tic las cclulas'1' o li ell difcrcntcs circlinstancids. Sin embargo, not sc sabia hasta clue Pllllto cstos nlodclos cxpcrimclltalcs SC ajustab;ul a lots 1C110111eI10S tic autotrtlcrancia natural.

Hot\ cn dial los ouctoulos dc transtcrcncia gcnita haven posiblc la im'estigacioin dirccta tie 1 .1 autottotlerallcia . Estos nlctotiots pcrntitcn introducir kin gcn concrcto ell kill rat6n eon kin trastinldot ucnetico hicn definido Allalizar sus ctectots,obrc cl desarrollo del sistcnla innlunitario . Adcnlas, si el gcn introducidtt sc encucntra ligado a kin promonor especifico tic tin tcjido, ski expresion sc pucdc linlitar a tictcrntinatios tipos cclularcs. El producto protcico codifcado ell cl transgcw~ cs considcrado por cl sistcnla innlunitario kin trrdadcro autoantigcno, por to yuc sus etcctos pucticn scr cstudiados in rirn ,in los trauntatisinots ill los proccsos inflaniatotrios quc suptulen Cl intpl,utte tie cc. lulas o tcjidos ajcnos . Adenlas, la cepa progenitora t 1 :1 cepa transgenica son id6ncas tiara Ilct-ar a cabo cxpcrimcntos contro IaCIOS para Ios cstutiicts tic transfcrcncia tic lintocitos, to quc Soil collgcnicas, cs ciccir, diticrcn solanlcntc ell kill locus. P.unbicn se puedcn crcar ratones transgcnicos ell Iris clue todos los linfitcitos 11 o T exprcscn kill solo receptor antigcnico, to clue pcrmite cntcnder ell dctallc los n>ecanisntos tic tolerancia al podcr auntcntar la t~ccucncia dc cclulas prccursoras cspccificas para kin antigcno . Por ultimo, la aplicacion do la -nlutagencsis dirigida "> Ila pcrmitido a los innluntilogos ehminar genes especificos para podcr estudiar la inlpotrtallciatic sus productots ell la trtlerancia innttinol6gica . Existcn trcs sistcntas para inipcdir yuc los fntocitos autorrc actitos rcsptaldan a los autoarltj ;coos: " Ehntinacirtn clonal : chnlinacion tisica de las cclulas del repcrtotrirt en alguna talc do ski proceso dc nladuracion . " Ancrgia clonal : rcgulacir`tn ncgativa tic Iris mecanisittos intrinsccots tic la rcspucsta innninitaria . " Supresion: inhibicidn tic la actititlad cclular mcditntc la intc raccioin toil o tras ccIuLts, cotnlot las ytic produccn citocinas inhihidrtr,ls rt los lintocitos anti-idiotipicos, title reconlocen al propirt rcccptrtr de antigcno . Existcn nuntcrosos tactorcs yuc tictcrntinan cual do cstos nlecanisntots se aplica a cada lintocitot ;autorrcactno concrcto . Entre cllos NC cncuentran : 1'h Cl grado do nladtlrez dc la celula clue se prctendc silcnciar, 2 i la afinidad tic[ rcccptrn . por CI autoantigc,it nrt, 3I la naturaleza del antigcno, 4 ) conccntraci6n, 5) ski distriltucihtl tisular, 6 i ski patron tic cxprcsion y i h la dispotnibilit1at1 tic scii ;dcs cotcstimulantcs . (:onus rcgla general, ell ;lusencja tic senates COCStill1l11 ;111te5 CS nlas irccuente quc Iris antigcnos pasell desaparcibidtts para I :1 rcspucsta innrtinitaria .

TOLERANCIA TIMICA CENTRAL FRENTE A LOS AUTOANTIGENOS Induction de tolerancia especifica en los ratones
inyeccion a kin raton recien nacido (cepa A) de cclulas de kin raton de la cepa B I as cclulas T sc dcsarrollan ell cl tinto a partir dc ill -CCUrsores clue atin not hall expcr-inlcntatlo la rcol-Clenacirin tic tits genes dc sus reccptotrcs tic cclulas T fTCR) . Estos genes sc rcordcnan dllrante cl proccso do desarrollo dc lot lintocittts tinlicos, do tat forma quc 1;11, celtllaS T exprcsan finalntcntc l ('R clue Its pcrntitcn recrtnrtccr lot productos o peptidos procedcntcs tie la cicgradacion ell tic Iris antigcnos cxpucstos cl surco tic las ntoleculas (.PH codificadas por cl complcio principal dc histocontpatibilidad (CPH I tic] Propirt organisnno ( calls.

semana

semana

semana

inje-os de pie piocedentes de ratones de las cepas B y C B C

r` .I Inferto B no its rechazado, mientras clue el C si

Fig . 14 .1 . Induction de tolerancia especifica en ratones frente a lot

injertos de piel, mediante la inyeccion dlrante el periodo neonatal de cclulas de bazo de ratones de otras cepas. En condiciones normales, lot ratones de la cepa A rechazan los injertos de ratones de la cepa B. Sin embargo, si se inyectan a kin raton recien nacido de la cepa A cclulas de kin raton de la cepa B, a las 6 semanas el raton receptor de la cepa A muestra tolerancia a lot injertos de piel de ratones de la cepa B, aunque sigue rechazando los de otras cepas (C). Este fenomeno se debe a la desviacion inmunitaria (v. texto) .

El timo selecciona las cclulas T clue poseen receptores capaces de unirse a los Ag asociados a molcculas CPH, pero elimina las cclulas clue presentan una afinidad excesiva por alg(in autoantigeno

La alta srlocidad dc pro,litrratiorn dc loos timr,citon sc cc cony pcnsacia potr una dcstruccir'tn ntasita do Iris ntisnlrts : la grin ntatotria tic lot timocitos dohlcntcntc posititos i ;( 1)4'(:l)8') son ell ticstruidos cl scito del onto . Esto cs dchido principalltlclue a la rcorticnacion altcrrantc do lots genes do los TCR (quc inlpide yuc se protduzca kin TCR util ), ,1 la sclcccion ncgatit-a Y :al re-

Tolerancia timica central frente a los autoantigenos

chazo de [as celulas ell cl proccso do seleccion positi\a . l;n cstc ultimo proccso sort SCICCCionactts \' Pucdcn sobres'is'ir Ias celula, T clue presentul un .t cierta a\ idez poll - Ins rcgiones polinlorticas dc las nloleculas CPI 1 iAz. 1-1.31 : Ias Cclulas f son cspucstas a Ias nloleculas CPH Lic [as Cclulas cpitclialcs corticalcs, \ so: crcc quc la union a las nlismas inlpidc yuc las Cclulas CXPerimcntcn cl proccso do nlttertc Celular programada . Este proccso dc seleccion positi\a garantiza quo: Ias Cclulas - I' nldduras solanlcntc ser:ill Capaces dc reconoccr pcptidos cuando cstos se encucntren situa dos en el surco dc union dC I1l0ICCLII :ts CPH propias, por lot quc estas Cclulas estarau sonletidas a restricciotn CPI I . Sin embargo, la seleccion positi\a no inlpide c :l desarrollo do Cclulas l coil TCR do: alta afnidad frcnte a pcptidos \' molcculas ('PH propias. Por Uanto, cs neccsario kill proccso Lic seleccion ncgati\ a I\era silenciar a estas celulas coil clc\ada rcacti\idad trentc a lots autoalltlgellos .

Tanto cn Itt, pr()cesos tic sclc-i(ul ptlsiti\a c(ml() Cn I(), tic: ,clelcl(tll Ile`;.1tl\,l soil oclc,alllri prUCCSos dc rccollocllllicllt() tic pcptidos propios asociados a nlolcculas CPH propias. ;Conno c, posiblc cntonccs yuc scflalcs iniciadas a tra\ es de kin mismo TC R condUZCall a resultados ditcrentcs? Se 11 .111 prOPucsto Lifts tCOl"ia5 para csplicar cstc tenonxno : " La tcoria cuantitati\-a plantca yuc kin pcgUCilo ntinlcro do conlplcjos pcptido-CPH cjctcrolilla una SCICCCiOll positi\a, micntras yuc una Bran cantidad do lots misnlos cictcrmina una seleccion negati\ a.

Los mecanismos de seleccion positiva y negativa

I, .1 tcoria Cualitati\ .1 Ptxtttla yuc (iitcrcntes complcios CPHpcptido indUCCn distintos tilxts dc sclial a tra\ es C1cl mismo rcCcpton- dc la CCIIlId h, pro\ocando una seleccion positi\a o tic gati\ a. La tcoria cuantitati\.1 cs apo\ada por experinlcntos coil ratolics transgcnicos yuc cxprcsan cl TC .R pare la protcina basica dc miclina, kin autoantigcno I)rcscntc en la miclina quo : rodca los axoncs ncrciosos . El cpitopo pcptidico natural cspecitico dc csta protcina reconocido por Ias Cclulas T ell una ccpa do rattin se liga con mu\ haja afinidad coil cl C .PH do class 11 adCCUado \, Conl(t CttnSCCUCncia sic csta union, ]JS Cclulas T cspccificas dc cstc cpitopo cscapan dc la seleccion negati\a cn cl tinul . CU :lllel0 SC inycctan analogos do cstc pcptido capaccs de unir so: a CPH con Bran atinidad a cstc mismo rattin transgenico TCR, lo s timocitos innladuros suf'en una seleccion ncgatica \ mucrte por apoptosis {_f?a 14 .3' . Parccc claro yuc CI ntimcrot Lic complcjos pcptido-CPH yuc so: prcscnta a la cclula T en o1csarrollo dctcrlnina si la celula sobrc\ i\ c o no . Los cpitopos propios coil mucha tendencia a tormar complejos cstabIcs coil las protcinas CPI I induccn con m:is frecuencia fenrinlcllos de sclecci(Sn ncgam a. La tcoria CUalitati\a surgioi pare csplicar yuc la modification do lots cpitopos de Ias Cclulas T a ni\cl dc lots residues respcnlsa hlcs de la intcruccion coil cl receptor do: la cclula 1' f anragonistas TCR') nlcjorc la seleccion positica conlparacia con cl cpitopo original f agonista I en czpcrinlcntos Coil CUlti\ -o tinlico . Sin embargo, Ias cios tcorias not so: CSCItICCII nTtttuanlcntc. En cl nlonlcnto actual sc puccic nlcdir la afnidad de union do TCR purifiCadt, "

Via de desarrollo de los timocitos murinos expresion aleatoria del repertorio de TCR ui3 precursor baja up seleccion positive : exposicion a molecules CPH pequena cantidad de aft seleccion negative : conjunto de exposicion a antigenos propios celulas T maduras
q'c c ltidaa ii?

CPH de clase I

sin interact . con CPH de clase I + pcptido propio

IL CPH de clase I + pcptido propio

epitelio cortical

celulas dendrlticas, macrofagos,

epitelio n-dular

destruc.cel. inducida por TCR,I

CPH de clase II + pcptido propio

sin interact . con CPH de clase II + peptido propio

M TCRs
Fig. 14 .2 . Los timocitos precursores se desarrollan en el cortex y originan celulas (, doblemente positives , que expresan pequenas cantidades de TCR all . Estas celulas se someten a kin proccso de seleccion positiva quc solo superan las capaces de interaccionar con molecules CPH de clase I o II del epitelio cortical . Las no seleccionadas presentan kin proccso de mucrte Celular programada

mucrte Celular programada

(apoptosis) . Las que interaccionan con molecules CPH de clase I pierden el marcador CD4, y las quc interaccionan con CPH de clase II pierden el marcador CD8. Finalmente son eliminadas las celulas autorreactivas, mediante la interaction con pcptidos propios presentados por celulas presentes en la region limitrofe entre el cortex y la medula o en la propia medula.

Tolerancia inmunitaria

La seleccidn negativa de los timocitos se relaciona directamente con la afinidad de los peptidos por las moleculas de CPH

La afinidad de TCR por el complejo peptido-CPH influye sobre la seleccion positiva naturaleza del semivida (s) peptido agonista antagonista irrelevante ++ + seleccidn de timocitos ocgau~~~ positivo ausencia de efecto respuesta de celulas T maduras ++ +

Fig. 14 .4 . Se puede determinar la afinidad de TCR soluble por los complejos formados entre diversos peptidos y el elemento de restriction CPH adecuado mediante tecnicas biofisicas, como la resonancia de superficie . Existe una correlation directa entre la semividad de la TCR unida al complejo peptido-CPH y la respuesta producida por celulas T maduras que expresan el mismo receptor (agonista > antagonista > peptido irrelevante) . Sin embargo, en los cultivos de timocitos, la adicion del peptido agonista hate que se eliminen las celulas en desarrollo (seleccion negativa), mientras que el antagonista estimula la seleccion positiva, to que demuestra que la interaction de baja afinidad estimula una seleccion positiva y la de alta afinidad estimula la seleccidn negativa .

Fig. 14 .3 . Este gel de agarosa, tenido para ADN, muestra el grado de apoptosis (fragmentation de ADN) de los timocitos obtenidos en ratones transgenicos (que expresan el TCR especifico para el peptido Act-9 de la proteirla basica de mielina) en presencia de peptidos con afinidad creciente por CPH de clase II . Calle (1) un peptido irrelevante. Calle (2) el peptido de baia afinidad autentico (Ac 1-9) . Calle (3) un analogo con afinidad intermedia por CPH (Acl-9[4A1). Calle (4) un analogo de alta afinidad por CPH (Acl-9[4V]) . Calle (5) otro analogo de alta afinidad por CPH (Ac l-9 WD .

La correlation entre la avidez y la seleccion de los timocitos

0 0 E
C O U U N d N

muerte celular programada

seleccion positiva

seleccion negativa

por las ntolcarlas (:I'H cart adas coil peptidos agonistas o antagonistas . EI IVR forma contplcjos inestables con los complcjos pclitido antagonista-(CPH, que induccn una seleccion positisa en Ios cstudios do cultito tilttll0 (fijf . 14.4') . El mismo T(A forma contplcjos rclativamcntc cstablcs con cl complejo agonista, dctcrntinand(r una sclccci()n negativa cn ]as misntas condicioncs . 1?stos dat(~s cspcrintcntalcs aunan las tconas cualitatisa y cuanti tatisa t- cxplican cl modclo cinctico, scgun cl cual la tclocidacl do disociaci6n do T( :R del complejo peptido-(a'H dctcrmina las propicdadcs do la aclccci(in negativa o positiva . 1 .a asidcz global Lie Coil las celulas 1, ]as AP(; timicas fji(z. 14 .S do la intcracci(in v- icnc dctcrntinada por : " El numcro do contplcjos peptido CPH, que depende do la afinidad del epitopo por cl elemento de restriction (TH . " I'll numcro do 1Y ;It de moleculas correceptoras importantcs cvprcsadas sobrc las celulas T. " I .a afinidad (lei TCR cspccifico por su ligando. .

avidez

Fig. 14 .5 . La avidez de la interaction entre la celula T y un peptido antigenico presentado por una CPA depende del nivel de expresion del complejo peptido-CPH (CPH + peptido) sobre la CPA y tanto de la afinidad como de la expresion de superficie del TCR y las moleculas correceptoras (TCR + molecula correceptoras) de la celula T. CPH + peptido depende de la afinidad del peptido por CPH y de la estabilidad del complejo una vez formado. TCR + moleculas correceptoras dependen de la afinidad del TCR concreto por el complejo peptido-CPH, el nivel de expresion de TCR en la superficie celular y la expresion apropiada de las moleculas correceptoras.

Tolerancia postimica o periferica frente a los autoantigenos

res s . corticalcs . ()tras cclulas quc tambien I)ucdcn participar en cl proceso tic climinaci(in son los I)ropios timocitos jfrq. 14 .x5/ .

La cronologia de la seleccion positive y la determination de linea

il'oryur eliminan I( is tim((cit()s un,t tic SUN III( (lectrlas c(nreccl) toms c'luctlan c((mpr(unctidas hatia una linca concrete ((a4 o CD8i? LA scl60(m 1)(mma sc 1)r((duce en los timocitos inntaduros que c\presan toda) ia CD4 t . ( l)8 y solo las cclulas doble mentc l)(nititas con tin T( .R tic esI)ccificidad al)nrpiatia poetic sufriresic proccso de seleccion positiu pare c((mcrtirsc en una cclula con Ix)siticidad %(ilo pare una molecule . l t dctcrminaci6n por una linea concrcta sc detx a la interruption sclcctna tic la %intesis tic la otra ntolecula correccptora . En I(ts rat(mes, esta in terruptihn sclcttit :t tie III sintesis del correccpt(n' sc produce cttan doles cclulas d(lhlemcnte positi)as reobcn las sctialcs adccuadas pare la ,clc-t( (11 I)( x,111( l h,T . 14 .21 .

La seleccion negativa se realize mediante senales de muerte

h\ISIClt una cric (it lllccani,nu(, rcsl)()rts,thlc, do la nrtrcrtc 1((n. apoj)t(tsis tic Ios lintiuitos nt :tduros, cntrc los ytic SC indurctt las sctialcs 1)roducidas I)or Fats, (' TLA-4 o cl receptor tic 'L\F (~ . nt .i s ,ttirlante 1 . l .t selecii(in ncgati)a tic I(rs tintocitos dol)Ic mcntc negativos cs especial, ya yue cn ella no participa ningun(t tic cstos procesos .

El momento y el lugar en que se produce la seleccion negativa depende de varios factores dr .1sic Ll, ccluLts I cn pr((.c,(( tic desarn,ll((,I I((% aut((atmgen()s, la ttiticz conlunta del iY'R s. do las m(dcculas acccs((ri .ts (CD8 (( ('1114) fictttc al complcjo tormado lair cl l,cptido prol)io y la molecule CPI I I)r(tpia t . Cl til)o tie cclulas (]Lie Iles an a caho la clitninaci6n . Para quo: net ati)a no sttclc scr ncccs,tria sepr(xiuzi,t d pnxes(r tic selctti(in intertencitin do cclulas presentadoras do antigenos I CPA I csla pecializadas : norntaltncnte, las cclulas cncargadas tic] mistno sue len ser I :ts cclulas dendriticas del tinto o los macr(itagos, tiuc abuncian en la region limitrote cntrc cl cortex la medula del timo ) . quo: [)((seen Bran cantidad tic molecules (- I'1 I tic clascs I t 11, tic t,tl to(rltta tluc sc l)uedcn unir a lax cclulas I yue prcscn 1-1 .(, ;x . Tanthicn tan una alto t) idcz l)(r I(ts peptid(n l)rol)ios puedc (Iue intcr)- cngan algunos tie lax cclulas CI)itclialcs medula

0 TOLERANCIA POSTIMICA 0 PERIFERICA FRENTE A LOS AUTOANTIOENOS

Algun,ts cclulas T autorrcacti,ts escapan tie I(ts proces((s tinticos tie seleccion v aparcccn cn la circulation 1)eritcrica, tic forma yue sc huctlen obtencr ion lacilidad hntocit(ts T autorrc .t :tisos trentr ,t I)cl)tidos deri)ados tic antigenos tisularcs cspecifcos, :ono la pr()teina h,isica tic midina, cn la sang re peritcrica tic personas sanas . Los Iintoritos T cscapan do la destruction tintica I)or : " \(~ todos los antigenos propios sc csprcsan cn cl timo . " \(r todos los cl)it(rpos propios se unen con la sttficientc afinid,td c(mto part l)roducir los c(ImI)Icjos pcptitlo-CPH cstables ne:esari(ts I)au -a la clintinati(nt tic IaS cclulas T. " \(( tondos los ICR Sc unctt :t stts rcslxcti)()s ligaandos ion ht suticicntc atinidad conto pare Line se climinen lax celuLts T . Sc puedc cvitar yue cstas celtdas autorreactitas atayucn lox tejid(ls methante cuatro sistemas distintos : " Ign(,rarlos . " Anergia . " \fucrtc telular. " Dcss iari6n/suprcsion inmunitaria .

Celulas del timo que intervienen en la seleccion negativa

Algunas veces lax celulas T potencialmente autorreactivas ignoran a su autoantigeno

MIA

poblacion celular que se ocupa de la elimination cons,ste en macrofagos de la medula osea y celulas dendriticas, y se situan predominantemente en la region limitrofe entre el cortex VIII medula. Otras celulas que pueden intervenir son lox propios timocitos, mediante su propiedad de veto, y algunos tipos de celulas epiteliales del timo, probablemente situadas en la medula del mismo .
Fig' 14 .6 . La

I ,t c Iii1()IIIell( ( tic iun((ralICIA do 1((, auto (anIIt~clt((s sc :()Itstdera t((rma pasica tic t((Icrancia innum((I((>;ic,t s ,i produce en lax sip,uicnlcs situa0(Incs : " Cuando lax cclulas T autorreactitas no son capaccs de pcnetrar ,t tr .ts-cs de una barrcra endotchal tras la yue sc cncuentran :onfinadas lax celulas portatl(rr,ts del autoantigcno . Cuando, a pesar tic haber atras csado dicha barrera, I :ts cclulas no Ixtctictt ser acti,adas dchido a que : a I La cantidad tic autoantigcn(( cs tientasiado pcyucna c(,nto pare ser detect aria . bl EI autoantigcno se cncucnira ,ituatio cn celulas tisularcs flue n() csprcsan molecular ( a'1 I o e\1)rcsan nntc I)oca cantidad tic lax mismas . c I \(1 hat - suticientcs cclulas "I corno pare organizer una respucsta inntttnitaria eficaz . d 1 El antigeno sc presenta en ausencia tic oxstimulaci(in . La coestimulacion tic I(ts lintocito%'I' alutic a la neccsidad Lie 1111a scgunda serial, adcmis tic la inducida p(rr TCR, scnal yue aumcnta la proliteraci(in tic lax cclulas T y sus tiutcioncs ctectoras, coma la production de lintitcinas y la cit6lisu . Varian m(dcculas tic superficic tie lax cclulas T pucdcrt actuar canto c(tcstimulad(rras, pero la m :is importantc cs la via 117 ('1)28/(,"I 1 .:1 4 . CD28 sc crpresa cn la supcrficic cclular, nticntras quo: CTIA 4 sc cncuentra sobre todo en cl interior cclular \ su lintitati,t crprcsi(in tic supcrticic depende tic rI ('R. L.a expresi()tt de 117 cn lax CPA es nccesaria pare la presentation de muchos antigenos . La prescntaci6n tic antigettos en auscncia do sctialcs coestIttIUI,tdoras, c(mto sucedc cn lax cclulas del l)incrcas, puedc hater yue cstas cclulas sc ignorcn o inducir ancrgia, en tiutci(in do la naturaIcza del antigeno y tic la avidez tie la interaction .

Tolerancia inmunitaria

Las cCIuLis I)uCdc+t I , CrJCr sti c ;tl , :lLid,ld tic rcsl)ucst .t tr ;t> Lt cillitic sena]Cs a trdtts tic ski 1(R . I'M printer lugar, I)uCCIcil rcducir ski nitmer() de de molecules correceptoris, Como COIl5CCLICIlCi,l tic la actIVuci6n, tic forma 1111C ell SittlaCiOlICS Lie Cstinlulaci(')Il cr(inica sc puctic Ilcgar a la ancrgia . l .a ancrgia sc define co,nlo -kill cstado cclular en ell quc ell lintocito I)crnlanccc li\o, pert cs incapai do dcsarrollar cicrtas resl)ucstas tuncionalcs, aunquc so: IC cstimulc do furnla adccuada a tratcs dell receptor especitico pare alltigeno v tic otros rccepto,res fundamcntalcs pare ski activaci()n "" . Se puedc inducir coil faciliciad till cstatlo tic ancrgia in ritrv cn los lilltocitos T metliantc la acti\acids tic ski TCR (scf al 1 ) ell au,cncia tic COCS6nll11 :16011 (scfial 2'I t nlcdiantc antagonistas pcptidicos cn prcscncia tic csta segunda seflal . La ancrgia producida po,r Calla tic COestinlula cion sc ptictic corregir estimulando :a [as cclulas T con lt .-2 . 1)arccc posihlc repr(xlucir kin Cstado similar in nivor metliantc la in\ccciinl tic supcralltigcllos I)otcntcs . Sin embargo, todasia sc CiisCUtC la inlportancia tic la ancrgia conlo nlecanisnlo tic la to Icrancia periferica frcntc a los autoalltigenos, la quc pareceria peligroso confiar ell kin mecanismo yuc se puctie rct emir con citocinas, como la II-2, pure conscguir la atitotolcrancia, sa yuc ell CStC C3SO I)r()CCSUS IllflaIllattl'IOS tral,Sltt11"I(,S t llna rcsl)llcsta inmunitaria frcntc a una inteccion ptdrian inducir cuadrts autoinmuncs . En rcalidad, intiCIlaS tic Ias dcscripcioncs tic In ancrgia in hirn refejan en realidad kin estado tic paralisis indu cilia cn los lintilcitos antes tic sit +nncrtc progr inacla, tic forma quo: sc dchc contcmplar la disminuci6n cn cl nunlcro tic rcccpto,rcs, la ancrgia s, ell illtimo termino, la nnicrtc cclular, conlo till comtinu() quc dcpcndc tic la nlagnitud . la duraci()n dell cs tinrtilo antigcnict .
siom

La anergia constituye kin mecanismo de tolerancia periferica

" ( .a union de ('1)28 aunlcnia Ll produccioin de ll . 2, la cxpresi(')n dell receptor pare Ill .-2 v fa\orccc la progrcsioll dell ciclo cclular ell las cclulas T icti\ati :l, . " La union tic CTLA 4 bloquca ] .is irsI)ticstas depentiierltes tic (1)28, intcrrunlpc Cl ciclo cclular \ produce nttterte cclular, al disminuir ll .-2 . I)or tlllto, CI Ctccto tic la cocstinnllaCi(')Il po,r las molecules B'' tic l ;ls CRA dependc tlel find cquilihrit entre la c\prcsion dc ('D28 (I'LA-4 ell la sul)crticic tic IA', cclulaS C . La cliininaciim tic CTIA 4 deinucstra quc Ias senalcs negatisas cinitidas por csta nlolecula ticsenlpeflall kill papel csencial ell la rcgulacioin tic Ills linfOCitos I autorreacti\OS . I ..t tolerancia I)critcrica II .ltia lo,', autoalltigcrOS I)uedc scr  ittjCtci(,s ;tr . tic tinnl .l tluC la inducci(')jl experimental do tolerancia dente .l till antigeno puedc mantcncr la tolerancia o suprinlir la rcspucsra inmunituria frcntc a orro scl;unclo antigcno, sicmprc yuc anlhos antigcnos guardcn alguna rclaciml tisica o estrliltU ral (cons(, cstar cr cl misino) tcjid(,1 . late len()iilcno indica quc cn la tolerancia hay iniplicados (arts fenoincnos quc no son ignorar una cclula cictcrnlinacia (, la 1IIUC11C teltllar. Una posihlc cxl)licaci(in tic dicho tcnomcnt scria yuc cxistan dos pohlacioncs tic lintilcitos T, quo: I)roduccn distintas cittcillas . Muclras cnlcrnlcdadcs autoillnlunitarias infamato,rias son producidas por ]as cclulas Tit l, quc produccn cit()cinas co)nl() I FN' N TNFa . 1 ts citocinas prodt+cidas por I'lt2 ( HA, 11 .- 5, IL-6, 11 .- 10 ! 6-

Desviacion inmunitaria

Muerte cellular periferica I i CI inlin .tci()1l cxtrltinlica tic 1,1% CC lulas T Cs kin inlportartc protcso,

tent(, pare ell mantcnimiento) tic la autotolcrancia coin)() pare cl cquilihrio normal tic] sistema innrimital-io . I)espucs de la acti\aci(')ii antigenica, la nlator partc tic Ias cclulas T muercn Ilotapoptosis, lo, yuc pcrinitc tanto ctntrolar la rCSI)ucsta autoinnlunitaria co>nlo nl :ultener till lainaf o adet uado de la poblaci(in linti,citaria . La climinaciom periferica tic Ias cclulas T se base en la union tic Fas con sit ligando o Lie '1NF con ski receptor. La consi~guicntc transduccion tic selialcs actin a protcaSas parctidas a la cnzima conscrtidora tic 11, 1(3 (ICE), cnctrgatlas tic la nulcrte cclular progranlada nlcdiantc apoplosis . Las dcticictlcias getleticas tic Fas l-/'o ski ligando pticdcn producir procesos linfoprolitcratis- os en ,atones ) . Inu,ulos . LOS lintilcitos T aumcntan la cxl)resio il dell Itgando do Fas cn Lt s{II)(:rficic cclular CICSI)ucs tic la acti\ aci(in antigeniCa . La Union tic Fas coil Fasl., tart() ski forma lipda a la cclula conic la soluble nlcdiantc digestion clvinlatica, translllitc la I'SCIial tic la nnicrtc ., a [as cclulas')' proximal, Cn till prtccso tratricida (Jiq . 14 . `) . llctcrminados tcjidos cmplcan Ias pare protcgcrsc tic Ias rcSI)ucstas innlunitarias pcrniciosas, tic forma yuc tcjidos conlo la retina o cl tcsticulo expresan cl ligando do Fas quc les protcgc do la iccioin tic los lintilcitos T acti\ albs . (''ITA-4 tainbicn dcsenlpcia una ill)pou - tantc IIIISI( `lil regula flora negatita . Los ,atones defcitarios para cstas molecule desarrollan proccsos linfoprolifcrativos parccitlos a Ills pr(xitttidos po,r cl deficit do Fas ) tanlt)icr Suti- cn cntcrniccl :uics aut(Iintlulnitarias . Una tcl acti\ados, Its linfi,cito,s T aunlertall la exprcsioll ell SUPCrficic tic GITA-4 l )'. ftR . 11 .51 . I .a union tic csta nl()Iccula lace title sc inluha la production tic 11 .-2 ticpcndicntc tic ('D28, la cxprcsioin tic los rcccptorcs para IL-2 )- la progrcsion del ciclo cclular en ]as cclulas f acti\adas . La ulli(nl silllult .incl tic I ('R c (`1TA-4 produce la nulcrte cclillar, yuc sc puede imps. till- anadicndo ll .-2 . La cocstinntlaCioin po)r la nlo1CCula 117 I)tiCtic teller CIos Ctcctos (/iq . 14A :

La importancia dell sistema Fas en la muerte de las cclulas T

Fast soluble

Las cclulas T activadas expresan tanto Fas (CD95) como ell ligando de esta molecule (FasL) . Los danos fratricidal (1) se pueden producir por contacto cclular directo o por escision dell FasL y la union de Fas por la forma soluble de ski ligando . El suicidio autocrino (2) se puede producir tambien por la interacci6n entre FasL soluble y Fas .
Fig. 14 .7 .

Tolerancia de las celulas B frente a los autoantigenos

cilitan la produccion cic anticucrpos, pcro tin ctcctor tirndamcn tal de algunas citocinas de estc tipo, comp 11 . 10, es la disnti nucion do las funcioncs clcctoras dc los rnacrotagos, incluida IA Tit sirgcncs prcscntacilm do antigenos a Ids celulas Ttil 10 .-?. Dc cstc modo, Ids celulas TH2 son rcsponsahlcs cic suprunir algunas respuestas inllanratorias i cic hipcrscnsihilidad retardada) . El IF\y producido por Icrs lintircitos'I'tl I puedc ina pcdir quc Ids celulas TIM se comicrtan en Ltt2 . Estc tipo dc dcstiacion inmunitaria SC cicscribici Itace rnds dc ;0 ,trios para descrihir ccnnu tin Animal concrcto podia responder al misnto antigeno dc dons formas complctamcntc distintas . Los cobasas sensibilizados Coil tin antigc11cr cn altintina producian nic cles elcvados do Ig( ;I, pcro no dcs.u-roll .than una rcshucsta dc Itipcrscnsibilidad rctardada, micntras quc estas mismcrs Allintalcs si desarrollahan cstc tipo tic respuesta clandor SC SCIISIbiliZall Coil el ntismo alltigcncr en la sol11citirt adt- ut- antc de FrCUnd ccNttp1c ta . Sc strgirio quc la capacidad dc till antigcncr dc inducir res pucstas -cclularcs ,, o -huntoralcs- podria rctlcjar la actiracicin dc dos brazens nnrtu.uncntc CXcluscntes dcl sistcntt innrtrnitario . Los r-esultados dc este csperintento rcpresentan sin ducla trnd forma dc cicssiacicrn innrtrnitaria, c1crisada dc la induccicin selcctita de Ttt2 mas quc dc THI . Esta cicssiacilm innnrnitaria tambien se aplica a los autoantigcnos, \, ,t quc proccsos ccrmo la diabetes o la cntcrmcdad intlantatoria intestinal producidors ambos par celulas 'I'tt 1 SC pucdcn intpcciir corn celulas I tt2 scnsibilizad:ts ti-cntc al antigcno .

cn taws tardias dcl cicsarrollo . Es dccir, cn cl caso dc Ids celulas B la tolerancia puedc scr inducida tanto durante cl periodo dc eicsarrollo comp tras la estimulacion antigenica en Icrs tejidos lit) brides sccundarios.

La sintesis de IL-2 se controla mediante senales coestimuladoras

IL 2R

Inhibicion de la sintesis de IL-2

La tolerancia de las celulas T depende de la constitucion genetica del individuo

Se ha crCAdc, 1111 ntcrcjelo trans,`cniccr c11 Cl y11c Ids celulas tic Icrs islotcs pancrcaticos esprcs :ut tin antigcno v iral I licmaglutinina de 13 gripe, I L-\ y SC cxpresa tin I'(: R CSI)ecilico pard cstc anti gcno en [as celulas T. Se cruzan esters ratcmes doblententc transgcnicos con ratcxtcs con genes no CPI I distintos, cs decir, raIds ccpas tones con una dotacicin gcnctica distinta . En und dc las celulas L rcactitas 1rcntc a HA pro I'dcdotaciun BAI .B/c), duccn grancics cantidadcs tanto dc 11.-4 cornto do IFNI; v nor mucstran signers dc cntcrnicdad inll :unatoria pancreatica. Sin embargo, en otra ccpa tic ratoncs l con dotacicin genctica BI0.I)2) Ids celulas rcactisas prcrducen cic forma cxclusisa ci tocinas Till s . pucdcn intiltrar Icrs islotcs pancrcaticos s, produ cir diabetes . La dcssiacicSn innntnitaria cs controlada Iurr Icrs genes, muchos dc los cuales se co11tbin :m yard co>ntrcrlar 1A susccptihilidad cic tin indis-itiuo trcntc a una cntcrntcdad autoinmunitaria .

Fig. 14 .8 . La union de CD28 estimula las senales intracelulares, que culminan en la produccion de IL-2, la expresion del receptor para IL-2 y la progresion en el ciclo celular de las celulas T activadas . La union de la CTLA-4 sobre la superficie celular bloquea estas respuestas dependientes de CD28 e inhibe la sintesis de IL-2, cuya disminucion se traduce de forma invariable en la muerte celular .

Respuesta de las celulas B frente a antigenos propios o ajenos

1 autoantigeno 2

antigeno exogeno con reactividad cruzada

TOLERANCIA DE LAS CELULAS B FRENTE A LOS AUTOANTIGENOS

I .i :" r~~~lutcicin cic Ie.G cic ah .i .ttinidad c' 11i : lrrn('mcno dcpcn duntc dc celulas C i s. cap. l l i . Por cllo- conlo cl untbral dc toIcrancia es mcnor para Ids celulas T quc para las celulas R, la fornta mas scncilla dc CXplicar la ausencia de autcrrrcactis idaci cic Ids Ids celulas T celulas B cs la ausencia dc ccrlaboracion purr paric dc ifuz. 14 .91 .

peptido propio

TH

ausencia de colaboracion

En algunas circunstancias es necesario inducir directamente la tolerancia de [as celulas B

ausencia de celula T

celula TH especiIi, ~ ; del antigeno exogeno

for elcmhlcr . Al~;unc~s III icnxrr~anismos posccn antigenos cdhaccs do dal lunar a ICACCioncs cruzadas, quc co11ticncn epitopos cs tranos que reaccionan coil Ids cclulas'L \' otros epitopos sintilares a epitopos propios, capacc% de cstimular Ids celulas B. Esters epitopos pocirian prosocar cncrgicas respuestas cic antictrcrpcn trcnte a Ios antigenos propios {fii1 . 14 .9) . Adcmas, al contrario yuc Ios 1'(:R, Ion rcccptcrrrs dc innuuu>globulina dc ]as celulas T made ras t estimuladas antigenicamcntc pucdcn czpcrintcntar fcno. menus tie hipcrnnrtacici11 t adquirir propictiacics autcrrreactjcas

Fig. 14 .9 . 1) Cuando no se dispone de celulas TH, ya sea por tin defecto en el repertorio de celulas T tv . cap. 9) o por su eliminacion en el timo durante el proceso de desarrollo de la autotolerancia, ninguna celula B autorreactiva sera capaz de producir una respuesta de anticuerpos contra antigenos propios. 2) Cuando una celula B autorreactiva colabora con una celula TH no autorreactiva como respuesta a antigenos que contienen simultaneamente determinantes propios y ajenos, se pueden producir autoanticuerpos .

Tolerancia inmunitaria

1-a intiuccicm tic tt)lcrancia ptrr imrtc do Its antigcnts I,rol,it~s hucdc tcncr ditcicnics CtrnSCCUCnCIas, como la eliminacion clonal o la adquisicion do :uicrgia . FI rcsultacio final dcl,cntic tic la atinitiad ticl . rcccl,tor tic :uttigcn0 tic I :i celula 11 c tic la n:tturticza dcl antigcno inductor, yuc l,uctic sir una i,rotcina integral tic ntcntbraim o una I,rotcina soluble circulantc y fitndaincntalntcntc ntonontetica . El dcstinct do las celUlas 11 Altorrcactitas sc ha cstudiado mcdiantc la tccnologia do transfercncia genica (firfs . 14 .10\ 14.11) .

Las celulas B autorreactivas pueden ser eliminadas o adquirir anergia, seg(n la afinidad del receptor de antigeno de la celula B y la naturaleza del antigeno

EI tirstincr tic ],Is ululas I ; autmrrc;utiv.n ishtcitit .ts tic .tunt.tntigcnts sir mcmhr.tn.t, slur scan cal,accs tic cntrccruzar los rcccptctres Ig tic I:ts celulas li coil Bran avitlcz, cs rl siguientc . EI ntimcro tic celul:ts 13 inmaduras autcn-rcactivas cn to medula osca no sc rcdmc, :uuuiuc la cai,rrsitin dc sus rcccl,nx'cs IgDi rs rcgulada ncgatiwamcntc tras Ia cvix>sicicin a aurt>anrigcnos tic mcmbrana. 1'or tunto, durantc las fries initiates tic diferenciacicin, las celulae R inm:uiuras no son eliminadas con tanta cficacia ccnuo las celulas I' inmatiuras . I'csc a totlo, la v- itia tic cstas celulas li rs muv coma v su tlcstino es ser tlestruidas (probablcmentc mc-

Las celulas B que responden a los autoantigenos de membrana son finalmente eliminadas

Induccion de tolerancia en celulas B perifericas mediante eliminacion clonal

progen . transgenic. heterocigoticos raton transgenico MET-K" rat6n transgenico anti-KIg Fig. 14 .10. Se transfirio a ratones con un haplotipo no b el gen H-2K'', que codifica una molecula CPH de clase I ajena y una proteina de membrana . El gen quedo bajo control del promotor de la metalotioneina, especifico de tejidos como el higado (ratones transgenicos MET-K) . Estos ratones fueron cruzados con otros no b a los que se les habia transferido el gen de la Ig anti-H-21< 1 (ratones transgenicos anti-KIg) . Sus descendientes, doblemente transgenicos, expresaban H-2K en el higado, y su medulla bsea producia celulas B especificas de H-2K. Sin embargo, estas celulas B autorreactivas eran eliminadas parcialmente en el bazo y completamente en los ganglios linfaticos, sin que tuvieran en ningun momento la posibilidad de producir autoanticuerpos . En los progenitores transgenicos no se detectti ningun idiotipo identico a anti-KIg .

25 0v

j 1,

i25 001

25

generation F,

no transgenico

ratt5n transgenico MET-K"

ratt5n transgenico anti-K"Ig

raton doblemente transgenico anti-K" eliminacion de las celulas B anti-K'' de los ganglios linfaticos y del bazo

reactividad anti-K" de las celulas B

normal

ausencia de reactividad IgG

anti-K presencia de anticuerpos Ig

Induccion de tolerancia frente a una proteina soluble en las celulas B mediante anergia clonal progen .transgenic. heterocigbticos raton transgenico LNG ratdn transgenico anti-LHG Ig Fig. 14 .11. Se transfirid el gen de la lisozima de huevo de galling (LHG) a una lines de ratones, ligado a un promotor tisular especifico . El LHG (fundamental mente soluble) indujo tolerancia en las celulas T y B. Se obtuvo una segunda lines transgenica (anti-LHG Ig) con los genes reordenados de las cadenas ligeras y pesadas de un Ab anti-LHG de alts afinidad . Un marcador alotipico IIgHII perming distinguir el Ab de las Ig endtigenas (IgHI . La mayoria de las celulas B de estos animates transgenicos expresaban IgM e IgD del alotipo , a,, . Los descendientes, doblemente transgenicos, presentaban una elevada tolerancia a la LHG, y no producian Ab anti-LHG ni celulas formadoras de placas. Las celulas B con afinidad por la LNG (autorreactivas) no habian silo eliminadas ; sin embargo, la expresion de receptores IgM de superficie se encontraba regulada negativamente, aunque si que se expresaba una cantidad normal de receptores IgD. Las celulas se comportaban como celulas anergicas.

125%

125/d

125%I

generation F,

no transgenico

raton transgenico LHG

ratt5n transgenico anti-LHG Ig

rat8n doblemente transgenico las celulas B especificas de LHG no son eliminadas: se tornan anergicas y expresan una menor cantidad de IgM de superficie

reactividad anti-LNG de las celulas B

normal

ratones tolerantes frente a LHG

la mayoria de las celulas 8 expresan el transgen de la Ig anti-LHG

Tolerancia inducida artificialmente in vitro

diante apooptosis ;+, casi sicnlprc antes de quc alcanccn los tcjidos linibidcs pcritericos.

Las celulas B especificas de autoantigenos solubles se tornan anergicas

Cuandoo Lis Cclulas B autoorrcacthas cspccitic.u tic antigcnos solttbles, htndanlcntaltnctac nlonontcricos, son cspucst ts a dichos an tigenos, no son elinunadas tie los tcjidos Iintoitics perifercos, ell Ion que se encucntran en grantics cantidades, silo quo: sc tornan anergicas. Este tenon1cno Solo se produce cuando la concentration dc antigeno SUPCra Lin cierto salor enthral . La ancrgia csta rclaciona da ion la rcducci()U tlcl nunlcro sic rcceptorcs IgM sic nlcnlbrana, pcro no do rcceptorcs Igl) . F .I cstadu ancrgiCo s a aconlpanado dc una interrupcion do la maduracioin dc las Cclulas B en la region fufcular dcl bozo, asi Como de una importante reduction ell la zona marginal dcl nunlcro dc Cclulas B Con concentracioncs altas de Ig+M dc superficic . Por tanto, al contrario que las Cclulas B, yuc son sontctidas a climinacion clonal, l as celulas B anergicas Sc dcsplazan hasta la pchiena, pero una s cz yuc alCanzan 1 .1 IlliSilla 110 Soil capaces de intcraccionar coil ]as celulas 1 i I corrcspondicntcs, Como conSCCUencia indil-CCta tic la carencia dc IgM. Acienlas, sal sentitida cs solanlcntc do unos po ocos Bias, frcntc a ]as scnlanas dc I :ts cc lulas B peritcricas norntales . Probablcmcntc, cstc tcnoomenoo no ill pen- Cclulas B anti-idiotiesb ntediado por Cclulas 1' suprcsoras ningun data en este scntido en PiCas, Va que no SC ha obtcnido los ntodelos de transtcroncia genict . La anergia tie las celulas 13 es reversible . Asi, las Cclulas B pee den responder a las setiales proccdcntcs indcpcndicntcs de antit, no t . dcpcndicntca dc C 1140 tic las Cclulas TI I, tras lo quo: pucden captar cantidacics fisiologicas tic :uui ;;cno ntcdiantc sus rcceptorcs Igll 1. prcsentarsclo a [as celulas TI I i s. cap. I 1 i. Por cl contrario, tras la union cntrc cl antigeno v cl receptor not so: produce la regu lacioin positisa de its n101000las B CC la supcrfiCiC CClular. Este dctciut do la CoxatinndaCio>n do las Cclulas B anergicas puedc ser Contrarrcstado si Lts CCIULas B son cstintuladas por citocinas intlanlatotias sconlo 11 .-41 of por algtulos actinadores policlonalcs +; conic cl lipopolisacarido} . Finaltnentc, la actisacioin cronica tic las Cclulas T poor parts dc los agcntcs infecciosos puedc pros ocar la :tctis aCioin dc las celulas B ~~espcctadoras- mcdiada por C1)40 N citocinas .

lulas B coil IgN1 de superficic (IgNis' 1 . .at concentracioncs n)eno rcs, Las celulas pre-B sc puckicn scguir cicsarrollando, dando lugar . a Cclulas B nlortologicanICIAC norntales 1 con una cantidad normal dc in nnuutglohttlinas recc:paxas, pcro I,rotiulLlanlcntc anergicas (,hill . 14 .12) . Por tanto, las intcraccioncs coil Ices rcceptorcs de su pcrficic dc Lts CCIULIS B cn cl nlonlcnto crucial cn quc son adquiridos (transicion dc Cclulas pre 13 a Cclulas R), pcrnmiten modular tanto cl funcionamientoo como 1.1 Cantidad Lie Cclulas 11 . Las Cclulas 1' hunlanas csprcsan C,PH dc class II V pucden prcscntarsc antigcnos pcptidicos cntrc si, log quc puedc dctcrnlinar tolerancia a trascs dC una disminUCioin do lots rCCCptorCS Coil

la consiguicntc ancrgia o actisacion en funcicin dc la naturaicza dc la celula T v Lie] antit cno . LOS cstudios Con c1une9 Lie celulas F nturinas has obtcnidot rcsultados yuc sugicrcn yuc la acti \moon sin Co CStinutlacion produce do tin- nia incsitai,lc anergia. is prescntacioin dc antigcnos pcptidiCOS sobrc CPA mcdiante unioncs quimicas o sohrc nlcntbranas artiticialcs que Conticncn C .PH dc class II produce .tnergia, lo tnisnlo que la lcti\acion tic las Cclulas poor anticuerpots anti R, in nlorilizados sobre 1111 .1 super ticic plastic, . Parcce clue la union tic TC R Sin cocstitnulacion t .em1)ion 1~1c011CC 1111 Cstadu :utcr~iCO, .

El numero de receptores Ig ocupados y su grado de entrecruzamiento determinan si un Ag provoca el aborto de las celulas B, su elimination o la adquisicion de anergia

1-: nti-C lois futoorcs tluC tietcrntin :Lit cual sera CI drstituc tic film Lc 1111a h dcTrrminaci.t sr encucntran la calrnCi.t tirl :ulttgcnot i cs t1CCir, su nuntero de epitoopoosi, su Ct1nCCtltraClon, la afiniLiad del reCeptor por cl epitopo a tr :tlcs dcl quo: SC Line .11 11111,VC11o .\ C1 grado dc nladurcz de la cclula H . Dc cntrc todos ICs cicstmoos posiblcs, cn uno dc Ios cstrcnlos se enCUentra cl aborto clonal, yuc CS prOpiot Lie Los Cclulas n1Cn0ti maLfir.ts, cspCCia1n1cntc Si So reccpto>r dcl cpitopo antigcnicot cs do alt, afinidad o si la \- a1cncia o I,t conccntracioin cicl antigcno son altas is . fill. 14 .131 . En cl cstrenlo opucsto sc cncucntra la posibilidad de quc not oCUrra nada, Coma SUCCdc CuandO las ComCCntraCiomCS de antig,cno of las afinidakics son t11M bajas. Ell LAS situaCionCS intcrn1cdias SC proodUCen Icn fenonlcnos tic ancrgia clonal .

Edition de los receptores

hl :a n1acoria dC I :ts Cclulas B, la proxit]CCioin do 1os gores de las illnr.:n+~t;lohulinas rcon- cirnado,s 11acc Cite no so: produzcan tuturos rcorLicn :unientos. Ell los ratoncs transgcnico~s para los genes rCotrdenados dc forma artificial se 11 .1 CICntoosU- ado quo: 11gunas Cclulas B potencialmente autorrcactisas escapan tic la ancrgia of la climinacioin nlediantc la genesis dc nias reorticnamicntos en Ion genes dc lasinnwnog1obulinas . l)iCl1a -ediCi(Sn` CIe receptores puedc scr Un0 dc los nlecanisnlos mediantc Ion Wales [as Cclulas 13 Se ascg,uran la suivrsiwncia cn prescncia Lie nurtacioncs sonlaticas progrcsi\as .

Sensibilidad de las celulas B frente a anti-IgM

como 100 proportion de respuesta la de los 80 controles ("a) 60 40

TOLERANCIA INDUCIDA ARTIFICIALMENTE IN VITRO Es facil inducir tolerancia de las celulas B y T in vitro

20 0 10 -5

capacidad finclonal

10 -4

lei auigcnos capacrs de entrccruzar Ios rcceptorcs innlunoglo bulinicos de las celulas H, pcro carentes de protpicdadcs mitotgcnicas intrinsecas, pucden inducir tolerancia en las celulas H. Las concentracioncs dc cstos antigcnos ncccsarias para inducir tolerancia en las Cclulas B maduras soil clcvadas, pent las Cclulas B inntadu ras adquicrcn tolerancia en presencia de pcyuctias cantid :uics dc los mismon . Tatnbien se puedc utilizar un antiCUcrpo anti-IgM harm simularcl entrecruzamicnto inducido~ poor cl antigcno Lie los receptores inmunoglobulinicos dc Las Cclulas 13 . l.as conccntracioncs doadas dc anti IgNt conduccn al aborto clonal de ] .is Cclulas pro: B. impidiendo quo: sc sigan ditcrrnciandot par, dar It ear a cc-

concentration de anti-IgM (pg/ml)

10 3 10 2

10

10

Fig. 14 .12. En este grafico se representan la expresion de IgM de superficie (IgMs) y la capacidad funcional (capacidad de respuesta frente al lipopolisacarido, LPS) como porcentaje de la respuesta de los controles. Para reducir la expresion de la IgMs es necesaria una cantidad de anticuerpos anti-IgM 10 .000 veces mayor que la necesaria para provocar una reduction parecida de la capacidad funcional . La capacidad de respuesta frente al LPS se puede ver alterada por cantidades de tan solamente 10' Nglml de anti-IgM, las cuales no Ilegan a afectar en absoluto a la expresion de la IgMs .

Tolerancia inmunitaria

Sensibilidad de las celulas B a la induction de tolerancia fase de desarrollo de la celula B pre-B ~ celula B celula B celula productora de Ab celula B de memoria celula B secundaria intensidad de la sepal negativa muy alts aborto elimination bloqueo aborto alta aborto anergia sin efecto aborto intermedia anergia sin efecto sin efecto anergia baja sin etecto sin efecto sin efecto sin efecto Fig. 14 .13. La capacidad de adquisicion tie tolerancia se va reduciendo a to largo del proceso de maduracion de las celulas B inmaduras hacia celulas productoras de anticuerpo . El tipo de tolerancia depende de la madurez de la celula y de la intensidad de las senales que recibe . Esto ultimo depende, a su vez, de la afinidad del receptor de antigeno por los epitopos implicados y de la concentration y valencia del antigeno en cuestion .

" Aborto clonal : cuandcr se administrall antigcllos polisalcntcs a conccturacioncs adccuadas, pucdcn prosocar cl aborto do Ias cclulas B inmaduras, itrtpidicndo que sc sigan ditcrcnciando . l a susccptibilidad a la adquisicicin do tolerancia do I :ts celulas prr-B cs clc\ada . Elininacicin clonal : Ias scftalcs negatis as dc gran intensidad pucdcn pro\ ocar la climinacicm dc Ias cclulas B nt .tciuras . Anergia clonal : Ias cclulas pre-B CXpttcstas a CUnCCntr;tci0nes intcrn1cdias de tin :uttigener pcrlisAlcntc se pucdcn scguir des;trrerllander, dander Ittgnr a CCIUlas li llurrfirlu'1ic :uncntc 1101111 .110, s, coat c.uttidades ncn- nr ;tlcs .ic ill ntunoglobttlinas rcicptlrras, pcro profundarncntc ancrgicas. " Indifcrcncia clonal : ctiandc> la concentration dc antigeno cs baja rr cuandrr la afinidad do los rcccptorcs dcl naismo cs insu ficicntc, nose produce ningiin etecto sobrc Ias cclulas B. Dcsdc tin punter do sista cstrictcr sc considcra ttn tcr16nictio do tolcrancia pasisa . Bloqueo de Ias cclulas productoras de antictterpo : of exec do till antigeno I , : dificulta la secretion dc anticuerpos pert So parts do Ias cclulas productoras dc Icrs misnurs. I,a capacidad dc adquisicicin dc tcrlcrancia dc Ias cclulas productoras dc anticucrpcr cs baja .

to ditcrctues . Para lograr estc rrbjetiso to ntejor es inocular celulas capaccs dc autorrcnosarse (1) . cj ., celulas dc mcdula osca). Cttando la prrblacirin de cclulas illscct:uias conticnc cclulas T maduras, cstas pucdcn rcaccionar ti -cntc a Icrs antigeno dc histoccrntpatibilidad dcl hucsped, prosocando ttna grac cnferntedad I gttc n10CILt6 scccs rcsujta tatal ;i cicnontinada cntcrntcdad injcrto contra hucsped . Los anticuerpos frente a los correceptores de las celulas T inducen tolerancia frente a los trasplantes I- POni111c inducir tolerancia frcntc a Icrs tcjidos trasplantados a in di\iciuos adultcrs nlcdiantc ]a Adntinistracirnt L1c anticucrpcu monotlonalcs frcntc a Ias t1101CCUlas ( :I)4 , ( I)R dc las cclulas T f cstos anticuerpos pucdcn dcstruir o ITS pctar Ias cclulas T~ . Dc esta nlanent sc puccic inducir tolerancia trcnto a los injertos tic picl inclus0 on auscncia tic quitncristno eclular.

Durante la generation de las celulas B de memoria hay tin nuevo periodo transitorio durante el cual las celulas pueden adquirir tolerancia

Susceptibilidades relativas de Ias celulas T y B a la induction de tolerancia ir1 vivo tolerancia

I .r,,i hil,rti l ; Ccund,iria, ~ I " r1 .cdc'ntc, 11r Milks li iic nicn1cnia t'c ncrJdJS n1cdiantc cstinTttlo, dcpclldicntrs do cclULts - 1 ; \. Cap, I 1 ;i son nrtn stisccptibles a la adquisicicin dc tcrlcr:utcia tras la czposicion a cpitopos prosentadcrs dc tiirnia penis alctac cn auscncia tic ctrlaboracicSn por parts dc Ias cclulas T qiq . 1-1 .1 .;1 . Probablenicntc, csta susccptibilidad frcntc a la adquisicicin dc to Icrancia garantiia la climinacie'rn del repertorio do ]as cclulas li dc memoria dc nucsa creation quo: hall adquirido autorrcactkidad !dcbido a la actintulacicSn dc nitttacioncs sornaticasl.

INDUCCION ARTIFICIAL DE LA TOLERANCIA IN VIVO La tolerancia in vivo se puede inducir artificialmente mediante diversos sistemas

En los animales quimericos se producen fenomenos de tolerancia I a tcrlcrancia sc pucdc inducir nlcdi:tntc Lt inotulatioll dc cclulas alogcnicas a hucspcdcs inniunoinconipctcntcs, por cjcniplo rccien nacidos o adultos sonactidos a tratamicntos innaunosu presorts, cotter la irradiaciein corporal total, algunos farniacos p. cj ., la ciclosporina 1 o anticuerpos anti-linlociticos i i0olntlilia anti linfircito, antiatcrpos anti CD4, etc. i . Para ciuc la to,crancia sea persistcnte, sc debt mantcncr cicrto grader Lie quinlCrisni0, Cs decir, dcben coexistir cclulas dc los den in(_iisidu0s gencticamen

dosis minima inductora de tolerancia : celulas B, 1-10 mg ; celulas T, 10 pg

2 3 10 20 30 40 50 140 150 dias despues de la administration del antigeno

Fig. 14 .14 . Se administro tin Ag (globulina humana, tin Ag T,~ ,) a tin raton a dosis capaces de inducir tolerancia (tolerogenicas), y se determino la duration de la misma. La tolerancia se indujo con mayor rapidez y fee mas persistente en las celulas T que en las celulas B. Las celulas B de la medula osea pueden tardar mucho mas en adquirir tolerancia que las celulas B del bazo . Generalmente, para inducir tolerancia en las celulas T son suficientes dosis de antigeno considerablemente menores: 10 pg frente a 1-10 mg, es decir, 1 .000 veces menores.

Posibles aplicaciones terapeuticas de la tolerancia

La administracicin tic antigen(), protcic()s sOltthles en ti)rn1a no ell rccicn naciagregada induce rapidamentc tolerancia tanto adultos. l .a s cclulas T 1, B prcscntan disdos coma en aninlalcs tinto grado dc susceptibilidad a la illducci(Sn tic tolerancia par parts do cstos antigcnos . Asi, las eclatlaS T del hazo V LIcl 61110 ell cl plaza dc pocas horas tras 1 :1 adminisadyuicrcn tolerancia Iracion tic dosi% nun hajas dc atttigctto . La inducci(5n do t(lICrancia en I :ts cclulas 11 del hazo es till prc)ccso inticho mas prolongado, para cl (Iuc sc prccisan neat ores dosis tic antigcno Ifp. 14 .1-11 . l .a s coneciaraciones do antigcno ncccsarias para indticir tolerancia de las cclulas 1 ; ell Ills rccicn nacidos soil cicn feces menores yuc Ias ncccsarias tiara inducir el mismo efecto en indiciduos adult()% .

Los antigenos solubles inducen tolerancia rapidamente

Una proliferacion clonal masiva puede conducir al agotamiento y a la tolerancia

I .a tolerancia dc los linfOcit(s I ), ell mcn()r mcdida, dc Ias :cltl las B pucde scr debida a till fcndnlcno dc agotamicntu clonal, quc sc pucde producir al tcrmino do Una rcspucsta inilrtnlitaria cspecialnlcntc intensa. Una cxposicic)n continuacia al antigcno puccic cstinltilar a tadaS ]as cclulas capaccs do responder Creme al mismo, quc se comcrtiran ell cclulas totalnlentc ditcrenciadas de senlisida corta, p()r I() quc al ciesaparccer estas pucdcn no cluedar cclulas capaces dc responder al mismo antigcno en una exposici(in postetior.

La administracion de antigenos par via oral induce tolerancia

urgano . ()tras inucosas pucdcn scr\ it tambien para tcn1seguir la tolerancia espccifica ante tin antigcno . Sc Ila clnplcado la administracicin nasal dc pcptidos rcstringidos par ('I'l l dc class I1 para controlar tantcl la% rcspucsta% <dhumoralcs , coma , cclularcsAdcntas, 1,1 administracicin I)ulmonar mcdiante aerosol do tin an tigcno pcrmitc controlar Lls rcspucsta% alergiCaS trCIltc .a antigcnos extranos 1. las autoinnluncs frcnte a antigcnos propios . l .a capacidad dc contr()lar tant() Ias rcsl)ucstas dc tip() Ttt 1 outoinmunitarias l cone) T112 I(alcrgicas ~ ton cste sistcma non dice yuc la dcstiacibn innlunitaria no dcbc scr cl mccanisnlo implicado ell ell la tolerancia cstc cast) . Poetic yuc acrd% tipos Mularcs, incluidas Las cclulas (-1)S, scan responsables de la suprcsi(Sn dc la rcspucsta innulnitari,l tras la administracicin de antigcnos pr(itcicos ell aerosol .

efecto% del 'L\F. Aunquc la induccicin tic Ias T112 nltlcos :ls CS especifica para su ;ultigeno, la actin idad suprcsora de TG F13 no It) es, do forma quc la induccicin dc tolerancia oral frentc a tin antigcno pueda sullhnlir la rCSI)ucstl innlunitaria frentc a otro sc gundo antigcno rclacionado . Estc cfccto dc -suprcsititl par pro xinlidad , . par las cclulas TH2 niticosas pcrmitc la stiprcsioll tic complcjas c111ermcdadcs autoinnlunitarias cspccificas para tin organo, administrando till antigcno tntico proccdcntc dc dicho

Losanrigenos adnliitistrad(n p)r ti,l oral indtl:cn tolerancia mcdiante dil'crsos mccanism(~s. 1)Osis cles aeias do antigcno pucdcn producir ancrgia o dCStLLIC'1OIl, pcro en csta sit iacion cl tcrmino ancrgia scria sincininlo tic paralisis c()nu) Paso prc\io a la nrtlcrtc celular ic. mas adclallte1 . Sin enlh :Ugo, IOS antigcnos a dosis hajas pucdcn scr rec()n(uidos par Ias cclulas T irltcstinalcs y, c(no la rcspucsta eticaz en diclla zona sc rcaliza mcdiante la cl)nnnltlci('m tic class hacia IgA, no rcsulta sorprcndcntc (Iuc I a Ilc;-ada del antigen() CSCi11tti1C a IaS MILL1% T yuc estinnt1an la I)rOduccio)n do IgA. Fstas cclulas parccidas a TH produtcn titotinas, CUi11a IL-1t11 '1'(,F(3, yuc inllihcn 1,11, rcspucsta% intlanrat()rias mcdiatic ]as das par Tit l . TGFji inhihc la prolitcraci611 V la 1`11116011 . do las cclulas ill;, inhihc ]as cclulas I citotdxicas c cclulas B, do la producci(in do citocinas par Ias linfocitos l antagoniza los

El punto tie unic'nl tic till anticticrpo pucde actuar onrlo antigcno c inducir la tormacion dc .antitucl-I)OS anti idiotipo If x-. cap . l,,' . EStO% anticuerpus Inlcdcn anular la capacidad tic rcspucsta tic Ias cclulas B nlctiiantc cl cmrccruzamicnto dc sus innlllnoglobulinas dc ell algmos aninlalcs la nlat Oria do los anticucrpo% supcrficic . Como prcxlucidos cant(:) rcspucsta a tictcrnlinatlos antigcnos pcrtcncccn a tin mismo idiotipo, la suprcsi(in dc cstc idiotipo par parte tic Icn anticuCI - 10s anti-idiotipo pucde mcxiiticar n()tahlenlcntc la rcspucsta . Sin embargo, cste tipo do tolerancia sicnlpre sera partial, la yuc sblo atectara a Ins cclulas B portacloras dc csc idiotipo c()ncrcto . El idiotipo tic tina cchlla 1 cst% represcntado par Ias reg,ioncs )olinu)rt:ls tic Ias cadcnas u t. [i dc stl TCR. Sc ha cicmosn- ado yuc Ias cclulas rcguladoras cspcciticas para'I ( :R, inducidas tras la sacunaciOll Coil cclulas "1 autOrrcactisas, I(x pcpritl(n dcl TCR c iIICILI%O Cl Al)\ title codifica cl LCR inlpidcn Ias procc%os dc aatOinnlUnidad .

Las respuestas anti-idiotipicas tambien pueden estar relacionadas con la tolerancia

Mantenimiento de la tolerancia in vivo

1 .a pcrsistcnoa dcl antigen() dc>cnlpclm till Lapel csencial in riru ell cl nlantcninliclito dcl cst.ld(( do tolerancia fi- cntc al nlisnlo: tu1nt1o la icnltcnu-aci(in do antigcno distninuty par dchajo do tin cicrto s alor untbral, la :apacidad tic rcspucsta se rccupcra . Si la tOIcrancia %c ha prOCiutido taltla :()i1SCitillICla tic una climinati(in i]anal () air tin tcn(inleno dc ancrgia irret crsiblc, la retuperaci(')n tic la capacidad dc rcspucsta depcndc del tienII)O necesari() p,u'.1 general- nuexos hntocitos a partir tic sus precursorcs . Esta rccupcracicin sc pucde c)- itar .uloptando cicrtas Incdidas, CO1110 la tiIlleitolill :l . Si se lllallticilc la t()lcrallcla mccllalltc till Illecalllsitlo suprcsor, basado par cjemplo cn la dcsx- iaci()n innnlnitaria, cstc cstado tic tolerancia puccic scr prolongado .

POSIBLES APLICACIONES TERAPEILTICAS DE LA TOLERANCIA

Un nlcjor ccntocimicnto do los tcn(imcncn de idgLli"iCi(in do tOlcratlcia scria titil en muchos scntitios . Sc pocitia promoter la tolctancia li- cntc a injcrtos tic tcjidos ijcllos, asi canto controlar Ias rcspucsta% ell Ias rcaccioncs dc Ilipcrscn innlunitaiias nocna% yuc sc (ihscr\an . 1 entcrmeciades autoinnlunituias . En la actualidad se sibilidad en Ias estan imcstigando intctlsanlciltc Las dixcrsas forma% tie inducir tcilerancia ell animalcs adultos, par si lilcra p()siblc su aplicacion tcrapctitica . Sc ha ohtcnido algtin exit() ell cl cast) dc trasplantcs rcali zad(x cn yuinlcras con administracicin sinulltanca dc tgciltcs i111111111 isupresores . 1 :.1 tt;atamicnto con antituei-I)Os n1()1l()cl(males anti-( :1)4 1, anti (1)S nO ticstructorcs tic I,ls cclulas talllbicn se Ila utilizado coil cxito en cl trasplantc dc tcjidos v ()rganos en SCITS humanc)s . I a p(nibilidad dc inducir tolerancia mcdiante la administraci()n nnicosa tic] antigcno diana s, mcdiante la utilizacic'm tic pcpti I don antagonistas cs una \ , s prometcdora para cl control dc algulms . .,, cntermccladcs ,urt()innuulit :lt-ias, pcndiclltc tic cstudios clinic() importance Ilcgar a saber c()nu) sc pucdcn acticatTanlbicn es Ias cclulas 1 clue ignoran detcrminados antigcnos, dc cal forma title cl sistcina innxinitario sea capaz dc ticscncadenar una re" Inlcsta actita adecuada . Esto podria scr till] para trenar el crecimicnto do Ias tuniorcs clue c\I)rcs,tn algun(x g,cncs cspct fiCOS drl prOpio nuor ell forma dc antigcnos de stipcrficic .

Es posible inducir desviacion inmunitaria en las cclulas T dirigiendo los antigcnos a cclulas B virgenes

ell Ias cclulas dirigicnSc I)ucde producir dcs) - iacion innuUlitircl do lOs antigcnos a cclulas B \ irgencs, para to clue Isasta Coil Lillir Cl :ultigeno coal tin anticucl-Ilo nlonocl(nlal frentc a la nlolecilla Igl) do la supcrficic do la cclula 11, con la tonsiguicntc prcscntacicin del antigen() pcpticiico par parts tic la cclula 11 t_ la destiacicin dc la rcspucsta innlunitaria al tip() LH2. Sc puccic cn1plcar estc abordajc para modular ] .is rcspucsta% inmunitaria% trcnte a antigen(n peptidicos en nlodclos expcrinlentales do cncctalomiclitis ;dcrgica experimental FAE' .

Tolerancia inmunitaria

LECTURAS ADICIONALES
~Por que escapan algunos linfocitos autorreactivos de los procesos de seleccion? ~Por que los linfocitos autorreactivos circulantes no suelen producir fenomenos autoinmunitarios? ~Que factores inclinan la balanza hacia la mitigar esta situacion? Goodnow C Transgenic mice and analysis of B cell tolerance. Annu Rev Immunol 1992 ;10,489-518 . Kruisbeek AM, Amsen D Mechanisms underlying T-cell tolerance Miller JFAP, Baster A Mechanisms of tolerance to self . Curr Opin Nossal GJV Negative selection of lymphocytes Cel1199436 :229-39. lmmunol 1996 :8 815-21 . Curr Opin Immi:nn+' 1996 :8 :233-44.

autoagresion y de que forma se puede impedir o ~Por que no reconoce el sistema inmunitario los antigenos de las celulas tumorales?

Rocken M, Shevach EM . Immune deviation-the thi "d d mension of nondeletional T cell tolerance Irnmunol Rev 1996 ;149 175-94 . mechanism? J Exp Med 1996,184 1-8

Schwartz RH Models of T cell wiergy is there a common molecular

Evolucion de la inmunidad
La fagocitosis y la encapsulaci6n son importantes mecanismos de elimination de componentes ajenos en los invertebrados, muchos de los cuales poseen leucocitos circulantes mediadores de estas funciones . El reconocimiento de los trasplantes heterologos existe incluso en los niveles evolutivos mas bajos, pero hay pocos datos que avalen la existencia de especificidad y expansion clonal en los invertebrados . III Las lectinas y la profenol oxidasa intervienen en los procesos de discrimination entre to propio y to ajeno . IIII Machos invertebrados poseen moleculas inmunorreguladoras parecidas a las citocinas . Los invertebrados carecen de inmunoglobulinas, aunque muchos de ellos poseen moleculas con dominios de tipo inmunoglobulina . Algunos invertebrados celomados presentan una inmunidad humoral inducible y de amplio espectro . Las moleculas receptoras de antigeno sujetas a restriction clonal son el elemento basico de las respuestas inmunitarias de los vertebrados, en las clue se generan celulas efectoras y de memoria. " Las celulas B y las IgM aparecen en todos los vertebrados provistos de mandibula . Aunque en los animales poiquilotermos edemas de las cadenas p se hen encontrado otros tipos de cadenas pesadas adicionales, la afinidad de los anticuerpos sigue siendo baja . Las tecnicas del ADN recombinante hall permitido detectar diversos patrones de organization de los genes de Ig a to largo de la filogenia de los vertebrados . Los peces cartilaginosos estan dotados de complejo principal de histocompatibilidad (CPH) . Los peces teleosteos son el primer escalon evolutivo de las celulas T. Actualmente se estan estudiando las moleculas receptoras de las celulas T de estos peces . Las celulas asesinas naturales (NK), fagocitos, componentes del complemento y citocinas inmunorreguladoras son elementos no adaptativos del sistema inmunitario de los vertebrados .

15

El cstudio detallado tic discrsos srrtcbrados nucstra un asancc eeolutito que conduce al sohsticado sistema inntulitario tic los marnifcros . Sin embargo, cl origcn flogcnetico tic] sistema innutnitario adaptativ-o tic los vcrtchraclos siguc sin cstar claro, cspecialmcntc a nivcl molecular, pest e los intcnsos cstucrzos tic inestigacicm que se hall realizadt~ sobrc el sistema inrnunitario tic los invertebrados . Por cl contrario, cl cstudio do los invcrtrbrados CS una importantc fUCrltC tic dates sobrc los origcncs ticl sistema innuulitario no adaptativo do los \ crtebrados 1 sistema inmunitario innato, p . cj ., la tagocitosis) . Los invertebrados pile den set animales setlitarios o ctsltmiales, con cavidades corporales o sin cllas (celomados/acelornacfos ), coil sistema sanguinco o sin el, v aharcan cl 9596 dcl conjunto total tic cspccics animales, par to clue aportan un grail nirnlcro tic posibles nlodclos expcrintcntalcs . En la /iqurrt 15.1 SC rrttrcstra un :irbol cvolutivo sinlpliticado tic[ rcino animal, cn cl clue los imcrtehraclos celomados se dividcn en dos ramas rcolutivas principales, tic acucrdo Coil ditcrcricias fundamcntalncntc cmbriologices . Una tic cstas ramas, yuc conduce a los n1oluscos, los anclidos \' Ions artrcipodos i los protosto nios ;~, se separo en fases tenlpranas tic la evolution tic la rama tic los equinodcrrnos, los tunicatios \- los vcrtcbratlos i los dcutcrtisnmxts) . Las invcstigacioncs sobrc la inmunidad do los invcrtcbrados sc han ccntrado cn los irtrupodos \' en los n10IUSCOS, va que nachos tic ellos constituven plagas transnlisoras tic cnfcrnledadcs o destructoras tic productos agricolas . Por cllo, se 11,111 descuidacio los estudios sobrc otros grupos clue filogencticamcnte sc encucntran mas cmparcntados con los vcrtcbracios 11) . cj ., los tunicados c los cquinodcrinos ;1 . Acicnuds, coma los ;ulccstros tic los ccrtcbrados sc c xtinguicron Hate macho ticnpo, los csfucrzos para localizar cl origcn tic la inmunidad tic los vertebrados en los inrertcbrados, en grupos coma los tunicados r hq. 15 .21, solo ticnen caracter cspcculativo, \- cn cllos se prcsupone que cntrc los animales actualcs cxistcn paricntcs prtixinlos dcl anccstro comiul tic los vertebrados . h n la /iqura 15 .1 tanlbic n se mucstran los tc nbnicnos innnnitarios cclulares y hurnoralcs yuc sc hall dCSrUbicrto cn lets inecrtchrados .

En la Jiqura 15.3 se mucstran los posiblcs pesos cs'olutis os tic las celulas sanguincas \ do la inmunidad tic los vertebrados . Pcsc al csito hiokigico tic los inertcbrados, solo los vertebrados disponcn tic lintocitos con capaciciad do mcrnoria altamcntc cspccifica a largo plaza . ;Quc prcsicmcs entbicntalcs pucdcn 1lahcr coil ciucido a la crecicntc sofisticacion tic[ sistema inrnunitario tic los vertebrados? PACCIC yuc cl aunlcnto dcl riesgo tic cancer v tic intccciones viricas en cstos animales complejos ~ do large v- ida haven silo tictorcs deterrninantes, que pucdcn haher tavorccido cl ticsarrtrllo de un sistema inrnunitario sonletido a un conpleia rcgulacion, con celulas cfcctoras circulantcs capaccs tic rccolnoccr pcptidos cxtrarios prcscntaclos par las glucoproteinas tic] cornplcjo principal do histocompatibilidad (CPH) sobrc la supcrficic tic celulas intcctatias o rnutantes . INMUNIDAD EN LOS INVERTEBRADQS

La nlavoria tic hss inccrtcbradors 1,trscrn IcnWcit()s, per(  ) Suclrn ca rcccr tic critrocitcts . I .tts ICUCOCitOS puCtiera scr fijos, circular par v -:tsos sanguincos o rncontrarsc ronfinados cn caviclatics corporalcs rcplctas tic liquido, cienominadas cclcnnas I;cclocitos'J o 11cntocclcs i lit nlocitos i . Probahlcnlcnte, Las prinlcras celulas sanguineas cvoluciona roil a partir tic un anccstro protozoario tic cilia hbrc . En los n1ctazoos m .is primitivos, coma las csponjas, los cclcntcreos c los platelnlintos, los antcbocitos tagociticos crrantcs no sc cncargan solatncntc tic funciones defensives, sino yuc tambicn cstan rclacionaeios con los procesos tic nutrition \ excrcci()il . En los ccltr nados itanto cn los protostonos conlo cn los dcutcrosttnnos), Caws cucrpos seen do mayor tarnano c cornplcjidad, cs necesario un sistema circulatorio para transporter los nutricntcs v las sustancias de dcsccho a to largo del organisnlo . Probablcnlcntc, las celulas tic tipo amehocito, que pa no Iran neccsarias para la cap retina tic nutricntcs, migraron dcstic cl tcjido conjuntivo circun-

Clasificacion de las celulas sanguineas de los invertebrados

Evolucion de la inmuf1idad

dIMC hasty CI sistema circulatoritt- A ctttttjnuacion, la 0011,16611 ctmdujo .t la aparicicin do una scric tic tipos cclularcs, algun0s do los CIIaICS asumicron Illncioncs cspccificas rclacionadas con la innrt)nidad l .5.4). 1)chido a la Bran di\crsidad do imcricbradtn, al contrario que cn cl caste do los \- crtchraLA0s, CS imposihlr clasificar adccua ddJ11Ct1tC IoS ICUCO CitOS lihrc, scgun sus caractcristicas morfohS-

Mecanismos inmunitarios de que disponen los vertebrados y los invertebrados

artropodos (insectos,crustaceos)

Fig. 15 .2 . Dos ascidias marinas coloniales (tunicados), Clavelina lepadiformis (C) y Morchellium argus (M). compitiendo por all terreno. En el centro se observa el sifon de tin tunicado solitario iflecha! . El diametro de cada Clavelina es de unos 4 mm . d'or gentileza del Dr . P. Dyrynda.)

Evolucion del sistema inmunitario moluscos Jigasteropodos ,,, bivalvos cefalopodos) paso evolutivo o presion selective
arnnrale!s ur ,- .ularer.

implicaciones inmunitarias
r~ :cu , ,oc irrnc :nto y discs n) :' a : iuri

multicelularidad (incluidas las formas coloniales)

sistema de histocompatibilidad, reconocimiento alogenico y memorial a corto plazo

nematodos (gusanos cilindricos)

celulas sanguineas libremente mesodermo y sistema circulantes y de tipos mas circulatorio, separation de las diversos, inmunidad celular y funciones de nutrition y defensa eritrocitos cancer e infecciones viricas vigilancia inmunitaria de las celulas relacionadas con los aumentos propias, para detectar aquellas que de la complejidad y la longevidad esten infectadas o sean cancerosas protovertebrados ancestrales vertebrados inferiores: aumento del tamano, de la duration del ciclo vital y reduction de la capac. reproduc ., en comparacion con invertebrados colonization de la tierra, exposition a las radiaciones y desarrollo de sistemas sanguineos vasculares de alta presion amniotos (reptiles, pajaros, mamiferos), que carecen de formas larvarias de vida libre ~mejor capacidad de reconocimiento y de discrimination? linfocitos verdaderos, tejidos linfoides y production de anticuerpos (IgM), memorial a un plazo mas largo medula osea, nuevas clases de anticuerpos, linfocitos T y B, organos linfoides cada vez mas complejos, TLAI mayor diferenciacion de [as celulas inmunocompetentes, que permite aumentar la diversidad y la eficacia del sistema inmunitario aumento de la eficacia del sistema inmunitario, integration de las respuestas cellular y humoral, centros germinales en los organos linfoides secundarios, ganglios linfaticos regulation fina adicional del sistema inmunitario, para evitar el rechazo por parte de la madre

inmunocitos

aloinmunidad 2 recha7o de trasprantes memoria y especificiclarl aloinmunitaria reactividad deucocitari~ " mixta

factores solubles ectividad natural 6 fn,-tores inducibles

animales homotermos, en cuyo seno los patogenos encuentran un entorno mas favorable para su desarrollo animales viviparos, con interacciones madre-feto

probable ausencia

? insuficiencia de datos

' respuesta limitada

Fig. 15 .1 . Datos conocidos de la presencia de varios fenomenos inmunitarios celulares y humorales en diversos tipos de invertebrados y vertebrados .

Fig. 15 .3 . Pasos evolutivos que pueden haber tenido importancia en la filogenia de las celulas sanguineas y del sistema inmunitario. (Adaptado de A. F. Rowley y N. A. Ratcliffe, eds. Vertebrate Blood Cells. Cambridge: Cambridge University Press, 1988 ; con autorizacion .)

Inmunidad en los invertebrados

picas y tintrtrialcs . Sin cmhargo, si quc cs posiblc construir tnt esquenm fitncional con cinco categorias principales (juT . 15 .4) : " Las celulas progenitoras, junta corn diversos tejidos licmato poscticos, Pucdcn actuar como celulas madrc dc otros tipos dc -celulas . Extcritrrmentc sc parecen a los lintbcitos dc Icts scrtebrados (ftfi . 15 .51, aundttc no cxistcn dates suficicntcs quc permitan afirmar quc cxistc inia trrdadcra hrtntt)Iogia . " Las celulas fagocitieas (ftf. 15.6) son probablcnicntc cl tinico tipo dc celula sanguine, (]tic aparece cn ttxio cl rcino animal . Correspondcn a los grantilocitos y los macrofagos dc hts maIniferrts, pero preseman ditcrcntes marcadores de superficic . " Las celulas hemostaticts (granttlosas) est:in rclacionadas con la coagulaci611 \ ctnt la cicatriracir ~n dc Las heridas, y sort cfectorcs jn,portantcs cn Cl recrtnrtcimicnto do estrucnrras ajenas . " Las celulas tnttritivas s6lo aparcccn cn unas pocas espccics . " Las celulas pigntentadas cst n prcscntcs cn ntuCILts c,l,ccics, peat solo) cn unas 1,ocas conticricn pi~gtncntos respiratrtrit)s, poi I)) ililc cquixalcn cn cstos cases a Iris critrocitos dc Iris \crtchr.airw. Los invertebrados carecen de linfocitos y anticuerpos, pero poseen mecanismos de defensa muy eficaces f.trc~. :luc -r,ti'ititrmas inrrtunit,u- itts do Irts jm-crtcbrados cu- cccn rk inntun( )L;Ir6uljnas, do suhpttblacictnes Iilltctcitarias ca1raccs do

intcraccionar nitittlamentc y do brganos linfoidcs . Sin embargo, cl innicnso ntimcro %, la Bran djccrsidad dc imcrtcbrados LIcnxtcstra la alta cficacia do sus ntccanismos dc dctcnsa . Al igual quc los xcrtcbrados, los intcrtcbrados prtsccn comet printer, line, de dctcnsa barrcras fisicoquimicas 111u\ cticaces

ffq . 15.4'1 . EI ntoco quc recubrc cl cuerpo dc muc1tos cclcntcrcos, . anelirirts, nuoluscos s algunrts tunicados captur .i t- dcstruyc a Ios posihlcs pat6gcnos 1.1itf. 15 .,';1 . Alguncts cclentcrctts, ntoluscos, equinodcrntos v artrriprtdos posecn s6lidos exoesqucletos, como caparazoncs o Conclias, quc Ics 1,rotcgcn f-cntc a la inxasion . 1=.n case dc quc consigan supcrar cstas harrcras, Icts ins- asorcs son cxpucstos a una scric do rcaccioncs dc dctcnsa cclulnrcs humra-;tlcs coordft .tdas :

2 Celulas y tejidos de los sistemas inmunitarios de los invertebrados c6lulasIteiidos

capararones y!o

funciones inmunitariastfisiolugicas
harrrr ;~s cl)".funsivac ; fi :;ir;n cl .i ri Lo-1

barrera intestinal

cinco grupos de leucocitos libres y fijos I

II

mediadores de las respuestas celulares y de muchas respuestas humorales pueden actuar como celulas madre de otros tipos de celulas fagocitosis, encapsulation, coagulation, cicatrizacion de heridas y destruction de otros organismos gelificacion y coagulation del plasma debidas a la agregacion celular; reconocimiento de estructuras ajenas, production de lisozima y aglutinina jeacciones de encapsulation y cicatrizacion de heridas?, funciones nutritivas? no se conocen (si es que existen) sus funciones defensivas; funcion respiratoria pinocitosis de coloides y pequenas particular ; ~sintesis de lisozima (celulas pericardicas) y de otros factores antimicrobianos? hematopoyesis y fagocitosis ; sintesis de factores antimicrobianos en algunos animales sintesis de proteinas inmunitarias y de aglutininas (cuerpo graso), fagocitosis (c81ulas del intestine medic), elimination de particular extranas (celulas que recubren los senos)

Fig. 15 .5 . Microfotografias electronicas de una celula del tunicado Ciona intestinalis analog, a un linfocito (1) y de un linfocito de un pez de la familia Blenniidae, Blennius pholis (2). Observese el parecido rrtorfologico; ambas celulas poseen un gran nticleo rodeado de una estrecha franja de citoplasma poco diferenciado . Barra de escala = 0,5 pm . [Per gentileza del Dr . A. F . Rowley, en Endeavour (New Series) 13 ;72-77, con autorizacion . Waxwell Pergamon Macmillan plc, 1989 .1

celulas progenitoras celulas fagociticas celulas hemosiSticas

III

IV

celulas nutritivas celulas pigmentadas

celulas fijas, como las celulas pericardicas, los nefrocitos, las celulas poro, etc. organos hematopoyeticos (bien organizados en algunos invertebrados) cuerpo graso linsectos), intestino medio y celulas que recubren los senos(moluscos,crustaceos)

Fig. 15 .4. Sistemas inmunitarios de los invertebrados. (Adaptado de N. A. Ratcliffe . Immunol Lett 1985 :10 ;253-70 ; Elsevier Science Publications, con autorizacion .)

Fig. 15 .6 . Microfotografia electronic, de una celula fagocitica del tunicado Ciona intestinalis . Observese la presencia en su interior de tres bacterias ingeridas (B). Nticleo iN). Barra de escala = 0,5 pnt. (Per gentileza del Dr . A. F . Rowley .)

Evolution de la inmunidad

2 Fig . 15 .7 . Captura y elimination de particulas extranas mediante la caps de moco que recubre al enteropneusto Saccoglossus ruber. Se inlrodujo kin ejemplar en una suspension de carbon en agua de mar durante 2-3 minutos, y despues se transfirio a agua limpia . A los 12 minutos la capa de moco que rodeaba al animal todavia se encontraba repleta de grandes cantidades de carbon (1) . A los 15 minutos todo el carbon habia sido eliminado, quedando atrapado en una bola de moco (2). Es probable que los microorganismos atrapados sean eliminados mediante kin mecanismo parecido . Los enteropneustos forman parte de kin grupo de invertebrados superiores,,, relacionados con los tunicados . Barra de escala = 5 mm . (Par gentileza del Dr . D . A . Millar .)

" Coagulacidn sanguinca v cicatrizaciin de licridas . " Fagocitosis . " Rcspuestas dc cncapsul ;,dill . " Factorcs antimicrobianos naturalcs c inducjhlcs . Para que sc prodtvcan cstas rcacciones es necesario el reconocirnicnto dc las estr"LICtkiras ajcnas y la presencia de moleculas receptores en la sangre v cn la superficic dc ]as celulas sanguincas .

Activation de la profenol oxidasa a fenol oxidasa en Ios artrcipodos herida lesion tisular

receptores plasmaticos de aglutinina sistema de coagulacion rr serin proteasas, inactivas inhibidores de Ias proteasas profenol oxidasa'

activation espontanea (baja concentration de Ca", cambios de pH)

proteasas activas

mediadores de la inmunidad

Las heridas se cierran ripidamente debido a la coagulacion de los liquidos corporales, que inducen las celulas hemostaticas y los componentes del plasma I as luridas dc Ios imcrtchrados prosocadas prrr traumatisnlos tt l,or la invasion dc jmrasitos se cierran rapidanlente, inlpidicndo la herdida fatal dc Ios liquidos corporales . La 11crida SC puede cerrar hor la extrusiin del cuerpo graso o del intestino, I,or contras 6611 muscular, por la coagulacion de liquidos corporales, por la agrcgacioin dc celulas sanguineas asociada ;t coagulacion /o por la t<1rnlaciin de depositos de tnclanina . Prt~bablenlentc, la n1igracion Lic ICncocitOS hacia la herida cs cstimulada por factorcs analogos a las citocinas \ . to as adclantc h . La geliticacic>n o ccl;tgulacitin del plasma en las proximidades dc una 1lcrida es prol,ia .ic los artrcipodos, aunquc tanlbien SC ha obscrsado cn los anclidos y cn los equinodcrnlos . Ell la coagulacion inters ienen celulas 11Cmostaticas que se aeregan cn la zona dc la Iesi(in lihcran ski contcnido, la yuc prosoca la gcliticacicin del pl ;tsn1a v retuerza Cl coagulo cclular. En nlucltas espccics tanlhien intcrviencn en el proceso conlponentes plasinaticos . Al igual que ell los nlanlitcros, cl proccso dc coagulacion consiste cn una conlplcja cascada cnrirnatica que se actin en las proxinlidadcs do la 11erida dcbido a factorcs libcrados por cl tcjido daf ado, a componcntcs tnicrobianos (),I altcraciones dc la conccntracicin dc Ca=' o del pH . Sc 11a afirmado que cl proccso cs parecido a la acti acion del complenlcnto por la via altcrnatia, Fl sistenra es tan sensible que en los cangrejos Xiphosurus polrpheouus la cascada se acti a rn presencia dc tan s6lo 4 ng/n11 dc endotoxina dc Esehcrichia eoh . El hrtrceso de coagulaciin es nun inlportantc, ta que COIlStitIlvC kill nictodo extremadanlente sensible para reconoccr a Ios imasores cxtranos mediante la dcsgranulaciin dc las celulas henlost.iticas . Es I)osihle clue en la gclificacion participe la enzinla protcnol ozi dasa ( PpO ), que una s cr transfbrnlada en tcnol oxidasa (PO Y por una writ dc scrin protcasas puede general- tact<rres que intcrscngan en acrnltccinlicntos inntunitarios mas tardios 1_firs. 1 .iA . Recientenlenty se Ila dentostrado yuc la cascada Pl,() tanlhicn cxistc cn aims im -ertebrados, coma lr>s anclidos V IOS tunicados . Las celulas fagociticas ingieren a los microbios invasores, mientras que los invasores de mayor tamano son confinados en capsulas pluricelulares Icidcn lips imcrtchrad()s h(nccn celulas lapcioticas yuc, ell c()l ;t horaciin am i,s fart()rcs 11kinuWaICS naturalcs Is . nrAS adclantcl . cemstituJcn la primes linen dc dctcnsa dente a Ios micrtxlrganisnlos i1-. hR. Li .h) . Ya sc lutn dcscrito antcriorrncnte las fasts dc yuinliotaxis, 11111011, ingcsticin y dcstruccicin, clue soil parecidas a [as clue sc producen en Ios sertchrados . Sin embargo, el reco nocimicnto dc la diana no esta mcdiado por receptores dc Fc, 1. tinicantente se ban cncontrado receptores parecidas a Ios dc ( :3b en una especic . La tagocitosis se puede producir en ausencia dc factorcs opsonizantcs, conltr ocurrc tanlhien en los s crtcbrados .

fenol oxidasa

Fig . 15 .8 . Posible esquema de activation de la profenol oxidasa (Pp0) a fenol oxidasa (P0) en los artropodos . La activation se ve estimulada en la region de la herida por la lesion tisular, por los microorganismos y por las alteraciones de la concentration de Ca" o del pH, pudiendo dar lugar a la coagulacion del plasma y a la generation de factorcs mediadores de acontecimientos inmunitarios mas tardios . (Basado en gran pane en datos de los Drs. K . Soderhall, M . Ashida y N . A . Ratcliffe .)

Inmunidad en los invertebrados

Sin embargo, en los ntoluSCOS, los artr6podos N Icrs tunicados dicha fWgcriitosis CS CStinufada por las Icctinas plastttaticas v por contponentes de la cascada dc la protcnol oxidasa. Cuando los patcigcnos im- asorcs son dcmasiado grancics o nuntcrosos, son contlinadt)s cn agregados pluricclularcs dcncrrninados nodulos o c:ipsulas, parccidos a los granult)m,1s do It)s ntamiteros (/i9. 15.9). Sc crcc quC los organisntos captUrados soil dcStl-UIt1OS mediante Ias cnzinras lisosomicas y la lisozima quc conticncn los Icucocitos, asi Como por la pcroxidasa y los compuestos rcacticos Lie oxigeno fquc SC ban detectado cn sarios andidos, nt0IUSCOS V artrupocios) . hanto la tagocitosis como la cncapsulacioin dcpcndcn dc la colaboracioin cclular cntrc [as Cilulas Itcmostaticas y hts tagociticas iv . mss adclante) .

prescncia cic un sistcma litico IlUntoral analogo al complcmcnto. Aclemas, sc ha comprohaclo clue la sangrc tic una oruga rcaccit)na coil cl factor dc , enetto dc cobra unitlo a supcrficies I Cob dc cobra), originandOSC una actic idad C33 coil\ crtasa quc escinde cl C3 hosino s . da lugar a una molccula parccida a (:311 . I a Cascade dc la protcnol oxidasa dc Icrs artropodos se Its comparado tamhien con la \ia altcrnatica del sistcma del complcmcnto, \a quc ambos sistentas soil acticados directamcnte pt)r ccrmponentes rnicrobi .u,1os v se basin cn la actic-aci(Sn secucncial de una setie de proteasas f Jiq. 15 .8) . Sin cmhargo, Irasta quc no Se IIC, en a Cabo cstudios iris cictallados .t niccl molecular, no sc puedc afirntar rotundamente quc la \- ia altcrnativa del complentento sc origin(') cn los im- crtchrudos .

brados carccen do innnmoglohulinas, pcro sus liquidcrs ccrrporales conticncn una serie dc factores humirrales cictensicos. Entrc ellOS se CnCUcraran las aglutininas, la list)zirna \ horas fsinas, bat tericidinas no relacionadas con la lisozima, las c11zintas lisose,males N eicrtt)s factores inntovilizantes. Eeisten algunos datos quc sugieren la I,resencia do corrnponcntcs Lie] sisterna tlcl complcmcnto . lror cjernplo, cs I,t)siblc quC los tagocitt)s dc Icrs crizos dc nutr posean receptores parccidos a los dc ( ;311, c . si It .t ohsercado la

Los liquidos corporales de los invertebrados contienen una serie de factores humorales defensivos naturales e inducibles Factores de defensa naturales . Prohahlcmcnte Ie>s imcr-tC-

title Cn algunas Ocasier,)CS en Icrs imcrtchrados sc producen aumenter. tic la conccntracioin dc aglutinina y tic hcntolisina, las irnicas mt)leculas quC SC 11,111 CStudiado con cierto dctalle soil los factores antimicrobianos inducibles dc los insectos . En la aCtua lidad se sabc con ccrtcza quc cstos factores tamhien sc cncuentran prcscntcs en otros im crtchracios, pcro su dctccci6n y Caracterizacic'm sc %en dificultadas por la cscasez de innrtuxigenOS, protoColos do inn,unizacibn adccuados . En los insectos como las mariposas nocturnal, las moscas y [as ahcjas se pucdc intIuCir la sintesis de hasty I S proteinas antihacterianas a ]as pocas horas de la imcccioSn de un antigeno ifq. I5 .10) . Muchos dc estos pcptidt)s ban side, purificados c SCC uCnCIA1crs ; presentan un amplio cspectrcr dc actixidad, quC dura st)lantcntc unos pocos dins, por to quc sc deduce quc sc trata de iorttPLICStOS mug distintos a ]as in nnrnoglobulinas do Icrs scrtchraclos . Rccicntcmcntc, en detcrntinados ,crtcbrados sc ban cncontradt) protcinas antibactcrianas parecidas (;\ . pig. 212? quc probahlementC son t,1crcrres inmunitarit)s ancestrales, aunquc atin sigucu tcniencio intportancia . Uno de cstos tactorcs, una CCCa- t)pinn dcnominada P4 o hcntolina (/ul . IS.IOj prcscnta hcnnologia (38%1 coil cictcrminacios dontinicrs de las innuu1oglt)hulinas . Sc pociria tratar tic una forma primitica dc innxrrtoglobtdina, pcro hucdC quC haca C,oluCionado intiepcndicntcmentc en los imertebraclos . Eli la cucaracha ante ricana sc ha dctectadcr otra claw dc protc na inducible, mucho m:ic parecida a las illmunorglolntlinas dc los scrtcbradors . Prcscnta una m:tsa nt0ICCUI,1r Lie ?00 kdal, cs altamcntr cspccifica \ pcrsistc durantc scntanas cn lugar de bias . Igual quC en CI Cast) anterior, no sc puedc cstablccer una cornparacicin liable hasty quc no se tic\C11 .t CAN) Ie,s Cstudirrs n,o,ICCUIarCS i,rCCiurs.

Factores humorales defensivos inducibles . Attnquc se sabc

I rr~ IM CrtChradrrs JIuCticn diStinguir CntrC di\en.r . .USLI:ui.u C\ trams, muChas XCCCs C()11 notable CSpCCifCidad . Enti-C IOS tactorcs Con CaIucjClad de recornocimicnro I,resentcs ell lo% liquidos corporaICs do Icrs im crtchradt)s so: cncucntran las aglutininas, Icrs contponentes do la cascada tic la protenol oxidasa ~ una cccropi na dc Icrs insectos, dcnominada hcntolina.

El reconocimiento de las estructuras ajenas y la colaboracion entre las celulas estan mediados por varios factores

Proteinas inmunitarias inducibles de Hyalophora cecropia

proteins inmunit. P4lhemolinal P5 atacinas A-F P7 (lisozima) cecropinas A-F (6 proteinas) mass molecular 48 .000 21-23 .000 15 .000 funciones y propiedades
proteins inmunitaria principal, jeconocim. de estruct. ajenas?

actividad antibacteriana de espectro reducido frente a algunas bacterias gramnegativas destruye algunas bacterial grampositivas algunas presentan un amplio espectro antibacteriano frente a bacterias grampositivas y gramnegativas

-4 .000

Fig. 15.9. Encapsulation de bacterias pt)r parts de las celulas sanguineas de una oruga. Se inyectaron bacterias (Bacillus cereus inactivados terr-nicamente) a larvas totalmente desarrolladas de la mariposa Pieris brassicae. Despues de 24 horas se extirparon y se seccionaron las capsulas quc se haban formado alrededor de las bacterias . Observese la pigmentation oscura del nticleo de melanina (M1, las multiples capas de celulas sanguineas (C), los bacilos (B) y la union de la capsula al tubulo de Malpigio (T). Barra de escala = 10 pm .

Fig. 15 .10. Proteinas inmunitarias inducibles de la mariposa nocturna Hyalophora cecropia, aisladas en sangre 10 horas despues cle la inmunizacion con bacterias (Enterobacler cloacael . (Segun los trabajos de H. Boman, D. Hultmark y cols .)

Evolucion de la inmunidad

sangrc Lie Ios moluscc rs, los insectos v los tunicados, r tacilitan cl re ctalocimicnto Lie particulas in iv tiv, asi como sit climinacicin dc la circulacion in viru . Estas aglutininas tamhicn sc cncucntran en la xtpcrficic dc Ias cclulas sani,uincas, en dondc actual) como nttr Icculas dc enlace cntre Ios Icucocitos y ]as particulas estran is, tie la misma l'orma que en el sistcma jnmunitano dc Ios m:unitcros. probable que tamhicn cste sistcma aporte a Icrs ;I[tl-()I)odos una seric de factoLie rcs rcconocimicnto . DUrat1TC la ccmsersie'm Lie Pp() en fenol oudasa P() i 15.17), ]as cclulas licmostiticas liberal) lactorcs Lie rcconocimicnto que cstjmulan la fagucitosis V la cncapstr lacilm . Rccicntemente sc ha demostrado que una aglutinina puriticada a partir Lie sangrc de cucaracha "- denominada BI)1J, actira la cascada PP(), dc tal forma que en la actualidad se LiisPorte Lie una tcoria unificadora Lie estos don sistemas tic recorno cimiento . BDIA presenta tamhicn un gran parecido estructural y funcicmal con las protcinas fijadoras dc manosa iMBP? dc los

Aglutininas purifieadas. Latos compucstos CStan I,resentes en la

ccrtebrados . (Las MBP son Icctinas; son componcntes esencialcs del sistcma innurnitario inespccifico dc los sertchrados, va que sc pucden unir a la superficic dc Ios micrtxorgani,tnos i11% asores y ticscncadenar un ataquc mediado por cl cornplcmcnto . } Al igual que la N113P, BMA actin a cl complcmento s. poscc dominion capaces dc rcconocer cl colagcno y Ios hidratos dc carbono .

El sistcma de la profenol oxidasa (PpO) . l

Hemolina . Adcmas de las aglutininas s, dc la 1'1,(), la sangrc dc I()s insectos t:urtbicn contiCnC una proteina inmunitaria dcnominada hern1olina . ( :onticnc cuatro doininios dc tipo~ innnutoglobttlina, que se Linen a las supcrficics bactCrlanaS V pucden interell el rcconocimicnto Lie las m(tlcculas estranas . En cl proccso de reconocimicntcr dc estructuras ajenas ~- en la subsiguicntc tagocitosis CS ncccsaria la colaboraciiin cntre las cclulas hcut0SOticas s, las cclulas ta,ociticas (1417. 15.11 ) . Asi, aun qtte Ios imertcbrados carecen de cclulas presemadoras de antigeno y dc subpoblacioncs linfocitarias capaccs dc intcraccionar nttrtuantcntc, Ios (it\- ersos inntunocitos colaboran en las rcspucstas inmunitarias mctfadas pc~r cclulas.

Dos modelos hipoteticos de la colaboracitin intercelular en el sistcma inmunitario de los artropodos insectos
fase 1: contacto de los microbios con las cclulas granulosas fase 2: desgranulacion y opsorutacion por medio de una oroteina de 90 kdal fase 3: ingestion por parte del fagocito

receptor

crustaceos
fase 1 : contacto de los microbios con las cclulas semigranulosas fase 2a : desgranulacion J fase 2b : desgranulacion de eel. granulosas y semigranulosas, y opsonizacion por medio de proteina de 76 kdal fase 3: ingestion per parte del fagocito

Fig. 15 .11 . Experimentos de las reacciones de poblaciones de cclulas sanguineas purifieadas frente a determinadas particulas . En los insectos, el reconocimiento de estructuras ajenas (fases 1 y 2) depende de las cclulas granulosas (hemostaticas), y la ingestion (fase 3) de las cclulas fagociticas. En el modelo de los crustaceos existe una Ease adicional (2b) : las cclulas semigranulosas y granulosas interaccionan para potenciar la respuesta. Las proteinas

de 90 kdal y 76 kdal que se hall detectado en los insectos y en los crustaceos, respectivamente, son moleculas opsonizantes (de reconocimiento) generadas por la activacion de la cascada de la profenol oxidasa . (Adaptado de N. A. Ratcliffe. En : G. W. Warr y N. Cohen, eds. Phylogenesis of Immune Functions . Oxford : CRC Press, 1991 :62. Los datos de los crustaceos proceden de los trabajos del profesor K. Soderhall y cots .)

Inmunidad en los invertebrados

Las reacciones defensivas celulares y humorales de las especies que actuan como vectores de enfermedades ejercen una importante influencia en la infection parasitaria

Cdda cC1 >C dCUn1111 :111 111 .1, datcts yuC indic:ut yuC Id cal, acldad litmunitaria Lic dctcrminadccs inccrtebrados yuc acttian como \CC-

MOnaLILtS SC ha obscrtado yuc Ids resl,uestas Lie Cncapsulaciitn continan cticazmcntc a Jos parusitos, t. tal \ -cz Jos LicstruVen . Adcnt :is, en imrstigacioncs rccicntcs sc han detectado aglutininas Ids intestinalcs en Anophclcs spp., moscas tsetse, Phlchotomusspp . . t en Ids chinchcs red6\ idas, yuC puccien alterar do tOrma significatiL-a CI crccimicnto' la supcrtisrncia tic lots protozoos pardsitos que ingicrcn cstcts insectos con la sattgrc . Pctr ejenlplo, en algutws moscas tsetse dcl gcnero Glossina, la inhibition Lie la aglutinina del intestino medio con D-glucosamina aumcnta significatix amcntc la rasa de infeccidn por Typanosoma hrucci rhodcsicuse. L:1 protcnctl oxidasa tambicn pucde toner ctcctos importantes, Ids llent bras de la ntosca tsetse Glossina morsimns morsitans presentan bajas tasas do intcccic'm do Ids glandular salicalcs nladuras potr 7' h. rhodesicnse en comparacicin con Jos machos do la ntisnla cspecie, %, poseen conccntrtcioncs nuld1ct nlas elexadas de Pp() yuc las moscas macho. Tantbien sc ha Licnlostrado que los Itcpti(IOS antibacterianos inducibles prescntcs ell la sangrc tie Ias nlosas negras del gcnero 5imulium dcstrut en a Icts gusanets nenlatocicls par;isitos cuando cstcts SC cncttentran t()cia\ia en Ids fasts iniciales de sit proceso Lie ntaduracion. Habra quC trat)ajar All) intcnsnmente en cste interestnte campo Lie imcstigacion, hacienda Itincapic en Jos mctotdos quC utilizan los parasites para burlar las dcfcnsas inntunitarias Lic Ices 1ccU)res .

torcs Lie enternledadcs (p . cj ., Anopheles spp., nulscas tsetse, Phlo'Gotomusspl, ., moscas ncgras, chinches rcLlitliLias , besaLictrau . y caracoles pulmonacios) infm'e en ,it capacidad para transmitir entermcdades (paludisnto, cnternlcdad dcl sucito, I)artonelosis, oncocercosis, entcrntedad de Chagas v esquistosettniasis, respcctitamcnte l . Por cjentplo, en Icts nlosquitOS L . en lets caracoles pill_

mar. Finalntente, se Ila Lienlostrado quC en Icts tunicados exists una citocina antfnflamatoria yuc afecta a la production de anti cucrpots, a Lt fagocitosis y a la citoxicidad mediada pctr cclulas en Jo s scrtchraclos, asi como a la actixiclad fagocitica do Jos Icucctcitos do Ids gambas . Fodas cstas ntolcculas aun sc Lichen caracteriz;lr mcior a nilel molecular. Por ultimo cabs c1cstacar yuC algunos Jos rstudios indican que cicosanoicies v lots pcpticios opioicics tanlhicn intcrx -icncn en la reactkiciad innlunitaria Lic ]as ccluhts Sanguineas do Jos in\ crtehrados .

Las defensas del huesped estan reguladas por una red de citocinas, algunas de las cuales se parecen a las interleucinas de los mamiferos

del hutsped, a travcs dC una red I)al'CCicia a la que cxiste en Jos vcrtebrados . FI hccho do yuc Jos protozoos ccnltcngan nloleutlas rclacionadas con [ .Is citocinas sugicrc yuc cstcts COmpuestos dChcn estar prescntcs en tOdO el rcino animal . Por cjcnlplo, una tcrct mona Lie Jos protozoos, Fr-1, prcsenta parccido cstructural ~- hill cional coil la intcrlcucina 2 (11 .-2 ) . Acienlds, recientenmnte se haul aislado t . caracterizado molecular coil actividades parecidas a Ids de IL- la, II .- I ji t - cl factor de necrosis tumoral (I'NF ) a partir do anclidos, cyuillOdcrMOS 1. tunicados. II .-la c IL-111 sc han detectado utilizando un sistenla experimental basado cn cclulas de origen vertcbracio Ida detcrtninacion dc la prolifcracion do tinto citos nlurinosl, c sc Il ;t dcntostrado yuc son inhihidas potr anticucrpos policlonalcs frente a la IL -I de lets vertcbrados. La 11, 1 Lie Jos im -crtcl,rados cstimula la at regacicin, la fagocirctsis 1 . la pro liferacion de Ids cclulas ~sanguincas- de cstcts audit .tics primiticos. lambicn sc Ila dctcctaLlo una actividad tipo TNF mcdiantc la prueha Lie citeltoxicidad 1.929, yuc sc suck utilizar para la Llctcrminacion tic] TNF de origen vertehradct . Aparte de Ids nlcncionadas, sc han Llcscuhicrto en Jos imcrtcbrados otras molecular con activiclaci do tipo citocina . 1 :11 Jos insectos sc ha detectado tin factor do agotanlicnto Lie lo" plasmocitos Itipo tic IC11000CUS ;1, 1111 acti\ador do JOS ICLICOCItOS (dcnomin.tdtt I1eniotcinina) v divcrsots agCntes CsllttttlIdlltCS Lie la mcapsulacion N la fagocitosis. Un factor producido potr Jos Icucocitos L1c lots cquinodernlos (CI factor do cstrclla Lie mar) presenta propicdadcs ntitogenicas sobrc Jos lintbcitos do lots mamiteros, c induce la acuntulacic'm Lie Icucocitos en Ids cstrcllas dc

lz` nu)hCUlas dC tihc1 CIt(1Ci11 .1 (JUL sr Cncucntran ell Jos imcrte hradccs pucdcn dcscmpcnar un pal,cl rcvuladotr do Ids rCShucstas

La inimnidad dc Icts Lcrtrhrados sc C.1ractrriza pctr un alto ~_ , radct do CSPCcificiciaci V una mator intCnsidad do las reacciones cuando cl indisicluo sc cxponc Pctr scgunda 1 -cc a un misnlo antigeno i tncniotria o ananlncsis) . Estos procesos cstan controhdos potr Jos Iintocitos . pctr cl complejo principal do histocompatibiIidad i ( :PH ) . Para deterntinar cl grado de especificidad s . ntcnloria en lots imcrtcbrados, sc han 11cLado a cabo cstudios de trasplantc, intplantc \ cilrOtOxicidakt Fstcts Cstudios do trasplantc son dificilcs de rcalizar en estas especies, debido a la rigiticz Lie sus CxocsqucIctcts o a la dclicadeza do sus ragas mas externas . Tantbicn puccie Set' difiCil cicterminar cuando sc ha I,roducidO un rcchazo. Pest a estas dificultadcs, en la actualiciad sc sahc clue Jos imcrtcbrados destru\ cn lets zcnctinjcrtos, \- Cn [as esponjas, Jos celentcrcos, Jos anclidos, Jos insectos, lets cyuinotdermos 1 . lets tunicados sc Ila comprobacio la existcncia do fenontcnos de rcconocinlicnto do Jos injcrtos alogenicos grrfs. 15 .1, 15 .12 L 15 . 1.3). I.a aparcntc fal to tie reconlocimicnto alogcnico ell lox nxtlusccts prohahlcmcntc cs dcNcia a problcmas tecnicos inlterentes .1 la cjecucicin tic tr:tspl :tntes en cstcts animalcs . No ttnIos JOs grupos que rccltazan aloinjertcts dan lugar a reacciones quC sc caractcricen pOr ;it CS I,ccificidaci v nlcnutria ; por cl contrario, dichas reacciones suclen ser lintitadas L. de corta duration {v. tf. 15.1). [.a gran tariabilidad do IOS resultdLIOS obtenidots tras Jos injcrtos pucde ser dcbida a la dependencia Lie la tcntllcratura del proccso do rechazo, que algttlll)s invcstigadorcs no ttelletl ell ctletlta . No cs sorprcndcnte quC en Jos invertebrados colonialcs, como Ids esponjas, Jos celentereos v JOS tunicados, se produzcan tcncime nOS Lie reconocimiento alogcnico, ya yuc la intcgridad do unit

Muchos invertebrados pueden rechazar trasplantes alogenicos y xenoglenicos

Fig . 15 .12 . Demostracion de la inmunidad mediada por cclulas en las esponjas : incompatibilidad alogcnica y compatibilidad isogenica . Se practica ona parabiosis (fusion de
iOS sistemas circulatoriosh entre dos fragmentos intactos de

esponja iCallysporlgis spl) .) Lie ona misma colonia y de dos colonias diferentes, manteniendolos unidos mediante un cable metalico recubierto de vinilo . 1) La fusion interfacial entre los dos parabiontes isogenicos We la misma colonia) se mantiene indefinidamente . .0,5 . 2) La incompatibilidad entre los parabiontes alogenicos (de colonias diferentes) provoca una interaction citotoxica y necrosis (flecha) a los 7-9 dias (24-27 -,C) . h0,25 . (Por gentileza del Dr . W. H. Hildemann .)

Evolucion de la inmunidad
Sin embargo, el dcscuhrimicntct do molcculas analog-as a la P_-microglohulina en las Ionlbriccs dc ticrra, en los crustaceos y en Icrs inscctos allow la tcoria dc guc Ills precursorcs del CPH Pueden haber surgido en Icrs imertebrados . Attnque la li .-n1icroglothulina dc los ycrtebrados csta coditicada par till gen que no encucntra ligado al CPI 1, sc asocia can [as molcculas CPI I dc clase 11. Pcrtcttccc a la supcrtatnilia dc Icrs gales do las tnoglohulinas . Por tanto, Las molcculas ( .PH pucdcn procentctlccula Con Lilt 6nico dominio parccida a la (i .-ntidcr dc croglobulina, quc habria ido adquiriendo contlplejidad rnedjante procesos dc reordcnaciem gcnica, duplicacion ginica sclecci(in natural . Finalnlentc esistc Lilt grupo dc ntolccuLts, cntrc has que se encucntra 1111- -1 f presente en cl ccrchro del calatnarl y la antalgam ;t, la fascidin,t Il, el ncurogliano \ la 1lemolina (codas cllas propias dc los inscctos ;i, quc tttnbicn I1crtcnccen a la supcrfamilia dc ill ntunoglobntlinas ; sc ha sugcrido que estas molcculas tyolucjonaron colt objeto de medial- las intcraccioncs intercelularcs s. guc podrian Ilcgar a dal- lugar a till sistcnla innwnitario CaPaz (ic recontocer Las estructuras ajenas . Fan cl caso dc la 1lcntolina dc los insectos es posible quc sc haya llcgado hasta cstc puma ( . ntas arribaI .
SC illIll 1111 .1 N IAN

colonia sc yc siemprc amcnazada par cl sohrecrecimicnto dc las colonias advacentcs ifiij. 1 .5 .21 . Lo s trabajos Ilcs- ados a cabo con laryas etc colonits dc tunicados haul Puesto de ntanificsto quc tanto cl rccmocimicnto alogcnico comp la tcrtilizacioin estan hajo cl control dc Lilt iutico locus gcnico que presenta \ratios alclos . Port tanto, existe Lilt cicrto parecido entre este sisten1a cfe los tunicados F lots genes dc histocompatibilidad de los mamitcros . Hay quc insistir en yuc la escasa cspccificidad nten1oria (ie los procesos dc rcconocimicnto alogcnico dc los imertebrados no parece afectar a sit sistema intntmitario iii a su c zito hiologico . Dc hcclto, los imertchrados rcspondcn rapidanlente ante la pre sencia dc patogenos son extraordinariaunente abundames .
V N

En los invertebrados aparecen ancestros del CPH y molcculas con dominios de tipo inmunoglobulina La rxistencia dc rcc(nxtcimiento alogcnico en mucl1os imcrtc bradors sugicrc que Ions anccstros del complcjo principal dc histor compatibilidad {CPI I ~ podrian cstar presentcs en cstots animales . ( :onto logs imertehradors cartoon dc innuuloglobulinas, cs posible quc CI ('PH sea Lilt sistema anterior c indcpcndientc del sistema dc ill munoglohulimas de Ios ycrtchrados . ticgitn csto, los yertehrados Itrintitiyos habrian retcnidor el ( :PH micntras desarrollaban indcpcndicntcmcntc cl sistema dc innlunoglobulinas, para consegttir tilt sistcnla dc rcconocimicnto ntas preciso dotado dc anticuerpos circulantcs y receptores cclularcs de superficic . En tascs tnas ay :uvadas del proccsor dc tyolucjcin de los wrtehrados, los sistcmas del ( .PH \ dc Las innuu1orglohulinas se podrian haber intcgrado Itasta Ilcgar a ejercer cl grtdo dc control quc cxigen las interacciomcs cntrc las celulas prcscntadotras dc antigcnos i CPA) - los lintctcitos . Dc todas torntas, tondo csto no cicja dc set una hipdtcsis ; no hay prucbas cstructuralcs ill tiutciontalcs dc quc ]as ceill relulas dc lots im -crtchrados exprescn glucoproteinas ( :PH ceptorcs cclularcs dinlcricos dc aloantig,etlos . Adenlas, cs posible que los imertebrados carezcan dc reactividad Icucocitaria mixta t iq . que till marcador futlcional dc la presencia de ( :PH en los wrtchrados . La ausencia de datos quc ayalen csta hipote sis ha Ilcsadot a proponcr otras ; had' im'cstigadorcs quc sostienen a partir do las proteiquc el ( :PH dc los wrtcbrados c\ nas dc shock tcrmico (v. n1as adcl :uttc ) .
N CS 011,160110

INMUNIDAD EN LOS VERTEBRADOS

Fit comparacidn coil la inntensa yaricdad dc tornlas quc prcscntan los orgaulismos im -ertebrados, todas los ycrtehrados respondcn a tin sistema basicot do organizacj6n bastante unitornle se cncuadran dcntro de tin inlico tipo, los cordados . Pcsc a la considcrablc cfis crgencia eyotlutiya que existe dentro del conjunto dc ycrtcbrados, cntre Icrs quc se encttentran lots peers sill mandibula, Ices peces cartilaginosos, los peces tcle(isteos tpro \istos de mandibula ), los anfihios, los reptiles, las ayes y Ion mantdcros, los comPotnentcs cclularcs n1olcculares basicos de Icrs sistcmas innuutitarios prcyentiyos do los gnat6sionlos cspccics corn mandibula) cstan sorprendcntcmcnte biers consenados . Sin embargo, la crecicnte especializaci6n dc lots tejidos Iin1oides y dc las tintciones linlocitarias, junta con la mayor yariedad dc clascs de innnutoglotbuljlt ;ts, parccen set propiors de loo niyclcs sultcriores de orga. niz .uioin . I -ors sistcmas innttmitariors nias complcjors cstructural t futuiornmllilt nic son Ion LIc 1()s mamitrros .
N

Celulas T y evolucion del CPH

Fig . 15 .13. Inmunidad frente a los trasplantes an los equinodermos : rechazo de tin injerto an una estrella de mar (Dermasterias) . 1) Pese a las dificultades tecnicas, este autoinjerto (T) esta en perfectas condiciones a los 300 dias . 2) Un aloinjerto (L) rechazado a los 287 dias (14-16'-,C), que presenta tin aspecto blanquecino y se encucntra contraido . En el rechazo intervienen celulas analogas a linfocitos y celulas fagociticas de mayor tamano . x4 . (Par gentileza del Dr . W . H . Hildemann .)

I as sul,p(r)laciottcs dc lintircit((s I kit, ot()xicos IiT( ) 1 . colabon'adorrcs ~; I i t 1 dc los marnifcros, yuc lx)sccn tttlos receptores dc celulas -I Up (T('lt), solo son caPaces do rcconocer a los antigcnos cxtranos cuando cstos son prcscntados adccuadanlcntc par las molcculas polim(irficas del CPH codificadas par cl propio organistno . Por cllo, la filogenia dc dctcrminadas pohlacioncs dc cclul as T j P . cj ., los linfocitos T citoroixicos I is hC I t . los quc inter yiencn en las reacciontcs leucocitarias tnixtas I Rl,4l I i y la cvoluciitn del ( :PH se estudiaran sintultarteanlcnte (Jirf. 1,5.14 ;1 . Se lla (ienlostrado mediantc criterions funcionales y/o mediartte tecnicas nlolcculares y gcncticas quc todas los yertebrados proyistos dc ntnndibula (dc los peces cartila~ginosos en adelante ;~ powers till CPI 1 . ( l .os critctios fitncionalcs cxigen demostrar que Las RIAI t. el rechazo dc aloinjcrtos esbtt hajo ell control dc una 6nica reg :lnn do genes polimorficos, v que los fenon1enos Cot1to la colaboraciCm cntrc I :ts cdulas C y l3, la induccion dc rcspucstas citotoixicts csprcificas dc antjgctw I P . cj ., frcntc a CCIUlas alogcnicas la cducacio'm timica dc las celulas dc cstirpc I' tambicn Cstan comroladas par el CPI 1 .
,1

Se ha demostrado claramente la existencia de CPH en el vertebrado poiquilotermo Xenopus halt obtcnid(r datos que indican gttc I(rs genes RCCiCntCmentC, del C .PH cs()lucionaron cn I()s peces cartilaginosos, cuws anSC

Inmunidad en los vertebrados

Evolution del CPH y de lax celulas T

Aves AS laves COMUrP .S I ' 11 Aves Squamata ilagartos, serpientesl I " Chelonia ! ~!- J (tort' -, tenet " . " . Reptiliay acua! J Teleostei (todos los demos peces comunes) Chondrostei lesturionesl
osteicthyes (peces con esqueleto)

`~ Eutheria (mamiferos cor, aiacenta) Mammalis rocodilia leodrilos, caimanes) J Anura AN Urodela (ranas, sapos (salmandras, ajolote)

tcccsorcs se scpar;a-on do lox dcmas ccrtchrados hate m.is dc 400 ntilloncs dc afios. Sin embargo, cl scrtcbrado poiyuilotcrmo i; de sangre Iria) ell cl yuC man a fimdo se 11,111 estudiado lox genes \. proteinas del ( PI I cs la rana de uftas, Xcuopus. En la harrra 15 .1 S sc comparan stl ( :PI-I idcnominado \LA), cl ( ;PI l dc lax as'cs jlocus 13) t. cl (:PH 1111 .16110 f H-2 ).

CPH clasico (la) de Xenopus . I as prtateinas do class la dc

.\ : uuplo soil polimorficas \ prcscntan units 20 alelos difcrcntcs . F.stas protcin .ts son Cspres .tdas en la supcrficic de todas lax cclula, adultas, sicndo la csprcsi(m maxima en lax celulas Itcmatopoytncas . Las cacicnas a de. chase. I dc Xtwopusprcscntan una ntasa molecular de 40-44 kdal, estan lormadas por tres dominion \ sc cncucntran tinidas de forma net coy alcntc a la (3,-microglubutina . [ .as protcinas ( :PH dc clase I dc Xcuoptrsprcscntan la particularidad de yuc cstan codificadas cn till iuaictt loots gcnjco (frcntc a trcs cn lox scrcs ITttmanos t. don cn lox ratoncs) .

L" Amphibia .Ml Elasmobranchii A - lvas .

I,

t I :ut ::~~~si

Condrichthyes (peces cartilaginoses)

Cyclostomata iciclostomas, lampreas)

CPH de close I, LTC

CPH de k~ close II,

RLM

Agnatha (peces sin mandibula

Fig . 15 .14 . En este arbol filogenetico de lox vertebrados se muestran algunos aspectos de la evolution del CPH y de las

calulas T. Se indican lox casos en que se dispone de datos que demuestran la existencia de don de lox mecanismos mediados por el CPH Ilinfocitos T citotoxicos, LTC, y reaction leucocitaria mixta, RLM), asi como aquellos en que existen pruebas bioquimicas y moleculares de la expresidn de lox genes y proteinas del CPH de close I y II . Los recuadros en blanco significan que no se dispone de suficientes datos que demuestren la existencia de esa propiedad.

.\'crrupas(fuc se identific) pCrtcnecC a una Bran familia de moleculas mononx>rficas, no clasicas fclasc I1 y parccidas a lax molectilas del (TH . Esta situado en tin cromosolna distinto yuc lox genes ~, clasicos f CPI I la ) . Parece que este gcn de class Ib ccxiitica una ntetIccula yuc presenta homologia con lax rcgiones fijadoras dc proteinas dc la familia dc protcinas dc shtick tcrmico 70 ( Hsp '(f1. Rccicntemcntc, sc ha sugrrido yuc la rcgicin dC union al pcptido dc lax molcculas ('PH dc class I podrian ltahcr 0ctlucjo11adct a partir de lull Hsp. {Las Hsp son molcculas yuc sc ban conscrs ado a to largo dc la Ctolucion . se cncucntran en todas lox organismos, en donde acnian comet -L Impcroninas ,, que interviencn en cl plcgamicnto y transports intracclular kic proteinas. ) I,as proteinas tipo ( :PH no clasicas se hail cncontrado cn lax stipcrficics cpitcliaIcs dc todas lox srrtcbrados yuc sc (tan Cstudiado, \' pucdcn desempenar discrsas funciones, sc tree yue algunas de cllas reconoccn Las I Isp dc lox organismos patogenos o dc lax celulas prctpias infcctadas o sotnctidas a cstrcs, prcscntando despucs cstos pcptirios conscrt ados a celulas T con rcltcrtorios rcstringidos do T(A.

CPH no clasico (Ibl de Xenopus . 1 :1 primer gcn dc close I dc

Xcuoim.; son polimorficas (units 30 alclos), v stilo sc csprcsan constituthaniclltc cn dctcrminadas celulas ad ultas, entrc lax Lfuc

CPH de close lien Xenopus . I .a s molcculas (:PH do class I I de

CPH de diferentes especies

Xenopus (XLA) BF I Gallus (B) BL II

-cc-a. BG IV

Mus IH-2)

100 kb
Fig. 15.15 . Todos los vertebrados provistos de mandibula poseen

CPH . En esta figura se muestra la organizacidn hipotetica de lox loci del CPH en la rana de unas (Xenopus) y en el pollo (Gallus) . La

estructura del complejo H-2 murino (Mus) se conoce con gran detalle . Las distancias en lox casos de Xenopus y Gallus son arbitrarias . (Por gentileza del Dr. L. Du Pasquier.)

Evolucion de la inmunidad

sc cncucntran los timocitos, Las cclulas B v I - N diversas ( :PA, come) tinas cclulas analogas a las dc Langcrhans Lie la epidermis cutanea i v . iiq . 15.16) . Las molcculas cie class II cstan COntPUCS tas de cadcnas a y 13 ccxiificadas cn el ('PH, sicndo ambas cadcnas glucoprotcinas transmcnahrana de 30-35 kdal . Los productos dc los genes del CPH dc class II que codifican las ctdenas j3 en Xcnopus presentan una ltontologia do casi el 50'%con las code nas 13 de close II de los nramit%ros . Las moleculas de class 11 se asocian transitoriantente durante el proceso biosintetico a una cadena im - ariahlc . El CPH Lie claw II Lie Xcnopusesta torntado Por tres loci gcnicos dc cadcnas j3 (igual que en los scres humanos"~ . La expresidn del CPH an Xenopus es diferente en cads fase de su ciclo vital Unit caracteristica cspccialrncntc intcrcsantc dc la cyrcsiein dcl ( .PH en Xcnopuscs clue Ias molcculas ( :PH de class I clasicis no son cxl,rrsadas en la supcrficic de ninguna cclula antes Lie la metantorlosis . Por el contrario, las moleculas de close 11 aparecen pronto cn las cclulas B del renacuajo, asi comp en detlrnalraadaS cclulas cpitclialcs clue estan en contacto directo cent Cl mcclio cxterno . Esto denutestra que la cxpresion de las molcculas clasicas de close I no es esencial para cl inicio del desarrollo ni para cl firn cionanticnto del sistenta inntunitario de las lars:is . Sin embargo, exists la posibiliciad de Clue Ias moleculas no clasicas de close I cjcrzan alguna titnci6n inntunitario en ]as larvas . Es nnn probable que la inmunidad cclular restringicia POI- ntolccttlas Lie close I I dcscmpctic tuncioncs cscncialcs durantc cstc pcriodo ontogcnico . La antplia distrihucion de Ias molcculas Lie close II en los renacuajos en contparaciem con las ranas adultas sugiere que este patron do ezpresion podria ser el clue se utilizaba c ii los sisterna, innrtrnitarios ntas printitivos para prcsentar los antigenos . El CPH en otros vertebrados Recicntentente, se lean detectado proteinas CPI I dc close I ~' II v genes polimorficos de close 11 en los peces cartilaginosos . En cuanto a los tcIc6stcos, sc hall Iocalizado genes del CPH Lie clasc I v dc R,-rnicroglobtrlina cn la trucha arco iris y CPH dc close 11 en la carpa . Lets ajolotes, cuyas celulas T presentan una escasa reactiv idad frente a los aloantigcnos, poseen cadcnas u v ji sic molcculas ( :PH dc class 11, que no son excesivantente polinrc')rficas . Estos anfibios cxprcsan tambicn antigcnos critrocitarios codificados cn cl

CPH, parccidos a I .ts cadcnas dc class la (44 kdall v a las mole cults polintiirticas dc class IV que sc cncucntran en lets critrocitos nucleados de los pollen . Pucdc que tanthien csten prcscntes cn Xrnopus. l .a s cadcnas Lie class Irx s . las molcculas hctcrodintcricas do class II ttnthicn SC cncucntran en divcrsos reptiles . Se pan identificado fenotipica y funcionalmente celulas T en diversos vertebrados asi c))ttao 1'1s Ino CC Eli Ias acrs sc hall detectado 1'( :IZ uj3 ]as corrcccl,toras ( 1)3, ( .1)4 \ ( :1)8 . Algunos dc Estos reccptores, o las cuicnas de que estan torrnados, se estan cntpczando a detcctar tanthicn en los anfhios . Por ejcntplo, lc)s genes dc lets tirnocite)s v le)s csplenocitos del ajolexe ntexicano presentan una considerable hetnutlugia con Ias cadcnas (3 de los I ( :IL de Ias aver v de los naamiteros . En los timocitos dc XenopusV en hnCas celularcs dc tuntores linti)ides del timo sc Ita detectado una proteina dc supcrficic de 55 kdal, que cn IOS estudic)s dc secuenciacion ha resultado prcsentar honaologia con la cadcna n dc los T('R . En la actualidad se disponc dc anticttcrpos monoclonalcs anti-Xcnopu+ dirigidos contra cl prcsunto CD5 171-88 kdal, cxpresado en to das las cclulas T) v CD8 ( :35 kdal, expresado en las cclulas T citotoxicas ) . Aunque reciententente se pan Iocalizado en la trUilta arco iris Ios segntentos genius clue ce)difican las cadcnas P dc sus IY .'R, tcxiavia no se ha conscguido producir anticuerpos monoclonales trente a Ias cclulas T dc los peces . En la actualidad no cxistcn datos que avalcn la prcsentaa dc cclulas T fitncionales en los peces cartilaginosos, aunque scria sorprcndente que careciesen de ellas, dada la presencio dc tin ('PI I pe)linteirfico en este nivel evolutivo . EI titndantento cclular v molecular Lie ]as RIA1 obscrv :ui :ts en Ios Icuu)citos de los cidostomas tcxlavia no sc ecntocc coil dctallc . La tentperatura CS tin tactor esencial en el desarrollo de respuestas innuutitarias en Ios e)rganisntos poiquiloterntos . En cl pea gate), Ias hajas tcnrl,craturas inltihcn la prolitcracion dc Ias CClulas T (pcro no dc Ias cclulas B) . Estos ctcctos soil dcbidos a las bajas concentracioncs cn Ias cclulas T de los peces de dctcrtninados acidos grasos saturacios f p . ej ., acido olcico) capaces de tluidificar ] .is mentbranas . Por ello, Ias dietas ricas cn ciertos acidos grasos puedcn favorcccr la adaptation dc los peces a Ias hajas tenrpcraturas . El acids olcico tanrl,icn Pucdc contrarrcstar la supresion dc rcSPuestas clue sc obscrva cuando sc sontctc in t ,ilr- o o las celulas T do los marniferos a hajas tenrperaturas, aunque todavia no se sabe exactunente CtiACS Soil Ias fases del process Lie transmision dc scitales que se ven atectuias petr la tentperatura . Evolucion de las celulas B y las inmunoglobulinas Se pan detectado cadcnas pesadas y ligeras de inmunoglobulinas en diversos vertebrados I- t Ia actualidad Sc SA, C clue cicrtas hn)tcinas sir I(n cicleiste)nnen . (Iue cn till principie) sc crcvo que Bran :utticurrl)c)s, Soil rcalincii tc ]as proteinas del contplcntcnto C3- C5 . De Itcclto, atin no se pan detectado nto1eculas pertenecicntes a la superfarnilia de [as innurnoglobulinas en los organismos agnatos (sin ntandihula), Icts ciclostomos v Las lanrprcas . I'odos Icts \crtcbrados coil ntandihula sintctizan anticuerpos firentc a una arnplia varicciad dc antigcnos . Sin embargo, los organismos poiquilotcrntos sintctizan anticuerpos Lie aliniciad rela tis- antcntc t)aja que carcccn dc mentoria inntunitario Prolong ada, cn contparaci(IIn corn lets anticuerpos dc Ios vcrtchrados endoterntos (de sangre calicntc h . La Cstr"ucttira dc los ;utticucrpos se ha conservado a to largo dc la cvolucicin, s' CUnSiStc en moIcculas torntadas Por cadcnas polipeptidicas innttrne)globulillicas pesadas y ligeras, coda una de Ias cuales contra de varios dontinios (v . Cap . 6l . Fstas innurne)glol,ulinas pucden set- cxprcsadas en la supcrficic dc Ias cclulas B, actuando conto rcccptorcs, o scr secrctadas hacia la circulation Por ]as cclulas 13 activadas . Las Ig :sl polirncricas aparcccn cn todos los \crtcbrados coil ntandibula iArr(. 15.1?I v constitusen le)s principales anticuerpos

Fig . 15 .16. Inmunofluorescencia : celulas dendriticas de Xenopus con moleculas CPH de close 11 . Las celulas de atipo I angerhans !L) abundan en la capa epidermica basal de la piel . Se observan celulas del Uuello de una glindula cutartea que se able al exterior a traves de la epidermis (N) y las glandulas cutaneas subepidermicas (S), con moleculas de close II . , 100 .

Inmunidad en los vertebrados

scricos cn Ios pcccs. (,ada caticna pcsada tr CO IISta tic cuatro do nainios constantcs N' un dominio s ariabIc, Ias cadcnas pcsacias .' ligeras CStdn unidJS cntrc Si por enlaces disulhu- u. La lunailia de Cadenas u prescnta una considerable dl\Cl- Sid:td liloogcnctica; poor Lie Ias CiLIcrras It del pcz gato Y (lei cjCnaplo, Cntl-C Ias SCCUCncias tic honaologia . raton solo cxistc un 24"'6 . 1-:n algunos PCCCS cartilaginOSO,, rr1m0 Ids rasas r Ios tiburoLie ncs, sc hall tiCtCCtadO anticucrpoos clue coonticncn cadcnas no u bajo peso m0I000lar I r . hn . l.i .l "1, aunquc la rclacioin c\'oluti\'a cntrc cstas IgR'' Ias denials cacicnas I 1 no o cst clara. Los anfbioos, los reptiles \' ]as a\'CS pOSCClI un isotipo tic cadcnas pesadas con title cs cuatro dominios constantcs dcnominado IgY, clue sc cree tic un precursor I:ts Igt_; r, I ;as IL E Lie Ios inainiferos, coil ]as quo: Igl' compartc caractensticas cstructuralcs y luncionalcs . Pucclc tic Sc yue la IgY tic los ajulootes tambicn sea una innnmoglobulina crecion, ra clue estC isotipo SC asocia en CI intcstino con n1olcculas parccidas al conaponcntc secretor . Es intcrcsantc cl liccho tic yuc aunyue los pcccs carcccn tic I-E, I0S tCICoStCOS pucdcn tic tipo l, (]Lie pucdcn ser desarrollar rcaccioncs tic hipersensibilidad debidas a la union tic anticucrpos hoanoocitotropicos a 1os tcjidos . Las It X tic Xcnopru, yuc al ccntrario yuc Ias lgY no sun dcl)cntic sccrccion Lie dicntes del 61110, pucdcn Scr eyuixalentes a ]as IgA cnurcntra prin los naamitcros, sa yuC sc trata tie un isootipu yuC se title cipalmcntc en cl intcstino- El primer cscalon C\OlLlti\O ell . aparcccn las IgA soon [as airs ntis Csoolucionadas

tic cadenas ligcras tambicn sc obserxa en n,uLa dixcrsidad chus organisnaos poiquilotcrrnos . En Xctmptrs se hall (Ictcctaclo tic cadcnas ligcras, UnO tic Ion door tipoos antigcnicanacntc distintoos CtraICS prescnta similitud con [as cadcnas x, \ tambicn Sc haul dctectado dos tipos en loos peces gato, ]as truchas Y lo .,, caimancs . Sc sabc yuc cn los tiburoncs cxistctt dos tipos tic caticnas ligcras, yuC prcscntan parccidos coil Las cadcnas h \ %., to yuc indica yuc la discrgcncia tic la cadena ligcra ancestral para t1ar lugar a los isotipos actualcs tire prc\'ia a la aparicion tic lus pcccs cartilaginosos . Itecicrucnaentc w laa reconucidoo en el tiburon noxiriza una Ill() Iccula tic la supcrtamilia tic inmunoglobulinas, posible antcccsor ta'Cl1trtICU tic [as illnttnoglobUlinas \- Ios TCR. Esta naolccula, ticnominada receptor antig,cnico nucs -o MAR, del inglcs Nca, Antiacn Receptor ;, prescnta un donainio sariablc s . cinco constantcs \, aparcce en forma tic ditncru en Cl sucro~ . Esti codificada cn un locus gcnctico somctidoo a rcurdenarnicntos V discrsificaci()n so na :itica . Fn Ios pcccs cartilaginoosoos se Ita rcconOCido un nucr'o tipo tic anticucrpo yuintiricoo, coompUcsto cntrc I,,X t . NAR, to title arrotic Ig . ja ducias sohrc la prinaacia tie lgN1 cotno isotipo primordial

Los genes de las inmunoglobulinas de los vertebrados inferiores pueden estar organizados de cuatro maneras diferentes

Distribucion de las inmunoglobulinas en los vertebrados

IgM mamiferos aves reptiles anfibk-,. peces pulnaonado, teleosteos elasmobranquios 6y5 5 4yl 5yl 5 5 19A IgX IgG IgY IgE IgD

1:1 mali~is mcdiantc tccnicas tic :\I)\ rccoombinantc tic loos loci gcnicoos dC Ias ill munoglot)ulinas tic Ions organismos poiquilootcrmoos laa cxpcrimcntado un gran dcsarrollo ell los 6ltinaos ticnr tic cuatro patroncs tic pos, lu1bicntdrse denaustrado la cxistencia oorganizacion.

Anfibios y peces teleosteos y holosteos . Estoos oorganisnaos

Fig. 15 .17 . Distribucion y posibles relaciones de las Ig de los vertebrados . Las IgM polimericas se encuentran en Todos los vertebrados provistos de mandibula, pero con diferente numero de unidades basicas (conjuntos de 2 cadenas H y 2 L) . La sangre de los peces cartilaginosos (elasmobranquios) y teleosteos tambicn contiene IgM monomerica . En diversos grupos se encuentran isotipos de cadenas pesadas distintos de p, pero no se conoce la funcion de la mayoria. (Por gentileza del Dr . G. W. Warr .)

prc`cittan una ont;anvacioin tie lt;l I pal'Ccida a la tic los naarnitcroo, l til)oo " nanslootoin -? . P(ll' cjcmplo, Cn Xenroprrscxistcn aproxinaadamcntc 80 100 segmentos VII, 15 segmentos 1) c 9 scgEstoos segmentos cooditicAn tantu Ias nlcntoos Ill (Jail . rcgioncs estructuralcs como Ias rcgioncs ticterminantes tic la coma pjCnacntariCdad . (aria region constantc tie Ias cadenas pesadas tie Xetopusf lgNI . 11;X, IgY) csti codificada por cuatro cxoncs Of . Lie Xenopus cst:in codificadas cn dcos crurno t .as CaLICIMS IigerAS tic cllos con sus currcspondicnsomas indcpcntiicntcs, cada uno tCS scgn1cntoos \'I , Jt %' CI . . Loos gCncs tic LIS cadcnas ligcras tic Ias tic Icon tCLc()SCCos nnlcstran cl tipo tic organiill munoglobulinas zacion ~1naultiCunjLIntw, yuc caractcriza a lus genes do Ias innnlnog,lobulinas tic loos tiburoncs I s-. m:is adclantc l . 1)urantc cl dcsarroollo tic Ias ccIULas 11 tic Xcuopussc produccn tic Ios genes tic innttuauglolxrlin:as pamirltiplrs rcox'dcnaciooncs recidos a loos yuC sc obscr\ all Cn Ios naanaitcros, y tambicn sc protic exclusion alclica, por lo clue los hnfocitos duce Cl tenonaenu proxluciclos soil rnonoocspccificos. Lus genes actisadorcs Lie la rccombinasa (yuc cataliza ]as rcordcn:lcioncs Lie Ion genes tic in nun1ug1obulinasi tambicn Cst:in pr-CSCntcs Cn Xcnoptrs, pcroo la di\crsidad tic los anticucrpos (region \) cs rclatis'anuntc pcqucr-1J, poscrcndu each adulto unas 5 x 10" naoleculas tic anticucrpoo tii

El locus IgH de Xenopus

VH1-VH100

DH1~DH15

JH1-JH9

CP

CZ

Cv

300-500 kb

20 kb

10 kb

4 kb

Fig. 15 .18. El locus IgH de Xenopus presenta una estructura similar a la de los peces teleosteos y a la de los mamiferos . Todos los segmentos genicos estan adosados a secuencias senal clue intervienen en el proceso de recombinaci6n . En primer lugar los segmentos D se desplazan hasta el segmento JH ; a continuacion, los genes VH se desplazan hasta el segmento D-J reordenado . Finalmente, los genes V-D-J reordenados se unen a un gen de region constante, dando lugar a IgM, IgX o IgY. (Segon los datos del Dr. L. Du Pasquier .)

Evolucidn de la inmunidad

tcrcntcs . La pcqucria magnitud do: la ntaduracion do: la afinidad quc No: ohscrva cn Xenopus i s_ ell otros poiquilotcrntos) tras la act itacicin tic las cclulas R no parccc scr dchida a la inexistcncia do mutaiioncs sontaticas tic Its genes do: innttm0glob111inas . Pcrr cl contrario, so crcc quc CI m0tittr de este lIccho CS la talta do capacidad para sclcccionar adccuadamcnte hrs mutantcs, to quc los cirganos lintiridcs do lo ,, orgartisrnos poiquilcrtermOS careccn do: ION contras gcrntinalcs prccisos para c11o . Los gall lios lintaticos dotados con ccntros gcrminalcs son CXCI11slt'os do las atcN \' do: ION mamifcros. Aunquc Ias larcas do Xrudpru PrOCIuccn los trcs ntismos isotipos do Ig quc Ias adultos, los rcpcrtorios cic anticucrposdo las lars,ts t cic los adultos son ditcrentcs . El rcpcrtorio tic Itrs adultos surge a partir de rrtrrdcnaci0nes gonicas quc sc produccn cn una sci-unda olcada do: dcsarrollo do: [as cclulas 13, dcspucs do la mctamorf'osis . La tcrccra region lupcrvariahlc do los adultos so: disct-sifca aon ntas mcciiantc la adicicin alcatoria tic aminoacidos cn la rcgicin N, liccho quo: no ocurre cn las larsas . nt0s ix>scen una segunda tirrnt .t tic tx,',aniiacitai do ION genes do: innILmc rglobulinas, t . la dit crsidad CIc sus anticuerpos se genera ell un eI)rgant r especial, la bolsa do: Fabricio do: la cloaca Li.1 t)1. El locus tic cacicnas ligeras do Ig del pollo conticne un unica gcn V, quc SC rettrtiena en printer lugar y se une a una unica unidad 1-( .

cell a lo largo do: coda la s ida. Sin cmhargo, cn cl pollo cxisicn tranttrs do: secucncias do nucle6tidcrs procedcntcs do: seudogenes (adUCCntCS al tinico gcn V ;~ quc sustittn ,cn a scgntcntos do: 10120 pares tic bases de ]as secuencjas gcnicas rcordenadas de las iunttrnoglobulinas . Estas comcrsjancs gcnicas I,quc tantbicn so ob scrsan en ION ctrncjosy se producrn nun frccucntcmente durance tOCIO CI ticmpo ell quc ]ON lintircitos 11 proliteran cn la balsa.

La generation de la diversidad en las aves . Estos organis-

(he . 15.?0}.

El locus IgI I del pollo tambicn conticne Imiltiplcs E!enes do: la rcgj6n 1) . Las rcorclcnacioncs stilts sc produccn dur;uttc tut pcricxlo de ticntpo htnitado, cu Ias primcras fast, del dcs,trroIltr en ]as quo: las cclulas Inadre colonizan la balsa, nlicntras quo: ell ION ratones t, en Itrs sores huntanos Ias rcordenacioncs do: Its genes de innnm0globulinas cn los precursores do [as cclulas 13 se prociu-

unoglobulina comp Ias ligcras i;parccidas a i. y rc,~ cstan codifi cadas ptrr Itt11Cltos conjuntos pequenos y discrctos de genes (,<Casscrtes " ) qiq . 15.?1 ;1, each 11110 de los Ctrales conticne sus corrcspondientcs genes V, i 1) ), j V ( ; . ('ada conjunto do: genes do: innum0glohulina prcscnta unit secucncia do: AI)\ ditcrentc do: la do Its ticniis . Estas secucncias tat c\istcn cn la Iinea germinal . Por cllo, Icrs anticucrpos do: los tihtu-tmcs ptrSCCrt unit grail dit-crsitlad { nYtrchos millones l do: punters cspecificos de Union, pcro c:trccen LIc sariabilidaci inrcrindisidual, \a quo : dicha ditersidad se encuontra codificada cn la Iinea germinal no so: genera median: mccanisntos scnnaticos . Por tanttr, la utilizaci6n do: las rcordeto nacioncs do Its genes sontaticos para gcncrar di\crsidad i come en el case tic hrs tclcosteos, los anfibios, las aces t . Itrs ntantifcrosi no CS un tCnOrtlCnO Link crsal dentro de Ices sertcbr clos . Estos peces cartilaginosos posccn altas conccntracioncs do anticucrpos naturalcs frente a disersos antigenos, clue se parecen .t los ;uttieucrpos IgM policspecificos (G'ccucntcmentc autorrcactisos) quc sccrctan Ias cclulas R t'1) ;' do: ]ON Inamiteros en Lis printcras tries do: su ontogenia. No se sabc con ccrteza si la disposicitin en grupos do: Ias subunidacics do genes de innttmo` ;lobulinas do ION tiburoIll

Los peces cartilaginosos poseen un tercer tipo de loci genicos de Ig. Ell cstc C,tso, tanttr lass caCjcrta, l,cs,tdas i u ; do in

La bolsa de Fabricio

bolsa de Fabricio-(celulas B)

timo (cclulas TI

Fig. 15 .19 . Los dos organos principales del sistema inmunitario de las aves son el time (2) y la bolsa de Fabricio (1) . Los linfocitos clue se desarrollan en el time se denominan cclulas T, mientras clue los clue to hacen en la bolsa se denominan cclulas B. Se muestran los foliculos linfoides (L) y la luz de la bolsa (B), asi come el cortex (C) y la medula (M) del time . Tincion hematoxilina/eosina, " 20 .

Fundamento genetico de la diversidad de los anticuerpos en los pollos

ADN de la Iinea germinal seudogenes P P 4 3 P P 2 1 reordenacion
VL1

P 25 2

-` 3

P 'P P', P . 4 3 -P

IJ :

CL

5. ,`{5H24 1

J, 4

3- 2

CL

ADN de la celula B

Fig. 15 .20. El locus de cadenas ligeras de Ig de Ias cclulas de la Iinea germinal de pollo ocupa menos de 30 kb de ADN. Hay un tinico gen funcional V (VL), 2 kb rrcorriente arribarr de una unica unidad J-C, y adosado al mismo hay 25 seudogenes (P) distribuidos a to largo de una region de 19 kb . Las reordenaciones se producen rapidamente durante las primeras fases del desarrollo de las cclulas B. La diversidad de los Ab se genera mediante la conversion genica entre los seudogenes P y la secuencia reordenada . La reordenacion clue se muestra (P1, P3 y P24) es un ejemplo; los segmentos convertidos no tienen per cue estar necesariamente en orden en el segmento genico V.

Inmunidad en los vertebrados

Loci

VH

de las inmunoglobulinas de los tiburones

i -I(, (c :;"

las cclulas T. sin embargo, t utto l :ts cclulas NK de [as avcs conlo las tic ION m :unitcros sc gcncran en el cstcrior tlcl timo . Actividad fagocitica en los peces Icrs acuiCUltt,rCN Cst,in exhcciaimciac intcrcsados en promorcr la rcsisicncra dc ]Os peces a las cnfcrmcdadcs. Por ello, han cstudia dor a timdo ION paranictrtrs quc podrian I,utcnciar la actisidad fagocitica dc estos urganismos . \o cabs dada que Itn grander progrcsos quC SC estan Consiguicndo en Cl Cultis- u prcrlcntgatlcr in t+itt-o . dc ICUCt1CItOS procedCntes de peces (p . cj ., tlcl pcz gato s de la cargar a nucxos a\;u1CCS en CstC Campo . SC puede inducir pa J d ;u;in hit un aumCnto dC la actin idad do Icrs tagocitos dc ION peces frentc a ION anrigcnos hacterianos mediante la simple imeccitin de patogcnos mucrtos y de sus productos, prubablcmentc dcbido a la hhcraciun de productos actixadores dc ION ntacrutagos . Fambien so: entail uti lizando los (3-glucanos (polisacaridos tic [as parcdcs cclularcs do las Ics'aduras v liongusj para potcnciar la innrtmidad mcdiada por tagocitos ell ION peces, y estos productos Cstan cicmostrando scr bLICIIOS id\ , utrantCS para las (dCUnas, aunquc todavia no sc conucc Su mccanismo de acci6n . Las cit(rcinas, como cl <~intcrfcr()ii gam ma , ~ proicdcnte Lie Celulas T dc peces t' cl TNFu htnnano, cicrcen tin ctccto sincrgico en la actin-acitin dc [as s Las que ConduCen al Cstallidu rcspiratorio cn ION nlacr6tagos dc trucha, conlo coil SCCUCnCia tlel Cual se pruducen radicalcs Mires tic oxigeno Coil prupiCdadcs antibactcrianas C ani('m suI,Crtisido ( pcrcixido dc hidrogcno) . El TGF(3 dc ION naamitcros pucdc inllibir la actixaci('m dc ION niacr6tagos dc ION peces . I.OS pCCCS PUSCCII taCtOI-CS tic tipo qtumiocina quC pucden tcncr importancia en ION prucesos dc dcsplazamicntu dc sus fat ocitos . ( ;onto la inmtinusuprcsioin producida por cl cstres pucdc suponer tin problem, en dCUiCUltura, ca intcrcsantc la rccicntc obscraci(in tic quc cl pcptido innumoaCtiso FK-565 bloquca cste tipo tic inmunosupresi6n . Sc sabc quo: Its ICUCt>tricnos S . otros meciiadores lipidicos i denominados colccticanicntc cictrsatio idcs i intericncn ell dircrsos proccsos intlamatorios en ION ntantitcros . Ell la actualidad sc dispunc dc datos quc indiCan title ION pCCCS i \ ION anfibios) tambien produCCn cic(rsanuidcs, \ quC csttrs protftiCtus (ICSCnIPCn :ut tin papcl impurtantr ell las rcacci(mes inflaniatorias dc estus org.tnismos . Por cjcniplo, CI ICUCOtricno li, pr(nnuesc la migracilm tic los Icucocitos de la trucha arco iris, y los cicosanoides puccicn modular la prolitcracitin dc las CclulaS T dc la trucha . ( :onau ION liI)idtrs de la dicta puCdcn intluir ell la produccioin dc cicosanoidcs ell ION pCCCS, su alimcntaci<in cs csencial a la hora dc dcsarrull .t r (a cunas para cllos, to quc Cunstitus-C en la actualidad tin campu do imcstigacion 111(1 :lCtictr .

lo l as inm u n og lobulinas

CH9i %,

Fig . 15 .21 . En el tiburon existen unos 200 grupos de genes de cadenas pesadas, cada ono de ellos con sus correspondientes segmentos genicos V, J, D y C . Se muestran ampliados el cuarto y noveno grupo de genes . Los segmentos VH, DH y JH estan estrechamente ligados y se situan en una region de unas 1,3 kb . Junto con el segmento CH ocupan una region de unos 10-15 kb . Parece quc la disposicion de los genes dentro de un grupo esta codificada en la linea germinal y no se debe a mecanismos de reordenacion somatica, to que puede ser la causa de la ausencia de variabilidad interindividual que caracteriza a las respuestas inmunitarias de esta especie . (Segtin datos de los Does . J . J . Marchalonis y G . W . Litman .)

ncs cs inoticu suficicnte para quc exist, rcstriccitin clonal do I :ts cclulas 11, :umque en algunas ocasioncs se Ila ohscr-ado tin aumento de la concoltraci6n de :uiticucrpos cspecificos en ausencia tic tin aumcnto tic la conccntracitin tic Ig scrica total, to quc Sugicrc quc si quc csistc algtin mccanismo tic rcstriccitin clonal . title cs posiblc quc exist, Los estudios prelinlinares indican tin nuCSU tiler do I(rCUS It H (grupos dc genes V-1) distribuidus a lu Largo del cromosomal en ION CCIOCantos, unas , rcligtfas , - cvoell cl occano Indico . Itnic-as dcScubicrtas rccicntemcntc

Celulas del sistema inmunitario no adaptativo La mayoria de los vertebrados poseen cclulas asesinas

naturales (NK) Las cclulas \K {del inglcs nrttio -al killcri tic ION illamiteros soil una poblacion do lintbcitos grailUIOstrs grandcs ditcrcntes dc las Mulas T \ 11 quc, al contraritr que Las cclulas T( , pucden lisar cspont :ineamente IinCaS CCIuIarCS transt6rntadas aunquc no ezprcsen antlgcnos CPFI . Las Mobs lintcridcs dc tipo NK cstin pro scntcs ell carios grupos dc scrtchrados intcriurcs, cntrc los que se cnCUCntran las a\CS, ION ;utfihioS' ION rCptiICS s . ION pCCCS tCICoSstcos . RCcientcmcntc, sc ha c(rnscguidu ticmostrar la prcscncia dc cclulas citotoxicas incspccificas ell dctcrntinados protocordados, eras cclulas sun CJPACCS tie dcstruir Celulas tic lincas ttun()I-.ilcs do ntantitcros . En ION peces cartilaginosos s' en los tclc(istcos sc ha obser(ado quC ION ntacr6fagos ejcrccn cspontancamcntc tuncioncs citot()xicas, y en ION tihtrroncs sc Ita cumprol'Ado la cxistcncia tic rcaccioncs de citotuxicidad mcdiada por Celulas y dcpcntiicnte do Ab +CMCl)A i . In vitro, la citotuxiCidad cspont.inea dc ]as Celulas dc tintoma ell Xeuopiis por esplcnocitos alogenicos esti incrementada en las rants timectomizatlas en fascs precocrs . I .()s anticucrpos monuclonalcs f - cntc a cclulas tipo \K del pci gato inhibcn la dcstrucci(Sn tic lincas CClularcs transtirrntacias tie origcn huntanu por parts tic cclulas NK proccdcntcs dc peces y do scrcs luinaanos, to quC Sugicre quC las molecutas rcceptoras do antigcno implicadas ell cstc proccso se han conscrsado a to lamu dc la c\olucion . Tambicn sc han detectado presuntas ccluIas~)K en los pullos, en ION quC median la citutuxicidad tto Sc r ntcticia a rcstriccitin CPH . Sc parcccn a las Celulas \K dc ION mantitcros ell quc Su citupiasma es ( :I) .;' micntras quc Str SupcrfiCie . . Estas caractcristicas Cs f( :R ( :1),; , S en title SUCICn cxprcsar C1)8 denuicstran la cstrcclia rclaci6n quC csistc Cntrc [as Celulas NK y

Molecular no especificas de antigeno

Las vias clasica, alternativa y litica del complemento se encuentran bier desarrolladas en los vertebrados I,os ur-anismON agnates poscen pr()tcinas n() espCcificas do antigcno parccidas ;t las dcl complcntcnto . Fn ION :iclostomos cstas nto Icculas presentan Ilomolugia coil ( :3, ( :4 t . (5 dc ION ntantitcros s. acttian como upscminas, para las (]Lie se ha dctcctado tin receptor do 105 kdal ell ION Icucucitos tagociticos . En todas Lis dcmas clascs dc s crtchradus sc encuentran prcscncis tanto la via clasica del complcnmntu { mcdiada por antiCUcrposl como la via altcrnatis a, aunquc ell hrs peces cartilaginusos . todac is no csta ciaru si csta ultima csistc En la carp, sc han aisladu t(rdos ION cornponcntcs del complemcnto, dcsdc ( :l a C9 N, los factorcs 11 y 1) . Exists una considerablc homologia etttre CI gen dc C .i tic X010pJtSr CI gCn do ('3 Lie ION mamitcros . En los anurus sc hall dctcctado tambicn CI (1, ( :4, contplcjos dc ataquc a la mcntbrana s cl factor ft . Las propicdadcs hasicas del complcmrnto dc ION mamitcros (como la tcrniolabilidad v la ncccsiciad Lie la prcscncia do ( :a=' \ \I'g! * son lus II)iillas title las LiCl ConIPICmCnto Lie ION peces v dc lus anfibios. Sin embargo, Corm CS l6gico, cl range tic tempcraturas en cl quC SC ntanticnC actiso Cl complcntcnto dc ION poiLiuilotcrmos cs manor, pudicndo acniar inClusu a tan s6hr 4 ( : . Por cl contrario, la inacm-acitin tcrI

Evolucion de la jnmunidad

mica sc produce a tcntllcraturas ntas bajas ; per cjcntpht, la actin idad del c(rnnplcntcnto ell of sucro tic Xcnoptrs dcsaparccc totalntontc tras fill tratainicnto a 45 "( durantc 40 minta(ts . El contplcntcnt(( tic I()S c01-MW, NC pucde cntplear en LIS LIeterntinaciones iu vitrn tic ;utticucrpos ltcino litic(rn cn I :ts (life sc utilizan anticuerpos dc anfihios adult(n . Ell Cl carol tic la nta\oria tic Ion poccs *' tic las larvas do Xinopus, cl c(tmplcntcnt(r utilizado dcl,c pr(tcedcr tic la misnta cspccic o do cspccics cstrcchantcntc rclacionacias.
Se han detectado citocinas en los vertebrados inferiores con funciones parecidas a las clue se encuentran en los mamiferos
LAS

basadas elf sccucncias consen adas do las citocinas do los mantitcros . Entre Las citocinas (life so: han dctcctado dc csta nrancra sc cncucntran cl factor dc crecimiento dc I(ts fibroblastos tic los an fibi(rs, TGF[l ('1'( ;F/3S en Xinopts, dondc pucdc inhibir la prolitcr'aci(in dc las MILLS I', N TGF(34 elf los pollosl c IL 2 dc los peccs del orden Hi -tcrwsontata . Parcce gttc los reccptorcs do TNF se hail consert ado a h) largo tic la es- oluci(m,'\'a Clue Ion efcctos actisad(trcs del I NFli Itttrttane sobrc los ntacrcilagos do trucha arc() iris pucdcn scr blotlucad(rs incuhando prcsialltcntc los fagocitos con anticucrp(n ti- ente a I()s reccptores tic 1'\F humane (pi,; ) .
Peptides antimicrobianos I .((, Itrptid()s antirnicr((t)i :ur~s c,tan relaci(tnados cstrucntralntcn

imcsti, (ci()ncs a ItltCI nndccularaccrca tic la Ct((ILiL1()It tic las cittxinas do I()s tcrtchrati()% inleriorcs, s, csl,ccialmcnic tic sus rcceptorcs de citocinas, estan macho ntenos acanzadas Clue las do sus Ill munoglobulillas, F(:R s' (-1 '1 I . Peso :t todo, una scric do dcterntinacioncs hiol(')gicts han dcntostrado que en nTttchas cla scr dc tertebrados ezistcn disers(ts grupos tic citocinas . Entre cllas fi` ;uran intcrleucinas, intertcrones, lact(tres dc necrosis tunt(ual, tactorcs cstimulantcs de has colonias ' quimiocinas . I'()r cjcntplo, sc han dctcctdC1o ftctorcs dc crecimiento do ]as celulas - I' IT(GF, del inglcs .l .-i(ll rTl'omtb /ititnt;ci, que pr(nnucrcn la ditcrcnciaci(')n do los lintithlast(ts do celulas I' in vitro, cn los so brcnatiantcs tic cultic - os dc linfocitos T cstintulados proccdcntcs dc tclc()stcos, antihi(n urodclos y anur()s, scrpicntcs Y poll(),,, f /irf. 15 .22) . El IUGF de Xeuopttspurificado cs una protein, dc 16 kdal, con parccido hioquintico V fUnCiOnal t la IL-2 do los ma mitcros . EI ,cn tic - ll .-2- v I(ts rcceptorcs tic -IL 2 ,, dc Xitmprts ,tin no hall sid(t idcntificados . Sc ha dctcctado un ;t actvidad , tip(( I1 .-1 ~ en los ntacr(ifagos do los tclc()stcos, los anfibios s- las ayes. Tambicn sc han dcscu bicrto tact(rres tipo interfer(m en los poitluil(xcrntos (;h . ej ., en peccs criados en piscitactorias, en las que las infecciones siricas pucdcn diczntar a la poblacion), Clue cjorccn titnCi(>nCs actitadoras dc los macr6fagos \ antisiricas . Rccicntcntcnte, sc ha sccucll ciado cl intcrfcr(in tic los pcccs del orden Hitirncotuata, pcro apcuas sc parccc a los intcrferoncs clue cort()CCnte% . Esta talta tic Itontologia puccle scr la raz()n pctr la que no sc ha obtenido Lilt gran czito ell la localizacicin do los gcncs tic citocinas dc I()s orgallisnros poicluil()tcrnt()s utilizando sondas do oligonuclcbtidos

tc c()ir las protcinas antiniicn(bianas do los imcrtchrados tdescritas pi-c\ iantcutc), t - tanthicn son tactores ininunitarios importanrcs del sistcnra iulltullitari() do los \crtchrados . Asi, sc Ittn desctthier -t(> cecr(tpinas en cl intcstin(t p(rrcino, asi conto dcfensi fills ell los tagocitos t . en dctcrntinadas celulas intcstinalcs dc los ntantitcr()s, en Clondc contr((lan cl crecimiento microbiano . Las glandular grtuur1osas tic la picl \- tiel intestine do XenoprlS sccretan otra familia dc pcptidos, C1enontinad(ts nttgainirtas . Fates cons puostos presentan Limas propiCCLatics antibi(Sticas do antplio espcctro, sicndo acticos frentc a bactcrias grampositisas y grantncgari\as, hongos s . protozoon . Adentas, sc ha dentostrado Cue tallthicn roll citot(iWeds frcntc a dctcrminathts tipos dc celulas malignas huntanas . Ell la actualidad, las magaininas sc sintctizan cn cl laboratorio, y Sc csta consiticrando la posihilidad tic utilizarlas come agcntes tcrapcuticos cn scrcs huntanos . La cscualamina, fin csteroiCic (life actua come antihi(Stico sistcntico en los tihur(ntcs, t :utthicn se ha c(mscrtido en fin candidate para cl Cicsarrollo tic farntacos utiliz:tblcs en I()s sercs huntanos .

TEJIDOS LINFOMIELOIDES DE LOS VERTEBRADOS INFERIORES

I-:I sistcnta lintinnicloide produce V alntaccna I(rs linfocitos, los granuktcitos s. otras celulas s .utguincas, v constitute cl armazon anat(intice ell el clue se Cstal,ICCCn la% intcraccioncs ,alecuadas en ire los innnrn()citos los antigcnos .

Factor de crecimiento de las celulas T en Xenopus sobrenadante :produccion extirpacion del bazo cultivo de linfocitos esplenicos I recoleccion a las 24 h de los SN de los cultivos purificacion , parcial de SN sobrenadante : determinsciones induce la incorporacidn de 3H-timidina en : esplenocitos en reposo linfoblastos T promueve el crecimiento de las linear de celulas T

Fig . 15 .22 . Se separaron los sobrenadantes de cultivos actives (SNA) de esplenocitos de Xenopus estimulados con PHA y se compararon con sobrenadantes obtenidos a partir de cultivos control (SNC) . En primer lugar se purificaron parcialmente estos sobrenadantes . Parece que los SNA contienen citocinas, ya clue inducen una notable proliferacion de los linfoblastos T (aunque su potencia estimulante frente a los esplenocitos en reposo es menor) y

promueven el crecimiento de lineas de celulas T alorreactivas ; los SNC no producen estos efectos . Los sobrenadantes de cultivos mixtos de linfocitos tambien presentan una actividad parecida, aunque menos acusada . La actividad inductors del crecimiento de las celulas T en Xenopus se debe a una protein, de 16 kdal clue, dadas sus propiedades bioquimicas y funcionales, podria sec la IL-2 de los anfibios . (Per gentileza del Dr . N . Cohen .)

Tejidos linfomieloides de los vertebrados inferiores

Tejidos linfomieloides de los peces hl ~iC(),to in,) Cti till oar Al i'ntor agnator ,I tic carccc do tinto y de

ha/(), cnt()s hntocitorl W Cie~arrollan Cn sit r'It1Urt CCt;fiCO o en cl inicstino . I as lamprcas si clue posecn till bazo primitiso Vtin tejido analogo a la medula 6sca . Los pcces coil mandihula carcccn de ntcolula (sea hnt6idc, pnghos linfaticos v noidulos do tejido lintcdc asociado al intcstino C11 .AI } Oilf . 15 .?31, Sin embargo, prcscntan till limo y tin .A I diftisot N. tejido hntinnicloide aso>bazo bicn desarrotllados, IT tal higado f. /irt . L ciado al riiuin i.241 . Una particularidad dcl tejido llntomlcloiLIC de Ios peces Cs la ahundanCia de Centros mclano-ntacrofagicos Cn cl higado dc las fornras m;is primitjras, clue eii los tclcoistcos aparcccn adenris cn cl bazo v cot cl riiuin (h!r . 15.35) . Estos ccntros conticnctt grancics canticiadcs dc pig

memos Cortl() hcmosiolcrina, ccroidc, mclanina s, cspccialnrcntc, lipotiiscina . I a actimulaciun do pigntcntos cn Cstos agrcgados do nracro~fagos do lets pcces pucde scr dchida en parse al alto Contcnjdo cn grasas no saturadas do esters anintales, que ICs pcrmitc mantcncr la fluidcz do sits mcmbratias a hajas teml,craturas, cstas grasas son cspccialmcntc propensas a la pcroxidacion, cn la que
SC

produce la hhotirscjna.

Tejido linfomieloide de los distintos tipos de peces

Evolution de los teiidos linfomieloides de los vertebrados

grupo de vertebrados mamiferos aves reptiles ragas,+sapos salamandras/ tritones peces pulmonados peces teleosteos tiburones ragas peces sin mandibula presenciai homologia tejido linfomieloide
t j UT10

bazo

medula ganghos osea linfaticos

TLAI

rinon/ higado

Mtejido linfomieloide craneal evidencia partial probable C ausencia I I organo epigonal

Mtejido linfomieloide pericardico --] organo de Leydig I

LL_j tejido linfomieloide renal 1 bazo Mlimo

Fig. 15 .23. Los compartimientos linfoide y mieloide de los peces y anfibios estan entremezclados .

Fig. 15 .24. Observese que en el inlestino de los tiburones y cle los esluriones tambien abunda el tejido linfomieloide (en la valvula espirah . iPor gentileza del Dr . R. Fange.)

Fig. 15 .25. Centros melanomacrofagicos (CMM) del higado de los peces. Fotografias a pequeno aumento y rmcroscopica del higado de tin pet ciptinodbntido (Rivulus marmoratUSJ infectado experimentalmente con el coccidio parasito Calyptospora funduh. Sesenta dias despues de la infection, se observan claramente los CMM (1, " 60) . En la impronta (2, -600) se observa que estos CMM

estan formados per ooquistes degenerados (O) del parasito asociados a pigmento (P) procedente del huesped. Los fagocitos mononucleares desempenan tin papel esencial en la formation de los CMM. (Por gentileza del Dr . W. K. Vogelbein.)

Evolucidn de la inmuniclad

Tejidos linfomieloides de los anfibios El timo F. I tinur (IC I(rs cjempLtrcs adHilo , do Nrn0Eut, se cncuentra sjtua do bajo la girl, dctras del oido mcdio . El tinro sc separa del cpitclio taringco en laws teml,ranas drl dcsarr<~Ilo, conxr UCUrr- e en la mayoria tic los sertcbrados, cxccpto en los peas tclc6stcos . A c(rntinuaci6n, cl timo sc difcrencit en un c()rtex extcrno s, una mcdula central (yuc Se tine mas dcbilmentcl . Los linfocitos car ticalcs prolitir:ui ripidamcntc y son cspccialmcntc scnsihlcs a las radiacioncs I_hq. 1 5-3lr'~ . La al ,optosis en cl tinro dc Xinoplts se c tan orCCida ill Vitro I)()1 - la I,rescncia do glucocorticoidcs . Las altas conccntracioncs dc corticostcroidcs in Vil'O pucdcn induCir Is atrotia timica en los organisnxrs dcl genera Rrtna . Existcn muchos indicios dc quc cl timo dc los poicluilotcr mas, al igu .tl quc cl dc los endotcrmos, genera finfocitos clue cjcrccn fitncioncs propias dc cclulas T. LA ultrtcstructura dc los lltiti)Utos timiCOS %' do las cclulas cl,itchalcs Vecinas se nttrestra ell la ligura 15.? %. 'l amhicn existcn otros tipos dc cclulas en Cl CS troma del timo do los anfibios, cntrc Las clue se enCUcntran gran(lcs cclulas (icndriticas ( intcrdi-itantes ), macr(ilagos, cistocitos t . cclulas granulares . Tambicn Sc cnCUentran cclulas mi(rides, conx> en cl timo dc los reptiles s . Ion mant1cros iv. fiitt. 15 .?-I . Las ce Ittlas mioidcs pucdcn promoter la circulaci(in dc los liyuidos tiSulareS en Cl tjmo, V pucde clue tambien Sean una tircntc dc t3ctorcs cstimulantes de los macrcifagos . Parccc clue las cclulas del cpitclio timico, title exprcsait antigcnos (TH de claw 11 en las tascs inicialcs del desarrollo, intersicncn en la <, cdttcacicin>~ dc las cclulas de cstjrpc -I' (\ . m .is adclanic) . En cl cstroma del time dc las ranas sc ban cncontrado complcjos do cclulas parccidas a cclulas nodriza r(dcando a los timocitos, quc pucden scr Ccntros en los yuc sc ctluyuc a las Cclulas T . Taml,icn sc Ilan cnc(mtrado cc-

lulas B en cl timo dc algunos cspccics dc scrtcbrados, induidos los anfibios, nunyuc cstc (irgano no intcnienc ell su prodUCCi(in . El tinto do Rana tambien poser scnulas do cndotcho ctibico, clue es posible clue prontttetan la inmigraci6n Cclular . El bazo El ha/() cs un importantc cirgano linfbidc pcriferico en todos los scrtchrados con mandibula . En Colah(rraCi(in Coil los ganglion hntiitiCOS~> V los rinoncs captura los antigenos, albcrga los fnfocit(rs en tasc dc prolitcracidn tras la estintulacidn antigcnica c se encarga dc libcrar cstas cclulas sun pr(rductOS en los momcntos adccuados . El bazo dc Xruopttsconsta dc zonas lintoidcs dcpcndictttes c indcpcndicntcs del timo (_)iq . 15.28), Los Coliculos dc la I,ulpa Blanca contienen grandcs cantitlades dc cclulas B i /iq. 15 .?9), coma sc ohscrt a al tcnir sclean amcntc csta region coil antictrcrpos monoclonales antiinmunoglobulind . Las cclulas T csplcnicas, quc se aCUmulan ell las regiones pcriti,liculares f rc-

Fig . 15 .27 . Microfotografia electronica de la mcdula del timo de una larva de Xenopus. El micleo de la celula mioide esta rodeado de anillos concentricos de miofibrillas estriadas (M) parecidas a las del mtisculo esqueletico. La cromatina nuclear de los linfocitos pequenos (L) esta dispuesta formando una serie de zonas electrodensas ; el citoplasma es escaso y contiene pocos organulos . El nbcleo de la celula epitelial (E) contiene cromatina muy dispersa y nucleolos prominentes ; el citoplasma es abundante y presenta proyecciones (P), clue forman interdigitaciones entre los linfocitos y cclulas de otros tipos, dando lugar a una estructura reticular, x700 . (Par gentileza del Dr . J . J . Rimmer .)

