ngel E.

Caballero Torres

La Habana, 2008

Catalogacin Editorial Ciencias Mdicas

Caballero Torres, ngel E. Temas de Higiene de los Alimentos / ngel E. Caballero Torres [et al]. La Habana: Editorial Ciencias Mdicas, 2008. [x] 382 p. : il., tab.

Incluye bibliografa al final de los captulos QW 85 HIGIENE ALIMENTARIA

Edicin: Dra. Nancy Cheping Snchez Diseo y realizacin: Ac. Luciano O. Snchez Nez Emplane: Xiomara Segura Surez

ngel E. Caballero Torres, 2008 Sobre la presente edicin: Editorial Ciencias Mdicas, 2008

ISBN 978-959-212-363-2

Centro Nacional de Informacin de Ciencias Mdicas Editorial Ciencias Mdicas Calle 23 No.177 entre N y O Edificio Soto El Vedado, Ciudad de La Habana, CP 10400, Cuba ecimed@infomed.sld.cu Telfonos: 838 3375 832 5338

Autor Principal
Dr. ngel Eladio Caballero Torres. Doctor en Ciencias Mdicas. Especialista en Higiene de los Alimentos. Investigador Auxiliar. Doctor en Medicina Veterinaria.

Autores
Lic. Virginia Leyva Castillo. Especialista en Microbiologa de los Alimentos. Investigadora Auxiliar. Licenciada en Microbiologa. Lic. Tamara Kely Martino Zagovalov. Especialista en Microbiologa. Investigadora Agregada. Licenciada en Microbiologa. Dra. Yamila Puig Pea. Especialista de I Grado en Microbiologa. Doctora en Medicina. Lic. Eyda Otero Fernndez-Trebejo. Mster en Nutricin. Investigadora Agregada. Licenciada en Bioqumica. Lic. Miguel Oscar Garca Roch. Investigador Auxiliar. Especialista en Qumica y Toxicologa de los Alimentos. Licenciado en Ciencia de los Alimentos. Lic. Grettel Garca Daz. Mster en Ciencias. Licenciada en Qumica. Lic. Iraida Rub Villazn. Especialista en Aditivos y Contaminantes Metlicos. Licenciada en Alimentos. Dra. Consuelo Macas Matos. Doctora en Ciencias Qumicas. Investigadora Titular. Lic. Daymara Mosquera. Mster en Nutricin. Licenciada en Alimentos. Lic. Armando Bcquer Lombard. Investigador Auxiliar. Licenciado en Alimentos. Dra. Tamara Daz Lorenzo. Mster en Nutricin. Especialista de I Grado en Pediatra. Especialista de II Grado en Nutricin e Higiene de los Alimentos. Investigadora Agregada. Doctora en Medicina. Dra. Marta Cardona Glvez. Mster en Nutricin. Especialista de I Grado en Medicina General Integral. Doctora en Medicina. Lic. Pedro Morejn. Mster en Ciencias Biolgicas. Licenciado en Biologa.

Colaboradores
Lic. Yariela Snchez Azahares. Licenciada en Alimentos. Lic. Jorge Luis Rodrguez Daz. Licenciado en Alimentos.

Prlogo
En el texto Temas de Higiene de los Alimentos, los profesores de la asignatura homnima exponen los conceptos, definiciones y principales explicaciones de esta ciencia, que permite garantizar la proteccin sanitaria de los alimentos. Los temas de microbiologa, qumica, toxicologa e inocuidad de los alimentos constituyen este material, que ser consulta obligada para los estudiantes del perfil de salida Nutricin y Diettica de la carrera Tecnologa de la Salud. Los contaminantes qumicos y biolgicos, explicados junto con los temas que permiten su prevencin, sern tiles adems para estudiantes de otras carreras afines, e incluso, profesionales que necesiten consultar estas materias, con el propsito de elevar la calidad tcnica de su desempeo laboral. Los contenidos de estos temas facilitarn adems la informacin a todos los que se interesen por el apasionante campo de las actividades que facilitan la prevencin y control de las enfermedades trasmitidas por los alimentos. En cada uno de los temas, desarrollados por los profesores que los imparten, se expresa de forma actualizada los conocimientos cientficotcnicos que permiten comprender sus fundamentos, as como los procedimientos para sus aplicaciones prcticas. El texto facilita la formacin de recursos humanos que incluyen en sus actividades laborales el noble empeo de contribuir a la alimentacin inocua y saludable de la poblacin. Los aos durante los cuales sern ledas estas lneas, hasta reclamar sus reimpresiones en versiones an superiores, expresarn los principales reconocimientos al esfuerzo de los autores, que es una de las razones que tienen para ser trabajadores del Instituto de Nutricin e Higiene de los Alimentos.

Dr. Jorge Ren Daz Fernndez Director del INHA

Contenido Seccin I. Microbiologa de los alimentos /1

Captulo 1. Aspectos generales de la microbiologa /3 Breve historia de la microbiologa de los alimentos /3 Mtodos pticos en el estudio microbiolgico /5 Posicin que ocupan los microorganismos en el mundo viviente /5 Aspectos generales sobre el proceso infeccioso /15 Agentes antimicrobianos y desinfectantes /18 Bibliografa /19 Captulo 2. Control microbiolgico de los alimentos /20 Microbiologa de los alimentos y su relacin con otras ramas /21 Incidencia y tipos de microorganismos en los alimentos /22 Bibliografa /28 Captulo 3. Principales bacterias patgenas en alimentos /29 Clasificacin de las enfermedades alimentarias /29 Caractersticas generales de las bacterias patgenas que con mayor frecuencia se aislan de los alimentos /30 Bibliografa /41 Captulo 4. Factores que influyen en el crecimiento y supervivencia de los microorganismos /43 Crecimiento microbiano /43 Bibliografa /54 Captulo 5. Parsitos en alimentos /55 Relacin husped-parsito /55 Forma de trasmisin de los parsitos en los alimentos /59 Epidemiologa /59 Diagnstico /59 Bibliografa /71 Captulo 6. Virus en alimentos /72 Virus de la hepatitis A /75 Virus de la hepatitis E /76 Rotavirus /77 Adenovirus /77 Calicivirus /77

Astrovirus /78 Otros enterovirus: virus Echo y virus de la Polio /79 Bibliografa /79

Seccin II. Qumica y toxicologa de los alimentos /81

Captulo 7. Introduccin a la toxicologa alimentaria /83 Captulo 8. Txicos naturales que forman parte del alimento /86 Factores antivitamnicos /86 Inhibidores de proteasas /87 Taninos /88 cido ftico (cido mioinositol 1,2,3,4,5,6 hexafosfato) /89 Oxalatos /89 Hemoaglutininas /89 Compuestos productores de favismo /90 Glucsidos cianognicos /91 Saponinas /94 Alcaloides (solanina y chaconina) /94 Xantinas /95 Alcoholes /96 Bibliografa /98 Captulo 9. Micotoxinas en alimentos /100 Toxinas del ergot /102 Aflatoxinas /103 Ocratoxinas /107 Zearalenona /108 Tricotecenos /109 Fumonisinas /110 Patulina /112 Mtodos de anlisis /113 Prevencin y control /113 Bibliografa /115 Captulo 10. Aditivos alimentarios /116 Colorantes orgnicos sintticos /121 Edulcorantes /124 Antioxidantes /130 Conservadores /134 Bibliografa /142

Captulo 11. Peligros toxicolgicos de los envases plsticos /145 Migracin total y especfica /148 Principales plsticos utilizados para el envasado de alimentos /149 Monmeros de mayor inters toxicolgico /150 Anlisis de migracin /158 Bibliografa /160 Captulo 12. Contaminantes metlicos en alimentos /161 Arsnico /161 Mercurio /166 Cadmio /170 Plomo /175 Bibliografa /182 Captulo 13. Txicos originados por el tratamiento trmico /186 Aminas heterocclicas /186 Hidrocarburos policclicos aromticos /188 Productos de la peroxidacin lipdica /191 Archilamida /195 Bibliografa /197 Captulo 14. Toxinas de origen marino /199 Ciguatera (CTX) /201 Intoxicacin neurotxica por marisco (NSP) /203 Intoxicacin diarreica por mariscos (DSP) /203 Intoxicacin por saxitoxina o toxina paralizante de los moluscos (PSP) /204 Intoxicacin por tetrodotoxina /206 Intoxicacin amnsica por moluscos (ASP) /206 Intoxicacin por aminas bigenas /207 Bibliografa /208

Seccin III. Inocuidad de los Alimentos /209

Captulo 15. Proteccin sanitaria de alimentos. Mtodos de trabajo en Higiene de los Alimentos /211 Mtodos de trabajo en Higiene de los Alimentos /211 Bibliografa /215 Captulo 16. Enfermedades trasmitidas por alimentos /216 Causas de las enfermedades trasmitidas por los alimentos /219 Principales caractersticas de algunas enfermedades trasmitidas por alimentos /223

Estudio y control de las ETA /239 Otras posibles causas y asociaciones /243 Bibliografa /247 Captulo 17. Mtodos de conservacin de alimentos /249 Clasificacin de los alimentos por su facilidad de descomposicin /250 Principios en que se basa la conservacin de los alimentos /250 Mtodos de conservacin de alimentos /251 Bibliografas /264 Captulo 18. Control sanitario de la leche y los productos lcteos /265 Leche /265 Productos lcteos /270 Bibliografa /272 Captulo 19. Control sanitario la carne y los productos crnicos /273 Carne /273 Animales de los que se obtiene la carne /273 Obtencin higinica de la carne /275 Captulo 21. Control sanitario del huevo /288 Estructura del huevo /289 Alteraciones de los huevos /290 Clasificacin sanitaria /291 Propiedades del huevo /293 Consejos y normas de manipulacin /294 Bibliografa /295 Captulo 22. Control sanitario de frutas y vegetales /296 Frutas /296 Vegetales /297 Control sanitario de las frutas y vegetales /298 Importancia sanitaria /302 Jugos /304 Bibliografa /305 Captulo 23. Control sanitario de las aguas y bebidas /306 Aguas /306 Bebidas no alcohlicas /308 Bebidas alcohlicas /309 Bibliografa /315

Captulo 24. Alimentacin colectiva /316 Principio de la marcha hacia delante /317 Venta de alimentos en las calles /318 Investigaciones realizadas en 8 ciudades de Amrica Latina /320 Estudio FAO sobre venta de alimentos en las calles /321 Bibliografa /321 Captulo 25. Programas de limpieza y desinfeccin /323 Trminos fundamentales /323 Ventajas de un programa de limpieza, desinfeccin y control de vectores /324 Control de plagas y vectores /327 Bibliografa /334 Captulo 26. Educacin sanitaria: procedimientos para impartirla. Principios y estrategias /335 Capacitacin del personal que impartir la educacin sanitaria /335 Etapas de las actividades educativas /337 Educacin sanitaria de los manipuladores de alimentos /341 Educacin sanitaria para nios sobre Higiene de los Alimentos /350 Educacin sanitaria para garantizar la inocuidad de los alimentos en el hogar /355 Bibliografa /355 Captulo 27. Tecnologas para garantizar la inocuidad de los alimentos /357 Definicin /358 Produccin primaria /358 Resumen /368 Algunas consideraciones sobre el sistema HACCP /373 Resumen de ejemplos de aplicaciones de los principios del sistema HACCP /375 Bibliografa /379

CAPTULO 1

Aspectos generales de la microbiologa

Tamara K. Martino Zagovalov, Virginia Leyva Castillo y Yamila Puig Pea

La microbiologa es la ciencia que estudia los organismos demasiado pequeos para ser percibidos a simple vista, por lo que se denominan microorganismos. En trminos generales dentro del amplio dominio de la microbiologa se ubican todos los organismos con dimetro de 1 mm o inferior. Sin los microorganismos sera imposible la vida, existen en la mayora de los lugares: los suelos, el aire, el agua, los alimentos, en la piel y mucosas del hombre y los animales. Algunos son beneficiosos, o al menos no producen ningn dao, otros son dainos y producen enfermedades al hombre, los animales y las plantas. En relacin con los alimentos hay microorganismos que ayudan en la elaboracin de diferentes tipos de productos: queso, cerveza, vino; existen otros cuya presencia sirve como indicador de la calidad sanitaria, o los que alteran sus caractersticas organolpticas y tambin microorganismos patgenos capaces de producir enfermedades al ser ingeridos con el alimento.

BREVE HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS

El inters por evitar las enfermedades trasmitidas por los alimentos surge con la prctica misma de ingestin de los alimentos; esta preocupacin se manifiesta histricamente de muy diversas maneras. La necesidad de preservar los alimentos contra el deterioro constituy un medio que de forma indirecta ha contribuido a proteger su inocuidad. Aunque es difcil sealar con precisin los primeros conocimientos acerca de la presencia y el papel de los microorganismos en los alimentos, se tiene evidencia de que su conocimiento antecede a la consideracin de la microbiologa como ciencia. El perodo de produccin de alimentos se remonta desde hace aproximadamente 8 000 aos. Con la introduccin de los alimentos preparados, hacen su aparicin los problemas de trasmisin de enfermedades por estos y las alteraciones debidas a conservaciones inadecuadas. Entre los aos 3 000 y 1 200 a.n.e. se utilizaron diferentes mtodos en la conservacin de alimentos: los judos utilizaron la sal del Mar Muerto; los chinos y griegos coman pescado salazonado y trasmitieron esta prctica a los romanos, quienes adems incluyeron en su dieta las carnes escabechadas; tambin debieron emplearse los aceites de oliva y ssamo para este fin. Al parecer existi una influencia entre el proceso de momificacin y la conservacin de alimentos.
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Hacia los aos 1 000 a.C los romanos sobresalieron en la conservacin de carnes y se cree que utilizaron nieve para la conservacin de alimentos perecederos. Se supone que en este perodo apareci el ahumado para la conservacin de carnes, as como la elaboracin de quesos y vinos. No se sabe si en esta poca se tena conocimiento del papel de los alimentos en la trasmisin de las enfermedades o del peligro para consumir carne de animales infectados. Entre el nacimiento de Cristo y el ao 1 100 d.C., parece ser que fue escasa la contribucin al conocimiento de la naturaleza de las alteraciones e intoxicaciones alimentarias. Durante La Edad Media las intoxicaciones por cornezuelo de centeno causaron decenas de miles de muertes. Hacia el siglo XIII, aunque se conocan las caractersticas propias de la carne higinica, no se sabe si haba conocimientos de las posibles relaciones causales entre sanidad y presencia de microorganismos. A partir del descubrimiento de los microorganismos y de su participacin como causa de enfermedad desde finales del siglo XIX, se establecieron las bases para la generacin de los principios cientficos que permitiran prevenir la contaminacin, impedir la proliferacin, inactivar de manera segura los agentes patgenos microbianos en los alimentos y desarrollar tcnicas que faciliten su deteccin. En 1683 Antony van Leeuwenhoek fue el primero en observar y describir los microbios, llamados entonces animculos. En 1765 Lzaro Spallanzani comprob que el tratamiento trmico repetido permita evitar el crecimiento de microorganismos en infusiones, lo cual supone un primer desarrollo de mtodos de esterilizacin de lquidos; realiz experimentos para refutar la doctrina de la generacin espontnea, aunque no consigui convencer a los seguidores de esta doctrina. Theodore Schwann (1837) realiz los primeros experimentos relacionados con la fermentacin y putrefaccin, originada por microorganismos y otros experimentos relacionados con la conservacin de alimentos tratados con calor; pero ninguno de estos 2 hombres consiguieron ventaja alguna de estos experimentos en cuanto a su aplicacin prctica. Franois Appert en 1809 desarroll el mtodo de conservacin de carnes en frascos de vidrio, que mantena en agua hirviendo durante perodos variables. Este mtodo conocido como "appertizacin", constituy la base del envasado de alimentos de la forma en que hoy da se hace, a pesar de que Appert no era un cientfico y probablemente ignoraba el alcance del descubrimiento en el que haba trabajado. Louis Pasteur, genial investigador francs, qumico y microbilogo, fue el primero que dio importancia y consider el alcance y el papel de los microorganismos en los alimentos: realiza experimentos que demuestran el origen microbiano de procesos de fermentacin alcohlica (1860), lctica y butrica (1861), as como demostr la existencia de microorganismos anaerobios. Hacia 1860 utiliz por primera vez el calor para destruir los microorganismos nocivos del vino y de la cerveza (pasteurizacin). Louis Pasteur y John Tyndall demostraron definitivamente, que al igual que los organismos macroscpicos, los microbios solo son producidos por otros microbios.
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Desde esta poca hasta la actualidad se han producido espectaculares progresos en la utilizacin de los microorganismos. En Cuba el desarrollo de la microbiologa es parte inseparable del desarrollo mdico, cientfico y tecnolgico.

MTODOS PTICOS EN EL ESTUDIO MICROBIOLGICO

La historia de la microbiologa est estrechamente ligada con la de la microscopia, que es la ciencia que se ocupa de los usos y aplicaciones interpretativas de los microscopios, los cuales nos permiten ver partculas muy pequeas que no pueden ser percibidas por el ojo humano. El microscopio ptico es ampliamente usado en estudios microbiolgicos. En la actualidad se han desarrollado microscopios luminosos compuestos, que constan al menos, de 2 sistemas de lentes (objetivo y ocular). La microscopia de campo claro es la ms usada para observar frotis coloreados, caractersticas morfolgicas y movilidad de los microorganismos. Existe adems la microscopia de contraste de fase, campo oscuro y fluorescencia. El microscopio electrnico tiene mayor resolucin que el microscopio ptico, emplea un haz de electrones enfocado por un magneto. Permite observar las estructuras detalladas de la clula, tambin ha sido muy til en el campo de la virologa, pues permiti la observacin e identificacin de virus.

COLORACIONES
En microbiologa las coloraciones o tinciones son muy tiles y se emplean con diversos objetivos. Las coloraciones pueden ser simple (usa un solo colorante) o compuestas, cuando emplean varios colorantes en diferentes etapas, se utiliza para observar tamao, forma y agrupacin de las clulas. La coloracin de Gram es una de las coloraciones ms empleadas, desarrollada por Hans Christiam Gram en 1884, se utiliza para diferenciar las bacterias en dependencia de la estructura de la pared celular, se basa en la reaccin frente al colorante, algunas clulas se tien con color azul-violeta y otras se decoloran y se tien ms tarde con un colorante de contraste safranina. Las bacterias llamadas grampositivas se tien de azul violeta y tienen una pared celular con elevado contenido de cido teicoico, mientras que las gramnegativas se tien de rosado y su pared contiene lipopolisacridos. Algunas modificaciones de este mtodo se han descrito. Existen otras tinciones para demostrar estructuras de la clula (cpsula, esporas, flagelos, etc.). Tambin hay coloraciones especficas para el estudio de bacterias cido-resistente, parsitos y virus.

POSICIN QUE OCUPAN LOS MICROORGANISMOS EN EL MUNDO VIVIENTE

En los siglos XVIII y XIX se planteaba la existencia de 2 reinos: reino vegetal y reino animal, en los que se ubicaron los microorganismos basado en la facultad para moverse activamente y la aptitud para realizar fotosntesis.
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Ms tarde, con la aceptacin de la teora celular, esta clasificacin comenz a crear interrogantes. Con el desarrollo de la microscopia electrnica se plante la existencia de 5 reinos: el reino monera, que inclua los procariontes (bacterias), y otros 4 reinos que incluan los eucariontes: protoctista (integrado por algas, protozoos, hongos viscosos y otros organismos acuticos y parsitos menos conocidos), hongo (que incluye hongos macroscpicos y microscpicos y lquenes), plantae (formado por musgos, helechos, conferas y plantas con flores) y animalia (formado por animales con esqueleto y sin l). El desarrollo de la biologa molecular simplific a 3 los reinos: Archea que incluye bacterias que sobreviven en condiciones extremas (termfilas, halfilas y metanognicas), procariotes y eucariotes.

CLULA PROCARITICA
Las palabras procarionte y eucarionte vienen del griego: procarithique y eucarithique, en las que pro significa antes; eu, verdadero y karion, ncleo. Las diferencias fundamentales entre ellas se recogen en la tabla 1.1.
Tabla 1.1. Algunas diferencias entre procariontes y eucariontes Aspectos Tamao celular Pared celular Procariontes Clulas pequeas (1-10 m) < 2 m de dimetro Presente en la mayora (peptidoglicano, cido teicoico, porinas, otros polisacridos y glicoprotenas) Presencia Ausencia Ausencia de mitocondrias. Las enzimas para la oxidacin de las molculas orgnicas se encuentran al nivel de membrana celular ADN en nucleoides no rodeados por membrana. No poseen cromosomas Presenta (plsmidos) No existe Directa, principalmente por fisin binaria. No poseen centrolos, ni huso mittico, ni microtbulos Eucariontes Clulas grandes (10-100 m) Ausente en animales; presente en algas, hongos y plantas Ausencia Presencia Presencia de mitocondrias

Endospora Organelos con membrana Sistema respiratorio

Ncleo

Ncleo membranoso que contiene cromosomas (ADN, ARN y protenas) No presenta Organismos multicelulares, desarrollo extenso de los tejidos Mitosis, huso mittico. Participacin de uno y otro sexos en la fertilizacin

ADN extracromosomal Desarrollo tisular Divisin celular

La clula bacteriana (procaritica) est constituida por la membrana celular que est rodeada por una pared celular, hacia el interior de la clula un citoplasma con ribosomas y una regin nuclear (nucleoide), y presenta en algunos casos grnulos, vesculas o ambos. Puede tener estructuras externas como: flagelos, fimbrias y cpsula. Como grupo son las formas de vida ms resistentes, ya que han soportado las condiciones ecolgicas ms diversas. Estructura de la clula bacteriana. La pared celular es una estructura fundamental de la bacteria; le brinda rigidez a la clula, proteccin osmtica, es la responsable de la forma celular y del comportamiento de las bacterias frente a la tincin de Gram. Desempea un papel importante en la divisin celular e interviene en su propia biosntesis. Su unidad bsica es el pptidoglicano (tpico de procariontes): polmero de configuracin D, que forma un enrejado. La biodiversidad en bacterias viene dada por la configuracin del pptidoglicano. Otro componente de la pared, tpico de procariontes, es el cido mesoaminopimlico. La mayora de las bacterias se pueden clasificar en gramnegativas y grampositivas de acuerdo con la coloracin de Gram. En el caso de las bacterias grampositivas contienen una pared celular (pptidoglicano) y a continuacin se encuentra la membrana citoplasmtica. Las gramnegativas tienen una pared ms fina, pero ms compleja que las grampositivas, y a diferencia de estas poseen una membrana externa de lipopolisacridos (LPS), que constituyen una endotoxina bacteriana. La membrana citoplasmtica es la barrera que separa la parte externa e interna de la clula, se encuentra rodeando al citoplasma. Es una estructura fundamental de la clula, presenta cationes calcio y magnesio que le dan estabilidad, tambin est formada por fosfolpidos y protenas. Es una barrera altamente selectiva, posibilita que la clula acumule metabolitos y excrete sustancias de reserva. A nivel de membrana ocurren todos los mecanismos de transporte. Estructuras externas. La cpsula es una estructura que poseen algunas especies bacterianas capaces de sintetizar grandes cantidades de polmeros extracelulares. Se deposita alrededor de la pared celular, es la estructura ms externa de la mayora de las clulas procariontes y consiste en un revestimiento viscoso, gomoso o mucilaginoso, que puede ser de naturaleza polisacardica o polipeptdica y no es imprescindible para la vida; adems, desempea un papel importante en la virulencia de la clula, as como le ofrece propiedades antifagocitarias. Protege a la clula de la desecacin, permite la adherencia a otras superficies celulares, por la capacidad que le ofrece de pegar iones metlicos y aminocidos con carga positiva. Los flagelos estn compuestos en su totalidad por protenas, estos son los responsables del movimiento, es decir, rganos de la locomocin para las formas que los poseen. Estos son submicroscpicos y se observan al microscopio ptico con tinciones especiales. Se conocen 3 tipos de ordenamiento: montrico (flagelo polar simple), loftrico (flagelos polares mltiples) y pertricos (flagelos distribuidos en la totalidad de la clula).
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Fimbrias o pili. Son apndices rgidos de la superficie bacteriana, estructuras mucho ms pequeas y finas que los flagelos. Solo se observan al microscopio electrnico. Se diferencian 2 tipos de pili: el sexual y las adhesinas, estas permiten a la bacteria adherirse a las clulas del hospedero. Estructuras internas. El citoplasma constituye la mayor parte del contenido celular, es una sustancia semifluida que est delimitada por la membrana citoplasmtica y posee elevado contenido de agua, as como sustancias qumicas (carbohidratos, enzimas, lpidos, protenas). En el citoplasma ocurren reacciones qumicas, metablicas y anablicas. El nucleoide o regin nuclear es la zona donde se halla el material gentico (ADN), no existe membrana nuclear ni aparato mittico y puede considerarse como un cromosoma nico. Algunas bacterias poseen ADN circular extracromosmico que se conoce con el nombre de plsmido. Los ribosomas estn compuestos por ARN y protenas, su funcin es la sntesis de protenas. Los ribosomas de procariontes son menores que los de eucariontes. En el citoplasma se pueden encontrar tambin otras estructuras como los cromatforos, que tienen como funcin la fotosntesis, adems se hallan las sustancias de reserva. Existe material de reserva no nitrogenado (glucgeno), nitrogenado (cianoficina), grnulos de volutina y corpsculos de azufre; la mayora se acumula en el citoplasma al finalizar la fase activa de crecimiento. Endospora bacteriana. Solo algunos gneros bacterianos son capaces de producir endospora. El proceso de esporulacin consiste en la modificacin morfolgica de la clula vegetativa en espora, la cual es capaz de sobrevivir largos perodos en condiciones adversas del medio. La endospora contiene toda la informacin gentica de la clula vegetativa. Cuando las condiciones ambientales (fsicas, qumicas y nutricionales) que dieron lugar a la formacin de la endospora se reestablecen, ocurre el proceso de "germinacin" que da lugar a la clula vegetativa (tabla 1.2). Divisin celular bacteriana. Las bacterias casi siempre se dividen por fisin binaria o biparticin simple. El cromosoma bacteriano se fija a la membrana. Al terminar la autoduplicacin del DNA sucede la sntesis de una membrana transversa que separa los 2 cromosomas homlogos, desplazndolos, lo cual es
Tabla 1.2. Diferencias entre la endospora y la clula vegetativa

Endospora Actividad enzimtica Contenido de iones calcio Resistencia al calor Resistencia a radiaciones y sustancias qumicas Contenido de agua pH citoplasmtico 8 Baja Alto S (por cido dipicolnico) S 10-25 % 5,5-6,0

Clula vegetativa Alta Bajo No No 80-90 % 7,0

seguido por la formacin de una nueva pared celular; la clula que se origina es idntica a la clula madre. Formas de la clula bacteriana y agrupaciones caractersticas. Segn su forma las bacterias se clasifican en: cocos, bacilos y espirilos. Al permanecer unidas temporalmente despus de dividirse, las bacterias pueden formar grupos caractersticos: Cocos: parejas (diplococos), cadenas (estreptococos), racimos (estafilococos), grupos de 4 clulas (ttradas) y grupos de 8 clulas (sarcinas). Bacilos: parejas (diplobacilos), cadenas (estreptobacilos) e hileras paralelas (palizadas). Clasificacin de las bacterias. La taxonoma o clasificacin biolgica es la disposicin sistemtica de los organismos en grupos o categoras. Los nombres cientficos son definiciones abreviadas o descripciones de los microorganismos. Para nombrar las bacterias se emplea el sistema binomial de nomenclatura; el nombre se escribe en latn y est compuesto por 2 palabras: la primera indica el grupo taxonmico de mayor categora (el gnero) y la segunda hace referencia a una especie en particular. Toda vez escrito en un texto, el gnero y la especie de un microorganismo al repetirla solo necesita poner la inicial del gnero, punto y el nombre de la especie.

MICROORGANISMOS EUCARIONTES. HONGOS

Principales caractersticas de los hongos. Son organismos formadores de espora, que carecen de clorofila; poseen todas las estructuras de la clula eucariota: mitocondrias, complejo de Golgi, retculo endoplasmtico, ncleo, etc. Algunos son parsitos de animales o plantas; adems son aerobios, aunque bajo determinadas condiciones anaerobias algunos pueden germinar y desarrollarse (ejemplo, las levaduras). Segn su forma de crecimiento se denominan hongos filamentosos o levaduras. Los hongos filamentosos crecen en forma de hifas, esta es la unidad celular de los hongos filamentosos; son estructuras cilndricas parecidas a tubos, filamentosas, rodeadas por una membrana citoplasmtica, presentan esteroles y luego una pared celular formada fundamentalmente por quitina. Los hongos superiores poseen hifas septadas y los inferiores no septadas, y son multinucleadas. Los septos poseen poros que permiten el paso del contenido citoplasmtico, incluyendo el ncleo. A partir de la hifa se forman estructuras diferenciadas que cumplen distintas funciones. Al conjunto de hifas unidas y entrelazadas se les denomina micelio, el cual puede ser reproductivo (donde se encuentran las esporas) o vegetativo (es el que se introduce en el medio de cultivo para absorber los nutrientes). Producen pigmentos y son tenaces, resisten la desecacin severa y otras agresiones. Se consideran los eucariontes ms adaptables.
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Los hongos levaduriformes se distinguen porque son unicelulares y poseen formas diversas, como colonias suaves, cremosas y con pigmentos variados segn el gnero y la especie. Algunos son dimorfos pues crecen tanto en la forma filamentosa como en la levaduriforme, lo cual depende de factores como la temperatura a que estn sometidos (25 37 C) y los nutrientes. La reproduccin en hongos puede ser sexual o asexual, generalmente tiene lugar mediante la formacin de esporas. La reproduccin asexual puede ser tambin por gemacin o fragmentacin del talo. La reproduccin sexual es ms compleja, supone la unin de 2 ncleos compatibles, lo que ocurre a travs de 3 procesos: plasmogamia, cariogamia y meiosis. Nutricin microbiana. Los nutrientes son todas las sustancias empleadas por las clulas como fuente de materia prima para la biosntesis y generacin de energa. La nutricin microbiana debe cubrir 2 necesidades bsicas de la clula: el suministro de carbono para el mantenimiento de su composicin y el suministro de energa para la actividad metablica. El agua constituye el nutriente principal en trminos cuantitativos, representa del 80 al 90 % del peso total de la clula. En los microorganismos, los macronutrientes constituyen la mayor parte del peso celular, estos son: C, O2, N, S, H2, P, K y Fe. De los macronutrientes que necesita la clula, el carbono es el ms importante por su peso en la nutricin de todos los organismos, representa el 50 % del peso seco celular; tambin tienen suma importancia el nitrgeno y el azufre. Las funciones del oxgeno son muy variadas, se encuentra formando parte del agua y tambin es requerido en el metabolismo energtico. Para su desarrollo los microorganismos tambin requieren micronutrientes o elementos trazas que se encuentran en un orden menor en la clula: Zn, Mg, Mo, Cu, Co, Ni, etc. Todos los elementos metlicos pueden suministrarse entre los nutrientes como cationes de sales inorgnicas. Las vitaminas tambin son requeridas para el crecimiento. A travs de la pared celular y la membrana citoplasmtica entran a la clula los nutrientes y la energa necesaria, y salen los desechos. Los microorganismos se clasifican desde el punto de vista nutricional segn la fuente de carbono y energa que emplean de la forma siguiente: Fotoauttrofos. Emplean la luz como fuente de energa y el CO2 como principal fuente de carbono. Fotohetertrofos Emplean la luz como fuente de energa y un compuesto orgnico como principal fuente de carbono. Quimiauttrofos. Usan una fuente qumica para el suministro de energa y el CO2 como fuente de carbono. La energa se obtiene por la oxidacin de compuestos inorgnicos reducidos. Quimiohetertrofos. Son aquellos organismos que emplean una fuente qumica de energa y una sustancia orgnica como fuente de carbono. En esta categora, tanto el carbono como la energa son derivados del metabolismo de
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un compuesto orgnico, por lo que son precisamente estos los organismos de inters para la microbiologa de los alimentos. Los microorganismos a partir de fuentes de carbono muy simples y sustancias minerales son capaces de sintetizar todas las complejas estructuras celulares que le dan vida. No obstante, existen microorganismo que pierden la facultad de sintetizar determinados metabolitos esenciales, conocidos como factores de crecimiento, ellos son: vitaminas (que se emplean como factores enzimticos), aminocidos (que constituyen las protenas) y enzimas, as como purinas y pirimidinas (precursoras de los cidos nucleicos), que son imprescindible aadirlos al medio de cultivo en muy pequeas concentraciones, para que este tipo de microorganismo pueda desarrollarse. Este fenmeno se conoce como auxotrofa. Por tanto los microorganismos auxtrofos son aquellos que requieren que en su medio de cultivo se incorpore algn factor de crecimiento para que estos se desarrollen; mientras que los organismos prottrofos son capaces de crecer en medios sin requerimientos de factores de crecimiento, estos medios de cultivo son medios mnimos, que solo poseen una fuente de carbono, energa y sales. Ecologa microbiana. Los seres vivos no se conciben sin el medio ambiente, ellos constituyen una unidad esencial. Los microorganismos establecen relaciones ms o menos estrechas con otros microorganismos, o con plantas y animales superiores. Estas relaciones pueden tener causas nutritivo-fisiolgicas o de tipo ecolgico. La coexistencia de 2 organismos diferentes durante largos perodos de vida se conoce como simbiosis. Para estudiar las relaciones entre los seres vivos se establecen categoras, segn la ubicacin en las cadenas alimentarias. Estas categoras son: Comensalismo. Es la relacin interespecfica, entre especies diferentes, donde un organismo denominado comensal vive en otro sin causarle dao. En esta relacin el beneficio mutuo es menos ostensible, pero no hay perjuicio para ninguno de los organismos participantes. Mutualismo: es la relacin interespecfica que es favorable para ambas especies. Parasitismo. Es la relacin interespecfica en la que un organismo vive a expensas de otro durante toda su vida o parte de ella, provocndoles dao o no, aparente o inaparente. Solo uno de los miembros -el parsito- se beneficia, y el otro organismo se perjudica. Los parsitos pueden ser obligados, cuando no pueden vivir si no es a expensas del husped, o facultativos. Los organismos saprfitos son aquellos que nunca interfieren en el funcionamiento normal de su hospedero o que no habitan en animales o vegetales vivos. Estos organismos viven normalmente sobre materias inanimadas o sustancias orgnicas muertas y en descomposicin. Metabolismo microbiano. La capacidad para utilizar y transformar la energa es una de las propiedades fundamentales de los sistemas vivientes. El crecimiento microbiano requiere la formacin de estructuras bioqumicas
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complejas: protenas, cidos nucleicos, polisacridos y lpidos; para ello, es necesario tomar nutrientes preformados del medio o sintetizarlo, por lo que se requiere una fuente de energa; todo este proceso se conoce como metabolismo. El metabolismo da lugar a 2 procesos importantes y opuestos: la generacin de energa y la utilizacin de ella en los procesos de sntesis celular; estos procesos se conocen con el nombre de catabolismo o metabolismo degradativo y anabolismo o biosntesis. El anabolismo va dirigido a la sntesis de macromolculas; es un proceso que requiere energa. El catabolismo es el proceso que aporta la energa para la sntesis de macromolculas; esta energa se obtiene usualmente en forma de ATP (adenosn trifosfato). Las funciones del metabolismo energtico en la clula son: Obtencin de energa para los procesos celulares. Energa qumica de los enlaces del sustrato (nutriente) o de la luz absorbida. Conversin de los compuestos nutritivos en precursores de los componentes celulares (formacin de macromolculas). Organizacin de las macromolculas en polmeros: protenas, cidos nucleicos y otros. Formacin y degradacin de las biomolculas necesarias para las funciones especficas de la clula. Catabolismo. La generacin de ATP se produce mediante mecanismos que tienen lugar en la membrana: la fosforilacin al nivel de sustrato y la fosforilacin asociada al transporte de electrones, y estos mecanismos se ponen de manifiesto en los esquemas o modos de metabolismo que emplea la clula microbiana para obtener energa (fermentacin, respiracin y fotosntesis). A los efectos de la microbiologa de los alimentos solo los 2 primeros son de inters. Fermentacin. La fermentacin es el mecanismo ms simple y quizs el ms antiguo desde el punto de vista evolutivo, de los procesos de obtencin de energa. Es el proceso metablico -generador de ATP- en el que tanto donantes como aceptores de electrones son molculas orgnicas. La molcula donante se oxida y la aceptora se reduce. En este esquema de metabolismo tiene lugar un mecanismo que acontece en la membrana, en el que el ATP se forma a partir de ADP (adenosn difosfato) por transferencia de un grupo fosfato PO42- de alta energa a partir de un intermediario catablico, este mecanismo se conoce como fosforilacin al nivel de sustrato. La fermentacin ocurre en ausencia de oxgeno y en ella existe un balance riguroso de carbono, hidrgeno y oxgeno entre los sustratos y los productos. Los grupos de microorganismos que pueden fermentar son los anaerobios estrictos, facultativos y aerotolerantes. Respiracin. Es el proceso metablico generador de ATP en el que tanto compuestos orgnicos, como inorgnicos sirven para donar electrones (oxidndose) y solo los inorgnicos se utilizan como aceptores (reducindose). En todo
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proceso respiratorio participa la cadena de transporte electrnico, en esta cadena los compuestos son oxidados y reducidos de forma reversible y en ella el ATP se forma mediante un mecanismo denominado fosforilacin oxidativa. Los microorganismo que pueden emplear compuestos orgnicos como donadores de electrones son los organismos hetertrofos, y los que pueden emplear compuestos inorgnicos como donadores de electrones son las bacterias littrofas o auttrofas. La respiracin puede ser: Aerobia. Cuando el aceptor final de electrones en la cadena respiratoria es el oxgeno. Es la respiracin ms completa, eficiente y evolucionada. Es el proceso que mayor energa permite obtener. Anaerobia. Cuando el aceptor final de electrones es una sustancia oxidada (sulfatos, nitratos y carbonatos). Este proceso respiratorio es caracterstico de un pequeo grupo de bacterias. Atendiendo al proceso respiratorio que realizan los microorganismos, pueden clasificarse como: Aerobios estrictos. Solo pueden vivir en presencia de oxgeno. Anaerobios facultativos. Microorganismos que pueden generar ATP mediante la fermentacin y la respiracin anaerobia, empleando el in nitrato como aceptor final de electrones. Este tipo de respiracin es importante para las bacterias porque les da la posibilidad de contar con un proceso alternativo ante condiciones adversas, que le permite vivir de manera anaerobia. Anaerobios estrictos. Microorganismos que no pueden emplear la respiracin aerobia como alternativa para obtener ATP. Emplean SO42- y CO32- como aceptores de electrones. No sobreviven en presencia de oxgeno, y requieren condiciones especiales de incubacin para lograr cultivos en el laboratorio. Existen microorganismos que necesitan atmsferas constituidas por una mezcla de gases y logran tolerar bajas tensiones de oxgeno, o sea, requieren bajas tensiones de oxgeno para su desarrollo, estos son los llamados microaerfilos. Anabolismo. A partir de diversas vas metablicas los microorganismos sintetizan las macromolculas necesarias para su desarrollo, de este modo se forman los componentes de la pared celular, como el pptidoglicano; tambin sintetizan lipopolisacridos (LPS), caractersticos de bacterias gramnegativas, polmeros capsulares extracelulares, material de reserva y as todos y cada uno de los componentes que necesita la clula. Todas las vas metablicas de produccin de energa tienen la misma funcin comn: la provisin de ATP y nucletidos de piridina reducidos, para realizar las reacciones de la biosntesis celular. El desarrollo microbiano solo puede entenderse como el resultado de una actividad qumica alta y especficamente regulada, que responde al principio de economa celular, para ello, en la clula operan 2 mecanismos diferentes de regulacin: la regulacin inespecfica de la actividad biosinttica y los mecanismos de regulacin rpidos y especficos.
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Crecimiento microbiano. En los sistemas biolgicos, el crecimiento es el incremento irreversible en la cantidad de constituyentes celulares y de sus estructuras. En los organismos unicelulares el crecimiento se refleja por el aumento de tamao y masa de la clula, con una divisin posterior en 2 clulas hijas y, por tanto, incremento en la poblacin. En los organismos filamentosos se destaca aumento en el volumen y la elongacin de los filamentos. Al inocular un microorganismo en un recipiente cerrado con cantidad fija de medio de cultivo e incubarlo a una temperatura, se aprecian cambios a travs del tiempo, los que han sido estudiados y divididos en fases que caracterizan determinados estados morfolgicos y fisiolgicos de la clula, de acuerdo con los factores del medio donde se encuentra (Fig. 1.1).

