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Universidade Estadual de Ponta Grossa Engenharia de Alimentos Qumica Geral e Inorgnica/Experimental Prof Juliana Swiech

FUNDAMENTOS DE FOTOMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO

Ana Maria Overcenko Bruna Molini Fernanda Mir Jhonatan Soultovski de Lima Patricia Pavezi Sabrina Corral G. de Camargo

Ponta Grossa 2013/Abril

OBJETIVO Dosear espcies qumicas mediante a absoro de luz. Caracterizar o comprimento de onda (l) onde ocorre absoro mxima. Construir uma curva padro para os reagentes utilizados.

INTRODUO A espectrofotometria pode ser definida como toda tcnica analtica que usa a luz para medir as concentraes das solues, atravs da interao da luz com a matria. A palavra espectro de origem grega foi empregada para nomear raios luminosos em virtude de na antiguidade as pessoas sepultarem seus mortos em covas rasas, e o simples fato de algum desavisado pisar em cima, de uma dessas sepulturas fazia com que o gs metano fosse expelido, visto que corpos em decomposio liberam diversos gases, entre eles o metano, que apresenta uma propriedade de auto inflamar-se apresentando um aspecto luminoso intenso. Quando algum era surpreendido por uma bola gasosa dessa ficava assustado e dizia estar sendo assustado por um fantasma que em grego espectro. A espectrofotometria o mtodo de anlises ptico mais usado nas investigaes biolgicas e fisico-qumicas. O espectrofotmetro um instrumento que permite comparar a radiao absorvida ou transmitida por uma soluo que contm uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substncia. Todas as substncias podem absorver energia radiante, mesmo o vidro que parece completamente transparente absorve comprimentos de ondas que pertencem ao espectro visvel. A gua absorve fortemente na regio do infravermelho. A absoro das radiaes ultravioletas, visveis e infravermelhas dependem das estruturas das molculas, e caracterstica para cada substncia qumica. Quando a luz atravessa uma substncia, parte da energia absorvida (absorbncia): a energia radiante no pode produzir nenhum efeito sem ser absorvida. A cor das substncias se deve a absoro (transmitncia) de certos comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas no absorvidos. A fotometria o ramo da ptica que se preocupa em medir a luz, em termos de como seu brilho percebido pelo olho humano. Aquela se diferencia da radiometria, que a cincia que mede a luz em termos de sua potncia absoluta, por descrever a potncia radiante associada a um dado comprimento de onda usando a funo de luminosidade modeladora da sensibilidade do olho humano ao brilho. A fotometria tambm utilizada na astronomia, na observao de estrelas, pela percepo da diminuio da luz por elas emitida. Atravs de estudos e clculos, possvel descobrir novos planetas e saber informaes como rotao, translao, distncia da estrela e satlites. O termo espectro foi utilizado inicialmente por Newton, quando este descobriu que a luz branca, ao atravessar um prisma, dividida em vrias cores. Atualmente, sabe-se que o espectro visvel apenas uma pequena parte do espectro eletromagntico. A luz , portanto, definida como uma forma de energia eletromagntica, formada por ondas que apresentam comprimentos diferentes. O comprimento de onda () medido em nm onde 1,0 nm equivale a 10-9 m.

Figura 1: Regies de espectro em relao ao comprimento de onda.

Lei de Lambert-Beer A fora vital da espectrofotometria est fundamentada na lei de Lambert Beer, que estabelece: A absorbncia diretamente proporcional a concentrao da soluo de amostra.

Figura 2: Exemplo da Lei de Lambert-Beer

De um ponto de vista prtico, o aspecto mais importante do clculo quntico a determinao de quanta luz absorvida pela amostra. Isto descrito pela lei de Beer- Lambert, que d a relao entre a intensidade da luz incidindo na soluo (I0), e a intensidade da luz saindo da soluo (I). Log (I0/ I) =A=cl A= absorbncia = absorvidade molecular ou coeficiente de extino c= concentrao do material absorvedor l= espessura da amostra da amostra atravs da qual a luz passa.