Fig . 15 .26 . Timo de un adulto joven de Xenopus : efecto de la irradiation . El timo normal (1, -.35) presenta un cortex (C) repleto de cclulas linfoides y una medula (M) clue se tine de forma mas debil y contiene menos cclulas . 2) Timo sometido a radiation gamma (9 dias despues de una dosis de 3 .000 rad, x90) . Observese la espectacular disminucion de linfocitos en el cortex (C), mientras clue en la mcdula (M) persisten algunos . Tras la irradiation, el tamano del timo se reduce . El timo esta rodeado de tejido adiposo (A) . Tincion con azul de toluidina .

Fig . 15 .28. Section del bazo de un ejemplar adulto de Xenopus. Se muestra la tuna dependiente del timo (pulpa roja perifolicular o region marginal (MZ)l y la zona independiente del mismo Ipulpa Blanca) . En Xenopus (al contrario clue en la mayoria de los poiquilotermos), la pulpa Blanca (W) esta claramente separada de la pulpa roja (R) circundante mediante una caps limitrofe compuesta de cclulas clue no se tinen bien (BL) . En la pulpa roja tambien se aprecian actimulos de linfocitos. Tincion hematoxilina/eosina, x80 .

Tejidos linfomieloides de los vertebrados inferiores

gicin marginal), carccen de innutraoglobufnas de supcrficic, pero entre cllas eziste una poblacic5n que es capaz de unirse a los antiCUertaos monoclonalcs anticclula T (s . fNf. 15 .?9'1 . La sangre penetra en cl bazo a trascs do la arteriole central de la pulpa Killca, que SC enCUCntra cstrccharnente asociada a un conjunto de fibres ncrsiosas sinap:iticas noracirenergicas . Estas fihras incrsan cl bazo y ejerccn tunciones innaunorrcguladoras . Dcsde la arteriole central parten capilares Line sicrten su ContCnido en la regicin marginal de pulpy raja situada alrededor; las paredcs do los capilarcs fbrnaan parte do la cape linaitrotc . En cstudios cspcrinacntales Ilcudos a cabo con antigcnos tcf idos coil tints china o naarcadoscon fuoresccina, sc ha obscr ado que la region del bazo en

do Ias cclulas 13 tanto en Ias larsas (dondc tambicn intcrvicnc cl higado) corno en los adultos, en los yuc constituse cl principal 6rgano de difcrcnciacion do las cclulas B. Es sorprendcnte el hecho do yuc los fntocitos do Xenopus no czprcsan constituticamente CD5, cl rnarcador clue aparece en las cclulas " <primithasIB I productoras do anticuerpos naturalcs do los manaitcros .

Los ganglios linfomieloides

la que penetran prinacro Ias sustancias transportadas en la sangre es la pulpy roja . Jlas tarde, los antigcnos circulantcs son atrapados en los tbliCUlos de la pulpy blanca, cs decir, qucdan retenidos en Ias proxinaidadcs de Ias cclulas capaccs cle sintetizar anticucr pos I ;/t9 . ]5 .301 . Los anrigcnos son cspuestos en la supcrficic cic Ias grandcs cclulas dcndriticas, cuvas rcacciones citoplasmiticas

din lugar a la enaisicin de seudopodos clue atrasiesan la cape timitrotc pcnctrua en la region marginal, en dondc abundan Ins cclulas T. La organi/acioin global del bazo do los anfibios es parecida a la del ba/o de Ios naanaitcros, aunque en los prirneros no sc ha ohscrvado la presencia de centros marginales . El bazo do ell cl desarrollo los anfibios descmpcna un papcl importantc

Los ganglios lintomicloides, due guardan un cicrto parccido timcismal con los ganglios lintaticos clc los ccrtcbrados cnclotcrnu),, aparcccn por prinacra sez en cl drbol csolutiso do los vcrtcbradr~s en los anfibios nags ,asanzaclos ,, , corno Ias rams \- sapos ranidos s. hufidos, pero no en los urodelos ni en Xenopus. Los ganglios lintinnicloidcs do los :uauros prescntan bastantcs difcrcncias ecru los ganglios linfiticos de IoS naanaifcros, va que sc trata cic oirganos cuva misi6n fundamental cs filtrar sangre, aunque tambicn pueden capturar sustancias contenidas en la linfa circundantc. Aunquc en los ganglios lintimaicloides de los anuros abundan ]as cclulas productoras do anticuerpo, dichos ganglios no prcscntan una cstructura ran dcfinida corno la Ltc los ganglios lintaticos de los naamitcros \ carcccn de CCrrtrOS gcrnaina]Ca. En Ias r;uaas adultas, Ios -ganghos lintaticoz- sc encucntran situados en el CuCllo en la region axilar: la glandula linfatica cic Ias larsas prcscnta una estructura parecicla ijia . 15.311 .

Fig . 15 .29 . Bazo de Xenopus adulto, con las zones ricas an cclulas B y T. 1) Las cclulas B abundan en Ins foliculos de la

pulpa blanca (Wl; tambicn se observan en la region marginal (MZ) yen la pulpa roja (R), principalmente en forma de cclulas plasmaticas que se tinen de forma intensa. Tincion con Abm

anti-celula B (anti-IgM), .100 . 2) Las cclulas T se concentran en la region marginal, justamente alrededor del foliculo de pulpa blanca (W). Son especialmente abundantes en la region perifolicular (marginal, MZ) y carecen de Ig de superficie . Tincion anti-celula T, .2-00 .

Fig . 15 .30 . Inmunofluorescencia del bazo de Xenopus adulto, an la qua se observe el atrapamiento antigenico . Se

inyecto a la rana IgG humans . A las 3 semanas se prepararon las criosecciones y se incubaron con Ab anti-IgG humana marcados con fluoresceina . La intense fluorescencia verde manzana demuestra la presencia de Ag en los foliculos de la pulpa blanca (W) . El Ag se encuentra atrapado en una red dendritica, parecida a la que se observa en los mamiferos y la aves, en la que se supone que se encuentra retenido en la superficie de las cclulas reticulares, x35.

Fig . 15 .31 . Corte de una glandula linfatica de una larva de Rana, Se observa un ganglio linfomieloide (N) alargado, par, unido

por SW care ventral al epitelio (E) de la camera branquial y que se proyecta hacia el amplio canal linfatico (C). Tambien se observa una seccion transversal de las branquias (G1 y de un dedo (D del miembro anterior que se encuentra en el interior de la camera branquial ; la piel de la larva esta situada lateralmente. La glandula linfatica esta formada por abundante parenquima linfoide con fagocitos y sinusoides intercalados (menos tenidos) . La funcion principal de la glandula linfatica es filtrar la sangre . Tincion hematoxilina/eosins, x25.

Evolution de la inmunidad

l (,dt, cl intcstinti dcl-,ado dc Ios .tnfibirrs ctmticnc n6dulos dc tc jidt, lint6idc ; I I .AI,i Parccidos a Ira del sistcma l I .AI dc los mamiterus. Ell X0t0PUs, Cl TLAI txuatiCnC ccltrl ;as plasmaticas que sccretan IL Ni r IgX. En el examen innaatnciltist(xluimico dcl in tCStino de Xcu0Euu con anticttCrPos mont,Clema1CS anti-celula '1 sc obSCna to hrCSCniia dC cclul:u'1' ncxIularcs ( . lamina hropiai e intraepitcljales 1 ; .331 .

Tejido linfoide asociado al intestino

Fig. 15 .32. Corte de intestino delgado de Xenopus obtenido an un criostato y tenido con Ab monoclonales anti-CD5 (un marcador universal de celulas T), visualizado mediante tinci6n de inmunoperoxidasa . Se observan celulas T intraepiteliales il) y depositos nodulares de celulas T (N) en la lamina propia ; tarnbien se observa la luz intestinal (G). Tras la timectomia precoz, las celulas T desaparecen en ambas regiones, " 300.

F:I rintin cs un importantc 6rgano linfiamicloide ell los anfbios Yu1. 1.,.33 i, al igual yuc en lot, pcccs, Peru picrdc esta funci(in en los reptiles, las ases y los mamiteros. En los anuros, cl desarrollo do ]as celulas 11 durante la ontogcnia sc inicia en cl rintin S. /' o cn cl higado . Dc licchs,, cstos organ( tiencn grin importancia en I;ts primcras fasts do dlferenCIaCI(in do las celulas critre,ides, linli>ides y naicloidcs dC dl('C,SO S vcrtchrados.

Ripon e higado

Los anfihit,s posccn medula ((sea, Pero no se sabe Clue papcl dcScntpcri ;a dcntro del sistcnia innrtmitario . La medula ((sea dc los cjcmplarcs adultos dc Raun pipirusconticnc tejido lintomicloidc (fp.1534) V Cs una tUCnlc importante do celulas productoras de anticuerpo . Por el contrario, parccc que en 1tuopru la medula (')sea cs nris rudinicntaria s . su tiuacion principal cs Proporcionar cl cntorno adccuado para la ditCl-CI)ClaCiOn dc los granulocitos neutrotilos ffiif . 15.,,'-1) .

Medula osea

MODELOS DE ANFIBIOS PARA EL ESTUDIO DE LA ONTOGENIA INMUNITARIA

En los tiltimos anon se ha conseguido desarrollar sarias familias isogcnicas V Cndogamicas dc Xenopus aptas para Ilccar a Cabo inscstigacioncs innnux,lcigicas. ESMS ditcrcntCS familias dc Xtnopus, que presentan c(rmpatibilidad CPH o posccn Solanasnte una o dos ditcrcncias haplotipicas, han rcsultado scr id6icas Para la in . s-rstigacion dc la ontogcnia del sistcma inmunitario.

Fig. 15 .33. Corte de rin6n de una larva de Rana, an el qua se aprecia el tejido hematopoyetico . El tejido hematopoyetico (H) abunda en las regiones intertubulares, en donde se encuentran linfocitos, granulocitos y otras celulas sanguineas en proceso de desarrollo . Adosados al mesonefros, se observan los musculos miotomales (M) y un asa intestinal (I) . Tincion hematoxilinaieosina, , 25 lK = tubules renales) .

El desarrollo del time

Fig. 15 .34. Medula 6sea . 1) Tejido linfomieloide (LT) en la medula osea de Rana, importante frente de celulas productoras de Ab . Tambien se observa el femur (F) y el tejido adiposo (A). Tincion hematoxilinaieosina, " 20 . 2) Citocentrifugado de medula osea de Xenopus, en el que se ven los granulocitos neutr6filos positives frente a la peroxidasa (N), <700 . (Citocentrifugado, per gentileza del Dr . I . Hadji-Azimi.)

scrnPcna cl tinaut en cl desarrollo del sistenaa inmunitario, ya Clue las larsas dc sida librc Pucdcn scr tinaectomizadas en fries natn tcmpranas dc la silo, cuando cl time tod.m a cs inniaduro yi,ts. 15 .35 s 15 .361 . En Xtnopirs, cl time (organ() par) sc dcsarrolla a partir del cpitclio dorsal do Las segundas balsas faringeas . Los Cstudios cxpcrimcntalcs han dcmostrado yuc los precursores dc las celulas lint6ides penetran pot- primera srz en los rudimcntos Cpitcljalcs del tinio ;a los 3-4 dins dc clad . A los 7 dias empicza a aparecer en la poblacion dc celulas lint sides del limo un antigcno dc difcrcnciaci(Sn do la% cclulas'1 -, CI marcador X I'LA-I i 120 kd al ), yuc cs rcconocido per cl anticucrpo monoclonal antitimocito dc raton XT-1 . A los 10 dial dc clad, la mayoria dc los timocitos expresa antigenos dc superficic propios dc Cell. I sicndo tanibicn cstc cl monicnto cn que SC conaicnzan a dctectar las primeras celulas l' en la periteria . Durantc la naetamort2bsis sc .166n del limo, asi como una nucsa olcada dc produce una ins-011 colonization per Partc dc celulas naadrc . I)CSPucs dc la nactamorfosis, cl ntimcro dc timocitos aunacnta, alcanzando cl maxinio nivcl a los I .,-16 naescs . La cxistcncia dc 1111 c(map(xacnte inmunitario dcpcndicntC dC celulas T ('1`., .  1, asi como de otro indcpendientc dc las misntas jT_{ ,I, lau yucdado cluramente demostrada mediantc la timectomia dc Xtnopw cn fasts tcmpranas dc Su iicsarrollo (a los 4-8 dins dc edad ) (;/ig. 'Gras csta tinaccto naia tcmpr:ma, ]as cclulas'I' X I' I - C asi como ( :1)5' s- ('1)8'j dc los organos lintoiClCs dc las lars as v dc Ios adultos desaparecen, micntras que abundan las celulas B con IgM dc supcrficic ifiiq. 15 .38) .

Desarrollo del time y timectomias experimentales Xenapir.~ es rip en .anisnatr idcinco para estudiar cl papel que dc-

Modelos de anfibios para el estudio de la ontogenia inmunitaria

Fig. 15 .35. Tirno de Xenopus a los 3 y a los 7 dias de edad . 1) A los 3 dias el timo (T) en desarrollo todavia se encuentra unicio al epitelio faringeo (PE) y esta compuesto principalmente de celulas epiteliales . Tambien se observa la bolsa de una branquia (G). Tincien de hematoxilinaieosina, x 100. 2) A los 7 dias, el timo esta compuesto de menos de 1 .000 celulas de dos tipos distintos. Las celulas epiteliales (E) presentan un nucleolo prominente, cromatina

dispersa y un citoplasma que se tine debilmente . Las celulas linfoides (L) poseen un citoplasma amplio que se tine intensamente, en el que abundan los ribosomal y las mitocondrias . A los 7 dias, la poblacion de celulas linfoides del timo empieza a expresar el marcador TX-1 y las celulas epiteliales expresan por primera vez prote(nas CPH de class II . Microfotografia electronica, ":500 .

Parccc yuc en CSIC esCaloll ese~lutiso CI time cs cscncial para ht ntaduraci6n dc ]as Cclulas'I . Sin embargo, cs importantc rcsaltar el hecho dc clue, en algunas ocasioncs, los cjcniplares dc Xruopus tirnectomizados en Ins fries tentpranas dc la s ida rcchazan los injertos dc picl proccdcntes de indis iduos Con incompatibilidad CPH . Tras cl recliazo, sus espICno~citos Clan lugar a rcsultados politicos en las pruebas dc culti\o mixto dc linti>citos, illClusu ante la prescncia dc agcntes estimulantcs Con Un (TH distinto al del donante original, pcro no Cuando SC utiliza Con)() cstinrulan.l .) . Todacia no sc te PHA !Un agcntc mit6gcno para las celulas COnOCC Id naturaleza dc Lis celulas alorreactn -as yuc intcrcicncn ell estos proceso, . La tintcctomia dc [as larcas en difcrentcs tales dc su desarroIlo sugicrc yuc las distintos timciones dc las celulas T requicren la prescncia del timo durante difcrentcs pehodos dc ticmpo, antes .Los CSIUdiOS Con anidc ntanitestarse en la pcritcria i_/itf. 15-Ni males intactos han demostrado yuc la alorreacticidad innrtmitaria i in rivo c in riti-o i, asi conto la capacidad dc los esplenocitos para responder a los nutiugenos dc celulas l', aparece en las primeras tascs dc la cida larcaria del rcnacuajo, nucntras yuc las respucstas do Igl' eficaces s6lo al,arcccn en [as ranas j6srnes, quc ya estin dotadas dc ]as imprescindihlcs tilnciones colaboradoras tie las Celulas '1 '.

h:tn demostradu yue Cl epitelio dCl time ajeno intcrsicnc en Cl proceso dc selection positis a c induce tolerancia frentc a los injertos dc picl del haplotipo ( :PH del timo, auncluc cs notable cl hecho dc yuc esta tolcranCia no intpidc yuc se prude/Ca una reaction lint6citaria mixta trcnte a Ins Celulas del domante del timo . Rccicntentcntc, sc Ira obscrsado Clue en los embrioncs dc las ascs y los mamitcros tamhicn SC produCC cstc tell(')111CIIO . Sill

El injerto de Un timo extrafu~ en un ejemplar de Xertopus timectomizado en las primeras titles dc su cida pucdc promoccr la diferenciaci6n dc las celulas prCCUrsoras del Inlesl)ed a to largo dc la via de las celulas T lfiq . 15-40} . El dcsarrollo in riro dc timos quc exprcscn difcrentcs marcadorcs CPI I en sus Compartimicntos cpitcliat y linfoidc tantbien sc pucdc Conseguir mcdiantc otra tecnica quirurgica . Esta tecnica ConSIStC en Unir la parts anterior de un entbricin dc 24 horns, Clue contienc las Celulas yuc originarin cl timo, con la parts posterior de un etnbri6n incompati blc Con respecto al (TH, yuc tiara origcn a las Celulas madrc hentatopoycticas, il1Cluidos los lint6citos (ftf. 15.41) . Estos dos sistcntas experimentalcs se han utilizado para incestigar cl papcl yuc desempefian las Celulas del cstrorna timico en la cdLICaCiOrn timiCa . En estc proceso se produce una selecci6n negatica (yuc genera tolcrancia de las Celulas '1' frente a los autoantigcnos) \' una scleccir>n positica (Clue rcstringc los antigenos (PH con los yuc intcraccionan prcfcrcntcmcntc las cclu

La education timica en Xenopus se lleva a cabo mediante selection positiva y una selection negativa limitada

Fig . 15 .36. Tirno de Xenopus a los 38 dies . El timo par y pigmentado se situa detras de los ojos (arriba) ; en su hermano, timectomizado a los 7 dial de vida, se aprecia claramente la ausencia del mismo (abajo) .

Efectos de la timectomia en Xenopus

respuesta de los anticuerpos fronts a: rechazo dal aloinjerto respuesta mitogenics frente a : celulas BI

LPS (T,-,) j normal timectomizado + +

ESC (T ., .:,) + -

LPS + +

(celulas T)I

PHA +

rapido lento

las'l colaboradoras y ctectoras) . Estos cxpcrintentos Con Xenopus

Fig. 15 .37. Se estudiaron in vitro las respuestas de Ab, las respuestas mediadas por celulas frente a injertos de piel y a los mitdgenos de ejemplares de Xenopus timectomizados a los 4-8 dins de vida . (LPS = lipopolisacarido; ESC = eritrocitos de sangre de carnero; PHA = fitohemaglutinina.)

Evolution de la inmunidad

Poblaciones de celulas T y B en Xenopus perfiles de celulas T numero relativo de celulas

891,

:)nzo del animal de control

304'.

bazo del animal timectomizado

2%

100 10 1 102 10 3 intensidad de la fluorescencia (escala logaritmica)

10 0

10 1

perfiles de celulas B numero relativo de ( :Piulas tilno del ,r'mal de ontrol

30

Iwo del a "imial de control

22,

C'I ar ~rval

4240

timectomizado

100 10 1 10 2 10 3 intensidad de la fluorescencia (escala logaritmica)

100

10 1

10 2

10 3

10 0

10 1

102

10 3

Fig. 15 .38. En primer lugar se tineron con anticuerpos monoclonales de ratdn frente a celulas T (XT-1) o frente a celulas B (anti-IgM) celulas del timo y del bazo de un ejemplar control de Xenopus (de 4 meses de edad) y del bazo de un ejemplar hermano del anterior timectomizado a los 7 dias . Como segundo anticuerpo se emple6 anti-inmunoglobulina de rat6n marcada con isotiocianato de fluoresceina . Se identificaron las celulas T y B mediante un

citometro de fluorescencia. Tras la timectomia en las fases tempranas del desarrollo larvario, las celulas T XT1' desaparecen del bazo y el numero de celulas B aumenta proporcionalmente. El porcentaje que se muestra en cads grafico es el de celulas positivas, es decir, aquellas que aparecen a la derecha del punto de torte (gris) que se fijo previamente para excluir el 98% de fluorescencia de fondo.

Aparicion secuencial de las subpoblaciones de celulas T

respuesta frente a aloinjentos reactividad RLM reactividad a mit6genos de celulas T buena respuesta primaria de Ab IgY fases anteriores no lestudiadas

larva

Trr--ry,6 7 8 9 12 metamorfosis rana joven Edad (semanas)

Fig. 15 .39. Ontogenia de la reactividad inmunitaria y efecto de la timectomia a diferentes edades de Xenopus. Tanto las respuestas frente a los aloinjentos como la reactividad linfocitaria mixta (RLM) y la reactividad frente a los mitogenos de celulas T aparecen pronto . Las celulas TH se desarrollan mucho mas tarde, especialmente aquellas necesarias para que se produzcan respuestas primarias eficaces de anticuerpos IgY ( " representa la edad a partir de la cual la timectomia ya no altera esta funci6n concreta).

Fig. 15 .40. Implantation de timo en un ejemplar timectomizado de Xenopus. 1) Se timectomizo a la rana X. laevis a los 7 dias de edad . En las ultimas fases de vida larvaria se implant6 subcutaneamente un timo de una larva de X. borealis. Este implante de timo (I) creci6 bien, quedando situado tras la metamorfosis junto al ojo izquierdo. 2) Se examin6 mediante microscopia de fluorescencia un torte del timo implantado . Las celulas procedentes del donante (D) se distinguen de las del huesped porque los nucleos de X. borealis muestran una fluorescencia brillante y punteada, mientras que las celulas de X. laevis se tinen de forma homogenea con un color verde mas apagado. El timo se encuentra repoblado con linfocitos del huesped, mientas que muchas celulas del estroma son (cpunteadas (es decir, proceden del donante) . Tincion con quinacrina, x300 .

Modelos de anfibios para el estudio de la ontogenia inmunitaria

embargo, en CI crier dC los ntatifcros SC Sigue pcnsando yue las celulas intcrdigitantcs (dcndriticas) dcl titno, quc SC Cncucntran en cl estronta pero yuC son dc origen eztratimico, dcsentpcftan un papcl rscncial cn la srlcccirm nCgatis;t, dCStrtnCnd() ]as cclulas T yuC prescntan alto atinidad por cl ( :PH propio, sin yuC intCn-Cngan en este proccso ]as CdUlas epitcliales tinticas . Ontogenia de la aloinmunidad, de la alotolerancia y de la production de anticuerpos Los rcnacuajos aCiyuicrcn capacidad part dcsencadenar respucsta, . aloinnutnitarias (dente a antigcnos (.PI I ) \ respucstas dc anticuetpos cspccificos cuandcr aparcccn las poblaciones acICCUadas dC cclulas T y B en la pcrifcria {ha. 1.5.4?), to yuc pucdC OCUrrir Cuando el sistCnta IinftidC CnCnta solantcntc corn ntcnos de tin ntill6n dc linfocitos . La mcntoria inntunitaria NC Pucdc trtnsfcrir despucs dc la ntctamortirsis, pero no se sabc Ni esto cs dcbido a la transfcrcncia dc cclulas dc ntcntoria o a la pcrsistcncia dcl antigcno. Pcsc a todtr, cs hicil inducir tolcrancia dente a picl alogcnica en [as Iarsas innntnocontpctcntes (pero no en los adultos is c>ta in ducci(in de alotolerancia es espccialntcntc facil durante la ntetantortbsis 15.4.)1 . Parecc quc los tactorcs criticos son cl tamafio dc los injertos trasplantados t- el grado (IC hiStOCOntpatibilidad . Los injertos relatisantcntc compatibles sicntprc soil tolcrados p(rr Xerroprslarsarios o cn tasc dc ntctantorti>sis . La tolcrancia inducida mcdiantc el injcrto dc piel ajcna V tejidos lutfirl(iC Srl(iCS dttnntC la rida lanaria no SLICIC ser -contplcta>,, ca yuc durantc la ntctantorfirsis () dcspucs dc la ntisnta SC sigucn dctcctando si ,nos dc rcacthidad frcntc al donante (conto la RIAI) . Probablentetae la tolcrancia aparccc como consccucncia dc fcn(intcnos dc suprcsl()n (r do ancrgia . Modelos para el estudio del origen de las celulas linfoides \IediantC C\jICrintcntcrs dC tr .tsJILurtC dC rudintcntcrs dC branquia citogcncticantente distinttrs a Rain pipicns, Xennpus lat vis v al trit6n I'lcur-odclcs ttvt1thi durantc la talc cntbrionaria sc ha de mostrado quc, al igual yuc Cn cl cash dc los organisntos cndotcrmos, los lint6citos timicos proccdcn dc cclulas precursoras cxtrinsecas quc Colonilan CI tinto . SC ha contprobado yuc Ion precursores de cclulas linfoides dc XCtlopns (Icstinados :t cstablc terse en el timo sc originan en las placas ntesodcrtnicas sentr(rla feral iislotcs sanguine( \rntralcsl y dorsolateral dcl entbri6n . Las ululas ntadrc penetran en el titno dc los ejcntplares jc)\ -cnes dc

Xenopus cn dos 0ICadas, una durantc las primcras fasts dc la s ida lar\aria t . otra durantc la ntctamortosis, to yuc probablcntcntc pcrntitc quc las cclulas T dcl adulto sc cduqucn Cn un cntorno cn donde se cxprcaan antigenos cspecificos dc la taSC adtdta . Rccientententc, se ha dentostrado yuc (iiccrsas estirpcs ltrntatopoycticas dc Xcnop:u cxprcsan cl antigcno Icucocitario comon ( :1)45, quc poscc acti\idad dc tirosin finfatasa .

embrion donante
huesped

larva

Fig. 15 .42 . Trasplante de tejido embrionario en Rana: ontogenia de la aloinmunidad . 1) Se extirpo un fragmento del pliegue neural de un embrion (en la fase de formation de la cola) y se trasplante a la superficie ventral media de otro embrion (huesped). Los pliegues neurales se encuentran intimamente asociados a Ios elementos de la cresta neural, que son precursores de diversos tipos de celulas, entre ellas las celulas pigmentadas . Cuando estas se diferencian constituyen un sistema visible externamente para constatar la evolution del trasplante embrionario . La larva huesped ha desarrollado una masa visible de celulas pigmentadas del implante . 2) Elementos diferenciados del implante 15 dias despues del trasplante : grandes celulas ganglionares (G) con nucleolos prominentes, otras celulas nerviosas (N) y melanina (M) . Pese a que el trasplante se Ilevo a cabo en fases muy tempranas, se observa la presencia de linfocitos y granulocitos, que invaden el implante (L = leucocitos invasores) . Tincion hematoxilina'eosina, ,100 . (Por gentileza del Dr . E. P. Volpe .)

Fig. 15 .41 . Sapos quimericos . Se obtuvieron Xenopus quimericos por intercambio de las regiones anterior y posterior de dos embriones 24 horas despues de la fecundacion . En esta fase, el armazon timico (p . ej ., el epitelio timico) se encuentra situado en la region anterior, mientras que todos los precursores linfocitarios estan en la posterior . Uno de los embriones era de una variante albina de piel blanca y ojos rojos, mientras que el otro era de Xenopus normal . Estas quimeras resultan Wiles para el estudio de la education timica . (Por gentileza de los Dres . M . Flajnik y L. Du Pasquier .)

Fig. 15 .43. Tolerancia a los injertos de piel en Xenopus. La piel alogenica es tolerada por on receptor larvario o en fase de metamorfosis, incluso aunque provenga de un donante con distinto CPH. Los subsiguientes injertos de piel Laqui se muestra un fragmento de piel blanca de la region ventral) del mismo donante tambien son aceptados por la rana adulta . Sin embargo, la piel de un donante diferente es rechazada en 3 semanas a 25 C.

Evolucion de la inmunidad

La metamorfosis plantea problemas al sistema inmunitario I .os inmunologos sc prrpuiu.ur ccinu) Cs fu)sihlc yuc I()s ;uifihic~s nci mucran ticbido a cnfermedaties atturinnumitari.ts durantc cl proccso do tnctamortosis, sa clue cn esc nutmcnto sc cxprcsan por primcra scz divcrsos marcadores cspccificos del animal adulto . No sc sahe pcrr que Las nx>Icculas CPH tic class I sc cxprcsan por primcra s-cz cn cl monxnto do la mctatnortusis. Parsec probable yuc cn cstc fcn<imcno sc encucntrcn implicados mccanismos suprcso

rcs. Por otrt parts, cn cl ntonrcnto algido de la mctamortuais sc ohscr\an concentracitmes clesada, tic ct~rticostcii \ un auntento tic I t expresicin de los reccptorcs tic los mismos . F ;stas altcraciones Iu~rmonalcs pucticn afcctar dircctamcntc a los mccanismos inmunitarius tncdiadcrs ptrr cclulas, hrubablcmcntc inhibicntio la produccilm do If .-3. l,a mctanxrrlOsis do Ices anfibi<~s CS un proceso tas cinante tfurantc cl cual se pttctien estudiar Las intcracciones entrc los sistcntas ncurocndocrino c inmunitario, esrudios CUM alcance CS tnuClto nta~ or yuc las cucstioncs l,uramcntc filo . , ,cncticas .

~Que mecanismos inmunitarios celulares y humorales poseen los diferentes tipos de invertebrados? Explique las diferencias fundamentales que existen entire el sistema inmunitario de los organismos

~Que se sable acerca de la evolucion del complejo las celulas T?

principal de histocompatibilidad y de la filogenia de " ~Hasta clue punto es 6til el anfibio Xenopus laevis para estudiar la ontogenia del sistema inmunitario? ~Cuales son las principales lagunas que existen en el conocimiento de la evoluci6n de la inmunidad? de estas cuestiones. Esboce la forma en que se podria abordar el estudio

vertebrados y et de los invertebrados. ZQue presiones evolutivas pueden haber originado los mecanismos de que estan dotados los vertebrados? " ~Que sistemas de generacion de la diversidad de anticuerpos ban adoptado los diferentes tipos de vertebrados?

LECTURAS ADICIONALES
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Inmunidad frente a los virus

Los virus son parasitos intracelulares estrictos. Su complejidad y sus estrategias de replicacion son diversas . Algunos producen infecciones agudas y son eliminados por el huesped, mientras que otros persisten indefinidamente y provocan enfermedades a largo plazo . Los mecanismos inmunitarios innatos act6an en las primeras fases de la infection e impiden la diseminacion del virus . Entre ellos se encuentran el interferon y las celulas NK . Los anticuerpos evitan la diseminacion de los virus a las celulas y tejidos adyacentes, neutralizando su infectividad . Este mecanismo de defensa es importante para evitar las reinfecciones . " Las celulas T citotoxicas reconocen las celulas infectadas por el virus y las destruyen durante las primeras fases de replicacion virica, antes Lie que se producton nuevas particulas del virus . Los virus han desarrollado estrategias para evitar set reconocidos por el huesped . Entre ellas se encuentran la latencia, la variation antigenica y la production de proteinas que actban conao senuelos e interfieren en los mecanismos antiviricos del huesped . Los virus pueden alterar directamente ell funcionamiento del sistema inmunitario, provocando inmunosupresion y enfermedades por inmunodeficiencia o desencadenando enfermedades autoinrnunitarias .

16

TIPOS DE INFECCION VIRICA

Los virus son parasites intracclulares estrictos, clue ncccsitan Ij maquinaria bioyuimica do ]as celulas del hueslpcd para Ilcvar a cako la sintcsis protcica mctahotlizar los azucarcs . Sus cstructu ras v complcjidad gene'tica son extrcmadamcntc c ariabIcs, alt' poscen gcnomas dc ARN que conticncn solo unos paces gcncs, mientras yuc otros est5n dotados de gcnomas dc All\ que Cen ticnen hasta 200 genes ditcrentes . I: slrL)Ctnr:alnaentC, un virus vicne a ser un IMyucte dc proteinas y acidos nuclcicos . Sin embargo, sc hail deSCnblcrllr krrmas dc situ join naas simples : " Los viroides son agcntcs clue intectan a los tCgeT .71CS v que solo cstan compucstos dc acido nucleico, carccicndo dc protcinas .

" I .os priones son "<protcinas intccciosas asociadas con enterntrd:rclrs ncurolcigicas dcgcneratis- as tic los aninaalcs v Lie los scrcs humanos, cntrc las Lluc sc encuentran cl srrapir, las en cctalopatias espongit'amcs bovinas (EEB) y la cntermcdad dc Crcutztcld-jakob f ECJ h . En Is figxra 16 .1 se ntuestra el preceso tipico do inteccicin dc unit cclula per tut thus . h<-as virus sc linen a [as celulas del hucspcd a traves tic rcccptorcs cspcciticos . Esta cspcciticidad cs la yuc cictcrmina cl tmpismo del virus hacia un dctcrnainadr~ Imcspcd o tillo dc cclula . En la j'igura 16.2 sc mucstran Agunos cjcnaplos Lie rcccptorcs cclularcs milizados por los virus . Und vez yuc CI thus penetra en la cclula sc dcshace dc su rubicrta, su acido nuclri0r clutch librc y sc product la transcripciim y la subsiguicntc sintcsis do Ias protcinas c iricaN . F.I L,cnorna vi rico sc rc-

Esquema general : Infection y replicacion de los virus

virus infectioo fijacidn penetracidn

I mediante gemact .on, j,j-\ dando lugar a una cubierta

capside

cubie :

acido nucleico

liberation

mediante citolisis, sin cubierta

perdida de la cubierta ensamblaje replicacion

formation de capsides alrededor del acido nucleico

sintesis del ARNm virico (directa o mediante la maquinaria del huesped), sintesis de las proteinas viricas de las nuevas capsides, sintesis del acido nucleico virico

~J ---

abertura en la capside

Fig . 16 .1 . Antes de replicarse los virus tienen clue infectar una cclula del huesped .

E3[

Inmunidad frente a los virus

pliCa \ N las 111.10,1% particulas Siricas " , liijas~, - irioncs1 se ell saInblan l . soil liberadas para clue infectcn ]as cclulas l. tejidos adcacentcs . Los detalles czactos dc estc proceso depcnden del tipo concreto do x-irus l. del cstado nlctah6lico dc la celula hucspcd . Por ejcnlplo, los picornaxirus (pcquefos virus AKN) tardall unas 8 horas ell producir IlLICx US x iriones, micntras quc en cl trio del Citonlegaloxirus huntano (fin virus A1)N i pueden set ncccsarias hasta -t8 horas . Los virus prescntall una gran lariabilidad ell cuanto a -,If capacidad Irara intcctar al hucspcd, persistir ell cl ) desencadenar una e nlcrlncdad . La invasion sc sucle producir a traves dc las nlu cocas ; tantbicn se pucdcn introducir nlediantc punciones cutaneas ip . ej ., debidas a picaduras Lie insectos () a agujasj, una via ntut cficaz porque situa directanlcnte a Ills \irus en el torrcntc circulat(xio . La replicacion sc suclc producir sobre supcrficies cpitelialcs, y algunas ICCCS CS Seg,uida por una talc dc lirelnia idisc111111aC1(111 Sallglllnea) gLIC trac tonlo consecuellcia la lntettr611 de otros tcjidos . Para la recuperation puedc scr ncccsaria la clinlinaci(')ii total del liras . Sin enlhargo, existcn algunos Virus (p . ej ., I(rs 1lcrpesx-irus) clue una xcz resuclta la inlccti(in persistcn en una forma latente (cs dccir, no intccciosa ), y quc en 1111 momcnto dctcrntinado son capaces de rcactisarsc v g,cncrar nucxos lirioncs . ()tros virus pucdcn persistir en Su forma intccciosa pest: a la respuesta innttutitaria del hucspcd I:p . ej ., Cl liras (ic la hepatitis 11 y cl liras dc la coriontcningitis linfocitaria) . En cl scra/ric \ la E(] no cxistc una fast aguda; estos agentes dan lugar a intcccioncs Icntas, nlanitestand(lse la enfcrmcdad muchas anos despucs del contacto initial . :AI contrario clue los virus, los prioncs no desencadcnan respucstas innntnitarias fit prol ocan cl aunlenta dc la sin tesis dc intertcr6n . En la,/uZura 10 .3 SC nltlestra fin I-CSUI11CI1 Lie las ditcrcntcs forntas de int-Cccion .

El interferon (IFN) estimula los mecanismos encaminados a inhibir la replicacion virica

tie unos 20 genes situados ell cl cromosoma 9 . " IFNR (intcrtcr(in do los fibroblastos), codificado por fin tinico gcn situado ell cl cromosoma 9 . " IFNy iintcrfcr6n innttutitario), codificado por fill irnico gcn situado en cl cromosoma 12 . La intcccoosn de una MULL por parte de fin Virus Cstinltlla la prodl1CC16r1 Lie IFN(x/(3, quc actisa los mccanisrnos anti\iricos do las cclulas pr6ximas V aunlenta sit resistencia frente a la infection lirica Ihq. 16 .4) . Los intcrfcroncs activan divcrsos genes, entrc los quc se encuentran dos coil actix idad antixirica directa : una protein cinasa do 67 kdal clue inhibe la fost6rilaci6n do cl F-2 y bloquca la traducc16l) pr()tcica, \ una 2',5' oligoadcnilato sintctasa quc actita una endonuclcasa latente quc intcr icnc en la degradation del ARN xirico . Existcn otros mccanisnuls antisiricos nrtrcho alas cspccific(:1s . Por cjcnlplo, cl gcn Mx inhibc la transcription prinlaria do Ios genes dcl sinus (1c la gripe, pcro no prescnta ehtt(1 lllgltrlU trcnte a otros tipos do sinus . El intcrter6n 1, ademas do inhibir directalllcnte la replicacion virica, aunlenta la eticacia de la respucsta innlunitaria adaptatila al inducir fin atrnlcnto dc la cxprcsion de nloleculas ( :PH de claws I v 11, siendrl ademas fin potC11te estinttll .ulte de Ios nlacrotagos V de las cclulas NK i ;\ . nlas adclante 1 . I a importancia in riro dc los intcrfcroncs qucda dcnlostrada por cl aurncnto de la scnsibilidad do los ruontcs a ]as intcccioncs tiricas tras la climinati6n de dlc1l0S intcrfcroncs nlcdiantc tratanlicnto coil antictrcrpos cspccificos .

" Ilea 1'interfcro11 Icucocitarioj, codificado por una t,unilia dc

tc~IltitCll

lrc~ tlpo dc Intcrtcroll :

RESPUESTAS INMUNITARIAS INNATAS FRENTE A LOS VIRUS

l .a tasc initial Lie una illfCCCi(in se puedc cornparar con fill a carrcra (life estahleccn cl virus l. IUS mecanisnl(>s de detcnsa del Irtrcspcd . La prinlera barrera delcnsixa firnte al virus cs la integridad dc las supcrhties corporales . Una lrz atratcsadas estas, sc actisan los prinlcros nlccanismos dc defcnsa innrtulitari(ls 11incspccificos o innatr~s, coma cl intcrter6n, las cclulas ascsinas naturalcs iNK) v los nlacr(itagos .

Las cclulas asesinas naturales (NK) poseen propiedades citotoxicas frente a las cclulas infectadas por virus
I,IS NK

Dos Bias despucs dc 1111 .1 intcccoon Ia Se dctcct .l11 cclu actixaclas . Sc ha dclnostrado clue soon unas Lie Los priniipaICS cclulas efcct(n-as frente a lox herpcsx-irus, especiallnentc frente al cironlegalolirus ;:(iM\''I . La aLISCntia o reduction dc la actilidad Lie las cclulas NK to aconrpaliada (ie fin aumento de la susceptibilidad frente .1 las inlccctones por CIMV, coma se obserea en cl sindronlc de Chc(iiak-Higashi N en los stoics beige mutantes . No sc sabc con ccrteza clue moleculas dc la superfine dc las

Receptores viricas de las cclulas hucspcd I

virus virus de la inmunodeficiencia humana (vIH) receptor CD4 tipo de eel . infec . cclulas TH cclulas B muchas cclulas enterocitos muchas cclulas neuronas

Diferentes tipos de infec ion virica

infection initial aguda aguda consecuencias recuperacibn y elimination del virus latencia (virus no infec .) : al reactivarse se producen nuevas particulas viricas persistencia con replicacion continua o intermitente infeccidn lenta persistente ejemplo virus de la gripe, rotavirus virus de la varicelazoster, virus del herpes simple virus de la hepatitis B, virus de Epstein-Barr enferm . d e CreutzfeldJakob, scrapie

CR2 (receptor del virus de Epstein-Barr complemento de tipo 2) virus de la gripe A glicoforina A virus de la gastroenteritis contagiosa rinovirus virus de la polio aminopeptidasa N, CD13 ICAM-1 receptor del virus de la polio (superfamilia de las inmunoglobulinas)

aguda crbnica

Fig . 16 .2 . Los virus se Linen a las cclulas mediante receptores especificos, to clue determina en parte clue tipo de cclulas resultan infectadas .

Fig . 16.3 . Las infecciones viricas pueden scr agudas o crbnicas, y producir consecuencias may diversas .

Intervenci6n de las celulas B y T en la defensa del huesped

celulas infectadas reconocen las celulas NK. Sin embargo, existc una corrclaci6n inccrsa cntrc la cxprcsi6n do molcculas CPH do close I v la actividad citotcixica NK . hate CS un tencinlcno intcrcsantc, Va quc sc sabe quc algunos Virus rcprimen la expresi6n Lie las molcculas (TH dc clasc I, to yuc pucclc constituir una estrategia para escapar al rcconocimicnto porr parte de Las celulas T. EI interferon .f actiVa las celulas NK V SUptrnC un oficaz sistema part dirigir dichas CCIulaIS hacia [as 7Unas dc intccci(Sn v actiVarlas alli . Las celulas NK ,oil tamhicn Into do los principles 111CChado rcs de la citotoxicidad metliacla pcrr celulas F dependiente dc an ticucrpos i ( AW1)A i .

ticmpo Clospucs dc la infection es sufcicntc para quo los ratones qucden protegiclos . A continuaci6n sc explicara el papel yuc c1csempcflan las celulas 11 y T en la lucha contra las inteccioncs \iricas.
POCO

Los anticuerpos y el complemento pueden frenar la diseminacion virica e impedir la reinfeccion

INTERVENC16N DE LAS CELULAS B Y T EN LA DEFENSA DEL HUESPED

La carencia do celulas T hace quo: cl Irttesped sea cxtremadamente susceptible trcntc a Las infcccioncs viricas . Por cicmplo, la intcccion cutinca con cl Virus del herpes simple NHS) do ratones con ausencia congcnita dc time i quc carecen do celulas T nra duras I da lugar a Icsioncs con tcndencia a diseminarse, finalmcnte el virus alcanza cl sistema ncrvioso central, provocando la nxtcrte tlel animal . La transterencia tit celulas T cspecificas cicl VHS

Bases moleculares de los efectos del interferon

celula infectada per ell virus celula no infectada

Los anticuerpos pueden neutralizar la infectividad de los virus AI it progresando la inlecciein, cl sistema inmunitario adaptatiVCr (espccifico,l comienza a responder, V aparecen las celulas T citot6xicas, las celulas T colaboradoras V los anticuerpos antiVirus . Esters anticuerpos constittlVen una do [as principalcs barrcras para cVitar Ia transmisi6n ctel Virus cntrc las celulas N los tejidos, v son especialtncnte importantes para evitar la discminaci6n por via son guinea . En las supcrlicies mucosas se activa la producci6n dc IgA, quc impidc las reinfcccioncs . Se pucden gencrar anticuctpos trente a cualquier protcina virica que se cncucntre en la MULL infectada, aunquo para cl ctnttrol de la intccciim solo son importantcs aqucllos quc cstan diri gidos contra glucoprotcinas cxprcsadas cn la supcrlicic dc los Viriones o dc las celulas infectadas . La innttrnidad mccliacla por anticuerpos pucclc set- do distintos tipos, cuvos mccanismos tans hien son muy diVcrsos . La dctensa trcntc a las particulas viricas librcs depcnde dc la ncutralizaci6n dc la infcctividad, to yuc sc puedc conseguir do ditcrentcs mancras (V. J~rf . 16 .5) . Es probable quc toclos esters mecanisnos tent an importancia in trivn, xa quo: la inycccicin tic anticuerpos monoclonales ncutralizantcs inhihc cficaztncntc la re plicaci6n virica . Es cVidcnte quo : la presencia de anticuerpos circulantes capaccs dc neutralizar of virus es un factor importantc para la prcNenci6n do las rcinteccioncs .

El complemento interviene en la neutralization

production de IFNoo/It

union del IFN a la celula no infectada

el IFN induce la sintesis de 2',5'-oligoadenilato sintetasa sintesis de trinucle6tidos de adenina protein cinasa

de algunos virus libres El complemento tamhicn pucclc daitar la cubierta tic lors Virioncs, prorceso quo sc dcncnnina vir6fsis . AIVunos Virus activ :ui dirccta mcntc las vial clasica V alternativa del complemento> . Sin embargo, se crce clue el ccntnplemento no CS tine dc los principalcs mecanismos dc tlctensa frcntc a los Virus, Va quc los inc1i\idLIOS Coil deficit del complctncttto no mucstran una prcdisposicion espc vial a I :ts intcccioncs viricas graves .

Efectos antiviricos de los anticuerpos fosforilaci6n e inactivation de e1F-2 diana agente solamente anticuerpo anticuerpo + complemento anticuerpo + complemento anticuerpo unido a las celulas infectadas mecanismo bloqueo oe la union a la ca :ula, bloqueo de la periettacion en la celula, bloqueo de la elimination de la cubierta virica lesiones en la cubierta virica, bloqueo receptores del virus lisis de las celulas infectadas, opsonizaci6n para la fagocitosis de los virus recubiertos o de las celulas infectadas citotoxicidad mediada per celulas y dependiente de anticuerpos per parte de celulas NK, macr6fagos y neutr6filos

activaci6n de la endonucleasa degradation ARNm virico

inhibition de la sintesis proteica

virus libre

prevention de la infection virica

I celulas !infectadas per el virus

Fig . 16.4 . La resistencia frente a los virus aparece a las pocas horas de la estimulaci6n per parte del interferon, y dura entre uno y dos dias .

Fig . 16.5 . Los anticuerpos neutralizan el virus o destruyen a las celulas infectadas per el mismo .

inmunidad frente a los virus

Los anticuerpos movilizan al complemento ylo a las celulas efectoras para clue destruyan las celulas infectadas per virus I .rn limcucipoos tambicn mm Cficaccs incCliadores tic la destruc loin do las celulas infcctatfas por los tirus . PtlCdCn ;tctivar cl %istcnla del complemento, ciando lugar a la formation Lie complcios tic ataque a la membrane a la lisis tic [as celulas intcctadas I, cap . 4 ) . Para Clue se produzca este feno rrictio es precise Clue la Cantidad tic antigenos tlricos prescntes en la supcrficic tic la menl bran a sea clcvads 1 aproximadanlcntc ; x 10"Cclula I . I'or CI Cotn trario, ell cl ca%o tic ht ( ; :xiC l4 :\ son SufcicntCS 10' nutlcculas tic IgG para que Ias celUlas NKNC unan a la celula infcctada v la tiestruvan . La unioin a las celulas rccubiertas de It G sc pr oxlucr :t tra\cs de 1~c'!RlII i(11)16 ;~, v dichas celulas Son Cicstruidas ripidamcntc mctiiantc un mcc :uusnlo en cl Clue intersicnen l ;ts per torinas (S.. cap . 10 ) . No cs tacil determiner que importancia tiene cads unot tic cstcts mccanismos in riro . Las I,ruchas n1 ;is alncluventcs en favo t-de la imliortancia do la ( :\I(:1)A provicncn tic cStudios solve cl ctccto protector de los anticuerpos nxtnotIonaICS no ncutralizantcs en los ratoncs . Aunciuc estos antiCucrpos no neutralizan al virus in PIP-0, S1 title ,Oil CdplCCS tic prottcgcr a ratoncs con Cicficit tic (15 tits la inoculation tic grin tics dosis tic virus . ( Fn CStOS CStUdlas SC Utilizan ratoncs con ticficit tic C5 para climinar los cfcctos tic Its componcntes tardios del complemento .)

Las celulas T intervienen de varias formas en la inmunidad frente a los virus

10S

I .as ccltul .ts I cj(r(cn ciivCrs .)s ktin~i(rnc, Cn I,t ill nutnidad ti- CIItt .t virus . I a n1avotria tic Ias rC,huCStas do :ultiCUcrpos So )II tinlo dcpcndicntcs, v prCCis ;u1 la colahooraciotn tic celulas T ( :1)4' para Clue sc produzca la CcnunutaCioin tic Claus v la maduracioin tic la afinidad . Las celulas T (a)4' tanlhicn intcrvicncn en la a(ticaCion tic Ias celulas 1 Citotto>xicas Cl)8 - , asi canto en Ia atun1ulacion VaC tisacihn tic los macrofagos en las zonas Lie infection virica . celulas T citotoxicas CDS' Fl principal Sistcnta tic C i"fanCia trcnte a los virus mcdiado por CcIuLts T CS nit\ Cli(ai t, SClccrico . l,as celulas 'I Citot(ixiCas 0148' rcstringidas por motleculas (TH tic class I sc concciaran en las zonas ell Clue cxistc rcpliCaCion virica y destruven alas Milks illtcctadas . Practic ;mlctac tod ;ts 1 :1s celulas del organisnlo cxpresan molcculas ( :PH tic claw I, pot to title estc mccanismo time gran importancia a Ia hors tic rcconoccr y ticstruir Ias celulas intcctadas por virus. Procesamiento y presentation de las proteinas viricas PracliCanlcntc Cu .thpticr protcina t irict Imcdc wr prooCcsada en cl citotplasma para tlar lut;;tr a peptitlos- yuc a CoIllitlkla(ion Soil transportaclos bast, cl rcticttlo cndotplasmatico, dondc Sc asocian con nlOICCUlas CPI 1 tic claw 1 . Este n1CCanismo CS muv titil para CI tluespcd, ya Clue pertnitc a Ias celulas T rcconoccr ]as proteinas expresadas en Ias primeras tries del ciclo tic replicacioin e iniciar una rcspucsta citotoixica antes tic quo: sc prooduzcan nucvas particulas viricas . Por cictnplo, la rcaccioin innxulitaria finite al (A IV murino mcdisda por celulas T csta dirigicia Contra la protcina pp89, que aparccc muv temprano . Sc ha iticntificado cl epitopo cotrrcspondicntc, yuc ha rCSUltado SCr un pcptidot nonamerico prcscntado potr la n10IcCUla ('I'I 1 de class I l .'' . La inn1unizaCioin tic ratoncs Coat Un ;t vacuna rccomhinantc (]Lie Centime pp89 Conficre una prottcccioin total Creme a Ias cntcrnlcclades pro\ocadas por cl C\iV nntrino ; la dclccioin tic 1 .1 Secuencia tic :\1)N Clue codifica cl notlalteptitlo anula cl clccto protector tic la protein, . La inlportancia in riro tic lots mccanismos depcndicntcs tic celulas T SC ha comprobado mctiiantc Ciivcrsos nlctocios : " La transfcrcncia adoptive tic Subpolbl :ttiones tic celulas f espccificas o tic clones tic iclulas T a animalcs intcctadas, y la subsiguicntC nlonitorizacion tic la climinacio'n tic los virus . " La climinaci611 in rim tic ]as poblacioncs tic celulas T nlcdiantc anticuerpos n1Un0CIOn,1ICS frcntc a ( :144 o ( :1)8 . " La construcci6n tic ratoncs -dctcCtuttsos "" , ell Ion Clue se 11 ;111 eliminado tic la lines germinal genes como los tic ( :1)4, ( :1)8 o la P,-tnicroglohulina . La capacidad para iniciar una respucsta ti-cnte a Ias infecciones viricas de estos ratoncs detectuosos yuc carecen de ciertas poblacioncs linfocitarias es un burn cicmplo tic ht multiplicidad do Caminos tic que clisponc cl sistcnm inmunitario . Por cicnnplo, ante la auscncia tic celulas T ( :1)8', Ias celulas 1' ( :l)4- u otros mccanismots soil capaccs tic cotnlpensar el cictccto v controlar la infection . Las celulas T CD4' pueden ejercer importantes funciones efectoras en las infecciones viricas Las celulas I (144 son una tic Ias principalcs poblaciorncs tic celulas etcctoras que intervicnen en Ias rCSpucstas inmunitarias trcute ;t la jnlcccion de Ias supcrticics cpitclialcs por parte del \'HS-I . En cstc trio Ios nlacr6tagos acudcn a la zona tic la infecci(tn tic la misma forma Clue en el case tic la hipersensihilitlad tic tipo rctardado (v. cap . 26'), to clue time como conSCCUCncia un aunlcnto tic la velctcidad tic eliminaciin del virus . Los macrofagos dcsernpcnan un papcl importantc ell cstc Ictuimcnct (fill. ld .b) . Las principalcs citocinas claw Clue intcr\icncn en cstc proccso son cl IFN7, que actstt los monocitos, 1 . cl factor tic necrosis tumortl (TNF) . TNF posee divcrsas propictiatics antiviricas ; soil parccidas a Ias del IFNy, pero actuan a travcs tic vial ditcrciaes .

Resistencia frente a la infection cutanea por VHS infection con VHS celulas CD4 + tratam . con sensibilizadas con anticuerpos VHS determination del virus en la piel

."__L~ _ sin tratamiento

sin tratamiento

+++

Fig . 16 .6 . Tanto las celulas T CD4' como los macrofagos y el IFN7 ejercen funciones protectoras en las infecciones Cutaneas por VHS . Se obtuvieron celulas T CD4 - a partir de ratones infectadas con VHS 8 dies antes . Se transfirieron a ratones singenicos con infecciones cutaneas por VHS . Se trat6 a algunos de estos ratones con anti-CR3 (para impedir la migration de los macrofagos hacia las zonas infectadas) y a otros con anti-IFN7 (para bloquear la activation de los macrofagos) ; un tercer grupo no fue tratado . Se utilize otro grupo de ratones como control, infectandolos con VHS pero sin transferides celulas T CD4' . A los 5 dias se determine la cantidad de virus infectivo remanente. Los resultados demuestran que los efectos protectores de las celulas T CD4' estan mediados por los macrofagos y per el IFN7.

Estrategias para eludir las defensas inmunitarias

Esquema general : Defensas del huesped frente a las infecciones viricas

opsonizaci6n mediante Fcy y receptores del complemento de Ios macrofagos

interferones

" inhibition de infection de otras celulas

Fig. 16.7 . La penetration de los virus en las superficies mucosas es inhibida poi las IgA. Tras la infection initial, el virus se puede diseminar hacia otros tejidos a traves de las vias sanguineas . Los interferones producidos poi las respuestas inmunitarias innata (IFN l e IFNIi) y adaptativa (IFN,,) inducen resistencia frente al virus en las

celulas vecinas. Los anticuerpos tienen importancia en el control de las particulas viricas libres, mientras que las celulas T y las celulas NK destruyen eficazmente las celulas infectadas . (CMCDA = citotoxicidad mediada poi celulas y dependiente de anticuerpos.)

hi la intcccioin pcrr cl Virus dcl sarampi6n sc prcxiucen celulas T citotuzicas (:1)4 yuC rrr~m~,ccn V destruVcn a las celulas portadoras dc naoleculas (TI I LiC claSC 11 quC SC Cncucntrcn inlcctadas poi el Virus. Esto sugicrc yuC had pcptidos procedentes kid Virus Lid sarampi6n yuC SC gcncran a traves dc las vias normalcs do prcscntaci<in dc antigcnos (cs dccir, mcdiantc fagocitosis V dmradaci('')n: V . cap. 9 i . Sin embargo, tanabicn sc han propucsto que pucdcn cxistir otras vias en las que algttnas protcinas o peptidos pcnctren cn [as Vesiculas citoscilicas de class 11 mediante algun mccanismo dcsconOCidO. En la fgttra 16.-sc inuestra un rcsumen do Ios mecanisntos dc dcfCnsafrcntc a Ios Virus, V cn la ,/igrrra 16 .8 sc indica la cinetica dc la inducci6n de each uno dc cstos mccanismos .

Celulas T citotoxicas CD4*

Respuesta frente a una infection virica aguda tipica

respuesta

ESTRATEGIAS PARA ELUDIR LAS DEFENSAS INMUNITARIAS

Los virus han dcsarrollado discrsas estrategias para cVitar scr rcconocidos poi Ios anticuerpos. La Variaci(')n antigcnica cs su sis tema dctcnsiVo m:is eficaz . Consiste cn inducir la mutacicm dc rcgiones prc~tcicas frcntc a ]as yuC nornaalnactttc cstan dirigidos . los anticuerpos. La Variation anti ;, cnica se observa en cl VI fi s cn la crfcrmcdad boca-pit, y es cl motivo dc [as modifiel Virus dc caciones V dcriVas antigcnicas que se producer Cn CI Virus dc la gripe ~fi,7 . 16 .9}. La inmunidad Immoral frcntc a estas enfcrntedadcs solo pcrsiste hasty que sc genera una nucVa ccpa dc Virus, to qUC hacc dificil Conscguir s:lcunas eficaces que pucdcn actuar a largo plazo . Los anticuerpos pucdcn recubrir s. promm-cr la climinacion dc antigcnos Viricos presents cn la nacmbrana plasmatica . Lstc pucdc scr uno de Ios mccanismos que obliga a algunos Virus a infeCtar a sus hucSPCdCS do f6rnaa exclusivamcnte intracclular . Los

10

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tiempo desde la infection (dias) Fig. 16.8 . Cinetica de las respuestas del huesped en el curso de una respuesta frente a una infection virica aguda tipica . Tras una infection virica aguda, poi ejemplo poi el virus de la gripe o poi un herpesvirus, se pueden detectar en el torrente circulatorio y en los tejidos infectados celulas NK e interferon . A continuation se activan en los ganglios linfaticos locales o en el bazo las celulas T citot6xicas y, finalmente, aparecen en suero anticuerpos neutralizantes . Aunque a las dos o tres semanas se dejan de detectar celulas T activadas, para ese momento ya se han formado celulas T de memoria que persisten durante muchos anos .

Inmunidad frente a los virus

Esquema general: Deriva y cambio antigenico en el virus de la gripe cepas del virus de la gripe A
hemagk,tirtinri

nucleocapside

neuraminidasa w A+PR8 1933-1946

tipo de antigeno

A;'FMI 1947-1956

A'SINGAPUR 1957-1967

AMONG KONG 1968-

Fig. 16.9 . Los principales antigenos cle superficie del virus de la gripe son la hemaglutinina y la neuraminidasa . La hemaglutinina interviene en la union a las celulas, por to que los anticuerpos frente a esta molecula ejercen un efecto protector . Los anticuerpos frente a la neuraminidasa son mucho menos eficaces. El virus de la gripe puede modificar su superficie ligeramente (deriva antigenica) o de una forma mar radical (modification antigenica) . Las modificaciones en la estructura de la hemaglutinina hacen inutiles los anticuerpos previamente existentes, por to que cuando se producers clan lugar a nuevas epidemias de gripe. En el diagrama se muestran las cepas que pan surgiclo como consecuencia de cambios antigenicos desde 1933 . La nomenclatura oficial de los Ag del virus de la gripe se basa en el tipo de hemaglutinina (H , H , etc .) y de neuraminidasa (N~, NZ, etc.) que se expresan en la superficie del virion . Pese a que las nuevas cepas reemplazan a las antiguas, los Ag internos no se modifican.

herpcsvirus f t"HS v C.MV humanol codifican gluurprotcinas Capaces dc uniru: al receptor del tr,gmcnto Fc do Fas It G . Est;t estrarc~ia v- rica pcxiria inrrrfcrir coil la tctiv;uicin dcl complemento v hloyuc ;u' cl etccto do los anticuerpos antivir-iCos . Algunos virus I p . ej ., cl virus dc Epstrin-IBarr v . Ios adcnovirus i pcncen mecanisnt<ts dc defensa prcvitim trente al intertercin, canto la prWuccicin do pcyttciuu trvttcts do AR\ clue compiten hor la protein cinasa c inhihcn cn cicrta forma la acrivacicin do la rnzinr,t . ()tros virus (p . cj ., adcnovirus v ('u1V'1 codifican protcin :ts capaces dc inhihir cl trutsiutrte dc Ias nutlcculas (:I'H dc Claw I pasta la ntenilbrama. l;sta estrategia propctrcicma al virus grander vcntajas, ya que elude el recctnctcimiento por pane dc ]as cclulas T uiorciWas. :al;unos gents viricos codifican contpucsios hont<ilogos a Icn receptetres dc [as citocinas, c incluso a Ias propias citocinas . Dc forma csta ]as iclulas intcctadas secrctan titrntas sc luhlcs dc Ios re ceptcn'cs do I1 .-1 13,'I \I : c IF\y, y pucden altcrar la actividad local de rstas citocinas. El virus do I-:pstcin-Barr codifica un compuesut hctnuilogct dc II . 10 que prescnta una actividad in vitro parccida .t la dc esta tiltima ciUxina . 'hodavia no sc conocc coil detallc la intpcn'tancia yue rienrn in rirn estcn productcx de Ios genes viricos . En Ia iiqura 16 .IOse nwcstra un rcsumcn dc Ios ccnnpucstos homcilogos dc ccnnpctnentes del sistenta inmunitario del huesped axlificados por cl virus .

/ INMUNOPATOLOGIA Las respuestas frente a Ios antigenos viricos pueden causar lesiones tisulares

Lesiones debidas a la formation de inmunocomplejos LOS illmunmcOmtplejos puedm aparecer en 1(),, liquidm cc,rpm,t les o en la superficie dc las cclulas v son cspecialmenre frcatentes durantc las intccciones persistentes o crcinicas, como las yue producen cl V<'afl . o el virus dc la hepatitis R. En presenci ;t dc grander auttidacies dc antigenos de ctrigen viricm Iw :tnticucrpc,s no

Productos viricos que interfieren con las defensas del huesped mecanismo defensivo VEB interferon vacuna vacuna VHS-1 mixomatosis citocinas virus fibromatosis Shope VEB CPH de clase I citomegalovirus murino adenovirus homologo de e1F-2a homologos de las proteinas de control del complemento gE,'gl homologo del receptor de IFNy homologo del receptor de TNF homologo de IL-10 proteins temprana E3 virus producto virico EBERS(pequenosARN) mecanismo bloquea la activation de la protein cinasa impide la fosforilacion de e1F-2u por parte de la protein cinasa bloquea la activation del complemento se une a Fey y bloquea su funcionamiento compite por IFNy, bloquea su funcionamiento compite por TNF, bloquea su funcionamiento reduce la actividad del IFNy impide el transporte de moleculas CPH cargadas con peptidos bloquea el transporte de las moleculas CPH pasta la superficie

complemento

Fig. 16 .10. Los virus utilizan una gran cantidad de estrategias ingeniosas para eludir los mecanismos de defensa del huesped.

Inmunopatologia Soft eficaces (auscncia do: acti\idad neutralizante 1 ; en csos casos so: forman inmunocomplcjos (life sc depositan en los rirloncs o cn los \asos sanguiucos, ctl dondc pro\ocan respucstas inflarnatorias clue ICsionan los tejidos, coma glcnnerulonctritis (\ . cap . 25) . Urta consecurncia patcrl6gica porn fiCCUCIAC tic las intcracciorlCs coil antiCUCrpO% alltl\'irus no ricutrallzaincs cs Ia ingcsti6n dl- los innuulOCCnrrpleios teas Su unicin a los recclitores de Fc do: los nracrt~tagus, Itr yue: potencia la capacidad intccti\a dcl virus . Este tcnlrnleno se obsrr\a en la intecci6n pt>r cl virus del dengue, \- sc considcra Liner do: los nlccanismos sub\acentos a la ficbrc he tnorra ,,ica \ al sindrontc do shock propios do: csta Cntcrnlcdad, en 'tn kluc sr produce una Itiperacti\acicin del sistcma del comple111i'1lti ~-

ear nuC\as particulas \iricas con capacidad intecti\a . 1-:11 la t qu ra 16 .1? so: mucstran ejemplos de virus clue intectan a las Hulas B, las celulas T \ los nlacr6tagos . El virus de inmunodeficiencia humana (VIH/ infecta a las celulas CD4' Id VIH, cl rctro\irtts yuC provoca cl SIDA, cs fin buen cjcntplo do: muchas de las CLICSIIOr1CS contcrltadas crl srccioncs anterioros . La intcccic'm por cl VI H so: caracteriza por fin prolongado pcriodo dl- latrncia, una rcspucsta innnrnitaria incficaz, las Ccnltinuas ITtuttcirmes del virus, la aparicion de ICsiones nourolhgicas \ una tcnccncia a infectar Las Cclulas proccdcntcs do la meciula bsca \ hrs linfocitos f \ . Cap . 21 i . EI VIH penctra en Lls celulas T tras la unicin CntrC una glucoprotcina \irica (gp120) \ ( :l)4 \ dotcrminados rrccptorcs do quirniocinas ;CCR3 y C(AS~ . Este mccanisnlo taunbiin Ic sir\c para prnctrar en los rnacr6tagos \' otras (TA . Ademas, la pc nctracioSn en las celulas yuC prrsccn rrccptcrrcs dl- he so: pucdc \er fa\orccida por la prcscncia do: antiCUCrpos, to clue sugicrc quo: CXiStC una via altcrnati\a para pcnrtrar cn los fagocitos o fill nlecanismo yur Cstinurla la pcnctracion cuando la conccntraciim do ('l)4 cs baja . A continuacioSn se produce fin pcriudo do: latrncia clinica do: duracibn \ariahlc, pcro sirnlpre largo ; ell el :i0% do: h\s pacicntcs la progrcsi6n hacia cl SIDA no SC produce antes do 10 anos . Durantc cste prriodo do: latrncia CS posibIC yue CI VIII se ell Cucntre integrado en el Al)N gen6mico del 1ll1CSpCCI en t6rnla do: pro\irus, sin clue se produzcan terl(')IIICIIOS do: transcription . Hay numrrosos tactorcs yuC pueden drscncadcnar la transcripcibn . Sc ha ohser\ado in vitro yuC tanto cl TNF comp IL 6 prcnnuC\on la produccibn do particulas \iticas intecciosas a partir do: hncas do: celulas l - intectadas . Este Ion('?r11CIIO f,uCdc toner inlportancia in viro, \a gLIC los monocitos dc: his indi\iduos portaciores tic] N'IH ticncicn a liberal- CantidadCS anornlallncntc grandcs tic cstas citocinas ; es posiblr quo: se produzca fill ciclo do: liberaci\rn do: FNI- c II .-6 clue conduzca a fin aunlcnto do la transcripcicin dcl if-us (f%q . 10 . 13) . Esto podria dal- lugar a la infccci6n do: nue\as MUlas, coil la consiguicntc librraci()n do alas cittrcinas . La producci6n do: \irus tarnhien so: \r aurnrntuia in vitro por otras ci tocinas \' linfocinas, por los ntitbgcnos \ por los estcrcs dcl tier hol . La Chrninacibn del \irus 110 CS posiblr dchido a \arias razoncs, Cntrc la% clue se encucntran Su cstado tic latrncia, [as rnutacioncs yuC Czpcrinlenta (clue dan lugar a una rapicia deri\a antigenica ;i Y la progrcsi\a inmunodeficiencia .

Lesiones tisulares mediadas por celulas T FS prol\ahlc yuC Cn ttrdas las it1tCCCItrnCS \iriCas se produzcan ell alguna nICdida ICSltrtres tisul :urs drhido .t la acti\idad do [as celulas'1' . Sin Cmhargo, Cn algunas OCasioncs Cstas ICSiOllCS I,ucdctl see tlltr\ importantes, Ilcgando a prrr\()car la muerte del artinral . El mcjor cjenlplo dl- cstc tenbrrtcno cs la rcspucsta fi-rntc al VCJIL do las Mulls T citot6xicas cn cl sistcma ncr\ioso central (\ . 16.11 i . AI ehrninar la, MUlas T cl animal no rnurre, to yue indica quo: las lesiones cercbrales soft producidas por cstas celulas, \ no por cl propio virus . En cl caso do hl hepatitis cr()niCa actin Iltuttana SC Ita prot,urst<r fin nlecanisrno parccido .

a.

Los virus pueden infectar a las celulas del sistcma inmunitario Algunos virus ip . cj ., cl VI H i intcctan diroctamcruc a Itrs limit citos o a los rnacrotagos, dando lugar a ctcctos patogcnicos . Las MULLS in In unoCCnl1pctrntCS ccnlstitu\cn 1111 Cntorno Csprcialrnonte favorable para la persistencia do: los \irus . C lalldo Ices ICtrcocitos sr encucrttran on cstado do: rrptrso pucdon alojar a los \-irus en una tirrrna no infCCCiosa ; mas adelante, Cuand\r las ccIUlns intectadas so: acti\an cl \irus taml,icn SC pucdr reacti\ar y gcno-

Virus de la coriomeningitis linfocitaria (VCML) en ratones VCML celulas T de fin ciclofosfamida adulto inmunizado
r1 recien nacido

efecto enfermedad por inmunocomplcjos muerte

Infecciones viricas de las celulas inmunocompetentes linfocitos B virus de Epstein-Bare virus del herpes gamma murino virus de la enfermedad infecciosa de la bursa virus linfotr6picos de celulas T humanas de tipos 1 y 2 VIH virus del sarampi6n virus del herpes Saimiri herpesvirus humano tipo 6 virus Visna VIH virus de la lactato deshidrogenasa citomegalovirus

infection persistente

muerte Los efectos del VCML dependen de la situaci6n inmunitaria concreta . La infection de ratones recien nacidos (1) provoca fin estado de portador crenico del virus y enfermedad por inmunocomplcjos, clue se manifiesta en forma de glomerulonefritis y vasculitis . La infection intracerebral de ratones adultos (2) provoca la muerte, por una reaction en la clue estan implicadas las celulas T, ya clue la inmunosupresi6n con ciclofosfamida (3) da lugar a una infection persistente, pero sin clue se produzca la muerte del animal . El efecto protectorn de la ciclofosfamida puede see contrarrestado por celulas T procedentes de fin animal inmunizado (4) .
Fig . 16.11 .

linfocitos T

macr6fagos

Fig . 16.12 . Algunos virus persisten indefinidamente en las celulas inmunocompetentes. Esta infection puede dal- lugar peri6dicamente a fendmenos patol6gicos, clue pueden provocar la muerte de la celula (VIH), o una transformation clue conduce a una neoplasia (virus de Epstein-Bare, HTLV-1) .

Inmunidad frente a los virus

La infeccion virica puede provocar fenomenos autoinmunitarios

Infeccion de los linfocitos y los macrofagos por el VIH

infeccion y penetracion latencia activacion de la transcripcion

l .rrs Virus puc,len dewn ::rdcrr .u- cnlrrmr~ia~ics :urtrrinntuitit .tri,ts dc diVcrsas t'ortmts :

Lesiones inducidas por el virus . l)urantc cl curse do algunas

inlcccioincs \-iricas Ic)s tcjidcis rrNultan danados, to yuc gcttora una respucsta inflam :uririt a Iii dc la coal qucdan al dcsctrhicr to algunas dntigenrrs "uetdters-, tine pucdcn scr proccsados ~' prcscntados al sistcnui innuinitario . Algunos cjcnlplrrs sim CI Vjrus Tlicilcr ( un picornaVirus 1111.16110 i \ la inlcccio'~n del sistcma nerViirsri Can el Virus do la hepatitis inuring, en la yuc lo ,, constituVentes dc la miclina L la sustancia aislantc quc rccul)re los ix() tics i actuan coma dianas para los anticticrpos y [as cclulas '1' .

Fenomenos de similitud molecular. Se produccn cuando la

sc :urn :ia dc una pn>trin:t Cs hinncrkoga a la do una pro tcina ,< 11ro pi a  , la quc prm~rca la dcsaparici6n do la tolcrancia inmunitaria trcntc a detcrininados autoantigenos V Cl consiguicnto ataquc contra tciidos propios por pane del sistcma ininunit :trio i\ . cap. 28). Atmque SC pucden discifiar sistcmas cxpcrintentales quc demucstran quc CSIC mecanismo CS posihle, en la actualidad sc disponc dc n1M' POCas datas yuc indiqucn quc estos tcnrintcnos sc prcrduccn en las intcccioncs Viricas naturalcs .

~Que caracteristicas de los virus les permiten eludir los mecanismos de defensa del huesped? Un nino fue ingresado en el hospital debido a una infeccion diseminada por un herpesvirus . ~Que inmunoterapia se le deberia prescribir? ~Por clue?

Fig. 16 .13. La glucoproteina gp120 de la superficie de los viriones del VIH se une a las molecules CD4 de la membrana de los linfocitos y penetra en ellos. El virus tamben puede penetrar en los macrofagos, que expresan cantidades relativamente pequenas de CD4, fenomeno que se puede ver favorecido por la union a los receptores Fc a traves de una molecula de anticuerpo . El virus permanece en estado de latencia, integrado en el ADN genomico de la celula huesped, hasta que algun estimulo (p. ej ., citocinas) provoca la activacion de la transcripcion . Los virus ensamblados salen a traves de la membrana externa de las celulas T mediante un proceso de gemacion o en las vacuolas intracitoplasmaticas de los macrofagos, en las que se puede Ilegar a acumular una gran cantidad de particulas con capacidad iinfectioa .

LECTURAS ADICIONALES
Borden EG, Rosenzweig IB, Byrne GI Interferons from virus inhibitor to modulator of amino acid and lipid metabolism . Interferon Res Mims CA . Interactions of viruses with the immune system Clin Exp Immunol 1986,66,1-16 . Nash AA, Cambouropoulos P. The immune response to herpes simplex virus . Semin Virol 1993 :4 :181-6, Oldstone MBA- Molecilar mimicry and autoimmune disease Cell 1987 ;50:819-20. Ramsay AJ . A case for cytokines as effector molecules in the resolution of virus infection. Immunol Today 1993,14155 Sissons JG, Oldstone MBA Antibody-mediated destruction of virusinfected cells. Adv Immunol 1980,31 :1 . Smith GA . Virus strategies for evasion of the host response to infection Trends Microbiol 1994 ;2.81-8.

1987 ;7 :591 Chisari FV, Ferrar C F-epatitis B virus immunopathogenesis- Annu Rev Immunol 1995 ;13:29-60 . Clements JE, Gidovin SL, Montelaro RC, et al. Antigenic variation in lentiviral disease. Annu Rev Immunol 1988 ;6 139-59 . Doherty PC, Allan W, Eichelberger M, et ai Roles of u./i1 and 1/6 T cell subsets in viral immunity . Annu Rev lmmunol 1992 :10123-51 . Doherty PC . Cell-mediated cytotoxicity . Cell 1993 :75:607 . Gooding LR Virus proteins that counteract host immune defences . Cell 1992 ;71 :5-7 Levy JA . Pathogenesis o+ human immunodeficiency virus infection . Microbiol Rev 1993 ;57183-289 .

Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

Los mecanismos de proteccion frente a una especie bacteriana se pueden deducir a partir de la estructura del organismo, especialmente de su pared celular, y sus mecanismos de patogenicidad . 2 Los Ab neutralizantes pueden ser suficientes para garantizar la proteccion cuando la patogenicidad del organismo deriva solo de la produccion de una unica toxina o molecula de adherencia . Existen mecanismos de reconocimiento muy antiguos filogeneticamente e inespecificos, que permiten detectar estructuras bacterianas conservadas y que pueden eliminar a la mayoria de las especies bacterianas . Entre ellos se encttentran la fagocitosis, la via alternativa del complemento y la liberacion de citocinas . El complemento puede destruir a algunas bacterias, especialmente a aquellas cuya superficie externa esta formada por una bicapa lipidica (es decir, a las bacterias gramnegativas) . 0 Los fagocitos destruyen a la mayoria de las bacterias mediante tin proceso clue consta de varias fases : quimiotaxis, fijacion, ingestion y destruccion . Los patogenos eficientes hall desarrollado una sorprendente cantidad de sistemas con el fin de conseguir eludir los efectos del complemento y de los fagocitos, asi como para poder confundir a los mecanismos dependientes de celulas T que activan los procesos de fagocitosis . Una liberacion excesiva de citocinas debido a la presencia de microorganismos puede Ilegar a provocar algunas sindromes inmunopatologicos, como, por ejemplo, el shock por endotoxina o la reaccion de Shwartzman . Las lesiones tisulares inmunopatologicas cronicas (como las que se producen en el curso de la tuberculosis) probablemente son consecuencia de tin desequilibrio en la secrecion de las diferentes citocinas, to que acaba desencadenando procesos efectores inadecuados . " La inmunidad frente a los hongos no se ha estudiado a fondo, pero parece estar mediada por celulas y ser parecida a la de las bacterias .

17

INMUNIDAD FRENTE A LAS BACTERIAS

Los mecanismos do tictcrlsa adccuados fi -crac a una bacteria cotncreta dcprnden de la estructura do csta tiltima, \ por tanto dc los mecanismos innntnitarios frente a los que sea sensible: y do sus mecanismos tic patogenicidad .

Hat, cuatro til,tt, hhmilmlcs dc pared celular bacteriana ; i, liq . 1-.1 !, corresponldicntc, a lots siguicnies tipos tic bacterias : " 13acterias granlpttsitius . " Racteri,ts gr,anuacgativas . " ,\licol,actcrias . " Espirocluetas . La bicapa lipidica cxtcrna dc los organismos grananc ;,ativos cs cspccialrnentc importantc, la clue suclc ser sensible a lots mecanismos capaccs tic lisar nacnabran,as, como cal conaplenlento deter rninadas celulas citoto'Ixicas . Por cal contrario, para cicstruir cal rcsto dc los tipos dc bacterias suck ser nccesaria la ingestion por parts dc lots fagocitos . l .a superficie extern, dc una bacteria tambicn pucdc cstar do tada dc finabrias of flagclos, of cncontrarsc rccubicrta tic una capsula protectors . Estas estructuras pucdcn estorbar la labor dc los fagocitos o del complcnlento, auncluc tanlbien SC I,ucdcn contcrtir can dianas do la rcspucsta do anticucrpos ; [as consecucncias do cstos hcchos sc analizaran mss adclantc I;\ . pig . 234 ) .

Los mecanismos inmunitarios dependen de la estructura de la superficie bacteriana

Cm- wreharto-ium diplube'riac a . Vibrio choh rac soil ciciliplos do organisnaos cxclusixanlentc toixicos, sin iapaciclad inxasixa . ( :ona1ct V su patogenicidad dcpcndc casi totaltncnte dc la protduc cion dc toxinas, cs probable clue los anticucrpos ficnte a I ;1 toxi na scan sulicicrucs para garantizar la innTtuliclad, auncluc talbicn pueden tenor importancia los anticucrpos que se Linen a las bacterias c impidcn tic esa forma clue estas sc adllicran al cpitclio . Sin embargo, can la naawria dc lots organismos imasims la patogenicidad net dcpcndc cxclusixanlcntc de una mica toxina, por lo clue el sistcnaa innaunitario debe estar ctpacitado para destruir a los propios orpnisnaon . Las primeras lineas de defensa son mecanismos antibacterianos que no precisan el reconocimiento de tin antigeno I . .u III inlcr .1, lint .u dc do tcns.l lie l itr .lni,nnt ircntc a las t).mcria~ Imtotcuas son mess barrcras yuc impidcn la cntrada tiel tnga nisnlo o la instauracion dc la inicccioin . Asi, la picl y otras supcrticics epitcliales expuestas al nacdict externo posecn sistcnaas protcctorcs inespecificos o innatos que linlitan la entrad .1 tic los organisnlos potencialnacntc incasicos it . Pa . 1 .1 j . l,a mayoria dc las bacterias no soil capaccs tic atrax - tsar la picl intaeta . .~dcmas, Ices acidos gratin clue produce dicha picl soil to~xicos para nauchos organismos . Dc hccho, la patogcnicidaci dc algunas ccpas csta dircctamcntc rclacionada corn sit capacidad para sobrcc is it can la picl . Las superficie, cltiteliales sotn sonnctidas continu .ulacnte a deter minacios procesos dc limpicza, conao> cal clue Ilea a cabo el sistcrna ciliar dc la tracluca of cal ctccto tic arrastrc tic la orina can los conductos urinariots . 91ut ras bacterias soil tlestruidas por cal pH acido tic] cstonaago a . do la s -agina . EI cpitclio x aginal sccrcta gluco')gcno, title es naetabolizado potr deternlinacias especics tic b;tcterias contensales yuc l1roducen acido lactico> . DC una lornla nlas general, los organismos cotncnsalcs pucdcn cx- itar la imasiotn potr parts dc organismots patotgenots mccliantc la produccion dc prottcinas antihacteriar1as dcn(nninadas colicinas . Por cllo, cuando la flora normal sc alicra dcbido a )a administracion do antibionicos sc pucdcn prcxfucir intcccioncs por Candida of Clostridium diffieile . Fn la practica, sol :ualcntC una cantidad nlinirna tic lots otrganisnaots pat( igcnos chic nos rodcan amsigucn acccdcr a los tcjidos .

Los mecanismos inmunitarios dependen de los mecanismos bacterianos de patogenicidad

I .os dtts rxtrcnuu ticntnt tic] cspcctnt tic 11()5iblcs mecanismos patogenlcos scan : " Foxicidad sill invasion . " Im ;isiun sin toxicidad (Aq. 1,-.2) . " Sin embargo, la naaxoria dc las bacterias sc comportan dc una forma intcrnacdia cntrc cstos cxtrcnuts, presentando propicdadcs imasixas r producicndo al mismo ticnapo algunas toxinas o tactores dc discnainacion fcnzimas dcgradantcs tic lots tcjidos i clue actiran a nitrl local .

Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

La segunda linea de defensa depende del reconocimiento de componentes bacterianos muy frecuentes

t'nm cCZ y~lc 1()ti ~n ,misnurs hCnCIrMI Cn lirn tcjid<~s, Inicdcn scr CUnlhatidOS cn prlmCr lugar mcdiantc ()tros componcntcs dcl sis-

tcma inmunitario innato . Ha' numerosos componentes hactciianos que son rcconocidos sin ncccsidad do la intmcncicin do los . receptores espccificos de antigeno de Las celulas H t T. Este tipo do rcconocinticnto csta hasado cn mccanismos do "'a1nlplio cspcctro, mu) antiguos filogeneticamentc, que aparccicron cn cl

Paredes celulares bacterianas

grampositivos gramnegativos capsula o microcapsula* - fimbrias o flagelos LPS* en la membrana lipidica externa glucolipidos* lipoproteina acidos micolicos lipoproteina fib ral s axiale s externa externa micobacterias espiroquetas

Flipoarabinomanano membrana celular peptidoglucano* (mureina)

Fig . 17 .1 . A to largo de la evolution han surgido diferentes mecanismos inmunitarios para destruir la estructura de las paredes bacterianas de los diferentes grupos de bacterias . Todos los tipos de paredes constan de una membrana celular interna y de una pared de peptidoglucano . Las bacterias gramnegativas poseen ademas una bicapa lipidica externa a la que se encuentra amarrado el lipopolisacarido (LIPS) . Las enzimas lisosomicas y la lisozima son activas frente a la capa de peptidoglucano, mientras que las proteinas cationicas y el complemento son eficaces contra la bicapa lipidica externa de las bacterias gramnegativas. La pared bacteriana compuesta de las micobacterias es extraordinariamente resistente, y

es probable que solo pueda ser destruida con la colaboracion de enzimas internas de la propia bacteria . Algunas bacterias poseen tambien fimbrias o flagelos, que pueden constituir dianas para los anticuerpos . Otras poseen una capsula externa que las hate mas resistentes frente a la fagocitosis y el complemento. Los componentes marcados con un asterisco (*) poseen propiedades adyuvantes, es decir, son reconocidos por el sistema inmunitario y actuan como senales inespecificas que amplifican la actividad inmunitaria.

Mecanismos inmunopatogenicos
Fig. 17 .2 . 1) Algunas bacterias provocan enfermedades debido exclusivamente a la production de una toxina (como, Corynebacterium diphteriae o Clostridium tetani) o a su capacidad para unirse a superficies epiteliales, sin necesidad de que invaden los tejidos del huesped (p . ej ., la faringitis producida por estreptococos del grupo A) . La inmunidad frente a este tipo de organismos puede estar garantizada mediante un unico Ab que sea capaz de neutralizar ese mecanismo patogenico esencial . 2) En el otro extremo se encuentran los organismos que no son toxicos, sino que causan las enfermedades invadiendo los tejidos y, en algunas ocasiones, las celulas, siendo debidas las lesiones principalmente a la masa de organismos o a sus propiedades inmunopatologicas (p . ej ., la lepra lepromatosa) . Cuando los organismos invaden las celulas solo pueden ser destruidos y degradados mediante respuestas inmunitarias mediadas por celulas. 3) Muchos organismos se encuentran en una situation intermedia entre estos dos 1 toxina tinica adherencia al epitelio
0

3 invasion

capacidad invasiva y toxicidad local

efectos sistemicos extremos, presentando una cierta capacidad invasiva asociada a una toxicidad local y a la production de determinadas enzimas que degradan la matriz extracelular (p . ej ., Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens) . En estos casos, en Ios procesos de resistencia intervienen tanto los Ab como las respuestas mediadas por celulas .

Inmunidad frente a las bacterial

curse, do Ia e,olucilm antes que Ias Cclulas'I V Ias inntunoglobu linas cspccificas do antigcno, y yuc pcrmiten quc Ios componcntes bacterianos mas fi-ccucntcs descncadcncn dircctamcntc rcspuestas inmunitarias . Probablententc nulchos organisnlos, conto Io% cocos no pathgcnos, son chminados de h,s tcjidos nlediantc cstos mccanismos, sin ncccsidad do yuc sc produzca una respuesta inmunitaria adaptativa cspecifica . En la fiqura 174 sc mucstran algunos do los componcntes bactcrianos que desencadcnan cstc tipo do rcspucstas, asi conic la naturaleza do dichas respuestas . Es intercsantc cl 11CClto do quc la ~ , prueba Lie] Linnllus-, que se emplea para detcctar Ia prcscncia do lipopolisacaridos ( ITS) contalninantcs en productos para utihzacj6nt Itumana, sc hasa en una do est;ts vial do rcconocimiento do un or ,anismo invcrtchrado . Limulus polrphrraus +; cl cangrcio do hcrradura i produce fibrina en prcscncia do canticiaLiCS insignificantcs do LPS, con ht quc rccubrc al agcntc intcccioso portador do ITS.

Las vial de reconocimiento bacteriano independientes de linfocitos dan lugar a diversas consecuencias Activacion del complemento a traves de la via alternativa (v. cap. 4). Esta activacion puedc scr,ir part dcsu- uir .Il unl+>
bacterias gramnegativas. -I'ambicn da lugar a la Iil,cr:tcion do Ios productos quimiotacticos ('3a y ( :5a . Estos induces la contracCio'in do la ntrlsculatura lira \ la dcsgranulacic'm do Io% mastocitos, adcntas do atracr y activar a ION neutr()filos . La consiguicntc lihcracicin do histantina y do leucotricnos i.LTR,) auntcntl aun mas la pcrmcahilitlad vascular liq. 1 7.-11 . l.,t opsoni/aci611 do las bacterias mctliantc la fijacicin do productos dcrivados do la cscisi(in do C3 tamhicn cs inlportantc cn [as %ubsiguicntcs intcracciones Con los fagocitos. tipOs do bacterias, cspccialmcntc aquellas con una bicapa lipidi ca emerna sensible a los contplejos liticos I:C5h-9i, CS Liccir, la ,,

Mecanismo de accion del LPS . Ezlstc una contphCada via Ca_ l,az tic nCutrahzar cl ITS, pcro quc tamhicn pucdc pasarlo a los reccptores hgados a la mcntbrana de Ices leuCOCitos \' l,osil,lcmcntc tamhicn do Ias cclulas endoteliales, activacoo las luncioncs clcctoras adecuadas, segos sc nnlcstra cn la fiwwa 1-3. Se pucdcn reconocer otros componcntes microbianos conscrvados, yuc sc mancjan del mismo nx,do.

Quimiotaxis . Este fendmeno atrac m:is lagocitos hacia la zona tic i+ltcccicin. PnCdC scr dchido a la activacion del cl,mplcntentr, ~+ A lin CfcCto5 grljlll1otaCtiCOS dlrectos do algunos produ,:(()s bac iCl'Lln4 ri . Liberacion de citocinas a partir de los macrofagos. I .t rapid.t hhcraciun sic citocinas omlu, cl tactor tic necrosis tumoral I NF,~ r\ Ia intcrlcucina I 11, 1 ) .a partir de ION ntacrotagos induce la aCtiv;tCion sistcmica tic Ias cclulas fagociticas V laCilita su adhesion al

Efectos del LPS

particulas lipoproteicas

J\
bacterias gramnegativas

LBP

neutralizaci6n del LPS

de LPS LBP \tip

LBP

CD14sLPS

via de activacion celular

neutr6filo

transferencia de LPS

activacion de la respuesta de fase aguda higado

activacion de cclulas endoteliales se puede transferir el LPS del complejo LPS-CD14s a esta forma de membrana . Posteriormente el complejo LPS-CD14m, junto con otros factores unidos a la membrana, transduce senales, quc aumentan la expresion de las integrinas (moleculas de adherencia) y facilita la liberaci6n de TNFu e IL-1, con la consiguiente activacion de las cclulas endoteliales e inicio de la respuesta de fase aguda a nivel hepatico, entre cuyos productos se encuentra la propia LBP.

Fig. 17 .3 . El LPS liberado por las bacterias gramnegativas se use con CD14 soluble (CD14s) y con particulas de lipoproteina en el plasma . Estas interacciones son catalizadas por una proteina que transfiere lipidos, tamhicn denominada proteina ligadora de LPS o LBP. La union con la lipoproteina neutraliza al LPS, pero la union con CD14s inicia la activacion celular, para to cual existe una forma de CD14 como proteina de membrana ligada a GPI (CD14m) en la superficie de los neutrdfilos y los macrofagos, de modo quc

 Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

Mecanismos protectores en los que no intervienen celulas B ni T especificas de antigeno

histamine

aumento de la permeabilidad vascular

quimiotaxis

polianiones lipoproteinas acido lipoleicoico lipoarabinomanano lipopolisacarido formil peptidos muramil peptidos peptidoglucano

activacion de los fagocitos

IL-12 TNF

adherencia de los fagocitos citocinas , activacion del endotelio

Fig. 17 .4 . Algunos componentes muy frecuentes de las bacterias son reconocidos por molecules sericas o por receptores celulares, to que active la via alternativa del complemento (factores C3, B, D y P), con la consiguiente liberacion de C3a y C5a; la activacion de los neutrofilos, los macrofagos y las celulas NK ; la liberacion de citocinas ; la desgranulacion de los mastocitos, que provoca tin

aumento del flujo sanguineo en la red capilar local; tin aumento de la adherencia de las celulas y de la fibrina a las celulas endoteliales . Estos mecanismos, junto con las lesiones tisulares producidas por las bacterias, pueden activar el sistema de coagulation y la formation de fibrina, con la consiguiente reduction de la diseminacion bacteriana .

endo)teljo, con lo yue .uucnta CI dCCrso LIr Cstas celulas haCia CI tcjido inflantado . Fambicn so: libcran micntbros dc una fsurtilia do pcqucnos peptidos yuimioticticos denominaclos -quimiocinas, quo: estinutlan la nto)ilidad global do I,ts celulas (s -. cap. S 1 . Liberation de citocinas a partir de las celulas asesinas naturales (NK) . ( :u .u111() IC cstinlulan Cclulas \l; ntliriIMs Coil A 11 .-12 () T\F, sc 1)r()dUCC 1 .1 lil)rratio)n oic intcrtcroim su )CZ, cstC p(lCde aCtiXar .t Ins macrOLagos . Fate )ja illdcl)Cn dicntc dc celulas l pcrmitc csplicar la incsl)cr :ttl ;t rcsistcncia do Ion stoics S( : 11) (illmunodcficicncia combinada grave, till defecto tic la ntaduracicm tic los linfi)citos') frcntc a algunas infcccioncs, C()ns) las producidas poor Nstrria monruaforicnrs . Efectos adyuvantes . FI tcrntino adtu) .uttC proccdc del latin ndirrr')7rc- , yuC yuICYC LICCir atudar. Las rcspucstts mcdiadas por Cclulas 1 c 11, ti -Cnte a los antigcnos solubICS administracios expcrintcnttlntcntc Son nuis intensas Cu :utdo cstos antigcnos sc administran ntczclados con tontponcntcs bactehanos yuC acttian coin)) ads- mantes . Fit la (i)lm-17 1,'.1 SC ntucstran(li)crsas sultan CidS yuC I)OSCCI1 Csta 1)rc)l)iCLIdd . El ads u) .u)tc do laboratorio ntcjor conocido es el deno)minado) Lit tl\.utte ContpICto do hrcund, qUC Col1SiStC en una suspension olcosa dc celulas inacti\adlS de .11rcobarfcr*ixnt fubcri 111n~iS, t- (]tic SC utilize torlnando una mull lion coil la solucicm atuosa do :uuigcno . Probablcntcntc cste ctccto rcflcja cl hccho do clue Las rcspucstas innttutitarias CsPcCiticas dc antigcno hall Cvolucionado en till cntorno tisular yuC contcnia prcviantentc estos componentcs bactcrlanos tarmaco

logicamentc adios. La rcspucsta ficntc a till antigeno bacteriano imectado ell tbrlna pure, sin componentes bactcrianos con propicdadcs id)ut .ultCS, SC puCde CollSIdCrar una situaCion arti ficial que no) SC proxiUCC CH la naturaleza . Seleccion de la respuesta linfocitaria adecuada . I .os cont-act Mantes> l)outCntcs (IC la, f)aCtcriaS t . la Ill)CraCl)1lt prccoz dc ci lo clilas soil Ios factorcs mas lml)ortalttcti c11 CStc .Itillccto) . (.dada tipo) dc l)actcria CJCl-CC sus I)rillCil)a1CS cICCU)s adt Lit .uttes sollre ditcl'ClttCS CICmCntos CICI siStcnla inlnunitario). Fsto pucdc scr dcbido a quC Cn I)rinlCr lugar cstc sistcnta dcl)e <clasificar taxononticantcntC ,, al organisms), tic forma title I)uCda poncr en marclta las lilncioncs cfccton -,is adccuaclas . La lil)craci()n tic citocinas per parte dc las bacterias tanthicn I)UCdC tencr importancia en esta fast de decision, coma sC czl)lica m;is tictalladantcntc cn cl capitulo 11 . Seleccion de respuestas inadecuadas. AIgunc)S nticroorga nisnWa l)uedell utiliiar Slls I)r()I)icdldC, adtmantes pare dirigir la lCSI)ucsta iniminitaria cn una direction CCIuj)ocada. 1:s e)idente yuc la csisrcncia do propicdades atl\ Ll\,uttO se dCl)C .1 till pl-()CCS() atlaptatiso dcl hucsprti . Sin embargo, alg,unos microorganismos 1)uCLIClt utilizer este fenomeno pare alterar la inntunorregulaci(in, inducicndo la aCtn-aCioll CIC una subpoblacii)n inadccuada do cclulas I cola boradoras Ti l I . La cxistcncia dc cstc fcnomcno sc ha ticntostradu Cn till modclo de inleccio')n de ratones con cl protozoa) parasite) Lcishmania major. Fn cstc modclo, la activacion tic las CcluLts'FI12 conduce a la mucrtc del animal, micntras yue la acti\acion do las celulas htll conficrc protccciom total (v-. cap. 18i.

Inmunidad frente a las bacterias

Cuando la lihcraci(in dc citocinas cs subita t . mask a sc pucdcn producir diterentcs sindromcs agudos asOCIados a ICSiOlICS tiSUlareS, algunos dc: Ios CLINICS pucdcn rcSultar tatalcs .
Sindromes de shock.

Los anticuerpos proporcionan un mecanismo protector especifico de antigeno I .a importancia dc Las intcraccioncs cnlrc Lts bacterias ~ Ios :utticucrpos con resl)ccto a la protcccion c1cl huesped depends del mecanismo do patogcnicidad. Esta claro quc los anticucrpos c1cscrni)Cnan un papcl CscnCial en las rcspttestas firntc a las toxinas bactcrianas . \cutralizan la toxina difterica impidicndo quc SC una :t sus ccltdas diana . Dc la misma forma pucdcn bloqucar toxinas quc actitan a niscl local cnzimas dcgradantCS dC la matrix C.x tracclular f quc Sc Contportan como a,,cntcs promotorcs do la diseminaci(in i, as] conirr intertrrir cn la mersilidad unicndosc a Ios flagclos . Una funcion jmp0rtantC quC suck scr Ilcsada a cabo pcrr la IgA de sccrccion ii IgAs, s . cap. 31 CS jmpccijr la uni(Sn cntrc las bacterias t [as celulas epitcliales dc las supcrficics externas s- nulcosas. Por cjcniplo, los anticucrpos fircntc a las proteinas 41 do Ios cstrcptOCOCOS CIcl gr- trpo A conficrcn innurnidad espccifica sic tipo trcntc a la taringitis cstrcptococica . I'ambien cs probable quc al-

gunos anticucrpos dirigidos contra la superficie bacteriana scan capaccs dc bluqucar dctcrntinadas tuncioncs cscncialcs dcl o>rganismo, C0111o la uni(in a CtlmpnCJt05 transportadorcs sic hjcrro o la in gcstit'm dc nurricntns (fiq. 1,-.5). Sin embargo, la funci6n mas importantc dc Ios anticucrpos en las respuc,,tas inntunitarias frcntc a [as bacterias que not pro duccn toxinas cs dirigir al complemento para clue actuc contra cllas. Incluso Ios organismos capaces dc rcsistir la %ta alternatixa i innata ; \ . 111 .1", adclantc ) suft- en Icsioncs inducidas por cl complownto cn presencia dc anticucrpos, o al mcnos quedan recubicrtas con producers dc C'3 quc tacilitan la tijacioin y la ingestion pcrr parts dc Ios tagocitos ' ftgs. 1'.6 \ 1 -. :'}. Los antICUCI- 110S ciuc lijan cl complemento con mas cficacia cn Ios scrcs humanos son IgCil, IgCr3 C IvNI . ],as clascs dc inntunoglobtdinas quC I- CSCntan motor atinidad por Ios receptores tic Fc son IgUI C I"G3 .

Efectos de los Ab y el complemento sobre la velocidad de eliminacion de bacterias virulentas de la sangre supervi- 100 vencia de las bacterias 10

bactenas no recubiertas

inmunidad innata

Funciones antibacterianas de los anticuerpos anticuerpos frente a las fimbrias, los acidos lipoteicoicos y algunas capsulas los Ab induces lesiones mediadas por el complem. en las bicapas lipidicas externas de bacterias gramnegativas ~los Ab frente a las proteinas M y las capsulas facilitan la opsonizacion a traves de los receptoresi de Fc y C3 los Ab bloquean mecanis. de trans orte receptores (p. ej ., Payra lot compuestos quelantes de hierro) 1
L-

bacterias recubiertas de Ab en ratones con deficit del complemento

inmunidad adaptativa

bacterias _ Z recubiertas de Ab ratones horas normales on

4~6

proliferacion de organismos

los anticuerpos evasion de celulas` neutralizan los agentes fagociticas inmunorrepelentes - i

Fig. 17 .6 . Las bacterias no recubiertas de anticuerpos son fagocitadas con bastante lentitud (a no set que se trate de una cepa concreta capaz de activar la via alternativa del complemento) ; una vex recubiertas, la adherencia a los fagocitos aumenta considerablemente . Esta adherencia es algo menos acusada en los animales privados temporalmente de complemento.

Interacciones entre las bacterias y las celulas fagociticas bacteria C3b iC3b iC3b MBP anticuerpo oligosacaridos lectinas CR1 ~ CR3 p150 .95 C1gR receptor de Fc lectinas oligosacaridos fagocito

los anticuerpos frente alastoxinas las neutralizan

los anticuerpos neutralizan Ios factores toxicas - , invasivas~ y enzimas de diseminacion (p . ej., hialuronidasa)

I
i

-,;

Fig. 17 .5 . En este diagrama se enumeran las fases del proceso de invasion bacteriana (azul) y los efectos antibacterianos de los anticuerpos (amarillo) en cada una de esas fases. Los anticuerpos frente a las fimbrias, el acido lipoteicoico y algunas capsulas impiden la union de la bacteria a las membranas de las celulas huesped. Los anticuerpos induces lesiones mediadas por el complemento en la bicapa lipidica externa de las bacterias gramnegativas. Los anticuerpos bloquean directamente proteinas de la superficie bacteriana encargadas de captar y transportar hasta el interior de la bacteria moleculas beneficiosas para la misma. Los anticuerpos frente a las proteinas M y las capsulas opsonizan a las bacterias y facilitan su fagocitosis mediante receptores de Fc y C3 . edemas pueden neutralizar los factores bacterianos que interfieren con la quimiotaxis o con la fagocitosis . Las toxinas bacteriana", pueden ser neutralizadas por anticuerpos, al igual que los factores de diseminacion que facilitan la invasion (p. ej ., destruyendo el tejido conjuntivo o la fibrina) .

Fig. 17 .7 . Existen diversas moleculas que facilitan la union de los organismos a la membrana del fagocito . La ingestion y la iniciacion de los mecanismo", destructores adecuados dependen de la naturaleza exacta de la union. Observese que con la excepcion del complemento, los anticuerpos y la proteina fijadora de manosa (MBP), que son moleculas procedentes del huesped que se unen a la superficie bacteriana, los demas componentes son moleculas constitutivas de las propias bacterias.

I11f11Ufliclad

frente a las bacterias y los hongos

Las bacterias patogenas pueden eludir los efectos nocivos del complemento All-'1111,1N cal,sulas baCtcrianas actic,ul nlu\ dchilmCntc la tja al ICrn :IMA Llul . 1,78'} . Adcncas, LIS largas tadcnas lateralcs fantigc nor () ) del ITS bactcrian(r pucdcn fijar ( .3t) a una distancia dc la bicapa lipidica denlasiado grande coin( para Clue puccla pacer d ;ciur alguno a Csta ultiml . De la misnla forma, los organismos granlncgatisos con supcrticic lisa i hsschcrichia coli, Salmonella spp., RscudontortIISSpp .) Sc trnCII al complcjo litico ( :Sb- ('9, pcro sc dcsprcndcn rapidanlcrnc del nlisnlo . ( )tros organismos imitan los nlccanisnlos yuc inlpidcn la tiestruCCion tie las celulas del hucspcd por cl contplenlento . ( :uando ('311 SC unc a una superficic pucdc intcraccionar con cl factor B,

anlplificando~ aun nlas la acticacicin tic ( :3, o pucdC scr inactk-a(to por los tactores H o I . Parccc quo: capsular quc conticncn grantics cantidacics do acido sialico {tomo las mcnlhranas cclularcs clel hucspcd ;I pronnUCtcn csta intcraccion con H c I . Ncisscria IIII'll inaitidis, li. coli KI' los cstrcptococos ciel grupo B rcsistcn to% efectos del complemento dc Csta forma . La proteina 11 tic los cstreptococos del grupo A actua conlo aceptor del ftctor 11, con to Clue SC potCnCia la disociation tic ( : ;1113 . Estas hacterias tanlbien po5CCr1 url gen Clue codifica tma (:5a proteasa .
] .is

Formas de evitar lesiones mediadas por complemento complemento ~;rn activacinr'r

La mayoria de las bacterias son destruidas finalmente por los fagocitos ( .onto Sc ha indicado anterioornlentt . llgwn,ls hattcrias, s  hre todo gr;urtnc ,,atjsas, son dcstruidas djrCCtarllCntC por cl sistenl,I tic] conlplcrncnto . Tanlhicn cxistcn datos yuc indican Clue algunos organismos, fundanlcntclntcntc granutcgatitos, hucdcn scr cicstruidos por Cl nlcro Contact( Coil celulas NK, o inCILINO Coil celulas 1 citot6xicas f 7 ( i . Probablenlentc, los mecanismos inductorcs dc la lisis dc nlenrbranas con yuc estate dotadas estas celulas i\ . cap . I I 1 cjcrccn su &cto sohrc la bicapa lipidica cxTCr'na tie los organismos granlnegatn'os ell cstc proccso . Sin embargo, La mayoria tie ]as bacterias son destrnrdas por los fagocitos . Este proccso consta dc carias Eases (\ .. .hit. 1 .15) . QuimiOtaxt's . L (s . t( -r ill><> mitC . 1 atteri ;uu s umxr t-ulct - Loth Plic i yuc cs quinliotactico para Ios Icucocitosl, los productts del conlplenlcnto corno (-:5a v las yuimiocinas \ citocinas libcradas a nicC1 local atracn a I()s fag()ciros I\, cap . 51 . Union del fagocito al organismo. Esta CS una intcraccion impon - tante dr la yuc pucdc dcpcnder si ;t continuacjou se produce la ingestion, si tiur :uttc la nlisllln se pollen en nlarcha Its [liecanisntos dcstl-uctilos . La union SC pucdc Cstableccr por medio dc .Is SiguicntCS nroleculas : ] " I,ectinas presentes ell el organismo, conlo por cjcnlplo la Iectina fijadora de nlanosa dc las linlbrias dc E . coli. " Lectinas presentes en el fagocito . p.n cste scntido soil cspc cialntentc inlportantes Ices rcccptorcs tie] complenlrnto ( :R3 y p150 .95, asi conlo la nlolecula rclacionlada I .NA-I ((antigeno Icucorcitario flrncional 1, un ntediador do la adllcrcncia intercelularl, Clue prcscnta multiples puntos do union para ditcrcntes sustitucrCntes carbollidratados . Tocias estas nlolcculas sc uncn a Ices P-glucanos o al ITS o endotoxina de las bacterias granlnegatil as . Conlpletnento dcpositado sobre el organismo nlccijantc la via clasica (r la alternatica . Rccicnicrncntc sc ha dcscuhicrto yuc Cl conlplcnlcnto tanlhien sc pucdc unir a la protcina tija flora dc nlanano prcscntc ell CI sucro, Clue a su s -ez prcscnta afinidad porr to ,, rcccptorcs tic ( .Iq . Receptores de Fc sobre el fagocito, yuc SC uncn a los antiCuCrp(rs fijados a Las bacterias i t . .tiq . 17.,?) . Inicio de la ingestion . l a uni()Il (let organisnlo a un receptor dc la mcnthrana del ncacroftgor no sicnlhrC c0nt1CSd su ingcstj(in . Por cjcmplo, las particular dc zinlosan (proccdcntcs tic let'adttras,l sc: linen :1 los rnacrotagos a tralcs dc una region tipo Icctina pertencciente a ( :1(3 r capaz dc reconoccr glucanos, sicndo ingeridas a contjrlnacl(lrl, micntras Clue en cl caso dc los critrocitos re cuNcrtos coil i( :3h no OCUrrC to n1ISnlo, aunyue I( .J11 tutlhien SC unc a CR3 . Inicio de la actividad antimicrobiana . AI igual Clue la union dc un organisnlo a ton rcccptorcs tic nlcnlbrana no inlplica yuc sea ingerido, ,it ingestion t :ullpoco garantiza Clue se cicscncacicncn Io% corrcspondientcs nlccanisntos cicstructorcs . Por cjenll)lo, losinia pscudotubcrculosis induce Su propia ingestion, pcro cl producto de tulo dc sus genCS nloniula las uila1CS gcncradas durantc la in gcstioin dc tae forma yuc no sc inicia cl proccso dcstructito .

capsula : :iu : .urn : :a pared celular

ausencia de union a la membrana

Alllllhhl~ d1&h~ -146- 14"

secreci6 , dcr proteinas Clue acturir , :cmin ,;enuelos

1

Fig . 17 .8. Las bacterias evitan los efectos nocivos del complemento de diversas maneras . 1) Mediante una capsula o cubierta externa Clue impide Clue se active el complemento . 2) La superficie externa puede estar dispuesta de tae forma Clue los receptores de complemento de los fagocitos no puedan acceder al C3b fijado previamente . 3) Pueden expresar estructuras superficiales Clue impiden la union a la membrana de los complejos liticos (CAM) . 4) Pueden existir enzimas unidas a la membrana capaces de degradar el complemento fijado o de hater Clue se desprenda de la misma . 5) La membrana externa puede see resistente a la insertion de los complejos liticos . 6) Pueden secretar proteinas Clue actuan como senuelos y hacen Clue el complemento se deposite sobre ellas, y no sobre la bacteria .

Inmunidad frente a las bacterial

Las celulas fagociticas estan dotadas de multiples mecanismos antibacterianos

so Unit tci qec un (trganisnut ha xido ill"Clid() 1101 - LM ntctido a una seric etc proexsos yuc ficncn per objcto su liCSe'tlCCi(in . Algunos mecanismos destructivos estan mediados por el oxigeno Compuestos reactivos del oxigeno (CRO). Fsta t i .t sC basa cn una cnzirna prcscnte en la ntentbneta dc I(ts tagocit(  title rcducc cl oxigeno (0 ~ a ani6n supcr(rxid(r C " (, ), un ('1() con propicdadcs uixic;ts . A su s'ez, CI suprr<ixido genera otros ( :R() (fq. 1'.9). Las celulas tic los pacicntes con cntcrntcdad grantdo matosa cronica carecen dc cstc mccanisnto, por to yuC II() Soll Ca paces dc dcstruir algunos microorganisntos i,`~ . ~!rl . 21 .16 ; . Ia cnfermcdatt sc caractcriza por la aparici6n do Icsicmcs intlamatorias cronicas en las clue SC CnCUCntran implicados organismos piogcnos, corno los cstafilococcrs . En presencia do peroxidasa, csta via condtlCC :t In produCCi(in tic COMPUCSCos toxicos parccidos a los quc Contiene la Icjia I't1f 1 .'.91; por cllo los ntonocitos dc Ios inditiduos coil deficit dc miclopcrozidasa pueden prcscntar una ac-

tixidad antirnicrohi,uta rcducida . Los macrofagos tisularcs no conticncn peroxidasa, por to quc cn cllos no sc producer las rcacciones en las clue inter icnc csta cnzirna. Compuestos reactivos del nitrogeno (CRN). :1 tras es dc csta cia ~f(rf . 171f1 i sC gCncra oxido nitrico l \()1, yuc Cs t(ixlco para Lis hactcrias . Ias celulas tum(rralcs . Para quc cstc mccanismo sc aCtixe (iptimamcntc, los macrofagos dchcn SCI- cs6mul.tdos por IF\y ell prcscncia dc T\F, sicndo este ultimo i( :rmpuCSt(t cl quc dcscncidcna la reacci6n . Este pucdc scr cl mccanismo yuc permitC a los rnacr6tagos merinos dcstruir las rnic(~bactchas, micntras yuc rcsulta macho mas difiCil c(mseguir quc los macr(itagos humanos produzcan cantidatics significatitas dc N() v para conscguirlo sc ncccsitan n1UChos CSCimtrIOS, corno la cxl)osici()it a citocinas c cl entrccruz:unicnto tic ('D23, un receptor de IgE . !siediante innttmohistoquimica SC pucdc cicmostrar tiuc a xcccs los macrofagos present" en locos inflamatorios humanos produccn la sintasa del oxido nitrico inducihlc \()Si), pcro prcscntan I isclcs nttlt bajos dc tctrahidrohioptcrina, un cofactor Cscncial cn la lin'nttcion (ic N().

Actividad antimicrobiana dependiente del oxigeno 1. independiente de peroxidasa Fig . 17 .9 . 1) Una enzima de la membrana del fagosoma reduce el oxigeno a anion superoxido ( " OZ ) . Este anion puede dar lugar a radicales hidroxilo (-OH), oxigeno singlete (Ag O,) y peroxido de hidrogeno (H z0)todos ellos potencialmente toxicos. La fusion lisosomica no es necesaria para que se produzcan estas reacciones, sino que estas se producer espontaneamente tras la formation del fagosoma . 2) Cuando se produce la fusion lisosomica, la mieloperoxidasa puede penetrar en el fagosoma . La mieloperoxidasa (o en algunas ocasiones la catalasa de los peroxisomas) ejerce sus efectos sobre los peroxidos en presencia de haluros (sobre todo yoduro) . Como consecuencia se generan mas agentes oxidantes toxicos, corno los hipohaluros (HI0, HCIO) .

catalasa procedente de los peroxisomas

La via del oxido nitrico

1
" E- ----L

2 ----L: j TNF Fig. 17 .10. La oxido nitrico sintetasa inducible (NOSi) cataliza la reaction entre el oxigeno y el nitrogeno guanidinico de la L-arginina, en la que se produce oxido nitrico, on producto toxico para las bacterial y las celulas tumorales. La toxicidad puede aumentar por las interacciones entre los productos de la reduction de oxigeno, con formation de peroxinitritos . Para esta reaction es necesario el cofactor tetrahidrobiopterina . El IWe murino activa la via (1), y la sectrencia de reacciones es desencadenada por el TNF (2). Los estimulos que determinan la liberation de NO en los macrofagos humanos son mas complicados y suelen implicar enlaces cruzados del CD23 de membrana . En ocasiones los macrofagos humanos pueden expresar NOSi, pero contienen escasa tetrahidrobiopterina, de forma que una liberation maxima de NO puede exigir interacciones con otros tipos celulares .

IFNy4MML-

oxido nitrico

IONS con tetrahidrobiopter ni

Inmunidad frente a las bacterias y los bongos

Los mecanismos destructivos independientes del oxigeno tambien pueden ser importantes PUC(IC que Catos mecanismos scan ntis inlpon - cantcs do to yuc SC pcnso cn un principioe . Las cclulas prOCCdcntrs dC indisi(luos con cnlernlCdad granulonlatosa croinica o dc pacicntcs con deficit dc mieloperoxidasa son capaces de dCStl- tllr a IIILICha5 organismos, aun(1uc Cstas CCIuLts no PLICCcn producir conlpucstos rcactisos

del oxigeno o) acidos Ilipollalosos, rCSpcctis anlentc . Partc dc csta actin idad PUCCIC scr dcbida al NO, pCl-o ha% n1tlchos organismos quc tambien son dcstruidos cn condiciones anacrohicas, to que indica clue Cxistcn otros MCCanisnlos adicionaICS . Sc conoccn algunos Lie cllos . Proteinas cationicas con propiedades antibidticas. Las detensilla, soil peptidos cationicos dc 30 ; ; .ullin(ricidos ricos cn cisteina s, argjnina, que SC hall (iCtCCtad() cn nlacrolap,s dc conejo y cn polinl(erlulludcarcs ncutreifilos lulnlanols, cn los quc Constitus Cn CI 30-5W., de I:ts promnas que contiClICn los granulos . Dan lugar a la formacion dc canales ionicos cn las hicapas lipidicas. Su cfectis idad es maxima a pf 1 7,0, por to clue cs prohahle quc actucn en Las fasts innlcdiatanlentc posteriolrCs a la tormacioin del fagolisosonla, antes de clue Su contenido se acidifique 1hq . 1711) . las detcnsinas dcstrutcn organismos nluc di\crsos, entrc los quc SC Cnc(rcntran .1tap1?rlocociusaun-rrs, Rscuduninnasaerarginosa, F. odi. C;Yptococcus noi in-mans y el virus rccuhicrtoo del 11CI-PCS simple . l .znthien exisicn protcinas cationicas con o tros pI I optinlos, como la catCpsina G . la azurocidina, anlhas rclacionadas con la clastasa s, actisas fi-cnte a bacterias grantnegativas ; su actividad antimicrohiana no time rclacicin AL una nom su actisi(ia(1 Cnzinl :itica . Otros mecanismos antimicrobianos. 'bras la fusion lisos(inlica sc produce una clcvacion pasajcra del pH antes dc que sc produrca la acidification Idisnlinuci6n del pH' del contenido del fagolisoson1a . FSto secede ell cl plaza dc 10-15 minutos . La den truccion dc algunos organismos pucdc scr dcbida a la propia acidificaci6n, aungUC cs nlis probable quc cstc rclacionada con el hajo pl I optimo dc algtmas MAIMS liSOSanIaICS . Cicrtos organismos granlpositis ols pueden scr (1CStl- Llid0S [101' la lisazilna, clue cs actisa f -cnte a la capa de pcptidoglucano Cspucsta en la superficic do estos organismos . Sc ha propuesto que otras sustancias, como la lactoferrina (producto do los polinlorfbnuclearcs ncutrofil(nl, tanlhicn inters icncn ell los proccsos dcstructis -os . I .a lactoferrina Sc Line al hierro c impide clue pucda scr captado por [as bacterias, in CIUSO a pH acido .;por cllo la actisidad antibactcriana de los polimorfonuclcarcs dcsaparccc cuando Sc aportan grandcs cantidades de hierro j . Fs posihlc clue tiara clue actucn toxios cstos mccanismos sea prccisa la fusion l.igolisos(inlica (hqs . 1 .7.11 1,7.12) .

Mecanismos que intervienen en la destruccidn de las bacterias

2 pH 7,0 exposicion al anion superoxido durante la fagocitosis CRO

proteinas cationicas
I

enzimas lisosomicas

Fig. 17 .11. Durante el proceso de fagocitosis tiene lugar una

exposicion inmediata a compuestos reactivos del oxigeno (CRO) (1), to cual a su vex provoca una elevation pasajera del pH, periodo durante el cual las proteinas cationicas acttian con mayor eficacia (2). AI reducirse mas tarde el pH, debido al bombeo de iones H` hacia el interior del fagolisosoma, las enzimas lisosomales con pH optimos bajos van siendo cada vez mas eficaces . La lactoferrina forma complejos con el hierro libre, pudiendo actuar tanto a pH alcalino como acido .

La actnacte?n si producc tra` la cxpoKlcl(~Il .1 lets 1,roductoes fill crohianos \ .1 Los hntiocinas prooicdcntcN dc Lls cclulas T. 1)e la misnla lin - nla, la inactjs- acion quc Se obscrsa cuando las cclulas Soil cultivadas durante una scnlana sc pucdc contrarrestar mediantc los agentes estinlulantcs adccuad0S lhq . 1 -. 13) . Algunos productos microbianos pueden activar a los macrofagos sin que sea necesario el reconocimiento por parte de los linfocitos Fsistcn dix - erues productos Inicrohianos clue pucden activar dircctanlenrc a los monocitos v los macrofagos, o activarlos indircctamcntc promoviendo la liberation dc citocinas por parte dc cllos nlismos o cie Lts cclulas NK . A coil tinttaCioll, Cstas Cito cinas actkan a los tagocitos . F.sto va sc comcnt6 antcriormente lp g . 231 I, cuando se explic() cl reconocimiento de las bacterias no dcpcndicntc dc fnlbcitos . Para clue loos faL'ocitos sC acticcn toet .llnlente Sl1CICr1 SCI_ necesarias las llrlf(1tlnaS que lihcran Ian cclulas I cn el cursor de las rcspucstas in vivo. La linfocina clue participa mas activamente en estc proceso cs cl IFN-;- clue estjmula tanto los mccanismos destructi vos dependicntcs dc oxigeno como los clue no to son . Tanlhicn

Los macrofagos en reposo pueden destruir organismos, pero estos procesos destructivos pueden ser potenciados, activandose nuevos mecanismos tras ell proceso de estimulacion

con fagosomas repletos de levaduras mediante la adicion de cloruro amonico . Se incubaron macrofagos peritoneales murinos con naranja de acridina, clue se concentra en los lisosomas secundarios . A continuation se anadio levadura de pan, clue en la celula adopta forma de agujeros- . Normalmente los lisosomas secundarios se fusionan con los fagosomas, con to clue el naranja de acridina penetra en ellos y da lugar a una fluorescencia verde, amarilla o anaranjada, segtin su concentration (1) . Sin embargo, en presencia de cloruro amonico la fusion no se produce, y los agujeros- permanecen oscuros (2) . Este bloqueo de la fusion lisosomica puede ser utilizado por M . tuberculosis y algunas leishmanias, clue secretan amoniaco . Algunos polianiones, como el acido poliglutamico o la suramina, producen este efecto . (Por gentileza del Sr . R . Young y del Dr . P . D . Hart .)

Fig. 17 .12. Inhibition de la fusion de los lisosomas secundarios

Las linfocinas activan aun mas los macrofagos

Inmunidad frente a las bacterias

Funciones antibacterianas de los monocitos y macrofagos humanos bacteria celulas no tratadas, dial 0
Icstr . . :,n

cultivadas durante 7 dias no tratadas

destrucc .

tratadas con IFN

no afectada

Salmonella typhirnuriurn Listeria monocytogenes Legionella pneumophila Nocardia asteroides Mycobacterium tuberculosis Chlamydia psittaci Chlamydia trachomatis Chlamydia trachomatis biovar .lymphogranuloma venereum

destruccion

no destrucc .

no destrucc . n o destrucc. destruccion

destruccion (este efecto no es bloqueado par los glucocorticoides)

destruccion (este efecto es bloqueado por los glucocorticoides)i variable (cierta inhibicion del crecimiento; capacidad de destruccion no no nula por las celulas de algunos destruccion destrucc . donantes; el 1,25-dihi(iroxicolecalciferol es mas activo que el I FN-,, ) destruccion no destrucc. destruccion destruccion destruccion destrucc . no destrucc . no afectada destruccion

En esta tabla se muestra la capacidad de los monocitos y los macrofagos (procedentes de diversos donantes) para destruir los organismos que se indican . Estas celulas tienen capacidad intrinseca para destruir machos tipos de bacterias. Esta propiedad puede desaparecer despues de una semana de cultivo, pero casi siempre es posible restaurarla mediante tratamiento con IFN-, . Esta claro que esta linfocina activa diversos mecanismos destructivos, algunos de ellos inhibibles mediante glucocorticoides y otros no . Otros organismos solamente son destruidos tras la activacibn mediada por linfocinas, mientras que hay otros que no son destruidos en ningbn caso . Estos hechos tambien demuestran la complejidad de estos mecanismos destructivos .
Fig . 17 .13 .

existcn datos yuc indicut yuc cn cstc proccso inters icncn IL-?, cl tactor cstitnulantc do [as colonias dc granulocitos-ntacr()tagos C;,\I-CSF}, I NF ~' otros citocinas . Coma sc cxpfcu con mas dc tulle en el capituhi I(1, para yuc se icti(rn algunas funciones Cs prccisa la colaboracion snare (arias citocinas . Las linfocinas cjcrccn don ctcctos sohrc his fagocitos in viva : los atracn \ los actisan . La impctrtancia rclati\a (1c CSC(tS don Ctec ton dificrc scgtin cl tipo dc organismo intplicado . Asi, en la in munidad trcntc a 1 .. ntouncYturirucs, yuc pucdc ser dcatruida canto por los monocitos corno por los ncutrotilos mcdiantc sun mecanismos (icpendictaes dcl etxtgeno sits ncccsidad dc yuc estos se N -can potenciade,s, cl efecto mas importantc es la itr.icchm de las celulas hacia la lesion . Por cl contrario, cn cl caso dc .11 . trrGertlllosis, (111C so[res -is -c en cl scno dc lets ncurrofilos c Ion nt(r nocitos, cl factor Cscncial es la actinaci()n dc las celulas . EstC C s un hccho HIM - importantc, ca yuc nutdx,s dC le,s trabajos CxPCtimcntalcs sc Ilc\ all .t cal,o utilizando ntacritfagos mttrin(ts . Las micobactcrias son all mien cjcntplo para comprcndcr la colltplcjidad dc cstc aSuntO . El IFNy puede activar los macrofagos murillos dc tal forma yuc dcstrtttan complctamcntc a las micohacterias . Parccc yuc csto es debido a la .tcti\-acion dc la sia dcl (,xid(t nitrico . Sin ctrtbargo, los ctcctos dcl I FN-, sobrc los macrofagos humanos sc hmitan, cn cl mcjor dc his cases, a una ligcra inhibici(tll (1cl crecimicuto dc .1-1. tuberculosis, Pudicndo dar lugar cn algunas oca si(mcs a un crecimicnnt significatisatncntc nta\or. Est(e pucdc ser cxplicad(e por las ditcrcncias cn ht produccion dc NO cntrc digersas cspecies, scgull sc Cxplic(i uttcs (\ . /UT. 1 .-.Ifll . POr otra I,artC, Las celulas I)turtanas ticnui algunas propicdadcs yuc net sc hall detectado en las Milks marinas . El IFN7 induce Cn los macrofagos Itum :utos la Cxpresi(in dc una I-hictroxilasa yuc con (icrtc :tl 2i hidr(exicctlccalciferol CN- itamina 1),1 circulantc inactjsvt cn su nICtabolito actiso, CI 1,2,;-dihi(lroxicolccalciterol . Estc comPuCSto :tctisa los mecanismos antimicobactcrianos dc los macrofagos con mas eficacia yuc cl propio IFNy it . fin. 1-.131 . Los patogenos eficaces hall desarrollado mecanismos para evitar ser destruidas por los fagocitos Coma la ma(oria do lets orgallismos son (lcstruidtrs tinalmcntc por los fat ocitos, no cs s(a-prendente que los patogenos eficaces Itatan (icsarrolla(1o un .t scrim dc mecanismos yuc ICs pcrntiten c(i tar corrcr esta sucrte i \ . Ail. 1-.14i .
Los macrofagos humanos y murinos son diferentes

Los patogenos intracelulares se pueden ((esconder)) en celulas con propiedades antimicrobianas

Las celulas infectadas pueden ser destruidas por celulas Tc AIILinoS ()ncutismos sr Pucdcn dcs ;urdLtr cn cl illtcri(,r dc to II(,(ite>s dcl Ilui'sPrd ]HC sC encucntren tl .titadt,s c, pl-CSCntCn anomalias tnctahulicas, o pucdcn sitar su ntucrtc cscapando dcsdc cl tagosoma al citoplasnta, comet LYstrria mouncitr`l7ores. (IIIC to consiguc liherando enzinras que re~mpcn la membrana dcl fagosonta . Otros organismos, coma :b1vtuhnctcrium h prac, pucdcn inducir stt propia ingestion por parts dc celulas yuc normaltncntc no actiian coma tagocitos y ticncn csctsa capacidad antibacteriana . Los organjstn(ts ingeridos dc esta mancra ticncn yuc ser liherados de Cstas celulas para p(xICr ser capturad(ts p(tr los lagocitos recien actin ados o ser cxpucstos a otros mecanismos bactericidas . Las celulas'I ( son Capaccs dc Ilc\ar a cah() csta misi6n mediantc la (lestrucci('m dc [as celulas infectadas . Por cjcmplo, cuando sc elimina cl gcn dc la P_-nticrogIobLilina dc forma yuc [as celulas '1'( : no scan capaccs dc reconoccr [as moleculas C .PH dc class I, los stones adquieren una gt;ui Susceptibilidad trcntc a .11. tubercuoosis. Estos hcche,s c(mcucrdan con la hipotcsis dc yuc las celulas -Icitotoxicas cicscmpenall Lilt IMItel eselleial en esters Procesos . Las celulas T ; ei suelen ser citotoxicas y es posible que destruyan celulas infectadas C'na Bran pnthorci(in (1c celul .u T :oil rcccpU>rcs '1 '6 prolilrr .t Cn prcsencia do alltit;cnos tMcterianos . AIgmtas suhpohlacioncs do Cstas eclulas SC encuCntran Situa(fs en LIS supcrficiCS CpitChalcs (( . cat) . 2 i . Por cllo, parsec prObabIC yuc (1CSCmI,Cticn :tlgiut papcl en ]as rcNpucsras trcntc a las int*CCCi(ntcs, uutquc aiin n(, se sabc cual es . Suclcn posccr propicdadcs citot(-~sicus, por to que cs posible yuc destruvan celulas infectadas . Algunas celulas tisulares pueden expresar mecanismos antimicrobianas Algunas bacterias, omw ll. 14-1 It - , .tileie7cllel S'niuIIuttIhl shh . ins :isiv ;ts, Rickettsia 'v Clilamvdin, tamhicn I,uCdcn pcnctrar cn cc lulus tisularcs ajenas al sistctna inntunitario . Canto se Ira indicad(t .utteriorntcllte, cstas celulas pucdcn ser destruidas por ]as M11[as 1( . Por otra parte, la acti\'aci('~n tie los fibroblastos mc(liantc IFNj pncdc inltihir CI CrCCimiCntO illtraCClular dc los organismos, probablcmcntc mcciiantc mccallismos cn los yuC intCrxiene la Via dcl No, yuc no cs cxclusis-a dc las celulas l gociticas .

Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

Mecanismos elusivos de las bacterias

Fig. 17 .14. Las bacterias, especialmente aquellas que sobreviven en el interior de ]as celulas, han desarrollado sistemas para eludir los mecanismos destructivos mediados por fagocitos. 1) Algunas secretan repelentes o toxinas que inhiben la quimiotaxis. 2) Otras poseen capsulas o cubiertas externas que inhiben la union al fagocito . 3) Otras son ingeridas, pero liberan factores que bloquean la initiation de los mecanismos destructivos. Algunas, como M. tuberculosis, secretan moleculas que impiden la fusion entre los lisosomas y el fagosoma tras la fagocitosis . Tambien inhiben la bomba de protones, que acidifica el fagosoma, de forma que no disminuye el pH . 4) Tambien pueden secretar catalasa, que elimina el peroxido de hidrogeno. 5) Los organismos como M. leprae poseen cubiertas externas muy resistentes . M. leprae esta recubierto de un glucolipido fenolico que inactiva los radicales libres . 6) Las micobacterias tambien liberan lipoarabinomanano, que impide que los macrofagos respondan a los estimulos del IFNy . 7) Las celulas infectadas tambien pueden perder su capacidad para presentar antigenos. 8) Diversos organismos (p . ej ., M. leprae) pueden escapar del fagosoma y reproducirse en el citoplasma . Finalmente, hay organismos (p . ej ., M. tuberculosis) que pueden destruir al propio fagocito .

Shock por endotoxina

0 0

"1

71
LPS

potenciacionen presencia de PAF

"

molecula de adherencia celular

adherencia a las celulas endoteliales

agregacion plaquetaria, deposito de fibrina

quimiotaxis, production de superoxido, desgranulacion -fibrina ---

"`~~ contraction de la musculatura lisa

Fig. 17 .15. La liberacion excesiva de citocinas, en muchas ocasiones desencadenada por la endotoxina (LPS) de las bacterias gramnegativas, puede provocar coagulation intravascular diseminada, con las consiguientes anomalias de la coagulation, alteraciones de la permeabilidad vascular, difusion de liquidos hacia los tejidos, hipotension, insuficiencia circulatoria y necrosis hemorragica, especialmente a nivel intestinal . Se muestran algunos de los pasos mas importantes de esta via a nivel celular. Las citocinas TNF e IL-1 inducen la expresion de moleculas de adherencia y de tromboplastina tisular por las celulas endoteliales . Estas provocan la adherencia de las celulas circulantes y el deposito de fibrina, respectivamente . El factor activador de las plaquetas (PAF) poteneia estos fenomenos. En los modelos experimentales el shock puede ser prevenido mediante la administration de Ab neutralizantes frente a TNF, y reducido en gran medida mediante Ab frente a la tromboplastina o inhibidores del PAF o de la production de oxido nitrico. Las bacterias grampositivas tambien pueden provocar shock, por ejemplo cuando se produce una liberacion masiva de citocinas tras la exposition a superantigenos (v . pag. siguiente) . IPDGF = factor plaquetario de crecimiento Idel ingles platelet-derived growth factor), que producen tanto las plaquetas como el endotelio .)

Inmunidad frente a las bacterias

Las respuestas frente a las bacterias pueden dar lugar a lesiones tisulares de origen inmunitario La secreci6n excesiva de citocinas puede provocar shock endot6xico

Fl shock endotto,sico, ihactcricinio,i al,arccC Cu,uttlot sc pi odIlCC una littcracio n masita Lie citocinas, gcncralntcntc dchido a Ion producats hactchanos quc se lihcran L1uruttc lots Cpisudi0s Lie haCtC rictnia. El producto hactcriano Lluc da lugar al shock cndott()\iCo con ntas trecttcncia es la cndottoxina I ]TSi Lie ]as bacterias gramnegatk ;ts, si hicn la hactcricntia potr hactcrias grampositicas pucde descncadcnar un sindrontc parccido . Pucdcn aparcccr ditcrsos sintomas LILIC sttponcn un pcligro para la tida Lie] pacicntc, cntrc los qLIC SC Cncucntran fichrc, insuticiCncia Cil-CUlatotria, coal,ulaci6n intratascular tiiscminatla necrosis hcnutrrigiCa, yuc C(trt ducen finalrncntc a una insuficicncia multiorganica All, I--.15) .

sensiblcs a ]as ICSiOr1CS tisularCS inducidas por Ias citocinas, como ()CUrrc cn la rcacciont de Slntartztnan, solve todot cuaniot czistc si. nTtiltancarnentc actinidad Lie las celulas Ti i 1 t Tit2 . En la . hrzttra 1 .-.1-sC ntttcstra un Cjent[Ilo dustratito Lie Ias 1-c laciones qLIC Czistcn Cnti-C I :t otturaleza Lie] organismo, la cntcrmedad, las Icsictncs inmunotpatoloigicas quc Sc pr0duccn e las respucstaS innmnitarias prc>tcctotr.u .

Nuevos aspectos de la inmunologia bacteriana Los superantigenos act6an sin necesidad de procesamiento y presentation previos

La reacci6n de Shwartzman consiste en una serie de lesiones tisulares inducidas por citocinas que aparecen en las regiones inflamadas y en la que no intervienen las celulas T

Shtc,trtvman othscrtoi quc cu :utdot SC in\CCtan onganisnun grant. ncgatit o,s ell la picl do tin concjo t 24 horas dcspucs SC adntinistra una SCgunda dosis, sc produce en diclta regicnt CutanCa un tcn6ntrno Lie necrosis licrilorrav do Shwartzman . Tantbicn obSCrcci title dos imcccioncS por via intratcnosa scparadas cntre si potr 24 horas protvocan una rcaccion sistcmica qLIC StlCIC Cc tnsistir en una in,ufiCiCnCia Cil-CUl:tton-i .1 t, una

necrosis bilateral de la cortcza renal . Sanarehi hahia obsenado tamhicn estc tcnoimeno, potr to clue Csta rcacci611 sc denomtina en la actualidad rcaccion sistentica Lie Shwartzman o Lie S,tnarelliSchttartzrnan . Estas rcacciotnes tamhicn pucdcn it acrnpariadas de necrosis pancreitica, hipofisaria, suprarrenal of intestinal . Adcmas SC proxIuCCn CoragulaCi6n intrat :tscular discrninada y trcnnhosis . Ell la actuahdad sc conoccn ntuchos otros orgaltisntos yuc "prcparan ,, la picl Lie la misma titrnta, cntrc los quc se CrICLICntr:ut estrcptococos, micothactcrias, Hrtrmophiltts spp., corinchactcrias y cl tutu Lie la Lacuna . FI contponcme actito Lie la intrcci()It intravcnctsa yuc desencadena la reacci6n cs la endotoxina f ITS i . En los printcros estudios se implicoi al cndotclio, a la fibrina deposita. da, a I,t aCUnrt1IaCicin t, d0granulaci6n Lie lots ncutr6filos t a Ias pla quotas cn Ias Icsiotncs produCidas . Estot cs cicrto, pcro cn la actualidad sc sahe qLIC lots principales mediadores son TNF(j, IFNy, I1 .-12 c II. 1 l t . cap. I 1 ) . I.a imeccio'in dirccta Lie TNFu en zonas inflantadas f ntctiiantc la imcccioin prccia tic hactcrias i piot-oca tcnbntenots necroticos parecidots ; es probable clue cl FNFa intcCta do cjcrza cl misnto etccto qLIC el qLIC Ilcga a tratcs Lie la circulacio'm tras la administracion iutr tia intratenosa do una d0sis do ITS. Este fenomeno cs cl motim del tipico esamenrt Itentorragico qLIC aparccc en Ion nitios quc padcccn meningitis mcningoc6cica . Cn primer episodic do bactericntia tla lugar a la formacioin Lie 111111 tiples puntos inflarnatorios yuc, en esc ntomcnto, todatia seta pcqucnos y no sc manificstan clinicantcntc, pcro soil cxtraordinariantcnte scnsiblcs a Ias citocinas . (atando sc produce un Segundo cpisodio do hactcricntia do ntarorcs dintcnsioncs, I a Iihcraci6n tic citocinas cs sufcicntc como para prat ()car necrosis en CSOS puntos .

Fst,ts comltumcntis hactcr .ut(,s 11 .111 ' :do, ,icscollicrtos rcciCn tcn)cnte, t sc dcnonainan asi porLiuc se Illicit dircctantcnte Ccs door, sin proccsamicnto prc\io ;1 a kts regiones tariaitles Lie Ias cadcnas ji f x'(1'1 do lots receptotres do antigeno Lie algtfas suhpoblacioncs Lie celulas 1, dando lugar a enlaces cruzados cntrc cstos recc11tores y Ias moleculas (TH Lie Ias Cclulas presentadonts Lie antigcnos f (a'A ;I (c . hit . 11 .15) . En ccnISCCUCncia, todas Ias Cclu Ias T qLIC pctSCCrt CI pro dliCto gcnico \''/i adccuado sort actkadas, sin necesiLiati Lie yuc Ios antigenos scan procesados \ prescnrados en f01-nta Lie pcptidots en lots surcos do l :ts molcculas (TH, proceso sin cl cual not suck scr posiblc la acti\ icicin cic kts Cclulas h. Sc h:tn encotntrado supcrantigenots do cstc tipo ell lets cstafiloco Cots, cstrcptotCOCOS, rtticoplasntas \- otras cspccics . Not se sabc corn ccrtcza aril es cl significadot Notlogico Lie cue sistenta Lie adaptaci6n Lie Ias hactcrias, pero unet Lie sus etcctcts othtios es la totziCidad dC6tada tie la litICracio>n naasira Lie citocinas \ linfotcinas pro\ ocada 1101- I :t es6tttnLttiolrt sinnrltanCa tic una subpoohlaCiotn nuntcrosa do celulas 1 . Parccc yuc ]as tosina% cstafilo cocicas qLIC loll lugar al sindronte de[ shock t6xicot f FSS l-I, ctc . : dcl inglcs toxic shock, Sh-Mbrottrr tn.Vilt} lCtuan tic cstt manCra .

Las proteinas del shock termico (proteinas del estres) estan muy bien conservadas y constituyen importantes dianas de las respuestas inmunitarias Fuas proxcmas w cncuCntran ell todaS Ias celulas C11c.tri  tas t 111-0

caritttas, Cn dondc dcscmpctian tunciomcs cscIlCiIIcs en cl cllsant

El fenomeno de Koch

inoculation en la extremidad ' trasera de un cobaya de Mycobacterium tuberculosis

aparicion de la lesion tuberculosa ,

inyeccion intradermica de antigenos ! de M. tuberculosis, 6-8 semanas despues

aparici6n de necrosis en los dos puntos de inoculation

El fenomeno de Koch consiste en una necrosis mediada por celulas T clue aparece en las lesiones provocadas por micobacterias y en las regiones cutaneas sensibilizadas

Se trata tic unit respucsta nccrotica licme a Ciertots anm-,enos tie Al . aria 1-otlosis quc file obscrt atla por printcra t-cz por Koch ell Cctb:tt ;ts tuberculosos (litt. 17.16i . l'ucdc cstar rclacionada tom la ticcross quc aparece tamhicn en [as Icsiones protpias de csta entertnedad . EstC Icno -mten0 CS dCNdct, al armors cn parte, a la lihcraci6n do citocinas cn una region crt la qLIC cxistC un pr'ctCCSO inflantatotrio mcdiado por celulas I 'l region tie hipersensibilidad Lie tipot retardadct : t. cap. 26 1 . F;stas regiones soil cxtraordinarianicnte

Fig. 17 .16. Robert Koch observ6 clue la inyeccion de Mycobacterium tuberculosis o de Ag solubles procedentes de esc mismo organismo en la piel de cobayas tuberculosos provoca una lesion necr6tica tanto en el punto de inyeccion como en la lesion tuberculosa original . Esto es debido, al menos en parte, a que las reacciones de sensibilidad retardada frente a los Ag micobacterianos pueden ser muy sensibles frente a la toxicidad de las citocinas, como se observa tambien en el punto de inyeccion de LPS en la reacci6n de Shwartzman . Estas citocinas se ptreden liberar localmente en el punto de la inyeccion cutanea . En los seres humanos clue padecen o ban padecido tuberculosis se observa una reacci6n parecida . Las respuestas al mismo Ag en individuos clue presentan pruebas cutaneas positivas por vacunaci6n con BCG no suelen dar lugar a fen6menos necr6ticos.

Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

Inmunidad en algunas infecciones bacterianas importantes

infection Corynebacterium patogenia principales mecanismo,, de defensa

diphteriae

faringitis no invasiva ; toxina enteritis no invasiva ;toxina nasofaringe ~bacteriemia -meningitis ~endotoxemia invasion local y toxicidad cutanea, etc . invasivo, provoca inmunopatologia, ~toxico? invasivo, ocupacion de espacios y/o inmunopatologia

anticuerpos neutralizantes anticuerpos neutralizantes y bloqueantes de la adherencia destruction mediante anticuerpos y complemento litico ; opsonizacion y fagocitosis opsonizacion mediante anticuerpos y complemento ; destruction por parte de los fagocitos

Vibrio cholera, Neisseria nleningitidis

(gramnegativo) Staphylococcus
aureus

1lticosis stiperticiales : son producidas por unos Bongos donor nlinados dcrtnatoofitos t. silo suclcn atectar a Ios contponcntcs yucratinizado, c incrtes dc la picl, cl cahcll() y las wias . :Mitosis subcutancas : tra, un traunratisn10, 10% 11(ngOS saprotiton 1uc(ien d .11- lu, .1rciulos .1r a no>ciulos~ 0 tilcrras ctYinicas en Ios tell dos suhctltancos, cono en la cromomicosis, la csporotricosis t cl micctonrt . Mitosis respiratorias : los hongos saprofitots del suelo protiu cen intccciones pulnionarcs sul)Clinic ;l, 1) agudas (quc no se suelen discniinar l o lesiones granul(n1,luos;u, tonal, por ejemplo, la histoplasmosis o I ;t coccidioidomicosis . " Candidiasis : ( :anfida albiran un organisnto conlcnsal inn uhicuol causa intccciones supcrficiales (raranicnte sistcnticis) tic la picl v tic las ntcnihranas nlucosas . Parece quo la base de la resistencia es la inmunidad mediada por celulas 1-1s intrcticnc, Cut.inC .t, hr0duCid .l, 1,((r 1u11g((, suelen ,Cr tIC t:( ractcr autolinlitadoo, cstandoo luni,ld,I Lt rccuperacio ll coil ulla ligera rcsi,,tencia a la rcinteccioin . Parece clue la resistencia quc se ohscrva cs dchida a tin fcnonieno tie naturalcza cclular, to clue los pacicntcs dcsarrollan hipcrscnsihjftlad dc tipo retardado ftipo I\'} trcntc a los antigcnos tungicos, N la atucncia dc cstas rcacciones se asocia coil infecciones dc caracter cr()nico . La inniunidad nlcdiada por celulas T tamhicn esta iniplicada en la resistencia frente a otras infecciones fiingicas, 1a quc en algunas ocasiones dicha resistencia puccle set - transtcritia hor nledio de CCInlas T . Sc CITC quc [as celulas Tti lil,cran citocinas quc actilan a Ion macrotagos para quc ticsti-Man Cl 11011,;0 Aff . 1 x.18) . En las mitosis respiratorias se obscr\'a a Feces tin cspectro clinico parecidol al dc la lepra (v . cap . 26) . Las alteraciones fisiologicas que protocan los tarntacos inmtut0sulprcsorcs c las dc la flora habitual yuc 1)1-01 ocan Ion antihioticos pucden predispoller a los inditidu()s frente a ] .is infecciones int ;ui,as polr Carulida . Estas intccciones tamhicn son frecucntc,, en Ios pacicntcs con innutnoticficicncias (innuutoticficicncia conihinada grat-c, aplasia dc timo, SIl)A, etc . I, to que indica yuc Cl sistcma innttuiitino es uno dc los niccanisnios yuc nianticnc confinados a los hongos en las zonas en que se alojan conic organisnios coniensales .

(grampositivo) Mycobacterium
tuberculosis

Mycobacterium

leprae

~activacion de los macrofagos mediante citocinas procedentes de las celulas T?

Fig. 17 .17. En esta tabla se muestran ejemplos de como es

posible predecir el mecanismo protector que se utilizara conociendo el organismo infectante y el mecanismo de la enfermedad .

hl .Ijc, plcganlicnto~ t transport, dc otras n101cculas . La cxprcsi(n dc cstc tillo tic nlolcatlas aunicnta cuando las celulas son expucstas a tcnlpcraturas supcrioi-cs a [as normalcs )o a taros tipos dc cstrcs ;l, to clue t1CnTUcstra yue sail capaccs dc cstahjlizar la estructura tic wras protcinas . Sots SCCuCncias dc ;uninoacidos cstan nrut hien conscrtadas, v en la actualidad se ,ospcclia quc ] .Is protcinas del ,,honk termico t1acterianas pucden cstar rclacionadas con lots lcnol mono,, autoinnutnitarios, dodo sit grail parecido con las protcinas corrcspondicntcs tie origen humano . Parad6jicanientc, pc,,e a estc parccido con las protcinas del hucspetl, parcce yue ]as protcinas del shock termico dc origen bactcriano soil dianas importatitcs ell ],is respuesta,, detcnsitas del hucsped trcntc a nntchoos organisntos illfCCCiOSOs . l)csde un pinto dc vista e\ -olutivo estc Iiedto no cs ilo,Cico, 1a yue Si CI hucspetl posec celulas T capaccs dc reconocer ciertos cpitopos hien conscr\ados dc [as protcinas del shtick tcrmicol, C,tts celulas T Cstaran capacitadas para detector prictica ntente cualtluicr pathgcno al clue sc cnti-cmen .

INMUNIDAD FRENTE A LOS HONGOS

Existen cuatro tipos de infection flingica tie ,,11,0 rclatkamentc pono acCrca tie lots nict .misnion csactos de la, rC,l,uC,t .1, innutnitaria, trentC a la, InICCtI(11C, fiingicas, hero sc crcc yuc en to fimdantcntal son parccitlos a los yuc sc ohscr\ an en les reacciones Irentc a Las intccciones hacterianas . Existcn olio trot tipos difercntcs dc infecciones fiingicas bananas :
Fig. 17 .18 . Participation de las celulas T en las respuestas inmunitarias frente a la cromomicosis . Cromomicosis

(mitosis subcutanea) con celulas fiingicas pigmentadas (c) en el interior de celulas gigantes (gc) de la dermis de un paciente . La zona esta rodeada por un infiltrado en el que predominan celulas mononucleares . En la parte superior de la fotografia se observa la capa basal de la epidermis (e) . Tincion hematoxilina/eosina, x400 . (Por gentileza del profesor R . J . Hay .)

Inrnunidad frente a los hongos

Tambien esistcn datos quc indican yuc los polintorlunudeares ncutrdtilos intervienen en la defcnsa trente a algunas mitosis rCSPiratoriaa, coma la mucormirosis (A9 . 1719,1 . Fs posihlc yuc las protcinas catioSnicas jdctcnsinas : v. h g. 235h cjcrz;ut una importalltc protcccicin frcntc a los hongos, ya quc los fagocitos do los pacientes con defcctos cn las vial do rc-

duccicin dcl oxigcno son capaccs do dcstruir las Icvaduras N las hitas con una cfic ;tcia proSzima a la norntalidad JF`7 . 1 .2f11. Sin cnilbargo, cn las rcaccioncs frcntc a C:rvptncoccussi sc activa la via dcl ozido nitrico, por to yuc CS posihlc yuc cstc mcc.uusnto tcnga importancia cn la dcfcnsa frcntc a otros muchos hrmgos.

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4 ed.

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Fig. 17 .19. Participaci6n de los neutr6filos en las respuestas inmunitarias frente a la mucormirosis . Corte del pulm6n de un paciente con mucormirosis (infection oportunista que afecta a individuos inmunodeprimidos). La reacci6n inflamatoria esta mediada casi totalmente por polimorfonucleares neutr6filos que rodean a las hifas del hongo. Esta enfermedad es especialmente frecuente en pacientes neutropenicos . Tinci6n con plata, x400 . (Por gentileza del profesor R. J. Hay.)

Destrucci6n de hongos por monocitos y macrofagos procedencia de los monocitos/macrofagos organismo normal enfermedad deficit de granulomatosa mieloperoxidasa cronica destrucc, a veces desconocido destrucci6n desconocido Fig. 17 .20. Muchos hongos son destruidos por los monocitos o los macrofagos . Las celulas procedentes de pacientes con enfermedad granulomatosa cronica o con deficit de mieloperoxidasa tambien son capaces de destruir a los hongos, to que indica que en este proceso intervienen mecanismos independientes del oxigeno.

Candida
albicans Candida parapsilosis

destrucci6n destrucc . a veces destrucci6n destrucci6n destrucci6n no destrucci6n desconocido destrucci6n

Criptococcus neoformans Conidios de Aspergillus fumigatus Hifas de Aspergillus fumigatus

destrucci6n

destrucci6n

desconocido

~De clue mecanismos antimicrobianos distintos disponen los fagocitos? ~Que papel desempena la gran cantidad de flora intestinal en las enfermedades inmunitarias? ~C6mo pueden alterar las bacterias los procesos celulares de los fagocitos para evitar ser destruidas

" ~Como se puede determinar que papel desempenan el complemento y los fagocitos en la destrucci6n de los diferentes microorganismos? ZQue tecnicas geneticas o moleculares se pueden utilizar para descifrar los sistemas que permiten a dichos

organismos eludir estos mecanismos efectores? " ~Que papel desempenan las citocinas en la activacion de los macrofagos que conduce a la destruction de las bacterias fagocitadas? ~Beneficia siempre al huesped esta activacion?

una vez que han sido ingeridas? Ponga ejemplos de estas tecnicas de evasion .

Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

LECTURAS ADICIONALES
General
F-itr

%+cndernic P "ess, 1992_ (See numerous entries under names of individual fungi and bacteria .) Bacteria,
Cater::)

IV, Delves PJ, (ed)

Encyclopedia of Immunology . London :

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Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

Los parasitos infectan a muchos millones de personas . Suelen ser especificos de tin huesped determinado, y la mayoria de ellos causa infecciones de tipo cronico . Muchos son diseminados a traves de vectores invertebrados y presentan complejos ciclos vitales . Sus antigenos varian en cada una de las fases de estos ciclos . La resistencia del huesped depende de diversos mecanismos . Las celulas efectoras como los macrofagos, los neutrbfilos, los eosinofilos y las plaquetas pueden matar protozoos y helmintos . Estas celulas secretan moleculas citotoxicas, como radicales reactivos de oxigeno y oxido nitrico . La eficacia de todas ellas aumenta tras ser estimuladas por citocinas . Las celulas T son esenciales en las respuestas inmunitarias frente a estos organismos . Los anticuerpos, solos o actuando conjuntamente con el complemento, son eficaces frente a los parasitos extracelulares . Potencian tambien la actividad fagocitica y citotoxica de las celulas efectoras y pueden evitar la invasion de otras celulas . Los parasitos eluden las respuestas inmunitarias del huesped de diversas formas . Algunos sacan provecho de estas respuestas, aunque la mayoria de ellos interfiere en las mismas . N Las infecciones par helmintos estan tipicamente asociadas a tin aumento en el ntimero de eosinofilos y en la concentracibn de IgE circulante . Tanto las respuestas TO como las TH2 desempenan tin papel en la respuesta inmunitaria . Las celulas TH2 son necesarias para la elimination de los helmintos intestinales . Los mastocitos interaccionan con los eosinofilos . M Tanto las celulas T CD4' como CD8' pueden ser necesarias para la respuesta defensiva . Las celulas TH1 confieren protection frente a los protozoos intracelulares mediante la secretion de IFNy, que activa los macrofagos . " Las infecciones parasitarias suelen it acompanadas de altas concentraciones de anticuerpos inespecificos, esplenomegalia y hepatomegalia . Las celulas T son las causantes de muchos de los fenomenos inmunopatologicos que se producen .

18

Las infecciones parasitarias cicscncadcnan una scric tic tnccanismos do dclcnsa inmunitaria caractcristicos, unos mcdiados por anticuerpos v otras por celulas . La cticacia tic cada unto dc cstos tipos tic respuesta (Icpcntlc del parasito implicado v do la face tic la intcccicin . En cstc capitulo sc cstudian Icts principios gcnrralcs tic la inrmmidad Ircntc a las infcccicrncs parasitarias, hacienda hincapic ell algunas tic las illfcccioncs lurnt :utas ntas intportantcs, que pucdcn atcctar al huesped dc disersas Iisrrnas /tit . 1,8.1) . Los protozoos parasitos pucdcn visit ell el intestino i anteNo, en la sangre itripanosomas africanos), ell cl interior dc los critrocitos ;` Plasmodium spp .l, cn los macrcitagos i; Lrishmania spp ., 7aroplasma gondiil, cn cl higado o cl bazo Y Lcishmauitt spp . o ell los mtisculos LTrrpanosomtt irrtcih . Entrc los helmintos parasitos que intcctan al hombre sc cncucntran los trcmatodo, o dUClas (csquistosontasj, lot, ccstodos alas tcnias) t, los ncntatodos o ncntatchnintos i Trichinella spiralis, las uneinarias, los a .siurcts, Asraris spp . v ]as filarias l . Las tcnias \- las uncinarias adultas s is cn cn cl intcstino, los csquistosontas adultas en los VASOS sanguincos, ell los vasos linfiticos (AR . 18.2,) . Es t algunas filarias, por cjcntplo, las consecuencias patolovicas producidas pucdcn ser ctidcntc que nun discrsas . muchos helmintos parasitos prcscntan ciclos \italcs complicados, a to largo dc los cuales migran a tra\cs tic discrsos brganos del IlLiespcd, ticsarrollandosc cada una tie Ian titrntts del parasito cn tcjidos ditcrcntcs hasta que Ilegan al lugar en dondc nraduran cictinitk-amcntc y qucdan alojados para cl rcsto do sit cida l_f q. 18 .3) . 1-as larsas do las uncinarias tic los csquistosomas imadcn directantcntc a sus hucspcdcs a traces do la picl ; las tcnias, lot osiuros v los ascaris pcnctran por sia oral, v las flarias son transmitidas tic indisiduo a auto a inscctct sector. La mayoria dc los protozoos tam traces dc bicn son transmitidas por till inscctct \ -cctor, con la esccp:icm dc 7bxoplasma, Giardia y los amebas, que sin transmitidas por via oral . En concrcto, los parasitos del paludismo y Lcishmania nom discminados por mosquitos, los tripanosomas por moscas tsetse y 1 . c ruzi pctr chinclics triatctmidas . La gran ditcrsidad tic sistcntas tic transrnisitin cs otro obstaculo para la ill nnmiiacicin .
1111 till

CARACTERISTICAS DE LAS INFECCIONES PARASITARIAS

Existe una gran cantidad de seres humanos infectados por parasitos Las irtlcccicmcs h .trasit .tri .n Lcm,titmrn till prohlcma mcdiot dc gran importancia, espccialmcntc ell los paiscs tropicalcs ffic] . 1,1' .1) . I'or cjcntplo, cl paludisnut prctsoc .t cnirc I \' 2 millones do I:illccimicntos anualcs . La tcrccra partc dc la poblacion mundial cst inlcctada coon hchnintcts intcstinalcs ; la grasedad dc la cntcrmcdad dcpendc dc la cantidad tic parasitos hrcscntcs ell cl pacictric, pcro ell Ias llinos induso pcqucf ss cantidadcs dc parasitos pueden pro vocal, anornalias del crccimicnto v del desarrctllo mental . La anemia s. I :t tiesnutricion son otras de las secuclas dc Lis cntcrmcdadcs parasitarias .
Las infecciones parasitarias presentan ciertas caracteristicas comunes

Los proton~ t, los liclmintc~s parasitos mm tic till tamano cctnsidcrablentcntc ntasor que las bacteri ;ts V los s ires ffiq. 18.4), por to que pctscen una manor uvicdad v cantidad tic antigcnos . Algunas espccics son capaccs do modificar sus antigcnos de supcrficic ntcdiantc till tcn(intcno clenantinado sariacicin anti,enica . 1,(),, parasitos title prcscntan ciclos sitalcs contplejos pucdcn csprcsar tictcrminados antigcnos solarnentc ell una do las fases dc sot ticsarrollo, to que da lugar a la csistcncia dc respuestas espccificas dc tase . Asi, I :t cubier to protcica dc los csporozoitos i tase inlcctis a del parasito del paludismo que transmitcn los mosquitos) induce la producci6n dc unos anticuerpos que no prcscntan rcactividad frente a la rise critrocitaria ; T spiralis tambien prewnta ditcrcntcs antigcnos tic supcrficic en las distintas fasts tic sit cido vital . Los protozoon tie till tamano sufcicntcntcrttc pequcri() corn() para s is ir ell cl interior dc los celulas humanas hall desarrolladct a to largo dc la 0011,16611 sistcntas cspeciales para pcnctrar en diclras celulas . El tncrozoitct, la fitrina imasiva do la Ease sanguinca del parasitc> Lie] paludismo, sc line a tictcrrninados rcceptorcs tic la supcrficic del critrocito \- utiliza tin organulo especial para pcnctrar en la celula . Lrishmania spp . sail parasitos tic los macrofagos que SC Linen a los rcccptorcs del cornplcmcnto para inducir sot propia

Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

Infecciones parasitarias humanas importantes

Protozoos Plasmodium vivax Plasmodium falciparum Plasmodium ovale Plasmodium malariae Leishmania tropics Leishmania donovani Leishmania braziliensis Trypanosoma rhodesiense Trypanosoma gambiense Trypanosoma cruzi Helmintos Trenlatodos (duelas) Schistosoma mansoni Schistosoma haematobium Schistosoma japonicum Cestodos (tenias) Nematodos i;nematelmintos) Trichuris trichura (tricocefalo) Ascaris lumbricoides tricuriasis ascariasis triquinosis =~1 l paludismo ulcers tropical, leishkala azar, maniasis ; espundia -J lenfermedad
de'sucrto

Organos en quc se alojan determinados parasitos

protozoos SNC asma ondii ToxoplyEntarnhisto oeba ytica Trypanosoma spp. Plasmofalci dium arum piel Leishmano spp. corazdn helmintos piel Oncltocer-ca I volvuhrs musculo Trichinella spiralis pulmones larvas de nematodos, larvas de esquistosomas ejemplares adultos de Schistosoma mansonl intestino Ascarls, TrrchUfls, uncmanas, tenias

enfermedad de Chagas

esquistosomiasis teniasis

Entarnoeba histolytica LefshrimnO spp, intestino f ntamoeba histolytica LGixdia larnblia

aiemplates adultos (1(' .Sr ::hi tosorna

h,lC~7tlfu6rr~~

Trichinella spiralis Ancylostoma duodenale Necator americanus Wuchereria bancrofti Brugia malayi Dipetalonema perstans Onchocerca volvulus

Plasmodium spp. Trypanosoma spp.

fi arias Fig. 18 .2 . Lugares de infeccion de parasitos importantes en medicina. nlisnla forma, la tcnia porcina tambicn cs capaz do infcctar a Ices SCI- CS hlllllalloti .

uncinariasis filariasis linfatica ceguera del rio

0 1 10 100 1.000 millones de personas infectadas (escala logaritmica) Fig. 18 .1 . Segbn datos de la Organizacion Mundial de la Salud (1993) .

ingestion Estos parasitols tambicn pucdcn penetrar en la Cclttla . utilizantio el receptor tic manosa lucosa dc la superficie dc los macrotagos .

p,or3sit(IS SC hail atiaptadO a sun IIIICSpCdcs .l III Llrf;rr tic nlido anon de 001116611, por to quc nlucstran HIM notable CSIlccifiCitiati Cn estc scntido . Pclr cjcmplo, los parasitos tic] palutiisnul dc Las at'CS, los roedorcs cl leis scrcs hunlatlols solo sc pucLICtl Inultiplicar en su huesped co>rrespolkiicntc . Esisten algunas csccpciomcs :l csta nor-ma general : por cjcnlplo, el prot()Zoel pa rasito 'lieveplasrrea goudii cs capaz de imadir multipliCarsc en todas las Mulas COIL ntiCICO Cic los naanliferos, asi conlo en loss critrocitos innladuros do cstos, cn Culti\OS do celuhs dc inseQes h en los eritrocitos nuclcados dc Ian atrS \ tic IOS peces . IBC la
I .0s IlolttCS

La mayoria de los parasitos son especificos de un huesped determinado

I ,t rcsistencia frcntc a la intccciom parasitalia tic cad.l intiititjurl Cs \ariable, s, CS IlclsiIIIC yuc kICPCnda dc cicrtos genes relaciomados roil las respuestas innlunitarias . Hah algunas cepas dc ratones i l. LIctcrnlinatiOS scrcs hunl :ulcls quc, dcbiti(I a los genes C'PH yuc posecn, prescntan una rcducida Caj)aCitiaci do sintcsis de antiCuerpos f-entc a Ices csporoz(l1to s PaliltiiCos, hOryuC SIIS CcluLls T no se Ilegan a sensibilizan Dc la nlisma tolrnla, cxistcn ciertos antigcnos HI .A quc parccc gLIC confiCYCn proltcccion fi-cntc al palutlismo grasc l . que son especialmente prclalentcs en Ices hahitantcs dc Atrica occidental, pero raros cn los inclit- iduos dc raza Hanca . Los genes ijciio,, al ( .PH tambicn pucdcn scr importantes: La susccptibifdad do los ratoncs a la infeccion con Lcishmania dunovani l . coil otros Parasit(ls dependc de un iuliCO gen tionlimante yuc controls la actinacion tic loss macrotagos \ . cap. I I i . Los tncrozoitos (Id parasito paltidico Plasmodium tirax pc nctran en las cclulas udljzandO como receptor una sustlncia dc grupo sanguinco especial quc se CIICuCIltra SObrc la superfiCiC dc Ices critrocitos, cl antigenol Dufk -. Existen indiliduos Aii canon quc carcccn (Ic cstc Antigeno f probablcnlcntc (Ichitiol a la presioin sclectis a ), por to quc son totalmentc resistentes a la infeccion corn cstc parasite . Fn la mahoria dc las intccciomcs pclr llclnlintoS una cantidad relatiumentc pcqucfla cic inditiduOS es portaLiora tic cantidades cnornles tie parasitos, hero esto no implica que CSt(lS intiit iduO%

La resistencia del huesped frente a los parasitos puede sec de origen genetico

Caracteristicas de las infecciones parasitarias

Helmintos parasitos de los seres humanos parAsito y enfermedad

Ascrm

tiempo de vida (anos)

1-2

huevos o larvas producidas diariamente por un ejemplar adulto

-200 .000

modo de transmision

via de migration de las larvas intestino +sw,grpulm-traquea-+f~,rirge

alojamiento definitivo de los adultos . art-Iiirodelgado - ciego - intestino - vena porta hepatica . venas de la vejiga urinaria , vasos linfaticos ' tejido subcutaneo

rernatodo r

4,

rhri c 1,r

Trichuris trichura, tricocefalo Ancylostoma duodenale, uncinaria Schistosoma mansoni, bilharzia Schistosoma haematobium, duela vesical Wuchereria bancrofti, filaria Onchocerca volvulus, ceguera de los rios

1-2 2-3 3-5 10 .000-20.000 100-300

ingestion de huevos enetracion cutanea de Parvas que viven en el suelo penetration cutanea de larvas procedentes de un caracol acuatico penetration cutanea de larvas procedentes de un caracol acuatico picadura de mosquito 1 .600 picadura de la mosca negra

intestino sangre -i pulmon -r traquea-faringe sangre-pulmonsangre sangre rpulm6n ~ sangre sangre piel

3-5

500-3.000

3-5 8-10

Fig. 18.3 . Longevidad, fertilidad y vias de migracidn de helmintos qua parasitan a los seres humanos .

prcscntcn mcnor rcsistcncia por razoncs 4cilcticas . Las imcstigacioncs accrca Lid comportanlicnto hunlano indican yuc incluu1 en ctnnunitiatics mut hcyurtias cl rirsgo de infeccicin de los in ditidLIOS CS nun- tariablc, debido a ditcrencias en la exposicicin a los partsitos imasicos .

Muchas infecciones parasitarias son de caracter cronico \I P.nisitci n  IC jntcIrcs.1 t)lle MI hllcspcd nutcra, .11 mcncrs 11 .Na ciuc It() 11asa ascguratict stt transtcrcncia a otrcl incii\itiuo . El tip0 tic rcspucsta inmtulitaria sc ca m0Lilficanti0 a I0 largcl Licl [1011110 cn cl curso tic una intcccicin cr6niCA, t dei)cntic do 1 .1 f,rcscnii.t Lit :u1tigenos circulantcs, do la pcrsistcncia do la cstinittlacicrn antigcnica 1 tic la titrmacicin de innnuu>ccmlplejcrx i ;fuf. i,S. .~ i . t`.s trecllente la apalicion tit ill nuulxrsuhrcsjcrn \ tcncnrlcru" inmun  h.~ttrl,~ ;~,iccrs .

Comparacion de los tamanos de diversos parasitos

a simple vista

helmintos

La defensa del huesped depende de una serie de mecanismos efectores del sistema inmunitario I- .I dcsarr0110 tic la jnnrtu10,1(1 CS tut proccscl c0n11)lcjo yuc sur~c tic I :is intcraccicmcs cntrc ntucllos tipos tic cclulas tftcrclucs .t Ilr largo Lit tin cicrto pcriodo de ticnlpo. Los ctcctas SC SUCICn pro ducir a nitcl Icrc .11, pudicndrl cstar presenter en Ias regicmes en yue SC prerduce la t1- Sp1ICSL1 innlunit.u-ia nlt]CIION tipcls de cclulas, catia una de Ias tu .11es c> ~ahaz Lie secrCLu- tarjcls nletiiatietres . ,Victrt;is, I()s hroccscrs yuc intcnicncn cn cl ccnttnrl LIC I ;t n1tlltj-

larva de filaria larva de vsquist')ss,ma amebas, Leishmania, tripanosomas protozoos

microscopio optico

microscopio electronico

metros

Fig. 18 .4 . Comparacion de los tamanos de diversos parasitos .

Fig. 18 .5 . Deposito de inmunocomplejos en el sindrome nefrotico de la fiebre cuartana . Microfotografia de fluorescencia a bajo aumento de un glomerulo renal obtenido mediante biopsia a partir de un nino nigeriano con este sindrome . Los individuos infectados con Plasmodium malariae pueden desarrollar glomerulonefritis como consecuencia del depdsito de inmunocomplejos. El torte se tino con anticuerpos anti-IgG humana conjugados con isotiocianato de fluoresceina, y en el se aprecia un deposito granular de inmunoglobulinas a to largo de todas las asas capilares glomerulares. (Por gentileza del Dr . V. HOUba .)

Inmunidad frente a los protozoon y los helmintos

plicaci('rn dc Lin panisito cn cl scno do tin it disidu(r infcctado puccicn scr clitcrcntcs do aqucll()s quo ticncn caatno objctis- o impcdir nuo\as intcccioncs . En alg inas infccci(nrcs p(rr liclntintos sc pr( r duct till proccso dc inmuniclad concomitants>, cs dccir, una situacion cn yuC, pest ;a quc la intccci()ti initial n( a sc consiguc crradicar, cl hucspcd adquicrc rcsistcncia \' no Puctic scr intcctado p()r nuc\()s cicniplarcs tic] liclminto . Fit gcncral, his antiatcrpos son ncccsarios pure climinar a jos parasitos cxtracclularcs contcnidos cn la sangrc (Arf. 18.b ;~, cl intcstin(r t . cn otros liquicios tisularcs ; para climinar Ion par ;isit(rs intracclularcs soil ncccsatias las rcspucstas mcdiadas por cclulas . Sin embargo, CI 6110 dC rcspucsta man aciccuado dcpcncic Lid harasito intectantc . Por cjcmplo, los anticucrpos, solos o cn prcscncia tic t(rMPlenaent(), pucdell pro\ocar ICsionCS a algunos parasitos extra cclularcs, pcro son man cficatcs cuando acttian cn conjunciiun :()It cclulas ctcctoras . Congo sc lia indicado antcri(rrnrcntc, cn una misnia infection sc pucdcn acti\ar divcrsos mccanismos ctcctoras, scgina la last tie desarrollo en LJHC sc cncucntrc cl parasito . Asi, en cl paludismo los anticucrpos fi-cntc a las tonnas cxtracclularcs impicicn yuc cstas im :ulan nticus cclulas, micntras quc Las respucstas nacChadas por cclulas C\itan la e\oluci(in laatia la fast hepatiCA cn Cl setur do los licpatocitos . La innttiniciad protmora ti-cntc al p .iludistn(a no dcpcndc cxclusi\anacntc do la Prcscntia dC ;utticucrp()S, pudicndo scr inclucida incluso cn auscntia (IC CStos . Est(r sc Ira dcmostrado mcdiantc la inoculation dc csp()r()r()it(rs dcl paludismo Cn ratoncs inmunizaCIos Colt S111mom-11a tvphimurium naanipulacla gcncticaincntc, cn la quc se 1a,abia intrOdurido 1111 gcn yuc COdifiCa till :intigcno do: supcrfcic cic dicho cspor(rzofro . Atuiquc los ratoncs no sintctizaron anticucrpos cspccificos, rcsultaron scr innauncs frCntC al parasito .

AntCS t1C actuar c(nno ccluhas prescntacioras dc antigcnos iniciado ran do la rcspucsta innaauaitaria, Ion iliac rotagos actiran c(mao cclulas ctcctoras, inhibicndo la multiplicacitin cic Ion parasitos o incluso dcstru\cndolos . Adcnias, wcrct ii nukculas quc rcgulan la rcspucsta intlamatoria . Algunas do cstas molcculas ~ I1 .-1, 11,-12, TNF(u \ 1()s factores cstimulantcs dc col(mias, t: SF) potcncian la rcspucsta inmunitaria al actiaar otras Milks o indutir su prolitcracilrn . Fs postblc quc otras molcculas, comp 11, 10, 11 . 12, las pr()staglandinas o I GIT, posc ;ua prOpicci ;utcs antiinllantatoriaS C innttua0SUPrcsoras .