Fig. 1.1. Fases de la curva tpica de crecimiento microbiano.

En los alimentos ocurren procesos similares, dado que la mayora contienen microorganismos en determinados niveles. Fase I. Fase lag o de latencia. Primera fase del crecimiento. Adaptacin a un medio ambiente con nuevas condiciones, existe cese parcial de las funciones metablicas, formacin de enzimas y metabolitos intermediarios necesarios para la reanimacin del crecimiento. La velocidad especfica de crecimiento es cero. La extensin de esta fase depende del inculo, la edad del cultivo, la composicin del medio y las caractersticas de la cepa utilizada del microorganismo. Fase II. Fase de aceleracin positiva. Las clulas disminuyen de tamao, comienzan a utilizarse las reservas y aparecen nuevas funciones. La velocidad especfica de crecimiento se incrementa hasta un valor mximo.
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Fase III. Fase exponencial o de crecimiento logartmico. Comienza toda vez que el microorganismo ha alcanzado la velocidad especfica de crecimiento mxima y esta se mantiene constante. Esta fase exponencial se caracteriza por elevada actividad fisiolgica; el contenido de ARN alcanza su mximo valor, lo cual determina la intensidad de crecimiento y elevado nivel de la sntesis de protena, adems, tiene lugar la divisin celular, y existe aumento exponencial de la masa. Tambin en esta fase existe un equilibrio de flujo de material. Este proceso se mantiene hasta que se agoten los nutrientes, se acumulen muchas sustancias txicas que inhiban el crecimiento y se manifieste las caractersticas ms importantes de la clula. Fase IV. Fase de aceleracin negativa o crecimiento retardado. Estadio de deficiencia: la concentracin de nutrientes decrece a expensas de una acumulacin del producto, el crecimiento y la divisin disminuyen por efecto de factores externos no favorables (aumento de la temperatura, la presin osmtica, la acumulacin de metabolitos txicos, etc.). La concentracin de nutrientes llega a ser tan baja que la velocidad especfica de crecimiento va de mxima a cero. Fase V. Fase estacionaria. Cese completo del crecimiento por agotamiento de nutrientes y acumulo de sustancias txicas. La velocidad especfica de crecimiento es cero. El nmero de microorganismos en la unidad de volumen se muestra existiendo un equilibrio entre la divisin y la muerte, aunque la mayor parte de la poblacin pasa al metabolismo endgeno, es decir, mantiene la viabilidad a expensas del consumo de su propia masa (sustancias de reserva). El agotamiento de los nutrientes, la excrecin de sustancias txicas, el cambio en el pH y en las condiciones xido-reductoras, as como en la concentracin celular, determinan las caractersticas de esta fase. Fase VI. Fase de declinacin o muerte. La velocidad especfica de crecimiento es negativa (muerte). Aumento de la mortalidad, son ms las clulas que mueren que las que nacen, aunque puede persistir un nmero pequeo de sobrevivientes a expensas de los nutrientes de las que mueren. La clula pierde toda capacidad para los procesos degradativos.

ASPECTOS GENERALES SOBRE EL PROCESO INFECCIOSO

Enfermedad es todo cambio o alteracin fisiolgica que puede causar sntomas o no. La enfermedad infecciosa es aquella alteracin producida por agentes biolgicos microscpicos; es el resultado de una relacin no exitosa entre el parsito y el hospedero. La infeccin implica aparicin de microorganismos en tejidos vivos, viene dada por la presencia y multiplicacin de microorganismos en la superficie o dentro de otro organismo. Comienza con ese primer encuentro en el que se llega a establecer un microorganismo en un macroorganismo. Es una unin al nivel molecular entre 2 componentes: uno celular (receptor) y otro microbiano (adhesina).
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Un agente patgeno es definido como un organismo que tiene elevada potencialidad para causar enfermedad. Los factores que afectan el desenlace final de la relacin hospedero-parsito determinan la salud o la enfermedad. Esta habilidad depende de diversos factores, entre los que se encuentran: la dosis infecciosa y virulencia del parsito, la puerta de entrada y los mecanismos de defensa del hospedero. Existen microorganismos que son patgenos verdaderos y otros son oportunistas. Los patgenos verdaderos se sobreponen a las defensas del organismo y producen enfermedad, mientras que los oportunistas son aquellos que solo inducen enfermedad cuando los mecanismos de defensa del hospedero estn comprometidos o debilitados. Algunos miembros de la microbiota normal pueden ser patgenos oportunistas. La patogenicidad es un atributo de las bacterias, dentro de las diferentes cepas de una especie se pueden encontrar amplias variaciones en la habilidad para perjudicar o daar la especie hospedera. Esta patogenicidad relativa se conoce como virulencia. La virulencia es un atributo de cepa y no de especie. En general, cuando una bacteria es ms virulenta la dosis para infectar a un individuo dado es menor. Se conoce que los procesos que intervienen en las relaciones que se establecen entre husped y parsito son muy complejos, y en modo alguno se puede considerar que ellas pueden ser unilaterales.

FACTORES DE VIRULENCIA O ATRIBUTOS PATOGNICOS

Los factores de virulencia o atributos de patogenicidad son mecanismos que los microorganismos han desarrollado para evadir o engaar las defensas protectoras de los organismos superiores. Muchos microorganismos deben su virulencia a una interaccin compleja de diferentes factores patognicos y no a un solo mecanismo. Algunos de estos atributos son tratados en este captulo de forma abreviada, atendiendo a aquellos mecanismos que participan en la primera parte del proceso infeccioso: adherencia, colonizacin e invasin y los que participan en la segunda parte del proceso infeccioso provocando el dao. Adhesinas. Las adhesinas, como las fimbrias o pili, participan en la primera parte del proceso infeccioso propiciando la adherencia. Por lo general, todas las enfermedades infecciosas comienzan en la superficie del husped. La adherencia es una relacin que se establece al nivel molecular, donde participan las adhesinas del patgeno y los receptores del hospedero. Adhesin equivale a fijacin, es el proceso mediante el cual la bacteria se "pega" a la superficie de las clulas del husped. La unin de las adhesinas y los receptores es un estrecho y especfico modo llave-cerradura. Cpsula. La cpsula evita la fagocitosis y dificulta el reconocimiento de la bacteria por el sistema inmunolgico del husped, por lo tanto este es un mecanismo que favorece la diseminacin bacteriana en el proceso de infeccin.
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Siderforos. La produccin de siderforos permite a la bacteria extraer el hierro que se encuentra en protenas como la lactoferrina y la transferrina, para hacerlo asequible al microorganismo.

OTROS FACTORES DE VIRULENCIA ASOCIADOS CON LA INVASIVIDAD

La pared celular de algunas bacterias contiene cantidades importantes de determinados compuestos que inhiben la fusin del fagosoma-lisosoma; otros mecanismos que evitan esta unin tambin han sido expuestos, aunque no han sido demostrados de manera convincente para la mayora de los microorganismos. Se ha visto que la exposicin a los grnulos hidrolticos lisosomales puede ser evitada por inhibicin de la fusin del lisosoma con el fagosoma. Existen microorganismos que adems pueden ser capaces de resistir las acciones antimicrobianas de las enzimas fagolisosmicas. Estos mecanismos pueden hacer que el organismo sea resistente a la muerte en el fagolisosoma. Otro mecanismo empleado es la destruccin de las clulas fagocticas, el que est asociado con la produccin de toxinas. Toxinas y enzimas. La produccin de toxinas y enzimas por parte de un patgeno en un hospedero implica daos. Las toxinas microbianas se clasifican como exotoxinas y endotoxinas. Las exotoxinas se producen durante el metabolismo de las bacterias y son secretadas al ambiente que las rodea. Se originan por las bacterias grampositivas y en ocasiones por las gramnegativas; son protenas inmunognicas; ejercen su accin por destruccin de componentes celulares especficos o interferencia de funciones celulares especficas. Las exotoxinas se pueden clasificar segn las clulas que afectan, por ejemplo: las neurotoxinas como la botulnica que ejercen su accin primaria sobre el sistema nervioso, y las enterotoxinas como las producidas por Staphylococcus aureus, afectan el enterocito (tabla 1.3). Tambin, en dependencia de la estructura y accin se consideran como: citotoxinas (hemolisinas, fosfolipasas) y superantgeno. Las citotoxinas atacan la membrana celular. Las hemolisinas poseen accin ltica sobre los eritrocitos de los mamferos, y las fosofolipasas separan el grupo cabecera de los fosfolpidos del resto de la estructura de la membrana celular; hacen inestable la estructura bicapa de la membrana y la clula se rompe. Los superantgenos ejercen su accin directamente entre el complejo principal de histocompatibilidad (MHC) de clase 2 y los receptores celulares especficos, por lo que se liberan citoquinas, apareciendo el dao celular. La toxina A del Staphylococcus es considerada un superantgeno. Las endotoxinas forman el componente LPS de la membrana externa de las bacterias gramnegativas y son liberadas en grandes cantidades solo cuando la clula se lisa. La toxicidad de las endotoxinas radica en el lpido A (responsable de todos los efectos que se producen por microorganismos gramnegativos). La endotoxina es el iniciador primario en el shock sptico por bacterias gramnegativas.
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Tabla 1.3. Caractersticas que diferencian a endotoxinas y exotoxinas Propiedades Fuente bacteriana Endotoxinas Solo gramnegativas. Para mostrar actividad biolgica no es necesaria su liberacin LPS de la membrana externa. Se libera cuando la clula muere Lpido de la membrana externa (LPS) Estable No son convertidas a toxoide Generales (fiebre,dolores, hipotensin) Pequea Exotoxinas Grampositvas, ocasionalmente por gramnegativas. Excretada por clulas vivas Producto metablico del crecimiento Protena Casi siempre inestable Muy antignicas. Toxoide (antitoxina) Afecta funciones celulares Elevada

Relacin con el microorganismo Qumica Estabilidad al calor Inmunologa Efectos Dosis letal

La invasin bacteriana de los tejidos es facilitada con frecuencia por la liberacin de enzimas, entre ellas se encuentran las hialuronidasa, coagulasa, colagenasa, lecitinasa, leucocidinas, etc.

AGENTES ANTIMICROBIANOS Y DESINFECTANTES

Los antimicrobianos son compuestos que tienen accin contra los microorganismos, pueden ser de origen microbiano o qumico. Algunas definiciones que deben ser conocidas en relacin con el tema son las siguientes: Sepsis. Presencia de microorganismos perjudiciales en el tejido vivo. Asepsia. Ausencia de microorganismos patgenos. Es en sentido estricto la ausencia de grmenes infecciosos en tejidos vivos. Bactericida. Que tiene la propiedad de matar las bacterias. Se dice de cualquier agente que destruye las bacterias patgenas o no, aunque no siempre sus esporas; es una accin irreversible. El sufijo -cida- significa exterminador. Bacteriosttico. Que tiene la propiedad de inhibir la multiplicacin bacteriana, esta se reanuda en cuanto se retira el agente. Los agentes bacteriostticos son sustancias o condiciones que no destruyen inmediatamente las bacterias, inhiben su multiplicacin de modo que mueren solo despus de algn tiempo sin un aumento importante de su nmero. Stasis es una palabra griega que significa detencin. Estril. Exento de vida de cualquier clase. Dado el criterio de muerte para los microorganismos, incapacidad para reproducirse. Desinfectante. Agente qumico capaz de destruir los microorganismos, en el caso de las bacterias su forma vegetativa, no necesariamente sus esporas, disminuye estas a niveles mnimos. La mayora de los desinfectantes son txicos
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o perjudiciales a los tejidos y no pueden ser empleados como antispticos. Su accin bactericida est determinada por la concentracin, tiempo y temperatura a la que son aplicados. Higienizante. Cualquier agente que reduzca el recuento bacteriano a niveles inocuos en el aspecto de las necesidades sanitarias. Suelen aplicarse a objetos inanimados como utensilios, pisos, paredes y mesetas. Antisptico. Son sustancias que destruyen o inhiben microorganismos especialmente en el cuerpo. Los antispticos poseen poca toxicidad selectiva, por lo que solo pueden ser usados para inactivar microorganismos en el medio inanimado o hasta cierto grado sobre la superficie cutnea. Antibiticos. Compuestos producidos por bacterias u hongos, capaces de impedir la presencia de otros microorganismos, ya sea porque inhiben el crecimiento o porque logran eventualmente destruirlos. En la actualidad el hombre ha logrado variar la estructura de estos compuestos para mejorar sus caractersticas, creando as antibiticos sintticos.

BIBLIOGRAFA
Howard, B.J. (1993). Clinical and pathogenic microbiology. 2nd. edition. St Louis. Mosby. Jawetz, J.L.; Melnick, E.; E.A. Adelberg. (1996). Microbiologa mdica. Mxico, D.F. Ed. El Manual Moderno, S.A. de C.V., 15ta edicin. Joklik, W.K.; Willett H.P.; D.B. Amos Zinsser (1983). Microbiologa. 17ma edicin. Llop; Valds-Dapena; Zuazo (2001). Microbiologa y parasitologa mdica. La Habana Ed. Ciencias Mdicas. Martnez, J.A.; Snchez, M.; Quintana, V.; G. Pazos del Barrio (1989). Microbiologa general. La Habana, Pueblo y educacin. Rojas, N.; Pazos, V.; O. Coto (1988). Microbiologa clnica I. La Habana. Ministerio de Educacin Superior. Salle. (1976). Bacteriologa. Cap. XVII. Desinfeccin y desinfectantes.

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CAPTULO 2

Control microbiolgico de los alimentos

Virginia Leyva Castillo, Tamara K. Martino Zagovalov y Yamila Puig Pea

Los microorganismos se utilizan para obtener gran variedad de alimentos, son causa de su deterioro y pueden provocar enfermedad en el hombre. Producir, distribuir y consumir alimentos con buena calidad sanitaria (crudos o preparados), para el consumo inmediato o procesado, forma parte de los intereses de cualquier comunidad. La satisfaccin de este objetivo est en relacin directa con el desarrollo social, econmico y cultural de un pas. Diversas circunstancias han hecho necesario el control microbiolgico de los alimentos, tales como: el aumento del comercio internacional de estos productos, el posible riesgo derivado del empleo de nuevas tcnicas en su produccin en masa, su rpida y amplia distribucin y el consumo en algunas reas o pases de alimentos procedentes de zonas en las que son prevalentes las enfermedades entricas. La presencia de microorganismos en los alimentos no significa necesariamente un peligro para el consumidor o una calidad inferior de estos productos. Si se excepta el nmero reducido de productos esterilizados, cada bocado de alimentos contiene levaduras inocuas, mohos, bacterias y otros microorganismos. La mayor parte de los alimentos se convierte potencialmente en patgenos para el consumidor, despus que han sido violados los principios de higiene, limpieza y desinfeccin durante el proceso de elaboracin, transporte y conservacin. Si los alimentos han estado sometidos a condiciones favorables para la entrada y/o multiplicacin de agentes infecciosos o toxignicos, los mismos pueden constituir un vehculo de trasmisin de enfermedades, como salmonelosis o la intoxicacin estafiloccica. La deficiente calidad sanitaria de los alimentos se traduce en daos de variada naturaleza para las poblaciones implicadas. Los daos incluyen aparicin de enfermedades, gastos de atencin mdica, deterioro de la calidad de vida, prdidas econmicas por deterioro de los alimentos, dao al turismo y causa de muerte. Segn la Organizacin Mundial de la Salud, las enfermedades trasmitidas por alimentos (ETA) constituyen el problema de salud pblica ms extendido en el mundo actual.
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MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS Y SU RELACIN CON OTRAS RAMAS

La microbiologa de los alimentos es la rama de la microbiologa que se ocupa entre otros aspectos del estudio de los microorganismos que pueden afectar la calidad sanitaria de los alimentos y el agua. El rea de la microbiologa de los alimentos es basta y compleja, pues incluye adems las caractersticas generales de estos microorganismos, su ecologa, su resistencia al medioambiente, su capacidad para sobrevivir y desarrollarse en los alimentos, las consecuencias de este desarrollo y los factores que influyen en este proceso. La microbiologa de los alimentos se relaciona con la microbiologa mdica, la veterinaria, la virologa, la parasitologa, la gentica, la bioqumica, la tecnologa de los alimentos y la epidemiologa. Es importante en el diseo y aplicacin del sistema de anlisis de peligro y puntos crticos de control, esencial para garantizar la inocuidad de los alimentos, en el estudio de brotes de enfermedades asociadas con el consumo de alimentos, en el diseo y evaluacin de tcnicas modernas de anlisis, en el estudio de los procesos que tienen lugar durante el deterioro de los alimentos y en la fabricacin de aquellos que hacen uso de microorganismos.

CONCEPTOS BSICOS PARA LA DISCIPLINA MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS

Salud. Es el estado o completo estado de bienestar fsico, mental y social, no solo la ausencia de enfermedad. Alimento sano o alimento con buena calidad sanitaria. Implica no solo ausencia de microorganismos patgenos y/o sus toxinas, sino el registro de caractersticas organolpticas que proporcionen plena satisfaccin al ser consumido. Esto significa que en el proceso de control sanitario de los alimentos hay que plantearse acciones que no solo tiendan a lograr productos libres de tales agentes, sino tambin que los alimentos deben cumplir determinados requisitos para que puedan llegar a la poblacin: frescos, atractivos, sabrosos, digestivos y con capacidad nutricional al mximo nivel. Calidad. Grado de excelencia que posee un producto, es decir, cuan bueno es para cumplir su finalidad. Calidad sanitaria. En este sentido la definicin de calidad sanitaria se encuentra directamente relacionada con el concepto de salud. Muestra. Porcin o artculo que representa la calidad del todo del que ha sido tomado. Alimento perecedero. Alimento cuya vida til es corta y que necesita refrigeracin para su conservacin. Alimento semielaborado. Alimento que ha recibido tratamiento trmico o no en su elaboracin y que necesita coccin para su consumo. Conserva. Alimento que se introduce en recipiente hermticamente cerrado y es sometido a un proceso de esterilizacin que asegura una vida til desde 6 meses hasta varios aos, que depende del tipo de alimento y la intensidad del tratamiento trmico aplicado.
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Semiconservas. Alimentos parcialmente estabilizados por la adicin de sustancias qumicas, envasados en recipientes inalterables, impermeables al agua, gases y microorganismos; estos alimentos casi siempre requieren almacenamiento a bajas temperaturas. Son productos establecidos para un tiempo limitado.

INCIDENCIA Y TIPOS DE MICROORGANISMOS EN LOS ALIMENTOS

En los alimentos existe gran diversidad de microorganismos. En general, el nmero y tipo de microorganismos en un producto alimenticio terminado estn influenciados por: El medio ambiente general del cual fue obtenido el alimento. La calidad microbiolgica del alimento en su estado fresco o antes de ser tratado. Las condiciones higinicas bajo las cuales el alimento fue manipulado y tratado. La adecuacin de las posteriores condiciones de envasado, manipulacin y almacenamiento para mantener la microbiota en un bajo nivel. A la hora de producir alimentos comerciales de buena calidad es importante mantener los microorganismos en bajo nivel por razones estticas, de salud pblica y de vida til. Existen 3 grandes grupos de microorganismos que constituyen el campo de accin de la microbiologa sanitaria: Los que afectan las caractersticas organolpticas de los alimentos. Los que se agrupan al margen de las lneas taxonmicas, en funcin de determinadas caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y ecolgicas. Los que afectan la salud del consumidor y estn en estrecha relacin con la microbiologa mdica. De ah que el control microbiolgico de los alimentos, en relacin directa con los grupos antes mencionados, est dirigido a la investigacin de: Microorganismos alteradores. Microorganismos indicadores. Microorganismos patgenos y/o sus toxinas. La actividad microbiana es el principal mecanismo que produce alteracin en la apariencia de un alimento, en cuanto a frecuencia e intensidad. El deterioro de los alimentos es desde luego, como la presencia de microorganismos patgenos, una condicin indeseable, que puede ser detectada por el consumidor frente al alimento, por lo que puede decidir si lo acepta o no. La presencia de los agentes patgenos en contraste, no suele acompaarse de cambios sensoriales objetables; mientras menor sea la incidencia de microorganismos deterioradores en activo, mayor riesgo de que una colonizacin concurrente por patgenos pase inadvertida, situacin evidente de riesgo mayor.
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La regla general es que la colonizacin de un alimento por bacterias patgenas no se traduce en cambios sensoriales adversos, lo cual significa que no evolucionan con deterioro del alimento. Los principales grupos de microorganismos alteradores estn formados por: Grmenes psicrfilos. Microorganismos capaces de desarrollarse a bajas temperaturas, como las temperaturas de refrigeracin de los alimentos. Grmenes termfilos. Los que crecen a temperaturas elevadas. Grmenes halfilos. Los que afectan alimentos con elevado contenido de sal. Grmenes lipolticos. Capaces de degradar los compuestos de origen lipdico que se encuentran en los alimentos. Grmenes acidfilos. Microorganismos que crecen en alimentos con pH bajo.

MICROORGANISMOS INDICADORES DE LA CALIDAD SANITARIA

Desde que en 1882 Schardinger determin la calidad sanitaria segn la presencia del que hoy conocemos como Escherichia coli, en lugar de hacerlo segn Salmonella typhi, los microorganismos indicadores han sido de gran utilidad. Se hace una amplia utilizacin de grupos o especies de microorganismos cuya enumeracin o recuento se realiza con mayor facilidad y su presencia en los alimentos en determinado nmero indica que estos productos estuvieron expuestos a condiciones que pudieran haber introducido organismos peligrosos y/o permitido la multiplicacin de especies infecciosas y/o toxignicas. Los grupos o especies utilizados con estos fines se denominan microorganismos indicadores, y sirven para evaluar tanto la seguridad que ofrecen los alimentos en cuanto a microorganismos y sus toxinas, como su calidad microbiolgica. Los microorganismos indicadores habitualmente no responden a criterios de agrupacin taxonmica, se definen ms bien en funcin de determinadas caractersticas ecolgicas y fisiolgicas que apoyan o justifican el valor aplicativo que se les intenta conferir. El principal objetivo de la utilizacin de microorganismos como indicadores de prcticas no sanitarias es revelar defecto de tratamiento que llevan consigo un peligro potencial, que no est necesariamente presente en la muestra particular examinada, pero es probable que pueda encontrarse en muestras paralelas. La metodologa del examen de los alimentos para detectar microorganismos indicadores y bacterias enteropatgenas ha sido revisada por varios investigadores, con la finalidad de ayudar a las diferentes organizaciones que se dedican a elaborar los procedimientos para el estudio microbiolgico de los alimentos. Los indicadores de calidad sanitaria ms utilizados son las determinaciones de: Microorganismos a 30 C. Coliformes Coliformes fecales (termotolerantes). Escherichia coli. Hongos filamentosos. Levaduras viables.
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 Enterobacterias totales. Determinacin de enterococos o estreptococos fecales.

M ICROORGANISMOS INDICADORES
Microorganismos a 30 C. Comnmente este indicador es conocido como microorganismos aerobios mesfilos, trmino an empleado por algunos autores, pero tomando en cuenta los criterios de las Normas ISO (Internacional Standard Operation), por las cuales se rigen los microbilogos de alimentos de nuestro pas, esta nueva denominacin de microorganismos a 30 C es la que se emplea en el texto. Los microorganismos que forman parte de este grupo son muy heterogneos, cualidad derivada de la propia definicin del grupo. Se incluyen en l todas las bacterias, mohos y levaduras que en aerobiosis muestran capacidad para formar colonias visibles, bajo las condiciones en las cuales se ejecuta el ensayo con crecimiento a temperatura ptima para los mesfilos. Es evidente que en una situacin particular podran quedar incluidos microorganismos patgenos. La mayora de los alimentos industrializados y/o listos para el consumo (excepto, por ejemplo, los productos fermentados) deben ser considerados como indeseables para el consumo, cuando tienen gran nmero de microorganismos, aun cuando estos microorganismos no sean conocidos como patgenos y no hayan alterado de forma apreciable los caracteres organolpticos del alimento. Pueden darse varias razones que justifiquen esta conducta. La interpretacin de los recuentos elevados segn el tipo de alimento es la siguiente: En productos estables: indica materia prima contaminada. Tratamientos no satisfactorios desde el punto de vista sanitario. En productos perecederos: indica adems condiciones inadecuadas de tiempo y temperatura durante el almacenamiento. Significa que pueden haberse dado condiciones favorables para la multiplicacin de microorganismos patgenos de origen humano o animal. Algunas cepas de bacterias mesfilas comunes, no generalmente consideradas como agentes de enfermedades trasmitidas por los alimentos (Proteus, Enterococos y Pseudomonas mesfilas) han sido sealadas como causa de enfermedad cuando existan en nmero elevado de clulas viables. Todas las bacterias patgenas conocidas en los alimentos son mesfilas y en algunos casos contribuyen con su presencia a los recuentos en placas encontrados. El mtodo de deteccin comnmente empleado para la determinacin de este indicador es el de recuento estndar en placa vertida. En general se utiliza un medio de cultivo rico en nutrientes sin sustancias inhibidoras ni indicadores; el medio ms utilizado en todo el mundo es el agar para recuento en placa o agar triptona-glucosa-extracto de levadura. Las colonias obtenidas en el medio slido se cuentan despus de la incubacin en aerobiosis a 30 C durante 72 h.
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Organismos coliformes. Por razones prcticas se mantienen agrupadas bajo la denominacin de grupo coliforme, principalmente, las especies de los gneros Escherichia, Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter, y otras especies de enterobacterias que sean capaces de fermentar la lactosa con produccin de gas. Se definen como bacilos gramnegativos no formadores de esporas, aerobios o facultativamente anaerobios, que fermentan la lactosa con formacin de gas dentro de las 48 h a 35 C, algunas fermentan la lactosa lentamente. Los organismos coliformes son el grupo indicador con mayor tradicin en microbiologa sanitaria. Se trata de una definicin totalmente convencional sin validez taxonmica, que pretende involucrar bacterias de hbitat tpicamente intestinal, si bien existen microorganismos que satisfacen la definicin y que con frecuencia se localizan en ambientes extraintestinales. Su hbitat natural es el contenido intestinal del hombre y animales superiores. En la materia fecal alcanzan cifras de 106 a 109 ufc/g. Debido a su capacidad de sobrevivencia y a su potencial para desarrollarse en la materia orgnica, pueden recuperarse de una diversidad de sustratos extraintestinales. Los alimentos no son la excepcin y el hallazgo de coliformes puede estar determinado por contaminacin seguida o no de activo desarrollo. Con excepcin de E. coli ninguno de ellos indican contaminacin fecal, ya que pueden encontrarse en el suelo, los vegetales y tener acceso a los alimentos. Los coliformes se encuentran en todas partes de las plantas (hojas, races y flores). El gnero Klebsiella predomina en muestras obtenidas de medios forestales y de productos frescos de granja. La mayora de las hortalizas frescas examinadas presentan niveles de coliformes de 106 a 107/g; tambin se pueden encontrar en las cscaras de huevos recin puestos y pueden penetrar a travs de los poros si la superficie de ella est daada. Estos microorganismos suelen encontrarse en la leche fresca por contaminacin de los conductos lactforos, debido al pienso o estircol; pueden estar presentes en las plumas de las aves de corral y en la piel, pezuas y pelos de otros animales. Los mariscos que crecen en zonas contaminadas concentran los microorganismos de tal modo, que se contaminan con niveles ms elevados que los que estn presentes en el agua. Pueden indicar en productos procesados falta de higiene en la fabricacin, procesamiento inadecuado, contaminacin posproceso, etc. Adems un nmero elevado puede indicar posible presencia de algunos patgenos. Los coliformes son bastante resistentes en condiciones naturales y soportan la desecacin, aunque no resisten bien los rigores del frigorfico o de la crioconservacin, son inactivados por tratamientos trmicos relativamente moderados, como la pasteurizacin. La luz ultravioleta, en las condiciones empleadas en la desinfeccin del agua, inactiva a los coliformes. Los germicidas como los yodforos y los compuestos clorados tambin son letales a las concentraciones usuales en las plantas procesadoras de alimentos. Se han utilizado muchos mtodos para detectar coliformes, la fermentacin de la lactosa es el primer paso en su identificacin. Hay un mtodo que consiste
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en el uso del nmero ms probable (NMP), esta es una tcnica laboriosa, lenta y requiere mayor volumen de material de laboratorio, pero es mucho ms sensible, muy utilizada en el estudio de agua potable y de alimentos, tales como mariscos y pescados. Adems, es muy apropiada para detectar clulas fisiolgicamente daadas que con frecuencia estn en los alimentos procesados. La mayora de las investigaciones realizadas en alimentos sobre coliformes se practican mediante el mtodo de placa vertida en agar bilis rojo-violeta, el cual es ms rpido, econmico y reproducible que el NMP, aunque no permite la recuperacin directa de bacterias daadas fisiolgicamente, ni la deteccin de concentraciones bajas del producto. Otro mtodo empleado para la determinacin de coliformes es el de filtracin por membrana, fundamentalmente empleado en anlisis de aguas. Coliformes fecales (termotolerantes). En 1904 Ejikman descubri que los coliformes presuntivos de contaminacin fecal producen gas en un medio de glucosa incubado a 46 C, mientras que los no fecales no lo hacen. El trmino surgi como un intento de encontrar mtodos rpidos y confiables, para demostrar la presencia de E. coli y variantes muy relacionadas, sin necesidad de purificar los cultivos obtenidos en las pruebas para coniformes, o de aplicar las relativamente costosas pruebas confirmatorias. Este grupo se refiere a aquellos coliformes que tienen capacidad para fermentar la lactosa con produccin de gas a temperaturas de 44 a 45 C; excepto este sealamiento, los coliformes fecales se identifican con el resto de los coliformes en relacin con su resistencia al medio ambiente, agentes qumicos y factores que favorecen o impiden su desarrollo. En los ltimos aos se considera que el trmino coliformes fecales debe sustituirse por coliformes termotolerantes, ya que el calificativo fecal subraya un origen y por tanto implicaciones que estn lejos de sustentarse en la realidad. Para el recuento de este grupo se requiere un control muy riguroso de la temperatura de incubacin, generalmente bao Mara de precisin con lmites de variacin no mayores de 0,2 C. La tcnica para su recuento casi siempre es el NMP a una temperatura de incubacin de 44,5 0,2 C. El NMP se computariza en tablas correspondientes de la forma indicada para los coliformes totales. Los mtodos de filtracin por membrana tambin pueden emplearse en este caso. Escherichia coli. Es el representante genuino de origen fecal, ya que es el indicador ms confiable de contaminacin fecal en alimentos. E. coli es un germen cuyo hbitat natural es al tracto entrico del hombre y de los animales de sangre caliente, por ello la presencia de este microorganismo en un alimento indica, casi siempre, contaminacin directa o indirecta de origen fecal. Es el indicador clsico de posible presencia de patgenos entricos en el agua, en los moluscos, en los productos lcteos y en otros alimentos. Cifras elevadas de E. coli en un alimento sugieren falta de limpieza en su manipulacin y almacenamiento inadecuado. Los mtodos de deteccin son muy parecidos a los que se utilizan en la determinacin de coliformes fecales y en ocasiones los mismos (NMP, placa
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vertida, filtracin por membrana), en la actualidad se estn utilizando mucho en pases desarrollados los mtodos cromognicos y fluorognicos. Los recobrados de E. coli de los mtodos convencionales requieren confirmacin bioqumica de las cepas aisladas. Enterobacterias totales. Muchos pases han introducido el anlisis de los alimentos que han recibido un tratamiento para asegurar su inocuidad, mediante una prueba que determina la familia de las Enterobacteriaceae (o sea, los tipos lactosa positivas y lactosa negativas). Es capaz de identificar microorganismos que no estn incluidos dentro del grupo de coliformes. Este se utiliza principalmente en Europa, no es muy usado en Amrica Latina y el Caribe; las razones por las cuales algunos laboratorios prefieren este indicador son las siguientes: Las bacterias "coliformes" o del grupo coliaergenes constituyen un grupo mal definido desde el punto de vista taxonmico. Una prueba solo para las bacterias lactosa positivas puede implicar resultados falsamente seguros, en el caso en los que predominan las lactosa negativas (Salmonella, Shigella, E. coli, etc.). Para su deteccin se utiliza casi siempre el mtodo de placa vertida con medio de agar rojo violeta bilis ms glucosa, ya que el fundamento de aislamiento de las Enterobacterias est dado por la fermentacin de la glucosa en el medio de cultivo a 37 C durante 24 h; las colonias presuntivas se confirmarn mediante la prueba de la oxidasa y la oxifermentacin de la glucosa (utilizacin de la glucosa en condiciones de aerobiosis y anaerobiosis). En nuestro pas est probado por investigaciones realizadas que el indicador coliformes totales cumple con las expectativas para evaluar la calidad sanitaria de los alimentos de mayor consumo, por lo que es el indicador utilizado en la actualidad en los programas de vigilancia nacionales en lugar del indicador Enterobacterias. Enterococos. Designaciones como estreptococos fecales y estreptococos del grupo D de Lancenfield se emplearon como sinnimos de Enterococos. Las bacterias de este grupo consisten en clulas esfricas u ovoides, dispuestas en pares o cadenas cortas. La determinacin cuantitativa de Enterococos es bastante discutida, pues actualmente ha perdido vigencia como indicador de contaminacin fecal, ya que adems de encontrarse en las heces de mamferos, tambin se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza; son muy resistentes al calor, a la desecacin, a las bajas temperaturas, as como a los detergentes y desinfectantes. Su uso como indicador deber limitarse a situaciones en las que se sepa que son manifestaciones de polucin fecal, por ejemplo en las aguas de piscinas. A pesar de las limitaciones y las incertidumbres apuntadas, la presencia de gran nmero de enterococos en los alimentos, excepto en los fermentados por cepas especficas de estos microorganismos, implica prcticas inadecuadas de higiene o exposicin del alimento a condiciones que pudieran haber permitido la multiplicacin de estas bacterias.
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Los medios de cultivo para la deteccin de los Enterococos se basan en la tolerancia relativa a condiciones adversas utilizando compuestos qumicos como la azida de sodio para inhibir otros gneros de bacterias, casi siempre se utilizan mtodos de recuentos probables o NMP; tambin se puede aplicar el mtodo de placa vertida con el uso de medios diseados especficamente para este grupo. Hongos filamentosos y levaduras. Las levaduras y los hongos filamentosos crecen con ms lentitud que las bacterias en los alimentos no cidos que conservan humedad, y por ello pocas veces determinan problemas en tales alimentos. Sin embargo, en los alimentos cidos y en los de baja actividad acuosa, crecen con mayor rapidez que las bacterias. En general este indicador se usa en productos no perecederos que se someten a almacenamiento largo, como en productos deshidratados cuando el almacenamiento se realiza en condiciones inadecuadas. La presencia de hongos filamentosos, adems, representa un peligro potencial dada la capacidad de produccin de micotoxina por algunas especies. Algunos hongos filamentosos muestran especial resistencia al calor debido a las esporas que producen. La expresin de desarrollo de las levaduras en los alimentos se distingue del observado por los hongos filamentosos, mientras las primeras pueden proliferar en la masa interna del alimento (slido como los quesos, o lquidos como los jugos de frutas), los hongos filamentosos se limitan de ordinario a las superficies, visiblemente distintivos sin necesidad de aumento alguno. Para su determinacin casi siempre se utiliza el mtodo de placa vertida, se pueden emplear medios acidificados para inhibir el crecimiento microbiano o la adicin de un antibitico al medio de cultivo, la temperatura de incubacin es 25 C durante 5 das.