Os componentes principais de um espectrofotmetro so apresentados e suas respectivas funes: Fonte de Luz: composta por uma lmpada de deutrio e uma lmpada de tungstnio (semelhante lmpada de carro). A lmpada de deutrio emite radiao UV e a de tungstnio emite luz visvel. Monocromador: alguns espectrofotmetros ainda possuem um prisma como monocromador, porm os mais modernos possuem dispositivos eletrnicos que transformam a luz incidida em vrios comprimentos de onda, em um s comprimento, ou seja, a luz monocromtica. Cubeta: o recipiente propcio para conter a amostra que ser utilizada na anlise, as cubetas podem ser de quartzo, vidro e acrlico, porm recomenda-se que seja usada uma cubeta de quartzo por que o vidro e o plstico absorvem UV e causa a reflexo da luz visvel.

Figura 3: Cubetas

Detector: o detector um dispositivo que detecta a frao de luz que passou pela amostra e transfere para o visor e para o computador acoplado ao aparelho.

MATERIAIS UTILIZADOS Espectrofotmetro com cubetas. Estante com tubos de ensaio. Soluo de azul de metileno. Verde de bromogrenol. Alaranjado de metila. Azul de bromofenol. Amarelo de alizarina. Vermelho de metila.

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Ligamos o aparelho, selecionamos o comprimento de onda adequado, da primeira vez ajustamos para 450nm. Ajustamos o zero da trasmitncia. Introduzimos a cubeta com gua e as cubetas com as respectivas solues dos reagentes. Obtivemos o espectro de absoro. E repetimos o processo para os seguintes comprimentos de onda 500, 550, 600, 650 e 700 nm.

RESULTADOS E DISCUSSO Efetuamos todas as leituras de absorbncia para cada reagente. Aps isso convertemos a transmitncia em absorbncia atravs de Ab= 2 log T. Corante 1 - Azul de Metileno. (nm) 450 500 550 600 650 700 Corante 2 Verde de Bromogresol (nm) 450 500 550 600 650 700 Corante 3 Alaranjado de Metila (nm) 450 500 550 600 650 700 Corante 4 Azul de Bromofenol (nm) 450 500 550 600 650 700 Leitura T (%) 63,6 77,8 69,4 64,4 90,3 90,2 Absorbncia 0,196 0,109 0,159 0,19 0,044 0,045 Leitura T (%) 7,48 24,1 91,6 96,6 99,0 98,6 Absorbncia 1,126 0,618 0,038 0,015 0,004 0,006 Leitura T (%) 5,96 29,0 51,8 31,6 69,1 97,7 Absorbncia 1,224 0,537 0,285 0,5 0,16 0,01 Leitura T (%) 94,4 90,7 79,1 38,9 16,3 91,5 Absorbncia 0,025 0,042 0,102 0,410 0,787 0,038

Corante 5 Amarelo de Alizarina (nm) 450 500 550 600 650 700 Corante 6 Vermelho de Metila (nm) 450 500 550 600 650 700 Leitura T (%) 78,8 84,5 85,5 91,9 93,9 93,6 Absorbncia 0,103 0,073 0,068 0,037 0,027 0,028 Leitura T (%) 55,6 74,1 77,2 81,0 86,1 86,9 Absorbncia 0,25 0,130 0,112 0,09 0,064 0,06

CONCLUSES Com o experimento conseguimos abordar a espectrofotometria para determinar o comprimento de onda para algumas amostras. E aprendemos como funciona um espectrofotmetro. Determinamos tambm a curva de absoro para os reagentes utilizados. Ento conclumos que os objetivos do experimento foram alcanados com xito.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS SANTOS, Luiz R. Espectrofotometria. [2011]. Disponvel <http://www.infoescola.com/quimica/espectrofotometria/> Acesso em: 18, abril, 2013. em

SOUSA, Rafael. Espectrofotometria no UV-Vis. [2011]. Disponvel em <http://www.ufjf.br/baccan/files/2011/07/Aula-10-ESPECTROFOTOMETRIA-_2S-2011-PARTE1-Modo-de-Compatibilidade.pdf> Acesso em: 18, abril, 2013.

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