Los macrofagos pueden destruir parasitos extracelulares

MECANISMOS EFECTORES
I'ara conscguir cstablccersc, y antes do quc sc produzcan las rcaccioncs ininunitarias cspccificas dcl liucsped, Icrs parasitos dcbcn supcrar prinicro los mccanismos tic dctcnsa prccxistcntcs . El complcmcnto dcscmlicna till papcl inaportantc cn cstc scntido, \a yuc cxistcn \arios parasitos yuc Iusccn tn(rlcculas cic supcrficic capaces cic acti\ar la via altcrnatisa, conio las larval infccti\as v Icrs cjcniplarcs adult(,s dc T'ichinc1ht spiralis \ las estiuistos()mulas tic Scl11t10ioma Ji1im(ol11 .

La primera linea de defensa esta formada por los macrofagos, los neutrofjlos, los eosinofilos y las plaquetas

Ia ta,()cit(rsis p(rr 11,11- tc cic 1(rs naacniLt~;(~> r(mstitutc till 111111()l 1,1111C nu'c .uiismo CIC dctcnsa dente a los parasitos do mcnor tamaiio, sin embargo, cstas cclulas tambicn sccrctan nrtichos tactorcs cit((t(ixicos,1o gttc Its pcrmitc dcstruir parasitos sin ncccsidad do in gcrirlos . ( :uando 10% macr(Sfag)s soil acti\ados por Lis citocinas soil cap,accc tic dcstruir canto pcqucfos parasitos extracelulares, tome Ins fasts critrocitarits dcl parasito paltidico, cotno otras tic mayor tatnatio, coma las lar\as dc I()s csquistirsomas . Los macrofagos tanabicn sc pucdcn comportar corrio cclulas ascsinas mcdianto los mccanismos tic citotoxicidad mcdiada potcclulas a. dcpcndicntc tic anticttcrpos ~~C\iCl)Al ; Por cjcmplo, ]as ItCi C 191-: cspccificas aunaontan su capacidad tic cicstrutcion do csquistosomulas . Tanabicn son capaccs do sccrctar citocinas omua TNFu c 11,-1, yuc intcraccionan con otros tiiurs dC cclulas ; por cjcmplo, pucdcn indutir la rcsistcncia tic los Itcpat()cit(rs frcntc a los parasitos dcl paluciismo . 1 .()s map'ofagos y los gr ;utulocitos producctt c()n1pucstos rCatti\os do oxfgcno i CRO ) tras la fagocitosis do algunos par;isi ton, conio, pin- cjetriplo, % : cruai, 1. rtarldii, Lcishmanin spp. t . los parasitos paliidic(rs ; las filarias \ Icrs esquistosomas tanibicn pronmc\cn cl cstallido rcspirat(u-io . Cuanci() Ion macr(ifagm soil activatios cog cittrcinas libcrua cantidadcs tic super()xido y pcriixido dc laicirogcno supcriorcs a las cquc libcran los nttcrtitagos rcsidentes n0rmalcs, \icndosc cstinrtilados runbicn 1()s mccanisnaos dcstructorcs no dcpcntiicntcs dC oxigcno . FI oxitto nitrico ii N()1, Lilt prodUCto dcl nictabolisnao dc la i -arginina, Cs una potcntc toxina no depcnClicntc clC oxigcno . Ian citocinas IFN j ~ TNFu cstimulan sit sintcsis por parts cic los nia crotagos, sientlo CstC CfCCto maS intCnSU ttiando ] .is don ciloclnas actiian conjuntanicntc . Las cclulas cndotchalcs tambicn pucdcn producir ()xitio nitrico . EStC iomp11CSt0 tirrma parts tic Ion niccanismos tic rcsistcncia ti-cntc a la Icishmaniasis, csquistostaniasis v paludismo, Y pr(rbablcnicntc cs inip(wtantc para cl control dc ha

I (,s .mtioicrp()s \ Las citocinas producidos cn las rcspucstas CsJ , C cificas a I(rs antigcnos parasitarios potcncian la acti\idad antipara sitaria tic cstas cclulas ctcctoras . Sin ciribargo, los macrofagos tisttlarcs, Its monocitos y los granul()cito% posccn una cicrta acti\idad intrinwca incluso Cn auscncia de una Cstinrtrlati(in prC\ia . La pucrta do cntrada clel Parasito CS tin factor do Bran im p(rrtancia ; por cjcmplo : " Las ccrcarias cic S. manstmi pcnctran a tra\cs cic la picl . La climinacitin experimental do Ion macrofagos, los neutrofilos t. Ion cosinofilos cutancos tic los ratoncs provoca till auntcnto tic la susccptibilidad Ircntc a la infection . " I ors tripanosomas t . Ion parasitos dcl Paludismo pcnctran cn la sangrc r son clinainados tic la misma por Las tclulas lagociticas dcl lrazo y cicl higado . " AI c(rmparar \arias ccpas do ratoncs coil dig-crSOS tictcttos inmunitarios con rcspccto a sit rcsistcncia f-cntc a la infection pot- 'I rrpamcuma r1wdcsicnse, sc obscrta quc Icrs tripanoeontas africanos soil dcstruidos por Ion macrofagos . Fri fasts mas aunz ;tdas do la intccci(')n, cuand(r los parasitos sc Cncucntran opsonizados con antiutcrPOS \ CI componcntc Cab dcl comple memo, Ion macrofagos lacpaticos los capturan alit fills rapicianacntc .

Fig . 18.6 . Pareja de esquistosomas adultos en los vasos sanguineos mesentericos . Aunque muy expuestos a los efectores inmunitarios, son rnuy resistentes y los esquistosomas adultos pueden sobrevivir 3-5 anos. (Por gentileza del Dr . Alison Agnew.)

Mecanismos efectores

ma\on-ia de ] .is intcccioncs parasitarias l/iq. 18 . ,') . Pcrr cjcmplo, 1 a resistencia innata frcntc a la inteccion por Ttiondii, dc la quo: carecen las indi\IC1ucrs inmunodcprintidos, parcce set- dchida a Icr inhibicioin dc Icr nTttltiplicaciin de Ices parasitos a tra\cs de un mccanismo no dcpcndicntc dc oxigcno . La activacion de los macrofagos es una de las caracteristicas de las fases iniciales de la infeccion Poo) ticmp() despucs dc la intcccion sc produce una estinmh dun dc las lunciuncs ctecron- as do los nracrcitagos . Aunclue para su actiacion cspccifica soil prccisas las citcrxinas sccrctadas por ]as cc-'I' (p . cj ., IF\ ;i, G\1-( ;SF, II . 3 c IIAh, tarnhicn pueden ser actiados a tra\cs do \ Las no dcpcndicntes de cclulas I', wino, por cicntplo : " Las cclulas \h sccrctan ll~Ny ctrand() son cstinttfadas par la It. 12 producida por los macrofagos . " Los naacroifagos sccrctan T\Fu coil) rcsptrcsta a la prcscncia do algunos productos de origen parasitario i;p . cj ., lo ." antigenos ti)sti)lipidicos de los Par;isitos palu(icos V algunos anti gcnos dc T hrucei), a Sir \cz, cstc T\Fox cstinurla a otros macroifagcn . Aunyuc cxistcn otras cclulas yuc tambicn sccrctan T\Fu, los macrcifagos actiados son la principal fucntc dc csta ntolccula, que CS necesaria para Clue sc inicicn las rcspucstas protcctoras adccuadas frcntc a cii crsas cspccics do protozoos I; p . ci ., Leishrnania spp . } \- 1lclmintos . Asi, TNFu cstinurla los maa- otav0s, Icx eosin(ifilos \ las playuctas para que cicstrtwan las lar\as de S. rnausoni, ctccto yuc NC \c POtcnciado ell prcscncia do IFNy . Ohscr\ese que, ademas dc sus ctcctos I)eneficiosos, TNFct tambicn pueden teller ctcctos pcrjudicialcs crt cl lurcspcd intectado, dcpcndicndo dc la cantidad que sc produzca del ntisnto \ dc si Cl campucsto cirurld librcincntc o sc cncucntra confnad() localntcntc . Las ccmcentracioncs scricas do cstc producto) sc corrclacionan cn la malaria por talciparum con la gra\cdad dc la cntcrmcdad . I .a administraciun de - I'\Fu ejcrce un ctccto curati\o sobrc una ccpa dc ratoncs susccptiblcs infccttdos coil Y. chrrEfecto toxico del NO sobre Leishmania in vitro
concentracidn de nitrito en el medio (Pmoles)

haudi, un parasito paludico propio dc los rocdores, inieniras que cn hs mismas condicioncs pro\oca la mucrtc dc las ccpas gcncticanacntc rcsistentcs . Es probable yuc cstas ciltimas cepas scan capaccs de producir canticlacics sufcicntcs dc T\F(t como para controlar la multiplicacioin dcl parasito, por to yuc uralquicr call tidad adicional da lugar a ctcctos tuxicos . Los neutrofilos pueden destruir parasitos grandes y pequenos I os ncutrofilon tam Ncn p)sccn Lt` pr( )picdadcs Clict( )r as clue nibs tran los macr(fagos . IA)s nctttrofilos soil cclulas dc naturaleza fa"ocitira, c . pueden dcstruir a los par;isitos ttnto poi mccanismos dcpcndicntes dc oxigcno como por mccanismos indcpcndicntcs del inismo, cntrc los que SC cncucntr:a Cl us0o nitrico . El estallicio rcspiratorio dc Ios ncutrufilos cs m ;is intcnso yuc cl dc los inacru Lagos, ~' sus granulOs do sccrccicin conticnen proteinas altantcntc citcxe)xicas (\ . Call . 31 . Pucdcn ser :tcti .ldo,, por citcrcinas como IFN-i, TNFa. c . Gal ( :SF . I .a (icstruccil)n cxtracclular mcdiada por netrtrcifilos sc -Ilcxa a caho mcciiantc la produccicm do H,()  nticntras clue los parasitos ingcridos srn) dCStrUidoN intracclul :u'n)cntc por Ion cornponcntcs clue conticru) l0S grauulo)s- I .as netrtrofilox SC acunnrlan cn ] .is rc`,ioncs inflamadas intcctadas por los parasitos, do)nde cs probable clue se encargucn dc climinar los parasitos liherad0s tras la dcstrUCClun dc Ias cclulas . Al igual yuc Ios macro')ta COs, Ion ncutrofilos posccn rcccptorcs de Fc v dcl contplcmcnto, por to clue Pucdcn intcr\cnir cn rcaccioncs citotoixicas dcpcndicntcs do anticucrpos, como, por cicmplo, la dcstruccic'm dc lan-as dc S . mansoui . En cstc sentido Pucdcn toner mayor podcr destructor yuc los cosinoifilos fi- cntc a \arias cspccics de ncmatcxlos, incluida T Spirrrli.a, aunyuc la cficacia rclatia dc antbos tipos dc cclula dcpcndc del isotipo \ la cspccificidad del anticrrcgao . Los eosinofilos estan tipicamente asociados a las infecciones por helmintos Sc I)a sugcrido yuc las co)sinc)lilo)s c)()1HO()narcm 1:0111o smcnla dc detcnsa especilico f-cnte a las fases tisularcs de ayucllos parasitos cu\O excesi\o tarttafio impidc yuc pucclan ser tagocitados, \ yuc [as rcaccioncs dc Ion mastocitos depcndicntes de It F. has e\olucionado para atracr a los eo)sinoifilas liacia cl parasito \ cstinaular sus propiccladcs antiparasitarias . La intpc)rtancia in viro do estas cclulas ctcctoras ha yucclado denu)strada claramcntc mcdiantc cxpcrin)cntos Ilc\ :tdcs a cabs) con) antistrcros trentc a los ccsinufilos . Los ratoncs intectaclos coil T spiralis\ tratados con dicho) :urtisucro cicsarrollan mas cluistcs muscularcs que los ratoncs dc control : cn auscnci 1 dc cosinofilos los ratoncs no) son) capaccs do climinar los helmintos, por lc) yuc los cnquistan para rcducir al minimo sus ctcctos noci\os . Sin embargo, 1os ultintcrs cstudicn has demostrado clue aunyuc nYtichas \TCC9 los cosinotilas a\udan al hucspcd cn su lucha contra la intcccion por I)cln)intos, cspccialmcntc impiciicndo su migracicin a tra\cs dc Icrs tcjidos, csto no sicmprc cs asi . Por cicnl ploy, la rcspucstd innrtrnitaria ti- cntc a S . mansoni dc ratomcs pri\ac1os do coninoifilos es normal, \ la cantidad dc parasitos ncccsaria para cstablcccr una intcccion Pcrr tcnias tampoco sc \e rcducida . Los eosinofilos destruyen a los helmintos mediante mecanismos dependientes e independientes de oxigeno Los c(uin(dfo)s ]toy posccn propic(lado tagociticas tall aCllSdd'ls c01110 los ncutro)filon . Las pcrturhacioncs dc la supcrficic do su Sir acti\idad sc \c cstimcmhrana induccn Sit desgranulaciin, \ nurlacia por citcrcinas como I'NFu \ GalA'SF . Sin cinhargo, la ma\on- ia tic sus ctcctos SC cncucntran bajo cl control do mccanismos cspccificos dc antigeno. Asi, Sir uni(Sn in vitro a hr\as dc hclmintas r- ccuNcr'tas con IgF cr Ig(i Ill . cj ., S. 1rnrtnsoni \ Y : spiralis) cstimula la Ithcracioin del contcnido dc sus granulos Noble la sn perficic dc los parasitos . Las Iesiones de las csquistos(mnrlas pueden ser causacias por la protcina basica principal i aiBP i del nuclco

200

TNF (Uiml)

Los datos de esta figura demuestran clue la destruccidn de Leishmania major Por parte de los macrofagos activados presenta correlacibn con la liberacion de oxido nitrico . Los macrofagos cultivados son activados Por el TNFu recombinante de forma dependiente de la dosis, observandose clue a las dosis mas elevadas la supervivencia de los parasitos se reduce hasta aproximadamente un tercio de la observada en los cultivos de control . AI mismo tiempo aumenta la cantidad de NO liberado, clue se determina midiendo la concentracidn de nitrito en el medio de cultivo . Cuando existen circunstancias clue interfieren con la sintesis de NO los parasitos sobreviven . (Segun los datos de Liew ycols., Immunol1990 ;71 :556 .)
Fig . 18 .7 .

~murlidad frerlte a Ios protwoos y Ios helm intos

Fig . 18 .8 . Destrucci6n de las larvas de esquistosoma pot los eosin6filos . Los eosin6filos se pueden adherir a las esquistosomulas y destruirlas . Las lesiones se deben a la desgranulacion de los eosin6filos y a la liberation del contenido de sus granulos sobre la superficie del helminto . En estas microfotografias electr6nicas se observe la adhesion de los eosin6filos y la desgranulaci6n sobre la superficie de la larva del helminto 11), y dos fases diferentes de la rotura del tegumento del helminto y de la migraci6n de los eosin6filos a travds de las lesiones l2 y 31 . IPor gentileza del Dr . D . McLaren .l cristaloidc de los ronino')filos . .1131) nor es cspecifica tireme .1 ninguna diana en concrcto, pcror conlo yuctia cotnfinada en cl reducido espaciot c\istcntc crurc cl cosir16filo \ cl csyuistos<nna, apcnas produce ctectos nocitos sobre Ias celulas sccinas del hucspcd . no sohrccivcn trots I ;1 infeccio'm colt protoz(xts conur 1 : rruzi o P yoilii, quo: en condicioncs nornulcs not son Ictalcs, :lsi conlo por la incapacidad de Ias rates priudas de cclulas'I pare c\pulsar .11 parasito intestinal Nippostrour~shrs by-asilirusis (/iq. 18.9) . Sin embargo, en algunas ocasio)ncs la transfercncia tic crlulas T pro ccticrucs tic animalcs inlectadon tic titrrma aguda pucdc suprimir Ias respucstas protectoras \ prmocar la nlucrtc tic lots receptorcs . Fsto) es tichido a Line estas celulas I secretan 11, -4 c I I .-10, quo: IIIhibcn la production t . la actitidad del IFN7 necesario pare actisar lots nlacrofagos t . clinlinar cl parasito . El papel (luc desenlpcnan Ias citocinas en Ias intcccioncs parasit .lrias ha silo tictiucido nlctliame la administration tic cstos conlI)ucsto)s a aninulcs intectados, or mctliantc su elimination coil ,ul ticucrpos monoclonalcs . Fri la actualidad se cstan obteniendo rulesos datos mctliantc el cstudio tic ditersas intccciones en ratones transgenicos corn respecto a una citocina dctcrrninada, asi conlo a partir de raones en Ios yuc se ha clinlinado cl gcn tic alguna cit(rcirla (ratours ^dtktuosos-l . Estors datos indican yuc muchas citocinas no s6lo cstimulan la capacidad citotoisica of citostatica de Ias crlulas ctectoras, sino yuc tambien actuan corn() factorcs tic crccimicnto title multiplican cl nurnero tic crlulas etectoras . Asi, la nlonocito%is r la csplcnomegalia tipica del paludisnlo, yuc cs dcbida al gran aunlcnto del numcro tic crlulas yuc conticnc cl bozo, son ten()mcnos dcpendientes tic crlulas f . ()trots cjcnlplos s(tn la acunurlacioin tic macroStagos en lots gralxrlomas quo: se for111 .111 en CI higad() en el CUrso Lie Ias rsquistosomiasis, la tipica cosinofilia do Ias intcccioncs potr hcllnintos \ la acurnulacion tic cosinofilos 1. mastocitos en la nurcosl intestinal en Ias intcccioncs ga%trosintestinalcs port hchnintos . Los mastocitos y Ion eosin6filos mucorsales, tie lots quo: dependc la c\olucion tic algunas intcccioncs lulr hclnlintos, prolitcran conlo rcspucsta a Ios productos de Ias crlulas T : IL-3 y GM-( :SF, c 11 . 5, respectiranlcrue . Sin embargo), un aunlcnto dcl nunlcro do crlulas tanlbicn puctir scr pcrjudicial para cl htrcycd . Asi, la administration tic 11 . 3 a ratonc% intectados coal 1xishmauia majorpucdc ewccrbar la infection a nisei local \ pr(nocar un aunlcnto tic la discminaci6n tic los parasitos, prohablcmcntc debido a la protliteracion tic lots prccursores tic la mcdula ()sea en quo: si)en Ion parasitos .

Los eosin6filos y los mastocitos acttian coordinadamente

I . .t destrmtiorn tic I,n I'll t .ts (it , .1 . marrsoui por p .(rtc (le I()s ct)si noitil,rs sc tr I)otcirt1 .rd .1 por los pro)ductor% tic los nlastorcitos, hahirndow- obscnado to ritr-o que lots cosinoifilos pr(cedcntcs do pacictncs con csquistononniasis soil mas eficaces ell estc aspccto Line lox de los indi%iduots normalcs . Loss antigenos liberados pro ~ocan la tlcsgrartulaciom tic los ntastorcitors dcpcndicnte tic IgE .1 nit,cl local, asi colnor la lit)craci(Sn tic mcdiadorcs . Estos atracn scIcctisanlcnte a lots cosinofilos hacia la zone tic infection \ potencian su actividad . \las tardc, cicrtots protductos tic lots corsin()filcx bloyuean la actitidad tic lots nlastorcito)s . Se ha dcnurstrado que cstos nucanismo s etectores sc pUc(1cn protducir in riro en lots rno nos, cn lots yuc la (ICstrUCCI()rl tie lots esyuistosonlds esta relacioln .r(1a ,rrn 1 .1 t .untulacirm tit cossiilortiLrs i,liq. 18 .S ; .

Las plaquetas pueden destruir muchos tipos de parasitos

F.ntrc Irrs parasitrrs (Iuc pucticn scr atatad(rs por Ias playuctas sc cucuentran Lu lar\ JS tic tluclas, T- rloudii v T cruzi . AI igual yuc OCUI'r'e Coil otras cclulas efectoras, str actl)'Itiad clt()to\lca se to Ixrtcnciada ell prcscncia tie citocinas i1) . cj ., IF\-+ t I NFu ) . Las phqucta% tie rata\ infectadas toll S. rnausoui adquicrcn actividad trout a Ias lamas cuando aparccen en el suero Ias proteinas do talc aguda, antes tic yuc Ias concentraciones tie antictlerpos sc hagan detectahles . Las playuctas normacs se actitan tras scr incub.tdas ell sueros tic este tipo . AI ig,ual yuc los nrlcrotagos 1 . otras cclul,ls ctectoras, Ias playuctas potsccn rcccptorcs tic Fcl: ell la su pcrticic tic su ruclnbrana, yuc Ics pertniten intervcnir en rcacciones citoui\icas depcrldicntes do anticucrpo nlcdiadas potr IgE .

LAS CELULAS T SON ESENCIALES PARA DESARROLLAR LA INMUNIDAD

En la mal oria tic Ias intcccioncs parasitarias es po%iblr contcrir rcsistcncia c\pcrinlcntalnlcntc mcdi .utte la transtercncia tie celulas csplrnicas procedcrucs tic animalcs innlunizatios, esl)ccialmente cclulas T . El papcl tic Ias celulas T tanthicn yucdA denlostrado port cl hccllo tic title lots ratones atimicos c) 1)risados tic celulas T

Id rpo tic cclula I cncargatla (ir O W11111,11 uir .t intcC :iorn (Irpen tic ticl tipo tic parasitos y do I .1 fast tic la inicccio)n, asr co)nto de Ias citocinas quo: proxluccn . 1'or cjcnlplo, tanto ]as celulas T ('1)4' cotro Ias ('1)8' ciercen efcctos prortcctores ell ditcrcnics fases tic

Para la defensa frente a algunos parasitos son necesarias tanto [as celulas T CD4' como las CD8`

Las celulas T son esenciales para desarrollar la inmunidad

Infecciones parasitarias en ratones privados de celulas T Fig. 18.9 . En los dos primeros grificos se muestra el aumento del numero de protozoos sanguineos (parasitemia) despues de la infeccion . 1) Trypanosoma cruzi se multiplica mas ripido (dando lugar a una parasitemia fatal) en los ratones clue pan sido sometidos a timectomia e irradiados para eliminar las celulas T (Thym x) . En los normales los parasitos desaparecen de la sangre transcurridos 16 dias . La reconstitution de los ratones privados de celulas T con celulas T procedentes de ratones inmunizados (T inmunes) restaura la capacidad para controlar la parasitemia . Se administraron celulas hepaticas fetales a ambos grupos de ratones timectomizados para restaurar las funciones hematopoyeticas esenciales . 2) Plasmodium yoelii provoca una infeccion autolimitada en ratones normales, siendo eliminados los parasitos de la circulation en el plazo de 20 dias . En los atimicos los parasitos se multiplican indefinidamente, provocando la muerte del raton al cabo de unos 30 dias . 3) En este grafico se representa la intensidad de elimination del nematodo intestinal Nippostrongylus brasiliensis del intestino de ratas en funcion parasitos/ mm, de sangre parasitemia ( .) 100

T. cruzi

P. yoelii

huevos/g de heces 10' ,

N. brasiliensis
'r I",

2 rr

w,Lil

3 . rtiyrr r

ft'r.res

10' -

---101 1 11111 0 10 20 30 1 dias tras la infeccion

02

10"

t 0 4 F 12 16

dias tras la inferokin

10

20

30

dias teas la

del tiempo transcurrido desde la infeccion . En las normales todos los helmintos hall sido expulsados a los 13 dials, de acuerdo con el numero de huevos detectados en las

heces. Para que se produzca esta expulsion es precisa la presencia de celulas T, ya que en las ratas atimicas la infeccion intestinal se cronifica.

la intecci(in par Plasmodium : las celulas L CD4` inter\icnen en la rcspucsta inmunitaria f-cntc a la fast sanguinca de P . roclii, nticntras que en la fast hepatica tic la intcccidn por P be~,Ihci sail [ .Is eclulas T ( :1)8' I :ts que cjcrcen cl ctecto protector. El efccto tic las eclulas CD8' cs dohle: par una parte sccrctan IFNt, que inhihc la multiplicaci(in tic los parasitos cn los hcpatocitos, y por otra destruycn los hcp:aucitos intcctados . Los hcpatocitos cxpresan moleurlas (fH tic close I, pero no Lie close 11, por to que Las ce lulus CD4- no los pucden rcconocer \ no Soil estirnLrladas tiara que prodtucan IF\y . [)c la misma ti\rnra, Las eclulas ( ;F)8' no afectan a 1(rs parasitOS dtrrante la fase sanguinca p(~rquc los critrocitos n( r expresan malecul:ts C.PH tic close 1 . Lm rcspucsta inmunitaria trcntc a 7: crud no dcpcndc exclu si\-amcntc Lie ]as cclrrlas T ('I)4' (;118', sine que tamhicn in teniencn en clia ]as eclulas NK lus anticucrpos, Csta mismo (xurre en la rcspucsta inmunitaria frcnte a T rfuudii. Sc ha compruhado c\pcrimcntmlmcntc yuc las eclulas ( :1)8' conficren protccci(in a los ratones prixadas Lie celulas T ( :1)4' mcdiantc l :r produccibn do IFNy \ cl ctect(r citot(ixico yuc cjcrccn sabre I((s inacriitagos intectatios. Las eclulas NKesurtttrladas por II .-1 2 pr(rccdcntc tic los mact-6tagos constituycn otra tircruc tic IFNy. Las intecciones cr61licas \an asociadas a una rctfuccilm tic Ia pr()duccibn tic IFN(j. Pucdc que estc sea cl motixo tic la alta incidcncia de toxoplasmosis ell los pacientes coil SIDA, que disponen de pocas celulas CD4` . Las celulas T CD4' actuan de diferente manera segun el tipo de infeccion Las eclulas l c((lahorad((ras pucdcn 1\crtcncccr a d(,s suhp(()la dunes ditcrcntcs, 1 I r 1 c I- tit i \ . cap. 9j . En ],is fasts iniciales tic una infecci(rnr cs posiblc cncontrar una mczcla tic las dos tipos tic eclulas ; el equilihrio cntrc amhas se pucde m(uiificar scgun cl tiempo o la edad, \ Nude inclinarsc hacia una do ellas cuando Im cntermcdad pcrsistc durantC un pcriotio prolongatio tic tiempo . Las citocinas tic las eclulas Tti I \ Ti 12 son mutuamcntc antag,onist.ts, por to que 1 .1 C\ 01116611 tic In cnfcrnxciad dcpcndcr:i tic la suhpohlacibn tic celulas T que predomine fnalmente (cst(r dc pcndc cn grail mctiida dcl tips tic par.isito implicado, c cn algunas ocasiones puctic ser impredccihle i. (~(ntno la importancia re-

lati\a de las eclulas Ti iI \ TH2 suds ser ditererae cn las di .stintas infccciones causadas por protozoos, \. en algunas ocasi(nies tambien en ]as debidas a helmintos, cs ncccsario estudiar coda caso por scparado . i En cl capitulo I I sc explica yuc citocinas son producidas por cstas suhpohlaciones \, cull es su Impel Llcruro Licl siste ma inmrmitari(~ . i En las reacciones inmunitarias frente al paludismo intervienen tanto las celulas TO como las TH2 Las celulas 11I I actiian durantc la tasc hepatica del paludismo: la administraci(Sn dirccta do IFNy (una citocina Fr l I ) a chimpanccs intectacios con esporozoitos tie Plasmodium vivax reduce la p.rr,tsitcmia . ALICmaS, la capacidad tic los ratones inmunizados para resister la cxposicidn a los csp(rrozoitos tic 1'. bergbei pucdc ser contrarrcstada nictfantc la administrtcion de anticucrpos frcnte a 11 2 Ny . Las celulas T112 suclerl colaborar en la pr(xlucci(m do anticucrpos que :fumentall la cshecificitiad tic la rcacci('m inmunitaria. Por ejcmplo, la climinaci('m tic los parasitos paltidicos durante la tasc critrocitaria sc produce en c1 hazo por nacdio tic MILLas ctcci(was acti\atias \ citotoxicidad dcpcndicnte tie anticucrpos. fart que la inntunidad sc mantcnga cs ncccsario que CI hazo permanczca intacto, aunque modificado . La subpoblacion TO potencia las respuestas defensivas frente a los protozoos intracelulares El 11-N-, acti\a a I((s nttcrotagos para clue destruyan a I((, proto/o(nque \-i\en ell su interior, como 1. . major-, 71 cruzi v T .,golidii (Iigs. 18.10 t 1(8.11) . Tamhicn potcncia las respuestas efectoras trente a otros parasitos. Los ctectos del IFNy sc han quest(( c1cgantcmcntc tic manificsto cn cicrtos cstudios Ilcxados a cabo con lxisbmauia, en los que SC ha demostrado que Las ccpas rcsistenres Lie ratones infpidcn cl dcsarrollo Lie ]as Icsioncs cutancas inLlucidas por 1.. nu2jor mcdiantc la producci('in do IF_ \y f una cit(r cina 7 I i 1 ) . En los ratones semibles, cn los clue la entermcdad cs tic caractcr progrcsi\o, prcdominan las celulas Ti 12, la sccrcci(in por partc tic CStaS celulas tic IIA inhihc la producci(in tic Il Nlj. La administraci(in de anticucrpos frcnte a IIA produce un ctccto curate\ o, \-a yuc reduce la actixidad T112 con la consiguicntc cxpansi(in tic 1 t suhpohlacilm '1 'l 11 . La administracidn tic I Fvy rc-

Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

Efecto protector del IFN,, parasitos 1 " 1T)"ml de sangre 15-

04
(
!l11111i, 2

14

dias despues de la infeccion Fig. 18 .11 . Efecto de la administration de la citocina IFN7, producto de las celulas T, en la infeccion aguda per Trypanosoma cruzi. En esta cepa de ratones los parasitos se suelen multiplicar y provocan la muerte del huesped en unas 3 semanas. AI administrar IFNy recombinante de rat6n la multiplicaci6n queda bajo control, siendo finalmente erradicados .

Fig. 18 .10. Inhibition de la multiplication de los parasitos en macrofagos tratados con citocinas. Se trataron macrofagos peritoneales de ratones BALBr'c infectados 72 horas antes con 10' amastigotes de Leishmania donovani con el sobrenadante de un cultivo de celulas T activadas (clue contenia citocinas) o con on sobrenadante de control . Una vez cultivadas, las celulas tratadas con citocinas no contienen parasitos 11), mientras que los macrofagos no tratados siguen albergando a muchos parasitos (2) . En estudios posteriores en los que se utiliz6 IFN-( recombinante y anticuerpos monoclonales frente a IFNt se demostro que la inhibition del crecimiento de los parasitos esta mediada por esta citocina . (Por gentileza del Dr . H. Murray, con autorizaci6n de J Immunol 1982 ;129 :344-357, American Association of Immunologists.)

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Funciones de [as celulas TO y TH2 en la infeccion por Leishmania

combinante a los ratones susccptiblcs not cs suficicntc para cur,trlcts, to yue indica que su susccptibilidad cs dcbida al cxccso dc actisidad T112, \ not a un defccto dc actisidad 'fill . IL-12 (protducida por los ntacr(Stagos y las celulas 11) protniuc\c cl ere cirnicnto dc las Cclula% - fill actkadas v dc Las celulas \h, asi comet la sintesis de una scrie dc citocinas anti-Leishmania . canto csta citocina canto c:l IFN~, suprintcn cl desarrollo dc Lis cclulas T112 t prcxiuccn un etccto curatn o cuando sc adininistrall a ratones susceptible% cn [as primeras Cases del protceset inlcccioso . En Icts serer IttrndIlttS la Icishmaniasis cutanea ditusa v la Irish mania%is s isccral prctgrcsixa sc caractcrizan por la cscasa produc. cion do Il Ny ~ por cl auntento dc la cxprcsicin dc IL-10, la citocina asociada a [as celulas FH2 yuc inhibc la prolitcracioin s . cl funcionamicnto dc ]as celulas 11 I1 . IL-4 inhihe la acticidad dc lots monocitos huntanos tircntc a L. donovani inducida por cl I FN ; in vitra (Jiq . 18 .12) . Fsttrs hallazgos sugicren yuc tai \c/ . sea posillic utilizar ll .-12 colno tratalnicntot para la leisltntaniasis cronica, sicmprc yuc SC ncutralicc simultancanentc la actixidad de Lis ci tocinas antagctnistas, 11 .-4, I1 .-10 v IY ;F(l . En las infecciones por helmintos son importantes tanto las celulas TO como las TH2 Las rcsj)tlestas innttutitarias fente a I,u intrcciontc, l?otr IIClnllntos sc caracterizan por la titration dc Lu conciitraciones dc IgE y por la cosinotilia, Y dcpcnden dc las citocinas secretadas por las celulas TH2 . Sin embargo, las aportacioncs rclatisas dc las subpoblacioncsFit 1 v TH2 en ]as rcepucstas illmunitarias fircntc a cstos parasitos sigucn sin cstar clams . Para complicar aun m:is esta cucstio n, ],is rcspucstas cn los ratones v cn ]as rata% son (lifcrcntcs a lax clue sc protduccn cn los scrcs humanos, al ntcnos cn cl caso dc la esyuistosolniasis : parecc clue cn los scrcs humallos los ctcctos dc las celulas T112 son importantcs, to yuc la resistencia frcntc a la rcillteccicill despucs del tratamicnto tarmacologico csta directamcntc rclaciotnada con la production dc IgE. Potr cl con-

activation de los macrofagos, curacion

ausencia de activation de macrofagos, enfermedad progresiva

Fig. 18 .12. Desarrollo de la respuesta inmunitaria frente a la infeccion por Leishmania. En la figura se muestran las citocinas que secretan las diferentes poblaciones de celulas T y sus efectos sobre la evolution de la enfermedad . Observese que IL-12, que tambien es producida por las celulas B, ademas de promover el crecimiento de las celulas TO tambien promueve el de las celulas NK, que constituyen otra fuente de IFNy, la citocina clave para conseguir eliminar el parasito .

trario, para inducir inmuniclad nicdiantc una s-acuna en Icts stones son necesarias ]as celulas TI I l ' la prcsencia dc IF\' mientras yuc las celulas TH2 estan rclacionadas con fenoimenos in III unctPatolcigiccts inducidos por lots huccos del parasito . La conntutaciotn hacia una r01xlcstt h112 cs protnovida por lots propios huetos . El patron dc production dc citocinas pucdc scr dilercntc en los hucspcdcs intccrados \ cn lots s aalnados . Por cjcmplo, en Icts rttoncs intcctados con S. mansoni prcdominan las celulas TH2 protductotras do IL 5 . Pctr cl contrario, cn los ratones yuc hall

Las celulas T son esenciales para desarrollar la inmunidad

sido innlunizades [as conccntracioncs dc IgE. y cl nunacro do rosinofilos soil bajos, \ preclonlinan las celulas 'l'111 . La secrecioSn dc IF\y poor parts dc Isis celulas I'H I actna las celulas efectoras clue destruyen las lanais de la tale pulmonar nxdiantc la prodUcci611 dc cixido nitrico . Sin embargo, cuando los laclnaintos adultos empiczan a producer 11uCYUS se libcra un antigeno solu tile procedentc dc cstos I1uC\'o1s clue s6lo cjcrcc sus efectos score los stones susceptiblcs . Este antigeno inhibe cl tunciomanlicnto dc las cclulas Tit I, reduce las conccntracioncs tic IFNY y estimula la producciim dc l l .- ; por parts dc las celulas ht 12 . 1-:n alt unas inicccioncs parasitarias cl sistcnaa innlunitario no es capaz de erradicar complctanlente cl parasito, porn trata sic aislar al organismo con Molds inflamatorias . El organismo del hucsped rcacciona trcntc a los antigcnos libcrados localnacntc, con la consiguicntc cstirnulacioin dc la libcracion dc citocinas quc atraen celulas bade csa region . Estc fcnonlcno sc ha ebscn ado cn ratones vacunados con ccrcarias dc csquistosonaas atenuados n1c-

diantc radiacion . Las celulas intlantatorias, sabre todo lintoci tos Ti 11, cnlpiczan a rodcar la larva en el pulnlon en las prime ras 24 horas postcriorcs a la inoculaci6n intra%enosa del get-men lfioT. 18 .13j, clitando dc este naoxlo la emigraci61l laacia las zones cn las quc madura a adulto . ()fro cjcnlplo de rcaccioin organica nacdiantc tabicacion del parasite cs cl granulomaa frcntc a csquis tesonla a nivel hcpatico . Esta reaccio n CS una respuesta crimica mediada por celulas trcnte a los antigcnos solublcs libcrados por los hucc- es atrapados ;1 nivcI l1epatico . l.os macrbtagos se acumulan s- liberan facto>res fibrogcnicos, quc estinazrlan la forntacion dc tcjido grululonlatoso v, cn ultimo ternlino, fibroso . _lunquc csta reaccion puccie sec beneficiosa para el hucsped, ya quo protege al 1ligado dc las toxinas clue sccretan los huclos, tambien pucdc scr una importante fucnte de tenomcnos patologicos, clue pucdc Ilegar a presocar alteracioncs hepaticas cstructurales y funcionalcs irrcccrsiblcs . En auscncia dc celulas T no sc forman granulon1as ni sc produce la subsiguicnte cncapsulaciim fibr6tica .

Fig . 18 .13 . Microfotograffas de pulm6n de raton en las clue se reconocen zones pulmonares alrededor de esquistos6mulas migratorias de Schistosoma mansoni. Se administraron esquistosomulas pulmonares por via intravenosa ; en la imagen 1 se observan las larvas inyectadas a las 24 h en el raton virgen y en la 2 se observa clue, en ratones protegidos mediante vacunacion con cercarias atenuadas mediante radiacion, se observan celulas inflamatorias en las primeras 24 h . Las fotografias 3-6 muestran el desarrollo secuencial de los focos a los

2, 4, 8 y 12 Bias de la exposicion . Los lavados broncoalveolares y los estudios de inmunocitoquimica ban demostrado clue el principal componente de los infiltrados pulmonares son linfocitos CD4' . La principal citocina producida por estas celulas es el IFN( y en el tejido pulmonar completo se induce ARNm de IFN,,, to clue permite deducir clue la respuesta protectora es de tipo TH1 . (Por gentileza del Dr . Lesley Smythies con autorizacion de Parasite Immunol 1996; 18 :359-369 .)

Inmunidad frente a los protozoon y los helmintos

Los mecanismos clue sc actin an dcpcndcn dc la zona anato mica yuc OCttPC CI parasito, comer Cl intestino 11). cj ., 7i-irhlrristr-iclnrra ) o los tcjidos (p . cj ., Onchortrca volrulus), \ dc la fast dcl ciclo \- ital cn quc sc cncucutrc a p . ej ., lars as dc csquistosonta en los pulnaoncs V helmintos adultos en las \cnas) . Las celulas TH son esenciales para la elimination de los helmintos intestinales Sc ha co~mprohado cycrinacnttlnacntc yuc Ion electors tic has cc lulas'1'ta2 son inaporrtantcs cn la,, intcccioncs intcstinalcs por hcl naintos. Por ejcnaplo, lors rat(rncs, yuc normalnacntc son rcsistcntes trcntc a ]as intcccioncs por parts do los triCOCCfalos merinos, desarrollan tum intcccion pcrsistentc cuando sc ncutraliza la citocirca I1_ 4 f una citocina Ti 12 ~ . Por cl contrario, los stones scnsiblcs expulsan los ltucsos cuando sc proartuexe la actjsidad dc IIA naediantc la administracio n dc anticuerpos neutralizantcs ti -cntc a Il~N-, . Dc la nusnaa t<rrnaa, la adrninistracion dc f1 .-12 a ratas infcctacias rccicntcnacntc con cl laelnainto intestinal N. hrasilicnsis cstinaula la Producci()n dc IFN,v, con to quc sc rctrasa la expulsion de los parasitos. IL-12 actua inhihiendo la production do las citocinas'1 - tt2, cspecialnacntc IL-4 c IL-5, por to yuc inhibc la produtcjon do It l-: la hipcrtrofia dc los m;tstocitos intcstinalcs, funUOnCS do II=4, asi como cl dcsarrollo dc la cosinofilia, quc cs uno dc los ctcctos yuc provoca IL-5 . Fn el proccso dc expulsiina dc los helmintos intcrvicncn loss mastocitos (ic la mucosa quc inducen las tclulas'I actiVadas por Cl antigcno . Sun productos estimulan la actisiclad tic orros pro cesos ctcctorcs, intcraccionan con los cosinofilos \ acclcran la expulsion dc los parasitos !/iq . IsY.14j . Los grinulos citoplasna ;iticos de los mastocitos conticncn dixersos mediadores sintetizados prc-

siamcntc (\ . cap. 23 i . l:urahicn constitu)cn tuna tuentc dc tnuchas citocinas difcrentes, cture I ;as yuc SC cncucntran II .-3, IIA, GhlC .SF y I'Nh(, asi como de una protcasa . Prosocan modificaciones tic la pernacabilidad intestinal \ la descanaacion del epitelio, to clue tambicn puccic scr util para cxpulsar At unos prottovours pa rdsitos . Eli ]as intcccioncs intcstinalcs pcrr ncmatoclos las cclulas caliciformes rccubren con moco a los Itehnintos justo antes tic su expulsion . Sc sabc quc csta respuesta es especifica, porcluc solo se prociucc cn aninaalcs inrnunizados . La nnrdificaci(in dc la pcrnacabilidad tic la mucosa inducida por los mediadorcs libcrados pcrr I(>s n)aistocit(rs hernaite yuc Cl conaplcnacnto \ l0S anticuerpos scricos scan secrctados haci ;t la luz intestinal . Fs posiblc quc cstos nacdiadorcs tambicn cjcrzan algirn ctccto sobrc la rantsculatura lira intestinal (IUC flCllitC Ia expulsion dcl parasitos naccliantc mocimicnt(n pcri,r,iltic()s-

Los parasitos inducen la production inespecifica y especifica de anticuerpos

t:n CI curs() tic nauCIMs intcccioncs I,,ar ;ISIUarias NC isrodutc una III lrcr -~.unnr,t"-l()bulincmia inespecifica, debida probablemente a sustanci ;as libcradas pcrr los parasitos clue actuan como naitogenos do [as cclulas 11 . Las concentracioncs totalcs tic innaunoglobulinas son altas: cn la tripanosonaiasis N cn cl paludisnao sc clcxan las cic 1;.:11, naicntras quc las dc IgG for laaCCn cn CI Iriluclisnao N cn la Icishnaaniasis sisccral . I a inaportancia rclatica dc las rcspucstas dcpcndicntcs c indcpcndicntcs dc anticuerpos es ditcrente segun cl tipo dc infcccicin ( .tilt. 18.1 .5). Fn la tzirtra 18.16 sc mucstra un resunacn dc los mecanismos yuc utilizan Ion anticuerpos espccificos para controlar ]as intcccioncs parasitarias, yuc son Ion sit;uicntcs :

Procesos implicados en la expulsion de nematodos intestinales

Fig. 18 .14. La expulsion de algunos nematodos intestinales se produce espontaneamente a las pocas semanas de la infection primaria . Parece clue esta expulsion se produce on dos Eases, y clue se consigue mediante una combination de mecanismos dependientes e independientes de celulas T. 1) Las celulas T (principalmente TH2) responden a los Ag parasitarios e inducen a) la sintesis de Ab por parte de las celulas B clue han proliferado previamente como respuesta a IL-4 e IL-5; b) la proliferation de los mastocitos de la mucosa, como respuesta a IL-3, IL-4, IL-9 e IL-10, y c) la hiperplasia de las celulas caliciformes del epitelio intestinal, clue secretan moco . Los helmintos son danados por la action coordinada de los Ab y los productos de los mastocitos sensibilizados por las IgE, clue se desgranulan tras establecer contacto con el Ag y liberan histamina, mediador clue aumenta la permeabilidad del epitelio intestinal . Estos procesos no son suficientes para eliminar los helmintos. 2) Los macrofagos secretan moleculas inflamatorias inespecificas como TNF e IL-1, clue colaboran en la induction de la proliferation de las celulas caliciformes e incrementan la production de moco . Este moco recubre a los parasitos y provoca su expulsion . El ntimero de celulas caliciformes en el epitelio del yeyuno y la secretion de moco aumentan de forma directamente proportional a la cantidad total de
I

procesos especificos 'p,1 procesos inflamatorios dependientes de celulas T inespecificos ; p. ej ., TNF, IL-1
1

estimulacion de la proliferation de celulas caliciformes

luz intestinal

epitelio intestinal

aumento de la secretion ` de moco . - expulsion m

lesiones metabolicas

helminto danado

parasitos presente . Las celulas T efectoras especificas de Ag son generadas en las primeras fases de la infection, y el paso clue limita la velocidad de la reaction es el inicio del ataque por parte de los Ab . La

importancia relativa de todos estos mecanismos depende del tipo de nematodo implicado.

Las celulas T son esenciales para desarrollar la inmunidad

Importancia relativa de las respuestas dependientes e independientes de anticuerpos en las infecciones por protozoon dependiente de anticuerpos importancia mecanismo lisis pot parte del complemento, que tambien los opsoniza para la fagocitosis sistemas de evasion variacion antigenica intracelular; variacion antigenica fase hepatica fase sanguinea citocinas activacion de los macrofagos activacion de los macrofagos mediante IFNt y TNFa; destruction mediante NO y metabolitos del oxigeno independiente de anticuerpos importancia mecanismo

parasito y habitat

T. brucei, libre en sangre Plasmodium, interior de los eritrocitos

40

bloqueo de la invasion, opsonizacion para la fagocitosis control de la diseminacion en la fase aguda de la infection, sensibilizacion para la CMCDA control de la diseminacion

intracelular

(fase cronica)

intracelular

++++

Fig. 18.15. En esta tabla se compara la importancia relativa de las don respuestas inmunitarias, los mecanismos que intervienen en las mismas y, en el caso de los Ab, los sistemas de que dispone el parasito para eludir sus efectos . Los Ab son un componente esencial de la respuesta inmunitaria frente a los parasitos que viven en el torrente circulatorio, como los tripanosomas africanos y los parasitos paludicos, mientras que la inmunidad celular es man activa frente a los parasitos tisulares, como Leishmania. Los Ab pueden danar directamente a los parasitos, promover su fagocitosis, activar el complemento o impedir su entrada en celulas no infectadas del huesped, limitando de esa forma su

diseminacion . Una vez que el parasito penetra en las celulas queda a salvo de los efectos de los Ab . Tanto Trypanosoma cruzi como Leishmania son sensibles a los metabolitos del oxigeno que se liberan en el estallido respiratorio de los macrofagos, asi como frente al oxido nitrico. El tratamiento de los macrofagos con citocinas aumenta la liberation de estos productos y reduce la penetracidn y la supervivencia de los parasitos. Los parasitos paludicos pueden ser destruidos por sustancias secretadas por los macrdfagos activacos, como el perdxido de hidrogeno y otros factores citotoxicos, incluso cuando se encuentran en el interior de los eritrocitos .

Mecanismos mediante los que controlan algunas infecciones parasitarias los anticuerpos especificos

parasito

esporozoitos de Plasmodium, helmintos intestinales, tripanosomas proteina del complemento

esporozoitos y merozoitos de Plasmodium, Trypanosoma cruzi, Toxoplasma gondii 3

Plasmodium, tripanosomas 4

esquistosomas, Trichinella spiralis, larvas de filarias

mecanismo

larva del helminto impide la diseminacion mediante la neutralization del punto de union, impide la fuga de la vacuola lisosomal, impide la inhibition de la fusion lisosomal

efecto

lesiones directas o lisis mediada por el complemento

estimulacion de la fagocitosis

citotoxicidad mediada por celulas y dependiente de anticuerpos (CMCDA)

Fig. 18 .16. 1) Daho directo. Los Ab activan la via clasica del complemento, provocando lesiones en la membrana del parasite e incrementando su susceptibilidad frente a otros mediadores . 2) Neutralization . Los parasitos como Plasmodium spp. se diseminan a otras celulas mediante la union a receptores especificos; el bloqueo de los puntos de union del merozoito con Ab impide su union a los receptores de la superficie eritrocitaria, por to que interrumpe el proceso de multiplicacidn .

3) Estimulaci6n de la fagocitosis . El componente C3b del complemento depositado sobre la membrana del parasito to opsoniza y facilita su fagocitosis por parte de las celulas poseedoras de receptores de C3b (p . ej ., los macrofagos) . Los macrofagos tambien poseen receptores de Fc . 4) Los eosinofilos, los neutrofilos, las plaquetas y los macrofagos presentan propiedades citotoxicas frente a algunos parasitos cuando estos se encuentran recubiertos de Ab (CMCDA). Esta reaction se ve potenciada en presenca de complemento.

Irmunidad frente a los protozoos y los helmintos

I .()s anticuerpo), pucdrn actuar dircctantenic sobre Ios protozoos t danarlos, ,a sea por si u)lo)s o) mcdiantc la activation del complcntcnto (kl. 18.1 .-') . Los 1nticucrpo)s pucdrn ncutralizar directamcnte .t un par .isito) impidiendo su union a 11s cdulas no intectadas del hucspcd, coma) ocurrc cn cl caso do Plasmodium ,pp ., cuyos mcrozojtos penetran en Ios critrocitos ntCCliantc un receptor especial : esta penetration pucdc set- inhibida mcdiantc anti cucrpos especificos (fry . 18.18') . Los anticuct -pos tambirn puC den impedir 11 discminaci(m del parisito, CUIIte ocurre, pun' ciemplo, cn la fasc aguda do la infcccion por 7 : cruzi . IA)s ;ulticucrPOS pucdrn cstin)ular la fagocitosis por parts do . ,. lo, nlltreflg(), . 1. .t t,t L,ellll,l, t, dlln nl,t Inten 1 Cn l Ie,lW do: complcntettto . Estos efcctos cstin mcdiados por los rcccp [ewes de Fc ~' C3 de Ios macroitagos, CUM nt1111CI"e pucdc' 1u mentor c()nt() consccucncia do la icti\aci()n do: estas cclulas . I .(), anticuerpos tambicn intcr)iencn en la, rcaccioncs do: citotoxicidad mcdiada po)r cclulas \- depcndicntc do anticucrpo)s, coo las quc so: proxiuccn cn las intcccioncs por 7 : cruzi, 7 : spiralis, S. nmnsoni )' fillrias . I -is Milk ,, citoto)xicts cone) l(), ntacrofagos, Ios ncutrofilos \ los cosin(Ailon ,e adhicrcn :t Ios hclmintos rccubicrtos prcrjanacntc do: anticuerpos mcdiantc sus rcccptores de Fc v ('3, v Ilcvan a Cabo un proccso do: cxocitosis sobre la utperficic del parisito . LO, di,tintos isotipos do anticucrI)os pucdrn dar lugar a efcctos difcremes . ( :omo sc ha indicado antcriormcme, 11s IgF. c,pccific,ts dcl parasite) do: Ios individue, inlectadv), con c,Cluisrr),onnls u)nficrcn rcsistoncia a 1,1 intcccio)n, oxistiend() un1 relacii n inccrsa cntrc la concentrlciein sanguinca do: dichas IgF c 1,1 prc)Imbilidad do: rvinfcccio)n . Parece Clue IgG4 bloquca los etccto)s de las IgF ; la reinfeccioin CS mas probable en l()s nines, ell N)s Clue las conccntracioncs do: I , G4 mm Inas clccldas . Se crcc Clue hard quc se dcsarr()Ilc 11 inmunidad c, neceslri1 1111 .1 C011111LM16611 ell

trc 1-G4 c IgE, quo: se produce al it a, anzando 11 cdad, las nt,ixim,ts tasas de inlcxcion se obscrvan cntre lo ,, 10 s . Ios 14 anus de clod, nu)mcnto cn Clue la concrntracion do: lVG4 cs mas clcvada . En mochas intccrioncs no CS f:icil di,tinguir las rcspucstas do quo: ambas act6an de fbrtipo cclular do: l .ts do tip() humoral, nrt coordinada en la lucha contra cl parasite . Esto queda refle jado) en la riijara 18 .19, en la Clue so eltumeran las rcacciones inmunitanas quo: so l)UCLIcn producir frente a las 11n - 1s do esquistosoma . MECANISMOS DE EVASION Para quo: una intcccioin parasitaria tenga exito es imprescindihlc Clue Ios parasites cludsn, 11 menus parcialmcmc, Ios efcctos do: 11s rcspucstas inntunitari 1s del Itatisped, Ios parasites ban desarro Ilado muclm, li)rmas do conscguirlo . Has dlgunW Clue Ilegan a utilizar las cclul :u n101CCtIl,ts dcl sistcma inmunitario del huc,ped plra su propio prmcclu) : 1xishmania, al utilizar Ios rcceptores del complcmento para penetrar en Ios macr()tagos, intpide quc SC inicio Cl e,rtllido respiratorl -io V evitd la destrucci(r)n inducida por Ios productos toxicos Clue se producer en Cl mismo . Peso .tl Impel protector Clue descmpena en la, rcspucstas ti-cnto a machos parasites, cl T\F(j. del hue,pcd cstimula 11 produccioin do hucvos por parts do Ios eientplarcs adultos de S. nutnconi, micntras Clue 7 : brucci utiliza cl IF\7 conto factor de crccinticnto . Los parasites pueden resistir los efcctos destructivos del complemento En cl cam) do Lcishmauia cud rcst,tcncia c .ri ro)rrcLicio)nada con sit )irulcncia . 1 . . trnpica, Clue CS do,truida colt Luilidad por Cl contlplcmcnto, prm-oca Icsionc, cut.incas k)talizada, \ autolimiEfectos de los anticuerpos sobre los parasites pallidicos parasites/ mm, ( .10 3 ) 12 crecimiento de los parasitos,'H, rpm (x10 I

trr- fo " rntns

4 Fig . 18 .17 . Efecto directo de los anticuerpos especificos sobre los esporozoitos de los parasites paludicos . En estas microfotografias electronicas de barrido se observa un esporozoito de Plasmodium berghei, agente causal del paludismo murino, antes (1) y despuds (2) de ser incubado en suero inmune . La superficie del esporozoito resulta danada por los Ab, Clue perturban la membrana externa e inducen la perdida de liquidos . Los Ab especificos ejercen un efecto protector frente a la infection per Plasmodium spp . en varias fases extracelulares de su ciclo vital . Los Ab implicados son especificos de coda fase . (Per gentileza del Dr . R . Nussenzweig .)

dias

12

8 16 24 horas de cultivo

Fig . 18 .18 . 1) La transferencia de ;r-globulina de adultos inmunizados a un nine infectado con Plasmodium falciparum provoco una brusca reduction de la parasiternia . Los anticuerpos especificos actuan sobre la fase de merozoito del ciclo vital del parasite, impidiendo la iniciacion de nuevos ciclos de multiplication en la sangre . El desarrollo de gametocitos a partir de las formas intracelulares preexistentes no se ve afectado . 2) La presencia de suero inmune interrumpe el aumento del numcro de parasites en un cultivo de P. knowlesi (un parasite paludico de los monos), segun la velocidad de incorporation de 3 H-leucina . La multiplication queda interrumpida en la fase inmediatamente posterior a la ruptura del esquizonte, al impedir a Ios merozoitos liberados infectar nuevos eritrocitos . La actividad inhibidora del suero inmune puede ser reducida mediante la absorcion previa de los anticuerpos especificos con esquizontes libres .

Mecanismos de evasion

Was, mientras quc L. douoraui, quc cs dicz \-cccs man rcsistcnte frcntc al conlplemento, sc disemina por las s-isccras s- da lugar a una enlirmedad quc mochas srces resulta fatal . Los mccanismos quc utifzan los parasitos para resistir I(^ cfcctos dc] complentcnto son dis'crsos. La cuhicrta superficial Lie lipofbstoglicano do L . major actin a cl complcmcnto, pcro a continuacicSn cl conlplejo sc dcsprcndc, por to quc cl panisito cs ita la lisis . Los tripomastigotcs do 'l : rrrrzi posccn una glucoproteina do superficie con una actin- idad parecida a la dcl factor acdcrador de la degradacitin (DAF), quc 161143 IaS rcaccioncs cjcl ctaI1l)1cnIento i;1 . cap. 4 ~ . La rcsistencia quc N an IdquiricndO las csquistostnnulas

al it madulando csta rclacionada ion la progrcsis'a aparicion do una mo Iccula do superficie quc ttmhicn sc p trccc :11 DAF. Los parasitos intracelulares evitan ser destruidos de diversas formas Los 1~,1r,isil~~s dur Been CI'. CI intcritn- dc h)s m.tcn~tat;l~s 11 .111 do sarr"11ad11 diccrsos sistcntts part csitar ser destruidos p1~r 1os me taholitos dcl osigcno s. las enzimas liulsomalcs iti?s. 18 .21) c 18.?1) . 1' goudii pcnctra en los macrofagos mcdiantc U11 .1 18.21), asi csita quc SC dCSCncadcnc cl estallidcl lagocitica rcspiratorio ; Leishmanin hcnetra unicndolsc a Ion receptores del
\ r ll no

Posibles respuestas efectoras frente a las esquistos6mulas

ailtir;~nns parasitarios

anticuerpos IgG IgE

Fig. 18 .19. En este diagrama se muestran los diversos mecanismos efectores que se conocen que danan a los esquistosomas in vitro. El complemento dana a los helmintos por si solo (1) o en colaboracion con Ab 12). Las celulas TO pueden actuar directamente inhibiendo el crecimiento de las larvas en los pulmones (3). El anticuerpo sensibiliza a los neutrofilos (4), a los macrofagos (5), a las plaquetas (6) y a los eosinofilos (7) para la citotoxicidad por celulas mediada por anticuerpos . Probablemente los neutrofilos y los macrofagos liberan metabolitos toxicos del oxigeno y del nitrogeno, mientras que los eosinofilos provocan lesiones en el tegumento del parasito mediante la liberacion de la proteina basica principal . La respuesta se ve potenciada por las citocinas (p . ej ., TNFO . Los Ab IgE son importantes tanto para sensibilizar a los eosinofilos como a los mastocitos locales, liberando estos ultimos diversos mediadores entre los clue se encuentran algunos activadores de los eosinofilos.

Los diferentes sistemas mediante los que los protozoos que se multiplican en los macrofagos consiguen evitar ser digeridos por las enzimas lisosomales Fig. 18 .20. Toxoplasma gondii. Los parasitos vivos recubiertos con laminina del huesped penetran activamente en las celulas dentro de una vacuola unida a la membrana, tras unirse a un miembro de la familia de receptores de las integrinas que aparece en la superficie de los macrofagos . Como estas vacuolas no se fusionan con los lisosomas, de esta forma eluden el ataque enzimatico . Sin embargo, los parasitos muertos son ingeridos mediante fagocitosis normal (por interaccion con los receptores de Fc del macrofago, cuando los parasitos estan recubiertos de Ab) y quedan confinados en un fagosoma que si que se fusiona con los lisosomas, siendo destruidos por las enzimas que contienen estos ultimos. Trypanosoma cruzi. La supervivencia de estos parasitos depende de su grado de desarrollo ; los tripomastigotes escapan del fagosoma y se multiplican en el citoplasma, mientras que los epimastigotes no son capaces de escapar y son destruidos. La cantidad de parasitos que se encuentran en el citoplasma se reduce cuando los macrdfagos estan activados. Toxoplasma gondii Trypanosoma cruzi Leishmania

1 . parasito muerto en el interior de un fagosoma ; fusion con los lisosomas 2. parasito vivo en un endosoma ; ausencia de fusion con los lisosomas

1 . parasito destruido en el interior del fagosoma tras la fusion con Ins lisosomas 2 . el parasito escapa del fagosoma y se multiplica libremente en el citoplasma

1 . los parasitos resisten las enzimas lisosomales y se dividen en el interior del fagosoma

Leishmania spp. Estos parasitos se multiplican en el interior del fagosoma y poseen una proteasa de superficie que impide su digestion . Con macrofagos

activados previamente se reduce el ntimero de parasitos que consiguen penetrar en la celula y la supervivencia de los que to logran .

Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

c(mtplentento, con to quc logra cl naisnao obictiso . Adcnaas, Leishmania spp . poscc cnzimas clue inhibcn cl cstallido rcspirat(n-io, supcr('>sido dismutasa yuC Ic prorcgc frcntc a los radicalcs de oxigcno. Sc pucdc demostrar clue la vacuola cn la quc sohrcvis-cn las lxishrnanias cs do naturaleza lisos(imica (tier. 18 .22), pero los parasitos half des:u-roll:ai(> mccanismos que Ics protegxn trcntc a los atayucs cnrimaticos . l .a Cubicrta Lie lipof(rsfogl1Cano { LI'(i I yuc dcpura los metabolitos del oxigcno a, protege a Ios organisntos kctac a los ;atayucs enzimaticos . Tambicn 1IOSCC Una glUC(~protcina, Gp63 f/iq. 18.?3), yuc inhibc las cnzinaas dc los lis(rsomas dc los naacrotagos. Adenads, Lcislrenania spp. pucdc rc

primir la expresion dc I as ntolecu[ .IS( 'I'I I dc Clasc 11 en Irrs m;aSir crotagos a los (life parasita, rcducicndo Capacidad para Cstirrtttlar a ]as Cclulas 1't i . I'csc a todo, cstos mccanismos dc crasi(in no son tan cfiCaCCS Cuando los Ituespcdcs cstan innttuaizados.

Los parasitos extracelulares se pueden disfrazar

1J)s I " ardsit(" yuc s()n cttscCp611ICS a I()s :ulticuCrp(n C`I)CCtficos Itut (1C~arn(Iladc~ ditcrcntCS ~uuntas h.tr:t Ccit ;u sus CtccL((s . Los tripanosonias ati-icanos cxpcrinacntan cl Icnonacno dc satiation antigcnica : la nao1CCUla de la quc cshi C(tmpuesta Sit cubicrta externa, la gluC(pr(ateina s ariable dc superficie (VSG, del inglis rariah(csurfitccghcop) ,uteinl, se nuxiifica s protcgc a la membrana supCrtiCial subsaCCntC Lie los atayucs Lie los mccanismos dc dctcnsa dcl huesped . ( :ada generation Lie parasitos cs antigcnicantcntc ditercntc a has antcricn- cs (Airs. 18 .?-1 s 18.?S) . Algunos

Dos antigenos de superficie de

Leishmania

proteina Gp633

lipofosfoglicano

Fig. 18 .21 . Microfotografia electronica de la invasion de una celula huesped por Toxoplasma gondii. Durante la invasion el parasito forma una union estrecha con la membrana de la celula huesped (flecha) y modifica el fagosoma recien formado para impedir la consiguiente fusion del lisosoma . (Por gentileza del la Dra. Judith Smith.)

P)
ii - . ,T , , u 'a

., ,w 1

Fig. 18 .22. La vacuola de Leishmania es de naturaleza lisosomica . 1) Inmunofluorescencia de macrofagos murinos infectados por Leishmania mexicana tenidos con on anticuerpo frente a tubulina marcado con rodamina para demostrar el parasito (tenido rojo,iamarillo) y on anticuerpo monoclonal que reacciona con el marcador endosomicoilisosomico tardio (LAMP-1) marcado con fluoresceina (tenido en verde) . 2) Microfotografia electronica de un macrofago murino infectado por Leishmania mexicana tenido con anticuerpo anti-catepsina D marcado con oro, que demuestra la proteinasa aspartica lisosomal en la vacuola de Leishmania . (Por gentileza del Dr . David Russell .)

Fig. 18 .23. Representation esquematica de dos antigenos de superficie de Leishmania amarrados a la membrana mediante sus colas de fosfatidilinositol (colas GPI) . 1) Este antigeno proteico, gp63, es una proteasa . La de L . mexicana se one al complemento, con la colaboracion del lipofosfoglicano (LPG). Esto permite al promastigote penetrar en el macrofago uniendose a los receptores de C3 . 2) Este antigeno fosfolipidico es un lipofosfoglicano que confiere resistencia frente a la lisis mediada por el complemento. El de L . major se une a C3b, el tercer componente del complemento, permitiendo al promastigote penetrar tras unirse al receptor del complemento CR1. Los anticuerpos frente a ambos antigenos confieren protection frente a la leishmaniasis cutanea murina . Observese que muchas de las proteinas de las cubiertas de los parasitos, como la glucoproteina variable de superficie (VSG) de T. brucei, se encuentran unidas a la superficie de la membrana mediante una cola GPI .

Mecanismos de evasion

antigcnos dc los parasitos paludicos tambicn cxpcrimcntan %- ariaci6n antigenica . ()tros parasitos, coma los csquistosornas, recubren su superficic con antigcnos Lid Itucspcd, dc tal tbrma quc cstc ultimo no cs capaz dc distinguirlos dc: sus propi(>s tcjidos . Las esquistostintulas cultisadas en un medio yuc c(~ntenga sucro humano \ critrocit(~s pucdcn adyuirir molcculas dc supcrficie quc c(mticncn los (lcterminantcs A, 11 y H do los grup(rs sanguucos. lambien pucdcn adyuirir molcculas ( ;p1 L Sin embargo, las esyuistos(')mulas culticadas ell un medio cxcnto de molcculas del hucspcd tambien pucdcn dcsarrollar resistcncia frcntc ,t I()s anticucrpos y cl complcmento, conu> sc ha ntencionado anteriormente .

Algunos parasitos extracelulares se esconden para evitar los mecanismos inmunitarios de defensa

Fig. 18.24. Variaciones antigenicas en los tripanosomas . El marcaje mediante inmunofluorescencia de los tripanosomas con un anticuerpo monoclonal especifico para el antigeno de tipo variable (1). En la imagen 2 se observa el mismo cameo on el que los nucleos y cinetoplastos se has tenido con el colorante que se use al ADN . Solo algunos parasitos expresan el antigeno variable concreto, mientras que otros expresan otros tipos antigenicos . (Par gentileza del Dr . Mike Turner.)

~I~nna, ('vhccics (lc hr(rim[(((w )~ . cj , Lr! ;rrtr ;rri!', 1li~fu ;'v' .fr'iTS v W hclmint(rs ih . cj ., I. spiralisY tin- nrut yujstcs I , rotcrt(xcti, mientras yuc los cjcmplarcs adultos de l) . volrfdus quc parasitan la picl induces ht t6rtnacion do n(idulos de colagcno por parte Lid Itucsped, yuc los r(rdcan y. protcgcn . Los ncmatodos intcstinalcs \ ]as tcnias se encucntran a sako de muchos dc los sistcmas (1c (lefcnsa del 111rcshc(I scncillamcntc I,(Wyuc Nc cn :ucittnui cn Cl intcstin() .

Algunos parasitos extracelulares son capaces de resistir los ataques del sistema inmunitario

Entry I(n har.isit((s cxistcn numcrW()s cjcmplos dc cstratcgas scnAlas dc (lctcnsa, I,asadas simplcnicntc cn la proteccion tisica : I()s ncnratodos posccn una grucsa cuticula cxtracclular yuc los

Variation antigenica en los tripanosomas africanos

numero de tripanosomas 1 " 10')/m m' de sangre titulo de i anticuerpos proportion relativa de variantes

infeccion par la mosca tsetse

(o)

tripanosomas,/ ml de sangre

100

15

10

50

5
V

U
2 3

0
I 106 I-: 4 6 8 10 dias despues de la infeccion

semanas

Fig. 18 .25. Las infecciones por tripanosomas pueden persistir durante meses, dando lugar a oleadas sucesivas de parasitemia . En el grafico 1 se muestran las fluctuaciones de parasitemia en un paciente con enfermedad del sueno. Aunque la infeccion fue iniciada por un unico parasito, en cada oleada aparece una poblacion de parasitos antigenicamente diferente de las demas (a, b, c, d) ; los Ab frente a cualquiera de las variantes de las oleadas anteriores no confieren protection frente a la variante que aparece en un oleada determinada. Existe una fuerte tendencia a que las variantes aparezcan en el mismo orden en diferentes huespedes. La variation no se produce en animales inmunodeprimidos les decir, animales tratados de tal forma que queden privados de algunas de sus funciones inmunitarias) .

En el 2 se muestra la production de Ab frente a Trypanosoma brucei en funcion del tiempo por parte de un conejo que habia sufrido una picadura de una mosca tsetse . Los Ab frente a cads una de las variantes sucesivas se produces al poco tiempo de la aparicion de la nueva variante, y alcanzan rapidamente una concentration maxima estable . La presencia de estos Ab induce la variation antigenica del parasito . En el 3 se muestra la cinetica de un ciclo de variation antigenica . Se infecto a una rata con una poblacion homogenea de una variante (a) de T. brucei. La segunda oleada de parasitemia se produce al aparecer la nueva variante (b), que se convierte en la predominante .

Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

Fig. 18 .26 . Microfotografia electronica de una larva infecciosa de Toxocara canis, en la que se muestra la cubierta de superficie (Sc) unida con ferritina cationizada (CF) por encima de la epicuticula (Ep) . Las larvas se fijaron con glutaraldehido y tetroxido de osmio antes de su procesamiento para la microfotografia electronica . (Por gentileza del Profesor Rick Maizels con autorizacion de Exp Parasitol 1992;75 :72-86.)

protcge fi-eme a Las agresioncs toxicas (_fi,7 . 18.26) ; Cl tegurrtenta de los csquistosomas se engrosa durautc cl proceso de n)adura cion, proporcionando una protcccion parccida ; la Cubicrta supcrficial do muchos ncmatodos sc puedc dcsprender dcspucs dcl Aayuc innumitario; las tenit, impidcn cl ataquc actis- amente me diante la sccreci()n de tin inhibidor de la elastasa, que anula Sit capacidad para atracr ncutr()fil()s . Muchos helmintos parasitos ban dcsarrollado ntetodos para rcsistir cl estallido rcspiratorio . Por ejemplo, Cuando las filarias SC enCUCntran en los \asos linf.iticos sccrctan una glutation per oxidasa do superficie, los csquistosontas posecn glutation S-transtcrasas do superficie N Ourborcrra sccrcta supcr()xido dismutasa . :1lgunos ncm :uodos c trematodos han dcsarrollado tin clcgante sistema para inacti\-ar los anticuerpos, ntcdiante la secrcci(in de proteasas +IC cscindCn las innrunoglobulinas scparando cl fi- agrncnto FC .

La mayoria de los parasitos interfieren en las respuestas inmunitarias

1..1 illnt(utosuPrcsi(in CS una dr lay c,u- .(rtrrutiC.u Lllli\CrNalcS dc 1,1s infecciones parasitarias i;fiq . 18.3 .-), t- atectt tanto a l :ts respuestas

Interferencias que provocan los Ag libres secretados por protozoos o helmintos en las respuestas inmunitarias del huesped

antigenos liberates per el parasite

1 . bloqueo de los anticuerpos

2 . bloqueo de las

celulas efectoras

3. induction de tolerancia en las celulas T y B

4. activation policlonal (distraction del sistema inmunitario) receptor de ~to-enos

5 . inhibition de la respuesta inflamatoria '

/-~~--,
CCILJI,l aseSlrla

macrofago activado

supresora

- " Iul~. T

(CMCDAi

.11 .

.FL

agotamiento clonal

bloqueo elimination de las clonal celulas productoras de anticuerpo

B!f
artiwc;cn fi, z~

prostaglandinas IL-10, V TGFj3

Fig. 18 .27 . Los antigenos fibres pueden : 1) Combinarse con anticuerpos y evitar que estos alcancen a los parasitos. Se tree que la glucoproteina variable de superficie de Trypanosoma brucei y los antigenos solubles tie Plasmodium falciparum, que tambien son polimorficos y contienen secuencias repetidas de aminoacidos, actuan como cortinas de humo o senuelos . 2) Bloquear a las celulas efectoras, ya sea directamente o en forma de inmunocomplejos. Per ejemplo, los complejos circulantes son capaces de inhibir los efectos de las celulas citotoxicas activadas frente a Schistosoma mansoni. 3) Inducir la tolerancia de las celulas T o B, probablemente mediante el bloqueo de las celulas productoras de anticuerpo o

mediante la elimination de los linfocitos especificos de antigenos tin maduros en proceso de agotamiento clonal . 4) Provocar la activation policlonal . La mayoria de los productos parasitarios se comportan como mitogenos frente a las celulas B o T, to que da lugar a las alias concentraciones sericas de IgM (e IgG) inespecifica que se suelen observar en las infecciones parasitarias . Cuando esta activation es prolongada se pueden Ilegar a producir anomahas de las celulas B, el agotamiento de los linfocitos B especificos de antigenos y la consecuente inmunodepresion. 5) Activar las celulas T, especialmente [as TH2, los macrofagos o ambas, con liberation de moleculas inmunosupresoras .

Consecuencias inmunopatologicas de las infecciones parasitarias

huntoralcs conno a ]as celulares . Aunclue algunos parasitos puedcn prototcar anontalias dc Ias celulas o tcjidos lintoidcs de una forma directa (p . cj ., las lar\as rccicn nacidas dc T. spiralis, clue secretan Lilt factor soluble lintocitoteixicoj, gran parts de la supresionn sucle set dehicia a intcrterencias con cl hlncionarnicnto dc los ina cr6tagos . La capacidad tlrncional dc cstas cclulas pucdc clucciar desbordada por la Bran cantidad dc antigcno librc, to clue muchos hchnintos sccrctan cnormes cantidadcs CIc polisacaridos N glucocotnjugados quc intcrficren con cl proccsanticnto de los antigcnos. Se Ita comprobado claraincnte quc Ios ntacroifagos de ratones infcctados con csquistosontts net son capaccs sic presentar Ios antigcnos coil cficacia . Dc la misma forma, la prcscntacicin de antigcnos no es correcta en Ios ratoncs intectados ion tripanosontas atricanos, la sccrccioin do lI.-I sc cncuentra rc ducida . En cl paludi,nto Ios macr6tagos acumulan cl pigntcnto hcntozoina, un producto do la dcgradaci6n dc la hcmoglobina clue interficre ell nrtrchas do sus tirnciones . !xiuchos productos parasitarios cstinttrhut la produccioin dc prostaglandinas v otras MOIeculas suprcsoras por parts de Ios macrotagos, quc asuntcn cl control dc las rcacciones intlantatorias . Es notable cl hccho dc clue las propias filarias y tcnias secretan prostaglandinas capaccs dc suprimir las rcspucstas inflarnatorias . La libcraci611 dc cnorntcs cantidadcs dc antigcnos parasitatios solublcs pucdc pro \ocar anontalias dc hts rcspucstas del huesped rncdiantc un proceso dcnorninado distracci6n inmunitaria . Asi, sc crec clue Ios antigcnos solublcs (antigcnos S o tcrmocstablcs i dc I' fdriparum saturan Ios anticuerpcts circulantcs, constituvcndo una acortina dc ITtrnio quc intpidc clue dichos anticucrpos al canccn [as celulas parasitarias . Muchos dc los antigenos dc sirpcrficic clue se hbcran son forntas solublcs dc molcculas clue sc cncucntran arnarradas a la supcrficic del parasito por una cola GPI, corno la VSG dc T. brucei, cl LPG o -factor cxcrctado~, de Ixisbmania (/ira. 18.?3) r divcrsos antigcnos dc supcrficic dc las csquistos6rnulas . Estos antigcnos son liticrados por la icci()il dc fostolipasas especificas dc fosfatidilinositol dc origen end6geno . 1 .1 supresi6n especifica de antigeno tartnbicn es posible, resultando atccttda la hipersensibilidad do fipo rctudado . Esta supresion pucdc set sclectisa V atcctar sctlantente a una de ]as subpoblaciones dc cclulas T Cll4', coil lot quc sc altcra el cduilibrio cntrc Ion linfocitos'fH 1 t . T112 do forma bcneficiosa para cl parasito . En cl caso de la Icishm:utiasis, cuando sc cultic an cclulas T dc pacicntcs inlet tados coil L. donorrani cn prcscilcia dc antigcnos cspccificos, ciichas cclulas dcjan de secrctar II .-2 c IFN7 . La producci6n dc 11 .-I y la expresi6n dc rtnolcculas ( .PH LIc claw II tanibicn sc s-c rcducida, aurncntando por cl contrario la sccreci6n dc prostaglandin as . Estos pacientes esolt16ctrra11 taxorabicnxntc tras un n-atanticnto coil ITN7 asociado a antinionio pentatalentc . 1)c la nusina fin- nta, cn la filartasis las celulas I'H I no prolitcran corno respucsta a los antigcnos especificos, auncluc las rcspucstas dc anticucrpos no resultan atccradas . De hccho, Ios p,tcirntcs infictadon con grancics cantidadcs dc filarias o esquistirsrmtas pressman altas concentntcioncs dc IgG4, clue bloquca las rcspucstas dctcnsitas mcciiadas por IgF . En la csquistosomiasis Ios anticucrlxOs Igr i c It G2 frcntc a algunos Itidratos etc carhono dc origen parasitario inhibcn las funciontcs cito t6xicas dc Ios granulocitos, \ Sit conccntracion prcscnta una corrclacioin directa corn la susceptibilidad frcntc a la rcinteccion . En algturts inteccioncs por protozoos, corno cl paludismo, la trip;utosontiasis africana y la cntcrnicdad dc Chagas, se protducc una cantidad insuficicntc de IL 2, otra citocina quc sccrctan Ios linfocitos T111 en talc dc proldcraci6n . Parccc quc ell Ios ratones infcctados ltor 7 : cruZi un producto dcl parasito intcrficrc cn la cxprcsioin del receptor dc IL-2, dc tal forma clue ]a ill\recci(')tl dc esta citocina induce la sintcsis del receptor, con lo clue sc recobra la actitidad dc las cclulas T colaboradrtras, se sintctizan matorcs cantictaclcs dc I,'xl c IgG, se reduce la parasitcntia t. aurnenta Cl tieinpo dc supert- isencia . 611 la ligura 1,S .2Ssc 11ttrcstra un rcsu11ten kit algunos dc Ios ntecanisntots Lie ccasioin quc sC 11,111 ntencionadri .
N -

CONSECUENCIAS INMUNOPATOLOGICAS DE LAS INFECCIONES PARASITARIAS Adernas dc los efectos destructit os directos quc cjcrcen algunos parasitos o sus productos sobre los tcjidos del huesped, en nn1chas ocasioncs I :ts propias rcspucstas inntunitarias ticncn consecucncias patol6gicas . I-:n cl paludismo, la tripanosonnasis africa na v la Icisltmaniasis visceral cl u1ntento del nunicro y dc la actn idad dc los macr6fagos y de los linfocitos en cl higado y cn ci bazo pro\ oca un auntcnto del tarnano dc cstos 6rganos . Grail parts dc Ios fencimenos patoloigicos quc sc produccn ell la esquistosontiasis son dchidos a los granulornas dcpcndientes de celulas 'I' clue SC forman alredcdor dc los Inievos del parasito cn cl hit ado del huesped . Las cspcctacularcs lltcracio ilcs title sc otbscrsan en Ios individuos con clctantiasis son debidas probablen+cntc a rcspucstas inmunopatologicas frcntc a las filarias quc in laden Ios \ asps linfiticos . La torntaci611 dc inntunoccnrtplcjos c:s

Algunos de los mecanismos mediante los clue los parasitos eluden las defensas del huesped parasito
T
F , pa+oso,+a

habitat
t rii~ntP

principal mecan . efector del huesped complemento anticuerpo CD8', citocinas metabolitos del 0 2, N0, enzimas lisosomales metabolitos del 0 2, N0, enzimas lisosomales metabolitos del 0, N0, enzimas lisosomales celulas mieloides, anticucrpos + complemento celulas mieloides, anticucrpos + complemento
'I"11, .
r : .,t,

sistema de evasion antigenica intracelular, variation antigenica incapacidad para iniciar la respuesta, inhibition de la fusion de lisosomas
Ios :rrneaCi~-

brucei

sanguineo hepatocitos, eritrocitos macrofagos

Plasmodium spp . Toxoplasma gondii

Trypanosoma cruzi

muchas celulas

escapa hacia el citoplasma, evitando la digestion inhibition del estallido respiratorio e inactivation de los productos del mismo, evita la digestion formation de quistes musculares, production de DAF adquisicion de antigcnos del huesped, bloqueo mediante Ab, Ag solublcs e inmunocomplejos, antioxidantes gruesa cuticula extracelular, antioxidantes

Leishmania

macrofagos

Trichinella spiralis

intestino, sangre, musculos piel, sangre, pulmones, vena porta

Schistosoma mansoni

Wuchereria
bancrofti

vasos linfaticos

celulas mieloides, anticucrpos + complemento

Fig . 18.28. Resumen de los diversos sistemas clue ban desarrollado los parasitos para eludir los mecanismos de defensa del huesped . DAF = factor acelerador de la degradation (del ingles decay accelerating factor) (v . cap . 4) .

Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

frecuentc ; cstos sc pucden dcpo,sitar en los rir5ones, conto en cl cast) del sindronte netrcitico dc la fiehre cuartana, o dal lugar a otras altcracioncs patolcigicas . Poor cjcmplo, sc ban oietcctado in III unoglohtdinas unidas a tcjidors cn lo ,, musculos dc ratoncs infectador, coil tripanosomas africanos v en cl plcxo coroidco dc stones coil paludisnio . Las lgE yuc SC produccn en las intecciones por laelnaintoos pucden pro\ ocar gras -es consecuencias en Cl lurcspcd, dchitior a la liberacioin dc los ntcdiaciorcs dc los mastocitos . 1 .a rotura dc tin yuistc hidatidico pucdc provocar un shock anafilactico . En las infcccioncs por 7ir.vorar-a canis sc producen rcaccioncs dc tipo asnaatico, clue tanabicn pucden aparcccr en la eosinofilia pulntonar tropical en cl monaento en quc las filarias migran .1 tra\'cs de los pulnaottes . Sc laan dctcctado autoanticucrpo>s trcnte a los eritrocitos, los linfocitos Y cl A1)N, yuc prohahlcnacntc sc produccn et)rno consccucncia dc la actisaci611 policlonal ip . cj ., cn la tripanosonaiasis y ell cl paludismo) . Los anticucrpos trcnte al parasito pucden prcsentar rcaccioncs crttzadas con los tcjidos del lurcspcd . Por cjcmplo, en la entermcdad dc Chagas pucden apareccr cardiomiopatia crcinice, csotagomcgalia y nacgacolon, dchido a los ctcc tots urtoinnTttnitai-ios clue cjcrcen Ios anticuerpos trcnte a 7' Cra_i so,hrc los gangglios ncr\iosos . Dc la misnta tbrma, O. nolrrrlru, Cl acente causal dc la cegucra del rio, POSee un antigeno yuc hrescnta rcacciones cruzacias con una protcina dc la retina . La produccitin excesiva dc algunas citoiinas pucdc scr la call sa de algunas de las manitestacio,nes dc 1a entermcdad . Asi, la tic bre, la anemia, la diarrea v las altcracioncs pulnaonarcs yuc Sc ohell scr\' :ui cl paludismo ag,udo se parecen 11auClto a los sintonaas do la endotorxernia, prohahlcnacntc tambicn cstan mediados pot cl I NFtx . 1 ;a notable caqucxia del ganado coil tripanosomiasis tanthicn pucdc cstar nardiada [,or cl TNFa . Adcnms, los cfcctos Set Ixuo>Iogico~s pucden - dcbidos a la combinaci611 de diacrsos mccanismos innurnitarios; por cjcmplo, sc tree yuc csto cs to quc ocurre cn cl cast) dc la anemia propia tic] paludismo (fio. 18.29) . Finalmentc, cs probable quc la innttutosupresitin inespecifica, yuc cs nun' ti-CCUCntC ell los indi% iduors Coil intcccicnacs parasitarias, sea la causa dc clue cstos pacicntcs scan cspecialmentc susccptihles a la% intecciontes bacterianas y viricas (p . ej ., el sarampioin) . Tambicn pucdc scr cl rt1OtlVO do la asociacitin cxistcn tc cntrc Cl llnfonaa de 13urkitt \ cl paludismo.

Posibles causas de la aparicion de anemia en el paludismo celulas madre de la mgdula osea eritrocitos leucocitos

' MADRE

autoanticuerpos frente a los eritrocitos

VACUNAS
En \ctcrinaria se ban utilizador tom cxito alr"unas Lacunas consistent" en parisitos s-icos atcnuador, Sin embargo, hasty cl naar11acnto no cxiste ninguna tiara trso lurmano, aunquc se dedican grancics csfucrzos al dcsarrollo tic lacunas trcnte al paludismo a. la csyuistosonaiasis, principalmcntc . Sc cstan Ileundo a caho a ariors CnSaVOS clinicos do \- minas trcnte a la prinicra dc estas cnfcrmedadcs, quc cstan basadas ell dctcrnainadas c(111ablnaCiOlIC, do pcptidtrs clue se crcc yuc I)ucoicn conterir hrtteccioin . 1,111 Cl c.tpitulo 19 sc cstudiara cste tcnrt coil nays dctallc .

Fig. 18 .29. El numero de eritrocitos clue se destruyen en el paludismo es mayor del clue cabria esperar de acuerdo con el numero de celulas infectadas . Ademas de los clue se destruyen por lisis en el momento de la liberation del esquizonte (1), es probable clue existan mecanismos inmunopatoldgicos clue esten relacionados con la anemia . Los Ag parasitarios, o los inmunocomplejos clue contienen Ag parasitarios, se pueden unir a eritrocitos no infectados y acelerar su destruction por parse de las celulas de la estirpe macroifago/monocito del bazo y del higado (2). Tambien se detectan pequenas cantidades de Ab frente a eritrocitos normales, clue aceleran su destruction (3) . El TNFu liberado como respuesta a la infection inhibe el desarrollo de los eritrocitos a partir de las celulas madre de la medula dsea y modifica la cinetica del proceso de renovation de eritrocitos (4).

Vacunas

Parece que los parasitos estan bien adaptados a la existencia en el seno de su huesped . ~Que datos indican que se producen respuestas inmunitarias eficaces frente a ellos? ~En que se diferencian los mecanismos de defensa de un huesped virgen y de uno que ha sido inmunizado previamente? ~Que significa inmunidad especifica de fase y a que es debida? ~Que papel desempenan las celulas T? ~Como pueden inducir una exacerbaci6n de una infeccion? ~Como intervienen en la expulsion de los helmintos parasitos del intestino?

~Como afectan TNFcu e IFNy a la supervivencia de los parasitos? " ~En que se diferencian los mecanismos defensivos frente a los parasitos intracelulares y extracelulares? ZComo pueden evitar los protozoos que viven en el interior de los macrofagos ser destruidos enzimaticamente o mediante moleculas citotoxicas? ~Como eluden las respuestas inmunitarias los parasitos que viven en la sangre o en los liquidos corporales en forma libre? ~Que fenomenos inmunopatologicos provocan los parasitos?

LECTURAS ADICIONALES
Butterworth AE, Human Immunit, to schistosomes : some questions . Parasitol Today 1994 ;10 .318-9 . Clark IA and Rockett KA . Nitric oxide and parasitic disease . Adv Parasitol 1996,37 1-58 . Maizels RM, Bunn ,, DAP, Selkirk ME, et al. Immunological modulation and evasio-i by helminth parasites in human populations . Nature 1993,365 797-804 Reiner SL, Locks,ey RM, The regulation of immunity to Leishmania major Anou Rev Immunol 1995,13 :51-177 . Russell DG . Leishmania and Mycobacteriunx Stowaways in the en dosomal network_ Trends Cell Biology 1995,5125-128. Internet addresses : There are various newsgroups on the Net, although not all dedicated to immunology They can be accessed by exploring keywords . There are several discussion groups operating through the bionet e .g, http :/www/bio .net, Parasitology Mail Newsgroup .

Vacu nacion
La inmunizacidn inespecifica, como, por ejemplo, la administracion de citocinas, puede ser 6til en orcunstancias en que se desea inducir una amplificaci6n general de la actividad inmunitaria . Los adyuvantes, sustancias que estimulan la producci6n de Ab, suelen ser necesarios cuando se utilizan vacunas inactivadas . La tecnologia del ADN recombinants, sera probablemente la base de las vacunas del futuro . La inmunidad adaptativa y la capacidad de los linfocitos para recorder los antigenos de un organismo pat6geno son el fundamento de la vacunaci6n . " Existen numerosos preparados antigenicos que se utilizan como vacunas, desde organismos completos hasta peptidos y azucares simples . Las vacunas vivas y las vacunas inactivadas presentan importantes diferencias entre si, siendo generalmente mas eficaces las primeras . La inmunizacitin active se denomina vacunaci6n . " La inmunizacion pasiva, es decir, la administraci6n directa de anticuerpos, sigue utilizandose en determinadas circunstancias, como por ejemplo cuando existe toxina tetanica circulante .

19

1,1 wcunaciim Cs la aplicaci6n nlcior co)nocida L this alas csito) 11,1 ohtcnido do Icrs principio)s innttuurl0i,iCOS :1 1.1 %Alud humane . 1d nornhre tie la pnnlcra Lacuna prorccdc del Liru% tic la \Ktu1a +t) taccinia i, una Cntcrnlctiad que atccta .11 ganador hmino . Icnncr tuc cl prinlcro) que la utiliz(), hace alx)ra uno s ?Ol) ano)s . Sus trabait)s CortstituLcron CI primer intrnto dclihcrado tie I,rC\Cnir una Cnler nlcdad infecciosa ~, la \- irucla ;, sc Ilcvaron a cah) en una epoca cn quC k dc%conocia twalnicntc la naturalcza do h)s virus ; c do t(rtl()% h dcnlas agcntcs intecciorsors i t . tic lo% procc%t )s mmutnt,tm)s . fransCUrricrorn I(Nl .tii()sIlastALiuePASCCtlrCnuncio)CI11rincil)ior general cn quo: sc has, la LaCUnaCioul : CS I)OS1111C utilizer I1rCllatatto)s do nucrobios nlodilicatios pare pr(rtiucir un increnlcnto tic la rcsistrnci .t inmunitaria Ircntc al aitcntc Lirulcnto intactor . 1-as nledula% c%pinalc% desccada% tie condos intcctath)% con ell Liru% de la rabia t Icrs bacil()s del carhuno) sonlcti(h)s .1 CalCntanliCnto) title prcpart) Pasteur fucron ION Wrtiatleros predcccsorcs do las vacunas actual", nltcntras quo: la linca iniciada per) icnner con virus tic la Lacuna pro ccdentes de aninlalcs I dletcroilogt)%- I no ha tenido continuidad . Pasteur tanlp(Ko tcnia un cont)cimicnto claro) tic la mcnloria inmunitaria ni tic las firncioncs tic l()% linf)citos, c tcndria quC transcurrir mrtiio sight mas pare quC CS10% tcn6n1enors sc Ilcgascn a corm premier. Finalmentc, ci tnecanisnto tie la vacunacit)n qucdo,clam . too) al Crutnciar Burnet la teoria tic ht %clcccioSn clonal i 195 ;' ) \ A Wr dc+Cut)icrtos to ,, linti)citos'I c B + 1965+ . El antigcno o antigenos contcnidos cn un .1 Lacuna induccn la expansion clonal tic las celulas T v/o B cs[WifiCas, dando lugar .1 la ti )rmacio )n tie Un.t pohlacii)n tie cclulas de mcnlo)ria . F tes induccn una rcspucsta inmunitaria se Cundatia cuand() sc 11rcrdUCC una nucla c\posicioln al nlisnur .11111 V,Cno , () antigenos,, this cs ntas rallida y cficaz quo: la rcsl'UCSta prin1 .1na normal . Ia rcSj)UC%ta primaria suds ser dcnla%iad() lent, corn() 1 .191 . pare cvitar que No: tics,lrrolle una cntcrrnedad graLc Por tanto, en Ia LaCUnacicin csta inlplicada la innlUnidad adaptativa, \ cl arts do tabricar una Lacuna consists cn obtener pre parados antigenicos tic] patogcno quC : " Sc pucdan adtninistrar con scguridad . " Induztan Cl tip() tie inmttnitiad .afccuado . " Scan ascquillICS pare la poblacio)n a la que Cstan dcstinados . SC Iran Ccnascguido brillantes cxitos cn cste sentido pare Larias cntcrntcdadcs, pert) had otras pare la% quo: no sc ha logrado obtcncr vacuna alguna . En cstc capitulo sc analizan la% razoncs por las quC esto ocurre .

LOS SUCIctt Net- matt ctjCaCcs t1uC Ic,s inartit'ados +; r. 111.1.% 'It ielantc i . Son cwcpcioncs a csta rcglt las cnlcrtncdatics en Lis this la call sa principal do los tcnomrncr% pato)logicor% c% una to>ina . En cstc CaNO la t,tCUna PuCLIC con%istir cn la pnrpia toxin, . t)tror tips) tie Lacunas st)n agUCII .1s en 1 .1s quC Ios antigenos microrhianos scnl cxprcsados por otro) Ii1)() tic Cclulas, this aCtuan Ctrm() \-cctor. Fn 1,1 futtrra 1 01.1 sc mucstran lors principales prcparados alltigenico)s tic lo% que No: dislxnlc actualnlcntc .

Principales preparados antigenicos tipo de Ag naturales organismos vivos ejemplo: de vacunas

vacuna Ipara la oirLWla)

bacilo del raton campestre (pare la TB, hist6rico) 'poliomielitis (Sabin ; vacuna oral de la poliomielitis) 'sarampi6n, 'parotiditis, "rubeola fiebre amarilla 17D, varicela-zoster (herpes humano de tipo 3) . 'BCG (pare la TB) "poliomielitis (Salk), rabia, gripe, hepatitis A, ffus 'tos ferina, fiebre tifoidea, c6lera, peste neumococo meningococo "hepatitis B "t6tanos, 'difteria 'hepatitis B (procedente de levaduras) experimental experimental experimental
Haemophilus influenzae

atenuados

organismos intactos inactivadas

virus bacterial polisacaridos capsulares antigenos de superficie clonaci6n y expresi6n de genes

fragmentos subcelulares toxoides

obtenidos mediante t6cnicas de genes expresados ADN en vectores recombinants, ADN puro antiidiotipos

ANTIGENOS UTILIZADOS COMO VACUNAS

El tilx) de antigen( que sc utilize Cn una Lacuna dcllcnde do n1uChos factors,% . 1?n general, cuantos m :is antigenos del microhio contenga unit Lacuna mayor sera sit actiLidad, y los organisnlos Li

tadministradas sistematicamente en la mayoria de los paises

Fig . 19 .1 . Hay ur, gran

utilizan como vacuna,

numero de preparados antigenicos que se

cotlh, c ;tcuna Ita sido cl tires tic la \- actma. Sin embargo, so: han Ilc\ado a cabo cnsayos cn nifios con rotat-irus bovinos v do si nlios; antiguanlente se utilize bastantc CI bacilo tic] raton canlpcstrc pare la t-acunacion contra la tuberculosis CHI I Ven ()6cnte (\Icdio V C11 I(usia sc practican innuulizucicmcs trcntc a Ixisbtuauirt utilizando ccpas proccdcntes dc casos lc\cs. Es posiblc yuc en CI futuro se dCSCUbra alguna lacuna hcter(iloga tficaz, lure, I(>s pr(hlcnlas dc sc` ;uridad yuc plantcaria scrian considcrablcs .

Las vacunas vivas pueden estar compuestas de organismos naturales o atenuados Las vacunas vivas naturales han sido muy poco utilizadas 1-.~ ui :ir(~ (n anisnur t(rnlhlrtanh-ntr it,ttur,tl CIUC Ita sido utilizadu

g I,acilO dc. (Jn1cttc Gucrin i, n1ttcl1ut incnos tirulcina s. yuc conficrc una cicrta protcccion frcntc a la I R . Los cxitos n1,is notahlcs NC hall CO IISC~Uliclo coil s irus, sicndo cl prinlcro dc cllos la ohtcnci(on do la tel,,1 171) tic] irus do la ficbre amarilla medi :uuc pales cn ratoncs cnlbrioncs do p(tllo r 1937 1, al tiuc siouicron la obtcnci( ,m nlctliantc inctodos parccidos dc cepas atcnuadas dc los Xirus dc la poli(tmiclitis, cl sarainpion, la parotiditis y la rubella ffa . 19 .2}. La eficacia do cstas lt1Utltls cuatro lacunas qucda dcnlostratia por la disnlinucion dc la incidencia dc las cuatro cntcrtnctiatics cn las dos o trcs tiltinlas dccadas (ip. 19.3') .
Co111O B('(i

Las vacunas vivas atenuadas han sido extremadamente 6tiles

I a cstratcgia ntis utilvad;l ha sid() atrurri7run l,,It(r,clt(( Ituntuht, con (d,jct(t do rcducir su tirulencia sin yuc Cic"parelCan I()s anti gcnos tiCSCatio, . I-:I primer Iogro cn cstc sciaido fuc la obtcncion p((r partc tic C'almcttc y G icrin do HIM CCho atcnuada tlc 111vobtlcttvium tuht-rculocistic (nigcn I,()t -in(t O1 . bovi~i, incdiantc cl cultivo in ritrodur :uttc 13 .1110S{ 19(18-1921 i de la ccpa original, yuc sc tcrmin() transfitrnlando cn la tCpa cono6da actttaln1cntc

Vacunas vivas atenuadas

enfermedad
prelim
III',

observaciones tipoa
tamhicn hay vacu-ia-na~tivaoa

31,

r2tier I -r r---ones;

sarampi6n virus parotiditis rubeola fiebre amarilla varicela-zoster hepatitis A bacterias tuberculosis

eficacia del 80%

actualmente a ambos sexos estable desde 1937 principalmente an leucemias existe tambien una vacuna inactivada estable desde 1921 ; tambien confiere una cierta protecci6n frente a la lepra

cioncs cychnlcntadas p(~r los priincr(ts (trgaoisnt(n ;ucnuados consistian cn una scric do nttitaci(tncs alcatctrias inducidas por cl crccinlicnto cn condicioncs no optinlas, durantc cl quc los organisnlos Iran controlaclos y scleccionados continuamcntc pare \ -crificar la consenaci('m dc los antigcn(ts dcscados s la pcrdida tic sirtilencia. Estc tcdioso procedinliento sc Ila den(rnlinado acertadanlciltc ~ , rulcta gcnctica~- . ( :uando so: hizo posihlc sccucnciar I(ts ~ cn(mlas do los \-irus, sc comprobe yuc los rcstdtatios crap sunlanlcnte ditcrs(ts . Un clam cjcnlplo son las ditcrcncias cxjstentcs cntrc los tres tipos dc lacuna \it,t CSabin i dc la polionliclitis . La lacuna tic la polionliclitis do tipo I conticnc 57 nltitaciones, \ casi nunca SC 11 :7 obscn-ado una rc\-crsion al tipo sal\ajc (cs dccir, una recuhcracion tic la sirulcncial, tnicntras Clue la scgttridad dc la% lacunas dc tipo 2 y 3 dcpcndc solatncntc do dos mutaciones Clare. En estos dots tiltint(ts tipos dc lacuna se hall obscruclo c(m frcatcncia rcscrsioncs al tipo sahajc, algunas de las cualcs han dado lugar a brotcs dc paralisis poliomiclitica . Uno do cstos br(rtcs sc produjo cn Succia, c indujo a Ias autoridadcs sanitari .l s a rctirar la vacuna vita \ a c(mlctlzar a utilizer la in :tcti\ada l, Salk ; s. n1 ; s adclante 1 . l'na scntaja de la s- acuna visa es yuc en nttrchas partcs do Estados Unitlos cl sires atcnuado ha colonizado los dcp(')sitos dc ague en los quc antes sisia CI sires de tipo sals- ajc, to C1ttC sin dude conficrc protcccion ;1 algunos inditiduos yuc no han sido cacunados run hucn cjcnlplo dc -innlunidad de tic la conwnidad-l . ('on la sotisticada tccilologia dcl A1)N rcconl6in,uuc disponiblc cn la actualidad, parccc probable yuc cn cl futuro Las \-acunas atcttuadas, tauto bactcrianas como viricas, contcndran nlutaci(tncs diri,,idas, s . n(~ alcatorias .

La atenuaci6n se puede inducir mediante mutaciones . ;Luc signihCad() timCCl tCrtttltt0 -~n1(tdificdd(( " ? I-ts 111(xiifica-

Fig. 19 .2 . Se dispone de vacunas atenuadas para muchas infecciones, aunque no para todas. En general, ha resultado mas facil atenuar virus que bacterias .

Las vacunas inactivadas estan compuestas de organismos intactos, pero muertos

Estas vacunas milt la tcrsi(in m(tdcrim tic las lacunas utactic,hiA1 tic 1'aStcttr quc SC 11,111 nlcnci(mado antcri(n- nlcnte . Algunas soil nim, cficaccs rla tic la rabia s . la tic la poliomiclitis tic Salki, otras solo inodcradanlcntc is ficbrc tihyidca, celcra s . gripe ) \ czistcn algullas

Efecto de la vacunaci6n sobre la incidencia de las enfermedades viricas

nbmero de casos (miles) poliomielifs sarampion rubeola parotiditis

40

30
20 -

M
t - .. 1960

70 60 50 40 30 20 10

70 60504020100

tor

30 -

0
1950

1970

1980

1950

1960

1970

1980

0-

1950

1960

1970

1980

1950

Fig. 19 .3 . La introducci6n de las vacunas ha provocado espectaculares tendencies a la baja en la incidencia de diversas enfermedades viricas en Estados Unidos desde el momento en que aparecieron (flechas).

Antigenos utilizados como vacunas

cuta cficacia csti cn entrcdicho ipcstc Y tintsi o quc son poten cialnlcntc tiixicas l(tos tcrina I . En la /irftrm 19 .-1 se cinimcran I,1, principales s :uUIUS inactivadas quc SC utiliz :u1 cn la ictitalidad. Se tree yue algtmas de ellas saran sttstituidas e11 cl fi.tturo por vcrsionCs atenuadas mas eficaces ; en cstc scntido se cncucntran cspeci:tlntente avanzadas las invcstigaciones sobre vacunas para Ia rabia ~, mcdiante tccnicas do ingrnicria gcnctica, para la ficl,rc ffoidea \ cl c6lcra .

rcccn do Capacjdad ill mt111ogenica . Esto es prlsible porquc la 111,1yor parts do la pobl icitin ha sido Vacttnada dente al tctanos, pctlo quc posecn Milks T do mcnloria quc rcconoccn la toxina . Sin embargo, cs pretcrible utilizar como portador una pnxcina dcl of;t;anism<1 frcntC al cual W dirk c la \ Kunaci()n i ncumococo, haluvlisnu r, ct,~ . i .

I as vacunas h.lctcrmn .ts nms rotates tCt,tncrs dittcria ; Elf. 19_iy cstan ccnt1pucstas do C\<lttrxjnas inactivadas I ;}u7 . 19 .6 ; \, cn principio, cstc mismo cntbyuc queue scr ;1plicable a otras djvcrsas in tccc1tn1cs .

Las toxinas inactivadas y los toxoides son las vacunas bacterianas mas eficaces

Los fragmentos subcelulares y los antigenos de superficie constituyen vacunas seguras y eficaces

I as primes" cstructuras quc rccunoCC cl sjsrcma Ill munjtarjr I C1 la mav oria do Ios organismo, son los anti,cnos do supcrficic, cs pccialmentc en cl trio do ]as MULLS 11 v los anticucrluls . Los antigcnos do supcrficic constittlWil una sacu11a scgura x cficiz trcntc a los or ;ganismos quc pucvicn scr controlados mccliantc una

El toxoide tetanico puede ser utilizado como portador para otras vacunas El toxoide tetanico time otra aplicacion : Crmu1 -po rtado l- para
WCU11a5 COnSiStClItCS ctl pcgticfos l,cptidos ytic por si solos ca-

Eficacia de la inmunizacion frente a la difteria

Vacunas inactivadas (organismos completos)

enfermedad poliormelllis virus rabia gripe hepatitis A tosferina fiebre tifoidea bacterias colera paste fiebre Q observaciones elegida en Escandinavia ; segura en individuos inmunodeprimidos puede ser administrada despues de la exposition, asociada a antisuero pasivo especifica de cada cepa tambien se dispone de vacuna atenuada puede provocarlesiones cerebrales (cuestion polemical confiere sobre un 70% de protection
dudosa

protection . ; puede ser combinada con subunidades de la toxina

solo protection a corto plazo buena protection

Fig. 19 .5 . Las declaraciones anuales de casos de difteria CfeMUeStran la gran eficacia de las vacunas basadas en toxinas inactivadas : el ntimero de casos se redujo espectacularmente a raiz de la introduction de la vacunacion en 1940 . (Por gentileza dal profesor J . R. Pattison, cap. 26, en J. Brostoff y cols ., ads., Clinical Immunology, Londres: Mosby, 1991 .)

Fig. 19.4 . Principales vacunas inactivadas de organismos completos.

Vacunas basadas en fragmentos microbianos subcelulares

organismo observaciones
!Mrs
yrupzII

Vacunas basadas en toxinas

organismo
i;~oc .~ ",dr, :rr

ti'eisse " is

r,r1 1

no proleye frente al grupo B

A , C: .

vacuna
'?
III I,,~

observaciones
l-re :Ip . - -''n ,, urw -, recr-rdo cada 10 wins

Ieljn,

Streptococcus pneumoniae bacterias

Haemophilus

84 serotipos ; las vacunas contienen al menos 23 de ellos vac. de polisacaridos han de estar conjugadas con Line proteina portadora poco eficaz veterinaria >95I de protection

Corynebacterium diphteriae VI cholerae Clostridium perfringens

toxina inactivada (formol)

se suele administrar junto con tetanos a.v . combinada con organismos completos inactivados ovejas recien nacidas

influenzae B

toxina, subunidad B toxina inactivada (formol)

Neisseria gonorrhoeae
Cscherichia coli

Fig. 19 .6 . Principales vacunas basadas en toxinas. Observese qua no existen vacunas frente a las numerosas exotoxinas estafilococicas y estreptococicas, ni frente a endotoxinas bacterianas como los lipopolisacaridos .

virus

virus de la hepatitis B

Fig. 19.7 . Principales vacunas basadas en fragmentos microbianos subcelulares .

Vacunacion

rapi(ia respucsta do: anticucrpos 1fir1 . 19 .-i . Los niaNorcs cxitos cn estc sentido sc hall conseguido coal las bacterias encapsuladas, cuyos polisacaridos capsularcs sc pucdcn obtcncr cn cantidadcs industriales, N coil el virus do la hepatitis B, quo: time la intrccuentC caractcristica do: producir cn exceso [as naoleculas de las Clue so: cornponc su cubicrta cxtcrna (HBs) .

Cuando el antigeno original no as adecuado se podrian utilizar las vacunas antiidiotipo

Fstc CS cl tinico tipor do s -acuna quc ha surgidcr conger antic cucncia do: razonamicntos purangcntc inngunologicos . Su fiugdanacnto cs la utilizacion do la tccnologia de los utticucrpos ngonoclonales (Abm) para obtcncr grandcs cantidades de un ata-

Hat alg,unos casos cn clue ull pcqucncr peptide pucdc conatcrir proteccion i aunquc ester no SICmpre cs asi i ; cuando existe un peptido do cstc tipo, Intcdc scr ngas cctntodo ohtcnerlo por sintesis o ngediantr la clentacicin de su correspondiente gen ell un vector do: exprcsion adecuado . Este sistcnia ha (lado cxcclcntcs rcsultados en el caso del ;antigeno I IBs, clue SC lea clonado en lcvaduras y ha dcsplazado a la vacuna Fills do prinacra gcncracicin, clue so: obtcnia a partir do la sangrc do inclisiduos portaclores del VHB ngediante tug laborioso procedingicnto ; adcmas, cl prceio dc la racuna sc ha reducido . Una caractcristica intcresante do: cste sistcnaa es clue se puedcn af adir llucs -as sccucncias ; por cjcngplcr, SC pucdcn cornhillar do: diversas nganeras epitopos sclcccionados do: eclulas B y T para clue la respucsta inngunitaria resultantc sea optima . Es importante teller presente yuc ngicntras clue las celulas 11 reconercen la firr. m a tridimensional dc Icrs antigcnos, las celulas I rcconocen secueuciasUncorks dc anginoacidos i v . cap . 9l . Pcrr tanto, Icrs pcptidos .se pucdcn compc~rtar e(nlto epitopos para las celulas h, pero no pucdcn singular taciltncntc los epitopos discontinttos quo: rcconcrccn ]as celulas B . Incluso en cl caso cn clue ull deterngin :ugte de celulas B sea lineal, los anticucrpos clue se producer frcnte al peptide librc, quo: csta dotado do: f1cxihilidad, no SC uncn a la sccuencia tan fuertcngentc comp cuatgdo dicha secucncia tornga parts do: la cstructura rigida de la niolecula proteica original .

Es posible obtener pequenos antigenos mediante sintesis o clonacion genica

Obtencion de un virus de la vacuna recombinante capaz de expresar un gen ajeno secuenciasa ri-,,s de la TK del~ vacu " ia OOON de la ,yen vector de ajeno transferencia
ir .a

ie

irus la vacuna

celula de mamifero

recombinaci6n homologa vivo

r

En el futuro las vacunas consistiran en genes y vectores clue produciran el antigeno in situ

()tra posibilidad do la clcngacion genica cs introducir el gen adecuado en ull sector, imcctarlo al pacicntc y dcjar Clue cl vector se repliquc V cxprcsc cl gen, con to yuc se produciran grandcs cantida(ics dcl antigeno in situ 19.81 . Sc ha sugcrido quc Cl virus dc la vacuna podria scr ull sector adecuado, pcsc a su ocasional toxicidad . Un argungcnto ell contra do: csta posibilidad cs clue muchos in(iiriduos son inngatnes a dicha virus, por to clue to climinarian ion dcrnasiada rapidcz . (longo altcrnatisa se lean propuestcr practicangctttc todas las vacunas siricas atcnuadas . ()tra posibilidad CS utilizar conga vectores lacunas bacteria naS atcnuaclas . La B(;(* parccc of candidate rnas adecuado, ya clue segiug los cilculos yuc sc hall rcalizado su gcnonla time el tangatie suficiente para albergar genes procedcntes do: todas Icrs organismos para los clue se prctenda claborar Una vacuna . Tanabicn so: conoce una scric do: salmonelas mutantcs quc pucdcn set ad ministradas pcrr via oral c induccn una respucsta innattnitaria ell los tejidos linfiridcs intcstinalcs antes do scr clirninadas, esters organismos scri:ug idoneos para inducir inmunidad a nivcl intestinal, un objctivo tnua perseguido dado Clue las enfcrmedades diarrcicas infantilcs son Ia principal cause do: ngortalidad a nigcl nutndial . ()tra srntaja do cstc sistenga es Clue los organismos atenuados pucdcn scr ingcridos por Icrs nlacrofagos y trail sportados a otras zones del org :uaistno, corn lo clue induccn una respucsta inmunitaria sisternica . Una innosaci(in todavia mas rccicnte cs la inveccion intramuscular do: ADN1 pero acoplado a un prornotor adecuado . Sorprendcntcngentc csto confierc al indis iducr una gran inllutnj dad, tanto de naturalcza Immoral Cemo celular, sin clue so: hayan detectado fenonicnos do: tolerancia debidos a la tirente potencialmcntc ifmitada do antigeno ajeno . Existe un tremendo intcres y actisidad cn cstc nucxo campo y sc cspcran pr()xingos cnsa\eos con una vacuna para la gripe .

aescendencia v rica (tipo salvaje y recombinantes con el gen ajeno) caps de agarosa - bUDR + bUDR cape de celulas exentas de TK y descendencia virica

places de virus de tipo salvaje y recombinantes

places recombinantes

Fig . 19 .8 . Se pueden obtener virus de la vacuna recombinantes clue expresen un gen ajeno . Este gen se inserta en el gen de la timidin cinasa (TK) del virus, para poder distinguir las places formadas par los virus recombinantes de las de tipo salvaje . El virus utiliza la TK para asimilar la timidina clue contiene el media de cultivo o la clue se encuentra en el interior de la celula para scr utilizada en la sintesis del ADN ; el virus recombinante no produce TK, porque el gen correspondiente ha sido seccionado en dos panes, par to clue debe utilizar la via alternativa de sintesis de timidina . La replicacion de los virus de tipo salvaje queda interrumpida en presencia de bromodeoxiuridina (bUDR), un compuesto analogo a la timidina clue bloquea la sintesis del ADN cuando se incorpora al mismo, mientras clue el virus recombinante se sigue replicando, debido a clue utilize timidina sintetizada de novo . La monocapa celular debe estar exenta de TK, con el fin de clue el virus recombinante no pueda utilizar la TK de las celulas para asimilar bUDR . (Par gentileza del Dr . D . J . Rowlands, cap . 26, en J . Brostoff y cots ., eds ., Clinical Immunology, Londres : Mosby, 1991 .)

Eficacia de las vacunas

tiidiotipo I;anti-Id) tircnte a la region V fidiotipol de un anti i , dcmostr.ld.1 , w ora hma suit Frc is cuyu uyv.a ~ aF,m_ui,axi F,ro tW n1cr1tc. Cuandrl sc cscogc cl anti-Id corrccto, este prcscnta una forma tridimensional p:uccida al antigeno inmunizantc original, por to yuc pucdc ser utilizado ell su lugar Ifij. 19 .91. Aunquc csta posibilidad ha sido pucsta en duda por algunos im estigado rcs, clue la considcran inmunrrlogia dc tertulias,, , si quc podria noes tenor urilidad en los casos ell quc cl antigeno original adccuado dcbido a su talta dc inmunogcnicidad. Este cs cl caso de los polisacaridos s' de la region del lipido A de la cnclo ttaxina bacteriana ~;LPS ;) . La ventaja dc los Abet es clue al scr proteinas inducirian menloria, al contrario dc to clue secede nornlalnlcntc con los polisacaridos V Ios lipidos .

Ser estable durantc cl periodo dc altnacenatnicnto : esto Cs esF,ccialincnte imF,ortante en el caso do las xacunas vivas, clue generalmcntc sc dchen conservar reti -igeradas, es dccir, dcl,c cxistir una ,cadciia dc trio,, inintcirrun1pida dcsdc cl tabricante llasta CI punto dc administraci6n, to que no sicanprc rcsulta sencillo" Ser suficientenacnte inmunogenica : en el caso dc las xacunas inactivadas suclc scr ncccsario potenciar su innninogcnicidad corn un adt'rtrante i v . m:is adclante ) . Las vacunas vivas suelen ser mas eficaces quo las inactivadas Ld induccitin do una inmunidad adccuada dcpcndc dc la` pr() picdades del antigeno . Las vacunas xixas tienen la Bran xentaja dc quc proporcionan un estimulo antigenico crcciciitc clue se pucdc prolongar durantc dins o semanas, ), clue cse estin1ulo se produce en la region adccuada I:lo clue es espccialmentc jmportantc cn la practica cuando csta inlplicada la inmunidad nlucosa1l {v. ftK. 19 .1(1). Las vacunas vivas SUCICn scr Ins clue conticncn ma vor niimero de antigenos microhianos . Las vacunas inactivadas prcscntan otros inconvcnicntcs : son indcpcndicntcs dc las ccluI .cs T v de la restricci611 por el conlplcjo principal dc histoconlpatibilidad (('1'11 ; v . cap . I I'1. Los polisacaridos son antigcntrs tipicamcntc indcpcndicntcs dc cclulas T, va yuc no SC Linen al ( :PH v, por tanto, no inmunidan a cstas cclulas . La cstratcgia utilizada actualnlcutc para inducir mcmoria CS unirlos a tuna protcina portadora cstandar, cono cl tosoide tetinico (\ . pag. 268), o a una protcina del organisnlo inmunizantc, como la protcina dc

EFICACIA DE LAS VACUNAS ha ohcio yuc para clue una vacuna se aprucbe y conlcrcialice debc scr eficaz, v csta cficacia sc rcxisa periodicanlente para coda va tuna . La e6cacia depende dc n1LICI1<lS tactorcs. Una vacuna eficaz dcbc : " Inducir el tipo de inmunidad adecuado : anticuerpos en CI caso dc toxinas v org:uaisnlos cxtracclularcs como Streptococcus pueuruoniac; inmunidad celular frente a los organisnlos intracclularcs como cl hacilo de la tuberculosis . (uando no sc sabc con certcza coal cs la rcspucsta mas adccuada i p . cj ., cn CI caso del paludismo ), cl discio do una vacuna eficaz rcsulta mas cotnplic.tdo .

Utilizacion de anticuerpos antiidiotipo como vacunas

Respuestas de anticuerpos frente a las vacunas viva e inactivada de la poliomielitis valor 512 reciproco del titulo de Ab frente al virus de la polio

antigeno

el antigeno puedesei determinante una proteine, antigenico un hidrato de carbono, etc.

s? se ecclor, a PI Ail con mayor afinidad unizacinrl idiotipo por el Ag inmunizantc, ratones 1 y se obtiene el correspon diente Ab monoclonal anticuerpos antiidiotipo frente al idiotipo 1 77! ~ J rsegundos Ab estudiados para sirnilitud con el Ag original vacunacion --- inact. v . parent . -viva por via oral IgG serica - IgM serica - IgA serica - IgAs nasal - IgAs duodenal --- IgA nasal y duodenal

antiidiotipo 1
nar , iii ! '~I r1q

antiidiotipo 1 lit-rr r' " e rle

;Vi

vacuna

rechazado

Fig. 19 .9 . La tecnologia de anticuerpos monoclonales y el descubrimiento de la i,red idiotipica (v . cap. 13) permite en la actualidad utilizar las inmunoglobulinas como osustitutosrr de los antigenos . En el caso de antigenos lipidicos o de hidratos de carbono es posible construir una ((copia- proteica del antigeno que presenta ciertas ventajas como vacuna.

Fig. 19 .10. Respuesta de anticuerpos frente a la vacuna viva atenuada de la poliomielitis administrada por via oral (linens continual) y frente a la vacuna inactivada de la poliomielitis administrada por via intramuscular (lineas discontinuas) . La vacuna viva induce la produccion de IgA de secreci6n (IgAs), ademas de anticuerpos sericos . Como la IgAs es la inmunoglobulina que produce el sistema de tejidos linfoides asociados a la mucosa (TLAM; v. cap. 3), la vacuna viva confiere proteccibn en la misma puerta de entrada del virus, la mucosa gastrointestinal . (Por gentileza del profesor J. R. Pattison, cap. 26, en J . Brostoff y cols ., eds., Clinical Immunology, Londres: Mosby, 1991 .)

Vacunacion COSTE DE LA VACUNACION

Aunquc la s acunaci(in cs sin du(ia alt una cl tratainicnto con mcjor rclacion caste eficacia (ic [as entcrinedadcs intcCCioSas, las \,curies pucden scguir sicndo dcrtttsiado caras para Las personas a has yuc estan destltladas . Un buen cjetnplo es la hepatitis 13 ; la sacunaenin do una persona ntediantc la lacuna obtetuda por clollaci(Sn gcnica cucsta onus 80 doilarcs, costc yuc n(1 SC pucciC pcrinitir cl 90`"f do la poblacioin niundial . En cl otro c\rrcnlo sc cncucntra la IWCi, que CUCStt s(11anlCntC Ur10S cuantos ccttta\os por dosis . ;Dada la baja rcntabilidad dc [as SaCturts cn connparaci(in coil los anrihioiticon, drbcnuls agradCCCr quc todavia qucdcn alg,ttnols fabricantcs dispucstos a producirlas!

la nicnibrana extern, dc los neumococos, Hncsrophillu, etc. La rcstriccion ('1111 atecta a pcyuchos pcptidos dc cntrc 10 a. 20 anlinolacidos, \ sc ntanificsta cn tin-nia de , atiscncia do rcspucstt dc (xigcn gcnctico-, as quo: Ios pcptidos solanacntc SC uncn :t dctcrnainadas inolcculas CPI I . Probablemcntc csto cs nlas tcoirico yuc real, a a que cl tamano do la maa aria dc Isis Vacunas Cs considerabletnentC superior . \i siyuicra la s aCt1na m;is efiCaz Induce inn1u indad Cn tod(1s Ios jndj\ iduos; poor c jcniplo, tin ;'%, do las personas a las yuc sc admjtustra cl tratamicnt(o complcto de la vacuna de la hepatitis 11 no dcsarrollan inniuni(iad .

SEGURIDAD DE LAS VACUNAS

Aunyuc en cl pasado 1:1 seguridad dC las lacunas no tits Una dC las CUCSticntcs priolritarias, cn la actualidad Cs ono dc los aspectos al quc m;is intportancia sc da . Por SUpucsto, CI tcrmino seguriciad cs relativo, va yuc un ligcro dolor () inllaLrlacion cn cl Puntol dc inacccioin o una ficbrc Ic\c se consideran aceptables, aunyue los pacicntes (' hostigados por Ios abogados protcsionalcs h cad, s cz ticnden a presentar naas denuncias con lines lucrati\- os . Esto no Cs ,orprencicntC si se time Cn cuenta yuc, al contrario que loos antihititic(1s V IttuC11(rs onroos farinacos, las lacunas sc administran a indisiduols que pre\ iantcntc disti-utan de un mien Cstadol (ic salad. Las connplicacioncs graves pucden scr dcbidas a factorcs rcla cionados con la sacuna o con cl pacicntc hhe. 19.111 . Las 1 acunas pucden cstar contantinadas coil protcinas o toxinas nocixas, oo jncltiso corn xirtrs silos. Las 1:teun.ts inacti\-.t1as pucden no liaber silo inactisadas totalnicntc, tnicntras que Ids racunas atenuadas pucden prcscntar rca crsioncs al tipo sah ajc. I :.I pacicntc pucdc scr hipcrscnsiblc a cantidadcs nlinintas do protcinas contantinantcs o pucdc cstar inrnunodcprinndo, cn CUco caso ctralgtder lacuna sis .t Csti coontraindicada .

VACUNAS DE LAS QUE SE DISPONE EN LA ACTUALIDAD Las vacunas que se utilizan en la actualidad presentan una eficacia variable
Fn la 6111Ylt 19.12 sc cnunlcr.a11 Las cacun:u yuc Sc urilji,ln'ic tcn n1a rutinaria en la actualidad . (;uatro dc cllas i polio, saranipio;nparotiditis \ rubcoolal son ran cficaccs quc sc prctcndc quo: cstas cnlrrnlcdadcs quccicit crradicadas a prirlCipjos ICI siglo XXl . Esto constituiria un logro cxtraordinario, 1a yuc Ios inodclos matcm:iticols dc sinttt1Aciom indican quc se trata dc objctisos inas -diticilcs~ , yuc la cirucla. Sin embargo, cxisten ultras lacunas yuc Cs nicno, probable yuc sir\- an par, crradicar las corrcsp(mdicntcs CntcrrnedadCN, dcbidol a Lts sigujentes razoncs: " El estado de portador : la crradicacio n do la hepatitis 11 scria un cxito cxtraordimarioo, pero par, do scr-ia prcciso crradicar cl cstado de polrtador, cspecialincnte cn Asia oriental, en donde la sia dc transitlisioin nias habitual cs do nlacirc a hijo . ;prcscnta grandcs ;( " La eficacia insuficiente : la eficacia do la B( sdriacioncs cntrc lots ditcrcntcs paiscs (la incidencia dc la tuberculosis sa Cn aumcnro, CspCCialrnCnte Cn IOS PaCiC1ltCS Coil SIDA'l, inienrras quo: la 1'aCUna do la lox ferina SG1o protege a lit) ?0`%, dc los indjs-iduos sacunados . " Efectos sccundarios: sc sospccha yuC la xacuna do la toss tcrina da lugar .t ctectos sccundarios, lo yuc rctrac a la poblaciun

Problemas de seguridad de las vacunas tipo de vacuna posibles problemas de seguridad

reversion al ti ; n

ejemplos
"p- 1,11 me1-" lo I, pol~ ;m'i(" I .lis tipos 2 ;.3

ante la sacunaci(in . " Forntas de vida fibre y hucspedes anitnales: cs probable yuc las tiornlas do s ida hbrc dcl agente dcl tctanos sohres ixan indcfiniciinicnte, s, tarnpocoo sera posible crradicar Isis enterrnedadcs cn yuC cxjste un IutcshCLI annual, coornoo la ficbrc anaarilla.

vacunas atenuadas

enfermedades graves an pacientes inmunodeprimidos infection persistente hipersensibilidad a los antigenos viricos hipersensibilidad a tos antigenos del huevo vacuna no inactivada

vacuna, BCG, sarampi6n varicela-zoster sarampi6n sarampi6n, parotiditis antiguam . accidentes con la poliomielitis hepatitis B poliomielitis Los ferina enfermedad t6tanos difteria tos ferina poliomielitis sarampi6n parotiditis rubeola Haernophilus

Vacunas de

use generalizado
observaciones administradas conjuntamente en 3 dosis entre los 2 y los 6 meses de edad; dosis de recuerdo de las del tetanus y la difteria cad, 10 anus administradas conjuntamente (,triple virican) a los 12-18 meses de edad nueva; puede que se some a las anteriores

vacuna toxoide toxoide organ. compl. inactiv. inactivada (Salk) o atenuada (Sabin) atenuada

vacunas inactivadas

contamination con levaduras contamination con virus animates contamination con endotoxina

polisacarido

Fig. 19.11. Los problemas de seguridad que pueden surgir a la hora de administrar vacunas hacen necesaria la vigilancia continua de los procedimientos de production y administration .

Fig. 19 .12. Vacunas que se administran en la actualidad de forma generalizada, siempre que sea posible .

Vacunas de las quo se dispone en la actualidad

Uno de Ios prohlelnas yuc sc pl :ultearan en cl tilturo sera Coalcienciar a la 11o111acion do la 11rcrsidad (IC \acunarsr fronts .t en fernlrdadcs yuc pareccra quc estan dcsaparcciciiio . ()trot prohlcnla sera yuc .11 irsc rcoiucicndo cl rcscr\orio dr la cnternledad, los casos tendcran a aparcccr a cdadcs nlas a\arlzadas, to yttc ell rnferriicdadcs conlo cl saranipion Y la rubcola da lugar a conscltlCllCiaS elt111CaS Illas Qra\Cs . La administration de algunas vacunas solo esta indicada en determinados grupos de individuos Flt los paiscs dcsarrofados curl cs cicrt(1 para la B( G s la ~actiil.l dc la hepatitis 11, \ Ira\ alvtulas yuc rn cualyuier ca"() Cstan ticsti-

nadas a poblaciones selecciomadas i(iajrros, personal do cnfrrmeria, ancianos, rte . ; tiq . 9.1 _, y . Esto pucdc scr dchidu a rcstriceionea geograficas { p. cj ., la fchrr amarilla ! o a la poca hrccucncia de exposicion 11), ej ., la rabia i, nlicmras yuc ell otl-OS casos es dr hido a la iinposibilidad do prrxiucir las camidadcs dc \acuna nCccsarias para cul1rir la dcnlanda . Por cjcinplo, coda c1lidcnlia dc gripe rsti causada por una cepa dilcreme, por to title cad:t \ez es neccsaria una nuc\a vacuna . lira vacuna Clue these cficaz trcntc a todas las crpas del virus de la gripe scria extrrtnadanlrnte tail ; sin embargo, drsgraciadanlcntc, tanto la llcnlaglutinina lrallrl la ncuranlinidasa, quo: son los coinpolrtncs dc la cuhicrta cztcrna del virus \ los antigcnos dc Ices yuc depends la rficacia do la vacuna, \ahall CUIlt1Iltl :l111CI11C .

Fn rl easel del ganado, Ills \ctcrinarios Ilc\arl decadas utilizaodo (111 .1 \acuna para Ios helnlintos pullnorrlarcs quo: parasitan a cstos aninlalcs . Sin clnhargo, cs posihlr quo: las jntrccioncs parasitarias hu Inallas Sean cspccialnlentr dlfieiICS sic ahordar, en parts prlr las caractcristicas polimorficas \ rapidainctuc canlbiamcs dc ntttchos aimI ,cilos parasitarios . Poor cjrnlplo, nillgluul de Ills Il1rxIClos aninlalcs dCl paludisnlor nlucstra una \anacion arlngcnica tan intro Na cr)nl(r I'Irisrundirtnf t~Icitparrrne, cl protonoo quc causa la fichre tcrciana maliena en los sires IuI1na11os . 1)C la nlislAl filrnla, resulta nlllcho alas ticil intntlnizar a la% ratas frentc a la csyuistosoaniasis quo: a moos anintiles, incluidos protlahlenlcntc Ices sores Inlnra nos. Parts dc Ion prrlhlcnlas soil LIchiLIcls a yuc cstos par.isitos rlol Sc alojaii cn cl lahoratorio cn Sit lulcsprd natural . Sc hall puhlicado los rcSUltados de \ariols cnsayos chnicos dc \acunas tremc al paludisino, enlpleando anngcnos do las tbrnlas hepatica o sanguine,, coal un cxito solo nlodrrado. El paludisnlo prrscllta I :1 particularidad do yuc cl ciclo \ital del panisito obese di\crsas dianas para la \acunacioin {tiq . 19,14h . Un cnsavo clinico Ilc\ado a Caho ell Vcncrucla Coil Icishnlanias inactj\adas comllinadas con 13CG ha deinostrado yUC al 111CI10S Cl 90'"i, do la pobla cion queda protegida teas la adnlinistracion do la sacurra . ttn prohlcnla yuc plantcan estas cnfcrnlcdades parasitarias cronicas cs la aparicion dc lenrmlenos innttulopatolilgicors . folr ejcnlplo, los simoinas de la infection pole '1 i_ypaunsontn o-nei (cn

Hay vacunas para enfermedades parasitarias y para algunas otras infecciones quo se encuentran en Ease experimental 1- 11 Ll .lctu .llid,ld a r~t .in I'r3li/All .j(r 't .uxlcs C>iLICfl(), [),Ml (Ir sarr()liar vacunas bents a LIS prillcip .11cs intccciomcs tropicalcs por protozoon \ hclmintos . Sin cinbar ,cl, ningulla do [as \actnlas obtenitias so: utiliza aun sic tiwlna rutillaria, \ ha\ cicrtos ill\cstiga dores yuc afirnlan ytrr Cstr1 110 Sera pr>sjl11C nunca, \a yuc cstas cnternlcd:ldrs no induccn una innnlnidad eficaz \ cs ilnposihle  supcrar a la naturalcza- . Pew a to(dr1, Iris cxhausti\os CStUdiOS Ile\ados a caho coal :ulintiles de cxpcrinlrntacio il hall deniostra do yuc cs pcrtecta11lcntc posiblc dcsarrollar vacunas para cl paludisnlo, la Icisllnlaniasis \ la csyttistosollliasin, \ tanlbicn se ha ohtcnidtr 1 .111 .1 \31cttlla con cicrta cficacia bents a la hahcsiosis canina .

Estrategias de desarrollo de vacunas antipaltidicas faille estrategia vatuna a base de esporozoitos para inducir la production de anticuerpos bloqueadores ; ya se ban Ilevado a cabo estudios de campo en seres humanos vacuna a base de esporozoitos para inducir inmunidad celular frente a la fase hepatica

esporozoitos

fase hepatica

Vacunas limitadas a ciertos grupos enfermedad

tuberculosis BCG

vacuna

grupos a los quo se administra

r Remo Unidu 10-14 anos EE .UU .: solo a grupos de riesgo

'

merozoitos

vacuna de merozoitos (-antigeno) pa ra inducir la production de anticuerpos bloqueadores vacuna de formas de la fase asexual (Ag) para inducir otras respuestas frente a la fase eritrocitaria y a los productos toxicos (vacuna r(antienfermedad,,)

hepatitis B

Ag de superficie

grupos de riesgo (medicos, personal de enfermeria, etc.) ADVP ; varones homosexuales ; individuos en contacto con portadores grupos de riesgo (trabajan con animales) ; tras la exposition viajeros grupos de riesgo; ancianos ancianos nihos con leucemia gametocitos

rabia meningitis, fiebre amarilla, fiebre tifoidea, colera, hepatitis A gripe neumoma neumococica varicela-zoster

inactivada polisacarido, atenuada, inactivada, mutante, inactivada/atenuada inactivada polisacarido atenuada

vacunas pare interrurnpir lasfasessexuales(vacuna ~rbloqueadora de la transmisiomr)

Fig. 19 .13. Vacunas que solo se administran hoy a grupos seleccionados.

Fig. 19 .14. En la actualidad se investigan diferentes tipos de vacunas para el paludismo, debido a la complejidad del ciclo vital del parasito y de las reacciones inmunitarias frente al mismo.

Vacunacion

ternxdati dc ('hagasj son e1chidos cn gran nlcdida a proccsos innitlnitarios {cs c1ccir, aut(linlnunidadi . Un caso parccido dcntro CIrl nlund(l bacteriano CS la Icpra, en l a quc lox sintonlas son debld(n t la ~` aparcntc ) hipcrrcacti\ idad dc lax cclulas TH 1 o TI 12 . ('na \acuna quc p(ltenciase lax reacciones ininulutarias sin clink nar cl agentc patdgcno podria agras ar lox sintonlas. ()tro cjcnlplo dc csra dcsagradahlc posibilidad cs cl dengue, cn cl quc cicrtos anticucrpos 111\01 -ecen la intecciiin al perinitir a Ios sires pcnetrar cn lax cclulas tras unirse a lox rcccptores dc Fc . En un modclo experimental de lacuna antipalitdica bloqucadora de la discnlinaci(in tamhien se Ila obscn- ado la aparici(in dc anticucrpos que potencian la infecci6n .
Otras vacunas experimentales

ADYUVANTES
El cl curso dc lox trabajos Ilc\ ados a cabo cn la dccada dc 192(1 con objeto dc producir sucr()s aniniales para sit administracibn a sercs humanos se obscrs (i quc detcrininadas sustancias, especial nlente lax sales dc aluminio, cstinrtIlah;ul notablerncnte la producciun dc anticucrpos cuando sc anachan al antigeno o sc cmulsihcaban con el Inismo, cs decir, acttian como adwrhautcs. El hidr6xid() dc aluminio siVuc siendo tl1LIC utilizadol, por ejenlplo asociado a lox toxoides dc la difteria \ dc] tctanos . En la actualidad, sic ha tratado dc dcsarrollar mejores adws- antes a la [it/ de lox IItICVos conocimientos iccrca tic lox proccsos dc cstimulacibn lintilcit;u-i ;t v gcneraci6n de inclnoria, cspecialnlente en to rclativo a I :ls rcspucstas mediadas por cclulas T. Ell la firfrrl-a 19.16 sc cntinicran estos aril u\ - antcs, per() es preciso insisrir en quc Inn _911110 dc lox nues()s adsvsantcs ha side autorizado aiin pare ser utilizado en Sercs hunlallos.

I :\i,tcn otras lacunae siricas \ bactcrianas quc tamhie) se Cncucntr .In t()dasia en tale de exl)c6nlcntacion itoxina dcl c6lcra, J'hIllrlla atenuada, ccpas <" infantilcs- dc rotes irus, glucoprotcilia dc sttpcrfcic Lid sires dc Epstcin-Barr) .

I I list .( dc enfcrnledades intccciosas graces part lax que aun n() se disp(nlc CIc \- acunas sigue sicndo min cstcnsa i_/ia. 1Q .EstaN .15) cntcrincdades, con el virus dc la in Ill LHIOdclicicncia hunlana I VI H I a la cabeca, constitttyen uno do lox principales retos tie imcstigaci(in \ desarrollo pare la pr6xinla (iccada.

Existen muchas enfermedades para las que no se dispone de vacuna alguna

PJYCcr (Ilk' I()s ctcctos tIe I()s tthutdntcs NC debCII tiln(i,Irllent ;Ilmcntc a d()s nlccalusmos: la concclnracion t1cl antigeno cn lox Ingares en quc se produce la exposici(in de lox fntocitos al misino l ; clecto dcpot,~) s . la inducci(m dc citocinas regtdadoras del tunci(manlicuto fnfbcitario . Sc crcc quc cl cfccto dc lax sales dc aluminio es de tipo depot, al inducir la ti,rnlaci()Il tie pequcfios granulomas en lox quc qucda rctenido el antigeno . En la actualidad sc Ilan dcsirrollado nucos sistemas, conic) lox liposonlas l. lox

Los adyuvantes concentran el antigeno en lox lugares adecuados o inducen la liberacion de citocinas

Principales enfermedades para lax que no se dispone de vacuna

enfermedad
VIH virus herpesvirus adenovirus, rinovirus estafilococos estreptococos, grupo A bacterial Mycobacterium
leprae

problemas variation antigenica ; Zinmunosupresion? ,peligro de reactivacion? ipero la vacuna para el virus de la varicela-zoster parece segura) multiplicidad de serotipos lax primeras vacunas no resultaron ser eficaces (era preferible at tratamiento con antibioticos) (la BCG confiere una cierta protection) no se conoce forma de inducir eficaz inmunidad lax primeras vacunas ineficaces no se conoce la forma de inducir eficazmente inmunidad variation antigenica

conIPlejos inmunocstinltrlantcs i ('()M IE ), gtte consigucn cl nlisIllo objetlvo al garanti7ar quc Ios antigenos que conticllell son transportados hastt lax cclulas presentadoras dc antigenos . Los productos bacterianos conlo lax paredes cclulares dc lax tnico-

Adyuvantes tipo de adyuvante utilizado rutinariamente on seres humanos hidroxido de aluminio (algeldrato) fosfato de aluminio fosfato de calcio liposomas* sistemas de administracion COMIE* polimeros bloqueadores formulaciones de liberacion retardada* BCG productos bacterianos Bordetella pertussis (con toxoides diftr:rico y tetanico)
Mycobacterium bovis y aceite' (adyuvante

experimental* o demasiado tdxicos pare humanost

sales inorganicas

hidroxido de berilio

Treponema Chlamydia hongos Candida

pallidum (sifilis)

Pneumocystis paludismo

protozoos

tripanosomiasis : enferm . del sueho y de Chagas ; leishmaniasis esquistosomiasis oncocercosis

gran variation antigenica ; inmunopatologia; autoinmunidad (ensayos clinicos prometedores) (ensayos prometedores en animales) no se conoce la forma de inducir eficazmente inmunidad

completo de Freund'l

muramil dipeptido IMDP`) IL-1 IL-2 IL-12 IFNy

helmintos

mediadores naturales (citocinas)

Fig. 19.15. Existen enfermedades infecciosas graves para lax que no se dispone de ninguna vacuna . El problema mas frecuente es el desconocimiento de la forma de inducir una inmunidad eficaz .

Fig. 19 .16. Existen diversas sustancias de origen exogeno y endogeno que pueden actuar como adyuvantes, pero en la practice clinica solamente se utilizan las sales de aluminio y calcio y Bordetella pertussis .

Vacunacion frente al cancer

bactcrias, la cndotoxina, etc ., probablenxiuc actuan cstinutlando la produccion de las citocinas adecuadas . Fsta tcoria SC sustcnta en el licclio dc yue ]as propias citocinas son buenos adyutantes, especialnlcntc cuando sc encucntran unidas dircctamentc al antigcno . Las citocinas pucdcn ser num utiles en pacicntes innlunodcprinridos Iv . f~9 . 19.IR), clue no sucicn responder a la administracion dc Las Lacunas com cncionales . Se tree clue tambicn pucdcn servir para dirigir la rcspuesta innlunitaria en la direcci('>n descacia f p . cj ., en las entcrmedades en clue se prctcnc1c yue solo sc produzca una respucsta TH I o Ti 12 j .

INMUNOTERAPIA INESPECIFICA
4luchos dc los ccnrrpuestos clue actuan comp adtutantes para las \acunas SC 11 .111 adnlinistrado tambicn como agente Linico, ell till intento dc anlpliticar la actividad ininunitaria general (;lio. 19.M . Los nlejorcs resultados se hall obtenido con citocinas, sicndo cl interferon u (IFNu1 cl mas utilizado de cllas, funcianicntalnicn tc debido a sus propiedades antiviricas (y antiturnoralcs en algunos casos ; \ . mas adclantc 1 . cap . 20 ;) . Probablcmcntc cl ctccto clinico ntis espectacular dc una citocina es cl clue ejcrcc cl tactor estimulantc dc [as colonies dc granul(xitos ( G CSF 1, quc cs capaz dc reactivar la nl dula osea despues dc los tratamicntos antitumorales, curl cl consiguicnte bcncficio coil respecto a ]as hemorragias ' ]as infecciones . Finalmente, en los proccsos intlamatorios grates o cronicos Sc pucdcn utilizar inhihidorcs dc citocinas . En cstc scntido son till Ics ditcrsos inhihidorcs del factor dc necrosis tumoral i'I NF'1 t dc la interleucina I (IL-1 , clue se hall aplicado en casos dc artritis reunlatoide 1 . icon mas polcnlica i en cl shock scptico provocad(1 poi organismos granlncgativos v en cl paludisnlo grate . Esperemos yue en pocos anus se hate aclarado la tarnracologia clinica de las citocinas t sus inhihidorcs, dc tai forma clue estos nlensajeros IIIOICCUI :lres del sistenla inmunitario Pucclan ser explotados en toclas sus tacctas, al igual yue 11 .1 sucedido con la to cunacion, yue aprotccha las propiedades de los lintocitos .

INMUNIZACION PASIVA
Aunyuc en la mayoria dc los casos ha silo sustittfcla pot- los alltibioticos, la inyccci(in de anticuerpos para cl tratamiento dc Las infecciones todavia time :tlgunas aplicaciones ell la actualidad i_/iq. 19.1 '} . PtiCCIC Ilcgar a saltar tides en los casos ell yue existen toxinas circulantes (p . ei ., tetanus, difreria, morclccluras de scrPiente1 o cuando son precisos titulos cletados dc till Illticuerpo especifico . Fstos anticarerpos se sucicn obtener a partir dc caballos, aunque en algunos ocasiones tambicn se utilizan los clue proccdcli de pacicntes clue hall padccido la enfernlcctad t sc hall recuperado . En cl otro extrenlo se encucntran las niezclas dc intntn1oglobulillas humanas nornlalcs, yue sucicn convener stificicntes anticuerpos frentc a las intcccioncs mas trecucntes como para yue una dosis dc 1(l0-400 ing de IgG protcja durantc till rocs a los pacicntcs coil hipoganunaglobulincniia . fare claborar cacia una de estas nlezclas se utiliza stiero dc mas dc 1 .000 donantcs, quc debe ser analizado prcvianlcnte para detectar la prescncia dc VII i 1 . dc los virus de las hepatitis B y C . Aunyuc Id utilizacion de anticuerpos monoclonalcs cspccificos es atractiw desde till punto Lie vista tc()rico, todavia no se Ila coil Sit principal Set' uido clue supcre a los mctoctos traclicionales, t aplicacion ell cl campo dc I:ts enternledacics intccci()',,1s sigue estando limitacla al diagnostico dc las mismos . Esta situacicin puede cambiar cuando sc obtengan mas facilmcntc t t a menor precio') anticuerpos monoclonalcs hunianos, to sea mediante cultivo celular o ingenicria protcica ~ t . cap . 29 ;1 .

VACUNACION FRENTE AL CANCER

La idea Lie cstimular incspccificanlcntc CI sistcma inrntulitario para quc dcstruta los tumorcs sc rcnlonta hasta pace cast till siglo, c(m los trabajos dc Colcv, quc utiliz6 con cicrto exito filtrad(n do cultivos bactcrianos ctivo mecanismo dc acci(m probablcincntc collsistia en la induction c1c citocinas como cl TNF t cl IFN . Sin rill hargo, los intcntos para conseguir estos mismos rcsultaclos coil citocinas puriticadas it otros ill nninocstimulantcs (p . ej ., BCG1

Inmunoterapia inespecifica
procedencia
`i t adrs :,, -tJtv,s

Inmunizacion pasiva
enfermedad enfermedad proced. de los Ab indicacidn

observaciones

microbiana

oacterianus

utilizada pot Coley 1;1909 para el tratamiento de los tdrnores cierta actividad frente a tumorcs eficaz en las infecciones cronicas : hepatitis B hepatitis C herpes zoster papilomas profilaxis frente al resfriado comtin (y frente a algunos tumorcs) eficaz en algunos casos de : enfermedad granulomatosa cronica, lepra lepromatosa, leishmaniasis (cutanea) leishmaniasis (cutanea) recuperation de la medula osea tras farmacos citotoxicos

BCG IFNu

gangrena gaseosa botulismo mordeduras de serpente picaduras de escorpion rabia hepatitis B hepatitis A sarampion

caballo - tras la exposition

citocinas

IFNy

humane humana mezcla de inmunoglobulinas humanas

tras la exposition (mas vacunacion) tras la exposition profilaxis (viajeros) tras la exposition

IL-2 G-CSF

antagonistas del TNF shock scptico inhibidores de citocinas antagonistas de IL-1 ~paludismo grave (cerebral)?
IL-10 Fig. 19 .18. En determinadas circunstancias, la estimulacion

Fig. 19 .17. Aunque en la actualidad no se utilize tanto como hate

50 anos, la inyeccion de anticuerpos especificos sigue siendo tin tratamiento clue puede salvar vidas en determinadas situaciones.

o inhibition inespecifica de ciertos componentes del sistema inmunitario puede ser beneficiosa .

Vacunacion

solo han tenid<r cxitrr para una peyueria scric do tumowes, y ell la ,tctuAidad los principalcs cstiicrzos sc centran cn la induccion do inmtrnidad CcI)cci/ica (igual clue ell cl caso do los inicrobiosi, sa yuc SC ha crrmprcrhado quc ell Agtnrts Oc :tsi0nes 10" tumorcs son rcchazados como si sc tratasc do injcrtos aicnos . Este tcnta sc cstudiara con mas dctallc ell Cl capitulo 20 .

~Por clue no se han desarrollado vacunas atenuadas frente a todos los virus y bacterias? Una vacuna no puede superar a la naturaleza . ~Es esta afirmacion excesivamente pesimista? ((No es probable clue se repita el exito obtenido con la viruela. ZEs cierta esta afirmacion? " ZSustituiran en algtin momento las vacunas a los antibioticos? " ~Que es el BCG : una vacuna, un adyuvante o un estimulante inespecifico? 4Por clue podria provocar mas problemas clue beneficios una vacuna frente a los helmintos? ~De clue maneras, aparte del estudio de su reaccion con los anticuerpos, se pueden identificar los antigenos adecuados para ser utilizados como vacunas?

VACUNAS ANTICONCEPTIVAS
En principio, cs posiblc intcrrumpir la conccpcioin y la implantacicill mcdiantc la induccic'm de inmunidad trcntc a di\crsas hormonas del cmharazo . t .a diana coil la quc sc lian obtenido los ntcjorcs rcsultados cs la gonadotropina coriunica hunwna I Il( del inglcs huntau chorionic itouariotropin i, una luormona cmbrionaria especifica encargada del mantrnimiento del cucrpo IUCCO . f.a s s acunas trcntc a la cadcna 13 do la h('(i acopladas a los tosoides ictainico o diticriccr son anticonccptiros nitn clicaccs cn los babuinos \, crmur sc ha comprobado mas rccicntcmentc, cn los scrcs humanos . Hn cl ensayo clinico clue sc ha Ilc\-ado a caho cn scrcs humanos la intcrtilidad rcsultri scr pasajcra, \ no sc produ jeron ctcctos secundarios intportantes . Estd clam quc este CS Lilt nucso sistcina do control do la natalidad, aunquc habr:i clue teller cn cucnta tantbicn todas las implicaciones culturalcs \ cticas yuc Ilc\ -a consign.

LECTURAS ADICIONALES
HMSO Immunisation against Infectious Diseases London . 1988. Hoffman SL, ed . Malaria Vaccine Development Washington, DC ASM Press, 1996 . Mims CA, Playfair JHL, Roitt IM, Wakelin D, VII ar",s R . Vaccination. In, Medicai Microbiology London Mosby, 1993 Modern Vaccines . London : Edward Arnold, 1990 Brown F, Dougan G, Hoey EM, Martin SJ, Rima BK, Trudgett A Vaccine Design . Chichester John Wiley & Sons : 1993

Inmunologia tumoral
" El proceso de vigilancia inmunitaria impide el desarrollo de la mayoria de los tumores al destruir precozmente las celulas anormales mediante mecanismos inmunitarios . " Probablemente el sistema de vigilancia inmunitario actda frente a los virus y no frente a los propios tumores . Esto queda demostrado poi el hecho de que, si bien la incidencia de tumores en individuos inmunodeprimidos es mayor de to normal, el aumento mas espectacular de esta incidencia se da en los tumores relacionados con virus oncogenicos . " Los antigenos relacionados con los tumores inducen respuestas inmunitarias ; estos antigenos pueden ser codificados por on virus o pueden ser productos anomalos o expresados en cantidades excesivas de los genes del propio huesped . " Los antigenos de diferenciacion gtre expresan los tumores pueden ser detectados mediante anticuerpos monoclonales . Aunque estos antigenos no son exclusivos de las celulas tumorales, son utiles para el diagnostico y pueden constituir dianas para tratamientos basados en anticuerpos . " La inmunoterapia pasiva con anticuerpos monoclonales puede Ilegar a ser una tecnica prometedora si se consigue dirigir dichos Ab contra un unico tipo celulas y si se logra evitar el problem, de la baja penetracion de estos Ab en las masas tumorales . " La inmunoterapia mediante inmunizacion activa o mediante la transferencia pasiva de celulas es en la actualidad una tecnica experimental . Las citocinas presentan actividad frente a algunos tipos de tumores .

EL TUMOR COMO TEJIDO INJERTADO

Dcsdc hacc nauclao ticmpo se ha sospechado clue los tuniores soil capaces dc inducir rcspucstas innaunirarias . A principios de siglo Paul Ehrlich sugiric'r yuc Icn SCI-CS huna:uaos I,osrian una gran tanfdad dc gcrnacncs abcrrantcs- I tunaorcs,i, yuc podian pro%ocar ctcctos dcstruttiyos Si no Iran contrarrcstados continuuniCntc por el sistema inmunitario . Esta afirnracion feyoi a corntsiderar a Ices to mores conao analogos do tcjidos injertados, capaces do ser reconocidos por el sistema inmunitario . Pcsr cllo, sc Ilcyaron a cabo intcntess par, climinarlos nacctiantc la estinrtrlacion (IC dicho sistema . Algunas obscryacioncs, conao la rcgrcsicin dc tumores tras la ad niinistracion de yacunas bacterianus I toxin, dc CAcy l o do forma espontanca, sc consideraron pruebas yuc demostraban la cxisTencia dc una rcspucsta inmunitaria cficaz . En las prinicras dccadas de este siglo los cientificos conicnzaron a imestigar la innatuaidad tumoral, v obscryaron yuc los tuittores trasplantados suCICn ezpcrinicntar una rcgrcsion, lei yuc Ios Ilcao a proponcr clue ctcctiyamcntc sc producian rcstuacstas innaunit :u- ias frcntc a ellos . Sin embargo, mLTCltos dc estos traba jos pioneros cayeron en descrcdito cuando se comprobci clue esta rcgrcsicn podia ser debida sencillamcnte a la incornpatibilidad gcnetica cntrc cl lurcshcd a. Cl tumor. En Ios afaos clue S1,91110-011 a la scgunda gucrra nrtrndial SC cibtuyicron cepas dc rocdorcs cndoganticas hornogcncas gencticantentc, clue hicicron posible cl estudio de las rcspucstas inmunitarias frcntc a Ios tumores en aniniales . Entrc cstos cstudios destacan los Ileyados a cabo por Burnett y Thomas clue, basantlose cn cl conccpto dc Ehrlich dc la cxistcncia dc rcspucstas inmunitarias frcntc a " <gcrnicncs abcrrantcs, desarrollanm la teoriu dc la vigilancia innaunitaria .

VIGILANCIA INMUNITARIA
La vigilancia inmunitaria es especialmente cficaz frente a los virus y no frente a las celulas tumorales Burnctt " , l honaas prcspusicrosn yuc cl sistema inmunitarios yigila continuumcntc cl organismo cn buSt1 cic celulas anornralcs, que son dcstruidas cn caso dc ser localizadas . Por tanto, se pcnsci que la rcspucsta inmunitaria frcntc a LIT) tumor constituyc un acontccirnicnto prccoz, yuc da lugar a la dcstruccicm cic la naayoria dc los tumores antes dc clue SC naanificstcn clinicamcntc . Tainbicn sc propuso clue cl sistema inmunitario dcscnapeiaa un papcl iniportantc al rcdtrcir la yclocidad dc crccinaicnto ), prorim-cr la rcgrcsicin do tumores consolidados . Estas supcisiciones SC basaban en diccrsas obscryacioncs :

" t,s datos obtenidos cn autopsias sugicrcn yuc lam\' rnuclaos tuna+arcs clue no sc llcgan a manilcstar clinicanaente . " Muchos tumores contiencn infiltrados linfoidcs, to clue puede tonstituir un signo dc bucn pronostico en algunos cases . " En Agunos ocasioncs se produce la rcgrcsicin espontanca dc algunos tumores . " Los tumores soil rnas trcCnCTttCS durantc cl pcriodo neonatal y en los ancianos, fascs de la \ida cn clue Cl sistema inmunitario es menos cficaz . " I .os indiyiducrs innatrnoticprimidos ticnden a prcscntar mayor incidencia tic tumores . Aunque tondos cstos datos parecen apoyar consistentenaentc estas tcorias, al analizarlos nias cuidadosainente se percibe clue: una dc las obscryacioncs mas contundcntc i; la asociacioin cntrc inmunodePrcsion c inci(Ienciai de tumores') se pucdc prcstar a otras interpretacioncs . La mayor partc dc los datos procedc del estudio dc rcceptorcs dc trasplantes renalcs, algunos tic Icn comics fan sido somctidos a scguimicnto durantc mss do 20 arias . Esta poblation innnutodeprimida present, una clesada inciticncia dc di\crsos tipos dc tunauircs, en morellos dc l0S Wales SC lam dcnrcistrado la implicaciisn dc dctcrminacios virus I_ft9. 20.11 . Sin embargo, tambicn cxistc Tina difercncia significatixa, aunquc pc yucna, en Cl ricsgo dc padecer otros tipos de cancer en Ios yuc no sc ha conscguido tlcnaostrar la particil)acicin dc nin~gun minis . Esto sugicre que cs probable yuc las rcspucstas inmunitarias scan especiahncntc importantcs para cyitar la disc in inacion dc virus potencialrnentc oncogcnicos, micntras clue la eficacia tie la lancia cjcrcida sobrc otro tipo dc tumores cs rclativamcntc baja . Sc sabe coil ccrtcza clue Ios scrcs Intnaanos normalcs gtrc rcsuttan intcctados con el virus de I ::pstcin Barr i VLB I sc ceinyierten en portadores durantc cl resto do su s ida, mostrando una cncrgica rcslnrcsta dc celulas T citotoxicas i' To ~ fi -cntc al virus . Aticmas, sc ha dcmostrado yuc cn Ios individuos inrrttrncidcprimitJos SC produce un aunaentci de la replicacion del virus s . de la concentracion dc particulas yiricas cn la,, ,ccrccioncs . Qucda claro, por tanto, clue cn condicioncs noirmalcs cl sistema inmunitario cs capaz dc redutir la rcplitacioin yirica I ;/iq. 211 .2x . Los dates obtcnidos a partir dc cxpcrimcntos coil aninialcs apcman la idea tic yuc la vigilancia innaunitaria se cjcrcc principalincntc sobrc Ios virus y no sobrc Ios propios tunacn- Cs . En cstudios llc\.idoss a cabo coil ratoncs atimicois o inniunoticprintidois mediante la administracioin dc sucro antilinfocitico, not sc ha obscryado aumento alguno dc la inciticncia general dc tumores . Sin embargo, una alt, proporcicin do ratoncs dcsarrollci tumores causados por el virus del polioma dc ADl\ pequcfio, clue s0hs proyoca tumores cn aninialcs norinales en muy raras ocasioncs . Esto no implica clue no sc produzca una rcspucsta innttrnitaria

Inmunologia tumoral

Resumen : Virus inductores de tumores e inmunodeficiencia causa de la inmunodeficiencia inr,ur.odeficiencia hereditaria tipos de tumor habituales linfoma linfoma cancer cervical inmunosupresion para trasplantes de organos o debida al SIDA cancer de piel cancer hepatico sarcoma de Kaposi paludismo autoinmunidad linfoma de Burkitt linfoma virus implicados VEB VEB virus del papiloma probablemente virus del papiloma virus de la hepatitis B virus herpes 8 VEB VEB

Funciones del VEB en la generation de tumores inmunidad frente al VEB en individuos normales destruction de celulas B

I infectadas

~inacion devirus extracelulares

Fig . 20 .1 . En todos los tipos de inmunodepresion el mayor aumento en la incidencia de tumores se produce en aquellos clue afectan al sistema linfoide . El virus de Epstein-Barr (VEB) esta implicado en muchos de ellos . La mayor parte de los individuos adultos son portadores de este virus durante toda la vida, sin que se produzca ningun efecto nocivo . La incidencia de la mayoria de canceres epiteliales, que no parecen estar asociados con ningtin virus, no es mayor en los pacientes inmunodeprimidos. trcme a la mayoria dc los tumores, pcro sugicrc que ell la mayoria dc los trios esta respuesta se produce demasiado tarde yresulta ineficaz .

inmunosupresi6n y VEB

Los antigenos tumorales pueden ser detectados por las celulas inmunitarias o por los anticuerpos

ausenci " e respuesta frente al antigeno replication del virus e infection el efecto mitogenico del virus proliferation de celulas B normales translocacion cromosomica crea tumor de celulas B

Se CUn0CCn CSCaSOS tumores humanoS prosocados pot' virus i-iiii . ?0 .3 ;, pcs-0 algunos dc ellos, comp cl cancer hepatico o cl ccrs ical, son la causa dc una cles ado mortalidad a niN, cl tnundial . Los antigenos \iricos pueden ser una dc Ios dianas dc las respuestas inmunitarias, pcro tambien existen datos clue indicall clue cn la mayoria dc los tumores, si no en todos, tic produccn disersas altcracioncs gcneticas I nnttacitin, ampliticacifin gcnica, dclcci6n o translocaci6n cromosomica} . Algcmas dc cstas alteracioncs inducen la c .xpresi()n de nwleculas anormales en ]as celulas tumorales, mientras quo: otras don lugar a la expresic5n de una cantidad excesis a de molcculas normales . Estas alteraciones pueden ser detectadas analizando dircctantcntc las respucstas inunutitarias del huesped o dc forma experimental, inmunizando delibcradamente con el tumor a animales dc otras especies .

Fig . 20 .2 . En los individuos normales el VEB infecta a los linfocitos B, pero las celulas Tc y los anticuerpos eliminan las celulas infectadas y los virus e impiden clue la infection se disemine . En los individuos inmunodeprimidos, asi como en algunos sometidos a tratamiento con ciclosporina, un agente inmunosupresor, el virus se replica e infecta mas celulas B . El virus acttia como mitogeno para estas celulas, de tal forma clue las celulas B infectadas de un individuo inmunodeprimido tienden a proliferar mas rapidamente de to normal . En ese momento se puede producer una transformation maligna debido a una translocacion cromosomica en las celulas B infectadas .

ANTIGENOS ASOCIADOS A LOS TUMORES QUE DETECTAN LAS CELULAS INMUNITARIAS

Los antigenos CnmoraICS so: cicscubricron mediante experimcntos de trasplantc . Al injcrtar un tumor a un animal inmunizado pre\ iamente con celulas inactis adas obtenidas a partir dc ese mismo tumor, se observa que el animal cs re .sistente trcnte a dicho injerto . Esta resistencia frcntc a Ios tumores, quo: como sc demostro mas tardc est.i mcdiada pen- celulas del sistcma inmunitario, csta dirigida frente a antigenos dc trasplantc asociados a tumores fA - I'AT1 de dos tipos . Los primeros son antigenos clue comparten muth0S tumores (antigenos T), incluso aunque el tejido original sea diterentc . Los segundos son antigenos cspecificos de coda tumor i antigenos dc trasplantc especiticos dc tumor; AI- E'f 1 . Un tumor puede expresar Si tttultaneamente antbos tipos tie antigenos .

Estos antigenos apar~:crn en tum<Wrs inducidcn p()r \irus conut el del polioma dc AI)v pcqueno o el S\'40, que son oncogcnicos para los animales tic experimentation, y Ios ~ - irus del papiloma humano, que estan asociados con el cancer cervical . EstoS sirus codifican antigenos T (tuntoralesj que comparten con otros virus del mismo grupo . Los antigenos T son proteinas nucleares clue dcsempenan un papel en el mantenimiento del estado transforntado i canccroso i . Los virus oncogcnicos AR\ prosocan lCUCCmias y sarcomas en animales, v se lea descubierto al menus un virus dc la leucemia humana +H'1'l .\'-1 ;_hrf. ?0_i1 . la progcnic tic CSt05 virus abandona )as celulas infectadas por gemacitin, siendo posible detcctar la glucoprotcina dc la cubicrta virico sobre la membrana celular dc dichas celulas . Los antigenos clue comparten Ios virus oncogcnicos A1)\ y ARN inducen energica .s respuestas humorales s . celulares, que pueden ejercer una cierta protection frente al tu-

Los antigenos tumorales compartidos son de origen virico

Antigenos asociados a los tumores que detectan las celulas inmunitarias

rnor. (,onto todos Ios nnnorcs provocados por scr virus oncogcitico detcrtninado connpartcn tin mismo antigcno, los ratoncs cndogarnicos inmunizados iediante, por ejennplo, inveccioncs reperidas de celulas tumorales inducidas por el virus SV40, recliazan cualyuier otro tumor indncido por (ilclno virus, pero siguen sicn(1o susccptiblcs a los tumores inducidos por cl virus del polioma . En algunas cepas de ratoncs se acti%an rcgularntcntc virus oncogenicos ARN endtigcnos, dando lugar a till proceso Icucetnico . En otros, la administracion de productos yuimicos canccrigcnos promca la expresi(in de antigcnos siricos en Ios ttunores resultantes y la producci(in de virus Lie la ICUCetntla inurina f VLMU) con capacidad infecti(a . I~stos tumores expresan antigcnos ntmorales muy frccucrtcs, asi coma antigcnos especificos tie tumor, conno se cxplica nnls adclantc . Sin cnil,argo, [as ITSPLICStas ininunital-ias frcnte a los virus ARN endtigcnos son dcbilcs, probablcnncntc debido a tin lenbnncno tie tolerancia innuntitaria IN . cap . 14i . Los antigcnos especificos de tin tumor aparecen debido a alteraciones de los genes de las celulas tumorales o a una expresion anomala de los mismos I .(n lnri ,gcnos especificos tic till tumor s(m aquellos yue son capa,c, do proyocar una I -espucsta intnunitaria tras la inycccior do celulas de dicho tumor cuando cl aunitnal receptor ha sido innrtunizado prcyiannentc con CSC nnisnu) tumor (ful. 2(1.4) . Estos antigcnos se detectaron por prinnera s ez ell Cl curso de estudios consistentes cn inducir tunnorcs cn ratoncs crdogannicos con productos quinnicos canccrigcnos, y cn la actualidad sc Ira dcscifrado su naturalcza nnediantc los experinnentos clue se cicscril,cn a CotntInLIacl6n . Se CXPIISO in t40-o till tumor trasplantablc i cs door, poco inInunogcnicol de till raton endogunic(~ t tin agente coil potentes propiedades nuttagclticas . Dc esta forma se pr(xiujeron subclones de celulas tumorales nuttantes, algunos de los cuales carecian tic la capacidad para crccer in riro a no scr que se innplantasen grandcs cantidacies de celulas . Esto signifca yue los inutantes habian adyuirido inis ilnnunogenicidad Line la tine poseia cl tumor original . Se utiliz6 uno de CstOS clones modificados, dcnonninados colccticantente clones tumor ncgatiyos (turn-), para innr(inizar a ratoncs geneticamente idcnticos . 1)e csta forma se obtuyicron celulas Tc capaces de dcstruir solannentc las celulas tumorales utilizadas para la inmunizacidn, pero no la linca tumoral original in otras yariantes tum-1iR. 20.S1 . A continuaci(in SC utilizaron cstas celulas l'(

comp sondas para dctectar la prcscncia de antigcno tumoral mutado durante el proceso tie cloraci61l molecular del gcn del antigcno tumoral . Finalmcnte, sc detect() \- sccucnci() CI ger nrutante que codificaba el antigcno tumoral i; cl gcn tuns 1 . Al connparar estc g,en con el gcn Inonn6logo del tumor original se obserxi') Line sus productos silo se diferenciaban cn tin anninoicido . A continua ci(in sc cicnnostr(i fbrmalmcntc que csta nnut:tdlm daba lugar al antigero in In unogenico que reconocian las celulas T : se incubaron celulas del tumor original en prcscncia de tin peptido de 10 antin(ricidos que contcnia la sccuercia tuns-, V SC obscrv(i que estos celulas podian scr dcstruidas p(A' las celulas'1'( mcncionadas antcriornnente ; sin embargo, esto no ocurria cuando cstas mismas celulas se incubaban en prcscncia de tin peptido que c(nntenia la secuencia no mutada l,hN. 2(1.6) . Si se tiCnC en enema Line las celulas T( cstan sonnctidas a restricci(in ('PH tic claw 1, cabs suponer clue la protvina cspecifica del tumor es procesada en el interior de la celula, dando lugar a tin peptido yue se asocia con las moleculas (TH de claw I s . es transportad(~ pasta la superIicic cclular. En otros casos Ios genes de Ios artll;CrUS tumorales procedentcs Lie otras yariantcs turn- rcsultaron scr idcnticos a los genes del

Virus y tumores humanos tumor cancer hepatico cancer cervical linfoma de Burkitt y otros linfomas en individuos inmunodeprimidos cancer nasofaringeo Ieucemia de celulas T de los adultos hepatitis B virus del papiloma humano! (HPV 16, 18 y otros) VEB VEB virus de la Ieucemia T humana I (HTLV-1) virus

Fig . 20 .3 . El VEB se asocia al linfoma de Burkitt en Africa y al cancer nasofaringeo en China, to clue sugiere clue para que existan los tumores son precisos ciertos cofactores, ambientales o geneticos . La Ieucemia de celulas T de los adultos es propia de Jap6n y los paises caribenos .

Demostracion de la existencia de antigenos especificos de tumor en tumores inducidos mediante productos quimicos inyeccidn de tin preparado de celulas tumorales en tin nuevo Won
inyeccion agent, : cancerigeno - d"

extirpation del tumor en crecimiento

exposici6n al mismo tumor

~,"'

ausencia de crecimiento del tumor

extirpation del tumor preparation de las celulas tumorales

"_L-~

inyeccidn de tin preparado de celulas tumorales en tin nuevo rat6n

extirpation del tumor en crecimiento

exposici6n a tin tumor diferente

crecimiento del tumor

Fig . 20 .4. Se indujo la apaticion de tumores en ratones mediante la inyeccidn de tin producto quimico cancerigeno (metilcolantreno) . Se inyectaron poll via subcutanea celulas tumorales de estos ratones en ratones geneticamente idcnticos . A continuation, se extirparon quir6rgicamente los tumores en crecimiento . Los ratones a los clue

se expuso al mismo tumor to rechazaron, pero no asi aquellos a los clue se expuso a tin tumor diferente (indncido con el mismo agente cancerigeno) . La capacidad para rechazar el tumor result6 scr transferible mediante celulas linfoides .

Inmunologia tumoral

Especificidad de la inmunidad tumoral celulas tumorales originales inyeccion crecimiento del tumor

Especificidad de celulas Tc frente a peptidos del Ag tumoral celula tumoral original variante turn-

~ peptido sintetico del tumor original

-e~ peptido sintetico del tumor mutante

celulas tumorales mutadas tum-

inyeccion

ausencia de crecimiento del tumor

eel . citotoxica especifica de tum-

Cclulas del bazo

celulas recubiertas con el peptido original sobreviven

eels . recubiertas con el peptido mutante son destruidas

tipo de celula tumoral tumor original variante turn-

efecto de las celulas del bazo sobre el tumor ausencia de efectos citotoxicidad

Fig. 20 .5. Se muestran el procedimiento de production de una variante tumoral altamente inmunogenica (turn-) y de las correspondientes celulas Tc en ratones DBA2 . Tras la induction de mutaciones en las celulas tumorales originales, se obtuvieron diversos subclones, algunos de los cuales habian perdido la capacidad para crecer en ratones DBA2 . Las celulas Tc del bazo de ratones a los que se inyectaron estas celulas turn- fueron capaces de destruir estas celulas turn- in vitro, pero no el tumor original .

Fig. 20 .8. Se obtuvieron celulas Tc de un raton inmunizado con una variante tumoral turn-, clue fueron capaces de destruir in vitro a celulas tumorales recubiertas con un peptido correspondiente a la secuencia del gen turn-, pero no a las celulas recubiertas con un peptido homologo del tumor original . Los dos peptidos se diferencian en un tinico aminoacido .

proccdentcs dc indis iduos norntalcs. Estos anticucrpos son capacn dc dctcctar autoantigcnus, y su importancia cn las rcspucstas dcl hucspcd frente a los tumores i si es que la times ) no csta clara.

tumor original . 1?star sariantes tom- sc ditcrcnciaban clrl tumor oxiginal en yuc la exprcsioin del antigcno era InuCitu mss intcnsa. Has

datos clue indican Claramcnte clue existen rcspucstas sonutidas a rcstriccicSn dc class II, al mcnos en los tumores hurnanos, pcro> se Babe nun' pocu accrca dc los antigenos tumorales que son reconoCidos Cttando se cnCtrentran asociados a mulcculas ( TH de class 11 .

ANTIGENOS ASOCIADOS A LOS TUMORES QUE DETECTAN LOS ANTICUERPOS

CC. It,tit rCalizado grandc~ cshrcrzos para dcscuhrir anngenos cx dusk'JmCnte 1tlrnoraiCS, \a sea en Cl SUCra del Inrcspcd portador del tUmar f tipiliCaCi(')lt autologa) o cn cl sucro dc animalcs inmunizados can elcmentos tunurralcs ftipificacion Itctcrologa} . Los trabajos mss rccicntcs se has hasador cn la trtilizacion do ailtiCUcrpos ntonuclonalcs obtcnidos a partir dc Cclulas 13 autcilogas o hctcrtilogas . Aunquc existcn mUS' pocos datos yuc asalcn la cxistencia dc m0ICCUlas exprcsadas cXClusicamcntc Ix>r celulas tumoralcs, sc hart detectader di\'ersos tipos dc antigenos asociados dc una u otra fn-ma cart los tumores.