BIBLIOGRAFA
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CAPTULO 3

Principales bacterias patgenas en alimentos

Tamara K. Martino Zagovalov, Virginia Leyva Castillo y Yamila Puig Pea

Los trastornos gastrointestinales debido a la ingestin de alimentos pueden obedecer a diversas causas, por ejemplo: la ingestin de excesiva cantidad de alimentos, alergias, carencias nutritivas, verdaderos envenenamientos qumicos, por plantas o animales txicos, toxinas bacterianas e infecciones por microorganismos. Las enfermedades trasmitidas por los alimentos (ETA) de origen bacteriano son las que con mayor frecuencia se reportan a nivel mundial. El perfil de las causas microbianas de las ETA muestra en la actualidad matices muy singulares. La lista de patgenos se ha incrementado notablemente. En algunos casos se trata de microorganismos recientemente descubiertos, en otros, son microorganismos que perdieron vigencia de acuerdo con los reportes epidemiolgicos, pero han resurgido y se informan cada vez con mayor frecuencia, denominados microorganismos emergentes y reemergentes. Estos patgenos incluyen los virus tipo Norwalk, Campylobacter jejuni, E. coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Vibrio vulnificus, Vibrio cholera y Yersinia enterocolitica, Vibrio parahemolyticus, Cryptosporidium parvum, Cyclospora cayetanensis e Isospora belli. Algunos factores tienen una participacin muy evidente en ese incremento, por ejemplo, cambios genticos que se traducen en el incremento de la virulencia, nuevos patrones en los hbitos y costumbres alimentarias de la poblacin, cambios en los sistemas y las tecnologas aplicadas en la produccin y distribucin de los alimentos, entre otras.

CLASIFICACIN DE LAS ENFERMEDADES ALIMENTARIAS

Normalmente, el trmino intoxicacin alimentaria, aplicado a enfermedades producidas por el consumo de alimentos contaminados por microorganismos, es utilizado en un sentido muy amplio, sin tener en cuenta que ese trmino solo debe ser empleado para referirse a las enfermedades producidas por la ingestin de toxinas elaboradas por los microorganismos, y no para referirse a aquellas otras debido a la infeccin del hospedero a travs del tracto intestinal. Las enfermedades alimentarias se subdividen en intoxicaciones alimentarias como consecuencia de envenenamiento qumico o por la ingestin de toxina, la cual se puede encontrar de forma natural en determinadas plantas o animales;
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tambin pueden ser un producto de naturaleza txica que ha sido excretada o preformada por el microorganismo en el alimento. Segn esta clasificacin existen 2 tipos principales de intoxicaciones alimentarias producidas por bacterias: el botulismo, originado por la presencia en los alimentos de la toxina producida por Clostridium botulinum, y la intoxicacin estafiloccica, originada por una toxina producida en los alimentos debida al Staphylococcus aureus. Las bacterias que causan enfermedades gastroentricas, diferentes a la intoxicacin alimentaria, la producen por 2 mecanismos patognicos distintos: Elaboracin de enterotoxinas en la luz intestinal (mecanismo enterotoxignico). Penetracin a travs de la capa epitelial de la pared intestinal (mecanismo invasivo). En algunas infecciones, las bacterias actan por ambos mecanismos y en otras solo por uno de ellos. Los sntomas clnicos del clera son debidos exclusivamente a una enterotoxina, mientras que los efectos patgenos de la mayora de las Salmonellas se producen por penetracin e invasin de la mucosa intestinal.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS BACTERIAS PATGENAS QUE CON MAYOR FRECUENCIA SE AISLAN DE LOS ALIMENTOS
Salmonella. Es una bacteria patgena para el hombre y muchos animales, produce una enfermedad de origen alimentario conocida como salmonelosis, que se presenta en formas espordica y de brotes. Es la causa ms comn de ETA en diversos pases, en Cuba es el primer agente causal de brotes de origen alimentario. Salmonella es uno de los gneros ms estudiados entre los patgenos que pueden ser aislados de los alimentos. El primer brote de salmonelosis se describi en Alemania en 1888, entre 50 personas que haban ingerido carne cruda molida proveniente de una vaca moribunda. Los integrantes de este gnero son bacilos gramnegativos no esporulados oxidasa negativa, pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae. La mayora no fermentan la lactosa y son mviles, son aerobios o anaerobios facultativos, contienen endotoxinas, generalmente son termolbiles, resisten la congelacin y algunos agentes qumicos, poseen una rica composicin antignica que se emplea como base para la identificacin de sus miembros en serotipos, recientemente designados como serovares. En la actualidad existen ms de 2 500 serovares de Salmonella, todos considerados potencialmente patgenos al hombre. En los ltimos aos la aplicacin de tcnicas moleculares, basadas en anlisis y reacciones de material gentico, ha dado lugar a una reclasificacin de los serovares en un nuevo esquema de subespecies. Se reconocen 2 lneas primarias en la evolucin con las especies S. enterica y S. bongori, los miembros de la primera se dividen en 7 subespecies (I, II, IIIa, IIIb, IV, VI y VII). En el I se encuentran los serovares que causan enfermedad
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en humanos y animales de sangre caliente. En los grupos II al VII estn los serovares aislados de vertebrados de sangre fra. S. bongori se sita en el grupo V. Los factores de virulencia o atributos de patogenicidad de Salmonella incluyen: la habilidad para invadir clulas, poseer una cubierta completa de lipolisacrido (LPS), capacidad para replicarse intracelularmente y posibilidad de produccin de toxinas. En el mecanismo de patogenicidad se conoce que son necesarios plsmidos de elevado peso molecular que se asocian con la virulencia. Se conocen 3 formas clnicas de salmonelosis en el humano: gastroenteritis (causada por S. Typhimuriun, S. Enteritidis, etc.), fiebre entrica (causada por S. Typhi y S. Paratyphi) y una enfermedad invasiva sistmica (ocasionada por S. Cholerasuis). Las complicaciones menos comunes pero ms graves pueden ser: artritis y pericarditis; puede producir tambin un cuadro grave, con meningitis (infeccin de las membranas que cubren el cerebro), aborto y hasta la muerte. El perodo de incubacin es de 6 a 72 h, por lo regular de 12 a 36 h. Se distribuye mundialmente, se notifica con mayor frecuencia en los pases de Amrica del Norte y de Europa. Se clasifica como enfermedad de origen alimentario, pues los alimentos contaminados constituyen el modo predominante de trasmisin. Se puede trasmitir durante toda la evolucin de la infeccin, usualmente de unos das a varias semanas. A veces el estado de portador temporal contina durante meses, especialmente en los lactantes. Cerca del 1 % de los adultos infectados y del 5 % de los nios menores de 5 aos excretan el microorganismo por ms de un ao. Se considera que el reservorio de Salmonella es el tracto intestinal de animales y hombres. Estudios epidemiolgicos indican que las aves constituyen un importante reservorio. Algunos serotipos tienen poca especificidad de husped y pueden aislarse del tracto intestinal de animales de sangre fra. Otros serotipos muestran elevada especificidad de husped como: S. Typhi en humanos, S. Typhimuriun en ratones, S. Gallinarum en aves de corral, S. Dublin en bovinos, S. Anatum en patos, S. Cholerasuis en porcinos y S. Abortusovis en ovinos. Salmonella es una bacteria primariamente parsita intestinal de los animales incluido el hombre, se libera al medio ambiente por las heces, donde muestra determinada capacidad de supervivencia en los materiales que contacta; en condiciones favorables se multiplica, y los alimentos no son una excepcin. Se puede aislar del medio ambiente en general, lo que incluye agua, tierra, etc.; vegetales, animales salvajes, de explotacin, acuticos, domsticos y el hombre. La principal forma de contagio es la va oral, se puede trasmitir de manera directa a travs del contacto con las heces fecales de personas enfermas o por medio de alimentos (leche y sus derivados, verduras, frutas, carne, huevos, etc.) o agua contaminada y hasta por objetos infectados por moscas o ratas. Shigella. Es una de las bacterias patgenas que con mayor frecuencia causa infecciones intestinales en los nios, son comunes los brotes en condiciones de hacinamiento y en caso de deficiencia de la higiene personal, se distingue por poseer una dosis infectiva baja con respecto a otros patgenos.
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La especie Shigella dysenteriae produce casi siempre la enfermedad ms grave, que es la tpica disentera bacilar. Estas bacterias pertenecen a la familia de las Enterobacteriaceae, el gnero comprende 4 especies patgenas al hombre: Grupo A. Shigella dysenteriae. Grupo B. Shigella flexneri. Grupo C. Shigella boydii. Grupo D. Shigella sonnei. Shigellas es invasivas y penetran a travs de la mucosa intestinal, algunas cepas producen toxinas poderosas; sin embargo, incluso estas cepas precisan invadir la mucosa para determinar la enfermedad. La shigelosis es una disentera bacilar, la mayora de las personas infectadas con Shigella presentan diarrea, fiebre y calambres estomacales, toma del estado general, cefalea intensa y en ocasiones sntomas neurolgicos a partir de 24 a 48 h despus de su exposicin a la bacteria; la diarrea es a menudo sanguinolenta. Es comn que la shigelosis desaparezca en 5 a 7 das. En algunas personas, especialmente en los nios de corta edad y los ancianos, la diarrea puede ser tan grave que el paciente requiere ser hospitalizado. Una infeccin aguda con fiebre elevada tambin puede ir acompaada de ataques o convulsiones en nios menores de 2 aos de edad. Algunas personas infectadas pueden no tener ningn sntoma. El nico reservorio importante es el hombre; sin embargo, se han reportado brotes en colonias de primates. Shigella es un microorganismo de distribucin mundial, sus especies varan de una regin a otra, las ms frecuentes en pases subdesarrollados son S. dysenteriae y S. flexneri, y en pases desarrollados es S. sonnei. La trasmisin es fecal-oral directa o indirecta de un paciente o de un portador. La infeccin puede surgir despus de ingerir 10 a 100 clulas. Los principales causantes de la trasmisin son las personas que no se lavan las manos ni se limpian las uas minuciosamente despus de la defecacin, de esta manera diseminan la infeccin por contacto fsico directo o indirecto al contaminar los alimentos. Tambin las moscas pueden transportar microorganismos a un alimento no refrigerado en el cual se multiplican hasta constituir un inculo infectante. Una persona infectada puede contaminar el alimento o el agua. Escherichia coli Patgenas. Forma parte importante de la microbiota intestinal del hombre y de los animales de sangre caliente, sin embargo, algunas cepas han desarrollado capacidad para provocar enfermedad en el hombre, como son las infecciones gastrointestinales. Estas cepas patgenas representan la principal causa de diarrea infantil en el mundo. La capacidad de E. coli patgena para producir enfermedad est determinada por factores de virulencia que le permiten infectar a sus huspedes y sobreponerse a los mecanismos de defensa, como la produccin de adhesinas, enterotoxinas, citotoxinas y otras protenas que le permiten sobrevivir en condiciones ambientales adversas. Actualmente se reconocen 6 grupos de E. coli patgenas que dan lugar a diversos padecimientos, entre estos existen diferencias clnicas y epidemiolgicas,
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as como en la estructura antignica y mecanismos de patogenicidad de los diferentes grupos. Cepas patgenas de E. coli: Enteropatgena (ECEP). Enterotoxignica (ECET). Enteroinvasiva (ECEI). Enterohemorrgica (ECEH). Enteroadherente (ECEA). Enteroagregativa (ECEG). E. coli Enteropatgena. Constituye la especie ms vieja identificada de E. coli que causa diarrea, se conoce desde los aos 1940 y prcticamente afecta solo a los lactantes menores de 1 ao de edad. El hombre es un reservorio importante de este grupo. Los principales serogrupos incluidos entre estas cepas patgenas son: O55, O86, O111, O119, O125, O127, O128ab y O142. Las cepas de ECEP causan lesiones histolgicas de adherencia y esfacelamiento (A/E) en el epitelio intestinal sin posterior evidencia de invasin, seguidas por la destruccin de las microvellosidades. E. coli Enterotoxignica. Fue reconocida como causa importante de diarrea en Bangladesh e India en 1968. Constituye una causa importante de diarrea de los viajeros de pases industrializados a otros menos desarrollados, y producen un cuadro clnico similar al del clera; el perodo de incubacin oscila entre 8 y 44 h con una media de 26 h. Los sntomas clnicos son nusea con moderado dolor abdominal y diarrea. ECET despus de ser ingerida a travs del agua o alimentos contaminados debe sobrevivir al ambiente hostil del estmago y adherirse a las clulas epiteliales del intestino delgado, donde la cepa infectante elabora una enterotoxina termolbil, que se inactiva a 60 C en 30 min, otra termoestable, que resiste la ebullicin durante 30 min, o ambas. Los serogrupos ms comunes incluyen O6, O8, O15, O20, O25, O27, O63, O78, O80, O114, O115, O128AC, O148, O153, O159 y O167. E. coli Enteroinvasiva. Este grupo muestra semejanzas bioqumicas y posee antgenos que comparte con el gnero Shigella; ambas son inmviles, una porcin elevada de cepas de ECEI son anerognicas, as como fermentadores tardos de la lactosa y poseen la misma capacidad para depender de plsmido con el fin de invadir y multiplicarse dentro de las clulas epiteliales; desde el punto de vista clnico causa disentera. La diferencia en la virulencia entre estas bacterias patgenas radica en que en el caso de ECEI la dosis infectante que requiere es muy superior a la de Shigella. Se ha demostrado que estas cepas de E. coli poseen la capacidad de invasin del intestino. Los serogrupos principales incluyen O28ac, O29, O112, O124, O136, O143, O144, O152, O164 y O167. E. coli Enterohemorrgica. Fue identificada en 1982 en los Estados Unidos durante un brote epidmico de colitis hemorrgica en varios estados, y se demostr que era debido a un serotipo especfico. Este grupo incluye cepas de E. coli que causan procesos infecciosos, entre lo que destaca como complicacin la colitis hemorrgica (diarrea sanguinolenta severa) y el sndrome urmico
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hemoltico. La cepa mencionada elabora citotoxinas potentes, llamadas toxinas similares a shiga 1 y 2 (por su gran semejanza con las toxinas shiga de S. dysenteriae 1), tambin fueron llamadas toxinas vero I y II. La produccin de estas toxinas depende de la presencia de algunos fagos que transporta la bacteria. Adems, las cepas tienen un plsmido que codifica un nuevo tipo de fimbrias que intervienen en la adherencia de la bacteria a la mucosa intestinal. El serotipo O157:H7 es el prototipo del grupo y se considera una de las bacterias patgenas emergentes trasmitidas por alimentos ms importantes en los ltimos aos, tambin se ha dicho que intervienen como agentes patgenos serotipos como O26:H11 y O11:H8. E. coli O157:H7 fermenta la lactosa pero no el sorbitol dentro de 48 horas, no produce glucuronidasa -base de la reaccin de MUG- ampliamente utilizada para identificar E. coli y tiene adems como cualidad muy distintiva el hecho de que no se desarrolla a temperaturas superiores a 42 C. ECEH posee factores de virulencia como la produccin de factores de adherencia, de citotoxinas y enterohemolisinas, capacidad para transportar hierro y desarrollo de lesiones de adherencia y esfacelamiento (A/E) con destruccin de las microvellosidades del epitelio intestinal. Se ha aislado de carne de ganado vacuno, y hay una relacin muy grande de la enfermedad con el consumo de hamburguesa elaboradas con carne de ganado vacuno, tambin se ha aislado de carne de cerdo, de pollos y de carneros. E. coli Enteroadherente. Es el grupo de E. coli diarreognica ms recientemente conocido. Las cepas de este grupo no forman toxinas termolbiles ni termoestables, tampoco son invasivas. Se desconoce si todas las cepas adherentes provocan cuadros diarreicos. Aunque no hay penetracin, en las clulas infectadas se forman unas proyecciones dactiliformes que envuelven a las bacterias. La adhesin est determinada por unas fimbrias cuyos codificadores pueden existir en los cromosomas o en un plsmido. E. coli Enteroagregativa. Esta categora de E. coli que produce diarrea no se ha definido con exactitud. Ocasiona diarrea infantil en los pases menos desarrollados, y los datos preliminares sugieren que por lo menos en algunas zonas, determinadas cepas pueden causar diarrea persistente en lactantes. La bacteria no forma enterotoxinas, pero muestra la caracterstica de adherirse mediante fimbrias en agregados celulares a las clulas Hep-2 (empleadas para cultivo de virus). Yersinia enterocolitica. Es una bacteria invasiva, agente causal de una enfermedad trasmitida por alimentos conocida como yersiniosis. Presenta caractersticas que son comunes a los miembros de la familia Enterobacteriaceae; es un microorganismo con forma de bastn que presenta pleomorfismo significativo, gramnegativo, no esporulado, mvil a 25 C y las temperaturas inferiores a 29 C favorecen su crecimiento. La expresin de algunas caractersticas de esta especie depende de la temperatura a la cual se desarrolla; como crece a temperaturas de refrigeracin este procedimiento no es eficaz para frenar su crecimiento. Es destruida por el proceso de pasteurizacin. Comprende ms
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de 50 serotipos y 5 biotipos, muchos de los cuales no son patgenos. Las cepas patgenas por lo general incluyen serotipos O3, O8, O9 y O5,27 y biotipos 1, 2, 3 y 4; los serotipos patgenos O3, O9 y O5,27 explican gran parte de los casos en Europa. Aparte de esta especie, Y. pseudotuberculosis se reconoce como otra especie patgena del gnero que tambin produce gastroenteritis. Los factores de virulencia de Y. enterocolitica se encuentran en el cromosoma y en un plsmido, entre los que se hallan: la invasividad, la produccin de enterotoxina, la produccin de protenas que se relacionan con la captura del hierro, la adherencia, la resistencia al factor germicida del suero, la produccin de antgenos, etc. La infeccin debida a esta bacteria puede manifestarse por una diversidad de cuadros clnicos, el ms comn es la gastroenteritis con sndrome diarreico. Y. enterocolitica posee una distribucin cosmopolita, aunque tiene predileccin por las bajas temperaturas, esta caracterstica hace que la prctica de conservacin de los alimentos en fro para Y. enterocolitica no resulta efectiva, ya que posee la capacidad de multiplicarse a bajas temperaturas, por ejemplo, en leches conservadas en refrigeracin. Muchos animales son reservorios del microorganismo (gato, perros, monos y cerdos), por lo que la fuente de contaminacin ms importante son los animales domsticos y la fauna nociva, as como los utilizados en la alimentacin humana como es el caso del cerdo. Vibrio cholerae. Esta bacteria es un patgeno exclusivamente del hombre y ocupa un lugar destacado en la microbiologa mdica y sanitaria, por la devastadora forma en que muchos pases fueron afectados en los siglos XIX y XX, y el excepcional potencial para provocar pandemias de gran magnitud. La palabra clera, enfermedad que ocasiona este patgeno, trae a la mente la idea de catstrofe y muerte. A partir de 1800 se han presentado 7 pandemias. El gnero Vibrio consta al menos de 12 especies patgenas al hombre, de estas V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginolyticus, V. mimicus, V. hollisae y probablemente V. furnissii se distinguen como agentes causales de ETA. Pertenece a la familia Vibrionaceae y consisten en bacilos gramnegativos, rectos y curvos, mviles, no esporulados, termolbiles, aerobios y anaerobios facultativos, con un metabolismo oxidativo y fermentativo. V. cholerae lica la gelatina, descarboxila la ornitina, aunque no hidroliza la arginina, no utiliza citrato, no fermenta la lactosa o lo hace con retardo de 2 a 8 das, es ureasa y sulfdrico negativo, su crecimiento se favorece por reacciones alcalinas y es halotolerante. El clera es una enfermedad bacteriana aguda que se caracteriza por comienzo repentino de diarrea acuosa profusa sin dolor, vmitos ocasionales, deshidratacin rpida, acidosis y colapso circulatorio. El perodo de incubacin es de horas a 5 das, por lo regular de 2 a 3 das. La infeccin asintomtica es mucho ms frecuente que la aparicin del cuadro clnico, especialmente en el caso del biotipo Eltor; son comunes los casos leves en que solo hay diarrea, particularmente en los nios. En los casos graves no tratados la persona puede morir en el
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trmino de horas y la tasa de letalidad excede el 50 %, en casos tratados la tasa es menor que 1 %. Antiguamente se pensaba que el nico reservorio era el hombre, observaciones recientes en los Estados Unidos y Australia sugieren la presencia de reservorios en el ambiente, al parecer en coppodos u otro zooplancton. La trasmisin se realiza fundamentalmente por la ingestin de agua contaminada con heces de portadores, ingestin de alimentos no refrigerados contaminados por agua sucia, heces, manos sucias o posiblemente moscas. La ingestin de mariscos crudos o mal cocinados provenientes de aguas contaminadas ha ocasionado brotes y epidemias en diversos lugares. Vibrio parahaemolyticus. Es una bacteria patgena miembro de la familia Vibrionaceae, se considera la principal causante de enfermedad asociada con el consumo de alimentos en Japn. Tiene como caracterstica que es haloflica, pues requiere de cloruro de sodio para su crecimiento, esta cualidad guarda congruencia con su hbitat marino. Los alimentos marinos son los vehculos ms comunes para producir la enfermedad que consiste en una gastroenteritis moderada a severa. Su patogenicidad est asociada con la produccin de una hemolisina que es termoestable, es letal, citotxica y cardioptica. La termoestabilidad de la toxina es tal que su actividad biolgica puede mantenerse a niveles de riesgo de la salud humana, bajo las condiciones de coccin de alimentos marinos como el camarn. Aeromonas hydrophila. Se considera una bacteria patgena participante en las ETA, debido a las infecciones que provoca en individuos inmunodeficientes, tambin puede afectar personas sanas, por su capacidad para producir toxinas y otros factores de virulencia. El gnero Aeromonas perteneca a la familia Vibrionaceae, en la actualidad est ubicada en la familia Aeromonadaceae. Aeromonas no es halfila, es ubicua del ambiente acutico principalmente de aguas dulces; A. hydrophila es resistente al bixido de carbono, por lo cual constituye un microorganismo importante para la industria de los alimentos. Es mvil y la produccin de gas es dependiente de la temperatura. El microorganismo muestra amplia prevalencia en casi todos los alimentos crudos, tanto de origen animal como vegetal. La patogenicidad de Aeromonas se ha atribuido a la produccin de endotoxinas, enterotoxinas extracelulares, hemolisinas, citotoxinas y proteasas, as como a la capacidad para adherirse a las clulas y la posesin de algunas protenas superficiales. Muchas cepas de A. hydrophila son psicrtrofas y muestran capacidad para producir enterotoxinas y hemolisinas a temperatura de refrigeracin. Esta caracterstica ha sugerido que la ingestin de la toxina preformada en los alimentos tambin puede causar enfermedad gastrointestinal en los humanos. Plesiomonas shigelloides. Es un bacilo gramnegativo, forma parte de la familia Vibrionaceae, anaerobio facultativo, no esporulado, oxidasa positiva, mvil con flagelo lofotrico (provista de 2 a 5 flagelos), algunos clulas son monotricas, se desarrolla con temperatura mnima de 8 C, temperatura ptima de 30 a 37 C y mxima de 44 C, la tolerancia mxima de NaCl es de 5 %.
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La enteropatogenicidad de esta bacteria es motivo de controversia. No existen pruebas concluyentes de que tenga carcter patgeno plenamente demostrado, pero es aceptado como un patgeno potencial para el hombre. Como ocurre con otras bacterias, posee de 2 a 5 flagelos (lofotrica), lo que la distingue del resto de los miembros mviles de esta familia. Es considerada un patgeno invasivo oportunista, aunque su mecanismo de enteropatogenicidad es incierto hasta estos momentos. Staphylococcus aureus. Fue descubierto en 1882 por Rosenbach. Su potencial patgeno para el hombre y los animales se manifiesta de diversas formas. En la microbiologa sanitaria tiene especial inters tanto por las enterotoxinas que produce, como por el significado que se deriva de su presencia y cantidad en un alimento. St. aureus es una bacteria que pertenece a la familia Micrococcaceae, consiste en clulas esfricas (cocos) grampositivas, termolbiles, coagulasa positiva, aerobio facultativo, inmvil, no esporulado, que resisten concentraciones relativamente altas de sal, producen hemlisis y fermentan el manitol, entre otras propiedades. El hombre en casi todos los casos es el reservorio principal y en ocasiones las vacas con las ubres infectadas, as como perros y aves de corral. La enfermedad se manifiesta como una intoxicacin de comienzo repentino y a veces violento, los sntomas pueden aparecer entre 30 min y 8 h de haber consumido el alimento, con una media entre 2 y 4 h, con nuseas, clico, vmitos y postracin, a menudo se acompaa de diarrea e hipotensin arterial. La muerte es rara, por lo general la enfermedad no dura ms de 1 2 das. La intoxicacin comienza por la ingestin de un producto alimentario que contiene enterotoxina estafiloccica. Los alimentos daados son los que estuvieron en contacto con las manos de personas que los manipularon sin haberlo cocido ms tarde o sin calentarlos o refrigerarlos de manera adecuada, como pasteles, flanes, aderezos de ensaladas, emparedados, etc. La toxina tambin se genera en el jamn y salami mal curados o en quesos mal elaborados. Cuando estos alimentos permanecen a temperatura ambiente durante varias horas antes de ser ingeridos, los estafilococos productores de toxina se multiplican y elaboran la toxina. Los microorganismos pueden ser de origen humano (secreciones purulentas de dedos u ojos infectados, abscesos, erupciones faciales acneiformes, secreciones nasofarngeas o de piel al parecer normal, tambin pueden provenir de productos bovinos, como la leche o los productos lcteos contaminados. Bacillus cereus. Como otras especies del gnero Bacillus, se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, es un bacilo grampositivo, corto con extremos cuadrados o redondeados, que forma cadenas cortas o hasta de 10 clulas, aerobio, esporulado con esporas elipsoidales, centrales o subterminales que no distienden el esporangio, es mvil, capaz de hidrolizar el almidn, la casena y la gelatina. Las esporas de B. cereus no muestran resistencia especial al calor, pero poseen resistencia inslita a la radiacin y a los desinfectantes en comparacin con la mayora de las bacterias mesfilas esporuladas. Produce
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una "intoxicacin" que en algunos casos se caracteriza por nuseas y vmito de comienzo repentino (emtica), es menos frecuente la aparicin de diarrea y dolores abdominales; rara vez es mortal y el cuadro es muy parecido al de la intoxicacin estafiloccica. En otros casos se produce una enfermedad caracterizada por clicos y diarrea acuosa profusa, raramente se observa fiebre o vmito. Si la diarrea es grave en grupos de riesgo como ancianos, nios y pacientes inmunodeprimidos puede observarse deshidratacin. La enfermedad se produce por la ingestin de alimentos que han sido conservados a temperatura ambiente despus de su coccin, lo cual ha permitido la multiplicacin de los microorganismos. Los brotes acompaados por vmitos, a menudo se relacionan con la ingestin de arroz cocido que despus de la coccin se ha conservado a temperatura ambiente, antes de recalentarlo. Por lo general, se necesitan ms de 105 microorganismos por gramo del alimento para causar enfermedad. En la enfermedad diarreica el perodo de incubacin es de 8 a 16 h. En la enfermedad emtica el perodo de incubacin es corto, de 1 a 5 h tras la ingestin del alimento. La duracin de la enfermedad es de 6 a 24 h. B. cereus est muy difundido en la naturaleza; se asla con facilidad en el suelo, en el polvo, en las cosechas de cereales, en la vegetacin, en el pelo de los animales, en el agua dulce y en los sedimentos. No es sorprendente encontrar el organismo en el interior o en la superficie de casi todos los productos agrcolas frescos, tambin pueden encontrarse en los alimentos crudos, secos y elaborados. La incidencia de B. cereus en productos alimenticios es muy amplia, aunque su frecuencia es mayor en cremas, postres, productos crnicos y vegetales, as como en leche y productos lcteos sometidos a UHT. Asimismo, destaca su elevada presencia en el arroz, las pastas alimenticias y las especias. Al igual que Clostridium perfringens, es habitual en los productos sometidos a coccin, tratamiento que deja una flora residual de esporas. En ausencia de microorganismos competitivos, B. cereus es capaz de multiplicarse con facilidad si el producto cocido se mantiene dentro de la escala de temperaturas de crecimiento del organismo (sobre todo en la comida china lista para llevar), produciendo la toxina en el alimento. Clostridium botulinum. Van Ermengem en 1897 demostr por primera vez que el botulismo poda resultar del consumo de alimentos en los que Cl. botulinum haba desarrollado y formado una toxina. Gran parte de la investigacin acerca de esta bacteria patgena se hizo en relacin con la rpida expansin de la industria del enlatado, y por la preocupacin de los peligros inherentes al consumo de productos tratados de forma insuficiente. El gnero Clostridium comprende bacilos grampositivos, la mayora mviles, anaerobios obligados, formadores de endosporas. Cl. botulinum no es un grupo muy homogneo, la caracterstica que comparten y que mantiene a la diversidad de microorganismos que conforman la especie es su potencial neurotoxignico. Las diferencias entre las numerosas cepas de Cl. botulinum dan lugar a distintos esquemas de clasificacin, los criterios ms usados son la serologa de las toxinas y las propiedades metablicas expresadas en cultivos.
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Cl. botulinum es un bacilo muy robusto que llega a exhibir filamentos largos, nunca ramificados, es termorresistente, la espora que forma es subterminal y oval y deforma el cuerpo bacteriano; se reconocen 8 tipos de Cl. botulinum segn la especificidad antignica. Los tipos C y D se asocian con el botulismo en animales. Los casos humanos pertenecen a los tipos A, B y E, del tipo F solo se han reportado 6 casos, incluso el botulismo infantil. La toxina botulnica es muy potente pero tiene como caracterstica importante que es termolbil, se destruye a 100 C (durante 10 a 15 min.). Algunas cepas se comportan como psicrtrofas, las esporas sobreviven indefinidamente en los alimentos congelados y las del tipo E puede sobrevivir la desecacin. Hay cepas que son proteolticas. La inhibicin de Cl. botulinum se obtiene por la incorporacin en los alimentos enlatados de conservadores qumicos del tipo sorbato, especialmente en combinacin con nitritos o polifosfatos. El botulismo es una autntica intoxicacin alimentaria. El mecanismo de patogenicidad de Cl. botulinum viene dado porque al producirse la toxina botulnica termolbil esta acta provocando la parlisis muscular flccida y muerte por asfixia. La toxina acta sobre la unin neuromuscular, bloqueando la liberacin de acetilcolina, trasmisor esencial para la contraccin muscular. Clostridium perfringens. Es un bacilo recto grampositivo, corto, esporulado, grueso con extremos terminales redondeados, est rodeado por una cpsula y es inmvil; forma una espora terminal oval que casi nunca es visible en los medios ordinarios. Es anaerobio aunque algunos investigadores lo acomodan mejor en el grupo de los microaerfilos, por su capacidad para iniciar el crecimiento sin condiciones rigurosas de anaerobiosis. Exhibe especial susceptibilidad a las bajas temperaturas, incluso cuando esporula. La resistencia al calor de las esporas es variable, segn la cepa; desde un inicio se plante que las cepas termorresistentes correspondan a las asociadas con brotes de gastroenteritis alimentaria, en tanto, ms bien las termosensibles eran productoras de gangrena gaseosa; actualmente no se acepta la validez de estas generalizaciones. La enfermedad se caracteriza por trastorno intestinal con aparicin repentina de clicos, seguidos de diarrea. La enfermedad alimentaria producida por Cl. perfringens se considera ms que una intoxicacin -una infeccin. La nusea es comn, pero por lo regular no aparecen vmitos ni fiebre, generalmente es una enfermedad leve de corta duracin, de un da o menos y rara vez causa la muerte en las personas sanas. Existe otra enfermedad ms severa pero menos frecuente, causada por ingerir un alimento contaminado con las cepas del tipo C de la misma, conocida como enteritis necrtica o como la enfermedad pig-bel. La enteritis necrtica es frecuentemente fatal; esta enfermedad tambin se inicia como resultado de la ingesta de gran nmero de bacterias de este tipo en los alimentos contaminados. Las muertes debidas a la enteritis necrtica son causadas por la infeccin y la necrosis de los intestinos as como tambin por la septicemia.
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La causa ms comn de aparicin de la enfermedad ocurre cuando gran cantidad de alimentos se preparan con mucha anticipacin y no se conservan de manera adecuada, entonces el microorganismo alcanza elevados tenores y al ser consumido el alimento aparece la enfermedad despus de un perodo de incubacin de 6 a 24 h, por lo regular de 10 a 12 h. Cl. perfringens se encuentra entre las bacterias patgenas ms ampliamente distribuidas en la naturaleza, ya que se encuentra en el suelo y en el intestino del hombre y animales (ganado vacuno, cerdos, aves de corral y peces). Las esporas de esta bacteria estn presentes en el suelo, sedimentos y reas a expensas de la polucin fecal por humanos y animales. Puede estar presente en los productos lcteos sin pasteurizar, as como en las verduras y cultivos que entran en contacto con la tierra. La infeccin puede ocurrir cuando las sopas, los guisos y las salsas hechos con carne, pescado o aves de corral se guardan de forma incorrecta o se dejan sin refrigerar durante varias horas. Las carnes y derivados as como los caldos de carne son los ms peligrosos. Listeria monocytogenes. Constituye una bacteria patgena emergente, reconocida como agente causal en ETA a partir de los aos 80 del siglo XX, por la ocurrencia de numerosos brotes de origen alimentario de los cuales fue el microorganismo responsable. Previo a esta fecha se conocan algunos casos de listeriosis (enfermedad que produce), incluso letales, pero al germen se le consideraba ms bien un patgeno oportunista. L. monocytogenes no siempre se relaciona con la enfermedad, se encuentra en los ambientes ms diversos, posee sorprendente resistencia al medio, son capaz de sobrevivir y multiplicarse en condiciones de temperatura y pH que no resultan de ordinario habituales en otros organismos patgenos, afines o no. El gnero Listeria est formado por 6 especies, de la cual L. monocytogenes es la especie tipo. L. monocytogenes es un bacilo corto grampositivo, aerobio facultativo, no esporulado, mvil entre 20 y 25 C; es mesfilo, aunque capaz de crecer en temperaturas que van desde -4,4 C hasta 45 C. Es termolbil, sin embargo se considera ms resistente al calor que otros patgenos, como Salmonella; sobrevive la desecacin; tolera y crece sin problemas en concentraciones de 10 % de cloruro de sodio y sobrevive a valores de hasta 20-30 %. L. monocytogenes es una bacteria invasiva, sus mecanismos de patogenicidad son poco entendidos an, la caracterstica ms importante del germen es su capacidad para sobrevivir y multiplicarse en los macrfagos. Solo la listerolisina O y la protena p60 son reconocidos como determinantes esenciales en la virulencia. Todo parece indicar que la protena p60 promueve la adherencia y penetracin de L. monocytogenes a las clulas fagocticas, mediante la induccin de su propia fagocitosis; una vez dentro, la listerolisina O, una hemolisina cuya produccin es regulada por el cromosoma, lisa las vacuolas fagocticas y libera hierro intracelular, permitiendo la supervivencia, multiplicacin y posterior diseminacin del microorganismo.
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Campylobacter jejuni y otras especies bacterianas relacionadas han sido reportadas como agentes causales en gran nmero de casos de diarrea aguda en casi todo el mundo. Esta especie adquiri importancia a partir de la dcada de 1980 por su aislamiento en elevado porcentaje de casos con diarrea. La familia Campylobacteriaceae fue denominada recientemente y contina siendo motivo de reagrupamientos con nuevas especies y subespecies. Campylobacter constituye un gnero que incluye varias especies que producen enfermedad trasmitida a travs de los alimentos, las 2 subespecies de C. jejuni (C. jejuni jejuni y C. jejunidoylei) son las que ms inters muestran para la salud pblica y la higiene de los alimentos, junto con Campylobacter coli, este ltimo es difcil de diferenciar de C. jejuni desde el punto de vista patolgico, y sus fuente de infeccin son bsicamente las mismas. C. jejuni se caracteriza por ser bacilos delgados, curveados en forma de espiral, no esporulados. Su movilidad es caracterstica, en forma de sacacorchos, poseen un solo flagelo polar por uno o ambos lados, no utilizan ningn carbohidrato, y son gramnegativos y microaerfilos. Los mecanismos de virulencia de este microorganismo difieren de otros enteropatgenos. En una revisin acerca de los mecanismos de colonizacin de C. jejuni se seala que el microorganismo no se adhiere a la superficie del tejido intestinal de ratones gnotobiticos, ms bien presenta una movilidad muy activa en l, desplazndose rpidamente a lo largo de la mucosa intestinal, o sea, la asociacin con la mucosa intestinal no est influida por adhesinas, sino por la gran movilidad de este microorganismo, lo cual unido a su morfologa le confiere ventaja para desplazarse en un ambiente viscoso como es la mucosa intestinal. El mecanismo de virulencia de C. jejuni parece estar determinado por la cepa del microorganismo, la invasin parece ser el mecanismo ms probable por el cual causa diarreas en humanos, as mismo se propone que esta invasividad se encuentra mediada por una actividad citotxica; sin embargo, otros investigadores encontraron que algunas cepas producen una enterotoxina termolbil semejante a la toxina colrica. Parece que C. jejuni puede causar enfermedad mediante invasividad o por produccin de enterotoxinas semejantes a la colrica, y que el mecanismo de patogenicidad determina las caractersticas clnicas de la enfermedad. C. jejuni vive en el tracto intestinal de gran diversidad de animales de sangre caliente, sin dao aparente, ejemplo: bovinos, ovinos, patos, pollos y animales domstico como perro y gato.

BIBLIOGRAFA
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CAPTULO 4

Factores que influyen en el crecimiento y supervivencia de los microorganismos

Virginia Leyva Castillo, Tamara K. Martino Zagovalov y Yamila Puig Pea

Los alimentos que consumimos casi nunca se encuentran estriles, sino que contienen asociaciones microbianas cuya composicin depende de qu organismo llegan a l y de cmo se multiplican, sobreviven e interaccionan en el alimento durante el transcurso del tiempo. Los microorganismos en los alimentos procedern tanto de la microbiota de la materia prima como los que se introducen durante las operaciones de recoleccin-sacrificio, tratamiento, almacenamiento y distribucin. Los tipos y cantidad de microorganismos sern determinados por las propiedades del alimento, por la atmsfera donde se almacena, por las caractersticas de los propios microorganismos y por los efectos del tratamiento. En el proceso de elaboracin de alimentos, cuando se cumple con las reglas de higiene o con las buenas prcticas de elaboracin, en toda la cadena del proceso, esta microbiota no ejerce un efecto aparente y el alimento puede ser consumido sin consecuencias adversas. En caso contrario, los microorganismos pueden manifestar su presencia en una de las formas siguientes: Causando alteracin de los alimentos. Provocando enfermedades trasmitidas por los alimentos. En algunos casos, de forma intencional en la elaboracin de un alimento, se transforman sus propiedades de una forma beneficiosa mediante su fermentacin.

CRECIMIENTO MICROBIANO
El crecimiento microbiano es un proceso autocataltico: no habr crecimiento sin la presencia de al menos una clula viable, y la tasa de crecimiento aumentar de acuerdo con la cantidad de biomasa viable presente. La pauta de crecimiento es la misma para bacterias y hongos. Las bacterias requieren determinadas condiciones para multiplicarse rpidamente, esta multiplicacin rpida es la que causa problemas relacionados con la seguridad del alimento. En condiciones ideales este crecimiento rpido puede llegar a un tiempo de generacin menor que 20 min. Si realizamos el experimento para determinar el nmero de microorganismos en relacin con el tiempo y despus representamos en una grfica el logaritmo
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de los microorganismos viables frente al tiempo, se obtiene la curva que se representa en el captulo 1, en la que se aprecia que el crecimiento exponencial solo tiene lugar durante una parte del tiempo. No es necesario hacer mucho nfasis en la importancia del crecimiento exponencial en el tratamiento de los alimentos, una sola bacteria con un tiempo de generacin de 20 min que crece en un alimento, puede producir una poblacin celular superior a 107 microorganismos/g o mL en 8 h. Por lo tanto la misin principal del microbilogo de alimentos y de los especialistas en higiene de los alimentos es conocer qu es lo que influye en el crecimiento microbiano con vistas a controlarlo. Si se tiene en cuenta que normalmente la microbiota de un alimento nunca est compuesta por un solo tipo de microorganismo durante el crecimiento, recoleccin/sacrificio, tratamiento y almacenamiento, el alimento est sujeto a contaminacin de diversa procedencia. Algunos microorganismos sern capaces de crecer juntos en lo que se conoce como una asociacin, cuya composicin cambiar en el transcurso del tiempo. Los factores que influyen en el crecimiento microbiano en los alimentos y por tanto las asociaciones que se desarrollan, tambin determinan la naturaleza de la alteracin y cualquier riesgo para la salud que se planteen. La fase logartmica de crecimiento puede verse afectada si se acorta su longitud, controlando los factores de crecimiento. Hace ms de 40 aos Mossel e Ingram dividieron estos factores en 4 grupos: Propiedades fsico-qumicas del propio alimento (factores intrnsecos). Condiciones del ambiente del almacenamiento (factores extrnsecos). Propiedades e interacciones de los microorganismos presentes (factores implcitos). Factores del tratamiento, este ltimo incluido por Mossel e Ingram entre los factores intrnsecos. Factores que influyen en el desarrollo de las asociaciones microbianas en los alimentos: Factores intrnsecos: Nutrientes. pH. Potencial redox. Actividad de agua. Constituyentes antimicrobianos. Estructuras biolgicas. Factores ambientales o extrnsecos: Humedad relativa. Temperatura. Atmsfera gaseosa.
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FACTORES

INTRNSECOS

Contenido de nutrientes. Del mismo modo que los seres humanos, los microorganismos son capaces de utilizar los alimentos como fuente de nutrientes y de energa. Los microorganismos en los alimentos, para multiplicarse y desarrollar su fisiologismo normal, necesitan los elementos siguientes: Agua. Fuente de energa. Fuente de nitrgeno y vitaminas. Factores de crecimiento afines, como sales minerales. Los microorganismos que se encuentran en los alimentos pueden utilizar azcares, alcoholes y aminocidos propios de los alimentos como fuente de energa. La incapacidad de un organismo para emplear un componente mayoritario de un material alimenticio limitar su crecimiento y lo situar en desventaja competitiva comparado con aquellos que no son capaces de utilizarlo. Algunos usan como fuente de energa carbohidratos complejos, como son los almidones por poseer enzimas amilolticas y la celulosa, por tener la posibilidad de degradar primeramente estos compuestos a azcares sencillos, esto favorecer el crecimiento de un determinado organismo en los cereales y en otros productos farinceos. La adicin al yogurt de frutas que contiene sacarosa y otros azcares aumenta la gama de carbohidratos disponibles y permite el desarrollo de una microbiota variada de levaduras causantes de alteracin. Las grasas tambin son utilizadas por un reducido e insignificante nmero de microorganismos como fuentes de energa. En general los microorganismos utilizan compuestos simples como los aminocidos, antes de tener que atacar compuestos complejos, como las protenas de elevado peso molecular, por tanto las principales fuentes de nitrgeno de los microorganismos hetertrofos son los aminocidos. En condiciones ideales la concentracin de nutrientes indispensables puede, hasta cierto punto, determinar la velocidad de crecimiento microbiano. pH. Tal y como se determina en un electrodo de vidrio, el pH es el logaritmo negativo de la concentracin del in hidrgeno de cualquier solucin. En trminos simple el pH de un alimento es la medida de su acidez o alcalinidad, teniendo en cuenta que la escala de pH comienza en cero y termina en 14; que una solucin de pH de 7 es considerada como neutra, que los pH menores que 7 son considerados como cidos y mayores como alcalinos. La acidez o la alcalinidad de un medio tienen gran influencia en la estabilidad de macromolculas tales como las enzimas, lo que justifica que tanto el crecimiento como el metabolismo de los microorganismos estn influidos por el pH. En general, las bacterias crecen con mayor rapidez a pH comprendido entre 6,0 y 8,0 (tabla 4.1), las levaduras entre 4,5 y 6,0, as como los hongos filamentosos entre 3,5 y 4,0; aunque hay bacterias capaces de crecer a pH bajos como consecuencia de su metabolismo productor de energa, por ejemplo, los
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lactobacilos y las bacterias acticas cuyo crecimiento ptimo generalmente tiene lugar a un pH comprendido entre 5,0 y 6,0. Si a un alimento se le cambia el pH, ya sea por encima o por debajo del neutro, los microorganismos crecern con mayor lentitud.
Tabla 4.1. Lmites de pH segn tipo de microorganismo pHmnimo Bacterias gramnegativas Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus vulgaris Pseudomonas aeruginosa Salmonella paratyphi Salmonella typhi Vibrio parahaemolyticus Bacterias grampositivas Bacillus cereus Bacillus subtilis Bacillus stearothermophillus Clostridium botulinum Clostridium sporogenes Enterococcus spp. Staphylococcus aureus Streptococcus lacti pHmximo

4,4 4,4 4,4 5,6 4,5 4,0-4,5 4,8 4,9 4,5 5,2 4,7 5,0 4,8 4,0 4,3-4,8

9 9 9,2 8 7,8 8,0-9,6 11,0 9,3 8,5 9,2 8,5 9,0 10,6 9,8 9,2

La mayora de los alimentos son, cuando menos, ligeramente cidos (tablas 4.2 y 4.3), ya que los materiales cuyo pH es alcalino casi siempre tienen un sabor bastante desagradable. La clara de huevo, cuyo pH aumenta hasta cerca de 9,2 a medida que el dixido de carbono es eliminado del huevo despus de ser puesto este, constituye una excepcin comn a lo expuesto. Un ejemplo que algunos tomaran como prueba convincente de la no comestibilidad de los alimentos alcalinos es el tiburn fermentado, que se elabora en Groenlandia, y que tiene un pH de 10 a 12. Aunque la mayora de los alimentos son de naturaleza cida, o sea que tienen el pH por debajo de 7, otros son ms cidos, tienen el pH por debajo de 4,6 como por ejemplo el vinagre, algunas frutas, los alimentos en salmuera, el yogurt, la mayonesa, etc. Por debajo de 4,6 la mayora de los microorganismos patgenos no crecen o lo hacen muy lentamente, por tanto, en general los alimentos cidos no constituyen un problema para la salud, en estos pH suelen crecer microorganismos alteradores que pueden cambiar la textura y la apariencia del alimento. La acidez de un producto puede tener importantes implicaciones tanto en su ecologa microbiana como en la rapidez y naturaleza de su alteracin, por ejemplo, los productos vegetales clasificados como hortalizas casi siempre tienen un pH ligeramente cido y las bacterias productoras de putrefaccin blanda, como Erwinia carotovora y Pseudomonas desempean un importante papel en su alteracin. En las frutas, sin embargo, un pH ms bajo impide el crecimiento bacteriano y de aqu que su alteracin sea dominada por levaduras y mohos.
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Tabla 4.2. Valores de pH aproximados de algunas frutas y hortalizas frescas Producto pH Hortalizas Esprragos (yemas y tallos) 5,7-6,1 Judas (vedes y limas) 4,6-6,5 Remolacha 4,2-4,4 Zanahorias 4,9-5,2; 6,0 Coliflor 5,6 Berenjena 4,5 Lechuga 6,0 Aceitunas 3,6-3,8 Cebollas rojas 5,3-5,8 Perejil 5,7-6,0 Patatas (tubrculos y boniatos) 5,3-5,6 Calabaza 4,8-5,2 Tomates entero 4,2-4,3 Nabos 5,2-5,5 Frutas Manzanas 2,9-3,3 Pltanos 4,5-4,7 Higos 4,6 Limas 1,8-2,0 Melones 6,3-6,7 Naranjas 3,6-4,3 Ciruelas 2,8-4,6 Tabla 4.3. Valores de pH aproximados de los productos lcteos, de las carnes y de los productos pesqueros Producto Productos lcteos Mantequilla Suero de mantequilla Leche Nata Queso (suave americano Cheddar) Pescados y mariscos Pescado (casi todas las especies inmediatamente despus de la muerte) Almejas Cangrejos Ostras Atn Camarn Salmn Pescado blanco Carnes Vaca picada Jamn Ternera Pollo pH 6,1-6,4 4,5 6,3-6,5 6,5 4,9-5,9

6,6-6,8 6,5 7,0 4,8-6,3 5,2-6,1 6,8-7,2 6,1-6,3 5,5 5,1-6,2 5,9-6,2 6,0 6,2-6,4 47

La capacidad del pH bajo para limitar el crecimiento microbiano ha sido aprovechado de forma deliberada, desde los tiempos ms antiguos en la conservacin de alimentos con los cidos acticos y lctico. Los pH bajos ayudan a la conservacin de los alimentos de las formas siguientes: Directamente, inhibiendo el crecimiento microbiano. Indirectamente, disminuyendo la resistencia al calor de los microorganismos en los alimentos que se someten a tratamiento trmico. Potencial Redox (Eh). Una reaccin de oxidacin-reduccin (O/R) o de potencial redox (Eh) se produce como consecuencia de una transferencia de electrones entre tomos o entre molculas. Desde hace muchos aos se conoce que los microorganismos presentan diferentes grados de sensibilidad al potencial de oxidacin-reduccin del medio de cultivo. En general, el potencial redox de un sustrato se puede definir como aquel en el que el sustrato pierde o gana electrones con mayor facilidad. Cuando un elemento o compuesto pierde electrones, se dice que el sustrato ha sido oxidado, mientras que un sustrato que gana electrones se ha reducido. Oxidacin Cu Reduccin Tambin se puede obtener oxidacin por adicin de oxgeno, como se indica en la reaccin siguiente: Cu + O2 2CuO Cu + e

Por tanto, una sustancia que fcilmente cede electrones es un buen agente reductor, mientras que otra que capte es un buen agente oxidante. Cuando pasan electrones de un compuesto a otro se crea una diferencia de potencial entre ambos, esta diferencia se mide frente a una referencia externa por medio de un electrodo de metal inerte casi siempre de platino sumergido en un medio, y se expresa en milivoltios (mV). Cuanto ms oxidada est una sustancia, ms positivo ser su potencial elctrico y cuanto ms reducida, ms negativo su potencial. En relacin con los microorganismos, el potencial redox indica las relaciones de oxgeno entre ellos, y es utilizado para especificar el ambiente en que un microorganismo es capaz de generar energa y sintetizar nuevas clulas. Los microorganismos aerobios necesitan para crecer valores redox positivos, mientras que los anaerobios frecuentemente requieren valores negativos. Los microorganismos de acuerdo con su potencial de oxidacin-reduccin se dividen en los grupos siguientes: aerobios estrictos, anaerobios estrictos, anaerobios facultativos y microaerfilos.
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Aerobios estrictos. Los microorganismos aerobios estrictos en el hbitat de los alimentos usan el oxgeno como aceptor final de electrones en la respiracin (Bacillus subtilis, B. megaterium, Acinetobacter, etc.), por consiguiente, tienen necesidad de oxgeno y de elevado Eh, por lo que predominarn en la superficie de los alimentos expuestos al aire o en aquellas zonas de los mismos en las que el aire pueda ser utilizado fcilmente; de manera que Pseudomonas, por ejemplo, Ps. fluorescens que crece a un Eh comprendido entre +100 y +500 mV. Otros bacilos gramnegativos oxidativos producen muclagos y olores desagradables en la superficie de la carne, Bacillus subtilis posee un potencial redox de crecimiento comprendido entre -100 y +135 mV, produce viscosidad en la textura abierta del pan y las especies de Acetobacter que crecen en la superficie de las bebidas alcohlicas, oxidan el etanol a cido actico para producir alteracin o vinagre. Anaerobios estrictos. Los microorganismos anaerobios obligados solo tienden a crecer a potenciales redox bajos o negativos, no pueden utilizar el oxgeno como aceptor final de electrones; dentro de ellos los Clostridios tienen gran importancia en microbiologa de los alimentos. Tienen la posibilidad de crecer donde las condiciones sean anaerobias, por ejemplo, en la profundidad de los tejidos y en los estofados de carne, en los alimentos envasados y enlatados al vaco causando alteracin. Entre los microorganismos anaerobios ms importante para la salud pblica se encuentra Clostridium botulinum. Anaerobios facultativos. Los anaerobios facultativos como los que forman las familias Vibrionaceae, Enterobacteriaceae y Corynebacteriaceae pueden utilizar el oxgeno como aceptor final de electrones, pero en su ausencia tambin pueden utilizar una diversidad de aceptores de electrones (NO3-, SO42-). Estos organismos pueden crecer en la superficie y en el interior de los alimentos, algunos poseen actividad proteoltica o lipoltica. Con frecuencia sus productos de desechos son cidos orgnicos. Debido a su profusa distribucin, su amplio rango de actividad enzimtica y su capacidad para descomponer los compuestos orgnicos, dichos microorganismos pueden competir en una amplia gama de ambientes y con frecuencia son responsables de la alteracin de los alimentos de bajo Eh; a esto se debe que sean importantes microorganismos alteradores de los alimentos; aunque algunos como los lactobacilos se pueden utilizar para cambios beneficiosos en la elaboracin de varios alimentos. Algunos microorganismos anaerobios facultativos como las enterobacterias tienen gran relevancia para la salud pblica. Microaerfilos. Estos microorganismos necesitan una cantidad muy reducida de oxgeno para su crecimiento, lo cual se debe tener en cuenta a la hora de cultivarlo en el laboratorio, uno de los microorganismos importantes desde el punto de vista de enfermedad para el humano a travs de los alimentos es Campylobacter spp. Actividad de Agua. La vida tal y como nosotros la conocemos depende totalmente de la presencia de agua en estado lquido, por tanto los microorganismos necesitan de agua libre o disponible para su crecimiento. Los solutos como sal y azcar, as como los mecanismos de deshidratacin disminuyen el agua disponible y reducen el rango de crecimiento microbiano.
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La actividad acuosa de un alimento o solucin (Aa) se define como el cociente entre la presin parcial del agua existente en la atmsfera en equilibrio con el sustrato (alimento) (P) y la presin parcial de la atmsfera en equilibrio con el agua pura a la misma temperatura: Aa = P/Po. Este cociente es equivalente a la humedad relativa de equilibrio (HRE) expresada como fraccin en lugar de porcentaje: Aa=P/Po=1/100 HRE La humedad relativa de equilibrio tiene importantes repercusiones en el almacenamiento de alimentos de baja Aa. A medida que una solucin se concentra la presin de vapor disminuye y la actividad acuosa va disminuyendo a partir de un valor mximo de 1 para el agua pura. La mayora de los microorganismos incluyendo las bacterias patgenas crecen ms rpidamente a niveles de Aa de 0,993 a 0,998 (tablas 4.4 y 4.5). A valores inferiores de Aa, la velocidad de crecimiento o la masa celular final disminuye y la fase de latencia aumenta.
Tabla 4.4. Actividades de agua mnimas a las que puede haber crecimiento activo Grupo de microorganismos Mayora de bacterias gramnegativas Mayora de bacterias gramnegativas Mayora de levaduras Aa mnima 0,97 0,90 0,88 Grupo de microorganismos Mayora de hongos Bacterias halfilas Hongos xerfilos Aa mnima 0,80 0,75 0,61

Tabla 4.5. Niveles mnimos de activad acuosa que permiten el crecimiento de los microorganismos que se citan a temperaturas prximas a la ptima Microorganismos Mohos Alternaria citri A. fumigatus P. islandicum A. flavus Levaduras S. cerevisiae Debaromyces hansenii S. rouxii Bacterias C. botulinum tipo E C. botulinum tipo A B. cereus C. perfringens E, coli Salmonella spp. C. botulinum tipo B V. parahaemolyticus S. aureus Halobacterium halobium 50 Aa 0,84 0,82 0,83 0,78 0,90 0,83 0,62 0,97 0,95 0,95 0,95 0,95 0,95 0,94 0,94 0,86 0,75

Principales razones para la no disponibilidad del agua por los microorganismos: Los solutos y los iones fijan agua de la disolucin. El aumento de la concentracin de las sustancias disueltas (azcares o sales) equivale a una deshidratacin. Los coloides hidrfilos (geles) impiden la disponibilidad del agua. El agua de cristalizacin o de hidratacin no suele ser asequible a los microorganismos, tampoco el agua cristalizada o formando hielo. El potencial de agua puede contener un componente osmtico, relacionado con el efecto de los solutos en solucin. A continuacin se definen 3 grupos de microorganismos asociados a diferentes tipos de alimentos de acuerdo con su actividad acuosa o su presin osmtica: Halotolerantes. Capaces de crecer en presencia de elevadas concentraciones de sal. Osmotolerantes. Capaces de crecer en presencia de elevadas concentraciones de compuestos orgnicos no ionizados como son los azcares. Xelotolerantes. Capaces de crecer en alimentos secos. Estos trminos no definen estrictamente grupos exclusivos de microorganismos pero son tiles en el contexto de los estudios de determinados alimentos. Si bien es cierto que algunos microorganismos crecen mejor a Aa reducida, por ello pueden ser definidos como halfilos, xerfilos.y osmfilos. Halfilos. Microorganismos que son capaces de crecer en presencia de elevadas concentraciones de sal y ataen principalmente a las bacterias, como las halobacterias que incluyen gneros tales como Halobacterium y Halococcus pertenecientes a las Archebacterias. Son obligadamente halfilas, suelen encontrarse en los lagos salados o en las charcas de agua salada y pueden causar la alteracin proteoltica del pescado salado y desecado. Xerfilos. Microorganismos que crecen ms rpidamente bajos condiciones de relativa sequedad y estn representados por mohos y levaduras. Osmfilos. Microorganismos que crecen en hbitat con altas presiones osmticas, este trmino se aplica habitualmente a las levaduras tolerantes al azcar. La tabla 4.6 muestra la escala de valores de la Aa correspondiente a diferentes alimentos. El valor limitante de la actividad de agua para el crecimiento de cualquier microorganismo es aproximadamente de 0,6, de modo que por debajo de este valor la alteracin de los alimentos no es microbiolgica.

FACTORES EXTRNSECOS
Humedad relativa. La humedad relativa y la actividad acuosa estn relacionadas entre s, de modo que la humedad relativa es esencialmente una medida de la actividad de agua en la fase gaseosa. Cuando se almacena un alimento que
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Tabla 4.6. Grupos principales de alimentos en relacin con su activad acuosa Aa de 0,98 o superiores Carnes y pescado frescos Frutas, hortalizas y verduras frescas Leche y otras bebidas Hortalizas en salmueras enlatadas Frutas enlatadas en almbares diluidas Aa entre 0,98-0,93 Leche evaporada Concentrado de tomate Productos crnicos y de pescado ligeramente salados Carnes curadas enlatadas Embutidos fermentados (no secos) Embutidos cocidos Quesos de maduracin corta Queso Gouda Frutas enlatadas en almbar Pan Ciruelas con elevado contenido en agua Aa entre 0,93-0,85 Embutidos fermentados y madurados (tipo italianos y hngaro) Queso Cheddar curado Jamn tipo Serrano Leche condensada azucarada Aa entre 0,85-0,60 Alimentos de humedad intermedia Frutas secas Harina Cereales Confituras y mermeladas Melazas Pescado muy salado Extractos de carne Algunos quesos madurados Nueces Aa inferiores a 0,60 Dulces Chocolate Miel Macarrones, fideos Galletas Papas fritas Verduras secas, huevos deshidratados, leche en polvo

tiene actividad acuosa baja en una atmsfera de humedad relativa elevada, el agua pasar desde la fase gaseosa al alimento. Es posible que transcurra mucho tiempo para que la masa del alimento aumente su actividad de agua, pero puede haber una condensacin en las superficies que origine zonas localizadas de elevada actividad de agua, en estas zonas en que los propgulos han permanecido viables, pero que no han sido capaces de crecer, pueden ahora germinar y crecer. Estos casos se pueden dar en los silos de granos o en los tanques donde se almacenan concentrados y jarabes. Otro problema de las unidades de almacenamiento en gran escala, como son los silos para grano, se presenta porque la humedad relativa del aire es muy sensible a la temperatura. Si un lado del silo se calienta en exceso, debido a una exposicin al sol, en tal caso la humedad relativa disminuye en este lado y hay desplazamiento neto de molculas de agua desde el lado ms fro para volver a equilibrar la humedad relativa. Cuando el mismo lado del silo se enfra de nuevo, la humedad relativa aumenta y, aunque se desplazan de nuevo las molculas de agua, el aumento temporal de la humedad relativa puede ser suficiente para causar una condensacin local en el grano, acompaada de aumento localizado de la Aa suficiente para permitir la germinacin de las esporas fngicas y la subsiguiente alteracin del grano.
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El almacenamiento de frutas y hortalizas frescas requiere un control muy cuidadoso de la humedad relativa. Si esta es excesivamente baja, en algunas hortalizas disminuir el contenido de agua y se mustiarn. Si es excesivamente elevada, puede haber condensacin y es posible que se inicie su alteracin microbiana. Temperatura. Los microorganismos crecen dentro de una amplia escala de temperaturas. A presin atmosfrica puede haber crecimiento microbiano dentro de un intervalo de temperatura comprendido aproximadamente desde -8 hasta 100 C. La exigencia ms importante es que el agua se encuentre en estado lquido y por tanto disponible para mantener el crecimiento. Ningn organismo ha sido capaz de crecer en todas las temperaturas de este intervalo; las bacterias normalmente se limitan a crecer en una escala de temperaturas en torno a los 35 C, mientras que los mohos lo hacen con temperaturas algo inferiores a los 30 C. Cada microorganismo exhibe unas temperaturas mnimas, mximas y ptimas de crecimiento. Estas temperaturas van a ser muy tpicas de un determinado microorganismo y van a estar influidas por el pH, la Aa y la disponibilidad de nutrientes.
Tabla 4.7. Temperaturas cardinales correspondientes al crecimiento microbiano Grupo Mnima Termfilos Mesfilos Psicrfilos (psicrfilos obligados) Psicrtrofos 40 - 45 5 - 15 -5 - +5 -5 - +5 Temperatura (C) ptima Mxima 55 - 75 30 - 40 12 - 15 25 - 30 60 - 90 40 - 47 15 - 20 30 - 35

Sobre la base de las temperaturas de crecimiento, los microorganismos pueden ser clasificados en varios grupos fisiolgicos (tabla 4.7). En microbiologa de los alimentos, los organismos mesfilos y psicrtrofos generalmente son de vital importancia. Los mesfilos con temperatura ptima en torno a 37 C con frecuencia son de origen humano o animal, e incluyen algunos de los ms importantes patgenos trasmitidos por los alimentos como, Salmonella, Staphylococcus aureus y Clostridium perfringens. Por regla general a su temperatura ptima crecen ms rpido que los psicrtrofos y por ello, la alteracin de los productos perecederos o almacenados en el intervalo de temperaturas correspondientes al crecimiento de los mesfilos es ms rpida que su alteracin en condiciones de refrigeracin. Como hemos podido observar los psicrfilos y psicrtrofos son los 2 grupos de organismos que crecen a temperaturas bajas, los psicrfilos (amantes del fro) verdaderos o estrictos tienen temperaturas ptimas de 12-15 C y no crecen por encima de los 20 C; los psicrfilos estn confinados principalmente en las regiones polares y en el medio marino. Los psicrtrofos o psicrfilos facultativos crecern a las mismas temperaturas como psicrfilos estrictos pero sus temperaturas de crecimiento ptimo y mxima son ms elevadas. Esta tolerancia de un intervalo de temperaturas ms amplio significa que los psicrtrofos se encuentran en
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una gama de hbitat ms variados y, consiguientemente, tienen mayor importancia en la alteracin de los alimentos refrigerados. Los termfilos por lo general tienen una importancia menor en microbiologa de los alimentos, aunque existen termfilos esporgenos tales como determinados Bacillus y determinadas especies de Clostridium que causan problemas. Constituyentes antimicrobianos (parmetro intrnseco). Algunos alimentos presentan estabilidad con respecto a determinados microorganismos, esto es debido a la presencia de algunas sustancias naturales en las que se ha demostrado la existencia de actividad microbiana, por ejemplo, aceites esenciales. Entre los aceites esenciales est el eugenol en el clavo, la alicina en el ajo, el aldehdo cinmico, el isotiocianato de alilo en la mostaza, el eugenol y el timol en la salvia, as como el carvacrol (isotimol) y el timol en el organo. La leche de vaca contiene varias sustancias antimicrobianas que incluyen la lactoferrina, la conglutinina y el sistema lactoperoxidasa; se ha demostrado que la casena, as como tambin algunos cidos grasos libres que existen en la leche, tienen actividad antimicrobiana. Los huevos contienen lizozima, al igual que la leche, y esta enzima junto con la conalbmina, dota a los huevos de un sistema antimicrobiano medianamente eficaz. Estructuras biolgicas (parmetro intrnseco). La envoltura natural de algunos alimentos proporciona excelente proteccin frente a la entrada y dao subsiguiente por microorganismos causantes de alteraciones. Entre los diferentes tipos de envolturas existen estructuras tales como la testa de las semillas, el tegumento externo de las frutas, las cscaras de los frutos (como la nuez), la piel de los animales y la cscara de los huevos.

BIBLIOGRAFA
Frazier, W.C.; D.C. Westhoff (1993). Microbiologa de los Alimentos. 4ta. ed. Zaragoza Espaa. Editorial Acribia. ICMSF (1980). Ecologa microbiana de los Alimentos. Factores que afectan la supervivencia de los microorganismos en los alimentos. Vol 1. Espaa. Editorial Acribia.. (1980). Ecologa microbiana de los Alimentos. Productos alimenticios. Vol II. Espaa. Editorial Acribia. Jay, J. (1994). Microbiologa moderna de los Alimentos. 3ra. ed., Espaa, Zaragoza. Editorial Acribia.

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CAPTULO 5

Parsitos en alimentos
Yamila Puig Pea, Virginia Leyva Castillo y Tamara K. Martino Zagovalov

Se llama parsito a todo ser vivo que pasa una parte o toda su existencia en otro ser vivo (hospedero), del cual se nutre, provocndole o no lesiones aparentes o inaparentes. De acuerdo con sus caractersticas morfolgicas los parsitos se clasifican en: Protozoos: microorganismos capaces de cumplir por s solo todas las funciones biolgicas fundamentales de la vida, son unicelulares y poseen la tpica estructura de la clula eucariota. Metazoos: son parsitos pluricelulares, de los cuales tienen inters en parasitologa clnica los helmintos. Helmintos (del griego helmins, gusano): son pluricelulares, pertenecen al reino animal, caracterizados por tener estructuras concretas, con sistemas digestivo y sensitivo pocos desarrollados. Presentan formas variadas segn la especie, algunos parecidos a gusanos aunque morfolgicamente no son gusanos, con tamaos que varan entre uno y varios centmetros de longitud. Se dividen en 2 grandes grupos: 1. Nematodos o gusanos cilndricos, no segmentados y con sexos separados. 2. Platelmintos o gusanos planos, segmentados o no, y hermafroditas la mayora de ellos. Se dividen en 2 clases: Cestodos: segmentados, con varios rganos de fijacin y hermafroditas. Trematodos: no segmentados, en forma de hoja, hermafroditas o con sexos separados.

RELACIN HUSPED-PARSITO
Parasitismo. Es la dependencia obligada y siempre unilateral de un organismo (parsito) con respecto a otro (husped). Los parsitos han desarrollado maneras diversas de vivir en el husped que los proveen de manera nutricional, pero paradjicamente muy hostiles desde el punto de vista inmunolgico, mostrando gran combinacin de adaptaciones bioqumicas, fisiolgicas y nutricionales, as como en la forma de evadir la respuesta inmune y sus consecuencias.
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Las relaciones entre el parsito y el husped pueden dar lugar a los diferentes grados de parasitismo, con alteracin del husped o sin ella. Una vez que el parsito ha penetrado en el organismo, si consigue superar las defensas del husped, y se establece un equilibrio, se constituye el estado de comensalismo, que explica las infecciones mudas, subclnicas o asintomticas, que en un momento determinado por falla en las defensas del husped pueden hacerse aparentes o clnicas. En la tabla 5.1 se relacionan los alimentos y los parsitos as como la forma infectiva de estos que pueden ser trasmitidos a travs de ellos.
Tabla 5.1. Parsitos que se trasmiten por los alimentos y su estado infectivo. Alimento Agua, Vegetales contaminados Parsito Protozoos Entamoeba histolytica Entamoeba coli Endolimax nana Iodamoeba buetschlii Dientamoeba fragilis Retortamonas intestinalis Retortamonas sinensis Chilomastix mesnili Enteromonas hominis Giardia lamblia Trichomonas hominis Isospora belli Blastosistis hominis Balantidium coli Cryptosporidium parvum Toxoplasma gondii Nematodos Capillaria heptica Trichiuris trichiura Enterobius vermicularis Syphacia obvelata Ascaris lumbricoides Toxocara cati Toxocara canis Cestodes Taenia multiceps (larva) Taenia serialis (larva) Echinococcus granulosus (larva) Echinococcus multilocularis (larva) Echinococcus vogeli (larva) Nematodos Ascaris lumbricoides Trichiuris trichiura Angiostrongylus costaricencis Angiostrongylus cantonensis Estado infectivo Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Quistes Trofozoitos Ooquistes Quistes Quistes Ooquistes Ooquistes Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos Huevos

Agua

Agua

Vegetales contaminados

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Tabla 5.1 (continuacin) Alimento Vegetales contaminados Parsito Trematodos Watsonius watsoni Gastrodiscoides hominis Fasciola heptica Fasciola gigantica Fasciola buski Nematodos Echinocephalus sp. Angiostrongylus cantonensis Angiostrongylus costaricencis Trematodos Echinostoma sp. Himasthla muehlensi Trematodos Paragonimus westermani Nematodos Capillaria philippinensis Dioctophyme renale Gnathostoma spinigerum Pseudoterranova spp. Anisakis spp. Porrocaecum spp. Contracaecum spp. Cestodes Diphyllobothrium latum Diplogonoporus grandis Digramma brauni Ligula intestinalis Braunia jasseyensis Spirometra crinacci Trematodos Echinostoma spp. Echinochasmus perfoliatus Opisthorchis felineus Clonorchis sinensis Heterophyes heterophyes Metagonimus yokagawai Metagonimus minutus Centrocestus armatus Diorchitrema pseudocirratum Diorchitrema formosenum Stellantchasmus amplicaelis Stellantchasmus falcatus Estado infectivo Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Larvas Larvas Larvas Metacercaria Metacercaria Metacercaria Larvas Larvas Larvas Larvas Larvas Larvas Larvas Plerocercoides Plerocercoides Plerocercoides Plerocercoides Plerocercoides Plerocercoides

Moluscos, ostiones, caracoles, almejas Moluscos, ostiones, caracoles, almejas Crustceos Peces

Peces

Peces

Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria 57

Tabla 5.1 (continuacin) Alimento Parsito Isoparorchis hypselobagri Alaria americana Haplorchis yokogawai Haplorchis taichui Protozoos Toxoplasma gondii Nematodos Gnathostoma spinigerum Protozoos Toxoplasma gondii Nanophyetus salmincola Balantidium coli Nematodos Trichinella spiralis Cestodes Taenia solium Taenia spp. (Taiwan) Protozoos Toxoplasma gondii Cestodes Taenia saginata Protozoos Toxoplasma gondii Estado infectivo Metacercaria Metacercaria Metacercaria Metacercaria Quistes tisulares Larvas Quistes tisulares Metacercaria Quistes Larvas Cisticercus Cisticercus Quistes tisulares Cisticercus Quistes tisulares

Peces, camarones

Aves de corral Aves de corral Cerdo

Cerdo Cerdo Carne de res Carne de res Carne de cabra, carne de carnero

Los parsitos que se trasmiten a travs de los alimentos que con mayor frecuencia causan enfermedad en el hombre son: Cryptosporidium parvum, Cyclospora cayetanensis, Giardia lambia, Entamoeba histolytica, Toxoplasma gondii, Isospora belli, Helmintos : Nematodos como Ascaris lumbricoides, Thrichuris trichiura, Trichinella spiralis, Anisakis spp.; Trematodos como: Fasciola hepatica; Cestodes: Diphyllobothrium latum, Taenia saginata y Taenia solium. Las manifestaciones clnicas de forma general pueden ir desde un portador asintomtico o sintomatologa leve, hasta graves manifestaciones, esto depende del nmero de parsito, patogenicidad y respuesta inmunitaria de la persona. En la forma sintomtica estn involucrados todos los problemas digestivos, tales como: mal aliento, apetito inestable, constipacin, diarreas, gases, acidez, hasta cuadros apendiculares o vesiculares, gastroenteritis, etc. Los parsitos provocan un bloqueo de la absorcin de los alimentos al nivel de la mucosa intestinal, lo que ocasiona en muchos casos la delgadez en los parasitados, aunque no debe relacionarse siempre a la persona parasitada con una persona delgada, el parasitado delgado se encuentra descompensado, pero si no lo est, puede tener cualquier peso e incluso ser un obeso. Con frecuencia se pueden manifestar estados de constipacin que alternan con diarrea explosiva,
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adems de intolerancias discontinuas a algunos alimentos. Las manifestaciones clnicas generales son: cefalea, anorexia y dolor abdominal.