Existen pocos antigenos exclusivos de los tumores

C.t celula, clue pUCdC sCL do 1111 tipo LCIatkamCHIC I,o(o abundante . pcrr tanto, las Ccluhts tumorales pucdcn exprcsar antigenos que en Co>ndiciorncs norrrnales sc cnCUCntr ;ut prcscntCS en un nirmeru mu reducido dc celulas . El antigcnu dc lu Icucemia linfirHastira aguda connin iCALLA, del inglcs common acute Ivnrpholrlastic leukaemia antigen, o CI)I0~ es tin eicmplo dc cstc tipo i;iirf . 30.-i. Otros son los antigenos oncofctalcs, yuc son antigenos dc difcrenciacion que se expresan nurntalncntc durantc cl desarrollo tietal, pero no cn cl curse dc la c ids adults i or se cxprcsan en CantidacICS mLIC pcyucnas h . Entrc ellos sc encucntran la a-fetoprotcina fAFP), producida pcrr las celulas canccrosas hepaticas, ~- Cl anti_ gcno carcinoembriunariu (CEA, del inglcs carcinocrnhrvonicautir7en), clue cs producida pcrr las Cclulas canCCrusas del colon Y dc otrus tcjidos cpitclialcs .

Los tumores pueden expresar antigenos de diferenciacion normales que presentan una distribution restringida en las celulas normales I . .t ma\crria do 1,11 cClttl .t~ tt1trt(n .tliti un ,1r11C n.iICntcs do Him tini

Los sueros obtenidos a partir de pacientes con tumores reaccionan con antigenos distribuidos muy ampliamente la sucro proccdcntc dc pacicntes Corn tumores, .tsi Ccntlor Icrs :Utti

cucrpors monoclonalcs obtcnidos a partir dc los mismos, rcacciorna can antigenos que SC cnCUCntran :unpliamente distribuidos en la supcrficic o, m,is frecucnicntcnte, en cl interior dc Cclulas ncn- maIcs \' tumorales . Los antictrerpos suclcn scr dc close Ig4f, por fo que sU afinidad cs baja . Tambien Cs posiblc obtencr anticucrpus monoclonalcs parcCidox nirdiantc la inmortalizacioin tic Cclulas It

E:I pr0Ceso dC glucorsiktci,n SC C)CUCntra altcrado ctt nuIClsor, to mores . Eaton pucdc dar lugar a la cxprcsioin dc nuc\'os Cpitopon hidrocarbonadors, Coma Cl antigeno dc Thornscn-Friccicnrcich, un disacaridu clue se suck mantcncr OCtslto en I :u Cclulas normaIcs. - fambicn pucdcn apareccr grUPOS sanguincors al,crrantcs . Las altcracioncs dc la glucosilaciorn pucdcn poser al dCSCUblerto epi tupos protcicos que no suclcn scr dctcctables cn [as celulas normales. I'or ejcntplo, had IIIUClras Cclulas cpitclialcs clue produccil mucinas cpitclialcs polimorticaN . Sc trata dc glucoprotcinas dc alto peso molecular con un nucleu peptidico repetitko rCCUbicrto dc cadcnas lateraICS tic hidrato tic carbono. I'.n los tumores cpitclialcs SC Inrcdc dctcctar un nucco cpitopo corrcspondiente a la cstructura rcpetitisa del niIClco .

Los antigenos normales clue se expresan en los tumores se pueden encontrar modificados mediante glucosilacion

Respuestas inmunitarias humanas frente a los tumores y mecanismos de evasion

RESPUESTAS INMUNITARIAS HUMANAS FRENTE A LOS TUMORES Y MECANISMOS DE EVASION La mayoria de los tumores tienen infiltrados linfoides

histo~h~,ic(  dc Irn tunicwcs Itwnancx 11.111 dctnostrado yuc la nta*N'ona do cllos conticrun un impl)rtante infiltrado dc cclulas infanlatonas (,Ji. ?0.X). En dicho infiltrado suclen pre dominar Ios linfocitos N los macr(ifagos_ si bicn tanlbicn sc pucdcn dctcctar otros tipos dc cclulas, cone) cclulas dendriticas, granu-

Expresion del CALLA en cclulas normales y linfomas

CALLA _______ IgMs

locitos y mastocitos . I.a utilizaci6n dc anticuerpos monocl(nlalcs I: Abn1) para idcntificar los subtipos dc cclulas linfoidcs ha sers jdo para fevar a cabo analisis rmis minuciosos tic las cclulas quc sc en Cucntran prescntcs en Cstos tumores (fq. ?0 .9i. 1)c csta forma se ha dctectado la prcscncia dc la nmvoria dc Ios subtil)os importantes de linfocitos gtte sc conocen . l ambien cs posiblc comprobar cl cstado hrncional do cstas cclulas mcdiantc la utilizacion dc Abrn cspccificos dc Ios rcceptorcs dc intcrlcucina 2 (IL-2 ; ), molcculas ('1'11 do chase 11 \- otros marcadores dc actjsaci6n . Sin embargo, no SC ha Cr)11seguido estthlcccr asociacioncs bicn dcfinidas entrc la prescncia tir deter minados subtipos dc cclulas lintoides s' CI pronostico dc Ios paCiC11tCS Ctm CSnccr. Esto poetic scr dcbido a quc solamcntc una pcyuciia proporcirin dc ]as cclulas quc sc obscrxan sort atraidas dc forma cspccifica hacia cl tumor. Btas dificultatics dc interprctaCi6n 11,111 prom()\ ido los eSCUdiOS in ritro sobrc cl hrncitmvilicnto tic cstos linfocitos infiltrantes dc tumores. 1.os rCsultadcls dC estos estudios se analizan en la pr6xima sccciinl .

precursor hematopoyetico

desarrollo de la celula B precursora (linfoblasto) CALLA

celula B madura

precursor hemato p oyetico

Precursor de las cclulas B leuccmicas

Ios linfoblastos proliferan, Pero no maduran

Fig. 20 .7 . t) CALLA solo es expresado normalmente en Ios precursores de las cclulas B o linfoblastos, quc constituyen menos del t6 del numero total de cclulas de la medusa osea . 2) La cantidad de CALLA aumenta en gran medida en la forma man frecuente de leucemia infantil .

DCx1r .lui ~C &Stu1 " r6i tltrC 1 .1s rCS11nrstas dC hl tcIul .r~ I aboraduras 1-II! Csdululada, PrCc1dmcntC hrn nn anli~Cno pucdcn ser rcproducidas in vitro xols icndo a Cstimularlas con CI misnlo antigcno, sc han empezado a lres ar a cabo cxpcrinlcntos cn Ios yuc SC Cstina1)lan lintocitos dc pacicntcs con cclulas tumorales inactisadas mctiiantc CI cultivo mixto dc dichos lint6citos s cclulas tun1oralcs (('EMI:h) (,/iq. ?0.10), con obicto dc dctcrnli11ar si CI sistcma innlunitaric) dcl pacicntc cs capaz dc reaccionar frentc al tumor. l .ON hntoCit0 S SC pucdcn obtcncr a partir dc sangre pcritcrica, tic Ios ganghos fnfiticcrs yuc drcnan la region cn quc se C11000ntra CI tumcn- 0 LICI propio nrnlor (CUando Sc obticncn dc Csta ir16uta nlancra, Ios lintocitos sc dcnominan lintocitos infiltradc)s Cn CI tumors . El (AIL1 pucdc cstimular a las cclulas Tli (('1)4") para quc prolitcrcn s SCCrctcn Cittkinas cfcctoras, pert) en CSCUS Cultis'os tanabicn se gencran cclulas T( f ('1)8- j, sicndo posiblc me(lir su actin i dad citotoSxica mediante la pruct)a dc liberaci6n de ^ :('r f vj~q. 2'9.26) . Las CclUlaS T( tanlbicn SC pucdcn obtcncr median tc cultiso cn prcscncia dc I1 .-2, quc prosoca la expansion tic Cualquicr Cclula CfcCtcn -a gcnrratia in riru. Es nccrs.lrio distinguir la actis- idad dc lascclulas Tc dc la dc las cclulas aSC81na5 Ilaturalcs (; \K,i, to quc CS posiblc Ni se estudian Ios cfcctos dc [as poblacioncs fnti)citarias Cxpul(fdas SObrC las cclulas diana dc rcfcrcncia adccuadas .

Los cultivos mixtos de linfocitos y cclulas tumorales demuestran la existencia de respuestas antitumorales in vitro
Col

Fig. 20 .8 . Reacci6n inmunitaria frente a un carcinoma de mama . En esta seccion se observa un tumor rodeado por un intenso infiltrado de cclulas mononucleares. Este proceso inflamatorio sugiere quc es posible quc los tumores sean reconocidos por las cclulas del sistcma inmunitario, y quc estas cclulas tengan capacidad para reducir la velocidad de crecimiento del tumor o para destruir cclulas tumorales . Tincion hematoxilina/eosina .

Fig. 20.9 . Celulas T CD4' y CD8' on un carcinoma de mama. Las cclulas CD4' y CD8- se detectaron mediante la tecnica inmunologica de la fosfatasa alcalina (tincion rosa) utilizando Ab monoclonales . Los cortes se han tenido tambien con hematoxilina como colorante de contraste. Rodeando al tumor se observan cclulas CD4 (arriba) y CD8 (abajo), estas ultimas en menor cantidad, pero apenas hay linfocitos en el seno del propio tumor.

Inmunologia tumoral

Cultivo mixto de linfocitos y celulas tumorales (CMLT)

En los CMLT se generan celulas T con muchas especificidades diferentes

celulas tumorales inactiv. del paciente

paciente

linfocitos del paciente

cultivo conjunto durante una' semana ; a continuation separar los linfocitos determinacion de citotoxicidad mediantc pruebas de liberation de isotopos 'deterrninac, de capacidad Ilde proliferac . mediantc la prueba de incorporac . de -IF-timidina

I,a CNI,cCillCidad dc LIN kcluh. 1 II \ It yuc NC 'Cncl-.tn sell p:uCcidas, nYticstran di,- cisos patroncs dc rvacti\idad trcntc a distin tas dianas en coda uuo C1c los ditcrcntes pacicincs 10 .11) . " En ainbos casos una ininoria dc [as celulas - I' chrnadas son espccificas del tumor autc'')Iol;o . " Algunos clones rcaccionan con el tumor autoilogo y coil todos o con parts do los tcjidos autoiIOgos in\cstigados . " Algunos clones Inucstran rcacticidad coil cl tumor autcilogo a. Coil .1gunos tumorcs do origcn alogenico . " I.as celulas rcstantes nuiestran rcacti,idad frcnte a dianas tuniorralcs inua di,crsas . SC hall dCtectado celulas 'h antitunaoralcs espccificas en pacicntcs con di,-crsos tipos dc tumorcs hunaanos . El inclanonia parcce set CSI,CCialinCntC innrtuaogcruco, V SC lean identificado di,- Crsas moleculas diana mediantc la estratcgia descrita para Ios ATET naurinos. Entrc ]as mrrleculas diana Lie las Cclulas Tr sc cncucntran los antigcnos del melanoma ,`AGIME), quc son expresados en una pcgLICna cantidad do celulas norinales, v la tirosinasa, una Cnzinaa quc cxpresan las celulas productoras de pigincnto . Los genes C1c los AGNIE a, do la tirosinasa de Ids celulas tunaorra1CS nor nnrcstran nrtrtaCi(Sn alguna . Tanabicn sc hall obscr,ado en pacicntcs Innnanors Con tumorcs respuCStas Creme a la proteins del oncogen 1-as Inutado v frcnte a p53, el producto del gen supresor do tumorcs. El tercer tipo dc clan w ha obrenjdo a partr dC PaCiClItCS Coil cancer do inarna y de o\ a6o . E\istcn datos rccicntcs quc indican quc Cste tipo dc clones puede responder dc forma espccifica pero no resMni~ida al pcpfido rcpctifi, o del nLICICO do la nurcina. Toda,ia no esta claro si dicho pcptido cs prcscntador pore niolcculas ( :PH o dc alguna otra IOrnia I ;p . ci ., actuando comer superanngcno ). I.as Cclulas quc responder frcnte a la nnICina puedcn scr Ti 1 o Tr (CD4 - o CD8' ) . No sc sabc quc iniportancia pucden teller in r , iro estos respuestas citotirxicas dctcctadas in virr-o. I .o cierto es quc ell CStr dios llesados a cabo en aninaales dc experinacntacion sc ha Cormprobado quc ]as celulas citoliticas antitumorales clonadas pucden prOSoCar una rc-rcsioin sic Ios tumorcs.

Fig. 20 .10. Se cultivan conjuntamente linfocitos obtenidos de sangre periferica, de ganglios linfaticos locales o del propio tumor con celulas tumorales autologas, inactivadas previamente mediante irradiation con rayos X o tratamiento con mitomicina C. Despues de un cierto tiempo de cultivo, se puede determinar la capacidad de proliferacidn de los linfocitos mediante la prueba de incorporation de 'H-timidina (presente en el medio de cultivo) . Tambien se puede estudiar su capacidad para lisar celulas diana mediante pruebas de liberaci6n de isbtopos .

Los tumores utilizan diversos mecanismos para eludir las respuestas inmunitarias

Tipos de respuestas quc se observan en los CMLT

linfocitos quc responden Tc Tc cels .citotoxicasespec. celulas especificos autorreacti- del tumor y no sometidas NK del tumor vos a restriction CPH celulas T +

celula diana

diana NK tumor alogenico eel . autbloga normal eel. autbloga tumoral

Fig. 20.11 . Se analizaron linfocitos obtenidos en CMLT mediante la prueba de liberation de "Cr a partir de diversas celulas tumorales y no tumorales. La destruccidn de las celulas se detects por la liberation del isotopo en el sobrenadante del cultivo . Los patrones de especificidad son diferentes segun el paciente del quc procedan los linfocitos : algunos de estos linfocitos solo son capaces de lisar celulas tumorales aut6logas, mientras quc otros lisan inespecificamente cualquier tipo de celula diana. Este ultimo efecto puede see debido a las celulas NK o a las celulas T activadas. Las celulas T CD4' y CD8' se comportan de forma parecida, y ambas muestran la misma variabilidad de respuestas .

(onus loN tumorcs csponitancos son Cal,accs dc crcccr \ proococar la nxICrtC del Iniespcd, es c, ideate quc nuIChos de cllos Consiguen clUdir las rcsl,ucstas inmunitarias del inisinor . Sc lion propucsto nurltitud dc nrccanisnaos . El m,is Ob,'io Cs la auscncia dC innatuaogenicidad por parts del tumor. fuctic quc esto no sea debidO a la auscncia do antigenos tumoralcs potcncialcs, sino a la cscast cficacia comp prcscntadoras CIC antigcixrs (CV1) dc ]as celulas tumoralcs. La induction dc respuestas inmunitarias requicrc scnalcs cocstiInulantes. quc puedcn scr Cmitidas hen' nao1CCUlas dC la SuPCrficie cclular er por las citocinas quc sccrctan Ias CI'A . Ell la actualidad se sabc Line la naorlccula B;', yuc porsren ],Is CI'A espetializ ;nias, es un COCStj1ntrhuuC cscncial quc act6a unicndose al receptor CD28 dc la superficie dc ] .is cclulas T (v. cap. 9) . Sc ha comprobado cxpcrinacinalincntc quc la prcscntacirin do los complcjos tornados por las molcculas ( .PH a . Ios pcptidos antigcniCOS a los reccptorcs do las cclutaS T en auscncia del CtcCto COCStinnlante de Bi puede dar lugar a tcnoinacnos de anergia. Desdc hacc ticnapo sc she Line los pacicntcs canccrosos rnucstran una rcspucsta innrrinitaria deprimida . Rccicntenacnte se ha dcnaostrado quc Ion linfocitos dc sangrc pcritcrica sic los pacicntcs canccroscis prcscntan anomalias en la transdUCCioill dc las scnalcs T; en algunos ocasioncs los lintircitors quc infiltran los tumorcs sc cncucntran ell Cstado ancrgico . Adenias, si las celulas turnorales carcccn Cic morleCUlas ( .PH do class 11, las CelUlaS Tti no podran responder hasta yuc Icts celulas CPA CSPCCializadas nO pr"OCCSCn los antigcnos tumoralcs (fig. 3(1.11) . Las celulas tumoralcs tainbien puedcn carecer de otras molcCUlas neccsarias para la fijacicin dc los lintircitos, como I .EA-1 . LEA 3 o ICAM- I Ix'. Cap. 5 h' o pucden Cxpresar nu)IcCtil .ts Comer las mucinas, quc inapiden diclta fij,tCiOll . hanabien puedcn secre-

Inmunodiagnostico

tar citocinas innaarrnasupresoras como TGF(3. t-n naccauisnao dc caasicin espccialmcntc importante es la desaparicirin dc los anti genus CPH, clue inapiclc quc se prcsentcn los pcptidos dericados de los antigens tumorales . Mas Lie] SOW dc las rclulas tumorales picrdcn inc r to nix, de los alclos ('PH dc clase I, \ has Agunos casos cn quc no sc cspresa ninguna molccula cie claw I 20.13) .

INMUNODIACNOSTICO
Aunque ezisten pocas molcculas yuc scan czclusi\- as dc las ccluI :ts tunuaralcs, lus :uatictrcrpos dente a molcculas rclacionadas cotta Ins tumores pueden set- nau* tttiles para cl diagncistico dc los tumores, ca yuc pernaiten dctcctar los aunaentos de la cantidad Lie tin antigcno por cncinaa dc los \-alores de referencia o sit prescn cia en lugarcs no habitualcs . Por cllo, el hecho de clue till antigcno no sea especitico de tin tumor no inaplica clue no sc puccia utilizar como herramienta diagn()stica .

In vivo. Los anticucrpos inarcados radiactisantcruc a, dirigidos contra molcculas relacionaclas con tumores sc hall utilizado como tecnica diagndstica ifijl. 20 .141, pero este mctodo no suele sups rar In scnsihilidad dc los nactodos mocicrnos do tomogratia coiliputaclorizada CIV) o resonancia naagnetica (RIM i . Acicmas, la innttuaoganamagratia time cl incomeniente dc clue CS IlCcc,.,,irio marcar radiactis anacntc los anticucrpos utilizacios para cada pa cicnte poco ticmpo antes dc Ilerar a cabo la prucba, v do clue depenclicndo del tipo de tunatn- a detectar se hall dc utilizar ditcrcntcs anticucrpos . El dcsarrollo dc fragmentos rcconabinantes dc anticucrpos dc alta afinidad puede naciorar la scnsihilidad de la innauuaog:uaaanagratia en ca tirturo . In vitro. LOS antictterpos son irtilcs para dcterminar la naturalcza dr la cclula original cn los tumores inditerenciados ffiq. 20.1 i1, asi como para detectar micromctastasis en la mcdula ()sea, en el liquido ccf;llorragtlidco, en lo, cirganos hntirides a . en otras localizacioncs f_/iq . 20.1(r'L'Fambicn se disponc dc innuttaoanalisis para

Presentation de antigenos tumorales a las celulas del sistema inmunitario 3

CD8 Tc citocinas j CD28 I Fig. 20 .12. Un antigeno tumoral puede ser presentado a las celulas T de diversas maneras. 1) Directamente y en ausencia de la coestinaulacion precisa, dando lugar a fenbmenos de anergia. 2) Directamente por parte de on tumor clue expresa molcculas coestimulantes, dando lugar a la activation de las celulas Tc . 3) Directamente por parte de las celulas tumorales e indirectamente por pane de CPA especializadas, dando lugar a la activation de las celulas Tc y TH .

anergia

activation de las celulas Tc y Tii

Fig. 20 .13. Tejido mamario canceroso clue presenta reactividad frente a tin anticuerpo monoclonal dirigido contra tin determinante monomorfico de los antigenos CPH de clase I . Solo hall quedado teniclas las celulas del estroma (en color marron), ya clue las celulas epiteliales malignas no expresan los antigenos CPH de clase I normales . Esto ocurre en aproximadamente el 50% de los canceres humanos. Algunos tumores pueden expresar molcculas de clase II anormales . ITecnica de la inmunoperoxidasa indirecta, contrastada con hematoxilina .)

Fig. 20 .14. Radiografia de torax e inmunogammagrafia tomografica de tin paciente con carcinoma de colon y metastasis pulmonares y hepaticas. El anticuerpo monoclonal YPC2 ;'12 .1, especifico de las celulas colorrectales cancerosas humanas, se Line al CEA. (Reacciona con una glucoproteina de 180 kdal .) El anticuerpo fue marcado radiactivamente con I'll e inyectado por via intravenosa . La gammagrafia se Ilevo a cabo 48 horas despues. La imagen se obtuvo mediante tin procedimiento sustractivo clue elimina las interferencias debidas al anticuerpo circulante en la sangre . (Por gentileza del profesor K. Sikora .)

Inmunologia tumoral

la determinacion en suero tic di%crsas mo lcculas asoociadas a tumores. Entre cllas sc cncucntran cl (TA N la AFR I .a larsencia tic coonccrnraciones clctaths tic cstas moolcculas pucdc tcncr valor diagnostico, llcroo ninguna tic las dos csta asoociada a un unico tipo tic tumor, llor for que su lsrincipal utilidad %title scr cl seguimicntoo del tratamiento f hq. 311.1 'I .

INMUNOTERAPIA
I .r 11rn1tnultcrapi .t IC ccnncitic~ .1 (1111U .1 1mtrclur ticntlloo, pcror Lt :rctualid,Id LAsi nunt,o cs cl tratamicnto de cleccio'rn . Sc put tic aplicar tic forma activa oo llasixa, csllccitica o incspecihca o incluso combinada- I:n la . /iqura 30.18 sc cnunlcran [as posibilidades tic las que sc disponc cn la actualidad .
CH

La inmunoterapia se utiliza poco an la actualidad

Fig. 20 .15. Identification de la celula original de un tumor indiferenciado . El estudio histologico convencional de una tiirrpsia de este tumor 11) revc" lo una caps de celulas tumorales no diferenciadas imposibles de identificar . A tenir el tumor con el metodo de la inmunoperoxidasa indirecta 12) utilizando un Ab frente a CD45 (el Ag leucocitario comun) se comprobo que la section era intensamente positiva frente al mismo, de to que se dedujo que se trataba de un linfoma.

Fig. 20 .16. Deteccidn de micrometastasis mediante un Ab monoclonal . En la figura se muestra una impronta de las celulas de un ganglin linfatico localizado en el territorio de drenaje de un carcinoma. El torte esta tenido mediante el metodo inmunologico de la fosfatasa alcalina, utilizando un Ab frente a la citoqueratina . Las celulas del carcinoma expresan citoqueratinas, pudiendo observarse una celula tumoral de gran tamano tehida de rosa . Las celulas tumorales aisladas, como la de esta muestra de ganglio, pasan desapercibidas con facilidad cuando se realiza un examen citologico convencional .

Inmunizacion especiica actva. Este mtu'doo sc 11,113 to la 11 h1 : zacio')n do celulas tunlooralcs mactisadas, \ ha tcnido, un c1crto cxi to en anjntalcs Lie cxpcrintcnt,1cjcm ir1111urIiL,K1os a11tcs tic la exllosicicin al tunloor . l,os intentors de inducir la regrcsion tic Willow, consolidadoos han dada pcores rcstdtadoos . Aunquc sc ha trabdiado tic inicnsanlcntc corn objeto tic aunlcntar la innurnogenicidad la% celulas tttt1IOI- alC% qiq. 30.14), la maxo'i,1 tic lots rnctoxlos utilizados tiara cllo han sido do tilloo cntl,irico . Reciciacnlcnic sc han cm hrcldidoo trahajon hasados cn cstratcgjas m,is rationales, tras cl des :tthrimrenioo tic tluc Io% t'hltcrlltn tic las celulas I soon llrcscntados poor nlolcculas ( I'H \ tic yuc la induction tic ] .is rcsllttcstas innlunitari,ts dcllcndc tic la llrescncia tic tactoorcs cocstimulantcs . tic Sc ha ticnlorstrado yuc la transfcccioln .1 celulas tumorales loos genes do la n1olecul.1 ttrCStlrltulaltte Iii oo tic citocinas comp ll .2, HA, cl interferon -, i I l : \'/ l o cl tactor cstinntlantc tic las coloonias tic grantilocitos/matrootagos I (;M ( .SF l, aunlcnta cn gran nlcdida su inrnunogcnicidad cn cxpcrimentos do llrotcccion tic aninialcs Ircnic a tun1orrcs . Dc la misrna forma, sc ha contscguido tluc las celulas fo rechaccn tumorcs exlscrimcntalcs mediante la innttrnizacioin corn epitorpors 11cl)tidicors tlcfinidtx a%oociados a no ccdosos adt mantes . 7anthicn sc pucdc inmunizar dircctanlcntc a lo>s aninmIcs coon Ah\ coonstruitios tie t:11 forma yuc corditiyuen antigenos tumorales y cocstimulantcs, coon lo yuc sc ctitan Ion

La inmunoterapia activa sigue siendo principalmente experimental

Monitorizacion del CEA en suero en el carcinoma de colon xtirpacton quirtirgica del Omer de colon CEA 1.000 (ng/ml) 100 10 pasiva 0 _ concentration normal 100 200 300 400 tiempo Idiasi detection clinics de metastasis hepaticas activa

Resumen: Inmunoterapia tumoral inespecifica BCG, Corynebacterium parvum, levamisol vacunas preventivas de celulas tumorales, extractor celulares, antigenos purificados o recombinantes, idiotipos celulas LAK, citocinas anticuerpos solos o asociados con farmacos, profarmacos, toxinas o radioisotopos, ,,nticuerpos biespecificos, I"olasT celulas LAK y anticuerpos biespecificos

,specifics inespecifica

especMica

combinada

Fig. 20.17. Relation entre la concentracirin serica de CEAy la evolution clinics en un paciente con carcinoma de colon. La concentration de CEA es elevada en la presentation y se reduce marcadamente tras la cirugia. Bastante antes de la detection clinics de metastasis, se vuelve a observar un aumento de la concentration de CEA.

Fig. 20 .18. Es probable que los agentes inespecificos amplifiquen los mecanismos inmunitarios especificos e inespecificos mediante la liberation de citocinas . Tambien se pueden dirigir las celulas hacia el tumor mediante la administration de citocinas o celulas fp . ej ., celulas asesinas activadas con linfocinas, LAK) solas o asociadas con Ab biespecificos Iv . pig. 282) .

Inmunoterapia

Resumen : Inmunoterapia especifica activa para potenciar las respuestas del hu6sped 1. infection virica 2. haptenizaci6n 3. transfecci6n de genes de B7 o de citocinas genes de citocinas Fig. 20.19. 1 y 2. La vacunaci6n frente a los turnores se viene estudiando desde hate machos anos, utilizando metodos empiricos con objeto de aumentar la inmunogenicidad de las celulas tumorales. 3. Mas recientemente se hall introducido en las celulas tumorales moleculas come 67 o citocinas mediante transfecci6n de ADN, que se sabe que act6an come importantes agentes coestimulantes en la induccien de las respuestas inmunitarias . Una vez activadas, las celulas T que hall establecido previamente contacto con el tumor pueden atacar directamente a las celulas tumorales originates, al no necesitar ya las correspondientes moleculas coestimulantes .

GM-CSF problemas debidos a la rcstriccicin gcnctica (pie aparcccn cuando se urilizan las propias celulas tumorales . Aunquc todos cstos mctodos pucdcn protcger a los animalcs fi -cntc a las sutniguicntcs cuposiiioncs al turner, Sit utilidad para el tratarnicnto de turnores consolidad(rs cs ntLIClto rncnor, y existen 1111, pocos datos acer(a dc inrnuniiaci(,nes especificas activas Ilecadas a cabo ion cxito en scrcs humanos. Estimulaci6n inespecifica de las respuestas inmunitarias . 1',11-a ell( r sC hall utllicado agcntcs HIM ~h\Crs()s i - /tit . _'0.2111 . I. .t maVona dc ltn iiacntos IIcVadr~s t iah() en scrcs I,uman()s l,()t Via sistentica no 11,111 ICnido 1111 CXito IlamatiVo, pert Si yuc SC hall ConSCguido regrcsiones dc melanomas mc(iiantc I,1 administra66n do B( .G ell la propia lesion, asi come bucnos resultados tras la innnrnizdCiOn inespecifica local con 13CG en pacientcs con to mores Vesicales . Inmunizaci6n frente a los virus oncogenicos . ( .()mo cada VCZ hay ntas prucl)as yuC dCIIILICStr'art Lt intl,liCaCi(nt t1C dlgun(rs

Virus ell dcterrninados tipos do cancer dc IOS SCrCS humanos, tint de Its sistcmas mas pr(nttctcdorcs para conscgtrir una inmtmizaci6n activa pucde ser prcVenir la intecciirn per partc dc estos agentes p(rtcncialmente oncogcnicos. No iabr dada dc clue la incidencia dc hcpatocarcinoma primario se reduCiria si se Consiell ('uicsc inmtmizar masa a la poblaci6n frcntc al virus dc la hepatitis B . Es posiblc yuC ell Cl tirturo SC IICguC a i1111tttrlizar ;t las poblacioncs yuC prcscntui mayor ricsgo dc infection per los Virus del papiloma, el I ITIA'-I o cl VF,B .

La inmunoterapia pasiva con Abm puede ser interesante, pero presenta ciertas limitaciones

Inmunoterapia inespecifica activa : modificadores de las respuestas biol6gicas (MRB) ejemplos BCG, C, pe~vam, murarnil dipeptido, dimicolato de trehalosa copolimero de pirano, EVM, poli I :C, pirimidinas IFN(,, IFNl1, IFN7, IL-2, TNF timosina, timulina, timopoyetina

tipo de MBR productos bacterianos moleculas sinteticas citocinas hormonas

efecto principal

arti~dclor : de los
rnacrofagos y las celulas NK

inducci6n de la producci6n de IFN activac . de macr6fagos y las celulas NK modulaci6n del funcionam. de las celulas T

l ()s printcros intcntos dc aplicacion dC Lt ill nurnotcntpia I, :tsiVa Cr,n IlltisuCrus l,oliCIcnra1CS 116 tus icrc,n apcnas csito, dcbido ;t las difiCUltades para obtener antisucr(rs dc alto titulo \ cspccifici dad . Estos problerrtas se pucdcn solucionar mcdiante la obtenciun dc anticuerpos nuax)Clonales. Aunquc todaVia It() SC ha dCSCUbicrto ninglin antigeno yuc sea totalntentc caclusiVo dc tin tumor y 'I . Icon la excepci6n dc Its idi(rtip(rs de las celulas B ell lo-, tin hmlas ;i, algunos antigcnos se espresan ell m1Vorcs Cantidatics en tictCrminadas celulas Ttrrnor'aICS, sicndo dcsl,rccial,lcs o tolcral,lcs los ctcct(rs nociVos clue pucdcn pro\ocar los Abrn sol,rC las celulas corporalcs normalcs quC cxprcscn cl rnisrno anti` ;cno, per to . hrs an quC ell principi(> Cs IaCtibIC tin tratamicnto dc cstc tip( ticucrpos numoclonales sc pucdcn administrar solos o asociad(rs a Eirmacos, protarmacos, tosinas, citocinas o isoropos Ifill . 20.211 . Sin cmbar,;o, cxistcn cicrtas fmitacioncs con rcspccto a Is utilizaci(in tCral,cutica dc anticuerpos, yuC sc C11trntcran a ContinuaCi(nt. La penetraci6n de los anticuerpos en las grandes tnasas tumorales no suele ser buena: en principio, esta dificultad po-

Fig. 20 .20 . Los modificadores de las respuestas biol6gicas (MRB) se utilizan para potenciar las respuestas inmunitarias frente a los turnores, y se pueden clasificar en cuatro categorias . A grandes rasgos, los productos bacterianos ejercen efectos adyuvantes sobre los macr6fagos (v . caps . 17 y 19); diversos polimeros, nucleotides y polinucle6tidos inducen la sintesis y liberation de IFN; las citocinas administradas directamente ejercen sus efectos sobre los macr6fagos y las celulas NK; y diversas hormonas, entre las quc se encuentran [as hormonas de origen timico, son capaces de estimular a las celulas T. (EVM = eter divinilico del anhidrido maleico ; TNF = factor de necrosis tumoral; poli I :C = ecido poliinosinico-policitidilico.)

" Los anticuerpos se uut'en a otras celulas: los anticuerpos sc pucdcn unir cspccifcamente a cualyuicr celula normal clue Cs prcse el misrn(r antigen( r yuc cl tunurr, (r incspeciticamentc a celulas (luc poscan reccptores tie Fc () moleculas capaics dc unirse a Its hidratos do Cal-1-10110 tic las illnnrn(rglobulinas . I .a modification de las moleculas tic anticucrpo mcdiante tealicas yuimiras o dc ingcnicria gcnctica l,odria soluCi(niar l,arcialntente estos problcrnas . Sc podria C(nISCguir una rnejor discrirninacion entrc las celulas tunurralcs V las n(rrmaics mcdiante la utilizaCi(in tie 1111 anticucrpo bifunCional dirig,ido frcntc a dos antigcnos clue s61o aparczcan C(mjuntanacntc en las Cclulas tumorales, pert yuC en la-, CCIuIAN 11(11-111,110 SC CnCUCntrCn sicntprc p(rr separad(r .

dria ser strl,Cntda utilizando moleculas mas pcyucrias yuc manttnicscn la cspeciticidad dC uni(rrt con CI antigcno, CUrtto fragmentos Fab' o anticuerpos con tin solo d(rmini(r obtcni dos mcdiante ingcnicria genetica . Otra posibilidad scna dirigir Its anticuerpos hacia cl cndotcho dc t(ts Vases sanguincos yuc irrigan cl tu111(n-.

Inmunologia tumoral
alta citotoxicidad frente a diyersas lianas tunl0rales, nlurchas tic las cualcs soil rc%1stcntcs a la, . cclulas \F rccicn cxtraidas y no sonletidas al tratamento mencionado . AI imectar estas celulas a%c%inas actiy .uias con lintocinas (cclulas L-1I;1, %c hall obtenido algunos resuhados alentadore% tanto en animalcs como en sores hunranos, CSPccialnlente cuando sc administra sunultaneanlcnte IL-2 . Sin embargo, los rcsultados de los cn%ayos clinicos controlados no hail silo tan bucno %, ~ Cl tratamicnto cs hastantc to)\ic() debido a la adnunistraci(in tic 11 .-2 . Parecc Probable yuc 110cas tic las cclulas imcctada% alcanccn el tumor, por to quo: cstr pucdc set cl motif -o tic Ices malos rcsultados . Para %olucionar el problcttla sc hall utilirado Abrn bituncionales . En cllos, uno de los Pull Los de tuli(in cs cspecifico tic algtana molccula tic la celula tunloral y cl otro tic tnarcadorrs supcrficiales do las cclulas ctcctoras, como ( :E)3 en cl cast) de ccIUIJS T( o CD16 cn el cast) tic Mulas \K. En tcoria, cstos anticuerpos debcrian dirigir a las cclulas LAK tlacia cl tumor . Aunqur csta estrategia Ila demostrado set eficaz to I'ttro, sit eficacia in vivo no esta tail clara . Las cclulas - f extraidas de la regi()n U111101-al tambien pueden tic ser cultiyadas in ritro cn prcscncia tic IL-2 e inycctadas nuevo . casos, mucstran relativa c%pc Ell dctcrrninatios las cclulas T una cificidad por cl tumor dcl quo hall silo obtenidas . Eli Io% mode los animals% %c ha dcmo%trado sin duda alguna gttc [as celula, T citotcixicas cshecificas del tumor pueden pr(lyo)car una rrgrcsion e%pcctacular dc[ Inismo . La toxicidad f-ctuc al tumor tie cstos ]into citos infiltralncs sc pucdc potcnciar mediante la transtcccidn tic genes quo codifqucn citocinas . Sin embargo, la cticacia real tic cstos ructoxios ell los sores humano% no ha %ido dcnlostrada . En cl cast)) de pacicntes humano)% clue Ilan cicsarrollado un linti)ma despite% de un trasplante do nlcdtlla ()%ca, sc Ilan cultiyado in ritro grandcs cantidatics do celulas T cspecifcas dcl VEB y se les Iran inpectado a continuaciom . Dc esta torlna %c ha conseguido yue los tumorrs renutan . En cste cast) pas lianas son los potcntcs antigenos yiricos del VEB, pcro auncluc Ion rcsultados son pronletedorcs ails no %c sabc si c%ta c%tratcgia tcndra alguna utilidad frente a los tuntorcs cpitcliales mar conuttles .

" Los anticuerpos son inmunogcnicos : pclr tantO, Pueden ser atacado(s P((r cl sistcnla innlulutario~ . Hasta Ion anticuerpos tluinlcr1 :(s o humanizado)s pueden inducir una rcsptlesta in nulnitaria trcntc a sit idiotipo . 1-;ue problcnla Podria Net solo cionadt) utilizando ditercntcs Abm cn cada ciclo del tr:ua Iniellto . Peso a estas dificultades, se hall ()1)tcnido algunon rcsultados alcntadores . Se Ila Ilct ado a callo Lift c%tudio alcatorio ell cl quo: so: Ilan utilizado Abut para cl tratalnicntol del cancer tic colon tra% la cxtirpaci()ii quirurgica del tumor prinlario . Fit c%tc cast) cl tratamicnto iba dirigido contra las nucroanctastasis, corn lo quo no cxistia cl Problona tic la penctracio)n tic Ices anticuerpos en [as grantics nrlsas tunl(Irales . La superviccncia file signifcativanlente mayor en cl grupo( tratado . Dc la nusnla forma, I()s anticuerpos anti-celula B rnarcados radiactiyatncnte son prontctcdorc% Para cl tratamicnto tic Ios linhmnas rcsi%trntes a Ion tratanucntos coilycttcionalcs . Los anticuerpos tartlbicn I)uctlon ser utilizad(n in ritro para eliminar ]as cclulas tumorales tic la medula ()sea tiestlnatia a set . aut(urasplantada 20 .221, o) Para eliminar las cclulas - 1- y pre yollir la rcaccioin injerto contra huc%ped en los tra%plantcs alogc niio% de medula !)sea . Rccietucruentc se hall tabricado biblioteca% ton los genes tic la rcgi()n variable tic los anticuerpos human(% a Partir de tag()% filalncntosos recombinantcs, title mucstran anticuerpos en sit %uPcrficie y en la actualidad so: Pueden elegir anticuerpos de alts afinidad para un antigen() dctcrminado en csta% bibliotecas tic to gels . Este nlctenio ha pernutido ya producir anticuerpos frente .t machos antigcnos tic supcrficic y Parecc clue Ota tccnologia per Initira la produccio)n tic una scgunda gcneracio)n tic anticuerpos tcrapeuticos ti-clnc a pas Inolcculas a%ociadas al tumor.

La eficacia de la inmunoterapia pasiva con linfocitos no esta clara ( uando se cultican in ritro y cn Prcsin :ia do II . 2 :clulas nurll()

nuclcarcs tic sangre pcrifcrica inun .ula, cstas cclulas .l(itluicrcll una

Modificacion terapeutica de los anticuerpos monoclonales 2

Purificacidn in vitro de medula osea infiltrada por celulas tumorales

profarmaco
Fig . 20 .22 .

tratam . con Ab frente L alas celulas tumoralesF

Ab quimericos obtenido% mediante ingenieria genetica adosando un fragmento Fc humano a un fragmento Fab'2 murino, para reducir el riesgo de una respuesta inmunitaria frente al Abm . Ademas, el fragmento Fc humano activa los mecanismos efectores humanos . Tambien se pueden adosar otras molecular a los Abm para dirigirlos contra pas cclulas tumorales. Entre ellas se encuentran toxinas (2), farmacos citotoxicos o enzimas capaces de activar profarmaco% (3) e isotopos radiactivos (4) .
Fig . 20 .21 . 1)

Las celulas tumorales contenidas en la medula osea pueden ser eliminadas mediante Abm y complemento, conjugados de anticuerpo y toxina o anticuerpos unidos a particular magneticas . La medula osea purificada se almacena mientras el paciente es sometido a un intenso tratamicnto quimioterapeutico y radioterapeutico . A continuacion, la medula osea se vuelve a inyectar en el paciente . Mediante este tratamiento se hall obtenido resultados alentadores en algunos pacicntes con leucemias y linfomas clue no responden frente a los tratamientos convencionales .

Inmunoterapia

CitttCin :u sc Irui Clonadrt, Cspres :uict X utilvado tiara cl tratamicntct dc tuinorcs . En la ii _ 1 0.2 3 sc nurcstran datcrs sohrc algunos do [as yuC ntas SC han ut1lizado hasta la fcclta . I .os rcsultados obtenidos hasty cl nionicnto hall sido discrctos, aunquc CI IF\u I,uCdc inciucir rCmisiones prolcn1gadas tic una Cnfermcdad poco ti- cCUCntC, la Icuccntia dc cclULIS I,cluclas, v la I1 .-2 Cs eficaz cn detcrininados niclanontas \. carcinomas rcnales . Tamhicn sc han obtenido rcsultados alcntadctrcs cn CI tratamicntct dC los tLIn101- CS ocaricos intrapcritoncalcs con IFNt s- I Nll~u . Sin
.MuCIMS

La inmunoterapia pasiva con citocinas puede provocar la regresion de los tumores

cnthargo, cs posible gLIC Irasta cl ntomcnto las citocinas sc ha\ an utilizado Lic forma inadecuada . C;cncralmcntc sc han adntinistrado scgiut las rnismas pautas yuC Icts flirmacos citotcizicos, cs ciccir, a Las ntaxinias dosis tolcraihlcs . RCcicntcntcntr sc han obtcnido datos acerca c1c los canccres tic cabeza c cuCIlo yuC sugicrcn yuc dosis mcnctrcs pucdcn scr igual o induso ntas cficaccs . Adenuis, al scr ad ministraclas dc csta mantra, [as citocinas prescntan etcctos sccundarios mas leses . AIL ,unas citocinas sc Cstan utilizando con cxito como tratainicnto dc apo~o . hor cjentplo, los taCtores estintulantcs Lic ]as colonias pucdcn acortar cl period( do aplasia despucs de un trasplante do mcdula 6sca o un tratamicnto citot6zico, N, la eritropc~\ctina cs Call para cl tratamicntct dc la ancinia .

Tratamiento de los tumores con citocinas citocina tipo de tumor y resultados

rnn is , :,r -. :- Lrv I : ;ny i 1 ~ ; i:h . ;i leucemia de celulas pilosas

posible ere- : :: tiatetic , ,i ~br!" v, turn("

efectos de la citocina y posibles mecanismos antitumorales

IFNrr

ligeros efectos an algunos carcinomas no eficar por via sistemica, remisiones del carcinoma ovarico intraperitoneal remisiones en el cancer renal y en el melanoma puede reducir la ascitis maligna

IFN-1

aumento de la expresion de molecular CPH de clase I, citostasis aumento de la expresion) de mole : :ulas CPH de clases I y II, ii- ti :ac on de los macrofagos y de las cc .t.las Tc, citostasis activation y proliferation de las celulas T, activation de las celulas INK ~aumento de la adherencia celular al tumor?, activation de los macrofagos y los linfocitos

Existen datos que indican que en muchos pacientes se produce una reaction inmunitaria del huesped frente a los antigenos asociados a los tumores . Sin embargo, la mayoria de los canceres crece y provoca la muerte del huesped cuando no son tratados . 4Como se puede explicar esta paradoja?

IL-2

0 La inmunologia tumoral se suele considerar una

TNFa

disciplina independiente del rest( de la inmunologia . ZExisten realmente caracteristicas especiales de las respuestas inmunitarias frente a los tumores que justifiquen este hecho?

A to largo de los ultimos 100 anos se ha intentado

aplicar tratamientos inmunoterapeuticos para el cancer. ~Por que se han obtenido hasta ahora tan pocos exitos y que posibilidades hay de que se obtengan mejores resultados en el futuro?

Fig . 20.23 . La mayoria de las citocinas se ha administrado sistemicarnente a altar dosis. En la mayoria de los casos no se conoce el mecanismo del efecto antitumoral . El IFN y el TNFu acttian como citostaticos in vitro frente a algunos celulas tumorales, pero todos los efectos que se observan in vivo pueden ser indirectos, ya que muchas citocinas inducen la produccidn de otras (cascada de las citocinas) . El que algunos pacientes tratados con IL-2 padezcan una tiroiditis autoinmunitaria transitoria demuestra que la administracidn de citocinas potencia realmente las respuestas inmunitarias.

La inmunizacion profilactica frente a las enfermedades infecciosas ha sido una herramienta muy eficaz . 4Sera esta la principal aportacion de la inmunologia a la oncologia?

LECTURAS ADICIONALES
Boon T, Cerottini J-C, Van den Eynde B, et al. Tumour antigens recognised by T lymphocytes . Annu Rev Irnaiurol 1994 ;12 : 337-66 . Franks LM, Teich N . Introduction to the Cellular and Ivlcrec,ar Biology of Cancer. Oxford Oxford University Press, 1991 de Kruif J, van der Vuurst de Vries A-R, Cilenti L, et al. T New on recombinant human antibodies Immunol Today 1996 ;17 453-55 Kedar E, Klein E . Cancer immunotherapy. are the results discouraging? Can they be improved? Adv Cancer Res 1992 ;59245-94 Pardoll DM . New strategies for enhancing the irrmunogeniclty of tumours . Curr Opin Immunol 1993 ;5 :719-25Rlethmuller G, Schneider-Gadicke E, Schlimok G, et al. German Cancer Aid 17-1 A Study Group . Randomised trial of monoclonal antibody for adjuva ,i! th i~t ::y c" resected Dukes' C colorectal carcinoma Lancet 1994 :343 11 77-83, Shell AGR . Development of malignancy following renal transplantation in Australia and New Zealand . Transplant Proc 199224 275-79. Soussi T The humoural response to the tumour-suppressor gene-product p53 in human cancer implications for diagnosis and therapy- Ir,mtinol Today 1996 ;17 :353-56 . Sulitzeanu D- Imm,lncs,ippressive factors in human cancer_ Adv Cancer Res1993,60 247-62 . Vlasveld LT, Rankir Elvl Recombinant interieukin-2 : basic and clinical aspects . Cari Treat Rev 1994,M275-311 Zier K, Gansbacher B, Salvadori S . Preventing abnormalities in signal transduction of T cells in cancer the promise of cytokine gene therapy . Immunol Today 1996,1739-45,

Inmunodeficiencia
Las respuestas defectuosas de Ab tienen como consecuencia una mayor susceptibilidad frente a las infecciones piogenicas, y son debidas a anomalias en el funcionamiento de las celulas B, como en la agammaglobulinemia ligada al cromosoma X, o a la incapacidad de las celulas T para transmitir las sehales adecuadas a las celulas B, como ocurre en el sindrome de hiperinmunoglobulinemia IgM, en la inmunodeficiencia variable comun IIVC) y en la h1pogammaglobulinemia transitoria de la infancia . Los defectos on la inmunidad mediada por celulas din como resultado una mayor susceptibilidad frente a las infecciones oportunistas, y son debidos a anomalias en el funcionamiento de las celulas T, como ocurre en la inmunodeficiencia combinada grave (SCID, del ingles severe combined immunodeficiency), en el deficit de moleculas CPH de clase II, en la ataxia-telangiectasia y en los sindromes de Wiskott-Aldrich y de DiGeorge . Los deficit hereditarios de componentes del complemento son caracteristicos de una serie de sindromes clinicos ; el mas frecuente de ellos es el deficit de inhibidor de C1, Clue tiene como consecuencia el angioedema hereditario .

rimaria

21

Los deficit hereditarios del complemento Clue afectan bien a los ultimos componentes de la cascada (C5, C6, C7 y C8) o bien a las proteinas de la via alternativa (factor H, factor I y properdina) provocan una extraordinaria susceptibilidad frente a dos especies de bacterias del genero Neisseria, N. gonorrhoeae y " Los defectos an la via de reduction del oxigeno an los fagocitos, debidos a la incapacidad de estas celulas para ensamblar la NADPH oxidasa y producir peroxido de hidrogeno y radicales de oxigeno anti bacteria nos, son la causa de la enfermedad granulomatosa cronica . La persistencia de productos bacterianos en los fagocitos conduce a la formation de abscesos o granulomas, segue el patogeno de Clue se trate . Los defectos de la adherencia leucocitaria Ilevan asociada una leucocitosis persistente, ya Clue las integrinas defectuosas de las celulas fagociticas impiden Clue dichas celulas puedan migrar desde el torrente sanguineo hasta los tejidos a traves del endotelio vascular.
N. meningitidis .

Las ill munodeticicncias SC dchcn a Li ausencia o al funcionamiento anormal do uno o mss elcmcntos del sistcma innlunitario . Las inntunodefciencias espccifcas se caractcrizan poor anotnalias dc l :ts celulas T o 11, los principalcs compooncntcs del sistcma inmunitario adaptatiVO . L :u innrtutoodcficicncia, incspecificas atcctan a ctcntcntos como cl complemento o los fagocitos, quc desenlpenan kin h :t1xCl incspecifiCo en las rcshucstas inntuni tarias . Las inntunodcliciencias primarias soil dchiclas a delcctos illtrinsccos dc ]as celulas quc integran el sistcma inmunitario, y en la nrtVoria dc los trios aparcccn como consecuencia do anontalias geneticas . I .as Ill nrtulodeficicncias bacon a los pacicntcs nads susccptibles frcntc a Ias intcccioncs . A grandcs rasgos, [as intcccioncs quc con trace los pacicntcs inmunodeprimidos SC Intcdcn diVidir en dos catcgorias . Los pacicntcs con cictcctos de las inmunoglobulinas, Las proteina, del cooaatplemento o Icos 1 .tgocitos son n1kiV suscehtibles a las intcccioncs rccurrcntcs causadas por bacterias cncap suladas, como Hrtenrophilus in rlucuzai, ftTiptuiociits puireiuoniai Stapln , loioccusannus. Estas intcccioncs sc dcnominan piogenicas, porquc las bacterias induccn la t6rmacioon dc pus . Por cl contrario, loos pacicntcs coil cictcctoos dc la innrttniciad cclular, CS dccir, dc I :ts celulas 'f, skiClen contracr graVcs intcccioncs (quo: pucclen rcsultar fatales) por microorranistnos antbicntalcs do distribucion nnlV amplia, ti'cntc a los quc loos indiViduoos nornaales dcsarrollan rapiciantcntc rcsistcncia . Poor olio, cstas intcccioncs Sc dcnominan oportunistas ; cntrc los microorganismos oportunis US SC encuentran las leVaduras V algunoS Virus nIUV eontuncs, como cl tic la Variccla .

ANOMALIAS DE LAS CELULAS B

Los pacicntcs con los dctcctos rims habitualcs dc [as celulas B cast . 21 .1) prcscntan intcccioncs piogenicas rccurrcntcs, como ncumentias, colitis media s . sinusitis . Cu :utc1o estoos pacicntcs no son tratadoos, dcsarrollan una cntcrmcdad pulmonar obstructita grave Lbronquicctasia) debido a las ncumonias rccurrcntcs, quc Sc caractcriza poor la rcduccio>n tic I :t clasticidad de las Vias across .

En la agammaglobulinemia ligada al cromosoma X (ALX) existe kin defecto en las primeras fases de maduracion de las celulas B EI h .tr .t .{mutt dc loo . dclc :ton dc 1 .1s cclttlas 1 ; CS la aganuna;"lobu lincmia ligada al :roonuosnn .t \ . h.sta titc la printcra imnunoodch ciencia quo: se Ilcgo a comprcnder coil cicrto detallc ; el dctecto stttt\ .lCcntc SC cotlocc desde 1952 . Los Varones afectados carccen total o casi totalntcntc dc celuLts B ell la sangre y ell los tejidos lintitidcs ; ell contsecucncia, skis g,ang,lioS hntaticos soil nrtn' pcquciioos y cstan desprovistos dc amigdalas . En el suero no SC SUCICn detcctar IgA, IgM, Ig( ; ni I~gE, V silo posccn pcqucnas cantici :ufcs dc IgG I nacnos dc 1011 mg c1l ) . A lot largo do los 6-12 printeros roosts do \-ida so: cncucturan protegidos frcntc :a las intcccioncs poor Lis IgG matcrnas transtcridas a traces ciic la placenta durantc 1 .1 Vid :t foil . :AI irsc at otando csta rcscr\a dc 1 tadoos etnpiczan a contracr intcccioncs piogenicas recurrences . Ski estacioo do s .tlud SC puCCIC mantcncr cstable mcdiantc: la administracicin por via intraVCnosa de grandcs dosis dc gammaglobuhnas . El gcn ALA sc encucntra situado en cl brazo largo del cro mosoma X i,fq. 1 1.2). En csta zona sc cucuentran tambien lox genes Clue proVOcan nutchas oxras inmunodeficiencias lacrcclitarias, por to quc ski cstudio sirVe para cstablcccr kin diagnostico prom tail . Rccictucmcntc so: ha icicntificado el ~-cn cictcctuoso do la AI .\, clue codifica una tirosin cinasa citoplasmdtica do las celulas B i; btk'I pertenccicntc a la tamilia dc oncogencs tn. Toxfaw no se contprcrtcIc Hen quc Impel desempeira esta cnzinaa en la maduracicin do Las celulas B, pcroo cs oobVio Clue dicho papcl cs cscncial en cstr proccso . La medula ()sca dc Ios pacicntcs con ALX ccnticnc una cantidad normal dc celulas pro-B, pcro cstas celulas no Inteden madurar V dar lugar a celulas 11 dCNdoo a Ids n1tttac1UnCS en cl gcn htk 1_ha. 21 .3).
Z1.

En el deficit de subclases IgA e IgG se producers anomalias en la diferenciacion final de las celulas B El clclicit dc IgA CS la innumoxicficicn :i :t iris lrc :ucittc 1'11n ~ dc cada ,''011 indiViducts clc rata blanc:t Prcscnta cstc dclcctoo, quc sin embargo solo atcctd ell mu\ rams ocasioones a los indiViduos pertcnccicntcs a otros grupos etnicos . Los pacicntcs con deficit clc

Inmunodeficiencia primaria

Inmunodeficiencias primarias de celulas B agammaglobulinemia ligada al cromosoma X deficit de IgA deficit de una subclase de IgG inmunodeficiencia con exceso de IgM inmunodeficiencia variable comun hipogammaglobulinemia transitoria de la infancia
Fig. 21 .1 . Los defectos de las celulas B van desde un inicio tardio

Inmunodeficiencias ligadas al cromosoma X

enfermedad granulomatosa cronica (EGC) ligada al cromosoma X sindrome de Wiskott-Aldrich (SWA) inmunodeficiencia combinada grave (SCID) ligada al cromosoma X agammaglobulinemia ligada al cromosoma X (ALX)

de la produccion normal de inmunoglobulinas, pasando par los deficit de un unico isotipo, hasta la agammaglobulinemia ligada al cromosoma X, en la que los varones afectados carecen de celulas B e inmunoglobulinas sericas .

inmunodeficiencia con exceso de IgM ligada iim al cromosoma X

Fig. 21 .2 . Los genes causantes de mochas inmttnodeficiencias se

IgA ticnticn a cicsarrollar enterntedades poor inntttnocontplejos f hipcrscnsihilidad do: tipo III ) . Aproximadantcnte cl 20"i, tic lots indi\iduos ion deficit do IgA carecen tanthicn tic IgG2 e 1` ;G4, poor to title son nun- susceptil,les frcntc a las intcccioncs piogcnicas . hi los scrcs Itttntantts, la matoria do: los anticucrpos ti-cnte a los polisac ;iridos capsul,urs do Las bactcrias pio,genicas son do la subclass IgG2 ; cl deficit aislado de IgG2 tatnltien da lugtr a intcccioncs piotgcnicas rccurrcntcs . I .os indisiduots coil deficit do: IgG3 csclusi\antcnto tantbien son susccptiblcs a cstas intcccioncs, por rd/ones que atin net se cotnprcnticn ntut ken . Fstos deficit do: detcrntinadas clases y suhclases de innutttotglohufnas Soil CICIMCIOS a defectos en la difercnciacioin final de las celulas B (t . fiq. ?1 .31 . En la inmunodeficiencia con exceso de 19M (HIGM) no se produce la conmutacion entre isotipos de inmunoglobulinas l \Mr utt tilxt Itc~uliar fir 11111111110110'10k 11':1J que se caracteriza hr,r cl dclicit tic I,,h c IgA ell prcscncia tic g,randcs cantidades (ntas do 2(111 tngdl} do: IgM policlonal . Los inditiduos afectados son susccptiblcs a ] .is intcccioncs piogcnicas t . dcl,en scr tratacios con ganunag lohulints : idntinistr.idaN poll sty intras-enosa . Iicndrn ;t producir autoautticucrptts de claw Ig~l trcntc a sus propiots ncutr(zfihts, plaquctas v taros elententtts Sanguinrots, asi cones ti- cntc a antigcncts tisularcs, con to quo: la innttnocicficicncia sc contplica coil la aparicittn do: entcrmcdatics autoinntunitarias . LOS tcjidos, csl , cci ;ilmcntc Ios dal tractct gastrointestinal, qurcian infiltratlos con celulas productoras tic 1g,M h/iq . 21 .-1) . En la HIGM Ids celulas R nit pucdcn connTtttar cntre la sintcsis tie las innnutoglohatlinas tic claw IgM \' Lis tic claw IgG, IgA o IgF, antic ocurre normalntcntc ell of curso de la ntaduraci(n do: las celulas 11, Fn las celulas B nonntalcs Cstt Ctttttttnttteiott cs inducida por dos Eictorcs : ht uni(tn tie 11 .-4 al receptor de 11, 4 de las celulas B t. la union tic la molecula CI)40 tic la supcrficie do: las celulas B al ligando tic ('1)40 presents en la supcrficie do: [as celulas T actitadas . En cl 70 % tie h,s casos la HIGM sc hcrcda con caractcr rccesit'o ligada al cromosoma X, siettdo dehida ell este caso a nnttaciones en el ligando do ( :I)40, cuyo gel se cncucntra situado precisantente en cl Ittazo largo do dicho cromosoma X . En la inmunodeficiencia variable comun (IVC) existen defectos en la transmision de scnales desde las celulas T a las celulas B Lots itulitidutis Loin IVC cics,u-rollan ttna ag:unnrtglotttulinrmi ;t dt1quirida dur :uttc I ;t scgunda o tcrcera decadas tic su t ida, of incluso afro m :is tarde . La enfcrntedad atccta por igual .t anthos SCXOS t su causa no sc conocc, pero pucde cstar rclacionada coil [a inteccliOll por cl s-irus de Fpstcin-Barr NEB) . ;1l igual que lots pacioitcs coil

encuentran situados en el cromosoma X . En todas estas enfermedades se hall identificado los correspond ientes defectos geneticos . (Adaptado de J . Schwaber y F . S . Rosen, X chromosome linked immunodeficiency . Immunodeficiency Rev
1990;2 ;235 .)

AI X, Ios pacicntcs con IV(' son nnnv susceptibles a las intcccioncs por organismos pio,;cnicos, A canto a ]as producidas por cl pro tozoo intestinal Giardia landilia (;Ji,R . ?1 ..51, que prot-oca una intensa diarrca . La mayoria do los pacicntcs con IVG, I(SO'%) posccn celulas B inntatturas que no ejercon sus tunciones corrcctantcntc . Sin embargo, estas celulas li no son defectuosas, sino que no re ciben las scnales idecuadas proccdcntes Lie [ .is cclullsT . No so: 11.1 conscguido aclarar todat is cua1es Soil los defectos que prescntan las celulas'1' do his inditiduos coil IVC . Los pacicntcs coil IV(, dclxn scr tratados con inmunoglobulinas intratenosas para protcgerlos trentc a las intcccioncs piogcnicas recurrcntcs . La ntatoria do: los pacicntcs drsarrollan enfcrntcdades autOinntunitarias, especial mcntc anemia perniciosa, :tunquc cl ntotit'o se dCsCortoCC . I .aIVC no CS tie naturalcza hcrcditaria, pcro SC suck cncontrar asociada a los haplotipos ('l'1 I I II .A 118 N HLA-DR3 . En la hipogammaglobulinemia transitoria de la infancia se retrasa el momento an que comienza la sintesis de 19G ( :onus sc Irt inditadot cn la garrrw '1-+, Icts Iactantcs rstan protegithts iniiialtncntc por Las IgG do ongen m ;ttcrno . Estas IgG se dcgrad :ut progresi%-antentc, sicndo su vida media do: tntos 30 Bias . bits lact :uttcs nornrales conticnzan a sintctizar sus propias IgG a Icts ores nteses dc edad, aunque hasta cl scgundo ano do: tidy no se produces cantidades suficientes do: anticuctpos especificos do: lot, polisacaridos capsularcs bactcrianos . En :algunos niitos la sintcsis normal tic IgG ; sc pucde retrasar hasty los 36 ntescs, y hasty entonces csos niitos soil altantentr suscoptibles frente a has intcccio . nes piogcnicas . Las celulas B do: cstos niitos son nttrntalcs, pero parece que ]as celulas T CD4` not Ics prestan la atuda necesaria para producir anticucrpos . ANOMALIAS DE LAS CELULAS T En la /utura 21 .0 se ntttestran [as principales anornalias do: las celulas T. Los pacicntcs que carecen do: has mismas, o aquellos cot los que su tunciotnanticnto cs anorntal, son susccptiblcs a las infeccioncs opttrtunistas . Canto ell los scrcs huntanos el burn tun-

Anomalias de las celulas T

Maduracion de las celulas B en las inmunodeficiencias ligadas al cromosoma X

enfermedad agammaglobulinemia Iigada al cromosoma X (ALX) celula pre-B p deficit de IgA inmunodeficiencia con exceso de IgM inmunodeficiencia variable comun

il

*-

11

Fig. 21 .3 . En la ALX los ninos varones afectados carecen de celulas B e inmunoglobulinas sericas, con la excepcion de pequenas cantidades de IgG de origen materno. En el deficit de IgA las celulas B productoras de IgA y, en algunos casos, las productoras de IgG2 e IgG4 no se consiguen diferenciar totalmente y dar lugar a

celulas plasmaticas. Los individuos con inmunodeficiencia con exceso de IgM carecen de IgG e IgA. En la IVC las celulas B de la mayoria de los isotipos no son capaces de diferenciarse y dar lugar a celulas plasmaticas.

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Fig. 21 .4. Vesicula biliar de un paciente con inmunodeficiencia con exceso de IgM . La submucosa esta repleta de celulas Cuyo citoplasma tine de color rosado y que presentan un nucleo excentrico . Estas celulas estan sintetizando y secretando IgM activamente.

Fig. 21 .5 . Giardia lamblia. En esta figura se observan innumerables parasitos del genero Giardia creciendo sobre la mucosa del yeyuno de un paciente con IVC.

Inmunodeficiencia primaria

CioOn:unionto Lie Isis Cclulas R depends ell gru11 n11CdiC1a Lie has cc hulas l, has anorrnali .1s do cstas tiltinus originan tamhicn 11a inmunodeficiencia sic L1I)o 111u111101-al ; dicho do otra tornla, has anoOtnahas do has CcIUlas T clan lugar a una illnlunodcficicnCia ell conihinada la Clue rcsUltan atectadas tanto la inmunitlad hun11oral COMLO la cclular,

I .) anomralia l1Cr- CditM- I,1 do la inn1unid .ld cClul.11 - mas gratr Cs la tIuC I" .1dCCCn lo>s niitos coil SCID, clue contraen infrccioncs rccurrcntes dCSdC Cl nlomsnto Lie Su nacin11ientoO al contrario Lie to qus OCUrrC ell los nif1oS cum AI \'i . Estos ninos suelen desarrollar diarrcas prolungadas prolocacias por rotalirus o por intccciones hacteriaoas Lie] tracto gastrointestinal, asi coma ncumomias, qus nluchas 1-cCcs c%lan C.1usadas Iu)r cl protozoo Prrcumurrstis Carl .irJtr . La 11hICLta lCCadLIra Candida aficanscrccc corn tacilidad ell su hoca u ell su I)iCl (,tr . 21 .-1. ('uando sc Ice caCLUM scm organisn11on vims, co)nio cl virus Lie la polio o) cl hacilo Lie C,1Jn11cttc-Gucrin (; B(YG ; utilizado para la ill nnnlizaCic'm frcntc a la tut)ct-CUlcnisl, ticsarrollan infecciOncs progrcsilas por cstos organisnuOs hahitualtnente inocuos, clue Ies coOnd11CCn ,1 la MIMIC . I .a S(ID Cs incorrnp .1tit)IC Con la )ida, 1 lox ninas lteCtddOS SUCICn nlorir ell Cl

En la inmunodeficiencia combinada grave (SCID, del ingles severe combined immunodeficiency) existe deficit de linfocitos y falta de desarrollo del timo

Inmunodeficiencias primarias de celulas T inmunodeficiencia combinada grave deficit de adenosina desaminasa deficit de nucledsido de purina fosforilasa deficit de moleculas CPH de chase II sindrome de DiGeorge

sindrorne Lie's%' - sk,ttAldrich Fig. 21 .6 . Existen mochas causas diferentes Clue pueden provocar anomalias de has celulas T, desde la ausencia de linfocitos hasta los deficit enzimaticos, pasando por el deficit de moleculas CPH. En todos los casos el funcionamiento de has celulas es anormal, to Clue conduce a una inmunodeficiencia combinada de has celulas T y B.

CLIL-SLR Lie los doe prinicros anoOs de t ida, .1 no scr qus CI L1cfCCto sea corr"idcO nlediante 1111 trasl)I:urtc Lie MCCIula 0%e,1. (:uandoO sc procede a tin trasplante de este tipo, los niios sc conlierten ell quin11cras lintucitarias N- pucdcn so Ot)rc) i1 it * 110 ,11- Una 1 ida nornwl . Los niios scm SCI l) posccn mtrl poCos linfocitos sanguincos i mcno', de 3 .000/11111) . Su tcjido linti)idc tamhicn caress dc cllos o eontiCnC 11)u1 paws . EI time prcscnta aspccto fetal i_I?iT . ?1AI \' solo conticnC has cclulas endodernlicas Lie] cstrorna procedentes Lie la tcrccra c cuarta holsa taringca . IAS cclulas madre lintuidcs, qus ell Icn ,,crcs lurnlanos suclcn coloniz.1r cl tinlo a has scis scmanas do . gcstaciLm i1 . cap. 12 I, no) Ilegan :a aparecer, por to clue cl time no sc coil\icrtc ell un org,1no linfuidc . ell La S(ID cs nias frecucntc los varoncs clue ell his nifias i 3:11, )a qus teas del ;0`"G sic Ios Casos sc)n dcl)idos a un dcfcctu Lie un gcn pertcnccicnte al crcu1111osontta \. El gcn detectuoso Co) dificl la cadcna t Lie[ receptor tic II . 2 . Esta cadcna 7 tamhicn for Ina parts do los rCCCptorcs Lie 11A, 7, 11 1' 15 . El factor 1nas dcCisi\o ell la nladuracion Lie los linfocitos l es la union de I1,-7 coil su receptor. E.n Ct7nSCCUCnCia, has Milks madre linfoides no Soil caj)aCCS sic rccihir una scric dc sefidICS ncccsarias tiara qus crczcan t tnadurcn . El IYSTO do Icn c.11so>s de SCI) soil dclnidos t genes reccst\ os Situados ell otros cromosonlas . La tnitad de cstos casos son dchidos a un deficit gcnetico Lie adenosina desanlinasa fADA) o tic nuclc6sido) do Purina tiOsturilasa { P\ I', Lie] inglcs perm nuchrrtide phruphorylasc1 . 1:.1 delicit Lie estas cnzirnas dcgradantcs do has purinas I,rolOCJ la acurnul ICioOn Lic nictaholitos qus rcsultan t6xiCO)s l),1r,1 Ids MULLS madre lintuidcs, principalmcntc dAll) 1 dGl"P fjin . 21 .91 . Estos n)ctaholito)s inhihcn 1 :1 cnzinla rihonuclco~tido) rcductasa, ncccsari :t para la sintcsis do Al)\ 1, por tanto, pan la rcl)licacioOn cclular. Como todas has CcluL11s de los rnarnitcros conticnen A1)A ,v PIP not parsec logico clue cstos detecton alcctcn solan11entc a Icn linfocitos . Parcce clue la razon dc Cstc tcnomcno cs cl deficit rclati)-o tic 5'-nuClcotiLiasa propio do has MULLS lintuidcs ; ell otras cclulas, csta ctuinia contrarrcsta cl deficit do: .11) .-1 L1 PNP 1 cvita la actrmulaci6n do: LlAMP 1- d( ;,\91). hl tratanlicnto tic CICCCioSn tiara la SCID cs CI traSI)I:tntc tic mcdula ()sea a partir tic un donantc toOt,1ln11cnte histoconlpatihlc, gencraln11cntc un 1lertnano satio. Aprminiadamcntc cl 70";, de los pacicntcs carcccn de tin 111crnianoO 11istoconnpatihlc, ell Cu\o caso SC suck trasplantar mcdula ()sea dC UnO do 10S I) :uIrcs, clue al 111CnoOs prcscnta un haplotipo identico, hahiendosr ohtcnicio cxito nlediantc estc sistcnia ell algunas ocasiomes . Recicntenlcntc sc 11,111 ohtcnido h11Cn0S rCSUltaCIos transtcctando lintucitcn del pacicntc con deficit de AI)A cum un Lrctor rctrooirico ell cl clue se hatua inscrtacio prelian11cnte CI gcn de la enzinla . Este ha sido el primer , trat .nnicnto gcnico- clue SC 111 .1 CcutSCguido Ilc\ar a caho con exito.

Fig . 21 .7 . Candida afbicans en la boca de un paciente con SCID . Este organismo crece sin problemas ell la boca y en la piel de los pacientes con SCID .

Fig. 21 .8. Ell timo en la SCID . Observese Clue el estroma timico no ha sido colonizado por celulas linfoides y Clue no se observan corpbsculos de Hassall. La glandula presenta el aspecto caracteristico de un timo de origen fetal .

Anomalias de las celulas T

Posible papel del deficit de ADA y PNP en la SCID desoxiinosinal l deficit de ADA desoxiadenosin .T guanina~ deficit de PNP desoxiguanosinaII

C1rcnuc dc I)i(icorge prcsrntan rasgos tacialcs caractcristicos L_hlf. 21 .10), cornsistcntcs ell una separacion csccsi\ .t dc los Of(),, ihipertclorisnto), una posicicin anorrmalinente baja dc los pabcIlones auricularcs v till aco)rtainiento) del surco subnasal del labia superior . T:unbicn prescntan maltiwmacioncs congenitas del corazcin o del ca\ado( .)o(riit0, asi como una tctania neonatal dcbi do) ;t la h1POplasia 0 .)pl ;)sia Lie Ids (LinL1ulaN paratiroideas . En la ataxia-telangiectasia hereditaria (AT) existen desperfectos cromosomicos que afectan a los genes de los TCR y de las inmunoglobulinas I . .) AI c, una cnfermeciad licrcclitaria clue sc tr.)nsmiti Lo)n Lar,ictcr autosontico rcccsim . Los nines Mcktado)s Lrmicnzan a caminar Lie forma titubeantc catasial aprosimadamcntC a los 18 nicscs do clad . Cuandor cumplcn imos scis anus con)icnzan a aparcccr en sus ojos \- en su picl capilarcs diIatadOS i tclangiecta sial . La A I' L- a asoeiada a tin grado Lariable Lie deficit de celulas T. Aproximaclamcntc cl 10"i, de ION pacicntcs Lm Al tamhicn prescntan deficit Lie IgA, y algunos dc ell() ,, tamhicn Lie Ig(i2 c lg( ;4 . to niuTrero \ la capacidad iltncional Lie [as celulas 7 circulames estan ntarcadan)ente rCLiucidos, con la consi,;uicntc e1eprcsio'~n de Lt respucsta mmunol6gica mcdiacla por celulas. Estos pacicntcs coiltracn grarcs inteccioncs dc los senos paranasales v los pulmoncs . En sus celulas se oobscrs'an dcspcrfectos cromoso')micos, general memo en los cromosomas 7 v 14, en los lugarcs en Clue sc en CtiCIM- an situado % los gcncs quo codlfiCan los TCR s, Ias cadenaN pesadas Lie [as inmtmoglobulinas . Los pacicntcs cam AT, asi como sus celulas in vitro, son ntut sensible,, a Ias radiacioncs ionizantcs . El gcn cicfcctivo en I :t A'1' cc)difica una prereina im1,liCAL1a en la reparacioin tic Ias rottiras tic la dorlilc tadcna Lie AI)\ . En el sindrome de Wiskott-Aldrich (SWA) existen anomalias de las celulas T y se detectan concentraciones anormales de inmunoglobulinas fa N\\' :\ es una ininunodeficicncia ligad .t .)I cr(mlOsonra \ . I as pLaquctas do Ion varoncs afcctados corn pecjuctl,ts, prcsrntan ti)rmas anormalcs \ su c(aiccntracio)ll es nras baja de to normal (trombocitopcnia) . Los ninor% corn S\\'A dcsarrollan tin ,_'race ecccnta, asi como inteccioncs piogcnicas s . oportunistas . Ias coil centraciones sericas Lie I .qA c IgE sc cncucntran auntentadas, Ias dc IgG son normalcs L . Ias dc Ig .NI bajas . El flincionamicnto Lie Lis celulas T no cs corrccto, v cstas anomalias dc la innnmidad cclular se san agrtrando corn cl Paso del ticmpo . Lts celulas I , prescntan till aspecto anorrmal y caracteristico cuando se obscrsan mcdiantc nticroscopia clectr(Snica, Llcbido a tin dclecu) tic] cito) csqucletO . I'll MI supcrficic cclular se ohsersan mono,, microLe-

dGMPT

dGDPT

dGTP ^ inhibicion de la ribonucleotido reductasa

inhibicion de la sintesis de ADN y de la replicacion celular Fig. 21 .9. Se cree que los deficit de ADA y PNP inducen la acumulacion de dATP y dGTP, respectivamente . Estos dos metabolitos son potentes inhibidores de la ribonucleotido reductasa, una enzima esencial para la sintesis del ADN .

El deficit de moleculas CPH de claw 11 va asociado a tin deficit de celulas TH I .;t incapacidad para cspresar nu)Icculas ( .PH Lie clasc II en Ias celulas hrc,cmadoras do antigcno f macrofagos V celulas 11 i CS U11.1 entcrn)CLlad licrcditaria title sc transmite con caracter autosomico recesico, v no L - a ligada al locus CPH situado en el brazo corto del cromosoma 6. l .os nitios atcctados padcccn intccciones rccurrcntes, especialmcntc del tracto gastrointestinal . ( :onto cl dcsarrollo de Ids celulas Tit CD4' icelulas T colaboradorasl dependc dc la sclecci(in positjca dc Ias molcculas ( .PH tic class 11 ell cl tinto IL . cap . 121, los nitios con deficit tic cstas nurleculas prescntan tanibien tin deficit sinnrluineo dc celulas TH ( :1)4' . A Sit scz, la .tusencia Lie cstas celtrLs prox-oca till deficit dc anticucrpos . I?1 deficit tic morlcculas ('I'H sic claw 11 sc produce como comsccucncia do dctcct()N en Lis protcinas promotoras clue SC uncn a la region 5' no codificaciora dc los genes ('PI I dc claw 11 . El sindrome de DiGeorge se debe a tin defecto en la embriogenesis del timo ( :unto se It ;t scfialado I,rc\iamcntc, cl cpitclior timicO w dcsarro Ila a partir de la sczta semana Lie , CStaci()n prorcedc emhriol(igicamente do la terccra \, cuarta balsa faringca . Posteriorntcntc este armazcin cndodcrntico es corlomizado por celulas madrc ]in foidcs, quo se tcrininan comL irtiendo ell celulas T. Las gl :indulas paratiroidcas prorccdcn tic Ias mismas cstructuras embrionarias . EI sindrome dc I)iGcorge CS Llebido) ;t tin detecto congcnit() Lie los organos quo sc originan ;t partir de la tCrCCra \. L uarta balsa la ringca . La ntagnittrd Lie] deficit Lie celulas T cs Lariahle, depcndiendo del grado Lie atectacion Lie] tinto . Los pacicntcs con sin-

Fig . 21 .10. Sindrome de DiGeorge . Gran separacion entre los ojos, posicion caida de los pabellones auriculares y surco subnasal acortado del labia superior . Tambien puede haber anomalias cardiovasculares congenitas .

Inmunodeficiencia primaria

IIosidadcs que ell las cclulas T normalcs . 1)urantc la colaboracion do las celulas R x t para tormar anticucrpos, Cl citoesyueleto dc I :ts cdulas T sc rcoricnta 1 . polariza ltacia Ian cclulas B, pcro csta ntlldificacion no sc produce ell cl sindronte dc Wiskott-Aldrich 1. sc traduce en una falta de colaboraci61l cntre Ins cclulas innlunitarlas .

DEFECTOS DE LAS PROTEINAS DEL COMPLEMENTO

En cl capitulo 4 sc 11.111 CStUdlado las proteinas del complemento t . sus interacciones con Cl ,1'4011 .1 inntunitario . En 1os sores 11umanos sc conoccn deficit dc practicanlcntc todas las protcinas del conlplcnlcnto 1;/ia . 31 .11 y, habiendo sido 11111 u61CS CSCas anontalias para comprendcr cl tuncionamiento dc didlo ,istenla .

don cspccics pat(igcnas del gcncro \'cisscria : 's' . rtott0rrhncai \. \' . mcuinr1itidis. Esto dcntucstra clarantcntc la importancia dc la via altcrnatisa x dc ION contplcjos ntacromolccularcs do ataque a la ntcntbrana cn la bactericiljsis do ION organisntos pcrtcnccicntcs a cstc gencro . Todos estos deficit ~~cncticos de componentcs del conlplementcl sc heredan con c :uactcr autosomico recesit- o, excepto Cl deficit dc propcrdina, yuc SC transmitc dc tilrnta rcccsita 1, lit, do al crontosoma X, \ cl dclicit del inhibidor dc ( :I, Clue sc transmitc con caractcr arnOmnnicc, dGmtinantc .

Los indixidtION r()n dL-fjcit do Iris ccqml , ()11cn1cs dc I,1. \1a dasic .l del complcntcnto~ i;( :lq, ( :1 r, ( :Is, (14 \ . ('2 i prcscman una tell dencia a dcsarrollar enfcrntcdades mcdiadas por inntunocomplcjos, comp cl lupus critcntntoso sistcinico . Estc hccho confirnta la intportancia dc la via clasica cn la climinacil`m dc innttrnocontplcjos . Los deficit do (:3, cl factor H o cl factor 1 promcall una alta susceptihilidad frcnte a las intccciones piogenicas, lo que Cs I6gl co Si se time en cucnta Cl papcl crucial yue dcsentpefta ( :3 en 1 ;1 opsonizacion tic Ins bacteria' piogcnicas . Los deficit de los cony ponctacs finales dc la via 1; C5, ( :6, ('- CS) t. ION dc los contponcnics dc la t is altcrnatit a i cl factor 1) 1_ la pr( pcrdina i prm ocan una notable susceptibilidad fircntc a ]as infcccioncs causadas por

Defectos que afectan a la eliminacion de inmunocomplejos, la inflamacion, la fagocitosis y la bacteriolisis

Deficit geneticos del complemento humano

grupo tipo Clq deficit modo de transmision

AR
,

AD

LX

deficit de inmunocomplejos angioedema infecciones piogenicas recurrentes

C1s, o C1r+C1s C2 C4 inhibidor de C1 factor H

Dcsdc un I'uIHO tic cistt clinicr~, Cl (icticit MAN in1l u - t .ultC do los contp,nlcntcs del c(nnplcmcnto cs cl del inhibidor de (I . I .a funci(in do esta molccula c' disociar cl componcntc ( :1 actitado, ntcdiantc su union I ( :1 r,( IN_ 1 :.l deficit prosoca una Ontermcdad bicn conocida, cl cdcma~angioncurcitico hereditario i EAH } 1611 . 31 .13 ;1, que se transmits cent caracrer autosomico dominants . Los pacicntcs cOn EAH prcscntan cpisodios rccurrcntcs dc hinchazon circunscrita a dctcrminadas rcgioncs corporalcs iangiocdcnta'~ . (uando cl edema afccta al intcstino se producer dolorcs alldominalcs insoportablcs s(imiros profmos . POr Cl c(nttrario, cuando atccta al tracto rcspiratono superior ION pacicntcs sc pucdcn 11cgar a asfixiar dcbido a la obstruccion do ]as xias acreas . I'or cllo, cl angiocdcnla do las sias rcspiratoria' supcriorcs constitln c una urgencia mcdica que exigc la aplicaci(in innlcdiata dc ntcdida, cncantinadas a garantizar una rcspiraci(in normal . FA inhibidor do ('I nu inltihc unicalncnte 1 .1 tia clasica del contplcmcnto, Sinn tnntbicn clcnlentos rclaci(ntados dc los sistcmas (1c las cininas, la plnsntina t . la COat;u1 .1ci6n . El edema cs pro \ocado por don Itcptidos yuc sc gcncran por la activacion descontrolada dc ]ON si,tOnras del contplcntcnto c tic c(tntacto : un pcptido Clue a produce en la actinaeion do ( :?, denominado cinina ( :2, y la bradicinina, que se genera cu :uldo se actka la \ja dc contacto iji4 . 31 .13} . Estos pcptidos cjcrccn sus efeCtos solve las Vcnulas poscapilarcs, pro\ocando la contraccion do las ccIuLts en dotcliales que, ell ccnl,ccucneia, dcj ;ul ranuras abicrtas Clue permitcn la cxtrasasaci6n del plasma i,`1.. cap . Existcn dots tornlas gcncticas dc E .-1H . En la forma dc tipo 1 cl gOn del inhibidor dc (' I cs detcctul~srr \ no se Ilega a transcribir. En la tirl- nta do tipo l l c1 gcn CorttiCl1C nrt1tacilmcs plmttules, 111 que du lugar a 1 ;1 sintcsis dc molcculas dcfcctuosas . Esta distinci(in c' importantc, ra yuc la cntcrntcdad do til, o II no pucde

El edema angioneurotico hereditario (EAH) se debe al deficit del inhibidor de C1

II III

asintomatico

C9
Fig. 21 .12 . Edema angioneurdtico hereditario. En esta

Fig. 21 .11 . Deficit geneticos del complemento humano .

(AR = fenotipicamente autosomico recesivo; AD = autosomico dominante ; LX = recesivo ligado a X .)

fotografia se muestra la hinchazon localizada y transitoria Clue se produce en esta enfermedad .

Defectos de los fagocitos

scr diagnosticada solantente mcdiante la determination cuantitatita tic la conccntraci6n del inhibidor tic (:1 . Poi- cl contrario, se debt determinar simultancamentc la concentration tic (A . tic los paEsta ultinta sictnpre sc cncucntra rcducida en CI suero cientes con EAH, to clue Cl C1 activado, clue no esta sujeto a inhibicicin, to dcstruse continuarnente . El deficit del inhibidor tic ( I sc pucdc adquirir en tries as anzadas de la silo . En algunos tic CstOS casos SC ha dctectado la prescncia tic dutoanticuerpos trente al ntismct . En otros, eaiste una proliferaci6n monoclonal Lie celulas 11, corno octtrrc cn la ICUCCtlna linftcitica cronica, cl ntielonta multiple o el lintirnta tic celulas B . Esters pacientcs sintetizan antfctiotipos f ente a las inmunoglobulinas producidas cn ezceso, las interacciones idiotipo-anriidiotipo prococan, por razones quc no SC conocen, consumo tic C1, C=1, C2 v del inhibidor de C1, sin clue se Ileguc a formar una C3 comertasa activa (clue daria lugar al dcpcisito tic C3 t , a la elintinacion tic los complejos tbrmados por cl complemento I . DEFECTOS DE LOS FAGOCITOS Las celulas tagociticas lpolimortimuclcares y celulas tic estirpe monocito/macr(Aago) son importantes para la detensa del huespcd finite a las bactcrias piogenicas y otros organismos intracc-

lularcs. Cuando la cantidad de leucocitos polintortonuclearcs es nrtn interior a to normal (neutropcnta) se producer graves infeccioncs bactcrianas . Eaisten cios clcfectos gcneticos tic los fagocitos con importancia chnica, yuc suclcn dar lugar a graves intcccioncs t. yuc mochas %coos condUCCtt a la ntucrtc : la entcrmcdad granulontatosa cronica _y cl dcfccto tic adltcrcncia ICUCO citaria . La enfermedad granulomatosa cr6nica (EGC) se debe a un defecto en la via de reducci6n del oxigeno I,()s p.tcicnics corn FC;( . posecn una NAI)PH osidasa dctcctuk) sa, yuc net cs capaz de catalizar la reaccicin tic transtitrntacion del () : cn " (), scgtin la rcacci6n : NAI)PIl - 2(), > NA1)P' + 2 " (), + H' Por ello, sus fagocitos no son capaces tic prcrducir anion superosidcr r " (-) ; 1 ni perosido de hidrcigeno tras la ingestion do microctrganismos, por to clue no pucdcn dcstruir con tacilidad ]as bactcrias u hongos tagocitados, rspccialmcntc aqL1CIlos clue producer c :ualasa i s . cap . 1 / 7 ) . En cartsecucncia, los rnicroor ganisnws sobret'isen rn el sera tic Ios fagocitos tic Icts pacientcs corn EGC . Esto da lugar a una rcspucsta celular frcntc a los antigcnos microbianos clue pcrsistcn en cl interior do las celulas, con Id consiguiCIAC tornrtcion tic gr .tnulontas . Los ninos con EGC desarrollan neuntonias, infecciones tic Ios ganglios lintaticos i lintadenitis i absccsos cutaneos, hepaticas en otros s isceras . El diagnhstico tic la 1-:( ;( : se basa cn la incapacidad Lie Ios fagocitos actisados para rcducir cl colorante nitroazul tic tctrazolio (NAT ;) . Este colorante, trail sparente \ tic color antarillo pali do, pcnctra en Ios fagocitos al tnistno ticntpo clue [as particulas ingeridas . EI NA'l accpta un H t, se reduce canto consccucncia tic la osidacion tic] NAI)PH, dando lugar a un precipitado tic color s ioleta oscuro ; csta reaccicin no se produce en Ios tagocitos do Ios pacientcs coil EGC Ififirf . 21 .141 . La reaccii>n clue cataliza la \AI)PII oxiciasa es compleja, estandct compucsta la enzinta tic rniiltiplcs subunidades . La tncmbrana do Ios fagocitos cn rcposo conticnc tut citocrorno cspecifico tic cstas celulas, cl citocronto h, ; h, . Este Csta contpuesto de dos cadenas, una tic 91 kdal codificada por un gen del brazo cctrto del crontosonra X, N , otra do 22 kdal cociificada por un gen situadet cn cl crontosonta 16 . I)urante el proceso tic tagocitosis sc fosf trilan % -arias protcinas citos(Slicas, clue a cetntinuaci6n se ties-

Patogenesis del edema angioneurotico hereditario

2 Fig . 21 .13 . El inhibidor de C1 interviene en la inactivation de elementos de los sistemas de la coagulacidn, las cininas, la plasmina y el complemento, clue se pueden poner en funcionamiento tras la activation superficial del factor XII (factor de Hageman) . Los pasos en los clue interviene el inhibidor C1 se muestran en color rojo . La activation no controlada de estas vias da lugar a la formation de bradicinina y de la cinina C2, moleculas clue inducen la formation de edemas . Fig . 21 .14 . Prueba del nitroazul de tetrazolio (NAT). Izquierda : En los polimorfonucleares y monocitos normales la tagocitosis induce la production de compuestos reactivos de oxigeno (CRO), y el NAT amarillo se convierte en formazan, de color violeta azulado . 1) Los pacientes con EGC no producer CRO, por to clue el colorante conserva su color amarillo (2) . (Por gentileza del profesor A . R . Hayward.)

Inmunodeficiencia primaria

plazas IL1Sr11 In nlcnlhr .ula \' SC uncn al cit()cronlo h ;>n . EI complejo tbrinado prcscnta actixidad cnzini .itica NADPI I oxidasa, \cataliza L1 rcaccion en la (Iuc cl NADPH sc oxida v acti\a la pr() dUtlloll tic Iadicalrs tic oxigcno ifo. 21 .15) . La ~brnla Inas frccuctltc tic F( ;( : cs la ligada al cronlosoma X, Clue sc det)c a un ticfict(1 tic la caticn :l do 91 kdal del citocromo hhxisten ot ras tres liWnl ;u tic E( ;( : yuc se tr,ulsnliten con Canisterult(n()nllc() rcccsi\(), debidas ;1 docctos ell 111 cadcna dc 22 kdal del citocro No I,- , () a detcctos tic p47+"'' , \-/() p67;"', otras d()s proteinas citos()licas Clue Ii)rnlan parts del c()mplcio enzinl .itico ,` poor es la ahrc\ -iatura do ()xidasa fagocitica, ell ingles plurgon-tic oridnsc ) .

NADPH oxidasa y sus componentes estado inactivo n estado activo 7

I)rcscntc ell la superficie tic los nlicrourganisnu)s ops0niz11dos CS csencial para la ingesti()n dc Isis hactcrias por parts dc dichos fagocitos . Los pacientes coil DAL careccn dc este receptor, una intcgrina dcn()Ininada receptor dc complclncnto 3 1(161, por to yue contr ;len gra\cs inteccioncs hactcrianas, especiallnentc en la hoca \ en el tracto gastrointestinal . (R3 csta compucsto tic dos cadenas polipcpti(fic .ls : LiIYa to ticna u dc 165 kcial ~ ( 1)111) i \una caticn ;l I3 tic 95 kd .ll (', I) I S ) . En cl LAD exists un tictccto gcnctic() de la cadcna 13, c()dificada por un gen del cronlt)sonla 21 . Fxisten otras don integrinas tic naturalcza protcica quc c(lnpartcn la misnla cadcna ji, en concrcto cl anrigcno funci()nal Icucocitario (I .FA-I1 \ p150 .95 (\'. cap . 5 I . Aunyuc each una do cllas posse una cadcna u propia I l a \- ( :1)1 I c, rcspccti\ anlcntc ) . los pacientes con I)AI . tanl hicn carecen de cstas protcinas . I .F.A I ejercc inlportantes funcioncs rclacionadas con la adherencia cclular, al intcraccionar con la nlt)Iccula tic adherencia intercclular 1 i I( :A11-I ) presents en la supcrhcic do cclular cndotchalcs \ ell otras mcnlhrana.s cell larcs . ()chid() al deficit tic I .FA-I, los tag()citos d1, los pacientes con DAL no sc puedcn fijar al cndotcho \;lscular, p(n- to yuc no pueticn abandonar cl torrents circulatorio \- dirigirse 11116,1 las regi(nles intcctadas . 1'or ell(), en Lu Icsi()ncs dc Ios pacientes C()I11 LAD n() sc pucdc 1`61- 111111, pus ; ('sit) permits discnlinarsc r,ipida111clltc a dl\crsas hactcri :is Ill\'as()Ias .

El defecto de adherencia leucocitaria (DAL) se debe a anomalias en el gen de la integrina Id & 1 .1 ]nrnlt)r:u111 de I()s f,lg()cit()s yue sc Line .11
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i (a)

] .is

Fig . 21 .15 . Nuestros conocimientos actuates sobre la NADPH oxicfasa sugieren Clue cuando no se encuentra activada algunos de sus componentes se encuentran situados sobre la membrana (citocromo b 55H y tat vez rap-1), mientras Clue otros son citosolicos (p47F"', p67P^^, el componente N Clue se Line al NADPH y un posible cuarto componente, denominado (u) . Tras los estimulos inducidos por la fagocitosis, los componentes citosolicos se asocian y se desplazan hacia la membrana, (ln acontecimiento Clue probablemente depende de la fosforilacion (P) de p4711"1" . Una vez Clue los componentes citosolicos se Linen a los de la membrana, la oxidasa adquiere capacidad catalitica y p47)'h^^ es fosforilado de nuevo . En cada una de las diferentes formas de EGC existen distintos defectos en los genes Clue codifican los diversos componentes de esta oxidasa . (Adaptado de R . M . Smit y J . T. Curnutte . Blood 1991 ;77(4) : 673-86, con autorizacion .)

Los varones con agammaglobulinemia ligada al cromosoma X presentan unas caracteristicas chnicas Clue no permiten distinguirlos de los Clue padecen deficit hereditario del tercer componente del complemento (C3), siendo ambos grupos de pacientes may susceptibles a las infecciones piogenicas . Explique este fenomeno .

clase I . ZDe clue subpoblacion de celulas T careceran estos tiltimos pacientes? Los pacientes con deficit de los primeros componentes del complemento (C1, C2, C4 e inhibidor de C1) no son especialmente susceptibles a las infecciones piogenicas, al contrario Clue los Clue presentan deficit de C3 . Explique este fenomeno .

Los pacientes con deficit de molecular CPH de clase II

carecen de celulas T CD4' . Se has descrito algunos casos de pacientes con deficit de molecular CPH de

LECTURAS ADICIONALES
Conley ME . Molecular anproacnes to analysis of X-linked immunodeficiencies, Anti Rev Inlmunol 1992,10 215, Curnutte JT, Orkin SH, Dinauer MC . Generic disorders of phagocyte function. In Stamatoyannopoulos G, Nienhuis AW, Maierus PW, Varmus H (eds) The Molecular Basis of Blood Diseases Philadelphia: PA Saunders ;1994A43 Rosen FS, Cooper f., , -RJP The primary immunodeficiencies
1

Rosen FS, Seligman M .(eds) Imrnunodeficiencies- Switzerland- Harwood Academic Publishers GmbH, 1993 Von Andrian UH, Berger EM, Chambers JD, et al In vivo behaviour of neutrophils from two patients with diFir - - t irh~- - ed leukocyte adhesion deficiency syndromes . J Clip Invest 199 .,91 2893

N Engl J Med l ':+_ 333-1 .'

Inmunodeficiencia secundaria
" Los farmacos inmunomoduladores pueden hater disminuir en gran medida las funciones inmunitarias . " Los esteroides afectan los desplazamientos celulares, determinan leucopenia e inhiben la sintesis de citocinas . " La ciclofosfamida, la azatioprina y el mofetil micofenolato actual directamente sobre el ADN o su sintesis . " La malnutrition cal6rico-proteica tiene graves consecuencias sobre el tejido linfoide y la inmunidad mediada por celulas. " Las deficiencias en algunos nutrientes, como tint, selenio, sobre, hierro, vitaminas A, B6 y folatos, afectan la funci6n inmunitaria . " La nutrition y la dieta constituyen unas novedosas armas para disminuir las enfermedades y las muertes producidas por las infecciones. " El SIDA es producido por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), un virus ARN de doble cadena que se une con CD4. " Una disminuci6n importante de CD4 se puede producir mediante diversos mecanismos, con la consiguiente alteraci6n en la inmunidad celular y muerte por infecciones oportunistas . " El tratamiento combinado con inhibidores de la transcriptasa inversa y de las proteasas obtiene un exito terapeutico razonable, pero con un elevado coste. " Todavia n4 se han identificado vacunas utiles .

II INMUNODEFICIENCIA PRODUCIDA POR FARMACOS

Fit la ultinla dccada sc han producido notables as- ances cn la comprcnsion tic la regulacicin del sistenla innutnitario t . del posiblc cCcto dc los tarnlacos sobre cl mismo, Clctcrmin.ulo tanto innuurcxlcficicncias cOlrltr ;utnlontor do stt :tcti\iC1dd . En cstc capitulor sc analiian lo>s farmacors cmplcado~s cot inmunortcrapia sir t6llica . Corticosteroides I-'I ~i ,tcma inn,ui,itarior sc rcgula mediante al mcnos cuatro nlc;ani,rnar' IUnd .,mrnt .lics ; hormonal jglucocorticoidcsI, cl sistc ma LIc citocinas I incluidas las intcrlcucinas V C1 interferon i, la red dc concxioncs I las rcspucstas dc tipo idiotipo-antiidiotipo'~ c los antigcnos. Los glucorcorrticoridc,, corn Icrs nurduladorrcs naturalcs del sistema innlunittlrior mat potcntcs, tom impcrrtantcs cfcctos sobre la mayoria dc Icrs nicelcs t . tic los clertlcntos del mismo. Adcmas dc una accicin hormonal dirccta sobre Is mm -ilidad v tuncion dc las celulas inmunitarias, Ions tortiCoStC1"oldCS ticncn una notable itltlucncia sobre la sintosis .1e citocinas, con Cl ecnlsiguicnte etecto indirccto-r a ni\cl innlunitarior.
Efecto sobre la movilidad celular

gad, cn cl numcro dc cosincifilos circulantes tr s cl tratamiento c% teroidco, to Clue contrast.t tern la noutrofilia prOClucid t .
Efectos sobre la funcion celular l .a tctic,tcicin 1 . hnrlitCr ., .iom lii L,s cel,tl ;ls'I'sC

: inhibc port lots Cs tcroidcs, yuc haccn tltic nor rc,pmdan a II,-l, impidicndo Cli coil sccucncia yuc sinteticcn I1 .-2 . Los corrticostcroides inhiben Lts fases inicialcs dc In nladuntcion (IC las CCIUlas 11, bloyucando la tuncioin dc loos nlornorciters, las celulas T, pero cjcrcen cscasos etcctcrs sobre las celulas 11 maduras. Sin ctnbaraor, tras la administra cion prolonggada tic closis altar, sc prOCiucc~una diSCrCTa oiisnlinu 6611 do earl, isotipo dc innrtmoglcrhulina. Icrs ccrrticorsteroides inhiben 1 .1 prorLluccion tie II .-1 c F\1~ Pot- lox nlonocitos is . rnas adclantc h, pent no bloqucan cl cfcctor de las citocinas sobre la fag,ocitosis, sing Clue la tar oreccn . Dc cstc louder, la administration do dosis hajas dc corticostcroidcs pucdc aunlentar la union del IFNh; y la consiguiente exprcsicrn do las molccul .v, I ILA-DR 1 . rccoptorrcs Fc . Sin embargo, la thncion do los polint<rfos Cs rcsistcntc a los nivclcs de cstcroridc,, quc sc put den consegttir port' tnctordos ttrnaacohrgicus, segtin estudiers ,cr tire la quinliotaxis, la tagcrcitosis s . la citortoxicidad .

1,1 1dnlinistracicin LIc C(N'tlcorStCrlridCS, incluso ell pcqucf as cantttlaClos, comer las ci1111ICatlas conlsoguir conccntracioncs fisioloigiC:ls cn Icrs pacicnics adrenclectcrtnizadors, produce canlbiors sorprendentcs en las pohlacioncs lCttlorCltaria ., . 1=.stos etcctox s ari;ul en funcicin del tipo celular i /iq. 22. 1 i .

El tratamicnto cstcrcridco produce 11Hj01'Itlrp0llll tll't tt1.111te, maxima a Lls 4-6 h' Clue sc nornlaliia en 24 h. Las celulas T se afectan mar Clue la,, 11 y, dentro dc Los prinleras, eras cl subtipo (,1)4 quo: cl (:1)8 . LOS CSttlCliOS cxperinlcntales sugieren quc cstas celulas SC rcdistribuVcn hacia la nlcdula ()sea v cl bazo . EI trat :uniento estcroidco tambicn produce mouocimpruia, m s notable a las ? h Clue SC recupera on general a las 24 11 ; sill

Efectos de los glucocorticoides sobre los leucocitos circulantes

horas despues de la inyecci6n tipo celular neutr6filos linfocitos eosin6filos monocitos bas6filos 0 4.000 2.000 400 300 100 6 10 .000 500 100 50 0 24 4.000 2.000 400 300 100

embargo, a ditcrcncia tic to Clue SUCCCie con otras pobfacioncs cclulares, [as closis repcticlas di arianlcntc no proxiucctl ciclos repctidos dc dcplcci6n . La noltru/ililt cs una caractcristica del tratamicnto colt corti. costeroidcs 1 so dcbe, cn parts, a la liberacic',n dc celulas nraduras almaccnadas ell la mcclula osca y, en parts, a la reduction del nunlcro do celulas yuc abandonan la Circulation. Sin cnlb :u-o, en los inditiduors norrnlalcs sc produce una rcdHCci6n rapid, proton

Fig. 22 .1 . Efecto de una dosis de glucocorticoides 140 mg/kg), administrados en el momento 0, sobre la cantidad de leucocitos humanos circulantes (por mm') .

Inmunodeficiencia secundaria

Sc It :t ticmostrado) in t irr yuc la sintcsis tic citocinas se inhibc por la, omcentracioncs farmacoologltas \ fisiol6gicas Lie corticosteroities, pero su tUnU6n SC atecta po)co . RcSUlta sorprencicnte que sc ha dcmostrado una mcnor produccion tic IL-I, 2, 3, 6 y Ifl, TNFu c IFN-p tras la administraci6n tic cstcroides in viva . Pucdcn estar implicatios ditcrsos mccanismos : I ) union a posiblcs clcmentos que respondcn a glucocorticoides en la region pro)mtno)ra tic ILLS genes tic las citocinas (: IL 4, 6 t 10 j ; 2) union directa, que antagonize a los factorcs actitadores tic la transcripci6n, Lie 11, 2, IL-8 ~- TNFu, o 3) acclcraci6n tic la rotura del ARNrn i,IL-I c 11 .-31 . Las principles consecucncias tic cstos procesos son la inhibicicin tic la activaci6n tic las celulas T, coil al'ectacion similar tic Ids celulas TH I t Ti 12, c inhibicicin tie] sistema monocito) ;''rnacro)t .i~ito) . Ciclofosfamida I .,t cick)hrsL11rrida pcrtcnerc, tumor ram el tk,r .imlsntil, :rl i;r- Uhc) tic tarm,tco)s innrtmcrm<xiuladoorc,, yuc atttian mcdiante Aquila cicn conalcntc tic otras molccula .s . La ciclotostamicla no disponc tic actitidad alquilantc propia, pero machos tic sus metabolitos son actit -c)s c coda una) tic cllos prcscnta dos sitios actitos yuc Pucdcn protocar enlaces cruzados entre las cadenas del ADN, intcrfirientlo coal la scparaci6n tic las mismas durance la reproducci6n . Su principal ctccto adverso es la toxicidad modular, clue hacc obligatorio controlar la Icucopenia . I a cirlofosfamida atecta funti .tntcntalmentc al ntirncro v funcion tic Ions linfocitos, sc)hrc to)dor desPucs tic un tratamicnto con bajas dosis orales diaries, mientras que cl nunicro tic polimorfonuclcares puedc perntancccr rclativamente constants . El tratamicnto con dosis bajas orales pucdc afectar mas las respucstas mediaclas por celulas c Cl tratamicnto con cmholadas intermitcntcs atecta Inds la produccion tic anticucrpos . Tanto en hu manos comor en animates tic experimentaci6n, una cmbolada de baja closis ( 611(1 rng/tn=) dctcrmina la rcducci6n tic los lint' rcitos B, ntas yuc tie Ios T y, dentro tic cstos ultimos, atecta teas a los CD8 quo a Ios (11)4 ; ,in embargo, cuando se administran dosis mas altas, sc atcctan todos It)F t1pos telularcs tic una forma parecida . Los estudios experimcntales ban demostrado que este ctccto diferencial cic la depleci()n tic (:D8 coil dosis bajas permits Cl aumcnto parad6jico tic algunas funciones controladas por CD8, coma la produccion tic anticucrpos . En humartos todavia no esta claro si ]as dosis hajas tic ciclofostamida tienen la misma importancia clinica . ( ;ono la ciclofoslatnida inflate tanto sobre la hrncion tic las celulas I3 coma 1', resulta eficaz para controlar tanto las respucstas inmunitarias mcdiadas por anticucrpos coma por celulas cn animates tic expcrimcntaci6n y en Ixunanos, por to yuc su utili dad principal cs en cl tratamicnto tic la entermctiad por anticucrpos y cn cl rechazo tic injcrtos . Azatioprina Fstc tarm .tco, quo in viva se transforma con rapidez, mcdiante mccanisnuos no enzimiticos, en 6-ntercaptopurina, actua, tras su tnetabolismo a acido tioinosinico, mcdiante la inhibicicin competitita del metabolistno tic las purinas e incorporandose al ADN coma base talsa, tic forma yuc su etecto principal es sobre la sintcsis tic ADN . A ditcrcncia tic la ciclotbstamida, clue rcsulta citot6xica, la azatioprina sc considera cltostatico, ya yuc solo act6a sobre las celulas cn ditisi6n, consiguicndo un ctccto m :ixill)o cuando se administra poco dcspucs Lie 1111 estimulo antigenico . El alopurinol, quo inhibc la cantina oxidasa, cuadriplica la dosis eficaz tie azatioprina, tic forma quo cuando el alopurinol resulta fundamental a Intel tlinico Icomo en cl tratamicnto tic la gotaj, sc debc rcciutir la dosis tic azatioprina cn un 25%,
Efecto sobre el sistema inmunitario

Efecto sobre la sintesis de citocinas

I .a azatioprina cs un inmunosupresor mtxicrado y consiguc una rcduttioin discreta tarno del n amcro tic celulas 13 corno T tras el tratamicnto prolongado cell dosis 2- mg/kg/dia . farces que su tt$t),uprinte tic forma especifica la actitidad dc las celulas asesinas N NK, mientras quo la innutnidad Immoral y la hipcrscnsibilidad rctardada no se atcctan con las closis titiles en clinica, a pesar tic la mcnor respucsta frcntc a los mitoigcnos tic los linfocitos obtenidos en pacierttes tratados con estc tarmaco . Mofetil micofenolato I .stc f :irnt :t0) sc dcsarr()Ilo'r para actuar de forma sclectita sobre la trio final do la sirucsi, tic purinas, empleando unit tie utilizada tic forma especifica por los linfocitos que proliferan tras un estimu1o antigenico . Por canto, cstc f3rmaco no inlube, a ditcrencia tic los analogos tic los nucle6sidos, coma la azatioprina, las enzimas tic reparaci6n tic ADN in sc incorpora comp analogos talsos tic las purinas al ADN . El micofenolato se hitiroliza cell rapidcz in viva ell su mctabolito actito, cl acido micotenolico .
Efecto sobre el sistema inmunitario El In ico)tcn()lato) t)h)yuca las respucstas prolifcratitas tanto tic ]as

Efecto sobre el sistema inmunitario

celulas h coma) - t a (dosis yuc parecen carecer tic efccto sobre otros tipos celulares . Tambicn inhibe la glucosilacion tic las tnoleculas tic adhcrcncia implicadas en la tnotilidad tic los leucocitos sobre las celulas endotehales, lunitando la amplificaci6n tic ]as lesioncs inflamatorias . Metotrexato 1-arc Lir - maco, analogo estructural del acido f6lico, bloquea las cias sitrtcticas dependicntes del acido t6lico fundamentales en la sintcsis del ADN . Vario)s articulos dcstacaro)n la rcdutcicin tic la sintesis tic innw n()globulin.ts, roll una notable disminuci6n tic todos los isotipos tic las mismas a los 3 mcscs tic tratamicnto . No sc hall obscrvado cambios constantes en los subtipos tic celulas -F ni a corto ni a largo plazo, iii tampoco cn la funcioin del sistema monocito/macrotagico . Sin embargo, la inhibicicin tic la dihidrofolato rcductasa implicada en la sintesis tic purinas hhcra adcnosina, un potcnte inhibidor tic los Icucocitos polimortonuclcarcs activaLioS, to quo data al mctotrcxato tic capacidad antiinflamatoria . Otros cfectos tic estc tarmaco sobre la infamacion pueden tenir ntediados por su etecto inhibidor del metabolismo del acido araquid6nico, aunquc otras fltnciones antiinllamatorias, indicadas por la rapida disrninuti(in tic los indices tic actitidad intlamatoria, coma la proteina C rcactiva f PCR) o la velocidad tic sedimcntaci(in eritrocitaria A'SG), disminuyen en periodos demasiado cortos coma para dcberse a una firn66n sohrc la htncitm tic las Cclul .ts inmunitarias () la sintcsis tie innturn) lo)hulinas . Ciclosporina, tacrolimo (FK506) y rapamicina Estcn tres farnlao)s tienen coruplicada, .utio)nrs s<rbrc la trans misicin tic senates a las celulas 1 t, 1)or canto), Sore su tiutcitin . Todos sc uncn con un tipo tic protcinas citoplasmaticas Idenominadas inntunofilillas), con actitidad pcptidil prolil isomerasa +rotanrtsa), a ]as yuc inhiben . Se picnsa que las inmunofilinas resultan cscnciales en la transmisi6n tic senates desde la superficic cclular hacia el micleo . La ciclosporina se line a una familia tic innumofilinas, las ciclofilinas, mientras yuc cl tacrolimo y la rapamicina sc ligan a las protein :ts yuc Linen FK. El complejo ciclosporina-ciclofilina actit,a a una fosfatasa tic scrina-ticonina dcnominada calcineurina ; cl complejo rapamicina proteina ligadora tic FK active una tie distinta . Tanto la ciclosporina coma cl tacrolimo inhiben las vies tic transduecicin tic scnales, que aumernan tic forma caractcristica el calcio libre intracclular, inhibiendo la actitacion
Efecto sobre el sistema inmunitario

Respuestas inmunitarias y nutricion

transcripcional de las citocinas v tic otros genes fundanlcntalcs tic las celulas T. La rapamicina para la prolitcracion v acttxidaJ bloquea la prolitcraci(on tic las celulas T mccliantc tin mccanisnlo tic distinto, la inhibition tic las vial tic transduccion dcpcndicntcs IL-2, quc tuncionan de forma indcpendicntc Lie la concentration tic los genes tic las citocinas tic calcio, sin afcctar la transcription

Efecto sabre el sistema inmunitario

La ciclosporina tierce tin potentc ctcct(( inhihitorio sabre las fltic la proliteracion de las celulas T inducida par las SO inicialcs reacciones mixtas tic lintclcitos, la concaxalina A o la fitohcmaelutinina v adcmas actua sobt-e las celulas 11, inhibicndo las rcs11LrCStaS prolitcraisas c(lntrolaclas pclr antiglobldinas, sin modi ficar las dctcrminadas par la cstinlulaci(in con Itpopcllisacaricios, tic antigenos pclr los nl()nocitamhicn sc atccta la prcscntaci()n tos 1 . las celulas do Langerhans . En rcsumen, la ciclospowina atecta principalmente a la, celulas - F, aunyuc se exticnde a otras cclula, innumitarias . Se picnsa Clue cl tacrolim(~ actim lie una tilrnla similar a la ciclosperr-ina, aunyuc se tine a una tnnlitnofilina dis tinta. Sin embargo, la rapamicina tamhicn actita sobre celulas no hcnlatopoycticas, inhibicndo par cjcmplo la prolifcracilrl del nlirsculo lisp vascular tras las Icsioncs pclr sonda con bal(in, ctcc to que puedc resultar Litil para inlpcdir la recstcnosis tras la antic las vioplastia . adenlas, este tarmaco inhibc la prcllitcracicin Clue el tacrolimo o la ciclosporina, celulas T en fasts mas tardias tic filrma conjunta con estos tarmapar lo Clue puedc set- usado cos o corno altcrnatixa a los mismos cn trios retractarios al tratarllietlt(1 .

Los paises porn tasorecidos a nivcl cconomico prcsctltatl tic deficiCrlllaS nutricionalcs, junta con una nlavor pres'alcncia los sectorcs sociales cmpohrccidos tic Ios paises industrtalizadcls . Ademas, muchos indixiducls prescntan l1teraCicnles nutricicnrales sccundarias a otros crlfernlcciades, comer cancer, netropatia cronica, qucmaduras, traumatismos multiples e intecci(lnes crconicas . Aunyuc result, paraclojico, tanto la obcsidad C(ltllo una in,,cst:l cxccsisa sc asocian con una manor rcspucsta inmunitaria .

Malnutrition e infection

I a intccci(n1 \ I,1 nldlnutricicin SC SUCIC11 agr:n ar cntre . Sin cmbargcl, 1 .1 malnutrition no atccta igual a todas ]as intcccioncs ; ell algunos casos cl CHI-SO cs'oluti\o V cl dcsctllacc sc afecta do tornm ncgati\ a pclr la malnutrition, coma en la ncumonia, la diarrca. cl . sarampion V la tlllCl_CUlOSiS ; en otros casos i tctanos 1 cncclalitis . s iral i la atectacion es nlininla 1 en ott-as (gripe c intcccicon pot- cl virus tic la ill n1xtnodefcicncia human, i cl elect(, cs m(xicrado . Multiples tactorcs predisponcn al desarrollo tic intcccioncs cn cl pacicntc nralnutrido, incluido la mala hivicnc, la cclntaminacion del aqua c cl alinlcnto, la falta tic :(mocimiciltos nutrio(m,lles \ sanitari((s, rl :uraltahctisnl() 1 . Cl l1 :IClnarlllint(( .

St

Tejidos linfoides

I/ RESPUESTAS INMUNITARIAS Y NUTRICION

Dcsdc antigucl SC conocc la relation cntrc la nutricion y la rcsistencia a las intecciones mcdiante as(ciacion histo-ica entrc la pests 1, cl hambrc, obscnaciones clinicas c datos cpidcnliol6gicos . En general, las dcficicncias nutriciclnales Sc rclacionan coil alts racioncs cn la rcspucsta inmunitaria, con atcctacion fiulctanlcntal tic tic la misma: la innlunida(i mcdiada par celucinco aspectos las, la tiuuicin tagocitica, cl complcmcnto, Ios anticucrpos sccl-etorcs 1. la production Lie citocinas. La intranutricim se considctic inmuncxicticicncia en todo cl nnmdo . ra la causa m:is frccucntc

I ((s tcjid(,s lintilidcs rcstiltarl cspeci,llnlcntc s ulncrablrs :1 I((s tic 1:1 ntllnutrici(on . La nlagnitud s . ` ;rasedad CICCILO pcrniciclscls tic la disfuncion lintoidc producida p(lr malnutricicin depende tic tic prcllitcracicin cclular, la cansarios factorcs, conlo la sclocidad tic tidad y vclocidad do la sintcsis protcica y la importancia la nutricion del indisiduo cn las sias mctabolicas criticas . Nlumcrosas crlzinlas inlplicacias cn los pr(lcesos inmtlnitarios lie ccsitan tine, llicrro, vitamina 110 s. otros micrcnlutrientc, para

podcr funcionar. La atl-ofia lintoidc es una caractcristicl mortilhogica llamati\a en la rnalruttricion . El tinlo cs tin barornctro sensible dcl CS tado nutritional en nit1clS pequenos, t' se ha denominado a la marcada disminucion del tanlano y cl peso del misrm) en pacientcs malnutridos coma -timcctonlia nutricional, A niscl his_ toleigico, la arquitectura lobulillar aparecc mar definida, con per . dida do la ciclimitacic'ln corticcmudular s reduction cn cl nunlcro tic tatic celulas linfoicics . Los c(n- ptisculos tic Hassall aunlcntan rn :lrio mucstrul aspccto degencrativo, pudicndo llcgar a calcihcarse . Sc ohscna atrofia cn ]as zonas pcrilrteriolarcs dc[ hazo dcpcndicntcs tier until ell la zona paracortical de Ios gangglios lintaticos .

Malnutrition calorico-proteica (MCP)

Ciclosporina, tacrolimo y rapamicina

ciclosporina secretion de linfocinas
(IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, GM-CSF, IFN-,,)

tacrolimo

rapamicina
T

-o

expresidn del receptor de IL-2 inhibition de la respuesta frente a

IL-2

Fig. 22 .2 . Efectos diferentes de las inmunofilinas ciclosporina, tacrolimo y rapamicina sobre la actividad de las citocinas .

LA malnutrici(m nu(dcr,lda 'grass sc asocia :()rl una rcdlrccion significatis -a cn I ., innwnidad mcdiacia pclr tcluhs, yuc sc tradutin ce cn una ciisminucion del ninnero de linfocitos 1 32 .3'1 . Los cxperinlcnt((s tic ntcnor cclcicntc tic las celulas T c(rcultiV(1 LICt11LICStrarl una rcduccion en la asuda celulas B, con disnlinuci(Sn Lie la rcspucsta disponihlc para las tic prolitcrtttsa trcnte a mitogcnos tic los linflcitos . La inmadurcz traduce en una manor actisidad de la ]as celulas T circulantes se dcsoxinuclc()tidil transtcrasa leucocitaria . l'na nlcnor actividad tic tinurlina puedc estar rclaci(1nada con las alteraciclnes en el nutic ]as cclulas T. Tanlhien se observa una nictncrcl l la actis idad nor produccicin de IgA secretor cn rcspucsta a los antigcnos tic lacunas ti-ccuentes, gtic puedc contribuir a la mas'clr incidcncia tic intcccioncs nlucosas . La tagocitosis tamhicn sc atecta par la NICP. Disminuve la tic \arias prom nas opsonizacicon, solve todo par la disminucion . del complcmcnto: (',3, (: ; 1 factcn- B. Aunyue la capacidad Lie ingevir micr(xrrganismos esti intact, en la ;1\1('I~ se alter, la ca pacidad tic Ills tagocitos tic dcstruir I(u en'g :urismos intracelularcs . tic cicrtas citocinas, coma Tambien sc reduce la production II .-2 y I'\F .

Inmunodeficiencia secundaria

Subtipos de linfocitos

porcentaje

50 40
30 20 10 0 CD4

C1),~

Obesidad e ingesta excesiva de nutrientes Los sujctos animalcs ()hc,,s n1ucstran ahcrati(>ncs ell \arias respuestau innTtulitarias, intluitla la citotosicidad, la acti\idad NK\ la capacidad dc los fagocitos do nratar las bacterias los h(nlgos ingcridos . Fstas altcracioncs innlttnologicas sc pucticn producir pot- las modificaci(mes en los ni\cles de cicrtos micronutriclltes, lipidos \ horn,onas . La administracion do una cantidad modcrada do cicrtos nutrientes fllcilita cictcrminatios aspcctos dc las respuestas innutnitarias, sohrc todo la innlunidad ntcdiada por cclulas . Estos nutricntcs s(n) la \itanlina F:, la sitamina A, cl cint \ cl sclcnio . Sin embargo, ell la 111 :1\oria dc los casos, existe tin limits tic ingcsta maximo por encin,a c1cl cual sc altcran las rcspucstas in111unitarias . Implicaciones clinicas Sc 11 :,11 ticscrito nuc\as iuniIIlIidadcs de itttcr\snti()n nutricional para la prc\cnci(in tant(> hrimaria como sccundaria en grupos tic alto ricsgo . Los pacicntcs hospitalvados malnutridos prcsentan nla\or ricsgo dc it,tcccioncs op(~rtunistas complit:uias, purr las 6Grnutlas do afnlentacion cnriquccidas ell nutricntcs cstimulan la innlunidad y rcduccn cl ricsgo dc complicaciones, como sepsis \ mala curaci(Sn tic las 1lcridas . En Itu ancian()s, una catisa do enfcrnlcdad fi-ccucntc cs la inlccci()n rcspiratoria y la adnlinistraci()Il tic una cantidad m(xicrada de nlicrontitricntcs suplen,cnta rios n,cjoran ]as rcspucstas innunlitarias 1 . rcduccn la incidcncia do infcccioncs respiratorias \ cl use do antibiriticru . Adcn, s, las rcspucstas innlunitarias pos\acunaci(i11 son n,ejorcs ell los pacicntcs a ION yuc se atiministran NUI)IC111entos nutrici(males quc en ION contr(11cs no tratatios . SIDA FI \irus do 1,1 i11nttu,odcficicnt1 .1 ilun1a11a i\ IH tausa tili) .A s sc transmits por \ is sexual, ell sangre o hcnloderit -ados , por \ia pcrinatal . Exisren dos \ariantes fundamcmalcs, cl VIH-I 1 . cl VIH-2 . LI VIH-2 cs endcmico ell Africa dcl cstc \ parsec scr r11CnOS patogenico . M :is dcl 80'%~ tic ]as personas inlcctadas por cl VIH \i\en en paises en \has dc ticsarrollo y sc suck discn,inar por contacto sexual f 711'%, vaginal ; 10'"x( anal i . La ()rganizacion 4lundial do la Salad iOi\1S'i cstinla quc, ell cl ano 2000, habr:i tin total acunlulado dc infcctatios dc 30 milloncs, till 996 do los CtiACS cstar n ell paices en cicsarrollo, 1 . cada ano moriran 2 milloncs do personas por SIDA . El virus F.I VII I cs till \- irus ARN do cadcna dohlc, dc 1011-120 11111 do di nlctro (fig. 2? .4) . Su cstructura gcnetica basica consta dc gcnes ttnrl (protcina del core), pal (polin,crasa/transcriptasa in\crsa} , rttr (protcinas dc la cubicrta ; . ()tros genes adicionales rcgulan la sintcsis do ]as protcinas \- iralss . El antigcno ( :D4 cs cl receptor dcl virus 1. aparecc n en los linfocitos I (a)4' 1 . en cclulas do cstirpc monocito/macrofagica . La gp120 \iral se lip al ( :I)4, pcro los corrcccptorcs de Ias quin,iocinas cstan in1plicados en la consiguiente fusion c internaliraci(in mediadas por I;I'41 . Disfuncion inmunitaria tic hr((dutc 1111 .1 gr:t11 disti111cion inrmmitaria, coil (Icprcsi(')tl ell meth() dc tin ambicntc tic acti\acion inmtinitaria, quc dcri\:t tic I(1s elcctos directos tic] VI I I \ dc la ticlllscilln \ alteraci(in Iiu1cional do las cclulas T (l)4 - a I(, Largo dcl ticnlpo, yuc constitu \c la Atcraci(in primaria . No se sabc Hen como dcstru\c el VIH a sus cclulas diana, aunquc SC I,an propucst(1 di\ersos ntecanismos, induida la acumulacion dc ARN \ A1)N 11(1 imcgrado ell cl citoplasnra cslular \ la union intracchdar tic ( :1)4 \ gp 1 2f1 . Las cc

[_-]bien alimentados M malnutridos Fig . 22 .3 . Subtipos de linfocitos en los ninos con malnutricion calorico-proteica frente a controles bien alimentados . (De Chandra RK, Clin Exp Immunol 1983 ;51 :126-131, con autorizacion .)

La 11t,lnutrici(in tamhicn atccta los mccanismos dc la innurnidad innata . La produccion dc IiSO/inla disn,inu\e discrctatnente . En IOS sujetos 111.1Inuthdos se mlen m :is bacterias a las cc lulas cllitcliales 1 . sc ahcra la curaci(in tic las lmidas . Existcn pocos datos acerca tic la calidad 1 . la cantidad tic moctl producido ell c asos do ,\i(T. Nutrientes individuales Sc It1 dcnl-trad(i .1111p1iam1cntc cl importantc cfccto tic la dcpri% .1ti(H) tic r - itt ; s()1,rc la', rcshucstas innnlnitarias . Sc I1r(xlttcc una disnlinucitnl en 1,1 I,ipcrscnsihilidad cutinca do tip( 1 retardado, disn,inu\c11 I(1s cocicntes ( :1)4'/ ('I)S' 1. se obscr\a disfitncion tic las cclttlas T. Un dato sorprendcnte \ patogn(aminico dc la deficicncia dc cint cs la reducci()n tic 1,1 acti\idad tic la tinudina se rica, tin nonopolipeptido quc conticnc chic conlo parts integral dc su n1olecula . FI bicr-tro cs till arena do dohlc filo, \a yuc la nr,1\(1r parts tic los microorganisnuls la ncccsitan pa ra crcccr t . las cniimas dcpcntlicntcs dc hicrr(i rcsultan titntianlcntalcs en ]as fllntl(1n('N tic los tagocitos 1 . los linfocitos, tic mod( yuc la dcficicncia tic hicrro se asocia con una menor capacidad tic ION neutr(')hlos para chminar a las bactcrias y los bongos, 1111 .1 mcnor rcspucsta linfocitari .1 a los mit(igenos V los alltigc11os V Ac1-acion tic la fitncidn dc las cclulas Nh . EI prlr'uio ,. cl cobrr tamhicn rcsultan esenciales en las rcspucstas ill n111nitarias . Una rccicntc obscrvacion indica quc los \irus pucden mutar 1 . mostrv' nla\or \irulencia en I(1S pacicntes n1alntttridos a las quc intcctan . LOS \irus ( ;oxsackic recupcrados do ratoncs con dcficicncia do sclcnio causaban tin ma\or danr, nliotardico \ sc rcconocicron scis ditcrcncias ell los 11udc(1ti dos entre ]a% cepas tic \irus i\irulcntOS introducidrls en los animalcs \ lac ccpas rccupcradas ell I((s pacicntcs coil ticlicicilcia do sclcnio . La CietlciClICla do ritrtmiua A altcra la cstructura cpitchal, producicndo nlctaplasia \ una mayor union dc [as bactcrias . Sc obscr\a unit rcducti(in en el nunlcro tic cicrtos subtiPos linfocitarios \ do ]as respucstas frcntc a mitogenos . Las deli cicncias tic 1 " itamiua 13, \ fidatu rcduccn la inn111nidad nlcdiada por cclulas, sohrc todo las rcspucstas prolifcrati\as do los linfocitos .

SIDA

297

Virus de la inmudeficiencia humana y

ski

ciclo vital

proteina transmembrana .. v gp41

gp12o' .

transcriptasa reversal

internalizaci6n y perdida de la cubierta

rlt-):' Ynn

proteina del huesped ARN del VIH-1 de cadena unica

bicapa lipidica proteina de la matriz p17u , y

integration al genorna del huesped provirus del VIH-1

activation celular

procesamiento y transporte del ARN

genoma del huesped

''Jfv'i1'ff~Ifvl'l'iS transcripci6n proviral

Fig. 22 .4 . Despues de perder ski cubierta, la transcripci6n inversa del ARN viral determina la production de ADN de doble cadena, que se inserta en el genoma del huesped en forma de provirus del VIH gracias a una enzima de tipo integrasa codificada por el virus. La activaci6n celular determina la transcription y production del ARNm viral, con la production y reunion de las proteinas

estructurales . Se producers virus VIH libres mediante gemacion viral a partir de las celulas del huesped, tras to cual se producers nuevas particulas de virus maduro mediante la rotura interna de una gran proteina precursora para liberar las pecluenas proteinas del core .

lulas intcctatias sc pucdcn unir con ()tras no inlcctadas a traVes tic citlaces ( : l) 4- gpi 2t1, con tirrmacion tic sincitios v celulas multi nuclcadas . El q) 120 unidO a la sul)Crficic do las celulas T ('I)4' nu intcctadas tall)bien la', ConViCrtc cn Vulllcral)Ics a la Cit(xoxicidad mctiiatia por celulas dcpcndicntc dc anticucrpos, micntras que las celulas intcctadas pucdcn scr climinadas p(>r las celulas T citoto\icas cspecificas para gp120. Las proteinas del VIH pucdctt contportarsc Como supcranti;-cnos, to yuc tictermina una antplia Cspallsi<in \ una del)Ieci(')it tnasiVa tic las celulas . Adentas, cl VIH puctc inducir ap()ptosis tic ]as celulas -I' V la gcnrtci(in tic los Virus puctic pro\ocar kill cicbilitamicnt(r de I.t mcntbrana con la ConaiguicntC lisis . El cspcctro tic la disfunci('m inntunitaria sc caractcriza p((r la dcplccion tic los lintocitos T (:1)4' V una mcnor rcspttcsta trcntc .a los antigenos, ntitogcnos, alo:utti ,cnos V anticucrpos antiC1)3, Colt una ntcn()r pr()ducciint tic I1 .-2 V otras iltcracioncs ell la l)roduccil>n de Cit()Cillas . AI final, SC piCrdcn las rcSpucstts do las celulas T CitotOxicas cspccificas para cl VIH V algunas titnciones tic ]as celulas prcscntatioras tic antigcno . Aumcntan las Cclulas f (1)S' acti)adas c inactiVas, Ios niVclcs de X32 inicr(rgl()bulina ) . neoptcrina cn sucro, la acti\acilm policlonal tic las celulas ll, sicndo diCItas celulas K rctraCtarias a los actiV:ttiorCS do CCl(llas h

illdcl)endiclltCS tic las CclUlas l, ). t:uttbiell auntCnt;u) IOS atrtoutticuerPos N- los inntullOCOntl)lejos . 1Ars rrt()dcl()S tic[ Virus en plasma y tic rcspucsta tic IaS Celulas'1' ( 1)+' frentc al tratamicnto anti\ it . al indican que la scntiVida media del Virus V las Cclulas infectadas en la circulation cs tic mcnor 2 dins . Sc libcran 10-10"' Virus tic ]as celulas infcC. tadas s cacia dia se inlectan V nuteren kin ntimero similar tic celulas llucVas .
Historia natural [ .a intccci()n hnnicra por VIH sc puctic asociar con una cntcr

mcclad tr,Ursit((rra harrcida a una fiCI)rC glandular, con ntalcstar, d()lores nuISCUlurcs, tUlt1CIaCC1()n tic los ganglion lintaticos, dolor tic garganta v exantcma . Sc produce una cIcpIcci()n transitoria tic los lliVClcs tic celulas T (1)4' en la peritcria, con cxpansi6n tic ]as Cclulas T ( :1)8' V aumcnto tic IoS lliVelcs plasntdticos tic VIH (firl . 22 .5) . En 2 a 6 scntanas aparcccn anticucrpos frenic a las tic pr(rtcinas del core V la superficic mcdiantc estudios tic inmullocnsdVO cnzimatico . SC produce una ittlccci6nt Cl-(mica sin elltcrntcd.ttl, IM -0 kin 33"i( tic los pacicntcs prcsCntall tumctacci(>ll tic I((s gallgli(rs lintatic((s. Cll 50''i' tic los pacicntcs infectados dcs,Ur(dlall SIDA en y 10 aii()s .

"munodeficiencia secundaria

Fat taws postcriores do la infecci6n, 1,c produccn sintonaas con%tltucionalc% Incspeclflcos, como ochre, sudoraci6n nocturna, diarrea a pcrdida de peso, junto con cntermcdatics -menorcs .., quC afectan ,()hrc t()do a la picl y las mucosas, cntre las que 1,c inclu\cn la candidiasis oral 1lntlguct !, Cl herpes, las Infcccloncs anogcnitales rccidicantes por herpes simple y . disersas intecciones cutancas . Estas cntcrincdadcs suclen anteccdcr al dcsarrollo do intecci()ncs turnorcs oportunistas gr,ncs, que c(nlstituacn cl SI1)A cuando cl recucnto tic cclulas T ('1)4' e1, interior a 200/al >Z . .S1 . El sarcoma do I;aposi, un tumor inultit6cal originado en las celulas cndotchalcs i_~q . ii.b), e1, el nt.is trccuente y sucle afectar anyliarnentc a la picl, 1,11, mucosas, [as aisccras (intcstino a . pulmoncsi y I()1, ganglion lintaticos . La infccci6n por virus herpes lulnlan() 8 NIMS) 1,c asocia con la aparici6n do tunaores . Tamhicn 1,c I)ucdcn pr()ducir linfmaas tic cclulas 13, yuc atcctan al cncctalo, .11 tuber digcstiso y a la nacdula osea . La mayor parte do la% inteccioncs oportunistas 1,c pr(Klucen por reactitaci()n de organislnos latcntes en cl hucsped y, en :tlgunos cas()s, por organismos ubicuos a Ion (luc 1,c csta cxpuesto continuanacntc . Rcsulta diticil diagnosticarlos 1, cl tratamicnto suck suprimirlos en lugar tic crradicarlos, sicndo trecucntcs las recidicas, I() que liacc necesari() un tratalniento continuado o do mantenimicnto con tarmac()% no eXcnt(n do clectos sccundarios . Se suclen afectar trcs sistcmas organic()% hlndanacntallnente : cl sistenaa rcspiratorio, cl who digestito y el sistcnaa nenioso . Es trccucntc la ncunaonia, causada cn la manor parts do los casos por Pricurrtoiwts car -inrr ??.b), aunquc tamhicn 1,c producen inteccioncs bactcrianas, por Jlrcnlreti 1 .crium trsbe rculosis, o por h()ng()s . La intecci6n por candida suclc producir dificultad cn la dcgluciain, pero tamhicn citonlegalMirus puede I)r(aiucir ill-

ccras csofagicas . Los protoz(u)s 1 crVptosporidirnrr t. microsp()ri diosl son los pat()genos que con mas tircuencia se aislan cn I()1, pacientes con diarrea y pcrdida tic peso iaie . ??.b), aunquc tamhicn se pucden cncontrar hactcrias entcricas c()nao Salmonr11a y. t .'a nr pyloha rtcr . Las conaplicaciones ncur()I(ipgicas del Sll)A sc deben al &cto directo por VI H, a intecci()ncs oportunistas o linfbma . l a dcmencia rclacionada coil cl SI l):\ atectaha antes al 10-40% do los pacientes con naanitestacionc% do SIDA, pero la utilizaci6n do iratamicnt()s antisirales 111 .11, clicaCCS 11 .1 reducida 1,u incidencia . tamhicn se produce atectaci(m (1c la nacdul,a espinal V ncuropatia ilcriferica . La tosoplasmosis, una infcccion por prot()z0(n, produce quisics ccrebrales \ deficit ncurologico i,l~f. i2A . CrYlrtricewcus neo/in-mans e1, un laongo clue produce meningitis . El citontcgal()s iron pucdc pr()(iucir intlamaci(m rrtiniana, dcl encctalo t. do la nacciula espinal, .1si como tic las raises nersiosas, y . JO cl polionaacirus (virus infccta a los ofg(nlcndrocitos del encctalo, determinando una enfcrnacdad dcsnaiclinizante rapidamcnte mortal, la Icucocncctalopatia multiti)cal progrcsica, Tratannientos antivirales I i) I')S_ , -mt,rii() la wiliia :i(na de ziclovudina IAZhi como I pmtxr do I(, nu,1 :widos inhibidor de la transcriptasa insrrsa i, Nit 11, del inglcs nurlcosidt anab)vui rcrcrsi transrriptasc inhibituri en cl tratamicnto do la intecci6n por VIH . 1)esde entonccs se ban producido notables asances, con cl ticsarrollo do otros \RTI v tamhicn do inhihidores do la transcriptasa imersa no nucle(isid()s i NNRTI ) c inhibidorcs do las protcasas 1 '? .4 1 . la mon()tcrapia con Ad()\ udina cn pacientes coil critcrincdad atanzada reduce la naortalidad a c()rto plate) 1, , la progrcsi(m (1c la

Historia natural del VIH recuento de linfocitos T CD4' (celulas/mm') 1 .200 1,100 1 .000 900 800
700 600 500 50

sindrome agudo por VIH diseminacion extensa del virus siembra de los 6rganos linfoides latencia clinica

100 viremia plasmatica Icopias de ARNiml x 10')

75
0_e

400 300 200 100 0

4 5 6 7 25

anon

10

11

Fig. 22 .5 . Curso tipico de la infeccion por VIH, por gentileza del Dr . A . S . Fauci, IModificado con autorizacidn de Pantaleo G, Graziosi C, N Engl J Med 1993 ;328:327-35 .)

SIDA

cnternledad . En las fasts iniciales dc la inteccicin, se obticnc un beneticio clinico escaso v transitorio, sin mejorar Ia supcrsi\encia . Por eso se emplcan conlbinaciones dc dos o mas farnlacos, para tratar Lie aunlentar la eficacia por los cfectos sinergistas o aditia os de los naismos, tratando al ticmpo dc retrasar la aparicicin dc re sistencias al disminuir la cclocidad de aparicicin dc mutaciones del gen R't o tratando dc conterir mutaciones Lluc pucdcn relertir las resistencias o conseguir virus menos conlpctcntes . La combinaci6n dc dos NRTI reduce la \clocidad dc pro~grcsic ;n .1 SIDA a . la mucrtc en un 409) mas dc I a ; anos comparada con la n1onotcrapia . Las combinacioncs dc NRTI c inhihidorcs dc las protcasas tambicn ban denlostrado scr wiles a nip cl clinico . La conabinacion de multiples NRC1, NNRTl c inhibidorcs de Ix-,

proteasas consiguc prometedores electos antivirales, adcnlis de un aunlento inapresionante a corto plazo Lie ]as cifi-as dc cclulas T CI)4', que puede SCI. util a ni\el cluaico . TOxlaaia no csta claro cuando sc debt cnlpczar cl tratimien to, aunque la mayoria dc los medicos actuan cnanlio las cifras dc ( .D4 oscilan rcpctidamcnte entrc 200 \ . 400,r 1111 1 . en todos los pacicntcs sintonlaticos . Los ni\cles dc ARN del ~'IH cn sucro tambicn influvcn sobre esta dccisicin . El CoStC incluso de Is 1110 noterapia rcsulta prolaibitis o para la mayor parte de los paiscs cn desarrollo . Como hasta el nlonlento no Sc disponc dc cacuna ni dc trattmicnto curati\o, nuestra principal arnla cn la actualidad . cs Li prca cnci6n mcdiantc education sanitaria a control dc la in
Iccci~in .

Fig . 22 .8. Caracteristicas frecuentes del SIDA . 1) Multiples lesiones de sarcoma de Kaposi en el torax y abdomen . 2) Radiografia de torax de un paciente con neumonia por Pneumocystis carinii, con un patron interstitial bilateral . 3) Biopsia del intestino delgado de un paciente con diarrea por Cryptosporidium, que muestra formas intermedias de criptosporidios (pequenos puntos rosas) en la superficie mucosa .

4) Tomografia computadorizada (TC) del craneo de un paciente

con toxoplasmosis cerebral . El paciente tenia antecedentes de convulsiones y debilidad del brazo y pierna izquierdos . La inyeccion de contraste demostro presencia de una lesion anillada que se reforzaba con contraste en el hemisferio derecho, rodeada de edema (area oscura) .

Inmunodeficiencia secundaria

~Por que son inmunosupresores los farmacos antimitoticos? 4Esperaria que los efectos de la ciclosporina y la rapamicina fueran aditivos, no aditivos o sinergistas? 0 Si fuera dirigente de un pais en vias de desarrollo con un presupuesto limitado, Zcuales serian sus prioridades de gasto para reducir las enfermedades infecciosas? ~Cuales son las consecuencias de las rapidas mutaciones de los virus ARN como el VIH?

Suponiendo que se pudiera transfectar las celulas con nucleotidos sin sentido combinados con el ARNm de las proteinas reguladoras del VIH, Zque celulas emplearia como diana para conseguir el maximo beneficio para el paciente?
~Que nutrientes consiguen mejorar la inmunidad,

administrados en pequenas cantidades?

4Cuales son los cambios mas habituales en el sistema inmunitario en situaciones de malnutricion calorico-proteica? 0 Si Listed cuidara de pacientes criticos y ancianos, que estrategia nutricional podria mejorar su salud y reducir el riesgo de infecciones?

LECTURAS ADICIONALES

Chandra RK led) Nutrition and Immunology St John's, NF, Canada ARTS Biomedical : 1992 Chandra RK Nutrition, immunity and infection Proc Natl Acad So USA Chandra RK Graying of the immune system Cr :-I improve immunity m the elderly? JAMA 199 ',
1996,93,14304-307 . 277 1n98-99,

Gershwin ME, Beach RS, Hurley LS Academic Press; 1984

Nutrition and Immunity.

New Yorl

supplements

Hiperse nsibilidad de tipo I

En los individuos atopicos/alergicos se produce IgE tras el contacto con cantidades muy pequenas de alergenos ambientales inocuos (polen, escarnas de origen animal o acaros domesticosl . Las IgE se unen a los mastocitos a traves de receptores especificos (FCt :RI) . La interaccion entre las IgE fijadas a los mastocitos y el alergeno induce la liberacion de los mediadores que contiene el mastocito (autacoides, citocinas), que son los que clan lugar a los sintomas clinicos de la alergia . Algunos ejemplos tipicos de reacciones alergicas son la fiebre del heno, el asma, el eccema atopico, la alergia a los farmacos y la anafilaxis . Entre los tratamientos para estas reacciones se encuentran los antihistaminicos, los broncodilatadores, la adrenalina, los corticosteroides y la inmunoterapia especifica . Los estudios epidemiologicos en grupos familiares, especialmente los de concordancia entre gemelos, han demostrado que la produccion de IgE es debida a una predisposicion genetica a la induccion de respuestas inmunitarias cle tipo TH2/IL-4 ante la presencia de alergenos. Los factores ambientales (grado de exposicion al alergeno, infecciones viricas o contaminacion ambiental) modifican y determinan la intensidad de respuestas de IgE y de sintomas clinicos . " Ell origen evolutivo de la IgE puede estar relacionado con la defensa frente a los helmintos parasitos. Su produccion como respuesta a los alergenos da lugar a reacciones alergicas, que se pueden considerar un lamentable efecto secundario de la activiclad normal de estas moleculas .

23

I I tcrrninu hipcrsensibilidad SC apIICd ;t ht's situacio)nrs cn la, yuc SC prordtICC un ;t respuesta inmunitaria atlaplatna esagcracla t, in adccuada . Las reacciones tic hipcrSCnsibilidad Son COnuCCUCncia del m,11 :()trtp()rt .utticnto dc rcspucstts innntnitarias normalmcntc bc. ncfiiioosas, c a cC :cs I1Cg;ut a prMoc;u - rcacciuncs inflamaro)rias \ Icsi(ntes tisulares . Estu rea:tio)ncs puckIen set proaftrCidJs 1101- tnttJtors .lg; los agcntes con :apa Jdad pact pro\oCar hipCrSCnsibilid;tl

>nn dilcrctucs en Cada intjn iduo . I _ ;t IlipCI-sClINillilitiad 110 SC 111,111i fiesta tras la prinicra cslxnicion it :\g, Sino title suclc apareccr tras un ContaCto posterior . ( ox)ntbs \ bell oiCsCrihiCn)n :uMro) reaccioncs tic hipcrscnsibilidad I tipos 1, 11, I I l N 1\ l, pcro cn algunas ocaSioncs en la practica estas catcgurias se superponen unas coil otras. Los trcs printcros tipo )s tic rcaccioin cstan mctiiatlos por anticucrpos; . ell CI Warto) tipo Intel icnCn hts :ClUla', T s lox nlaCroit .t,os. I-ts rcacci(nCS 11C IIi)CrSCnSihiIidad do tip() 1 Linntccliatai sc lv-ordu :Cn :u :tndo SC dCSCnC .tdcna un ;t rCShucata do IgE. contra ;tgcntcs ambientales inocuos, como cl polen, Ion .team)" del pins() tiomcsticu o les cscarnas cutancas dc animalcS . La consiguiente li bcraci(m dc mctiiaclorcs con actin idad farmacologi :;t por parte tic lus ntusto)ciros Scnsibilizados pon laS lgF prodUCC una rcaccion in-

llamatoria a,, uda, yuc da lug;tr a Suu(ntas Co)nto CI asnm () Lt rinitis. Las rcac :ioncs tic ItilurSCnsibilidatf tic til)() 11, o) cit(no\iCa dcpcntjicnte dc anticuerpos, sc prOdUCen :uando un Ah, -'CncralrncntC IvG, Sc unc a A, propio)s o) ajcno s situados SubrC Su perljcics :clularcs, :on la Cortsit:uientc Artisa :ion tic Icos tagocitos, LIS celulas aSCSinas o) la lists tnrtilada pur CI C0ntplentcnto) is, cal, . 24, . Las rcaccio)ncs tic luhCrscnsibilidad dc tipor III aparcccn cuando sc prudu:Cn grantics cantidatics de inntuno)cornplcjos o cuando cl sistCma reticulocndutclial no es capaz tie Clintin ;tr loo quc hat a prCSCntCS . I() (]Lie da I agar a reacciones dcl tipo tic la cnlcrmrtiad del sucro i s. cap . 25 ) . I as manitcstaciuncs nras gra\cs de la hipersensibilidad dc tip() IV o) hipcrscnsibilidad tie tipo) rctartfado i HTR I w produccn Si algun()s antigc nos i p. cj ., Ion tic los ha :ilus dc la tubcrculosis) gUCtl;ut atrapado. en IOS mau'0tagos \ It() puCCiCn set destruidOS . (onto Co)n"CLUC11Cia SC produ :C una Cstirrtttlacion tic LIN CCIUIaS l, title prOdu:cn CitOcinaS me diatioras tic una antplia ganta tic fcnoimcnos inflamau)rio)s . ()trots aspcctos tic ] .is rcaccio)ncs H'I R son ci rccltazo do trasplantcs \ la ticrnruitis alert ica por contacto (s . cap. 26 . Los cuatro tip( tic rc aCCioncs tic ItipcrscnSibilidad Sc rcsumcn en la J aurri 2.,. 1 i.

Resumen: Los cuatro tipos de reacciones de hipersensibilidad tipo I

al%" r;~err-

antigeno (1e

tipo 11
a siip(rrticic

tipo III celular

dcy ;(aito u ;e nntunu I

tip0 IV

celula ~', dianal go * efecto cltotoxlco

-if ItI~-' . . ~.f0?I

;,

complejos -_ f,

C`

desgranulacion de los mastocitos y liberacion de mediadores

I sin meo ad ; : per el complemento

')

vaso sanguineo

macrofago activado

Fig. 23 .1 . Existen cuatro tipos de reacciones de hipersensibilidad. Tipo I : Los mastocitos se unen a las IgE mediante sun receptores de Fc Cuando se produce la exposicion al Ag las IgE se entrecruzan, induciendo la desgranulacion y la liberacion de los mediadores que provocan las reacciones alergicas . Tipo 11 : Los Ab son especificos de Ag de las celulas del propio individuo (celulas diana) o de Ag ajenos, como eritrocitos transfundidos. Esto puede provocar efectos citotoxicos por parte de las celulas asesinas o la lisis mediada por el complemento. Tipo III: En primer lugar se

produce on deposito de inmunocomplejos sobre los tejidos . A continuacion, se activa el complemento y los polimorfonucleares son atraidos hacia el lugar en donde se ha producido dicho deposito, provocando lesiones tisulares e inflamacion . Tipo IV : Las celulas T sensibilizadas previamente por un Ag liberan linfocinas cuando son expuestas de nuevo al mismo antigeno . Estas citocinas provocan reacciones inflamatorias y activan y atraen a los macrofagos, que a su vez liberan man mediadores inflamatorias.

Hipersensibilidad de tipo I

HIPERSENSIBILIDAD INMEDIATA DE TWO I

La hiperscnsibilidai de tipo I sc caracteriza por una reacci(in alcr(,ica i, .hq . 23 .21 clue aparece innaediatanicntc despucs Lie la cxposici(in a un antigcno, quc se dcnornina alergeno . El tcrnaino alcr gia file aCUiaado cn 1900 por Von fircluct, significa ,rcactiviciacl an<ina,ala  del huespeci ante cl C(ntacto coil Lill , as habia silo expuesto pros- iantcntc . Von PirquCt no CstabICCi() limitacion aleuna accrca del tipo dc rcspucsta innttrnitaria clue Sc produce cn cl Itucspe(i . I.a asociaci(')ii entre , .alergia- c hipcrscnSihilidad (3,e tipO I Cs 111 .1', FCCICntC .

cxtrajcron suero dc Kiistncr i quC era alergico al pcscado l to inscctaron cn la picl dc Prausnitz. AI imccrar m;is tardc uuigcnos dc pescado en la region scnsihilizada, SC prOClujo innae(iiaGUcntC una reaccion de hinchazon s critcma. ( Esic cxpcriincttto cs parccid(r a la prucha cic anafilaxis cutanca pasis a I A(a' J, quc se utiliza para detectar la produccion de IgE : cn anintalcs de cxperimcntaciom.h PraUSnllL Kiistncr i,nrl,usierOn la cxistcncia dC una <" rcagina atoLie I(n in(lici(iuO, alcr,,icos. Unos -1 anos nals pica- en Cl SuerO tardc, Ishizaka \ coos . aislaron csta , rcagina ito pica ,, y dcntostrtron quc se trataba (3,c una rnr0a iIASC cic inntunoglc(hulina, la IgE.

Atopia : un termino muy amplio clue abarca el asma, los eccemas, la fiebre del heno y la alergia a los alimentos

Las reacciones de hipersensibilidad de tipo I se producen tras la estimulacion de los mastocitos sensibilizados con IgE por pane del alergeno

El tcrmino atopia- tire utfizadO por printcra ccz en 1923, por (cxa \- ( cx(kc para cicscribir las prcscntaiioncs clinicas dc ]as rcaicicates Cic hipcrscrtsibiliciad (3,c tipo I, entre I;ts clue se enCuCntran cl asma, los eccemas, la fichre del heno, la urticaria s las alergias a los alirrcntos . Estos lenointcnos se suelcn prodUCir en indisjduos con anteccdcntes tamiliarcs do cstos trastornos o do otros sintilarcs ; acicrnas, cstos pacicrites mucstran rcaccioncs cuLie tancas innacdiatas dc hinchazon y critcma tras la inycCcion alergeno', anibientales Cctnnutes. 1 lace va ntttcho ticntpo quc se sugirio clue ill anafilaxis cic los anintalcs, cicscubicrta por Porticr y Richct en 1902, cstaha rclaciOnacfa con la fichre dcl heno ~' cl asma dc los scrcs hunranos, pero tanthicn se obscrxci quC mientras clue cl 90 9 0 dc los anintalcs prodUcian antiCUerpos precipitantes tras la inscccion de protcinas o toxinas ajcnas, solantcntC Lin 10-20% do la poblaci(in Inirnana clueciaba sensibilizacla tras la exposicion a un alergeno Suspcndicio cn cl airs . ()tra diterencia importantc cs quC ha alcr gia Ituntana prcscnta un importante componcntc lict-cclitario, Clue no sc obscrro (cn aquellos moritcntos1 cn los tcnontcnos attafiI icticos jnducidos en anintalcs. Por tanto, en un printer rttontento sc pens( clue [as i-caccioncs alert pia hurnana Iran fcncimcnos difercntcs .

Las rracci~ncs -u .actcrmicts dc la laihcrsrnsibilidad dc tih() I sc Ill OdUCCn COntO C(H1SCLUCIlCid do la Csrintttladon CspCCtfca cic lus mastocitos scnsihilizaclos con IgE por parte de Lilt alergeno . Los mastocitos libcran ntcdiadotrcs coil acti\iciad tarmacolcigica quc clan lugar a las rcspucst:as inflantatorias tipicas Lie cstas rcac

clones de hipcrsensihiliciad i / irf. 2,;.31. Recicntctncntc sc han 11c\-ado a cabo importatnes expcriLine mentos Clue Iran denlOSCr'ad0 en Cl proccso de actis-acion dc k>S masarCitos medi ;uio por It E- sc libcran tarnbicn diccrsas Ci tocirms multifunci(nales . IL-3, c It. -4 pucden cjercer importantes CfCCtos autOCrinos sobre el propio mastocito \', ell colaboraejon con (atlas citocinas, pucden facilitar la produccicin do IgE por parts dc ]as celulas B . Adcmas, cxistcn dis crsas citocinas, entrc las quC SC CncuCruran IL-5 v los productos do las fantilias gcnicas Cic IL-8 c IL 9, Clue pucden scr intportantes cn los proccsos quinti(aniCtiCOS V en la actixacioin do las celulas inflarnatorias cn la zona do la reaccjon alcrgica . Sin embargo, no has quc olsidar clue cl papcl exact(, quc dewnipenan in rir(r ] .is citcacinas procecicntCs tic ION rtl;1NIOCilos no SC c011000 t0das la,

INMUNOGLOBULINA E
l'na xez quC un alergeno establece CcntaCto Coil una supcrficic ntucosa sc produce una complcja scrie de acontccinticntos quc fin;tlmentC tienC Corm() resultado la prcxiUCCion (3,e IgE. I a rcspucsta de IgE cs un acontccimicnto local quc SC Pr(xiUCC cxClusixanacnte en el punter cn quC CI :alergeno penctra cn cl organismo, es decir, en las supcrficics rnucosas y o ell los ganglios linfaticos locales. 1'ara yuC las celulas R l,roxiuzcan It E cs precisa la prcsentacion del alergeno por parte dc las celulas presentadoras dc antigenos 'CPA!, asi conto la colaboracion cinrc las celulas B s las celuhs Ttr2 is- .l?rf. ?3,.31 . Las I'", pr(xiucidas a nis- cl local scnsibilizan en printer Ittgar a los mastocitos localizados en csd zona ; la IgE ~gsobrante pasa a la circulaci()n V SC Line a los receptores espccifiCos Lie los basofilos circulantcs y do los mastocitos tisularcs quC se rncucntran distril,uidos a to largo dc t(ado cl organismo. l'na caractcristica importante do [as IgE CS Su alta alinidad dc union a tras- cs de sus ciorninios Fc a los mastocitos s' a los bas(ifilos. Asi, aunquc la sernisida cic la IgE librc en suero cs solo cic unOS pocos dias, los mastocitos pucden clucdar sensihilizados por la IgE durante ntescs cichiclo a la alta atjnidad dc union cntrc csta s ell receptor Fct:R1, clue exita la ciegraciacicin tie cstas inrnunoglobulinas peat' parte Lie Lis proteasas scricas i cl receptor FcrR11 prcscnta una afinidad mucho mas haja por las IgE 1 . Todo csto file dcntostradu clcgamemcnte en leas experintentos pioncros Lie Stanscorth . Para ello scnsibilizo docc puntos cutlneos ditcrcn tes cic sit propio hrazo coil suero atopico. A Continuacion expuso cacia scinana uno dc estos puntos al antigcno correspondientc, cfurantc trcs nacscs. En cada una cic cstas cxp(asiciones, incluicla la itltinaa, Sc produjO inntcdiatantcntc una reaccion do hinchazon s' critcma, coil to quc qucdoi dcmostraclo clue trcs ntescs dcspucs de la scnsihilizacion tociasia clucdaba una canticiad intporLie tantc IgE unida a IOs mastocitos cutancos rcgionalcs .

La alergia esta mediada por las IgE

L;t prirncra dcsiripci(m lief mc-miser, dc ias rcaccioncs alergicas tits prcsentada por Prausniti s Kiistncr cn 1921 . Estos inxcstigaclorcs

Fig. 23 .2 . Respuesta anafilactica al veneno de abeja . -,reaccion inmediata es un excelente ejemplo de una reaccion Lie hipersensibilidad de tipo I debida a la liberacion de mediadores con actividad farmacologica por los mastocitos, entre los clue se encuentra la histamina . Se aprecia una reaccion localizada frente a una picadura facial . Cuando el alergeno es inyectado en lugar de scr inhalado, la reaccion puede desembocar en un proccso anafilactico generalizado e incluso provocar la muerte . Esta reaccion puede agravarse por la melitina clue contiene el veneno de abeia, clue estimula tambien a los mastocitos mediante mecanismos no inmcrnitarios.

Inmunoglobulina E

Resumen : Inducci6n y mecanismos efectores de las reacciones de hipersensibilidad de tipo I

CPA 1

-, procesamiento , - - y presentation

efectos farmacoldgicos vasos sanguineos, vias aereas, etc . infiltration y acumulaci6n celular (v . figs. 23.14 y 23.20)

efectos clinicos fiebre del hero asma IFN-1 presentation de antigenos f ' production de IgE L ' 1 I activation de los mastocitos
GM-CSF, TNFa, nrtivnri6n ~!n Ins eUaS inf1B Tiab ;rias

liberation de mediadores

efectos clinicos

Fig . 23.3. Los Ag ambientales inocuos (alergenos) penetran en el organismo a travel de las superficies mucosas y son ingeridos por las celulas presentadoras de Ag (CPA) locales, que los procesan y los presentan a las celulas TH . Las celulas TH2 secretan citocinas que inducen la proliferation de las celulas B y promueven el inicio de una respuesta de IgE especifica del alergeno . Las IgE se Linen a los receptores de Fee (FCERl) de los mastocitos, y estos ultimos quedan sensibilizados . Cuando el alergeno contacta posteriormente con los mastocitos sensibilizados se produce el entrecruzamiento de las IgE

unidas a ski superficie, to que induce on aumento de la concentracidn de calcio (Ca z , ) intracelular que desencadena la liberation de mediadores almacenados, como la histamina y las proteasas, y la sintesis de otros mediadores lipidicos, como los leucotrienos y las prostaglandinas. Estos autacoides clan lugar a los sintomas clinicos de la alergia . En la desgranulaci6n de los mastocitos se liberan tambien citocinas, que pueden potenciar la respuesta inflamatoria y la production de IgE .

En las enfermedades alergicas las concentraciones de IgE se encuentran elevadas Las omcentraciones do Igl, en Ios pacicntes ton entcrmctiades alergicas suclcn SCr altar, V .11111 mil en Ios yuc h,idcecn intecciones parasitarias . Cuando sc cxamina a o adultos pant comprobar si padccen alguna Cntcrmetiad ate'~pica, una concentracidn eletada tic IgE pucde scrvir para oricntar el diagndstico, aunquc una concentracidn normal no CXCluvc la presencia tic atopia ifiq . 2.i .4) . Hay que tenor presente que una dctcrminacicin tic IgF. aislada no sirvc para cstablecer kill diagndstico tic alcrgia, va yuc existen factorcs gcneticos v ambientales que tambien dcscmpcnan kin papel importante en la exprcsi<in de los sintomas clinicos . I'm a todo, es muv probable quc kin pacicnte con una concen tracidn mud- clevada tic IgE en cl clue sc hava CXCluitfo la presencia tic una infcccicin parasitaria padezca una enfermedad alcrgica . Cuando se Ilcvan a cabo prucbas cutancas en grupcrs nunterosos, el numero tic resultados positivos cs muv superior al de in ditiduos que presentan sintomas alergicos . En kin estudio recientc Ilcvado a cabo con kin grupo tic 5 .000 individuos clcgidos aleatoriamentc sc ha comprohado que kin 30%, tic cllos prcscntaha reacciones cutaneas positivas fi-ente a uno o mar alergenos CUmU nes . Por tanto, estos individuos producen IgE: especifica, pero carecen tic algun factor (factor X, \ . ./iq. 23.2?) ncccsa6o para que se descncadcnc la esprcsion tic Ion sinttimas clinicos tic la atopia . La production de IgE esta sometida al control de las celulas T colaboradoras En los estudios mas antiguos ya se sugirio que ciertas celulas T asupresoras ejercian una funcidn reguladora Los estudios Ilevados a cabo por I acia \ co k . a principios tic la detada tic 1970 dcmostraron la importancia do ]as celulas 1 cn cl control tic la produccidn do IgE . Los animalcs inrmmizados coil

cl antigeno I)N1'-Ascar-is(con Bordcte11a pe)-tussiscomtr advuvante) mostraron kin aumento tic los titulos tic IgE quc alCanzaha ski valor maximo entrc cinco y diez dias despucs tic la exlxrsicion, volviendo la concentracidn a la normalidad al cabo tic scis semanas . Cuando se timcctomizaba o irradiaba previamcntc a los animates, la respuestt de It E era nuis intcnsa v prolongada . Ademds, si durantc cstc pcriodo de prociucciixt potcnciada do IgE: sc administraba a los animalcs timectomizados timocitos o celulas tic bazo procecientes de animalcs expuestos previamcnte a Ascaris, la produccion de IgE se intcrrumpia (/!q . 23.51 . Estos hechos Its Ilevaron a proponcr clue la SUpresicin tic la respuesta tic IgE era debida a I,t actividad de determinadas celulas T suprcsoras presenter en la poblacitin tic celulas transferidas, una actit idad yuc habia sido anulada pre\iamentc mcdiantc la timectomia o la irradiacidn . Las concentracioncs tic IgG e IgM no sc modificaban tras la transfcrcncia cclular, to clue ticmostraba quc las rcspL1CStas tic IgE Bran especialnrente sensibles a los efectos tic las prcsuntas celulas T suprcsoras . Otros experimcntos hall demostrado quc la timectomia en el momento del nacimicnto anula totalntcnte la capacidad tic las ratas para producir IgE especifica tic 1)\ f-Ascaris, to que indica clue para la induccidn tic una respuesta tic IgF: son necesarias I,ts celulas TH . Tantbien se ha sugerido quc en determinadas situacioncs clinical cxiste una asociaci6n entrc los rccucntos bajos tic Celuhts T supresoras v [as concentracioncs clevadas tic IgE, lo clue indica quc en Ios sores Irumanos cxistc kin cicrto control tic la produccidn tic IgE por partc tic ]JS celulas T . El efecto supresor esta mediado por las celulas TH1 En la actualidad sc sahc quc Ias CCIUIas cncargacias tic la regulacidn tic la produccidn tic IgE que observd Tada pcrttnecen a determinadas subpublacitmcs tic Cclulas TH que prodUCcn perfiles tic citocinas definidos . En la fcqura 23.6sc mucstran tic forma simpli-

Hipersensibilidad de tipo I

Concentraciones de IgE y enfermedad atopica 100 T 1 80 60 40 20

IgE serica total (UI/ml) 10 .000

w

1 .000

i. i

100

10

0valores normales

fiebre del heno

rinitis alergica

asma

eccema atopica 2

individuos atopicos poblacion general

-- :60

60-200

200-450

450 IgE serica (U l'' m1)

Fig. 23 .4 . 1) La concentration serica de IgE (que viene a sec de unas 100 Ullml) es 105 veces menor clue la de IgG (aproximadamente 10 mg/ml), y supone menos del 0,001% de la de las inmunoglobulinas totales . Las concentraciones en los individuos atopicos tienden a ser elevadas, especialmente en el eccema atopica ficada los mccanismos celularcs s. moleculares implicacios en este proccso dc regulation . t)bscrvcsc yuc cl pcrfil de citocinas yuc prodLICCn ]as cclulas Trt2 i IL-3, 4, S, 9, 13 ;1 csta coclificado cn un Conjunto dC genes que en los sores humanos se entuentra si tuado en cl cromosoma 5 v en los ratones en el cromosonaa 13 .

(1 UI = 2 ng). 2) Cuanto mayor es la concentration de IgE menor es el porcentaje de la poblacion, pero mayor la probabilidad de padecer atopia . Cuando las concentraciones son superiores a 450 UI/ml la mayoria de los individuos son atopicos .

F.n esperinacntos con ratoncs sc ha dem(astrado cl papel csencial (put (icsempcnan cstas citocinas in vivo . - Fanto la administraCi()Il CIC antiCUcrpos frcntc a IIA coma la adnajnistracion dc IFNy prodUCCn unu inhibition do las respuestas de IgE . Adenaas,

Control de las celulas T sabre las respuestas de IgE: primeros estudios tratam . previo A control B timectomia C timectomia IgE especifica (unidades 6arbitrarias) 4 2 0-1 0 1 2 3
A

eel. T supresoras

I()s ratones transgcnic(as h(maocigotos con respecto a unu rnutaCi(in quC inaCtica Cl gcn dC 11 .-4 no sort capaccs dc prociucir lgF: Cuando son intectados con ncrnatodos . l .a administration dc IFNu f yuc product rnCnos CtCCtos SCCUndarios quC CI IFNy l a los pacicntes con sindronre do laipcrinurtu1oglobulincn1ia E tambicn induce una rcduccirm dc las c(mcentraci(mcs scricas dc IgE. I ,Oda\ia no se conocen los mecanismos mcdiantc los cuales IIr4 C 11 .-13 111(IUCCn la coil mutaci(in quc Ilcs -a a la production dc IgE Ixar partc do ]as CcIUlas B . Es notable cl laccho dc gtrc las cclulas 1) 12 tambicn protiucen 11. 5 ;, que pronure\'C la sintesis y la secrccicin de Ii,,-1 par parte tie las cclulas 11, ademas de ser csencial para cl dcsarrollo \ la supcrsicencia de los cosin(')filos cn las z(naas dc inflamacion . Esta pucdc ser la razcin tic la tipica asociacion yuc csistC cntrc la cosinofilia \ las reacciones alcrgicas mcdi:uias par IgE (s . tambicnfua( . 23.20-23.221 . No cabe ducla de clue la alteration dcl perfil dc citocinas producidas o cic sus etectos pucdc constituir en cl firturo una cstratcgia util para cl tratamicnto dc ]as cntcrmcciacics mCcliadas par IgE.

4 5 semanas

GENETICA DE LAS RESPUESTAS ALERGICAS HUMANAS

(;icrtos cstudios Ilcrados a cabo to la deCacia cic 1920 clcmostraron clue los indis iduos Cua OS haclrcs son alcr;gicos ticncn rnds tendencia :a padecer alergia quC aquCllos cusps padres n(~ to son. DC hccho, Ni tanto cl padre c(rm(r la madre son alcrgicos, la probabilidad dc quC tut hijo strso to sea Cs superior al SOW; 1nCluso sicndolo solo ono dc cllos, la probabiliclad cs cic ilrcdcdor dcl 30", 1, Por canto, los anteccderucs alcrgicos dc los padres Constitu\'en un factor dc riesgo para la atopia . Sin embargo, los estudios en genaelos han demostrado clue los factores gcneticos no esplican par complcto cl cicsarrollo LIe la cntermedad atopica i_/iq . ?3 . ") . t)bscrsrsc quo: tambicn C\istC una scric tic tactorcs no gtnClj cos clue desenapc.ua un papcl nt(n inrportantc cn cstas rcacciones,

Fig. 23 .5 . Las respuestas de IgE estan sometidas al control tanto de las celulas T colaboradoras (TH) coma de las celulas T supresoras (Ts) . Se utilizaron tres grupos de ratas: un grupo de control (A), que no recibio tratamiento alguno durante la semana previa a la exposition antigenica, y otros dos grupos que fueron timectomizados previamente IB y C) . Tras el estimulo antigenica se determinaron a intervalos regulares las respuestas de IgE. La concentration de IgE especifica de los controles aumento transitoriamente despues de la exposition al Ag . La timectomia (o la irradiation) da lugar a una respuesta prolongada (B), que puede sec contrarrestada mediante la administration de celulas de bazo sensibilizadas frente al Ag, entre las clue se encuentran celulas T supresoras (C) . En ratas timectomizadas al nacimiento no hay respuestas de IgE; asi, la presencia de celulas T es csencial para clue se produzcan dachas respuestas .

Genetica de las respuestas alergicas humanas

como cl grado dc exposition al alcrgcno, cl cstado de nutrition del indisiduo y la presencia dc infecci(mes cronicas sub\acentcs o de intcccioncs viricas agudas . En Cuanto al grado do csposici(in, cada indiriduo so %c Czpucsto anualtncntc a aproximad:uttcntc 1 ug dc polcnes suspcndidos en el airc . No deja dc resultar sorprendcnto quc alrcdcdor dc un 30"i . de la poblacihn presentc rcsPuestas frcntc a estas dosis cstraordinariamente bajas dc alcrgeno . Los nteranisnurs genctico~s regulan tres aspcctos do lax rcspucstas alcrgicas : " La conccntracirm total do IgE. " Las respuestas cspeciticas :t lox alergenos. " La Itiperrcact(sidad generalizada .

La concentracion total de IgE depende de factores geneticos LI Cstudio~ (Ir gruh<rs tamiliares c LiC luTntutos ,cmClrr, Ira .ICnu~str.ul(r sin dada al-una quc lax CUnCCntr'3CionCS tOtalCS dc IgE \icucn tictcrminadas por factores geneticos. ('omo lax Cclu lax Ti 1 2 \ lax citocinas quo i)roduccn Cstas celulas prrrrrrue\ Cn lax rcSI,LICStas do: IRE, en un principio n( r carccia dc Ibgica buscar una rclaci(in entrc lox marcadorcs geneticos del , grullo de genes do: la citocina IIA~, s . la concentracion dc Igl-: total s, espccifica . Este estudio fire Ilesado a crbo por David Marsh c cots ., quc tollfirmaron quC CtcCticamCnto Cxistia una relaci()n dc este tipo . 1)cmostraron Clue IL-4 y,,,o cl prOCluCto (IC otro gen do csta mis-

Resumen : Control ejercido por lax citocinas sobre lax respuestas de IgE

fundamentalmente presentacion de antigenos

fundamentalrnente presentacion de alergenos ( IL-4 IL-13 THO ) ;) Fig. 23 .6 . Las citocinas presentes son lax que determinan que tipo de subpoblacion de celulas T se generara a partir de lax celulas THO y, en consecuencia, como se comportaran lax celulas B. Asi, el predominio de IL-4 e IL-13 favorece el desarrollo de las celulas TH2 y la conmutaci6n de lax celulas B para producir IgE . La production de IL-10 por parte de lax celulas TH2 inhibe lax respuestas de lax celulas TO a traves de su efecto sobre lax CPA, y mantiene y potencia la respuesta TH2 . Por tanto, [as respuestas TH2 promueven la production de IgE ante la presencia de alergenos. Por el contrario, lax respuestas TO frente a antigenos convencionales como el toxoide tetanico se ven favorecidas por la production de IFNy e IL-2, que ademas inhiben el desarrollo de lax celulas TH2. Las respuestas TO promueven la production de IgG2a y la inmunidad mediada por celulas T.

Herencia y factores ambientales en la atopia antecedentes familiares y riesgo de atopia ninos 50 con atopia 1 0 1 40 concordancia entre gemelos resp. a enferm . atopicas concordancia (ol n. de parejas estudiadas 2,869 5-039

30 50

20

ninguno uno ambos numero de progenitores con antecedentes de alergia

MC 2

BC

Fig. 23 .7 . 1) En lox individuos alergicos suelen existir claros antecedentes familiares de atopia . En estudios Ilevados a cabo con un gran numero de pacientes se ha confirmado que cuantos mas antecedentes familiares de atopia existan mayor es el riesgo de que Lin individuo padezca esta enfermedad . 2) La concordancia con respecto a lax enfermedades atopicas entre gemelos bicig6ticos (BC; no identicos) es ligeramente mayor que la que se observa en la poblacion general (aproximadamente un 30%) . Sin embargo, la concordancia entre gemelos monocigoticos (MC; identicos) es bastante inferior al 100% que cabria esperar si el genotipo fuese el unico factor determinante del desarrollo de atopia . Estos dos hallazgos sugieren que para que se exprese una enfermedad at6pica son tan importantes los factores geneticos como lox ambientales .

Hipersensibilidad de tipo I La hiperreactividad generalizada y la especifica estan ligadas al HLA

ma region del cromosonta _ ; rcgulan la conccntracion total dc IgE pcro no la dc IgF. cspccifical . Rcsulta intcrcsantc quc 011-as rcgiones del cromosoma 5q tambicn intcrsienen en la regulaci(')il do la hipcrrcactisidad hronquial' cl control Lie] gcn dc los rcccptorcs adrcncrgic(rs do tipo (32 . Adams, sc ha Iocalizado otro posible rnarcador relaci(mado con Cl aSnla r la sensibilidad atopica cn cl cr(mursoma I I q .1 .,, marcador quc parccc rclacionado con cl polimorfismo dc la cadcna [i del FcrRI .