FORMA DE TRASMISIN DE LOS PARSITOS EN LOS ALIMENTOS

Las formas de trasmisin ms frecuentes son: por el consumo de agua y alimentos contaminados, contacto animal-persona o persona-persona. En los alimentos se puede producir por la ingestin de los estados infectivos de los parsitos, que estn atrapados en la musculatura, rganos u otras partes del animal al consumir carnes crudas o poco cocinadas, ejemplo: trichinosis, cisticercosis o por la ingestin de los huevos o quistes de los parsitos con los vegetales y otros productos contaminados derivados de la tierra ejemplo: Ascaridiasis lumbricoide, Thrichuris trichiura, etc. En muchas ocasiones el parsito puede pasar al alimento por la inadecuada manipulacin de portadores asintomtico que contaminan los alimentos por no cumplir escrupulosas normas higinicas personales. La trasmisin depende del ciclo evolutivo de vida de cada parsito, un punto en comn es que necesitan el paso por un organismo animal, animales o personas para completar el ciclo. En el caso de la contaminacin de productos vegetales ocurre a gran escala en los pases en los que las condiciones higinicas de depuracin de las aguas residuales son deficientes y se utilizan en la irrigacin de cultivos hortcolas y frutcolas. Los alimentos implicados con ms frecuencia en la trasmisin de parsitos son: las frutas y verduras contaminadas, muchos han sido los vegetales contaminados entre los que habra que destacar las lechugas, tomates, pepinos, frambuesas o zumos de fruta sin pasteurizar, otros alimentos implicados son pescado y carnes crudas o mal cocinadas, cualquier alimento que no ha recibido tratamiento y en el que se encuentren formas infectivas del parsito.

EPIDEMIOLOGA
Las infecciones parasitarias son frecuentes en las zonas rurales de frica, Asia y Sudamrica, pero son poco frecuentes en los pases desarrollados por sus elevados estndares higinicos. Los parsitos casi nunca producen una infeccin mortal, sino infecciones crnicas, en muchos casos asintomticas, lo que contribuye a su trasmisin hacia otras personas o animales.

DIAGNSTICO
A diferencia de las bacterias trasmitidas por alimentos, los parsitos no se multiplican en estos y su presencia debe ser detectada por mtodos directos, ya que todos no crecen in vitro y es difcil su crecimiento en los medios de cultivo, basta con utilizar tcnicas de concentracin y tincin apropiadas. La OPS recomienda para la determinacin de parsito en agua y alimentos una concentracin primaria seguida de la observacin directa al microscopio,
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mtodos de concentrado, tcnicas de inmunofluorescencia, micro ELISA y reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). Entamoeba histolytica. Es un parsito cosmopolita pero ms frecuente en el trpico y subtrpico, sumamente sensibles a los cambios de temperatura, capaces de colonizar el intestino grueso de una buena parte de la poblacin mundial. El ciclo de vida es relativamente sencillo. La infeccin se inicia con la ingestin de quistes provenientes de agua o alimentos contaminados con materia fecal. Los quistes son capaces de resistir el pH gstrico; en el intestino delgado ocurre la llamada exquistacin, que consiste en la divisin del quiste para dar origen al estado metaqustico transitorio, la divisin citoplsmica contina y emergen 8 trofozoitos forma adulta. Los trofozoitos se dirigen al intestino grueso para colonizarlo, ah se alimentan de bacterias y restos celulares. Por ltimo, los trofozoitos pueden enquistarse completando el ciclo al ser excretados con las heces fecales. Pueden excretarse 45 millones de quistes por das, el perodo de incubacin es de 2 a 4 semanas. El reservorio es el hombre pero tambin perros y otros animales. La trasmisin directa se produce a travs del contacto con heces infectadas. Los brotes de amebiasis se producen con mayor frecuencia en instituciones (hogares de ancianos, crculos infantiles, hospitales psiquitricos, etc.). La trasmisin indirecta de los quistes es ms frecuente en las zonas con malas condiciones sanitarias, como los campos de trabajo no permanentes. Las frutas y verduras pueden contaminarse cuando crecen en tierra fertilizada con excretas humanas, se lavan con agua contaminada o las prepara alguien que est infectado y no cumple con las normas de higiene adecuadas; cualquier alimento que no ha recibido tratamiento puede trasmitir el parsito. Los quistes son muy resistentes y pueden diseminarse tanto de forma directa de persona a persona, como indirectamente a travs de los alimentos o el agua. Son viables por varios das, hasta 30 das a temperatura ambiente, pueden sobrevivir varias semanas en tierra hmeda, son viables en las manos durante 5 min y 45 min en las uas, en alimentos acuosos pueden mantenerse viables por 15 das a 4 C, sin embargo en alimentos congelados ms de 24 h no constituyen peligro, mueren despus de 24 h a temperaturas de -10 a -15 C. Resisten la cloracin normal, se destruyen por uso de yodo, hipercloracin o filtrado. En algunos casos los sntomas son tan leves que casi pasan inadvertidos, consisten en diarrea, estreimientos intermitentes y una mayor cantidad de gas (flatulencia). El abdomen puede ser doloroso al tacto y es posible que las heces contengan moco y sangre. Puede haber poca fiebre. En ocasiones, los trofozoitos dan lugar a una perforacin intestinal. La liberacin del contenido intestinal dentro de la cavidad abdominal causa un gran dolor en la zona, adems de infeccin (peritonitis), la cual requiere atencin quirrgica inmediata. En el hgado puede formarse un absceso lleno de trofozoitos. Los sntomas consisten en dolor o malestar en la zona que se encuentra por encima del hgado,
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fiebre intermitente, sudores, escalofros, nuseas, vmitos, debilidad, prdida de peso y ocasionalmente ictericia leve. Giardia lamblia. La giardiasis ocurre en todo el mundo y es especialmente frecuente entre los nios y en sitios donde las condiciones sanitarias son deficientes. Esta especie es la nica de inters dentro del gnero para el ser humano. En algunos pases desarrollados, la giardiasis es una de las infecciones parasitarias ms frecuentes. Giardia lamblia se encuentra principalmente en el intestino delgado de sus hospederos. El hospedero infectado elimina el quiste con las heces fecales y es trasmitido a otro hospedero directamente o a travs de vehculos como agua y alimentos. Diez quistes son suficientes como dosis infectante. El desenquistamiento inicial ocurre debido a la acidez del contenido gstrico, y culmina con la liberacin de 1 2 trofozoitos. La infeccin se propaga en duodeno y el resto del intestino delgado. Sus mecanismos no estn bien comprendidos, pero aparentemente se trata de un proceso multifactorial. El enquistamiento se produce cuando el contenido intestinal comienza a deshidratarse, al abandonar el yeyuno; una vez fuera del hospedero, no tiene lugar ningn desarrollo, es totalmente infectantes en el momento que son liberados. El perodo de incubacin es de 7 a 13 das, la dosis de infeccin puede ser alcanzada por la ingestin de 10 quistes o menos, incluso un quiste, a diferencia de la mayora de las enfermedades bacterianas en las que es necesario el consumo de centenares o miles de microorganismos para que se presente la enfermedad. Se ha determinado que una persona con giardiasis puede excretar hasta 9 x 10 8 quistes por da, debido a lo anteriormente expuesto, es importante tener en cuenta la existencia de portadores asintomticos; existen estudios donde se ha encontrado una prevalencia de 25,47 % para Giardia lamblia en personas aparentemente sanas o infectados asintomticos. Giardia lamblia puede infectar adems a otros animales, los que actan como reservorio de la infeccin. La existencia de estos reservorios animales explica la presencia de la infeccin en reas ubicadas lejos de la actividad del hombre, o provocada por medio del agua no contaminada con heces humanas. Los animales a los que se responsabiliza con mayor frecuencia de infeccin humana son los gatos y perros. Los alimentos crudos como las hortalizas son con frecuencia fuente de contaminantes, la contaminacin cruzada es uno de los factores ms importantes en la cadena de transmisin. Los quistes son resistentes a la cloracin habitual del agua y conservan su viabilidad en agua a 8 C por ms de 2 meses, a 21 C hasta un mes y a 37 C cerca de 4 das. La congelacin y descongelacin disminuye el nmero de quistes viables pero no los inactiva totalmente, la ebullicin del agua lo inactiva por completo, as como la luz ultravioleta y el ozono. Los sntomas suelen ser leves, incluyen nuseas intermitentes, mayor cantidad de gas (flatulencia), molestias abdominales, heces voluminosas y con mal olor. La adhesin mediante el disco suctorio, al nivel de su flanco ventrolateral, y el movimiento flagelar producen dao variable y atrofia al nivel de las microvellosidades, con efecto citoptico y que actan sobre el estado inmune y
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nutricional del hospedero (la inmunodepresin predispone hacia la cronicidad de la infeccin). Si la infeccin es intensa, es posible que el enfermo no consiga absorber los nutrientes ms importantes de los alimentos y como resultado pierde mucho peso, esto se traduce por la atrofia de las microvellosidades intestinales, lo que lleva consigo una prdida o disminucin de la actividad de las disacaridasas, lectinas y proteasas, lactasa, maltasa, sacarosa, etc., una disminucin de la absorcin de vitamina B12, alteracin en el transporte de glucosa-sodio y en la absorcin de D-xilosa. Uno de los factores ms importantes dependientes del hospedero es la inmunodeficiencia humoral, como la hipogammaglobulinemia (congnita, comn variable, ligada al cromosoma X), o el dficit selectivo de IgA que afecta al 10 % de la poblacin. Toxoplasma gondii. La toxoplasmosis es una infeccin causada por Toxoplasma gondii. El parsito se presenta bajo 3 formas diferentes: trofozoito, quistes tisulares y ooquistes. La reproduccin sexual del parsito tiene lugar solo en las clulas que revisten el intestino de los gatos. Los huevos (oocistos) se encuentran en las heces de los gatos. Las personas se infectan comiendo alimentos crudos o mal cocidos que contengan (oocistos) del parsito, o bien tras exponerse en terrenos que contengan oocistos de heces de gatos. Si una mujer embarazada se infecta, la infeccin puede ser trasmitida a su feto a travs de la placenta. Los humanos pueden infestarse de varias maneras: ingestin de carne infestada mal cocinada o curada que contiene oocistos de toxoplasma; por manos o alimentos contaminados por heces de gato, y trasplante de rganos o transfusin sangunea. La toxoplasmosis presenta un perodo de incubacin de 7 a 13 das. Las deyecciones del gato sobre las verduras y pastos constituyen una importante fuente de enfermedad para los seres humanos con hbitos vegetarianos y para los animales herbvoros. La manipulacin de carne cruda posibilita la introduccin del parsito en el organismo por las heridas en las manos. El consumo de huevos y leche cruda contaminada puede producir la enfermedad, pero la coccin y pasteurizacin, respectivamente, eliminan todo riesgo. Los oocistos pueden sobrevivir en el medio ambiente durante varios meses, son muy estables a la desecacin. La humedad de 18 a 22 % permite que se mantenga infectante durante 14 a 18 das, sobreviven en agua a 20-22 C ms de un ao, conservan su vitalidad y patogenicidad hasta 3 semanas en carnes a ms de 4 C y 3 das a -15 C y son sumamente resistentes a los desinfectantes comunes, al congelamiento y la deshidratacin, pero son destruidos por el calor a 70 C (158 F) durante 10 min. En la clara del huevo de la gallina, conservada a 4 C dura hasta 2 semanas; en embutidos crudos curados secos con nitritos sobrevive 3 das. El ganado infectado alberga quistes infecciosos, al menos, 267 das despus de la infeccin. La contaminacin cruzada en la carnicera hacia las carnes de otras especies es probable, por ejemplo a travs del molino cuando no se realiza la desinfeccin adecuada.
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La localizacin de los quistes no es la misma para cada animal. En bovino el mayor nmero se encuentra en el hgado, en menor cantidad en los msculos, intestinos y cerebro; en el cerdo en el cerebro, corazn y menos en las vsceras; en la cabra en los msculos esquelticos y menos en vsceras y cerebro. La carne de res y cordero suelen estar menos contaminadas que otros tipos de carne pero tambin pueden encontrarse quistes. Los nios nacidos con toxoplasmosis congnita pueden presentar sntomas graves y rpidamente mortales, o bien no presentar ningn sntoma en absoluto. Los sntomas incluyen inflamacin de los ojos (que deriva en ceguera), ictericia grave, facilidad para formar hematomas, convulsiones y retraso mental importante. Poco despus del nacimiento pueden aparecer sntomas muy leves, pero frecuentemente suelen hacerlo meses o varios aos ms tarde. La toxoplasmosis adquirida despus del nacimiento rara vez produce sntomas y por lo general se diagnostica cuando un anlisis de sangre revela la presencia de anticuerpos contra el parsito; sin embargo, en ocasiones aparecen sntomas, estos varan segn el tipo de toxoplasmosis que presente el afectado (linftica leve, crnica o aguda diseminada). En los enfermos afectados de SIDA, la toxoplasmosis se puede diagnosticar hasta en el 40 % y la tercera parte padece de toxoplasmosis cerebral. Isospora belli. Es un protozoario coccidio taxonmicamente relacionado con los gneros Cryptosporidium parvum y Cyclospora cayetanensis. Despus de la ingestin del oocisto desciende en el tracto gastrointestinal y libera el esporozoito que invade las clulas epiteliales del intestino delgado. Dentro de las clulas se produce la multiplicacin asexual y el desarrollo sexual, que origina los oocistos maduros, los cuales se liberarn con las deposiciones y pueden ser infectantes en el momento de su eliminacin o desarrollar infectividad en unos pocos das, permaneciendo as en el medio ambiente por semanas o meses. Los ooquistes esporulados pueden ser ingeridos por hospederos inespecficos (ratn, bovino, etc.). En los hospederos finales vuelve a tener lugar el ciclo completo de los coccidios con esquizogonia, gametogonia y formacin de ooquistes. Los ooquistes de Isospora sp son extremadamente resistentes al medio ambiente y se mantienen viables durante ms de un ao, dependiendo de la temperatura y humedad, pueden permanecer viables durante 7 meses en solucin de formaldehdo al 0,5 %, es difcil su diagnstico por la corta duracin de los sntomas. Es importante considerar el nmero de ooquistes que elimina la persona infectada, los que pueden llegar a ser muy escasos. La infeccin por I. belli es ms frecuente en los meses de verano. Afecta a adultos y nios de forma transitoria, pero puede llegar a formas crnicas en pacientes inmunocomprometidos, en los que la diarrea es grave. Ha sido tambin implicado como agente causal en la diarrea del viajero. Cyclospora cayetanensis. El ciclo de vida es semejante al de los dems coccidios, excepto que el oocisto al ser liberado con las heces contiene un esporonte esfrico que no es infectante, inmediatamente al ser expulsado, por lo que no se
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produce la trasmisin directa fecal-oral, lo cual diferencia a C. cayetanensis de otro coccdeo parsito importante como Cryptosporidium parvum . La esporulacin ocurre a temperaturas entre 26 y 30 C (78,8 a 86 F) despus de das o semanas, se produce la divisin del esporonte en 2 esporocistos, donde cada uno contiene 2 esporozotos alargados. Las frutas, verduras y el agua sirven como vehculo para la trasmisin de oocistos esporulados. Cyclospora cayetanensis causa frecuentemente enfermedades gastrointestinales en humanos. Los parsitos que pertenecen al grupo Cyclospora parasitan varias especies de animales, sin embargo C. cayetanensis infecta solo al hombre. Causa diarrea acuosa frecuente y a veces explosivaas como movimientos intestinales. Otros sntomas incluyen la prdida del apetito, prdida significativa de peso, hinchazn, aumento de gases, clicos estomacales, nusea, vmito, dolor muscular, fiebre reducida y fatiga. Algunas personas infestadas no presentan sntomas. El perodo de incubacin es aproximadamente de 7 das y los sntomas persisten durante algunos das, un mes o ms, estos pueden desaparecer y reaparecer una o ms veces (recurrencia). Cryptosporidium parvum. Se desarrolla y multiplica en el intestino delgado fuera del enterocito, dentro o sobre las microvellosidades intestinales. Los macrogametocitos fertilizados se desarrollan para formar ooquistes, y cuando son eliminados con las heces son infectantes, contaminan el agua y los alimentos, y cuando son ingeridos por el hospedero se produce el desenquistamiento en el duodeno. La dosis de infeccin es menor que 10 organismos y posiblemente un solo ooquiste puede iniciar la infeccin. C. parvum puede estar presentes, tericamente, en cualquier alimento que ha sido tocado por un manipulador contaminado. Las verduras para ensaladas, fertilizadas con estircol, son otra fuente posible de infeccin para el hombre. Los grandes brotes se han asociado con el suministro de agua contaminada. La infectividad del microorganismo se pierde por calentamiento a ms de 65 C durante 30 min o exposicin en buffer salino por 100 das; la congelacin de -15 a -20 C por 14 das y a -27 C por 5 das inactiva los ooquistes. La cloracin a niveles normales no lo inactiva, se debe utilizar cloracin recomendada para el lavado de los vegetales, el ozono se utiliza para la inactivacin en agua. El mecanismo de la enfermedad no es conocido, no obstante, la destruccin del borde en cepillo en las clulas epiteliales de la mucosa intestinal se considera el principal mecanismo de dao. Los estados intracelulares del parsito pueden causar alteraciones severas como mala absorcin de nutrientes, que estara dada por la alteracin de las vellosidades. De manera secundaria esta mala absorcin implica un sobrecrecimiento bacteriano que agravara esta condicin. La diarrea tipo secretoria descrita en pacientes inmunocomprometidos sugiere la presencia de una toxina que no ha podido ser caracterizada. La cryptosporidiosis intestinal es autolimitada en la mayora de los individuos saludables, produce diarrea acuosa de 2 a 4 das. En algunos brotes la diarrea persiste de 1 a 4 semanas; en individuos inmunodeprimidos, principalmente
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los pacientes con SIDA, la diarrea es severa, puede llevarlos a la muerte y se reporta hasta 50 % de mortalidad. La invasin del sistema pulmonar tambin puede ser fatal en este grupo de personas. Trichuris trichura. Se encuentra principalmente en el trpico y subtrpico, donde la falta de medidas sanitarias, el clima clido y hmedo brindan las condiciones necesarias para que los huevos sean incubados. El hombre se contamina al ingerir el huevo embrionado en su primer estadio; cuando pasa al duodeno la larva es liberada, ocurre un perodo de crecimiento de 2 a 10 das y luego migra al intestino delgado alcanzando su estado de adultez en 3 meses, puede sobrevivir de 7 a 10 aos. El parsito adulto macho mide de 30 a 45 mm de longitud y la hembra de 35 a 50 mm; la hembra fertilizada produce huevos en forma de barril, los cuales pueden ser excretados de 5 000 a 7 000 por da y al ser depositados en un ambiente apropiado de humedad y sombra, desarrollan su estado infectivo en 3 semanas y se mantienen viables por 2 semanas ms. Los huevos se encuentran en fertilizantes orgnicos tratados de forma deficiente y en tierras donde las larvas se desarrollan a partir de los huevos fertilizados, pueden contaminar vegetales que crecen en tierras fertilizadas con estircol que no recibi un tratamiento letal para el parsito; los humanos se infestan cuando estos productos se consumen crudos. Los manipuladores de alimentos infestados pueden contaminar el alimento, afectan particularmente a los consumidores de vegetales crudos y frutas. Los sntomas varan desde un ligero malestar en el tracto digestivo hasta la prdida de peso con deshidratacin cutnea y diarrea. Se pueden presentar sntomas txicos o alrgicos. Solo una gran infeccin provoca sntomas como dolor abdominal y diarrea. Cuando la parasitosis es muy intensa produce hemorragias intestinales, anemia, prdida de peso y apendicitis. En ocasiones, puede suceder prolapso rectal, especialmente en los nios o las mujeres durante el trabajo de parto. Ascaris lumbricoides. La infeccin se produce en todo el mundo, pero es ms frecuente en zonas clidas con deficientes condiciones sanitarias. El ciclo vital del parsito se parece al de Trichuris trichura, excepto de que las larvas migran hacia los pulmones. La enfermedad se adquiere por la ingestin de huevos infectados en su segundo estadio larvario, ya en el duodeno atraviesan la pared intestinal y pasan al sistema circulatorio, migra al pulmn y la larva comienza su cuarto estadio luego de 10 das despus de la infeccin; en este estadio pasa del sistema respiratorio hasta la faringe, donde es deglutido y del estmago pasa al intestino delgado donde comienza su estado adulto de 25 a 30 das despus de la infeccin. La hembra fertilizada expulsa 200 000 huevos por da, en 17 meses de vida produce 26 millones de huevos. Despus que se expulsan los huevos con las heces, se necesitan condiciones de humedad y sombra para desarrollar su forma infectiva durante 10 a 15 das. El ciclo vital se completa aproximadamente en 2 meses y los parsitos adultos
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pueden vivir de 6 a 12 meses; las condiciones adversas para el desarrollo del parsito estn dadas por la desecacin y exposicin directa al sol. La migracin de las larvas a travs de los pulmones puede provocar fiebre, tos y respiracin jadeante (neumona vermiana), un sndrome de Lffler tpico. La infeccin intestinal grave puede causar dolor abdominal y en ocasiones obstruccin intestinal. La deficiente absorcin de nutrientes puede estar causada por gran concentracin de parsitos a veces obstruyen el apndice, el tracto biliar o el conducto pancretico. Fasciola hepatica. La enfermedad producida por Fasciola es un problema sanitario de primer orden. Se calcula que actualmente hay unos 40 millones de personas afectadas en el sureste asitico y ms de 300 000 personas en frica. Como consecuencia, supone un problema importante para la poblacin de estos pases, pero tambin para los turistas europeos que se pueden contaminar por el consumo de vegetales o frutas crudos o mal manipulados. En Latinoamrica la mayora de los casos humanos descritos provienen de Chile, Cuba, Bolivia, Per y Argentina. Es un parsito de animales herbvoros que puede infestar accidentalmente a los humanos. El parsito adulto mide de 3 a 13 mm, habita en los conductos biliares del husped mamfero. Para desarrollar el ciclo de vida los huevos sin madurar son liberados a travs de las heces, por lo que es necesario que se depositen en agua de ros o lagunas; despus del desarrollo en el agua cada huevo libera un miracicio, que invade el caracol de los gneros Lymnaea, Stagnicola y Fosssaria, el cual es un husped intermediario. En el caracol, el parsito pasa por varios estados (esporocisto, redia y cercaria). Las cercarias se liberan y enquistan como metacercaria en la vegetacin acutica y otras superficies, al ser ingerida la metacercaria pasa al parnquima heptico hasta los conductos biliares, donde se desarrolla el parsito adulto; la maduracin de la metacercaria toma entre 3 y 4 meses aproximadamente; el parsito adulto produce 25 000 huevos por da. Las medidas de control de la trasmisin al hombre son la observacin y el cuidado de no ingerir agua posiblemente contaminada, el tratamiento de los animales parasitados, el control del husped intermediario y la inspeccin de carnes, principalmente del hgado. Los alimentos fundamentales son los hgados derivados de bvidos y ovinos infestados que no han sido bien cocinados y las verduras a las cuales se han adherido las metacercarias, en nuestro medio la trasmisin fundamentalmente es mediante consumo del berro contaminado. El perodo de invasin comienza desde la ingestin de la metacercaria hasta la llegada de la larva a los conductos biliares, de 1 a 4 semanas despus de la ingestin y se caracteriza por: fiebre moderada y prolongada, dolor en epigastrio e hipocondrio derecho, inapetencia, manifestaciones alrgicas (urticaria, crisis asmatiforme, etc.), infiltrados pulmonares fugaces, leucocitosis con eosinofilia importante (ms de 50 %), al examen fsico, hepatomegalia dolorosa. El perodo de estado ocurre de 2 a 3 meses despus de la ingestin de la metacercaria y se
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manifiesta con clicos biliares, ctero de tipo obstructivo, epigastralgia, vmitos y accesos de angiocolitis. Taenia saginata. La infeccin es particularmente frecuente en frica, Oriente Medio, Europa Oriental, Mxico y Amrica del Sur. El parsito adulto acintado habita el tracto intestinal humano, puede llegar a medir entre 5 y 10 m de largo. Las secciones del gusano que contienen los huevos (progltides) son liberadas por el recto, y los huevos son infectantes desde el momento que se excretan; la ingestin de vegetales contaminados por los huevos infesta al husped intermediario herbvoro: bovinos y otros. Los huevos eclosionan en el ganado vacuno y liberan las oncosferas embrionarias que invaden la pared intestinal y son transportadas por el torrente sanguneo hasta los msculos estriados, al los 2 meses se transforman en cisticercos, quistes pequeos que contienen un nico esclex invaginado, estos pueden sobrevivir durante muchos aos en el animal. Los humanos se infectan al comer carne de vaca cruda o poco cocinada que contiene quistes. Los cisticercos se adhieren a la mucosa intestinal y maduran en unos 2 meses. Los parsitos adultos (solo suelen existir 1 2) pueden vivir ms de 30 aos. Los humanos son los nicos huspedes definitivos de Taenia saginata. El parsito adulto reside en el intestino delgado donde se fija por medio de una estructura llamada esclex (cada gusano tiene de 1 000 a 2 000 progltides) que se fecundan, se separan del gusano y migran por el ano o salen con el excremento (aproximadamente 6 por da). Cada progltide fecundada contiene de 80 000 a 100 000 huevos que se liberan despus que esta estructura sale del cuerpo y se eliminan con el excremento; los huevos pueden sobrevivir por meses y hasta aos en el medio ambiente. Desde el momento de la infestacin hasta la eliminacin de los huevos maduros, transcurren de 2 a 3 meses. Los huevos son sensibles a temperaturas superiores a 38 C y no sobreviven a la desecacin pero pueden mantenerse infectivos en partculas hmedas durante 60 a 70 das a 20 C. La coccin durante 10 min de 55 a 70 C 1 min de 85 a 100 C elimina la posibilidad de infeccin. La congelacin a temperaturas menores que -10 C durante 10 a 15 das o su inmersin en soluciones concentradas de sal, por un tiempo de hasta 3 semanas, inactivar los parsitos. Taenia saginata apenas produce sntomas abdominales. El hecho ms sorprendente consiste en el pasaje (activo o pasivo) de los progltides. Este hecho puede ocasionar de vez en cuando apendicitis o colangitis. Las manifestaciones generales son insomnio, anorexia, prdida de peso, dolores abdominales, trastornos digestivos y molestias en la regin anal. Taenia solium. Las infecciones provocadas por el gusano del cerdo son frecuentes en Asia, la antigua Unin Sovitica, Europa Oriental y Amrica Latina. Esta infeccin es muy poco frecuente en los pases desarrollados, excepto entre los inmigrantes y turistas provenientes de zonas de alto riesgo. El parsito adulto mide de 2,5 a 3,5 m de largo, est formado por una cabeza armada con varios ganchos diminutos y un cuerpo compuesto por 1 000 anillos que contienen (progltides). Su ciclo de vida es similar al de Taenia saginata,
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excepto que los cerdos, a diferencia del ganado vacuno, actan como huspedes intermediarios. La incubacin vara de 2 meses hasta 30 aos. Los parsitos adultos presentan menos de 1 000 progltides que son menos activos que en Taenia saginata cada uno con 50 000 huevos; la longevidad es superior a 25 aos. No se desarrollan exclusivamente en humanos sino tambin en animales (monos, marmotas, etc.). EL cisticerco no se desarrolla tan solo en msculos estriados, tambin en el cerebro y dems tejidos de cerdos y otros animales. Los seres humanos pueden desarrollar la teniasis al ingerir carne de cerdo mal cocinada que contiene el cisticerco. Taenia solium permanece de 10 a 25 aos en la persona parasitada. Las medidas de control para ambas teniasis incluyen el saneamiento bsico y la coccin adecuada de la carne. Los cisticercos en los msculos son termosensibles y pierden su viabilidad por coccin a 76,7 C durante 30 min o congelacin 4 das a -5 C 12 h a -20 C. La infeccin provocada por el gusano adulto no suele causar ningn sntoma. Las grandes infecciones producidas por quistes pueden causar dolor muscular, debilidad y fiebre. La teniasis por Taenia solium es menos sintomtica que la de T. saginata. El hecho ms importante consiste en el riesgo del desarrollo de la cisticercosis que puede provocar la muerte, por lo general cuando los cisticercos se desarrollan en el sistema nervioso central (neurocisticercosis). La cisticercosis humana es una autntica zoonosis parasitaria, producida cuando el humano alberga la larva de Taenia solium o T. saginata, este se comporta como husped intermediario, aunque el ciclo biolgico del parsito se interrumpe. La forma de adquirir la infeccin es mediante la ingestin del huevo de T. solium por medio de agua o verduras contaminadas. Otro mecanismo es la autoinfeccin: en un individuo parasitazo, los huevos quedan adheridos a la regin perianal y con el rascado, el paciente contamina con ellos sus uas pudiendo as llevarlos a la boca. Las manos de un portador del parsito con malos hbitos higinicos pueden contagiar por pasaje de progltides al estmago o por peristaltismo inverso. Al ingerirse los huevos, sus envolturas se deshacen en el intestino delgado y el embrin atraviesa la pared intestinal, invade el torrente sanguneo y se localiza en alguna parte del organismo, teniendo particular afinidad por el sistema nervioso central. La cisticercosis cerebral se presenta como convulsiones, hipertensin cerebral o pseudotumores y problemas psquicos. Adems de estas, existen las cisticercosis oftlmica y diseminada. Los sntomas dependen de la localizacin, tamao, nmero, estado evolutivo y de la reaccin del husped a la fijacin del cisticerco. La prevencin de neurocercosis radica en abatir la infestacin del parsito adulto (fuente de huevecillos para los animales y personas), deteccin temprana y tratamiento de la teniasis, prcticas de higiene personal y eliminacin sanitaria de excretas humanas.
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Trichinella spiralis. Est presente en la mayor parte del mundo, pero es muy rara o no existe en regiones en las que los cerdos son alimentados con verduras, como en Francia y otros pases. No es un parsito comn en nuestro pas. La infeccin se produce al ingerir cerdo o sus derivados (crudos, mal cocido) o carne de oso o jabal. Cualquiera de estos animales puede contener quistes de dichas larvas (triquina). Cuando la cpsula del quiste es digerida en el estmago o el duodeno, libera larvas que atraviesan la pared del intestino delgado. En el transcurso de 2 das, dichas larvas maduran y se aparean. Los gusanos machos ya no participan en la produccin de la infeccin. Las hembras permanecen anidadas dentro de la pared intestinal y al sptimo da comienzan a descargar larvas vivas. Cada hembra puede generar ms de 1 000 larvas. La produccin es continua durante 4 a 6 semanas, despus de las cuales la hembra muere y es digerida. Las diminutas larvas son transportadas por todo el organismo a travs de los vasos linfticos y el flujo sanguneo, solo sobreviven las que consiguen alcanzar los msculos del esqueleto, penetran en estos y causan inflamacin; al final del tercer mes se enquistan. La triquinosis se evita cocinando por entero la carne de cerdo, sus productos derivados y tambin otras carnes, la coccin de la carne debe ser a 77 C. Alternativamente, las larvas pueden ser eliminadas al congelar la carne a -15 C durante 3 semanas, a -23 C durante 10 das -29 C por 6 das; las piezas no deben sobrepasar 15 cm de grosor. La congelacin durante 30 das destruye la variedad domstica que se encuentra en la carne del cerdo, pero la variedad salvaje puede sobrevivir al congelamiento superior a 6 meses. Los procedimientos de ahumado o salado no matan las larvas. La triquinosis presenta un primer perodo intestinal con diarreas, clicos, vmitos y fiebre elevada; un segundo perodo diseminativo con manifestaciones txicas: fiebre, anemia, dolores musculares y articulares y edemas en los prpados; por ltimo un tercer perodo de localizacin, en el cual el enfermo puede llegar a la desnutricin y a la muerte. Algunos msculos como los de la lengua, los del ojo y los msculos localizados entre las costillas son particularmente propensos a infectarse. Los sntomas fundamentales lo constituyen miositis, mialgia, edema periorbitario, fiebre y eosinofilia; la ingestin de bajo nmero de larvas pasa inadvertida, con 500 larvas o ms la sintomatologa va de moderada a severa, en casos extremos puede ocasionar la muerte. Anisakis simple. Es un nematodo, parsito que infecta a mamferos marinos (ballenas, delfines, focas, etc.) y a grandes peces, en los cuales se desarrolla hasta alcanzar su forma adulta. A travs de las heces de estos animales se liberan al mar los huevos del parsito, que son ingeridos por pequeos crustceos y que sirven a su vez de alimento de otros peces y cefalpodos, como la sepia o el calamar, en los que las larvas maduran.
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El ciclo biolgico se cierra cuando estos peces y cefalpodos son ingeridos por los mamferos y grandes peces, que son los huspedes definitivos. Anisakis simple se aloja habitualmente en el tubo digestivo de los peces vivos y una vez que estos mueren, las larvas migran hacia las vsceras y la musculatura, llegando incluso a traspasar la piel del pescado. El hombre es un husped accidental que puede adquirir las larvas si consume pescado parasitado crudo o poco cocinado. Los primeros casos de parasitismo se describieron en Japn y Holanda, pases que presentan elevado consumo de pescado crudo y luego han ido apareciendo casos en otros pases como Espaa, Francia, Estados Unidos, etc., posiblemente debido a la introduccin de nuevas preparaciones culinarias al ponerse de moda las barras de sushi y sashimi. La poblacin ms susceptible son los consumidores de frutos de mar crudos o subprocesados. En este caso la enfermedad se adquiere por el consumo de larvas vivas durante la ingestin de pescado crudo, ahumado, salado, en vinagre, marinado o poco cocinado, en el microondas o a la plancha. Las larvas del pescado mueren con la coccin a una temperatura de 60 C por lo menos durante 10 min. Asimismo, las larvas se destruyen mediante la congelacin, para ello es preciso congelar el pescado durante ms de 24 h a una temperatura de -20 C. El pescado congelado o ultracongelado en alta mar, que ha sido eviscerado rpidamente, tiene pocas posibilidades de estar parasitado, las larvas se eliminan con la evisceracin inmediata pero si demora, las larvas pasan a la musculatura. En Holanda se utiliza la salmuera, el escabechado con pH 4,0 y concentraciones de NaCl 6,5 % durante 30 das. Las larvas afectan sobre todo al tracto gastrointestinal y sobreviven a las diferentes secreciones digestivas. Pueden enclavarse y producir inflamacin, o en los casos ms graves, llegar a perforar el estmago e intestino, o migrar a otros tejidos y rganos. La forma gstrica evoluciona con dolor abdominal, acompaado o no de nuseas, vmitos y diarreas, que puede semejarse a las manifestaciones de otras enfermedades como apendicitis, iletis, lcera gstrica, obstruccin intestinal e incluso tumores abdominales. Se han encontrado tambin casos de afectacin articular y de otros rganos (pulmn, hgado, pncreas y bazo). La gran mayora de los pacientes refiere haber ingerido pescado entre las 48-72 h anteriores. Las tcnicas endoscpicas (gastroendoscopia o colonoscopia) permiten ver las larvas y a su vez extraerlas, si bien en casos de mayor gravedad puede ser necesaria la ciruga. Diphyllobothrium latum. La infeccin causada por este parsito es frecuente en Europa (particularmente en Escandinavia), Japn, frica, Sudamrica, Canad y los Estados Unidos. La infeccin suele producirse al comer pescado de agua dulce crudo o poco cocido. El parsito adulto est formado por varios anillos (progltides) que contienen huevos y mide de 5 a 10 m de largo. De cada progltide se liberan huevos dentro del intestino, que luego son expulsados por las heces. El huevo madura en
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el agua dulce y libera al embrin, que se convierte en alimento de pequeos crustceos; a su vez los crustceos son el alimento de los peces. Las personas se infectan cuando comen pescado de agua dulce crudo o poco elaborado. Los huevos del gusano aparecen en las heces. Para prevenir la infeccin es suficiente cocinar completamente el pescado de agua dulce, o bien congelarlo a -10 C durante 48 h. La infeccin no suele provocar sntomas, a pesar de que algunas personas pueden experimentar un ligero malestar intestinal. En casos raros el gusano provoca anemia, ya que consume vitamina B12.

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CAPTULO 6

Virus en alimentos
Yamila Puig Pea, Virginia Leyva Castillo y Tamara K. Martino Zagovalov

Los virus son agentes biolgicos submicroscpicos, compuestos por material gentico: cido ribonucleico (ARN) o cido desoxirribonucleico (ADN), nunca ambos, rodeado por una envoltura protectora, una capa de protena o de protena combinada con componentes lipdicos o glcidos. Carecen de vida independiente, se pueden replicar en el interior de las clulas vivas, lo cual perjudica en muchos casos a su husped en este proceso. Los virus que se trasmiten a travs de los alimentos y se reportan con mayor frecuencia son los virus de la hepatitis A y los virus entricos tipo Norwalk. Otros virus que producen gastroenteritis son enterovirus (polio, eco), adenovirus, rotavirus, astrovirus, entre otros. En la tabla 6.1 se relacionan los virus trasmitidos por alimento, la familia a que pertenecen y las enfermedades asociadas. Los virus pasan de un husped a otro en forma de partculas inertes, o sea, no se multiplican en los alimentos, penetran solo en una clula especficas del husped, la especificidad depende de la interaccin de la cubierta proteica con los receptores que se encuentran en ella, solo algunas clulas de ciertas especies pueden ser infectadas; esencialmente, todos los virus trasmitidos a los humanos a travs de los alimentos son especficos para estos. Los virus que producen gastroenteritis se adquieren esencialmente por va oral, como muchos otros agentes infecciosos que se trasmiten de manera entrica; otras vas de trasmisin son por el contacto de una persona con otra, al llevar las manos contaminadas con heces a la boca; si los vmitos son parte de la enfermedad se pueden propagar partculas virales a travs del vmito. La trasmisin indirecta de los agentes entricos puede ocurrir a travs de vectores tales como moscas, fomites y paales sucios; no obstante, la forma ms comn de trasmisin es mediante vehculos como alimentos y agua. Los mtodos para detectar virus en los alimentos son laboriosos y costosos; no se realizan de forma rutinaria. Hoy da se estn buscando indicadores que sealen la presencia de contaminacin viral en los alimentos, se han realizado estudios puntuales mediante la deteccin de bacterifagos. Un problema en el diagnstico de los Calicivirus es que no pueden crecer en cultivo celulares y el virus de la hepatitis A solo con xito moderado. Los mtodos utilizados actualmente son la inmunomicroscopia electrnica y tcnicas de biologa molecular como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
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Tabla 6.1. Virus, familia a que pertenecen y enfermedades asociadas Familia Adenoviridae Astroviridae Liciviridae Virus Adenovirus Grupo F, Serotipos 40 y 41 (Ad V) Astrovirus humano, 7 serotipos (HuAV) Calicivirus entrico humano, 5 o ms serotipos. (HuCV). Virus pequeos esfricos. Ejemplo: Norwalk o NLV. 4-9 (serotipos). Hepatitis E (HEV) Hepatitis infecciosa Parvovirus, ejemplo: agente de Dichling y Cockle Poliovirus tipos 1 y 3 Echovirus tipos 1-65 Enterovirus (68-71) Coxsackie A (1-23) Coxsackie B (1-6) Hepatitis A (HAV) Reovirus Rotavirus, principal A, ocasional Grupos B y C Coronavirus entrico humano (HECV) Torovirus humano Enfermedad asociada Gastroenteritis Gastroenteritis benigna

Gastroenteritis Gastroenteritis Gastroenteritis asociada con mariscos Meningitis, parlisis, fiebre Meningitis, exantema, diarrea, fiebre, sntomas respiratorios. Meningitis, sntomas respiratorios, miocarditis Hepatitis infecciosa. Gastroenteritis Gastroenteritis, posiblemente. Enterocolitis necrotizante del recin nacido Gastroenteritis

Parvoviridae Picornaviridae

Reovirus Coronaviridae

Torovirus

Se ha observado gran resistencia de los virus en el medio ambiente. Estudios realizados con virus entricos adicionados en aguas de desecho utilizadas como aguas de riego, han demostrado que los virus pueden permanecer viables hasta 5 semanas en hortalizas irrigadas con este tipo de agua. En estudio de tierras que haban sido irrigadas con aguas negras se determin que el polivirus puede recuperarse 23 das despus que se realiz la irrigacin. Tambin se ha determinado que los enterovirus y rotavirus pueden sobrevivir de 1 a 4 meses en hortalizas durante almacenamiento en refrigeracin. El virus de la hepatitis A sobrevive en verduras almacenadas de 4 a 20 C y muestra resistencia a la cloracin del agua. Los rotavirus se mantienen infectivos hasta 10 das en superficie inerte, plstico, vidrio, acero inoxidable cuando se desecan sobre ellas heces contaminadas. En las aguas marinas sobreviven menos que en aguas dulces, no obstante, se mantienen infectivos durante 130 das. Los alimentos con mayor frecuencia implicados en la trasmisin de virus son los moluscos bivalvos, tales como almejas, berberechos, mejillones y ostiones;
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si las aguas en las cuales crecen estn expuestas a la contaminacin por materias fecales, algunas veces se debe a la descarga de aguas negras y otras veces a las infecciones trasmitidas por los recolectores de mariscos. Los mariscos acumulan virus durante el proceso de filtracin de alimentos; los virus humanos no infectan estas especies, pero se hospedan durante das o semanas en el sistema digestivo de los mariscos y aparentemente son ms difciles de remover que las bacterias durante los procesos de limpieza. A diferencia de muchos otros productos marinos comestibles, los mariscos, se consumen con el sistema digestivo en su lugar, con frecuencia se comen crudos o ligeramente cocidos. Las frutas y hortalizas que se consumen crudas o poco procesadas son tambin alimentos frecuentemente relacionados con la trasmisin de virus. En el perodo de 1988 a 1992, el Centro para la Prevencin de Enfermedades (CDC, Atlanta, EE.UU.) report un total de 45 brotes de enfermedades virales, 18 de los cuales fueron causados por consumo de frutas o verduras contaminadas. Otros tipos de alimentos reportados son los postres, ensaladas, sandwiches, etc.; cualquier alimento contaminado, que se ha manipulado y subsecuentemente no se ha calentado lo suficiente, es posible origen de infeccin. Desde el punto de vista clnico los efectos de las gastroenteritis causadas por virus sobre el estado nutricional y el crecimiento sobre todo en nios son considerables. La ingestin de tan solo 10 partculas virales basta para causar la infeccin y generar diarrea cargada de microorganismos, lo que asegura su trasmisin, cumpliendo con el ciclo fecal-oral. El tiempo en el que se inicia la enfermedad en brote explosivo, durante el cual muchas personas son infectadas en la misma ocasin, tiende a igualar el perodo medio de incubacin de la enfermedad, por lo tanto, el inicio de la enfermedad durante un brote de hepatitis A puede manifestarse a lo largo de un perodo de 28 30 das, bajo circunstancias similares, en los brotes de gastroenteritis debida al virus Norwalk, probablemente se presenten manifestaciones de la enfermedad primaria al cabo de 2 das. La gastroenteritis Norwalk con frecuencia se caracteriza por la propagacin de virus, tanto en el vmito como en las heces, por lo cual incrementan las oportunidades de trasmisin secundaria del virus. Los virus trasmitidos mediante los alimentos, como provienen de las heces humanas, se pueden eliminar previniendo la contaminacin fecal humana, manteniendo las heces fuera de los alimentos o dndole tratamiento a los vehculos, tales como el agua. Las infecciones que tienen un perodo de incubacin prolongado, como el caso de la hepatitis A e infecciones persistentes breves en personas que convalecen gastroenteritis viral, han sido los mayores problemas en relacin con los virus trasmitidos por va fecal-oral. Es necesario tener buenas prcticas de higiene personal, estndares elevados de proteccin de los alimentos y de procedimientos sanitarios, en dichos casos, el lavado de manos adecuado, frecuente y eficaz friccionando las manos y usando un cepillo de uas es la medida preventiva general ms adecuada. Las personas infectadas pueden contaminar el alimento, ya sea la que trabaja en el
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campo, en la cocina o sirva los alimentos. Los guantes pueden tener algn valor para prevenir el contacto con las manos, sin embargo, la disponibilidad de instalaciones para el lavado de manos y el nfasis de la gerencia respecto a las tcnicas apropiadas para el lavado de manos, son las precauciones ms importantes para prevenir la contaminacin de alimentos con virus. Vacunar a las personas que trabajan con alimentos contra hepatitis A tambin puede ser importante en lugares donde la inmunidad natural de la infeccin no se adquiere comnmente a temprana edad. Inactivacin de virus en los alimentos. A diferencia de las bacterias los virus no se pueden multiplicar en los alimentos. Suponiendo que no se ha prevenido la contaminacin, los virus presentes en los alimentos se pueden inactivar antes de que estos sean consumidos. El poder de inactivacin de los virus entricos depende de la temperatura. Temperaturas a 4 C favorece la viabilidad del virus, el almacenamiento a temperatura ambiente favorece la inactivacin en los alimentos, pero pueden producirse riesgos bacterianos. El procesamiento trmico en general es eficaz, la resistencia al calor es mayor que en las bacterias no esporuladas, por lo que se necesita brindarle un poco ms de atencin a la suficiente pasteurizacin de la leche, para inactivar al virus de hepatitis A. En el caso de moluscos, algunas instituciones recomiendan que se calienten de 85 a 90 C por lo menos durante 90 s, para destruir los virus. Alternativamente, los mariscos pueden ser depurados, es decir, mantenidos en instalaciones provistas con agua salina limpia o transferidos del lugar donde crecieron hacia agua limpia para depurarse de los contaminantes; aunque estas prcticas han servido para remover las bacterias patgenas de los mariscos, no se garantiza el xito con los virus. Para remover los virus se necesitan perodos de tratamiento ms extensos que para remover bacterias. Otros tipos de procesamientos de alimentos que no son trmicos, son menos eficaces. En cuanto a la efectividad de los desinfectantes; los virus son ms resistentes a desinfeccin que las bacterias, incluyendo E. coli. Los virus representan un blanco pequeo para la radiacin ionizante. Generalmente los virus entricos son resistentes al cido y el virus de la hepatitis A es bastante resistente al secado. Los virus que se encuentran en el agua o en otras superficies pueden ser inactivados mediante agentes oxidantes fuertes, tales como cloro u ozono y por medio de la luz ultravioleta. La mnima temperatura interna y el tiempo de coccin que asegura la inactivacin de los virus y otros microorganismos patgenos son referidos en la tabla 6.2.

VIRUS DE LA HEPATITIS A
Existen al menos 6 clases de virus de la hepatitis. Solo los virus de las hepatitis A y E se trasmiten de persona a persona, por contacto o contaminacin del alimento o el agua, el resto lo hacen por va sexual o sangunea.

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Tabla 6.2. Mnima temperatura interna y tiempo de coccin que asegura la inactivacin de los virus Alimento Pollo y carnes rellena Carne molida Carne de cerdo Carnes inyectadas Pescado picado Huevo en platillo Rosbif Pescado, mariscos, carne de res (cubos, rebanadas), huevos en cascarn y otros guisos potencialmente riesgosos Tiempo 15 s 15 s 15 s 60 s 3 min 3 min 12 min 15 s Temperatura (C) 73,9 68,3 68,3 65,6 62,8 62,8 60,0 62,8

Agregar 14 s en cada caso si se usa horno microonda

El virus es resistente a solventes orgnicos, al pH cido y a la cloracin normal del agua, lo que facilita su diseminacin y contagio; su perodo de incubacin es de 2 a 4 semanas, est presente en las heces de 1 a 2 semanas antes de que aparezcan los sntomas y tambin durante la primera, segunda o tercera semana de la enfermedad. La trasmisin de persona a persona puede causar epidemias en escuelas y campamentos, casi siempre los nios son los ms afectados. La contaminacin vrica del agua o los alimentos constituye una fuente frecuente de infeccin. Se calcula que en los pases desarrollados del 20 al 50 % de los adultos han sido infectados y han desarrollado inmunidad (anticuerpos), mientras que en los pases en desarrollo la infeccin es ms frecuente y se detecta en el 90 % de los adultos. El virus infecta las clulas hepticas, causa hepatitis (inflamacin y lesin heptica), las manifestaciones clnicas ms frecuentes son fiebre, anorexia, nuseas, vmitos e ictericia (color amarillo de la piel) siendo esta ms frecuente en los adultos. Hay acolia (heces incoloras) y coluria (orina color coca-cola). Es raro que se desarrolle insuficiencia heptica grave y peligrosa para la vida, esto solo ocurre en el 1 % de los casos. El resto evoluciona favorablemente, elimina el virus, no queda como portador sano y se hace inmune al nico tipo de hepatitis A que existe.

VIRUS DE LA HEPATITIS E
Se excreta con las heces y se disemina por va fecal-oral; su forma clnica es similar a la del virus de la hepatitis A y es infrecuente en pases desarrollados. Existen casos de infeccin trasmitida por agua, constituye el 50 % de los casos de hepatitis espordica en los pases en desarrollo. El perodo de incubacin es de 6 a 8 semanas; la enfermedad suele ser leve aunque afecta gravemente a las embarazadas con elevado porcentaje de morbimortalidad (20 %). El virus se elimina cuando el paciente se recupera y no deja portadores.
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ROTAVIRUS
Tienen una distribucin de tipo cosmopolita; afectan al hombre y a distintas especies animales (gatos, perros, vacas, caballos y cerdos). Se cree que los virus de una especie pueden infectar ocasionalmente a otra especie. Este tipo de virus es susceptible a los desinfectantes que tienen cloro entre sus componentes pero es resistente al pH cido, lo que le permite llegar al intestino sin problemas. Tiene un perodo de incubacin de 1 a 4 das. Los sntomas se inician con vmitos y, al multiplicarse en las clulas intestinales, aparece la diarrea que se prolonga durante 3 a 5 das como mximo. La infeccin es frecuente en nios menores de 2 aos, por el escaso desarrollo de su sistema inmunolgico. Ocasionalmente aparecen infecciones de este tipo en adultos, lo que ocurre cuando presentan ciertas alteraciones en la mucosa intestinal, que favorece la entrada del virus y el desarrollo de la enfermedad. Los nios tendrn un cuadro diarreico y con vmitos durante 3 a 5 das, la minora sufrir grave deshidratacin que implica riesgo para la vida, y en otros puede presentarse como un cuadro asintomtico. La presencia del rotavirus desarrolla un cuadro violento, con abundantes vmitos en las primeras horas y deposiciones lquidas en los 3 a 5 das siguientes, lo cual implica impedimento de la llegada de lquidos al aparato digestivo; prdida de agua y electrlitos por las deposiciones lquidas y por la fiebre. La diarrea es la manifestacin clnica de esta infeccin.

ADENOVIRUS
Estos virus ocupan el segundo lugar, despus de los Rotavirus, como agentes causantes de diarrea aguda en nios pequeos, en los que provoca sntomas leves. Otras cepas estn relacionadas con enfermedades respiratorias y oculares. La va de trasmisin es fecal-oral, a travs del agua o de otros vectores como las moscas. Ingresa por va oral, resiste el pH cido del estmago y llega al intestino donde se desarrolla la enfermedad. Es muy frecuente en comparacin con otros microorganismos. El pronstico es bueno y puede prevenirse con medidas higinico-sanitarias adecuadas, control de moscas, etc.

CALICIVIRUS
Causan la llamada enfermedad de los vmitos invernales. Uno de sus agentes es el virus Norwalk; tienen una distribucin de tipo cosmopolita, son los principales causantes de gastroenteritis en nios mayores y adultos (alrededor del 40 %). Los sntomas que con mayor frecuencia se observan son cefaleas, dolor muscular, escalofros, vmitos y diarrea. Resisten las altas temperaturas (son termoestables) y el pH cido; no tienen una estacin predominante, aparecen durante todo el ao. Cumplen con la va de trasmisin fecal-oral y se asocian con el consumo de mariscos (mejillones, berberechos) de aguas contaminadas con materia fecal.
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Poseen un perodo de incubacin de 24 a 48 h y la enfermedad se prolonga durante 3 4 das. Los sntomas pueden surgir en forma gradual o brusca. Producen alteraciones en las clulas del intestino (enterocitos), principalmente en las microvellosidades, inhibiendo enzimas y provocando mala absorcin de nutrientes (azcares y grasas). Las deposiciones suelen ser algo blandas, sin moco, pus, ni sangre ya que no invaden la mucosa. Los adultos mayores infectados tienen cierta resistencia a no reinfectarse durante 2 aos. Afecta tanto al hombre como a distintas especies animales. Para prevenir este tipo de infeccin se recomienda cocinar bien los alimentos, por lo menos a 70 C durante 30 min y tomar medidas higinicosanitarias. Las personas que han sido infectadas por el virus Norwalk son propensas a tener reinfecciones despus de aproximadamente un ao, con otros serotipos de virus. El virus evidentemente se propaga en grandes cantidades, y pequeas cantidades (an no se han medido) son infecciosas por va oral; sin embargo, las partculas virales individuales no parecen ser excepcionalmente resistentes a la inactivacin por calor o cloro.

ASTROVIRUS
Tienen una distribucin de tipo cosmopolita, ms frecuentes en invierno, afectan principalmente a nios menores de 3 aos y causa sntomas leves. El perodo de incubacin es de 3 a 4 das y la enfermedad se prolonga hasta un mximo de 5 das, aparecen sntomas como fiebre, cefalea, dolor muscular y diarrea, lo ms comn es que en la persona se manifieste de forma sintomtica. En la patogenia de la enfermedad, en estudios con adultos voluntarios, se observa atrofia de las vellosidades intestinales e infiltrados inflamatorios en la lmina propia, dando lugar, al igual que los rotavirus, a la disminucin de la actividad de las disacaridasas y produccin de diarrea osmtica. En humanos existen pocos datos acerca del mecanismo de entrada del virus en las clulas susceptibles del husped, aunque el ms probable parece ser el de endocitosis. La enfermedad atribuida a astrovirus consiste, principalmente, en la instauracin aguda de diarrea, malestar, cefalea, nuseas, vmitos e hipertermia leve. El cuadro clnico tpico es autolimitado, con una duracin de 1 a 5 das. Los episodios pueden ser espordicos o presentarse en forma de brotes. Se han descrito casos de diarrea prolongada asociada con eliminacin fecal de virus; en un estudio reciente en Bangladesh se detectaron astrovirus en el 15 % de los cuadros de diarrea persistente estudiados. Desde el punto de vista clnico, la gastroenteritis por astrovirus es ms leve que la producida por rotavirus, ya que presenta menos duracin de la diarrea y menor incidencia de fiebre y vmitos, lo cual se traduce tambin en mayor frecuencia de deteccin en pacientes ambulatorios que en los que requieren hospitalizacin. La necesidad de ingreso hospitalario en nios con gastroenteritis por
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astrovirus se ha cifrado en 1-2 % de los pacientes atendidos por ese motivo. La mortalidad atribuible a esta enfermedad es prcticamente nula, aunque se ha comunicado algn caso aislado. El perodo de incubacin se ha establecido, segn los datos de estudios en voluntarios adultos: de 3 a 4 das, aunque podra ser de 24 a 36 h segn otros estudios. Principalmente, la enfermedad se manifiesta en nios durante los 3 primeros aos de edad, con mayor frecuencia entre los 6 y 18 meses de vida. La historia natural de la enfermedad es menos conocida que en el caso de rotavirus. Aunque se crea que la mayora de infecciones por astrovirus eran sintomticas los estudios de cohortes han demostrado hasta un 24-74 % de infecciones asintomticas.

OTROS ENTEROVIRUS: VIRUS ECHO Y VIRUS DE LA POLIO

La poliomielitis paraltica fue importante en la dcada de los 50, se trasmite por alimentos. Los alimentos implicados son los crudos o manipulados tras cocerlos, hielo, helados, pasta, ensaladas y mariscos. La contaminacin procede de los propios manipuladores o del agua. Los sntomas son diversos, ocasionan gran variedad de enfermedades. Los sntomas varan de acuerdo con el tipo de enfermedad y se pueden encontrar bajo varios diagnsticos: gastroenteritis aguda, faringitis viral, herpangina (lceras bucales), crup, infeccin de las vas respiratorias superiores, neumona, pericarditis, miocarditis, meningitis asptica, encefalitis. Las complicaciones varan de acuerdo con el tipo de infeccin y su localizacin. La miocarditis y la pericarditis pueden ser fatales, mientras que infecciones de otro tipo pueden mejorar de manera espontnea.

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CAPTULO 7

Introduccin a la toxicologa alimentaria

Miguel O. Garca y Eyda Otero Fernndez-Trebejo

La toxicologa alimentaria es una rama de la ciencia que se ocupa de las fuentes, niveles de exposicin, transformacin en los alimentos, toxicocintica, efectos biolgicos, prevencin, anlisis y legislacin de sustancias presentes, natural y antropognicamente en los alimentos con significacin para la salud de los consumidores. Una sustancia txica ser aquella que al penetrar al organismo humano y animal, por cualquier va y al ser absorbido, bloquea los mecanismos metablicos normales de ese organismo. En el caso de los txicos alimentarios, prcticamente la va de penetracin es la oral mediante los alimentos y el agua de beber. De particular importancia para la prevencin del riesgo, por ingestin de las sustancias txicas en los alimentos, es el conocimiento y control de sus fuentes, o sea, su origen, por lo que a partir de este criterio se clasifican en naturales (componentes del alimento y toxinas producidas por microorganismos) y antropognicos (intencionales, accidentales y los generados durante el procesamiento de los alimentos). En estrecha relacin con las fuentes se encuentran los niveles de exposicin, los cuales estn determinados por la dosis de aplicacin (para el caso de los txicos intencionales), la magnitud de los residuos en los alimentos y las cantidades y frecuencia de consumo de estos. La disminucin de la exposicin influye extraordinariamente en la reduccin del riesgo toxicolgico y es objeto fundamental de la toxicologa. Muchos componentes y contaminantes de los alimentos se transforman en sustancias de mayor toxicidad para el hombre, por lo que es preciso identificar y conocer los mecanismos y factores que influyen en esas transformaciones para prevenirlos. Para los txicos intencionales, cobra importancia atender al perodo de carencia o de espera, el cual determina cunto tiempo debe esperarse para consumir un alimento de acuerdo con la degradacin en el ambiente (ejemplo, un plaguicida en el suelo) o su toxicocintica en el organismo animal (ejemplo, un medicamento veterinario) y est muy vinculado con la dosis de aplicacin. La toxicocintica comprende los procesos implicados en la absorcin, distribucin, metabolismo y excrecin del txico en el organismo vivo. La fraccin de la dosis ingerida que alcanza la circulacin general del organismo despus de
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la absorcin se denomina biodisponibilidad. Una dosis nica de un txico alimentario no es muy frecuente, pero en la exposicin crnica, que es lo ms general, el equilibrio de las concentraciones plasmticas del txico se alcanzar cuando las cantidades ingeridas sean iguales a las cantidades excretadas por unidad de tiempo. Las transformaciones metablicas pueden conducir a la detoxificacin o a la bioactivacin. En este ltimo caso suelen formarse metabolitos ms txicos a partir de sustancias poco txicas o no txicas. Las enzimas microsomales hepticas desempean un importante papel en el metabolismo de muchos txicos alimentarios. Las sustancias que se excretan sin cambio carecen de toxicidad. Otras no se metabolizan entera ni rpidamente, se acumulan y constituyen un riesgo toxicolgico crnico. La acumulacin progresiva de un txico en un organismo vivo se denomina bioacumulacin, fenmeno que con frecuencia ocurre con sustancias liposolubles y persistentes. El incremento de la concentracin en los diversos organismos vivos, elementos de la cadena trfica-alimentaria, cuando llega al hombre da lugar a la biomagnificacin. Los efectos biolgicos (toxicodinmica), inducidos por los txicos alimentarios, comprenden los procesos biofsicos y bioqumicos que aparecen como respuesta, los daos histopatolgicos, la genotoxicidad, teratogenicidad y carcinognesis, entre otros efectos especiales. Algunos efectos son reversibles y estn relacionados con la concentracin del txico en los fluidos o tejidos del organismo. Otros, la mayora, son irreversibles y se asocian con la interaccin de molculas reactivas, en muchos casos entre zonas nucleoflicas y txicos electroflicos per se o por biotransformacin. En el caso de txicos reversibles, el factor tiempo adems de la dosis, tiene obvia influencia en la respuesta adversa. Para los txicos irreversibles, aunque existen sistemas de reparacin del material gentico y la capacidad de sintetizar nuevas protenas, estos sistemas son limitados y el tiempo entre la administracin del txico y la respuesta son proporcionales y dependientes a y de la dosis total acumulada. De ah, la importancia en la evaluacin toxicolgica de la denominada curva dosis-respuesta, la cual pone de manifiesto que en la prctica la toxicidad depende de la dosis, y puede en general determinarse el nivel que no causa efecto observado (NOEL), que aplicando un factor de seguridad, se puede establecer la dosis diaria admisible de un txico por toda la vida, que para sustancias que se ingieren se denomina IDA, expresada en mg del compuesto/kg de peso corporal; un parmetro muy til para evaluar y comparar el riesgo por ingestin sistemtica en toxicologa alimentaria. Desafortunadamente, las evaluaciones toxicolgicas, por su complejidad y costos, suelen realizarse a sustancias por separado. Hay que tener en cuenta que diversos txicos alimentarios se ingieren de forma sistemtica y en conjunto, pudiendo ocurrir efectos adversos por interaccin, acumulativos y sinrgicos entre compuestos no evaluados, por ello se debe, no solo no alcanzar la IDA, sino para mayor seguridad, que la ingestin de los txicos se aleje de ese valor.
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La prevencin requiere tener en cuenta todos los aspectos mencionados de que se ocupa la toxicologa alimentaria, y como colofn es necesaria una legislacin que gue como proceder para prevenir. Un parmetro de extrema importancia en este sentido ser el establecimiento y cumplimiento de las tolerancias o ms correctamente, los lmites mximos de residuos de los txicos naturales, aditivos y contaminantes qumicos en los alimentos, los cuales son las cantidades mximas permisibles expresadas en mg del txico/kg de alimento. Todo lo anterior explica claramente, porqu la toxicologa alimentaria se auxilia de diversas disciplinas cientficas: qumica analtica y estructural, biologa y bioqumica, gentica y patologa experimental, higiene y nutricin, as como epidemiologa, y porqu los conocimientos sobre toxicologa alimentaria son de inters para varios campos de trabajo, personal profesional y tcnico multidisciplinario. Esta rama cientfica es til y necesaria para las esferas de salud pblica (toxiclogos, epidemilogos, nutricionistas, higienistas y naturistas), y de la industria agroalimentaria (veterinarios, agrnomos, qumicos analistas y tecnlogos de alimentos, normalizadores y especialistas de control de la calidad de los alimentos).

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CAPTULO 8

Txicos naturales que forman parte del alimento

Eyda Otero Fernndez-Trevejo y Jorge Luis Rodrguez Daz

Entre la clasificacin de compuestos txicos de origen natural pueden distinguirse aquellos que forman parte del alimento, algunos llamados factores antinutricionales, y son sustancias que pueden interferir en los procesos metablicos o en la biodisponibilidad de nutrientes. Estos tienen la capacidad de reaccionar o interferir con un nutrimento, disminuyendo su biodisponibilidad, y a largo plazo (toxicidad crnica) producir una anormalidad fisiolgica y/o anatmica, que en la mayora de los casos es irreversible; sin embargo, el propio nutrimento puede actuar como antagonista, por lo cual, una fortificacin de este en la etapa inicial del efecto daino, puede atenuar o eliminar el problema.

FACTORES ANTIVITAMNICOS
Compuestos que disminuyen o inhiben la actividad de una vitamina. Avidina. Es una glucoprotena antagonista de la biotina, la cual se une con gran afinidad para formar un derivado insoluble que impide su biodisponibilidad. Fue aislada por vez primera por Eakin y colaboradores en 1940 y se encuentra presente en la clara de huevo cruda, mientras que la biotina es un componente de la yema. La biotina (vitamina del complejo B, llamada tambin vitamina B8 H) es un cido monocarboxlico estable al calor, por tanto resiste los tratamientos de coccin, pero menos estable a los lcalis, soluble en agua y alcohol y susceptible a la oxidacin. Es la coenzima de las carboxilasas, a la cual se une por medio de un enlace peptdico ~amino de un resto de lisina situado en el centro activo; el pptido formado por lisina y biotina se llama biocitina. Esta unin tiene la capacidad de fijar dixido de carbono. Interviene en la formacin de la glucosa a partir de los carbohidratos y de las grasas; alivia dolores musculares, el eczema y la dermatitis, tambin ayuda a combatir la depresin y la somnolencia. Otras fuentes que aportan alto contenido de biotina en la dieta lo constituye el hgado, la leche, el pescado, los guisantes secos, las setas, la levadura de cerveza y los frutos secos. La flora intestinal tambin es capaz de sintetizar cantidad considerable de biotina, ya que la eliminacin fecal y urinaria es mucho ms elevada que la ingestin diettica.
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Sin embargo, la avidina presente en la clara de huevo cruda es capaz de inhibir la actividad de la biotina ingerida mediante la dieta y sintetizada por las bacterias intestinales. La evidencia de la presencia de un factor de toxicidad por clara de huevo fue observada por primera vez en 1916 por Bateman en ratas alimentadas con una dieta que contena clara de huevo cruda como nica fuente de protena, las que manifestaron un sndrome por deficiencia de biotina, caracterizado por trastornos neuromusculares, dermatitis grave y prdida de pelo. Este sndrome poda evitarse al cocer la protena o al administrar un suplemento con biotina. En seres humanos, los signos y sntomas de deficiencia incluyen lesiones descamativas de la piel y las mucosas, dermatitis, hiperestesia, dolor muscular, anorexia, anemia leve y cambios en el electrocardiograma. Se ha observado deficiencia espontnea en algunos individuos que han consumido huevos crudos durante perodos prolongados. La deficiencia clnica aparece en escasas ocasiones, aunque la sintetizan las bacterias intestinales en gran cantidad y aparece en la mayora de los alimentos. Tiaminasas. Las tiaminasas son otro factor antinutricional presente en algunos alimentos, capaces de inhibir la accin de la tiamina o vitamina B1, que acta como coenzima en reacciones del metabolismo de carbohidratos principalmente, aunque tambin en el de protenas, grasas y cidos nucleicos; su deficiencia puede producir beri-beri. Las tiaminasas de tipo I pueden estar presentes en carne y vsceras de animales acuticos, t, caf, nueces y sustituye el grupo tiazol de la molcula de tiamina por una base. Las tiaminasa de tipo II presentes en helecho, cerezas y arroz entre otros, escinden la molcula de tiamina a nivel del grupo metilo. Ambas se destruyen con una coccin a 60 C, por lo que no son de importancia en alimentos bien cocinados.

INHIBIDORES DE PROTEASAS
Son enzimas naturales que hidrolizan las protenas y se clasifican segn el aminocido involucrado en su mecanismo de accin: Proteinasas serina: tripsina y quimotripsina (enzimas esenciales del pncreas). Sulfidrilproteinasas (papana, bromelina y ficina). Metaloprotenas: carboxipeptidasas A y B. Aminopeptidasas. Carboxilo acdicas proteinasas. Antitripsina o inhibidores de proteasas (tripsina-quimotripsina). Los inhibidores de proteasas ms estudiados son los inhibidores de la tripsina, ya que esta familia de protenas inhibe amplia variedad de proteasas adems de la tripsina. Tanto la tripsina como la quimotripsina son enzimas proteolticas del pncreas, segregadas al intestino delgado. La tripsina cataliza la hidrlisis peptdica de los grupos carboxilos aportados por la lisina y la arginina, mientras que la quimotripsina lo hace para grupos carboxilos aportados por la fenilalanina, tirosina y triptfano.
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Los inhibidores de la tripsina son comunes en la soja; tambin pueden estar presentes en huevos, leche, productos lcteos, patatas, porotos negros y otros vegetales. Actan unindose tanto a la tripsina como a la quimotripsina, formando complejos estables e inactivos con las enzimas, que producen una hipertrofia pancretica. Las enzimas pancreticas tanto tripsina como quimotripsina son ricas en aminocidos azufrados (aa), la hipertrofia o hiperplasia pancretica desva estos aa de la sntesis de protenas hacia la sntesis de estas enzimas. Como un efecto secundario, regulado por mecanismos feed-back negativos, se estimula la secrecin de enzimas pancreticas. El resultado neto es una prdida de protena endgena, rica en aminocidos azufrados, que provoca retraso en el crecimiento estimado entre 30 40 % y bajo ndice de eficiencia proteica (PER). Algunos de estos inhibidores como los del maz actan en forma competitiva con la tripsina y la quimotripsina. En general, los inhibidores de las proteasas pueden ser destruidos por el tratamiento con calor. Esta inactivacin depende del pH, la temperatura, el tiempo de calentamiento, las condiciones de humedad, el tamao de partcula, etc. Tambin es posible la inactivacin mediante la reduccin de los puentes disulfuro. El tratamiento por calor requerido desnaturaliza las protenas mejorando su digestibilidad, ya que la protena de soja no desnaturalizada, es parcialmente resistente al ataque de las enzimas. Por otro lado, conduce a una reduccin de sus propiedades funcionales tales como la solubilidad y la unin agua-grasa. Un tratamiento por calor excesivo puede resultar en protenas daadas, disminucin de los aminocidos disponibles y digestibilidad ms baja de la protena, lo que representa un riesgo en productos comerciales procesados. Se considera que los productos de soja adecuadamente procesados, con una concentracin de inhibidores de la tripsina menor que 2,5 mg/g, no afectan a la digestibilidad ni el crecimiento de animales jvenes. Hervor por 3 min inactiva el 90 %. Adems del calor es necesario el control del tiempo, humedad y pH. Inhibidor de browman-birk. Los inhibidor de browman-birk constituyen un segundo factor antiproteoltico de la soya. Tambin aparece en las patatas constituyendo entre el 15 y 20 % de las protenas solubles del tubrculo. Acta como inhibidor de la quimotripsina ms que de la tripsina. Es un heptapctido de 7 puentes disulfuro con 2 centros activos: uno para tripsina y otro para quimotripsina. Se destruyen con un proceso de calentamiento adecuado y ptimo por ms de 100 oC y 3 min. Frijoles del gnero Phaseolus tienen 6 inhibidores insensibles al calor, cido y lcalis que se unen a la tripsina en mayor proporcin que a la quimotripsina.

TANINOS
Son polifenoles derivados de los cidos glico y elgico. Producen en los alimentos que lo contienen un sabor astringente. Se encuentran en gran nmero
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de productos vegetales, como el sorgo y diversos helechos as como en cacao, t, bananas y habas. Desde hace tiempo se conoce la reduccin en la biodisponibilidad de las protenas cuando estas se administran junto con los taninos; sin embargo, no es concluyente que estos compuestos provoquen cncer. A pesar de esta situacin, se considera que algunas poblaciones de frica desarrollan cncer del esfago al consumir una dieta basada en sorgo con alto contenido de taninos. Se combinan con las protenas reduciendo su biodisponibilidad, por lo que disminuye el valor biolgico de los alimentos y aumentan la excrecin fecal de nitrgeno. En frutas aparece en niveles de 0,2 a 1 % de peso fresco y en verduras entre 0,5 y 2 %. Destruyen la vitamina B1 Disminuyen las reservas de vitamina A. Reducen la disponibilidad de vitamina B12. Pueden asociarse a iones di y trivalentes, de lo que se desprende una disminucin de la disponibilidad de hierro, aunque puede resultar beneficioso cuando reduce la absorcin de algunos metales pesados como el plomo. Se encuentran en los alimentos como helechos.