LOS GENES QUE CONTROLAN LAS RESPUESTAS ESPECIFICAS FRENTE A LOS ALERGENOS ESTAN LIGADOS AL HLA
I'arCCC (]tic Ios I,rincilrtlcs tact((rcs ]tic c(mtr()Ian las respucstas cspccificas dc IgE estan codificados por Ios genes dc la rcspucsta in munitaria I RI } hgados al H I .A . Esto cs csPccialntcntc cicrto en cl caso dc exhosicioncs a dosis n1LIC hajas dc alergcno, y espccialrnente cn las respucstas rrentc a deterntinantcs secundarios de hajo peso molecular . Por ejcmplo, naas del 90'%, do los indis iduos quc prcscntan respucstas dc IgE trcntc al aicrgcno Amb it V i5 kdal ) do la ambrosia posccn cl haplotipo I ILA D\%2 i_hq. 23A . Sin embargo, no sc c<nurcc inn guna asociacion con cl HI .A ell los indiciduos yuc rcslxnuicn ul alergeno Amb a 1 138 kdal ;, nras abundantc y de rnavor tarnano . La asociacion cs mas intcnsa cn cl caso dc Itrs anticucrpos IgE . ]as pruehas cutancas de hiperscnsibilidad innxdi ; ta quc para I(rs anticucrp(>s IgG . Sin cnilbargo, tras la hiposcnsibilizacion a la ambrosia solo los indis iduos I II,A 1)ss -2 4111b a V" prcscntan pumas respucstas de IgG, to quc dcmucstra yuc la LCs InICSU inmunitaria trcnte a Arab a V no dcpcndc solantcntc dc las IgE, sino quc cn clla pucdcn intcncnir tambicn (eras Ch1SC5 de inmunoglohulinas . Fin:tlmentc, rxistc un manor grado dc fit amicnto a HLA cuartc1o Cl jndisiduo prcscnta concentraciones hajas do IgE . Por cjcntplo, entre los pacicntcs alergicos a la ambrosia solo into do cada scis rcspondc al clctcrminarnc sccundario Arm a I11 . El 90',(, dc Ios pacicntcs Amb it III' con coil cell traciones hajas do IgE total poscc cl haplotipo I I LA-A2 (J a . 2.,' .91 . Cuando las conccntraci(ncs dc It E son masorcs csta asociacion HLA no cxiste .

Sc dice quc un IMIICIIIC hrr~rnt .i hihcrrc .tctisidad gcncraliiada cuando( sus prucbas cutancas son positisas trentc a una amplia gama do antigcnos . Sc hail Ilc\'ado a cab() estudios quc hail dcmostrado quc cstos pacientes posccn Ions haplotipos HLA-B8 y H I .A-Dss 3 con rnucha 111 .1\ or frccucncia quc los indis iduos norrn:ilcs, pcro carccen dc H I,A-A I . Tarnbicn sc aprccia un fenomcno do hipcrreactividad en Ios indisiduos (luc produccn anticuerp(~s Igl . frentc a la ambrosia, consistcntc ell quc los quc posccn HI .A-B8 prcscntan mas ores titulos de anticuerpos \ concentraciones superiores dc IgE total . HI .A 138 tarnbien esta cstrcchanicntc asociado con otras fornras de , hipcracticidad>, inmunitaria, conto, por ejernplo, las cnfcrmc(ladcs autoinmunitarias . Esto sugicre quc HI,A-B8 pucdc cstar ligado a los genes clue controlan la actis-idad supresora dc las cclulas "hen las respucstas inmunitarias, s a clue sc crce clue la disrninucion dc la actisiclad suprcsora csta rclacionada con las cnfermedacics autoinrnunitarias \ con las respucstas dc IgE .

Atopia : concentraciones de IgE y tipo HLA numero de 25 pacientes alergicos a Amb a III 20 15 10 5 0 30 100 300 1 .000 3 .000 IgE (Ulimli

Alergenos y asociaciones HLA nombre sistematico

Ambrosia Amb a I

pacientes 100 con HLA-A2 (o) 75 valor de p 50 25 0 2 A!. .t?

;1

nombre antiguo

peso mol. asociacion Idaltons) principal

II I

spp . (ambrosia)
Amb a III Amb a VI AmbaV Amb tV

AgE Ra3 Rah Ra5 Ra5G

37 .800 12 .300 11 .500 5 .000 4 .400

ninguno A2 DR5 DR2IDw2 DR2!Dw2

0,01 <10' <10 , <10'

cuartiles del titulo de IgE

Lolium

spp . (ballico)
Lol p I Lol p 11 Lol p III

Rye I Rye 11 Rye 111

27 .000 11 .000 11 .000

Dr3%Dw3 Dr3,'Dw3 Dr31Dw3

<10' <10 3 <10'

Fig . 23 .8 . Asociacion entre el HLA y las respucstas de IgE frente a la ambrosia y el ballico . (Por gentileza del Dr . D . Marsh .)

Fig . 23 .9 . 1) GrAfico en clue se muestra el numero de pacientes alergicos a la ambrosia (Amb a III') para cada concentration de IgE ; se pan senalado en diferentes colores los cuartiles de la distribution . 2) Grafico en clue se muestra el porcentaje de pacientes clue poseen HLA-A2 para cada uno de los cuartiles. En este caso estan incluidos tanto los individuos Amb a III' como Amb a III-. Da la impresion de clue la probabilidad de clue una persona sea sensible a Amb a III es mayor cuando posee HLA-A2 . Esta asociacion es mas acusada (es decir, el ligamiento es mayor) cuando las concentraciones de IgE son bajas . El 47% de la poblacion posee HLA-A2 .

mastocitos

Wit

MASTOCITOS
Sc sahc dcxlc hate ticntpo yuc Ion mastocitos dc las distintas cspccics presentan ciertas ditcrencias ntortblogicas. Estas ditcrcnci,ts no atectan solamcntc a la tbrnm en yuc se titicn las cclulas y a la estructura cstcrna tic sus granulos, sin( tamhicn ,tl mccanismo c\acto del pr(Kcso dc tlcsgranulaci(in . Esta ultima atirmacio'fn pucdc scr demostrada tauuisamcrnc ; cn los scres humanos las ntcnthranas (life ronlcan a loos granulos dc los mastocitos se tusioo nan antes dc la CV)citoosis C\(Kitosis :ontjunta(, nticntras yuc en [as ratas cada granular is ;\hulsad0 indi\idualntcntc i_liq. 23 ./(11. / .ors ntast0Cn(cs SC disidcn Of dots catcgorrias scgun su tiistri. bucion tisular, la li,rma cn clue sc linen s las prowasas tliic Coil tiencn ; mastocitos del trjido conjuntico I ( I \IC, tic] ingles crmnccth ,c tissrlc mast cells) I mastocitos de Inucosas ( JI\1C, del 23.12) . inglcs 11111G1S111 mast calls) (figs . 23 .11 'tamhicn csistcn ditercncias elf las rcspucstas dc estas doss subpohlaciomcs tic mastorcitors a los tarmacos yuc induces la dcs granulation iomo~fbros del ( :a=- , cl contpuestoo -18/80, etc. ) oo inltihcn la lihcration tic histamina Icromtoglicato de soalio) .

La clasificacion de los mastocitos se basa en su localization y en su morfologia

fl-.111d, (st

L(rs ( TIM( sc' rncueiur.t n en la m,twnia de I((s tejid(n, :onixn .(Ir:.ir.ion- dC ](IN \,ts(), s.ur ;uin0rs . Aunyt1c los CI'\R yuc SC rncuctur,ut cn tftcrctncs lugarcs prcsctnan proopicdades parecidas, la morti(logia general dc Ion (.TAIL pcritonc ;tles V cu cantos, par cjcntplo, pUCCIC difcrir kmantc en cuanto al nutncror 1 tarnano dc %if% granulos, la imcmiclad con yuc se linen N sits

pro>pictladcs tarmaco(logicas (c. figs. 23 .11 y ?3.121 . La distrihuci(m dc loos \1\1( : cs ditcrcme ; cn I(rs sercshunt,utos [as tnasores concentraciones do los mismos sc hallan en la mucosa del intcstino meclio \ cn loos pultnomcs . En cl cursor tic ]as inteccioncs parasitarias 11). cj ., ratas intectadas coil Nippuslrouuzvltrs brasilicusis) czistc fill Bran aumctYto del nuntcro dc \I\IC. prcscntes elf la mucosa intestinal . Este aurnentoo tamhicn sc obscrca en la cntcrmcdad (1c Croltn \ cn la colitis ulccrosa . l)c la misma turma, sc (rhscrsa fin auntctno del nuntcro dc ( :1 \t(' cn los espacion sinon Tales dc los pacicincs coil artritis reumatoidc . Sin embargo, no sc sabe con cxactitud yuc funciomcs dcsctnpenan los mastocitos en estas entcrmethdcs . Se ha sugeridoo clue lots prccursorcs dc lots \I\1C prooceclcn dc I(>s ganglion linlaticors ntcscntcrico,s clue drcnall Cl intestino, II clue migran hasta el a trascs tic] omducto toracico . Esta :laro clue la prolitcraciom dc ION \I\1(' en Cl cursor tic una intcccion parasitaria csta inducida poor las lintiocinas II--3 c IIA prorducidas par las cclulas T. Lots CIAW crcccn cn los cultisos dc capas dc tihro~hlaston sin Line sea ncccsaria la coolahoraciun dc las cclulas 1 ni dc tactorcs dcri\'ados tic las mismas . Rccicntentcnic sc lian ohtenido dates yuc indican title lo" \1\I( \ los CI \I( proccden de una mw-ma cclula precursorra, yuc sl1 tenotipo final dcpcndc dc tacto~rrs prcscmes cn cl nncroramhicnic cn yuc sc dcsarroollan .

Los granulos de los CTMC y los MMC contienen proteasas caracteristicas

Rccictnctnctuc sc Im clonado v sccucnciado una scric dc hr((tcas,ts dc I(rs grinul0s dc Ios mastocitos . I)os dc (alas, la triptasa \ la

Fig . 23 .10. Microfotografias electronicas de mastocitos de rata .

1) Mastocito peritoneal de rata irttacto, cuya membrana celular recubre estrechamente sus granulos. Microfotografia electronica de barrido, 1.500 . 2) Mastocito peritoneal de rata durance el proceso de desgranulacion inducido mediante incubation en presencia de anti-IgE durante 30 segundos . Microfotografia electronica de barrido, 0,500. (Par gentileza del Dr . T. S. C. Orr.) 3) Mastocito peritoneal de rata en el que se observan los granulos electrondensos . 4) Formation de vacuolas y exocitosis del contenido de los granulos tras la incubation con anti-IgE . Microfotografias electronicas de transmision, =2 .700 . (Por gentileza del Dr. D. Lawson .)

Hipersensibilidad de tipo I

Diferencias entre las poblaciones de mastocitos (I)

mastocitos de mucosas localizaci6n in vivo tiempo de vida dependencia de eels . T nbmero de receptores FCr: contenido de histamina IgE citoplasmatica principales metabolitos del AA; relaci6n LTC, :PGD, inhibici6n de la liberaci6n de histamina por CGS y la teofilina proteoglicano principal sulfato de condroitina heparina + 25:1 1 :40 intestino y pulm6n <40 dias (?) + 25 x 105 3 x 10 mastocitos del tejido conjuntivo ubicuos >40 dias (?) Fig. 23 .11 . Existen al menos dos subpoblaciones de mastocitos, los mastocitos de mucosas (MMC) y los mastocitos del telido conjuntivo (CTMC) . Las diferencias morfol6gicas y farmacol6gicas que existen entre ellos sugieren que deben ejercer diferentes funciones in vivo . Los MMC estan relacionados con las infecciones por helmintos parasitos y, probablemente, con las reacciones alergicas . Los MMC son mas pequenos que los CTMC, su vida es mats corta, dependen de celulas T, poseen mas receptores Fc, y contienen IgE intracitoplasmatica . Los granulos de ambos tipos de celulas contienen histamina y serotonina; el mayor contenido de histamina de los CTMC puede ser debido a que sus granulos son mas numerosos. Ambos tipos de celulas producen importantes metabolitos del acido araquid6nico (AA) (leucotrienos y prostaglandinas), aunque en diferentes cantidades . Por ejemplo, la relaci6n entre la producci6n de leucotrieno LTC, y prostaglandina PGD' en los MMC es de 1 :25, mientras que en los CTMC es de 1 :40. Los efectos de los farmacos sobre la desgranulaci6n son diferentes en los dos tipos de celulas . El cromoglicato de sodio (CGS) y la teofilina inhiben la liberaci6n de histamina por parte de los CTMC, pero no por parte de los MMC. (Esto puede tener importancia en el tratamiento del asma .) Obs6rvese que machos de estos datos provienen de estudios realizados con roedores, por to que pueden no ser extrapolables a los seres humanos.

Diferencias entre las poblaciones de mastocitos (II)

tipo de celula localizaci6n cantidad por celula (pg) triptasa quimasa

MC. (MMC) MC,, : (CTMC) bas6filo

pulm6n y cavidad nasal, mucosa intestinal piel, vasos sanguineos, submucosa intestinal circulaci6n

10 35 0,04

<0,04 4,5 <0,04

Fig. 23 .12. La triptasa es tin tetramero de 134 kdal que puede suponer hasta el 25% del contenido proteico de los mastocitos . La quimasa es tin mon6mero de 30 kdal . Las proporciones relativas de estas proteasas en los mastocitos permite dividir a estos 61timos en mastocitos MC T y MCT,_, que presentan diferentes distribuciones tisulares . Los bas6filos contienen cantidades may pequenas de ambas proteasas. (Los subindices T y Tc indican el contenido de triptasa y quimasa de las respectivas celulas .)

Estas proteasas ticncn iniportancia clinica, va yuc la triptasa PUCdC hr()\OCar ItipcrLCaCtisidad N-cmytiial V la gLIinlasa CstinTtlla la sccrccion hronquial dC nxrco {dos dc Ios signos Caractcristi Cos dcl asnta; \' . hv. 23.21)). Adcnias, anibas proeasas pueden degradar al pcptido intestinal yasoaCtiyo (\"l l', dcl ill glcs r SoIlCtire intestinal pcptidc;~, tin indLICtor :IC la rclajaci6n do la nurSCUlatura brongtiial . Por Sit parts, la triptasa Cs tut potcntc factor dc crccinticnto dc los fbroblastos, lo que PuCLIC SCr CI ntotiyo dc la asociacio'm c\i,tcntr cntrc la actiyacj()ll sic Ios mastocitos y la fihrosis .

quilltasa, hall scryido para do linftar airn nias [as subpoblacioncs dc ljlaStOCitOS 23 .12l .

mastocitos superficialcs t . estos alcrgenos loran lugar a la liberaci6n dc ntediadorcs, y cry colISCCUCnda a till aumento dc la pcrntcabilidad dc la mucosa trcnte al alcrgcno . Esto conducira a sit VCZ .1 tin incrcntento tic la liberaci6n dc ntediadores por parts dc los nt :tstocitos submuCOSOS y a la Consiguicntc antplificaci6n sic los sinto ntaS ClIniCcrti . La nlae-nitud dc la desgranulaci6n pucdc ser detcrminada nicdiantc la mcdida dc la conccntraciom scrica dc triptasa . EstC :onthucsto Cs till indicador dc la desgranulaci6n dc los mastocitos nicior yuc la histamina, debido a Sit mayor cstabilidad.

Los farmacos que ejercen sus efectos sobre los mastocitos pueden provocar importantes efectos clinicos

Estudios clinicos de los mastocitos en el asma y en la fiebre del hello

En 1111 .1 SCrie dC Cstudio, tJjni0)s Ilr(,~(i  s a :aho rc :jClltcllTCntC SC ha dClnOStrado titie CI cpitclio nasal dc los pacicntcs con ficbrc dcl hen(, sc cncucntra infiltrado por mastocitos durantc la cpoca do la polinizaci6n, pcro no en otros monicntos. De la misnia lorma, sc ha obscryador tin niinicro anornialnicntc clcyado dc niastocitos ;yuc no hall sido clasificados ;l cn cl layado broncoalvcolar dc los indisidttos asmaticos . ('01110 la SUpcrficic dc la nuICOSa bronqui.1l cs cl primer lug.1r dc contacto con los alcrgcnos inlialados, las intcracc6mcs cntrc hos

Ulla ntcjo~r :omprcllsio'rn dc I .t naturalcza dc csto~s mastocitos bromcoabcolarcs superficialcs * dc sits rcsl,ticstas fi- cntc .t lox tarntacos antialcrgicos scria sic grall utilidad tcrapcutica. Por cicniplo, cn ]as ratas infcctadas coil cl ncmatodo parisito Nippustrrotrgrllls brrasihcnsis, los NIN1(' aiurntilaclo s Cn cl intestine desaparcccn rapidanicntc tras la administraci6n dc corticostcroidcs . Fs intcrcsaiitc cl Itccho dc yuc la administraci6n local do corticosteroicics tambicn suprintc cl incrc mcnto dcl nunicro do nrtstocitos nasalcs gLIC sc obscrya cn Ios pacicntcs coil fichrc dcl hcno durantc la cpoca tic la polinizaciom . El mccanisnio do csta suprcsi6n no csta claro, pcro sc sabc yuc lox corticostcroitics inliibcn la prodLICCi6n LIC citocinas pcrr parts dc las Cclulas l'H, ill

tluidas [as citecinas IL-3 c It . 4, yuc actuan conto factores de crecimicnto para ION mastocitos. El ctccte de los tarmacos sohrc la desgranulacion dc ION mastocitos cs do gran importancia, tanto dcsdc un punto do vista tuncional conlo chnico . En la rata, cl cronloglicato dc sodio \' la tcoilina inhihcn la libcracion dc histamina a partir de 1()s G1'11(" pcro no do ION Dada la hctcrogoncidad dc I(n mastocitos y las ditcrencias cxistcntcs cntrc distintas csl.ccics, cstos rosulta dos 11(1 Ilucdcn set, extrapolad0r% a ION sores hunlanos . I'd dcsarro Ilo do l111cas cclularcs purae " do nlastocitcrs lauma11()s scria un logro cic ;,ran trasccndcncia tiara cl cstudio cic las cnfcrtncdadcs alcrgicas de Ios scrcs hunlanos . Las IgE se unen tambien a otros tipos de celulas inmunitarias . I .(rs cesinofilos t ],IN placluctas twrnrllcs prcs.cntan HIM 11111\001, ciION esquistosonlas, cu ;u1 IO10t\icidatl hacia cicrtos parasites, conao do son scnsibilizaclas con IgE . Adcnlas, en Ios pacicntcs alcrgic()s cstas cclulas I,ucdcn scr sensibilizadas per Ios intnunoconlplcjos Es posiblc yuc cstas cclulas (c ciriul,tntcs quo: centcngan IgF , :.. ES .11,611 p,lpel en [as rcspuestas alcrgicas, s-a yue :unbar . conticncn discrsos nlcchadorcs t protci11as inflanlatorias capaces Las rcacciones alcrgicas . Rccicntcnlente, se 11 ;111 oh dc exaccrbar

gicin Fc . Este IYttcde ser Cl motiso do la urticaria yuc proloc ;ul las ticsas ell AV ltnOS indi\- iduos, to yuc CstOS frUtOS conticnen granLICS cantidadcs (ic ICctlnas . Existen otras c(rtnPuestes quo induccn la Ciesgranulacicin dc les monocitos con Bran eticacia . Entre cllos, ION yuc probable nlonto tiCt1Cn naas imp0artancia ill riroson algunos de Ios pr(xiuctos cic la actisacicin del complctncnto, concrctanlentc (:3a \ (:5a. Estas anatiilotoxinas atcctan t:urnbicn a mochas etras cclulas, cntrc Las quo: SC cncucntran Ios ncutrofilos, [as playuotas \ ION tnacrota t;es. ()tI-OS c(rrnpuestes yuc pucdcn actinar dircctamcntc a ION mastocit(rs ,Oil Ios ionoforos cic calcio, la nlclitina, cl compucste 48/80 . s_ algunos tarmacos, cona,r la ACTH sintetica, la codcina 1 la nlorfina . "Dodos cllos actisan ;a Ios mastocitos al pcrmitir la cntracia en la cclula de iones calci(>. Las rcspuestas anafilacticas inducidas por cstos agctacs son identicas a las yuc so: ebscrtan en las rcaccioncs nlcdiadas por IgF:, aunyuc, lurr supucsto, actUan mediante n1ccanis1110s incicpcndicntcs de ends inntlnl(,,IOhulinas . En el proceso de desgranulacion se liberan los mediadores almacenados y se induce la sintesis de nuevos compuestos derivados del acido araquidonico I ..a pcnctraci'in dc 1((itcs c;alci(r ell krs masteiitols inducida Ix,r CI an t1gono ticitc d(rs c(msocucncias principalcs . En primer lugar, sc produce la cxocitosis del contenido cic ION granulos V la CUnSiguiente lihcracic'tn cic Ios mcdiadorcs almacenados en ellos, cntrc les yuc SC encucntra la histamina, yue cs el nias importante tic es ton mcdiadorcs en Ios sores hunlanos . En scgundo lugar, sc indtt cc la sintesis dc mesas mediadorcs dori\ados ctel acido araquid()nico, ccnlcretanacntc prostaglandinas \ lcucotricnos, clue cici -ccii ctcctos dircctos sohrc ION tcjidos a ni\cl 1()cal . 1111 cl pulnlon induces inmeciatanlcntc hroncoconstricci(in, edema tic la 11utcosa c 1lipcrsccrocion nutcosa, prosocande asma (r, fqs. ? .;.1-1 1, ?3 .?0) . C1da acz se time m;is ccrtcza tic clue las distintas p()blaciones de nlasulciteu prexlucen ditcrcntcs pertiles dc nlcdiadercs tie

tcnido dates yuc dctnucstran clue Ios Ceslta(1tIIOS, nlacrotagos, playuctas ccIUlas do I .angcrhans cxprcsan rcccptorcs cic IgE tanto tic baja c(mxr dc alta atinitlad 1`Pp. ?3 .1 .1). Es intcresantc cl 1leclto dc clue Las cclulas tic Langerhans de la piel dc pacicntcs con cccenaa atcipico presentul IgE unida a :de cjcrcor alguna tuncilrn a la 11()ra tic presu superficic, yue I)ut

scntar cl anti-cno/alemcne a las cclulas T clue infiltran la picl, dando lugar dc csa forma a las tipicas rcaccioncs inflanlatorias cutancas. Est:vs cclulas dc I.angcrltans fijaderas tic IgE no sc do ill en indi\ iduos atotpjcos Sill CCCCIII'l . tcct .ul ell la picl normal La desgranulacion de los mastocitos puede ser inducida de diversas maneras Una \ci yuc L1s IgF. sc unci : a 1011 rcccl,t(lrcs t Rl dc 1- 111a" tocit00s (r do Ios bas()tll(>s, SC pucdc Pruducir la dcsgranulacidn do ION nlismos mediante Cl entrecru/Anuente do dichas IgE. Este Poole scr inducid(1 1101- Cl alcrgcno o Ixrr otras molcculas, v da lugar ;t la ngregacion cic Ios receptcrrCN VCs. (:01110 CenSCCLICnCi ;a, se produce un Hujo CIc iones calcio llacia Cl interior (IC la cclula yuc dcsrncadcna la desgranulacion . La c1cs-ranulaci(in Sc puccic inciucir tambien niccliantc sistcrnas yuc cntrccruccn dircctamcntc ION rcccptorcs i.fp . 21 .141 . Po r cjcnlplo, las Icctinas c(1mo la PHA o ht ('en,-\ pucdcn cntrccru zar Ins IgF mediante su union a Ios gropes glucidices do la rc-

nuc\ a sintesis . Por cjcnlplo, Ios antihistaminicos prcscntan eficacia cl nica en la rinitis \ en la urticaria, pcro no en cl asma, en dOndC ION Icucetrien0s dcsenlpcnan un Lapel protninente . I,es t.irnlaces pucdcn bloyucar la liberacion de ntccliaciorcs mediante cl aumcnto do Las cencentraciencs intracclularcs dc AMPC i p. cj ., la isoprcnalina, clue estimula les rcccptorcs [i adre ncrgicos) o inlpidicndo la cscisi()n dc dicho ADiPc por partc dc la ti(stildicstcrasa I P . cj ., la tcofilina) . No sc c0nlocc bicn cl mecanistne dc icci()t1 del crenloglicato cic sedio, yuc inlpidc la libcraci(Sn dc histamina a partir dc ION mastocitos, pCro pucdc Cstar rclacienacio con la inhibici611 de la penetracion do calcio yue induce cl antigeno, puedc atcctar tambien a la litleracion dc nlcthadorcs por parts do otras cclulas .

Resumen : Union de la IgE a otras celulas distintas de Ios mastocitos y los basofilos receptores Fcr:Rlla I celulas alas B observaciones expresado en las cciulas B normales ; actua conlo prornotor del crecimiento celular y de la adherencia Fig. 23 .13. Los receptores FccRl de los mastocitos y los basofilos presenten una afinidad macho mayor por la IgE quo los receptores de estas inmunoglobulinas presentes en otras celulas (Fcr:Rll) . Las celulas B normales expresan de forma constitutiva FCr:Rlla mientras quo IL-4 induce la expresion de Fc+:Rllb en otros tipos de celulas . Las celulas T, las celulas B, los monocitos y los macrofagos expresan Fa :Rllb, al igual quo las celulas de Langerhans de la piel . Las celulas de Langerhans, los macrofagos, las playuctas y los eosinofilos tambien pueden expresar el receptor de alta afinidad Fcr:Rl.

celulas T FceRllb

eosinofilos laquetasU-JS i celulas de Langerhans

celulas B macrofagos r.,. /I

celulas dendriticas foliculares

inducido en celulas normales por IL-4 ; expresado cie forma habitual por algunas celulas B y T, monocitos y eosinofilos ; las celulas de Langerhans y las celulas dendriticas foliculares tambien pueden expresar FcrRl

Hipersensibilidad de tipo I

Resumen : Activation de los mastocitos y efectos fisiologicos de los mediadores que producen
agentes quimiotacticos estimulacion de los mastocitos a traves de su receptor FceRl ionoforos de calcio, compuesto 48/80, melitina productos farmacoldgicos codeina, morfina, \ ACTH sintetica citocinas, p. ej ., IL-5, TNFa, IL-8 LTB,, PAF activadores histamina PAF
F ,

-_

neutrofilos, eosinofilos, basofilos basofilos vasodilatation y aumento de permeab. vascular microtrombos enzima proteolitica ; active C3 cininas vasodilatation " ederna contraction de la musculature lisa bronquial edema de la mucosa, secretion de moco

h
C3a y C5a anafilotoxinas

triptasa cininogenasa

agentes espasmogenicos histamina PG D, LTC,, LTD,

Fig. 23 .14. La activation de mastocitos puede ser inducida por estimulos inmunitarios que entrecruzan los receptores Fce, asi como por anafilotoxinas y secretagogos (p . ej ., el compuesto 48/80, la melitina, el ionoforo de calcio A23187) . Algunos farmacos, como la codeina, la morfina y la ACTH sintetica, ejercen una action directa sobre los mastocitos . El acontecimiento fundamental que desencadena la desgranulacion es tin flujo de iones calcio hacia el interior celular, que induce la formation de microtubulos y el desplazamiento de los granulos hasta la superficie, donde se fusionan con la membrana plasmatica y liberan los mediadores almacenados que contienen. Los cambios que experimenta la membrane plasmatica, junto con la activation de la fosfolipasa A., inducen la liberation de acido araquidonico ; este puede ser metabolizado por la lipooxigenasa o por la ciclooxigenasa, segun el mastocito. Entre los metabolitos lipidicos sintetizados se encuentran las prostaglandinas IPGD,) y los tromboxanos, producidos por la via de la ciclooxigenasa, y los leucotrienos (LTC,, LTD,, y LTB,, con propiedades quimiotacticas), producidos por la via de la lipooxigenasa. Los mediadores lipidicos almacenados en los granulos y los mediadores lipidicos de nueva sintesis ejercen fundamentalmente tres acciones .

Agentes quimiotacticos : Diversas celulas son atraidas hacia la region de activation de los mastocitos, especialmente eosinofilos, neutrofilos y celulas mononucleares, entre las que se encuentran incluidos los linfocitos . Ademas, datos recientes indican que algunas de las citocinas almacenados y liberadas durante la desgranulacion de los mastocitos tambibn ejercen efectos quimiotacticos sobre las celulas inflamatorias . Activadores de la inflamacion: Pueden provocar vasodilatation, edema y microtrombos ; en este ultimo efecto tambien interviene el factor activador de las plaquetas (PAF). Todo ello conduce a la aparicion de lesiones tisulares locales . La triptasa, la principal proteasa neutra de los mastocitos pulmonares humanos, puede activar C3 directamente, funcion inhibida por la heparina . Tambien se liberan cininogenasas, que producen cininas a partir de los cininogenos y afectan a los pequenos vasos sanguineos, to que exacerba atin mas el proceso inflamatorio . Actividad espasmogenica : Estos mediadores ejercen tin efecto directo sobre la musculature lisa de los bronquios, pero es posible que tambien aumenten las secreciones mucosas, obstruyendo estas was aereas.

REACCIQNES CUTANEAS
I,uncion Cut .inCd, quC CS un(r dC I(rs mctodos diagnosticos nt:is scncillos pare detecmr los lcnontenos alcrgicos, ilustrc tin Lien la innumopatologia do cstc til)O dc rcaccionts .Ia Prucba Cut:i nee clasica Para la atopia es la reaction innICLhata do hinchazon N critema, cn la quc cl altrgcno introducido cn ht picl induce la lihCr:ui('m (IC IOS mediadores almacenados; Cstos mediadores prosocan till aununto do la pcrntcabilidad ISCUlar, edema local Y prurito (Jiq. 23.15) . Las I,rurbas cutaneas suclcn Prcscntar una bUCna corrclacilm con la prucba do radioalcrgoabsorcion { RAS'h, dcl inglcs radioalh rgosorbcnt assat) pare IgE cspccifica cn sucro, asi conur con las Pruebas de pr(nocacion en la regicin afcaada (p . ci ., la exposition do la mucosa nasal () bronquial al alcrgcno) . I_ ;t rCSI,uCSta tardia que sc product dcsl,ucs LiC la PI - 11C113 cut:utta no Se sude obscrvar, va que rare vez sc busca. (:uando aparece, Sc trata do till abult.tmitnto cutanco doloroso, pero no pruriginUSO . El hccho do quc los pacic(ttcs con divcrsas cnfcrmedadcs :ui>picas ntucstrcn la reaction cLisict do hinchazon v critcma dtspt S do LIS prutbas Llc puncion cutanea denuICstra quc cxistc 1gF unida a I(rs mastocitos do la pid, aunquc ,stir sintomas scan ILlSACS () bnmquialts . Sin tmbargo, cxistc una Pcqucn ;t proporPruebas de puncion cutanea . I S curioso quc la Prucba de

Reacciones cutaneas inmediatas y tardias

reaction tardia (a las 5 horas) reaction inmediata (a los 20 minutos)

1 :10 1 :100 1 :1 .000 1 :10.000

Fig. 23 .15. Pruebas cutaneas realizadas 5 horas (izq .) y 20 rninutos (dcha .) antes de obtener la fotografia . En las Pruebas de la derecha se observa el tipico punto final de una reaction inmediata (de tipo I) de habon y eritema. A las 5 horas se aprecia claramente la fase tardia de la reaction cutanea (izq .), especialmente cuando ha ido precedida de una intense respuesta inmediata. Los numeros indican las diluciones del extracto alergenico .

Reaccjones bronqujales

ci(Sn do paticntes con sintomas clams de, por cjentplo, rinitis alcrgica, c ut as pruebas c utanea% s, RAS I' son ncgatit os . PCSC a 1 .1 auscncia tic IgE ett la picl y en cl sucro, estos pacientcs si title presentan una rcspuesta tic IgE a ni%cl tic la mucosa local . F%to tic manific%to ntcdiantc pruchas tic pro%ocacion Sc puedc goner nasalcs o midicndo tnediantc BAST la IgE especitica directamcnte en ]as secreciones nasalcs . Si se estimulan in vitro linfiwitos tic estos pacientcs toil cl alergeno co~rrespomdictue, se produce una transformation tic Ion linf6ciuos c, %c proulucen citocina%, to yuc indica yuc sots tdula%'I' son :apace% tie responder al alcr gcno . Esto no implica clue Ios fcn()mcno% tie hipersensibilidad retardada intcrrengan dircctatncnte en las manitcstacioncs tie la cnfermcclad . Sin embargo, si yuc indica la prcsencia en cstos pacientcs tic cclulas TI12 espccificas del alergeno, yuc puedcn colalxtrar en la rcspuesta tic IgE .
La prueba de parchc cutaneo . En la prucha tic parchc cuta-

neo sc aplica cl alergeno, s(,hrc una region de picl "" normal" ligc-

ramente crosionada prcsiamcntc . Por cjcmplo, la pructia tic parchc cs positita ante cl alergeno tic los acaros tic] polio dorntc%tico en los pacientcs con ccccnta atopico (/!q . 23 .161, yuc poscen antitucrixrs IgE trentc a dichm acarm ( /!q . 2 .3. /'I . Es intcrc%an to cl hccho tie title una cicrta proporci(')ii tic pacientc% tom rinitjs alcrgita cichida a los acaros tic polio domcstico l;firf . 2.3 .11) tamhicn presentan prucbas tie parchc positita% coil infiltration tic hasofilos Ircnte a di:1ur alergeno, for LItlC sugicre yuc csta in filtration no cs cspcofica dcl ccccnta atopico . (`uando~ %c describior onginalmentr la rca :cion cutanca tardia, se pcn%o title cl mccanisnu> podia ser cl tic una rcaccio'nt tic ttiperecnsibilidad tic tipo III Lmcdiada poir inntunocomplcjosl tic bide a la precipitacio'~n tic antictterpos IL',( ;, :onto la clue se produce cn la aspergilosis hromroopulmonar. Sin embargo, casi nunca sc hail deteitatio anticucrpos prccipitanics cn csta talc tardia tic la reaction, v [as imc%tigacionc% lxtstchorc% hail confirtnado title la rcspuesta tardia es depcndicnte tic IgE . REACCIONES BRONQUIALES Las reaccioncs broncluialc% a los alergeno% tamhicn consi%ten en una rcspuesta inmethata v una tardia Iiq . 23. 10) . El cronu~glicato tic sodio cs un tratanurnto rnut' cficaz part cl asma alcrgica y suprintc Canto la, reaction inmcdiata contor la tardia yuc sc pro duccn dcspuc% tic la c\porsi :iont bronyuial al alergeno . Esto implica clue cl dc%arrolloo tic la reaction pulntomar tardia tamhicn depcndc tic la interac :iom initial cntrc cl alergeno, la IgF \ Io% mastocito% ; cl cromoglicato tic sodio inhibc la tlcsgrattttlaciont tic los mastotitos c impidc clue sc produican tcxios los aconteci micntos posteriorrcs . Si lors pacientcs son tratados ton c(rrtjcosteroides or coil inhithidorcs tic prostaglandina %intctasa antes tie la exposition al alergeno, solo u anulan las reacciones tardia%, nticntras clue la rcspuesta initial no cxpcnmcnta pricticamcntc moxlificacioncs . Esto sugicrc clue en las reaccioncs tardia% intcnicnctt los mctabolito% del acido aracluidonjco yuc produccn los mastor citos, cs decor, las prostaglandinas _s' los leucotricnos (s'. jiq. 23. I4) . la mavoria tic los asmaticos coil obstrutejon rcscr,ible de las ties acrcas ntcjoran tra% cl tratanticnto~ coil cortico %tcroides adminjstrado % por via inhalatoria, clue rccfucen la infiltration tic tdulas inflamatorias clue sc produce en los bronyuio% especialmcntc durantc la fast tardia tic la reaccio'm (,/ia . 23 .211) .

Fig. 23 .16. Aspecto de un eccema atopico on la mano de

un nino al6rgico al arroz y a los huevos .

SkILIO

Fig . 23 .17 . Pruebas de parchc cutaneo en un paciente con eccema atopico, Ilevadas a cabo utilizando antigeno purificado de bcaro de polvo domestico (Dermatophagoides pteronyssinus) . 1) Se elimina la queratina de una region no afectada mediante una ligera abrasion y se fija el extracto sobre la piel, donde debe permanecer 48 horas antes de examinar los resultados . Las lesiones que aparecen son de tipo eccematoso, y microscopicamente se detecta la presencia de eosinofilos y basofilos . 2) Control de solution saline . (Por gentileza del Dr . E . B. Mitchell .)

Fig . 23 .18 . Acaro de polvo domdstico : un alergeno importante. Microfotografia electronica en la que se observe Dermatophagoides pteronyssinus, junto a un deposito de excrementos fecales (abajo a la derecha) . Tambien se muestran granos biconcavos de polen (arriba a la derechal pare comparar el tamano . El principal alergeno son los excrementos fecales que quedan suspendidos en el aire y penetran en los pulmones, y no el propio bcaro . (Por gentileza del Dr . R. Tovey.)

Hinersensibilidad de tipo I

Reacciones bronquiales inmediata y tardia ratamiento previ-I 1. ninguno 2. cromoglicato rip sodio alergeno' Fastocito histurnina ieucotrienos y prostaglandinas CGS
I

3. indometacina, esteroides _

4
FEV

10

indometacina y esteroides

12

16 horas

Fig. 23 .19. En este grafico se representa el volumen espiratorio forzado (FEV), un parametro que sirve para analizar el funcionamiento pulmonar, en tres grupos de individuos antes y varias horas despues de la provocation bronquial con un alergeno . En el grupo decontrol (grupo 1) se produce una broncoconstriccion bifasica (initial y tardia) . La reaction initial dura aproximadamente una hora y va seguida de una reacci6n tardia (RT) que dura varias horas. Se tree que en los seres humanos el mediador principal de la reaction es la histamina liberada en la desgranulacion de los mastocitos . Los otros dos grupos fueron sometidos a dos tratarnientos previos diferentes. El grupo 2 fue tratado con cromoglicato de sodio (CGS), que inhibe la desgranulacion de los mastocitos y parece impedir tanto la reaction inmediata como la tardia . El grupo 3 fue tratado previamente con indometacina o con corticosteroides, que bloquean las vias metab6licas del acido araquidonico e inhiben la reaction tardia, pero no la inmediata. Esto implica que en la fase tardia de la reacci6n intervienen los ieucotrienos y las prostaglandinas . Aunque el tratamiento prolongado con esteroides puede suavizar la reacci6n inmediata, la RT queda totalmente suprimida. En muchas ocasiones, el tratamiento de primera linea para los asmaticos son los corticosteroides administrados por via inhalatoria, que reducen la infiltration de celulas inflamatorias . Esto sugiere que la RT y sus secuelas son de gran importancia en el asma cronica.

Resumen: Respuestas inflamatorias en los bronquios de los pacientes asmaticos

section transversal de un bronquio

factores

PAF, citocinas

LTB,,

F- RI

"

* .

'

liberac. de mediadores

histamina

enzimas lisosomales

microtrombos

complemento, proteina basica prostaglandinas principal i

. " ,

ag . espasmogen .
histamina, LT,

hiperreactividad bronquial

PG, PAF normal a broncoconstriccion (respuesta inmediata) infiltration celular ~reaccion tardia y respuesta inflamatoria cronica)

Fig. 23 .20. Entre los mediadores de los mastocitos figuran factores quimiotacticos y espasmogenicos . Estos ultimos inducen una broncoconstriccion inmediata, aumentan la permeabilidad de los pequenos vasos y provocan edema y migration celular . Los factores quimiotacticos y las citocinas (GM-CSF, IL-5, TNF(t) promueven la acumulacion activa de neutrofilos (1), bas6filos (2), eosinofilos (3), rnacrofagos (4) y plaquetas (5). A su vez, la production de moleculas inflamatorias par parte de estas celulas infiltradas provoca la fase tardia de la respuesta y el proceso

inflamatorio cronico tipico del asma . El asma subaguda o cronica es el resultado de los efectos de muchos factores diferentes, entre los que se hallan la hipersecrecion de moco (M), la hipertrofia de la musculatura lisa (SM) y la infiltration celular (CI), clue va acompanada de hiperreactividad bronquial. Ademas, el tratamiento con corticosteroides reduce la infiltration celular y tambien la production de oxido nitrico (NO) .

Reacciones bronquiales

Los mastocitos broncoalveolares son importantes en las reacciones asmaticas

l a III/ bronquill tic los pacientcs cLm asma (Lmticnc nris nlast~r citt~s dc lo normal . Estas cclulas ruin situadas dc nlancra prn- ilegtlda para intcraccionar con los alcrgenos inllalados e iniciar la" :l analisis tic cstas CeILdas Yob rcspucstas tic IgF cn los pulnloncs. E tenicias mediantc las adcl broncoals color I L11A j rcs cla clue se dcsgranttlan Coil tacifdad, coma to LICI11UCStra cl alto contcrudo dc mediadores quc colnticne cl Iiquidol dc I .M . Es probable quc Cstas cclulas sean la diana principal del tarnlaco antiasmatico cro mogficato dc sodio, y pucdc clue tambicn dc otros farnlacos como la ciclosporina . Son cclulas facilcs dc inhibir, ell comparacion con
. las clue se ohticncn a partir del parcnquinla pulnlonar i fiq. 2.) . M Acicinas, datos obtcnidos rccicntcnlcntc inclican clue CI suhtipo prcdominante de cclulas 1 ell CI I .BA dc los pacientcs asnlaticos es cl Ttl2, to quc sugierc quc las respucstas i111111.1nitarias clue SC prodUCCn en cl puln1on asinatico son do naturalcra alirgica y Cstan asociadas a la produccioln tic Igl:: . l'ambicn cxistc una importantc infiltracion CClular ell la nntcosa bronquial, clue probable nlcnte contribusr a quc la cntcrinccfad sc 11aga cronica .

La lihcracion de pcptidos dc origcn neuronal, conlo cl I'll', la sustancia 1' v cl pcpticlo rclaciomado con cl gcn do la calcitonina I CGRP, del inglcs calcitoniu acne related peptide's potencia s, di tundc 1 :1 respucsta inflamatoria Cxistentc, Coil to quc SC Cxaccrba la hilxrrcactnidad bronquial .

Mediadores de los eosinofilos

citocinas IL-3 :L-5 . GM-CSF, TGF,,

Existen otros factores implicados en el asma cr6nica

Eosinofilos.

proteinas basicas en los grsnulos

Hat n1uCho'Lht(~s yuC indic,ln ynC la infiltracio ll dc cclulas inflantitorias cicscnlpciia un papel crucial cn la tasc tar. dia dc estas rcacciLlnes . En concrcto, cl LBA 1 la n)uCOSa hronquial do cstos pacientcs conticncn una grail canticiad Lie eosinofilos durantc la talc tardia do las rcaccioncs asinaticas (pcro no durantc la fast innlcciiata > . La I I .-S clue liberan las cclulas Ti 12 y los nlastocitos poscc propicdaclcs yuinliotaCticas pare IL1s cclsin(Sfilos s, estinntla la liberacion dc mediadores c citocinas pox- parts dc cstas mismas cclulas l_liq . ?x .21) . I .os cosinotilos provocan Icsiones cn el cpitclio rcspiratorio al liberal- deterininadas proteinas basicas quc conticncn sus grantilos ifiq . 23.221 . FStO pu(:dc tacilitar la penetraci6n dc los alcrgcnos v el acceso dc los nlediadorcs intlanlatorios a Las tcrnlinaciomcs nct- iosas atcrcntcs, prLlxocandLl brtmcoconstricci6n a trascs dc las s'ias axcinicas rctlejas .

proteins basica prlr~ ; :gpal +N16'i proteina cati6nica de eosinofilos neurotoxina de los eosinofilos (EDNI Iperoxidasa de los eosinofilos (EPO)
(ECP)

mediad . de nueva sintesis derivad . de componentes de membrana

1.

factor aclivaanr de [as plaquetas

I PAF ) 15-HETE

LTC,, LTD,,

I prostaglandina E IPGEI

Fig. 23 .21 . La desgranulacion de los eosinofilos puede ser desencadenada por los alergenos a troves de las IgE unidas a los receptores FCr;RI o FCi:Rll o por mediadores solubles, como el PAF y el LTB'. Los eosinofilos liberan citocinas con actividad inflamatoria y mediadores de nueva sintesis derivados de componentes de la membrana . Liberan tambien las proteinas basicas que contienen sus grsnulos, que son altamente citotoxicas y provocan las lesiones de las celulas epiteliales que aparecen en el asma cronica.

Fig. 23 .22 . Localizaci6n de la MBP an all pulm6n de un paciente con asma grave. 1) El epitelio respiratorio muestra una considerable infiltracion de eosinofilos en la submucosa y un grupo de celulas epiteliales que se ha desprendido y aparece situado en la luz bronquial (flecha), junto a un deposito de hollin con aspecto de ~ cordon . Tincion RE . 2) Mismo corte tenido para revelar la proteina basica principal (MBP); la IF indica que se

encuentra en los eosindfilos infiltrados . Tambien se observan depositos de MBP en ]as celulas epiteliales descamadas de la superficie luminal. 3) Un corte de control tenido con suero normal de conejo ; no se tinen los eosinofilos ni el tejido bronquial, pero el deposito de hollin se tine ligeramente de forma inespecifica . (Por gentileza del Dr . G. Gleich, en J Allergy Clin Immunol 1982 ; 70 :160-69, con autorizacion .)

Hipersensibilidad de tipo I

IIij" Crrc .ICticidad br((ityuial trentc a 1 .1 histamina . Irentc a estinttil(>s no ( cspcoficos, Co mio cl airc trio sy cl \ apor kit aqua . Asi, los individuos norniales dcsarrollan asma tras la inlialaci(n dc 10 ng dc hist :unina, mientras yuc en cl caso dc pacientes asin :iticos stn suficientCS 0,S ng o inCluSo menos. El conccpto do quc csta Iupcrrcactisidac1 CS ConsecuenCia do una cxposicion cr()nica al alergcno csta solidamcntc apoyado pot- las obscrs acioncs dc PlattsMills, quc Iles() a Cabo un experimento consistente en alejar a pacicntcs asmaticos de stir do>niicilios (y, por unto, Lie Ios acaros de poli o domesticoI ingrcsandolos cn zonas limpias dc tin hos pital durantc trcs ruses. Transcurrido cstc ticmpo, la hipcrreac tiridad frentc a la histairtina sc habia rcduCiC1o cn gran nlc(iida o inCluM) habia cicsaparecidor la entcrinedad asntatica tambien cxpcrimcnroo una notable nicjoria .

Hiperreactividadbronquial. El asma esta relacionado coil Una

cl N( ) puedc dcscmpcnar algiin papcl cn la pato,,Cncsis del asma, yuc la detcrininacioin cicl No cSpirado pucdc ser iitil para cl diagnostico, cl seguinticnto s- cl trat ;unicnto .

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL DESARROLLO DE LA ALERGIA

Adenias dc la predispotsicion gcnctica a la alergia yuc \a Demos comcntacio, en la actualidad se conoccn otros t'actores yue tam bicn pucdcn scr intportantes cn su (Icsarrollo, y yuc SC analizan a Contlnuacion .

I NOSi 1 cataliza la tormacion do cixiclo nitrico (NO I cn IIIUCIt1S celulas csrinniladas con citocinas. Rccicntcmente sc ban detec tado altas concentraciones (ic esta enzima en el cpitclio bronquial dc pacicntcs asmaticos, pcro not en cl dc individuos Sill ISIIla 23 .23i . EI NO que produce \()Si SC pucdc Cuantificar cn cl airs cspirado por los pacicntcs asinaticos no tratados ; su conccntracicin sc reduce considcrablcmcntc cuando sc apfca un trata micnto con corticostcroidcs adininistrados por Nia inlialatoria (h(/. l3 .?3;), Line se sabc quc rcgulan ncgatis'amcnte la Cxl)rcsi(in dc las citocinas v do \()Si . Estas obscrvacioncs sugiercn quc

bxido nitrico . l . ;t forma inducible de ciziclo nitrico sintctasa

El oxido nitrico (NO) en el asma

Existcn hastantc, dat(o, Line indican yuc las cclula~ - 1 - uitcrcicncn tanto cn cl desarrollo onto cn la suprcsion dc las rcspucstas tic IgE (\ .jigs. ?.i. ~- ?,,(i1 . Esto Ilcs- o ell un principio a superir Line la ctiologia dc la atopia podia consistir cn algiui dctccto dc las celulas l_, y en concrcto dc las "" celulas T Supresoras- . 1)c hccho, sc ha dcmostrado quc los pacicntcs con eccema poseen bajas Cantidades dc celulas suprcs(iras (a8' (/ (z . 33 .?4j . Adcmas, las rcspuestas dc ] .IS celulas l trente a los mit(igenos son mcnos intensas en los paciciacs con atopia grasC fes dccir, los que presenraI ecccntaj . Esta rcduCCi('m do las rcSpucstas do las celulas T in vitro prew'nta corrclacion coil la rcduccion dc la inmunidad mcdiada poor Cclulas, to Line se I,ucdc rcilejar in vivo en forma tie una disminucio'm dc IaS respucstts Cutincas dc hipcrscnsibilidad retardacia . Hasta hacc poco ticmpo o no sc labia si cstc deficit dc cclulas T CS una do las Causal o una tic las C(n)SCCUCncias dc la entcrmedad at(ipica . Sin embargo, en la actualidad sc disponc dc datos quc in dican yuc czistc una rclaci(in causal cntre cl deficit dc celulas T s' la atopia, aunquc solo para cl caso dc lactantes iliiliciitidos coil bibcroncs . S(uxhill y cols . ban cicniostrado Line la incidencia tic eccema cn los ninos se reduCC cuandoi son alimcntados direct:mcntc por la macirc, t cn los trahajos do otros grupos Sc ha oil scrs - adot una rclacion cntrc la alintcntacion con bibcroncs do IcCltc Lie s aCa, la rcduCCi(')II do la canticlad dc celulas T rcguladoras pertcnccicntes a detcrininadas subpotblacioncs v cl aumcino do las

El deficit de celulas T esta relacionado con la atopia

Las celulas T en la atopia

no atopicos 'atdpicos leves (rinitis y asmai eccema atopico grave

0
control asmaticos asmaticos no tratados tratados

25

porcentaje de linfocitos totales celulas CD3'

50

75

100

celulas CD8`

Fig. 23 .23. 1) Biopsia de un individuo asmatico . Intensa tincion especifica de NOSi en el epitelio bronquial, con lesiones en algunas zonas. 2) En el asma leve no tratada es frecuente que el aire espirado contenga cantidades de NO superiores a las de los individuos de control . Por el contrario, en el asma tratada con corticosteroides las concentraciones de NO son parecidas a las de los individuos normales . (Por gentileza del Dr . David Springall .)

Fig. 23 .24. AI contrario que los pacientes con rinitis o asma, los que padecen eccema atopico grave poseen un ntimero reducido de celulas T CD3', que se debe fundamentalmente a la reduction del ntimero de celulas T CD8' detectables mediante tincion . Se tree que entre estas celulas existe una poblacion ((supresora,,, y la disminucion del numero de celulas circulantes de este tipo esta relacionada con las grandes concentraciones sericas de IgE que se suelen detectar en los pacientes con eccema atopico .

El concepto de alergia por desbordamiento

concentraciones dc IgE ( /iq. 2,3 .25j . Sin embargo, no se sabc coil certeza si la alinlentaci6n con biberones atecta al n6tnero de celulas T. Es exidcnte yuc existen otros tactores ambicntalcs yuc tambicn son importantes en la exprcsion de lots trastornos alcrgicos . Tantbicn cs preciso aclarar que relaci()n exacta existe entre Ias difcrcncias en cl ntimcrot dc celulas T supresoras yuc se obsersaron en los prinleros estudios y la inlportancia dcl equilibrio Till/TH2, conocida recicntcnlente .
Los contaminantes ambientales aumentan la produccion de IgE especifica

Los contaminantcs anlbicntalcs otw(~ cl di(ixido dc aiutic, lit" (ixidos de nitrogen(), las particulas cxpulsadas por Icts nuttorcs diesel v [as ccntcas suspcndidas pucdcn proxocar :utmcntos do la pcrmcabilidad dc la mucosa y taxorecer la penctraci6n dc los alergenos y las rcspucstas dc IgF . Las particulas expulsadas por los motores diesel i, PEMD ) pucdcn actuar comp potentes adxvxan23 .2V Su dianlctro es me nor dc tes en la produccion dc IgF; 1 Pill, por to que cluedan suspendidas cn el acre dc Ins zonas con tarninadas v pucdcn scr inllaladas . La concentration en el acre urbano xienc a scr dc 2 ug/n1', pcro puedc Ilegar a alcanzar 30 ug/'m' ell las calles mas transitacias v hasta 500 ug/m' cn horas clue cl trifico es tnas intenso . La administration conjunta dc PEMD x, un alergcno por via intranasal induce un acusado aumcnto dc la produccion de IgE especifica . Estc etecto acfwcante se obserxa incluso cuando las dosis cfe antigeno a Ias yuc sc cxpone el indjxiduo son bajas, del tnisnlo ordcn de las yuc cabs espera " encontrar en el ambiente . El aumcnto de la incidencia dc rinitis alergica y asma en las tiltimas tres decadas prcscnta una correlacion dirccta con cl

aumcnto dc la contaminacio n ambicntal V la utilizacion dc tnct torts diesel . I'or tanto, cs probable yuc Icts contaminantcs alnbientales estcn taxorcciclIClo [as rcspuest :ts do IgE, coil Cl Cor1Si guiente aumcnto dc las cntcrmcdadcs alcrgicas . Obscrx ese clue Cl tatnaflo dc las unidac(cs tamiliarcs tambicn prcscnta una cicrta rclacion con la incidencia dc la alcrgia, ya que los primogenitos prcscntan mayor tcndcncia ,t xcrsc afectados . El cfccto del tabaco parccc scr dcpcndicntc do la dosis, clandot lugar a una estimulacion dc la sintesis dc IgF, cuando cl coil sumo cs bajo x suprinticndola atando CS clcs'ado . Los funtadorcs actixos mucstran una inlportantc rcduccio~n do ],is rcspucstas innxtnitarias ti -cntc a Ios antigcnos inllalados ; la inltalaci(in plsic -a dc Innno dc tabaco puedc aunlentar cl ricsgo dc asnla en los ninos .

EL CONCEPTO DE ALERGIA POR DESBORDAMIENTO

Es exidcnte yuc Ios proccsos alcrpicos sc produce)) COtll(t c(YnSC cucncia dc una scric dc tactores . La hip()tesis dc la alcrgia por tic" bordamienro sutncre que los sintonnas dinicos dc la alcrgia s( )lo Sc tnanificstan cuando sc supcra un cicrto nixcl dc actixidad innlunitaria ~`_/iq_ 23 .2,-} . Esto dcpcndc dc una scric dc condicioncs, como el grado dc exposicioin al alergcno, la predisposition genetica x . la tcndcncia a sintetizar IgE, asi como dc carets tactores, como la cxistcncia dc infcccioncs xiricas del tracto respiratorio superior, la participacibn rclatixa dc las tcltdas Ti ii/TH2 en la rcspucsta inntunitaria c cl deficit transitorio do IgA . El aumcnto dc la prcxalcncia dc la alcrgia sc ha atribuido a la contamination ambicntal, yuc cn la actualidad cs otro factor yuc dcbc scr considcrado dentro del concepto de alcrgia por desbordamiento .

Efecto de alimentacion con biberones sobre eel. T y concentraciones de IgE

Efecto de los agentes contaminantes sobre las respuestas de IgE OA (0,25 pg) + PEMD

(OLIMI)

IgE 20 serica

alimentacion con biberon

alimentacion materna

titulo de 10 .240 anticuerpos IgE (prueba de anafilaxis cutanea pasiva)

2,5 -

12 0

- cantidad baja de celulas T

edad (meses)

12
0,25 Ng 0.25 Ftg

semanas tras la inmunizacion

de OA sola de OA + 1 Ng de PEMD - 0,25 pg de OA + 5 pg de PEMD - 0,25 pg de OA + 25 pg de PEMD

cantidad normal de celulas T

Efecto de la alimentacion con biberones sobre las celulas T y las IgE . En un estudio en ninos con bajas cantidades de celulas T circulantes, los que habian sido alimentados con biberones de leche de vaca mostraban concentraciones sericas de IgE mas elevadas que los que habian sido alimentados por su madre . Estos ultimos presentaban concentraciones sericas de IgE parecidas a las de los ninos con una cantidad normal de celulas T, alimentados de manera natural o artificial . Esto indica que la alimentacion y el numero de celulas T afectan a las concentraciones de IgE, y sugiere que la atopia puede relacionarse con un defecto de las celulas T asociado a factores ambientales (alimentacion con biberones) .
Fig . 23 .25 .

Efectos de los agentes contaminantes, concretamente de las particulas expulsadas por los motores diesel (PEMD), sobre las respuestas de IgE anti-ovoalbdmina en los ratones . AI inmunizar ratones con ovoalbbmina (OA) por via intranasal, hay dos maximos en la concentration de Ab IgE a las 5 y a las 8 semanas de la inmunizacion ; estos Ab desaparecen despues . Si se administran PEMD al mismo tiempo que la OA, hay un aumcnto de la (IgEl dependiente de la dosis de PEMD, que persiste tras interrumpir el alergcno. De ello se deduce que las PEMD son buenos adyuvantes para la produccion de IgE, y que pueden motivar el aumcnto de la incidencia de alergia de los ultimos anos . (Por gentileza del Dr . S . Takafuji, de J Allergy Clin Immunol 1987 ;79:639-45, con autorizaci6n .)
Fig . 23.26 .

Hipersensibilidad de tipo I

HIPOSENSIBILIZACION
ell El tratanliennt tic hiposcnsibilizacion consists im ,cctar dosis crccicntcs del alergeno . :lunyuc ell nutch:u ocasioncs sr hrt>ducc una nlcjoria clinica, no sc conocc cl mecanisnto o mccanismos Clue la hrtnocan . Tras c'I tratamiento sc produce un aL1l1lCl1tO tic 1,11, concentracioncs scricas dc IgG osllccifica tic] :uttigenet, asi CUtt10 dc la actividad tic his celulas T supresoras, mientras yuc las con ccntracioncs tic IgE sc tiendcn a rcducir f. lirf . ?3 .?Ry ; Sill c1lit-tarp), en la ntavotria tic los casos no sc otbscrca unit corrclacion clam entre cstos llallazgos y la nteioria clinica ticl pacicntc . Sc ha ticntostrado clue las celulas T supresoras especifica% del :ilcrgcno prolitcran en hts pacientes alcrgicos ;t la ambrosia sontctidos coon c\ito .11 proccciimicnto tic hiposensibilizaciom csto queue acarrcar una Sc ric do COIINCCLICnclaS, cor11et la sullrcsiiin tic Itts rcshucstas tic Igl: Y do la acumulaciom dc ntastttcitos inducida por Ias celulas T. (:onto en ettros casos, csto pucdc scr debido a la CUttlltut.lCiUtt dC,dC una respucsta T112 frentc :tl alergeno a una resllttesta 1'ti I . En cl caso dc los individuos alcrgictts al vencno dc abcja cn los yuc Sc induce la produccitin tle Ig( ; mcdiantc un proceso tic hiposcnsibilizaci6n, csiste una bucna correlacitm entre las concentr;tcioncs sanguincas do anticucrlxts bloqucatiorcs lg( ; espccificos del %menu y la proteccioin clinica Irento a la :ut:tfilaxis.

t"CYI)LICSLIS Ti j2 'fool, comrirticndet, lletr tanto, la resllitcsta dc anticucrpots IgE -cn una respucsta [g(i2a i~._hrr . 23A. I'll aillbos casos SC rcducc la produccitin dc IL-<l. Las hosibilithdcs do estos tiPos tic inntunotcrahia especifica basadots ell alcrgcnos modificadets para el tr :u :unicnto tic SCI-CS Inu11.uitts tttdalfa est:i por 1cr. En la ciccada dc 1950 t a SC utilizaron alcmcnos modificados pa recidos i clue sc denctntinaron alergoides) con un cicrtot csito.

En inrestig.tcitttlc, rttitntcs accrc.t tic I ;t c,rrucrur.t Cl( 1()C At r gettos SC ha den1ostr:1do quc CS posilllc idctttificar los chitopos quc reconocen las celulas l' mcciiantc Cl estudio tic la llrolifer :tcioin in vitro do los lintocitos . I-os tratanlicntos inntuncttcral1cuticos Ilcvados a cabo corn pcptidos obtcniclos de esta mantra in ducen tolerancia en Las celulas T, v es llosiblc yuc puccian setutilizacios clinictnlcntc . Otra forma do controlar las rcshucstas dc IgE: en los ratotncs cs ht utilizacitin tic Acrgcnets ntttdificados mcdiantc glut :u- Addlidot, Clue induces la connnttacitin Intro las Alergia por desbordamiento en el scr humano : hipotesis

La estructura de un alergeno puede scr modificada para inducir tolerancia

E:n la actu,llidad rsi ,ten ahuntiantc, I" rttcl" ati, e'lltcnid.t, ntr,ii,tn tc c\l1crintcntets i(111 anin1J1Cs, yuc dcnutcstr:ut la e\istcncia tic CClulus E supresoras tic Vitia nnn larga y de celulas B dc mcmoria productoras tic IgE rcsistcntcs a Las radiacioncs I cs dccir, clue 110 ell SC diVidcn1 . Pcn-cjctnplo, las rata% t, ratoncs tutrntalcs la inlta lacion rcheticia tic tin antigeno (ovoalbuntinal induce tolerancia, qucd .utdo sullrintitlas LAS ITSPuCSLIS do IgE. 1 Ietlt v cols . Iran ticntostrado clue las celulas Igl: de ntctnoria t . ],is celulas plasnt :iticas prexluctoras dc IgE tic los anintalcs clue prcscntan rcsltttestas Igl . intcnsas son muv rcsistcntcs trcntc a los clcctos tic las cclults l' supresoras cspcciticas dc oloalbuinina, por lo clue Ias resllucst:ts tie IgE: dc estos aninlalcs f-cnte a estc alergeno net sc ten alcctadas htn- la prescncia tic ClICllaS CclUlaS T. Sill embargo, la administraciotn do ostas celulas T suprcsttras a estos misntos aninmlcs cuando tttdavia no pan silo inmunizaclos impide Cl inicio tic las correslltn1dicntes respuestas dc IgE ti- entc a la ovoalbiunina . Estas obscrcacioncs son nlus intportantcs, t a clue cn los scrcs huntanos la Aergja SC sucle diagnosticar cuando cl individuo 1a ha sidot scnsibilizado; cstc lluodc scr CA ntotno tic los trat :tsos tluo so: producen algunas \cccs al aplicar I :ts tccnicas dc hiposensibilizacitin . Una mejor contprensitin del mccanistno o mccanismos tic pcrsistencia tic cstas celulas Bt : do larga vida scria tic Bran utilidad para disef ar los tr tamicntos del titturo; poor cicnr plo, cs llosiblc yuc cstas celulas pcrsistan debido a la prescntacion C(HtlltlUa do alergeno por parts do [as celulas dcndriticas o mcdiantc algun sistenla en cl yuc este intplicada una red idiotipica . Otra obscrvacicin intercs .intc del ;grupo dc Holt cs clue-la in1lalacitin dc sustancias nods as i 6sido nitrico tt histamina) antes de la inltalaci6n del antigen() induce cncrgicas rcshucstas tic It E en

La inducci6n de tolerancia suprime las respuestas de IgE sin eliminar las celulas B productoras de esta inmunoglobulina

sintomas clinicos/ respuesta de IgE

individuo con respuest .a lye ititensa + X

desbordarniento~ , ~,alergia

Efectos del tratamiento de hiposensibilizaci6n

medida de la actividad tiempo Fig. 23 .27. Los individuos clue responden debilmente a los alergenos pueden experimentar una respuesta transitoria de IgE tras la exposici6n a uno de ellos, pero dicha respuesta es controlada rapidamente por las celulas T supresoras y/o por una conmutaci6n desde una respucsta Trr2 a una TH1 . Por el contrario, en los individuos clue responden intensamente la produccitin de IgE en prescncia del alergeno es mucho mayor, pero los sintomas clinicos no se manifiestan mientras no se alcance un cierto umbral de desbordamiento . El nivel de este umbral depende de la prescncia de otros factores (X), como infecciones viricas del tracto respiratorio superior, deficit transitorio de IgA o reducci6n de la actividad de las celulas T supresoras, clue incrementan la produccitin de IgE y originan el desarrollo de los sintomas clinicos . Sin factor X, es posible clue los individuos clue responden intensamente no presenten sintomas clinicos despues de un corto periodo de exposici6n al alergeno, pero estos sintomas pueden aparecer cuando la exposici6n es prolongada o en prescncia del factor X.

tiempo Fig. 23 .28. El tratamiento de hiposensibilizaci6n clasico consiste en inyectar repetidamente dosis crecientes del alergeno . Ello provoca un aumento de la [IgGl especifica del Ag y una reduction de la IgE especifica del mismo. Desde hate tiempo se supone clue esto es debido a un aumento de la actividad de las celulas T supresoras, clue se refleja in vitro en una reducci6n de la transformation linfocitaria (TL) inducida por el Ag . En la actualidad se sabe clue tambien puede scr debido a una modificacibn del equilibrio TH1fTH2 de la respuesta inmunitaria frente al alergeno.

Efectos beneficiosos de la IgE

aninnalcs quc en principio rcspondcn solo ligcranncntc, to que rc lucrza la tcorfa to cxpucsta tic la influencia de Ios tactores anthicntalcs ell Lis rcspucstas do IgF .

EFECTOS BENEFICIOSOS DE LA IgE

Ante la grain cantidad de dcstentajas olue suponen [as resilucstas do IgE trente a alergcnos anthientalcs inocuos, cabs haecrse ht siguientc prcgunta : ;pcrr quc ban cscducionadrr hasta nucstros Bias Ios anticuerpos tic lose IgE% Sc ha pcnsado durantc mucho ticmllo Clue ]as IgE 0o11,1160naron para cjcrccr trna firnci6n dctensita cn Ias intcccioncs poi Inchnintos parasites, Ios mccanismos clue intenicncn en estos proccsos sc nurcstran cn la liqura 1R .y. Los Inclrnintos parasito,s quc sc alojan cn cl intestino liberan antigenos quc cstinnrlan cspectaculares respucstas tie IL ,h. i, \ ' de IgCi i en Ios tejidos lintoidcs intcstinales i FLAN1l . I .os mastocitos clue maduran cn cl FLANI sort sensibilizados corn IgE migran hasta la mucosa intestinal,

drmdc cstablc(:cn contacto Con Iris antigcnos del hclminto v SC dcsgranulan, lltlCrando mctliadorcs quc urmcntut la I)crnncabilitlad vascular y atracn hacia csa zone a Ias cclulas inflantato rias, cntre Ias quc se encucntr ;ul Iris crrsinritilrts- Adentas, Ias IgF: prtxlucidas en Irts ganglions lintaticos scnsihilizan al parasito para quc Pucda scr atacado prtr Ios cosinotiilos, quo: posccn rcccptorcs LIcl dominio Fc tic Ias IgE . En la region intcctada pcnctran tam Neil ntolcculas del complententor c Ig(-; espccificas tic] helnninto, dcbido al aumcnto tic la pcrnacahilidad vascular inducido poi mediadorcs como la histamine . Al ntisrno ticnnpo sc produce un aumcnto tic la produccion tic morn poi parts de Ias cclulas call cit'Ormcs do la nlucrns .t . 'F0dos cstrn> ntccanisnnos actuan conjoin ii \ tiCncn cr>nto etnnSCCUCrtcla la induction CIc IC%iorlC% cn cl par.isito \ finalrncntc su expulsion . (lomo aproximadamcntc un tcrcio do la pohlacion nuutdial prcscnta intcccioncs poi hclrnintos, Itucdc quc esta ace la pre skin c\olutita tluc originr~ cl dcsarrr>Ilo do ]as inntunorglobulinaa do class IgE, sicndo Ias alergias un lamentable etccto sccundario tic cstc a\ancc c-oluti\-o .

Las celulas TH2 (y Ias citocinas que producen) son el factor mas importante en el desarrollo de Ias alergias . ZEs cierta esta afirmaci6n? ~Cuales serian en su opini6n Ias estrategias mas acertadas para desarrollar nuevos tratamientos contra Ias alergias? ~C6mo se puede bloquear especificamente la fase tardfa de Ias reacciones alergicas pulmonares? ~Que efectos tiene este bloqueo sobre Ias respuestas asmaticas?

~C6mo se puede determiner la importancia relativa de Ios factores geneticos y ambientales en el desarrollo de la alergia? ~Por que ha aumentado la incidencia de Ias alergias en la poblaci6n hasta un 30%, cuando en 1900 era solamente del 1-2%? ~Es el asma alergico un verdadero ejemplo de hipersensibilidad de tipo retardado a nivel pulmonar?

LECTURAS ADICIONALES
Beaven MA, Metzger H Sigral transduction by Fc receptors : the Fcl:RI case Immunol Today 1993,14222-6 Bruynzeel-Koomen C, Wither D, Toonstra J, et a! The presence of IgE molecules on epidermal Langema ,ts' eel s in patients with atopic dermatitis Arch Derrnatol Res 1986,278 199-205 Coca AF, Cooke RA . On the classificat on of -he phenomenon of hypersensitiveness . J Immunol 1923 ;8 :163 . Cooke RA, Vender-Veer A . Human sensitization . J Immunol 1916 ;1 :201 de Vries JE . Novel fundamental approaches to intervening in IgE-n,ediated allergic diseases . J Invest Derrnatol 1994,102 :141-4 . Gah 5- blew concepts abou, the mast cell % Engl J Med 1993 328 257-65 . Geha RF Regulation of IgE synthesis in humans o Aiiergy Cin Immunol 1992,90143-50, Gordon J CD23 novel disease marker with a split personality . Clin Exp Immunol 1991 ;86 :356-9Gordon JR, Burd PR, Galli SJ . Mast cells as a source of multifunctional cytokines . Immunol Today 1990 ;11458-64 Juto P . Elevated serum immunoglobulin E in T cell deficient infants fed cow's milk . J Allergy Clin Immunol 1980,66 402 Kaliner MA The late-phase reaction and its cli-iical implications . Hosp Prat 1987,15(Oct) :73-83 . Kharitonov SA, Yates D, Robbins RA, et al. Increased nitric oxide in exhaled air of asthmatic patients Lancet 1994 :343 :133-5 . Marsh DG, Neely JD, Breazeale DR, et a+ Linkage analysis of IL-4 and t ~til se , un- n-munoglobuother chromosome 5931 1 r j[ ., lin E concert,a-ic-ic, Science 1':i' i - 264 -2-6 . Miller JS, Schwartz LB Human mast cell proteases and mast cell heterogeneity Curr Open Immunol 1989 ;1 637-42 Montfort S, Robinson HC, Holgate ST. The bronchial epithelium as a target for inflammatory attack in asthma . Clin Exp Irtrnunol 1992 ;22 :511-20 . O'Hehir RE, Lamb JR, Strategies for modulating immunoglobulin E synthesis Clin Exp Allergy 1992,227-10 . Prausnitz C, Kiistner H . In : Gell PG-1, Coombes RRA (eds)- Clinical Aspects of Immunology. Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1962 :808-16 (Appendix) . Romagnani S . Human TH1 and TH2 subsets : Regulation of differentiation and role in protection and immunopathology . Int Arch Allergy Immunol 1992 ;98 279-85 . Sedgwick JD, Holt PG . Induction of IgE-secreting cells in the lymphatic drainage of the lungs of rats following passive antigen inhalation lot Arch A!!ergy Appl Immunol 1986,79:329-31 . Shau-Ku H, Marsh DG . Genetics of allergy . Ann Allergy, 1993 ;70 3 : 7-58 . Spry CJF, Kay AB, Gleich GJ . Eosinophils 1992 . Irtmuno! Today 1992 ;13384-7 . Sutton BJ . Gould HJ . The human IgE network . Nature 1993,366 , ;2 1-8 Takafujl S, Suzukki S, Kolzumi K, etaf Diesel-exhaust particulates inoculated by the intranasal route have adjuvart activity for IgE production in mice . J Allergy Cho Immunol 1987,79 639-45 . Wide L, Bennich H, Johansson SGO . Diagnosis of allergy by an in vitro test for allergen antibodies- Lancet 1967ii :1105 .

Hiperse nsibilidad de tipo II

Las reacciones de hipersensibilidad de tipo II son debidas a anticuerpos IgG o IgM especificos frente a antigenos presentes en la superficie de las celulas o en la matriz extracelular. Tambien se pueden producir anticuerpos frente a componentes intracelulares . Estos no suelen dar lugar a efectos patol6gicos, aunque pueden resultar 6tiles como herramientas diagn6sticas . Las reacciones transfusionales frente a los eritrocitos se deben a anticuerpos especificos de los antigenos de los grupos sanguineos, que se pueden formar espontaneamente o ser inducidos por un contacto previo con tejidos o sangre incompatible durante procedimientos de trasplante o transfusi6n, asi como durante el embarazo . " Los anticuerpos provocan lesiones celulares y tisulares al activar el complemento y al unirse a celulas efectoras con receptores de Fc;, a las que activan . " La enfermedad hemolftica del recien nacido se produce cuando atraviesan la placenta anticuerpos maternos especificos de los antigenos de grupo sanguineo del feto, que destruyen los eritrocitos de este ultimo . Las lesiones tisulares pueden ser producidas por anticuerpos frente a membranas basales, moleculas de adherencia intercelular o receptores . Los efectos patol6gicos dependen de [as moleculas y tejidos contra los que vayan dirigidos los anticuerpos .

24

Las reacciones dc hipCrsensihiliclad tic tip)) II Cst .i n Irtctliadas por anticucrpos Ig(i c lg)Nl quC SC Unen tic forma CspccitiCl :t tic tcrminadaS celulas o tcjidos . Por tanto, Stil() afeetalt a aqucllas CC lulas o tcjidos que poscan Ios anti,Cnos atiCCUatlos . F.n gCncral, Iou :uttiCU(:rpts dirigidos Contra antigenos dC la superficie cclular surlCn ser parogcniccs, nricntras qur Irx dinggiclos Contra III 11"C1101 intr :uClul :u- CS nt) . PoI - tanto, la ditcrcncia cntrc Ias rcac Jones dc hipcrsensibilidad tic tips) I I \ Ias tic tipo III es que en cstas tiltimas los anticuerpos Soil CspCCitiCos do antigenos disucltos cn cl sucrt), coil lo, quC sC u)ntbjnan \ .1,111 lugar a innnrrn)CtnrrplcjoS CiI*CUlantCS . En CStC ultimo tipo tiC rCaCCioncs Lts Icsioncs sc prodUCCn cuando to,, inmunocomplcjos sc clcpositan dc forma no cspcCitica sobrc dctcrminados tcjittos -/'u urgan()s \. Cap . 2 :5) ', .

na \ tutalmcntc activadas, las celulas efectoras pucdCn prc)\ocarC))nsiticrabICS lCSio11CS tistfarcs cap . 10 Los cfi\- crsos isotipos do anticuerpo induccn cstc tipo do reacciones cn diterente rnedida, SCg6n "It CapaCiddd para unirse .t ( ;l q t) interacCionar coil to ,, receptores dc Fc tic Los CClulas CfCctoras . Los fragmcntos dcl complcrnento o ] .is Ig(i pueden actuar cortno opsoninas unicrulosc a Ios tcjidos dcl hucspcci o a Ios micrtx)rganismos, ingiriendo dc%pucs Ios tag,0CitoS csras partICULts opsomizadas . Las opsoninas ru) solamcntc potcncian los cfcctos ticstruCtorcs dc h)s fagocitos mctiianrc la cstinwlaciint dC Su ac ti\ Aid lisosomica \ sit capacidad prodUCtora dc ComplICStos rCacti\os dC oxigcno, sins) quo: tantbicn atnnCnta11 su capacidad 1,3r,1 prt)tlucir Icsiomrs inmun))p,u))higicas cn Ias r-Caccioncs tic hipcrsensibilidad tic tip)) II ~`/q. 24 .i1 . Por cjctnplo, Ios ncutr)) filo)s Lid liquids) sinmial tic un pacicntc con artritjs rcUntatoidC

MECANISMOS PATOGENICOS
En la hipcrscnsihilidad tic tips) 11 Ios anticuerpos frcntc a antigenos situados cn supcrficics celularcs o sobre tcjidos intcraccion :m con CI ComplCmento \ Con una Seric tie MtIlas efectoras \ pr))\ocan daf os cn [as celulas liana i)ltr . 24.11 . Loa \ez que CI anticuerpo) SC unC a la superficie dc ht cclula o tcjitio, puede tijar \ aCti\ar Cl ComponCntC ( :1 kiCl ComplcItICnIo Las Co11SCCLICncias dc esta actl\acion soil las slgulcntcs \-. cap 41 : " I .os trtgntentos del complemento i; ( : 3a \ ('5a'1 pro)ducidos tras la :tcti\aCio)n atracn hacia la iona :t rnacrr)lagos \ polimon-tonudeares, \ cstimulan :t Its ntastoCitos \' ,t IoS basofilos para quC protiLIZCan moleculas quC atracn y actn- an a otras CelUlds CfCC toras i, \ . Cap . 101La aiti\acic)n tic la via clasica clcl contplcrncnto v dcl buds tic arttplificacioin clan lugar al dcpoisito dc (3h, C3bi V ( :3d sohrc la mcmhrana dc la Cclula diana . I ras la acti\aci6n dc I,t \ia cl :isica cicl complemento \ dc la via litica so: ti)rman complcios dc atagLIC a la ntcrnbrana (15h-9, quC SC inscrtan Cn la mcmhrana dc la MULL liana . Las celulas efectoras cn CStC Cast) Ic)s m3Croifagos, Ios ncutri)filos, Ios Cosi11oifilos \ las Cclulas ti Idcl invlcs killer, ascsinasI) sc uncn al ComplCjo antigcno anticuerpo mediantc sus receptores dc Fc, o a ( :3h, C3bi o C3d ntediante sus receptores dc C3 24.2 \' cap . 51 . La uni6n kiCl antiCUcrpot a his receptores dc Fc Cstinurla . l a produccibn dc cantidadcs adicionales dc Ieucotricnos \ prostaglandinas por parts dc los fagocitos; estas moleculas inter\icnen cn Ias rcspucstas intlamatorias (\. cap . 5) . Las qui miocinas N Ias moleculas cluimiotacticas, cntre Ias quC se CnCUentran CSa, CI Icucotricno B, f LTI', ) 1 \ Ios pcptidos dcrivados do la fibrina, tambicn pueden acti\ar a ],is celulas clue aCUden hacia la zona dc la rcacciun . Una \CZ Unitias firmCnTCntc a SUN C%IUlas dia Citotoxicidad dependiente de anticuerpos anticuerpo IgG IgM e IgG C1I q C3 activado j via clasica via litica

celulas efectoras lesiones de la membrana

Fig. 24 .1 . Todas Ias (.Clulos ufectoras Icelula,. K, p'aquetas,

neutr6filos, eosinofilos y fagocitos roononudeares) poseen receptores de Fc, mediante los que se unen a los anticuerpos fijados sobre los tejidos diana . La activaci6n del componente C3 del complemento puede inducir directamente la lisis de las celulas diana, pero ademas permite que las celulas fagociticas se unan a sus lianas a traves de sus receptores de C3 b, C3bi o Cad, uni6n que activa a estas celulas efectoras .

Hipersensibilidad de tipo II

produtcn m:is superoxido al scr cstirnulados clue JOS ncutr(itilos circulantcs tic Csc niisnio pacicnte . Se crce title esto cs dehido a la icti%aci()n dc Ios ncutr(rfilos en la articulaci('m afcetada, nit diana por innitrm~t(~rnplcjos o por tragnicntos tic componcntes dCl C0>n1PICn)ento . Los niccanismos clue utilizan las celulas etectoras ell las reaCcioncs tic hipcrsensibilidad dc tipo II para provocar Icsioncs en sus cclulas diana son parccidos a JOS yuC utiliz :ui para atacar a Ios agcntcs patogenos habituales i_jiq . ?4.4'l . Asi, Ios p;ucigcnos quC no son rcsistcntcs a las agrcsioncs tagociticas son destruidos en cl interior de Ios tagolisosonias por la acci61l conjunta de metaholitos dcl oxigcno, radicaics, ioncs, enzinias, nioditicicioncs dcl pH v otros tactorcs quC intcrficrcn en su nictabolisnto . (:uantio la diana es demasiado grancic conio para podcr scr to gocitada sc recurre a la cxocitosis, cs dccir, ht libcraciini dcl t(mtenltio do Ios granulos v dc Ios lisosonias cn LIS proximidadcs tic . 24.4'1 . Fn algtuias oca .7 un objctivo scnsihilizado prev -ianicntc (f sioncs, coma, por cjcniplo, en [as rcaccioncs tic Ios cosinotilos trcntc a Ios esyuistosonias fv . cap. 18 ;, la csocitosis dcl contcnido tic los granulos cs hcncficiosa para cl Inrisped ; pcro cuando CI objctivo son tcjidos del propio htrespcd scnsibilizados I,rcvia nicrtte con anticuerpos, Ios efectos son nocivos ijuf. 24 .5). Los anticuerpos tanibicn induccn Itipcrscnsibilidad al tacilitar la union dC las cclulas K con Ios tcjidos diana. La niai aria dc las ululas K pcrtcncccn a la subpoblaci(m dc linfocitos granulosos grantics, V Se unCn a Ios anticuerpos mcdiantc receptores tic Fc dc alta afinidad . Se ha coniprobado clue las cclulas K son citotoixitas in vitro trcntc :t diversos tipos dc cclulas, v parccc quC utilizan principalnictue las citocinas y la cxocitosis do grinul()s. Sin Cnibarg,o, no cs tacil dctcrniinar hasta Clue punto inter\ icncn las cclulas K ell hts rcaccionics do hipersensihilidad dc tipo Ii . Una do

comertasa, micntras yuc ell la niavoria de las cclulas i(ni r1UtICO son ncccsarias nitrcli;ts nias molcCUlas tic Cstc tipo . En cl rcsto dc cstc tapitulo sc analizan algunas cnterniedadcs en ]as yuc SC crcc quC la destruction dc las cclulas diana o IaS Icsioncs ill niunop ;itolcS6cas son dcbidas ell gran nicdida a rcaccionCS dC Itipersensihilidad dc tipo II .

[as razoncs cs yuc n( r czistcn dos tipos (IC Cclula yuc prcscntcn cxactamcnte la misnia susccptil,ilitlad trcntc a un .t Mull Ctectora dctcrminada . ESta SUSCCJ,tihihdad dcpcndc do la cantitlad dc antigcno cxprcsado sabre la superficie tic la cclula diana N de la catracidad intrinseca dc las ditcrentes cclulas diana para resistir Lt . agrCsi(incs. I'or Cjctttplo, tin critrocito puede scr lisado cuancio sc fija a sit nicnibrana una irnica nitrlecula con actividad (:5

REACCIONES FRENTE A LAS CELULAS SANGUINEAS Y LAS PLAQUETAS

Uno dc Ios cicniplos niis claros tic una rcacci(in dc tip( r II son hs respuestas frentr a Ios critrotitos . Estas ticnen consccucncias imp(n- tantcs en Ios siguicntcs Casos: " Incompatihilidad en I :is transtusioncs sanguincas, Cn las yuC cl receptor Sc scnsibiliza frentr a Ios antigenos dc to superficie dc Ios critrocitos dcl donante . Lnlernictiad Iicniolitica dcl rccien nacido, cn la title la niadrc ha sido scnsibilizada prcvianicntc trcntc a Ios critrocitos tcttlcs. Anemia" Iicnrolititas autointnunitarias, en las yuC cl paCiente se still, pr(rPios Critrocjtos. scnsihiliza Ircntc ,t Las rcaccioncs trcntc a las playuetas pucdcn dar lugar a tromhocit(rpenia, micntras yuC las rcacciones frentr a Ios ncutrcifilos N' los linfircitos sc ban rclacionado con cl lupus critcniatoso sistcniico .

Mecanismos citotoxicos de tipo II

fagocito fosfolipasa A, Fig. 24.2 . Los Ab unidos a los Ag de la superficie de las celulas diana opsonizan a estas tiltimas de tal forma clue las convierten en objetivos para los fagocitos. El entrecruzamiento de los receptores de Fc del fagocito : activa un complejo de membrana con actividad oxidasa, clue origina producci6n de radicales de oxigeno; induce un incremento de la fosforilaci6n proteica y, por tanto, de la actividad celular, y aumenta la liberacidn de acido araquid6nico a partir de los fosfolipidos de membrana (catalizada por la fosfolipasa . Los inmunocomplejos Ad inducen el deposito del componente C3b del complemento, clue tambien puede interaccionar con receptores de los fagocitos. La activacidn de la via litica da lugar al ensamblaje de complejos de ataque a la membrana (CAM) a partir de C5-C9.

estimulaci(in mediante el entrecruzamiento de los receptores de Fc

prosiaglandinas, leucotrienos i ceptor ~lee Fc n

v , 1 g 8nfl- enos de membrana

el anticuerpo fijado activa el complemento , (via clasica)

receptor de C3 complejodeataque~ a la membrana C3b C3d

P'

via litica del complemento

dML

celula diana

Activation de los neutrdfilos

funcidn del neutr6filo adherencia metabolismo del oxigeno liberation de enzimas lisosdmicas quimiotaxis fagocitosis + _ activador IgG C3 IgG + C3 C5a C5b67 IgA

+-++ ++++ + ++++

+ + +

Fig. 24 .3 . Los neutrdfilos son activados por inmunocomplejos We IgG o IgA) y por los componentes activados del complemento. Cada niediador posee su propio espectro de actividad . La activation de C3 (clue puede originar C3b, C3bi o C3d, segbn la madurez de las celulas implicadas) y la activacidn mediante las IgG se potencian mutuamente . La actuacidn conjunta de estos dos factores transmite a las celulas senales intensas .

Reacciones frente a las celulas sanguineas y las plaquetas

I laq .t cl +nwncntrr w Imn idr~~titic .t(i(~ cn I()s sere, hi+m,an(), m:is do 2(1 sistcmas cic grupo sanguinc(~, title clan lugar .t m.is do 2011 \ariantcs gcncticas dc anti~(cnos critrocitarios . Un sistcma dc grupo sanguinCO CcnsistC ell, ull I(ICL+s gcnico yuc coditiC.a till antigen( do la supcrficic (ic las celulas s;utguincas igencr :tlmcntc do los eritrocitos, aunyuC no sicmprC 1 . En each uno dc los sistcmas Puccic habcr clos o mas tenotipos. Por cjcnaplo, cn cl sistcma AB() cxistcn cuatro tenc~tip(~s + :1, B, AB \ () ;, \ I)or tall to son posiblcs cuatro grupos sanguineos . Un indicidtuo con till determinado grul,o sanguinco es capaz c1c reconoccr Ios eritrocitos yue lioscan antigenos do grulpo sancuinco 110gcnicos (CS dccir, ajenosj,) prociucira antiCUcrpos contra cllos. Sin embargo, en cl caso dc algunos antigenos de grupo s:uaguillCO CSLOS alltiCuerpos tambicn pueden scr pr(rducici(~s dc torma I'naturak, cs dccir, sin necesiciaci cic sensibilizaciein lirecia mediante eritrocitos cxtrarios +, v mas adclantc 1 . La transfusi6n Lie eritrocitos alogcnicos :a tin indisiduO clue hosca anticuerpos ti -ente a cllOS pucdC originar la destruccirm dc Isis critr(~cit(rs transfundid(rs Y la ape rici(Sn cic Ios sintomas dc una , rcaccioSn transfusional . , . Algunos do Ios sistemas dc grupO san;'uinCO (1). cj ., ABU v Rhesus )se caractcrizan poryue sus antl.Icnos soil inmull(igcnos rcl :uis ;unCntc Potentes ; estOS antigenos suCICn dar lugar a la tiarmaciun de an ticuerpos con mas frccucncia clue otros. Cuando se pretcnde Ilcvar a caho una transtusi6n sangumcd, cs importantc ascgurarsc dc

Las reacciones transfusionales se producen cuando tin receptor posee anticuerpos capaces de reaccionar con los eritrocitos del donante

yuc Ios tipos de sangrc del rCCCptor Nr dCl donante son c<mipati blCS ion rCSPCCto a CStOS l;ruPos sanguineos prjncipalcs; en caso contrario se pueden producir reacciones transtitsionales . Algunos de los principalcs grupos sanguinc(rs yuc SC COIIOCCn cn Ios scrcs humanos sc cnumcran en la /uqura 24 .6 . El sistema ABO. Este sistema dc grupo sanguinCO Cs tic Bran importancia . I .os cpitopos intplicados aparecen en nttrchas otras celulas apartc dc Ices eritrocitos, y forman I,artc de los sustitu acme, gltrcidiCOS dc cictcrminadas 41LICOprotCilla.S . I .a CstruCtura de cstos hidratos do carbono, asi como la do Ios yuc dctcrininan

Mecanismos de lesion
acci6n antimicrobiana normal rece(7t':f
iI. F :' .

Fig. 24 .5 . Fagocito atacando una membrane basal. En esta microfotografia electronica se observa tin neutrofilo (N) y tres monocitos (M) unidos a tin capilar de una membrane basal (B) de rinon de conejo recubierta de anticuerpos anti-membrane basal . P = podocito . .3 .500 . (Por gentileza del profesor G. A. Andres .)

011 receptor de C3 1 . adherencia microbio de los neutrofilos

Los cinco sistemas mas importantes de grupos sanguineos relacionados con las reacciones transfusionales
2. fagocitosis 3. fusion lisosomica sistema loci genico antigenos frecuencia de los fenotipos A B AB 0 RhD' RhDK k Fy'Fyb Fy' Fy b Fy MM MN NN 42% 8% 3% 47% 85% 15% 9% 91% 46% 20% 34% 0,1% 28% 50% 22%

reaction de hipersensibilidad de tipo II

ABO

A,Bo0

Rhesus

2 loci estrechamente ligados; antigeno principal = RhD 1

Coc Dod Eoe Ko k

Kell

de los neutrofilos

II .

frustrada,,

III . liberation de enzimas al espacio extracelular

Duffy

Fya, Fyb o Fy

Fig. 24 .4 . Las lesiones producidas por los neutrofilos se deben a la puesta en funcionamiento de sus mecanismos antibacterianos normales (1) Los neutrofilos se Linen a los microbios mediante sus receptores de Fc y C3 (2). Despues el microbio es fagocitado y destruido mediante la fusion de los lisosomas, que da lugar al fagolisosoma (3). En las reacciones de hipersensibilidad de tipo II las celulas del huesped pueden ser fagocitadas de forma parecida, pero cuando la diana es muy grande, como en el caso de una membrana basal (I), los neutrofilos no pueden fagocitarla (11). En esos casos liberan el contenido de sus lisosomas, danando a las celulas vecinas (III) .

MN

MoN

Fig. 24.6 . No todos los grupos sanguineos presentan la misma potencia antigenica en las reacciones transfusionales: RhD provoca una reaction mas intense en los pacientes incompatibles que otros antigenos Rhesus ; Fy' es mas antigenico que Fy b. Las frecuencias tabuladas se refleren a pohlariones de raza blanca ; en otras razas las frecuencias son difetentes .

 Hipersensibilidad de tipo II

CI sistcma dC grupo sanguinco dc Lcstis, depends dc Ios genes quC CodifiC :u1 las cnzinlas quc transficrcn los azitcarcs tcrnlinalcs al csquelcto dc la molecula dC llidrato dc carbono (fuf . 24 . -) . 1 ,t m:1coria tiC hts individut~s dcsarrollan :tntiCUcrpos fircntc a los intigCnos Alit) AogcniCOS aunque no haaan sido c.xpuestos a critrocitos extrat5o>s, esta sensibilizaci6n se dche nl contacto Coil epi topos identicos quc CasualmcntC cxpresan do forma rutinaria una Bran cantidad dc microorganismos. Pctr Canto, Icts anticucrpos frentc a los antigenos AB() son extrutrdinariamcntc trccucntes, let gttc lace espccialtncnic inapotrt :uate la terificaci6n dc los grupos tic] donantc . Lid receptor antes dc Ite\'ar :i cibo una transfitsio>n Sanguinca. Sin embargo, todo cl mundo pucdc tolerar cl antigeno 0, por to quC Ios indi\- iduos con CstC tipo tie sangrc se ctnsidcran donantes unitcrsalcs para cl sistcma AIM.

dcl sistcma MN he-man parts dc la region glucosilada del extrenut amino dC Ia UIict,hrr- ina A, una glucoprotcina qUC SC CnCucntra presents en la supcrficie dc h-ts eritrt>citos . La antigenicidad cs dcbida a polimortismos cn los aminoacidos I v 5 . Los .uatigenos del sistcma Ss, rclacionado con cl anterior, fornlan partc dc to glicotarina B. En la figtrrtt 24.8 se cnumeran las relacitr ties cxistcntcs ctitre grupos sanguineos V protcinas Sit crficialcs dc Its critrocitos . Las rcaccit mss transtitsionalcs dcbidas a cstos grttpos sanguineos secundarios stn poct> treinCaltCS, a no set quc sc administren a un indiciduo multiples transfusiones sanguineas . AI igual clue cn cl cast, tic los grupos sanguineos principales, cl ricsgo sc pucdc rcducir A nainitno rcalizando las prucbas cruzadas adCCUadas con sangrc del donantc Y del receptor. rantirar quc la saingrc ticl receptor no contienc anticucrpos Capaccs dc rC .acci<,nar coil Ios critrocitos transtinadidos (del donantc i v ticstruirlos . Pear ejetnplo, los anticucrpos frente a los antigenos ticl sistcma AB() inducen la at lutinaci(in de [as Celulas incompatibles, sicndo la rcacci6n \isible a simple tista. Los sistcmas do grupos sanguineos secundarios dan lugar a reacciones naas CichiICS, quC a aCCCS solamentC CS pttsible detcctar inediante to pructha indirccta dc Coombs (c. /ia. 24 .12) . (:uando sc transtitndc sangrc cntcra al indit iduo, tanlhicn cs ncccsario cornprobar quC cl sucro del donantc no conticnc antiCUCrpos trcntc a los critrocitos del receptor. Sin embargo, la transtusi6n dc sangre cntcra no cs una practica habitual ; la nrayor parte de la sangrc donada sc scpara en sus traccioncs celuhr v scrica, clue despues son utilizadas indcpcndicntctnentc .

Sistemas de grupos sanguineos secundarios . Los cpitopos

El sistcma Rhesus . Este sistcma tambien cs into importantc, t:i quc t()ttst1tU\C la principal causa dc cntcrmcdad 1lemolitica del rccit n n .acid() i I .l IRN1 . lots antigenos Rhesus son protcinas dc ,',U kohl asociadas coil Ia mcnabrana, quc sc exprcsan cn cantidad naodCrada ell la SupcrfiCiC critrocitaria . Los antigenos cstan coxiiticados cn dos genes estrechanlente ligados, Rill) 'v WiCcEc, Coil una homttl()gia del 92%. El mas importantc dc cllos cs cl locus Rlicsus t), tichidot a sit clet'ada innuu1ogcnicidad, pcro cn los pacicntcs Rill) cstc lochs falta por complcto . El locus RtiCcEc codific:1 una tnttlccula quc cxprcsa los cpitopos RIW/C a, Blab./c. Reacciones clue dan lugar a los grupos sanguineos ABO
oligosacarido precursor

Pruebas cruzadas . El objeti\o dc las prucbas cruzatias cs ga-

En las reacciones transfusionales se produce la destruccidn masiva de los critrocitos del huesped

La transtitsioin dc critrocitos a un receptor quC pOSca antiCUCrpos trcntc a esas celulas pro\oca una reaccio'm innac(liata . Rapidamentc antigeno H

Antigenos eritrocitarios de grupos sanguineos

glucoproteina de superficie de los critrocitos proteina de transporte anionico glicoforina A transportador de glucosa Mr 45.000-100 .000 Mr 30.000 glicoforina B glicoforinas C y D CD44 180 kdal) Kell (93 kdal) Fg (40 kdal) grupos sang . expresados ABO, li MN ABO, li ABO ABO, Rh N, Ss Gerbich (Ge) Cromer Ina/Inh Kell Fg 1,2 x 105 2,5 x 10 ,
105

n. de epitopos por celula 10, 106 5

x

NAG tGal j NAGA antigeno A ~Fua grupo sanguineo (fenotipo) A B AB 0 genotipos AA, AO BB, BO AB 00

? Gal :, (Gal)

Fu j amigeno, o
antigenos anticucrpos sericos frente a ABO A B AyB H anti-B anti-A ninguno anti-A y anti-B

105

DAF (factor acel . de degradac .)

<10.000

3.000-6 .000 3.000-6 .000 12 .000 1 .500-4 .000

Fig. 24.7 . Formacion de los grupos sanguineos ABO. La enzima producida por el gee H transfiere una molecula de fucosa (Fuc) a la galactosa (Gal) terminal del oligosacarido precursor. A continuacidn, los individuos clue poseen el gen A anaden una molecula de N-acetilgalactosamina (NAGA) a esta molecula de galactosa; los clue poseen el gen B anaden otra molecula de galactosa, dando lugar a los antigenos A y B, respectivamente . Los individuos con ambos genes sintetizan ambos tipos de Ag . En la tabla se muestran los genotipos y los antigenos del sistcma ABC. La mayor parte de los individuos sintetizan anticucrpos naturales frente a los antigenos de los clue carecen. (NAG = N-acetilglucosamina.)

luterana (78 y 85 kdal)

luterana

Fig. 24 .8. Los epitopos de los grupos sanguineos de naturaleza glucidica, como los ABO y los li (expresado en el precursor del polisacarido ABO), pueden aparecer en mochas proteinas diferentes, incluidos los Ag Rh . Algunos Ag, como los Rhesus o los Cromer, son protcinas, por to clue sus cpitopos solamente aparecen en un tipo de molecula . En general, los grupos sanguineos mas importantes aparecen en los critrocitos en grandes cantidades, proporcionando una gran cantidad de dianas para la lisis mediada por el complemento o para la eliminacion mediada por receptores de Fc .

Reacciones frente a las celulas sanguineas y las plaquetas

consiguientc Hujo dc ICUCOCitOS s . playuctas Ilacia la zcrna l . su suhsiguientc actisacioin . Sin embargo, en la actualidad sc rcalizan pruchas cruzadas cntre el donante y el receptor part dctectar incompatibilidadcs ABt), por to yuc cstc tipo do rcaccioncs cs Il11IC pOCO fl-CCLIClltC . LOS 111tiCtlcrpos fl"entc a otros antigcnos del injcrtc, ip . Cj ., Ids Il1cr1CCUlds CPHj inducidos por un trasplante prcviol tambicn pucoicn dar higar a rcaccioncs sic cstc tips, .

apareccn ficbrc, hipotcusidn, n :iuscas X scSmitos, asi conlo dolorcs cn la cspalda s . cn cl toirax . La t;ra\cdad de la rcacci(in dependc dc la class dc los anticuerpos inlplicados y dc su ctntidad . Los anticuerpos frcnte a Ios anti"ends LIcl sistema AB() suclcn set dc class IgM, por to yuc induces aglutinaciOll, :tail aciOll del complcmcnto s, hcnu,lisis intralascular. La respuesta a otro,s grupos sanguincos cs dc tipo IgG, y no da lugar a una aglutinaciun tan intcnsa COI110 cuando inters- icncn anticuerpos dc class Ig4l . L.I S celulas scnsibilizadas con IgG suclcn set ingcridas por los tagocitcrs csplcnicos v Ilepaticos, tun que en l :ts rcaccioncs nlas graves sc puede producir lisis mcdiada por cl complcmcnto . Esto pucde conducir a un shock circulator rio, t. la libcracioin del contcnido LIc Ios critrocitcls pucdc (far lugar a una necrosis ttlbtlIar aguda ell Ios riliclnes . Estas rcaccioncs transhlsionlalcs agudas se SuCICII producir en indi\ iduos quc no es tab :n sensibilizados pre\ianlcnte, l. suclcn aparecer transcurridos dias o scnlanas desdc la transfusion, cuando sc cmpiczan a sintctizar anticuerpos frentc a ]as celulas cxtranas . l .as COnsccucncias chnicas pucdcn set cl dcsarrollo do anemia o dc ictcricia . Tainbien se pueden producir reacciones transtilsiolnalcs Irerl to a crircrs conlponentes sanggtlincos, aunque sus crntsecucncias no suclcn scr tan graces conto cn cl caso dc Ios eritrocitos . El rechazo hiperagudo de trasplantes esta relacionado con las reacciones transfusionales El rechazo hipcr .lgud dc un trasplantc se produce cu,tul,h, el receptor del trasplantc poser prcviamcntc anticuerpos ti- cntC al tcjido inicrtado . Solo sc produce en tcjidos quc son rcs- ascularizados directarncutc dcspues del trasplante, conlo, pclr ejenlplo, Ios rifoncs . Las rcaccioncs de rechazo, nlas grascs dc estc tipo, sc dc bell :t Ios antigcnors del sistema AB() quc expresan Its celulas rcnales . Las Icsiones sc proxiuccn poll' la action dc Ices anticuerpos t. la actiucion del complclncnto cn Ios s asos sanguinccls, Coll Cl Enfermedad hemolitica del recien nacido primer parto periodo posparto

La enfermedad hemolitica del recien nacido se debe a anticuerpos IgG de procedencia materna que reaccionan in utero con los eritrocitos del feto

la entcrmcdad hemolitica del recien nacido i EH RN ? aparccc cuando la nladrc ll :t side, scnsillilizada prc\iamcntc dente a Ices antigcnos dc los critrocitos del tcto l. silltctiza :lnticucrpos IgG ti-entc a ellos . Fatcls :ult1Cucrpon atrasiesan la placenta o. reaccionan con Ios eritrocitos tetales, pros ocando su dcstrLICCit111 r /its . 34.9 s' ?4.101 . El antigeno implicado con mas frecucncia cs cl Rhesus 1) ( Kill) ) . El pch,ro do FHRN surge cuandcl unit nladrc lth scnsibilizada prc\ialncntc Ircntc al :uttigcno JUL qucda cnlbarazada dc un letol Rh' . La scnsibilizaciun de la madre Rh trcntc a Ices critrocitox Ith' se suele producir dtllalltC Cl parto de sit primer hijo Rh', dcbido a la transtercncia dc critrocitcls tctalcs al sistema circulatorio ntaterno a teases dc la placenta, yuc a continuation son rcconocidos por Cl sistema inmunitario, de la madre . 1'c,r tanto, cl primer hijo incompatible no slide resultar atectadcl, micntras que Ion siguicntes hijos sail tcnicndo cada scz macor prohabilidad do padcccr la cntcnncdad, sa yuc en each nucs o cnilarazo la madrc woke a set scnsihilizada dc nucso . Tanlbien SC pucdc producir EHR\ dcbido a otros grupos sanguincos, siendo cl Segundol cut orgen dc tirecuencia el antigeno K del sistema hell . Las rcaccioncs dcbidas a este ultirtto soil nlucho I11CI10S ti-ecucntes que LIS dchidas a Kill), va yuc la prcl -alcncia del :ultigcno K (9'!s,} s. su antigcnicidad son nulcl,cl ntcnorcs .

sucesivos embarazos Fig . 24 .9 . Algunos eritrocitos de los fetos Rhesus' (RhD') se introduces en el sistema circulatorio de la madre, generalmente durante el parto. En consecuencia, despues del parto induces la production de anticuerpos anti-Rh de clase IgG . En los siguientes embarazos estos anticuerpos IgG atraviesan la placenta y penetran en el sistema circulatorio fetal (las IgM no pueden atravesar la placenta) . Si el feto es incompatible, estos anticuerpos destruyen sus eritrocitos .

feto RhD'

Fig . 24 .10 . Recien nacido con EHRN . Marcado aumento del tamano del higado y del bazo debido a la destruction de los eritrocitos inducida por los Ab antieritrocito de origen materno qua hall penetrado en el sistema circulatorio fetal . Existe una concentration anormalmente elevada de bilirrubina (producto de la degradacibn de la hemoglobina) . Las petequias hemorragicas de la cart se deben a anomalias del funcionamiento de las plaquetas . El Ag implicado con frecuencia es RhD . (Por gentileza del Dr . K . Sloper .)

Hipersensibilidad de tipo II

Sc ,abc clue cl ricsgo do El IRN ciebido a inconlpatibiliciad RIICSUS CS mcnol" Cuando el padre pertencce a un grupo A13() ditcrcntc dcl do la madre. Esta obscr)acicin sugicrc quc las nla tires Rll yuc SC enCUCntran Cn didla situation dcstru)cn alas r,ipidanicntc has ccltllaS Rh' yuc perlCr1CCCn a un grupo .All() ditcrciitC . Ell conscctrcllcla, los critrocitos tctaics no ticncti ticnlpO LIC scnsibilizar cl si,tcnla innlunitario lnatcrno trcntc al antigc no RA) . Estc cc~ncepto cc~ndujc~ al cicsarrcdlo do la profilasis frcntc a la incompatibilidad Rhesus ; para ello sc adnlinistran a [as madrcs 10 anticucrpos anti-101) inmediatanlentc despucs dcl nacimicnto do un nino Rh , para ccitar yuc los critrocitos RIC tctalcs l)ucclan inducir la sensibilizacion. Por cstc proccclimicnto se ha Ccnlseguido reducir notal)lenlcntc la incidencia de El IRN debdoa a incompatibilidad Rhesus 24 .11 ;.

ticucrpcn suclcn it dirigidt)s Contra antigenos critrocitarios o innituloconlplcios adsorbidos sohre la sul)crficic do los critrocitos. La prucha indirecta de la .uttiglobulina tanlhicn sc utiliza para dctectar la prcsencia de anticucrpos sohre los critrocitos cuando Sc sospCClla yuc czistc una reaction transfusional o EHR\ i% . nl s arriha ) . Las ancnlias hcnloliticas autoinnitlnitarias pttc den scr do trcs tipos, acgtin Nil agents Causal : " Autoanticucrptx calicntcs, quc rcaccionan con cl antigeno a 37'V" Autoanticucrpcts trios, yuc sulo son CapaCes do rcaccionar coil cl antigcno a tcmpcraturas intcriorcs a l7 ~ i)roduuc1os dchido .t rcspucstas alcrgicas a tier " AntiCt :Crl " ()~ tots 1,11 11 Los autoanticuerpos calientes aceleran el proceso de renovation de los eritrocitos Lo', ;ttltoantI000I-j)oS CalicilICS NUCICH It' .l 1111111C nos dcl sistenla Rhesus, entrc lo% (Iuc SC ilIClu) - cn dCtClllllllalltCS do los loci RAW c RhE, acicmas do Rhl) . SC ditcrcncian do los anticucrpos quc aparcccn cn Lis rcaccioncs tr;ulshisionalcs en quc parccc gtrc son capaces do rcaccicmar con sarios cpitopos . Tanlbicn se conocen autoanticucrpos calicntes trcntc a cnros antigCnos do grupo sanguinCO, atlnquc son poco frcCUCratCS. La ma)- cn- ia do cstas ancnuas henu)liticas scan do ctiologi;t drsccnxrcida, pcro algultas Catan asociadas con otras entcrnlcdades ;uttoinnuulitarias . Sc tree gtle en la mahoria do los casos la ane-

Las anemias hemoliticas autoinmunitarias surgen como enfermedades autoinmunitarias espontaneas o pueden serdesencadenadas por reacciones frente a farmacos

En Ln ;ulcnlids IlcnlolitiC:tN dUto~illilttlllit,11-las ranlblcn sr hrtxiuCCn redcciones csl)cnlt.incis trcntc a antigenos do grui)o sanguinco, cn Las quc Ices pacicntes producer anticucrpos trcntc a sus propios critrocitos. Sc dchc sospcchar la existcncia do anemia licmolitica autoinnlunitaria Cn un l)acicnte Ctlalldo la prIlCha indirecta tic la antiglohuhna cs positica (Jill . 24.12; ; csta prucha dctccta la l)rcsenCia do anticucrpos sohre los critrocitos dcl pacicnte . Estos in-

Profilaxis frente a los antigenos Rhesus

1 . sensibilizacion 2 . ausencia de sensibilizacion enfermedad hemolitica del reci6n nacido

anti-D

fallecimientos por cada 1 .000 nacidos vivos ftentr a los

inirOCluc do profilaxis
ACJ RhP .SUS

Fig. 24 .11 . 1) En ausencia de profilaxis

1950

1960

ano

1970

1980

los eritrocitos Rh' penetran en el sistema circulatorio de la madre Rh - y la sensibilizan frente a los antigenos Rh . 2) Si se inyectan anticucrpos anti-Rh (anti-D) inmediatamente despucs del parto, se eliminan los eritrocitos Rh', por to clue la madre no es sensibilizada. La incidencia de fallecimientos debidos a EHRN durante el periodo 1950-1966 se redujo debido a la mejora en los ctlidados prestados a los pacientes. Sin embargo, esta reduction de la incidencia se acentu6 a partir de 1969 cuando se introdujo la profilaxis frente al antigeno Rhesus .

Prueba indirecta de la antiglobulina

aglutinacion ausencia de aglutinacidn

anticuerpo

eritrocito

Fig . 24 .12 . Esta prueba, denominada tambicn prueba de Coombs,

se utiliza para dctectar anticucrpos sobre la superficie de los eritrocitos del paciente . En prcsencia de anticucrpos se produce una

aglutinacion de los eritrocitos al anadir anticucrpos frente a inmunoglobulina humana . En ausencia de anticucrpos dicha aglutinacion no se produce.

Ig 1116-110mana

Reacciones frente a las celulas sanguineas y las plaquetas

mia cs consccucncia dc tina rcnovacion acclcrada dc Ios eritrocitos por partc dc los macrofagos csplenicos, sin gtic interscngan tenomcnos liticos mcdiados por cl complcnicnto . Los autoanticuerpos frios provocan la lisis

autrlanticucrpols calicntes . FSlt~s Jutcr,tmicuerpo~s Son dc cla se IgM c fijan con nrticha cficacia cl complcnlcino . Iran la nlatoria do los easels soil cspCCificos del Sistenla Lie grupo SnnguinCO Ii . Los cpitclpos I c i soil cxprcsador cn los polisacaridos prcCUrsc1res dc Lcrs epito~pols de:l sistcnla ,Oil C0 IISCellerlCla dc la glucclsilacioin incompleta dc la cstructura glucidica central . La rcaccicin do los antiarcrpOS Con los eritrocitos se prOdtICc en la cirCUlaCIOn pcritcrica Ccspccialnlcnte durantc Jos nlcses dc insicrno), cn dondc la tcnlpcratura cn JOS bucks dc capilarcs cutancos puede scr interior .1 30 A' . En los casos iris gras es se puc de producir necrosis pcritcrica, debido a la agregacion dc los eritrocitos a la fornlacioin dc microtror11hos cn Ios pcquchos casos conlo consecucncia do la dCStI-LIct i()n dc Cdulas pcritcricas nacdiada por cl co>nlplemento. Por tanto, la grat cdad dc la anemia es dircctatnerttc proporcional a la actividad del complenlcnto en cl stiero del pacicnte . ( En CstC prOCCSO no SC prOduCC clinlinacicin dc celulas mcciiada por Fc en cl haze ni cn cl higado, ya que en estos cirganos la tenlpcratura es dcmasiado coos ada N los eritrocitos no Sc uncn a Ios anticuerpos .) Las anemia% hcnloliticas debicias a autoanticuerpos frios son propias do indi\iduOS de cdad alanzada . No sc conocc su causa, pcro cs notable cl hccho dc que la clonalidad de Ios autoantiCucrpos quC sc prodLICCn cs niu1 limitada, to quc indica quc cn cl proceso scilo inters ICnCn unus pOCOS clones autorreacti\os . Sill enillurger, se h:111 dctectadO algumls CaSOS secund iriols a intcccio nes por alvcoplasma pnrumouiae-, en este easel la cnicrmedad es de tipo agudo, dc corta duracicin y Jos antiCUcrpos soil dc naturalcz:t policlonal . Sc crec quc casos casos son dcbidos a antigcnos bactcrianos quc presenten reacciones cruzacias con otro% presentes en los eritrocitos, prociuCicndose 1111 tc[16111010 Lie .111111,16611 temporal Lie la tolerancia i \ . Cap . 28 ) . Las reacciones frente a componentes sanguineos

de los eritrocitos mediante la fijacion del complemento I.c)s Hullos dC :luloan tiCUcrpos trrtlS SucICrr scr neat ()rcs yuc los (IC

Las reacciones frente a otras celulas sanguineas estan asociadas con el lupus eritematoso sistemico y la trombocitopenia Anticuerpos frente a los neutrofilos y los linfocitos . 1 ~ . .1ut(),ulticucrpors frente a Icrs ncutr()til()s +, 6a . 2-1.1-1Y som rcrLIaLiC-

r,u11cnte cspecificos do tcjido ; sc uncn Cxclusis :trllentr ,1 Ion net trofilos . fPor cl contrario, los anticuerpos fi'cntc a los antigenos del sistcnla .AI;<) son nlut inespecifico s, va yuc CStOS antigCllOS SC cncucntran cn Ios eritrocitos, cl rincin, Las gl :indulas salitalcS v muChos OtrOS tcjidos.) En CI lupus Crircrnatoso sistcmico i I .I`,S) sc dctcctan anticuerpos trcntc a JOS ncutrofi1OS 1 . los IintoCitols, pcrcl parece quc no intersicncn dc forma significatixa en la patogcncsis dc la cntermedad, probablcnlcnte porquc CStaS Milks sc cicsllaccn rapidanlcntc do los anticuerpos quc sc tirlerl a Su superficie .

Anticuerpos frente a las plaquetas . Lets antICLICrPOS trentC a

las plaductas w cictectan aprolxirnadamente en el 70"6 dc loos caSOS tic ptirpur:1 tr0n1l1OCitopeniCa idic>Iritica, una etltermedad en

Reacciones frente a los eritrocitos inducidas por farmacos: formas en quo el tratamiento farmacologico puede producir efectos nocivos

lisis

Cab
CR1

C3b??
~ ;, .', lizis

Los f1irnracos i;() sus nletabOlito,s S pucdcn prmocar reacciones dc hipersensibilidad tircntC ,1 1,1s CCItiL1s s:u1guineas, incluidors los cri trocitos t. [as plaquetas. Estas reacciones se pueticn producir de trcs mancras ditcrcntcs +.l. 24 .13) : " Union Lie] firnlaco a las celulas sanguineas 1 . produCCiein dc anticuerpos trcntc al misnxr . En este case, para quc SC produ/ca la rcaccicin es ncccsaria la prescncia simultanca dc farnlaco 1 . dc antiCUCrpos . Este tcnoinlcno fire descrito por pripresent() nlcra srz poor Ackrotd, al (]tic SC IC tut case dc purpura trombocito penica (destrLICCical dc plaquetas qUC Coil tit1CC ,1 till cumcnla purpurcoi tras la administracicin del farmaco Scdornlid . Sc hall descrito casos Lie anemia 11en1olitiCa tras la administracic'm dc farmacos 111111 LiixcrSOS, Cntre Icrs yuc se CnCUCntran la pcifcilina, la quinina \ las sultamidas . Estas reacciones soil po~co freCtierltCS . Adsorcion dc innlunOCOnlplejos fiarntaco-anticucrpo sobre la nlcnlbrana celular dc los eritrocitos. Las lesiones que se pro tilICen Cstan n1CCiiadas POI' C1 COMPICII)CIltO . " IndUCCiOll do una rcaccicin alcrgiCa trcntc .11 t3rmaco, con la produccion dc autOantiCUcrpos trcntc a los eritrocitos del pacientc ; csta rcaccion sc obscr\ a cn el 0,3", i', dc los pacientes :t [ON yuc se administra (1-n1Ctildolpa . Los anticuerpos proxlucidos en cstc case soil parccidos a Ios quc sc Lictcctan cn los pacicntcs con autoantICUCrpos CalicntCS . Sin embargo, la cntcrnlcciad rcnlitc al poco ticnlpol do la intcrrupcicin del tratamicntcl .

inducidas por farmacos pueden ser debidas a la adsorcion de anticuerpos especificos del farmaco sobre las celulas o a la supresion de la autotolerancia

lisis

0 farmacor'metabolito

A antigeno eritrocitario

Fig. 24 .13. Existen tres mecanismos per los que tin tratamiento farmacologico puede provocar efectos nocivos. 1) Adsorcion del farmaco a las membranas celulares . Los Ab frente al farmaco se unen a la celula y fijan el complemento, que lisa dicha cblula . 2) Adsorcion de inmunocomplejos farmaco-Ab sobre la superficie del eritrocito . Esto puede ocurrir a traves del receptor de Fc, pero es mas frecuente que ocurra a traves del receptor CR3 de C3b. Las lesiones liticas producidas estan mediadas por el complemento. 3) Supresion de la autotolerancia inducida per el farmaco, probablemente tras su adsorcion a la superficie de las celulas y la estimulacion de las celulas T colaboradoras (TH) . Se forman Ab frente a otros Ag de grupo sanguineo presentes en la superficie celular . Observese que en los casos 1 y 2 es precisa la presencia del farmaco para que se produzca el efecto nocivo, mientras que en el case 3 las celulas son destruidas esten unidas o no al farmaco inductor .

Hipersensibilidad de tipo II

la yuc his plaquctas son climinadas dc la circulation por los maCrotago)s espli -nitos a una c-clocidad superior 11 .1 normal . Esta climinacicin se produce a traces de los rcceptores dc akilict-ciicia I'll nttutitaria Lie dichos macrofagos . La cnt%rmcdad Suclc aparcccr dCSptrcs do una intcCci6n bactcriana o virica, aunquc tambicn sc pucdc prcscntar asociada a cntcrnteclades auto)inntunitarias corn( cl LES . Algunas ceccs sc detectan en cl LES anticucrpos trentc a Cardiolillilld, una molccula clue tambicn sc encucntra prescntc en las plaquctas. Los autoarticucrpos trcntC a cardiolipina y otro)s li)stifil)idcn pucdcn inhibir ciertas taws dcl proccso tic coagulacidn )antico)agulan(C ltpicc)), ~' ell algurnts casos l)uCCICr cstar rclacionados coil tcn6mcnos dc trombosis cellos, 1, abort( recurrcntc . La trom[locirope 11ia tart NCH lnrede set- inducida por 1 .irmacos, dc aCUcrL1o con los r11ISLit0S mccanisntos yuc SC haul indicado en la fclura ?4 .1-a .

REACCIONES FRENTE A ANTIGENOS TISULARES

Eaistcn una scric dc cnfcrnlcciadcs autoinnnutitarias en Las guc se produccn Icsiones innlunopatol6gicas por 1.1 action Lie anticucrpos dirigidos contra antigcnos tisularcs, quo dan lugar a rcaccioncs do hipcrsensibilidad dc tipo 11 . Los antigcnos son cxtracclul .ires, t. pueden scar espresaclos en protcinas cstructuralcs c) ell la Strpcrficic Lie cclulas. A co)ntinuaCi()n sc dcscril)cn algunas dc cstas enfcrmc dadcs i sindromc Lie Go)cxip,sturc, pcnfigo t. miastenia grace ) . En general, sc detectan autc),uttiCucrllos ti- cllte a deterntinados tipos Lie cclulas, PCro en Csto)s casos los antigcnos son intraCe1ularcs . no) sc sabc last, quo punt() SC CncuCntran intplicados los mecanisnu)s dc tips) II . Probablcmcntc en estas sittracio)ncs time rtas importancia patol6gica el rcconocimicnto Lie] autoantigcrlo por parts c1c las Ccltrlas'C, nticntras quo los autoantiCucrpos solanlcnic cicscntpcnan un l'afcl SCCtrndario .

. W6 dc los pacicntcs, sort capaces dc fijar cl complcmento. La en ; tcrrlCLiad suck Conducir a una grasr necrosis glontcruhu- , coil dcposito sic fibrin, . La asociacicin entrc cstc tipo c1c nctritis \ Las liernorragias pill monares fire obsen acia por printer, s cz por Goodpasture i ell CUCO honor sc ha clenominado cl sindro)nic ) . Aunquc los sintcnnas pulmonares no aparcccr ell todos los pacicntcs, la asociacio5n cntrc has lCSI()nes pulnton:u-CS t . r"Cr1aIC5 SC dcbc a clue estos tejidos comic Lien autoantigenos gLIC presentan rcacciones cruzadas . Se hall desarrollaclo saric)s mcxlclos anintales Lie] sindronte dc Goodpasture . Ell la nctritis inducida po)rsucro nctrotosico ~ glonlerulonetritis Lie Masugi y Se imect:ut en ruas o Colic jcn anti eLrcrpos Itctcrologos ti-cntc :t la mcmbrana basal glonneruldr . LOS ;urticucrpo)s imcct .iLlcn sc Llcpositan sobrc las mcnlbranas bas, ICs, t, a continuacion sc dcpositan sobrc los mismos anticucrpos del IuICSPCLi especifico)s del anticucrpo imectaclo ; corn( conseCuCnCia sc desrrcadcna una nctritis ,gild, . to dcs;trrollo dc nctritis t, proteinuria cs Licbido a la acunTtrl,Ciun Lie neutrofilos, glrc sc Linen a Lis nicntbranas mediantc ntccanismos c1cpcndicntcs c indcpcndicntcs Lie] complement() . fambin se pucdcn indLICir Icsioncs parccidas mcdiantc la innlunizacioin con nicntbranas basaICs dc (riven Itctcrologo i ntociclo Lie StCbla'1 . FAistc otro model( animal i nctritis dc He\ ntann) guc Crud, la glonlcruloncfritis mcntbranosa Ittrmana, t. quo SC has, ell la produCCiont Lie antiCucrpos trCntC a una proteina quo SC cncucn tra en cl bordc en ccpillo Lie la% cclulas cpiteliales glontcrularcs. Ell cstc model( las Icsioncs son mccliadas principaln1entc por cl coil plemento, ca yuc .11 inactil at- cstc sistema desaparecen Bran parts do Ios sintornas.

El pcnfigo es provocado por autoanticuerpos frente a una molccula de adherencia intercelular

En el sindrome de Goodpasture los anticucrpos frente a las membranas basales producer nefritis I Ir ulr _icrtc) nuntcro L1c pacicntcs coil nctritis sc Llctcctan anti-

cucrpos Ircntc a una 9lLICc)protCIlla do la nICntbrana basal glonlcrular. Fstos anticucrpos suCICrt scr do dasc IgG N, al ntcnos en cl

EI pCltf1~)~ Cs una grass cntcrmedad anlpcdlosa Lie la picl c dc las mcmbranas n111COS ;M I .os pacicntcs posccn autoantitucrl)os frente ;t la desrnoglcina-n, una Lie I,ts proteinas dc los desmosontas, quo son las estructuras cnc,u-adas dc mantcner ullidas cntrc si las Milks cpidcrmicas i:hq. 24. 15). ar1tlCLICt-p0S indLICcn la separacibn dc cstas cclulas t, clan lugar a lCsiOIICS ell la epidermis. I:a cntcrntcdad sc ha corrclacionacio coil la incidcncia do anticucrpos dc tip( IgG4 Contra una harts distinta de la niolccula. Id pintigo I'uarda una cs-

Fig. 24 .14. En el LES se detectan Ab frente a los neutrofilos, como demuestra la inmunofluorescencia clue presentan estos neutrofilos normales . ;Se expusieron neutrofilos normales a Suero de un paciente tort LES y, a continuation, a Ab anti Fab' human( marcados con una sustancia fluorescent( . En la microfotografia se aprecia claramente la presencia de Ab anti-neutrofilo .) Las reacciones transfusionales agudas frente a los neutrofilos pueden provocar fiebre, probablemente debido a los pirogenos liberados a partir de los neutrofilos destruidos . Esto indica clue los anticucrpos antineutrofilo pueden danar a estas cclulas, aunque no se sabe clue importancia puede tener este fenomeno en la patogenesis del LES . (Reproducido con autorizacion de J Clin Inv 1979 :64 :902-12 .)

las uniones intercelulares de las cclulas epidermicas mediante inmunofluorescencia . El antigen( es un component( de los desmosomas clue intervienen en la union intercelular . Inmunofluorescencia de piel humana tenida con anti-IgA . IPor gentileza del Dr . Mirakian y del Sr . P. CollinO

rlg . Lt . I'-

Li . , .i L e~y, . - :,I)"r, e,, du("diiri,u- II)--,

III

Reacciones frente a antigenos tisulares

trecha rclacion ion tin haplotipo infrecucnte tic FILA DR4 (; DRB I *0402) ysc ha ticmostrado yuc csta molecttla prcsctita till peptido tic la (icsmoglcina-3, a ditcrcncia tic ott-OS subtipos tic HI .A-DR4, to (life confirma quo: se (rata tic till claro cjcml)lo tic cntermcdad autoinmunitaria por mccanisnu) tic tipo II .

327

1,1 naiasicnia gra(c, till trastorn(t yuc SC c,tractctiza POI- una Bran tic dchifdad muscular, es provocada por la prescncia anticuerpos frcntc a los rcccptorcs tic acetilcolina tic la supcrlicic tic las nacnr branas muscularcs . I .e)% rcccptorcs de acetilcolina estan situados ell las placas motoras tcrminalcs quc coticctan a las neuronas con ]as fibras nutscularcs. La transmisi6n tic imptrlsos dcsdc el ncrvio al ell nIIISCttIO se produce mediante la liberacitin tic acetilcolina cl cxtic sit tremo terminal la ncurona y dii rsi(in a tras cs tic la taenditiura tic yuc separa a csta ialtima la fibra nnrscular. En tin principio sc obscrvo yuc la inntttnizaci(in tic animalcs tic experimentaci6n con receptores tic acetilcolina induce una debilidad muscular nrtn parccida a la miastcnia humana . Esto strgirio yuc en la cntcrmcdad lurmana podrian intcrscnir anticttcrpcts f ente a acetilcolina . Mediantc el analisis del defecto presente en los t116SCUIOS miastcnicos se comprob(') yuc no cxistcn anomahas en la sintesis tic acetilcolina, y quc este mediador es secretado normalmcntc conic( respucsta a los inapulsos ncrsio-

La miastenia grave y el sindrome de LambertEaton se deben a anticuerpos quc reducen la disponibilidad de acetilcolina en las placas motoras terminales

sos; parece, por tanto, que cl problema consiste en yuc la acetilcolina liberada net induce la (iespolarizaei6n nnrscular como debicra +_/iq . ?4 .16) . Fn cl examen tic las placas ncttr(xrtuscularcs tcrminalcs mediantc tecnicas inmtinoquimicas sc hall dctcctado ell los plicgucs postsinajYticos muscularcs Ig(; s . las protcinas ticl complement() C3 a . C9 thti . ?4 .1,?i . (Mar tardc sc hall obtenido nucsas prucbas yuc dcnurestran cl papcl patogcnctiCt tic 1,1% IgG ell csta cntcrntcdad, al dcscubrirse quc los ninos con ntadrcs miastenicas prcscnt:ua una dcbihdad nnrscular transitoria despucs del nacimient(). Este hallazgo cs importantc, ca title sc sabc quc las IgG atrax-icsan la placenta \ pcnctran cn cl torrcntc sanguinco del teto . ) Sc crcc title las IgG N, cl complcnacnto actuan tic dos mancras: aumcntall la cclocidad tic rcnosaci(fn tic los rcccptorcs tic acetilcolina x bloyucan parcialmcnte la union tic este mediador al receptor. La infiltracion cclular do [as placas tcrminalcs miastcnicas cs fill tcnftmcn(t poco ti -ccucnte, por It) (life sc crec quc en cl proccso patogcnctico no intcr\icncn cclulas ctcctoras . El sindrome tic 1 ambcrt-baton CS tin trastorno parccido, en cl yuc la dcbilidad muscular sc debc a una fbcraci(in tictccttxxa tic acetilcolina (a partir tic las ncuronas . Cuando se transfundc suero o IgG tic pacientcs con el sindrome tic I.ambcrt-Fat(tn a ra tones tambicn sc transficrc la enfermedad, to quc indica (life esta tiltima CSta mcdiada por autoanticucrpos . Los autttanticucrpos tic los canales tic calcio Sc dirigen frentc a los conaponentcs controlatios p(tr xoltajc o contra la protcina sinaptotagmina tic la \cs cula sinaptica, parccicnd(t quc las ditcrcncias ell cl sindrome

Miastenia grave
impulso nervioso normal miastenico anticuerpos anti-ACh

acetilcolina

~~

pliegues postslnapticos fibra muscular receptor de acetilcolina receptor de acetilcolina Fig. 24.16. Normalmente los impulsos nerviosos quc recorren las neuronas Ilegan a la placa motora terminal e inclucen la liberation de acetilcolina AM . Este mediador atraviesa la hendidura neuromuscular, se tine a los receptores de ACh muscularcs y provoca la apertura de canales ionicos presentes en la membrana de las celulas muscularcs, to quc desencadena la contraction muscular . En la miastenia grave los autoanticuerpos frente a los receptores bloquean la union de ACh. Por tanto, los efectos inducidos por las vesicular liberadas se ven reducidos, y el mirsculo puede Ilegar a adquirir una gran debiliclad . Probablemente este es uno de los factores quc clan lugar a la enfermedad . Fig. 24 .17. Microfotografias electronicas an las qua se observa la presencia de autoAb IgG (1) y del componente C9 del complemento (2) an las places motoras terminales de pacientes con miastenia grave. En la microfotografia superior se ven depositos aislados de IgG (G) sobre la membrana postsinaptica (P). =13.000 . En la inferior se observa C9 (C) sobre la region postsinaptica, despojada de la termination nerviosa ; se observan depositos de residuos y pliegues en proccso de degeneration (D). La reaction que presentan estos residuos indica quc contienen grandes canticlades de C9. M = fibra muscular . x9 .000 . (Por gentileza del Dr . A. G. Engel .)

Hipersensibilidad de tipo II

"hedCCen al tipo dC diaM :uuigcniCa \ ;31 titulo dC anticucrpos proscnte . Fstas dos cntermedades sort cjcmplos do: casos en quC la pi- cscncia de autoranticucrpos trcnte a till receptor bloogttca Cl tirnCioonanticnto del mismo . Sill cillbal-L dadcs ell las quo: lus autuantiCUCrpus CjcrCCn CI CIeCto Cuntrario ; put Cjemplo, en Ilguutos tipos do: enternmdadcs tiroideas :uttoinmttnitarias los anticuCrIoos ti- cnte al receptor do FS1I i; heorntona C .(ItnttlatttC tlel tirooidCs I Cntul :ul Ios CteCtoos de CSLI hoi- moam, hurcnOXILIc) la 116\id,td tircoidCl I:\-cJl', 2-

induCicndoo en algunos casos la apcoptosis . Aunquc toda%ia sc discutc la importancia relatisa do: los anticucrpos ell la genesis do: las ICSiOlICS CClularcs, su prcwncia constituse till btiCJI ntarcador do: la cnfermedad .'\a quo: sc suelen detcctar antes sic quc sc Prodti6C8tt las Icsioncs innuutopatologicas . y ti' 40wib . t
A VA

unquc tc Cconoccn HIM gr :ut Carttid .t d do ttrtoantiCHerpon Clue re7CCiondn colt anti cnco~ tisularc,, n111CIUS \'CCCS no Csts claro quc prOcoxiUCn lCsioncs tiSULtrcs u totrtos ton()nICnOS P :ttuldgicos in rino. Poor Cjemplo, aungLIC en Cl Sucro do algunos pacicntes diabcticos cs posible dctcctar in t4tro atitoanticucrpos f-cnte a Las cclulas tie lo" islotcs pancreiticus f fiti. 24.18'1, se crce quo: la orator parts do: his lCSiOnCS ill nrttnopatoliogicas quo: se obecr\ an ell la (Iiabctcs autoinmunitatia stn prococadas put celulas '1' :urtorrcactis as . I Iasta base porno tictnpo sc crcia quC los :tuttrtntiCucrpos trcntc a atttigcnos intracelularcs no solian producir patoloogia porquc too poodrian alcanzar su antigcno ell una ccLttla \ica . Sin Cm bargo, parccc quc :ut6CUCrpos coma anti-RN I' \ . anti Af)N [)LieLicit alcanzar cl nuCICO cclular y modular la titnci6n COular,

Los autoanticuerpos frente a antigenos tisulares no provocan siempre una reaccion de hipersensibilidad de tipo II

11

3. " 1
o

r! ~Oh

Fig . 24 .18 . Autoanticuerpos frente a las celulas de los islotes . En la diabetes mellitus se detectan autoAb frente al pancreas mediante inmunofluorescencia . Estos Ab son utiles para el diagn6stico, y es posible que desempenen algun papel en el proceso patol6gico . (Por gentileza del Dr . B . Dean .)

" ~Que sistemas efectores inmunitarios se activan en el curso de las reacciones de hipersensibilidad de tipo II? ~Que suerte correrian los eritrocitos alogenicos transfundidos a tin individuo con deficit absoluto del componente C5 del complemento en la primera transfusion y en transfusiones sucesivas?

~Por que suelen producir reacciones patologicas los anticuerpos dirigidos frente a antigenos situados sobre superficies celulares, mientras que los dirigidos contra antigenos intracelulares no? ~Por que solo se produce EHRN en una de cada 20 parejas madre-hijo en que existe incompatibilidad

Rhesus?

LECTURAS ADICIONALES
Alarcon-Segovia D, Ruiz-Arguelles A, Llorente L . Broken dogma penetrat on of autoantibodies into living cells . Immunol . Today 1996 ;17163-4, Anstee DJ Blood group active substances of the human red blood cell . Vox Sang 1990 ;581 Bhol K, Nataraian K, Nagarwalla N, et al. Correlation of peptide specificity and IgG subclass ~ :Ith pathogenic and non-pathogenic auto-antibodies in pemphigus vulgaris : a model for autoimmunrty . Pros Nat Acad Sci USA 1995,92 5239-43 . Bloy C, Blanchard D, Lambin P, et :i+ (raractenzation of the D, C, E and G antigens of the Rh blood grc-,gyp system with human monoclonal antibodies, Mol lmmunol 1988,25 926-30 . Druet P, Glotz D . Experimental autoimmune nephropathies, induction and regulation . Adv Nephrol 1984 ;113 .115 Hughes-Jones NC . Monoclonal antibodies as potential blood-typing reagents . Intmunol Today 1987,9 :68 . Le van Kim C, Mauro I, Cherif-Zahar B, et al Molecular cloning and primary structure of the human blood group RhD polypeptide Proc Nat Acad Sci USA 1992:89 :'0925-29 . Ki ,r: %1_ E1-~od group antigens on human erythrocytes - distribution, and possible functions . Biochim Biophys . Acta 1994; 1197 1-1 , 14 . r , P, f .-,%som-Davis J Immunopathology of the Lambert Eaton ,try stht:nic syndrome . Springer Semrn in lmmunoparhol 19951173-15 . Lindstrom J Immunobiology of myasthenia gravis, experimental autoimmune myasthenia gravis and Lambert-Eaton syndrome . Annu Rev Immunol 1985 ;3 :109-31 . Mauro I, Colin Y, Chenif-Zahar B,et al. Molecular genetic basis of ;he human rRhesus blood group system . Nature - Genet 1993 ;5:62-5 Naparstek Y, Plotz PH . The role of autoantibodies in autoimmune disease Annu Rev Immunol 1993,11 :79-104 . Race R, Sanger R Blood Groups in rLlan 6th edn, Oxford Blackwel' Scientific Publications, 1975 . Yamamoto F-I, Clausen H, White T, et al. Male-r,la , ge , tetic basis of the histo-blood group ABO system . Nature '990,345 ~ ,229 .

Hipersensibilidad d e tipo III

Siempre que un anticuerpo se encuentra con un antigeno se forman inmunocomplejos, que son eliminados por el sistema fagocitico mononuclear tras la activation del complemento. La persistencia del antigeno en las infecciones prolongadas o en las enfermedades autoinmunitarias puede dar lugar a enfermedades mediadas por inmunocomplejos . Los inmunocomplejos se pueden formar en el sistema circulatorio, dando lugar a enfermedades sistemicas, o en regiones concretas como los pulmones . El complemento interviene en la rotura de los enlaces antigeno-anticuerpo e induce la disolucion de los inmunocomplejos. Los eritrocitos de los primates poseen un receptor de C3 b, y ejercen la importante funcion de transportar los inmunocomplejos asociados a componentes del complemento hasta el bazo, en donde son eliminados . Los deficit del complemento dan IUgar a la formation de grandes inmunocomplejos, relativamente insolubles, que se depositan en los tejidos. Los antigenos con carga cationica tienden a unirse a los tejidos, especialmente a los glomerulos, por to cue inducen el deposito de inmunocomplejos en el rinon . Los factores qua aumentan la permeabilidad de los vasos sanguineos favorecen el deposito de inmunocornplejos en los tejidos.

Sicntprc que un anticuerp() Se C1lCUCntr.1 Con tut antigctw Sc titrntan inntun()C()ntplej()s, ytic gcncralntcntc sons Clintina(1()s clicartncntc por el sistema fagociticO mononuclear, hero quc cn alpunas ocasiones pcrsistcn t Sr pucdcn Ilcgar a Cicltositar cn dit crsots teji dots . ()rganors . (,Uarttiot CSt0 OCUITC SC I)uCCICn hrOCiuCir CfcCtots nook(), mcdiadots potr cl contplentcnto \ p()r Cclul.ts CfcCton-as, V Ion fcn(ntcnos p;ttotl()gic(ts as()Ciad(ts Sc Cicn(tminan rcaccion1Cs LIC hiPcrscnsibilid .t d dc till() III of cntcrntc(lacics porr inmun(tC(nnhlcjo,s . La zona cn quo: sc (Icpositan lots innwn()complcj()s dchcndc cn 1),11 -tc tic la localizacion dcl anttgcno cn I()s tclidot,s, a,sl Cons() dc I,t tin-In,t Cn quC %C dcpotsitan los itunun0C(nnItlejOS Cil-CUlantCS .

Los tres tipos de enfermedad por inmunocomplejos causa infeccion persistente autoinmunidad inhalation de antiyenos antigeno antiyenos microbianos autoantigenos Ag de mohos, vegetales o animales lugar de deposito de inmunocomplejos organols} infectodoi;s}, rinon rmones, articulacarterias, piel pulmdn

TIPOS DE ENFERMEDADES POR INMUNOCOMPLEJOS

CntcrnlC(iadCS (ICING,)" .t la titrmacioin dc ill nwn)COttnI,lcjos pUCCIen Ciit idir :t gr.uuies r%tsg()s C11 tres grub(),: las C:tUS.tt11, Itor la prescnCta .ic una infeccion I,crsistCntt, las dChidas ,t cntcrIncdadcs autotinntunitarias y Ias pros,-oc :uias por inhalation Cic hroduCUts :uttigcnicots I_fio. 35 .11 .
LAS SC

Fig. 25 .1 . En esta tabla se muestra la procedencia del antigeno y Ins organos que resultan afectados con mas frecuencia .

Infection persistente . I ()' OCCt(tS Contbinad()S CIC Un .t intccCion },Cr>istCIUC Colt una C:unit{ :td rclatis :unCrttc hCgticna dc orga nisnt()s intCCti\OS \ una rCSI,UCSta CIC antiCUerpOS CIchil oian lugar a la turmaCion cromica CIC itununOCOanItlejOS, quC SC huCCICn IlCgar a dcpusitar cn Ion tejidos i_/iq . 35.31 . Entrc LIS Cnfcrn1Cd.uiCS COtn esta ctiotl()gia SC ClICUCntran la ICpr ;l, CI haludisnio, cl dcn;uc, la hepatitis tiriea \ la C1lCiOCarCiitis intcCCiotsa p(tr CStafil()C()COS . Enfermedades autoinmunitarias . La cntcrntcdad h(a- innrtl:u~C(unhlCjo,s cs una c,nthlit,iCion hahitual dc las cntcrlncdadcs iuu,inmunitarias, Cn las quC la hr(Ouccioin Continua dc autoanti Cucrlxts dente a un :utn>anti('cno Ch lug:tr a la fort tlCioSn dC innttut000ntplcjos Clur :uttc largos pcnodos tic ticntpo . AI it

I:.

auntcntando Ia conccntracion s:utguinca dC innutIIOCOmhlcjos, los sistema, cncargadots dc Sit clintitMCiitn i I :tgOCitOS ntononuCICarcs-critrocitos \ COntplcntcntot I rcsultan dcsbotrdadots, \ lots comIPICjOS Se dehositan cn los tejidos (fea . 35 .3) . I : ntrc las entcrntedadcs con csta ctiologia se cncucntlan la artritis rcunratotidc, cl lupus critcntatoso sistcntico i LESI c la polimiositis .

Inhalation de productos antigenicos. La cspotsicion a antigrno,s cstrinseco,s hucdc Gar Iti .tr a la titrmaciotn dc inntunOonplcjos S()ItrC Ill? suj " CrtlClC1 O,rh(IrtICS. f .StC Cs Cl tip( tic reaccio~n que sc ()hscr\a en Iota I,ulntoa1CS tr:ts la inh.ttadon rel,Ctid.t de product(), antigcnicos pr()CCdCntes dc ntoltos, \-c ,ctalcs (,

Fig. 25 .2 . Detection mediante inmunofluorescencia de la presencia de inmunocomplejos (IC) en las enfermedades infecciosas. Comes sucesivos do la arteria renal de un paciente con infeccion cronica por el virus de la hepatitis B (VHBI tenidos con Ab marcados con fluoresceina frente a un Ag del virus de la hepatitis B (1) y con Ab anti-IgM marcados con rodamina (2). Se observa la presencia tanto de Ag como de Ab en la intima y la media de la pared arterial, to que indica que en estos lugares existen deposito, de IC . Tambien se detectan IgG y C3, con la misma distribution . (Por gentileza del Dr. A. Nowoslawski .)

329

Hipersensibilidad de tipo III

aninaalcs . Algunos cjcrnplos son cl pulnuSn del granjero s cl pulmun del cuidador de pajaros, entcrrnedaxics en [as quc se dctCC to la presencia dc anticucrpos t IrCUIatttes fi-entC a hon` ;os actinomicctrrs i,gUC Contienc Ia paja mohosal o antigcnos do paloma, respectis anacnte . Ambas entcrmcciacics son formas ditercntcs dc ahcolitis alergica extrinseca, y solo aparcccn tras una exposicitin rcpetida al antigeno . i()bservesc clue los anticucrpos inducidos por cstos antigcnos son fundamcrualrncntc dc claw IgG, v no de class IgE, como cn cl caso dc ]as rcaccioncs do laipcrsensjbilidad dc tipo 1 . ) ( - uando sc a ttCIVC a inhalar cl antigcno sc torman

innaunoconaplejos en los ahcolos, clue prosocan proccsos infa matcnios t . fibrosis l./in. 2.5 .4'1 . EI 90','6 tic los pacientes coil pUIm(')1l del granjero posccn anticucrpos precipitantes ti-cnte a antigcnos dc actjnomicctos . Sin embargo, CSt05 anticucrpos rartahicn aparcccn cn cl sucro dc algunos indit iduos sanos, N algunos pacicntcs coil la enterntctlad carccen dc cllos, por to quc sc Crcc quc esistcn otros factorcs implicados en esta cnternaedad, como Ias rcaccioncs tic hipersensibilidad de tipo IV .

MECANISMOS DE LAS REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD DE TWO III

Los inmunocomplejos son capaces dc dcscncadenar discrsos proccsos intlamatorios : " Interaccionan coil cl sisteni a del complernento, dando lugar a la fornaacicin tic ('3a Y ( - 5a I anafilotosinas) . Estos tragmcntos del CoMPICmCmo intluCCn Ia hbcraci(in tic aminas sasoactitas I mfrs las quc sC CncuCntran la histarnina v Ia 5-hidrositriptanainal \ factors% quinuotacticos a partir do los mastocitos ylos bas(ltilos . ('Sa tanabien posse propicdadcs quimjotacticas intrinsccas Ircntc a los basdfilos, Ios cosinofilos v los ncutrcifilos . " Estinurlan a los naacrotagos para quc lihcrcn citocinas, cspccialnaentc TNFa c IL 1, quc soil mediadores tnuV importantcs en los proccsos inflatnatorios . " Los innntnocomplejos Interaccionan directanaente con los baslifilos s . [as plaquctas j nacdiantc sus receptores dc Fc) C induccn la libcracion dc aminas s-asoactia -as +,/irf . 25.51 . Las aminas s asoactis as lihcracias por ]as plaquctas, los bas6filos N los rnastocitos prococan la rCtraCCicin tic ]as cclulas cndotehalcs, coil to quc aunacnta la pcrnacabilidad s - ascular \ sc dcpositan inmunocomplejos sobrc las parcdes dc los aasos sanguinCOS i~/irf . 25 .6) . Estos depirsitos dc innntnocontpleios induccn la prodttccicin dc mas (13a v ( :5a . Adern,is, ]as plaquctas se agrcgan sobre cl colugeno quc quet1a al cicscubierto cn la menahrana basal del \ aso, establecicndo intcraccioncs con los dominios Fc dc los inmunocomplejos depositados ; csto da lugar a la formation do naicrotronabos . Las plaquctas agrvgadas prodUCCn mas aminas tasodCtisas V estjnaulan la prodUCCion do m :is (:3a V ('5a . ( Las plaquctas tarnhicii soil una fuctttc importante dc tactorcs dc crccinaiento, quc pucdcn in-

Fig . 25 .3 . Detection mediante inmunofluorescencia de la presencia de inmunocomplejos en las enfermedades autoinmunitarias . Cortes renales en el lupus eriternatoso sisternico lhipersensibilidad de tipo III (1)1 . y en el sindrome de Goodpasture lhipersensibilidad de tipo II (2)1 . En ambos casos los Ab se detectaron con anti-IgG fluorescente . Los IC formados en el torrente circulatorio y depositados en el rinon din lugar a depositos ~, grumosos)) irregulares caracteristicos (1) . Los Ab frente a la membrana basal quc se producen en el sindrome de Goodpasture forman una caps continua sobre la membrana basal glomerular . (Pot gentileza del Dr . S . Thiru .)

Alveolitis alergica extrinseca

acumulacion de cclulas, inflamacion 2 y fibrosis Fig . 25 .4 . Cuando un individuo sensibilizado inhala Ag fungicos y estos alcanzan sus pulmones, se forman inmunocomplejos en los alveolos (2) . La fijacion del complemento da lugar a la acumulacion de cclulas, a un proceso inflamatorio y a fibrosis . En el examen histologico de un pulmon con alveolitis alergica extrinseca (1) se aprecian zonas de consolidation, quc son consecuencia de la acumulacion de cclulas . Los Ab precipitantes en el suero de un paciente con la enfermedad del pulmon del cuidador de pajaros IP; 3) son especificos de un Ag del bongo Micropolyspora faeni.

Modelos experimentales de enfermedades mediadas por inmunocomplejos

331 ,

Deposito de IC en las paredes de los vasos sanguineos (1)

Deposito de IC en las paredes de los vasos sanguineos (11)

Fig . 25 .5 . Los inmunocomplejos (IC) interaccionan con el complemento y clan lugar a la formation de C3a y C5a, que a su vez estimulan la liberation de aminas vasoactivas por los basofilos. Los IC tambien ejercen un efecto directo sobre los basofilos y las plaquetas (en los seres humanos), induciendo tambien la liberation de estas aminas vasoactivas . Las aminas liberadas (p . ej ., histamina, 5-hidroxitriptamina) provocan la retraction de las celulas endoteliales, con aumento de la permeabilidad vascular.

Fig . 25 .6 . El aumento de la permeabilidad vascular permite a los inmunocomplejos depositarse sobre la pared del vaso sanguineo . Esto induce la agregacion de las plaquetas y la activation del complemento . Las plaquetas agregadas forman microtrombos sobre el colageno que queda al descubierto en la membrana basal del endotelio . Los neutrdfilos son atraidos hacia la zona por determinados productos del complemento, pero no son capaces de ingerir los complejos . Por ello, liberan sus enzimas lisosdmicas mediante exocitosis y danan atin mas la pared del vaso sanguineo .

tervenir en la proliferaci611 celular Lluc sc obscrsa cn las enfermedades por innuuuocomplCjOS, ccnno la glontcrulonetritis N - la artritis rcutnatOidC .? Los polinlorfonudcarcs son atraidos hacia la zona por los cstimulos quimiotacticos dc ('5a . L-na scz alli tratan dc tagocitar los intmmocotnpicios depositados, pero no to logran dcbido a clue estas inmunocomplejos se encucntran unidos a la pared del sraso . En COnSCCnencla, liberan sus enzimas lisostinticas mediante exoCitosis ell Cl punto de ciepdsito (fia . ?5.6i . Cuando estas enzimas lisos6micas son libcradas cn cl torrentc circulatorio no suclcn in ducir procesos intlaniatorios, sa que son ncutralizadas rapidamentc por enzimas inlubidoras scricas . Sin embargo, si el fagocito cstablece un contacto intimo con los complejos dcpositaclos cn cl tcjido, unicndosc a sus cicnninios Fc, los inhibiclorcs scricos no pueden penetrar en cl espacio clue los scpara, y las enzimas liberadas pueden prococar lesioncs en los tcjidos circunclantcs .

" Leis ratoncs NLB, NGW son un modclo adecuado dc autojnmuniciad . " La reaction dc Artltus cs un cjcntplo Lie lesioncs locales prosocadas l,Ln- un antigeno cxtrinscco . Sc debt scr cauto al intcrprerar los cspcrjmcntos llcsados a cabo en anintales, ya clue los e6trocitos Lie hrs roeclores s, los coneios carecen del receptor do C .3 ti (denonfnado CRI l, al que se unen rapidamcntc los inmun0contplejos quC 11,111 fijado cl complcntcnto . Los critrocitos dc los primates si clue posecn cstc receptor . La enfermedad del suero se puede inducir mediante la inyeccion de grandes cantidades de antigenos ajenos 1-:11 I .t cntcrmcdad del stick) los inmun()CLnplCj()s :il'CLII .uitCs SC dcpositan sobrc las paredes de los vasos sanguinCO, \ sot-)re los tcjidos, dando lugar a un aumento Lie la permeabilidad vascular y, en consecuencia, a enfcrmedades infantatorias como la glomerulonetritis o la artritis . En la era preantibititica la cniermedad del suero era una cony plicacion habitual de la scrotcrapia, clue consistia cn la administracion dc grutcies dosis dc anticuerpos para cl tratamiento de en tertnedades como la ditteria . Se solia utilizar suero antidifterico do caballo, . . alt unos individuos producian antictterpos frcntc a las protcinas cquinas . En la actuslidad la Cnfermcdad del suero sc sucle cstudiar cn concjos a los clue se administran invccciones intrasrCnosas dc una

MODELOS EXPERIMENTALES DE ENFERMEDADES MEDIADAS POR INMUNOCOMPLEJOS

Sc disponc dc modclos ezpcrimcntalcs para cad a uno dc los tres tipos principales de enfermedadcs POI- inntunOCOmplcjos que se halt ntcncionado : " La enfermcclad del suero, quC sc provoca mcdi :ultc imcccio ncs dc antigenos ajenos, ctnula los cfcctos de una infection pcrsistcntc .

Hipersensibilidad de tipo III

I,rrrtcina solub1C ajcna, comp Abunlina tic suero hos-ino i ASB ;l, AI taho tic una senlana SC fornran anticuerpos yuc pawn a la tirculati()Il v SC tmCn a Sus correspondientes antigenos . (don)(t la reaction se prrtdUCC Cn prcscttcia tic cxccso tic antigeno, CI tan1ano tic los innltuloconlplejrts 1-CSUltantcs CS pcyucrio -'5 . -) . Estos I)cquctios innrtuloconlPICjtts NAM clinlinados plus Icntaincnte por cl Sistcnla tagcttitito ntmrmuclcar, por to que persisten en la cirttlIatlon . La titrnlacirin tic Iris inmunocomplejos s'a tic scguida un brUSCO (ICSCCnsc1 tic la crtncentracion total do tom 111cnicntct hcnlolitico; Icts signos clinicos yuc sc ohscrvan cn Ill cn tcrnleciad (Ad Sttcro soil debjdos ;il dclulsito tic acun1ttlrts do ctnT1 plcjtts antigcno-antittlerprt a la fornlaci(tn tic ( ;,3, sobrc la tnernbrana basal glonlcrular ~; MBG'h 1, la pared tic kts \ asos s;u1guinctts tic pcquctio talibl-C . ( :uando SC fi1r111an alas anticuerpos s, cstos clnpiczan a cstar cn cxccso, cl tanlano tic los inn1uno conlplcjos aunlcnta, por Itt yuC Scn1 ChnlinatJttS ton n1 .1 tn- cficacia 1. los sintomas cicsaparcccn . Tanlhicn sc puCCIC intiucir una enfermedad do tipo ci -cinico mcdiantc la imcccicin diaria tic antigcno .

N/B NAW pntriuien Tina sCric tic autctanticucrp~ts i :ulticritr()tito, ;uuinutlcarcs, anti-.Al)N v anti. S111 1 1 padCCCll una enfermedad por innltuloconnplcjos nun- prrccicia al I .ES humano . Estos ratcn,Cs no prcscntan sintomas clitic nicos al naccr, hero a los 2-3 nleses cida dcsarrollan anemia 11cniolitica . Las pruchas para detectar anticttcrprts antieritrctcitarios i prucba tic Coonlhs i, anticuerpos antinudcarcs, cclulas 111l1jcas C inn1un()CCtnlPICjos tl1-tulantCS son positjcas, y sc ohscrcan cicpcisitos tic innnulocomplejos cn los glonlcrttlos s' cn cl plc.s o coroidco . La cntcrnlcdad es macho nlas flcn-ida cn las tic 11cnibras, quo: mucrcn a los pocos nleses tic la aparicilin I( )s ejnto111as (f`7 .25 .8) .

La enfermedad por inmunocomplejos de los ratones NZB/NZW es debida a fenomenos autoinmunitarios

l irs rat(),rcs luhrid,)s 1

sa11`aujncrrs tic pcquen() calibre t a Itn tcjidos circtuldantcs; normalnlcntc suck ser inducida cn la picl . I'ara cl1o, sc ininuniza repctidanlcntc a un animal hasty yuc SC tic detcctc una cantitidd tonSIdCrab1C anticuerpos scricos i princj pn1nlCntC I'G i . ( :uando so: jm ccta a continuation pttr s is stlbCUti nca o intradcrlnica cl antigcnct, SC I,r(xiuci una rcacticin Cn CI puntic to imcccion, qUC en n1nt11aS orasioncs to atctnlpallada tic un inrenso edema d1- henun-ragias, scgiul 1a cantidati t1c go: lo jn t-cctado . 1.:1 reaction alcanza x11 inazinla intcnsidad a las 4 1011oras, dcspucs cnlpicza a ticsaparccer \ apcnas es perceptible ;1 las 48 [it)ras tic la imcccicin f/icq . 2 .5.9) . ~kdialltC Cstudios de inn1t111ofluorescencia se 11a detnotstrado yuc cl dcllosito initial tic antigeno, anticucr-pos s . ccnnplenlento stabrc la pared tie] caret U segtlida tic un :i infiltration pctr ncutrofilos tic la agrrgaiicm intracas ill;u-dC plat quotas t/iq . 25 .10'1. Esta al"rcgacion playuctaria pucdc prococar oclusioncs sascularcs c intlusct necrosis cn los casos teas gralcs . I ranscurridas 24-48 floras, los nCUtroifilos soil sustituidos por cclulas n1cn1onucIcares, y finalinente aparecen algunas cclulas plasnlaticas . La actinacitin ticl conlpicnlcnto, 1 a %ca por la cia clasica o por la s'ia altcrnatil- a, CS cscncial tiara yuc sc prociuzca la reaction tic Arthus . Lit auscncia tic colnplclnento Ion ncutrofilos no son atrai tic dos llacia CI Ittgar la imCtti()I1, Y la itnica reaction yuc SC ohscr a cs un ligcro edema. EI I'NEo potcncia tic ditcrsas mantras las rcspuCStas inmunitarias nlccliadas 1101- cclulas c ~ . tap. 101 . F . .] tratanlicnto con :antiturrpcts 6i- cntc a FNF IntcdC rctiucir Id intcnsidad tic las rcac ciones tic Artllus. Tanlhicn sc 11a Sugcrido quo: cl anti-TNI : pttedc tic scr util para cl tratanliento la artritis rcunlatoidC . La relation Cntrc las tanticiadCS ti c antigen() anticuerpo est:i dircctanlcntc rclacionacia coil la intcnsidad tic la reaction . Los illnxtnoconlplcjos yuc so: 601-111;111 tuando cxistc cxccso tic anti-

La inyeccion de un antigeno en la piel de animates sensibilizados previamente da lugar a una reaction de Arthus I .1 ri,tttir>I1 tic Al-1111A, C~ tic til" 1) 10C,111/ado, \ ,ifccta a Irrs t,lsrn

Curso temporal de la enfermedad del suero experimental

suero xenogenico rodeAg remanente en sangre nefritis y arteritis `

Enfermedad autoinmunitaria de los ratones NZB/NZW

antiq,nc:

t :aal

inrnunocomplejo
an!lge "lu fibre

a z
anticuerfx> libre
7

0
dlas Fig. 25 .7 . Tras la inyeccion de un suero xenogenico se produce un periodo de latencia de unos cinco dias, en el que en el suero solo se detecta antigeno libre. Transcurrido este tiempo, se producen anticuerpos frente a las proteinas ajenas, con la consiguiente formation de inmunocomplejos sericos ; esta es la fase en la que aparecen los sintomas de nefritis y arteritis . AI principio existe un exceso de antigeno, y se forman inmunocomplejos de pequeno tamano ; segun va aumentando el titulo de anticuerpos, los complejos que se forman van siendo mayores, y se depositan y son eliminados posteriormente . En esta fase desaparecen los sintomas .

inmunocomplejos renales anticuerpos antinucleares

meses de edad -proteinuria -Ab frente a los eritrocitos

10

12

Fig. 25 .8 . Evolution de la enfermedad autoinmunitaria de los ratones NZBiNZW hembra con el tiempo . La incidencia indica el porcentaje de ratones que presenta cada una de las caracteristicas estudiadas . Los IC se detectaron mediante inmunofluorescencia de tortes de rinon. Los Ab antinucleares fueron detectados en suero mediante inmunofluorescencia indirecta . La proteinuria indica el grado de deterioro renal. Los auto-Ab frente a los eritrocitos aparecen en fases tardias, y no suelen presentar correlation con la patologia renal. La enfermedad autoinmunitaria en los ratones macho se produce unos tres meses mar tarde.

Persistencia de los inmunocomplejos

geno o do :uttjCucrpo sun ntucltu n1Cn0S tri\icos clue los quc fbrman cuandu Las cantidadcs son cyuintrrlccularcs .

SC

PERSISTENCIA DE LOS INMUNOCOMPLEJOS Los inmunocomplejos suelen ser eliminados por el sistema fagocitico mononuclear

Ir .u is .tcti~acirin clel crnrnplemcntrr, Irrs inmunrrannPlcjr , s sera ~~p :cmvadrn ;un ( "F) c climinadus purcl sistcma fagocitico mononuclear, cshcctalntentc en CI higadr~ \ cn cl barn . La climinadcin se produce mediante la unicin al receptor do (3b, ricnuntinado (Itl ; cn Ins primates, la nmsorm dc las mulcculas dc receptor dc (3b SC cncucntran situadas cn Irrs eritrucitos . i Los

dcmas animalcs carccen dc rcccptorcs critrocitarius dc (;3b, prrr lo clue dcl,cttdcn csclusi\amcntc dc Ios rcccptorcs do C ;b dc Lis playuctas. i Cada critrocitu poscc unos 700 reccptrrres, \ su clictcia cs manor cuandu onus cuantos dc cllus sc cncucntran a,,ru pados cntre si, ya yuc dc csa forma aumcnta la l\idcz do uuirrn con Iris immulocumplcios dc gran tantaitu . (RI SC tmc con litcilidad a Irn innlunocumplcjus yuc 11,111 lijado CI cuntplemcnto, como sc ha demostrado ell cxperimcntos Ilc\adrrs a cabo con anintales despro\istos dc complemcntu (. jilt . ?~ 11 ; . Los eritrucitus de los prjm ;ttcs centstituscn 1111 sjstcma de regulacirin, al unirse a Irrs complejos que han fijadu Cl cumplemento ~. clintinarlos del plasma . El llujrr laminar clue csistc cn los r:tsos dc pcclucnrr calibre hcrmite a Ir,s critrocitos manteitersc cn cl ccntro del \'asu, clucdando rodeados hex- cl flujo de plasma . Dc csta l'rrma solarncntc cl plasma establccc contacto con las pare

Fig. 25 .9 . Aspecto de las tree reacciones cutaneas mas importantes . Las reacciones de hipersensibilidad de tipo 111) provocan un notable abultamiento de 5-7 mm de diametro en el plazo de 15 minutos, que presenta un borde bien definido . Las reacciones tie Arthus (hipersensibilidad de tipo III, 2) aparecen a

las 5-12 horas de la exposici ,-m, -m (50 mm o mas) y su borde no esta tan bien definido . Las reacciones de hipersensibilidad de tipo IV (retardada) dan lugar a una lesion rojiza con induracion a las 24-48 horas, de unos 5 mm de diametro (3).
1h[ P ] ., .-

La reaccion de Arthus
Fig. 25 .10. El antigeno inyectado por via intradermica se one a los anticuerpos especificos presentes en la sangre, dando lugar a la formation de inmunocomplejos. Estos complejos activan el cumplemento y ejercen ciertos efectos sobre las plaquetas, liberandose como resultado de ello aminas vasoactivas . Los inmunocomplejos tambien inducen la liberation tie TNF e IL-1 por parte de los macrofagos (no mostrado en la figural . Los fragmentos C3a y C5a del cumplemento inducen la desgranulacion de los mastocitos y atraen a los neutrofilos hacia el tejido afectado . Los productos de los mastocitos, entre los que se encuentran la histamina y los leucotrienos, aumentan el flujo sanguineo y la permeabilidad vascular . La reaccion inflamatoria es potenciada por las enzimas lisosomicas liberadas por los polimorfonucleares . Ademas, el C3b que se deposita sobre los complejos los opsoniza y facilita su fagocitosis . La reaccion de Arthus se produce en pacientes con anticuerpos precipitantes, como aquellos con alveolitis alergica extrinseca relacionada con la enfermedad del pulmon del granjero .

quimiotaxis de los rWutr0files

Hipersensibilidad de tipo III

dcs Lie lo)S cases IJirt . ?i.12) . LOS eritrocitos solo cntran en Contacto) con estos paredes en lo)s sinusoidcs del higado 1 . del bazo o) en las zonas de turhulencia . 1 .0% intllunocOnIPlejcn son transportadon hasta cl lugado c el bazo, en dondc son capturados por lo)S nlacroifagos ijos dc esos tcjidos I`/iq. ?5 .131 . I'M cstc proceso se elinlina tamhicn la macoria dc CRI, po)r h) quc cuando la tornlaci6n dc innutno complcios es conltinua, el nulncro de reccptores se va rcducen do progrcsicamcnic, altcrando el funcionamicnto normal del sis tcnla Lie climinaCioin do ill nlunoconIPICjo)s . I'or ejcnlplo, Ios pacicntcs coil LES pucdcn tenor solo la mittd Lie rcccptorcs quc tin indiciduo normal . l .on compIcion tamhicn K puetien dcsprcndcr dc JOs eritrocitos circulantes por la action clviniAtica del factor 1, quc cscin dc ('31) y dcja tin llcquctio fragnlcnto (('3dlz I unido al receptor CRI tic la nlcnlhrana celular. ,A continuation, Ios conlplcios soluhlcs dcsprendition star eliminados lx)r I,1s cclulas tagociticas quc poseen reccptorcs del dominio Fc dc Lu Ig( ; (ftp. 3i .1 .i1 . El complemento facilita la disolucion de los inmunocomplejos I)csdc Ion trahajon tic I lcildcrhtrgcr en 1 .1 dccada dc 1930 accrca dc la Curca de la prccipitina, sc sake quc cl complemento retrasa la prccipitacion dc IOs innlunOCOnlplejos, aunque durante algtin ticnlpo no se dio importancia a este hallazgo . La capacidad para mantener Ios innumocomplcion en forma soluble cs una timcitin de la via clasica del complrtncnto . I .os comlx)nentcs del complemento rcducen cl nunlcro de epitopon a Ios quc so : pueden unir Ios anticcierlx)s (cs decir, rcducen la calcncia del antigcnoi mccli ;ulte su inscrci()n cn la red del complejo, dando lugar a inmunocomplejos dc Efectos de la ausencia del complemento sobre el destino de los inmunocomplejos

mcnor tanl :ulo c, po)r tanto, solubles . Estos complejos aSl)CLILiOS a componcntcs del complenlento se linen rapldallictlte al receptor do ('3b ICR11 dc Ion eritrocitos tic Ion primates . El complemento pucdc inducir la disolucioin dc Ios compic)os quc 11,111 prccipitado prccianlcntc a traces Lie la via altern :uica (/in. 35 .1-1). P; recc quc la diSOIUCi()t1 s< produce dchjdo a la insertion de Ios tiragnlcntos ('31) c ('3d Licl complemento) en Ios complejos . Es l,tnihle quc en los indisiduo s nortnalcs se estcn dclx-)sitando continuanlcine inmunocomplejos, quc serian eliminados nledianiC Liisoluci6n . En caso de title esto litcra cierto, cstc proceso prewntana anonlalias en ion haCICntes coal dCtctto5 del con1plemcnto~, to yue protocana tin Ll(7lscisito coaltinuo dc intnunocotnpIcio)s . 1)e llecho, se hart Licicctado dctccto)s en cl pro o:cso dc disolucion en cl suero do paciclucs coil cntcrmedades sistemicas tnctfiadas por innutnocompIcios, pero no) se salx coil Certeza si estc detccto cs dc naturaleza primaria o) sccundaria . El deficit del complemento altera el proceso de elimination de inmunocomplejos En los pacicntcs con Rajas conccntracio)ncs tic I) )s umll,)nclucs dc la via clasica ticl omlplcnlcnto, lo)s mtnunoconlplejos no sc unrtl hicn a Ios eritrocitos . El Licticit dc complemento sc puedc deber al agotainiento de sus componcntcs dchido) a una cnfermedad po)r ill nuuIOCOnlplejos o t algtin trastorno hcreditario, Como cl Licticit dc ('? . Cahria espcrar yue la consccuencia de estos detectos tuese la acunlulaci6n dc inmunocomplejos circulantcs, pcro de hccho Ocurrc to contrario N , Ios conlplcios dcsaparccen rapidamente dc la circulacion . Estos complcios quc no sc encuentran unidos a eritrocitos som capturados rapidamente por cl higado Ipcro no la)r cl bazo)i 1 . a continuacioin son hhrrados, dCPosit .inC1OSC en la picl, Ios rillones y Ios musculos, dondc pucden dar lugar a rcaccioncs inflanlatorias (/iq . 35.15) . La intitsi6n dc plasma fresco) corn conlplenlcnto hacc quc el proceso Lie eliminaci()n dc conlplejos s-uclsa t la nornlalidad, to quc dcnulcstra la importancia del complenlcnto en este proceso . La incapacidad del hazo para capturar Ios innunloco11hlcjos no scilo da lugar a cntcrmedades POI - ittttltulOCOtnplejOS, situ) quc tamhicn puede atectar ti torma importantr al desarrollo tic las Funciones de eritrocitos en enfermedades por IC

inmunocomplejos quc permanecen en la circulation t%)

pared del vaso inmunocomplejos unidos a eritrocitos

plasma

complemento normal - ausencia de complemento Fig . 25 .11 . Se inyectaron inmunocomplejos (ICI en forma de bolo en el sistema circulatorio de tin primate . En los animates qua poseian tin sistema del complemento normal los IC se unieron rapidamente a los receptores CR1 de los eritrocitos. Por el contrario, en los animates quc habian sido desprovistos del sistema del complemento mediante tratamiento con factor de veneno de cobra, los IC apenas se unieron a los eritrocitos . Paradojicamente, la elimination de los IC es mas rapida en los animales carentes de complemento, ya qua estos complejos an lugar de ser eliminados por el bazo se depositan en los tejidos . (Segun datos de Waxman y cots ., 1984 .)

2:0

.06 A& V411111PI P MW

Fig . 25 .12 . La sangre atraviesa los vasos sanguineos mediante tin flujo laminar, an el quc los eritrocitos permanecen en el centro del vaso, a su alrededor fluyen los leucocitos y unicamente establecen contacto con las paredes el plasma . Los IC unidos a los eritrocitos a traves de CR1 (1) se mantienen alejados de las paredes del vaso . Las anomalias del complemento impiden la union entre los eritrocitos y los IC, y los IC si establecen contacto con las parades de los vasos (2) .

Persistencia de los inmunocomplejos

respucstas inntunitarias adceuadas . Esto es debido ;a yuc cl bazo dcsempeita un papcl escncial en el procesamicnto de antigenos N cn Ia induction tic I .is rcspuestas inmunitarias (s . cap. 3) .

Disoluci6n de los IC mediada por el complemento

disolucion 100 de los inmunocomplejos (%) suero fresco 50 suero inactivado terrnicamente

Soil Cj illj i general, IOS ill mtulotcnnl'lcj()s do masrn- tamano tic un0S pocos rt1irtutOS, micntras lurr el plazo nados cl hi;-ado en tic que los complejos m:is pcqucnos cirrulan durtntc periodos prolongados l lirf. ?S.16) . Esto es debido a yuc los inficmpo ntas nmnocontplejos tic may or tamano lijan el complemento con mas cficacia, por to yuc SC until ntcior a los eritrocitos. Adentis, los tic complejos manor tamano son lihcrados m.is Icntantente de los eritrocitos por la :tccicin dcl factor 1 . l'or tanto, cualquicr factic IOs inmunocomplejos afcctara tor quc iutlu'a en cl tamano elimination de los mismos . i, Sc ha sugeritambicn al proceso tic tic do que los defectos gencticos que fawreccn la production tic baja atinidad podrian dar IUgar a la tirrnraci<in anticuerpos de inmunocomplejos m:is pequenos y, por tanto, :t enlcrmedades por inmunOCOMPIcjOSj . La maduracion por afinidad dcpendc tic la selection tic ]as cclulas B do una nrtrtaci m somatica cficaz y tic la union dcl antigeno . Este centros germinales d"puts en los proceso sc rcaliza de un modo mucho mas eficaz cuandc~ las cclulas K son estinwladas pen- :uirjgcnos O innttrnocomplcjos rc-

El tamano de los inmunocomplejos influye en el proceso de deposito de los mismos

Ell

10

20 minutos

vestidos por complemento . Los pacientcs con deticicncias dcl complemento resultan cspccialmente susccptihles tic dcsarrollar enferntedades por inmunocomplejos' - c\isten O idcncias recien tic los ntec :ulismos yuc cxplican este lie ten quc indican yuc 11110 tic los complejos antigcnicos por Icx cho cs la ntala idcntificaciom centros gcrminalcs, quc impidcn la maduracion por afinidad . I,os tic baja afinidad anticucrpos ticntc a Icx autoantigcnos pucdcn ser reconocer SOlamentC unos pocos epitopos en each molcctrla do y tic pc antigen0 . En consctucncja, se lorman inmunocomplejos qucfio tamano y IOs periodos de chininaci6n soil largos, ya (-]tic no cs posihlc la tormati<'~n do grandcs rcdcs entrccruzadas .