CIDO FTICO (CIDO MIOINOSITOL 1,2,3,4,5,6 HEXAFOSFATO)

Conocido tambin como antivitamina D relacionado con la mala absorcin de calcio. Se presenta casi siempre en la naturaleza como un complejo fitatomineral-protena. El cido ftico constituye una fuente de fsforo no bioasimilable, por lo que aquellos alimentos con derivados hidroxilados de cido ftico dan un mayor aporte de fsforo biodisponible. Disminuye la absorcin o biodisponibilidad de minerales divalentes como: calcio, magnesio, hierro, cinc, cobre y molibdeno, formando con ellos sales insolubles, por lo que provoca disminucin de la formacin de gastroferrina en el intestino y puede contribuir a la descalcificacin del organismo a travs de las heces. Se encuentra en alimentos como cereales, soya, leguminosas, oleaginosas, zanahorias, etc. Se inactiva con el calor, los cidos o la presencia de fitasas.

OXALATOS
cido oxlico (COOH-COOH). Disminuye la absorcin o biodisponibilidad de minerales divalentes. Su carcter txico es derivado de la disminucin de la asimilacin de calcio, formando sales de dbil disociacin que dan lugar a la formacin de clculos renales. Se considera como dosis letal mnima 5 g. Se encuentra en alimentos como el cacao, t, papas, espinaca, ruibarbo, etc.

HEMOAGLUTININAS
Son protenas o pptidos, tambin llamadas lectinas, consideradas ms txicas que los inhibidores de tripsina.
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Se adhieren a los carbohidratos sobre la superficie del intestino delgado (duodeno y yeyuno) y causan daos en la pared intestinal. Como consecuencia, la permeabilidad del intestino aumenta, por lo que las lectinas y otros pptidos puedan ser absorbidos y tengan efectos perjudiciales sobre el sistema inmunolgico y algunos rganos. La unin con la mucosa intestinal tambin produce disminucin en la absorcin de nutrientes, cambio en la actividad de las enzimas digestivas, hipersecrecin de protena endgena debido a la descamacin de clulas daadas, aumento en la produccin de mucinas y prdida de protenas del plasma en el lumen intestinal. Son aglutinantes de los eritrocitos o de las clulas malignas y con frecuencia activan la mitosis; reducen la capacidad de absorcin intestinal. Se encuentra en alimentos como frijoles negros y blancos, guisantes, lentejas, soya, chcharo, peces, moluscos, crustceos y esponjas. Las lectinas de la soja representan el 1 % de las protenas del grano y en los porotos blancos hasta el 10 %. El nivel de lectinas de los productos de protena de soja procesados de forma adecuada es extremadamente bajo, menor que 0,5 mg/g, por consiguiente, no es de esperar que las lectinas desempeen un papel importante en la determinacin de la calidad nutritiva de las protenas de soja.

COMPUESTOS PRODUCTORES DE FAVISMO

El favismo esta relacionado con la aparicin de anemia hemoltica en regiones de Italia, Sicilia, Cerdea, Grecia, Irak, etc., las que se vinculan con el consumo de faba, o con la inhalacin de su polen, que posee elevado contenido de divicina e isouramilo. Son oxidantes del glutatin. En personas con deficiencia de la glucosa 6 fosfatodeshidrogenasa eritrocitaria, la cual acta en la generacin de NADPH, (quien interviene en la formacin de glutatin reducido por accin de la glutatin reductasa), provocan niveles bajos y patolgicos del mismo e insuficiencia de NAPH. Esto ocasiona anemia hemoltica, ya que el glutatin reducido es necesario para mantener la integridad de la membrana celular. Esta enfermedad prevalece en las regiones insulares y litorales del Mar Mediterrneo donde se reportan 5 casos por cada 1 000 habitantes, donde se ha observado una relacin entre consumo de faba, deficiencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenada y manifestacin de anemia hemoltica. Otros efectos son dolor de cabeza, fiebre, trastornos gastrointestinales, hemoglobinuria, hematuria masiva, metahemoglobinemia y anuria. En las semillas se encuentran en forma de glucsidos txicos (5--Dglucopiransidos) como: Divicina vicina. Isouramilo convecina. La vicina y la convecina son hidrolizadas por glucosidasas de microorganismos del intestino o en la semilla por su propio metabolismo.
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Se encuentran en mayor concentracin en la parte seca de la semilla, por lo que son ms txicos los concentrados proteicos o las tortas. En las habas secas hay aproximadamente 2 % de estos compuestos.

GLUCSIDOS CIANOGNICOS
Los glucsidos cianognicos estn ampliamente distribuidos en las plantas y constituye la forma orgnica en que se acumula el cianuro en cantidad de trazas. Ms que metabolito secundario, como en un principio se crea, son considerados metabolitos intermediarios en la biosntesis de algunos aminocidos. Han sido muy estudiados, observndose que derivan de aminocidos. Los precursores de los glucsidos de importancia en alimentos son los siguientes: L-tirosina precursor de durrina, L-fenilalanina de prunasina, L-valina de linamarina y L-isoleucina precursor de lotaustralina. Algunas plantas pueden acumular alta concentracin de este tipo de compuestos. El glucsido no es txico por s mismo, pero s el cido ciandrico (HCN) generado por la hidrlisis enzimtica de la -glucosidasa, cuando el material biolgico es macerado o daado. El HCN acta a nivel de citocromo oxidasa, es decir que es un potente inhibidor de la cadena respiratoria. La DL50 del HCN, administrado por va oral, es de 0,5 a 3,5 mg/kg; causa problemas de anoxia histotxica. Sera suficiente ingerir 100 g de una semilla cruda para tener consecuencias fatales especialmente en nios y ancianos. Debido a la naturaleza de los aminocidos precursores, el aglucn puede ser de tipo aromtico, aliftico o cclico. Tambin puede haber variacin en la naturaleza del carbohidrato; sin embargo, de los 32 glucsidos reportados, la mayora son monosacridos, por lo que la D-glucosa es el azcar ms comn. En la naturaleza existen ms de 100 especies que contienen glucsidos cianognicos y no exclusivamente asociados con leguminosas. Otras semillas de fruta que contienen CN- son: almendras, duraznos, cerezas, ciruelas, manzana, etc. Diferentes plantas tambin poseen glucsidos cianognicos como bamb, chaya, sorgo, soya, yuca, etc. La manera de expresar la concentracin de estos factores txicos en las plantas que los contienen, es mediante HCN liberado de ellos, donde es de suma importancia la accin de la glucosidasa. Se han desarrollado mtodos donde se tiene que adicionar la enzima que hidroliza a este tipo de glucsido, no obstante, que la misma planta en la mayora de los casos tenga su propia enzima, esto con el fin de realizar adecuada cualificacin de dichos txicos. Sobre lo anterior, se ha observado que las plantas que contiene este tipo de glucsidos, a la vez, contienen la enzima que los hidroliza, pero en diferente sitio celular; sin embargo, la actividad y sensibilidad de la respectiva enzima es muy variable. Algunas personas en Sudamrica presentan ataxia neuroptica debido al consumo de yuca. La accin enzimtica que se lleva a cabo es por una -gluco91

sidasa. Por lo general, diferentes culturas han aprendido que la fermentacin de la yuca les brinda un producto libre de cianuro y puede ser usada como alimento. Durante la biotransformacin se llegan a tener niveles altos de tiocianato, ya que el cianuro reacciona con productos de la degradacin de la cistena. El cianuro y el tiocianato (que puede causar problemas de bocio), finalmente son eliminados en la orina como cianometahemoglobina.

TRATAMIENTO DE LA INTOXICACIN PRODUCIDA POR CIANURO

De las reacciones anteriores se deduce que un aumento en la concentracin de tiocianato favorecer la eliminacin de cianuro, lo cual justifica el suministro de tiosulfato como antdoto, a pesar del riesgo de la formacin de compuestos bociognicos. Un tratamiento alternativo comprende el uso de vitamina B12. Con respecto a la eliminacin de estos compuestos, desde el punto de vista gentico en la actualidad se han obtenido variedades mejoradas, con un contenido significativamente bajo en estos txicos, como es el caso del frijol de Lima. Cuando el material ya contiene este tipo de glucsidos, el tratamiento trmico en seco, aunque elimina la actividad enzimtica, no sucede lo mismo con los glucsidos, por lo que se obtiene solo una ligera disminucin, ya que estos son termoestables. Un procedimiento para la eliminacin de estos txicos consiste en fraccionar el material y a continuacin someterlo a un precocimiento, donde la temperatura no sobrepase de 50 C, mantener estas condiciones ms o menos una hora, con lo cual se producir la autoliberacin del HCN; adems, es aconsejable eliminar el agua de coccin, ya que si hay presente glucsidos intactos, estos se encontrarn en dicha fase polar. Se considera que 900 g de harina de habichuela de Lima pueden matar un buey. Las hojas de algunas especies de cerezos pueden contener ms de 200 mg de HCN por 100 g. Un kilogramo de yuca fresca puede liberar hasta 400 g de HCN, que pueden ser reducidos a 500 mg/kg despus de los procesos de coccin. En algunos pases de frica como Nigeria, Zaire y Camern se ha observado elevada incidencia de bocio y alteraciones neurolgicas en grandes consumidores de yuca por la actividad anxica directa del HCN sobre el SNC. La tabla 8.1 muestra diversos alimentos que contienen glucsidos cianognicos. La dosis de glucsidos cianognicos que sobrepasan el umbral de toxicidad depende de: Cantidad de alimento ingerido. Dieta. pH del contenido gstrico. Cantidad de HCN libre en la planta. Concentracin de las enzimas glucosidasas. Velocidad de ingestin del alimento.
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Tabla 8.1. Contenido y tipo de glucsidos cianognicos en diversos alimentos Especies Leguminosas Concentraciones (mg/100g) Lentejas (Ervum lens) Judas Frijoles y habichuelas del gnero Phaseolus Chcharo Ciruelo Cerezo Melocotonero Manzano Almendro Yuca o mandioca Tipo

2 14,4- 312 2,3

Phaseolunatina

Rosceas (rboles frutales de Europa) Tubrculo

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Amigdalina (ms comn) Prunasina Prulaurasina Linamarina

Los rumiantes son la especie animal ms susceptible, ya que las enzimas que participan en los mecanismos de destoxificacin se destruyen con el cido clorhdrico del rumen. Existen algunos aminocidos precursores de glucsidos cianognicos: Tirosina durrina. Fenilalanina prunasina. Isoleucina lotaustralina. Valina linamarina.

GLUCOSINOLATOS
Como resultado de la hidrlisis de los glucosinolatos en presencia de tioglucosidasas se forman ciertas sustancias que tienen propiedades bociognicas, estas son: nitrilos, tiocinatos, isotiocianatos, tioizasolidina y goitrina. Estos compuestos tienen una accin competitiva en la iodacin de la tirosina por desplazamiento de los iones ioduro en los puntos de insercin del epitelio de la glndula tiroides, ya que tienen radio inico similar y mayor afinidad con los receptores. Como consecuencia se produce atrofia de la glndula tiroides y una prdida de ion ioduro por la orina. En la tabla 8.2 se muestran algunos alimentos que contienen cantidades importantes de glucosinolatos. Los efectos bociognicos en el hombre pueden aparecer cuando se alcanzan, como mnimo 20 mg de goitrina o de 200 a 1 000 mg de tiocianato. La col contiene 4 tipos de glucosinolatos en su parte activa: aglucona y antocianos. La aglucona puede contener: 50 mg/kg de tiocianato, 100 mg/kg de
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Tabla 8.2. Alimentos que contienen glucosinolatos Especies Col Col de Bruselas Nabo Rbano Mostaza Coliflor Cebolla Mandioca

isotiocianato y 10 mg/kg de tioizasolidina. La ingestin de 500 g de col diaria durante 2 semanas disminuye de manera significativa la fijacin de iodo por la tiroides.

SAPONINAS
Son glucsidos con propiedades tensoactivas que pueden producir espumas, por lo que son utilizados en algunos pases como aditivos alimentarios, como correctores del sabor, aunque por sus propiedades txicas en otros pases se prohbe su uso. Tienen accin antimictico y bacteriosttica. Interactan con el colesterol y eventualmente con protenas de membranas de los glbulos rojos, causando su hemlisis. Extremadamente txicos para animales de sangre fra (anfibios, peces, etc.). No se ha podido demostrar in vivo, por lo que se plantea que esta actividad hemoltica es contrarrestada por el plasma sanguneo. En la tabla 8.3 se relaciona un grupo de alimentos que contienen saponinas de forma natural.

ALCALOIDES (SOLANINA Y CHACONINA)

Los alcaloides son bases nitrogenadas muy termorresistentes, parecidas a los lcalis. Se encuentran generalmente como glicoalcaloides, formando sales
Tabla 8.3. Alimentos que contienen saponinas de forma natural Alimentos Alfalfa Espinaca Remolacha Esparrago Soja T Otros Veneno de serpiente Estrella marina

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con los cidos oxlico, actico, lctico, mlico, tartrico y ctrico. En este grupo se distinguen ms de 6 000 sustancias que tienen una actividad biolgica importante, ya que siguen el ciclo del metabolismo nitrogenado, por lo que pueden intervenir en las principales reacciones del metabolismo celular, adems de que suelen presentar un mimetismo hormonal; las ms frecuentes son la solanina y la chaconina. Se presentan en la piel y brotes de papas inmaduras en el rango de 1 a 13 mg/100 g, y son inhibidores de la colinesterasa. La solanina se acumula al retardarse la maduracin, as como en el almacenamiento en fro y con luz. Los sntomas producidos son malestares gastrointestinales, desrdenes neurolgicos, estado semicomatoso y dao hemoltico del tracto intestinal. En casos graves se presentan edemas cerebrales, coma, calambres y muerte. La DL50 en ratas (oral) es de 590 mg/kg. Su baja toxicidad se debe probablemente a que existe absorcin lenta y rpida eliminacin; adems, la solanina puede ser degradada de forma enzimtica a solanidina (aglucn), que es menos txica que la molcula original. Se considera que puede ser el agente causal de la espina bfida en el hombre. Las concentraciones difieren segn la variedad. En variedades comestibles comerciales se ha informado un contenido que est en el rango de 1,5 a 15 mg de glicoalcaloides/100 g de papa, llegando hasta 200 mg de glicoalcaloides/100 g de material fresco variedades silvestres, valor que est muy superior del lmite permitido, que es de 20 mg/100 g de papa. Este tipo de sustancias txicas, an despus de sometidas a coccin producen daos severos en los animales que las consumen. El almacenaje y manipulacin inadecuada de los tubrculos, particularmente su exposicin a la luz, puede incrementar su actividad txica por el aumento de los niveles de estos compuestos que le atribuyen al tubrculo un fuerte sabor amargo, por lo que se debe evitar su exposicin a la luz.

XANTINAS
Son una familia de compuestos relativamente no txicos, donde se distinguen la cafena, teofilina, teobromina y paraxantina encontradas en mayores proporciones en el caf, t, mate, cola y cocoa. Tienen propiedades diurticas, son relajantes de la fibra muscular lisa, que se manifiesta sobre el msculo cardaco. Se considera que pueda tener algn efecto teratognico especialmente la cafena, la que se considera a su vez la droga estimulante ms aceptada desde el punto de vista social y, a su vez, la menos perjudicial. Las xantinas son consideradas compuestos estimulantes del SNC en estados de aburrimiento o fatiga. De acuerdo con los expertos, la cafena estimula el cerebro al interferir en la accin de la adenosina (un trasmisor nervioso que produce calma y tranquilidad) y provoca sensacin de euforia y de fuerza durante algunas horas en dosis habituales de 2 a 4 tazas diarias -150 a 250 mg. Tambin facilita la actividad intelectual y la creatividad, al mantener despierto y en estado
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de alerta a su consumidor; todo esto ocurre junto con un incremento de los niveles de adrenalina y noradrenalina, que son neurotrasmisores activadores. En el nivel del sistema cardiovascular acta estimulando el corazn -incrementa la frecuencia cardaca y la fuerza de contraccin- y adems aumenta la presin arterial en forma transitoria. Tanto la cafena como la teofilina provocan disminucin del flujo sanguneo cerebral por vasoconstriccin de los vasos pericraneales, aliviando de esta manera la cefalea; pueden ser utilizadas en el tratamiento de la migraa. Otro efecto importante es que aumenta la secrecin de jugos -como el cido clorhdrico y la pepsina- en el estmago, esta accin la convierte en una droga irritante de la mucosa gstrica, pero a su vez tiene accin antiespasmdica en la vescula. La cafena posee tambin un leve efecto diurtico, aumenta la capacidad de trabajo muscular, refuerza la contraccin, as como retarda y alivia la fatiga. Por ltimo, se considera que la cafena tiene alguna accin sobre el metabolismo de las catecolaminas, lo que se relaciona con la aparicin de la esclerosis coronaria, encontrndose una correlacin entre la ingestin de caf y la concentracin de lpidos y lipoprotenas del suero en pacientes cardacos. Provoca muy pequeo efecto en los pulmones, dilatando los bronquios. El elevado consumo de cafena puede provocar estado de ansiedad, excitacin e insomnio, temblor, efectos cardiovasculares, diuresis, aumento generalizado de la sensibilidad y disminucin de los reflejos. La teofilina y la praxanina son ms activas farmacolgicamente que la cafena. La teobromina es la de menor potencial. Toxicidad aguda de la cafena: 150-200 M en plasma. Provoca sntomas tales como inquietud, excitacin, delirios, temblores, taquicardia, etc. Concentraciones letales: 0,5-1 mM (75 tazas de caf consumidas en 30 min). Otros estudios informan que 0,5 g de cafenas en 5 tazas de caf pueden causar falta de sueo, palpitaciones e incluso angina de pecho y que de 150 a 200 mg/kg de peso corporal es letal en el hombre. La mxima concentracin en la sangre se alcanza entre los 30 y 45 min de haberla ingerido. A las 3 h ya se ha eliminado la mitad de lo que se ha absorbido. Algunos compuestos como los anticonceptivos y los frmacos para el corazn o las lceras reducen la capacidad del organismo para eliminar la cafena por los riones, esto puede provocar insomnio, irritabilidad y palpitaciones. La cafena reduce el efecto sedante de algunos tranquilizantes y si se toma con algunos antidepresivos, puede causar una crisis de hipertensin arterial grave y alteraciones del ritmo cardaco.

ALCOHOLES
Su consumo en forma moderada (200-300 g/da) ha sido asociado con disminucin de los ataques cardacos, sin embargo, su utilizacin ms all de esos
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parmetros puede actuar como agente de gran toxicidad sobre el sistema nervioso, la sangre, el estmago, hgado, pncreas, corazn, msculos y huesos. Debido a que el lupus es una enfermedad multisistmica, se aconseja consumir alcohol en forma modesta o directamente suprimirlo, porque puede interactuar con los antiinflamatorios y los corticoides, causando problemas gastrointestinales, lcera pptica o gastritis; puede tambin interactuar con los sedantes y barbitricos, desvirtuando sus efectos. Una intoxicacin alcohlica aguda puede dar lugar a estados de sobreexcitacin, que desde el punto de vista fsico se exterioriza en forma de reduccin de la capacidad de rendimiento, alteracin y parlisis circulatoria, as como irritacin de la mucosa gstrica (gastritis, modorra). En caso de abuso prolongado de alcohol aparece una intoxicacin alcohlica crnica, que puede manifestarse mediante polineuritis, ataxia, temblor, trastornos mentales, dilatacin cardaca, cirrosis heptica y esclerosis renal, adems, ocurre degeneracin anmica de la personalidad. Se ha demostrado en fechas recientes que la ingestin de alcohol durante la gestacin, incluso en cantidades moderadas, puede producir daos graves en el feto, especialmente retraso en el desarrollo fsico y mental; la forma ms grave de este retraso, poco frecuente, se llama sndrome de alcoholismo fetal. El metanol, carbinol o alcohol metlico es el ms simple de los alcoholes y se caracteriza por ser incoloro. Se denomina alcohol metlico o alcohol de madera porque originalmente se obtena de la destilacin de esta materia prima en ausencia de aire. La toxicidad obedece a su transformacin en cido frmico y formaldehdo, con la propiedad de precipitar las protenas de las vas nerviosas causando dao irreparable, mecanismo responsable de la destruccin irreversible del nervio ptico que causa ceguera. El cido frmico, adems produce acidosis metablica severa. La ingestin directa produce la respuesta ms rpida, de 50 a 100 mL es una dosis mortal, mientras que de 25 a 50 mL son frecuentemente mortales si el paciente no es tratado de inmediato. La tolerancia individual vara mucho. Se deben tomar todas las precauciones para evitar que el metanol sea ingerido por error. Es txico en las formas lquida o vapor, por lo que puede ingresar al organismo por inhalacin o a travs de la piel (especialmente por va de cortes o lastimaduras) y es rpidamente absorbido por los fluidos del cuerpo. Su biotransformacin se realiza principalmente en el hgado y su eliminacin como cido frmico por va urinaria. En menor porcentaje se elimina por la va enteroheptica. Tratamiento de la intoxicacin por metanol: Lavado gstrico con carbn activado en las primeras 4 h despus de la ingestin. Lquidos parenterales.
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 Vendaje ocular precoz. Tratar la acidosis mediante la administracin de bicarbonato de acuerdo con los gases arteriales. Administracin parenteral de etanol (1 mg/kg). Se utiliza la infusin intravenosa de etanol absoluto diluido en dextrosa al 5 %, para pasar en 15 min, continuando con una dosis de 125 mg/kg/h con el objetivo de mantener concentraciones sanguneas de etanol de 100 a 200 mg/dL, las cuales causan ebriedad; este tratamiento se debe mantener durante 72 h. El etanol es la droga ms antigua usada por el hombre, una de las que provoca ms dependencia y que afecta principalmente el hgado. El alcohlico sufre una variacin biolgica cualitativa de la respuesta del sistema nervioso. Entre los principales daos que causa su ingestin se encuentra: irrita la mucosa del esfago, el estomago y el intestino cuyas funciones digestivas altera. Tambin puede originar diarrea crnica y cirrosis heptica, en esta enfermedad el tejido normal del hgado es reemplazado por cicatrices fibrosas que impiden el cumplimiento de las importantes funciones de este rgano; causa neumonas, abscesos pulmonares; produce insuficiencia cardaca, alteraciones del ritmo de los latidos del corazn, su agrandamiento e hipertensin. Disminuye la actividad de los leucocitos y la resistencia de las enfermedades, provoca desinhibiciones, lentitud en los reflejos, incoordinacin muscular, dificultades en la memoria, desorientacin en el tiempo y espacio. Adems ocasiona modificaciones en el carcter, con perodos de tristeza, pereza, irritabilidad y de violencia, pesadillas, alucinaciones nocturnas especialmente relacionadas con precipicios, animales y monstruos que lo atacan.

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CAPTULO 9

Micotoxinas en alimentos
Eyda Otero Fernndez-Trevejo

La garanta de la inocuidad de los alimentos constituye un reto para productores y comercializadores, as como una responsabilidad de las autoridades de salud. Muchos son los factores de origen ambiental que pueden causar contaminacin directa o indirecta por compuestos qumicos que provocan daos a la salud. Entre los mltiples factores ambientales que pueden ser causa directa o indirecta de la contaminacin de alimentos y forrajes, tienen especial importancia las micotoxinas, por su amplia distribucin en la naturaleza, no se limita a determinadas regiones sino que constituye un problema mundial. Las micotoxinas son consideradas metabolitos secundarios txicos producidos por hongos microscpicos durante la fase estacionaria de su crecimiento. Los hongos pueden acarrear peligros graves a la salud del hombre y los animales cuando crecen de forma descontrolada, pueden cambiar la textura, el olor, el color, el sabor y la calidad de muchos alimentos, lo que contribuye a su descomposicin. Estos cambios pueden resultar favorables cuando son provocados y controlados por la mano del hombre mediante el uso de cepas inocuas como es el caso de los procesos fermentativos. El hbitat fundamental de los hongos es el suelo, y sus esporas son aerivagantes, lo cual hace a los productos agrcolas, tanto los subterrneos como areos un sustrato favorable a la contaminacin, la que puede ocurrir en el campo desde las tempranas etapas de floracin. Aunque las principales dificultades se presentan en etapas deficientes de la poscosecha (recoleccin, secado, almacenamiento y procesamiento), donde las condiciones para la proliferacin de hongos saprfitos suelen ser favorables. La presencia de propgulos de hongos no indica necesariamente la existencia de toxinas ya que no todas las especies son toxignicas, sino un riesgo potencial de contaminacin. Aunque los mayores niveles se registran en granos visiblemente daados, se ha demostrado que la contaminacin puede aparecer en granos aparentemente sanos, o en aquellos donde el hongo ha perdido su viabilidad. Los hongos productores de micotoxinas de mayor importancia pertenecen a 3 gneros: Aspergillus, Penicillium y Fusarium. Tambin pueden citarse algunas especies de Alternaria, Claviceps, Rhizopus, Sclerotinia, Rhizoctonia,
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Cladosporium, Byssochlamys, etc. Sin embargo, la produccin de micotoxinas est restringida a un nmero pequeo de especies, e incluso a ciertas cepas de una misma especie, estando afectada adems por la disponibilidad de nutrientes en el sustrato y por diversos factores ambientales. Entre los factores ambientales ms importantes que influyen sobre el crecimiento de los hongos y la produccin de micotoxinas, estn la temperatura y la actividad de agua (aw), que a su vez est muy relacionada con la humedad relativa ambiental. En lo que respecta a la temperatura ptima y temperaturas extremas de crecimiento, as como para los valores de aw que resultan limitantes para el desarrollo y la biosntesis de las toxinas, los requerimientos son variables. En muchos casos la produccin del metabolito ocurre solo en un rango de aw considerablemente ms elevado que el requerido para el crecimiento del hongo y en un rango de temperatura ms estrecho. Otros factores que influyen en la proliferacin de los hongos y la produccin de micotoxinas en los alimentos pueden ser los daos mecnicos y la accin de agentes biolgicos tales como insectos y roedores, los que aumentan la susceptibilidad a la infeccin, aadiendo que los propios agentes pueden portar esporas de hongos e introducirlas en los productos atacados. A ellos se suma la competencia microbiana que hace que la presencia de otras especies rivales disminuya o anule la produccin de micotoxinas. El genoma de la planta hospedera es otro factor que hace a ciertas especies resistentes a la infeccin, debido a sus caractersticas qumicas. Cuando los hongos pueden sintetizar ms de una toxina, las condiciones ambientales tambin influyen sobre el tipo y la cantidad de metabolitos producidos. Muchas han sido las sustancias aisladas de alimentos y piensos, consideradas micotoxinas, pero solo unas pocas de ellas han sido involucradas como agentes causales de micotoxicosis humana o animal, las ms importantes son las aflatoxinas, ocratoxina A, zearalenona, tricotecenos, fumonisinas, patulina y las toxinas del ergot entre otras. Las micotoxinas provocan efectos txicos a la salud, de forma aguda o crnica en dependencia de la dosis de ingestin y el tiempo de exposicin. Pueden penetrar al organismo en su forma original cuando estn presentes en los alimentos directamente contaminados, como los productos de origen vegetal. Tambin suelen llegar biotransformadas como residuos de metabolitos presentes en los alimentos de origen animal como leche, huevo, tejidos de msculos y vsceras procedentes de cras que han sido alimentadas con piensos elaborados a partir de cereales enmohecidos. Las micotoxicosis aguda son fundamentalmente un problema de salud animal, ya que los alimentos deteriorados son habitualmente rechazados por el hombre y muchas veces desviados a la alimentacin animal, adems son fcilmente detectadas por la intensidad y especificidad de sus manifestaciones. Efectos agudos en el hombre han causado serias afectaciones a la salud de diferentes poblaciones en el mundo, con efectos incluso letales.
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Para el hombre la toxicidad crnica suele suscitar mayor preocupacin, ya que est asociada al consumo de pequeas cantidades de toxinas en perodos prolongados. Para este tipo de intoxicaciones es difcil establecer una relacin causa-efecto, ya que los sntomas se manifiestan de manera tarda y la intensidad y naturaleza de los efectos puede variar por otros factores como el sexo, la edad, el estado de salud del individuo, la composicin de la dieta, el tipo y la concentracin de la toxina en los alimentos, la exposicin simultnea a otros agentes txicos y el tiempo de exposicin a la ingestin. Tambin es comn que en los alimentos aparezcan mezclas de diferentes toxinas que puedan actuar de forma sinrgica. La contaminacin por micotoxinas en los alimentos, adems de incidir en la salud pblica, tiene implicaciones econmicas al repercutir adversamente en la produccin agropecuaria, afectar la disponibilidad de ciertos productos y su comercializacin en el mbito regional e internacional. Muchas veces resulta difcil evaluar el impacto econmico derivado no solo de las prdidas directas de cosecha y ganado, tambin de los costos mdicos y veterinarios asociados con la micotoxicosis, y de los programas de prevencin y control diseados con la finalidad de reducir el riesgo para la salud humana y animal. Las principales micotoxinas identificadas como contaminantes de alimentos y forrajes se estudian a continuacin.

TOXINAS DEL ERGOT

Constituyeron el primer registro de agentes causales de micotoxicosis humana, que tuvieron lugar en Europa y el Lejano Oriente desde la Edad Media hasta principios del siglo XX y que causaron la muerte a un considerable nmero de personas. En 1875 fueron identificados estos compuestos como alcaloides (ergolinas) derivados en general del cido lisrgico, entre los que se encuentran la ergotamina, ergocristina, ergocriptina y ergometrina a partir de ciertas especies de mohos del gnero Claviceps, en particular del C. purpurea. Estas toxinas aparecen fundamentalmente en el centeno y otros cereales como la avena, el trigo, la cebada, etc. El ergotismo se caracteriza por la aparicin de gangrenas debido a efecto de vasoconstriccin, lo que se conoce como fiebre de San Antonio. En otros casos pueden aparecer convulsiones, en dependencia del tipo de ergolina presente, y si adicionalmente se detecta deficiencia de vitamina A. Casi siempre aparecen nuseas, vmitos repetidos, mareos y cefaleas seguidos por prolongados sueos de hasta 24 y 48 h. Pueden provocar contracciones uterinas, por lo que es empleado en medicina como oxitxico. Se considera que la exposicin del hombre a estas toxinas est ampliamente diseminada en el mundo, aunque los niveles son muy bajos debido al proceso de beneficio y elaboracin que llevan los alimentos preparados con estos productos.
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AFLATOXINAS
Las aflatoxinas son las micotoxinas de ms amplia distribucin en el mundo, halladas como contaminantes en muchos tipos de alimentos, por tanto han sido tambin las ms estudiadas. Constituyen un grupo de compuestos fluorescentes qumicamente relacionados con estructuras de difuranocumarinas. Las ms importantes son las aflatoxinas B1 (AFB1), B2 (AFB2), G1 (AFG1) y G2 (AFG2), que son halladas frecuentemente unidas en diferentes proporciones en los alimentos contaminados. La AFB1 es la ms frecuente y txica. Su nomenclatura est basada en sus propiedades fsico-qumicas, ya que las B presentan fluorescencia azul (blue) y las G fluorescencia verde cuando se observan bajo la luz ultravioleta. El subndice 1 indica mayor movilidad cromatogrfica que el 2. Algunos productos de su metabolismo pueden ser excretados por los fluidos biolgicos y considerados como mecanismo de detoxificacin. Tal es el caso de la aflatoxina M1 (AFM1), principal metabolito hidroxilado excretado en la leche de los mamferos, incluyendo el hombre, cuando han consumido alimentos contaminados con AFB1. Sus efectos txicos son similares a los de AFB1 y tiene una potencia de aproximadamente un orden de magnitud inferior que la molcula original. Otros productos del metabolismo son la aflatoxina P1, eliminada como glucurnido, la aflatoxina Q1 y el aflatoxicol. Los procesos de biotransformacin metablica, en cambio, pueden llevar a la formacin de intermediarios altamente reactivos, capaces de unirse al DNA, RNA o protenas, y conducir a la mutagnesis, carcinognesis o efectos txicos agudos. Las aflatoxinas fueron descubiertas como agente causal de una micotoxicosis aguda que afect a pavos de crianza en el ao 1960 en Inglaterra y que caus la muerte a millares de ellos, en los que se observ la presencia de lesiones en el hgado. El aislamiento de estos compuestos en una pasta de cacahuetes, usada en la formulacin de su alimento, y la posterior comprobacin de su potente potencial cancergeno, constituy la primera evidencia del peligro potencial que representa la presencia de los hongos capaces de producir metabolitos txicos en los alimentos. Produccin. Son producidas fundamentalmente por 2 especies de hongos del gnero Aspergillus: A. flavus y A. parasiticus, predominantes en las regiones tropicales y subtropicales. Otra especie productora a sido considerada A. nomius; estas especies son componentes comunes de la microflora de los suelos y productos agrcolas, contribuyen activamente a su deterioro. La proporcin de cepas no toxignicas es mayor en la especie A. flavus, que produce fundamentalmente aflatoxinas de los tipos B1 y G1. La mayora de las cepas de A. parasiticus son toxignicas y potentes productoras de las 4 aflatoxinas, al igual que las de A. nomius. En el caso de los hongos del grupo A. flavus, la temperatura ptima de crecimiento es aproximadamente 37 oC, pero la mxima acumulacin de aflatoxinas tiene lugar en el rango de 25 a 30 oC, y valores de aw cercanos a 0,98 con un lmite inferior de 0,85.
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Los datos de contaminacin sitan al man y al maz como los cultivos de mayor incidencia. Tambin ha sido detectada en otros granos (sorgo, cebada, avena, trigo, centeno y arroz) y semillas (algodn, copra, girasol, pistacho, nueces, soja, almendras, legumbres, especias y algunas frutas como los higos). En alimentos de origen animal se han encontrado residuos de AFB1 en huevos de gallinas ponedoras, tejido muscular y vsceras y la AFM1 en leche de vaca y derivados. Aunque sus productores crecen con mayor facilidad en condiciones de almacenamiento, se han encontrado cultivos de man y maz recin cosechados, con niveles considerables de contaminacin. Esto ha demostrado que tambin puede ocurrir en el campo, asociado a condiciones de estrs de la planta. Toxicidad. La toxicidad de las aflatoxinas ha sido demostrada en diferentes especies de animales y en el hombre, y decrece en el orden de B1 a G2, o sea, B1>G1>B2>G2. La susceptibilidad de sufrir una aflatoxicosis est relacionada con la rapidez de penetracin de las aflatoxinas en el hepatocito. Las funciones comunes de la clula heptica se vern alteradas cuando logren atravesar la membrana y se introduzcan en el ncleo, el cual capta 1/3 del total de las aflatoxinas que ingresan en el tejido heptico. Primeramente se unen al DNA e inhiben la sntesis del RNA, derivndose una marcada disminucin de la sntesis de protena. Efectos biolgicos. Las aflatoxicosis agudas han sido bien documentadas en diversas partes del mundo y fundamentalmente en aves, cerdos y ganado. Los sntomas clnicos estn caracterizados por flacidez, disminucin del crecimiento, desorden en la actividad gastrointestinal, sntomas neurolgicos como convulsiones y parlisis, hemorragias mltiples y hasta incluso la muerte. En aves se ha observado inicialmente una disminucin en la produccin de huevos. El hgado es el rgano blanco en los eventos de aflatoxicosis crnica, el cual se torna hiperplsico hasta extremadamente cirrtico, con fibrosis progresiva y desarrollo de tumores, tiene como caractersticas microscpicas aumento y necrosis en las clulas del parnquima heptico, degeneracin grasa, fibrosis y proliferacin de los conductos biliares. La hepatotoxicidad es debida a la biotransformacin de la AF-B1 en el hgado, en 2 fases mediadas por la accin de las oxidasas microsomales de funcin mixta. Por un lado ocurren reacciones de glucuronizacin, sulfacin y acetilacin o reaccin con glutatin, dando lugar a metabolitos fcilmente excretables. Por otro lado las reacciones de oxidacin, reduccin e hidroxilacin originan el 2,3 epoxiaflatoxina B1 (compuesto mutagnico que forma aductos con el DNA), el cual al unirse a las macromolculas de las clulas hepticas provoca daos como hgado graso y plido, necrosis moderada a intensa y hemorragias. La teratognesis ha sido observada en hamsters con 8 das de preadas, a los que se les inyect por va intraperitoneal AF-B1 a razn de 8 mg/kg de peso corporal, lo que provoc un elevado porcentaje de fetos malformados, muertos o reabsorbidos. Este efecto de las AFs, como ocurre para otros teratgenos, se
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observa de forma ms marcada en los primeros estadios de la diferenciacin morfolgica y depende de la dosis. La carcinognesis resultante de estudios realizados en ratas, pavos y monos se ha demostrado con la formacin de tumores, localizados en hgado, colon y rin. La hepatocarcinogenicidad de la AF-B1 ha demostrado ser mayor respecto a las AFs B2 y G2. Tambin ha sido demostrada en otras especies de animales en las que se constat la presencia de tumores de hgado en tiempos variables, despus de comenzar a ingerir la dieta contaminada como se muestra en la tabla 9.1. En determinadas condiciones puede observarse tumores en otros rganos como estmago, esfago, rin o colon.
Tabla 9.1. Efectos carcinognicos de la AFB1 Especies Pato Trucha Mono Rata Dosis 30 g/kg en dieta 8 g/kg en dieta 100-800 mg total 100 g/kg en dieta Duracin de la exposicin 14 meses 1 ao 2 aos 54-88 semanas Frecuencia de formacin de tumores (%) 8/11 (72) 27/65 (40) 3/42 (7) 28/28 (100)