Fig. 25.14. El complemento puede inducir la disolucion de inmunocomplejos (IC) precipitados in vitro. AI anadir suero fresco que contiene complemento activo a los IC insolubles, estos se disuelven al cabo de unos 15 minutos a 37 C. Algunos de los complejos no se Ilegan a disolver . El suero calentado previamente (56 C durante 30 minutos) carece de complemento activo y no es capaz de inducir la disolucion de los IC . La disolucion de los complejos se produce debido a la insertion de los componentes C3b y C3d del complemento en el IC, que provoca la rotura de algunos enlaces Ag-Ab. Los complejos artificiales unidos mediante enlaces covalentes no se disuelven en presencia de complemento.

Transporte y eliminacidn de inmunocomplejos

inmunocomplejos complemento

Efminaci6n de los inmunocomplejos en el higado

infusi6n de inmunocomplejos marcados Ifactorl

inmunocomplejos unidos a los eritrocitos

dissoluci6n

60

120

180

- sangre arterial vena renal

- vena porta - vena hepatica

360 240 300 tiempo (segundos)

inmunocomplejos unidos a los eritrocitos macr6fagos hepaticos (celulas de 1 Kupffer) _-/ r--

Fig. 25 .13. Se inyectaron complejos ' 25 1-ASB'anti-ASB en un primate a to largo de un periodo de 120 segundos . Se extrajeron muestras de las venas renal, porta y hepatica, y se determin6 la cantidad de inmunocomplejos unidos a los eritrocitos mediante la medida de la radiactividad . La concentration de complejos en la vena renal y porta result6 ser parecida a la observada en sangre arterial . Sin embargo, la sangre obtenida a partir de la vena hepatica apenas contenia inmunocomplejos, to que indica que basta con que los eritrocitos atraviesen una vez el higado para que los complejos unidos a los mismos sean eliminados . (Seg6n datos de Cornacoff y cols ., 1983 .)

Fig. 25 .15. En los primates los IC se unen a los receptores CR1 de los eritrocitos y Ilegan al higado, donde son eliminados por los macr6fagos hepaticos. Los complejos que se desprenden de los eritrocitos por la action del factor I son capturados por celulas con receptores de Fc y del complemento (tambien se encuentran los macr6fagos) . La disolucion de los grandes IC mediada por el complemento da lugar a pequenos complejos solubles, que pueden ser capturados directamente por los macr6fagos tisulares .

Hpersensibilidad de tipo III

La clase de inmunoglobulina influye en la velocidad de eliminacion de los inmunocomplejos Sc hall obscrlatio notables ditcrcn :i .1s cn la elinlina :ttul de Icn ill nluncuonnl,lcjt,s ,cgiin 1 .1 CLI,C :IC innrtu10glohulina tluC Co11 tcngan . I .t,s Ctmlplcjtn yuc ctmtiencn IgG sc uncn a ht, critrocittn t- son chnlmadtn gradualmentc tic la :irculacicm, micntras yuc h1s coinplcjs,s yuc Ctm1ICHCn It;A nt, u uncn llicn .1 Icn rritrt,citos, sins, yuc ticsaparetell ripidanlcntc tic la circulation ticpccsitantlo,e cn I()s ritioncs, Ic pu1r11c1t,cs V cl ccrcbro . Los defectos de los fagocitos prolongan of tiempo de persistencia de los inmunocomplejos Ell con:licit,nes nor- 111,11c", It,s ill nurnc,ct,1n111Cjt  t,l,stnlii .nlt,s stm clinlulados pttr cl sistcnla tagt,crtico n1tmonudcar, tirndanlcntalnlcnte cn cl higado % cn cl bait, . Sin ctnbargo, cuandt, csi tcn strands" : .lnlidadcs do ill nlunt,ctmlplcjcls, cl sistenla lagocitico int,ntnlticlcar pucdc ytictlar dc:shc,rdadc,, coon cl ccmsiguicntc .1un1cnte, tic la Ctn1centra :itnl tic amihlcjtrs circulantcs s del ticptnitt, tic It,s misnu,s cn Ios glonlcrult,s t Cn otras /imas [.it al gums clca%icmc, so: ha tictcctado un mat tuncionanucnto do: Icn tagclcitos nltlnonucicarc% cn las cnicrmcdadcs humanas por innlunc,conlplcjcls, aunciuc csto pucdc scr una con%ccucncia dc la st,lnccarga tic trabajo dc Icts mismos 1 nor un dctcctc, prinlario . Los sustituyentes glucidicos de los anticuerpos influyen en el proceso de eliminacion de los inmunocomplejos No: Ita ticnlt,str .tcit, yuc lcn to 111)()s glucidi :t,s adosadtr, .t las nlolcculas de las innuuloglohulin .ts ssm inllu,rtantc, para ytit d proccst, do climinacitm tic Io% inrnum,c(nnplejos Ix)r parts tic la, celulas tagcwiticas puctia scr Ilccado a caho coil cticacia . En algunas cnicr n1CclaLIC,11sa- innuultntnnlllejt,s, comic, la aruitis rcunlau this, sr hall doectacio anotnlalias cn cslos grupos glucidiicx, yue not 11.1 11 sins, agrasar cl pr(Kcsc) patoklgictt . l .c n oligostc .i6C1os (ICI t1tnt1itliO Fc dc las innumoghdlulinas carcccn tic la gal .uttly terminal habitual, h1 this tacilita ,u unison al factor reunlatoitic . Itccicnivmentc sc ha denutstrado quo la protcina lijaciora dc nlamlnt, ,c unc a las molccuIas de galactc,sa tie las IgG c induce la aclil a : ion dcl :tutll)lcnlento . Eliminaci6n de IC por los fagocitos mononucleares

DEPOSITO DE INMUNOCOMPLEJOS EN LOS TEJIDOS

Lo,, innnnu,conlplejt,s pucticn pcrsistir en la circulacicm durante pcriodt,s prt11ongadtn tic ticnlpo . Sin cnlbargo, %tt mcra prexn cia lit) c, nu,tnt, suficicntc como para yue se prtaiuzcan etccto% nc,cilt,s ; Isn problcnlas aparcccn cuando Io% innnrnoconlplcjtn so: cnlpician a dcp)sitar cn Is,s tcjidos . Hat tits cuestitmcs in1portantc% a analizar Coil rc,pecto al dcp6sit0 tic ill tlttnu,amlpICjt: ctt 10% tCjidcn : " :I'or yuc se dcpt  itan It,s ill nxnlt,rtmlp]Cjos? " ;l'or yuc inucstran Itn ill nttu1o1:t,1111,ICjos afinitiad hc,r dctcr nlinadt,s tejidos cn Cicrtas crltcrnlctlacics? Probablemente el estimulo mas importante para el deposito de inmunocomplejos as el aumento de la permeabilidad vascular \Irdixttr c " ~iid :,x IIt N .t .h- ,t :,tt " i c ii minialcN sir c spcrinlcnt .t :ita1 so: lt .t tlcnx,str .tti  this tictcrrnmatias stntancias mcrtcs, onnt~ cl carbono coloidal, ,c tlcisositan cn parcdc% dc Icn \ asps san guincsn tras la administration tic urstancias,ast,aCtitas, conlo la histamina c1 la scrotonina . Los inmnru,conlplejos circulantes sc c1cpositan tic tilrnla :ulalo,ga tras la administration tic sustancias yuc induccn la liberacitin do I :ts aminas tasotctnac tic Icn masts, citos (cntrc las yue ,c cncucntra la hi%taminal . FI tratamicntcr previo Coin :ultihistanlinicos inhibc csic tcnonlcncr . En Ciertcts CSttrtiit15 so,bl-C la entcrnlcdad c\pcrimental por in Ill u1t,ctmiI,lCj0s Cn ctnlej0s sC ha ticnlt,strado (lilt: 1 .1 administra
o ] .is

Efectos de un antagonista de las aminas vasoactivas en las enfermedades por inmunocomplejos

proliferaciorr del endotelio arterial complejos subendo teliales necrosis de la media arterial rniocarditis infiltration de neotrcifilos

corazon

poll-

25

50 tiempo ihorasl

0 20 40 60 80 100 0 no tratados incidencia de lesiones Ml F>" desprovistos de plaquetas tratados con inhibidores de las aminas vasoactivas Fig . 25 .17 . Se indujo la enfermedad del suero en ratones mediante una unica inyeccion de albitmina de suero bovino. Los animates se dividieron en tres grupos : no tratados, sin plaquetas y tratados con antagonistas de las aminas vasoactivas . Se determine la incidencia de lesiones cardiacas y pulmonares debidas a la enfermedad del suero . El tratamiento farmacologico redujo considerablemente los signos de la enfermedad, al disminuir la permeabilidad vascular y reducir de esa forma al minimo el deposito de IC .

Fig . 25 .16 . Los IC grandes son eliminados mas rapidamente porque se presentan ante las celulas reticuloendoteliales portadoras de receptores de Fc como una red de IgG-Fc, to que aumenta su avidez de union con dichas celulas . Ademas, fijan el complemento con mayor eficacia que los pequefios .

Deposito de inmunocomplejos en los tejidos

ciim :a largo plaro dc antagonistas tic la, aminas yasoactiyas, como la cloricniramina o la metisergida, reduce considcralslenicnte cl deposito tic inmunoconiplcj()s lAq. 25 .171 . Adcnias, cs atin m:is iniportante cl liccho i;dcsdc cl lpunto tic vista dc la pt- c\ cncioin do la cntcrrnctlad i dc tiuc Ios ratoncs NZli ;i'\Z\V jhyencs tratados tom nretisrrgida ticsarrollan ntenots Icsioncs renales quc Ios ra

dente es la artritis rcumatoidc, cn domde Ios factorcs rcumatoidcs IgG anti-l-( ; sc li>rinan cn cl interior dc la cayidad sinmial ; a coriltinu.ICion csios anticucrpos sc combinan cntrc si v dcscnca(icnan la rc .i-coin inflamatomia .

tones de control ;fist . 25 .18'j, El aurncnto dc la pernicahilidad yastular pucdc scr inducido mctiiantc diycrsols mccanismos tic inip(mtancia yariahlc, scuiin cull sea la entcrinedad cxistentc \ la especie animal implicatia . Esta uriabilidad hacc yuc la intcrprctacion tic los rcsuludos oib tenido(, cn alguno, nIOdcl(), animalcs sea diticil . Sin embargo), cl complcmcnto, los nlasto(citois, los hasofilos y las plaquctas Lichen set' sicml,rc considcradors fucnies potcncialcs de aminas yasoacti\as en tualquicr especie animal .

El lugar de deposito de los inmunocomplejos depende en parte del tamano del complejo

L'n cjcinl, l() (lart) cs cl ritu'In: I,ts inniuiio(c(mylcj((s tic I .Imano pcqucfuo prtctien atraycs .u I .I iiictnhr .Itla halal Ioimcrular V SC ticpo,itan cn la lurch cpitclial tic dicha mcmhrana ; los inniuno tomplcjos dc nlay()r tamaiur no pucticn atra\csarla, por I(i yuc se SLiCICII acunuilar entrc Cl endtttclio \ ht nienihrana halal () Cl mc-

El deposito de inmunocomplejos es mas probable cuando la presion arterial es elevada o cuando existen turbulencias

Efectos de la metisergida, un antagonista de las aminas vasoactivas, sobre las lesiones renales
iniensidad de 3 la proteinuria
2

cti I((s capilarcs glomcrula \lutha, nLtcrt nn()]C, LILT, rcs, cn Ios quc la prcsioin sangumca cs aprmimadamcnte cuatr() teas mayor clue cn cl rcsto do los capilarcs (/iq .25.1o9,1 . Cuando sc reduce la presi(m sanguinca glontcrular tic III) ctlnej() mctiiantc la constriccitrn partial tic la arteria renal o mctiiantc la lig.tdura dcl ureter, cl delshsito tic innrtmoconIIplejos tamhicn sc rcdu cc . I'or cl contrario, Si SC :umicnta la prcsion sanguinca glotlcrular incdiante la induccioin artificial do hipcrtcnsion, cl deposito do inntimotomplcjos aunicnta, ctm1o dcnttICSti'a cl IIcclio de la apariciln tic sintonras dc la cntcrntetiad tic[ ,t]er(). En otras regioncs corporalcs, [,is Icsioncs m;is inlportantcs sc prolduccn cn zomas tic flujo turhulcntol . Estc CS pr0hio tic las turyas y bifimcationcs tic las arterial, asi como tic ticterininadois hltros yasculares, conxi cl pie\o coroidco I. Cl cuer[1o cili ;u' tic] gloho ocular.

La afinidad de los antigenos por tejidos especificos puede dirigir a los inmunocomplejos hacia determinadas zonas La Ilihcriciisitin ,(rirrial .a nitcl [((cal pcrmite c\plicar por yuc Ios

Fig . 25 .18 . Se determinaron las lesiones renales en ratones

inmtnt00nnplej()s tiCilticn a ticpositarsc cn cicrtos organos, llcr(( no pair yuc ell algunas cntcrniedadcs Its inmtinoconiplcjos sc :n cl I .FS se Produce un COIndrpo(sitan cn or ganos cspccilicoi% . E sidcrahlc deposito tic complcjts cn Ios rifioncs, micntras yuc tit la artritis rcuntatoidc no, cn cstc ultimo caso, aunquc Its innnintitoml,lcjt,s circulantcs son ahundantes, cstos ticndcn a dclaisitarsc cn ],is articulaciomcs . Es posil,lc yuc cl antigen( Clue tilrma part( tie Ios cotmplejos conficra csl,ccificidad do ()rgano, y sc lie dcsarrollado, un nloxiclo quc denuicstra c(nmnccntcmcnte cstc heels( . En este model( st administra endoltol\ina a ratoncs, to yuc induce Icsioncs cclularcs y la liberation tic AI)\, yuc a contirtuacitn se Line a las IIICIII branas basalcs glonicrUlarCs sanas. I .a attiyati<in politlonal do [as cdulas B da lugar dcspucs I la fin-madoin tic .uuicucrpos anti-Al)\ . yuc SC uncn al ADN fijado fimmando ininun(womlplcjos a niycl I() cal i_6ir . 25 .2111 . l,a production dc tactoir rcumatoidc ( Ip\t i anti IgG da lugar a la filrinacio'n do mil innTtmotonllilejos iu situ . Fs posil,lc yuc cn otras entcrinetiaccs tamhicn cxistan antigenos yuc prescmcn afinidad por dctcrminados organots . La carga del antigcno y del :uuicucrpti tamhicn pucdc tcncr importancia cn tictcrminadas sitttaciones . I'or ciemplo, c\istc una alta probthilidad do yuc Its antigen,, y Ios antictrcrpos cargados positi\aincnte se dcl,tsitcn solve la nicmhrana halal ;IIonicrular, yuc csti cargatia ncgatiyanuntr. I :I grad( dc glucosilacitin tamhicn influyc CIA cl destino dc los inmunocomplejos yuc conticncn antigenos gluc((pnrtcitos, ya yuc Cl rectnIOcimicntO tic las molctulas dc aziicar actin cicrtos mccanisnios do climinaci(In, como, poir ejcmplo, cl dependicntc do la promna fijadora del manano . En tictcrininaclas cntcrmctiatics los anticucrpos y los antigenos sc proxiucen cn cl scno tic) organ( atccudtl . I-:I caso mil ct i-

NZB,'NZW en cinco meses mediante la proteinuria . Los animales no tratados desarrollaron una intense proteinuria; esto no ocurrio en los tratados con metisergida, que inhibe la production de la amina vasoactiva 5-hidroxitriptamina, que bloquea una serie de acontecimientos inflamatorios como el deposito de IC, la infiltration de neutrofilos en las paredes capilares y la proliferacidn del endotelio, que provocan fendmenos patologicos a nivel renal.

Factores hemodinamicos que afectan al deposito de IC

glomerulo renal
t

arteries

iedentP tir Ir. ;,'tt:rid renal

capsule de Bowman ,- hipertension

1 a la vena renal
Fig . 25 .19 . Entre los factores que favorecen el deposito de IC se

encuentran los procesos de filtration y las presiones arteriales elevadas, fenomenos que coexisten durante la formation del ultrafiltrado en los glomerulo, renales (1) . Las turbulencias en las curves o en las bifurcaciones de las arteries (2) tambien favorecen el deposito de IC .

-lipersensibilidad de tipo III

Union de antigenos a los tejidos con formacion de inmunocomplejos a nivel local

Deposito de inmunocomplejos en el rifion

MBG

c6lula epitelial (podocito) del glom6rulo Fig . 25 .20 . AI inyectar endotoxina en ratones se produce un aumento de la permeabilidad vascular y se induces lesiones celulares y la liberacion de ADN . Este ADN se puede depositar 11) sobre el col6geno de las membranes basales glomerulares (MBG) del rinon . La endotoxina tambien induce una proliferacion policlonal de las celulas B, algunas de las cuales produces autoanticuerpos como anti-ADN o anti-IgG (estos ultimos denominados factores reumatoides IFRI) . A continuacion, los anticuerpos anti-ADN se pueden unir al ADN depositado dando lugar a la formacion de inmunocomplejos a nivel local (2) . Los FR presentan baja afinidad por las IgG monomericas, se unen con gran avidez a los complejos ADN-anti-ADN 13) . Esto da lugar a la formacion in situ de mis inmunocomplejos .

Fig . 25 .21 . La zone del rinon donde se depositan los inmunocomplejos circulantes depende del tamano de estos ultimos . Los grandes complejos se depositan sobre la membrana basal glomerular, mientras que los m6s pequenos la atraviesan y se depositan sobre la superficie epitelial del glomerulo .

sangio lfiq. 35 .311 . El tarnafur de los inrnunocontplcjos dcpcndc de la salencia del antigen() del titulo yafinidad del anticuerpo .

ADN ,11ic ,C tict : :t .ut ell CI I I'stn dc d .t I c,ti .uw :lirrl " ~ ,e, , suhdascs muc ditcrciltcs segue la cdad % cl %C\() dcl Pa cientc . Dc la ntisnta tirrnla, ,t to larger del desarrollo de los ratones V'/,li/\7.11' sc prordUCC una conrnutacion tic la class tie innltrnoglobulina, clue al principio es predorllinantenlente IgM c dcspucs pasa a scr IgC,2a . Fsta connurta :ioin sc proxfucc antes en la% llcntbras que ell los ntacltcls, \ coincide ell cl tictnpo iom la aparicion do la cntcrmedad renal, to que dcinucstra que la class de anticuerpos cjcrce cierta influcncia sobre cl tlcpoisito tic Icrs innlull :  111PICt  1 Cn Io,s ICll,f , ' - tilt 2~ 22

La clase de inmunoglobulina que forma parte del inmunocomplejo tambien influye en la manera en que se deposita

rcscencia llara detectar la prcscncia do innttutoglodutlinas %, ions plementor . l a contlx,sicioin tic lots inntunocorntplcjo,s, su aspccto % Ia rcgioin concrcta tic tcjido atcctada prolwrionan imlurrtantc intbrmacioin accrca do la grawdad % cl pronostico de la enicrrnedad . I'or cjcrnplo, cl pron6stico tic los llacicntcs corn glonlcrulonctiitis Incinbranosa ell los qUC sc obscrsan dclltisitos suhepitclialcc de Igt ; Continuos s. grtnulosrn cs rnalo . 1'or cl contrario, cl proatostico do aquc Ilos cn Icrs qUC los inmunocomplejos cstan Iocalvados .t ni%cl ntcsangial cs much( ntcjor. all, todos lo, . :0mlllcjos que sc uncn a los tejidos flan lugar .t una rcac:ioin intlantatoria-, prr cjcmplo, ell cl LES ce suclcn detectar contplcjo n ell las hio,psias cutancas obtcnidas ell regioncs ell las title la picl prescnta un aspccto normal, asi Como ell I .s  htcnidas ell las rcgio,ne, ell title la picl csta inthmada .

Pruebas analiticas para detectar inmunocomplejos circulantes I o,s inlmmo,co,mplejo,s circulantes ol:ulmn do,s cntpartinucnto,s

DETECCION DE LOS INMUNOCOMPLEJOS

Los inmunocomplejos depositados se pueden visualizar mediante inmunofluorescencia

I I ,itk, idontco, pant tictect .u lo,s contl,lejo,s es cl o,rgano atictado . I n mucstr.ts tic [C) i .io, NC I'kIc,1CII es .unin,11- mediante inmun011uo-

dI1C rrnt : s I, ucticn rstar unith,s a Ion critror<itos o litlrcs ell cl plasnt,t . 1A  co,mplejo,s unidos .t k,s critnmtos ticndcn a producir nlcnos clcctos nocivos, llor for que la oictcrnlinacioin que ticnc ntas intcrcs cs la de los complejos librcs . F.s preciso obsenar tic tcrminadas prccauciones cn cl ntontcnto do ohtcncion tic la rnuestra, sVa Clue los complejos fijados pucticn set libcrados port el factor I durantc cl prolccso do coagulacioin . pare que Icn rcsultados obtcniclos seen c\actos, sc dcbcn separar rapidanicntc loo critroeiton del plasma, con o,hjcto tic ccitar la libcracioin de lots illntunoconiplcjos unitios a Ion critrocitors . Uno tic Ios nlctodos utilitados pare detectar las IgG de alto peso molecular, en el que csta basado uno do lox sistemas que sc

Detecci6n de los inmunocomplejos

Clases de Ab en la enfermedades por IC

Determinaci6n de inmunocomplejos mediante la utilizacion de polietilenglicol (PEG)

suero problema

porcentaje de 60 union total al 50 AON en cads 40 clase 30 20 -

hembras

aparici6n de la nefritis

CA1

adici6n de PEG al suero problema para precipitar

IgG2a

10

60 50 40 30 20

machos
rI b1

el sobrenadante contiene IgG libre

igC2 ;;

10 014 4 18 25 27 29 33 35 37 edad (semanas)

el precipitado contiene complejos de IgG, clue son lavados en PEG, redisueltos y cuantificados Fig. 25 .23. Se anade polietilenglicol lPEG) al suero problema clue contiene inmunocomplejos de IgG e IgG monomerica . Los complejos precipitan selectivamente a trna concentracion de PEG del 2% ; por el contrario, los anticuerpos libres permanecen disueltos a esta concentracion . A continuacion se centrifuga el tubo de ensayo y los complejos sedimentan en el fondo del mismo. Se elimina el sobrenadante clue contiene el anticuerpo libre y, finalmente, se lava y se redisuelve el precipitado, con to clue es posible determinar la cantidad de IgG clue forma parte de los complejos (p . ej ., mediante inmunodifusi6n radial sencilla, nefelometria o radioinmunoanalisis) .

Fig. 25.22. En los ratones NZB?NZW la enfermedad por IC surge espontaneamente, tras una conmutacion de clase de Ig entre IgM e IgG2a en las fases tempranas del desarrollo . Se muestran las proporciones de Ab anti-ADN de los isotipos IgM e IgG2a en los machos y en las hembras. Tanto la conmutacion de clases como el desarrollo de la enfermedad renal fatal se producen antes en las hembras clue en los machos de esta ceps .

encucntran en cl ntercado, consists en prccipitar los inmunO complejos con polietilenglicol ( PEG) y mcdir la IgG precipitada Para la determinacion LIC la concentracion Lle inmunocomplejos circulantcs sc Suck apro\Cchar sit afinidad por el componcntc C:Iq del compicntemo . utilizando (Iq marcado radiactisantcn tc o cn fasc soilida I ;CIq unidor a un soportc solido) i .fllf . 3-1.3-1) . Tantbicn se pueden utili/ar otros rccCpurres para capturar y Cuantiticar los inmtinocomplcjos, conic cl receptor Lie C :3 dc las celulas RAJI Tuna Ijnca de Cclttlas I3 tumorales ;l o cl receptor do FC de las plaquctas. Sin embargo, se debe scr canto al intcri)retar los resultados do la detcrininacion dC ill mtm000mplcjos en pacientcs con cntcrmedadcs autoinnutnitarias, ra quC CstOS paciCntCS puCdCtt POSCCI- anticucrpos ti- Cnte a comporncntes del propio sistcma de determinaci6n . Por ejemplo, en cl ITS los pacicntes prenlucen anticuerpos frente a los lintocitos t. cl Al)\, quC SC tmett a las C lULts RAIL c dan resultados falsamcntc positi\OS en CI analisis dC innrtmOCOmplejos . Dc la misma tornra, se han dciectado anticuerpos anti-CI q en una scric de cntcrincd.uics del tcjido conjuntiso (CIq prcscnta una cstrLICtura parecida a la del colagcno), to yuC horde ciar Ill gar a talsos positis os en L is detcrnainaciones en gLIC SC utiliza C. Iq. En todas cstas cicterminacioncs Cs importantc s crilicar quC to clue parcce un ill nrtm000mpleiO prcscnta do liccho un peso molccular m;is clesado clue [as Ig(i monorm ricas . Finalmcntc has quc senalar clue la rsalu .tiioat dCl sit nificado dc la prcscncia de inn LI nocomplejos circulantcs es atin mas dclicada clue 1 .1 intcrpretacitin de la presencia dc inmunocomplejos en Icrs tcjidos . Muchos inmunocomplejos circulantcs no son datunos. l as Icsioncs solo apareccn cuando cstos complejos sc dcpositan cn los tcjidos .
i LhR . 2 .i.23 i .

Radioinmunoanalisis de inmunocomplejos

Fig. 25 .24. Radioinmunoanalisis de tipo (4sandwich,, para la determinaci6n de inmunocomplejos, basado en la utilizacion de Clq. 1) Se one C1q a un soporte s6lido inerte, generalmente un tubo o placa de poliestireno . 2) Se anade el suero clue contiene los complejos. Estos se Linen al C1q presente en la fase sdlida a traves del conjunto de dominios Fc clue poseen . 3) Se anaden anticuerpos anti-IgG marcados radiactivamente . A continuacion se mide mediante un contador gamma la radiactividad retenida en la fase s6lida despues del lavado, a partir de la coal se puede calcular la cantidad de complejo unido a C1q.

Hipersensibilidad de tipo III

~Que factores tienden a inducir la persistencia de los inmunocomplejos? " 4Por que se depositan los inmunocomplejos en algunos organos y en otros no? 4Que manipulaciones novedosas del sistema inmunitario podrian set utilizadas para el tratamiento de las enfermedades por inmunocomplejos?

~Es beneficiosa o nociva para los pacientes la activacion de complemento por parte de los inmunocomplejos? ~Como influye la clase de anticuerpo en el destino final de los inmunocomplejos? " 4Por que es dificil la determinacion de inmunocomplejos en el laboratorio?

LECTURAS ADICIONALES
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r -"

Hipersensibilidad de tipo IV
" Existen tres tipos de hipersensibilidad de tipo IV : por contacto . de tipo tuberculinico y granulomatosa. " Las celulas de Langerhans capturan y procesan los haptenos aplicacos sobre la pie), para presentarlos a las celulas T especificas de antigeno . " Las citocinas producidas por las celulas inmunocompetentes de la piel (p . ej . . queratinocitos, celulas de Langerhans cdltllas TI atraen a las celulas T no esoacificas de antigeno, asi como a los macrofagos . " Las reacciones de hipersensibilidad de tipo tuberculinico se utilizan para comprobar si ha existido una exposition previa a diversos agentes infecciosos. " En las reacciones granulomatosas existe tin equilibrio entre los efectos protectores del sistema inmunitario y las lesiones fisulares que producen las reacciones de las celulas T frente a los antigenos insolubles . Un buen ejemplo de este tipo de reacci6n es la lepra tuberculoide . " La persistencia del antigeno induce la transformation de los macrofagos en celulas epitelioides, que se fusionan entre si y dan lugar a celulas gigantes La respuesta patologica global se denomina reaccion granulomatosa, y provoca lesiones tisulares. " La formation de granulomas se inicia cuando las celulas T activan a los macrofagos, y para que se produzcan es precisa la presencia de TNF.

26

. Scgijll la clasiticacj(nl tic ( :(x)n1bs 1 tic]], oats rcaccioncs tic Ilipcrscnsibilidad tic tip() 1\' ~ rctarda cia ) tardan alas do 12 horas cn ma . nitcstarse, l cn colas (stall inJIllicadas re .ccioncs illIllullitarlas Ille diadas por cclulas, sin illtcrlcllcio'n al ;'una dc ],is rcaccioncs Ilunloralcs. Sin cnlbaargo, cn la actualidad ac sabc (Iuc hay otnu rcaccioncs do Ilipcrscllsihili(taad yuc tanlbicn pucticn cncajar (1cn tro dc csta dcfinicion . POr cjcnlplo, la fast tarthA sic [as rcaccioncs

HIPERSENSIBILIDAD POR CONTACTO

La hipcrscnsibilidad por contacto sc caractcriza Ilor una rcaccicin ccccnl .ltosa cn la /cola en yuc SC Ilroducr conttact) Coil till Acrgcno +h!r 26 .2'1 . Suclc aparcccr tras cl contacto coil agcntcs colllo cl niqucl, loos cromatos, los acclerad()rcs do la polinlcrizaacion tic Ins gonlas c cl pcnta oiccacatccol I; colllponcntc do la I11edl'd s cnc

Incdiadas Pot IgF. S C ))cock nlanifestalr IIASta 12-_'4 floras dcspucs dcl contacto coon cl alcrgcnol. Aunquc cl mccanisnlo titndanlcntal dc csta rcaccicin csta mcdiado por Ias I ;-E, cn cola tanlbicn intcrt- icncn la's cclulas'f C01,11101 - adorats, to ]tic con1plicn alull nlas el panorama . I la \ horas rcaccioncs (coin() la reaccion dc hipcrscnsibilidad dc joncs-,\lot(, yuc pucdc (Itic sea analogy a las rcaccio

Los tres tipos de

hipersensibilidad de tipo retardado tiempo maximo de reaccion 48-77 horns 48-72 horas 21-28 dias

ncs de Ios haSOtilos cutancc)s dc los cobasasl yuc antiguan1cnte tanlhicn sc consicicraron rcaccioncs dc hipcrsensibilidad tic tip() IV, altlllytiC sus n1ccanismcn 1. su illlpOrtancia clinics todalia no hall side) aClaara(1os: cn cstc capitulo no o sc cobcra a haccr noon cirnl :a cstas re.tccionlcs . .-11 contrario dc I() yuc ocurrc cn otras ti)rnras dc hil,crscnsibilidad, la hipcrscnsillilidad tic tip() IV no pucdc scr transtcrida dc tin allinlal e toll'() nlc(iiantc la trallslcrcncia tic sucro, sin() yuc Cs necesari(o tr,ulstcrir cclulas 'L co)IabOradoorals Cool I cn cl rat6n ) . Es obs-io (111C cstc tip() dc hipcrscnsihilicfad cst.i rclacionado con Ion proccsos illnlunitarios pr()tcctorcs dcpcndicntcs dc cclulas l', pcro, sin cnlbargo, allnhos tcnomcnos no sicnaprc 1 -an nsociad(n: Cll algunas Ocasi(ollcs It() czjstc UIM co)rrclacio)n total clltrc la Ili1wrscnsibilidad dc tipo IV \ la innlttnidad protcctora . Las cclu Las l- yuc (1,111 lugar a lau rcspucstas sir tipo retardado ticncn yuc labor silo scnsibilizacias prcl- ianlcntc por csposicion al antigcllo, v sit nlision cs atracr cclulas dc otros tipos Iracia la zona (ic la

reaccion retardada por corltawto tuberculinica granulomatosa

Fig. 26 .1 . Las reacciones de hipersensibilidad por contacto y ]as de tipo tuberculinico presentan tin curso temporal parecido, y su intensidad es maxima a las 48-72 horas. En determinadas circunstancias (p . ej ., ante Ag insolubles) tambien se pueden producir reacciones granulomatosas, a los 21-28 dins de la exposition (p . ej ., pruebas cutaneas para lepra) .

reaccion . I lay trcs rcaccioncs dc hipersensibilidad (IC til)o R' i /ir) . 26 .11. . La hipcrscnsibilidad po)r contacto 1 la (ic till() tuberculinico sc la% 72 horas postcriolrcs ;a la cxposicion manificstan durantc al Ag . Las rcaccioncs do tipo granulonlatoso tarcian tout 21 l 28 dills ell Illanlfestarsc ; los granul(nllas tic tormatl cool() collsc cucncia tic la agrcgacio)n v prolitcracion (Ic los nlacr(Aagos, y la rcaccion sc pucdc prolongar varias scnlaanas . En cuanto a sit inlportancia chnicaa, esta cs sin du(la lay rcaccicin nlas gralc (ic Ilipcrscnsitlilidad dc tipo I\'. 'bras la cxposici6n .1 till Ag puccic producir alas do till tip() dc reaccion ; Ias discrsas rcaccionhes sc

pucdcn so1lapar unas coil otras. Los trcs tipos dc hipcrscnsibilidad retardada sc ditcrcnciar(n scgun la rcaccicin quo sc product ail aplicar cl :1g s()brc la picl (adnlinistraaci(')n cpicutaancal o imcctaa- por lja intraticrmica. En los aminlalcs, la nlagnitud (ic la respuesta SC suck cictcrnlinar nli dicndo cl cngrosamicnto) producido cn la picl . Esta respuesta pucdc acompanaarsc dc un,1 scric tic rcaccioncs innlltnitarials sistcllllc'.is .

Fig. 26 .2 . Las lesiones inducidas por las reacciones de hipersensibilidad por contacto an tin caso clinico y en una prueba de parche . 1) Eccema on la inuneca debido a la sensibilidad irerlte al niquel que contiene la hebilla del reloi. 2) La sospecha de alergia se puede contirrnar mediante la aplicacion de los posibles alergenos, a concentraciones adecuadas y en los vehiculos apropiados, sobre la zona superior de la espalda del paciente (prueba del parche). Las reacciones positivas dan lugar a tin eccema localizado en el punto de aplicacion, 2-4 dias despues de la misma .

Hipersensibilidad de tipo IV

nosy 1 . hl coltlacto Colt agentes irritantes Line provocan Icsloncs Cutancas mccliantc nlecanismos t6xicon no rclacionados con la 1liperscnsibilidad pucdc dar lugar a cccenlas . Aunque las rca :cioncs inicialcs diheren, Ices aCo~tltCCnttic1ll0s innlunitariots +IC SC produces tras cl contacto con agcntcs irritantes v coil alergenos soil parccidos . Las regioncs con acti\idad inmunitaria tic los agcntcs cnumerados antcriorlnentc sc dcnominan haptcnos . Los . haptcnos, .11-CS C11VOS PCSOS n1010001 SUCIC11 scr inleriotrcs a 1 kdal, son dctnasiado pcqucnos conut para posccr inmunogcnicidad intrinscCa . Pcnetran cn la epidermis sc conjugan cost protrinas atrporalcs, generalnlentc tic forma co\ alcnte . l a potcncia xensibiliiadora tic un hapteno no pucde ser prediclta coon fiabilidad atendiendo tinicamente a su estructura quinlica, aunquc cxiste una cicrta cotrrclaci6n mire 01 nanlcro tic haptcnos unidos al transportatiotr N la capacidad tic la nlolccula para pcnctrar cn la picl . Adcnus, algunos agcntcs indUCtotrcs tic alcrgia por cotntai to poscen Carbonos unidos por dobles enlaces, por lot que sc o\idan con tacilidad . Algunos haptcnos, conto cl dinitroclorolxnccno i I)\('1 ;1, sensibilizan pricticantcntc a totdos Ios indi\iduos, por to gtlc puccicn scr utiliiados para cotntprotbar cl titncionan1i0nto tic lots Con1PoncntCS CClulares dcl sistcnia inntunitariot . EI I)\CB aplicado por \ia CpitLltanca sc uno a Ion grupos -\H, de la% lisinas tic las protcinas cpjdcrlnicas .

Las celulas de Langerhans son las principales celulas presentadoras de antigenos La Itiperscnsihilid .t d por contact() cs cscn :ialmcntc una rcaction cpitierinica, % Lis celulas dentintica% de Langgerhans de la rrgiun suprabasal tic la epidermis soil las principales celulas prcscntadoras de antigenos (CPA) quc intervicncn en cstas rcacciones . ?h .3) . 1 .,is celulas de Langerhans procedcn tic la inedula 6sca l-/?it \ exprcsan CD 1, antigenos CPI I tic clasc II \ reccptorcs tic sitpcrticic tic Fc \ dcl complenictm) +~ . cap . 21 . \Icdiantc microscoopia clectronica sc obscr\ - ,1 tiuc posccn lon ticnontinados gra nulos tic Birheck, unos organulos procedcntes de la nlcnlbrana celular espccitiCOS tic cstas Ccltdas . Las celulas do Langerhans soil inacti\atias por los ra\os ultra\iolcta 11, quo poor tanto pucticn anular o atcnuar lots etcctos tic la hipersensibilidad por contacto . 1 .1% Celulas tic Lanverlians sc contportan in ritro coma (PA, \ son alas Cticaccs Cn CSIC SCntitiO yuC Ion ntonocitos . Silt en1bargo, no sc conoccn los mccanismos qUC utilivan las celulas de Langerhans para proccsar logs antigenos . F% lutsiblc que cstos se unan a las moleculas C .PH tic claw 11 \ scan ingcridos mediante endocitosis dcpcndientc de receptorcs, tic acuerdo ion un me canislno en cl quc tatnbicn intcrsendnan los granulos de Birixck .
\1

Las celulas de Langerhans y los queratinocitos desempetnan funciones esenciales en la hipersensibilidad por contacto

Fase de sensibilizacion de hipersensibilidad por contacto complejo hapteno-portador L K epidermis hapteno

Fig . 26.3 . C61ulas de Langerhans. 1) Estas celulas dendriticas constituyen el 3% del numero total de c6lulas de la epidermis . Expresan diversos marcadores de superficie que permiten visualizarlas . En este caso pertenecen a una secci6n de piel normal y se has ter)ido mediante un anticuerpo monoclonal que reacciona con el antigeno CD1 (como colorante de contraste se ha utilizado haemalum de Mayer) . L . c6lula de Langerhans, K = queratinocito . .312 . 2) Microfotografia electr6nica de una c6lula de Langerhans con uno de los caracteristicos ~igrAinulos de Birbeck)> . Este org6nulo es una estructura plana con unas estrias centrales claramente visibles y que muchas veces presenta una prolongaci6n tipo flictena en uno de sus extremos. x 132 .000 .

Fig . 26.4. El hapteno da lugar a un complejo hapteno-portador en la epidermis . Las c6lulas de Langerhans ingieren el antigeno y migran a traves de los vasos linfaticos aferentes hasta las regiones paracorticales de los ganglios linfaticos locales, en donde adoptan la forma de c6lulas interdigitantes y presentan el antigeno a las celulas T CDC .

Hipersensibilidad por contacto

Los queratinocitos producen una serie de citocinas quc desempenan importantes funciones en las respuestas de hipersensibilidad por contacto
IArs

tlucratinocitors contfcrcn a I .i rpidcrmis integridad estructural dcsemhcnan kin papcl cscncial ell Icrs Icn6mcnos inmunitarios quc sc producen en la mjsma. Pueden exprcsar solve ski mcmhr; na cclular molecules ('PH de class II c I(`.N I-1 . Adcrnas lihcran citocinas, cntrc las que se encucntran 11, l, [l .-3, ll .-6, IL 8, . GM-(S[ ; , '1'NFu, TGFu s TGFj3. 11, 3 pucdc :tctir ;tr has celulas do [ant,gcrlrrns, actuar comp ,gems quitniotactico \ cocstinutlantc do las respuestas prolitcratisas do los mastocitos e inducir la sc10 \r'l*GFj3i, clue crcciiin dc citocinas inmtmostiptesoras I p . cj ., 11, tcn(imcnos tic ancrla respucsta innlunitarja den lugar a atclliian gia clonal {auscncia de respucsta inmunitaria) dc Ins cclulas Ti 11 . 1 .()S yucratinocitcrs pucticn set actisadors mcdiante disersos estintulos, cntrc los quc sc cncucntran Icrs alergcnos v Icrs agentcs irritantes. Una sez activados, producen citocinas jnnttm(restinutlantcs como T\Fu v GNl-(:SF, quc activan a ski vez a Las cclulas dc 1<ingerhans. Algtmos antigcnos, como cl urusiol dc la hiccira vcncttoN1, l" urdrn nuiucir Ii irCCt.unsnts la producci()n tic l \'Foc c 11, 8.

(asociados a molecules C'PH de close 11) a los lintbcitos CD4', clando lugar a una I,ohlaciun dc cclulas T ('D4' dc tnemoria fin. 26 .-11 . I,os CstkidloS Ilcs'ados a caho cn SCI-CS Irttnulos utilizando 1)NCB dcnmestran que cl factor claw cn 11 sensihilizacioin es la dosis do hapteno por unidad tic suhcrficie cutanca, y no la dosis total tic hapteno ni la superficic cut :%nca total expuesta al misrno .

En la fase de respuesta acuden hacia la zona afectada linfocitos CD4' y monocitos

I .a aplicacioin dc kin alcrsgeno skiCIC inducir en Cl blaze, dc tunas pocas horns una ligcra rcducci(in dcl nitmero tic cclulas dc Langerhans tic la epidermis . A continuaci6n se Iles a a sabot la prescnracioin dcl antigeno en la propia picl v cn Ios ganglions 1 i 11 fatjcos . Al poco tiempo del contacto con cl alcrgcno . los mastocitos sc dcsgranulan s . lihcran citocinas . La scircciun tic - 1'Vl u c II .-1 por parts tic di\crsos tipos dc cclulas, pero especialmcntc por los tna cr6tagos, induce la cxl,rcsi()n de nunlcculas de acilicrcncia en las cc lulas cndotclialcs . Estas citocinas lihcradas .t nisel local gcncran kill gradients quc atrac a las cclulas rnononudcarcs liacia la zone de uni(in crate la dermis \ la epidermis \ hacia la propia epidermis . En la-Iirtrrra 26-i sc mucstra kill csquema do la talc do rcspucsta tic las reacciones de hilicrsensibilidad por contacto . l,a primrra altcraci(in histokigica, quc aparccc al cabo tic 48 horns, cs la concentracio n tic cclulas ntonnonucleares alrcdcdor do Icrs ancxos dc la picl N dc Icrs \ asos sarguineos, con la subsiguicnte infiltraci6n tic la epidermis . Transcurridas 48 horns Icrs nrtcrotagos hall incadido la dermis' la epidermis . El niurncror dc celulas infiltradas ell la dertnis y en la epidermis alcattza ski valor maxinur a las 48-72 Itoras i f!q. ?6 .61. I .a mavotia dc Icrs lintocitos infiltrados son ( :1)4', aungtrc tamhicn SC tiCtectan algunos ( :l)8 -.

Las reacciones de hipersensibilidad por contacto constan de dos fases: la de sensibilizaci6n y la de respuesta La sensibilizacion induce el desarroHo de una poblacidn de celulas T de memoria

La sensibilizacioin cs kill proccso tic 10 14 dias dc duratto n cn los scrcs huntanos . Un :t vcz quc se absorbe Cl hapteno, CHIC se cony bina con una protcilla \ ca illgcrido port las cclulas dc Langerhans do la epidermis, quc ahandornan la z(nta \ ntigran a travcs tic Icrs vasos linfaticos atcrentes cn forma dc celulas camutladas llasta las ;iomalcs. Una rcgioncs paracorticales tic Icrs g:mglios IinEaticos rc, szz alli, pressman Ios conjugadors hapteno-proteina prorccsados

l .a proporcion tic cclttLIS pcrtcnccicntcs a kin mismo clon Icclu [as F ( :I)4' cspecificas dc anti,cnonl cs interior al l"f, Es dccir, cl ntccanistno principal dc atracciorn dc cclulas T hacia la zone do rcaccio'rn nor cs dclrcndicnte dcl antit,cno.

La fase de respuesta de la hipersensibilidad pot contacto

' citocinas con r':'`g -,' actividad inflamatoria?` 5

vaso linfatico respuesta tiempo atenuaci6n

Fig. 26 .5 . Las celulas de Langerhans que contienen el complejo haptenoportador (1) se desplazan desde la epidermis a la dermis, en donde presentan dicho complejo a las celulas T CD4' de memoria (2). Estas celulas liberan IFNg, que induce la expresi6n de ICAM-1 (3) y, mar tarde, de molecular CPH de close II (4) sobre la superficie de los queratinocitos y de las celulas endoteliales de los capilares dermicos, asi como la secreci6n pot parte de los queratinocitos de citocinas con actividad inflamatoria, como IL-1, IL-6 y GM-CSF (5). Las citocinas atraen hacia la zona a celulas T CD4' no especificas de antigeno (6), quc se pueden unir a los queratinocitos a troves de ICAM-1 y de las molecules de close II . Ws tarde los macr6fagos activados tambien son atraidos hacia la piel . A partir de ere momento la reacci6n se empieza a atenuar. En este proceso de atenuaci6n pueden intervenir eicosanoides como la PGE quc producen los queratinocitos y los macr6fagos activados (7).

Hipersensibilidad de tipo IV

Citocinas, prostaglandinas e interacciones celulares en las reacciones de hipersensibilidad por contacto

- expresion de moleculas 4- CPH de class II e ICAM-1

.L ." . t . d's t 7i 
.- :

A. ., "

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Fig. 26 .6 . Histologia de una lesidn por reacci6n de hipersensibilidad por contacto . Infiltration de cclulas mononucleares (M) tanto en la dermis como en la epidermis. epidermis es empujada hacia el exterior y se forman microvesiculas (V), por edema (O) . Tincion H/E, " 130.

hapteno-portador Citocinas celula T, : . de memoria`, ."' p lIL-2 ' IFNy, '. especifica ; 2 de Ag activacion y acumulacion de macrofagos i

Los mecanismos de reaccion frente a los alergenos y frente a los agentes irritantes presentan ciertas caracteristicas comunes
Loos .11rrr.t1t(n

Langerhans cn prooccso dc migraci6n atracn a las cdulaS Ttt1 . Las cclulas T dc rncrnooria sc situan cn Ios capilarcs tic la dcrtnis, dc%dc clondc purdcn inducir la reaccion y atracr otras cclulas tic tiortna indcpcndicntc dcl antigcno .

.ip,ciltc~ irrit .liltr~ l1HCJC11 d .111 .11 LIN :Clul:ls tic I.arlgCrllanN c in(futir 1 .1 hroxiuCtionl (]C tltootin,ls, I1r(n1uol)Cntio 1 .1 n1,lduraci6n de las cclulas dc Langerhans, yuC SC tran%tiornlan en cticacc% CPA % rnigran hacia los ganglion lintaticoos doondc inician ]as rcspucstas inmunitarias . Trcinta nlinut0s dcslnrc% do la apliC.1tjoo11 dC un antigCno o un agcntc irritants poor 1ia topica sr dc tcclan scnalcs pronnooiooras tic 1 :1 sinicsis dcl ARNln1 tic 'I'\Ivz, II~\ " 1 (i\1 ( tiF, c tr .ulsCUrrici :ts 2 -1 luoras la c\prcsion dc cstoos AR\111 Sc mulnphta pordiez . If,n clctsrminadas moxlificaciooncs tic Lt transcription kid :1R\111 yur %oloo sc manificstan tras la apli cation do un 1laptcnoo . Entrc cllas sc ClICtrCntran un aunlcnto a los Ici nlinutos dc la Sena] proonlootoora tic 1 .1 Sintcsis tic] ARNn1 dc 11 . 1li Cn las cclulas tic I-u1gcrl1,ln%, \ 1111 .1 rCguhCioin luositi\ .t tic la transcription tic II .-let, tic la prootcina inflanlatooria 2 tic loos nlatrooCl~oos \III'-2, ticl inglcs ntairoph(ttti irillnuntatot .1 Protiiu Zt . tic Lt protcnla 111 inducida poor cl jrncrtcron 111' 1(l, tirl inglcs intir/iron-iudnied pi-otirn 10) cn loos tlucratinotitoos i - liq . 26 .-1 . La aphcaCioon tic Ilr0dLICtoos yunnicoos cn 1a cpiticrmis puctic III dar gar al aunxntoo tic la Csprrsio'n tic F :I .A1\t-1 1 \'(',~~1 1 cn cl plazo tic 2 hooras, 1, tic R -A\1 I cn rl plazoo do R luoras, indcI1Cndisntsnlcntc tic yuC cl indl\ lduoo sea 0 no seruibic . I('A\I- I ticnc nu% importancia yuC \Y :A\I I v ELANI-1 : Cs cl ligando tic I .FA-I, moolccula slut se cncucnira en las cclulas fntioidcs s . nliCltoi(ICS 1. nICdiantc 1 .1 CIA CSUS cclulas sC asi(nt :u1 Cn 1,1 pill . Las Citocinas yuinlioot :ICtlCJS 1 . CI ~ " cfcctoo faro ,, dc las Celulas dc

celula de Langerhans supresion

macrofago

celula T ,. i, de memoria ..;, especifica de Ag

Citocinas, p . el ., IFN-(, IL-2 macrofago

I,~, matr,, Lip, . 1 110, yucratinoocitoos prooduccn PGI- LIuC lnhibc 1,1 prootiuctioon tic I1"-1 c 11 . 2 ; [a% cclulas 1- sc uncn ,1 loos tlucratinoocitoos actn .ldoos s, cl conjugadoo tic] hapteno cs sonlctidoo .1 (Icgradaci(5n CnziIIIMiCa 1 . CClular . 1 . .1 rCgulacioin ncgatila ticl prooccsoo dcpcntic tic Ion sigtlicntcs niccanisnloos : " I .as Iinti)cina% inhibidooras do la inigracibn irnpiden la diserninaci6n tic la rraccion intlarnatoria . " Loos rnastocito% tic la dcrnlis, loos yucratinocito% actisados c loos linfocitoos prooduccn l - GFfi, yuC inhibc 1,1 intlanlaci(a1 ~- bloyuca In inciuccioin dc la prooliteraci()n poor paric dc IL-1 r 11 2 .

La supresion de la reaccion inflamatoria esta mediada por diversas Citocinas I .1 rc .1co(n sc (icsl .lnccc transcurridas 48 -_'

Fig. 26 .7 . Las Citocinas y las prostaglandinas desempenan funciones esenciales en las complejas interacciones en las reacciones de hipersensibilidad por contacto entre cclulas de Langerhans, cclulas T CD4', queratinocitos, macrofagos y cclulas endoteliales. La presentation del Ag (1) induce la liberation en cascada de Citocinas 12) . Primero esta cascada promueve la activacion y la proliferation de las cclulas T CD4' (3), la expresion de ICAM-1 y de moleculas CPH de class II en los queratinocitos y en las cclulas endoteliales (4), y la acumulacion de cclulas T y macrofagos en la piel (3, 5) . Mas tarde, la production de PGE por los queratinocitos y los macrofagos puede ejercer un efecto inhibidor sobre la production de IL-1 e IL-2 . La regulation negativa de la reaccion depends de la action conjunta de la PGE, la union de las cclulas T activadas a los queratinocitos y la degradation enzimatica y celular del complejo hapteno-portador .

Hipersensibilidad de tipo tuberculinico

I .os qucnttinocitos sintctizan 11, 1 tras estat)Icccr contact() cell ill los alcrgelun, citocina yuc l)ibe cl nletaholisnx) ()\idatico dc I<x n)aCrofag,es \- reduce la ti)rn)aCi(')n do n)Cdiadores con anti \idad intlanlateria ll()r p,u'tc do Ios ntisn)os . II .-I(1 rcgula ncgati\an)Cntc la C\prcsio'm de 111e1CCnlaS CPI I tic class 11 \ suprin)c la preducciom de citocinas \ la pr(fitcracion dcpendicntc sic ant gon() de las cclulas T1 11 . Tan)hicn pucdcn intcr\enir tactores e\tcrno)s: SC I)a demos undo quc cn los stones la luz LW induce la preducci6n dc tin

inhibido)r especifico dc IL-1 . LOS yucratinocitos yuc cspresan mcllcculas dc class 11 ell auscnCia do Ille1CCUIaS cecs6nrlll :u)tcs no pucdcn actual- cen)o ('PA, pCr0 Cuando cntran cn centacte con el haptcne en pre sencia do Cclulas'I'l I 11nledcn inducir ancrgia clonal .

HIPERSENSIBILIDAD DE TWO TUBERCULINICO

Este tip() dc hipersensibilidad file descrit() originaln)cntc 1,()r K(wh . El imcstigado)r KOCh obscr\oi quc cu .u1de SC in\CCtaba po)r \ia Subcutinca a los pacicntcs tuberculoses tin filtradcl dc till cultivo tulkrculinico iantigenes procccicntcs del bacih) dc la tul)crCUlesis) sC prodUCia Una reaccion tcblil ~- malestar general. 1-:n CI l)unto dc la inyecciol aparccia una zcnla tic cndurccimicnto c hinchazin . Los antigcnos so)lublcs de di\crso)s ()rganisnlos, cntrc h)s quc se cncucntran _Lfrcobrtctcrifnrr mbcrcUlasis, a1 . lclwac \ Liisllwanin t)wpica, induccn rcaccioncs de cstc tip() cn lo,, indi\ iduos sensibilizadcn. Estas rcaccioncs Cuiancas sc SLICICII utilizar para con)prohar si till indi\- idUO CS sensible trcntc a tin dotcrn)inade organisn)o, es dccir, si ha side) c\pucsto prc\iantente al misnlo I;`1lJ. 26A. I?sta fornla Lie hipcrunsihilidad tan)bicn 1)tICdC ser inducida por agcntcs dc origcn no) micro)hiano,, co)nlo) cl hcrilio \ cl circo)nio) . En la reaccion cutanea frente a la tuberculina intervienen fundamentalmente los monocitos :c 1,1 tul)ercoilin .) Cs ut1 Cjrm])Ic) sic resl)uCSt.I I - .I de roucrdo) Lie UIt antigctu) s()lut)IC Copt CI (Juc SC Ila c,tal)ICCi(o) contact() l)rc\io cn cl Curse CIC Luta int'CCCion . 'fins la in\CCCio'nl do tul)ci-CUlina po)r via intradcrn)iCa en till indiciduo scnsibifzado Sc acti\an [ .is Mill- I' csl)ccificas do antigen(), yuc Sccrctall Cito cinas yuc iniCian la rcaccicin dc hipcrscnsibilidad. EI 'L\I-u \ la ljntotoxina i INF(3j producidos po)r cstas Cclulas T ejerccn sus etc( tos sobrr Las cclulas cn(iotclialcs dc lo)s \asos sangguinros dc la dcrnlis, ell las yuc induccn la csl)rcsion) sccucncial tic las n)olccu-

las de adl)ercncia selectina E, R'AM-I c \'CAn1-1 . estas moleculas sc linen a rcccptorcs presentcs cn los ICLICo C1toS los dirigcn IlaCia la z(n)a Lie la reaccion . l'ru)SCUrricias 4 horns, la n)acon -1 .1 tic Its Cclulas quc ICUCIC11 hacia la /()iii son neutr6filos, pcro a la" 12 Iloras pawn a ser men)ocitos \ cclulas 1 . Este preccso) do infil tracioln, quc sc czticndc I)acia cal exterior v pro)\()ca la dcstruccioin dc 1()< Ilaccs do celagen() de la dernlis, alc;U)za stl n)a\in)a C\prcsicm 48 Horns CICSpues . I .1 rclacion Cntl-C Celulas I ( :1)4- \ ( I )S Cs al,roximadamentc dc 2 :1 . :\ Las 24 \ . a [as 48 horns talnhicn sc cn CuCntran cn cl infiltrad() Licrmico cclulas ( ;l) I' i parecidas a las cclulas de I angorl);u)s, l)or() sin granules dc Birbccki, dctcctandesc intiltradas cn la epidermis . al nlisnlo ticntl)e algunas CCIUlas Los mcmclcitos constitu\cn cl 80 90''i . del nunlcro total de cclulas intiltradas. Lanto Io,, lint()cito)% cons) l()s macrotagc)s e\ prcsan nx)Icculas ( :PH dc close II, Ie) yuc inCren)cnt1 la CfiCacia Ccnm) (PA sic les iliacroIagos activado)s . I-os yucratilulcitos dc la rcgio'nl alas c\tcrna c\l)rcsan moleculas HI,;\ 1)R 48-96 horas despues dc la aparicio')n del intiltr,tcio linti)citario) . En laJ{o~ri-a 26,1) sc I- CSLI11)CIl tecies CSte3 aCel)tCCIIll1Cnt()s . I)r()hablcnlcntc, cn las rcaccio)ncs dc hipci- scilsibilidad dc ill)() tUbCl7UlillICe las principalcs CRA son los n)acrot ;tg()s . Sin cnlhargo, en cl infiltrado dormice tanlhicn aparcccn cclulas ( :1)1 - , l() gllc sugjcre clue en estas proccsos t inbicn pucdcn intcr\ -enir Ins cclulas dc Langerhans u estas Cilu1as cicndriticas no icicntificadas . Sc crec quc In Cil-CUlaCion dc las cclulas innlunitarias cntrc la region atcctada )- les ganghos lintiiticos locales cs similar a la clue sc produce ell las rcaccio)ncs dc hil)CrSCnsibilidad l)ort contaCto .

Hipersensibilidad de tipo tuberculinico

tuberculina

dermis

expresion de moleculas CPH de close II inflamaci6n y edema

Fig. 26 .8 . Aspect() clinic() e histologico de las reacciones de hipersensibilidad de tipo tuberculinico. La respuesta a una inyeccion de bacilos de la lepra en tin individuo sensibilizado se denornina reaccion de Fernandez. Aparece en la piel del paciente una zona rojiza, hinchada y dura al facto, clue alcanza su maxima intensidad 48-72 horas despues de la exposicion (1). En el examen histologico (2) se observa tin denso infiltrado de leucocitos y macrofagos en la dermis. Tincion HIE, .80.

Fig. 26.9 . En este diagrama se muestra la actividad celular clue se desencadena tras la inyeccion intradermica de tuberculina . Transcurricfas 1-2 horas se expresa selectina E sobre el endotelio capilar, to clue da lugar a tin breve period() de afluencia de leucocitos neutrofilos. A las 12 horas ICAM-1 y VCAM-1 del endotelio se unen a las integrinas LFA-1 y VLA-4 de los monocitos y los linfocitos, dando lugar a la acumulacion de estas cclulas en la dermis . Esta acumulacion es maxima a las 48 horas, y va seguida de la expresion de moleculas HLA de tipo II por parte de los queratinocitos . En la epidermis no se produce edema.

Hipersensibilidad de tipo IV

l .a Icsi(in tuherculinica sucle dcsaparecer en cl plazo do Sdial, 110-0 CH-111d( el :unigeno prrsistc cn el tcjid(r Puede dar Ittg,u- a una reaccion granulotnatosa . I-a infltraci6n subcpidcrmica por htsufilos no cs caractcristicn do cstc tipcr do rcaccioncs, pcro si quc sc obscrva cn algunas rcacciones dc hipersensibilidad pcrr contacto N. en Ias prucbas cutancas Ilcs adas n c;tho con protcinas hctcrulogas, como la reaccion do Joncs-11otc.

HIPERSENSIBILIDAD GRANULOMATOSA
I.a hipersensihilidad granul<miatosa es la ti>rnta ntuis importantc do hipersensibilidad dc tipo IN' dcsdc un punto do vista dinico, .' Cs la caus .t do ntuchos do Ios etcctos patol6gicos de Lis enlermed.tde, en quc inter\ -icnen prrrccsos innuutitarios me(ii:ui(>s p(ncchtlts I' . LstaS re ;tccjoncs SUCICn scr CUnSCCtterlCia do la pcrsistcncia cn el interior dc los tnacrofagos dc micro(rrganisntos intracCltr1arCS o do otras particulas yuc C3tas celulas no s(rn capaccs de dcsu-uir. En ocasiones tamhicn puede scr dehida a la l,resencia pcrsistentc dc ill nnutoccmiplcjos, coma ocurrc cn la ahcolitis alcrgica . Fst(rs hrOcesos dan lugar a la t rrnraci(in do granulcr tnas dc celulas epitelieridcs .

lil aspcctO histol6 ;'ico do una reaccion granulomatosa Cs mtnditcrcntc dcl que sc obscr\a cn las rcaccioncs dc tipo tuhcrculinicu . Sin embargo, sttCIcn ser inducidas por antigcnos nucrobianos parecidos, conto, por cjcmplo, los antigcnos dc Al. tuhcrculosis y Jt . liprac (_/in. ?b .1M. El sistcnia inmunitario tamhicn forma granul() mas en Ias reaccioncs dc hipersensibilidad f- cntc al circonio t- al bcrilio, ,tsi como cn la sarcoidosis, aunquc cn cstc ultimo caso no sc sabc cu :il cs cl antigeno implicadrr . Li fi>rntacicin dc granulomas :Omo respucsta a la prescncia dc cucrpos estraitos I)uedc scr inducida pcrr cl talco, la silicc c otras Particulas diwrsas. En cstc caso la rcacci('rn sc dcbc a yuc los macrdfagos no consigucn digerir Ias particulas inorg.inicts. Estos granulomas cttVO origen n( r cs dc tipo innuutitatio sc caractcrizan pcrr la auscncia do lint6citos cn Lis Icsirmcs .

La hipersensibilidad granulomatosa presenta de forma tipica celulas epitelioides y celulas gigantes

Celulas epitelioides . Estas celulas s(nt gr:utalcs I\ aplanadas, :()nticncn un rcticrrl() cndoplasntatico dc gran tamanu ' ka. 2o.11 l . Sc tirrrnan a [),u-tit' do los macr(ifagos, cuando cstos sc scn somctidos a una cstimulacicin crtinica por citocinas; conscr\ .tn la capacidad part producir TVF, pen- to chic fasoreccn la Pcrsistencia dcl pr()ccs() inllantat(rrio .

Funcion de los fnfocitos TDTH en las reacciones de hipersensibilidad de tipo IV

enfermedad est~mulacior continua granulrr~roa hipersensibilidad por contacto hipersensibilidad por contacto z,Ag soluble . intradermico respuosla
tubere,uliMca

antigeno

diagnostico

La prueba cutanea de la tuberculina (abajo : por gentileza del profesor J. H. L. Playfair) es un metodo diagnostico clasico basado en la inmunidad mediada por celulas propia de la tuberculosis . Cuando el estimulo antigenico es continuo, y no esta limitado a una unica inyeccion de Ag solubles, se desarrolla una reaccion granulomatosa (arriba: por gentileza del Dr. A. du Vivier) o una reaccion de hipersensibilidad por contacto (centro : por gentileza del Dr . D. Sharvill). Esto tambien puede suceder cuando los macrofagos no son capaces de destruir el Ag .

Fig. 26 .10.

Fig. 26.11 . Microfotografia

electronica de una celula epitelioide. Esta es las celula caracteristica de la hipersensibilidad granulomatosa . Comparese el tamano del reticulo endoplasmatico (E) de la celula epitelioide (1, 4.800) con el de un

macrofago tisular (2, .4 .800). (por gentileza de M. J . Spencer.) U = nucleolo ; N = nucleo ; C = colageno ; L = lisosomas; M = mitocondrias .

Reacciones celulares en la hipersensibilidad de tipo IV

Celulas gigantes.

Lts CCIUlas epitelioides se pucdcn ti(sionar v (lar lut;ar .t celulas gigantCS nurltill uclCadas (hp . 36.13}, quc cn ,]gums ocasi(ntcs sc denontjnan celulas gigantcs tic Langltans (quc no sc dchcn contundir corn las (:clulu (ic i.angcrltans mencionadas ion anterioridad ;~ . Las celulas gigantcs conticnen sarios nuclcos, pcro estos not sc CnCUCntran situados en cl centro dC la celula . El . reticulo cndoplasntatico cs cscas(), t ],is mitocondrias y los hsosor mas dan la impresion do cncotntrai-SC en tale (iC degcneraciotn. P(tr tanto, cs posiblC quc las Celulas giguttcs Constitm an la tasc final dc ditcrcnciaciom dc las Mulas dc la cstirpc nxtnorot(ntacrotago .

sc prodUCen C(tnt(t respuesta a ]as intccciones por bactcrias intraccJUlarcs . Las Celulas T (i(i sensibilizadas son estintuladas por cl antigen, s- ]as CPA adccuados . t experintentan 1111 .1 transfin-ntacion lint6blastica antes dc iniciar la din isi(in CClular l_/p. ?h.14) . Este proCcso constitusc cl limdamento do la pruch.1 do cstinurlaci(in (Ic lintitcitos {s ,. Cap. 2y'i . la estintulacion tic los lintitcitos (:t acontpanada dc la sintesis (ic :11)\, cuta intcnsidad puCdC scr dctcrminada ntidicnd(t la cantidad de timidina radiactisa inCorporada (la tintidina Cs till nucleosido r nccesario para I a sintesis dc .^fit)\ i. Lots lintitcitos drl pacirntc sots Cultis'a(i(x coil cl antigeno sospcchotsor para cost probar si sc produce la transtormacio'rn . Es imporrtante tenet- cn cuenta quc en csta prucha solo, NC Cottrnprucba la cxistencia dc celulas "h dc mcntoria, por lo quc su porsitRidad not intplica quc cxista una innuuti(ia(i protcctora adecuada . Cna (ci actisadas p(tr las ( :PA, [as CCIUlas h libcran Un .t sc ric dc citocinas urn actinidad intlantatoria, quc atracn t actisan a los 111,10-4,112 ,0S . FntI-C cllas SC CnCUCntran cl IFNy, la lintontxina, II .- .; c GPI-CSF. Este patron dc citorcinas dc tipoTi tl sc \-c por

Un granulc,ma innrunittt- i() trl1IC(r Csta tiu- 111 .1d, hoir Lilt 111,X10) de Cclul:u rltitclioides t . maa- oititgots, quo: ell algunas orc.tsiotnCS t.uttbicn atntienc Celulas gigantes . En algunas cnfcrntcdadcs, conlo la tuberculosis, csta zona central I,uCdC presontar una necrosis partial, con cicstruccion total dc la CstruCtura CClular . Este nucleo do nucrofagos t- Celulas epitehoidcs csta rodeado por una Capa dc lintitcitos, t . tamhicn pucdc aparcccr una notable fibrosis (deposito dc fibras dc col.i,, cnol dcbido a la proliteracioin dc I(ts fibrobl:tstos c a) auntento dc la sintcsis do colagcno . Algunos cjcm plus dc rcaui(mcs granUlontatosas Son la rcacci()n dc \Iitsuda . finite a lots antigenos dc A1 . lelnwe i ~ . ./iq . 36 .131 ~, la prucha do htcint, cn la quc los pacicntcs con sarcoidosis rcaccionan f-cntc a los antigenos (dcsconocidos'i hroccdcntcs del bazo de otro pacicntc con strcoiki(si,, . En la,/irrtw(r 36 .1 .1 sc resumes las caractcrjsticas dc los trcs tipos dc Ilipcrsensibilidad dc tilxt l\'.

Los granulomas contienen celulas epitelioides, macrofagos y linfocitos

Reacciones de hipersensibilidad retardada

tipo tiempo de reac . aspect clinico histologia Iinioutos, inas tarde macrofagos, edema epidermico linfocitos, monocitos, macrofagos macrofagos, celulas epitelioides, celulas gigantes, fibrosis antigeno ep)(lerrruco, p. ej ., niquel, goma, hiedra venenosa intradermico, p . ej ., tuberculina complejos Ag,,Ab persistentes o estimulos no inmunitarios, p. ej ., talco

por contacto

48-72 h

eccema

REACCIONES CELULARES EN LA HIPERSENSIBILIDAD DE TWO IV

gene knock-ono has demostrulo clue las Celulas - h portadoras dc T(R uR, pcro not asi las clue posccn TCR ;t-6, son cscnciales para cl
Los cxpen ntcntos con ratones coil defeetos genicos i ;lgko, dcl inglcs

tuberculinica

48-72 h

induracion local endurecimiento, p. ej ., de la piel o del pulmon

inicio dc las reacciones dc hipersensibilidad de tipo rctar(iado quc

granulomatosa

21-28 dias

Fig. 26 .13. Caracteristicas de las reacciones de hipersensibilidad tipo IV.

Fig. 26 .12. Aspecto clinico e histologico de la reaction de Mitsuda an un paciente con lepra tras 28 dias de evolucidn. 1) La inflamacion de la piel ique puede Ilegar a la formation de una ulceral es mucho mas dura y esta mucho mejor definida clue cuando solo hall transcurrido 48 horas. 2) En el examen histologico se observa un granuloma tipico de celulas epitelioides (tincion hematoxilinai'eosina, " 60) . En el centro de la lesion hay celulas gigantes (G), estando rodeado todo este nucleo por una capa de linfocitos . Esta respuesta se parece mas a los procesos patologicos clue se produces en las enfermedades por hipersensibilidad de tipo rctardado clue a las reacciones de tipo tuberculinico, clue suelen scr autolimitadas. La reaction es debida a la presencia continua de Ag micobacterianos.

Fig. 26.14. Linfocitos transformados. Tras la estimulacion con un antigeno adecuado, las celulas T experimentan una transformation linfoblastica antes de dividirse . En la figura se muestran blastos con nuclcos y citoplasmas de gran tamano (asi como un linfocito en la metafase del proceso de division cclular) .

Hipersensibilidad de tipo IV

tettiladO por la actuation de Las Cclulas F cn prescncia de 11 .-12, citocina quc lihcran ION inacr6fagos al scr cxlntestos ;t (Ictcrlnin;tdos pr()(iuctos inicrohianos . 11 .-12 suprintc las respuCstas tic Cit(rtinas do Ias Cclulas'f112 . La tunci(in do cada una do [as CitoCinas SC Inlcdc Cstudiar en ratones gko dcsprosistos tic] gcn corrcsp(mdicntc . Por ejentplo, ION ratones gko IFNy no son capaccs tic actin at- a Icts macrofagos ni controlar ]as intcccicatcs por .11. tuberculosis(- ftH. 26.15;1 . Los inacr(>fagos actisatios sc c(tmicrtcn cn una importantc tucntc do TGIF cn hts redCCionCS gr .utttI(nnatosas, .- c I desarrollo do ION granulomas sc prodUCC ntcdiante un proccso de autoantplificacitin, que (la lugar finalmentc a ht difcrenciaCi()l1 de ION ntacrOtagos Cn Cclulas Cpitelioides ifiljs. 26.16 \- 26 .1-) . Estas celulas siL;uen sccrctando I- NI , con Ict qUC induCcn la fot- nwci(m tic ttt1CtaS Cclulas CpitClioidcs t, la fltsiun tic las to cxistcntcs para Liar lugar a Cclulas 9iQantes 26 .1x4).

Diferenciacion de los macrofagos

moleculas coestimulantes

ENFERMEDADES QUE CURSAN CON HIPERSENSIBILIDAD GRANULOMATOSA DE TWO IV

Existctt nuIChas cnfcrntcdatics Cr(iniCas Itumanas cn cuto curso aparcccn reaccioncs do hipcrscnsihilidad do tip(, I1'. La nrasona sent tickidas a agcntcs infecciosos como las micohactcrias, ION protwoos x, ION hongos, aunquC cn algunas cnterntcdadcs granulo ntatosas Com() la sarcoidosis o la cntcrntcdad do Crohn t(xiatia no sc Ita tictcctado la intcrtcnci(in do ninpin agents intcccioso .

proliferation (le las celulas T

IL-3 IFN, GM-CSF' TWO

celula epitelioide

';

fusion celular TF

~` .

_~`v

40

celula multinucleada gigante

Importancia del IM, en la activacilin de los macrofagos destruction del gen del IFN, para generar ratones con un defecto genico (gko) que afecta a una Bola citocina

Fig . 26 .16. Los productos bacterianos inducen la secretion cle IL-12 por parte de los macrofagos . La activacion de las celulas T en presencia de IL-12 da lugar a la liberacion de IFNy y otras citocinas, como TNF(3, IL-3 y GM-CSF . Estas citocinas activan a los macrofagos para que destruyan a los parasitos intracelulares. Cuando no se erradica el estimulo antigenico, la liberacion de citocinas es continua y promueve la diferenciacion de los macrofagos en celulas epitelioides, que secretan grandes cantidades de TNFa . Algunas se fusionan y clan lugar a celulas gigantes multinucleadas .

infection con una dosis subletal de M. tuberculosis

Importancia del TNF en la formation de granulomas inyeccion por via intravenosa de BCG a un raton , ningun tratamiento adicional el raton desarrolla granulomas en higado, bazo y pulmones

Or , 109 I higado

10 , -

10'

supervi- 100 vencia ( l 80 60 40 20 0 -, 0 10 20 30 40 50 60 dias tras la infection

- normales

'i

10 6 T 1 , 0 5 10 15 dias tras la infection

-gko

inyeccion por via intravenosa de BCG a un raton

inyeccion por via intravenosa de anticuerposanti-TNF

I'

no se forman granulomas

Fig. 26 .15. Los macrofagos de los ratones con deficit de IFNy iratones gko) no se activan como respuesta a las infecciones por bacterias intracelulares . Los macrofagos se acumulan inicialmente en la zona cfe la infection, pero no forman los tipicos granulomas . La falta de control de la infection (izq .) prOVOCa una extensa necrosis tisular y finalmente la muerte (dcha.) .

Fig. 26 .17. El TNF es esencial para el desarrollo de los granulomas de celulas epitelioides . Cuando se inyectan anticuerpos anti-TNFca a ratones a los que se ha inyectado previamente BCG no se forman granulomas .

Enfermedades que cursan con hipersensibilidad granulomatosa de tipo IV

.Tunas do his cntermedadcs importantes do cste tipo soil : " Lcpra . " -Fuhcrculosis. " Esquistoscmtiasis. " Sarcoidosis . " Entermcdad de Crohn. U'na caracteristica comtin de todas cstas infcccioncs es que cl agcnte patrigcno cjcrcc un cstintulo antigcnico cronico. La actiVacion dc los macrotagos por parts do los lintocitos pucdc scrVir para contencr la inteccioin, pero cl estimulo antigcnico continuo pucdc provocar lesiones tisularcs dchido a la lihcracion do los prtxiuctos do los macrcitagos, entrc los que se encucntrtn

los compucstos rcactiVOS de ozigeno V dctcrminadas hidrolasas . Aunquc la hipcrscnsihilidad rctardada da una idea del grado do actiVaciiun de las celulas "1- , la intecci6n pucdc no cncontrarsc hajo control, es decir, la inntunidad pr<nectora y la hpcrsensihilidad rctardada no van sicmpre cmparejadas . I'or do, algunos indivi duos que nattcstran hipcrscnsihilidad do tipo rctardado pucden no cstar protcgidos ti-cntc a la cntcrmcdad cn cl tuturo .

Lepra. I)CSdC

1111 ptutto do Vista dinicct csistcn t1- CS tipos princiIMlcs LIc Icpra: tuherculoidc, . .hctrderline" V Icprontatosa . En la Irpra tttlicrculoidc la picl pucdc prescntar dlgunas rcgioncs do hipopigmcntacitm hien dctinidas c intcns :uncntc infiltradas por lin-

Fig. 26 .18. Celulas epitelioides an un granuloma pulmonar de un paciente con sarcoidosis. 1) En el centro se observan celulas epitelioides y celulas gigantes tenidas con el anticuerpo especifico RFD-9. 2) Macrofagos tisulares maduros rodeando al granuloma y tenidos con el anticuerpo especifico RFD-7. (Por gentileza de C. S. Munro .)

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IRS

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Aj6

El espectro inmunitario de la lepra

tuberculoide ((borderline,, lepromatosa inmunidad humoral
11 ~ r~

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inmunidad celular

't .r .fir

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Fig. 26 .19. El espectro clinico de la lepra va desde la enfermedad tuberculoide, en la que las bacterias y las lesiones son escasas, hasta la lepra lepromatosa, en la que abundan las lesiones y las bacterias proliferan sin control . Ello refleja la variabilidad de ]as respuestas inmunitarias de los pacientes, clue presentan diferencias en cuanto a las respuestas celulares y humorales frente a M. leprae y a la expresion de citocinas en los tejidos .

Fig. 26 .20. Reaccion leprosa de tipo uborderline . 1) Este pequeno nervio se encuentra sustituido casi por completo por el infiltrado granulomatoso . 2) Lepra lepromatosa, con presencia de gran cantidad de bacilos. (Per gentileza del Dr . Phillip McKee.) 3) Lepra lepromatosa ,borderline ,, , con placas eritematosas infiltradas de limites bien definidos. (Por gentileza del Dr . S. Lucas.)

Hipersensibilidad de tipo IV

Prueba de estimulacion de linfocitos en la lepra incorporation de 'H-timidina a las celulas T (cuentas por minuto - 10') 1098 76 54 3 2-

0 -1 initial reaction despues del tratamiento

Fig . 26.21 . La estimulacion de los linfocitos como respuesta a la prcscncia de M. leprae aumenta durante las reacciones de la lepra . Cuando la reaction se trata con exito con (borderline,, corticosteroides la intensidad de esta respuesta se reduce . Se muestran las respuestas de los linfocitos de 17 pacicntes con este tipo de reacciones ; los linfocitos fueron expuestos a M. leprae destruidos previamente mediante ultrasonidos, y se determine la intensidad de las respuestas midiendo la cantidad de 1 1-timidina incorporada : a) antes del tratamiento con farmacos antileprosos (initial) ; b) durante la reaction, y c) tras el tratamiento con exito con esteroides . Las barras horizontales indican el valor de las medianas .

t6citos l . celulas cpitelioides, pero clue no conticncn nlicroorganisnlos . Por cl contrario, las rc9ccioncS clue se prodUCCn en la Icpra Icpronlatosa cxtrcnra dan lugar a una scric de lCYI(1nCS Cutincas contluccntes clue conticncn nunlerOsos hacilos, macrotagos es punlosos- s . escasos linfocitos . La Icpra 4bordcrlinc- prcscnta caracteristicas nlistas (fiij. ?6.101 . En la Icpra, el sistcnla innlunitario suelc ejerccr una protcccicin eficaz cuando actuan los nlccanismos de tipo CClular, pero I :1 cfiCdCia (1e la respuesta innntnitaria la disnlinul endo a to largo del cspectro dc la Icpra hasty Ilegar a la fornla Icpromlatosa, quc sc caractcriza por la prcscncia dc antiCUerpos anti- :11. leprae quc no confieren protcccicin alguna . Las reacciones clue sc obsers an en la Icpra " hordcrlinc- son till magnifiCO cjcnlplo do hipcrscnsibilidad de tipo rctardado . Las reacciones <, 1)ordcr1inc , - se producen esp(~nt :incanlente o tras cl rratvniento farnlacol(igico dc la cntcrnlcdad . Consistcn en la aparicion dc lesioncs cutincas hipopignlcntldas quc conticnen :11 . leprac y clue SC hinChan e intlanlan 6.20) dcbido a una rcacci(in de hipersensihilidad de tipo rctardado quc desarrolla cl paciente . En el examen histologico se ohscrl a Lilt p:ltron m .is biers tubercu loide, con prcscncia dc linfocitos infiltrados secrctores de IF\y . Este proccso se pucde producir en los ncr ios peritericos, ya clue Ias Cclulas dc Schls ann son im- adidas por los bacdos; csta cs la causa principal de la dcsrrUCCion do los nervios tipica dc esta entcrmedad . Las lesioncs clue aparcccn en la Icpra ,borderline, soil Ias dc una reaction dc Ilipcrscnsithilidad granulonlatosa cl,isica I_fin . 26.20) . Fit los pacicntes con la entermcdad de tipo tuherculoidc sc pucdc comprobar in ritru la sensibilizacion dc las celulas T nlccliantc la prucba de estimulacion do linfocitos il . cap . 29 ), utilizando como antigeno a1. leprac intactos o sonlctidos prcliamcntc a tratanlicnto con ultrasonidos ( .fitf. 26 .21) . Tuberculosis . En 13 tuberculosis eziste till cquilibrio cntre el omtro~l dc la cntermcdad por partc dc los nlacrotagos actisados \ lx, Ic,i(mes inducidas por cstas misinas celulas en los brganos tittcctados . Las lesioncs gr :ululomatosas pulmonares dan lugar a cas itacion N , a la Consiguiente disc nlinaci6n dc las bacterias . Estas reacciones SUCICn it acompanadas por una intensa fibrosis, y las Icsiones son fucilmentc lisihles en las radiogralias tor:icicas dc los pacicntes alectados If(rt . 26.22) . El a .specto histol(igico dc la Irsion cs el tipico dc una reaction grannlonlatosa, Coil Lin :l zona central dc necrosis Cascosa ~ . eorl

Fig . 26 .22 . Radiografia de torax de tin paciente con tuberculosis pulmonar . Se observa una considerable opacidad del parenquima, especialmente en los lobules pulmonares superiores . Estas alteraciones son tipicas de la tuberculosis pulmonar bilateral cronica . Tambien se observa tin cierto grado de cardiomegalia .

Fig . 26 .23. Aspecto histologico de una saccion pulmonar de tin paciente tuberculoso . Se observa tin granuloma de celulas epitelioides (E) clue tambien contiene celulas gigantes (G) . La region se encuentra infiltrada por celulas mononucleares (M) . Tambien se aprecia una acusada caseificacion y necrosis (N) en el seno del granuloma . Tincion hematoxilinaieosina, x75.

Enfermedades que cursan con hipersensibilidad granulomatosa de tipo IV

consistencia tic yucso) I,lui. 26 .2.3) . .-1 su ,111cdc(1(a - sc cncucntra una zona de cclulas cpitclioidcs en la clue aparecen tanlbicn al gunas cclulas gigantes . Los b(tr(ICS se encuclnran infiltrados par cclulas nlononuclcarcs .
Esquistosomiasis. En la esquistosomiasis, una cntertnedad

causada p(rr Itcltnintos trclnat(xlos (csquistosonias'), cl ITttcspcd adquicre scnsibilidad frcntc a Ios hucsos tic los parisitos, yuc (tail lugar a una rcacciun granttlonlatosa tipica en cl tcjido intcctado i /iq. 26.24: s . talnbien cap . 1St .
Sarcoidosis. La sarcoidosis es una enfernlc(iad cr6nlca de ctio logia dcsc(mocida en la gttc SC acunntlan tnacrotagos actin- ados y

se tbrman granulonas en nluch0s tejidos, procesos yuc SUlICtl it asociados al dcsarrollo tic fibrosis (fin. 36 .25) . La cnfernlcdad afecta especialtnente a los tcjidos linfbides, 1, en las radiografias tic torax de los pacicntes atcctados sc observa un .uunento del to ntano de los ganglion lintaticos 26 .26) . \(t se ha conseguido

aislar ningun agente inteccioso en estos pacicntes, aunyuc SC ha sugerido yuc las tnicobacterias podrian estar inlplicadas ell la cntcrmcdad, dada cl parccido cxistcnte con Ios tcn6nlcnos patol(igicos que sc obscrsan cn las tllicobacteriosis . Una tic las paradojas tic la innltutologia clinica es clue csta cntertnedad suck estar asociada con una rcducciiin de la tlipcrscnsibili(tad rctardada, unto in biro coma ill ritrrr. I .os pacictttcs coal sarcoidosis prcscntul ancrgia cuando son sontcticios a la prucba tic la tubcrculina, sin embargo, cuando sc asocia cortisona al antigeno tuhrrculinico las prucbas ctnancas si que son positisas, to que su.0ere yuc la anergia puc(1c ser debida a la accion do cclulas T supresoras sensibles a la cortisona . En condicirmes nortltales la cort1SOlla suprinlc las rcaccirmcs tic hipersensibilidad rctardada . En la sarcoidosis sc tornlan granulomas en dil crsos organos, cspecialtnctuc en los pulnlonc%, ganglion lintaticos, hucsos, tcjido ncnioso 1, piel . La cntcrmcdad pucdc dcl.utar tic forma aguda. con ficbre 1. malestar general, aunyuc a largo plaza to% I, a cicntcs con atcctacion pulnl(mar suclcn dcsarrollar disnca dellido a la fibrosis pulmonar. t :.l diagn6stico tic prexunci6n SUCle estar basad(t cn cl cuando clinic( 1 en las altcracirmcs radiolhgicas, N sc confirnla mccliante blopsla . I'M ocasioncs X observan concctltra ciones clcs alas tic enzinla con - crsora de angiotcnsina I ECA I c tic calcio serico, dcbido a que I(Is nlacr6tagos pr(xlucen tanto E(, .-\ coma 1,2ti-dihidroxicolccalciterol (el nlctabolito actiso tic la ci lamina I),, ) . tic ctiolotic ~,L1 n,1 Into-11~1 .1 yuc sc c .i r.lctcnza lxlr la fi)nnaci()n granuloIn .t ., hi la cntcrmcdad kic ( r(~hn, una cntcrmcdad intlarnatona crialica del ilc(m s . del colon, sc actrmulan lintiicitos c n1acr6tag(n en todas las capas de la pared intestinal . La reacci6n granul(mlatosa y la fibrosis subsiguicntc prococan constricci6n intestinal y dan Itlgar a la torntaci()n tic fistulas clue penctran cn otros organos . \o sc conocc la naturalcza tic los antigen(~s o agentcs intcccios(r% Line inician 1. pcrhctt an csta reaction vrantilonlatosa . Sc ha analizado la importancia tic la int(rlcrancia alinlcntaria en la genesis tic las Icsioncs mcdiantc dictas tic climinacion, (tire son cficaccs en un inlportantc porcentaic tic Ion pacicntes con cntcrmcdad tic Crohn . Todasia no sc ha dctnostrado si los rcs ponsablcs tic csta niciona son cl propio alinlcnto o la% mo(iificaciones en la nlicroflora intestinal .
Enfermedad de Crohn. Sc trata de otra cntcrmcdad

Fig . 26 .24. Aspecto histol6gico del higado de un paciente con esquistosomiasis . El granuloma de cclulas epitelioides rodea a los huevos de los esquistosomas (0) . Tincidn H E, 300. (Par gentileza del Dr. Phillip McKee .)

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Fig . 26 .25. Aspecto histologico de una biopsia de un ganglia linfAtico de un paciente con sarcoidosis . Los granulornas de la sarcoidosis estan compuestos tipicamente par cclulas epitelioides ~Ei y cclulas gigantes multinucleadas (G), pero no se aprecia necrosis caseosa . El infiltrado de cclulas mononucleares es escaso (M) y se encuentra situado en la periferia del granuloma . Tincion hematoxilina/eosina, " 240 .

Fig . 26 .26. Radiografis de tbrax de un paciente con sarcoidosis . Se observa el aumento de tamano de los ganglion adyacentes a las regiones hiliar iH) y paratraqueal (L) de los pulmones, asi coma la infiltraci6n pulmonar caracteristica de esta enfermedad .

Hipersensibilidad de tipo IV

~Por que las mismas citocinas que activan a los macrofagos para que destruyan parasitos intracelulares pueden provocar lesiones tisulares? ~Que otros reacciones inmunitarias se pueden bloquear mediante anticuerpos frente a las citocinas? ~Como es posible que los agentes irritantes y la hipersensibilidad por contacto den lugar a las mismas reacciones cutaneas? 4Que tipo de hipersensibilidad de tipo IV provoca las lesiones tisulares mas graves?

~En clue se diferencian la fase tardia de las reacciones mediadas por IgE y las reacciones de hipersensibilidad de tipo IV? ~Como influye el numero y la furl de las celulas T en las manifestaciones de la hipersensibilidad de tipo tuberculinico? ^eden exacerbarse las reacciones que aparecen en la lepra ((borderline)) debido a otros mecanismos inmunitarios? ~Pueden deducirse los mecanismos de la hipersensibilidad de tipo IV a partir de los efectos inducidos por la exposicion a radiaciones UVB?

LECTURAS ADICIONALES Baadsgaard 0, Wang T . Immune regulation in allergic and irritant skin reactions . Int J Dermatol 1991 ;30.161-72 . Bevilacqua MP E , )dothelial-leukocyte adhesion molecules . Annu Rev Immunot 1993,11 767-804 Bjune G, Barnetson RStC, Ridley DS, et al. Lymphocyte transformation test in leprosy : correlation of the response with inflammation of lesio , r C+-- E,p Immunol 1976,25 85-94Brittor ,',- n munology of leprosy Trans Roy Soc Trop Med Hyg 19 :):',87 508-14 . Coope A%' . " lynn JL . The protective immune response to tily~ ;x ;a~ter,run tuberculosis . Curr Oprn Immunol 1995 ;7 512-16 . Erik AH, Katz SI Contact hypersensitivity as a model for Tcell activation in skin . J Invest Dermatol 1995 ;105 805-35 . Flynn JL, Chan J, Triebold KJ . e t al Ar , ossential role for interferon-Y in resistance to Mycobacterium rc.r~,c ulosis infection . J Exp Med 1993,178 :2249-54 . Friedmanr PS 1 he immunology of allergic contact dermatitis : the DrJr'P, advDermatol1991,5 17 5 5-96. Gaspar, AA Aovances in the understanding of contact hypersensitivity Am J Cont Derm 1993 ;4 :138-49 . Gawkrodger DJ, McVittie E, Carr MM, Phenotypic characterisation of the early cellular responses - allergic and irritant contact dermatitis . Clrn Exp Immunol 1986 .66590-98 . Gawkrodger DJ, Carr MM, McVittie E, et al . Keratrnocyte expression of MHC cuss II antigens in allergic sensitisation and challenge re ! , ; in irritant contact dermatitis J Invest Dermatol 1 -- 88 Hoefakker S, Canbo M, van't Erre EHM, et al In vitro cytokine profiles in allergic and irritant contact dermatitis . Contact Dermatitis 1995,33 258-66 . Kaufmann SHE Bacterial and protozoal infection in genetically disrupted mice . Curr Opin Immunol 1994 ;6 :518-25 . Kindler V, Sappino A-P, Gear GE, et al . The inducing role of tumour necrosis factor in the deve,o ,,) ,-t of bactericidal granulomas during BCG infection Cell 1989,56 731-40 Lowes J, Jewell D Immunology of inflammatory bowel disease Vol 12 . Springer Semin Immunopathoi 1990,180 251-68 Munro CS, Campbell DA, Collings LA, er al Monoclonal antibodies distinguish macrophages and epithelioid cells in sarcoidosis and leprosy . Clin Exp Immunol 1987 ;68,282-87 Sauder DN . Allergic contact dermatitis In Thiers BH, Dobson RL ledsl . Pathogenesis of Skin Diseases New fork Churchill Livingstone; 19863-12 . Schwarzenberger K, Udey MC . Contac! III ,-rra, ; and epidermal prornflammatory cytokines modulate Lang,- : - -wi E-cadherrn expression in situ . J Invest Dermatol 1996,106 55:) 8 Trinchieri G . Interleukin-12 and its role in the generation of Thl cells. Immunol Today 1993,14 335-8 . Yamamura M Deans RJ, et al Defining protective immu ne respor : . gens cytokine profiles 5-n leprosy lesions . Science 19 254 -9

Traspla nte y rechazo

El rechazo de los tejidos trasplantados se produce debido a que el sistema inmunitario del receptor reconoce ins antigenos de histocompatibilidad (tisulares) ajenos que expresa el injerto y respande contra ellos. Los antigenos de histocompatibilidad mas importantes son aquellos que estan codificados en el complejo principal de histocompatibilidad (CPH) . Los linfocitos T reconocen directamente las moleculas CPH ajenas y responden contra ellas. Las celulas T colaboradoras activadas sintetizan linfocinas que dan lugar a la activacion de muchos nlecanismos efectores encaminados a destruir el injerto . Las linfocinas tambien pueden ejercer efectos sobre el propio injerto, promoviendo la expresibn de moleculas CPH y cie adherencia, aumentando la susceptibilidad del injerto frente al rechazo. / Las respuestas de rechazo del injerto se pueden reducir al minimo Ilevando a cabo los trasplantes con donantes y receptores cuyas moleculas CPH se parezcan to mas posible entre si, especialmente en to clue respecta a las moleculas CPH de clase II . / Los agentes inmunosupresores inespecificos se pueden utilizar para evitar el rechazo de trasplantes, antique pueden reducir la resistencia a las infecciones . / La inmunosupresion especifica se utilizara en el futuro para inactivar solo los clones de linfocitos que provocan rechazo.

27

La ininunohiologia dc Irn trasplantes cs importantc por mochas razoncs, \ :a Clue sir\C tanto para ct~mprcrldcr mcjor Ias proccsos inntunitarias ctamo para cl dcsarrollo do tcolicas clinicas dc cjccucicin dc trasplantes. Las nxileculas ticl complcja principal tic histctcampatihilidad i (1'11 h SC dcscubricron Cttltltt ConsccuCncia dc e\pcrinlcntos dc rechazo tic injerto, de pie[ ell ratonacs s anti t S f \. cap . 7 ) ; la nlisicin tic Cstas nlotlcculas Cs prCSCntar loexit :ut tin Papcl a Ias celulas T it . Cap . 91 . Las celulas T (iCSCnll)Cii csencial ell cl rechazo dc trasplantes, \ Bran parts tic ha yuc SahCnlos accrca do 1 ;1 tisiolagia \' funcitmcs tic cstas celulas, tic la title dc autotolcrancia \ tic la atttorinnumidad, asi comtr dcl Impel

scntpeha cl tltlla ell la Cducaciun CIc las M111,71% A, SC 10 tiCt)CII)OS a c\pcrinacnttas relacionados coin Iris trasplantes . Adcnaas, cl trasplantc do tcjidcts CS LltIJ taccta chnica tic ;;ran importancia . La ncicsidad dc c\ -itar cl rctlrazo do Its trasplantes ha IIC\a(itt al ticsarroIlo \ a la tttilizaCiun tic nueras tarinacors inlnunonloduladorcs, asi COnlo a 111\Cstt` i,:i0 ncs Ctlldtninadas a IndLICir tolcrancia fr -CI1tc a los tejidos injcrtatlos. Las conclusioncs obtcnidas ell totdtts cstts ;cnCral a tii\crsas cnCstudios pucdcn set - aplicadas tic foal-n1,1 alas `

fernlcdacics innaunitarias, ctmlo las lcsicntcs tisularcs innlunaltatolctgic ;as que aparCCCn ell las rcaccioncs do hipcrscnsibiliclad \ ell Las cnfcrnlcciaCCS autoinnunlitarias . Fn la practica clinic:a los organos son trasplantadtts con ohjctt r tic corrcgir tin deficit funcirmal ffiq. Z-.1). A no set- yuc cl donantc \ cl receptor scan gcncticantentc idcnticos, los antigenos dcl injerto induciran una rcspucsta inntunitaria tic rechazo. Las trasplantes pueden poner cn flincittnarnicnto tocia ],a gaina dc ntecanisnttas innutnitarios cclularcs \ 11unltraICS, tantct cspcciticos canto incspccificos . Estca cs dCltidt> al rcconocimicnttt pear parts: dc L1s celulas T dc los antiigenos pcptidicos ajenas unititts a Ias tllt,Iccul:ls (,PH dc Ias celulas injcrtadas . Los pepticios antigenict~s suclcn proccdcr dc contptmcntcs notrmalcs dc Ias celulas &l dtait natltc, pcro tanlhicn pucdcn pcrtcncccr a \irus tarts nlicrohios title intcctcn thchas celulas . Dc la nlisnaa tin-n1a, till trasplantc pus dc acti\-ar tt>dos hts nlccanismos rcguladorcs yuc contrtalan las rcSPUCStas innTtnlitarias I; \. Cap. 13, 1 . Por tantct, la inntunohitalogia dc Itas trasplantes abarca pnacticanlcntc toxlos los aspccto.S dcl iclll:l Innlttilltario .
Sis-

14

OBSTACULOS FRENTE A LOS TRASPLANTES

Trasplantes clinicos lirgano trasplantado

nrmr,

LOS ohst :icu1cn Ircntc a los trasplantes sc dchcn titndanlcntal

ejemplos de enfermedades
Insllicwrwla ienal terminal

corazon pulmon o corazon/pulmon higado cornea pancreas o islotes medula osea intestino delgado piel

insuficiencia cardiaca terminal hipertension pulmonar, fibrosis quistica cirrosis, cancer, atresia biliar distrofia, queratitis diabetes inmunodeficiencia, leucemia cancer quemaduras

mcntc :a la disparitlatf gcnctica cntrc cl donantc \ cl receptor, hrs iiliCi-to, SC pucdcn tic\ idir ell auttrinjcrtos, isoinjcrtos, aloinjcrtos a \cnttinjcrtos i /trf . ? -.?Y . Los autoinjcrtos dcsdc una parts dcl CuCrpa a ctrl not suptmcn la inlplantacit'm do tcjidcts ajenas, por lo que no~ scan lugar a rccllazos. 1)c Ia nlisnla manera, hts istainIci- tt1S cntrc Intii\iduos Isogetlicos igCIicticattaclttc Idcntlcos}, ctrnu> hts gcnuhts nlanttcigoticos I:idcnticosl o Ias rarones dc una misnla ccpa cndogainica, no c\prcsan antigenos clue rcsultCn c\ trallttS para Cl rCCCPttn-, por Ict title tanlpoco dan lu(ar a rcacciti tics tic rechazo. Los trasplantes ntis h- ecucntcs Cn la practica Cli nice sail Itrs aloinjcrtos, ell Icts yuc tin indi\iduo demo tillt)rgano a tarts indi\- idua ;;cncticanlCnte ditercntc. En estc casts cl injerto cs alovenico (cs dccir, cntrc micnlhros tic la inisnla cspcCic title prcscntan difercmcs rariantes alclicas t1C algunos gCtICS ) . Las CC-

Fig. 27 .1 . Los organos y tejidos se trasplantan para el tratamiento de diferentes enfermedades . Cada tipo de trasplante presenta sus propias dificultades medicos y quirurgicas.

lulas tic Ios alcnjCl-to, C\pI_CSan aloanti` ;enos Clue son rccollocidos coma ajcnois pttr cl receptor . La tiisp:u-it1 ;n1 gcnetic,a maxima cs la que C\iste Cntl-C n1icn1hro>s tic LiifcrcntCS cspct ics, \' 1os \cnoinlertos que SC 11C\ all a caber ticsatiando csta barrcra xcnogenica suclcn set- rcchazatlos rapider mcntc, \a sea por anticucrpos Ig,\1 naturalcs tic] receptor ti pttr una rCaCCitin innlcdiata tncdiada pctr celulas f \. ntas adclantc 1 . 353

Trasplante y rechazo

Barreras geneticas frente a los trasplantes

autoinjerto de una parte del cuerpo a otra ; p . ej ., desde el tronco al brazo

isoinjerto entre individuos geneticamente identicos; p . ei ., gemelos monocig6ticos o miembros de una misma cepa endogamica

Algunos tcjidos xcnogcnicos, armor ]a picl, los sasos sanguincos o [as s :ils'ulas cardiacas de Icrs certlers, puCden scr tratatios conccnicittcmcntc para reducir su innaunogcnicitiad, ptrdicndo scr in1plantatlers a con6nuaci6n ell SCITS IlUmanos . Sin embargo, los in tentos tic trasplantc tic 6rganos conapletos dcsde aninlales a seres humantrs ban dado lugar a estrcpitosos fi-acasos, aunquc sc hall conscguidcr algunos cxitos en I(rs trasplantes entrc aninaales tic cspccics ditcrcntcs . Si SC ccrnsiguen supcrar Icrs problenlas innauncrl(igicos do los xcnotrasplantcs, la utilizacicin tic 6rganos tic origcn animal podria paliar la actual escascz do cirganos humantrs . ltin asi scguirian cxistiendo cicrtos problcnlas, conao cl tanaaiao tic] 6rgano del cionantc, la posibilidad tie transmision tic entermcdades dcsdc cl animal al scr lusnancr \ Icrs aspectos cticos tic cstos procedinlicntos .

ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD Los antigenos de histocompatibilidad constituyen las dianas de los procesos de rechazo

aloinjerto entre miembros diferentes de la misma especie; p . ej ., del Sr . Smith al Sr . Jones

xenoinjerto entre miembros de diferente especie ; p . ej ., de un mono a un scr humano

Fig . 27 .2 . El factor quc determina si se producira o no un rechazo es la relation gen6tica existente entre el donante y el receptor . Los autoinjertos y los isoinjertos no suelen ser rechazados, mientras que los aloinjertos y los xenoinjertos si to son .

Los antigcnos yuc prosocan cl rccliazo tic los tcjiti(), s,cncticanlCntc difCrCntCS a ticnonainan antigcnos tic histocompatibilidad (cs t1ccir, tic conapatibilidad 0sular), V cstan ccrdificados pot los gc tics tic histocompatibilidad . Existcn mas tic 30 loci gcnicos tic histocornlpatibilidad, algun()s de los cualcs provocan rccliazos coil nlas frcCucncia yuc otros . LOS aloantigencrs title induces las rcspucstas rnas cnergicas son los quc codifican los genes del CPH ; sc tanta tlc ]as molcculas yuc prcscntan Icrs :antigcnos a Ias celulas T do mantra title cstas pucdan reconoccrlos . Todas Ias cspccics tic \'crtchrados posccn (TH . El ( .PH tic los ratones sc dcnonaina H-2, micraras quc cl tie los sores hunlanos es cl sistcnra tic antigcncrs Icucocitarios humantrs f Hl A ; s'. cap . 7) . LOS producton tic ],is xariantcs alclicas de los ticnlas genes de histocompatibilidad pro\ocan rcspucstas tic rechazo rnas dchiles cuando actuan indiridualnaCntC, p(rr for yuc sc dcntnninan antigcnos tic histocompatibilidad secund ;u-icrs ; cstos antigcnos son comp(rnCntcs Cclularcs normalcs . Sill cinbar secundarios pucde dar lugar a cncrgicas rcspucstas tie rechazo 27. .31 .

Antigenos de histocompatibilidad murinos y supervivencia de los injertos

MHC: H-2 H3 H-10

arable

Los genes tic] ( :PI I se Irercdan scgtin ill , csgUCnaa n1cndclian(r Simple \ sc eyrcsan tic tirrnm todorminantc . Fs dccir, coda indixidu(r paste riots -nacdias dortaciomcs- (haplotiporo tic genes, una proceticnte tic catia progenitor (r'irt . 274'i ; anahos laaplotipos sc cxprcsan cn la nrisnla meclida, do tal forma yuc ]as CeluIas do un indjc -iduo prcsentan cn sit supcrficic tanto la% molecular ( .PH proccdcntes del padre como las proccdentcs tic la macirc r ftq . 2 - .5y .

Los haplotipos CPH se heredan de ambos progenitores y se expresan de forma codominante

varios loci secundarios 0 25 50 75 100

tiempo de rechazo (dias) Fig . 27 .3 . Tiempo hasta quc son rechazados los injertos de piel entre ratones con diferencias en cicrtos loci de incompatibilidad secundarios (rojo) y en el locus principal de histocompatibilidad H-2 (verde) . Los injertos quc presentan disparidades en varios loci secundarios son rechazados con tanta rapidez como los quc difieren en el locus H-2. (Datos del Dr . R . Graff y Dr . D . Bailey .)

I .as nlolcculas ( PH nor se cxprcsan p(rr igual cn tondos Icrs tcjidors cicl orrganisnao . L :t mas - aria de Ias tCIuLts 0M ntiCICO (asi comp Icrs critrocitos 1. Lts PFaCIUCtas tic algunas cspccics s cxprcsan naolcculas ('PH tic claw I, rnicntras yuc las naolcculas CPH tic claw II solo soil expresadas pcrr Ias celulas presentadoras tic antigcnos i (PA ; p . Ci ., celulas dendriticas c, rnacr6fagos actjsados'~, ]as celulas 11 V, en algunas cspccics, pcrr las celulas T actisadas \ las celulas del cndcrtcho sascular. La exprcsicrn tic molcculas (11'11 cn Ias celulas csta sonlctida al control tic citocinas : cl intcrfer6n y (IF\y) y el factor tic necrosis tunaoral ('i'\F1 son potentes inductores do la cxprcsion tic n1orleculas CPH en naarch(rs tipos tic celulas title, en auscncia tic ellos, s6lo cxprcsan pcyUCnas canti datics tic Ias naisnlas . Congo sc s -cra pronto, Cstc tcn()rncno ConIlc\ :a consccuencias inaportantcs corn rcspccto al rcclaazcr tic trasplantca (\' . pag . 3,7 i .

Los tejidos trasplantados expresan molecular CPH cuando son estimulados pot citocinas

Papel que desempenan los linfocitos T en el rechazo

Herencia de los haplotipos de los antigenos CPH

madre HLA-A , HLA C HLA-B J HLA-D ,, b padre

Expresion codominante de los antigenos CPH

Vi Fig. 27 .4 . El CPH humano (HLA) se encuentra situado en el brazo corto del cromosoma 6. Cada una de los progenitores aporta uno dotaci6n (haplotipo) de genes CPH de close I (HLA-A, B y C) y de close II (HLA-D), de acuerdo con un sistema de herencia mendeliana simple . moleculas de close II Fig. 27 .5 . Todos los genes CPH heredados son expresados en la superficie de las celulas . Cada uno de los genes de close I maternos y paternos codifica una molecula de close I, que se expresa en la membrana . Cada uno de los genes a y 13 de close II codifica una cadena u y 13 que se expresan en la superficie celular, pero estas cadenas se pueden asociar dando lugar a cuatro moleculas diferentes . Ademes existen otros genes u y 13 de close II que codifican los Ag DP y DQ . Una celula B posee 23 - toy moleculas de close I y una cantidad analoga de moleculas de close IL

LAS LEYES DEL TRASPLANTE

Los trasplantes originan una situaciOn MM' especial, va que ConstitutCn CI iutiCo caso en que ]as Cclulas T pucdCn scr actisadas directantcntc por moleculas (,PH ajenas . En las respuCstas normales dc las icltrlaS T ti-cntc a pro>tcinas cxtraf as los antigenos dchcn scr procesados c transtbrmados en peptidos, quC a coontinuacicin son prescmado s en la superficie do las CPA del luicspcd asociados
.t moleculas (TH .

Las celulas T son esenciales en el rechazo de injertos

PAPEL QUE DESEMPENAN LOS LINFOCITOS T EN EL RECHAZO

El rechazo es debido a las respuestas del huesped frente al injerto

l- liechoo que cictcrrnina yore un alooinjcrtor sea rccltazador Cs que cste ultimo posca cualquier antigcno del clue carczca cl receptor. En la fiqura ?r-.6 sc explica cste principio fundamental dc ]as rCaCCiomCS Itttespcd contra injcrto.

Las reacciones injerto contra huesped se producen cuando los linfocitos del donante responden frente a los tejidos del receptor

hi Ion tr,tsplantC, c :C MCClul3 trsCa sC hr()duCC una Sitttacicin CSPC vial : la ponil,iliclad dc dcsarroolloo dc la cnlerntcdad dc injcrto contra IuICSPCd i ER'll'h dcbido a la prcscncia ciC Cclulas T innnmoell un receptor alogcnicoo contpetcntcs proocccicntes del donante incapacidad pucdc scr cichich clue no cs capaz dc eliminarlas . Esta a las diterencias gencticas existentes entre el donante \ cl rccchtor o a la innuinoincoomhctcncia del receptor lea sea por inmadurez o por innrunosuprcsion J. En cstots Casos, las Cclulas 1' innntnOCOnt petentes trasplantadas junta con la mcdula cisea pueden atacar Ios tejidos del receptor (fig. 3i.-r. La EICI I Cs una de las principalcs . complicaciones del trasplante dc mcdula ()sea, s prenoca Icsioncs importantes, solve todo a niscl Cutanco C intCS6nal; S010 SC I)LIC dc prctcnir Ilcsando a caho una tipihCaCio'ort mCtiCUlosa, Climinando ]as celulas 'I maduras Prcscmcs en cl tcjido trasplantado ~' administrandor tarmacoos innurn0supresorcs.

l .(n r(wdoores que naccn sin tint() I Itllliiclr>I c.ucccn dc celulas 1 nraduras % no son Capaces dc rcchazar lors injertos . Lo misnto oCUrrC en Cl caso de ratas o ratones nornrales somctidos a tintectomia en CI montcnto del nacintiento, antes dc quC las celulas 1' Sc hatan difundido poor la periferia . De la misnta forma, la tintcctennia dc ratas o ratones adultos (para interrumpir la prooduccioin dc celulas Ti, Seguida dc irradiacion i;para climinar la celulas T CzistCntes i ~ trasplante dc ntedula o)SCJ I Para rCStaurar la hematopo~csis}, da lugar a reccptorcs ,A I'x .Bi\t ,, i dcl ingles adult tln~_ mectomY y bone marrow J, clue carecen Lie Cclulas 'I' y, par consiguicntc, no son capaccs dc rcchazar injertos . Esta capacidad dc rCCllazo puddc scr rcCUperada poor Cualquicra dc estos anintalcs (atimicos, tintectomizados neonatalntcntc o A'Fx .B,%l) mcdiantc la imcccioin do celulas T procccientes dc un animal normal de la rnisma ccpa . Por tanto, esta claro quC las Cclulas T son precisas para quC sc produZC.ut loos tcn0mc noon cic rechazo . Esto no implica que en CI proccso no intcrwngan otros tzcton-CS, Comp Ios antiCttcrpos, las celulas B u otros Cclulas. ell Ios injertos, y Dc hecho, Ios anticuerpoos proo\ocan lesioncs tambicn cs posible quC loos macroifagos intcr\Cngan en I .ts rcacciooncs inflamatoorias que sc producen en Ios tejidos injertados .

La base molecular de las reacciones de rechazo son las interacciones TCR-CPH

Las celulas L que intcrsiCnen ell 1 .11 rC .rccio,nes dC rCCliaur rC(() noccn por mcdiot dc sus rcccptorcs I CR a pcptidoos proccdcrucs

Trasplante y rechazo

del d(mantr as()ciados :t antigcnos ('I'll cxpresado)s en cl tcjido injertad() . Como t-a sabcntcn, la cstructura Lie I(ts rcccptorcs do las CC lulas'I i T(A)I t . cap. ,' cs Cal yuc dichas cc lulas sdlo pitcdcn -tcr , a los antigcnos pcl)tjdiCOS cutndo cstos se encuentran as()Ciad()s con ttto1CCULts (.TH, una rcstricci("m impucsta por cl proceso de sclccci(in p(siiita yuc se Ilea a cabo en Cl [into C % . Caps . 12, 14 y1?zf. ?-A. I'(n- Canto, par, c(tmprcncicr cl papcl quc desctnpeftan las cclulaS T en Ios recltazos sc dcbcn cxaminar las diferencias quc existcn cntrc las moleculas (TI I del receptor ) . Lie] injerto, am conto la manes ell clue atcctan csas ditcrcncias al tip() do antigcnos prcscntado a los l-CR del receptor . La estructura de todas las moleculas CPH es parecida, pero los surcos de union al peptido de cad, una de ellas son diferentes La cstr-uctura Lie LAS ditcrcntcs trto1ecttl,ts ( PH cs practic ;uttcntc icicntica, estando fbrmadas por dos helices (i due sc apo\an en una Limina 13 cncinta do dos dominios do tipo Ill ntttnoglobulina, por ntcdi() do Ios cuales sc ntanticncn antarradas :t la mctnbrana cclular ~-. cap. ? ) . I_as hcliccs a torntan un prohtndo sure() dondc sc alojan los peptidos . ha region de la nt()lecula ('I'll quo: intcracciona cot) Ias celulas h es Cl bo)rde extern() tic cstas helices to, quc present, una sccttcncia ttttn bicn co)nscnada ell ]as ditcrcntcs moleculas ('I'll . Las diti:rvncias mns intportantcs en la sccucncia do atninoaciclo.s do dos moleculas ('I'll ditcrcntcs ip . cj ., I :ts \ariantcs ticlicas A2 t. ~A\toS del antigcno) I II A-A ;~ aparcccn ell la region ntns protitnda Lie] surco yuc h)rman Lts dos helices u, \ no ell la su pcrticic cxtcrna yuc cstablccc c()ntacto con cl TCR (\ . Cap. -j . I'or Canto, la principal ditcrcntca que cxiste cntrc Las ditcrcntcs nto1000Ias CPH con rcspccto al rcconocimicnto por parts Lie ]as

al ntisn- c la (wicntacion yuc ad()ptaran clichos peptidos en cl set rnonmcnto do - prcscntados a los'IVR ic . cap. 9j . Los peptidos que presentan las moleculas CPH del injerto y del huesped son diferentes En c()ndici()ncs fsi()I()gicas n()rntalcs cl sur(() tic I :IN ( PH No: cst .i ocupado p()r peptidos pr()ccdcntcs Lie componctttcs cclularcs no)rmalcs sontctidos t dc"radacilm intracclular. Los ntccanisntos do tolcrancia timica fcliminacion clonal Lie las MULLS h autorrcactit:ts, ) . cap. 14) garantizan yuc las celulas T no reconozcan cst()s I)cptidos de origen cndogcno, to clue conduciria al desa rroll() do pr(xcsos autoinnttutitarios . Pero, cuando las celulas %()it intcctadas (p . cj ., por tut t - irusl, los peptidos pr()ccdcntcs do los componcntes norntalcs Lie las celulas s()II sustituid(s p()r peptidos do origen ajcno, co)nto ocurre cn cl cas() dc las ('1'A -pr()lesionalcs11 . Esto induce una rrspucsta Lie las (elulas T ti- cntc a cstos peptidos cstraitos asociados a moleculas (.P1 I pr()I)ias. Sin embarg(), cn cl caso do tin tcjido trasplantado v gcncticantente clitcrente a I()s del receptor surge una tericra situaci(in . Los peptidos prcs(ntados sobrc la supcrfcic de las celulas del in jcrto son ditcrcntcs, dchido a clue la ti)rma .\ la carga del surco de sus m0Icculas ('I'H tantbicn to son. Acicntas, cl injerto pucdc cxprcsar torntas alclicas ditcrcntcs tic c()nlP(ntcntcs cclularcs normales {segtln los loci do histocontpatibilidad secundarios yuc posea'e, que pucdcn dar lugar. a Lilt conjunto Lie peptidos nuc)-os t . totalmcntc desconocidos . Esta cs la r:tron por In quc las ditcrcncias cntrc las moleculas CPH del donantc y del receptor (en cuanto a la torma t. car` ;, do sus surcos) o Intro sus antigcnos do Itistocontj)atibilidad sccunciarios ((Iuc Clan lugar a peptidos dife rentcs) pro\oca la cxprcsi()tt en los tejidos trasplantados de una Bran cantidad do antigcnos cxtranos, yuc pucdcn scr reccntocjdos por las celulas - h del receptor . Fstos antigcnos prcsentcs en Its tc-

celulas - I - cstriba cot la forma \ cn la carga del sure() tic uni(')n al peptido (t . cap. 7'), yuc determina los peptidos Clue SC lillil- all

Reacciones de huesped contra injerto donante receptor resultado aceptado

Enfermedad de injerto contra huesped

it

celulas rrntnocompetentes receptor (A - B) Il

irradiacion X rece~~bo~ itr'i

3 A. 4

A - B

aceptado division- de las cal. del donantc ref- hazado

muerte del receptor

Fig. 27 .6 . Los injertos entre animales geneticamente identicos son aceptados . Por el contrario, los injertos entre animates geneticamente diferentes son rechazados, y la rapidez del rechazo depende de las diferencias geneticas existentes entre los animates . Por ejemplo, los animates singenicos con un locus CPH identico aceptan mutuamente los injertos (1). Por el contrario, los animates que presentan diferencias en el locus CPH los rechazan (2). Para quc un injerto sea aceptado es preciso quc el receptor posea todos los genes de histocompatibilidad del donantc. Esto se demostrara realizando injertos desde una cep, progenitora a animales (A ~ B) F . (3) y a la inversa (4). Los animales con diferencias en loci ajenos al CPH rechazan mutuamente los injertos, pero con una rapidez macho menor.

Fig. 27 .7 . Se inyectan celulas inmunocompetentes de un donante de tipo A en un huesped inmunodeprimido (mediante irradiacion X) de tipo C y en un receptor (A " B)F 1 normal . El huesped inmunodeprimido no es capaz de eliminar las celulas trasplantadas y el animal F. tolera de buen grado las celulas progenitoras de tipo A. En ambos casos las celulas del donantc reconocen los tejidos extranos de tipos B y C del receptor . En consecuencia, se dividen y atacan a las celulas de los tejidos del receptor, indttciendo la acumulacion de grandes cantidades de celulas del huesped en las regiones inflamadas . Este proceso conduce con frecuencia a la muerte del receptor .

Papel que desempenan los linfocitos T en el rechazo

357 .

Induccion de tolerancia en el timo y fuera del mismo autotolerancia medula dsea del huesped tolerancia frente a aloantigenos medula osea del donante Fig. 27 .8 . En condiciones fisiologicas normales las celulas pre-T procedentes de la medula dsea penetran en el timo y son sometidas a un proceso de seleccidn positiva (exclusion de la muerte celular programada) mediante el contacto con las celulas epiteliales del cortex, proceso que solo superan las celulas pre-T que son capaces de interaccionar con moleculas CPH propios. A continuacion son sometidas a un proceso de seleccidn negativa (eliminacidn de clones autorreactivos) mediante el contacto con las celulas dendriticas de la region corticomedular . Las celulas T autorreactivas producidas de novo pueden ser inactivadas (aunque no necesariamente eliminadas) en el exterior del Limo por el antigeno periferico ; tambien se pueden convertir en celulas supresoras activadas . En los animales alotolerantes la medula del timo puede contener antigenos ajenos (en forma de celulas dendriticas procedentes del donante, es decir, celulas ((pasajeras)), o como antigenos del donante presentados por las celulas dendriticas del receptor) . Estes antigenos pueden ejercer los mismos efectos que los antigenos propios e inducir tolerancia mediante seleccidn negativa de las celulas T que reaccionan con ellos (eliminacion clonal) . Ademas, la presencia de antigeno en los tejidos perifericos de estos animales alotolerantes puede inducir anergia clonal (ausencia de respuesta, induccion de tolerancia) o estimular los procesos de supresion activa .

celulas dendriticas del huesped

celulas dendriticas del donante_ antigeno PERIFERIA j induccion. de , tolerancia o supresion', antigeno del donante-

tejido del twesped linfocitos perifericos

tejido del donante

jidos dc un donantc alogenico Pucden acti% ar hasty un I0'si, t1C la potHACiOll total tic cclttlaS T (IC un indi\ICiuo . Las celulas T colaboradoras (TH) y las linfocinas intervienen en las reacciones de rechazo Papel que desempenan las celulas T colaboradoras (TH) en las reacciones de rechazo La IM CCCi(in dC celulas I Ittrtc'nCCicntcs ,t la sullt(tldaCl()ll ( l)4' i cclttlas 1 11! Cor ICCepl(ICS uimicos o AI x.PM tienc como c(tnsccucncia un rechazo agutl(t do lo, injcrtots dc picl . Esto net ocurre CnanLIO SC inccct :ul celulas T CI)S' iCClulas 1'( ) sirgcncs, nO scnsihilizadas, IM-0 Cuandot cstas ultimo so: ntczclan corn una Cantidad mtn pcquCfla LiC celulas 1' (-1)T - o cstan sensibilizadas prc\i:unentc dente a Tots antigenos prcscntcs en cl inicrtct f cs dccir, si procedcn dc animales que U lean rcchazado un injcrto ticl mismo tipo I, cste es destruid(t en un cot - to cspacio de tic tnpot. 1 :1 tratanticnto dc tots animales reccptorcs COIL antiCUCrPOS nLCtnctclctnales anti (1)4' (fp. _' .9) cotnfirnta la importancia dc las ce-

jerto dcpcnde ell gran ntetlida de la presencia do celulas pasaicvas i;hn. 2'.10"~. Papel que desempenan las linfocinas en el rechazo Adcnlas dc las celulas l l I ( :1)4 , ell ],is reacciones dc rechazo in tersicncn (Ir()s mcCanisnuts innuutittrios, cntre Its clue so enCuontran inCluidas l :ts llnf()CInaS . Gn la fittrrra 2 .11 so: mucstra tut csyuCma CIcl proceso global . Las linktcinas quo: cjorccn funcioncs nias importantes en [as reacciones dc rechazo son la intcrlcucina 2 ( II . 2 i, quo Cs precis ;L para que SC aCtiscn la', celulas T( , \- CI IFN-,, que induce la CxprcsiOll CIc nt0lt'Cttla% (Tl 1, aunLCnta la actk - idad dc las ('l'A, actin -a a Ion linliicitos granulosos grandcs t, cn presencia dc T\Fj3 {linfotoxina ;h, icti\-a a Ios niacrutagos. (Notta : la mezcla dc IFNy y T\t 13 sc dcnontinu antiguamcntC factor actit- a-

lulas'l'fl en [as reacciones dc rccliazo . I .as celulas 111 son actitadas por CPA proccclcntcs do la me duly ()sea, quo: cxprcsan met1eCUI,LS (I'H do CIaSC II . Las (:p:\ que actisan Ios mccanismos de rcchaz() I,ucticn proceder del donante o del receptor. Las que pr()CCden LICI donante se Cncuentran Cn cl inicrtct en litrma do lCnt OCitOS I~paSajcrOS- (celulas dendriticas jntcrsticiales I, c induccn una actiucion -dircctu ., do las cclulas'l i t del receptor. Las clue proCCCIcn del receptor se cncucntran cii Icts ganglion lint:iticos lo.alCs capturan lots antigenos lilerados pow cl injcrto, prcscnt,indoscl()S dcspucs a Ian Cclttlas TI I del receptor, que en csto caso son actiudas de titrma ", indirccta- . I .a actiucion dil-CCta Cs un cstinurlo min ptlcntC para el rechazo que la s is que kenos (Icnominadct indirccta . Por cllo, Ia suI)crti\cncia del in-

dotr do: Ios ntacroifagos [ MAF, del in0cs tuacrophnttc aitiratiiott lititorl . l Las linlitcinas i 1IA, ; L, 61 tambicn soil nccesLrias para la acti\ .LCioin do las Cclulas li, Clue da Ittgar a la tiLrmaci(in Lie anti CucrI,oCs trCntc al injCrtO. ESIOS antiCUcrpos fijan el conLplcntcntot v pr()\ocan Icsioncs cn cl cndtttcliot sascul .u- , (itnCIO Ittgar a hcmorra,ias, agr"acion intraLascular do las plaquctas, tcnointc Ios tromthoticos cn cl injcrto, lisis de las celulas del ntisnto li hcracioin tic contponcmcs del complcmcnto con acti\idad intla

nratoria, cotncretamcnte (:3a v (:5a. Para LIuC sc prodtt/Cd cl rechazo no Cs prcciso clue so: ocasionc una agrcsion solve todas ] .is partCS del injcrto. I as dianas mss scnsiblcs soil el ondo tclio USCUlar Lie I(ts pcq achos \ asps v LLs ie lulus parcnquimatosas cspccializadas del ()rgano, como Ios tubuL" I - I n :dc', lots islotCS tie Langerlians del pancreas et los miocitos

Trasplante y rechazo

Papel que desempefian las celulas T en el rechazo de injertos

Papel de las celulas pasajeras en la destruccion de los injertos

se-,-ana 0 timectomia

semanas 3 y 4 inyeccion de anticuerpos

semana 12

semana 12-+ medula osea de la cepa A medula osea de la ceps B

injertos 100 cutaneos supervivientes (%)

injerto cutaneo con celulas pasajeras procedentes de la medula osea

10
Fig . 27 .9 .

20

30 dias

(,primers instancia ,, : RECHAZO LENTO

Fig . 27 .10 .

(<segunda instanciaw RECHAZO RAPIDO

Se administraron anticuerpos monoclonales frente a CD4 y CD8 a ratones CBA timectomizados, para eliminar selectivamente las poblaciones de celulas TH y Tc, respectivamente . A continuacion se les injerto piel de ratones B10 .BR, que solamente difieren de ellos en algunos loci de histocompatibilidad secundarios . Finalmente se comprobo la supervivencia de estos injertos . Los injertos Ilevados a cabo en animales tratados con anticuerpos anti-CD4 sobrevivieron durante mss tiempo que los Ilevados a cabo en animales no tratados (control) o en animales tratados con anticuerpos anti-CD8 . Esto demuestra la importancia que tienen las celulas CD4 , (TH) en las reacciones de rechazo . (Segtin datos del pofesor H . Waldman y del Dr . S . Cobbold .)

Se sometieron a irradiacion X ratones de la cepa A IXIA)l, y se reconstituyeron con celulas de medula osea procedentes de ratones de las cepas A o B . Los injertos cutaneos de estos fueron aceptados por los ratones de la cepa A 11) . Se implantaron en estos receptores injertos cutaneos de ratones de la cepa B. Los animales cuyo primer trasplante procedia de un animal reconstituido con celulas de la cepa A rechazaron el injerto de piel de la cepa B mss tarde que los de primer injerto procedente de ratones reconstituidos con celulas de la cepa B (2) . Esto implica que las celulas de medula osea de la cepa B, transferidas como pasajeras en el primer injerto, sensibilizan al receptor frente a los aloantigenos de la cepa B .

El IFN'y Inrede inducir la c\prcsiiin dc grtndcti cantidadcs de molecular (I'll dc clasc I I ell [as celulas cndotclialcs, asi como la csprcsicin dc ntoleculas dc claw I N 11 en las celulas parcnquintatc>sas, yuc apenas suclcn cxprcsar moleculas dc estc tipo . Esta rcgulacicin positiva dc la espresicin cle molecular CPH cn las celulas del injerto puCCIC potcnciar la rcspucsta dc rechazo, al yucdar cxpucstas en cl ntismo un nutt or nutncro dc molecular liana para Ios anticuerpos V hu celulas actkadas . T\Fjl c IFNy ttmbicn rcgulan posititamcntc la cxprcsicin de nuOleculas dc adlaerencia cn cl endotclio vascular . Estas molcculas son ncccsarias para Clue los ICnCOUtOS sanguineos se adhicran a las paredcs dc los taros, cont<r paso pretio para su migraciom ltacia Ios tcjidos a traces del cndotclio .

CURSO TEMPORAL DEL RECHAZ0

La rapidcz con que se produce cl rechazo depcnde cn parte dc los mecanismos ctcctorcs intplicaclos (fa. 2,'.12). Rechazo hipcragudo. F .ste tipo dc rechazo se produce con grin rapidci err l"tcicntcs yuc PCrSCCSI pretiantcnte anticuerpos frcntc al injrrtO, . I .c,s anticuerpos anti I ILA pucdcn apareccr dc bidO a transtirsiones pret ias, a multiples embarazos o al rechazo dc un trasplantc prcrio . Los ;utticuerpos frente al sistenta dc grupo sanguinco AB() tambien pucdcn pros ocar rcchazos hipcragudos . Eatos anticuerpos prcsentcs pretianacnte fijan cl com plentcnto, causandr~ Icsioncs cn cl rctestinticnto dc celulas cndotclialcs do Ios vasos sataguincos . Estas Icsioncs perntitcn la tugs do celulas liyuidos c induces la agrcgacidn do las plaquctas,

Clue obstrus en los s asos de peclueno calibre t prix in al injerto dc un riego .sanguinco adccuado I ;fR- 2,"'.13; ~ . ttntbien pag . 323) . Los rcchazos hiperagudos se pucdcn pretenir ntediante cl implante de cirganos procedentes dc clonantcs compatibles con respccto al grupo AB() y ntediante la rcalizacioin do pruebas cruzaclas, en las yuc se cctntprucba si el sucro Lie[ future receptor contiene ;uuicuerpos citotdzicos trente a las celulas del clonante. Como los scrcs huntanos poscen anticuerpos naturalcs i cs dccir, producidos pretia y cspontincanicntc} frentc a las celulas dc aninttlcs dc otras espccics, los trasplantcs dc cirganos anima Ics a sores hnntdlIOS suclcn dar lugar a rcchazos hipcragudos . En la actualidad sc intcstigan acticanaentc posiblcs sistcmas para supcttr cstc problems ; algunos dc las posibilidadcs sort climinar los anticuerpos, suprimir la actiticlad clel complententor u obtcncr ntediante ingcnieria genetics anint,tlcs donantcs cute  tcjidos scan nacnos sensibles a las reaccioncs dc rechazo hipcragudo . Rechazo agudo. Este tipo dc rechazo se ntanificsta transcurridrs unors dial o semanas dcsdc cl momcnto del trasplantc, v se dcbc timclantentalmente a la actitacion Lie las celulas T, yuc a cotntinuacio ll clcsencadenan la actit acioin de ditersos ntecanisntos cfectores (- fqs. 2714-27101 . Si SC IICV;t a cabo un trasplantc con un receptor Clue ha sido sensibilizado pretiatt)e[Jte frente a los antigenos del tejido injcrtad<t, se produce una reactit acicm de las celulas T, yuc da lugar a una rcspucsta dc rechazo mcdiada por celulas denontinada rcspucsta acelerada . Estas respuestas dc rechazo aceleradas o dc -segunda instancia soil especialmente espectaculares cn cl cast dc Ics injertos dc pie], a . sc Iran dcnontinadoa , rcchazos de injerto blancos ; en cllos cl injerto es rechazado antes dc yuc cicatrice {io. 2718) .

Curso temporal dal rechazo

Componentes inmunitarios dal rechazo

Curso temporal de las reacciones de rechazo tipo de rechazo hiperagudo acelerado agudo tiempo necesario rninutos-horns dias dies-semanas cause Ab frente a celulas den dwnante preexistentes y complemento reactivacion de celulas T sensibilizadas previamente activacion primaria de las celulas T causes poco claras : anticuerpos, inmunocomplejos, reacciones celulares lentas, recidiva de la enfermedad original

cronico

mesas-anos

Fig. 27 .12. La evolution temporal de las lesiones en un injerto proporciona mucha information acerca de los mecanismos de rechazo implicados . La presencia previa de Ab o linfocitos sensibilizados da lugar a rechazo rapido ; [as respuestas primarias se asocian a reacciones mas lentas .

citotoxicidad mediada por celulas

citotoxicidad lesiones liticas, mediada por celulas obstruction vascular y dependiente de Ab efectos sobre el injerto

mediadores inflamatorios

Fig. 27.11 . Las celulas TH son activadas por las CPA y secretan linfocinas . IL-2 e IFNy son precisas para la activacion de las celulas Tc ; IL-2, IL-4 e IL-5 intervienen en la activacion de las celulas B; la mezcla de TNFII (linfotoxina) e IFN,'/ constituye el factor activador de los macrofagos (MAR . Todas estas celulas intervienen en el rechazo de los injertos por medio de mecanismos inmunitarios celulares y humorales o a traves de reacciones inmunitarias inespecificas.

Fig. 27 .13. Aspecto histol6gico de un riven trasplantado tras una reacci6n de rechazo hiperagudo . Se observa una grave necrosis de los capilares glomerulares asociada a una hemorragia interstitial masiva . Este proceso necrotico va precedido de una intense infiltration de polimorfonucleares qua se produce antes de que transcurra una hora desde el momento de revascularizacion dal injerto. La fotografia de la figura se obtuvo 2448 horas despues dal trasplante . Tincion hematoxilinaleosina, -200 .

Fig. 27 .14. Secciones de piel de un rat6n de una ceps A correspondientes a piel normal (1) y a un aloinjerto 5 dies despues (2) y 12 dias despues (3) dal trasplante a un rat6n huesped de una cape CBA as la ceps dal rat6n qua recibe el injerto . A los 5 dias se observa una considerable infiltration de celulas mononucleares dal huesped en la region dal aloinjerto 11). A los 12 dias el epitelio ha sido destruido totalmente y se comienza a desprender la dermis, que para entonces carece ya de celulas; las celulas infiltradas dal huesped hen sido destruidas por anoxia, pero todavia existe transito celular activo en la base dal injerto, entre la dermis y el paniculo carnoso. (Por gentileza dal profesor L. Brent .)

Trasplante y rechazo

Rechazo cronico . Id recha/() dc I()s injcrtrrs pucdc scr ttn pr'occm) Icntrr r no manitcstarsc hasty mcscs o anos dcspucs tras tic] trasplantc ; su momcnto dc aparici(ln dclien(1c dc la disparidad genctica esistente cntrc donante v receptor \, de I()s tratamlentoS inflit]nosuprcsores instaurados . Fn cstc rechazo Las parcdcs dc los vasos sanguincos tic] injerto sc cngrosan s' tcrntin ;in ()bstru ccndcnc . Este tipo dc rechazo sc llama rechazo cr()nico \ pucdc dCI)Cl-SC a ditcrcntcs rausas, contra t una rcaccir'm dc reels/() do t tja intcnsid :ul mediada por celulas () al dcl)r'tsito do anticucrpos 0 inntunOccntthlcjtts srtbl-C CI tcjid() injertadrt, quo: puekicn hntsocar lesioncs o acti\.ir a las celulas cndrrtclialcs yuc rCtubr'Cn CI \'aso, desencadcnando respuestas tic rcparacion inadccuadas. Las caractcristicas tirndantcntalcs del rcclrvo cronico soil la obliteracie'tn lumimtl hluyuco do 1 .1s lucc, \usculares del injen()

lair la prolitcntci6n tic] mirsculrr lisp slur cmivra dcsdc la pared sascular \ pctr cl depcisite> de l,ntteinas do la m;ttriz \ la fibrosis interstitial ftormacirin do tcjido cicatrizal en tr~dr~ el injcrtrtl . Fstos procesos son contrctlacirts lxn - dis'crsrrs fattl)ITS Lie Cl- ccimicntu, conut TGF13, libcrados conao consecucncia do hts Icsio lies innmnitarias o do otro tipo dcl injerto 1:` . Jig. 27.17 . l, :i seno ha mi\ida do un trasplantc renal cs de sr')lo ' 8 ltnrrs mcjor:ulo ell IOS irltillMs 10 anos a Pesar do la intrr,ducci(')ll de la ciclosporina A para controlar cl rechazo agudo, Itt que indica la nccesictad imPcriosa de clionttrar nuc%()s firmacos inmtmosupresurcs para contrttlar el rechazo. l,os injertots tambicn pucden rcsultar danado, poll- rccidi gas do la cnfcrmcdad yuc hizo prcciso cl trasplantc originalmcntc .

_ m,3

Jw-

P a.

ii,

Fig . 27 .15 . Aspecto histologico de un rifion trasplantado tras una reacci6n de rechazo agudo (I) . ACUMUlaclon cle

pequenos linfocitos y otras celulas en la region interstitial del injerto. Esta infiltration ill es caracteristica del rechazo agudo, y se produce antes de que aparezcan los signos clinicos del mismo. (G = glomerulo .) Tincion HIE, .200 .

Fig. 27 .16 . Aspecto histologico de un rinbn trasplantado tras una reaction de rechazo agudo (11) . El torte de la izquierda ftincion HIE/ perterteCe a un rinon que ha experimentado un
rechazo agudo y en el que hay obstruction vascular (O); el de la derecha (tincion de Van Gieson) corresponde a la fase final de este proceso. (G = glomerulo .) " 140 .

Mecanismos inmunologicos del rechazo cronico del trasplante

ataque viraUinmunitario
anticuerpos

respuesta a las lesiones

obliteration de la luz

Fig. 27 .17 . La activation endotelial por

una respuesta inmunitaria o ataque viral estimula la liberation de varios factores de crecimiento, de los que destaca el TGFj3, que causa fibrosis del injerto y contribuye a la aterosclerosis . Se produce obliteration de los varos que irrigan el injerto cuando las celulas musculares lisas de la intima migran hacia la pared vascular, donde proliferan y depositan componentes de la matriz . La perdida progresiva del riego vascular de los tejidos injertados precipita la fibrosis, to que se traduce en una perdida lenta de la funcion del injerto.

Prevencjon de los rechazos

PREVENCION DE LOS RECHAZOS Las reacciones de rechazo se pueden reducir al mini analizando previamente la compatibilidad entre el donante y el receptor L'[t rc'chtin - % tilt d(ntantc'laic hrrscntan tiny ~~rmhatihilidad

tal son iuogenicos, conio ocurrc, per cjcnlplo, sit cl case dc Itcr manos gemclos hontocigoticos . Silt embargo, esta situacio'nt Cs poco trcCUCII(C, N en la grail nrasoria dc Ios cases cxistiran difcrencias entire cl donante t- el receptor en Ios alltigCIMS do histocompatihilidad j)rincipalcs o sccundarios. En la llractica stiloo cs 1)osiblc estudiar la contpatihilidad dc Ios antigcnos principales .Para ello sc pucdcn utilizar tccnicas sc; CCPH, cs dccir, HI-A 2:-.1y) cuvos resuliados sc pucdcn conolccr cn cl rol(lgicts plazo dc pocas lu,ras, pcriodo~ duralltc Cl cttal CI (''rgano del donante se comsersa rcfrigcrado. Recicntcmcntc sc h:tit dcsarroll :tdo tecnicas dc tipificacion dc grail scnsibilidad y c\Actitud en las yuc SC utiliza la rcaccuin en cadcna do la poclintcras.1 i 1 1<'R, del inglcs Polrmerase chain reaction) I s. cap. 2 0) 1 para detectar Ios genes HLA en Ios AI)\ del dollarttc s - dcl receptor . I :a detcrminacion do todos Ios antigenos HLA conocidos es practicamcntc intposiblc, Hero sc consigucn bucnas taws dc sit

llcrciccncia do Ios cSrg :uu~s injcrtados cuandot Cl donante s- cl rccclltor Posccn Ios ntisntos antigcnos (:PH do class II, especi :tlntcntc ell to conccrnicntc al locus I I LA DR I; -jip. 2,-".20), t, a quc cstos son los quc actkan directamcnte las cclulas 'I H del receptor . La lista oic anti,,CIus do class 1 i; H I . :1-A, H IA- 11 \_ HI .A-(' I t. dc class 11 HI .A-DP, H1 .A-l)L y HLA-DR) quc sc conoccn cs hastantc rxtcnsa C jil). 2721 i, .\ la probabilidad de quc dos indjs iduos escogid(~s alcatoriamcntc coincidall en todos ellos Cs rcmoott. I:urthicn SC pucdc utilizar la rcaccion dc mczcla dc lintocitos 1 R\9L i para comprobar la cah:tcirl :ul dc rcsl)ucsta dc los linfi)citos del receptor trentc a Ios antigcm)s quc expresan las cclulas del donante . .q ? -.221 . Las respucstas RN1I . dcbiles frente a las / cclulas del donante cstan asociadas co>n una cxcclcntc supers is - cncia del traslllantc . Sin embargo, 11 .11-.1 Ilcs :u - a callo la 1( .\11, son ncccsarios 4-5 dial, per to clue csta tecniia tto Iltiedc SCI- utiliz:tda casi nurtc.t en la practica, \a clue Ios oirganos dc dorttantes lallccido~s or diagnorsticados dc ntuerte cerebral nor PUCLIen ser conscrvaclos durantc mas dc 24-48 horas. Por Cl COt1tt :lriO, cuando sc va a Ilcva1- a cabo till trasl)lantc a Imrtir do tin donalltc t i\-o p . cj ., tin familiarl csta tccnica si clue cs aplicablc. La RAIL cs espccialmentc impotrt:uttc ell lo>s trasplantcs dc ntcdula (')sea, \a clue sirs c para comprobar si las cclulas de la mcdula ()sea del do~-

Fig. 27 .18. La memoria inmunitaria interviene en el rechazo de los injertos . Un aloinjerto de piel humana se revasculariza totalmente a Ios 5 dias (1), y las cclulas comienzan a dividirse, pero transcurridos 12 dias (2) queda completamente destruido. Un segundo injerto procedente del mismo donante (injerto de segunda instancia))) no se Ilega a revascularizar, y al septimo dia (3) se encuentra totalmente destruido. Esto indica quo la sensibilizaci6n tras el primer injerto induce memoria inmunitaria.

Tipificaci6n tisular mediante serologia

Supervivencia de trasplantes renales y compatibilidad HLA

supervivencia al ano M) 100 90 80 -70 60 50 Furotransplant

Oxford

~' C

azul tripan

40 0

1
HLA-A y B HLA-DR

'

Fig. 27 .19. La tipificaci6n tisular mediante tecnicas serol6gicas se Ileva a cabo anadiendo tin antisuero con especificidad determinada (p . ej ., anti-HLA-B8), complemento y el colorante azul tripan a las cclulas problema situadas en los pocillos de una microplaca . El azul tripan tine las cclulas muertas, to quo confirma quo estas poseen el Ag (HLA-B8) . En la imagen derecha se observan cclulas muertas tenidas con azul tripan (color oscuro).

n6mero de incompatibilidades Fig. 27 .20. Resultados de dos estudios en los quo se determinaron los porcentaies de supervivencia al ano de injertos renales humanos procedentes de cadaveres. En el primero (Eurotransplantl se determine la compatibilidad de los donantes con respecto a HLA-A y HLA-B (clase 1) . En el segundo (Oxford) se determinaron los Ag HLA-DR (clase II) .

Trasplante y rechazo

Antigenos HLA detectables serologicamente

clase I locus A 1 2 3 9 10 11 w19 23 24 25 26 28 29 30 31 32 w33 w34 w36 w43 w66 w68 w69 w74 B 5 7 8 12 13 14 15 16 17 18 21 w22 27 35 37 38 39 40 w41 w42 44 45 w46 w47 w48 49 w50 51 w52 w53 w54 w55 w56 w57 w58 w59 w60 w61 w62 w63 w64 w65 w67 w70 w71 w72 w73 w75 w76 w4 w6 C w1 w2 w3 w4 w5 w6 w7 w8 w9 w10 w11 DR 1 2 3 4 5 w6 7 w8 w9 w10 w11 w12 w13 w14 w15 w16 w17 w18 w52 w53 clase II DQ w1 w2 w3 w4 w5 w6 w7 w8 w9 DP w1 w2 w3 w4 w5 w6

mate son capaccs dc responder a los antigenos del receptor y pro\ocar una FA'II i\, pig. 3 ;6 ) .

antigenos

Fig. 27 .21 . Se conocen aproximadamente 80 moleculas diferentes de clase I (HLA-A, B y CI y mcs de 35 moleculas diversas de clase II (HLA-DP, DQ y DR) en los seres humanos. Las tecnicas de genetic- molecular clan lugar continuamente al descubrimiento de nuevas variantes . Sin embargo, algunas de estas nuevas variantes no pueden ser diferenciaclas serologicamente .

Los ties agentes jnespecificos mas utilizados en la actualidad en la practica clinic- son los estcroidcs, la ciclosporina y la azatioprina {fq. ?;7.231 . Los estcroidcs poscen propiedadcs antiinfanatorias y suprimen la uctisidad dc los macrcifagos, interficrcn en el tiuuionamiento dc las CPA v reducen la expresion dc iiltigcjios (TH . Ademas, los estcroidcs contrarrcstan machos dc Icn efectos clue ejercc cl IFNIy sohre los ntacr6fagos y los tejidos injcrtados . La ciclosporina CS un macr6lido ohtenido a partir de un liongo clue vive en cl suelo, 'v poscc propiedadcs inmunosrrpresoras may potentcs c intcresantcs . Su ptincipal etecto CS la suprcsicin de la procluccj6n dc lint*ocinas poi parte dc las cclulas TII, al intcrferir en la acti\acicin dc los genes quc codifican dichas linfocinas v rcducir de forma direct- o indirccta la ezpresi()n de reccptores de 11 .2 cn los linfocitos en proceso dc acti\aci6n . Se conocen

EXiStCll rich tipos do tr,uamirutcrs innrun(MuhrcsOrcs : icrs cspcciticos dc antigcno v lox incspcoticr~s . L()s tr .ILdnIICntOS inmunosupresores inespeciticos ticncn poi objeto rcducir la acti\idad global del sistcma inmunitario frcnte a cualquicr estinurlo antigenico . Estos trattmicntos ticncn el incom-enicntc dc clue inducen una gran susceptibilidad ti-cntc a las inteccioncs en los reccptores de los trasplantcs . Por cjcmplo, una dosis alta dc radiaci6n \ csita los rechazos, pero al mismo ticntpo prosoca nurcltos etectos nocisos v suprime la inn1unidad antimicrohiana . La mayoria dc los tratamicntos inespecificos clue se: utilizan en la actualidad son sclcctiscn pane cl sistcma innTtrnitario o son utilizados dc tal forma clue prcscntan una cicrta sclcctiviclad . El tratamicnto ideal scria aquel clue inactivase 6nicantentc los clones dc linfocitos especiticos de Icn antigenos del donantc, sin ifectar a los demas clones, dc tal forma clue cl pacicnte no padeciera infeccioncs ni ctectos secundarios. Este tipo de illmunosuprcsi()n especifica sigue sicndo cl -Santo Grial dc la inntunobiologia dc los . 364) . trasplantes, v sera anali-zada Inns lLiClantC {v. pig

Para evitar las reacciones de rechazo se puede utilizar la inmunosupresion inespecifica

Tipificacion de tejidos : reaccion de mezcla de linfocitos

Inmunosupresion farmacologica

celula problem- DR3.7

celula prohlerna DR4.7

reconocimiento

" /,','

ausencia de reconocimiento

transformacion y proliferation

ausencia de reaccion

Fig. 27 .22. En la reaccion de mezcla de linfocitos se incuban las cclulas problema con cclulas tipificadoras de HLA conocido (en este caso DR4.4) . Las cclulas DR3.7 reconocen a la celula tipificadora como extrana; esto se manifiesta en forma de transformacion y proliferation de las cclulas problema (las cclulas tipificadoras son sometidas a un tratamiento previo para evitar clue proliferen como respuesta a las cclulas problema) . Por el contrario, las cclulas DR4.7, clue poscen el mismo antigeno clue la celula tipificadora (DR4), no reconocen a esta ultima y no clan lugar a reaccion alguna .

Fig. 27 .23 . Los agentes usados en la actualidad suprimen las respuestas de rechazo mediante la interferencia con pasos del proceso. Los esteroides poseen propiedades antiinflamatorias y ejercen un efecto supresor sobre los macrofagos activados, reducen la actividad de las CPA y reprimen la expresidn de moleculas CPH. La ciclosporina interfiere con la producci6n de linfocinas . La azatioprina impide la proliferacian de las cclulas activadas.

Prevention de los rechazos

otros ntacr6lidos quc tatrthien poscen propicdadcs inntttnctsuprcsoras, comet FK506 v la rapamicina . FK500 suprintc la producci6n dc linfocinas pctr parte de las Celulas 'I'H meciiante ntecanisntos parccidos a los dc la ciclosporina . La rapamicina intcrficrr coil la tea intracclular do transmisi6n dc scfmics procc cicntes del receptor dc [L-2, por to yuc intpide que esta citocina active a Icts linfocitos . En Ia /irttrra ?7.?4 se iontpara la cstrucrctr:t dc la ciclosporina, cl FK506 v la rapamicina . Part yuc sc produzc1 una rcaccion dc rechau, es prcciso que . los fnli,citos sc dividan t clitcrcttcicn rapiciantcntc i;prolifcracion}. La l/,ltietl,rina CS till tarnmco antiprcrlitcrativet coil una cstructura parecida a la de la 6 ntercaptopurina . Sc incorpora al Ah\ de las celulas en fast dc divisi6n c intpide yuc sigan prolitcrandct . En la actualidad se im- cstigan nuevos farmacos antiproliterativos, wino los dcrivados del acido micotcniilico. F .SCOS agcntcs pucden scr tatiles conto tratamicnto tinico, aunque cuando se administran dc esta manera suclen set- iicccsai-ia ,,

Macrolidos inmunosupresores de origen f6ngico ciclosporina

Me Me N 0 Me HI. -1 - OH 0 Me Me Me --", 0 `' r- Me Me Me

Mi e

grander dcxis yuc aumcntan cl riesgct do ciuc aparczcan cfcitcn tcisiios . Cuando sc utilizan asociadcts cntrc si aititan dc ternrt sinergica, ya quc each uno dc diets hlctyuea un }nisei ditcrcntc dc la misma via inmuniraria . 1W csta titrma la dctsis aciministrada dc iada unet dc Icts agcntcs cs ntrnctr v sc reduce: al mininut la I,rcthahilidad dc yuc se prctduzcan efectos secundarios- Los resultadex clinicos ctbtenidcx dcsdc la introciuicicin do Ia cicletspenina utn mtw bucncts lauscniia dc rcihuzo ell cl 35 90"^a dc Icts trasplanrcs do riticin, icrrazvn e higacict en cl plarct dc till moil . Sill cntitargo, dcbidct n Irx problemas rclaiictnadcts ion cl rcihazct creSnicrt v a iluc I ;t utiliaacilm dc t:irmacets a target l,lazet tcrmina p<tr prcxluiir cfcitcts advrrscts, la csprranz ;t dc villa media de un injerto do riri<in CS de ?-8 ;riots . La introducciein dc mews tar ntaios ell CI tenure, I,ucdc mcjctrar csti: indiie dc supervivrniia . En la actualidad SC encucntran cn fare do dcsarrctllct nurvcts :tgcntrs incspecitiicx tit:is selritivcts (-lirt. ?'.?,ij. Entrc riles sc cncuentran los untiuteti,cts monoilon,tJcs fi-cntc a molecular dc la su pcrfiiic dc Icx lintitritcx, cspccialnxntr C1)3, <il)4 v (I1)ti ; ramhien SC puedr aprovcchar la prcscncia cn cstas slulas c1cl receptor dc IL-2 },ara climinarlas n p;tra inactivarlas sclcitivamcntc . Error anticuerpos pucden it unidets a tirmaios citcttitsiiex para Amen ciar sus cfcitcts . ()trn Posibilidad es unir una taeina :t 11 .-2 dc rat forma yuc Ias celulas en pruceso dc activ:tcicin cctnut rcspucsta a los untigcnos del injerto, yuc posccn resptcn-cs dc IL-2, C,11)tLircil CI cctnjugado II .-2-tcwina v Scan drsn - uidas sclcitivantcntc. La inmunosupresion especifica reduce la intensidad de las respuestas frente al injerto sin que se produzca un aumento de la susceptibilidad frente a las infecciones 1 .1 sistema inmunitaric, csta rc~"ulade perr divers(),, meianisnuts dc rctrctalimcnttcirnt yuc irrntrolan la nragntntd, cl ttpo v la cs'I ~

N 1
0

H N

0 if

_j` i

MeN Me LO

N Me

Me H Me N . .O Me

II . N _
H

Me

Me

Me

Me

Me Me

FK506
Me

pcufiudad dc las rispuistas innnmirtrias j v. ca}, . 13), En dcterminadets ntetdelos evperimenrales cs posihlc m:utipular error me ianismos dc rcrroalimcntaiion para ptrvcnir el rechazo de trasplantcs. Esto SC pucdc ccmscguir mediante trcs proiedimicn tcts ditcrcntcs : la induccicin dc tctlcr ;utiia ell cl mctmcntct dcl nacimicntct, la pcxrniiacic'm aitiva v la pcttcnciaciein p;tsiva .

Posibilidades de inmunosupresion selectiva

OMe

agents antisuero heterblogo/ anticuerpos anticuerpos monoclonales conjugados anticuerpo-toxina conjugados linfoctoa-toxina

diana

LMe OMe Me Me

Me

OH

suero antilinfocitico todos los linfocitos ISALI globulina antitimocitica selectivo para las celulas T IGATI anti-CD3 anti-CD4 anti-CD25 0L-2R) celulas T maduras celulas TH celulas T activadas

rapamicina

MeO MeO Me

13 12-11 14_ 10

Me - 0

(15 16I H

'17 18 ` 19--Me 20 _21 -1 -22 . OH

anti-CD5 union a cads- celulas T activadas na A de toxina del ricino ICD5'1 IL-2 unida a la toxina difterica DAF,'MCP CD59 transfectado en celulas del donante (especialmente en los xenoinjertos) celulas T activadas (que expresan IL-2R) efectos del complemento a traves de las vias clasica y alternativa

- 25 27 . - 29 30 3 t 24- _-- 26 j- 28 23 Me Me

_`-0 0 OMe

'33-

33 - - OR

molecular in activadoras del complemento

Fig. 27.24. Los macrolidos inmunosupresores de origen ftingico (ciclosporina, FK506 y rapamicina) presentan estructuras bastante diferentes entre si y ejercen diversos efectos snore los linfocitos ; la ciclosporina y FK506 interfieren en la produc :cion de linfocinas, mientras quc la rapamicina inhibe la via de transmision de senates quc activa el receptor de IL-2 (IL-2R).

Fig. 27 .25. Los anticuerpos y las linfocinas pucden set dirigidos hacia las celulas del sistema inmunitario. Por el contrario, los farmacos pucden provocar efectos nocivos en tejidos no linfoides, como, por ejemplo, nefrotoxicidad y hepatotoxicidad . La eficacia de los agentes bioldgicos se pucdc potenciar mediante su union a farmacos o toxinas.

Trasplante y rechazo

La exposicion a antigenos del donante en el momento del nacimiento induce la ausencia de respuestas de los animales frente a los trasplantes 1711, ci rnunuIuo) cn yuc naiCn Ion rocciorres sus cclulas 1' maciurAN Ann fit) Iran abandonado cl time al contrarioo de to que ()cone cn cl case dc los sores launr.uaos, cn yuc cstas cclulas Soil cxPol-tad.1% a la perifcria a las 1(a 20 scntutts dc gcstacicna l . Cuando sc administra a cstos rocdorcs una lircntc Pcrsistcntc cic antigcno, Canto cclulas Viablcs Coon capacidad do crcciinictito o ilivcccioncs rchotidas do antigcnoo, se interrunipe cl clesarrollo cic Ias cclulas T inaduras cspccificas do: cse antigcno . l'n cxperinicnto cl .isicoa consistr cn imcctar Milks do mcdula ()sea dc un r:ttont (A x 11 iF t a un ratoon rccicn nacido do la ccpa li . 1 Sc utilizan cclulas do Clonantcs iA x 13)1` 1 pare co,itar la rcaccion del injcrto A contra cl httespcd li ciue Sc proniuciria Si se utilizase un donante dc tipo A. I El inciculo do mcdula ()sea gencra cclulas que consti tut cn una tUCntc corrttinua do :uatjgcno . Cuando cl raton dc la ccpa 11 alcanza la clad adulta, no o es capaz dc descncadcnar rcslnrcstas trentc a los antigenos A a los yuc tire cxpucsto durante cl periodo neonatal, pox to yuc tolera los trasplantes cutancos o dc otros to: jidos procccicnics dc doonantcs A o i;A x B)F~ . En la /irtul-n ?-.R se nurcstran los mecanismoos yuc originan la tolerutcia neonatal, yuc Iran silo cxplicados con mas dctallc ell cl capitulo 12 . Es posible yuc Ion antigenos activen selectisanicnte cictcrnai nadas subpooblacioIICS de lintocitos . En la act ialidad so: crec clue cxisten dos tipos principalcs do cclulas Ttl, (Icnominadas cclulas Ti l l \' '1'112 (\-. cap . I I ; . Los ratooncs en loos yuc so laa inducido toIcrancia cn su nacinticntoo pucdcn prcscntar un dcticit do ccluIas Ti I1 esl)ecificas del donante y tin aunicnto del nunacroo dc ccIulas TI12 cic csa ntisnaa csl)ccificidad . Las cclulas Ti I1 siniciizan ll \'~ c I1 .-2, V soil las cclulas 111 yuc SC nurcstran cn la ltnrct ?-.2.1 v yuc intcr\ iencn cn las reaccioncs do rechazo . for cl coontrarioo, ]as cclulas 11 12 sintctizan otras lintiocinas, ioonaoo 11, 10 o cl factor inhibidoor dc la sintcsis dc citocinas del ingjcs nmkinc ~Ynthcsis inhibitm-a~ rhitor ;l, que interficrc en la sintcsis cic citocinas par partc dc Ias cclulas 'I'll 1 . La prcwncia do una cantidad inenor dc cclulas 'Ill I \ de una cantidad rnaVOr do celuLas TH2 cn loo ratoncs cn los gtrc so Ill indtrcido tolCl -allCia ell Cl naonicnto del nacinaicntoo supoone un deslol .tzanricnto del cquilibrio cntrc rechazo y accptaci6n, ta\ooreciendo esta (rltinta posibiliclad . Esta forma do tolcrancia no consistc cxactanic ntc en unit :uudacioin dc Ias rcspucstas, sino ell una modificacioin cic Ias naisnaa,. F's in tcrcsantc cl laecho dc yuc cs posibic yuc la ciclosponna actiic prcfcrentcmcnic sabre Ias cclulas Ti 11, sin afcctar :t Ias TH2 . I-inaltncnte, cl antigcno puede actjtar cclulas T suprcsoras (cclulas Ts Y . Todasia no so: sabc hicn coal cs la idcntidad exacta de cstas cclulas . Sin embargo, si yuc SC sabc quo: cunndo SC transficrcn cclulas T proccdcntcs de un animal tolcrantc ti- cntc a los trasplantes de un donante A a otro animal, cste (iltirno idquicrc tolcrancia frente a los injertos clue conticnm antigenos A . Este procedimiento se denomina transtcrcncia adoptisa dc supresi aa, a . puede scr dcbido a los ctectcis do cclulas TI 1 o Ts . FXIStC una Bran controscrsia ac:rca do Ias cclulas Ts sus naecanisnuas do accicon, pcro Ion cxpcrinacntos IIC\'adoos a caboo no o dcjan dada alguna sabre su ozistonia . Son cclulas resistentos a I :a ciclosporina pucdcn dcscnapcilar algtin papcl cn cl naccanisna,o dc acciion do cstc firniaco innaunosuprcsor, asi coma inducir tolcrancia nacdi,antc supresicon activa . La situacion en los sexes humanos. En los sores latinianos no cs poosiblc inducir tolcctncia ell CI naonacnto del nacimiento dc la forma que SC ha dcschtoo . Sin embargo, si son posiblcs proccdinticntos coma la irradiation linfoide total l 1LT), en la quo : cl n(tntcro dc linfocitos maduros se reduce drasticanicntc nicdiante irradiacioon, nlieluris que Ia mcdula ()sea sc pro tege y qucda intacta : estc proccdimicnto puede dar lugar ell los indhiduos adultos a una situaci()n parccida a la qtr : se produo: cn los rocclorcs rccien nacidos . Dc hccho, la I I :1' scguida dc la exposicion a un atati~"cno

induce UrTt I,r4irnda I()ICrarlCla . Sin Cntbarg0, la IIA' CS cieniasi :tdoo hcliercosa CUmo I,ara sex utilizada en la I,r :ictiia clinica . 1 lace as alg(rn fcnipo yuo Lts MULLS 1 circulantos cic los rccehtores de traspl .tntcs tic coorazon sc clinainan dc tiirina rutinaria ntcdi.uitc sucro antilintiocjtjaa (SAL), obtcnicio mcdiantc la inmunizacioin dc ani males con lintocitos Ininianos . Estas cchrlas I naaduras tanabicn sc pticcicn climinar d : una forma ruuclao ntas scgura c igtralmcntc cficaz coon anticucrpos naona0clcnalcs ospcciticors, utlliz .indosc ell la act ialiciad coon cstc fin anticucrpoos anti ('D3 . En los sexes humanos se puede inducir la ausencia de respuesta a los trasplantes mediante transfusiones de sangre I-:n algunoos casoos la c\hcosicioin hrc\i :t a los :uthgrnoos del donante horde prooloong ;u- Inuclaoo oo indelinidantonte la ,uhonitrncia do loos injertos Ifq. 2-1263 . En principioo c%too no parece Iogico, )a que cabria esPerar que ell cstos casos SC produjcse un rechazo aCCICradoo to hihcragtrdo . Este tcnonicno sc ha cicnonainado potCnCLaCloin activa do la suPcrvisencia del injcrto . La tia do: cxpcosicicin al antigcno cs importantc, probablcm :ntc pooryuc dc clla dopende cnACS scrap los tcjidos lintoides expucstos a dicho antigeno . Nediante un ntodclo intirino de injcrto renal sc ha demostrado (Iuc una transtitsi6n dc sangre del donante adntinistrada pox tia intras-enosa al receptor una scniana antes del Potenciacidn inmunitaria de la supervivencia de injertos potenciacidn activa tratamiento previo de+ receptor con antigenos del donante isangre) . trasplante desde el donante al receptor el injerto sobrevive

potenciacidn pasiva tratamiento previo del : receptor con Ab frente a Ag del donante ~.' trasplante desde: el donante al receptor el injerto sobrevive

tr :msfusidn sanguinea

t suero Linmune
Fig . 27 .26 . El tratamiento previo de los animales receptores con Ag del donante i .v . puede prolongar la supervivencia de un aloinjerto . Este fen6meno se denomina potenciacidn activa de la supervivencia del injerto, ya que para que se produzca es precisa una respuesta activa pox parte del receptor (si se administra la misma sangre pox una via diferente se puede producir un rapido rechazo .) Otra posibilidad es administrar Ab frente a Ag del donante en el momento (lei trasplante, to que puede dar lugar a una potenciacidn pasiva de la supervivencia del injerto . Tanto la potenciacidn activa coma la pasiva presentan especificidad inmunitaria, ya que solo suprimen las respuestas frente a un donante determinado ; la supervivencia de los injertos procedentes de un tercer animal no relacionado no mejora .

Prevencion de los rechazos

trasplantc renal induce una aceptacioin del injcrto a largo) plazo, nlicntras yuc la adnlinistracioll Por t -ja suhcutanca do la misnla dosis dc sangrc induce un rechazo acclcrado . Este ctccto prcsenta cspecilicidad innnlnitaria, por to quc cl don :uuc dc la san grc v cl del riiltin dcbcn cormpartir al nICIIOS algunos antigcnos.l se ha utilizado ell la practiEl ctccto dc potcnciacitin actinra clinics administrando transtusioncs cspccificas del donantc (TEI)) . Pot cjenIplo, cuandoo un padre \a :1 dollar un rinun .s sit hijo, cl receptor pucdc scr tratado con transtusioncs de sanerc del padre antes del trasplantc . I)csgraciadanlentc, apro\inladanlCntc un 20",I~ dc los pacientes a los quc sc adlninjstran '111) dcs:arrollan anticuCrPOa trentc a anti gcnos ciel donantc, por to quc cl trasplantc pic\- istol fiche set- mspendidol ante cl pcligrts dc rc chazo Ilipcragudtl . Sin embargo, la tasa dc cxitos dc los teas plantcs Ilc\'ados a caho ell cl 80"6 rcstantc dc cstos pacientes cs del 95- I (HP-1 . El ctccto bcncticioso do la,, transtusioncs sanguincas Ilresi :lS al trasplantc sc ha denolninado ctccto dc transtllsion sanguinca, ~ Sc ha ohscrcado tamhicn en pacientes quc 11 .111 rccillidts transfusioncs por otros nloti\ -os 1\, por tanto, alcatorias 1, Prohablcnlentc Portluc en Chas 11 .111 sido cxllvCstOS casualnlente a antigeno ,, contenidos en cl trasplantc f firz. 272 - ) . 1)c llecho, cl clecto dc transfusion Sall"tllnca cS nlas acllsado cnanto Illa1'ol - sea CI Illl mcro dc CI -dIlStUSiOlICS cic cstc tilul (Iuc 1l,\, rccil)ido Cl pacicntc, ell los quc sc 1, duranic algin1 ticlnpo la nlal oria dc los ccntros practican trasplantcs ado~ptarom la costunlbrc dc transtundir san grc a Its candidatos a un trasplantc . Sin embargo, sicnlprc czistcn los ricsgOs tic quc Cl pacicntc clslcdc scnsihilizadol V tic 1 .1 transnlisioin tic] SI1)A, 1- laS nlcjorss en la di,ponlihilidad l. cn Lt utiliz.1ciom dc Its i,,cntcs ill nunIO,ullrcson- C, IIan rclcgado cstc proccdimicluol al ohido . La potcnciacitin aCtiV,1 Csii'C una I'C' pursra 1ctna )lot lame del receptor teas la im -ccciom dc antillcnos del donantc . NI n1ccanislno podria cstar rclacionado con la inducciun dc ancrgia, I :I acti\aciun sclectisa dc Ias cclulas 'I 112 o la icti\aciom dc las cc ItILIS Ts inducida por la trdn,filsi(m sanguinca, colno ocurrc ell cl cast dc la tolcrancia inducida dur ;ultc Cl pcriodo neonatal .

Por cl contrariol, cl mecanisnlo tamhicn podria esar basado en la induccioin tic la producciom dc -anticucrpo~s poltcnciadolrcscapaccs dc impcdir cl rcconocimicnto dc los antmcnos cspcc iti cos del dtmantc, bloqucando dc csa manes la rcaccion dc rccluzo, o cspaccs dc cicstruir hrs ICl1000ItOS pasajcros altatncntc innlunogcnicos del injcrto . l'nmbicn sr puedcn turnlar anti cucrpos potcnciadorcs ficntc a los rcccl,torcs dc antigeno, quc Ilucdcn clinlinar las cclulas rcactisas del dtmantc o afcctar a la prcscntacion dc antigcnol% dc tal Iilrnla quc, por cjensplo, dcs puts del traspl :uttC SC Cncucntrc fl%orccida la Ctitacio -In dc las ;c I it lds .l .I 12 \ 1's . Los .ulticucrpos puedcn ejerrcr 1111 efCCto de rctroalin1cntaciom cn Itrs indjsiduos rcccptorcs cic un trasplantc . La imcccioin Efecto de las transfusiones sanguineas sobre los trasplantes renales supervivencia 100 del injerto Io) 80 60 40 -20 0 0 6 12 18 8 24 30 meses

transfundidos no transfundidos

La supervivencia de los injertos renales es mayor en los pacientes sometidos previamente a transfusiones (102 pacientes) quc en aquellos que no hall recibido ninguna (71 pacientes) .
Fig. 27 .27.

do anticucrpos frcntc a anti ;,cnos del donantc i potcnciacio'm pasn .s) en cl nnmlcluo del trasplantc do un rintin a una rata rcccl,tora pucdc inducir la supcrskencia a largo plaza tie) injerto (s . fin. 2--'o) .

~En que se diferencian las respuestas inducidas por la activacion directs de las cclulas T del receptor en presencia de complejos peptido del donantc/CPH del donante de las quc son inducidas indirectamente por complejos peptido del donantc/CPH del receptor? La transfusion sanguinea previa a un trasplantc renal aumenta el tiempo de supervivencia del tejido injertado al evitar la respuesta inmunologica . Un problems de esta tecnica es el desarrollo de anticuerpos frente a las cclulas extranas de la transfusion en algunos pacientes, to que dificulta la realizacion segura del trasplantc . ~Como se podria evitar la aparicion de Ab frente a Ag del donante? " En el rechazo cronico parecen implicados n)ecanismos efectores distintos a los que operan en el rechazo agudo . ~Como se debe modificar el tratamiento para evitar el rechazo cronico?

La primera barrera frente a un xenotrasplante es la presencia de anticuerpos preformados frente al donante . Si pudicramos evitar el rechazo hiperagudo de los organos de, por ejemplo, un cerdo trasplantados a humanos, to mss probable es quc se generara una respuesta celular. ~En que se diferenciarian los procesos de reconocimiento xenogenico y alogcnico? . ~Quc papel desempetia cads una de las vias inmunitarias directs e indirecta en las reacciones de rechazo de injertos? ~Que asociacion de farmacos, anticuerpos o antigenos cree quc seria mss eficaz para evitar el rechazo de un trasplantc histoincompatible?

Trasplante y rechazo

LECTURAS ADICIONALES Alexandre GPJ, Latime D, Gianello P, et al. Preformed cytotoxic antibodies and ABO-incompatible grafts Chn Transplant 1991 ;5583 Mason DW, Moms PJ Effector mechanisms in allograft rejection . Annu Rev Immuno11986,4.119 Masoor S, Schroeder TJ, Michler RE, et al Monoclonal antibodies in organ transplantation : an overview . Transplant Immunol 1986 ;4 :176-89 Opelz G Effect of HLA matching in heart transplantation Transplant Proc

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Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

/ Los mecanismos autoinmunitarios son la base de muchas enfermedades, algunas de las cuales son especificas de un organo determinado, mientras que otras son sistemicas . / Las enfermedades autoinmunitarias se pueden solapar entre si : un individuo puede padecer mas de una enfermedad especifica de organo o mas de una enfermedad sistemica . / Los factores geneticos, como el tipo de HLA, son muy importantes en las enfermedades autoinmunitarias, y es probable que cada enfermedad dependa de la presencia de varios factores de este tipo . / Se conocen aigunos de los mecanismos autoinmunitarios que inducen reacciones patologicas en modelos animales de autoinmunidad experimental o espontanea . / Los autoanticuerpos humanos pueden ejercer efectos patologicos directos. / Los inmunocomplejos suelen estar relacionados con las enfermedades autoinmunitarias sistemicas . / Algunas celulas B y T autorreactivas persisten en los individuos normales y pueden ser seleccionadas por sus autoantigenos correspond ientes, dando lugar a respuestas inmunitarias que desencadenan enfermedades autoinmunitarias . / Los antigenos microbianos que presentan reacciones cruzadas y la regulation anomala de las citocinas pueden provocar fenomenos autoinmunitarios . / Determinar auto-Ab es un metodo util para diagnosticar y, a veces, para pronosticar enfermedades autoinmunitarias . / El tratamiento de las enfermedades especificas de organo suele estar basado en el control metabolico. / El tratamiento de las enfermedades sistemicas suele consistir en administrar farmacos anti inflamatorios e inmunosupresores. / Los futuros tratamientos probablemente estaran dirigidos frente a las celulas T autorreactivas, que desempenan un papel esencial en estos procesos, y consistiran en antigenos o peptidos, anti-CD4 y, tal vez, vacunas de celulas T.

28

LA RELACION ENTRE AUTOINMUNIDAD Y ENFERMEDAD

El sistcma inmunitario prcscnta una cnormc discrsidad N, como el repcrtorio dc especiticidades quc expresan las celulas l; y T se genera de torma alcatoria, pucdc incluir clcmcntos con espccificidad frcntc a detcrminados componcntcs propios . Por cllo, cl organismo disponc do tlnos ntccarlismos (ie autotolcrancia quc Ic pcrmitcn ditcrcnciar Ios deterrninantes propios do los ajenos t cvitar asi la autorrcacti\idad {~. cap . 14 ) . Sin embargo, cualquicr mecanismo pucdc tallar cn un momcnto dado . Los mccanismos dc rcconocimicnto (1c to propio no constituNcn una excepcion a csta rcgla, \ se can0CCn una scric dc enfermedades dcbicias a fen(imcnos autoinmunitarios cn ]as clue sc produccn cantidades masi\as do autoanticuerpos y celulas T autorreactivas . Una dc las prirncras cntcrmcda(ics cn las quc sc cstal,lcci() una relation causal entre la production dc autoanticuerpos y un proccso patologico cn un (irgano dctcrrninado cs la tiroiditis dc Hashimoto . I .a tiroiditis cs una dc las cntermcdadcs autoinnnrnitarias mcjor cstudiada, v muchas de las cucstioncs quc sc abordaran cn cstc capitulo sc basan cn nucstro conocimicnto dc csta cntermedad . Sc trata de una enlermcclad del tiroidcs clue es especialnicntc prvvalcnte entre mujcres do mcdiana clod, v clue en ocasioncs induce la aparicion dc bocio c hipotiroidismo . La glandula sc encucntra infiltrada por celulas lintoidcs intlanratorias, en algunas ocasioncs de torma rnuy intcnsa . Entrc cstas celulas prcdominan los fagocitos mononuclcarcs, los linfocitos y las celulas plasmaticas, y cs frcCLICntC la prcsencia dc fbliculos linti)idcs sccundarios IJia. ?,1',1 } . Tambicn cs ti -ccucntc obscrs ar fbliculos tiroideos en proccso dc regcncracion, al contrario que en CI mizedema primario, otra enfermedad inmunitaria dc caracteristicas parecidas cn la que la glandula queda destruida casi totalnaente y sc atrofia . El sucro dc los pacientes con enfermedad de Hashimoto sucIc contcncr anticucrpos frcntc a tiroglobulina . (atando Ios titulos Son clcvados cstos anticuerpos sc pucdcn dctcctar mc(iiante reacciones de aglutinacion y dc prccipitina . iMuchos pacientes tambien poseen anticuerpos dirigidos frentc a un antigeno citoplasmdtico o microsomal clue tambien csta prescnte sobrc la supcrficic apical do las celulas cpitelialcs foliculares l.#,7. ?8.?), v quc cn la actualidad sc sabc clue cs la pcroxidasa tiroidea, la enzima clue cataliza la adicion dc yodo a la tiroglobulina .

TIPOS DE ENFERMEDADES AUTOINMUNITARIAS

Los anticucrpos quc sc dctcctan cn la tiroiditis dc Hashimoto v cn cl miscdcma primario rcaccionan czclusisamentc coil cl tiroidcs, por to clue solo provocan JCSlonCS a ni%el local . Por el con trario, cl sucro do pacientes con enfermedades como cl lupus eritcmatoso sistemico { LES i rcacciona con muchas dc los tcjidos del organisnto (tal \ CZ con to(ios ) . Uno do Ios anticucrpos mas irttpctrtantcs que sc dctcctan cn cl LES cs cspccitico del nriclco cc

Fig. 28.1 . Alteraciones histologicas an la tiroiditis de Hashimoto. En la glandula tiroidea normal (1) las celulas

foliculares o celulas epiteliales de los acinos (aec) delimitan el espacio coloidal (cs), en el que secretan tiroglobulina, que es degradada de acuerdo con las necesidades dando lugar a las hormonas tiroideas (cap = capilares repletos de eritrocitos) . En la glandula de los pacientes con enfermedad de Hashimoto (2) la estructura normal se encuentra practicamente destruida, y existe una acumulacion de celulas invasoras lie), entre las que predominan los linfocitos, los macrofagos y las celulas plasmaticas . Se observa un foliculo linfoide secundario (sf) con su correspondiente contro germinal (ge) rodeado de una capa de linfocitos pequenos (m), y foliculos tiroideos en regeneration (rf) . Tincion HIE, " 80 .

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

lular ifiq. 28.Z ;~ . Estas clots cntcrniccladcs sc cncucntran situadas cn los cxtrcmos opucstcts del cspectro do ]as cntcrntctlacics autoinntttnlTariaS (fie. 28 .J). Los organos afectados coil ntas ILCCUCrtc la ell las cnfcrmcdaties autoinnntnitarias cspecifcas do organo son cl tiroides, las gl andulas suprarrenales, el estointago y cl pancreas . Las enfcrntcdadcs citic no presentan esltccificidad tic cirgano, cntrc las que SC cncucntran [as cltfernteclacics rcunr:iticas, SUCICI11 afcctar a la picl, . los rif oncs, las articulaciones t Icts rt1USCUIOS (fiq . ?b'.4).

Un individuo puede padecer mas de una enfermedad autoinmunitaria

Fig. 28.2 . Autoanticuerpos antitiroideos. Se incubaron secciones no fijadas de tiroides humano sano con suero de pacientes, y a continuation con anticuerpos de conejo anti-Ig humane marcados coil fluoresceina . Las celulas epiteliales de los acinos foliculares se tinen en presencia de anticuerpos de pacientes con enfermedad de Hashimoto, que reaccionan con el citoplasma celular pero no con el nticleo (1). Las secciones no fijadas retienen algo de coloide, per to que la tiroglobulina presente en el espacio coloidal de los acinos tambien se tine (2). Por el contrario, el Suero de on paciente con LES (derecha) contiene anticuerpos que solamente reaccionan con los nucleos de las celulas epiteliales de los acinos, mientras que el citoplasma no se tine (2). (Por gentileza del Sr. G. Swana.)

l 'n Itccho intcrcsantc cs tluc cn tada uno tic logs c~trcnton Jcl c~pcctro tic entcrnicciacics autojntntlnitarias se produccn coil Itttttlta ticcucncia notables sctlaltanticntcts. Es frccuentc dctcctar anti cucrpos antitiroiticos cn los pacientes tom anemia pci- niciosa, Clue ltrcscntan atttoinmunidad ticntc a sus celulas gastricas, N la prctalcncia do enferntcdadcs tiroidcas autoinmunitarias en estos pacientes CS supcrjcn - a la tic la potblaci(in normal . Dc la ntisnta tornta, lots pacjcntcs coil tiroiditis autoinntunitaria presentan una alta prccalcncia do autoanticuerpos ticntc a Las celulas gasrricas, v algunos de cllos presentan signets clinicos do anemia hcrniciosa . EI conjunto do trastornos reuntaticos agrupados cn cl otro tin considerable solapacstrcnto del cspectro tainbicn inucstra micnto . I'on- cjcntpkr, en algunos easels tic LES sc obscrcan signets tic artritis rcuntatojdc . En cstas cnicrmcdacics sc produce un dcpusito do inntunocontplcjos a niccl sistemico, csliccialmcnte en Ices riitotncs, ]as articulaciones V la picl, Clue da lugar a lesiones

El espectro de las enfermedades autoinmunitarias

especificas de organo tiroiditis de Hashimoto mixedema primario tirotoxicosis anemia perniciosa gastritis atrofica autoinmunitaria enfermedad de Addison menopausia premature (algunos casos) diabetes mellitus insulinodependiente sindrome del hombre rigido sindrome de Goodpasture miastenia grave infertilidad masculine (algunos casos) penfigo vulgar penfigoide oftalmia simpitica uveitis facogdnica esclerosis multiple (?) anemia hemolitica autoinmunitaria pcirpura trombocitopenica idiopatica leucopenia idiop6tica cirrosis biliar primaria hepatitis cronica active (sin HBsAg) cirrosis criptogenica (algunos casos) colitis ulcerosa sindrome de Sjogren artritis reumatoide dermatomiositis escleroderma enfermedad mixta del tejido conjuntivo lupus eritematoso discoide lupus eritematoso sistemico (LES)

Los dos tipos de enfermedad autoinmunitaria

especifica de 6rgano no especifica de 6rgano

tiroides tiroiditis de Hashimoto mixedema primario tirotoxicosis

estomago anemia perniciosa glAndulas suprarrenales ( enfermedad de Addison ~' pancreas l diabetes mellitus insulinodependiente +'
r+'

~i i!

rindn LES

I~

articulaciones artritis reumatoide

no especificas de organo

Fig. 28 .3 . Las enfermedades autoinmunitarias se pueden dividir en especificas y no especificas de tin cirgano . En las primeras, los Ag frente a los que va dirigida la respuesta inmunitaria aparecen exclusivamente en un 6rgano determinado; en las otras se encuentran repartidos per todo el organismo.

Fig. 28 .4 . Aunque las enfermedades que no presentan especificidad de 6rgano suelen provocar s(ntomas en la piel, las articulaciones, los rinones y los musculos, en algunas de ellas resultan afectados en mayor medida determinados organos, como, per ejemplo, el rinon en el lupus eritematoso sistemico (LES) o las articulaciones en la artritis reumatoide .

Factores geneticos

discminatias . I)or cl contrario, cl solapainicnto chore cntcrmcdatics situadas en lots cxtrcntos opucstos tic] cspcctro cs bastantc loco trccucntc Ihq. 2,1' . ;1 . L .os mcc :utismos innuutol) :ttolo'tgic()s que InLIucctt las ICS10 11CS cicpcndcn tic la posici6n tic la cnicrinctiad ticntro dcl cspcctro . ('uando cl antigcno csta Iocalizado cn tin (irgano cictcrntinad(o . NC suclcn producir rcaccioncs tic hipcrscnsibilidad tic til)o II v nic di :tdors por cclulas i\ -. caps . 24 \ 261 . I'or cl contrario, cn la .tuto)inmuniclad sistctnica cl dcpbsito do inrnunocomplcios pro)<tca proccsos inilamatorios mctliantc di)crsos mccanismos, cntrc los tluc sc cncuentran la actiuci(in tic] completttcnto V la acunttilaci(5n tic tagocitos cap . 25 ) .

Hay determinados haplotipos HLA que predisponen a la autoinmunidad

M FACTORES GENETICOS
Las enfermedades autoinmunitarias pueden afectar a familias completas

\(t cahc dull, tic ]tic to algunas tamilias la incidcn :i,1 (ic mtt((iitnnuutlatl cs anortnalmcntc clcrada, conto cicnxicstra cl cicmplo tic la firfuva 28 .0. Esta acuntttlacion tic casos no cs tichitla a tactorcs ambicntales, ,ino gcncticos, cortno sc ha comprobado cn estudios Ilccados a cabo cn gcniclos idcnticos ) . not iticnticos, t. coma ticnTttcstra la asotciaci(m cxistcntc cntrc la prcscncia tic atttttanticucrpos antitiroidcos \- cicrtas anomalias dcl cromosonra X . La autoinnutnidad tantfiar suck scr cspccifica do 6rgano . Adcmas tic una prcdisposiciom gcncral a I)roducir anticuerpos cspccificos tic 6r;-ano, tambicn cstin impfcados otros iactorcs gcncticos, yttc detcrntinan cual cs cl (irgano que rcsulta mas atcct:tdo . No ha) yuc ob- iciar yuc ION tttniliarcs tic Ios pacictitcs coil entcrtnedad tic Hashimoto o coil anemia I)crniciosa prcscntan una incidcncia )- un titulo tic atttoanticttcrpos antitiroidco s por cncima tic to normal, v tluc cn cl caso tic los tamfiarcs tic pacicntcs coil anemia perniciosa sc ot)scr) a cl mismo tcndmcno coil rcspccto a Ios autoanticuct -pos Ircntc a las cclulas gastricas, to que lithe, yuc tlentro) dc cstc grupo tic cntcrntctladcs autoinmttnitarias cspccificas tic (irgano czistcn tactorcs gcncticos yuc sclcccionatt coma diana al cstontago .

t)tra III ud)a tic la 6111)11 .h iom tic tatt(trtS tnct~ :(~~ :~t I :t~ :it : tcnt1CdadC1 auto(inntunitarias Cs la tctttICtttla tic cstos trast(rr ttoS a I)rcscntal-W asociados a tictcrntinados Itapl()tipos IILA girl . 2(`.'l . La artritis rctnnatoidc n() ntucstra ninguna asociaCl6tt coon los Itaplotipos tic loss loci 1 II .A-A ) B, I)cro s yuc csta asocldCIa ton una sccucncia tic nuclcotitios yuc aparccc cn DR I ~' cn ION subtip(tc I)6nciPAcs tic DR4 i, csta sccucncia c()difica los antinoacidos -0--4 tic la caticna 1)RI3 ; . Fsta sccucncia tambicn csti prcscntc cn las protcinas dcl shock tcrmic() dna) tic di)rrsos bacilos \ cn la protcina gpI I(I tic VEB, Io yuc sugicrc yuc sc puctic ituittcir aut()inntunidad mctliantc Ia,, rctcci(rttcs cruradas cot cstos cpito>pos (\ . alas atiCIatttC',1 . Los cstudi(rs Iran dcni(ntrado yuc las molcculas tic HLA DR que prcscntan csta sccuencia se I,uedcn unir ton otra protcina del shock tcrmico bac rerun,, tlnaK, com ',it an :il(r ., 0 huntano, Itsl)i 3, yuc ticncn comp diana UILt9 protcinas cictcrtninadas tic los liso"Omas implicadas cn cl proccumicnto antigcnico . El haplotipo 118,1)10 sc obser) ;t con especial ti -ecucncia en ] .is entcrntctia(ics csl)ccificas tic oirgatto, aunyuc la tirotiditis tic Hashimoto sc sucle asociar con (IDi . Tantbicn cs notable cl hccho tic yuc ION indi)iduos hctcrocig(Iticos D()2/'8 prcscntan tut ricsgo clc(ado) tic ticsarrollar diabetes mellitus insulinodcpcndicntc (dc tipo I) I . .liq . 28. list() sugicrc yuc cn cl dcsarr(tllo tic [as cntcrmctlatics autoinntunitarias cstan intpfcados ciitcrsos tactorcs gcncticos : Itat , gcncs yuc I)rcdisponcn a Ios indiciduos a dcsarro llar cicrtas cntcrtttctlatics, especificos o no esl)cciticas tic (irgano), nticnrras yuc otros gents dctcrminan yuc antigeno o antigenos se )clan intplica(io% cn las misntas . I'ottas cstas Itil)()tcsis se han contirmado ntcdiantc modelos anintales tic autoinmuniciad, como se csplicara a continua :i()n .

Autoinmunidad en una familia

Solapamiento de los anticuerpos anticuerpos especificos de 6rgano anticuerpos no especificos de 6rgano 60 (; 57 1 54 ` \48 ,,

anemia anemia gastritis anemia perniciosa perniciosa atr6fica perniciosa anticuerpos antitiroideos Ab frente a lcelulas gastricas

46

~4

~~j ambos anticuerpos

Fig . 28 .5 . Muchos individuos producen simultaneamente autoanticuerpos especificos de 6rgano dirigidos contra el tiroides y el estomago, pero es raro que exista solapamiento con anticuerpos que no presentan especificidad de 6rgano, como los que reaccionan con el ADN y las nucleoproteinas .

Fig . 28 .6 . En este arbol geneal6gico familiar se muestra la incidencia de anomalias especificos de 6rgano que afectan al tiroides y al est6mago . (Cuando se Ilevb a cabo el estudio el padre ya labia fallecido, por to que no se pudo determinar clue Ab poseia .) Todos los descendientes desarrollaron enfermedades autoinmunitarias gastricas, mientras que la madre padecia mixedema primario . Desde un punto de vista serol6gico se observ6 un sorprendente solapamiento con la autoinmunidad frente al tiroides, aunque los descendientes no presentaban signos de enfermedad tiroidea . La prevalencia de los auto-Ab result6 estar relacionada directamente con la edad Ilas edades que se indican son las del momento de detecci6n de los auto-Abl .

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

Asociaciones HLA en las enfermedades autoinmunitarias

enfermedad de Addison (glandulas suprarrenalesl diabetes mellitus insulino dependiente We tipo 1 o juvenil) artritis reumatoide

PATOGENESIS 1 .()s preriescn autOinnuulital-iOS suclen set' Patogenicos. (:uando sc dctcctan autoantiCUcrlxa, asociacios a trna Lictcrrninacla entcrn1eciatf cs posiblc quc : tic " El proccso autoinnnrnitario SC .l Cl causantc I :as Icsioncs clue aharcccu Cn la Cntcrn1CLlad . " Los autoantiCUCrPos SC produzcan como respuesta a autoantigenos libcrados C(lrno CUr1SCCUCnela tic las ICsioncs tisularcs quo: pr(rsoca la cntcrnlcdad. " Esista algun factor quc protoquc al nlisnlo ticntpo la" Icsioncs v la autoinmunidad . En algunos ocasioncs sc Lictectan autoanticucrpos sccundarios a 1111 .1 IcsicSn ( la scgunda posibilidad nlcnCionada O . P(n- Cjenlplo, dcspues de un intarto tic miocardio sc pucLicn producir auto .1ntiCUCrpos frcntc a antigcnos cardiacos . Sin embargo, I .1 libcraci611 tic autoantigenos dcbido a tr:urmatismos simples no suele dar lu tic gar a la producci(in autoautiCUCrpos . La masoria tic ]as Cnfermcdacics rclacionadas con la atrt(>innlunidad suelc corrcspondcr al primer grupo, cs dccir, a iqucl cn quc las ICSiOnCS son pros ocadas por cl proccso autoinmunitario .
Ell papel patogeno de la autoinmunidad se puede demostrar en modelos experimentales Ejemplos de autoinmunidad inducida

14

riesgo relativo

16

18

20

Fig. 28 .7 . El riesgo relativo es una magnitud clue indica el peligro clue corren los individuos portadores de un Ag HLA determinado de contraer la enfermedad con respecto a los clue carecen de dicho Ag . Practicamente en codas las enfermedades autoinmunitarias clue se ban estudiado se ha encontrado alguna relation con alguna especificidad HLA. El riesgo de desarrollar enfermedad de Addison de los individuos con HLA-DR3 es mas elevado clue el de los clue poseen HLA-B8, to clue sugiere clue DR3 esta estrechamente ligado al ((gen de susceptibilidad a la enfermedad), , o incluso clue se puede tratar de dicho gen. En este caso no es extrano clue B8 presente un riesgo relativo mayor de 1; se sabe clue suele asociarse con DR3 mas de to clue cabria esperar si la distribucibn fuese totalmente aleatoria, fenomeno denominado desequilibrio de ligamiento . Tanto DQ2 como DQ8 estan asociados con la diabetes mellitus de tipo 1, y cuando estos dos genes estan presentes simultaneamente (es decir, en los heterocigotos DQ2/8) el riesgo de padecer la enfermedad es muy elevado, to clue apoya la suposicion de multiples factores geneticos clue actuan de forma aditiva . La artritis reumatoide se encuentra asociada a una secuencia pentamerica en DR1 y a determinados tipos de DR4, pero no a los alelos HLA-A ni HLA-B.

Fig. 28 .8 . Aspecto histoldgico de la tiroiditis autoalergica experimental . En este torte de un animal al clue se habia inyectado tiroglobulina (izquierda) hay destruction masiva de la estructura folicular, apreciandose solamente algunos foliculos intactos aislados (f) ademas de otros con signos iniciales de destruction (br), una notable acumulacion de celulas inflamatorias mononucleares (inf) . A la derecha se muestra un torte de control, an el clue se observan los foliculos normales repletos de coloide. Tincion H/E, x200 .

Hashimoto, cl parccid() cntrc arnbas cnlcrnlcdadcs cs notable . l .a CapdCidad para inducir cnfcrnicdadcs autoinnlunitarias cz perinlcntalcs dcpendc Lie la cello de animal clue se utilicc . Por ejenlpl(), se ha dernostrado yuc la suscclitihilidad Lie ]as ratas N , ratones frcntc a la encetalcnnielitis inducida por la protcina basitic ca tic nliclina dcpendc de un nurncro rcducido loci genicos, tic tic cntrc Ios Cualcs cl mis importante es cl las rnoleculas ('1'H class 11 . Tarnhien CS posit)lc inducir cncetalomiclitis autoalcrgica en ccpas suSCCptibICS mcdiantc la imrCCi(in tic cclulas T cspccifitic tic cas la proteina basica miclina. 1;stas Celulas T colaboradoras tic (Ti l) son ('l)4', y se Ita obscrlado clue 1 ;1 aparici6n la cntcrmcclad PuCLic scr cs itada mcdiantc el tratamicnto de los .aninlalcs receptorCs con anticucrpos anti-CD4 justo antes del m(nlaento prcs into do aparicibn do los sintomas ; cstos anticucrPos hloclucan ] .is intcraccioncs cntrc ]as CeI111as'I rl CD4 - v las nIOICCUlas (.PH tic class 11 do [as cclulas prcscntad(lras de antigcnos (CPA) (v cap. 10 j . Estos 11allazgcas dcnlucsrran la inlportancia quC tiencn las CCILIIaN TI I autorrcacticas rcstringiclas por n1oleCUlas do class 11 tic cn cl dcsarrollo estos trastornos, asi (:onto cl papel prcpondcrantc quC LiCSCnlpcna el CI'l l .

L.a li,rnra nris d1rCCL1 LIC C(npr((h.ar si I :a Aut(tinn1rmidad (" l .1 I'm sa tic llts ICSIOuCS (]Lie dpal-CCen ell una CntcrnICLI ;ui cs indUCir dclibcraciamcntc autoinmunidad ell un animal tic cxpcrinlcntaci('m y cornprobar si csto c(>nducc al ciesarrollo tic Icsioncs . I_a autoinmunidad lnrctic scr inducida en los aninlalcs do cxperinlcntaciim nit diantc la imcccilm conjunta do un autoantilleno (antiigeno propio i tic,ad%'ut :ultC C(rnIPICt(, Lie FrC11nd f\ . cap . 17 i, v sc ha dcmostratio clue cste pr()ccdimicnt(r da Itrgar a la aparici611 tic cntcrnledadcs cspccificas tic oruan(r. I'or cjcntplo, Lt imccciiin tic tiroglohulina pucdc inducir una cntcrn1CLiad intlanlatoria tic] tiroides, tic rnientras quc I :a prwcina bdsica do la nlidina pucdc dar hrgar a tic encetalorniclitis . En cl caso los aninralcs a los clue SC in\ccta tiroglohulina no s()1o SC produccn autoanticticrtios antitiroidcos, sino yuc Ia 91.indula cs im attida por cclulas n1on(muClcares y la estructic tura los acinos yuccia dcstruida i hl . ?(1' .(1' ;x . Aunyuc csta resPucsta no CS c.eact.unCntc igual a la obscn-ado ell la tiroiditis tic

Ejemplos de autoinmunidad espontanea I Js CnlcrnICdadcs aut((inntunitarru Csp(mt :inCas yuc

SC produccn cn algun()s aninlalcs han permitid(~ c(nnprcnder mejor n111C1105 aspcctos tic cstos proccsos . L 'n cjcmplo clasico cs la cepa tic poIlos obcsos ( ()S1 (ftq. ?9.91, yuC sc caractcri/a por la producci(in tic espontanca autoantiCtrerpos antitiroiticos y la dcstruCCi(in pro-

Patogenesis

37 1

anemia pcrniciosa, yuc posccn anticucrpos capaccs de reaccionar ion CClulas parictalcs no~rntalcs do naannteros . La cntcrtnedad do la ccpa do pollos obesos sc parece a la en tcrmcclad tiroidca autoinmunitaria humana cn cuando a las lesion nes quo SC produccn ell la glandula, la producci(in de :ulticuorpos trcnte a dircrsos conaponcntcs del tiroidcs y cl solapalinicilto coil la autoinmunidad gastrica . Por cllo, cs intcrcsantc cl lacclao do quo: cuando sc altcra la situacion innunitaria de csto(s aninralos, Se produccn ctcctos cspcctacularcs cn la CVolucioin de la crtfernu dad. Por cjcmplo, si sc climina la hursa do Fahricio f lugar do maduraciGn do las CClulas 131 porn ticnapo dcspucs do I a Cdosl()n dcl hueVot, la grascdad do la tiroiditis Sc reduce considcrablctncntc, to quc indica gtrc en la patogcncsis do la cntcrmcdad inters icncn las celulas 11, bicn mo(iiantc la produccion (ic anticucrpoas o conu~ cc lulls prcscntacloras do antigcnts para Ion linfocitos 1 patdgcnos. Por cl contrariot, la climinacion del tinao ell cl naomcuto del nacimicnto exaccrba la tiroiditis, lo quc sugicre yuc Cl tinao ojcrcc un cicrto control sobrc la cntcrmcciad i:_liq. 38 .111) . Paradhjicamcntc, la chtninaci('n total do la pohlaci('n do celulas '1 cn los animales adultos nacciiantc la imcccioin do grandcs dosis cic SatCfo anticclulas 1' do pollos inhibc tottalmentc la produccicin do anticucrpos y los ctcctos Icsis os sobrc cl tiroidcs . Por tanto, se deduce yuc Lts celulas I' desctnpcnan un papcl escncial en esta enfermedad conto mc(iiadoras V rcluladoras do la misma. Los autoanticuerpos humanos pueden ejercer efectos patogenicos directamente Como Cs I(Sgico, la imcstigacioin dirccta (io la .atilc)III mtinidad hu many prcscjndicndo do modclos animalcs orifgina ma\orcs dificultadcs cuando So: quicrcn Ile\ ar a cabo dctcrtninados cxhcrjmcntos . Sin embargo, cxistcn machos d;ato~s quc indican yuc Ios autoanticucrpos dcscmpcnan un importantc papcl patoueneticot . A continuaci(in SC anahzan Ios cjcnaplos naas inaportantes ell cstc scnticio .

Ion sucros do cst(n aninaalcs rcaccionan coil celulas dcl cstomago i protentriculo i do pollos normalcs ell las prucbas do innlullo tluorcscencia. Esta situacilan cs parecida ,a la do los pacicnics coil

grcsisa do la glandula dcbido a un protccso inllanaatorio cr(Snico . FI suero do cstos animales conticne autoanticucrpos trcntc a tiroglobulitra ijirt . 3 -.10 i . .Adcm as, aproximadamcntc cl I S"'. do

Tirotoxicosis. Sc conoccn djscrsas rnterntcdades cn ]as quc Ices aut((,uiticucrpoos Ircntc a receptores hornaonalcs puc(icn inducir los mismws etcctos quo: la hormona normal, dando lu ;1,ar a Ion corrcspondicntcs tratit()rn0S. 1 .1 tir()atxicotsis ILc la printcra cntcrnacdacl cn quc SC (iCalostr'() la pre,cncia de cste tipot de anticucrpots ticnto a receptores ijrq. 3.x'.11 i . La tirotoxicosis neonatal ,e pucde considorar un CstUdlo( tic -transtcrencia pasit-a " natural, cn cl yuc los anticucrpos IgG de una madre con tirotoxicosis atras iesan la placenta \. cjcrcen sus cfccton sohrc Cl fcto . Sc hall Lies

Efectos de la bursectomia y la timectomia neonatal sobre la tiroiditis de los pollos OS

gravedad de la tiroiditis

3
contro~

contro . j

bursectomizados

timectomizados

Fig. 28 .10. La gravedad de la tiroiditis es funcidn de la infiltracion linfocitaria . La bursectomia al nacimiento reduce la tiroiditis, to que sugiere que los Ab desempenan un papel importante en el proceso patogenetico . La extirpacion del timo al nacer exacerba la enfermedad, to que indica que las celulas T supresoras (Ts) ejercen un cierto control sobre la misma.

Autoinmunidad frente a receptores de superficie celular

anticuerpo frente a los receptores de TSH TSH

receptor de TSH

celula tiroidea Fig. 28 .9 . Cepa de pollos obesos (OS) . Los pollos de esta cepa padecen una tiroiditis autoinmunitaria espontanea parecida a la enfermedad de Hashimoto. Son macho alas pequenos (derechal clue los controles de la misma edad y muestran otros sintomas de hipotiroidismo, como hipersensibilidad al frio (plumas erizadas), anomalias cutaneas (plumas largas y sedosas), dificultades para la reproduccion, depositos de grasa subcutaneos y abdominales lde ahi su denominacion), suero lipemico, etc. Estos sintomas pueden set prevenidos mediante la administracidn temprana de tiroxina . (Por gentileza del profesor G. Wick .) estimulo' estimulo

Fig. 28 .11 . Las celulas tiroideas son estimuladas pot la union de la hormona estimulante del tiroides (TSH) a sus receptores (izquierda) . Los anticuerpos frente a este receptor que se detectan en los pacientes con tirotoxicosis (enfermedad de Graves o de Basedow) se Linen a el de la misma manera, induciendo un estimulo parecido en las celulas tiroideas (derecha) y dando lugar, pot tanto, a la produccirin excesiva de hormonas tiroideas .

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

crito nuichos casos dc nitios nacido)s dc madrcs con tirotoxicosis cn los yuc se obsers a lupcractis id :txi tlrOIdCa, pci'o Cl problcnta desaparece espontancamcntc iu,utt1o Ios artticucrpo)s dc oorigen matcrno son catabolizados al cabo dc unas pocas scmanas . Miastenia grave. Sc ha obscrsado till ti :nonicno parecidoo al mcnoo)n,id() cn cl parrato anterior cn rclacioon colt Lis niadrcs (loo' padcten miastcnia,raw, consistente en yuc los anticucrpos dente :t Icts rccclitorcs do acctilcolina atrasicsan la placenta c cjcrccn ,us ctcctos sobrc cl tcto, dando lugar a dcbilidad muscular transitoria cn cl rccicn nacido) . Otras enfermedades en que intervienen receptores. Atm(iuc rs p()t(o frtturntc, cn algunas ocasiontcs sc 11,111 dctcctado auto) .uttitucrp()s trcntc :t I()s rcccpt(n- CN dc 1 .1 illsulina y Ios rcccptorcs ji adrcncrgicos, cstoos ultimos cn relation con asnia broon quial . tie PUCdcn producir dctcctos ncuronnuscularcs en stones inVcctando Cl st[Cr0 dc los pacicntes con sindromc dc EatonLantbcrt, yuc contienc anticucrpos trcntc a los canalcs dc calcio presinapticos, mientras yuc en Cl sindronnc do Guillain-Barre sc rcconoccn autoantiatcrpos trcntc a los canalcs dc sodio . Infertilidad masculine . Otro cicmplo dc cntcrrncdad autoinnrtmit :u-ia yue cs 1 .1 causal de una pequcita proporcio'm dc los casos de intcrtilidad masculine cs la prcscncia do anticucrpos trcntc a los cspcrniatozoidcs, yuc prosoca la aglutinacioon do cstas cclulas contcnidas cn cl semen por sus cabczas o po)r sus colas 1fri. 2(1.12) . Anemia perniciosa . En csta cnfcrmcded till :urtoanticucrpo in) pidc la abs(wcioin norm,1I do \itamina B ._ . Esta sitaunina no sc absorllc dircctanicntc, silo yuc se dcbe asociar en primer lugar con una protein, dcnoniinada factor intrinseco ; cstc complejo sitamina-protein, si yue pucde atras esar la ntt[tosa intestinal . Ell ono) do los prinicros cstudios dc transtcrcncia yuc SC 110,11-on a cabo SC dcmostro yuc al administrar conjuntuncnte a till illdi\ iduo sang sucro do tin pacicntc ton anemia perniciosa s' complcio (actor intrInsCCo - \itantltta B o _, la absorcion dc la \itamina yucc1aba inlti-

bide . aMas adclanic sc iclcntifico cl tactor scrico yuc inhibc la al,sorci()n do la s itamina, yuc rcsulto scr tin anticuerpo trcntc al (actor intrinseco . En la actualidad sc sabc yuc ]as cclulas plasniaticas dc la ntucosa gastric .( do los pacicntes colt dncntia perniciosa sc. 28 .13) . .q crctan cstc anticucrpo hacia la luz cst(unacal if/ Sindrome de Goodpasture . En cl sindromc do Gou)dpasture sc dctcctan anticucrpss trcntc a la mcmbrana basal glonicrular 2i3) . I'ara dcyuc scat cap atcs dC unirsc al rillon in tiru niostrar yuc cstos anticucrpos puccicn prmocar etcctos p .ttologicos sc Ilcs-o a cabo tin czpcrintento dc trautsferencia . Sc clMcron los anticucrpos dcl ritiom do tin pacicntc quo habia tallccido comet CUr1SCCLICtttla de csta entcrntcdad, c SC incectaront en pri mates ttls'OS antigcnos rcnalcs Iran suticicntcnictuc parccido)s coin() pare que estos anticucrpos sc fijasen en la nicmbrana basal glontcrular. Los mollos a los yue se imectaron los anticucrpos taIlccicron m .is tardc Comoo coonsccucncia dc glomcrulonctiitis . Trastornos sanguineos. La anemia IICtttolitiC .t autoinnnutitaria \ la purpura tr(,mb()citopcnica idiopatica sc dchc a la sintcsis dc autoanticucrl ()s lrcntc a los critrocitos \- I .ts playuctas, rcs pcctisantcntc . Id srndroonic primario por antitiostolipidoo sc caractcriza por tcnomcnos trombocmbolicos rcpctidoos s',1bort()s s . sc debt a la reacci6n dc autoanticuCrpos (tome a cardiolipina c la gducoprotcina 1-02 .

Parece que los inmunocomplejos desempenan tin papel patogenico en la autoinmunidad sistemica

En loos pacicntes c()n IES sc dctc~t .m iiti ;)urn,)c()mplcjo)s d(autc) .uttigWl1(, \ anticuCITo yuc sc dcp()sitan cn Ios rinoncs, I ;t pid, las Jrticul :tti()11cs s' Cl pleso coro)i(ico) c induccn rctcciones de hipcrsensibilidad dc tipo I I I comp ]as yuc sc hen descrito en cl capituloo ? ;, . Los pacicntes con una dcticicincia genctica dc los pri-

Anomalias de absorcion de B 12 en la anemia perniciosa normal dieta secretion por parte de las cclulas parietales anemia perniciosa dieta

secretion por parte de las cclulas plasruaticas vitamina B, 1 absorbida en el intestino ausencia de absorcion de la vitamina B , Z

Fig . 28.12 . Aglutinacion de espermatozoides . La presencia de autoanticuerpos frente a los espermatozoides pucde dar lugar a una aglutinacion entre sus cabezas (1) o entre sus colas (2) .

Fig . 28 .13 . Normalmente, la vitamina B,, de la dieta se absorbe en el intestino delgado en forma de complejo con el factor intrinseco (IF) quo sintetizan las cclulas parietales de la mucosa gastric, . En la anemia perniciosa se sintetizan a nivel local autoanticuerpos especificos del factor intrinseco, quo se combinan con el e impiden quo transporte la vitamina B,, .

Etiologia

37 3

En Cttanto a los anintalcs tic cxpcrintcntacion, los ratones Iii brides do Ias ccpas Nueva Zelanda negra ~ : NuCSa Zelanda blan ca desarrollan espont ricamcnte I .ES merino, que se caracteriza POI - una ;-IomcrLllotlcfritis inducida por inmunocomplejos v la prcscncia do ttttoanticuCrpas anti A1)\ . El Itccho do quc las nIC didas CnCaminadas a suprimir la rCSI,uCSta innutnitaria ell estos animalcs f p. ej ., CI tratamicnto con anti-( :1)41 induces la tlcsaparicion tic la csferntctlad \ prolongan cl pcriOLIO tic supers i\Cncia dcnntcstra la intcr\cncioin de mCCanjsntos atttojnnutttjtarios en la misma 28.1-1 ; . I .as crosiones yue sc produccn en el hucso ~~ cl cartilago de los pacicntcs con artritis rcumatoidc cstan mcdiadas por macr6fagos ~ . fibroblastos Cstjnutlatlos por citocinas tic Ia ., celulas T acti\adas por los innutnocontplcjos producidos en CI Curso do una intensa reaccioin inmunotloigiia ac ;xcitia en d scno del trjido~ sinovial . Los complejos sc pucoicn producir por la asociacioin tic los factorcs rcumatoitics tic tipo IgG cspecificos para Ios dominios

meros componcntcs do la via del complcmcnto climinan mus oral Ios innttm0COmPICjos, resultando cspecialmeste suSCCptibles a desarrollar LES.

Fcy, proceso quc SC \C tacilitado por la importautc dcticicncia de galactosa terminal en los oligo sacarido~s del Fc ligado al cxtrcmo N terminal . Esta glucotorma sin galactosa tic IgG presellte en los connhlejOS pucde cxaccrbar las rcaccioncs inflamatorias mediantc las rcaccioncs con las protcinas ligadoras tic manosa v IN F.

ETIOLOGIA Hay celulas B y T autorreactivas que persistent incluso en los individuos normales I'csc a Lt coomplejidad de loos ntccanisnuos dc ticlr-ioin ]tic inducCn la all tooto~lerancia durantc cl proceso, tic desarrolloo tic los lintocitos, cl organisnto conticne una Bran cantidad do lint6citos potencialmcntc autorrcactitos . Este cs cl caso de ]as Celulas - P u micas I tinxtCitos t title not son climinatias por AL ,,till stibcomjunto do peptidots propios f epitopos propios Y . Norntalntcntc, las ( 1'A timicas portadoras do till cpitopo propio pronuICSrn la SCICCCioill nCgatna yuC da lugar a la ccstrucci6n do ] .is ciaulas T auto~rrc,tctjsas . Sin embargo, cxistcs algunos epitopos cripticos propios quc apareccn cn las (PA a concentraciones rclatisamcntc bajas, poryuc no son proccsacios clicazmentc V ''o poorytic prcscntan baja afiniclad por los surcos tic las moleculas ('I'I I, por to yuC no soil capaccs tic induCir tolerancia cn las Cclulas T autorreacti s'as ft1. 28.15) .

Supresidn de las enfermedades autoinmunitarias NZW (Nueva Zelanda blanco) NZB (Nueva Zelanda negro)

Los epitopos cripticos propios no induces tolerancia en las eel . T autoanticuerpos anti-ADN, glomerulonefritis por inmunocomplejos autoanticuerpos anti-ADN autoantigeno

timo

1 :100 200 400

--T 800

T1 .600 titulo medio 3.200

seleccibn negativa de las celulas autorreactivas', -

nitr6geno ureico en sangre

10

20 control

30

40

50

D anti-CD4

60 mg/dl celulas T tolerantes celulas T autorreactivas

Fig. 28 .14. Los ratones de la cepa Nueva Zelanda negra desarrollan una anemia hemolitica autoinmunitaria espontanea . Los hibridos entre estos ratones y los pertenecientes a la cepa Nueva Zelanda Blanca desarrollan autoanticuerpos anti-ADN y glomerulonefritis mediada por inmunocomplejos, como los pacientes con LES. La inmunosupresion mediante Ab monoclonales frente al marcador CD4 de las celulas TH reduce considerablemente la gravedad de la glomerulonefritis y el titulo de autoanticuerpos frente a ADN bicatenario a los 8 meses de edad, to que demuestra el importante papel que desempena el sistema inmunitario en la etiologia de esta enfermedad . (Seg6n datos de D. Wofsy y cols ., J Exp Med, 1985 ;161 :378 .)

Fig. 28 .15. Los epitopos propios que aparecen a altas concentraciones y asociados a moleculas CPH sobre las celulas CPA una vez procesados epitopos dominantes, y son potentes estimulantes de la elimination o anergizacion de las celulas T autorreactivas en proceso de desarrollo, de tal manera que solo abandonan el timo las celulas T que presentan tolerancia frente a estos epitopos . Los epitopos propios de concentraciones may bajas en la superficie de las CPA se denominan cripticos, ya que no son capaces de eliminar las correspondientes celulas T autorreactivas, que a continuacidn pueden formar parte del repertorio periferico de celulas T adultas.

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

Muc11os autoanti ;`cnos inLIuccn la sintcsis do autoanticucrpos en aninaales non-ntales cuand(( soil imectadors :tsociadoas a tin ad a on ante, to quc dcnnrestra la existcncia en la pohlacioin normal do cclulas B autorrcactisas, do las quo: pucden icicntificarsr An[nas (l' . cj ., trrnte :a la tiroglohulina I . Los indic iduos nornaalrs pot SMl tanlbicn celulas T autoarrcactivas, conlo denurestra cl 1lecho CIc title CS posihle olucnct lincas do cclulas '1 con acticidad autoinnaunitaria nacdiantc la rstinntlacion LIc cclulas - I - circul :uatcs normalcs con cl autoantigcno adccuado I p . cl ., protcina blsic1 do michna} c I1= 2 .

La autoinmunidad es inducida por antigenos

Suponicnd(~ quc caiman cclulas I> .uuo(rrc .1cticas- su prolifcracion t . la production dc anticucrpos pxiria scr inducida por autoantigcnos o por otros sistenaas, como actis adorcs policlonalcs incsl)ccificos o rcdes idiotipicas is, f16. 28 .1 .`, . La e.xistencia dc autoanticucrpos do alta afinidad gcncrados nlcdiantc mutacioin sonaatica, tin proccso quo : rocluicrc la prcscncia do cclulas T V autoanti;'cno, denule,tra clarantentc title las cclulas B soil actisad:ts por la prescncia dc antigeno . Adernas cxisten autoanticucrpos ti-cntc a conjuntos complctors do antigenos, quc cstan fiarmadors pot' disersos cpitopos unidos a la misma naolccula autodntigenica . \o cs ficil inaaginar otro sistcrtta capaz do clay 1ugar a rcspurstas tic anticucrpor sinltrltanc :as trcntc a ditcrcntcs cpitopos dc una misrna mole cull quc no sea la prescncia del propio autoantivcno . Los ditcrcntcs componentes ntoloculares dc los organulos intracclularcs ip . ej ., los nuclcosornas o los , spliccosomas~" que apar'eccn en tiarnaa dc ccsictilas sobrc la supcrficic dc las cclulas apoptoticasl o los antigenos rclacionados con tin mismo organo !p . rj ., la tiroglobulina \ la peroxidasa tiroidca) tunbien pucden day I11gu- a la production dc autoanticucrpos en tin inditiduo, dc la rnisma mantra quc 1,1s ag,tupaci(nlcs do .urtoantigcnos cicscritas antcriormcntc . l .a prucha naffs dirrcta dc quc la autoinntunidad cs inducida por antigenos surge dc los CSC11diOS Ilrs ados a cabo cn la cepa do porllos obesos quc, CUt11o SC lay indicado antcriormcntc, desarroILu1 cspontancanaentc una cnfcrmcdad til'OidCa tic naturalcza autoinnaunitaria . ( :uando se cztirpa a cstos polkas cn cl motncnt(o del nacimiento la glindula tiroidca i la fircntc do autoantigcnol, I((s aninralrs nmduran no Ilegan a sintetizar aut((anticuerpos antitiroridcos (ful . 2(".16) . Adcnras, la cztirpacioin do la glindula tuna \oz quc SC Ira dcsarr(tllado la entcrnardad tiroidca autoinnaunitatia induce una notable disnainucion dc la concrntracio'an de autoanticucrpos antitiroiclros, gcncralmcntc hasty nicclcs indctcctahlcs . Sc lain rcalizado cspcrintcntos similarcs cn ccpas do ratoncs

diabcticos no obcs(>s i \()I)), quo sin en conio modelo para la diabetes autoinnTtrnitaria humana . La dcstruccion quimica dc las cclulas 11 laacc quo : disnainuta CI nurncro do anticucrpos p :utcrc :iticos . El trat.urnicnto con A1)\asa de I()s rat((ncs coil lupus nlciora la cnfcrmcdad, posiblcnlentc al oicstruir Ios conaplojos innaunitarios potencialmcntc patogenicos . Las cclulas T son cscncialcs cn cl desarrollo do ]as entcrrncda dcs autoinnntnitarias . La alta afinidad \ 13s nnrtaci(ntes sontaticas quc caracterizan a los autoanticuerpos de clase IgG se general en tin procrso en cl titre intercienen acticantrntr las celulas TH . Mcdiante la utilizacioin dc modelos animalcs so: ha tiertaostrado la participacioin de las cclulas Ten las entcrmedades :uatoinnaunitarias 7 1 i, pcro csto cs nays dificil dc dcmostrar cn cl caso \ . pigs . tic las entcrnacdadrs hun1 :ut :ts . Sin cnthamo, se ban aislado clones do cclulas T cspccificas del tiroides a partir dc las glandular dc pacicntcs con tirotoxicosis, y los tratainicnios anti-( :1)-1 pucden toner cfcctos hcncticiosos en pacicntes con artritis reunaatoide i;al igual yuc cn aninaalcs con cntcrntcdades autorinmtlnitarias ; t . fir7 . _'8.141 . Acicmas, la asociaci6n cntrc las cntcrmcdades autoinnuuaitarias s . detcrminadon tit,os dc ( :l'H fa-. )iq. 28 . `) prohablcnacntr son dchidas a la tuncion quc dcscnapcft :ui las molcculas ( :pH en la prcscutacicin de antigenos a Ids celulas T . En las entcrntedadrs especificas do oirgatto cxisten prucbas irretirtablcs dc: quc ]as cclulas l' responder ti-ente a los antigenos presentes en Ios cirganos agrcdidos . Sin embargo, ell la autOinnuutid id no cspccifica do organo so: sahc nun' poco accrca de cuales soil los : rcconoccn Ids cclulas T . L'na posibilidad cs quo: ]as antigenos quo cclulas T no detecten cl pcptido :uttigcnico coamencional f to que probablenaentc cs cicrto( cn las rcspurstas ti- cntc al Al)yl, silo quc rcconozcan 1111 idioltil,o del anticuer-po I tin detcrminante antigcnico tic la region \' ctel anticucrpoY . hcsdc cstc punto dr vista, cl LES, hen- cjcrnplo, scria una cnfcrmcdad <~iclio>tipica ,, , do acuerdor con el modelo quo SC natrcstra cn Ia firlura ?8.1-. Ell rstc model() se suPOnc quo: las celulas 11 produccn nornaalnicntc pcqucfias cantidades de autoanticucrpos mcdiante sus genes do: linca germinal . ( :uando cstos anticucrpos tornran contplcjos con el autoantigrno, pucden set capturados por [as ('RA i incluidas las cclulas B i, y los componrntes del complejo, entry Ion que sr cncucntra cl idior tipo del anticucrpo, pucden scr prescntados a las cclulas T. A continuacioin, las cclulas '1' csl,ccificas del idiotipo prcstarian su Colahoracioin a las cclulas li pl-Oductoras tic dutoanticucrpo .

Los mecanismos quc controlan el desarrollo de la autoinmunidad pueden sec eludidos de diversas maneras

Efectos de la tiroidectomia neonatal en los pollos obesos

tratam . en ell nacimiento ninguno hemitiroidectomia tiroidectomia sham tiroidectomia
50 100

La similitud molecular con antigenos microbianos que presentan reacciones cruzadas puede estimular a las celulas B y T autorreactivas

incidencia de anticuerpos frente a tiroglobulina (o) Fig . 28 .16 . Como la extirpaci6n del tiroides en el momento del nacimiento impide el desarrollo de autoanticuerpos antitiroideos, parece quc el proceso autoinmunitario es induccdo por los autoantigenos presentes en la glindula tiroidea . iSegun datos de L. C . P . Carvalho y cols ., J Exp Med 1982 ;
155:1255.)

\oarnlalrnente, I :as cclulas'l aurorrcactic -as cirgenrs quc rrconoccn Ions cpitopos a'ipticos prol,ios no SC cncucnn-:ut actit'adas, porquc cl antigcno solo cs prcscntado a hajas conccntraciones por ]as ( :p:1 ~protcsionalcs ,, o porquc cs prrscmado por ('PA ~, no prolcsionales ,, , conto [as cclulas 1i de Ion islotes pancrcaticos o las celulas epitclialrs del tiroidcs, que carcccn LIr Iii y de otras moleculas coestimtrlantcs . Sin embargo, la intccci(in con tin microbio yuc ports antigenos capaccs LIo char lug:u- a reacciones cruzadas con los cpitopos cripticos I ;cs dccir, coil cpitopos conauncsi inducir.i la presencia do una cantidad suficientc de peptidos procesadors cn las (TA conlo para actisar [as cclulas I' autorrcactiaas \ trgcnes . l ; na \ cz actiuclas, cstas cclulas T soil cipaccs de rcco noccr cl cpitopo propio en las (:p:1 no proicsionalcs a. dc rcaccionar coil el, puesto quc ca no es necesaria una sepal cocstinua] .title \ la atidcz por su liana es mayor debido a la regula66n positiva dc las naolccttlas tie adlacrencia acccsorias ijiq. 28 .1(1') . Los antigenos quc prrscntan reacciones cruzadas, es decir, quc posecn cpitopos de cclulas 11 igualcs a los dc cieternainadas nao1cculas propias, tanlbien pucden anular la tolcrancia, pero mcdiantc tin mecanisn1o difer'ente . MUCIMS cclulas 11 autOrrcactisas

Etiologia

no pueden scr antis alas porcluc cn las celulas '1 - (;1)-t - clue deberian prestar su colaboracion sc ha inducido tolcrancia selectisamcntc, sa clue CStaS celulas '1' picrcicn su capacidad dc respucsta a conccntraciomcs Lie antigcno m;is bajas clue Ids CelUlaS B . Sill embargo, estas celUl;ts 11 quo carccen dc co~laboracitin sj clue pucdcn see estinnrladas Ni cl ;uttigcno clue prescnta I ;t reaction cruzada conticnc till epito~por transportador " <cxtranw~ frentc .11 clue las cclulas'1 no hall adcluirido tolcrancia (_/iq . 38 .19) . El proccso autoinmunit:trio puede persistir despucs de la elimination del antigeno c\tratio, si [as celulas B activadas ccntran cl autoantigcno sobrc sus reccptorcs dc supcrlicic y to prcscntan a celulas l' autorrvactiv as clue SUCICn cstar en rcposo, clue empicz :ui a proliferar y se contportan como celulas '1' colaboradoras para la cstintnlacjcin de nuccas celulas B. Una entermcdad quc sc produce como consecucncia dc cs ten tenoimcnos de similitud molecular cs la fichrc rcum ;itica, en la clue sc dctcttan anritucrpos frentc a antigcnos prcscntas cn las ,ilv alas cardiacas . ESTos :uititucrpos aparCCcn tinas scmanas dcspttes del proccso intcccioso ell una petlucna proportion dc los pacientes coil inteccitmes estreptococicas taringcas . Los At, glucidicos dc los estrcptococos prcscntan rvaccioncs cruzadas coil tut antigcno dc las saly - ulas cardiacas, dc tal mantra clue I ;t intcccioill puede anular la tolcrancia dc las celulas'1' frcntc a esic antigcno . - amhicn puede csistir rc;tctis idad cruzada entrc H I.A-B27 Y de tcrminadas ccpas do Klchsit ,lla, dando lugar a la cspondilitis an-

quilosante, s titre las proteillas del shtick terntico dc las bacterias s 1)1(4, originando artritis rcumatoidc . ltccientcmcntr sc hall dcscrito cpitopos commies titre Ycrsinia cntcrocolitira s' cl dominio cztrtcclular del receptor dc 1-SH .

La reactividad cruzada de los Ag induce la activation de las eel. TH autorreactivas antigeno microbiano a alta concentration autoantigeno a baja concentration

CPA _'profesional

celula T virgen (baja afinidad)

celula T activada (alts afinidad)

Modelo de colaboracion de las celulas T mediante el procesamiento de complejos intermoleculares en la induction de la autoinmunidad autoantigeno autoanticuerpo natural '

_' ingestion del complejo

captura del complejo

Fig. 28 .18. La incapacidad de las celulas TH virgenes para reconocer Ins auto-Ag en las celulas tisulares, ya sea por baja concentration o por baja afinidad, se puede corregir en presencia de tin Ag microbiano clue de lugar a reacciones cruzadas con el auto-Ag, bien debido a la elevada concentration del mismo o a su mayor afinidad intrinseca ; para clue las celulas TH sean activadas tambien es precisa la presencia de la molecula coestimulante 87 sobre la superficie de las CPA profesionales (1). Las celulas TH activadas presentan a partir de ese momento alta afinidad, debido a la expresion de moleculas accesorias (p. ej ., LFA-1 y CD2), y como no precisan una serial coestimulante pueden reaccionar con el auto-Ag presente en las CPA ((no profesionales,,, como las celulas epiteliales de los diversos organos, y dar lugar a enfermedades autoinmunitarias (2) .

Induction de autoinmunidad mediante Ag clue presentan reactividad cruzada procesamiento y presentation del idiotipo B autoantigeno Ag extrano clue presents reactiv . cruzada

colaboracion especifica del idiotipo

Fig. 28 .17. Un inmunocomplejo formado por tin autoantigeno (p . ei ., ADN) y tin autoanticuerpo natural (de la linea germinal) es capturado por una CPA, y los peptidos originados en el procesamiento del segmento idiotipico de anticuerpos (Id) son presentados a las celulas TH . A continuation, las celulas B clue expresan el autoanticuerpo (~patogeno)) pueden capturar el complejo y recibir la ayuda de las celulas T tras presentar el Id procesado a las celulas TH .

Fig. 28 .19. La celula B reconoce tin epitopo presente sobre el auto-Ag pero clue casualmente aparece tambien en tin Ag extrano. Normalmente, la celula B presenta el auto-Ag pero no recibe ayuda de las celulas TH autorreactivas, clue hall sido eliminadas funcionalmente . Cuando se produce la exposition a tin Ag extrano clue presents reactividad cruzada, las celulas B pueden presentar peptidos procedentes de esta molecula a las celulas T no autorreactivas, con la consiguiente proliferation, diferenciacion y secretion de auto-Ab por parte de las celulas B.

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

En algunos casos los antigenos extranos pueden estinlular directamente a las celulas autorreactivas ()trot n1CCallisn)o 11Jra ootuiar la tot1Crdt1Cla tic IAN CClulas - Ill ;tutorcaCtitas Collsistc Cn la Cstimulacioin tiirccta tic la, CCIuLts oleo toms auton-rcaCti\ -as 1101- In-17C drl 1,ro11iO antigcno o tic otro faCton- cstintulantc . Por cjcntplo, cl lipopolisacarido of cl virus tic I -.11sicin-Rarr estimulan dircct :ulW-ntc ;t la's CCIULIS 11, alguno dc lo ; clones actitados pucde prodtlCir autotantiCUerpos, aunqur Cn ausenCia do Colahoraci(in p(tL I,ar'IC de Lts CCIttlas l - cl titttlo V la afinidad tic dichos anticucrpos not suclcn scr clcx,dos . La autoinmunidad puede sec consecuencia de una regulacion defectuosa de las citocinas, de la expresion inadecuada de moleculas CPH y de anomalias en los mecanismos de supresion PJVC(:C Liuc l .ls anonttalias cn lots I)LOCCSON rr,;uldtiortcs tic la rrti tic citotcin,ts t,tnthictt Pur&tt liar lugar a la acti\acion tic las celulas T ;tutonrrdCticas. Fsta dfirntaciotn NC ha drmc)strado cxpcrillwntal ntcntc n1Cdiantr la introdUCCiull do tin transgen tic intCrtcrcSn .y ( IFNyi Cn la, celulas [i tic ION, WOWS 11,u1crcatiCOS . ( ;uantio cstas Cclulas cxprrsan cl transgen ;t la tnaxinta intcnsidad sc pl-OdUCC HIM rcgulacioin po,itita tic los genes (:PI I dc class 11, lot quc da lugar a Lt ticstruCCi(in autoinmunitaria tic Ias celulas do los islotes (fir7 . ?8-(1') . Esto not Cs Sint111cn1cntc cl resultado tic tin 11r0CCSo inflant.tt()rio indiscriminado c incspccificot gcncrado a ni\cI local por cl IF\;,, xa gtlC al trasplalltar islo tteS nOrm tics a otro cntplazamictuo ttnthicn son rcchazatiOS, Ic) quC tirntttrsrra la cxistc ncia de autorrcactit idad tic laS celulas - P esj)CCificas tie Lts CelULtti I1 ;tttcrcaticas . La mcra expresion tic moleculas (IPH tic class II cn la supct. ticic CClular n() Cs tin 0411111,110 sufiCirntr CUt1t() 11.11-, aCtilar las CcIttl .ts I autorrcacticas \ir` ;cncs, .1unquC I)urtlr scr una CondiCioin nccesaria par, quC estas celulas SC Com irrt .ut cn dianas par, las cc lulas T auton- rcactixas acti\adas, pox- I(t yuc CI LICSCUhrinticnto tic quC la, Cclulas dc pacicntcs coil tirotoxicosis sintctizan actil antcntc

Autoinmunidad por anomalias en la regulacion de citocinas

IFNy

nutlcculas ( :PI I dc claw II que Ias hair rccotnotcihles po)r parte dc las cclulnS T (11)4' (celulas fH l constituvo cn to dia till h.1llazgo t1111V contcntado IJiq. 8 .?1) . En cstc sentitlo cs intcrcsantc cl hcChot de quc I :ts ccpas dc aninialcs quc tiendrn a dcsarrofar enter mcdadcs autoinnnillitari .1s cxpresall moleculas ( :PH do class 11 con mas facilidad quo: las ccpas no susccptilllrs A scr estintulatias n1CLhAntc I F\ ;,. Entrc rstas ccpas coil tCttolct1Cia a dcsarrollar Oros CCNoti atrtoillnxrrtitarios sc encucntran la rata tic 1,C\\ i (cnCCtalitIS autoinmunitaria c xperintental }, los pollos obestts i tiroiditis ) 1 las rates U1 ; (quc desarrollan diabetes autoinmunitaria ) . I .a afirmaci(m do yuc 1 .1 production dcscquilihrada dc citocinas 1,uctic IlrOVOCar fcn(imcnos autoinnuutitarios tanthien sc xc rcspahiada por cl hallaz ;~ot incspcratfo tic quC cl factor dc nccro sis tunutral atentia la cntcrntcdad autoinmunitaria dc los stones hibridots \7,B\ZNV (tras la introduccirtn en lots misntos do tin transt,, cn ticl T\1 , i.~tlenras tic 1 .1 intiitcrencia- ante los epitopos cripticos pro piots, es posiblc quc cxistan otrots nlCCanisntos reguladorcs, cntre los tluc Sc podrian cncontrar LIS celulas Ts, el efccto suprcsor de algunas hormonal (p . cj ., ]as cstcroidcas ;I ~- citocinas (Como, TGFfi), t . los prodUCtos tic los ntacrofagos (/ill. .' .R.22) . Los do:tccto>s do Cualquicra dc cstots mcctnismo)s pucdcn auntentar la susccptihilidad frcnte a las cntcrmcdadcs autctinntunitarias . Las alas tic retroalintcntacio>n entrc Its celulas I colahoradoras y los nt ;ttrOtagos a tras- cs dcl cjr Itil,otalam(rhipofisario rcsultan tic cspccial intcrcs, to quc los detictos cn tlitrrsts tunas tic has misntas Lictcrrninan ditcrsas crttcrntcciatics .tutoillntunitarias ; - liq. ?8.?;i . Potr cjcntplct, Ion pacicntes corn artritis rcuntatotidc prcsenttn ill tclcs hajos do corticosteroidrs circulantcs comparados corn los coattr(tlrs V, ticsl,ucs do I .1 Cirugia, auntyuc 1,rOd000n g,tatttics Calltidatlcs tic 11 .-1 r II .-6, tin tlctccto Cn Cl r1UCICO paratcntricular intpidc que auntente cl ni\cl dc A( -TI I \, cn cotnsecucncia, la pros duccio ll tic corticostcroi(icx . Eos tantiliarrs aparententcnte sallos tic ION 11adcntcs con I .ES prcscntan till ccfccto cn I .1 pr(xiuccion dc celulas Ts inrsl)CCifiCas ILIuC tanthicn Ilrrsrntan ION, propios pacicntcs ;S, lot quc sugierc yuc rstr LlCtcCtot Cs sul.ur,entr uno de los ntliltiplrs tactorcs quC clan lugar a la aparicio)n dc IT.S . Es possible quc 1,,11-a quc Sc 1lrodUZCa 1111 .1 rcsllucsta uttoillllltutitai-ia sea prcciso yuc talk ttt:ls L1c tin C1Ctt1Cttto tic la rrd su11rcsotra, \ cn Ios pacicntcs coil I.ES puctic quc SCa ttCCCSaria aticnris la 1lrcScncia dc oral anoartalias cn las Cclulas T rcguladon- as cspccificas tic antigcno) of idiotipo). l'n suhtipo tic celulas reguladoras ( .l)4 presrntes

eel. 14 de los islotes pancreaticos

eel . fi de los islotes recien trasplantada

diabetes

destruccion

Fig. 28 .20. La introduction de tin transgen que codifique IFNy en tin pron)otor de la insulin, da lugar a la expresion y secretion de grandes cantidades de IFN., por las celulas pancreaticas . Esto induce una regulacion positiva de la expresion de moleculas CPH de clase II y la activation de celulas T autorreactivas, por mecanismos que no se conocen bien pero en los que puede que intervengan las CPA ,, profesionalestt . Las celulas T activadas inician la destruccion autoinmunitaria de las celulas It . La rapid, destruccion de los trasplantes de celulas de los islotes procedentes de animales singenicos norrnales (celulas geneticamente identical pero que carecen del transgen) demuestra que este fenomeno es una verdadera autoagresion .

Fig. 28 .21 . Cortes de tiroides humano tenidos para detectar la presencia de moleculas CPH de clase II . 1) En e. tiroides normal las celulas foliculares no se tinen; hay una celula dendritica aislada e intensamente tenida . 2) En Ins pacientes con tirotoxicosis (enfermedad de Graves) el citoplasma de las celulas tiroideas contiene gran cantidad de moleculas CPH de clase II : la actividad de sintesis de estas moleculas es muy elevada.

Tratamiento

en ratones jci\cnes y sanos dc la cepa NOD puedc impcdir la transterencia Lie la cntcrnicciad a traces de las cclulas csplenicas do los animates diabeticos a los stones NOD congcnicos para cl rasgo do la innumodeficicncia combinada grave : cafe subtillo rc gulador Sc picrdc en Ios rato ncs macorcs .
Los defectos previos del organo diana pueden incrementar la susceptibilidad frente a la autoinmunidad

1'a hCmos ll1Cnci(Waa , Cl aumCnt0 LIC ~Cit~ihilidad yuC C .Xpcri mcntan las cclulas diana dc hos aninlaICS SusCCptibICS a dctcrminadas enfermedades autoinnnmitari as cuando sc induce un aumcnto dc [aezpresicin dc molcculas CPI I dc claw 11 mcdiantc IFN-; . Hay otros datos clue indican quc puedc cxistir un detecto pro\ -io en cl cirgano diana . Ell CI modclo de autoinmunidad tiroidca cspon tanea dc la cepa de pollos obesos ( v. pag . 371 l se ha clemostrado L1ne cuando se suprimc la producci(Hi endcigena tic TSH mcdiantc n-atanticnto con tirmina, la capttcicin dc s-odo por parte Lie la gLindula tiroidca dc los animalcs obesos cs nrUCho mayor yuC la quc sc obscrc a cn los animalcs pertcnccicntcs a ccpas normales . Ademas, csto no es debido a ningun ctccto estimulantc dc natu raleza autoinmunitaria, ya clue los animates ill munodeprimidos captan atin mas dodo (fa7 . 38.3-1} . Es interesantc cl lteclto dc quc los pollos dc la cepa Cornell 1 dc la clue SC obtus o la cepa de pollos obesos mcdiantc dctcrntinados cruccsl muestran una capacidad dc captaci6n dc ~-odo aun nras CIC\ada, pero, sin embargo, estos animates no desarrollan tiroiditis cspontanea . Esto podria set- ccmsccuencia Lie algun tipo do comportamiento anormal del tiroidcs yuc, por si solo, no basta para inducir la aparicicin dc la entermcdad autOinnuulit .Iria, pcro clue ConurihuVC Cn cicrta mcclida a 1 .1 clccada susceptibilidad caracteristica do la cepa dc pollos obesos. Estas obsers acioncs sc lian confirmado mcdiantc experimentos en clue sc transfiricron cclulas linfbicics dc pollos obesos de cdad avanzada, quc ca padecian enfcrmedad tiroidca, a otros pollos . Estas cclulas induces tiroiditis en pollos jovencs dc la cepa dc pollos obc SOS c dc la cepa (orncll, pero no en otras ccpas histocompatiblcs Mecanismos reguladores clue controlan la autoinmunidad

yuc carecen tic] detccto primario quc liacc a las primcras cepas sus ceptiblcs Creme a la enfcrmedad autoinmunitaria . Otras situaciornes cn las yuc se modifica la prodUCCicin dC antiCUcrpos inCIuNCn la diabetes, ell la clue uno dc los lactores gcncticos de riesgo guarda rclacioin con un marcado~r dc microsatclites localizado Licntro del factor dc transcripcioin clue co>ntrola la \Clocidad dc prodUCCirnt dc la insulina, \ 'la arthtis rCmnatOiLIC . Cn la clue la glicotirrnm anLimala sin galaCtcna (IC Ig( ; cs nun ahundantc . Todos cstos expenmcntos co~nfirman la participacilm dc multiples lactores cn cl dcsarroIILr dc IL>s proccsos autoinmunitarias prolomgados .

VALOR DIAGNOSTICO Y PRONOSTICO DE LOS AUTOANTICUERPOS

Sea Coal sea la rclaciim cxistente entre Ios autoanticucrpos ~ cl proceso patolcigiar, estos aut<rantiCUU -pos sucks aportar datos importantcs para cl diagncistico dc la enfcrmedad . Un e\cclcntC eicmplo cs la dctcrminacicin do anticucrpos antintitocondrialcs, yuC SC utiliza para cl diagncistico dc la cirrosis biliar primaria p. 38.15) . Antiguamente cl diagn6stico de esta cntcrittedad Cxigia la eiccucioin dc una laparotomia cxploratoria, yuc solia reprcsentar un pchgro debido a la clad v ail estado fisico dc los pacicntcs . Los autoanticucrpos, especialmente ION dirigidos frente a las cclulas ii do los islotes pancreaticos, tambien pueden teller valor predictiso, comp se muestra cn la /iaamrr 38 .10 .

FrCCUCiitCnunrC lns lmto~mas Lie [as cntcrmcdadcs autOinntculi tarias cspCCiticas dc or>;ana sc pucdcn corrrgir mcdiantc Control ntetabolico . Por ejemplo, el hipotiroidismo se puedc controlar mcdiantc la administracioin de tiroxina v la tirotoxicosis mcdiantc tarntacos antitiroidcos . En la anemia perniciosa se imecta dircctantcnte s itamina B, \ en la ntiastcnia grave se administran inDefectos en el asa de retroalimentacion hipotalamohipofisario-adrenal/citocina en los procesos autoinmunitarios n6cleo anterior paraventricular anterior hipotalamico . 4.? ~0 5 .' --~ -I- ,, " glandula suprarrenal ACTH

TRATAMIENTO

indiferencia,

citocinas, -' IL-1, IL-6 _., auto rreactividad --,` production de citocinas Las celulas TH autorreactivas no son estimuladas normalmente por los epitopos cripticos 0(indiferencia), pero en caso de clue se actives son mantenidas bajo control por una red de senates supresoras, entre las clue se encuentra la supresion especifica de Ag por las celulas T, clue puede ser directa o mediada por citocinas supresoras como IL-10 y TGFIt . La supresion inespecifica (mediada por prostaglandinas) reduce la capacidad de respuesta de las celulas TH . En caso de clue la capacidad de respuesta de las celulas TH sea elevada, por ejemplo debido a altas concentraciones de receptores de IL-2, o si fallan los mecanismos supresores, el equilibrio se rompe y aparecen las enfermedades autoinmunitarias .
Fig . 28 .22 .

"

glucocorticoides

La production de IL-1 es deficiente en los stones no obesos (RN0) (1) Y en las ratas predispuestas a la diabetes IBB, 2) y la enfcrmedad se puede corregir inyectando la citocina . Igual sucede en el caso de TNFoa en el raton NZBxW predispuesto al lupus (3)- Los pacientes con artritis reumatoide tienen una pobre respuesta hipotalamica frente a IL-1 e IL-6 (4) . El eje hipotalamo-hipofisario funciona mat en la cepa de pollos obesos y en la rata Lewis, clue tiende a desarrollar enfermedades autoinmunitarias experimentales mediadas por el adyuvante de Freund (5) . CRH : hormona liberadora de corticotropina ; M0 : macrofago .
Fig . 28 .23 .

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

Captacion de "'I por el tiroides de pollos tras la supresion deproduccion de TSH cepas normales exogamica K RLC RLR RLR cepa de pollos obesos cepa Cornell

Utilidad diagn6stica de los Ab antimitocondriales cirrosis biliar primaria cirrosis criptogenica hepatitis cr6nica activa obstruccion biliar extrahepatica colestasis inducida por farmacos r 100 0 50 pacientes con anticuerpos antimitocondriales 1%1 Fig. 28 .25. La determinacidn de anticuerpos anti mitocondriales mediante inmunofluorescencia indirecta, en conjunci6n con la biopsia hepatica percutanea, se puede utilizar para el diagn6stico diferencial de estas enfermedades . Una alta proporci6n de pacientes con cirrosis biliar primaria poseen este tipo de anticuerpos, quo solo aparecen en menos de la mitad de los pacientes con cirrosis criptogenica o hepatitis cr6nica activa ; en las otras enfermedades la presencia de estos anticuerpos es poco comun.

C .P .M .

(x10 ')

Fig . 28.24. La captaci6n de "'I por el tiroides de los pollos obesos y de los pollos de la cepa Cornell, parecidos a los anteriores, es mucho mas alta que la de las cepas normales . Se suprimi6 la produccidn end6gena de TSH mediante la administraci6n de tiroxina ; por tanto, la captacidn de I 'l l que se midio es la que no depende de TSH. Los valores resultaron mucho mas elevados de to normal en los pollos obesos, que desarrollan espontaneamente tiroiditis autoinmunitaria, y atin mas elevados en los pollos de la cepa Cornell, que no presentan autoinmunidad y son la cepa originaria a partir de la cual se obtuvo la cepa de pollos obesos . Se demostr6 que esta anomalia no era mediada por mecanismos inmunitarios mediante la induccidn de inmunosupresi6n (barras azulesl, que de hecho aument6 la captaci6n de "'I por parte de la glandula tiroidea .

Valor predictive de los autoanticuerpos

9 diabetes mellitus a los 2 anos 'ca- indice) haplotipos HLA

diabetes mellitus a los 7 anos 3 -4 --

OEM

Ab frente a hip6fisis y a L c6lulas de islotes aparicion de la diabetes I

Fig. 28.26. Estudio prospective de una familia con diabetes mellitus insulinodependiente (se muestran las edades de cada una at de los miembros de la familia en memento del inicio del estudio) . El hermano quo compartia un haplotipo con el case indice poseia Ab fijadores del complemento frente a las c6lulas de los islotes y desarro116 diabetes dos anos mas tarde.

hihidorcs de la colinesterasa . ( :candor la ttnci6n del organo sc Cncuentra an alada y no sc puede administrar un tratamicnto her monal sustitutiso, comp ocurre en la nctritis del 1 .1E v en la artritis reuntatoide cr6nica, sc pacden utilizar injertos Lie tejidos o dispositicos mecanicos sustitutisos . En cl case do loos injertos tisulares puede scr precise prortcger al tejiolor injertado> Lie los proccsos inmunitarios que destruteron el organo original . 1'.I tratamicnto innuntosuprcsor clasico con agcntes antimi toiticos puede Set- utilizado para atenuar ]as respuestas ininunitarias, pcro dchido a los pcligros que supine solo se sacle apticar en cases en Icrs yuc peligra la silo del pacicnte, comp en cl LES y en la dermatorniositis . To dasia no se conocen bien las posibiliciades de la ciclosporina v de otros agcntes parecidos, si bien se ban conseguido resultados Cspectacularcs en cl tratarniento de la diabetes de tipo 1. Como es I6gico, en cl case de las entermedades reumaticas se administran farmacos antiinflamatorios v se est.i n consiguiendo resultados prometedo~res tratando a los pacicntes con artritis reumatoide con bajas dosis de estcroides para corrcgir las altcraciones cn su producciorn relacionacias con las altcraciones Cn cl asa do retroalintentacion suprarrcnal. ( ;ttando se conozcan nicj(w los dctectos exactas title dan lugar .t cada una do estas entermedades t, se disponga de mejorcs sisternas para manipular cl cstado innurnitario de los pacierttes, es probable que pucdan ser utilizados algunoos tratannientos que en la actualidad se encuentran atin cn tase experimental qO. 28.2 .') . En concrcto, se ha conseguido tratar con exito algunas enfermcdacies autoiruttunitarias experimcntalcs administrando el anti gcno para inducir tolerancia oral, mcdiante la inhalacio5n de peptides auto~antigenicos V sits analogos, c mcdiante la ~~s acunacion~, con pcpticios Lie[ receptor csl)ecihco para cl antigeno de las celulas I autorrcactisas . 1'atO sugiere yuc la C,tinnrlaciun Lie las funC10 11Cs strpresoras normales, incluida la red idiotipica, puede ser un carnino prormetedor.

Tratamiento

Tratamientos actuales y potenciales de las enfermedades autoinmunitarias

diferenciacidn activacidn y proliferacidn maduracion action efectora

plasmaferesis

injerto mecanico o tisular

~ {autoanticuerpos

trasplante de medula osea

tolerancia inducida por Ag o peptidos, -balas magicas ,,

anti-IL-2R anti-clase II anti-CD4, farmacos antimitdticos i

irradiation total de ganglios linfaticos,factores supresores de las celulas T, antiidiotipos

s hipersensibilidad --- ~ mediada por cels .

Fig . 28 .27. Los tratamientos utilizados en la actualidad para corregir los efectos patologicos de las enfermedades autoinmunitarias se muestran en recuadros azules, mientras los que puede que Sean utiles en el futuro se muestran en recuadros verdes. Los farmacos antimitoticos se administran en casos graves de LES o de hepatitis cronica activa, y la utilization de agentes

antiinflamatorios en la artritis reumatoide esta muy extendida . Las enfermedades especificas de organo (p . ej ., el mixedema primario) se pueden tratar mediante la administracidn del componente deficitario (p . ej ., hormonas tiroideas) . Cuando es preciso Ilevar a cabo un trasplante tisular, los tratamientos inmunosupresores pueden evitar que se produman lesiones en el injerto .

ZPor cue es poco probable que el ADN sea un autoantigeno timodependiente y mediante que mecanismos se podria convertir en uno de ellos? ~Que datos indican que los autoanticuerpos desempenan un papel patogenico en las enfermedades atltoinmtinitarias? Se inyectan a un raton transgenes que codifican : 1) una glucoproteina virica del virus de la coriomeningitis linfocitaria (VCML) en un promotor de insulina y 2) el TCR de un clon de celulas T que presenta citotoxicidad frente a las celulas infectadas con el VCML . El raton solo desarrolla diabetes cuando es infectado por el VCML . ZPor clue?

~C6mo pueden predisponer determinados haplotipos CPH a ciertas enfermedades autoinmunitarias? " ~Que hemos aprendido acerca de las enfermedades autoinmunitarias mediante el estudio de la ceps de ratones obesos? ~Como se podrian manipular las celulas T para tratar las enfermedades autoinmunitarias?

Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

LECTURAS ADICIONALES
Albany S, Keystone EC, Nelson JL et al. Positive selection in autoimmunity abnormal immune responses to bacterial dnaJ antigenic determinant in patents with early rheumatoid arthritis, Nat Med 1995 1 1:448-52Bach J-F led) Symposium on autoimmunity . J Auto;mmun 1996 ;9,205-304 . Brostoff J, Scadding GK, Male D, et al Clinical Immunology . London : Gower Medical Publishing, 1991 Chapel HM, Haeney M Essentials of Clinical Immunology 3rd edn . Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1992 . Gelfand EW (ed) . Intravenous immune globulin : mechanisr-i :~ ,t a:',ion and model disease states . Clin Exp Immunol 1996104 l .jpol 11 :1-97 . Kingsley G, Lanchbury J, Panayi G Immunotherapy it rl -ieun _tic disease Today 1996,17 9-12 . Lanzaveo 'ua A Identifying strategies for immune intervention . Science 1993,260 937. Lokki M-J, Colten HR . Genetic deficiencies of complement . Ann Med 1995 ;27:451-9 . Lichtenstein LM, Fauci AS leds) . Current Therapy in Allergy, Immunology and RheumatologySt Louis, USA:Mosby, 1996 . Peter JB, Shoenfeid Y (eds), Autoantibodies . Amsterdam: Elsevier, 1996 . Rademacher T, Williams P, Dwek RA Agalactosyl glycoforms of IgG autoantibodies are pathogenic . Proc Natl Acad Sci USA 1994 .91.6123-7 . Rich RR, Fleisher TA, Schwartz BD, et al (eds) Clinical Immunology. Principles and Practice . Vols I & II . St Louis, USA Mosby, 1996 Vandenbark AA, Chou YK, Whitham R, et al Treatment of multiple sclerosis with T-cell receptor peptides Alai Med 1996,2 1109-15. Weiner HL, Mayer LF, eds . Oral tc erance : mechan sms and applications. Ann N Y Acad Sci 1996 ;778 453. Wicker L, Wekerle H (eds~ A,itoirimunity . Curr Oprn Immunol 1995 ;6,783-852 . (Several critica essays in each annual volume .)

Tecnicas inmunologicas
Las interacciones antigeno-anticuerpo son la base de mochas tecnicas inmunologicas, en las que se utiliza la alta especificidad de tin anticuerpo para identificar, aislar o cuantificar tin antigeno determinado . Las poblaciones celulares se pueden detector e identificar segun sus marcadores de superficie mediante tecnicas de inmunofluorescencia o inmunohistoquimicas. Las poblaciones celulares se pueden aislar de acuerdo con los marcadores de superficie que posean mediante tecnicas entre las que se encuentran la citometria de fluorescencca (FACS, del ingles fluorescence-activated cell sorting), la separation en placa y la centrifugation en gradiente de densidad . Las pruebas mas importantes para determinar el estado funcional de los linfocitos son las de production de Ab o citocinas, las de proliferation como respuesta a los Ag y las de citotoxicidad .

29

Los inntunologos utilizan un ;t scric do tecnicas quc tambien se entplcan ell otros Campus do: lus ciencins biulcigicas . Por cjemplo, los atttigcn0s V Ios antiCUCrpeK se aislan nteciiatttc las tccnic;u No~ quitniCas \ do fraccionamiento protcico clasicas, nticntras quo las sciuencias de Icts genCS do las nto1CCUlas rcle\ ;uttes tIC"de lilt puntot de vista inmunitario sc cictcrtninan mcdiantc las tecnicas habitualcs do la gcnctiCl ntolocular . Sin embargo, lo" innnmcilogos tantbicn halt dcsarrolladct tecnicas propias basadas principalmcn ell tc has intcraccioncs cntre antj :;cnos \- anticuerpo" . .1 su \cz, cstas halt side aplicadas a nutchas~otras ramas do las Cicncias bioIcigicas . Por cjcntplo, cualquicr moIccula con capacidad antigeniCa pucdc set- dctcctacla ell los tcjidos mrediante tecnicas inmunocitcuiuinticas, t . cl radi0inntunt, :ut,ilisis i RLA i t, la prucha dc

l-t Itctttaglutinao(m hcrntitc' dctrct .t r t ctiantihcar lilt 1,ticlINP, ;t h,tj .ts ~luc 1 .1, (]tic x'n nCCC"trrot Lts tcCnicas dc Contl'alnmltnoCICCtt'ofi)t'CSiS \ CICCtrotorCsis LIc Coltctcs . ell Esta tccnica csta basada ht cipacidad dc I<rs anticuerpo~s para cntrclazar los critrocitos mcdiantc sit union a antigeno" prescntcs ell NIL supci-ficie 29 .v
OHtcCntr,AI(Mcs 111,11

Hemaglutinaci6n y fijacion del complemento

in mttnoabsorcicin ligada a cnzimas HASA, del ingles cuz que_ linked immuuosat-benr assay) sirccn Para CuantifiCar cantidacics nnn poyuCft;t% de es ;ts ntisntas nto1CCUlas . En la actualidad sc utilizan Ciento" (IC tCeniCas inntunologicas difcrcntcs, estado detiicado estc CaPitulo a la dcscripcicin do las mas importantcs.

La reaction de la precipitina anticuerpo libre antigeno libre +

INTERACCIONES ANTIGENO-ANTICUERPO
do las rcaCcioncs an ti-ctw anticticip) titr sti C3h.tcidad para (far lugar ;t precipitados atando sc combinan ell hr()l,orcioncs igu;tlcs () prcixintas ,tl punell la to de cquisalencia . Este tcmimcno sc po ne dc nrtnifiesto reaccioSn CIasiCa LIC ht precipitina, en la quo so inezclan en fase Ijduida till anti,"cno tin anticuerpo i / u7 . 29 .11. ( :uando cstas rcaccioncs se Ilcun a cab() en geles tie agar cs posiblc elitcrenciar cad.t un ;t dc ] .is reacciones antigcno-anticticrint a quo: d;ut lugar ]as difercntes subp()l,laCiemcs LIC uttiCLICrlt()s prcscntcs en el suero LtccniCa LiC innrtutctditu"icin tioblc1 . Las pt~sibilikfdcs Lie csta tccnica sc )tan ido ampliandt,, \ cn la actualidad sircc hart clctcrnti. 29 .2h . nar la rclacic'nt quc c\istc cntrc difcrcntcs antigcnos .4q Sin embargo, algunas ntc/Clan tic antigeno" ,()it dcntasiado complcjas como Para podcr scr analizadas mcdiantc difusion tprecipitacion simples, peer to quo: fuc ncccsario~ ticsarrollar Ios mctodos dc ill ntunOCICCtt()fitrcsis, (]tic Consistcn en scparar Icts anti genus scgittt SILL Cargo olCCtriCl V cisualizarlos (Icspucs ntcdi;uttc prccipitacion ffp, ?9. .>'~ . Estas tecnicas en gel solo perntitcu analizar los antigcnos ~los antiCUcrpos dc forma Cualitati\a, pcro ntcdianto una m()LjifiCaci<in posterior SC CIcs ;u- rcdlo la tccnica do inntunctdifitsicin radial, yuc pcrntitc cuantifiCarlos i f4 . 39.41. Si so: aplica un .t ditcrencia dc pe~tencial a tfa\es tic tin gel de tal forma yuc los antigeno% y los anticttcrpos sc dcsl,laccn sintttlta neantente, la tccnica de innxtnoditusicin se tom icrtc en una con 111- al nIlYttnUCICCtrUf(tt-CsiS, \' la inntunodifusii>n radial simple ell 111111 clcctroforcsis dc -coltetes- f lp . 2 9.5'i . Estas tecnicas permiten detector concentraciones de antigeno . o anticuerpo co>mprcndidas cntrc 20 u'/1111 2 mg/nil

Reacciones de precipitation l'i:() dc I()" printer()s do ": uhrimicnn~s accrca

inmunocomplejos precipitados

antigeno anadido --" Fig. 29 .1 . El ejemplo clasico de reaction antigeno-anticuerpo in vitro es la reaction de la precipitina . AI it aumentando la concentration de antigeno en presencia de una concentration constante de anticuerpo, la cantidad de inmunocomplejos precipitados aumenta en tin principio, pero mas adelante se empieza a reducir. La curva de precipitina obtenida de esta manera presenta tres zonas: Zona de exceso de anticuerpo : la cantidad de antigeno es insuficiente para saturar todo el anticuerpo presente y precipitarlo ; por tanto, en el sobrenadante se detects anticuerpo libre. Zona de equivalencia : el antigeno anadido es suficiente como para reaccionar con todo el anticuerpo presente y precipitarlo, por to que en el sobrenadante no se detects antigeno ni anticuerpo libre. Zona de exceso de antigeno (prozona) : la cantidad de antigeno es superior a la necesaria para precipitar todo el anticuerpo, por to que se produce una reduction de la cantidad de anticuerpo precipitarlo . Esto es debido a la disolucion de los inmunocomplejos en presencia de exceso de antigeno . La magnitud de este fenomeno depende del anticuerpo implicado y de la especie animal de la que proceda.

Tecnicas inmunologicas

Reaction de precipitina en gel: inmunodifusion doble 1 . identidad Fig. 29 .2 . En la tecnica de inmunodifusion doble se vierte un gel de agar sobre la superficie de una lamina de vidrio y se deja solidificar ; a continuation se excavan unos pocillos en el gel y se anaden a los mismos las disoluciones problema de antigeno (Ag) y anticuerpo (Ab) . Las disoluciones se difunden hacia el exterior de los pocillos, formando un precipitado en el lugar de encuentro entre ambas. Estas bandas de precipitina se pueden visualizar lavando el gel para eliminar las proteinas solubles y tinendo luego los precipitados con un colorante de proteinas, como el azul de Coomassie. Esta tecnica se puede utilizar para determinar la relation existente entre diversos antigenos (azul) y un determinado anticuerpo problema (amarillo) . Basicamente, se pueden producir tres tipos de reaction . Los numeros que se muestran en los pocillos azules indican los epitopos que contiene cada uno de los antigenos investigados . En la reaction (1) las bandas de precipitina que se forman entre el anticuerpo y los dos antigenos se fusionan una con la otra, to que indica que las dos disoluciones antigenicas contienen un epitopo identico (epitopo 1) que reacciona con el anticuerpo . Esto no implica que los antigenos sean identicos; su parecido se limita al hecho de que el anticuerpo no es capaz de diferenciarlos . En la reaction (2) el anticuerpo reconoce tres antigenos diferentes, dando lugar a tres bandas de precipitina independientes . Finalmente, en la reaction (3) los dos antigenos comparten el epitopo 1, pero uno de ellos tambien posee el epitopo 2. En este caso la situation es analoga a la del caso (1), pero el anticuerpo sirve para distinguir los dos antigenos porque es capaz de reaccionar con los dos epitopos . La reaction con el epitopo 1 da lugar a la aparicion de una banda de identidad, pero ademas aparece un ((espolon adicional en la zona de reaction entre el anti-epitopo 2 y el segundo epitopo, to que indica que la identidad entre las dos disoluciones antigenicas solo es partial .

2. no identidad

anti-1,2,4

lAb 1

Inmunoelectroforesis 1 . separacidn de los antigenos 3. difusidn y precipitation

2. antisuero en ell surco

surco

0 00 0

Fig . 29 .3 . La inmunoelectroforesis permite comparar mezclas complejas de antigenos, como las que se encuentran en el surco. 1) Los antigenos son separados en un gel de agar mediante la aplicacion de una carga electrica a to largo del mismo. El pH del gel se selecciona de tal forma que las proteinas con carga positiva

se desplacen hacia el electrodo negativo y las cargadas negativamente hacia el electrodo positivo . 2) A continuation se excava un surco entre los pocillos, se anade Ab al mismo y se deja que difunda . 3) Los Ag y el Ab dan lugar a la formation de arcos de precipitina.

Interacciones antigeno-anticuerpo

I .as rcnccioncs all tigcno-anricuerl,o dan lugar a la formacicin dc innTtrnocomplcjos que induccn la tijacion del complcmcnto a tray cs de la s is clasicu, fi :nomCno yuC puedc Set- apro \cchado para cuantilicar la cantidad de antigcm> o anticicrpo prCSentc fairs. PI 29, -l . I .a Itcnraglutimacir'm V la fij .tcion dCl C()m PICmento ueden dctectar anticucrpos a concentraciones inferiorcs a 1 ligml.

tendC Il0- :tr a Cabo una dctcrminacirin Cuantitati\a do la concentr :tcion dc anticucrpos . La utilization de Cortcs tisularcs I yue conticncn ;ran ninncro de antigcnos i licrmitc idcntiticar anticuerpos frentc a unos anti,-Coos ditercntcs ell un solo portaobjctos, Si sc conocc la distribucion dc CsloS antigenos ell las Cclulas o en los difcrcntcs Compartimicntos subcelulares .

Inmunofluorescencia directs e indirecta

I .a inmunc41M,rrsccncia CS una tCCHICa nun utilizada para dctcC_ tar autcruntitucrpos anritutrlxis trcntc a antii;cnos tisularcs CClul.trcs i_hif. ?y.8I. Aunquc csta tecnica cs rttis laboriosn que l as descritas at ueriormcuc, presents al`,unas )asscntajas Cuand() Sc pre

Contrainmunoelectroforesis y electroforesis de cohetes contrainmunoelectroforesis agar a pH 8,0

sAb Inmunodifusion radial simple gel con Ab anillo de precipitins

" '

F-40

banda de precipitins electroforesis de cohetes

cohetes de precipitins

curva estandar diametro (del anillo

gel con Ab

10

25 50 100 concentration del antigeno

Fig. 29 .4. La inmunodifusion simple permite cuantificar Ag . Se anade Ab a un gel de agar que, a continuation, se vierte sobre una lamina de vidrio y se deja solidificar. Cuando el agar ya esta solido, se excavan en el mismo unos pocillos y se anade a cads uno un volumen estandar del Ag problema a diferentes concentraciones . Las placas se incuban durante un periodo minimo de 24 horas, durante el cual el Ag se difunde hacia el exterior de los pocillos y forma complejos (en la zona de exceso de Ag) con el Ab . ~stos se siguen difundiendo hacia el exterior, uniendose cads vez a mss cantidad de Ab, hasta que se alcanza el punto de equivalencia y los inmunocomplejos precipitan formando un anillo . La superficie que abarca el anillo, que es funcion del cuadrado de su diametro, es proportional a la concentration del Ag . La concentration de las muestras problema se determina mediante interpolation a partir de una curva de calibration (grafico) . El proceso tambien se puede Ilevar a cabo a la inversa utilizando un gel con Ag para determinar concentraciones desconocidas de Ab .

Fig. 29 .5 . La contrainmunoelectroforesis se Ileva a cabo en geles de agar en los que se escoge un pH al que el Ab implicado presente carga positiva y el Ag negativa . AI aplicar una diferencia de potential a to largo del gel el Ag y el Ab se desplazan el uno hacia el otro y clan lugar a la formacion de un precipitado. El principio es el mismo que en el caso de la tecnica de inmunodifusion doble, pero la sensibilidad es entre 10 y 20 veces mayor. Los Ag tambien pueden ser cuantificados mediante electroforesis en un gel con Ab, mediante una tecnica denominada electroforesis de ((cohetes)) . El pH del gel se elige de tal forma que los Ab permanezcan inmoviles y el Ag se encuentre cargado negativamente . El proceso da lugar a la formacion de cohetes de precipitins ; la altura de cads cohete es proportional a la concentration de Ag, y la concentration de las muestras problema se determina mediante interpolation a partir de los estandares . En la parte derecha de la figura se muestra el aspecto de los cohetes tenidos. Ambas tecnicas estan basadas en la diferencia de carga que existe a un pH determinado entre el Ab y el Ag ; esta diferencia suele existir en el caso de la mayoria de los Ag, debido al punto isoelectrico relativamente elevado de los Ab (es decir, a que su carga electrica se neutraliza a un pH mss alcalino que la mayoria de los Ag) . Cuando las cargas del Ag y del Ab son demasiado parecidas, se puede modificar quimicamente el Ab o el Ag para que aumente la diferencia entre sus puntos isoelectricos . La electroforesis de cohetes tambien puede ser Ilevada a cabo a la inversa para determinar concentraciones de Ab, siempre que se disponga de un gel con un pH al que el Ag se mantenga inmovil sin alterarse y que no interfiera en la reaction Ag-Ab.

Tecnicas inmunologicas

Hemaglutinacion antigenos eritrocitarios antigenos eritrocitarios eritrocitos sensibilizados con antigenos

,911tlgellr) j s~ :risihil ;rsa ;lr

anticuerpo valor reciproco de la dilucion del suero "6 3ti 6A Nti6 tih6 y"1 1 A % sueros problema

s' NO~ Qo

C"CI"O'O'O'o'O'o~4~b~4 p e o o+ o~o~o~o~o~o~cr~a

,G~O~O~O O H O 0~0
011

o c~o~o~o o o~o~o~o a~a

,cW cW ooo oo~o~o~o~
+ +

I LA~~ G~Gw~tr_V ~WWW~~~

Fig. 29 .6 . La prueba de hemaglutinacion activa (recuadro de arriba a la izquierda) sirve para detectar anticuerpos frente a antigenos eritrocitarios . Los anticuerpos se diluyen de forma seriada (generalmente mediante el metodo de doble dilucion) en solution salina fisiologica y se vierten en los pocillos de una placa de hemaglutinacion (recuadro inferior, columnas 1-10 desde la izquierda) . En la misma placa se colocan tambien controles positivos (columna 11) y negativos (columna 12). En este ejemplo se analizan simultaneamente ocho antisueros diferentes (filas A-H) . A continuation, se anade a cada pocillo una suspension de eritrocitos (a la que se ha anadido previamente una proteina que impide que las celulas aglutinen de forma inespecifica) hasta alcanzar una concentration de celulas del 1% aproximadamente. Si la concentration de anticuerpo es suficiente como para aglutinar (entrelazar) las celulas, estas se depositan en el fondo del pocillo formando una capa uniforme . En caso contrario, las celulas ruedan por las paredes inclinadas del pocillo y se depositan en el fondo formando tin punto niticlo. Algunos anticuerpos carecen de capacidad para aglutinar los eritrocitos con eficacia, pero atin asi pueden ser detectados mediante pruebas de aglutinacion indirecta anadiendo un segundo anticuerpo especifico del anticuerpo no aglutinante fijado previamente sobre la superficie de los eritrocitos . La tecnica de hemaglutinacion tambien puede servir para detectar anticuerpos frente a antigenos que normalmente no se encuentran en la superficie de los eritrocitos, uniendo de forma covalente o no covalente diferentes antigenos a la superficie de estas celulas (recuadro de arriba a la derecha) . Para fijar estos antigenos sobre los eritrocitos se utilizan cloruro cromico, acido tanico, glutaraldehido y otros productos quimicos .

Fijacilin del complemento

complemento

Il celulas indicadoras

complemento libre " O, ausencia 1, 0 de inmunocomplejos 00 001 O"

complemento fijado
lisis d.,

las celulas indicadoras

ausencia de lisis celular

Fig. 29 .7 . La prueba de la fijacion del complemento sirve para detectar anticuerpos . 1) Se preparan diluciones seriadas dobles del antisuero y se anade a cada tubo o pocillo una cantidad fija de antigeno . En caso de que el suero problema contenga anticuerpos se formaran los correspondientes inmunocomplejos. 2) A continuation se anade complemento a la mezcla . En presentaa de inmunocomplejos estos fijaran el complemento y to l(agotaran . 3) Finalmente, se anaden las celulas indicadoras (eritrocitos) y una cantidad no aglutinante de anticuerpos antieritrocitarios . En caso de que quede algo de complemento, las celulas seran lisadas ; por el contrario, si el complemento ha sido agotado en la fase 2 por los inmunocomplejos, la cantidad del mismo no sera suficiente como para lisar los eritrocitos . En esta tecnica se anade la cantidad exacta de complemento necesaria

para lisar los eritrocitos cuando los IC no consumen nada del mismo . La determination se suele Ilevar a cabo en microplacas de plastico . Esta tecnica tambien puede ser utilizada para determinar la concentration de Ag, utilizando una concentration fija de Ab y diluciones seriadas del Ag . La utilization de controles adecuados en esta prueba es esencial, ya que algunos preparados de Ab fijan el complemento en ausencia de antigeno, por ejemplo cuando el preparado utilizado procede de un suero que contenia previamente inmunocomplejos. Ademas, algunos antigenos pueden presentar actividad anticomplemento. Por tanto, se debe preparar un control de anticuerpo y otro de antigeno para comprobar que ninguno de ellos fija el complemento por si solo .

Interacciones antigeno-anticuerpo

Adcm s, las I,ruehas LiC ill nrnrnotluoresccncia SC Ipuccien utilizar para icicntitic .u- un tiho cictcrminado do celulas en una susPcnsicin, cs dccir, para eictcctar antigenos en celulas viNas. Cuando sc introdUCC una suspcnsi6m do celulas %kas tenidas en un citr~metro do fluorescencia i FACS, dcl inglcstluorrsceu ce actuated cell mrtcr'I, cstc dispositivo es capaz dc medic la intcnsidad do fluorescencia dc cads una dc las Milks, sicnclo

posiblc separarlas scgtin diclia intensidad . Mcdiantc csta tccnica cs posiblc aislar di\rrsas poblaciones celulares segtin los antigcnos cic supcrticic yuc hrcscntcn, tltlcndolas cots difcrentcs ,uttjcucrpos tluorcsccntcs i itrf . 21).`)i . En C1 Capitulo 13 SC ha comcntado una aplicacicm de csta tccnica a la idcntiticacion do las difcrentcs pcrblaciones do timucitos cn dcs;trrollo i ~ . Jirf. 13.19').

Inmunofluorescencia directs e indirecta directs anticuerpo marcado con fluoresceina indirecta indirecta amplificada per el complemento anticuerpo

Citometro de fluorescencia (FACS)

muestra liquido portador J camara de flujo vibratoria dispersores del h .

fluorescencia roja fluorescencia verde

anillo inductor de carga

_j t--dispersion frontal de la luz Itamano)

dispersion a 90 de la Iuz (contenido granular

tubos !_ colectores adicion de Ag anti -C3 marcados con fluoresceina

4 desechos

1,

poblacion linfocitaria completa n lavado Fig. 29 .8 . La inmunofluorescencia permite detectar Ag in situ . En primer lugar se corta una seccion de un bloque de tejido congelado a temperaturas muy bajas en un criostato . La refrigeration impide que los Ag labiles sean danados por los fijadores . Directs: se cubre la seccion con una gota de disolucion de Ag fluorescente, se incuba y se lava . A continuacion, los Ab fijados pueden sec visualizados mediante microscopia; al iluminar la seccion con luz UV procedente del objetivo el fondo del campo queda oscuro, mientras que las zonas a las que se ha unido el anticuerpo presentan una fluorescencia verde. La distribution de la fluorescencia es caracteristica de cads antigeno tisular . Indirecta: se aplica un Ab a la seccion, y luego este Ab se visualiza mediante la utilization de una antiinmunoglobulina conjugada con una molecula fluorescente . Indirecta amplificada per el complemento: esta tccnica esta basada en el rnetodo indirecto para la detection de Ab que fijan el complemento (v . fig. 29.7) . En el segundo paso se anade complemento fresco, que queda fijado alrededor de las zonas a las que se ha unido el Ab . Una unica molecula de Ab puede inducir la union de muchas moleculas de C3b a la seccion, debido al proceso de amplification que se produce en la via clasica del complemento (v . cap. 5) ; a continuacion, estas moleculas de C3b pueden sec visualizadas mediante anti-C3 marcado con fluoresceina .

poblacion CD8'

Fig. 29 .9. Las celulas se tinen con reactivos fluorescentes especificos capaces de unirse a diferentes moleculas de superficie. Se introducen en la camara de flujo vibratoria del FACS . Las celulas abandonan esta camara en un flujo de liquido tamponado y son iluminadas por un rayo laser, que permite detectar su tamano (segun la dispersion frontal de la luz), los granules que contienen (dispersion a 90) y la fluorescencia verde o roja que presentan, que permite la detection de dos marcadores de superficie diferentes . La vibration inducida en el flujo de celulas to desintegra en diminutas goticulas cargadas, que pueden sec dirigiclas hacia diferentes tubos colectores mediante unas placas deflectoras controladas por un sistema computarizado; todo ello permite separar las diferentes poblaciones celulares de acuerdo con los parametros que se ban medido inicialmente . En la parte inferior se muestran unos graficos tridimensionales en los cue se representan el tamano (s), el numero (n) y la fluorescencia (f) de las celulas de una poblacion linfocitaria completa y de una poblacion CD8' separada mediante el citometro, ambas teriidas con anti-CD8.

Tecnicas inmunologicas

I u tctitit:u do inntunuslrilisis en Ins que se utilizan reacticos n)arcad()s para ~ictcttar antigenos \ anticuerpos prescntan una cstraordinaria sensibilidad, Y los reactivos yuc SC utilizan cn )as rnismas resultan mUV etoncSmicos f li)Z. 39.1(11 . Las detertninaciones tic anticuerpos en taSC s(iliLia utilizando ligandos marcados con radiois6t(~pos o con cnzimas i prucha de innninoabsorci6n Ii gada a cnzimas o ELISA, del inglcs cn<rrnc-lurked incmunosoJbcntassay; fcf. 29 .11) son probablctncntc los mctocios de analisis innittnol6gico mas utilizands, 'va yuc pcrmitcn Ilcvar a cab() una Bran cantidad tic determinaciones en un tcn-to cspacio tic ticmpo, aunquc itltimamente los marcadores radioisot6picos wren siendc~ sustitUidos por marcadores fluorcsccntes o quin)iolun)i

Inmunoanalisis

nisccntcs. LOS antigenos se pueden determinar nediante prttebas tic -sandwichtipo () competiti%'as, en las quo: la dctecci6n se pucdc Ilesar a cab- utilizando cttnlquicra tic los marcadores due se hen nicncl()nado 1_I(JJ . 39.12) .

Inmunotransferencia (immunoblotting) e inmunoprecipitacion

I ~ , nicu,d  s descrit(s Itt,tt cstc nunrncnt(~ som cshccialmcntt utiles para ntcdir las conccntracioncs do dctcrminados antigenos o anticuerpos conocidos, pcro cn mutl)as otasioncs CS ncccsario detectar c identificar antigenos quo: no se conoccn prcs'jamente a partir de una mezcla compleja ; las tccnicas de inntunotranstcrcncia son mus' utiles en este sentido. En la illntunotransfercntia SC utilizan geles analiticos para separar el contcnido tic mczclas complejas y, a continuation, Lu

Inmunoanalisis de anticuerpos
1 sensibilizar la place con antigeno 2 lavar antigeno

molecules son transtcridas a tnctnbranas )blots, cn inglcs) para idcntificar cada uno tic los antigenos mediante anticuerps especificos . En la scpartci6n initial SC pueden utilizer geles de dodccilsultato tic sodio ;:SI)S, dcl inglcs sodium dodrcYl sulphate), de

Prueba de inmunoabsorcion ligada a enzimas (ELISA)

anticuerpo 1 sensibilizar la place con antigeno

ligando marcado

curve de calibracidn tipica zone line/ 1/

ligando

senal

ruido de

7 anadir el cromogeno 8 revelar la place

cromogeno

concentration del anticuerpo problema Fig. 29 .10. Inmunoanalisis de Ab . 1) Se incuba el Ag disuelto en solution salina en una place o tubo de plastic-, con to que se fijan en las paredes pequenas cantidades del mismo . 2) Se elimina mediante lavado el Ag libre. (En este momento la place puede ser bloqueada con un exceso de una proteina irrelevance, para evitar la posterior union inespecifica de otras protenas .) 3) Se anade el Ab problema, que se une al Ag . 4) Las proteinas no fijadas son eliminadas mediante lavado . 5) Se detecta el Ab mediante un ligando marcado. El ligando puede ser une molecule como la proteina A de los estafilococos, que se une a la region Fc de las IgG, aunque es mas frecuente que se trate de otro Ab especifico del Ab problema . Es posible distinguir los isotipos de Ab problema mediante la utilization de ligandos que se unan especificamente a determinadas clases o subclases de Ig . 6) Se elimina el ligando libre mediante lavado . 7) Se mide la cantidad de marcador retenido en la place. En el grafico se muestra une curve de calibration tipica . AI it creciendo la cantidad de Ab problema, la senal aumenta desde un nivel basal hasta un maxim-, existiendo une zone lineal entre ambos extremos . Los titulos de Ab solo se miden correctamente cuando se trabaja en la zona lineal . La serial maxima tiene une intensidad entre 20 y 100 veces superior a la del ruido de fondo (zona basal) . La tecnica tiene une sensibilidad que permite detectar 1-50 ngiml de Ab especifico . La especificidad puede ser verificada mediante la adicion de concentraciones crecientes de Ag libre al Ab problema en el peso 3; este Ag se une al Ab e impide que este se una al Ag de la place . AI it anadiendo cantidades crecientes de Ag libre la intensidad de la senal se debe it reduciendo . sueros problema

valor reciproco de la dilution del suero 'L a

0 s6 31 6A

N10 156 6"1

-0Q-5 seq .

0001,C)

Fig. 29 .11 . Las places de ELISA se preparan igual que en la figure 29.10, hasta el peso 4. En este metodo el ligando es une molecule con afinidad por el Ab y que se encuentra unida covalentemente a une enzima como la peroxidasa . Este ligando se une al Ab y, una vez que se ha eliminado el ligando libre (6), se puede determinar la cantidad fijada mediante la adicion de un cromogeno (7), que es un sustrato incoloro capaz de transformarse en un compuesto coloreado por action de la portion enzimatica de la molecule de ligando. En la parte inferior de la figura se muestra une place revelada (8). La cantidad de Ab que contiene la muestra problema se calcula a partir de la cantidad de product- coloreado que se forma, mediante la medida de la densidad optica .

Purification de anticuerpos

Determinacidn de antigenos inmunoanelisis competitivo anticuerpo inmunoanelisis de tipo sandwicht"

antigeno 'marcado

entociuc isoclictrico o do (lctcccion do pcptidos, con to quc sc pucdcn obtcncr datos accrct del ttmaix~, punto isoclcctrico v rcIaCiOnCS moleculares de los antigenos cstudiados f Jiq. 29 .1 .i~j . En algunos casos Io% procesos (ic separacion \ transferencia (lesnaturuliz :Lit el anti geno hasta tal punto quc Agun0s do sus epit(rpos picrden la capacidad (IC union a sus anticuerpos especif1COS . Ell CStOS IaSOS SC I)uede dctcctar cl antigeno yuc se Line a Lin (lctcrminado anticuerpo mediantc innutnoprccil,ita(i(m . Esta tccnica sirsc pare (lctcctar antigenos solublcs o lijos sobre superticics cclulares (/ q. 39.14} .

competencia entre el Ag problema y el Ag marcado Fig. 29 .12. 1) Inmunoanalisis competitivo. Se anaden conjuntamente el Ag problema y Ag marcado a una place recubierta de Ab especificos . Cuanto mss Ag problema haya, menos Ag marcado se puede unir a la place. Este tipo de analisis se suele utilizar para determiner Ag quc se encuentran presentes a concentraciones relativamente elevadas u hormonas quc solo se pueden unir a tin Ab por tin tinico punto. 2) Inmunoanalisis de tipo ~4sandwich)) . Se anade la solution problema a una place recubierta de Ab especifico, con to quc el Ag contenido en la muestra es capturado por el Ab fijo . Tras la elimination mediante lavado de los productos libres, el Ag capturado se detects mediante otro Ab marcado y especifico de otro epitopo del Ag . Como el Ag tiene quc ser reconocido por dos Ab, el segundo de ellos en exceso, este metodo de analisis es muy especifico y sensible .

PURIFICACION DE ANTICUERPOS
En rttticlt ;ts ocasitmes los inmunologos ticncn quc aislar anticucrpos puros, ya sea anticuerpos especifcos de tin antigeno dctcrminado o illnnmoglobulinas inespccifcas . El aislamicnto Lie cstas tiltimas a partir do sucro sc suck Ilc\ ar a cabs, me(liantc una scric do pesos succsiVos dt f- accionamicnto prowico, cntrc los quc se pucdcn encontrar: " Precipitation de las gammaglobulinas coil sulfato amonico a1 30- ;0";, . Filtration en gel para scparar mOIC :Ul :ts de tin tamano dcterminado . Crontatografia de intercambio ionico para aislar las molc:ulas yuc I,rcscnt :ut carp p<rsitiva a pH ncutro . (. :romatografta de afinidad utili .u1(io ligandos naturalcs do I :ts inntun((t~lobulillas, 0)1110 la protcina A (csta prowina cs till c(mtponcntc de las parcdts cclularcs do los cstatilococos (iuc sc unc .l una region (it ( : , 2 v (`,v3 yuc aparecc en la mas- oria do las subclascs (1e IgG, concretamentc cn las IgGl, IgG2 c IgG4j.

Inmunotransferencia gel de separacion muestras de antigeno camera de transferencia transferencia de los pcptidos a una membrane de nitrocelulosa (blot) inmunotincion de la membrane adicion de anticuerpo, lavado, adicion de conjugado marcado radiactivamente Fig. 29 .13. En las tecnicas de inmunotransferencia se separan en primer lugar los antigenos contenidos en la muestra mediante tin gel analitico, por ejemplo tin gel de SDS-poliacrilamida o tin gel de enfoque isoelectrico . Las molecules separadas son transferidas mediante electroforesis en una camera de transferencia a una membrana de nitrocelulosa. A continuation la membrana es tratada con tin anticuerpo especifico del antigeno en estudio, lavada y finalmente tratada con tin conjugado marcado radiactivamente especifico de los anticuerpos quc pan quedado retenidos en la misma. El fundamento de este metodo es parecido al del RIA y el ELISA. Despues de tin nuevo lavado, la membrana se situa en una camera adecuada en contacto con una pelicula sensible a los rayos X; tras revelar la radioautografia resultante se hacen visibles las bandas de antigeno quc pan fijado el anticuerpo . Esta tccnica puede ser modificada mediante la utilization de marcadores quimioluminiscentes o de tin conjugado enzimatico (como en el ELISA), en cuyo caso los productos fijados pueden ser detectados mediante tratamiento con tin cromogeno quc provoque el deposito de alguna sustancia insoluble sobre la membrana .

revelado y fijado de la radioautografia radioautografia

visualization de las bandas de antigeno

Tecnicas inmunologicas

1-:I liSlamicntr) cic IC; espeoficas de tin antmcno cleterminado sc Ilea a cabo mediante cromatografia do afiniciad, unicndo cl pro I,i)) alltigcno a till soportc dc ticpharosc ; cl anticucrpo pure absorbidr) sc elucc tnccliantc agentes caotr()pjcos como tiocianato dc sodio, tampon dc glicina-M .] r) t :unPcin do dietilamina. I,a cromato,,rafia dc afiniciad cs la tecnica dc cleccion ctiando sc pretcndc aislar tin anticucrpo o till antigcno en CStadO purer I.jJlf. 9 .1 .5)-

cicfinida i_hr7 . 29.161, con Io yuc SC ct itan Ic)s prublcrnas dcricacios c1cl use (IC antistrcros ilalta dc unitormidad~ . I,os anticuerpos numoclonalcs hall sido ampliamCnte utihzados cn nnrchas Face Las Lie Las ciencias biologicas, aprovcchando la .tlta espccificidad cic Ion mismos . Como dc hccho cada cclula B produce till anticuerpo ntonr)clonal, cl sistcma para obtener Cstas moleculas en gr ;uidcs can-

do tin antigcn)) deterntinadc, c0)n,iNtc ('n hr))cfucir .uiticucrpos mrrrn)clondies mediante cl culti\0 do CC lulas. I .a pruducciotI SC I,ucdc mantener indctinidamente generando tin clan inmortal cic cclulas productoras cic 1111 tinier) anticucrpo Cot) 1111a CSPCCitlCiC1,1C1 Hell

Produccion de anticuerpos monoclonales ( )171-3 m,tncr,t cic )))lcnCr an6cuerh))s hunn rtihccificos

Cromatografia de afinidad

anticuerpo

Inmunoprecipitacion adicion de Ab especifico

adicion de agentes coprecipitantes

centrifugacion del precipitado

lavado

anticuerpo no fijado 2

tampon de elu

mezcla de antigenos marcados

antigeno en forma de inmunocomplejos

redisolver

fsAg

radioautografia

separacion en gel SDS proteinas separadas de los inmunocomplejos

anticuerpo eluido Fig. 29.15. La cromatografia de afinidad permite aislar una poblacion de Ab en estado puro . 1) Se prepara tin inmunoabsorbente en fase solids (fsAg) ; este consiste en tin antigeno unido de forma covalente a tin soporte inerte (p . ej ., esferas de dextrano entrecruzado). El inmunoabsorbente se introduce en una columna y se hace pasar la mezcla de Ab a traves de la misma en condiciones fisiologicas . Los Ab especificos del Ag se Linen a la columna, mientras que los Ab que no presentan especificidad por el mismo la atraviesan totalmente sin quedar retenidos. 2) En la segunda fase se eluye la columna para recuperar el Ab fijado; para ello se anode tin tampon de elucion (p . ej ., acetato a pH 3,0, dietilamina a pH 11,5, guanidina HO 3M) capaz de romper los enlaces Ag-Ab . La tecnica tambien puede ser Ilevacfa a cabo a la inversa, fijando Ab a la columna para obtener Ag puros. Asimismo, esta tecnica puede utilizarse para obtener otros tipos de moleculas. Por ejemplo, una columna de lectina absorbers todas las moleculas que contengan determinados grupos glucidicos, que a continuacion pueden ser eluidas mediante tin tampon que contenga moleculas libres de tin azdcar que compita con la proteina fijada por los puntos de union de la lectina.

Fig. 29.14. En las tecnicas de inmunoprecipitacion los Ag a investigar se marcan con ' 2 JI y, a continuacion, se anade el anticuerpo correspondiente, que solamente se Line a su Ag especifico . Los complejos son precipitados mediante la adicion de agentes coprecipitantes, como anticuerpos antiinmunoglobulina o proteina A estafilococica . Los complejos insolubles son separados mediante centrifugaci6n y lavados para eliminar todo el Ag marcado libre. A continuacion se disuelve el precipitado, por ejemplo en SDS, y sus componentes se separan mediante geles analiticos . Una vez Ilevada a cabo esta separacion se revelan los geles mediante radioautografia, para comprobar la posicion que ocupa el Ag marcado. Mochas veces los Ag proceden de la superficie de celulas marcados radiactivamente, que se disuelven en detergentes antes de la inmunoprecipitacion . Tambien es posible marcar los Ag con biotina y detectarlos cromatogreficamente al final del procedimiento mediante la utilizacion de estreptavidina (que se Line a la biotina) unido a una enzima como la peroxidasa (v . tecnica de ELISA) .

Purification de anticuerpos

TIddLICS CS imnorializar una cclula 11 concrcta c inducir 'al prolitcraci6n . La ma\oria do los anticuCrpos ntcnIOCI()]Ialcs SC ohticncn mediante la tirxion do csplenocitos do rat6n con una cclula 11 do mieloma do stones (1c la misma ccpa quc no secrete anticucrpo .

Produccion de anticuerpos monoclonales

l amhicn cs posiblc producir liibrid(tt cntrc CCP;u (iifcrcntcs c inCluso cntrc cspccics ditcrcntcs, pcro cstos Itihridos suclcn scr incs tables . Otra p(tsihilidad CS inducir la transtin-ntaci(in do Lts Cclulas ft ; por cicmplo, la intccci('>n con cl \ iru> do lipstcin-BAIT p11cdc inmortalizar las celulas R humanas, quc P(rsteh(trmcntc pucdcn Set- utilizadas para la pr(>dUC:i(rn Lie anticuerpos monoclonalcs . Lna 111,10 .1 tccnica para la ohtcncion Lie antictict- po's mono clonales es la (ic tagos scleccionados . ,\lediante esta intercsante tccnica cs Posiblc csprcsar sobrc la strpcrficic tic] fago filamcntoso ,\113 [as rcgi(mes (ariathles de los anticuerpos ;i Vi l v \'I i en t6rma de fragmcnt(rs nutlecularcs f Fv i con una (ictcnninada cs peciticidad (, Ifini(iaci Por un antigcno, do tal t6rma clue sc' pucda sclccci(mar a cstos ta,os mediante cl antic,cno. Adcmas, al intCCtaI" haQCTlas coil Cstl)5 t;t gos cstas sccrctan grandCS Cantlda(iC% do protcina F\ al medio do Cultis(~ . F .sta tccnica hacc inncccsaria la inmunizaci6n intencionada dC animales 0 Lie sere, hurnanos Aun(1uc 1111 antic11crPo nt(nt(rClonal CS un rcacti(o barn dcfinid(t, su CSPccificidad no cs mayor quc la de un antisucro policl(mal yuc rcc(nxuca ditcrcntcs rpit(tp(rs dcl anrigeno .

mieloma no secretor l - (sensible a HAT)

las celulas de mieloma son destruidas por el HAT, las celulas de bazo mueren gradualmente, solo sobreviven las celulas fusionadas

Produccion de Ab Fv mediante seleccion de fagos

detection de Ab en los pocillos

ARNm de

J VH

y Vt

clones product. de Ab Fig. 29 .16. Se inmunizan animales (generalmente ratones o ratas) con un Ab . Una vez presentan una buena respuesta de Ag se extirpan scrs bazos y se prepara una suspension celular a partir de los mismos (tambien se pueden utilizar celulas de los ganglios linfaticos) . Estas celulas se fusionan con una linea celular de mieloma mediante la adicion de polietilenglicol (PEG), que promueve la fusion de las membranas celulares . Solamente se fusiona adecuadamente una pequena proportion de celulas . A continuacion, la mezcla obtenida tras el procedimiento de fusion se inocula en un medio de cultivo que contenga MAT,). HAT es una mezcla de hipoxantina, aminopterina y timidina . La aminopterina es una potente toxina que bloquea una importante via metabolica . Esta via puede ser eludida a traves de otra via de derivacion si se aporta a las celulas hipoxantina y timidina . Las celulas del bazo pueden crecer en presencia de HAT; las de mieloma son destruidas debido a un defecto metabolico que no les permite utilizar la via de derivacion mencionada . El inoculo contiene celulas de bazo, celulas de mieloma y celulas fusionadas . Las celulas de bazo mueren de forma natural en el medio de cultivo transcurridas 1-2 semanas, mientras que las celUlas de mieloma son destruidas por el HAT. Sin embargo, las celulas fusionadas sobreviven, ya que estan dotadas de la inmortalidad propia de las celulas de mieloma y, al mismo tiempo, de la via metabolica de derivacion de las celulas de bazo . Algunas de ellas habren adquirido tambien la capacidad de sintesis de Ab de las celulas del bazo . Todos los pocillos con crecimiento celular son analizados para detectar la presencia del Ab que se pretencle obtener (generalmente mediante inmunoanalisis en fase solida) ; si el resultado es positivo, son clonadas mediante cultivo en placas de tal manera que se pueda separar cads uno de los clones . Asi se obtienen clones procedentes de una unica celula progenitora que son inmortales y producen un Ab monoclonal .

Vn
VL F

- ADNc

espaciado
VH VL

ADN Fv

anticuerpo Fv expresado score el fago M13

Fig. 29 .17. Para producir anticuerpos Fv mediante la tccnica de seleccion cfe fagos, en primer lugar se amplifican los genes VH y Vt a partir del ARNm de las celulas B mediante la reaction en cadena de la polimerasa . Los genes se unen entre si mediante un espaciador, con to que se obtiene un fragmento Fv. A continuacion se transfecta el gen en bacterias mediante un seudofago vector que contenga una secuencia lider, un fragmento del gen que codifica la proteina 3 de la cubierta virica y un origen de replication del fago M13; finalmente se infectan las bacterias con el fago M13. Estos ultimos se replican y expresan Fv en sus extremos . Los fagos que presentan la especificidad adecuada se seleccionan mediante pases en placas que contengan el Ag y despues son amplificados . El fago con la especificidad deseada puede ser utilizado finalmente para infectar cepas de bacterias que de esta forma secretaran la proteina Fv en el medio de cultivo .

Tecnicas inmunologicas TECNICAS DE DETERMINACION DEL COMPLEMENTO

l.a ti(rIrt :t nra, sCncilla do: (ictcrminar la actjsjdad dcl C()ttal)lcmcnto es nadir la c  nccntraci<in 1 la quc cl suero lisa el S50% tic Ulla suspension estandar dc critrocitos sensibilizados coil anticucrp()s i E:\). Esta tictcrminac ioin sc pucdc Ilcs ar a cabo ell tullos o ell rnicr(~pocillos . ('n sistema mas sencillo, title da un,t idea apr(Aint,tda dc la actit idad del complemento, cs la tecnica do 11cnioljsis radial simple . Su funciarncnto cs similar al cie Is innrtulodititsicin radial simple f \ . - liq. 29.41, cxccl)to por cl hccllo de quC ell IOS 110cillos sc anadc suero t . cl ;~cl contiene F.A . I .a adici(m dc un Siteto quc contenga c(mlplcrnento actiro induce la tornlaci('~n tic una zotla tic lacna(Slisis alrededor dc los pOCillos, CUM tanaan() Cs propo(rcional a la cantidad tic conlpleniento aitadido al pocillo . Lstt tccnica sine para valorar conjuntarrtentc la actjsidad total do las tias clasica y litica (( ;I -('91, pcro ell caso do quc CI suero carezca tic actisidad no suministra intornlacion accrca dc coal es la pro teina del complemento causantc dc la anornalia. I .os c(nnponcntes indkidualcs puccicn ser analizados por scparad(t para determinar sit conccntraci(in o sit grado de actisidad . Es inaportante teller en cucnta cual do cstas cios magnitudes se csti midiendo, l a yue el quo: la concentraci6n do all dcterntinado Crn11p(mente sea normal no implica quc tirncionc corrcctanacntc . ],as concentracioncs totaICS tic Cada una do ]as protcirms del conaplcnacnt(t SC SUCICt1 dctcrnlinar nacciiante RIA () ELISA, utilizando anticucrpos cspecitjcos trcntc a la protcina quc sc prctcnde analizar. Los niccle% tic actin idad se determinan mcdiantc prucbas disc iiadas espccialnacnte para detectar cada una do las 11rotcinas dCl conlplemcnto, en las title sc anadc sucr() a un .t ntezcla title contiene eritr(rcit((s scttsibilizados y todos I()s componentes del complcnacnto exccpt(t cl clue se prctcrtdc analizar 29.11) .

Determinacion de componentes del complemento LISIS el suero contiene el componente analizado SIN LISIS el sueru nc contiene ei componente analizado prueba C1 C4 C2 C3 C5 C6 FB FD indicador EAC 41cobayal EA EAC 4 (humano) (antrypol) EAC 142 (cobaya) EAC 14 oxi 23 EAC 143 (humano) (antrypol) EA + EGTA + Mgz' EA + EGTA + Mg z+ reactivo de complemento reactivo C1 suero de cobaya deficitario en C4 reactivo C2 C5-9 (suero de cobaya tratado con NH) suero de raton deficitario en C5 suero de conejo deficitario en C6 suero deficit. en B (trat . a 50 C) suero deficitario en D (exclusion mediante Sephadex G75)

celula indicadora Isuer pp or blema proteinas del complemento

5 SEPARACION DE POBLACIONES DE LINFOCITOS

Es mttc11os Lie los cxperintcntos in rivo c in vitro title Ilctan a cabo los illlltttn()logos son prccisas poblaciones lintocitarias puras. I .as principales fitcntcs dc lintocitos dc aninlalcs do cxl,crintentaci(in scan cl tinxt, cl bazo t . I(s ganplios litttatico pcritericos. Ell ciertos Cstudios espocializados paedc set- necosari(( ()Iltcncr Cclulas tic otros regiones, conul, por ejemplo, tic la% placas dc I'ctcr .

1,as celulas en proceso de recirculacjcin son olltcnitlas mcdiantc la inscrcion (IC un caterer en CI conciucto toracjco, rcco9icndo a continuaci6s los hntocitos a to largo dc sarias floras . En los cstudios Ilesa(i(ts a cabo en sores lttrntanos la fuonte dc linti)citos nias coimoda cs la sangrc perilerici, pcro tambicn sc pucticn obtcncr celulas del bazo, las arnigdalas o I()s ` ;anghos lintatic((s mcdiantc proccdinlientos quiritrgicos . Sin Cnlbargo, las n1ucstras obtcnitias do esta 6ltinla mantra llucdcn gcncrar problc ntts dcbido a la prCSCncia do los aget11CS intCCCiosos o celulas tun1(x-alCS prOpi(s del proceso yue ha lacclatl preciso cl procctiinaicnto yuirurgic(). I lar quo: teller ell arcnta clue ]as p()blacionCS CClulares (tbtcnidas .t partir do cada una dc cstas zonas cs ditcrcntc do las dcnaas ell to title respccta a la nladurcz dc los lintixitos t . a la proportion rclatit-a tic los djs crsos tiPos Lie celulas quC contiene . A partir del tinto Sc 1lucdcn ohtcncr Milks T en cstado rclarit amcntc puro, aullquc con grados mUt cariablcs dc nladurcz . (Cuando sc trahaja coil lin hlcit(rs I)roccdentcs dc otras zonas suele ser comrnicnte scparar [as diterentes poblaciones cclularcs para distinguir sun otcCtos. 1a sc ha nlenci(mado quc una do las formas dc scparar poblaciorno lintocitarias es la citornetria dc fiuoresccncia ( FAGS o scparador cclular con actitacioin de fluoresccina), quo: so: basa ell los ditcrctues nlarcado -CS Lie superficie quo: prcscnta cada tipo cclular. Sin embargo, el nurncro tic celulas obtenid(t mediante cstc proccdillaicnto dcpcndc dc la sclocidad del tlujo, quc suele set baja' a yue cada celula dcbe ser analizada illdis idualnlCntC por CI citonlctro . Atin-tunadamente sc dispose dc otros nlctodos para

Fig. 29 .18. Este metodo sirve para detectar componentes especificos del complemento en muestras de suero. La prueba consiste en mezclar eritrocitos sensibilizados con un ((reactivo de complemento,,, de tal manera quc la mezcla contenga todos los componentes del complemento (C) necesarios para lisar los eritrocitos con la excepcion del componente quc se pretende analizar. Por ejemplo, para determinar C4 se mezclan eritrocitos sensibilizados con Ab (EA) y suero de cobaya deficitario en C4. En caso de quc haya C4 en el suero problema las celulas se lisaran, pero no to haran en ausencia del mismo. En la tabla se enumeran las combinaciones de reactivos para la determinacion de cada componentes del C. Los eritrocitos se preparan bloqueando las reacciones de los EA con el C en una fase determinada. Los reactivos de C pueden ser sueros en los quc se sepa quc falta uno de los componentes o sueros tratados fisicoquimicamente para eliminar o inactivar dicho componente . En la practica la determinacion se Ileva a cabo de forma cuantitativa, por ejemplo mediante hemolisis radial simple o en tubos en los quc se determina la dilucion necesaria para quc se lisen el 506 de las celulas .

scparar do forma ntas rapida lintircit(ts y subpoblacioncs cspecificas tic los rnismos. Entrc cll()N sc encuentran la scparacion en gradicntc dc densidad, la tirrnaacicis de roseta%, la scparacion en placa 1- los proccdimientos ntagncticos. La scparacion en grad ielite de densidad so: basa ell yuC los linfbcitos son menos (Aensos quC los eritrocitos N los granulocitos f(T. 29.19), 1, se utiliza para separar conjuntantente todtrs It1s lin ti>citos sangguineos . Las tccnicas dc fornaacion tic roseus 1 . dc separaci(in en placa ; :figs. 29 .20 1, 29.211 SC utilizan para separar subpoblacioncs cspccificas. I , ;a scparaciinl en placa tic linfixitos cs una espocic do crontatografia do afinidad aplicada a celulas ell lug,1r de a nlolcculas . Exists una tcaaita p,trccida basada en la utilizaci(Sn de cstcras nla` ;ncticas rCCUbicrtas con antiarcrpos cspc-

Pruebas de celulas efectoras

391

cificos (p . cj ., anti-(-1)4 ;1 . Las cstcras sc naczclan con la pobla cion celular N. sc uncn a ]as celulas yuc reconoce el :utticuerpo . ,A c(mtinuacjon, cstas celulas puccicn scr scparacias de las dcmis mcdiantc la aplicacitin tic un campo magnetico. ()tra torma dc climinar las poblacioncs cclularcs no dcscadas es la utilization de anticuerpos y complcmcnto. C uando se :uia dc en primer lugar un anticuct- 1)o cspccitic(t ip . ej ., CI)8 i a una mezcla do celulas, \- dcspu~s SC ahadc complcmcnto, la subpoblacion de celulas seleccionada cs lisada . Como Cs logico, esta tecnica solo pucdc scr Ilc\nda a cabo con anticuerpos clue tijcn cl complcmcnto, sicnclo prcciso yuc la poblacicin do celulas diana posea una cantidad dc antigcnos dc supcrficic suficicnte como para fijar una dosis litica dc complcmcnto . C)tra posibiliclad para obtcncr linfocitos purificados Cs la obtcncion dc lincas dc celulaS T espccificas dc antigcno \ su cultic o du rants pcn(>d(ts prolongatios dc ticmpo (/tq. 29 .22) . Dc esta t6rma rcsulta innccesu'io aislar confiltn;tmentC celulas .a partir de animales .

PRUEBAS DE CELULAS EFECTORAS

Sc han dcsarrollado disci-,,(),, m%todos para la cvaluacion dc las htnciones etcct(tras dc los linfOClt05, cntre los yuc se cncuentran la prucba dc producci('m tic anticuerpos, I a dc citotosicidad _~ ]as dc cola horaci(in V suprcsion dc las celulas T. Las celulas pr(xluctoras dc ,anticucrpo sc analizan mediante la 29.231, yuc permite detcctar prucba de titrnraciom dc placas celulas productoras tic IgG o IgAl . ()tra mantra dc dctcctar las celulas productoras dc anticucrpo CS mccfiantc la prucba cnzina;iti ca ELISP()1 29 .241 . Tanabicn czistc una tecnica derjsada dc la anterior clue permits culuar cl funci(mantiento dc [as celulas T dc acucrdo con los mcdiadorcs i citocinas,t lihcrad(~s . En csta tecnica la placa sc sensibiliza con un anticucrpo frcntc a una citocina concrcta i;p . cj ., anti-IEVj. Estc anticucrpo captt(ra la citocind Ijhcrada y da lugar a la fitrnraci(in tic un lsunt(( .tlrc dcdor do cada cclula T actin a.

Separation de linfocitos en gradiente de densidad en Ficoll Isopaque Fig. 29.19. Los linfocitos se pueden separar a partir de sangre total mediante un gradiente de densidad . Se desfibrina la sangre entera poi- agitation en presencia de esferas de vidrio y se separa el coagulo clue se forma . Se diluye la sangre con un medio liquido de cultivo celular y se deposita la suspension en un tubo Ileno hasta la mitad con Ficoll . La densidad del Ficoll es mayor clue la de los linfocitos, pero menor clue la de los eritrocitos y los granulocitos (p . ej ., neuirofilos) . Durante la centrifugation, los eritrocitos y los polimorfonucleares neutrofilos (PMN) atraviesan el Ficoll y se depositan en el fondo del tubo, mientras clue los linfocitos quedan retenidos en la interfase entre el medio de cultivo y el Ficoll . Los macrofagos y los pocos PMN clue pudieran haber quedado en la poblacion linfocitaria obtenida se pueden eliminar mediante la

sangre entera diluida y desfibrinada

plas(rna c',iluid(,

linfocitos Ficoll Isopaque eritrocitos . granuloc - ton

Ficoll Isopaque

y pla(I(,ptas

adicion de limaduras de hierro ; estas son ingeridas por los fagocitos clue, a continuation, se separan mediante un iman potente. Los macrofagos tambien pueden ser eliminados dejando la

suspension celular en reposo sobre una placa de plastico . Se adhieren al plastico, y los linfocitos quedan libres y pueden ser separados .

Aislamiento de subpoblaciones fnfocitarias: formation de rosetas

~alula T~

antieritrocito de buey gradientes de Ficoll . Tambien se muestra una modification de est., tecnica clue permite aislar celulas con otros receptores (2). Poiejemplo, algunas celulas T (celulas T-;) poseen receptores del dominio Fc de Ig (Fc() . Estas celulas son identificadas y aisladas debido a su propiedad de formar rosetas con eritrocitos de buey sensibilizados con una cantidad no aglutinante de anticuerpos antieritrocito de buey . A la derecha se muestra un linfocito clue ha formado una roseta (3) . (Por gentileza del Dr . P. M. Lydyard.)

Fig. 29 .20. La formation de rosetas se basa en el hecho de clue algunas poblaciones de linfocitos poseen receptores de eritrocitos . Las celulas T humanas poseen receptores de los eritrocitos de camero (E) ; estos receptores son las moleculas CD2 (1). Las celulas T de los ratones no poseen una cantidad suficiente de los mismos, por to clue no pueden ser aisladas mediante este sistema. Las rosetas se forman cuando se mezclan celulas T y eritrocitos, y pueden ser separadas de las celulas B (clue no forman rosetas) en

Tecnicas inmunol6gicas

Aislamiento de subpoblaciones linfocitarias : separar en placa antigenos de superficie correspondientes a los anticuerpos de la placa

Ill de celulas T

I.

Ag -

antigeno

eels . estimuladas da l ganglios linfaticos - -lcels . alimentad singenicas

adicion de la mezcla de linfocitos a la placa

TI

lavado de la placa para 1-- separar el resto de las celulas

eel . T aetivadas

cultivo durante 4 dias

ooooo~o~
determination de la especificidad Fig. 29 .21 . Las poblaciones celulares se pueden separar mediante placas sensibilizadas con Ab . Los Ab se unen de forma no covalence a la placa de plastico (de la misma forma que en los inmunoanalisis en fase solida) y a continuation se anade a la placa la mezcla de celulas . Las celulas que poseen el Ag (Ag') se unen al Ab, to que permite eliminar las celulas que no to poseen (Ag ) mediante tin cuidadoso lavado . En algunas ocasiones es posible recuperar las celulas unidas a la placa mediante la modification de las condiciones dal medio de cultivo o mediante digestion enzimatica . Las celulas que se Linen a la placa se suelen alterar como consecuencia de esta union ; por ejemplo, la union a la placa puede entrecruzar el antigeno e inducir la activation de las celulas. Por tanto, el metodo es especialmente titil para eliminar una subpoblacion de la poblacion celular total, mas que para aislar subpoblaciones. Algunas aplicaciones de este metodo son la separacion de las celulas TH y Tc mediante Ab frente a CD4 o CD8 y la separacion de las celulas T y B mediante anti-Ig Ique se Line a los Ab de superficie de las celulas B) . Tambien se puede sensibilizar la superficie de la placa con Ag, en cuyo caso se pueden separar las celulas que se Linen a tin Ag determinado de las que no se Linen. Fig. 29.22. En esta figura se muestra uno de los muchos protocolos qua existen para la obtencion de lineas de celulas T. Los ratones son estimulados con antigeno (generalmente por via subcutanea en la planta de las patas traseras) y, una semana mas tarde, se extirpan los ganglios linfaticos que drenan la region en la que se ha inyectado el antigeno len este caso los ganglios popliteos e inguinales) ; estos ganglios son cultivados conjuntamente con el antigeno y con celulas alimentadoras singenicas, es decir, procedentes de la misma cepa endogamica (p . ej ., timocitos o esplenocitos normales) . Cuatro dias despues se separan los linfoblastos y se induce so proliferation con interleucina 2 (IL-2) . Cuando la poblacion de celulas se ha expandido to suficiente, se determina su especificidad antigenica y CPH mediante una prueba de transformation linfocitaria, y se mantiene mediante ciclos alternativos de cultivo en celulas alimentadoras tratadas con el antigeno y medio de cultivo con IL-2 .

l cclulas'I- CSPctificas do till antigeno determinado se sucIcn cictcctar mediante la prueba tic cstirrttllaCio'm do fnfo Citos, Cn la que sc considcra gtic una cclula resl)tntdC trCntC a tin antigeno cuando sc dais -a sit CjClo tclular ~. Cntpieia a incorpc)rar procursorcs do la sintcsjs tic AD\ qirf. 39.3 .;) . La actisidad cittutieica do: ]as poblaciones celulares se suck tictcrnninar comprobandr) sit capaciciad para liar celulas dialla 11). Cj ., celulas infcctadas p01sinus, celulas tttntoraICS, celulas do tcjidos alogcnicos) . La lisis tic Ins celulas liana se dl me(iiante la mcdicia do: la fbcraci6n do: crc)Int) I ;,/irf. 39 .36') .

~ c\l)crintcntois hart tictcrininar Lis tits migratorias do los lin (i)titl~s iii viro suclcn cstar hasados en la invcccion intravellosa do: linl6cito s ntarcados t- cn cl lutstcrior seguimicnto do los ntismos ,t trascs do: Ion di)crsos orgattos . Las celulas SC puctlcn ntarcar radiactit antente o mediante colorantes 11uorescetttcs establcs . Las celulas marcadas ratiiacti\ anten(e w utiliian karat ntcdir do: ti)rnta cuantitati\a la migration celular. La distribution do: cstas celulas en N)s ditcrentes ()r` ;anos se ptretiC (Ictcrminar mediante radioatttog,ratia o l X isttalizacioin directa do Las celulas fluorcscontcs utifzando till tniCrOSCt)pio con ilttrnillacion ultra\iolcta . El an ;ifsis do: [as molcttil as do adltcrcncia intplicadas en los to ncSmcm)e do: tnigracion do: los ICtiCOCitOS SC suck Ilccar a Cabo In vitro. l .a prueba do: Stamper 1V<x)drootc consists cn tncdir la union tfrccta de los linfocitos a JS )'cnulas tic epitcho alto tras l ttcr etc contacto los linfocitos colt sccclolics LIC galtgllr)S Ilnt :ltlco5,
l .a,~

Migration de los linfocitos

Pruebas de celulas efectoras

Prueba de formation de placas

celulas cie baio procedentes de un animal inmunizado

eritrocitos sensibilizados con antigeno

incubar, anadir complemento

Fig. 29 .23. Las celulas productoras tie anticuerpo se pueden analizar mediante la mezcla de la poblacion problema con eritrocitos sensibilizados con antigenos. Tras la incubation, los eritrocitos que rodean a las celulas que secretan anticuerpos especificos quedan recubiertos por estos ultimos, por to que pueden ser lisados por el complemento. En la imagen de la derecha se observa el aspecto de una placa con una celula B en su centro . Se pueden formar dos tipos de placas : Placas directas : los anticuerpos especificos IgM producidos por las celulas pueden provocar directamente la lisis mediada por el complemento de los eritrocitos sensibilizados con su antigeno correspondiente, dada su gran capacidad para fijar el complemento. Placas indirectas : los anticuerpos especificos IgG no fijan el complemento con tanta eficacia, por to que para que las celulas productoras de IgG lisen los eritrocitos es precisa la adicion de anticuerpos anti-IgG . Llevando a cabo esta prueba en presencia y en ausencia de anti-19G, es posible calcular el numero de celulas B productoras de IgM y el de las que producen IgG.

Tecnica de ELISPOT detection de celulas B especificas de antigeno linfocitos detection de celulas T productoras de citocina linfocitos

B
u. _ . _ _ _ : . .

-~
. qua .

B
v .

Ir

placa recubierta de antigeno anadir conjugado enzima-anti-Ig

~r fir_ it placa recubierta de anticitocina

anadir conjugado enzima-anticitocina

Fig. 29 .24. La tecnica de ELISPOT permite detectar celulas B productoras de un anticuerpo especifico o celulas T productoras de una determinada citocina . Para poder detectar las celulas productoras de anticuerpo se extienden los linfocitos en una placa sensibilizada con antigeno . Los anticuerpos secretados se juntan al antigeno situado en las proximidades de la celula productora . A continuation, se detectan los puntos en que el anticuerpo se ha unido al antigeno mediante la adicion de una enzima conjugada con antiinmunoglobulina y un cromogeno . Para poder detectar las celulas productoras de citocina se anaden a las placas anticuerpos anticitocina y se visualiza la citocina capturada mediante una enzima conjugada con un anticuerpo frente a otro epitopo de la citocina . Arriba a la izquierda

anadir cromogeno

se muestra el aspecto de una placa revelada . (Fotografia por gentileza de

P. Hutchings y Blackwell Scientific Publications .)

Tecnicas inmunologicas
places tic Pcccr u otros organos yuc contcngan s cnt1LIS tic cstc tipo . A continuacicin se dcternlina microscdpicantentc cl ntintcro do cclulas atihcridas . I .os antictrcrpos Creme a las nu)Icculas tie adltcrcniia rcduccn Cl grado tic union, sicntpre \ cuancio cstos anticucrptts SC unan a Ias ntoleculas de adltcrcncia en Isis proximiClades tic sit centro :titian . Tanlbien cs posiblc blotiucar la adllerencia tic los linfocitos a nltrn)rcapas tic cclulas cpitclialcs in vitro . Dc esta forma cs posible identificar Ias molcculas do adltcrencia ntarcando los linfocitos o Ias cclulas cpitcliales 1 . utilizando antirucrl)os clue bloyttcen la union, ion to clue I'll ntunoprecipitan Ias n10Icculas tic ldlict-cncia cspecificas .

Prueba de estimulacion de linfocitos medio de cultivo

sangre entera en solution salina

MODIFICACION GENICA DIRIGIDA Y ANIMALES TRANSGENICOS

L'na tie Ias fi)rn1,1s Iic cstudi,1r Cl lirnillrn,1n11ent() tic utla r1ur1C cult tictcrntinatia CS mediante la gcneracion tic attintalcs tr,tnsccnicos en los yuc no se expresc o se c\presc exccsi\- amcntc o tic forma nuitante el gen de dicha molccula . 1,a tccnica original pare obtener animalcs transgenicos consistc ell Ia in ecci61l directa ell cl pronticleo tie tin oocito fcctindado de UIY1S 100 copies del gen en cucstion . A continuacicin, cstc )xtcito se trvlsficrc al titero do una ltcntbra tic ratcin scutlocntbarazatia, dondc sc ticsarrolla . Este tipo tic procetlimicntos tie lugar a la gcncricion do animalcs de ditcrsas caractcristicas . En una minorm tic cllos una o rmis copies del gen se hen insertado en uno tic los cromosontas antes tic que sc produzca la prinlcra ditisicin cclular; CS tos animalcs soil hcrcrctiigotos con rcspccto al transgen . Fn trtros Iurios animalcs rl gen SC It :t inscrtat1o LICSpucs tic clue SC prerdujcsc la prinlcra (its isicrn celular, pcrr to .lue I(rs animalcs resultantes son quimcras (]tie poscen cclulas rxuntales Y cclulas clue amticncn cl trans gen . En la matoria tie los animalcs cl Veil no sc Help a inscrtar ell cl cromosonta . Las caractcristicas tic cada animal sc dctcrrninan a traces tic la dctcccidn del gen en sits cclulas mediante -Southern blotting . Una cez dctcctados Icrs ra tones transgenicos hetcroclgotos sc puetie obtener trna ccpa transgcnica hontocigc)tica mediante tin proccso tic reproduction endog.itnica . Cicncralrnentc los transgcnes sc inscrtan en cl cromosoma ell blo9ue y al azau% EI ntintcro tic transgcnes insert tio se dcnontina nirntero do copies . Es importante clue la inscrcicin de este blo clue net ticstruca ningtin gen escncial . I-a modalidad de exprcsion tic los transgcncs ticpcndc dr una scric tic factores . En ul,unas ocasioncs qucdan bajo cl control tic prontotorcs gcncrales, por- to clue son ezprcsados en Ia macoria tic his tejidos . En otras ocasioncs clucclan lig,ados t promcttores especificos de tin tejido, pcrr to clue solo scran CXpr-CSatios ell tiCtcrr111n:1dOS tejidos (p . ej ., stil() ell los littti)citos) o ell tlctcrntinadas t*ascs del ticsarrollo . Se debc ser catittr al interpreter el tcnotipo tic los animales transgenicos, \a que: nrta ezpresicin escesica del transgen en till tcjiCio inadccuaclo puede acarr- ear consccucniias fisiologicas imprccisiblcs . t na posihilid,ld rmis refnada cs 1,1 utiltzacion tic la modificaci6n , cnica thrigi)ia . hi esta tccnica se transfiere tin get) que intcracoona o sc rccontbina con cl correspondiente gen endeigeno, altcrandolo ell cierta rnctlida . Por cjcmplo, cl gen cndogcno puedc ser eliminado i dando lugar a animalcs que cn inglcs sc dcnominan -knockout mice-, es (iecir, )atones -defecticos , ~), puctic experimental- una nrtrtacidn puntual o puede perder uno tic sits cxoncs . Para cllo, sc incccta el g en nxxiifiiatio ell una ee It1la madre crnbrionaril pluripotcncial, en I ;t yuc NC reccanbina corn cl gen endogeno . A cenuinuacitin, esta cclula rnadre se in t-ccta en tin blastocisto ) se implanta tic la misnla mallcra clue C11 cl iaso interior (,hq. 29.? ;~ .

Animales transgenicos

sangre separada
Fig .

cultivo

medida de la radiactividad

29 .25 . En la prueba de estimulacion de linfocitos se transfiere en primer lugar sangre diluida con solution salina a la superficie de tin tubo con Ficoll Isopaque (cuya densidad esta entre la de los leucocitos y los eritrocitos, por to que es capaz de separarlos), y a continuacicin se centrifuge a 400 , G . De esta forma los linfocitos se separan de los demas componentes celulares y sericos (v . fig. 29.19) . Se lavan las celulas (para eliminar contaminantes como el Ag) y se transfieren a tubos de ensayo con una suspension del Ag en tin medio de cultivo . Dieciseis horas antes de recolectar las celulas, se anade timidina tritiada ('H-timidina). Las celulas son recolectadas mediante tin filtro circular de fibra de vidrio y se determine la radiactividad incorporada por transferencia del disco a tin contador de centelleo liquido . Las cuentas altas indican que los linfocitos hall experimentado una transformacicin, es decir, clue hall respondido frente al Ag . Esta prueba tambien se puede Ilevar a cabo con celulas obtenidas de tejidos linfoides .

Prueba de citotoxicidad por la determinacion de liberation de cromo 5 'Cr

transferencia a place

celulas efectoras

determinacion de "Cr en el sobrenadante

Modification genica dirigida

4i).

cultivo conjunto durante 4-16 horas Para determiner la citotoxicidad de las celulas efectoras se incuban celulas diana en presencia de "Cr, que se incorpora a lax celulas y queda unido a sits proteinas . Tras la incubacicin se elimina el exceso de "Cr mediante tin lavado y se transfieren lax celulas diana a una place . Se cultivan conjuntamente con las celulas efectoras durante 4-16 horas, se recoge el sobrenadante y se determina la cantidad de cromo liberado por las celulas diana que hall sido lisadas por lax celulas efectoras .
Fig . 29 .26 .

Modificacion genica dirigida y animales transgenicos

Modificacion genica dirigida por recombination homologa transgenes

l electroporacion

III

Ii

celulas madre embrionarias selec. cel . con marcador y que han sufrido recomb . homologa

recombination homologa

inyectar en el blastocisto

transferir al utero de una seudoembarazada

Fig . 29.27 . Para generar animales transgenicos se puede utilizar un procedimiento de modification genica dirigida por recombination homologa . Para ello se utiliza un segmento genico que contenga una secuencia homologa a un gen celular ligada a un marcador genico y que, por ejemplo, presente una mutation . Este segmento se introduce en las celulas madre del embrion mediante electroporacion y, a continuation, se seleccionan las celulas en las que se ha introducido el gen exogeno, que se pueden distinguir de las demas por la presencia del marcador . Estas celulas son sometidas a un segundo proceso de selection para separar aquellas en las que el gen exogeno se ha recombinado con el gen endogeno . Finalmente, se inyectan estas celulas en blastocistos y se implantan estos ultimos en el ritero de hembras de ratones seudoembarazadas . Los embriones siguen su desarrollo habitual y nacen normalmente .

Imagine que ha detectado una molecula en la superficie de los linfocitos T utilizando una tecnica de inmunofluorescencia con un anticuerpo monoclonal nuevo . Seleccione la combination adecuada de tecnicas que le permitirian contestar a las siguientes preguntas : ~Reducira la presencia de diversas cantidades de anticuerpo la capacidad de proliferation de las celulas T cultivadas en presencia de concanavalina A (mitogeno)? ~Y el numero de celulas que producen IL-2?

~Cual es el peso molecular de la molecula? ~Esta presente la molecula tanto en las celulas T CD4` como en las CD8+? " ~Cual es la concentration de anticuerpo en el sobrenadante del cultivo de celulas de hibridoma que to producen?

LECTURAS ADICIONALES Coligan JE, Kruisbeck AM, Margulies DH, et al. (eds) Current Protocols in Immunology, New York Greene Publishing Associates & WileyInterscience, 1991 -continually updated . Hudson L, Hay FC Practical Immunology . 3rd edn . Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1989 Johnstone A, Thorpe R . Immunochemistry in Practice. 2nd edn . Oxford, Blackwell Scientific Publications, 1987 . Rose NR et air, (eds) Manual of Clinical Laboratory Irrnmunology. 4th edn . Washington : American Society of Microbiology, 1992 Weir DM Handbook of Experimental Immunology. Vols I & II . 4th edn . Oxford : Blackwell Scientific Publications, 1986 Winter G, Griffith AD, Hawkins RE, et al Making antibodies by phage display technology . Annu Rev Immunol, 1994,12 433-55

A end ices
Apendice I: Especificidades HLA
Alelo DPA1'0101 DPA1*0102 DPA1*0103 DPA1*0201 DPA1*02021 DPA1*02022 DPAt`0301 DPA1 ` 0401 DP81 *0101 1c DPB * 01012 DPB11 *0201 2 DPB *1 02011 DPB 1*0101 2 DPB1*0202 DPB1*0301 DPB1"0401 DPB1*0402 DPB1*0501 DPB1*0601 DPB1*0801 DPB1*0901 DPB1'1001 DPB1'1101c DPB1`11012 DP81*1401 DP81*1501 DP81*1601 DPB1'1701 DPB1'1801 DP81*1901 I DP81`20011c DPB1*20012 DPB1'2101 DPB1*2201 DPB1*2301 DP81*2401 DPB1*2501 DP61*26011c DPB1'26012 DPB1`2701 DPB1'2801 DPB1'2901 DPB1*3001 DPB1*3101 DPB1*3201 DPB1*3301 DPB1`3401 DPB1'3501 DP81`3601 DPB1*3701 DP81`3801 DPB1'3901 DPB1'4001 DPB1'4101 DPB1*4401 DPB1*4501 DPB1*4601 DP81`4701 DP81`4801 DPB1*4901 DP81*5001 DP81*5101 DP81`5201 DPB1*5301 DPB1*5401 DPB1*5501 Espedfiddad DPw1 DPw1 DPw2 DPw2 DPw2 DPw2 DPw3 DPw4 DPw4 DPw5 DPw6 _ Alelo DQAI'0101 DQA1*0102 DQA1*0103 DQA1'0104 DQA1*0201 DQA1*03011 DQA1'03012 DQA10302 DQA1'0402 DQA1' 050 4 1e DQA1*05011 DQA1 '05012 DQA1*05013 DQA1'0502 DQA1'0601 DQB1*0501 DQB1*0502 DQB1*05031 DQB1*05032 DQB1"0504 DQB1*001c DQB1*06012 DQB1*0602 DQB 1 ' 0603 DQ81"0604 DQ81*06051c DQB1*06052 DQ81*0606 DOB 1`0607 DQ81-0608 DQ81*0609 DQ81*0201 DQB1*0202 DQB1'0301 DQ81*0302 DQ81*03031 DQB1*03032 DQB1*0304 DQ81'0305 DQB1'0401 DQ81`0402 Alelo DMA'0101 DMA`0102 DMA*0103 DMA*0104 DMA`0101 DM8*0102 DMB*0103 DMB*0104 Alelo DRA'0101 DRA'0102 DRB1*0101 DRB1*0102 DRB1*0103 DRB1'0104 DRB1*1501 DRB1*15021c DRB1*15022 DRB1'1503 DRB1*1504 DRB1'1601 DRB1'1602 Eswifiddid Espxificided DQ50 i DQ501 DQ511) DQ50) 006111 006111 DQ60 ) DQ6i 006111 006(1) 006(1) DQ2 DQ2 DQ713) DQ8(3) DQ913i DQ9i3i DQ7131 DQ4 DQ4 Especificidad DRB1'1603 DRB1*1604 DR01'1605 DRB1*1606 DR81*03011c DR81*03012 DRB1*0302 DRB1'0303 DRB1`0304 DRB1*0401 DRB1*0402 DRB1o04O3 DRB1*0404 DRB1*0405 DRB1*0406 DRB1 " 0407 DR61*0408 DRB1*0409 DR81'0410 DRB1*0411 DRB1`0412 DR81*0413 DRB1'0414 DR81'0415 DRB1*0416 0R81*0417 DRB1*0418 DRB1'0419 DRB1'11011 DRB1*11012 DRB1 1 1102 DR B1 " 1103 DRB1'11041 DRB1'11042 DRB1`1105 DRBl - 1106 DRB1*1107 DRB1'11081 DRB1 " 11082 DRB1'1109 DRB1'1110 DRB1`1111 DRB1*1112 DRB1 " 1113 DR B1 '1201 DRB1'1202 DR B1*1203 DRB1 " 1301 DRB1*1302 DRB1*1303 DRB1'1304 DRB1'1305 DRB1*1306 DRB1'1307 DRB1 " 1308 DRB1'1309 DRB1*1310 DRB1*1311 DRB1'1312 DRB1'1313 DRB1`1401 DRB1`1402 DRB1*1403 DRB1*1404 DRB1'1405 DR81*1406 DR81*1407 DR81`1408 DR81'1409 DR16(2) DR2 DR 17(3) DR17131 DR1813) DR18131 DR3 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR4 DR11(5) DR1115) DR1 051 DR11151 DR1115l DR11(5) DR11(5) DR1115) DR11(5) DR1115) DR11(51 DR12(5) DR12151 DR12(51 DR12(61 DR1316) DR13161 DR13(6) DR13(6) DR13(6) DR13(6) DR13(6) DR13(6) DR14(6) DR14161 DR1403 DR1404 DR14(6) DR14(6) DR1416) DR14(6) DR14i6) DRB1*1410 DRB1'1411 DRB1*1412 DRB1*1413 DRB1*1414 DRB1'1415 DRB1*1416 DRB1'1417 DRB1*0701 DRB1'0801 DRB1'08021 DR B1 '08022 DRB1*08031 DRB1*08032 DRB1'08041c DRB1*08042 DRB1'0805 DRB1*0806 DRB1'0807 DRB1*0808 DRB1'0809 DRB1'0810 DRB1'0811 DRB1*09011 DRB1*09012 DR81'1001 DRB3'0101 DRB3*0201 DRB3*0202 DRB3'0301 DRB4 1 01f DRB4'01011c DRB4'01012N DRB4'0102 DRB4'0103 DRB5'0101 DRB5'0102 DRB5'0201 DRB5'0202 DRB5'0203 DRB6*0101 DRB6*0201 DRB6'0202 DRB7*01011 DRB7*01012 Alelo 8*0701 B*0702 B"0703 B*0704 8*0801 B*0802 E1"1301 8*1302 B"1401 B*1402 B*1501 B*1502 8*1503 B*1504 8"1505 8*1506 8*1507 B*1508 B*1509 B*1510 B"1511 B*1512 DR7 DRS DRS DR8 DRS DRS DR8 DR8 DR8 DRS DRS DR8 DR8 DR8 DRS DR9 DR9 DR10 DR52 DR52 DR52 DR52 DR53 DR53 DR53 DR53 DR53 DR51 DR51 DR51 DR51 DR51 Ewdficided B7 B7 B703 B7 B8 B8 813 B13 8641141 865114) 862115) 875115) 872(70) 862115) 862115) 862115) 862115) 862115) 870 B7(70) B15 876115) 8'1513 B*1514 B*1515 B*1516 B*1517 B *1518 B* 1519 B * 1520 B *1801 B*1802 B*2701 B*2702 8`2703 8'2704 B`27051c B*27052 B*2706 B*2707 B*2708 B*3501 B*3502 8'3503 8`3504 B*3505 B*3506 B*3507 8'3508 B*3701 B*3801 8`3802 B'3901 1c 8'36013 B'39021c 8'39022 8`3903 8'3904 B*40011c 8'40012 8'4002 8'4003 8'4004 8'4005 8'4006 8'4101 8'4201 B*4402 8'4403 8'4404 8'4501 8`4601 B*4701 8 " 4801 8'4802 B*4901 8`5001 8`5101 8'5102 8`5103 8'5104 B*5105 B'52011d 8'52012 8'5301 B*5401 8'5501 B*5502 B*5601 B*5602 B*5701 B77i151 876115) 8621151 863(151 8631151 876051 8621151 B18 B18 B27 827 827 827 827 827 827 B27 B35 B35 B35 B35 B35 835 835 B35 B37 838(161 8381161 83901 83901 B3902 83902 8391161 839116) 8601401 B60(401 861(401 840 B40 84005 861140) B41 B42 8441121 844112) 8441121 845(12) 846 B47 848 848 8491211 850(21) 851151 85102 85103 85115) 85115) 852(5) 852(5) 853 854(221 8551221 8551221 B56i22i B56(22i 857(17) 8'5702 8`5801 8`5901 8'6701 8'7301 8'7801 Alelo Cw'0101 Cw*0102 Cw'0201 Cw'02021 Cw'02022 Cw'0301 Cw'0302 Cw'0303 Cw*0304 Cw'040 Cw'0402 Cw*0501 Cw'0601 Cw'0602 Cw'0701 Cw'0702 Cw " 0703 Cw'0801 Cw"0802 Cw*0803 Cw*1201 Cw'12022 c Cw " 1202 Cw'1203 Cw'1301 Cw'1401 Cw*1402 Cw'1501 Cw " 1502 Cw'1503 Cw*1504 Cw'1601 Cw'1602 Cw*1701 E*0101 E*0102 E"0103 E*0104 G*01011 G"01012 G*0102 G*0103 Alelo A'0101 q*0102 A*0201 A*0202 q*0203 A*0204 A*0205 A*0206 A'0207 A*0208 A*0209 A'0210 A'0211 A*0212 A*0213 A*0301 857(171 8581171 B59 B67 873 87801 Espedfioidad Cw1 Cw1 Cwt Cwt Cw2 Cw3 Cw3 Cw3 Cw3 Cw4 Cw4 Cw5 Cw6 Cw6 Cw7 Cw7 Cw7 Cw8 CWB Cw8 Espadkided A1 A1 A2 A2 A203 A2 A2 A2 A2 A2 A2 A210 A2 A2 A2 A3 A'0302 A'1101 A'1102 A'2301 A*2401 A*2402 A*2403 q*2501 A*2601 A*2602 A'2603 A*2604 A *2 90 1 A *2 90 2 A"3001 q*3002 A*3003 A'31011 A*31012 A*3201 A'3301 A'3302 A*3401 q*3402 A *3601 A4301 A6601 q*6602 q"6801 1c A'68022 A'6 9 0 1 A'60 A " 7401 q<g001 Alelo TAP1*0101 TAP1*02011 TAP1*02012 TAN '0301 TAP1*0401 TAP2*0101 TAP2'0102 TAP2'0201 A3 All A11 A23(9) A24(9) A24(91 A2403 A2500) A2600) A26110) A2600) A2600i A2909) A261 191 A301 191 A301 19 ; A3009) A31(191 A31 1 19) A32091 A33(191 A33(19) A3400) A3400)i A36 A36 A66oo)I A6600) A68(28) A681281 A68128) A69128) A741191

EspeAddad

DR1 DR1 DR 103 DR 1 DR 15(2) DR 15(2) DR 15(21 DR15121 DR15(2) DR16(2) DR16(21

En la columna de la derecha de cada grupo se enumeran las especificidades antigenicas que se pueden detectar por medio de tecnicas seroldgicas . Las especificidades HLA-D tambien se detectan en la prueba de mezcla de linfocitos . Las especificidades que ailn no han sido bien definidas se designan utifzando el sufijo w (del ingles

workshop, en fase de trabajo) . Tambien se muestran las variantes alelicas de los genes CPH en cada locus. (Segun datos de J. G. Bodmer, S. G. E. Marsh, P. Parham y cots . Nomenclature for factors of the HLA system . 1994 . Tissue Antigens 1994 ;44:1-18 .)

Apendices

Apendice II : Marcadores CD

marcadores CD peso molecular Mail) 49 45 43 55 50 25,20, 19, 16,22 55 67 100 40 36.32 24 100 180 165 150 90-120 150 5355 50-65 48 95 95 33-37 130-140 45 41,38 55 120 TNFR IgSF Int TNFR IgSF _IgSF IgSF CCP TM4 55 44 130 120 140 40 67 105-120 160-260 88 40-52 45 TNFR Into 70-100 48 12025 , 23 135,23 22 85 Muc 95 80-95 200 ,r CP rt t r a End MSC End MSC, CFD End LSC CFD CFO : CFD P P P EoB LSC Thy Thy Thy Thy CL CD a0 ~4c

CD CDIa CDlb CD1c Old CD2 CD3

identidad'funcion

familia IgSF IgSF IgSF IgSF IgSF IgSF IgS F IgSF Scav Scav IgSF IgSF TM4 ZnMP Into Inter Into ZnMP Carb IgSF IgSF Carlo Int(1 IqSF TM4 _ CCP IgSF Clec CytR

h o ou``~~A
~o~ ~ F

\oc: `a o ~

\mo Q

~tia a" o~

ZPresentacion de lipidos7 Presentaciondeantigenos Receptor de LFA-3 (adherencia) Comple)o de senalizacion de TCR (,5 .,) ( ;.vl p Coestimulador iactivacionl Coestimulador (activation) Transduccion de senales Receptor del CPH de clase I

CD5 CD6 CD7 CD8 CD9 CD10 CD11a CD11b CD11c CDwl2 CD13 CD14 CD15 CD16 CD16b CDwl7 CD18 CD19 CD20 CD21 C022 CD23 CD24 CD25 CD26 CD27 CD28 _CD29 _CD30 _CD31 _CD32 _CD33 CD34 CD35 CD36 CD37 CD38 CD39 CD40 C041 CD42a CD42b CD42c CD42d CD43 CID" CD45

Activation de las plaquetas Endopeptidasa neutra

LFA-1 CR3 CR4 Aminopeptidasa N Receptor proteico qua liga LPS Sialil Lewis X FcfRIIIA/Fc(RIIIB Fc-IRIIIB Lactosil ceramida LFA-1r'CR3r'CR4 Subunidad correceotora de la celula B Canal de Ca" Subunidad correceptora de la celula B CR2 Molecula de adherencia Fci RlI Coestimulador (activation( IL-2R Dipeptidil peptidasa IV Se liga con CD70 Se liga con CD80, CD86 VLA-1, VLA-6 Transduccion de la sepal lapoptosis) PECAM-1 Fc;Rll Se liga con la selectina-L CR1 Molecula de adherencia Transduccion de senales ( activacidn) Transduccion de senales (adherencia) Se lira con CD154, coestimulador Adherencia Lie GPllb a la matriz Adherencia de GPIX Adherencia de GPlb Adherencia de GPlb Adherencia de GPV Leucosialina se lioa a CD54 Adherencia de Pqp-1 a la matriz

t x

it

Eo

Antigeno leucocitario comun ILCA)

Apendices

Apendice II : Marcadores CD
marcadores CD peso molecular (kdal) 220 190,205 CCP IgSF Into Into Into Into Into Into IgSF
u

CD
CD45RA CD45RB CD45RO CD46 CD47 CD48 CD49a CD49b CD49c CD49d CD49e CD49f CD50 CD51 CD52 CD53 CD54 CD55 CD56 CD57 CD58 CD59 CDw60 CD61 CD62E CD62L CD62P CD63 CD64 CD65 CD66a CD66b CD66c CD66d CD66e CD66f CD68 CD69 CD70 CD71 CD72 _CD73 C074 CD75 _CDw76 CD77 CDw78 CD79a CD79b CD80 Fc-(Rl

identidadffuncion LCA restringido LCA restringido LCA restringido MCP (cofactor proteico membranal Se liga con CD2 (roedores) VLA-1 de adherencia a la matriz VLA-2 de adherencia a la matriz VLA-3 de adherencia a la matriz VLA 4 de adherencia VLA-5 de adherencia a la matriz VLA-6 de adherencia a la matriz (CAM -3 Receptor OX 44 (CAM-1 DAF (factor acelerador degradac io n l NCAM Imoladherencia . calnerviosal . HNK-1 LFA-3 que se liga con CD2 Protecting NeuAcNeuAc-Gal Subunidad del receptor de vitronectina E-selecting L -selecting P-selecting de vitronectina Campath-1

familia

\J O ar

F ~a

NCO

J ' a

190 66,56 47-52 41 210 160 125 150,80 .70 135,25 120,25 124 120,24 21-28 32-40 75-115 70 220135 110 4065 19 LC

Into TM4 19 SF CCP IgSF IgSF Carb Intp Clec Clec Clec TM4 IgSF Carb IgSF IgSF IgSF 19SF IgSF IgSF

105 115 _75-80 150 53 70 180-200 95-100 90-95 30 180-200 110 *

End *End *E

Dodecasacarido de ceramida BGB-1 Anteriormente CD67 INCA CGMI Ag carcinoembrionario ICEA) Glucoproteina especifica del embarazo Macrosialina Activation de la induction Ligando de CD27 Receptor de transferrina

Clec TNF Clec

32,28 175,95,75 95 43,39 69 41,35,33 53

* * *

* *

Ecto-5'-nucleotidasa li (cad . invariable mol . CPH close III u-2,6-sialiltransferasa, ligando de CD22 NeuAc u-2,6 (Gal 131,4 GIcNacln Globotriaosilceramida Igu Igp B7-1, se liga a CD28 y CD152

_Carb Carb IgSF IgSF IgSF

End

33 39 60 Rectangulo relleno = se expresa la molecula . Rectangulo vacio = la molecula no se expresa todavia . Rectangulo semirrelleno = subpoblacion .

En la tabla se enumeran los marcadores CD que se conocen de las celulas hematopoyeticas, asi como su distribution . P = plaquetas ;

CD =

Thy = timocitos ; CL = celulas de Langerhans : Eo = eosinofilos; B = basbfilos ; CFD = celulas foliculares dendriticas ; LSC = celulas madre linfoides ; MSC = celulas madre mieloides ; CP = celulas plasmaticas ; End = endotelios .
celulas dendriticas ;

no se ha detectado

*= Sdlo

en celulas activadas .

Apendices

Apendice II : Marcadores CD

marcadores CD

g a y
pusu

CD

ident idad;funcion

familia

molecular (kdal) 26 60 43 74

a" J 2 v

co

a~

OQ

CD81 CD82 CD83 CDw84 CD85 _CD86 _CD87 _CD88 _CD89 CD90 CD91 CDw92 CD93 CD94 CD95 CD96 CD97 CD98 CD99 CD100 CD101 CD102 CD103 CD 1 04 CD105 CD106 CD107a CD107b CDw108 CD109 CD114 CD115 CD116 CD117 CD118 CD119 CD120a CD120b CD121a CDw121b CD122 CD123 CD124 CD125 CD126 CD127 CD128 CD130 CDwl31 CD132 CD134 CD135 CDwl36 CDwl37 CD138 CD139

Unidad correceplora TAPA de las ce rl. I ~Presentacion de antigeno? iCoestimulacion? 87-2 se liga con CD28 yCD152 Urocinasa activador del plasminogeno C5uR FcuR Thy-1 Receptor de la 2-macroglobulina

TK14 TM4 IgSF

19SF TM7 IgSF IgSF LDLR

80 35-59 43 50-70 25-35 515,85 70 120 Thy

it

Mas

N N

End End

Se liga con CPH de clase I Transduccion de senates poiFas (apoptosis) Se liga a CD55 Modula el Ca ++ intracelular ~Proliferac16n)

Clec TNFR IgSF EGFR

70 43 160 75-85 80,45 32 150

IgSF ICAM-2 se liga a LFA-1 aEfi7 integrina 114 integrin as Endoglina se liga con TGFp VCAM-1 se liga con VLA-4 IgSF IgSF Intu Intp

120 55,65 150,25 220 90 90-110 110 120 80 * * * * * * * * * End End *End *end *end End il End

Factor activadorde las plaquetas G- CSFR, IL-IOR M-CSFR Cadena .r. del GM-CSFR Receptordelfactorc-khdelascelulasmadre Receptor del IFNmp Receptor del IM, TNFR-I TNFR-11 IL-1R tipo I IL-1 R tipo II Cadena 11 de IL-2R IL 3R It. 4R IL-5R IL 6R IL 7R UK recegrrut:6.xjuimiocina CXCR1 IL-6R, subunidad comun de IL-11R IL 3R, subunidad comun de IL 5R Subunidad comun de IL-2R 4R AR, -15R ~Molecula de adherencia? TNFR 7R TM7 I+SF C tR C R TNFR TNFR IgSF 19SF CytR C tR C C R R 19SF CytR IgSF

170 110 130 150-130 60 145 90-100 60 75-85 80 60 -70 75 70 130-150 55-60 80 68-80 58 130 140 64 50 155,130 180

Thy

CM

End

CM * * Eo End LSC

I SF

CM

CM

Coestimuladora (activation) Sindecan se liga con el colageno de tipo I

TNFR

30 228,209

Apendlces

Apendice II : Marcadores CD
a y peso molecular (kdap 180,180 Clec ZnMP 105 46 170-180 135 110,90,25 IgSF IgSF 130 55-65 250 75-95 TM4 IgSF TNF TNFR +SF 32 33 38-40 32-39 80-90 60-70 42-50 IgSF IgSF I SF Clec 58,50 58 .50 58 .50 44 240 130 80 37 1,^,.10 Th CM CFO E dl * ,t Thy e * f

marcadores CD

CD
CD140 CD141 CD142 CD143 CD144 CD145 CD146 CD147 CD148 CDw149 CDw150 CD151 CD152 CD153 CD154 CD155 CD156 CD157 CD 158a CD158b CD158c CD161 CD162 CD163 CD164 CD165 CD166

identidad(funcion Receptor PDGF Trorr,L-," iudulina Fa l,

T

familia

J 4'

\ay y Q

~J

0 y ~a

oe~ e

c o` F

Aa

Qa

.~J o

oiph

End End End End End End End

-iar

Eniima convertidora de angiolensina ( ECA1 VE-cadhenna de adherencia tAdherencia? Neurotelina . 4basigina de adherencia? Inhibition por contacto MEM3 ISLAM? transduccion de senales tPETA3? senales iadherencia) CTLA 4 se lip a CD80 y CD86 CD30L se liga con CD30 CD40L se liga con CD40 Recer[7rir~fr ADAM8 ADP-ribosil ciclasa p58.1, p50.1 se ligan con CPH de close I (KIR) p58,2. p50,2 se liga con CPH de close I IKIR) .:58,3, 50,3 activation Icaotoxicidadi NKRP-1 modula la citotoxicidad PSGL-1 se liga con la P-selecrina M130 MGC-24 adherencia con las wAulas estromales AD2 adherencia con el e ( itefo timico ALCArn se liga co n CDs ~~- -

End

IgSF

T = celula T

ZnMP = metaloproteinasa de tint Into = cadena alfa de la integrina Carb = hidrato de carbono Clec = lectina de tipo C Intl3 = cadena beta de la integrina CCP = dominios proteicos de control del complemento CytR = familia del receptor de las citocinas hematopoyeticas TNFR = familia del receptor TNFINGF Muc = mucina TNF = parecido a TNF En este cuadro solo se recogen relaciones de familias de principios. Algunas moleculas son compuestas .

B = celula B NK = celula asesina natural G = granulocito P = plaqueta

M = linea de los fagocitos mononucleares

CD = celula dendritica Thy = timocito Eo = eosinofilo B = basofilo

CL = celula de Langerhans

CFD = celula folicular dendritica CM = celula madre p = precursor

LSC = celula madre linfoide CP = celula plasmatica End = endotelio N = neutrofilo Mas = mastocito

La letra own indica un numero provisional. Recuadro sombreado = la molecula se expresa. Recuadro sin sombrear = la molecula no se expresa o no se ha podido determinar

MSC = celula madre mieloide

TM4 = familia de pase tetramembrana TM7 = receptor de transito acoplado con la proteina G transmembrana 7

IgSF = familia de supergenes de las inmunoglobulinas Scav = receptores de limpieza

Recuadro medio sombreado = Solo subpoblacion . *= Solamente celulas activadas.

H~-iH111 :IIII-Hs

Apendice III: Las principales citocinas celulas inmunitarias productoras rnacrofagos, LGG, celulas B celulas T

citocina IL-1u IL-1p IL-2

otras celulas endotelio, fibroblastos, astrocitos, etc.

principales dianas celulas T, celulas B, rnacrofagos, endotelio, celulas tisulares celulas T

principales efectos activaclon de linfocitos, estimulacion de macrofagos, mar adherencia entre leucocitos y endotelio, fiebre, proteinas de fase aguda proliferacion y diferenciacion de las celulas T, activacion de los linfocitos citotdxicos y de los macrofagos factor estim. colonias no especifico de estirpe

IL-3 IL-4 IL-5 IL-6 IL-7 IL-8 IL-9 IL-10 IL-11

celulas T celulas T celulas T celulas T, celulas B

celulas madre celulas B, celulas T celulas B macrofagos, fibroblastos celulas del estroma de la medula dsea celulas B, hepatocitos celulas pre-B, celulas T neutrdfilos, basdfilos, celulas T, queratinocitos

factor de crecimiento de las celulas B, seleccidn de isotipos, IgE, IgG1 crecimiento y diferenciacion de las celulas B, seleccion de IgA diferenciacion de las celulas B, induccion de la sintesis de proteinas de fase aguda proliferacion de las celulas B y T quimiotaxis, angiogenesis, liberacion de superdxido, liberacion de granulos aumenta la supervivencia de celulasT, activacidn de mastocitos, sinergia con eritropoyetina

monocitos celulas T celulas T

fibroblastos

celulas TO celulas estromales de la medula osea progenitores hematopoyeticos, osteoclastos

inhibicion de la sintesis de citocinas formacidn de osteoclastos, factor estimulante de colonias, eleva el recuento plaquetario in vivo e inhibe la produccidn de citocinas proinflamatorias induccion de las celulas TH1 crecimiento y diferenciacion de las celulas B e inhibe la produccidn de las citocinas proinflamatorias estimula la proliferacidn de las celulas B activadas, inhibe la secrecidn de Ig

IL-12 L-13

monocitos celulas T activadas

celulas T monocitos, celulas B

L-14 IL-15 IL-16 IL-17

celulas T monocitos eosinofilos, celulasTCD8* linfocitos T CD4' mbsculo, celulas epiteliales celulas T, celulas B activadas celulas T CD4' epitelio, fibroblastos, endotelio

proliferacidn quimioatraccidn de las celulas CD4 liberacion de IL-6, IL-8, G-CSF, PGE-2, estimula ICAM-1, estimula que fibroblastos sostengan a sus progenitores CD34* induce la produccidn de IFN, aumenta la actividad de NK activacidn de macrofagos, granulocitos y las celulas citotoxicas, aumento de la adherencia entre los leucocitos y el endotelio, caquexia, fiebre, induccion de la sintesis de proteinas de fase aguda, estimulacion de la angiogenesis, aumento de la produccidn de molecular CPH clase I Igual que TNFu

IL-18 TNFu macrofagos, linfocitos, mastocitos

hepatocitos

PBMC macrofagos, granulocitos, celulas tisulares

TNFi3 ILTI IFNu

linfocitos leucocitos epitelios, fibroblastos celulas tisulares

induccion de CPH clase I, efecto antivirico, estimulacion de las celulas NK, antiproliferativo, estimula la produccidn de IL-12 de celulas TH1 induccidn de CPH clase I, estado antiviral, anti proliferativo

IFNIi

fibroblastos, epitelios

celulas tisulares, leucocitos

Apendices

Apendice III: Las principales citocinas celulas inmunitarias productoras celulas T, celulas NK

citocina IFNy

otras celulas epitelios, fibroblastos

principales dianas leococltos, celulas tisulares. celulas TH2

inrli~cidn de de CPH oe cases I  II, activation de macrofagos, aumento de adherencia entre linfocitos y endotelio, disminucion de sintesis de citocinas, estado antiviral, antiproliferativo (celulas TO) proliferacidn de precursores de macrofagos

principales efectos

M-CSF G-CSF GM-CSF MIF MCP-1 MIP-1

monocitos macrofagos celulas T, macrofagos celulas T monocitos celulas T, monocitos, neutrdfilos

endotelio, fibroblastos fibroblastos endotelio, fibroblastos macrdfagos epitelios fibroblastos monocitos, celulas T, mastocitos, basofilos, celulas madre monocitos, celulas T, celulas B, celulas NK, mastocitos, eosinofilos, celulas dendriticas, celulas madre monocitos, celulas T, celulas NK, eosinofilos, basdfilos, celulas dendriticas eosinofilos celulas T, celulas NK, celulas endoteliales celulas madre

estimulacidn de la division y la diferenciacion proliferacidn de precursores de granulocitos y macrofagos y activation de los mismos inhibition de la migracidn quimiotaxis, adherencia, liberation histamina, inhibition de formacidn de colonias quimiotaxis, estallido respiratorio, adherencia, inhibition de la formacidn de colonias quimiotaxis, liberation de histamina

RANTES

celulas T

eotaxina IP-10

monocitos monocitos

quimiotaxis quimiotaxis, actividad citolitica, inhibition de la angiogenesis

Glosario
ACP (anafilaxis cutanea pasiva) . Tecnica utilizada para detectar la presencia de IgE especifica de antigeno, consistente en inyectar a un animal por via intravenosa el antigeno asociado a un colorante, habiendo sensibilizado previamente la piel con anticuerpos. Adyuvante . Sustancia que estimula inespecificamente la respuesta inmunitaria frente a un antigeno . Adyuvante de Freund . Emulsion de antigeno acuoso en aceite . El adyuvante completo de Freund contiene Mycobacterium tuberculosis inactivados, mientras que el incompleto no . Afinidad . Magnitud que mide la fuerza de union entre un determinante antigenico (epitopo) y el punto de union de un anticuerpo (paratopo) . Alergeno . Agente que induce reacciones de hipersensibilidad mediadas por IgE, como el polen, el polvo domestico o las escamas de algunos animales . Alergia . Definida originalmente como una alteration de la reactividad en el segundo contacto con un antigeno ; en la actualidad se suele referir a una reaction de hipersensibilidad de tipo I . Alotipo . Proteina codificada por un alelo que puede ser reconocida como un antigeno por otro miembro de la misma especie . Aminas vasoactivas . Productos quimicos como la histamina o la 5-hidroxitriptamina que son liberados por los basofilos, los mastocitos y las plaquetas y que ejercen sus efectos sobre el endotelio y la musculatura lisa de los vasos locales . Anafilaxis . Reaction inmunitaria especifica de antigeno mediada principalmente por IgE, que provoca vasodilatation y contraction de la musculatura lisa, incluida la bronquial, y que puede conducir a la muerte . Anafilotoxinas . Peptidos derivados del complemento (C3a y C5a) Clue inducen la desgranulacion de los mastocitos y la contraction de la musculatura lisa . Animal transgenico . Animal en el que se han incorporado uno o mas genes de los que carecia con anterioridad . Estos genes se suelen colocar bajo el control de determinados promotores para que solo sean expresados en determinados tejidos durante ciertos periodos de tiempo . Anticuerpo . Molecula producida por los animales como respuesta a un antigeno, que tiene la propiedad de combinarse especificamente con el antigeno que indujo su production . Antigeno . Molecula que reacciona con un anticuerpo formado previamente en los receptores especificos de las celulas T y B . Antigenos dependientes e independientes de celulas T. Los antigenos dependientes de celulas T deben ser reconocidos por las celulas T y B para inducir una respuesta inmunitaria . Por el contrario, los antigenos independientes de celulas T pueden estimular directamente la production de anticuerpos por parte de las celulas B . Antigenos Ly . Grupo de marcadores de la superficie celular Clue poseen las celulas T murinas y que estan relacionados con la diferenciacion de las subpoblaciones de las celulas T . En la actualidad muchos se relacionan con el sistema CD . Antigenos muy tardios (VLA-1, VLA-6) . Grupo de integrinas clue comparten una cadena j',1 comun (CD29) . ARAM (motivos de activation del receptor de antigenos) . Secuencias de aminoacidos diana en los dominios intracelulares de CD79a y CD3, que se pueden fosforilar cuando se activa un linfocito mediante su receptor antigenico . ARNhn (ARN heteronuclear) . Parte del ARN nuclear que procede de la transcription del ADN y que aun no ha sido procesado para dar lugar a ARNm . Asociacion genetica . Termino que se utiliza para describir la situation en que determinados genotipos estan asociados con otros fenomenos, como determinados enfermedades . Atopia . Manifestaciones clinicas de las reacciones de hipersensibilidad de tipo I, entre las que se encuentran el eccema, el asma y la rinitis . Autocrino . Se refiere a la capacidad de una citocina de actuar sobre la celula que la ha producido . Autoinmunidad . Reconocimiento y reaction inmunitaria frente a los tejidos propios del individuo . Avidez . Fuerza de union real entre un antigeno y su correspondiente anticuerpo, que depende tanto de la afinidad entre los epitopos y los paratopos como de la valencia del antigeno y del anticuerpo . B7-1 (CD81) y B7-2 (CD86) . Dos moleculas presentes en las celulas presentadoras de antigeno, Clue ligan CD28 en las celulas T y actuan como poderosas senales coestimuladoras . Bazo . Un organo secundario fundamental localizado en la cavidad peritoneal cerca del estomago . BCG (bacilo de Calmette-Guerin) . Cepa atenuada de Mycobacterium tuberculosis Clue se utiliza como vacuna, como adyuvante y como modificador de las respuestas biologicas en diferentes circunstancias . Bcl-2 . Una molecula expresada de forma transitoria por las celulas B activadas que han silo rescatadas de la apoptosis . Bisagra . Portion de las cadenas pesadas de inmunoglobulina situada entre las regiones Fc y Fab y que confiere flexibilidad a la molecula, permitiendo que los dos puntos de union actuen independientemente . La region de bisagra suele estar codificada en un exon propio . Bradicinina . Nonapeptido vasoactivo y mediador mas importante del sistema de las cininas . Bucle de amplification . Via alternativa de activation del complemento, clue actua como sistema de retroalimentacion positiva cuando se escinde C3 en presencia de un activador de superficie . Bursa de Fabricio . Organo linfoepitelial situado en el punto de union entre el intestino posterior y la cloaca de las aves, en el que maduran las celulas B . C1-C9 . Componentes de las vias clasica y litica del complemento, que intervienen en las reacciones inflamatorias, en la opsonizacion de particulas y en la lisis de las membranas celulares . Cadena J . Polipeptido monomorfico presente en las IgA e IgM polimericas y esencial para su formation . Cadenas n (kappa) . Uno de los isotipos de cadena ligera de las inmunoglobulinas . Cadenas ~. (lambda) . Uno de los isotipos de cadena ligera de las inmunoglobulinas . Cariotipo . Constitution cromosomica de una celula que puede variar entre individuos de la misma especie, segun la presencia o ausencia de determinados cromosomas sexuales

Glosario

o la incidencia de translocaciones entre secciones de diferentes cromosomas . Celulas K . Conjunto de linfocitos capaces de destruir sus dianas mediante citotoxicidad mediada por celulas y dependiente de anticuerpos . Poseen receptores de Fc. Celula plasmatica . CelUla B productora de anticuerpos que ha alcanzado su estado de maxima diferenciacion . Celulas asesinas activadas por linfocinas (LAK) . Celulas citotoxicas generadas ex vivo, mediante la estimulacion con IL-2 y posiblemente con otras citocinas . Celulas B . Linfocitos cue se desarrollan en la medulla osea de los adultos y producen anticuerpos . Celulas de Kupffer. Celulas fagociticas que recubren los sinusoides hepaticos . Celulas de Langerhans . Celulas presentadoras de antigenos de la piel, que migran a los ganglios linfaticos y se transforman en celulas dendriticas ; son muy actives en la presentation de antigenos a las celulas T. Celulas de memoria . Linfocitos de vida prolongada que ya se hen encontrado con su antigeno, pero todavia no se han diferenciado por completo en celulas efectoras . Reaccionan con mas rapidez que los linfocitos virgenes cuando vuelven a ser estimulados por ell mismo antigeno . Celulas dendriticas . Conjunto de celulas presentes en los tejidos cue capturan los antigenos y migran hasta los ganglios linfaticos y ell bazo, en donde presentan activamente los antigenos procesados a las celulas T. Celulas efectoras . Concepto funcional que en su contexto se refiere a aquellos linfocitos o fagocitos que ejercen ell efecto final . Celulas an transito . Leucocitos dell donante presentes en ell tejido injertado que pueden sensibilizar al receptor frente al injerto . Celulas foliculares dendriticas (CFD) . Celulas presentadoras de antigeno presentes en las zones B de los tejidos linfoides, que almacenan antigenos . Celulas formadoras de anticuerpos (CFA) . Equivalentes a nivel funcional a las celulas plasmaticas . Celulas gigantes . Grandes celulas multinucleadas que aparecen en algunas ocasiones en las reacciones inflamatorias y clue se tree que proceden de la fusion de los macrofagos . Celulas mieloides. Las lineas de los fagocitos derivados de la medulla osea, que incluyen los neutrofilos, los eosinofilos y los monocitos . Celulas NK (asesinas naturales) . Conjunto de linfocitos que poseen la propiedad intrinseca de reconocen y destruir algunas celulas infectadas por virus y algunas celulas tumorales . Celulas T. Linfocitos que se diferencian primariamente en ell timo y son fundamentales para ell control y desarrollo de las respuestas inmunitarias . Celulas T -;6 . Un pequeno subtipo de celulas T, que expresa la forma 6 dell receptor de la celula T. Celulas T colaboradoras (TH) . Subpoblacion funcional de celulas T que puede colaborar en la generation de celulas T citotoxicas y en las respuestas de anticuerpos de las celUlas B . Las celulas colaboradoras reconocen los antigenos asociados a moleculas CPH de clase II . Celulas T supresoras (Ts) . Poblacion de celulas T definida funcionalmente que atenUa las respuestas inmunitarias de otras celulas T o B, o que provoca la conmutacion de la respuesta hacia otra via distinta de la investigada .

Centros germinales . Areas dell tejido linfoide secundario en ell cue se produce la diferenciacion de las celulas B y la conmutacion de las clases de anticuerpos . CFP (celula formadora de place) . Celula productora de anticuerpo detectada in vitro mediante su capacidad para lisar eritrocitos sensibilizados con ell antigeno en presencia de complemento . c-kit (CD117) . Un receptor para ell factor de las celulas madre, necesario para ell desarrollo de los leucocitos en fases iniciales . Ciclo cellular. Proceso de division cellular cue consta de cuatro fases, G1, S, G2 y M . El ADN se replica durante la fase S y la celula se divide en la fase M (mitosis) . Ciclofosfamida . Farmaco citotoxico que se suele utilizar como agente inmunosupresor . Ciclosporina . Farmaco supresor de la actividad de las celulas T que es especialmente btil en la prevention de los rechazos de injertos. Cininas . Conjunto de mediadores vasoactivos que se producen tras una lesion tisular. Citocinas . Termino generico que se utiliza para designer a las moleculas solubles que intervienen en las interacciones intercelulares . Citometria de flujo . Analisis de las poblaciones celulares en suspension en funcion de la expresion en cads celula de determinados marcadores de superficie seleccionados . Citometro de fluorescencia (FACS) . Una maquina que analiza las celUlas mediante Citometria de flujo y que permite clue se seleccionen y recojan las distintas poblaciones celulares. CLP (cape linfatica periarteriolar) . Acbmulos de tejido linfoide que constituyen la pulpa Blanca dell bazo. CMCDA (citotoxicidad mediada por celulas y dependiente de anticuerpos) . Reaction citotoxica en que Ins receptores cie Fc de las celulas asesinas reconocen a sus celulas diana mediante anticuerpos especificos de estas celulas . Coestimulacion . Las senales precisas para que un linfocito se active, aparte de la inducida por ell antigeno al unirse a sus correspondientes receptores . CD28 es una importante molecule coestimuladora para las celulas T y CD40 para las celulas B . Colectinas . Un grupo de proteinas polimericas grandes, que comprende la conglutinina y la lectina ligadora de manano (MBL), cue Irueden opsonizar los patogenos microbianos . Complejo correceptor de las celulas B . Un grupo de moleculas de superficie que comprende ell receptor dell complemento de tipo 2 (CD21), CD81 y CD19, que actban como receptores coestimuladores en las celUlas B maduras . Complejo de ataque a la membrane (CAM) . Ensamblaje molecular final de los componentes C5b-C9 de la via litica dell complemento que se inserta en las membranes celulares. Complejo receptor de las celulas B (CRB) . Inmunoglobulina de la superficie de las celulas B y sus moleculas senalizadoras asociadas, CD79a y CD79b . Complemento . Grupo de proteinas sericas que intervienen en los procesos inflamatorios, en la activation de los fagocitos y en los ataques liticos a las membranes celulares . Este sistema puede ser activado por interacciones con ell sistema inmunitario (via clasica) . Componente secretor. Polipeptido producido por las celUlas de algunos epitelios de secretion que sirve para transportar la IgA polimerica de secretion a traves de la pared dell organo implicado, impidiendo que sea digerida en ell tracto gastrointestinal .

Glosario

ConA (concanavalina A) . Un mitogeno de celulas T. Congenico . Animales que difieren entre si en un unioo locus genico . Conjugado . Reactive que se forma per union covalente entre dos moleculas, como la fluoresceina unida a una molecula de inmunoglobulina . Conmutacion de clases . Proceso mediante el cual los diferentes genes C de las cadenas pesadas de inmunoglobulina de las celulas B de un individuo se Linen con los segmentos V recombinados y den lugar a una clase de anticuerpos diferente con la misma especificidad . Este proceso queda reflejado en la conmutacion general de clases de inmunoglobulina que se observa en el curse de una respuesta inmunitaria . Convertasa de C3 . Los complejos enzimaticos C3bBb y C4b2a que escinden el C3 del complemento . CPA (celulas presentadoras de antigenos) . Diversos tipos de celulas clue exponen los antigenos de tal forma que puedan ser reconocidos por los linfocitos . CPH (complejo principal de histocompatibilidad) . Region genica que poseen todos los mamiferos y cuyos productos son los principales causantes del rapido rechazo de los injertos entre individuos diferentes y de la transmision de senales entre los linfocitos y las celulas que expresan antigenos . CSF (factores estimulantes de colonies) . Grupo de citocinas clue controlan la diferenciacion de las celulas madre hematopoyeticas . CTLA-4 (CD152) . Una molecula que transmite senales de regulacion a la baja en las celulas T y que compite con CD28 per la union con B7 en las celulas presentadoras cle antigeno . Defensinas . Un grupo de pequenas proteinas antibacterianas producidas por los neutrofilos . Desequilibrio de ligamiento . Situacion en la que dos genes se encuentran asociados en un mismo individuo con una frecuencia mayor de la predicha per el producto de sus frecuencias individuales en la poblacion . Desgranulacion . Exocitosis de los granules que contienen dlgunas celulas, como los mastocitos y los basofilos . Determinantes antigenicos . v. epitopos . Dominio . Region de un peptide que presenta una estructura terciaria bien definida . Tanto las inmunoglobulinas como las moleculas CPH de clases I y II estan formadas per varies dominios . Dominios C . Dominios constantes de los anticuerpos y de los receptores de las celulas T. Estos dominios no forman parte del punto de union al antigeno y muestran poca variabilidad entre las diferentes moleculas receptores . Dominios de las proteinas de control del complemento (DPCC) Idenominados tambien secuencias repetitivas cortas de consenso) . Dominios con una estructura caracteristica que aparecen en muchas proteinas de las vies clasica y alternativa del complemento, asi como en algunos receptores y proteinas de control del complemento . Dominios V . Dominios del extreme amino de las cadenas pesadas y ligeras de los anticuerpos y de las cadenas u . (i . y ci de los receptores de las celulas T que se recombinan con los genes D y J adecuados durante la ontogenia de los linfocitos . Educacion de las celulas T. Proceso mediante el cual los timocitos en desarrollo se seleccionan de forma positiva per las celulas T que reconocen peptides unidos a las moleculas CPH propias, pero de forma negativa per las celulas T que reconocen peptides antigenicos propios.

ETCH (enfermedad de injerto contra huesped) . Enfermedad clue aparece cuando los linfocitos de un donante alogenico reaccionan frente a los tejidos del huesped en un receptor inmunodeprimido . Eicosanoides . Productos del metabolismo del acido araquidonico, que incluyen las prostaglandinas, los leucotrienos y los tromboxanos . Endocitosis . Internalizacion de material por una celula, mediante fagocitosis o pinocitosis . Endotelio . Celulas que recubren los vases sanguineos y linfaticos . Endotoxinas . Lipopolisacaridos producidos per las bacterial gramnegativas, que activan a las celulas B y los macrofagos . Enfoque isoelectrico . Separacion de moleculas de acuerdo con su carga . Cada molecula migra hasta una region del gradiente de pH en que so carga es nula . Epitopo . Las partes del antigeno que contactan con el sitio de union antigenica del anticuerpo o del receptor de las celulas T . Estallido respiratorio . Aumento del metabolismo oxidative de los fagocitos tras la ingestion de particulas opsonizadas . Exclusion alelica . Se produce cuando la expresion de un gen procedente del padre o de la madre impide que se exprese el otro . Este fenomeno sucede con los genes de los anticuerpos y del receptor de las celulas T. Exon . Segmento genico que codifica proteina . Fab . Parte de la molecula de un anticuerpo en la que esta situado el punto de union al antigeno, y que contra de la cadena ligera y de parte de la cadena pesada ; se puede separar mediante digestion enzimatica . Factor de las celulas madre . Tambien denominado factor de Steel, se trata de una citocina necesaria en los estadios mas precoces del desarrollo de los leucocitos en la medula osea . Factor de veneno de cobra . Componente del complemento Lie cobra equivalente a C3b de los mamiferos . Factores B, P, D, H e I . Componentes de la via alternativa del complemento . Factores de crecimiento transformante (TGF) . Un grupo de citocinas, identificadas por su capacidad de favorecer el crecimiento de los fibroblastos y clue tambien suelen ser inmunosupresores . Factores de necrosis tumoral (TNF) . Un grupo de citocinas proinflamatorias codificadas en el CPH . Factores de restricci6n homologos . Componentes del complemento que restringen la accion del complejo de ataque de membrana sabre las celulas del huesped . Fagocitosis . Proceso mediante el cual las celulas capturan particulas y las confinan en una vacuole citoplasmatica Ifagosorrna) . Familia de los supergenes de las inmunoglobulinas (IgSF) . Molecules que poseen dominios homologos a los presentes en las inmunoglobulinas, incluidos los CPH de clase I y II, el receptor de las celulas T, CD2, CD3, CD4, CD8, ICAM, VCAM y algunos de los receptores Fc . Fas (CD95) . Una molecula expresada per diversas celulas, que actua como diana para la union de FasL sobre la superficie de los linfocitos citotoxicos . Fc . Parte de un anticuerpo que se Line a los receptores celulares de anticuerpo y al componente Clq del complemento . Fenotipo . Las caracteristicas que expresa un individuo 1 comparar genotipo) .

Glosario

Formacion de caperuzas . Proceso en el que las moleculas de superficie de las celulas se agregan (generalmente por accion de un anticuerpol en la membrana celular. Formacion de rosetas . Tecnica para identificar o aislar celulas mezclandolas con particulas o con celulas capaces de unirse a las mismas (p . ej ., los eritrocitos de carnero en el caso de las celUlas T humanas) . Las rosetas estan formadas por una celula central rodeada de celulas unidas . Gen Ir . Grupo cle genes relacionados con las respuestas inmunitarias que cleterminan la magnitud de las mismas frente a un antigeno o estimulo externo determinado . Parte de ellos se encuentran situados en el complejo principal cle histocompatibilidad . Genes C . Segmentos genicos que codifican la pane constante de las cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulina y de las cadenas u . 13 . ;- y ii de los receptores de antigeno de las celulas T. Genes D . Conjunto de segmentos genicos situados entre los segmentos V y J en los genes de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas y en los genes de las cadenas 11 y 6 de los receptores cle las celulas T, y que se recombinan con los genes V y J durante el periodo ontogenico . Genes de la respuesta inmunitaria (Ir) . Genes que afectan el nivel de la respuesta inmunitaria . Los genes CPH de clase I resultan esenciales para controlar las respuestas frente a antigenos especificos . Genes J . Conjunto de segmentos genicos de los genes de las cadenas pesadas y ligeras de las inmunoglobulinas, asi como de los genes de las cadenas de los receptores de las celulas T, que se recombinan durante la ontogenia cle los linfocitos y clan lugar a los genes de los dominios variables . Genoma . El conjunto total de material genetico que contiene una celula . Genotipo . El material genetico heredado de los progenitores; solo se suele expresar parte del mismo . Granulocitos . Neutrofilos, eosinofilos y basofilos . Granzimas . Enzimas asociadas a granulos de las celulas T citotoxicas y de los linfocitos granulosos grandes . Grupos sanguineos . Conjunto de moleculas variables a nivel alelico que se expresan en los hematies y en ocasiones en otros tejidos, que pueden ser la diana de las reacciones transfusionales . H-2 . Complejo principal de histocompatibilidad del raton . Haplotipo . Conjunto de cleterminantes geneticos situado en uno de los cromosomas. Hapteno . Molecula pequena que puede actuar como epitopo, pero que por si sola no es capaz de inducir una respuesta de anticuerpos . Heterologo . Se aplica a las diferencias antigenicas entre especies diferentes . Hibridoma . Linea celular creada in vitro mediante la fusion de dos tipos cle celula diferentes, generalmente linfocitos, y uno de ellos cle naturaleza tumoral . 5-hidroxitriptamina . Amina vasoactiva presente en las plaquetas y que en los roedores es uno de los mediadores mas importantes de los procesos inflamatorios . Hipersensibilidad por contacto . Una reaccion inflamatoria retrasada de la piel en situaciones de hipersensibilidad de tipo IV. Histamina . Importante amina vasoactiva que liberan los mastocitos y los basofilos a partir de sus granulos . Histocompatibilidad . Capacidad para aceptar injertos entre individuos .

HLA (antigeno leucocitario comun), sistema . Complejo principal de histocompatibilidad de los seres humanas . HTR (hipersensibilidad de tipo retardado) . Este termino se utiliza para designar las reacciones cutaneas retardaclas relacionaclas con la hipersensibilidad de tipo IV. Humoral . Relacionado con los liquidos extracelUlares, entre los que se encuentran el suero y la linfa . ICAM-1 (CD54), ICAM-2 (CD102) e ICAM-3 (CD50) (moleculas de adherencia intercelular) . Moleculas de la superficie celular que se encuentran presentes en diversos leucocitos y celUlas no hematogenas, y que interaccionan con LFA-1 . Icosomas . Inmunocomplejos presentes en forma cle pequenos cuerpos de inclusion en las celulas foliculares dendriticas . Idiotipo . Caracteristicas antigenicas de la region V cle un anticuerpo . Idiotipo recurrente . Un idiotipo que aparece en las respuestas inmunitarias de diferentes animales o cepas frente a un antigeno determinado . Idiotipos dominantes . Idiotipos individuates que estan presentes en grandes canticlades en los anticuerpol generados por un determinado antigeno . Idiotopo . Determinante antigenico concreto de la region V de un anticuerpo . IMC (inmunidad mediada por celulas) . Termino con el que se designan las reacciones inmunitarias en que intervienen celulas en lugar de anticuerpol u otros factores humorales . Induccion . Sensibilizacion inicial a tin antigeno . Inflamacion . Una serie de reacciones, que atraen a las celulas y las moleculas del sistema inmunitario a los sitios de infeccion o lesion, cleterminando un aumento en el aporte sanguineo, con una mayor permemabiliclad vascular y la migracion transenclotelial de leucocitos . Inmunocomplejo . Producto de una reaccion antigeno-anticuerpo, que tambien puede contener moleculas del complemento . Inmunofluorescencia . Tecnica para identificar microscopicamente determinaclos antigenos en tejidos o en celulas, mediante su union a un conjugado de un anticuerpo y una molecula fluorescente . Inmunogenico . Capaz de inducir reacciones inmunitarias mediaclas por las celulas B o T. Inmunoglobulinas . Los anticuerpol sericos, que incluyen IgG, IgM, IgA, IgE e IgD . Integrinas . Gran familia de moleculas de adherencia de la superficie celular que pueden interaccionar con las CAM, con fragmentos del complemento o con componentes de la matriz extracelular. Interferones OFN) . Conjunto de moleculas que transmiten senales entre las celulas del sistema inmunitario y en la proteccion frente a las infecciones virales . Interleucinas (IL-1/IL-18) . Conjunto de moleculas que transmiten senales entre las celulas del sistema inmunitario . Intermediarios reactivos del oxigeno/nitrogeno . Metabolitos bactericidal producidos por las celulas fagociticas, que incluyen el peroxido de hidrogeno, los hipohalitos y el oxido nitrico . Intron . Segmento genico intercalado entre los exones y que no codifica proteina . Isotipo . Variantes geneticas de una familia de proteinas o peptidos, todas ellas codificadas en el genoma de cads uno de

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los miembros de una determinada especie (p. ej ., las clases de inmunoglobulinas) . ((Knockout)) . Animal en ell qua ell gen endogeno de una proteina determinada se ha eliminado o ha experimentado mutation, perdiendo su capacidad de funcionamiento . LES (lupus eritematoso sistemico) . Enfermedad autoinmunitaria de los seres humanos en la que se suelen detectar anticuerpos antinucleares . Leucotrienos . Conjunto de metabolitos dell acido araquidonico con potentes efectos farmacologicos . LFA (antigenos leucocitarios funcionales) . Conjunto de tres moldculas que median la adherencia intercellular entre los leucocitos y otras celulas sin necesidad de la presencia de antigeno (LFA-1 es CD11a;''CD18, LFA-2 es CD2 y LFA-3 es CD58 . Ligamiento . Proximidad entre dos genes dentro de un mismo cromosoma, que suele ear lugar a su transmision hereditaria conjunta . Ligando . Molecula con capacidad de union . Linea . Celulas generadas mediante ell crecimiento continuo in vitro de un cultivo cellular . Cada una de estas lineas suele contener diversos clones . Linea germinal . Material genbtico transferido a travds de los gametos antes de ser modificado por recombination somatica o maduracion . Linfocinas. Termino gendrico con ell que se designan las moleculas que, sin ser anticuerpos, transmiten senales entre las celulas dell sistema inmunitario y son producidas por los linfocitos Icompararinterleucinas) . Linfocitos granulosos grandes (LGG) . Grupo de linfocitos bien definido morfologicamente y al que pertenecen la mayor parte de las celulas K y NK . Poseen marcadores propios de los linfocitos y de las c6lulas de la estirpe monocito'macrofago . Lisis por vecindad . Lisis mediada por ell complemento de celulas que, sin haber activado ellas mismas ell complemento, se encuentran situadas en las proximidades de un punto de activation dell mismo . LPS (lipopolisacarido) . Producto de la pared cellular de algunas bacterias gramnegativas que puede actuar como mitogeno de las c6lulas B . Maduracion de la afinidad . Aumento de la afinidad media de los anticuerpos qua se suele producir en ell curso de las respuestas inmunitarias secundarias . Marcadores CD . Moldculas de la superficie cellular de los leucocitos y las plaquetas qua se pueden diferenciar entre si mediante la utilization de anticuerpos monoclonales y qua sirven para distinguir las diferentes poblaciones celulares . Mastocitos . Celulas presentes cerca de los vasos sanguineos en la mayoria de los tejidos, qua contienen granulos con mediadores de la inflamacion . 13 2 -microglobulina . Polipbptido que forma parte de algunas proteinas de membrana, entre las que se encuentran las moleculas CPH de clase I . Mieloma . Linfoma de c6lulas de la estirpe B . MIF (factor inhibidor de la migration) . Grupo de peptidos clue producer los linfocitos y que son capaces de inhibir la migration de los macrofagos . Mitogeno de hierba carmin . Un mitogeno de c6lulas B y T. Mitogenos . Sustancias que inducen la division de las celulas, especialmente de los linfocitos .

Moleculas CPH de clase l/Il/Ill . En ell CPH se codifican tres tipos esenciales de moleculas . Las moleculas de clase I codifican un pdptido unido al CPH que forma complejos con la 132-microglobulina, en los CPH de clase II hay dos pdptidos ligados a CPH que se asocian de forma no covalente y en las moleculas de clase III se incluyen otras moldculas, incluidos algunos componentes dal complemento . Moleculas de adherencia cellular (MAC) . Grupo de proteinas pertenecientes a la superfamilia genica de las inmunoglobulinas que intervienen en los procesos de adherencia intercellular ; entre ellas se encuentran ICAM-1, ICAM-2, ICAM-3, VCAM-1, MAdCAM-1 y PECAM . Moleculas DM . Moleculas relacionadas con CPH de clase II, necesarias para la carga de los pdptidos antigenicos en las moleculas de clase II . Mutation somatica. Proceso que sucede durante la maduracion de las c6lulas B, que afecta a las regiones de los genes de los anticuerpos y que permite la selection de la especificidad de los anticuerpos . Neoplasia . Sinonimo de tejido canceroso . Opsonizacion . Proceso que facilita la fagocitosis mediante ell deposito de opsoninas (p . ej ., anticuerpos o C3b) sobre ell antigeno . PAF (factor activador de las plaquetas) . Factor liberado por los basofilos que induce la agregacion de las plaquetas . Paracrino . La action de una citocina sobre una celula distinta a la clue la proclujo . Patogeno . Un organismo que produce una enfermedad . PC (fosforilcolina) . Hapteno utilizado con frecuencia que tambien se encuentra sobre la superficie de algunos microorganismos . Peptidos antagonistas . Analogos de los peptidos antigenicos que se ligan a las moleculas CPH e impiden la estimulacion de los clones especificos de celulas T . Peptidos antigenicos . Fragmentos peptidicos de proteinas clue se ligan con las moleculas CPH y estimulan la activation de las c6lulas T. Perforina. Una molecula presente en los granulos de las celulas citotoxicas, homologo a C9 dell complemento y que puede formar poros en la membrana de la celula diana . PHA (fitohemaglutinina) . Un mitogeno de cdlulas T. Placas de Payer . Colecciones de c6lulas linfoides en la pared intestinal, qua constituyen ell tejido linfoide secundario . Portador . Moldcula inmunogdnica o parte de la misma que reconocen las c6lulas T en las respuestas de anticuerpos . Potenciacion . Prolongation de la supervivencia de un injerto mediante ell tratamiento con anticuerpos frente a aloantigenos dal propio injerto . Presentation de antigenos. Proceso durante ell cual determinadas celulas dal organismo (celulas presentadoras de antigenos) expresan ell antigeno sobre sus membranas de forma clue pueda ser reconocido por los linfocitos . Procesamiento de antigenos . Proceso de transformation que experimenta un antigeno para qua pueda ser reconocido por los linfocitos . Prostaglandinas . Derivados dal acido araquidonico con actividad farmacologica . Algunas prostaglandinas estan implicadas en la regulation de los procesos de movilidad cellular y en las respuestas inmunitarias . Proteina A y proteina G . Componentes de la pared cellular de algunas cepas de estafilococos, qua se ligan a la Fc de la mayoria de los isotipos de IgG .

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Proteinas antivirales . Proteinas cuya sintesis es inducida por los interferones . Se activan cuando la celula se infects por un virus y limits la replication viral . Proteinas de fase aguda . Proteinas sericas cuyas concentraciones aumentan durante las infecciones o las reacciones inflamatorias . Proteosomas . Organulos que degradan las proteinas celulares marcaclas para su degradation mediante union con las ubiquitinas . Prueba de puncion cutanea . Inyeccion de cantidades pequenas cle antigeno en la piel para el estudio cle la hipersensibilidad cle tipo I . Prueba del parche . Aplicacion cle Un antigeno a la piel en un parche para inclucir una reaction cle hipersensibilidad de tipo IV. Pulpa blanca . Portion linfoide del bazo, formada por capas periarteriolares de linfocitos y celulas presentadoras de antigenos . Quimerismo . Situation en la que en un mismo individuo coexisten celulas de individuos geneticamente distintos . Quimiocinesis . Aumento de la actividad migratoria aleatoria de las celulas . Quimiotaxis . Aumento de la actividad migratoria directional de las celulas, casi siempre como respuesta a los gradientes de concentration tie cleterminaclos factores quimiotacticos . Radioinmunoanalisis (RIA) . Una serie de diversas tecnicas MY sensibles para determinar las concentraciones de antigenos o anticuerpos mediante reactivos marcados radiactivamente . RAG-1 y RAG-2 . Genes activadores de la reactivacion, necesarios para la recombination de los segmentos genicos V, D y J durante la generation de los genes receptores de antigeno funcionales . Ratones atimicos . Ratones que carecen de timo de forma congenita y que tambien presentan un defecto de la production cle pelo estrechamente ligado al anterior. Ratones Biozzi . Cepas cle ratones que hen sido someticlos a cruces de tal forma que producton respuestas de anticuerpos muy intensas o muy debiles frente a diversos antigenos (originalmente eritrocitos de carnero) . RDC (regiones determinantes de la complementariedad) . Partes de la region V de un anticuerpo o de tit) receptor de las celulas T que clan lugar a la formation del enlace con el antigeno o con el complejo antigeno-CPH . Reaction de Arthus . Inflamacion que aparece en la piel algunas horas clespues de la inyeccion cle antigeno . Se trata de una manifestation de una reaction de hipersensibilidad de tipo III . Reacciones cruzadas . Dos antigenos distintos que comparten deterrninantes antigenicos . Reacciones granulomatosas . Reacciones inflamatorias cronicas (con frecuencia como manifestation de la hipersensibilidad de tipo IV) producidas por la incapacidad de eliminar el antigeno . Receptor. Molecule de la superficie celular que se une especificamente a cleterminaclas moleculas extracelulares . Receptor de celulas T (TCR) . Receptor de antigeno de las celulas T que esta formado por un dimero (il,, (TCR-2) o un dimero -;6 (TVR-1) asociado con el complejo molecular CD3 . Receptores del complemento (CR1-CR4 y C1gR) . Conjunto de cuatro receptores de la superficie celular que se unen a los fragmentos C3 del complemento . CR1 y CR2 contienen numerosos DPCC, mientras que CR3 y CR4 son integrinas . C1gR se liga con C1q .

Receptores Fc . Moleculas cle superficie de muchas celulas que se ligan a las regiones Fc de las inmunoglobulinas . Son especificas para la clase de anticuerpo y selectivas para isotipo . Recombination . Proceso de reorganization del material genetico durante la meiosis . Este proceso se produce tambien durante las reordenaciones somaticas del ADN que se Ilevan a cabo en el proceso de formation de los genes de las moleculas de anticuerpo y los receptores de las celUlas T. Region hipervariable . Zonas (3) de los dominios V de las inmunoglobulinas y de las cadenas de los receptores de las celUlas T que presentan la maxima variabilidad . Estas regiones se agrupan en el extremo distal del dominio V y forman parte del punto cle union al antigeno . Regiones constantes . Porciones relativamente invariables de las cadenas pesaclas y ligeras de las inmunoglobulinas y de las cadenas o . ; ; . _y y ;i de los receptores cle las celulas T . Regiones N . Segmentos genicos presentes en los genes cle los receptores de antigeno recombinaclos, que no aparecen en el ADN cle la linea germinal . Residuos de anclajje . Determinados residuos de aminoacidos de los pepticlos antigenicos necesarios para la interaction con el bolsillo de union de las moleculas CPH . Respuesta primaria . Respuesta inmunitaria (celular o humoral) que se produce tras la primera exposition a un antigeno . Respuesta secundaria . Respuesta inmunitaria que se produce cuando se establece contacto con un antigeno con el que ha existiclo una exposition previa . Restriction CPH . Una caracteristica de muchas reacciones inmunitarias en virtud de la cual las celulas colaboran con mss eficacia con otras celulas que posean un haplotipo CPH identico . Restriction de clase I-11 . El hecho de que las celulas inmunitarias activadas solo actuaran con eficacia cuando comparten haplotipos CPH en los loci de clase I o II . Restriction genetics . Termino utilizado para describir el hecho de que los linfocitos y las celulas presentadoras de antigenos colaboran mss eficazmente cuando comparten determinados haplotipos HLA . RML/CML (reaction de mezcla de linfocitos/cultivo de mezcla de linfocitos) . Tecnica para estudiar el reconocimiento de celulas alogenicas por parte de las celulas T, basado en la detection de la proliferation en presencia de las celulas estimulantes . Segmentos estructurales . Tramos de la region V de los anticuerpos que se encuentran situados entre las regiones hipervariables . Selection clonal . Proceso fundamental en la activation de los linfocitos, mediante el cual el antigeno induce exclusivamente la activation, division y diferenciacion de las celulas que poseen receptores con los que es capaz de combinarse . Selectinas . Tres moleculas de adherencia, la P-selectina (CD62P), la E-selectina (CD62E) y la L-selectina (CD62L), implicadas en el retraso de los leucocitos durante su transito a traves de las venulas . Seudoalelos . Variantes de un gen que aparecen en tandem ; no ocupan una position homologa en el cromosoma (p . ej ., C4) . Seudogenes . Genes que presentan estructuras homologas a las cle otros genes, pero que no pueden ser expresados (p . ej ., A3 en el raton) .

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Sindrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) . Una inmunodeficiencia progresiva producida por la infection de las celulas T CD4 por un retrovirus humano VIH . Sinergismo . Interaction cooperative . Singenico . Cepas de animales obtenidas mediante reproduction endogamica sistematica en las que los dos autosomas de cada individuo son identicos . Sistema mononuclear fagocitico . La linea de fagocitos fijos y moviles de vida prolongada, relacionados con los monocitos sanguineos y los macrofagos tisulares . Sistema reticuloendotelial . Sistema difuso de celulas fagociticas derivadas de las celulas madre de la medula osea que se encuentran asociadas con el armazon de tejido conjuntivo del higado, bazo, ganglios linfaticos y otras cavidades serosas . Este termino es antiguo, y en la actualidad se prefiere la denomination de sistema fagocitico mononuclear. Superantigenos . Antigenos que estimulan clones de celulas T con distinta especificidad antigenica, pero que emplean los mismos genes TCR V. T15 . Idiotipo asociado con los anticuerpos antifosforilcolina, cuyo nombre procede de la secuencia prototipo del mieloma TEPC15 . Tejidos linfoides primarios . brganos linfoides en los que los linfocitos completan su proceso de maduracion; entre ellos se encuentran el higado del feto, la medula osea y el timo de los adultos y la bursa de Fabricio de las eves . Teoria de la red . Teoria propuesta originalmente por Jerne (y que ha sido desarrollada despues) segun la cual las celulas T y B se regulan mutuamente mediante el reconocimiento de los idiotipos presentes en sus receptores de antigeno . T'imo . Un organo linfoide primario localizado en la cavidad toracica por encima del corazon . Tipaje de tejidos . Determination de [as variantes alotipicas individuales de las molecules CPH . TLAI (tejido linfoide asociado al intestino) . Acumulaciones de tejido linfoide situadas a to largo del tracto gastrointestinal .

TLAM (tejido linfoide asociado a las mucosas) . Termino generico con el que se designa el tejido linfoide que se encuentra en el tracto gastrointestinal, el arbol bronquial y otras superficies mucosas . TNF (factor de necrosis tumoral) . Citocina liberada por los macrofagos activados que esta relacionada estructuralmente con la linfotoxina liberada por las celulas T activadas . Tolerancia . Estado en que no se producen respuestas frente a un antigeno especifico . Transformaci6n . Cambios morfologicos en un linfocito relacionados con la activation del proceso de division celular. Este termino tambien se utiliza para designer los cambios que se producen en las celulas cancerosas que adquieren capacidad de division autonoma . VEA (venula de endotelio alto) . Regiones de las venulas en las que los linfocitos abandonan el torrente circulatorio y se dirigen a los ganglios linfaticos . Via alternative . Vias de activation del sistema del complemento en las que intervienen C3 y los factores B, D, P, H e I, que interaccionan entre si en las proximidades de un activador de superficie, dando lugar a la C3 convertasa de la via alternativa . Via clasica . Via a traves de la cual los complejos antigenoanticuerpo activan el sistema del complemento, y en la que intervienen C1, C2 y C4, que den lugar a la formation de la C3 convertasa de la via clasica . Via de las lectinas . Via de activation del complemento descubierta recientemente, que es iniciada por la proteina fijadora del manano y termina confluyendo con la via clasica . Via liitica . Via del complemento en la que intervienen los factores C5-C9 y que da lugar a la lisis de las membranes plasmaticas de las celulas sensibilizadas . Virus de Epstein-Barr (VEB) . Agente causal del linfoma de Burkitt y de la mononucleosis infecciosa, capaz de transformar las celulas B humanas en lineas celulares estables . Westernblotting . Una tecnica util para identificar y caracterizar las proteinas empleando anticuerpos . Xenogenico . Se aplica a las diferencias existentes entre especies (comparar heterologo) .

Indice
aborto clonal, celulas B, 195-6 acaros dal polvo domestuco, 311 accion de masas . lay de . 108, 109 acetilcolma autoanucuerpos frente al receptor, 327, 372 Iiberaaon defectuosa, 327 acido olelco . 208 acidos grasos saturados. 208 ACTH, 178 actmdad de las celulas asesinas . 128, 129, 130 adenovirus, 226 adherencia, leucocdos, 10, 65 . 66 adherencia mmunrtana, 53 adiclon de nucleotidos . 94 . 99-100, 210 adm,nistraci6n en aerosol, artigeno, 172, 197 administraci0n nasal, antigenos, 197 administracibn oral, antigeno, 172, 197 adresinas, vascular, 40, 63 . 65 adyuvante de Freund . completo, 232, 270 adyuvantes, 232, 270-1 aumento de la afinidad de los anticuerpos, 112, 113 afinidad, anticuerpo, 108, 109 . 150 adminislraciOn pasiva de IgG y, 173 . 174 constante (K), 108, 109 . 112-13 determ,nacion, 112-2 frente a avidez, 108-9, 110 heterogeneidad, 113 maduracl6n, 112 . 113, 150 IocalizaciOn, 152 mediante la selecci6n celular, 151-2 signdicado biologico, 112 agammaglobulinemia ligada a X (ALX), 285 . 286. 287 aglutinmas . mveriebrados . 203, 204 . 205 agotamlento clonal, 197 Agp-200 . 65 alergenos control genetico de la respuesta, 306 hipersensitHiodad poi contacto, 341-2 . 344 tratamiento de hiposenslbrhzacidn, 316 alergia, 302-17 asociaciones HLA, 306 concepto de rotura, 315, 316 factories predisponentes . 304-6, 314-15 IgE en, 302-4 mastocltos y, 29, 302, 307-9 mecanismos de inducc0n y efectoras, 302, 303 reacciones bronquiales, 311-14 reacclones cutaneas . 310-11 reacclones de fase tardia, 311, 312, 341 tratam,ento de hiposensibizacion, 316 v. tambren hipersensibdidad de contacto alergia ahmentaria, 302 aloinjertos, 353 alommundad, en anflblos, 219 alotipos, 77, 95 alveolitis alergica extrinseca, 330 ALX, 207-8 amigdalas, 31, 37 aminas vasoactlvas antagonistas, 336, 337 en la enfermedad poi inmunocomplelos, 330-1, 336-7 anafilaioxinas. 54-5 actlvaclon de los mastocrtos, 309 . 310 en la hipersensibilidad de tlpo III, 330, 331 en la patogenia de la enfermedad, 57, 58 v. tambren C3a, C5a anafilaxia, 302, 309 Ancylostorzla duodenale, 245 anemia en el paludismo, 260 hemoliuca autoinmunitaria, 320, 324-5 . 372 autoantrcuefpos reactivos en calor, 324-5 autoantlcuerpos reachvos en frio, 324, 325 inducido poi farmacos, 324, 325 perniciosa, 286, 368, 369, 372, 377 anergia celulas B, 144, 194 ~nduccion in vitro, 195-6

y autotolerancia . 195 celulas T, 142, 161 en la sarco,dosis . 351 induccion in vitro . 195 y tolerancia periferica a lo propio . 192 clonal, 1 defin,ci6n, 192 anfibios complemento, 211-12 CPH v celulas T, 206-8 desarrollo dal timo . 216-19 inmunoglobulinas, 209-10 metamorfosis . 220 modelos para estudio de la inmunldad, 216-20 odgen de las celulas linfoides, 219 telidos hnfomielodes, 214-16 andlo de Waldeyer, 31, 37 animales transgenicos, 394, 395 autommunidad . 193 TCR especifico, cadena VO, 180. 181 182 tolerancia en, 182, 188, 189, 194 anon superoxido . 235 anomalia de DiCeorge, 36, 289 anticoagulante lupico, 326 anucuerpo antdonante . 364 . 365 articuerpo antrlgM . 195 anticuerpo anti-RhD, 173, 324 anticuerpos, 4, 71-82, 121 activaci6n dal complemento, 77, 78, 81 en las,nfecciones . 233 . 253, 254 acim,nistracion pasha. 173, 174, 271 afinidad ; v afinidad poi anticuerpos aislam,ento de puro . 387-9 antigenos tumorales, 276 avdez.108-109.110 bloqueo . 173, 174 diversidad, 93, 94-104, 106 er otros vertebrados, 101-2, 209-10 generaci6n . 94-100. 101, 166 en el rechazo de mlerto. 357, 359 ensayos .386 especifiddad, 110-13 fragmentos, generados poi enzimas, 80 frente a receptores de las celulas T, 107 funciones efectoras. 6-7, 72. 77-8 en Ias mfecciones, 10, 11 en Ias infecciones bacterianas, 233-4 en las infecciones parasitarias, 252-4 en las -nfecciones virales, 223, 224, 225 estudlos de funci6Nestructura . 80-1 rnecanismos de evasion, 256-7 monoclonales ; v . monoclonales natural, 19 neutralaci6n, 9 bacterlas, 233 parasrtos, 253, 254 virus, 223 radiomarcado, en el diagn6stico de tumores, 279-80 reactividad cruzada, 110 receptores . 78-9 regulac16n de la respuesta inmunitarta, 173-4 respuestas antigenos independientes de celulas T, 145 cooperac16n celular en, 13353 factores geneticos . 179 in vivo, 150-3 interacciones idiotipicas qua modulan, 177 primarias, 150 . 151 regulac16n poi anticuerpos . 173-4 secundanas . 150, 151 Mulo, 150 union antigenica, 77-8, 107-9 cinetica, 109 enlaces no covalentes . 107, 108 multrvalente, 108-9. 110 polrtunclonal, 111, 112 srtio, 107, 108 anticuerpos anti-ADN, 328, 338 anticuerpos anti-CD3, 364 anticuerpos anti-CD4, 224

en la tolerancia dal m)erto, 196, 197 supresOn de la autommunidad, 174. 176. 373, 374 anticuerpos anti-CD8, 196, 197, 224 anticuerpos antiidiotipo, 176 . 177, 197 anticuerpos antimitocondriales, 377. 378 anticuerpos anti-TNFa, reaccion de Arthus, 332 anticuerpos cardioliprna, 326 anticuerpos frente al esperma, 372 anticuerpos frente al 'actor intrinseco, 372 anticuerpos frente al receptor "drenergrco, 372 anticuerpos frente al receptor de la lnsulina, 372 anticuerpos monoclonales imAbsl detecci6n de micrometastasis, 280 diseho Imediante ingen ,eria geneocal, 111, 2B1, 282 en la inmunizacion pasrva. 271 inmunogenicrdad. 281 inmunoterapia tumoral, 281-2 marcadores CD, 15 metodos de producc16n, 388-9 antigeno . 7 actnacl6n de Imfocoos, 20 administracion de aerosol, 172, 197 administraci6n oral, 172, 197 asociados a tumores, 274-6 conmutacion de isotpos . 167-8 dependiente de las celulas T, 144-5 detecci6n in situ. 383-5 doss, inducci6n de tolerancia y, 171-2 en vacunas, 263-7 ensayos. 386. 387 estruciura . 113-14 forma de admmistraciOn, 172, 197 identdicaci6n, 386-7 independiente de las celulas T, 144-5, 167 inducclon de la tolerancia . 171-2, 194-5 inhalados. 32330 rntracelular, autoanucuerpos frente a, 328 parasito, efectos inmunosupresores, 258-9 alas celulas Tc, 116, 128-9 alas celulas Ti .- 116 antigenos tumorales . 278, 279 en la hipersensibdidad de contacto, 342 interaccibn celulas B y T, 142-5 interacciones de las moleculas de superficie en, 140-2 papel dal complemento. 57 respuesta inmunrtaria despues de, 142 presentac16n, 114, 139-42 procesamlento, 114-19 . 139 propros produccibn de to autommunidad, 374 tolerancia de [as celulas B, 193-5 tolerancia de las celulas T, 161, 188-93 receptores ; v anticuerpos ; receptor de las celulas T reconocimiento, 7, 8. 107-19 regiones mmunodommantes, 113-4 respuestas inmunitanas a, 171-2 soluble, 171, 195, 197 unidos a la membrana, 194-5 v tambren alergenos; peptdos antigeno 14,1 . 103 antigeno carcinoembrionario (CEA), 276, 27380 antigeno de los grupos sanguineos Fig, 322 antigeno de Thomsen-Friedenreich, 276 antigeno muy tardfo; v VLA antigeno-1 de la celula plasmatlca (PCA-1), 23, 164 antigenos de diferenciaci6n, 276 antigenos de funci6n linfocrtaria ; v . LFA-1 ; LFA-3 antigenos de histocompatibilidad, 354 principal ; v CPH antigenos de los grupos sanguineos Gerbrch, 322 antigenos de los grupos sanguineos Kell. 321 . 322 . 323 antigenos de los grupos sanguineos Ina/Inh, 322 antigenos de los grupos sanguineos luteranos, 322 antigenos de trasplante asociados a tumores (TATA), 274-6 antigenos dal grupo sanguineo Cromer, 322 antigenos dal melanoma (MAGE), 278 antigenos dal trasplante especificos de tumores (TSTAI . 274 275-6

Indice

antigenos Duffy, 67, 123, 244, 321 antigenos I-E, 180, 182, 183 antigenos leucoctarios humanos, v HLA antigenos fv1 . 91 antigenos rnenores de histocomoatibilidad, 354 antige-ios rrenores estimuladores de linfoctos Mi . 180, 181 antigenos MI Imenores estimuladores de linfocitos), 180,181 antigenos oncofetales, 276 antigenos pohsacandos bacterianos, 171, 264, 267 antigenos Rhesus tRhDl, 321, 322 antigenos T, 274-5 antihistaminicos, 309, 337 antisuero especificidad . 110-13 reactivdad cruzada, 110 aparato de Golgi, trafico de CPH, 118 apoptosis. 9 celulas B en desarrollo, 163 celulas plasmaticas, 22 aefectos geneticos, 184 inducda por las celulas TC, 131 peri`erica lextratimica), 192 timocitos, 160, 161 aporte sanguineo, en la inflamacon, 10, 61 ARN nuclear heterogeneo IARNnhI . 96 artrrt,s reumatoide . 307, 320. 368-9 asociacones con HLA, 183, 369, 370 defectos en el ele flipotalamo-hipof,sario-adrenal, 376,377 deposito de ~nmunocompleios, 337, 373 trwamiento, 374 . 378 Ascarrs rumbrrcordes. 245 asma . 311-14, 372 equilibrioTHl,rr12, 125, 313 factores predisporentes en, 314-15 mastocitos en, 308-9, 312, 313 respuesta inflamatoria, 62, 312 Aspergrllus furmgatus, 241 atacinas, 203 ataxia telargiectasia (AT), 289 atopia, 302 deficencia de las celulas T, 314-15 factories geneticos . 304-5 autoanticuerpos antitiroideos, 367, 368 en los pollos obesos, 370-1 deteccior in situ, 383-5 en el reperiorio de anticuerpos fetales. 98 en la patogenia de la enfermedad, 370, 371-2 frente a la desmogleina-3, 326-7 frente a las celulas de los islotes, 328, 377, 378 mecanismos de ~nduccion, 374-7 secundarios, 370 valor predictwo, 377, 378 autoinjerlos, 353 aves, 101-2, 166, 210, 211 avidez anticuerpo, 108-9, 110 TCR y selection de timocitos . 190 azatioprira azurocdina, 236 B B7, 141-2 . 191, 278 regulacon de las celulas T autorreachvas, 192, 193 transfeccion genica . 80-1 137-1 iCD80), 141, 142-4 87-2 iCD86), 141, 142-4 bacterias . 229-40 activation del complemento, 46, 231, 232 barreras frente a la entrada/infection, 229 celulas p1i y, 85 efectos adyuvantes, 232 efectos rnmunopatologcos, 239 gramnegatwas, 229, 230 v tarlbiern I popolisacaridos grampositivas. 230 inmunidad mediada por anticuerpos, 233 rntracelular, 237 lesiones mediadas por complemento, 233 mecanismos de evasion, 56, 234, 237, 238 mecanismos de patogenicidad, 229, 230 muene mediada por fagocitos, 233, 234-7

Paredes celulares, 229, 230 proteinas del shock termico, 240, 369, 375 respuesta inmunrtara innala, 230-3 superantigenos, 147, 180-1, 239 union a los fagoctos, 233, 234 bactencdinas, 203 basofilos, 5, 13-14 . 29, 308 desarrollo, 156 en la inflamacion . 68 en las enfermedades por inmunocomplejos, 330, 331 marcadores funcionales, 30 morfologia, 28 receptores Fc, 78 bazo, 31, 33-4 celulas presentadoras de antigeno, 25 cordones, 34 desplazamiento de fnfocitos, 39 en la enfermedad por complelos inmunrtarlos, 333, 335 evolution, 213, 214-5 funcones,33 migracon de las celulas B haca, 165 pulpa blanca, 33, 34 pulpa rola, 33, 34 senos venosos, 34 BCG Ibacilo de Calmette-Guerinl, 132-3, 266 er la nmunoterapia no especifica, 281 vacuna de la tuberculosis . 264, 268 BDL1, 204 biblioteca de fagos, produccon de anticuerpos Fv por, 389 blk, 146 bradicnina, 68, 290, 291 bursa de Fabricio, 13, 33, 166 . 210 elimination, 371 C C1,45,46,47 Clq, 45, 46, 47 deficencia, 290 ensayos de , nmunocomplejos basados en, 339 sitio de union del anticuerpo, 81 C2. 47 deficiencia, 290 C3.44 . 45 deficiencia, 55, 57, 184, 290 hidrousis espontanea, 48, 49 procesamiento de los inmunocomple ;os y, 57 receptores, v CR1, CR2, CR3, p150, 95 C3 convertasa, 45 . 49 via altema -:wa, 48, 49 via clasica, 47 C3a, 54, 231 acciones, 55, 68 receptores, 54 C3b, 7, 47 func16n de la unida a superficie, 55, 56 generacon, 45, 48, 49, 50 receptores ; v . CR1 regulation de la unida a superficie, 50 . 51 union a superficies rrprotegidas,,, 48-50 C31, 48, 49 C4,47 deficiencia, 290 Cob, 47 inestable IC4b') . 47 unida a la superficie, 47, 55 C5, 61 deficencia, 224 C5 convertasa, 45 . 51 Csa, 54-5 acciones. 54-5. 68 en la qunniotaxis, 10 . 67 en as infeccones bacterianas, 231 receptor, 30, 54 semmda. 55 cadena Y, : L-2R tCD1341, 19-20, 123, 124 en la inmunodeficiencia comb nada grave, 288 ratones defectwos, 136 cadena invariable Iii), 118 cadena J, 75, 76 cadena pesada p, 75 asociacion con cadenas seudoligeras, 103, 163, 164

control de la sintesis de inmunoglobulinas, 103-4 sintesis, 102, 103 cadenas ligeras, 73 dominios, 74 kappa. v cadenas Iigeras x lambda, v cadenas bgeras }mutacion somatica, 100 patron de plegaruento, 74 recombinacon genetica . 96, 97, 98-9, 100 region constante iCL) . 73 region variable NO, 73, 74 subrogada, 163, 164 variabdidad en, 95 cadenas Iigeras K, 73, 95 mutation somatica, 100 recombinacon genica, 96 . 97, 98, 99 variab,idad en, 95 cadenas pesadas IIgH), 73 dominos, 74 genes, 95,151 en la conmutacion de sotipos, 166-7 recombinacon, 97-8, 99, 100 sp(rcrng diferencal, 103, 104 mutation somatica, 100, 101 region variable IVHI, 73, 74 regiones cons-antes (C-+i, 73, 74, 102 variabilidad er 95, 96 variation isotioica, 72, 73, 75 calcitriol 11 25-dfiidroxicolecalciferolh 134, 237, 351 calnexina, 117, 118 CALLA, v CD10 cancer vacunas, 271-2 v tambren tumores Candida albicans. 240, 241 en la ~nmunodeficienca combinada grave, 288 moleculas parecidas a CR2/CR3, 56 Candida parapsolosrs, 241 candidiasis, 240 capas de moco, 201, 202 catepsina G, 236 CM 18,26. 159 en la presentacon de antigeno, 141 en las interacciones entre las celulas B y T, 142, 143 senates intracelulares, 147 CD3, 19, 83-4, 145 cadena o, 83, 84 cadena r, 83 . 84 cadena r :, 83, 84, 85 cadena q, 83, 84 cadena _, 83, 84 celu as T en desarrollo . 159, 160 en las senates intracelulares, 146 interaction con el VIH . 296 union con CPH de cease II, 88 v tambren complelo receptor oe las celulas T JCR-CD3I CD4, 26 CD5, 18,159 CD7, 18, 158, 159 CD10 rCALLAi . 16, 164, 165 en la leucem,a, 276, 277 CD11a/CD18, v LFA-1 CD1 tb/CD18: v CR3 CD11c/CD18 ; v p150,95 CD13, 24, 156 . 157 CD14, 24, 156, 157 membrana (mCD14), 231 soluble isCD14j, 231 CD IS, 24, 65 . ' 56, 157 CD16 . v FC-(Rlll CD19, 19, 164 . 165 en el complelo correceptor-celula B, 146, 147 CD20, 19 .164, 165 CD21 ; v. CR2 CD22, 19 .164 . 165 CD23 ; v FCyRlI CD25, 22 celulas B . 164, 165 celulas T en oesarrollo, 159, 160

CD28 . 17 . 191 en la interaction entire las celulas B y T, 143, 144 en la presentation de antigeno, 141 (atones defectivos, 141 transduccion de senales . 145, 146 CD29 .22 CD30, 125 CD32 : v FCyRII CD33, 157 CD34,157 CD35 ; v-CR1 CD38, 22, 23 celulas B, 164 celulas mieloides, 156, 157 celulas T en desarrollo, 159 CD40, 19,26 celulas B en desarrollo. 164, 165 en la activation de las celulas B, 143 144 CD41, 30 CD44, 16,40 celulas T en desarrollo, 32, 159, 160 CD45, 17, 19, 162 CD46 )proteina cofactor de membrane ; MCP), 44, 47, 48, 50 CD51, 30 CD55, v factor acelerador de la degradation CD56, 19 CD59 . 52 CD64 ; v- FCpRl CD68 . 24 CD69,22 CD71 (receptor de transferrina) . 22 . 23. 159 CD72 . 19, 164 CD79a : v Igu CD79b ; v IgP CD801B7-11, 141, 142-4 CD81,''46, 147 CD86 i87-11 . 141, 142-4 CD94, 129 CD95 (Fas), 131, 184 . 192 CD103 (HML-11, 38 CD122 Icadena (1 de IL-2R), 19, 22, 123 CD134 ; v. cadena y, IL 2R CD158a/b, 129 cecropinas, 203 . 212 celomocitos . 199 celula T ~~fratricida ., , 192 celulas migracion, v migration sisterna inmunitario, 3-5, 13-30 celulas A, sinovial, 3 celulas accesonas: v celulas auxiliares celulas asesmas (killer,) en la hipersensibilidad de tipo II, 319, 320 mecanismos efectores, 130 reconocimiento de la celula diana, 130 v tambien celulas asesmas activadas poi linfocmas ILAK), celulas asesmas naturales celulas asesinas activadas poi linfocinas (LAK), 20 . 130,282 celulas asesmas naturales INK( . 5, 19-20, 128-9 acciones antivirales, 222-3, 225 desarrollo, 13, 155 efectos anti bactenanos, 232, 234 en las infecciones parasitanas . 249 evolucion, 211 funciones, 20 inhibition poi molecules CPH de clase I . 129-30 marcadores fenotipcos, 17, 19-20, 23 mecanismos efectores, 9, 130' morfologia, 15 reconocimiento de la celula diana, 128, 129, 130 respuestas tumorales, 277, 278 celulas auxilhares iaccesoriasi, 3 . 14 en la inflamacion, 5 . 68-9 celulas B, 2, 3-4, 18-19 aborto clonal, 195-6 acciones de las citocinas, 147-50 activation, 20-3. 53 antigenos rndependientes de las celulas T, 144-5 interaction de .as cell T en, 142-5, 149 localization . 152 marcadores, 23 policlonal, 145, 258 transduccion de sena , 20-1, 146, 147

anergia, 144, 194, 195-6 autorreactivos en la enfermedad autoinmundaria, 3746 en los sujetos normales, 373-4 selecoon negative . 163, 194-5 blastos, 16, 21 . 164, 165, 168 como celulas presentadoras de antigeno, 26, 139, 140 de memoria : v celulas B de memoria deficiencies primaries, 285-6 desarrollo, 13, 155, 1626 en Ias eves. 166 sitios de, 32-3, 162 dderenciacion, 21, 144 . 164 en las infecciones virales . 223-4 en los ganglios Imfatlcos, 36 ensayos de activ,dad . 391, 393 esplenica, 33 evolucion, 208-11, 214 interaction con las celulas T, 142-5 marcadores de superficie, 18-19, 26 durante el desarrollo, 164, 165 migration, 61, 165 receptores antigenicos, v. innwnoglobulina, reconocimiento de antigeno de superficie, 142 sangre en reposo, 15. 16 selecoon clonal, 8, 163 subtiocs, 19 tipos morfologicos, 15, 16 tolerancia a los antigenos propics . 193-5 induction in vitro . 1956 induction in vivo, 196-7 iransformado poi virus de Epstein-Barr, 389 virus que infectan, 227 celulas B B-1, 19, 145 celulas B B-2, 19 celulas B CD5', 19. 145, 165, 166 celulas B de memoria, 21, 23, 152 desarrollo, 168 IgE, 316 induction de tolerancia, 196 marcadores de superficie . 164, 165 celulas blancas, v leucocaos 'celulas carnufladl 25, 140 celulas CID 1 `, 26, 159. '60, 345 celulas crtotoxicas, 4-5, '28-31 efectos inmunopatologicos, 135 en los vertebrados inferiores, 211 ensayo de Iiberacon de cromo . 222-3, 224 mecanismos efectores, 9, 130-1 v. tambien celulas T citotoxicas iTCI ; celulas asesmas IK), celulas asesmas naturales INK) celulas de Kuppfer, 3, 23, 141 elimination de los inmunocomplelos, 335 celulas de Langerhans, 25, 26, 141 en la hipersensibdidad de tipo IV, 342, 343, 344, 345 migration, 61 recirculantes ( ,, celulas camufladas0, 25, 140 union de IgE, 309 celulas de+ centro folicular, 21, 36, 168 celulas dendriticas centro germinal ICDCGI, 25, 26 desarrollo, 157 en la selecoon negativa, 191 induccion de la respuesta mmunitana, 172-3 migration, 61 presentation de antigeno . 140 v tambien celulas foliculares dendriticas ; celulas dendriticas interdigdantes celulas dendriticas interdigitantes, 25, 26, 139, 141 activation de las celulas T, 142 gal Iinfaticos, 34, 36, 140 timo, 32 celulas en transito, en los injertos, 357, 358 celulas endoteliales, 14 control de la migration leucocitaria, 63 en el rechazo de injerto, 358 en la hipersensibilidad de too IV, 343, 344, 345 en la inflamacion . 68 interacciones de las celulas migratonas, 61, 62-3 marcadores de superficie, 40 migration leucocitaria a traves de, 66-7 molecules de adherencia . 64 presentation de antigeno . 141 v- tambien venulas tie endotefo alto

celulas epidermicas dendriticas (CEDI, 85 celulas eprtelioides, 134, 346-7, 348, 349 celulas eritroides 156 celulas foliculares de tiroides. 141, 376 celulas foliculares dendriticas (CFD), 25. 26, 140, 141 activacion de las celulas B, 146, 152 irteraccion con los centrocaos, 168 localization, 33, 36 origen, 157 celulas formadoras tie anticuerpos (CFA), 21 . 71, 150, 165 citocinas que median en la diferenciacion, 144 ensayo, 391 . 393 induccion de tolerancia . 196 celulas gigantes multmucleadas (de Langhansi, 134, 346-7,348 celulas granu osas (hemostaticas), 201 . 204 celulas hemostaticas Igranulosas), 201, 204 celulas K ; v. celulas asesmas celulas linfoides, 13 . 14-23, 166 desarrollo. 157-66 origenes en los all 219 celulas M, 37-8 celulas madre hematopoyeticas, 13, 155-6 med,ila osea, 157 celulas memoria . 8, 20 142 celulas mesangiales, irtraglomerulares, 23 celulas rnieloides, 13, 214 desarrollo, 156-7 mecanismos de citotoxicidad, 131 celulas NK ; v. celulas asesinas naturales celL, :as nutritivas, 201 celuas pigmentadas, invertebrados . 201 celuias p roninofilicas, 166 celulas p asmaticas, 4, 21, 71 marcadores de superficie . 23 morfologia . 21 . 22 muerte poi apoptosis, 22 celulas pre -B, 163 induction de tolerancia, 195, 196 marcadores de superficie . 164, 165 proouccion de inmunoglobuhnas . 103, 104 celulas presentadoras de antigeno (CPA). 14, 23, 25-6 . 139 activadas, 142 desarrollo, 26, 157, 158 en el rechazo den mjerto, 357 en a activation de las celulas T, 139 en .a selecoon de los timocaos, 190, 191 en los ganglios linfaticos, 25, 34 . 36, 140 facultativas, 141 marcadores fenotipicos . 26 migration, 61, 62 origenes, 156 procesamiento de antigenos, 114-19 propiedades y funciones, 140, 141 prueba de antiglobulinas (de Coombs), mdirecia, 322 .324 variaciones en ias respuestas inmunrtarias, 172-3 celulas pro-B, 164, 165 celulas progerrtoras . 201 celulas RAJI, 339 celulas T, 2, 3-4, 16-18 u(1; v. celulas T up Yd; v. celulas T ye acciones de las citocinas . 147-50 activacion, 20-3, 148 citocinas y, 141, 142, 147-9 marcadores, 22 molecules de superficie que controlan, 140-2 policlonal, 258 poi mitogenos, 147 poi suoerantigenos, 147 ,rsegunda senal , ~, 142 transduccion de senales, 20-1 . 145-7 anergia ; v. anergia, celulas T autorreactivos delecon en el timo, '60-1, 180, 191 en la enfermedad autoinmunita "ia, 374-6 en los sujetos normales . 373-4 mecanismos de control periferico, 191-3 blastos . 21 deficiencies primaries, 286-90

Indice

celuas ? fcontl desarroilo, 13 155 158-62 en arfibos, 217-19 extraumico . 162 t nl co . 32, 158-61, 162, 189 e'ectos inmurornoduacores, 174-6 er: el " echazo del injerto, 353 . 355-8 en nfecciones fungicas, 240 er la atop a, 314-15 en la conmutacion de isotipos, 150-1, 167 en la ~nmurodad rediada por celulas, 127-8 en la,nmunidad viral, 224-5 en la malnutncion . 295, 296 en las infecaones parasitarias, 248-54 en los ganghos linf6tcos, 36 esplenicos, 142 en ream naados, 162 estudios de actividad, 391-2, 394 evolution, 206, 207, 208, 214-15 Npersers-bidad de tipo IV, 341, 342, 343, 344, 347-8 interacci0r con las celulas B, 142-5 lineas, 391, 392 marcadores de sucerficie, 16-17 . 18 . 159, 160 migration, 61, 63 presentation de antigenos a, v antigeno ipresentacioni prolrferaci6n, 148 reconocimiento de antigenos, 7, 8, 114-19, 142 respuestas tumorales, 277-8 sangre en reposo, 14, 15 selecci6n clonal, 8 v . tam&en selecci6n negativa ; selecci6n positiva subpos, 16-17 v. tambien celulas Cl celulas Cl celulas T citotoxicas (Tc) ; celulas T supresoras ITsi ; celulas T colaboradoras (THI ;ipos morfologicos, 14, 15 tolerancia, 142 a los antigenos propios, 161, 188-93 inducci6n in vitro, 195 induccion in vivo, 196-7 mediante transferencia, 174, 176 virus cue infectan, 227, 228 celulas Tap, 16-17, 159 distribution anatomica, 85 en la hipersens+bilidad de tipo IV, 347-8 expresion de CD4 y CD8, 17 morfologia, 14, 15 subtipos funcionales, 17 celulas T Cl 17 autoinmunidad y, 174, 175, 176, 373, 374 celulas de memona, 153 citot6xica (T:1, 128 . 131 desarrollo. 161, 162 en la deficiencia de CPH de close II, 289 en la hipersensibilidad por contacto, 342, 343, 344 en la mfecci6n por VIH, 227, 228, 297 en la inflamacion cronica, 62 en la inmunidad viral, 224-5 en las infecciones parasitarias, 248-52 en los granulomas, 135 inmunorregulacion por, 176 presentacion de antigeno a, 142 subtipos; v. celuas T-HQ celulas TH 1 . celulas TH2 v. tambien celulas T colaboradoras iTH) celulas T Cl CD8 + idoble positivol, 159 . 160 c ,orologia de la selecci6n de linea, 191 selection negativa y positiva . 181, 182, 188-9 celulas T Cl CD8 - idoble negatvoi, 17, 159. 160 celulas T CD8`, 17 -r&, 18 desarrollo, 159, 160, 161, 162 efectos inmunomoduladores, 176 en la inmunidad viral, 224 en las :nfecciones parasitarias, 248-9 presentation de antigeno a, 142 subtipos, 17, 125 v tambien celulas T citot6xicas (Tcl celulas T citotoxicas (TCI. 4 . 128-9 CD4`, 128, 131 en la inmunidad bacteriana, 234, 237 en la inmunidad viral, 224, 225 en los vertebrados, 206, 207 especifico de tumor, 275 . 276, 277-8 inducci6n poi celulas dendriticas, 173

inmuno-erapia tumora,, 282 interacciones con las celulas diana, 129 mecanismos efectores, 9, 10, 11, 130-1 morfologia, 14 presentacior de antigenos a, 116-7, 118, 128-9 reconocimiento de la celu a diana, 128-9 restricci6n por CPH, 114, 179, 180 subtipos, 17, 125 v tambien celulas T Cl celulas T colaboradoras JO, 4 en el rechazo del :njerto, 357-8 en la enfermedad autoinmurrtaria, 370, 375 en la inmunidad mediada por celulas. 127-8 en la production de IgE, 303-4 morfo ogia, 14 presentation de antigenos a, 116, 118-9 respuestas tumorales . 277-8 restriction de CPH, 114 subpos, 17, 124, 125 v tambien celulas TH1 ; celulas TH2 v. tamb~en celulas T Cl celulas T de memoria, 152-3 en la hipersensibilidad por contacto . 343 celulas T y6, 17, 159 CD8',18 distribucidn anatomica, 85 en la inmunidad bacteriana, 237 exoresion de CD4 y CM 17 localization, 17-18 morfologia, 14, 15 reconocimiento de antigeno, 85 celulas T supresoras ITsl, 18, 127, 128, 175 autoirmunioad v, 376 control de la production de IgE, 303-4 en la atopia, 314-15 en la tolerarcia al injerto, 364 tratam , ento de h,posensibilizacion y, 316 celulas T : : v, celulas T crtot6xicas celulas T ;1, 125 celulas Tc2, 125 celulas Ti, v celulas T colaboradoras celulas T-iQ 124, 144 celulas Tit, 17, 125 activation de las celulas B, 144 citocinas, 124, 125 control de +a production de IgE . 303-4, 305 eiferenciaci6n, 124, 125 en la enfermedad autoinmunitaria, 370 en las infecciones parasitarias, 249-52 celulas T112 . 17, 125 activation de las celulas B. 144, 149 citocinas, 124, 125 diferenciaci6n, 124, 125 en infecciones oarasitarias, 249, 250-2 regulation de la resouesta irmunitaria, 176 celulas trofoolestcas, resistencia a las celulas IN K . 129 centroblastos . 36, 168 centrotitos Icelulas del centro folicularl, 21, 36, 168 centros germirales, 33, 36 desarrollo de las celulas B, 152 funciones, 168 mutac16n somatica, 100 centros melanomacrofagicos (Cl 213 CFl 156 CFll-GM, 156, 157 chaperones, molecuar, 117, 118 ChOrrydra psittaci, 237 Chlamydia trachomatis, 237 ciclofilinas, 294 ciclofosfam,da . 294 ciclosporina, 294-5 . 362-3, 378 cinasas de la familha sic, 145, 146 cmasas Jar-us (Jak), 123-4 tinina de C2, 290, 291 cininas, 68, 310 cirrosis, biliar primaria, 377, 378 atoadhesinas fintegrinas 83l, 64-5 citocinas, 6, 121-5, apendice III acciones sobre ~as celulas T y B, 147-50 activac16r de los macr6fagos, 236-7 como adyuvantes, 270, 271 rrdecel 136. 137 disregulacior:, en la autoinmunidad, 376, 377 en el desarrollo de las celulas T, 161 en el rechazo del inlerto, 357-8, 359

en el reclutannento de lejcootos, 127 en la aclivacion de las ce ulas B 144, 149 en la activacion de las ce ulas T, 141, 142, 147-9 en la alergia, 302 . 303, 304, 305 en la atotoxicidad mediada por celulas, 131 en ia conmutacion oe ~sot-pos, 151, 167 en la hipersensibilioao ee tipo IV . 347-8 en la hipersersibliead po " contacto, 343, 344 en la nflamacton, 69 en la nteraccion entre las celulas B y T, 144 en las infecaones oacterianas, 231-2 en las infecciones carasitanas . 248 evolution, 205, 212 expres16n de CPH y, 354 fam,has . 122-3 homojogos virales, 226 induccOr de las moleculas de adherencia, 66 influencias neuroendocrinas, 178 inhibdores, use teraoeutico, 271 mmunoaegu+adores, 149-50 liberation exces,va . 135, 238, 239, 260 liberacion induc,da por microbos, 126-7 nomenclatura, 121 ratores defect,vos, 135, 136 receptores celu as B en desarrollo, 165 familias, 122-3 homologos virales, 226 ratones defectivos, 136 soluble, 137 transduccion de senales, 123-4 red, 135-7 papeles fisiologicos . 137 regulation, 136, 137 Tr-l ;`T-i2, 17, 124, 125 transfeccion de genes, celuas tumorales, 280-1 tratamiento estero deo v . 294 use te, apeutico, 271, 283 v tambien citocinas especificas cnomegalovirus iCMVh, 298 estra".egias de evasion, 225-6 respuestas inmunitarias, 222-3, 224 citome :ro de fluorescenca, 16, 385, 390 citotoxicidad mediada por celulas dependiette de anticuerpos iCCDAl . 20. 128, 129, 130 en la hipersensibndad de tipo II, 301, 319-20 en las nfecciones parasitarias, 246, 253, 254 en las infecciones vrales, 224 en los vertebrados mfehores . 211 CLIP ipeptido invariable asociado a CPH de close III, 118-9 coagulation, en invertebrados . 202 coestimuacion ausentia y tolerancia, 142, 191 en la activation de los linfocitos, 146-7 en la interaccibn entre las celuas B y T, 142-4 er la presentation de antigeno . 140-2 presentation de antigenos tumorales y, 278 . 279 regulation de las celulas T autorreactivas, 192, 193 colectinas, 47, 54 colera ib9brio cholerael, 229, 240 toxina . 265 vacunas, 264 . 265, 269 colicinas, 229 colitis experimental, 176 colitis ulcerosa, 307 complelo C5b-C9, 51, 52 v tambien complelo de ataque de membrana complelo co " receptor de las celulas B, 146, 147 complelo de ataque de membrana ICAfvlh 51-2 deficiencias, 55, 290 en la patogenia de la enfermedad, 57, 58 en las infecaones virales, 224 evasion por los microorganismos, 56 fo"maci6n, 51 . 52 funtion, 55-6 regulation de la formation, 51-2 complelo Gollbllla. 30 complelo hapteno-transoortador, respuestas a, 342-4 complelo princ , pal de histocompatibiBdad ; v CPH complelo receptor de antigeno de las celulas B, 18 complelo recepto, de las celulas T (TCR-Cl 17, 83 estructura . 84-5 formas alternativas, 160 complelos estimuladores de la inmunidad, 270

complelos +nmunitarios activation dal complemento, 45, 46 . 330, 332 circulantes, pruebas para, 338-9 deposito tisular, 336-8 efectos inflamatorios, 330-1 an la patogeria de la enfermedad, 58, 226-7, 301, 372-3 v tambien hipersensibilidad tipo III en las infecciones parasitaras, 245, 259-60 mmunorregulacion por, 173-4, 175 metodos de deteccion, 338-9 persistencia, 333-6 procesamiento, papel dal complemento . 57, 333-5 complelos peotido-CPH, 116-19 afinidad por TCR y seleccion de timocitos, 189-90 antagonista, 190 estructura, 116 reunion, 116-19 complemento, 5, 43-58 activacion, 45-52 formacon dal complejo de ataque de membrana, 51-2 microorganismos que inhiben, 23, 56 por inmunocomplejos, 45, 46, 330, 332 por inmunoglobulinas ; v anticuerpos, activation dal complemento por microorganismos, 46, 48, 231, 232 reguladoras de RCA iproteinas de control dal complementoj. 44 47 via alternativa, 48-50 via clasica, 45-7 complejo de ataque de membrana ; v. complejo de ataque de membrana componentes clasificacion en superfamilias, 44 deficiencias, 55, 290-1, 334-5 desarrollo, 157, 158 ensayos, 390 estructura en mosatco, 44 nomenclatura, 43 efectos biologicos, 5, 44-5, 54-8 beneficiosos, 54 en la hipersensibilidad de tipo II, 319-20 en la inducton de las respuestas inmunitarias, 57 an la inflamation, 44, 45, 54-6, 69 an la patogenia de la enferme(lad, 57-8 en las infecciones bacterianas, 233, 234 en las infecciones virales, 223-4 evasion por los microorganismos, 56, 234 perniciosos, 54 procesamiento de los inmunocomplejos, 57, 333-5 resistencia por los parasitos, 254-5 utihzacion por los microorganismos, 56 ensayos, 390 evolut16n, 203, 211-12 nomenclatura, 43-4 prueba de fijacion, 381-3, 384 receptores, 52-4 nomenclatura, 43-4 proteinas reguladoras, nomenclatura, 43 via alternativa . 5, 44 activation al ralenti, 48 activadores, 46, 48 butte de amplification, 48-50, 51 frente a la via clasica . 45, 49 regulation. 50, 51 via clasica, 5, 44, 45-7, 48 activadores, 45, 46 frente a la via alternativa, 45, 49 regulation, 47, 48 via de las lectinas, 46, 47, 49 v tambienCR1 ; CR2, CR3 . pl50,95 componente secretor, 72, 76 concavalina A iConA), 20, 147 conducto toracico, 35, 39 conejos, 102 conmutac16n de isotipos, 102-3, 166-7 antigenos independientes de las celulas T y, 145, 167 an el sindrome hiper-IgM, 286 medlante la elimination drferencial de intrones de ARNm, 103 medlante recombination genetica, 102, 103, 166-7 papal de las celulas T, 150-1, 167 patron temporal, 167

typo de antigeno y, 167-8 contaminacion ambiental, 315 contaminacion dal afire . 315 conversion gen,ca . 94, 102, 210 corpusculos de Hassall, 32, 159 corticosteroides atrofia timica y, 32 efectos mmunosupresores, 178 . 293-4 an el asma . 311 en la artritis reumatoide, 378 en la decision TH1/TH2, 125 en la metamorfosis de los anfibios, 344 en los receptores de trasplantes, 362 supres16n de los mastocitos, 308-9 Corynebacterium diphteriae, v di'ter a CPA; v. celulas presentadoras de antigeno CPH, 354 evolution, 206-8 genes, 86, 89-92 control de la respuesta inmunitana, 179-80 en el procesamiento/presentation de antigenos, 117 resouesta a las infecciones y. 181-2 genes de cease I, 89-90 genes de cease II, 90-1 genes de cease III, 85 haplotipos enfermedades autoinmunitarias y. 182-3 . 369, 370 herencia, 354, 355 inmunodeficiencia variable comun y, 286 respuesta de anticuerpos y, 179 respuesta especifica a a,ergeros y, 306 selection positiva, 180, 181 susceptibilidad a las infecciones y, 182, 183, 244 susceptibilidad al paludismo y, 182, 244 moleculas, 7, 8, 85-9 en el rechazo dal injerio, 355-6 . 358 union de peptido, 116-19, 356 moleculas de cease I, 85 asociac,on con (f,--microglobulina, 85, 86, 117, 118 celulas tumorales, 279 desplazamento intracelular, 118 dominos extracelulares, 85-6, 87 en Xenopus. 207, 208 estructura, 85-9 frente a las moleculas de cease II, 88, 89 inh,bicion de las celulas NK, 20, 129-30 polimorfismo, 91, 92 regulation a la baja regulada por los virus, 223 surco pectidico de union dal antigeno, 86-8, 116 tepdos trasplantados, 354 union dal peptido, 116-17 moleculas de cease II, 85 celulas B, 19, 23, 164, 165 celulas mieloides, 156, 157 celulas presentadoras de antigeno, 25, 26 celulas T, 22 celulas tumorales, 278, 279 deficiencia, 289 despiazamiento intracelular, 118 dominos extracelulares, 88 en la hipersensibilidad de tipo IV, 343, 345 en Xenopus, 207-8 estructura, 88-9 frente a las moleculas de cease I, 88, 89 hendidura peptidica de union antigenica, 88-9, 116 monocitos/macrofagos, 24 polimorfismo, 91-2 tejidos trasplantados, 354 union dal peptido, 116 . 117, 118-19 polimorfismo, 91-2, 180 pruebas cruzadas an el trasplante, 361, 362 restriccion, 114, 179 desarrollo, 160, 161, 180 vacunacion y, 267-8 v tambien H-2 ; HLA CR1 ICD351. 44, 53 celulas que expresan, 19, 24, 25, 26, 30 en la ehminacion de los inmunocomplejos, 333 . 334 en los no primates . 331, 333 regulation de la activation dal complemento, 47, 48, 50 CR2 ICD211, 44, 53-4 celulas B en desarrollo, 164, 165 celulas qua expresan, 19, 25, 26

en el complejo celula B-correceptor, 146, 147 interacclones con los inmunocomplejos, 173-4 CR31Mac-1, CD11b/CD181 . 54, 64 celulas qua expresan, 19, 24, 30 deficiencia . 55 . 292 en la migracron leucocitara, 66 en la union con las bacterias, 234 CR4, v. p150,95 cromatografla de afinidad, 387-8 cromoglicato sodico, 308, 309, 311, 313 cromom,cosis . 240 enfermedad granulomatosa cronica . 235, 236, 241, 291-2 Cryptococcus neoformans. 241, 298 Cryptosporidium diarrhoea, 298, 299 CTLA-4, 17, 141, 191 en la deteccion de las celulas T, 192 ratones defectivos, 141, 192 cuerpo de Gall, 14 cuerpos de VVeibel-Palate, 40 cultivo mixto de ;infoci*os y tumor IMLTCI, 277-8 curacion de las heridas, en invertebrados, 202 defensinas, 212 . 236, 342 deficiencia de adenosina deaminasa IADAh 288, 289 aeficencia de adherencia leucocitaria IDALI . 66, 127, 179 .292 deficiencia de cnc, 296 deficiencia de cobra, 296 deficiencia de folatos . 296 deficiencia de hierro . 296 deficiencia de purina nucleosido fosforilasa IPNP), 288, 289 deficiencia de seleno, 296 deficiencia de vtamina A, 296 deficiencia de vtamina B6, 296 dehidroepiandrosterona (DHEA), 125 deteccion clonal, 188 celulas B autorreactivas, 163. 194-5 celulas B in vitro, 195-6 celulas T autorreactivas, 160-1, 180, 191 v . tambien selection negativa dementia, relacionada con el SIDA, 298 deoxmucleotidd transferasa terminal (Tdt), 99 celulas B en desarrollo . 163 . 164 celulas T en desarrollo, 160 deriva antiger,ca, 226 derivation antigenica, 226 derivado proteico purficado WPM, 133 derivados reactivos dal nitrogeno, 131, 235, 246-7 derivados reactivos dal ox ;geno, 9 . 131, 235, 236 an la enfermedad granulomatosa cronica, 291-2 en las infecciones parasitaras, 246 . 247 evasion de la muerte por, 255-6, 258 desviacion inmunitaria, 176, 192-3 control genetitico . 193 dosis de antigeno y, 171-2 induction in vivo . 197 tipo de celula presentadora de antigeno y, 173 v . tambienequilibnoTH1/TH2 determmantes antigenicos, v. epitopos dextrano, 145 diabetes mellitus insulinodependiente, de typo I, 377,378 autoarticuerpos frente a las celulas de Ios islotes, 328 . 377, 378 factores geneticos, 182-3, 184, 369, 370 diacilghcerol IDAGI, 21 dana genetica, 394 diapedesis, 10, 27 difterta iCorynebacterum diphtartae,l, 240 genetica de la resistencia a, 178-9 inmunizacion, 265, 268 toxina, 229, 233 toxoide, 11, 265 1 .25-dihidroxicolecalc,ferol Icalcitrioll, 134, 237, 351 dinitroclorobenceno IDNC81, 342 discriminacibn entre to propio y to no propio, 44-5, 187 v- tambien tolerancia, prop,o distraction mmunitaria, 259 diversidad, 93-106 anticuerpos ; v anticuerpos, diversidad magnrtud, 106 receptor de la celula T, 105-6

Indice

aiversidad de la region N inr " wnoglobul,nas, 94, 99-100 receptores de las celulas T, 106 acmiro Cy2, 80 dwmnios, inmunoglobulinas, 73, 74-5 E-selectina, 40, 65 en is hipersensibilidad de tpo IV, 345 en la migracon leucoctaria, 65, 66 eccema atopico, 302, 311, 314-15 contacto alergico, 341-2 irritante. 342 edema angioneurotico, heredrtario (EAH1. 290-1 educac16n timica ; v. selecci6n negativa, selecci6n positiva ,~efecto transportadon , , 142, 143 efectos nmunosupresores,294 en los receptores de trasplantes, 362, 363 Ehrlich, Paul, 93, 187, 273 ecosanoides, 205, 211 eje hipotalamo-hipofisario-adrenal, en la autoinmunidad, 376, 377 electroforesis en cohete, 381, 383 por contracorriente, 381, 383 elefantiasis, 259 encefalinas, 178 encefalomielitis alergico experimental IEAE'r . 65, 172 . 173, 176. 178, 370 endocard-tis . bacteriana, 58 endorfinas, 178 endosomasllisosomas, montaje de CPH de close IIpeptdo, 118-19 endotoxina; v rpopolisacarido enfermedad autoinmunitaria/autoinmunidad, 11, 12, 367-79 asociaciones, 368-9 celulas T CD4` y, 174, 175, 176, 373, 374 en las infecciones parasitarias . 260 enfermedad por inmunocomplejos en, 329, 332 especifica de 6rgano, 368 espectro, 367-9 etologia, 228, 373-7 factores geneticos, 184 . 369, 370 mecanismos de la nipersensibilidad de tipo II, 324-8 modelos expenmentales, 370-1 patogenia, 370-3 producida oo " antigenos, 374 susceptibilidad ligada a CPH, 182-3, 369, 370 tratamiento, 377-9 valor predictive de los autoanticuerpos, 377, 378 enfermedad de Addison, 370 enfermedad de Chagas . 244, 260 . 269-70 enfermedad de Crohn, 307, 351 enfermedad de Graves (tirotoxicosis), 371-2, 374, 376,377 enfermedad de Hashimoto (tiroiditisl. 367, 368, 369 enfermedad dal sumo : v . tripanosomiasis africana enfermedad dal suero, 331-2, 336 enfermedad granulomatosa cronica IEGCI, 235, 236, 241 . 291-2 enfermedad hemolitica dal recen nacdo, 320, 323-4 erfermedad injerto contra huesped IEICH1, 355 . 356 ensayo relacionado con el cromo, 392, 394 ensayos ELISPOT, 391, 393 Entamoeba histolytica, 244, 257 enterotoxina B estafiloc6cica ISEB), 180-1 enzima convertidora de angotensina IECA) . 351 enzimas I,posomales, 55 en los invertebrados. 203 evasion de la muerte por, 255 exocitosis, 320, 321, 331 eosinofilia en las reacciones albrgicas, 304 pulmonar tropical, 260 eosinofdos. 5, 13-14, 28-9 citotoxicdad, 130 control genetico de la actividad, 184 desarrollo . 156 desgranulac16n, 26-9 en el asma, 313 en la h,persensibllidad de ; Gi- 11 319 en las infecciones parasitaras, 62, 246, 247-8

marcadores funcionales, 30 morfologia, 28 quimioatrac-.antes, 29 sensibilacion mediada por IgE . 309 epidermis celulas presentadoras de antigeno, 25 celulasT yD, 17-18 epitelio asociado a los foliculos (EAFI, 37, 38 epitopos, 7, 113-14 celu~as T frente a celulas B, 114 cripticos propios . 373, 376 en las vneracciones antigeno-anticuerpo, 108 interaccones con anticuerpos polifunconales . 11, 112 equdibno TH1/TH2, 125 control genetico, 193 doss de antigeno y, 171-2 en el asma, 125 . 313 en el rechazo de injerto, 364 en las rnfeccones por Lershmama major, 232, 249-50 en las infecciones per protozoon intracelulares, 249-50 production de inmunoglobulinas y, 174-6 regulac6n por calctriol, 134 tipo de celula presentadora de antigeno y, 173 tolerancia a to propio y, 192-3 tratamiento hiposensibilizante, 316 eritrocitos anticueroos, 320-6 . 372 antigenos de los grupos sanguineos, 321, 322 destino en ei bozo, 34 en la enfermedad por inmunocomplejos, 334, 335 lisis mediada por complemento, 51-2 Escherichia colt, 237 . 265 escualamina, 212 espordilitis anquilopoyet,ca, 375 esquistosorriasis, 244 . 250-1, 259 . 269 formacon de grams omas, 251, 351 esterasa no especifica INSET, 26 esteroides, v corucosterodes estimulaci6n activa, 364-5 est .rrulac16r) pasiva, 364, 365 estreptococo dal grupo A, 233, 234 estres, 125, 178 evoluc6n, sistema inmunitario, 199-220 f-Met-Leu-Phe OWN, 67, 234 F480 . 24 'actor acele , ador de la cegradacOn IDAF ; CD551 . 44, 47 . 48 . 50 productos dal tripanosoma qua se parecen a, 255 factor activador de las plaquetas IPAFI, 68, 69, 238 . 310 factor activador de los macrofagos IMAFI . 357, 359 factor B, 48, 49, 50, 51 factor D, 48, 49, 50 deficiencia, 290 factor de activation/diferenciac6n de las celulas B, v interleucina 4 factor de crecimiento transformante 0 (TGF-131, 6 acciones inmunorreguladoras, 150, 176 desact-vacion de los macrofagos, 134 en el rechazo dal injerto, 360 en la cor mutac16n de isotipos . 151 en la diferenciacion de Tr-1, 124 en la hipersensibilidad por contacto, 344 ratones defectives, 136 factor de diferenciacion de las celulas B, v interleucina 6 factor de la estrella marina, 205 factor de necrosis tumoral (TNF), 122 antagonistas, use "terapeutico, 271 autoinmunidad y, 376 en la infection por VIH, 227 en las infecciones vrales, 224 en las reacciones granulomatosas, 348 liberation excesiva, 238, 260 factor de necrosis tumoral a ITNF-,I, 6 activation de macrofagos, 133, 247 en el reclutamiento de los leucocitos, 127 en la activation de las celulas B, 144 en la citotoxicidad mediada per celulas, 131

en la fase initial de la respuesta inmunitaria . 126, 127 en la hipersensibilidad de tipo IV . 345 en las infeccones parasitartas, 246, 247, 254 expresion de moeculas de adherencia y . 66 mecanismo de action, 124 nefritis lupica y, 183 ratones defectives, 136 reacc6n de Sl-wartzman v, 239 use terapeutico, 283 factor de necrosis tumoral P (TNF-p ; linfotoxinal, 6, 125 en el rechazo dal injerto, 357, 359 en la activation de las celulas B, 144 en la citotoxicdad mediada por celulas, 131 en la hipersensibilidad de tipo IV, 345 ratones defectives, 136 factor de restricci6n hom6logo IFRHI, 52 factor desactivador de los macrofagos IMDF1, 134 factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSFI . 156,271 factor estimulante de colonias de granulocitosmacrb`agos iGM-CSFI, 26 en la hematopoyesis, 156 en la hipersensibilidad por contacto, 343, 344 en las nfeccones paras,tanas, 248 factor estimulante de colonias macrofagicas IM-CSFI, 156 factor estimulante de los hepatocitos ; v . interleucina-6 factor H, 44, 50, 51 deficiencia . 290 factor I, 47, 50 . 51 deficiencia . 290 en la elimination de inmunocomplejos, 334, 335 factor nhibdor de la sintesis de citocnas ; v. tambren interleucina-10 factor quimiotactico de eosin6filos en la anafilaxis IECF-AI . 29 factor quimiotactico de neutr6filos iNCFI, 68 factores de crecimento de las celulas T ITCGFI . 212 factores estimulantes de colon,as . 6, 122, 156 use terapeutico, 283 factores geneticos enfermedad autoinmunitaria, 184, 369, 370 respuesta alergico, 304-6 respuesta inmunitaria, 178-84 toleranca a las celulas T propias, 193 factores quimiotacticos, 67 mastocitos, 310 . 312 fagocitos, 2, 13-14 defectos hereditarios, 291-2 en la hipersensibilidad de tipo II, 319-20, 321 en la inflamacion, 10 funciones . 3, 4, 7 interacc:ones de los linfocitos con, 2, 3 invertebrados, 201, 202-3, 204 mecanismos de evasion de los patogenos . 237, 238 migraci6n, 61 muerte de las bacterias, 233, 234-7 paces, 211 qumiotaxis, 5. 125, 126 union a las bacterias . 233, 234 fagocitos mononucleares, 23-4 eliminac6n de complejos inmunitarcs, 333-6 funciones, 3 . 23 receptores F^ .78 reclutamiento, 62 v tambren macrofagos; monocitos fagocitosis, 9, 125-6 en las infecciones parasitarias, 253, 254 frustrada . 320, 321, 331 papal dal complemento 53, 55, 125-6 fagolisosomas, 9, 27, 28 . 236 fagosoma, 9 familia de rodopsina de receptores acoplados a las proteinas G . 54 familia dal receptor de crecmiento nervioso INGF1 . 16 ras ICD951, 131, 184 . 192 Fc,Rl, 78-9, 309 distribution celular, 29, 30 sitio de union de IgE, 81 Fc,Rll ICD231 . 78, 79, 309 celulas B, 164, 165 distribution celular, 10, 23, 24, 29, 30 sitio de union de IgE, 81 FCyRI ICD641 . 78, 79, 81 distribution celular, 24, 26

en la citotoxradad mediada por celulas NK, 130 FoRll (CD321 . 78 . 79 distribucion celular, 19, 24, 26, 29, 30 FcyRhl (CD161, 78, 79 distribucion celular, 20, 21, 24, 30 FcWR . 78 FcRn, 81 fenoloxdasa IPOI, 202 fenomeno de Koch, 239 fertdidad, vacunas contra, 272 feto, inmunoglobulinas sericas, 168 u-fetoproteina (AFPi, 276, 279-80 f 0roblastos . 141 Ficoll, 145 fete amanlla. 264, 268, 269 fiebre del heno, 302 . 3089 fiebre O, 265 fiebre reumat,ca, 375 filarias, 243, 258 . 259 fitohemaglutinina IPHAI, 20 . 147 FK5061tacrolirnol, 294-5. 362-3 flagelina, polirnerica bactenana . 145 flavivirus, 56 foliculos linfoides, 33, 34 secundarios, 33 . 36, 37 fosfolipasa C PLO, 145 . 146 fragmento Fc', 80 fragmento pFc . 80 fragmentos Flab')2, 80 fragmentos Fab . 80 fragmentos Fc, 80 fyn 145, ganado . 102 ganglios linfaticos, 31, 34-6 celulas presentadoras de antigeno, 25, 34, 36. 140 cortex, 34, 35 desplazamiento de linfocltos, 39, 40, 63 evolution, 210 . 213, 215-16 funciones . 33 m6dula . 34, 35 migreo6n de las celulas B hacia, 165 paracbrtex, 34, 35 gemelos, monocig6tucos, 361 gen bcl-2. 152 gen brk, 285 gen cim, 183 gen g1d. 184 gen Ipr, 184 gen IshlltylBcg, 184 gen Mx, 222 genes de activacion de la recombinaci6n (RAG-1/ RAG-2). 98-9. 160 genes de las inmunogbbulinas . 95 en los vertebrados ~nfenores, 209-10 recombmacon, 96-100, 163 . 165, 166 en la fase initial de la vida fetal, 98 en los vertebrados inienores, 209-11 generation de dominos V de las cadenas ligeras . 96.97 generacron de dominios V de las cadenas pesadas, 97-8 mecanismos de control. 98-9 reordenamientos futuros, 195 varabildad en, 99-100 genes Idd. 184 genes M, 90 genes Oa .90,91 genes Tla . 90 . 91 genes TS-1/TS-2, 182 Giardia lamblia, 286, 287 ging,paina-1, 55 glandula Imfatica, larvas de anfibios, 215 glicoforma A . 322 glicoforina B . 322 glucocorticoides ; v . corticosteroides glucoproteina de superfine variable IVSG), 256-7, 259 glucosilanon, antigenos tumorales, 276 gonadotropina corionica humana IhCGI . 272 gp130 (cadena P IL-6R) . 123 Go63 . 256 graficos de Wu y Kabat, 95, 96 granulociios, 13-14, 26-9 desarrollo, 155, 156, 157

marcadores funcionales . 30 pohmorfonucleares, 1314. 26-9 v tambien basof-los, eosin6filos, neutrofdos granulomas, 134-5, 346-7 composic16n celular, 347 cuerpo extrano, 346 en la esgwstosomasis, 251, 351 entermedades que se manifiestan comp . 348-51 granubs de Birbeck, 25, 342 granzimas.130-1 gripe vacuna, 264, 265, 269 virus, 128, 222 . 225 . 226 gusanos (helmintosl, parasitos. 243-61 en bs huespedes humanos. 245 funciones de IgE, 254, 260 . 317 intestmales, v gusanos ~ntestinales respuestas mediadas por los eosin6fdos, 247-8 respuestas Tr,1 y TrQ, 250-2 gusanos intestinales, 243 mecanismos de expulsion, 252, 317 respuestas de las celulas TH2, 252 H-2, 354 genes de clase I, 89-90 genes de clase II, 90, 91 haplotipos. 89. 90, 179 organizacion genomica . 86, 8390 haptenos . 142, 342 helmintos, parasitos; v tambien parasitos hemaglutinina (HA), gripe, 116, 191226 hematles, v entrocitos hemocateresis. 34 hemociios, 199 hemolina (P4I, 203, 204, 306 hemozoina, 259 hepatitis B. 2267, 268 cr6nlca, 329 tumores y . 274, 275 vacuna. 265. 266. 268 . 269 . 28 1 hrdratos de carbono scald-Levvis X, 65 1-u hidroxdasa, 134, 237 5-hidroxitriptamina (5HT, serotonina), 30, 68 higado comp 6rgano linfomieloide, 213, 216 elimination de inmunocomple)os, 333, 335 fetal, desarrollo de las celulas B. 32-3, 162-5 hiperreactividad bronqural, 314 hlpersensibilidad, 12, 301 contacto, 341-5, 347 granulomatosa, 341, 346-51 tipo I linmediata), 301, 302-17 reacaones cutaneas. 31011, 333 v tambien alergia boo 11, 301, 319-28 antigenos tisulares, 326-8 celulas sanguineas y plaquetas, 320-6 mecanismos de la lesion, 319-20 tipo III lenfermedad por inmunocomplelos), 301, 329-40 deposito tisular de complelos, 336-8 mecanismos, 3301 modelos experimentales, 331-3 persistencia de complelos, 333-6 tipos, 329-30 v tambien complelos inmunitarios typo IV Itipo retardado), 301, 341-52 reacaones celulares, 347-8 reacaones cutaneas, 333 variantes, 341 . 347 typo tuberculina, 341, 345 . 347 hipersensibilidad de Jones-Mote, 341 hipersensibilidad granulomatosa, 341 . 34651 hipersensitxhdad por contacto . 341-5. 347 alergenos frente a rrritantes . 344 fase de elicitation, 343 fase de sensibilizan6n, 342, 343 supres16n mediada por ntocinas, 344-5 hrpogammaglobulinemia, transdorla, de le lactancia, 286 hip6tesis instructiva, formaci6n de anticuerpos, 94 hipotiroidismo . 377 histamina, 29 . 68 en la alergia, 309, 310 . 314

H LA . 85 . 354 especificidades. apendice I genes de clase I, 90 genes de clase II, 90-1 organizacion genlca, 86 v tambien CPH HLA-A2,87,88 HLA-Avv68, 87, 88 HLA-88 .306 HLA-B27, 89 HLA-DM, 118-19 HLA-DR1 . 86-9 HML-1 ICD103i, 38 hongos. 240-41 mmunidad medrada por celulas, 240-1 epos de infeccrones, 240 hormona liberadora de corticotropina ICRH). 178 ICAM-1, 40, 64. 66 en la hioersensibildad de tipo IV. 343. 344, 345 en la interaction entre las celulas B y T, 142, 143 en la presentaci6n de antigenos, 140-1 ICAM-2, 40, 64, 66 ICAM-3, 142 icosomas, 25 . 146 IDCG, v inmunodeficiencia combinada grave idatipos. 77 . 95. 176-7 Igu ICD79a?, 18, 145 en la transm,sion de senales intracelulares, 146, 147 en las celulas B en desarrollo, 163 IgA, 18, 72, 73 conmutacion a, 151, 167 deficiencia, 2856, 287 en bs recien nacdos, 168 en los vertebrados, 209 estructura, 76-7 receptores, 78 secretora ilgAs), 33, 38. 72 efectos antibacterianos . 233 estructura. 76 propiedades fisiopquinlicas, 73 subclases. 72, 767 transporte a traves del epitelio mucoso, 39 Igl1 ICD79b), 18, 145 en la transmisi6n de senales ~ntracelulares . 146, 147 en las celulas B en desarrollo, 163 IgD, 18 . 73 estructura, 77 production, 102 . 103 IgE, 73 alergia y, 301, 302-4 celulas inmunitarias que se ligan con, 309 conmutacion a, 151, 167 en las infecnones por gusanos. 254, 260 . 317 entrecruzamiento de los receptores, 309. 310 estructura, 77 estudios de estruclura/func16n, 81 funciones, 73, 317 nlveles sencos control genetico. 184, 305-6 en las entermedades alergicas, 303 . 304 Upo de HI.A y . 306 production, 102, 103 control de, 303-4, 305 efectos de los contaminantes, 315 receptores, v FcvRI, FccRll supresion de la respuesta, 316 IgG . 72, 73 administration pasiva, 173 agalactosil, 336 conmutacion a, 150-1, 167 deficienca de subclases iIgG2). 286 en feto/recien naado, 168 en las infecaones por esquistosomas. 254 estructura, 73-5 estudios de estructura/funci6n, 80 . 81 fragmentos, generados mediante enzimas, 80 inmunorregulaci6n poi, 173, 174 production, 102 production retrasada en bs lactantes . 286 receptores, v Fc-fRI, FCRII ; FcyRlll subclases, 72, 73 IgM, 18 . 72 . 73 administranbn pasiva, 173

Indice

IgM icont coniiguracon ~,en forma de cangrejorr, 75,81 en la respiesta de anticuerpos, 150, 151 en os vertebrados, 208-9 er, ream nacdos, 168 estuctura,75 estudios de estructura/funcon, 81 inmunodeficiencia con aumento de (sindrome de hiperIgM), 144, 286, 287 producc6n, 102, 103 receptores, 78 superficie (IgMs), 165, 166 regulac6n a la bale, 194, 195 ignorancia antigenos propios, 191 clonal de jas celulas B, 196 IgX, 209 IgY, 209, 217 imitacon molecular, 228, 374-5 immunodeficienca, 12 incompatibilidad Rhesus IRhi, 173 . 323-4 ndice de Shannon, 113 irfantes alimentados con biberon, 314-5 mfeccones, 1 en la deficiencia del complemento, 55. 184 factores geneticos en, 181-2, 183 . 184 oportun .stas, 285, 286, 288, 298 pares tarias, 62, 243-61 caracteristicas, 243-6 diferencias geneticas en la res+stencia . 244-5 efectos inmunopatologicos, 259-60 especificidad del hueSped, 244 inmunidad mediada per celulas T . 248-54 mastoctos en, 248, 252 . 307, 308 mecanismos de evasion, 253, 254-9 mecanismos efectores en, 245-8 naturaleza CrOrica . 245 sitios de iinfectior, 244 vacunas, 260, 269-70 vectores, 205 .243 persistemes, 329 piogenicas recidivantes . 285, 286 ~nfertilidad, masculine, 372 inflamaci6n, 10, 68-9 celulas que mtervienen, 5 control, 68-9 cr6nica, 62 . 135 funciones del complemento en, 44, 45, 54-6, 69 migration de los leucocdos er., 10, 61-2 . 66 reaccones, 61 inhibidor de C1, 47 deficiencia, 290-1 inmunidad adaptativa, 1-2, 7 sistema del complemento y . 44, 45 vacunaci6n y, 263 ~~inmunidad concomrtante .r, 246 inmunidad en rebano, 264 inmunidad humoral, 121 ontogenia en anfibios, 219 v tambien anticuerpos inmunidad innata (no adaptativa), 1-2 a Ids virus, 222-3 en Ids vertebrados, 211-12 srstema del complemento y, 44, 45 inmunidad mediada per celulas, 121-37 ctotox cidad, 128-31 dependiente de jas celulas T, 127-8 en jas infecciones fungicas, 240-1 independiente de jas celulas T, 125-7 inmunopatologia, 135 ontogenia en Ids anfibios, 219 v tambien macr6fagos ; celulas asesinas naturales iNKI, celulas T inmunizacion active, v vaCunac16n pasiva, 271 inmunoblotting, 386-7 combinada grave lIDCGj, 179, 288 ratones, 100 . 176, 232 secundaria . 293-300 variacle comun OVCI, 286, 287 virus tumorales y, 273, 274 primaria, 285-92 celulas T, 286-90 celulas B, 285-6, 287

defectos de los `agocitos, 291-2 proteinas de- complemento, 290-1 v. tambren inmunosupresion inmunodiagnostico, tumor, 279-80 inmunodifusibn, radial simple . 381, 383 inr7unoelectroforesis, 381, 382 inmunoensayos . 27980 . 386 inmunofilinas, 294 inmunofluorescencia, 16, 17 directa e indirecta . 383-5 en la detection de inmunocomplejos, 338 inmunogammagrafia, 279 inmunoglobulinas, 71, 163 actipos . 77, 95 atteraciones de Ids hidratos de carbono, 336 cadenas ligeras . v. cadenas fgeras cadenas pesadi v cadenas pesadas clases Gsotiposl, 71-3, 77, 95, 166-8 conmutacion, v conmutacion oe isotipos en la enfermedad par inmunocomplejos, 336, 338,339 diversidad, v anticuerpos, diversidad en feto/recien nacdo, 72, 168 en jas celulas plasmaticas, 21, 22 estructura, 72, 73-7 estudios de estructura/funcion, 80-1 evolucon, 201, 203, 208-11 funciones efectoras, 72 humana almacenada, 271 producc6n, 93-104 regulation de, 103-4, 105 teorias de . 93-4 secretadas producc6n, 103, 104, 105 v tambren anticuerpos subclases, 72 superficie jmembranal. 18, 71 edition de receptor, 195 pOrdida de, t65 production. 103, 104 regulacibn a la baja, 194 . 195 variabilidad . 94-5 varacon idiotipica, 77, 95, 176-7 v. tambien anticuerpos ; IgA . IgD : IgE . IgG : IgM inmunopatologia, 11-12 inmunoprecipitacion, 386-7, 388 inmunosupresion en 'a enfermedad autommunitaria, 378 incidencia de tumores y, 271274 inducda per farmacos. 293-5 inducida per tumores . 174 infecciones fungicas y . 240 mediadas per parasites, 258-9, 260 receptores de injertos, 362-5 inmunoterapia active, 280-1 especifica de alergeno, 316 no especifica. 271 en el cancer, 281 pasiva, tumores, 280, 281-3 tumor, 280-3 mositol 1,4,5-trifosfato (11-31, 21 ntegrinas, 16, 64-5 a4j17, 40 aD02, 24 01, 16, 64, 67 02 ileucocitarial, 16, 54, 64 p3 icitoadhesinasl, 64-5 interacciones antigeno-anticuerpo ensayos basados en, 381-7 reacciones de precipitation . 381 v. tambren anticuerpos, union antigenica interacciones entre el sistema neuroendocrino e inmunrtario, 178 interferon-a, IIFN-al, 122 acciones inmunorreguladoras, 124 en la decision TH1/TH2, 125, 175-6 en jas infecciones vuales, 222, 223 transduccion de senales, 124 use terapeutico, 271, 283 interferon-0 ill'N-pi, 6, 149, 222, 223 interferon-, IIFN-y), 6 acciones inmunorreguladoras, 149, 150 activacon de los macr6fagos, 133, 134, 237, 247 autoinmunidad y, 376

como citocina TH1, 125 en el rechazo del irierto . 357, 358, 359 en la alergia, 304 en la cdotoxicdad mediada oorcelulas, 131 en la conmutacion de isotipos, 151, 167 en la diferenciacion de TH1, 124 en la diferenciacion T :-1, 125 en la hipersens,bilidad de tipo IV, 343, 344, 348 en jas infecciones bacterianas, 232 . 236, 237 en jas infecciones parasitarias, 246, 247, 249-50, 251 .254 en jas infecciones virales, 222, 223 . 224 ~nl de TH2, 175 ratones defectives, 136, 348 receptor, 24, 136 use adyuvante, 112, 113 use terapeutico, 271, 283 interferones, 6, 122 acciones ant,virales, 222, 223 en los vertebrados ~nferiores, 212 interleucma-1 IIL-11 . 149 antagonistas, 271 en !a activation de jas celulas T, 142, 149 en a hipersensibilidad per contacto. 343, 344 en la inflamacion . 69 en la interaction ente jas celulas B y T, 144 liberaci6n excesiva . 238 mecanismo de acc6n, 124 receptor OL-11 RI, 165 secretion neuroendocrina, 178 interleucma-2 pL-21, 19-20. 125 acciones, 148-9 activation genica, 145 . 146 control per molecules coestimuladoras . 192, 193 en el desarrollo de jas celulas T, 161 en el rechazo del inlerto, 357, 359 en la activacon de jas celulas B, 144 en la activac on de jas celulas T . 147-9 en jas infeccones parasitarias, 259 ratones defectives, 136 receptor IIL-2l 123 alta afinidad, 147-8 . 175 cadena a : v .CD25 cadena p iCD1221, 19. 22, 123 cadena y; v 7, cadena IL-2R distribuc6n celular, 22, 23, 24, 165 gen. activacion, 145 transduccion de la senal, 124 reversion de la anergia de jas celulas T, 192 use terapeutico, 271, 282 . 283 ~nterleucrna-3 ill--3j en la activacon de "as celulas T, 149 en la alergia . 302 en la hematopoyes,s, 156, 165 en la hipersensibilidad per contacto, 343 en jas infecciones pxasitanas . 248 receptor IIL-3R1, 23, 165 interleucma-411L-4h . 26, 125 acciones de as celulas T . 124, 125, 149 activacon de jas celulas B, 144, 149 conjunto de genes . 305-6 desactivacion de los macr6fagos, 134 en el rechazo delinjerto, 357, 359 en la alergia, 302, 304 en la conmutac6n de isotipos . 151, 167 en la interaccion entre jas celulas B y T, 144 en la leisnmaniasis, 249-50 ratones defectives . 136 receptor ill--41`1i, 23, 24, 123, 124, 165 interleucine-5 OL-51, 125 activacon de jas celulas B . 144, 149 en el rechazo delinjerto, 357, 359 en la alergia, 304, 313 en is conmutacon de isot,pos, 167 en la hematopoyesis, 156 en ]as infecciones parasitarias . 248, 250 receptor IIL-5R), 23, 165 interleucma-611L-61, 125 acciones . 122, 149 en el rechazo del mjerto, 357 en la activation de jas celulas T, 142, 149 en la hipersensibilidao per contacto, 343 en la infection per VIH, 227 en la mflamaci6n, 69 en la interaction entre jas celulas T y B, 144

receptor IIL-IBRI, 23, 123, 165 cadena /l igpl301, 123 secretion neuroendocrina, 178 interleucina-7 iIL-71 . 98 acciones de las celulas T 149 en el desarrollo de las celulas B, 163, 165 ratones defectivos, 136 receptor (IL-7R). 165 interleucina-8 iIL 81, 67, 68, 69 interleucina-9111--91, 124, 125 interleucina-101 IL-10i, 124, 125 acciones, 149 en la hipersens:bilidad por contacto, 345 en la leshmaniasis, 250 homoiogos de virus, 226 inhibition de TH1, 175 ratones defectivos, 136 interleucina-11 OL-11 i, 123, 144, 149 interleucina-12111--121, 124 acciones, 149 en la activation de las celulas T 142 en la dderenciacion de THt . 124, 125 en la hipersensibilidad de tipo IV, 348 en la respuesta inmunrtaria initial, 126, 127 en las infecciones parasitarias, 250 . 252 inhibition de TH1, 175 ratones defectivos, 136 interleucina-13IIL-13i, 125, 144 . 149 interleucina-15 I I L-151 . 142 interleucinas (ILI, 6, 122 evolution, 205 . 212 invertebrados, 199-206 celulas sanguineas . 199-201 citocinas, 205 como vectores de la enfermedad . 205, 243 cooperation celula-celula, 203-4 curacion de las heridas, 202 factores oe defensa humoral, 203 mecanismos de defensa dal huespee, 201-3 molecular de reconocimiento, 203-4 rechazo dei injerio . 205-6 irradiation Ilnfoide total IILT), 364 irritantes, hipersensibilidad por contacto, 342, 344 ISCOM, 270 isoinjertos, 353 isoprenalina, 309 isoopos, v inmunoglobulinas, ceases TAM, 145,146

Jenner, Edward, 263

L-selectina, 65, 66 lactantes hipogammaglobulinemo transitoria, 286 lactancia artificial. 314-5 vacunacon, 173 lactofernna, 9, 236 LAG-3, 125 Ick IIp561ck1 . 88, 145, 146 LCMV: v. virus de la coriomeningitis linfocitica lectina ligadora de manano IMBL : proteina ligadora de manano1,47 78, lectinas, 20, 234, 309 colageras, 47 typo C, 16, 129 Legionella pneurnophda, 237 Leishmania. 243, 244 mecanismos de evasion, 254-5, 256, 259 muerte por los macrofagos, 133, 247 respuestas depend,entes de anticuerpos, 253 vacunas, 269 Leishmania donovaru. 250 mecanismos de evasion, 254-5, 259 suscepiibilidad genetica. 182, 184, 244 Le,s~?mania major ~nmunidad mediada oor celulas, 128, 248 mecanismos de evas on, 255 oxido nitrico v, 247 respuestas Tn1r7H2, 232 . 249-50 suscepuoilidad genetica, 184 Leishrnanra mevcana, 256 eshnna-iiasis 241 , 250, 259

lepra, 349-50 v tarnbien Mycobacterium leprae LES, v lupus entematoso sistemico leucemia CALLA iCD101, 276 . 277 inducida por virus, 274, 275 linfocitica cronica, 98 leucocitos, 2, 3 adherencia, 10, 65, 66 circulantes, efectos de los esteroides, 293 en invertebrados, 199-201 en la infiamacion . 68-9 en trarsito, en ~os injer ",os, 357, 358 migration ; v. migracon celular molecular quimiotacticas, 67 v tambien tipos especihcos leucoencefalopatia multifocal orogres :va . 298 leucotrieno B4 ILTB4) . 67, 68 leucotrieno D4 ILTD4i, 68 leucotrienos, 309, 310 en el alma, 311 en los vertebrados inferiores, 211 levano, 145 LFA-1 (CID 11a/CD18), 54, 64. 65 celulas qua expresan, 24, 30 deficienoa, 55, 292 en la migration leucocitaria, 66 en la presentation de antigenos, 140-1 en la union a bacterial, 234 LFA-3, 141, 142, 143 1, Icadena invariablel,118 Iigando de CD40 ICD400 celulas T activadas, 22 en la activation de las celwas B, 143, 144 en la conmutac16n de isotipos . 151 mutacones genbLcas, 286 Iigando de Fas (FasL1, 131 . 184, 192 Iinfoblastos, 158 linfocinas activacion de los macrofagos, 236-7 en el rechazo dal ~njerto, 357-8, 359 linfocitopenia, inducda par esteroides, 293 Iinfocitos, 3-4, 13 activation, 20-3 marcadores, 16, 22-3 por mitogenos, 147 transduccion de sehales, 20-1, 145-7 B ; v celulas B de la lamina propia, 38, 39 desarrollo. 157-66 despiazamiento, 38-41 efectos inmunomoduladores, 174-6 en la inflamacion, 10 en las respuestas inmunitarias adaptativas, 2 en los granulomas, 347 evolution . 201 formation de rosetas, 390 . 391 granulosos grandes ILGU, 4 . 5, 14 . 129 mecanismos de la citotoxicidad, 130 infection viral, 227 . 228 infiltracion de los tumores, 277, 282 influencias neuroendocrinas, 178 inmunoterapia tumoral, 282 interaction con la matriz extracelular, 67 interacciones con los fagoctos, 2 . 3 intraepdeliales ILIEI . 17-18 . 38, 39 receptores de las celulas T, 85 lamina propia, 38, 39 marcadores de superficie, 15-16 metooos de aislamiento, 390-1 migration . 61 . 62 . 63, 66-7 metodos de detection, 392-4 mucosos, 38, 39 pequehos no granulosos, 14 proliferation, 8 rad,omarcados 392 reacciones de tipo II frente a, 320 . 325 reclutamiento, 62 separation en placa, 390-1, 392 separation por gradiente de densidad . 390, 391 T : v celulas T tipos morfologicos, 14 v tambien celulas B, celulas asesinas naturales INK) : celulas T Imtoma de c6lulas B . -298

linfotoxina ; v -actor de necrosis tumoral ~l lipofosfoglicano ILPGI, 256, 259 lipopolisacarido (LPS, endotoxina) . 145, 230, 231 activation de linfocitos, 20 activation dal complemento, 125 eo el shock, 57, 238, 239 en la autoinmunidad, 376 induccion de la liberation de citocinas, 126, 127 mecanismo dal efecto, 231 modelo de enfermedad por complejos inmunes, 337,338 reaction de Shwartzman . 239 ,posomas, 270 ,Isis mediada por complemento, 5, 44, 45, 51-2 mecanismos de evasion, 56 reactivos . 51 Iisozima, 236 en los invertebrados, 203 interacciones con los anticuerpos, 108, 109, 11, 115 Listeria monocytogenes, 183, 237 LMP2, 117, 118 L'v'P7, 1'7, 118 PAN1-1 lintegrina nr4(17l, 64, 66-7 LPS : v. Iipopolisacandos lupus entematoso sistemico (LES), 367-9, 376 autoanticuerpos, 325, 326, 368 erfermedad por complejos inmunes, 330, 337, 338, 339,372-3 equilibrio TH1/TH2, 125 modelo animal, v ratones NZB/NAA%, tratamiento . 378 luz ultravioleta WV) . 345 Lyt ICD5i, 18, 159 Ly49, 129 Lyb-2, 19 Lyb-5, 19 Ivn, 146,',47

Mac-1, v CR3 macrofagos . 3, 4, 9, 23 activation, 44, 133 aumentada por citocinas, 132-3 en las infecciones bacterianas. 236-7 en las infecciones parasitarias, 247 papel dei calcitriol, 134 regulation negativa/positiva, 134 alveolar, 23 control genetico de la actividad, 184 cuerpo tingiNe, 37 diferentiacion a celula epitelioide, 348 elimination de inmunocompiejos, 334, 335 en granulomas, 346, 347 348 en la hipersensioilidad de tipo II, 319 en la hipersensibilidad de tipo III, 330 en la hipersensibilidad de tipo IV, 343 344,345 en las infecciones bacterianas, 231-2, 235,236-7 en las infecciones fungicas, 240, 241 en las infecciones parasitarias, 246-7 en las infecciones virales, 224 en los ganghos linfaticos, 23, 140 esplenica, 23, 33 evasion de la destruction por, 255-6 heterogenedad, 133 humana frente a m,uina, 237 infiltration tumoral, 277 marcadores de superficie, 26 molecular quim,otacticas, 67 papal en la respuesta inmunitaria, 126, 127, 132-4 . 173 paces, 211 presentation de antigeno, 139, 140 receptores de IgE, 309 selection de timotitos, 191 seno marginal izona), 36, 140 serosa, 23 timico, 32 virus qua infectar . 227, 228 MaoCAM-1, 40, 64, 65 er la migracion de los linfocitos, 66-7 magaininas, 212 malnutrition infection y, 295 proteico-energetica CMPEI . 2956

Indice

maquinas de de "ivacior pumon-corazon, 57 rnastoctos. 5, 14, 29, 307 9 activacion, 309, 310 alergia ~, 29 . 302, 3079 dasificacior, 307-8 desarrollo, 155, 307 lesgranilacion, 29, 309, 310 en el alma/fieore del heno, 308-9, 312, 313 en la ~nflamacion, 68 en ias infecciones parasitarias, 248, 252, 307, 308 farmacos due tienen como diana, 308-9 marcadores funconales, 30 mediadores, 309, 310 mucosos IMMCi, 29.307-8 que conhenen qumasas ICTMCj, 308 que contienen triptasa IMCTI, 308 receptores Fc, 78, 308 tejido conjuntivo ICTMCI . 29, 307-8 matriz extracelular, 67 MCP-I, 67, 127 mecanismos efectores, 8-9 mediadores de la inflamacbn, 68, 309 . 310 mediadores de rvados del acdo araqudonico, 309, 310 medula osea, 31 celulas estromales, 163 celulas madre, 157 celulas tumorales . 282 desarrollo de las celulas B, 32-3, 162-5 desarrollo de Ids celulas presentadoras de antigeno. 26 evolution, 213, 216 trasplarte, 361 en la IDCG, 288 enfernledad inlerto contra huesped, 355, 356 megacarrocitos, 29-30, 156 mernbrana basal glomerular autoanticuerpos, 58, 326, 330, 372 deposito de inmt.nocomplejos, 337-8 memona inmunologica, 11, 152-3 meningococo ; v, Neissseria meningitrdrs menores, 354 metabolismo del fosfatidil rnositol, 21 a-metildopa, 325 medsergida, 337 metotrexato, 294 m astenia grave, 58, 327-8, 372, 377-8 m,coferotato mofetd, 294 mIcosrs respiratoria, 240, 241 subcutanea, 240 superficial, 240 microglia, 23, 141 p2-microglobuuna Ip2m1, 86 asociacion con CPH de clase I, 85, 86, 117, 118 en el desarrollo timico, 158 ger, 95 hornologos en invertebrados, 206 ratones defectivos, 237 microorganismos, 1, 2 activacion del complemento, 46, 48 . 231, 232 comensales, 229 defenses de Ins invertebrados, 202-3 evasion del ataque mediado por complemento, 56 .234 imitacon molecular, 228, 374-5 oduccon de la IOeracion de ctccnas/qumiocinas . 126-7 muerte mediada por complemento, 54-6 quimrotaxis mediada por, 125, 126 use del sistema de complemento . 56 v. tambren batter as, virus mieloblastos, 156 m,eloctos, 156, 157 mieloperoxidasa, 235 de`iciencia, 235, 236, 241 migration . celular, 61-7 control, 63 en la inflamacion, 10, 61-2, 66 mecanismos, 66-7 metooos oe detection, 392-4 pasos del proceso, 66 patrones, 62-3 qurmrotaxis, 10 M11C, 118 MIP-1a, 67, 124, 127

h1 P- IV . 67 rrtogeno de la hierba carmin, 20, 21 mitogenos, 20, 21, 147 mixedema, 367 n"ixomavirus, 226 rnodelo de Stablay, de Ids nefritis, 326 Ids molecule 1 de adherencia adresina de celulas mucosas, v MadC .AM-1 molecule de adherencia vascular 1 ; v VCAM-1 molecular CD iciuster o1 differentiatiom, 15, apendice II molecules de adherencia, 63-5 celulas turnorales, 278 en el desarrolio de Ids celulas T, 161 en el rechazo del injerto, 358 en la nugracon leucocitaria, 66-7 metodos de detection, 392-4 modulation de la expresion, 63, 64, 127 venues de endotelio alto, 63, 65 molecules de adherencia intercelular, v ICAM-1 ; ICAM-2 . ICAM-3 molecular de +a superficie celular, 15-16 er la presentation de antigenos a +as ce ulas T, 140-2 familias, 16 regulacon de la activacion oel complemento. 50, 51 union a los componentes del complemento, 47 molecules formadoras de poros, 51 molecular VLA, 67 monoblastos, 156-7 monocitopenra, inducida por esteroides, 293 monocitos, 3, 4, 23 acciones artibacterianas, 237 citotoxicdad, 130, 132 como celulas presentadoras de antigeno, 26, 139 desarrollo, 155, 156-7 en la hipersensibilidad de tipo IV, 345 en la oflamaci6n, 10 en Ids intecciones furl 241 migracon, 61 morfologia, 23 . 24 monocitos/macrofagos, 13-14, 23-4 heterogeneidad, 133 marcadores de superficie. 24, 25 presentation de antigeno, 139, 140, 141 v tambren macrofagos ; monocitos mucormicosrs, 241 mutation somatica Ihipermutacon'r, 94, 100, 101, 106 en la madurac16n por afinidad, 151-2 en Ids ovelas y ganado, 102 lugar de, 168 mutagenesis, oingica por sitio, 80-1 rMycobactertum boys, 184 Mycobactertum retrace?lutare, 184 Mycobacrenum tep"ae, 240 mecanismos de evasion, 237, 238 reaccrones granulomatosas, 134, 135, 346, 347, 349-50 Mycobacterium lepraernurium, 183, 184 lvfycobacterium tuberctdosis, 237, 240 derwado de prote :'na purificada iPPDI, 133 evasion de Ids resouestas -nmunitarias, 238 fenomeno de Koch, 239 prueba de tucerculina, 345, 346 reaccrones granulomatosas, 346, 348, 350-1 susceptibilidad genetica, 183 v tambren tuberculosis Mycoprasma pneumoniae. 325 NADPH oxidasa, 291-2 necrosis tisular, activacion del complemento por, 57-8 nefritis de Heymann. 326 en el sindronte de Goodpasture, 326 lupica, 183 mernbranosa, 58 suero nefrotoxico . 326 Neisseria gonorrhoeae, 265 . 290 Neisseria menrng~trds imeningococoi infecciones, 55 . 239, 240, 290 vacuras .26 neonatos; v recien nacrdos neumonra por Pneumocystis canna, 298, 299 neuraminidasa, 226

neutrofilia, inducda por esteroioes, 293 neutrofilos IPMN, pollmorfosl . 3, 13-14, 27-8 activacion mediada por complemento . 44 adherencia, 65 citotoxicdad, 130 desarrollo. 156, 157 en la enferrnedad nor " nmunocomplelos . 331 en la hipersersibilidad de typo II, 319, 320, 321 en Ids infecciones fungicas, 241 en Ids ~nfeccones parasitarias, 246, 247 fagoctosis por, 9 marcadores funconales, 30 migration, 10, 61, 62, 66 molecules quimiotacticas . 27, 67 morfologia, 27 reaccones de t po II a, 320, 325, 326 receptores Fc, 78 reclutamien:o. 62 neutropenia, 291 NF-A- 145 N1-KB, 145 Mpoostrongy,c:s brasdrensis, 248 . 249, 252, 307, 308 Nocarda aste"ordes, 237 nodulos linforneloioes, 215 Nramp, 184 nuevo receptor antigenico INARI . 209 nutrition, 295-6 nutrrentes deficrencas de especificos, 296 ingesta excesiva, 296 obesidad, 296 omento, prect.rsores de Ids celulas B, 162, 165 oncostatina M, 123 Oncnocerca volvulis . 244, 245, 252 efectos patologicos, 260 mecanismos de evasion, 257, 258 opsoninas, 5, 211 opsonizacon, 5 . 7 mecanismos de evasion microbiana, 56 mediada nor complemento, 44, 45, 55, 56, 231 papelde Crl,53 organos/tepdos linfoides, 31 en la malnutrition, 295 primarros Icentrales~, 13, 14, 31, 32-3 secundarios, 14, 31, 33-8 migracon de las celulas B haca, 165 ovalbumina, 116, 172 ovelas, 102 ox,do nitrico WOI . 133, 235 en el asma . 314 er Ids infecciones parasitarias, 246-7 oxido nitrico sirtasa, inducble IAOS! . 133, 235. 314 P-select na . 40, 65 P4 Ihemolinal . 203, 204, 206 PI50,95CID' Ic/CD18 ; CR4 24, 54, 64 de`iciencia, 55. 292 en la union con Ids bacterial, 234 p5d`y tick), 88, 145, 146 paludismo, 243, 244 anemia en, 260 celulas T-i I y TH2, 249 efectos patologicos, 259 . 260 inntunidad a, 246 mecanismos de evasion, 257, 258, 259 respues :as dependrentes de anticuerpos, 253, 254 respuestas dependrentes de las celulas T, 248-9 susceptibilrdad genetica, 182, 244 vacunas,260 .269 papilomavruss. 274, 275 paratopo . 108 oarticulas por combustion de diesel, 315 Pasteur, Louis, 263 patogenos extracelt. ares, 1, 2, 10, 11 mecanismos de evasion, 256-8 patogenos intracelulares, 1, 2 celulas Tn1, 249-50 evasion de la destruction, 255-6 muerte por los macrofagos, 132, 133 protozoos, 243, 249-50 reaccrones c4oioxicas mediadas por celulas, 128-9,237

respuestas dependientes de anticuerpos, 253 respuestas inmunitarias, 10, 11 . 171 patron . regiones, anticuerpo, 80, 107 pavimentacidn, 10 peces celulas INK, 211 celulas T y CPH, 207 . 208 complemento, 211-12 fagocitos, 211 inmunoglobulinas, 208-9. 210-11 tejidos linfomieloides, 213 penhgo, 3267 peptido relacionado con el gen de la caltitonina, 134 peptidos antigenico de las celulas T, 114-15 antigenico sintetico, 115 antimicrobianos, 212, 236 degradation proteina en, 115 extrahos, en el rechazo del inlerto, 356 opiaceos . 178, 205 residuos de anclale, 116, 117 vacunas, 266 perfonra . 9 . 51 130 permeanilidad capilar en la enfermedad por inmunocomplejos, 330, 331,336-7 en la inflamacion, 10, 61, 68 permeabilidad vascular : v- permeabilidad capilar peroxidasa, 24, 30 . 235 peel experimentos en aloinjertos . 187, 188. 361 prueba de parche, 311, 341 prueba de puncion, 310-11 reacciones alergicas, 310-11 reacciones de prueba, aspecto, 333 placas de Player, 31, 37, 38 plaquetas, 5, 14, 29-30 autoanticuerpos . 320, 325-6, 372 oesarrollo . 155, 156 destrno en el bazo, 34 en la enfermedad por inmunocomple ;os, 330-1 en la inflamacion, 68-9 en las infecciones parasitarias, 246, 248 sensibilizacion mediada por IgE, 309 Plasmodium berghei, 184 . 249, 254 Plasmodium chabaudi, 247 Plasmodiurn falc+partim, 254 . 269 haplotpos de HLA y, 182 mecanismos de evasion, 258, 259 v tambren paludismo Plasmodium malariae, 245 Plasn1odrum vrvax, 244, 249 Plasmodurn " yoelii, 184, 248, 249 poli-D aminoatidos . 145 polimorfonucleares neutrofilos IPMNi, v neutrofilos pollos obesos . 370-1, 374, 377 . 378 en cohete, 381 . 383 por contracorriente, 381, 383 priones, 221 . 222 productos de degradation de la fibrina/fibrinopeptidos, 68 productos react,vos del nitrogeno, 131, 235 . 246-7 promielocitos . 156, 157 promonocitos . 156-7 properd,na (P), 48 deficiencia, 290 prostaglandina E2 iPGE2i, 68 prostaglandinas . 309, 310 derivada de los parasaos, 259 en el asma . 311 en :a hipersensibildad por contacto, 344 proteasas parecidas a la erzima convertidora de interleucina lpIIL-1 p1 . 192 proteasomas, 117, 118 proteina 1-u inflamaioria macrofagica MP-1d1, 67, 124.127 proteina 1-0 nflamatoria macrofagica (MIP-1 p), 67 proteina A, estafilococica, 77, 81, 387 proteina oasica de mielina iMBPI, 370 adminitracion oral . 172, 176 tolerancia . 173, 189, 190 prote-na basica principal IMBPI . 29 . 247, 313 proteina C reactiva, 5 proteina cationica de los eosinofilos (ECP), 29

proteina cinasa C, 21 proteina cofactora de membrana (MCP ; CD46), 44, 47, 48,50 proteina G, 21 proteina G estafilococica. 77 proteina ).5, 103, 163, 164 proteina Iigadora de C4 IC4-bpl, 44, 47 proteina I,gadora de lipopolisacaridos ILBPI, 24 proteina I:gadora de LIPS (LBPl, 231 proteina precoz inmed ;ata pp89, 224 proteina S ivitronectinal . 51 proteina-1 gwmiotactica de los macrofagos (MCP-1), 67 .127 proteisas antibacterianas, mverteoraoos, 203 antigenica, respuesta inmunaaria, 171 de control del complemento ICCP1, 44 . 47 de fase aguda, 5 del shocK termico, 207, 239-40 bacterianas, 240, 369, 375 suero, 72 proteinasas de senra asociadas a las lectinas ligadoras de manano IMASP/MASP21, 47 proteoglucanos de -a superficie celular, 16 protozoos, 243-61 prueba de celulas formadoras oe placas, 391, 393 prueba de complejos inmunitarios basados en el polieiilenglicol IPEGI . 338-9 prueba de Coombs (antiglobulina), indirecta, 322, 324 orueba de estimulacion de Iinfocrtos, 347, 350, 392,394 orueba de heriaglut -iacion, 381-3, 384 orueba de inrwnoabsortion Iigada a enzimas (ELISAI, 386 prueba de Kveim, 347 prueba de Limulus, 231 Drueba de reaction cutanea a la tuberculina, 345, 346 Drueba de Stamper-Woodroofe, 392-4 orueba del azul de tetrazodo INBT} . 291 oruebas cruzadas, sangre, 322 pruebas cruzadas tisulares locale) . 361, 362 pulmon del cwdaoor de palomas, 329-30 pulmon del granjero, 329-30 ourpura trombocitopenica ~diopatico, 325-6, 372 inducida por farmacos, 325, 326 queratinocitos, 343, 344, 345 quimasa. 307-8 quimerismo en Xenopus, 217, 219 tolerancia y, 196 quimiocinas,67,122,123 en el reclutamiento de leucocitos, 127 en la inflamacion, 68 quimiocinesis, 67 gwmiotaxis, 67 en las infecciones bacterianas, 231, 234 fagocitos, 5, 125, 126 nugracion celular y, 10, 67 :: - I R , . ':=-2 . 98-9, 160 F ;',',I- ", 124 . 127 ta ;;airUna . 294-5, 362-3 rata BB, 377 rata Lewis, 178, 377 ratones beige mutantes, 222-3 ratones Biazzi, 184 ratones defectivos, 188 . 224, 248, 394 ratones defectivos Jak-1, 137 ratones defectivos Slat-1 . 136 ratones desnudos, 100, 355 ratones desnudos fatimicosl . 100, 355 ratones diabeticos no obesos (DN0i, 184 . 374, 376,377 ratones NZB/NZW, 377 enfermedad por complelos inmunitarios, 331, 332, 337, 338, 339, 373 TNFu y refritis lupica, 183 reaction de Arthus, 331, 332-3 reaction de Mitsuda, 347 reaction de precipillna, 381 rearcidn do Sanarei -Shv%artzmar, 239

reaction de Shwartzman, 239 reaction evanescente, 310 reaction mxta de Iinfocitos (MLR), 361 . 362 reacciones brongwales alergicas, 311-14 reacciones citotoxicas, 9 reacciones inlerto contra huesped . 355, 356 -eceptor de entroblastos (EbRI, 24 ~eceptor de las celulas pre-B, 163, 164 ,eceptor de las celulas T iTCRI, 4, 71, 83-5 up, 1617 .83 estructura, 84 v- tambren celulas T up ;re, 17 . 83 estructura, 85 v tambren celulas T v6 afinidad, selection de timocitos y. 189-90 antagonistas, 189-90 avidez y selection de timocitos, 190 cadena u, subrogada (pre-T), 160 cadena p, formas alternativas, 160 celulas i en desarrollo . 159, 160 diversidad generat16n, 105-6, 159-60 magnrtud, 106 en el rechazo del injerto, 355-6 evolution, 208 formas a, ternativas ourante el desarrollo, 160 frente a anticuerpos, 107 genes, 95, 104-6 genes a, 104, 105 genes 0, 104, 105 genes 7, 105 genes bi, 105-6 interaction con los superantigenos, 147 recornbrtacior genica, 105-6 reconocimiento de antigeno, 7, 8, 140 regulation a la bala, 192 sena es coestimulaooras, 146-7 tipos, 16-17 transduccion de senales, 145-7 receptor de los entrocitos de carnero IRECI, 24 receptor del 'actor de crecimiento de las celulas B de alto peso molecular, 165 de oajo peso molecular, 165 receptor del factor de necrosis tumoral !TNFRI en la Merle mediada por celulas Tr-, 131 evolution . 212 familia, 16, 122 ratones defectivos, 136 receptor inh,bidor oe a celula asesina p70, 129-30 receptores activadores de las celulas asesinas, 20, 130 receptores be fucosil-manosil (MFRI, 24 receptores tie a hormona estimulante del tiroides lTSHi, 371, 375 receptores de lirrpieza . 24 receptores oe N-acetil glucosamina, 24 receptores oe trans=errina (CD71), 22, 23, 159 receptores Fi-, 78-9 en la union fagocito-bacteria, 234 entrecruzamento inducido por IgG, 173, 174 receptores inhibidores de las celulas asesinas WR " , 20,129 rechazo agudo, 12, 353-65 acelerada ( ,~segurda tanda~ , l, 358, 359 . 361 agudo . 358, 359,360 antigenos de histocompatibilidad, 354 cron,co, 359, 360 en inveriebrados . 2056 hiperagudo, 323, 358 . 359 papel de las celulas T, 353, 355-8 prevention, 361-5 tempo, 358-60 v tambren trasplante recien nacidos recien nacidos, 243 . 244 anticuerpos artndiotipo, 177 celulas T . 162 enfermedad autoinmunitaria transitoria, 371-2 inductior de tolerancia, 187, 188, 197, 364 inmunoglobulinas, 72, 168 respuestas inmunitaras, 173 timectomia, 303, 355, 371 recombination somatica inmunoglobulinas, 94, 96-100 receptores de as celulas T, 105-6, 159-60 redundancia, otocinas, 123

Indice

region Fao . inmunoglobulinas 6, 74, 75 region Fc de as inmunoglobulinas, 6, 74 region variable IVl anticuerpo, 73, 74-5 eonst"uccion a partir de segmentos genicos, 96-100 mutation somatica, 100 teoria de los genes multiples de la linen germinal, 94 receptor de la celula T, 84-5 . 105 regiones bisagra, inmunoglobulinas . 73, 74, 76 regiones de conmutacion is), inmunoglobulinas . 102,103 regiones determinantes de la complementariedad IRDC) ; v regiones hipervariables regiones hipervariables (CDR) inmunoglobulina, 80, 95 en la union antigeno-anticuerpo, 107, 108, 109 en los anticuerpos de diseno, 111 generation de la diversidad, 98, 100 receptor de la celula T, 84, 85 regiones/dommpos constantes anticuerpo, 73, 74, 74-5, 102 receptor de las celulas T, 84, 85 respuesta de encapsulation, invertebrados, 203, 205 respuesta inmunitaria, 7-9 adaptativo; v. evasion inmunitaria adaptativa por las bacterias . 56, 234, 237, 238 por los parasitos, 253 . 254-9 por Ids virus, 225-6 control genetico, 178-84 innata, v inmunidad innata modulation neuroendocrina, 178 regulation, 171-85 reticulo endoplasmatico (RE) marcaje po" inmunoglobulinas, 104, 105 montaje de peptido-CPH de clase I, 117, 118 movimiento de CPH de clase II, 118 Rickettso tsutsugamushr; 183 rinitis, alergica, 308-9, 311, 315 nnon como brgano linfomielorde . 213, 216 deposito de inmunocomplejos, 337-8 trasplante incidencia de tumores despues de, 273 tiempo de supervivencia, 360, 361 tratamiento rnmunosupresor, 363, 364-5 sales de aluminio, 270 salmonella recombinante . 266 Salmonella typhimunum, 183, 184, 237 sarampion vacunas, 264 . 268 virus, 56, 225 sarco,dosis. 134, 346, 349, 351 prueba de Kveim, 347 sarcoma de Kaposi, 298. 299 Schistosorna haernatobrum, 244, 245 Schistosoma mansom, 184, 244, 245 efectos mmunopatologicos, 259 mecanismos de evasion, 254, 257, 258 . 259 muerte mediada por eosinofilos, 28, 29, 247, 248 respuestas efectoras, 246, 247, 248, 250-1, 254,255 secuencias cortas repetidas de consenso (SCR), 44 secuencias de activation basadas en la tirosina del inmunorreceptor, 145, 146 secuencias de senaies de recombination IRSSI, 98, 99 segmentos genicos D inmunoglobulina, 97-8, 99 receptor de la celula T, 105-6 segmentos genicos J anticuerpo, 96 . 97-8, 99-100 receptor de la celula T, 105-6 segmentos genicos b' anticuerpos, 96-100 receptor de las celulas T, 105-6 selection clonal, 8 teoria, 94, 187-8 selection negativa celulas B, 163, 194-5 celulas T . 160-1, 162, 188-91 control genetico, 180, 182 en Xenopus,217-19

fuera del timo, 161, 192 por superantigenos, 180-1 programacion temporal, 191 senales de muerte en, 191 teorias cuanti tat ivas/cualitanvas, 189-90 selection positiva celulas B, 163 celulas T, 160, 162, 188-91 control genOUco, 180, 181, 182 en Xenopus, 217-19 programacion temporal, 191 teoras cuantitativas/cualitativas, 189-90 selectinas, 16, 65 sensibilidad al berilro, 346 sensibilidad al zirconio, 346 serotonina (5-hidroxitriptamina ; 5HT), 30, 68 seudogenes, inmunoglobulinas, 98, 102 shock,233 anafilactico, 260 endotoxico, 57, 238, 239 SIDA, 296-9 toxoplasmosis en, 249, 298, 299 v. tambicn virus de la inmunodeficiencia humana smdrome antifosfolipido, 326, 372 sindrome de Cheoiak-Higashi, 222-3 sindrome de Eaton-Lambert, 327-8, 372 sindrome de Goodpasture, 58, 326 . 330, 372 sindrome de Guillain-Barre, 372 smdrome de inmunodeficiencia adgwnda, v SIDA sindrome de Wiskott-Aidrich (SWAT, 289-90 sindrome por hiper-IgM, 144, 286, 287 sistema de la coagulation, 68 sistema de la profenoloxidasa (Pp01, 202, 203, 204, 205 sistema de Ids grupos sanguineos ABO, 321-2 en el rechazo de inlertos, 323, 358 sistema de Ids grupos sanguineos MN, 321, 322 sistema de los grupos sanguineos Ss . 322 sistema del grupo sanguineo li, 322, 325 sistema inmunrtario desarrollo, 155-69 evolution, 199-220 celulas . 3-5, 13-30 mediadores solubles . 5-7 sistema linfatico, 34-6 sistema linfoide, 31-41 sistema linfoide mucoao, 37-8 sistema reticuloendotelial ISREI . 4, 23, 24 sistema Rhesus, 321, 322 sistemas de Ids grupos sanguineos, 321 Staphylococcus auteus . 240 Stat-, 124 suero antilinfocitico (SALT, 364 superantigenos, 147, 180-1, 239 superfamila ce las !nmunoglobulinas, 16, 64, 122 evolution . 206, 209 superfamilia del receptor trarsmembrana, multifuncronal, 16, 123 superfities propias frente a alenas, 50, 51 i, protegidas ,,, 48, 50 . 51 v tambren moleculas de la superfine celular superoxido dismutasa, 256 supervivencia del inlerto supres16n linfocitos autorreactivos, 188 por proximidad, 197 v tambren inmunosupresion sustarcia reactiva lenta de la anafilaxis ISRS-AI, 29 Syk, 146

tabaquismo, 315 tacrolimo IFK506), 294-5, 362-3 TAP1, 117, 118 -AP2 . 117, 118, 183 TCR v- receptor de las celulas T tecnica de inmunodifusion doble, 381, 382 tejido linfoide asociado a !as mucosas (TLAMI, 31, 33, 37-8 circulation de linfocitos en, 40, 41 celulas presentadoras de antigeno, 25 tejido linfoide asociado al brongwo (TLAB), 31, 33 tejido linfoide asociado al intestino ITLAI), 33 en los vertebrados infenores, 213, 216

tejidos linfomieloides, 212-16 anfibios, 214-16 peces, 213 temperatura, efectos en los ectotermos, 208, 211-12 teofilina, 308, 309 tetanos, 268 vacuna toxoide, 265, 268 tetrahidrobiopterina . 133, 325 TGFjf ; v factor de crecimiento transformante (i Thy-1, 18 tiburones, 101, 209, 210-11 tifus, 264-5 timectomia adulto, con trasplante de medula osea, 355, 357 en anfibios, 216-17, 218 nenonatal, 303, 355, 371 timid, 31, 32, 159 aislamiento de linfocitos del, 390 aplasia congenita . 36 . 289 celulas epiteiiales, 32, 160, 214 celulas epiteaales corticales, 32 celulas epiteiiales medulares, 32 celulas nodriza, 32, 158, 162 celulas presentadoras de antigeno, 25 desarrollo, 158 en anfibios, 216-19 desarrollo de las celulas T, 13, 32, 158-6t, 162 en la inmunodeficiencia combinada grave, 288 en la malnutrition, 295 evolution, 213, 214 involution relacionada con la edad, 32 organization lobulillar, 32 selection de las celulas T, v selection negativa, selection positiva toleranaa a to propio, desarrollo de, 161, 188-91 trasplante en anfibios, 217, 218 timocrtos, 32, 158 cortical, 158-9 en la selection negativa, 191 fase I Iprecoz), 159, 160 fase II (intermeda, comun), 159, 160 fase III (madura), 159, 160 meduar, 158-9 via de desarrollo, 158-61, 189 tiroglobulina, 174, 175, 176, 367, 370 tiroidrtis alergica experimental, 176, 370 tirosina cinasas . 145, 146 trosinasa, 278 tirotoxicosis, 371-2, 374, 376, 377 TLAM, v tejido linfoide asociado a las mucosas TNF, v factor de necrosis tumoral tolerancia, 187-98 celulas B ; v. celulas B Itolerancia) celulas T, v celulas T, toleranaa efectos de [as dosis de antigeno, 171-2 historia, 187-8 induction in vitro . 195-6 induction in vivo, 196-7 induccion neonatal, 187, 188, 197, 364 inducida oor parasitos, 258. 259 ontogenia en los anfibios, 219 potential terapeutico, 197 propias, 187, 188-195, 357, 367 celulas B, 193-5 induction experimental, 188 periferica (postimica), 161, 191-3 timica central, 161, 188-91 tipo de celuia oresentadora de antigeno, 173 via de administracior de los antigenos y, 172 . 197 toxina de Clostridium perfangens, 265 tox,na del sindrome del shock toxico, 147, 239 townas, bacterianas, 229, 3 2 inactivadas, 265 Toxocara cams, 258, 260 toxoides, 265 Toxopiasrna goodrr doxoplasmos,sl . 244, 249 en SIDA, 249 . 298, 299 mecanismos de evasion, 255-6 . 259 respuestas inmunita " ias, 247, 248, 249 transferenna adoptiva celulas T especificas para virus, 224 toleranaa del injerto. 364 transferenna placentaria, inmunoglobulinas . 77 transfusion de sangre, 12, 321-3 induction de la tolerancia al njerto, 364-5

pruebas crL.zaoas para, 322 reacciones . 320, 322-2 trasplante. 353-65 oarreras genelcas, 353-4 an invertebrados . 205-6 en la enfermedad autoinmunitaria, 378 nduccon de tolerancia, 197 pnrcpios, 355 v tambien rechazo de injerto tratamiento antiviral, 298-9 traiarniemo de hiposensibilizacibn, 316 Trichinera sprralrs, 243, 244 mecanismos de evasion, 257, 259 respuestas ~nmunitarias, 247, 254 susceptibilidad genetuca . 182, 183 Tnchuos tochura. 245, 252 tripanosomias s africana {enfermedad dal sueho), 244, 246,259, 260 v tambien Trypanosoma cruzr triptasa . 307-8, 310 Trypanosoma brute, efectos patoldgicos, 260 mecanismos de evasion, 254, 255 . 256-7, 258, 259 respuestas depend,entes de anticuerpos, 253, 254 respuestas depend antes de las celulas T, 249, 250 Trypanosoma cr uz", 184, 248, 249 vacunacior 269-70 variacior ant genica, 2567 Trypanosoma rhodesrens, 246 tuberculosis, 350-1 formation de granulomas, 134, 350-1 production de calcitriol, 134 vacunacion, 264, 269 v tambien Mycobacterium tuberculosis tumor, 273-83 antigenos, 274-6 de origen viral, 274-5 detectados por anticuerpos, 276 detectados por las celulas rnmunitarias, 274-6 especifica, 275-6 presentation, 278, 279 como injerto tisular, 273 inducda por virus, 274, 275 mfiltrados linfoides . 277 inmunodiagnbstico, 279-80 inmunoterap,a, 280-3 mecanismos de evasion, 278 supresion inmunitara por, 174 vacunas, 271-2 . 280-1 vigilanca inmunologica, 273-4 tunicados, 199, 200, 201 Tyk2 .124

V V

uridades formadoras de colonias IIJFC) . 156 unicaria, 302, 309 racuna(sl actuates, 268-70 antifertdidad, 272 antigenos empleados en, 263-7 antiioiotipo, 2667 basadas en toxinas. 263, 265 cancer, 271-2, 280-1 de ADN, 266 de Haemocnlus infaenzae B, 265 . 268 de la nepatitis A, 265 269 pe a ge'ctidi'is, 264, 268

de la paste, 264-5 de la poliomielitis, 264, 265, 267, 268 de la rabia, 264, 265 . 269 de la rubeola, 264, 268 dal virus varicela-zoster, 269 eficacia . 267-8 fragmentos suocelulares/antigenos de superficie, 263 . 265-6 infecciores parasitarias, 260, 269-70 muertas, 263, 264-5, 267-8 para neumococo (Streptococcus pneumornael, 265 .269 para Streptococcus pneumoniae i-ieumococol, 265,269 pertussis, 265. 268 recombinantes, 263, 266 seguridad, 268 tifoidea, 264 265, 269 vivas, 263, 264, 267-8 atenuadas, 263, 264, 268 naturales, 263 . 264 vacuracior,11,173,263-72 adyuvantes, 270-1 coste, 268 vainas iinfoides penarteriolares . 33 . 34 van actin antigenica . 225. 226, 256-7 vasos iinfaticos eferentes . 34, 35, 39 vasos sanguineos deoosco de inmunocomplejos, 330 . 331, 336-7 en el rechazo dal injerto . 360 VCAM-1, 40, 64 en la hipersensibilidad de tipo fv, 344, 345 en la migracidn leucocrtaria . 66, 67 vectores, enfermedad, 205, 243 venulas migracibn leucoctaria, 63 venulas de endotelio alto IVEA), 32 . 38-40, 62 imporancia en el desplazamiento de h "rocrtos . 40 migracibn de Ids linfoctos a traves de, 63, 66-7 molecular de adherencia, 63, 65 vertebrados, 200, 20612 celulas B; nmunoglobulinas, 206-11 celulas T, I 206, 208 inmunioad no adaptativa, 211-12 tejidos linfomieloides en inferiores. 212-16 via de las cirasas MAP, 124 via de las cnasas Ras!MAP, 124 Viboo cholerae, v colera vigilancia inmunitaria, 273-4 VIH, v virus de la inmunodet,cienca humana viroides, 221 virus, 221-8 activation de complemento, 46 defersas contra . 10, 11, 128-9 222-5 efectos inmunopatologicos, 226-8 evasion de la respires "-a inmunitaria, 56 . 225-6 latencia. 222 modos de irfeccon, 221-2 neutralization por anticuerposlcomplemento, 223 oncogencos, inmunizacon contra, 281 persistenca, 222 proteinas, procesamiento y presentac6n . 224 due causan tumores. 274, 275 receptores de las celulas huesped, 221, 222 respuestas inmunrtar as mnatas, 222-3 respuestas mediadas por celulas B . 223-4 respuestas mediadas por ce ulas T, 224-5 vigilanca inmurolog,ca . 273-4 y autoirmunidad, 228

virus ADN dal pohoma pecueno, 273-4 virus de Epstein-Bar (VES . 273 desarrollo tumoral y, 274, 275 en la autoirmunidad, 376 estrateg as de evasion, 226 irmortalizacion de las celulas B humanas . 389 inmunoterapia tumoral y, 282 receptores, 53-4, 56 virus de la conomeningit , s Itnfocitica, 179 efectos rnmunopatologicos, 226-7 tolerancia, 172, 181, 182, 187 virus oe is nepatais murina . 228 virus de ,a ~nmunodeficiencia humana IVIHI, 225, 296 infeccon, 296-9 disfuncion inmunitaria y, 296-7 historia natural, 297-8 tratamientos antwirales, 298-9 infeccon de Iinfocaoslmacrofagos, 227, 228, 296-7 virus de la leucemia murina IMul-Vl, 275 virus de la leucemia T humana (HTLV-1), 274, 275 virus de Theiler, 228 virus dal dengue, 56, 227, 270 virus dal herpes humano 8 IHHV8), 274, 298 virus dal oeste dal No, 56 virus dal papiloma humano, 274, 275 virus dal tumor mamario munno IMMTVI, 181 virus fibromatosis shope, 226 virus herpes simple (VHS), 56, 224, 225-6 virus JC, 298 virus SV40 . 274, 275 virus vacuna, 226, 263, 266 vitam,na B12 . 372 vitamina D3, 134, 237, 351 vitronectina Iproteina Si, 51 VLA-1,64 VLA-2, 64, 67 VLA-3 . 64, 67 VLA-4, 24, 30, 64 celulas mieloides en desarrollo, 156 en la migracibn leucocitaria, 66, 67 VLA-5, 64, 67 VLA-6, 64, 67 VoreB . 103, 163, 164

W X

04ichereriabancrofti, 245, 259 xenoinjertos, 353-4 Xenopus celulas crtotoxicas, 211 ctocnas, 212 complemento, 211, 212 CPH, 206-8 inmunoglobulinas. 209-10 mooelos para el estudio de la inmunioad, 216-20 tejidos In'ornieloides, 214-16

Y Z

Y'ersinia enterocolitica . 375 Yersima pseudotuberculosis, 234

ZAP-70. 145, 146 zidovudira IAZT1 . 298 , 9 zona dal manto. 36 zona marginal, 33, 34

Contenido
Prologo y guia de utilization Agradecimientos Colaboradores vm

1 . Introduccion al sistema inmunitario

Dr. David Male y profesor Ivan Roitt Inmunidad adaptativa e innata Celulas del sistema inmunitario Mediadores solubles de la inmunidad Antigenos Respuestas inmunitarias Inflamacion Defensas frente a agentes patogenos extracelulares e intracelulares Vacunacion Inmunopatologia 1 3 5 7 7 10 10 11 11

5 . Migration celular e inflamacion

Dr. David Male Patrones de migracion celular Moleculas de adherencia intercelular Mecanismos de migracion celular Inflamacion 62 63 66 68

6. Anticuerpos y sus receptores

Profesor Malcolm Turner Inmunoglobulinas : una familia de proteinas Estructura de los anticuerpos Las diferencias de secuencia entre las moleculas de anticuerpos pueden ser isotipicas, alotipicas o idiotipicas Funciones efectoras de los anticuerpos Receptores de anticuerpos Estructura y funcion de los anticuerpos 71 73 77 77 78 79

2 . Celulas que intervienen en la respuesta inmunitaria

Profesor Peter Lydyard y profesor Carlo Grossi Linfocitos Fagocitos mononucleares Celulas presentadoras de antigenos Polimorfonucleares, mastocitos y plaquetas 14 23 25 26

3 . El sistema linfoide
Profesor Peter Lydyard y profesor Carlo Grossi Los tejidos linfoides se pueden clasificar en primarios y secundarios brganos linfoides primarios brganos y tejidos linfoides secundarios Circulation de los linfocitos 31 32 33 38

7 . Receptores de las celulas T y moleculas del CPH

Dr. Michael Owen Receptores de las celulas T Antigenos del complejo principal de histocompatibilidad (CPH) Organization genica del CPH 83 85 89

4. El complemento
Profesor Mark Walport Introduccion Activation del complemento Receptores del complemento Efectos biologicos del complemento 43 45 52 54

8 . La generation de la diversidad
Profesor Frank Hay y Dr. Olwyn Westwood Teorias sobre la sintesis de anticuerpos Variabilidad de las inmunoglobulinas Recombination de los genes de inmunoglobulinas Mutation somatica Diversidad de las inmunoglobulinas de otros vertebrados Genes de la region constante de las cadenas pesadas Regulation de la sintesis de inmunoglobulinas Genes del receptor de antigeno de las celulas T Magnitud de la diversidad 93 94 96 100 101 102 103 104 106

9. Reconocimiento de antigenos
Dr. Michael Owen y profesor Michael Steward Union antigeno-anticuerpo Especificidad y afinidad de los anticuerpos Estructura de los antigenos Reconocimiento del antigeno por parte de las celulas T Procesamiento y presentation del antigeno Estructura y ensamblaje de los complejos molecula CPH peptido 107 110 113 114 114

13. Regulacion de las respuestas inmunitarias

Dr. Anne Cooke Regulacion por el antigeno Celulas presentadoras de antigenos Regulacion por el anticuerpo Regulacion por linfocitos Modulacion idiotipica de las respuestas Modulacion neuroendocrina de las respuestas inmunitarias Control genetico de las respuestas inmunitarias 171 172 173 174 176 178 178

10 . Reacciones inmunitarias mediadas por celulas

Profesor Graham Rook y Dr. Frances Balkwill Citocinas y sus receptores Mecanismos de defensa no dependientes de celulas T Respuestas mediadas por celulas y dependientes de celulas T Citotoxicidad mediada por celulas El papel de los macrofagos en las respuestas inmunitarias Formation de granulomas Inmunopatologia La red de citocinas 125 127 128 132 134 135 135

14. Tolerancia inmunitaria

Profesor D. C. Wraith Introduction Induccion experimental de la tolerancia Tolerancia timica central frente a los autoantigenos Tolerancia postimica o periferica frente a los autoantigenos Tolerancia de las celulas B frente a los autoantigenos Tolerancia inducida artificialmente in vitro Induccion artificial de la tolerancia in vivo Posibles aplicaciones terapeuticas de la tolerancia 187 188 188 193 195 196 197

11 . Colaboracion celular en la respuesta de anticuerpos

Profesor Marc Feldmann Presentation del antigeno a las celulas T Interacciones entre celulas B y T Fase de la comunicacion intracelular durante la activation de los linfocitos Acciones de las citocinas sobre las celulas B y T Respuestas de anticuerpos in vivo 139 142 145 147 150

15 . Evolution de la inmunidad
Dr. John Horton y profesor Norman Ratcliffe Inmunidad en los invertebrados Inmunidad en los vertebrados Tejidos linfomieloides de los vertebrados inferiores Modelos de anfibios para el estudio de la ontogenia inmunitaria 199 206 212 216

12 . Desarrollo del sistema inmunitario

Profesor Peter Lydyard y profesor Carlo Grossi Celulas mieloides El sistema del complemento Celulas linfoides Diversidad de la especificidad de los anticuerpos Diversidad de las clases de anticuerpos Desarrollo de las celulas B de memoria 156 157 157 166 166 168

16. Inmunidad frente a los virus

ProfesorTony Nash Tipos de infection virica Respuestas inmunitarias innatas frente a los virus Intervention de las celulas B y T en la defensa del huesped Estrategias para eludir las defensas inmunitarias Inmunopatologia 221 222 223 225 226

17 .Inmunidad frente a las bacterias y los hongos

Profesor Graham Rook Inmunidad frente a las bacterias Inmunidad frente a los hongos 229 240

21 .Inmunodeficiencia primaria
ProfesorFred Rosen Anomalias de las celulas B Anomalias de las celulas T Defectos de las proteinas del complemento Defectos de los fagocitos 285 286 290 291

18.Inmunidad frente a los protozoos y los helmintos

Dr. Janice Taverne y Dr. Jan E. Bradley Caracteristicas de las infecciones parasitarias Mecanismos efectores Las celulas T son esenciales para desarrollar la inmunidad Mecanismos de evasion Consecuencias inmunopatologicas de las infecciones parasitarias Vacunas 243 246 248 254 259 260

22 .Inmunodeficiencia secundaria
Profesor Ian Weller, Dr. C. M. Lockwood y Dr. R. K. Chandra Inmunodeficiencia producida por farmacos Respuestas inmunitarias y nutricion SIDA 293 295 296

23 . Hipersensibilidad de tipo I
Profesor Jonathan Brostoff y Dr. Tony Hall Hipersensibilidad inmediata de tipo I Inmunoglobulina E Genetica de las respuestas alergicas humanas Los genes que controlan las respuestas especificas frente a los alergenos estan ligados al HLA Mastocitos Reacciones cutaneas Reacciones bronquiales Factores que influyen en el desarrollo de la alergia El concepto de alergia por desbordamiento Hiposensibilizacion Efectos beneficiosos de la IgE 302 302 304 306 307 310 311 314 315 316 317

19.Vacunacion
Profesor John Playfair Antigenos utilizados como vacunas Eficacia de las vacunas Seguridad de las vacunas Coste de la vacunacion Vacunas de las que se dispone en la actualidad Adyuvantes Inmunizacion pasiva Inmunoterapia inespecifica Vacunacion frente al cancer Vacunas anticonceptivas 263 267 268 268 268 270 271 271 271 272

20. Inmunologlia tumoral

Profesor Peter Beverley El tumor como tejido injertado Vigilancia inmunitaria Antigenos asociados a los tumores que detectan las celulas inmunitarias Antigenos asociados a los tumores que detectan los anticuerpos Respuestas inmunitarias humanas frente a los tumores y mecanismos de evasion Inmunodiagnostico Inmunoterapia 273 273 274 276 277 279 280

24. Hipersensibilidad de tipo II

Dr. David Male Mecanismos patogenicos Reacciones frente a las celulas sanguineas y las plaquetas Reacciones frente a antigenos tisulares 319 320 326

25. Hipersensibilidad de tipo III

Profesor Frank Hay y Dr. Olwyn Westwood Tipos de enfermedades por inmunocomplejos Mecanismos de las reacciones de hipersensibilidad de tipo III Modelos experimentales de enfermedades mediadas por inmunocomplejos Persistencia de los inmunocomplejos Deposito de inmunocomplejos en los tejidos Detection de los inmunocomplejos 329 330 331 333 336 338

28. Autoinmunidad y enfermedades autoinmunitarias

ProfesorIvan Roitt La relation entre autoinmunidad y enfermedad Tipos de enfermedades autoinmunitarias Factores geneticos Patogenesis Etiologia Valor diagnostico y pronostico de los autoanticuerpos Tratamiento 367 367 369 370 373 377 377

26 . Hipersensibilidad de tipo IV
Profesor Ross Barnetson, Dr. David Gawkrodger y profesor ayudante Warwick Britton Hipersensibilidad por contacto Hipersensibilidad de tipo tuberculinico Hipersensibilidad granulomatosa Reacciones celulares en la hipersensibilidad de tipo IV Enfermedades que cursan con hipersensibilidad granulomatosa de tipo IV 341 345 346 347 348

29 . Tecnicas inmunologicas
Profesor Michael Steward y Dr. David Male Interacciones antigeno-anticuerpo Purification de anticuerpos Tecnicas de determination del complemento Separation de poblaciones de linfocitos Pruebas de celulas efectoras Modification genica dirigida y animales transgenicos Apendices I Especificidades HLA II Marcadores CD III Las principales citocinas Glosario 381 387 390 390 391 394 397 398 402 404 411

27 . Trasplante y rechazo
Profesor Ian Hutchinson Obstaculos frente a los trasplantes Antigenos de histocompatibilidad Las leyes del trasplante Papel que desempenan los linfocitos T en el rechazo Curso temporal del rechazo Prevention de los rechazos 353 354 355 355 358 361

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