La AFB1 es uno de los ms potentes hepatocancergenos naturales conocidos. En algunas cepas de ratas se verific un aumento apreciable de tumores con niveles dietticos de 1 g/kg. Los efectos cancergenos en animales de granja no tienen demasiada importancia econmica, ya que en la mayora de los casos el perodo de vida til de los animales es normalmente menor que el requerido para producir cncer, es decir, los animales son sacrificados antes de la aparicin de los tumores. Otros efectos asociados a la exposicin de aflatoxinas es la inmunosupresin. Evidencias epidemiolgicas de aflatoxicosis agudas y crnicas. Existen abundantes evidencias epidemiolgicas que sealan a las aflatoxinas como productoras de enfermedades humanas en diversas partes del mundo. El consumo de alimentos altamente contaminados origin algunos episodios de toxicidad aguda, aunque han sido poco frecuentes y en general restringidos en reas con deficiencias alimentarias serias (Taiwan, India, Tailandia y Kenya). El brote ms importante tuvo lugar en 1974 en varias aldeas de una regin al noroeste de la India, el cual afect a casi 400 individuos, con un total de 106 casos fatales. El hecho fue atribuido a que el maz, uno de los componentes bsicos de la dieta de la poblacin, estaba fuertemente contaminado con aflatoxinas, debido a condiciones climticas adversas. Los anlisis realizados posteriormente revelaron niveles muy altos de contaminacin (15 mg/kg) en el maz consumido por algunas familias. Los pacientes fueron afectados por hepatitis acompaada de ictericia, vmitos, breves perodos de fiebre y anorexia. La muerte de los pacientes fue precedida por fuertes hemorragias gastrointestinales.
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En 2 villas de Taiwan, 26 personas se intoxicaron con arroz elaborado, que contenan 200 g/kg de AFB1, 7 adultos sufrieron solo sntomas ligeros, 19 nios desarrollaron edemas en las piernas, dolores abdominales, vmito, inflamacin en el hgado y fiebre, en 3 de ellos ocurri la muerte de 6 h a 1 mes de iniciado los sntomas. Se ha considerado que las aflatoxinas podran ser el agente causal de la cirrosis aparecida en nios de diversas reas de la India, Sri Lanka, pases del sureste de Asia, oeste de frica, Medio Oriente y el Caribe. Esta enfermedad afecta principalmente a nios entre 1 y 1,5 aos de edad. Los cambios histopatolgicos son: infiltracin de las clulas del hgado, seguido de desintegracin de las clulas, fibrosis, orina amarilla, ictericia, acumulacin de lquido en el abdomen y edemas en las piernas. Las muestras de almendras colectadas de las familias afectadas mostraron niveles de contaminacin entre 2 y 100 g/kg de AFB 1. Las aflatoxinas podran estar relacionadas con una enfermedad conocida como sndrome de Reye, una encefalopata combinada con degeneracin grasa del hgado, que se da en nios y adolescentes, con una baja incidencia pero con mortalidad elevada. Investigaciones llevadas a cabo en diversos pases especialmente en Tailandia, donde este sndrome es bastante frecuente, se demostr la presencia de aflatoxinas en el hgado de los pacientes que haban muerto por esta enfermedad, en tanto que la toxina estaba ausente en los tejidos de pacientes que haban muerto por otras causas. Este sndrome tambin se asocia con ciertas enfermedades virales, por lo que en la actualidad, si bien no se excluye la posibilidad de que las aflatoxinas estn implicadas, se cree que no sera el nico agente causal. Los primeros sntomas de la enfermedad son vmitos, niveles bajos de glucosa sangunea, convulsiones y presencia de amonaco en la sangre, coma y muerte. En la India se encontr aflatoxina B1 y M1 en la leche de las madres de nios lactantes que presentaban cirrosis heptica, as como tambin AFM1 en la orina de los nios. En relacin con la salud humana, el problema principal es el de la aflatoxicosis crnica asociada con la incidencia de cncer primario de hgado, lo que se ha demostrado en estudios epidemiolgicos de diferentes reas geogrficas (Tailandia, Swazilandia, Mozambique, Uganda y Kenia). En Mozambique, donde se reportaba la mayor incidencia mundial de cncer de hgado, se estim una ingestin per cpita de aflatoxinas varias veces mayor que en otras regiones estudiadas. La mayora de estos estudios fueron criticados por no tener en cuenta posible incidencia de otros factores ambientales, como el virus de la hepatitis B, muy comn en estos pases. An considerando estas limitaciones, la OMS y el JECFA (1999) consideraron que las aflatoxinas son carcingenos para el hgado humano, siendo la AFB1, la ms potente. La potencia de las aflatoxinas en individuos portadores de hepatitis B es considerablemente mayor que en los individuos no portadores.
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OCRATOXINAS
Las ocratoxinas fueron descubiertas en frica del Sur por un grupo de cientficos que frecuentemente aislaban cepas de Aspergillus ocraceus, responsables de ciertos efectos txicos en animales de laboratorios. Se conocen 3 compuestos de este grupo con estructuras qumicas similares, la ocratoxina A fue la ms txica, presenta en su molcula un tomo de cloro responsable de su carcter txico. Se conocen como ocratoxinas a un grupo de compuestos que poseen fenilalanina ligada a una isocumarina por el grupo amida. De los metabolitos identificados en este grupo la de mayor importancia por sus efectos txicos y su amplia distribucin en la naturaleza y en los alimentos es la ocratoxina A. Hongos productores. La ocratoxina A es producida de forma natural por los hongos A. ocraceus y P. viridicatum, aunque algunas cepas de P. verrucosum son productoras muy potentes de esta toxina. Las condiciones ambientales para la produccin de ocratoxina A en alimentos son: aw ptima de 0,99 con un valor lmite de 0,85 y temperatura ptima de 31 C con un recorrido que vara de 19 a 37 C. Esta toxina se produce por P. verrucosum a temperatura ptima de 24 C y aw ptima de 0,97 con un valor lmite de 0,9. Alimentos ms susceptibles a la contaminacin. La ocratoxina A se ha encontrado en maz, trigo, sorgo, arroz y caf verde. La cebada y la avena han sido los cereales con niveles de contaminacin ms elevados informados en Dinamarca, otros pases escandinavos, las zonas de los Balcanes y la India. Tambin han sido encontrados residuos de ocratoxina A en vsceras y huevos de gallinas ponedoras y en leche de mamferos. Toxicidad. Efectos biolgicos . La ocratoxina A es una sustancia nefrotxica. Estas toxinas atacan de forma selectiva al rin, afectan fundamentalmente los tbulos proximales, tambin algunas tienen actividad hepatotxica sobre todo si se ingieren en altas dosis. Se ha demostrado sus efectos teratognicos y carcinognicos en varias especies de animales. En dosis elevadas administradas a animales, pueden observarse daos en diferentes rganos y tejidos, as como en niveles bajos de exposicin los daos se manifiestan solo en los riones. Las lesiones incluyen degeneraciones de los tbulos, fibrosis intersticial y ms tarde hialinizacin de los glomrulos con alteracin de la funcin renal. Esta toxina result ser teratognica en todas las especies estudiadas y existen ciertas evidencias de su accin sobre el sistema inmunolgico. Son las responsables de la enfermedad conocida como nefropata de los Balcanes, por ser endmica de esta rea geogrfica. Efectos bioqumicos. Inhibe la sntesis proteica, por competir con la fenilalanina en la reaccin catalizada por la fenil-ARN sintetasa. Interfiere en la fosforilacin oxidativa y el organelo blanco es la mitocondria. Evidencias epidemiolgicas. La ocratoxina A ha sido involucrada en micotoxicosis denominada nefropata porcina que es endmica en Dinamarca. Estudios realizados en ese pas permiten asociarla con la presencia de concentraciones
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elevadas de esta toxina en la dieta de los cerdos; adems, se detect la presencia de la toxina en el 35 % de los riones de animales afectados, en tanto que no aparece en riones de animales sanos. La ocratoxina A puede ser encontrada en granos junto con citrinina u otras toxinas del Fusarium, provocando un efecto sinrgico en su toxicidad. Existe en ciertas zonas del rea de los Balcanes (Bulgaria, Rumania y Yugoslavia) una nefropata endmica cuyas caractersticas clnicas e histopatolgicas guardan similitudes estrechas con la nefropata porcina. Algunos estudios preliminares indican que los alimentos consumidos en las zonas endmicas tienen mayor frecuencia y niveles de contaminacin con ocratoxina A que los provenientes de las zonas no endmicas. En otras reas donde la exposicin humana a esta toxina es baja (ejemplo, EE.UU. y Canad) podra ser preocupante la toxicidad crnica, ya que experiencias con animales indican que es cancergena para algunas especies, aunque no se han realizado estudios epidemiolgicos.

ZEARALENONA
Es una sustancia estrognica (con actividad hormonal) derivada del cido resorclico. Tambin se encuentra en los alimentos su derivado hidroxilado (zearalenol) con similares efectos estrognicos. Este compuesto por su actividad anablica ha sido utilizado para incrementar el rendimiento del ganado bovino; su uso actualmente est muy restringido debido a sus efectos txicos. Fue descubierta en millo enmohecido con Fusarium graminearum, implicado en la etiologa de un sndrome de hiperestrogenia en porcinos. Hongos productores. Es producida por numerosas especies del gnero Fusarium. Las que se involucran con mayor frecuencia en brotes de hiperestrogenismo, causados fundamentalmente por la ingestin de maz contaminado, son F. graminearum y F. roseum. Estos hongos requieren elevada disponibilidad de agua en el sustrato. En su mayora son fitopatgenos, capaces de invadir los cultivos en el campo y crecen limitadamente en granos almacenados. Su desarrollo se ve favorecido por temperaturas relativamente bajas (10-15 C). La toxina se produce a temperatura ptima de 25 C y una aw ptima de 0,97 con un valor lmite de 0,90. Alimentos ms susceptibles a la contaminacin. Aparece con frecuencia en el maz en concentraciones elevadas. Tambin se ha detectado en trigo, avena, cebada, sorgo, millo, ssamo, heno y piensos balanceados. Su incidencia no est solo restringida a los cereales, tambin se ha encontrado en otros productos vegetales como la yuca (mandioca), pltano (banano) y porotos. Recientemente se han encontrado residuos de esta toxina en cervezas y otros productos fermentados a partir de millo y sorgo. Toxicidad. La toxicidad aguda de la zearalenona es baja y variable, depende de la especie animal. Su importancia reside en las alteraciones que produce en el aparato reproductor de los animales, cuando las concentraciones en los
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alimentos exceden el nivel de 1-5 p.p.m. Los cerdos son los animales ms sensibles, los efectos son ms evidentes en las hembras como vulvovaginitis, aumento de tamao de las glndulas mamarias, prolapso del tero y recto e hipoplasia de ovario; en los machos el efecto es la atrofia testicular e infertilidad. La ingestin de alimentos contaminados por cerdas gestantes ha sido asociado con abortos, camadas pequeas y mortalidad de los recin nacidos. Otros animales afectados pueden ser el ganado lechero y las aves. Evidencias epidemiolgicas. Hasta el presente no se ha demostrado que la zearalenona constituya causa de enfermedades que afectan al hombre, sobre todo en aquellos casos de hiperestrogenismo humano. De todas formas es conveniente controlar la exposicin de esta toxina en la poblacin, mediante los alimentos, teniendo en cuenta sus efectos teratognicos en ratas.

TRICOTECENOS
Son alrededor de 30 compuestos biolgicamente activos y relacionados desde el punto de vista qumico. Su estructura bsica es de un sesquiterpeno, con grupos que alternan diferentes posiciones; entre los de mayor importancia se encuentran la toxina T-2, el nivalenol, el deoxinivalenol (DON o vomitoxina) y el diacetoxiscirpenol (DAS), todos ellos involucrados como contaminantes naturales en micotoxicosis que afectan al hombre y los animales. Adems de los mencionados, la toxina HT-2, la fusarenona X y el neosolaniol se consideran importantes desde el punto de vista de la toxicologa alimentaria. El DON es uno de los tricotecenos ms distribuido en los alimentos, pero a la vez, uno de los menos txicos. La toxina T-2 es mucho ms peligrosa, pero afortunadamente ms espordica. Hongos productores. Los tricotecenos son producidos por varios gneros de hongos como Myrirhecium, Cephalosporium, Stachybotrys y Trichoderma. El productor ms importante es el Fusarium, ya que algunas especies de este gnero han sido aisladas de alimentos e involucradas en micotoxicosis que afectan al hombre y los animales. El productor ms importante de toxina T-2 es F. spotrichioides, adems de F. poae. El DON es producido fundamentalmente por F. graminearum y F. culmorum. Alimentos ms susceptibles a la contaminacin. Los cultivos ms afectados son: el trigo, el maz y la cebada, especialmente cuando se les obtiene en regiones de clima fro o templado y en condiciones de humedad elevada. La contaminacin con estos metabolitos ocurre fundamentalmente en las etapas de precosecha. Se ha demostrado la aparicin simultnea de 2 toxinas derivadas de la familia de los tricotecenos, por ejemplo en Japn, el nivalenol se ha encontrado con el DON en trigo y arroz. La zearalenona puede encontrarse junto con los tricotecenos en estos cereales. Toxicidad. Desde el punto de vista toxicolgico son considerados en conjunto porque sus efectos biolgicos son muy similares. En las intoxicaciones agudas no
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existe un rgano blanco definido y los sntomas son muy variados. En animales de granja los tricotecenos originan daos a las mucosas de los rganos digestivos, hemorragias de los rganos internos y menngeas con otros trastornos neurolgicos asociados. Las manifestaciones ms agudas consisten en vmitos y diarreas sanguinolentas, depresin y falta de apetito, as como es usual encontrar lesiones necrticas y hemorrgicas en nariz, boca y tejido subcutneo. Adems existen trastornos hematolgicos, en particular leucopenia muy pronunciada asociada con hipoplasia notoria de la mdula sea. Muchos de estos sntomas se han observado en brotes de micotoxicosis en ganado vacuno, porcino y aves de corral, asociadas al consumo de alimentos contaminados con tricotecenos, particularmente la toxina T-2. El DON, conocido tambin como vomitoxina, acta sobre el sistema nervioso central y causa un sndrome emtico, as como rechazo de los alimentos. Los cerdos son particularmente sensibles a estos efectos observados con dosis tan bajas como 50 g/kg. Evidencias epidemiolgicas. En la actualidad se conoce que los tricotecenos, principalmente la toxina T-2 es la responsable de la enfermedad endmica registrada en Rusia durante la II Guerra Mundial. Conocida como leucopenia txica alimentaria; la epidemia fue causada por el consumo de granos invadidos por hongos del tipo F. poae y F. sporotrichioides. Aos despus se comprob que estas cepas haban producido la toxina T-2 y probablemente otros tricotecenos, favorecidos por las bajas temperaturas a la que se hallaban los granos. El estado nutricional deficiente de la poblacin agudiz los efectos de esta micotoxicosis que se manifestaron con hemorragias severas, lesiones necrticas en la cavidad oral, esfago y estmago, y particularmente marcada leucopenia, resultado de la accin sobre la mdula sea y alteracin del sistema hematopoytico. La mortalidad fue elevada y el problema desapareci cuando la poblacin dej de consumir los granos contaminados. Aunque los datos no son suficientes, la presencia de estas toxinas en los alimentos constituye una preocupacin para las autoridades de salud, especialmente en los pases de climas templados o fros.

FUMONISINAS
Las fumonisinas son una familia de compuestos relacionados estructuralmente derivados de los disteres de propano-1,2,3-cido tricarboxlico y del 2-amino12,16-dimetil polihidroxieicosano, que estn muy distribuidos en el mundo. Se han aislado 8 anlogos de fumonisinas, desde que se descubri en 1988 la FB1, el miembro de mayor significacin toxicolgica. Las concentraciones de FB1 en los cereales y piensos suelen superar las de FB2 y FB3 en 3 veces o ms. Hongos productores. Las fumonisinas son producidas por hongos de varias especies de Fusarium morfolgicamente afines ( F. moniliforme , F. proliferatum, F. globosum, F. napiforme y otros) que pueden producir estas
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toxinas hasta en concentraciones de g/kg en maz esterilizado. F. moniliforme y F. proliferatum figuran entre los hongos ms comunes asociados con el maz y que pueden encontrarse en la mayora de los granos de maz, incluso los aparentemente sanos. Las temperaturas ptimas para el crecimiento del F. moliniforme y F. proliferatum son de 30 a 15 oC, respectivamente, con una actividad de agua entre 0,93 y 0,98. Estas especies de Fusarium causan la podredumbre del grano de maz, que es una de las enfermedades ms importantes de la espiga en las regiones clidas y est asociada con aos clidos y secos y/o daos de insectos. Existe una fuerte relacin entre los daos por insectos y la podredumbre del grano por Fusarium. En espigas de maz contaminadas naturalmente con F. moliniforme se observ gran influencia de las condiciones ambientales en la infestacin de la espiga y la acumulacin de fumonisinas. Desde que comenz la vigilancia en los EE.UU., los aos clidos y secos arrojan mayores concentraciones que los aos fros. Asimismo, en condiciones normales, el maz cultivado en zonas ms fras no resulta contaminado considerablemente por las fumonisinas. Alimentos ms susceptibles a la contaminacin. Se ha encontrado fumonisina B1 (FB1) en el maz y productos de maz procedentes de frica, Asia, EE.UU., Canad, Amrica del Sur y Europa. Se han hallado niveles altsimos en el maz de regiones de Sudfrica (hasta 117 mg/kg) y de China (150 mg/kg), zonas de gran incidencia de cncer de esfago. Los productos del maz para consumo humano estn contaminados por lo general con niveles inferiores a 1 mg/kg, aunque distintos productos de algunos pases pueden alcanzar niveles muchos mayores. En Italia se han encontrado elevados niveles de FB1 (20 mg/kg) en alimentos que contienen maz. Toxicidad. Las fumonisinas son consideradas agentes causales de la leucoencefalomalacia equina (enfermedad del cerebro que suele ser fatal) y del sndrome de edema pulmonar porcino (inflamacin de los pulmones y del trax); ambos casos estn asociados con el consumo de piensos que contienen maz. La FB1 es hepatotxica en la mayora de las especies animales, entre ellas, ratas, caballos, conejos y cerdos. La embriotoxicidad y la teratogenicidad solo se dan, segn se ha observado, con una toxicidad materna simultnea o subsiguiente. Las fumonisinas son nefrotxicas en cerdos machos, ratas, ovejas y conejos. En las ratas y conejos la toxicidad renal se presenta con dosis inferiores respecto a la toxicidad del hgado. Desde el punto de vista experimental, la exposicin a FB1 va asociada con unos niveles elevados de colesterol en la sangre y con alteraciones inmunolgicas en varias especies de animales. La FB1 inhibe el crecimiento celular y provoca acumulacin de bases espingoides libres y trastornos del metabolismo de los lpidos en animales y algunas plantas. Las fumonisinas no son mutgenas en el ensayo de Salmonella, y no inducen la sntesis del ADN imprevista en los ensayos de reparacin de ADN in vitro e in vivo en hepatocitos de ratas. Las fumonisina B1 producen carcinoma de las clulas del hgado y de los conductos biliares en ratas; parece que el cncer de hgado inducido por la FB1 en las ratas, se desarrolla sobre una hepatitis txica
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crnica que culmina en cirrosis. La FB1 es un promotor cancergeno potente e influye en el desarrollo del cncer en ausencia de una hepatoxicidad excesiva a un nivel alimentario ms bajo. No hay suficientes datos para concluir si la FB1 es un carcingeno en toda su extensin. Evidencias epidemiolgicas. A pesar de casos de exposicin humana muy elevada, no hay evidencias confirmadas de una toxicidad aguda por FB1 en seres humanos, aunque en la India se ha producido un brote sospechoso. Pruebas epidemiolgicas disponibles han informado conexin entre la exposicin alimentaria a las fumonisinas y el cncer de esfago en 3 regiones. En la regin de Transkei, Sudfrica, se dan ndices elevados de cncer de esfago en zonas donde se ha demostrado la existencia de exposicin relativamente elevada a las fumonisinas y las condiciones ambientales fomentan la acumulacin de fumonisinas en el maz, que es el alimento bsico de esa regin. Sin embargo, otros factores como las deficiencias nutricionales, las nitrosaminas y otras micotoxinas confunden la asociacin de cncer de esfago con las fumonisinas. En China se han sealados tambin elevados niveles de fumonisinas en el maz procedente de zonas de alto riesgo para el cncer de esfago, no obstante, los datos comparados de niveles de fumonisinas en el maz entre zonas de riesgo alto y bajo, no son concluyentes.

PATULINA
La patulina es una micotoxina producida por varios hongos de los gneros Aspergillus, Penicillium y Byssochlammys. Inicialmente se aisl a partir de Penicillium claviforme y su inters se centr en sus propiedades como antibitico de amplio espectro; puede detectarse en frutas, hortalizas, cereales, forrajes y quesos; est presente en numerosas frutas frescas tras la infeccin natural por Penicillium, la contaminacin ms frecuente es la provocada por Penicillium expansum, se halla en determinadas formas de podredumbre de las manzanas daadas en la superficie, como el moho azul. El grado de contaminacin est relacionado con el grado de podredumbre, y la patulina apenas se extiende fuera de los tejidos daados: por consiguiente, la exposicin humana es ms probable a partir del consumo de frutas elaboradas como pulpas, purs, jaleas y fundamentalmente los jugos, no obstante, no puede excluirse su presencia en las frutas aparentemente sanas. Toxicidad. Tiene efecto citotxico, nefrotxico, hepatotxico e inmunotxico, aunque este ltimo se observa en niveles muy superiores a la dosis sin efecto. Por su elevada reactividad electroflica inhibe varias enzimas como la ARNpolimerasa y ADN-polimerasa. Afecta la transcripcin y la traduccin, as como causa rupturas en el ADN, pero no una sntesis no programada de este; da lugar a aberraciones cromosmicas sin intercambio de cromtidas hermanas. Por consiguiente no hay pruebas evidentes de su potencialidad cancergena, aunque los expertos coinciden en cuanto a la necesidad de realizar estudios de carcinognesis en otras especies distinta a las ratas.
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La ingestin diaria mxima tolerable y provisional (IDMTP) es 0,4 g/kg de p.c./d.

MTODOS DE ANLISIS
Los mtodos cromatogrficos han sido los ms utilizados para la determinacin de micotoxinas en alimentos y piensos. Tanto la cromatografa de placa delgada (TLC) como la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC), de mayor sensibilidad y precisin, se combinan recientemente con procedimientos de purificacin en fase slida o columnas de inmunoafinidad, que garantizan la obtencin de extractos mucho ms puros. Tambin han sido desarrollados mtodos inmunoenzimticos con la ventaja de que la muestra no requiere procedimientos de purificacin y puede ser desarrollado directamente en el terreno.

PREVENCIN Y CONTROL
La principal va de entrada de las micotoxinas a la cadena alimentaria de la poblacin humana y de los animales es a travs de los alimentos de origen vegetal, sobre los cuales se ha producido el crecimiento de los hongos toxignicos. Tambin es posible que se incorporen a la cadena alimentaria humana por alimentos de origen animal (huevo, carne y leche), aunque es poco probable que estos residuos puedan provocar algn tipo de intoxicacin. Las micotoxinas son en general molculas muy estables, una vez ocurrida la contaminacin es muy difcil eliminarlas de los alimentos. No se les puede destruir con tratamientos trmicos, y si bien se han propuesto algunos mtodos de destoxificacin (ejemplo, tratamiento con amonaco y extraccin con solventes), ninguno de ellos hasta el momento ha resultado ser suficientemente eficaz como para ser llevado a la prctica. La utilizacin de las propiedades absorbentes de ciertos silicatos (aluminosilicatos de calcio y sodio hidratados) que mezclados con los piensos retienen las toxinas presentes es actualmente un mtodo muy difundido; estos complejos bloquean la molcula qumica de las micotoxinas e impiden que esta acte y luego son excretados por las heces del animal, por lo que se insiste en las medidas de prevencin que deben aplicarse en las diferentes etapas de la cadena de produccin de los alimentos. Existen factores biolgicos y ambientales que pueden promover la formacin de micotoxinas en el campo, entre los que se incluyen la invasin por insectos, la susceptibilidad o resistencia de los cultivos, las deficiencias nutricionales de las plantas, las condiciones de sequa o lluvias excesivas, etc. Como medidas preventivas en esta etapa se sugieren las buenas prcticas agrcolas como la rotacin de cultivos, preparacin adecuada de los suelos, control de plagas e insectos, irrigacin y empleo de variedades de plantas resistentes a la invasin de hongos toxignicos.
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En la etapa de la cosecha es importante recolectar los productos en el estado justo de madurez y evitar los daos mecnicos. La etapa de poscosecha es crtica, principalmente en relacin con ciertas toxinas producidas por Aspergillus y Penicillium. Un control de la temperatura ambiental, de la humedad y la aireacin son los parmetros principales que permiten lograr el almacenamiento seguro. Una forma adecuada de prevenir la incorporacin de toxinas peligrosas a la cadena alimentaria del hombre es el desvo de productos altamente contaminados para otros fines, ejemplo, la alimentacin animal. El alimento de origen animal ms susceptible a la contaminacin es la leche, la cual puede contener niveles de aflatoxinas M1 que pudieran ser peligrosos, especialmente para la poblacin infantil, por lo que este alimento debe ser estrictamente controlado si consideramos su efecto cancergeno. En el caso de los animales productores de leche se recomienda evitar que estos ingieran piensos altamente contaminados con micotoxinas, por lo que es necesario establecer un control en las fbricas de piensos sobre la calidad sanitaria de los mismos.

LEGISLACIN SOBRE LA PRESENCIA DE MICOTOXINAS EN ALIMENTOS

La necesidad de establecer una legislacin para fijar lmites en la concentracin de micotoxinas en alimentos para humanos y animales est generalmente reconocida en varios pases del mundo. Casi todos los pases desarrollados tienen reglamentaciones para las micotoxinas; por el contrario, muy pocos pases en vas de desarrollo, donde la agricultura es el rengln ms importante y se produce de forma ms artesanal, tienen una legislacin para las micotoxinas. Las micotoxinas no son sustancias agregadas intencionalmente como sucede con algunos aditivos o plaguicidas, tampoco son componentes naturales de los alimentos, como es el caso de otras sustancias txicas. Para algunas micotoxinas -como las aflatoxinas- con demostrado poder cancergeno en los animales y el hombre es deseable evitar por completo su aparicin en los alimentos. Sin embargo, se acepta que las micotoxinas no pueden ser eliminadas completamente modificando ciertos aspectos de las prcticas agrcolas y de manufactura, porque su presencia es el resultado de un conjunto complejo de condiciones climticas. Parece ser que en algunos productos y en determinadas condiciones es inevitable cierto grado de contaminacin. Por otra parte, todava no se ha podido establecer con certeza, ni an en el caso de las aflatoxinas, cul es el nivel por debajo del cual se puede asegurar que no hay efectos adversos (NOAEL). Los lmites mximos permitidos se han establecido sobre la base de soluciones de compromiso entre los intereses de los productores y la proteccin a la salud de los consumidores. Uno de los argumentos en favor de permitir cierto nivel de contaminacin en los alimentos es que, al aplicar lmites muy estrictos, existe el peligro de tener que desechar alimentos necesarios para evitar el hambre en algunas poblaciones. La situacin es crtica cuando se debe evitar el riesgo de cncer sin llegar a la prdida de alimentos indispensables. Tambin se debe tener en cuenta que el lmite mximo permitido no debe ser menor que la sensibilidad de los mtodos analticos. En la actualidad las
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micotoxinas de mayor importancia pueden ser detectadas cualitativa y cuantitativamente, an en laboratorios de mediana complejidad, con lmites de deteccin satisfactorios. Para las aflatoxinas el lmite de deteccin es de aproximadamente 0,1 g/kg.

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CAPTULO 10

Aditivos alimentarios
Grettel Garca Daz y Miguel O. Garca Roch

Los aditivos alimentarios se emplean desde que el hombre aprendi a conservar los alimentos de la cosecha para el ao siguiente, la carne y el pescado con tcnicas de salazn y ahumado. Los egipcios utilizaban colorantes y aromas para realzar el atractivo de algunos alimentos, y los romanos empleaban salmuera (nitrato potsico), especias y colorantes para conservar y mejorar la apariencia de los alimentos. Los cocineros han utilizado a menudo levadura para hacer crecer ciertos alimentos, espesantes para salsas y colorantes, como la cochinilla, para transformar materias primas de buena calidad en alimentos seguros, saludables y apetecibles. En general, los propsitos de la cocina casera tradicional y de la industria alimentaria, que emplea mtodos de elaboracin para preparar y conservar los alimentos, son los mismos. Gracias al desarrollo de la ciencia y la tecnologa de la alimentacin en los ltimos 50 aos, se han descubierto varias sustancias nuevas que pueden cumplir funciones beneficiosas en los alimentos, y estas sustancias, denominadas aditivos alimentarios, estn hoy al alcance de todos. Se define como aditivo alimentario a una sustancia que normalmente no se consume como alimento ni se usa como ingrediente caracterstico del alimento, tenga o no valor nutritivo. Su adicin intencional al alimento con un fin tecnolgico (incluso organolptico) en la fabricacin, elaboracin, preparacin, tratamiento, envasado, empaquetamiento, transporte o conservacin de ese alimento, resulta o es de prever que resulte (directa o indirectamente) en que l o sus derivados pasen a ser un componente de tales alimentos o afecten las caractersticas de estos. El trmino no comprende los contaminantes ni las sustancias aadidas a los alimentos para mantener o mejorar la calidad nutricional, ni el cloruro de sodio. Los aditivos alimentarios constituyen txicos intencionales, pues se adicionan a los alimentos para lograr un objetivo tecnolgico o una propiedad funcional (lo cual constituye la base para su clasificacin), la dosis de uso es semejantes a los residuos que aparecen en los alimentos. Los aditivos alimentarios desempean un papel muy importante en el complejo abastecimiento alimenticio de hoy da. Nunca antes ha existido una variedad tan amplia de alimentos en cuanto a su disponibilidad en supermercados, tiendas alimenticias especializadas y cuando se come fuera de casa.
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Mientras que una proporcin cada vez menor de la poblacin se dedica a la produccin primaria de alimentos, los consumidores exigen que haya alimentos ms variados y fciles de preparar, y que sean ms seguros, nutritivos y baratos. Solo se pueden satisfacer estas expectativas y exigencias de los consumidores empleando las nuevas tecnologas de transformacin de alimentos, entre ellas los aditivos, cuya seguridad y utilidad estn avaladas por su uso continuado y por rigurosas pruebas. Los aditivos cumplen varias funciones tiles en los alimentos, los cuales estn sometidos a muchas condiciones medioambientales que pueden modificar su composicin original, como los cambios de temperatura, oxidacin y exposicin a microbios. Los aditivos alimentarios desempean una funcin fundamental a la hora de mantener las cualidades y caractersticas de los alimentos que exigen los consumidores, y hacen que los alimentos continen siendo seguros, nutritivos y apetecibles en su proceso desde el campo a la mesa. La utilizacin de aditivos est estrictamente regulada, los criterios que se tienen en cuenta para su uso son: que tengan eficacia demostrada, sean seguros y no induzcan a cometer error al consumidor. Las funciones principales de los aditivos alimentarios se pueden resumir en: Conservan la consistencia del producto. Los emulsionantes proporcionan una textura consistente y evitan que los productos se separen. Los estabilizadores y los espesantes proporcionan una textura uniforme y los agentes antisolidificantes facilitan el libre flujo de sustancias. Mejoran o conservan el valor nutricional. El fortalecimiento y enriquecimiento de los alimentos permiti mejorar el estado nutricional de la poblacin en muchos pases, por ejemplo, las vitaminas y los minerales se agregan a muchos alimentos, entre otros, la harina, el cereal, la margarina y la leche, lo cual ayuda a compensar la baja cantidad de vitaminas y minerales o su carencia en la dieta del individuo. Todos los productos que contengan nutrientes agregados deben llevar una etiqueta con su descripcin. Conservan la salubridad y buen sabor de los alimentos. La contaminacin bacteriana facilita el desarrollo de enfermedades por consumo de alimento. Los preservativos reducen el dao que el aire, los hongos, las bacterias o la levadura pueden causar. Los preservativos tales como los antioxidantes ayudan a los alimentos horneados a conservar su sabor, evitan que las grasas y los aceites se vuelvan rancios y que las frutas frescas se vuelvan oscuras cuando estn expuestas al aire. Controlan la acidez y la alcalinidad. Los aditivos especiales ayudan a modificar la acidez o alcalinidad de los alimentos con el objetivo de obtener el sabor, gusto y color deseados. Los agentes derivados de la levadura que liberan cidos, cuando se someten al calor, reaccionan con la soda de hornear para hacer que crezcan los bizcochos, tortas y otros productos horneados. Suministran color y mejoran el sabor. Algunos colores mejoran el aspecto de los alimentos, mientras que gran cantidad de especias, al igual que los sabores sintticos y naturales, ayudan a dar mejor sabor.
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A nivel mundial la Comisin del Cdex Alimentarius, una organizacin conjunta de la FAO y la OMS, que se encarga de desarrollar normas internacionales sobre seguridad alimentaria, est preparando actualmente una nueva Normativa General sobre los Aditivos Alimentarios (General Standards for Food Additives [GSFA]), con el propsito de establecer unas normas internacionales armonizadas, factibles e incuestionables para su comercio en todo el mundo. Solo se incluyen los aditivos que han sido evaluados por el Comit Conjunto FAO/OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios. Como otros txicos vinculados a los alimentos, y ms an en el caso de los aditivos alimentarios, por la intencionalidad de su empleo, para su aprobacin se requiere el cumplimiento de los denominados Principios Generales del Comit del Cdex sobre Aditivos Alimentarios (CCFAC). Los Principios Generales se basan en que los aditivos cumplan 3 aspectos fundamentales: Que su empleo y la dosis de uso estn determinados por la necesidad tecnolgica y no sirva para enmascarar inadecuadas prcticas de elaboracin, mala calidad de la materia prima, ni engao al consumidor. Que cumpla con las especificaciones de identidad y pureza que recomienda y publica peridicamente el Cdex Alimentarius. Que su inocuidad toxicolgica (incluida la carcinognica) haya sido probada mediante experimentos in vitro e in vivo debidamente diseados y realizados, y evaluada por el Comit Mixto FAO/OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios (JECFA). Se han establecido monografas de especificaciones de identidad y pureza para 227 aditivos alimentarios y aromatizantes. La ingestin diaria admisible (IDA) recomendada por el JECFA tiene magnitud numrica, pero hay aditivos sumamente inocuos para los que se recomienda una IDA no especificada o no limitada, en estos casos la magnitud de las dosis de uso (DU) y los niveles mximos admisibles (NM) se limitarn por Buenas Prcticas de Manufactura, atendiendo al mencionado primer Principio General. El nmero de aditivos alimentarios autorizados en las listas positivas recomendadas por el CCFAC en la Norma General sobre Aditivos Alimentarios (NGAA) y en las legislaciones nacionales es muy grande; un nmero relativamente pequeo suelen provocar intoxicaciones agudas cuando hay errores en la dosificacin por negligencias o accidentalmente, como por ejemplo el bromato de potasio empleado durante mucho tiempo como mejorador de la panificacin, el cual ha sido prohibido en muchos pases, y el JECFA le ha retirado la IDA o el conservante autorizado (nitrito de sodio) capaz de causar metahemoglobinemia en nios y ocasionalmente en adultos, por confusin de la sal de cura con la sal comn; sin embargo, en la mayora de los casos el consumo sistemtico de los aditivos alimentarios puede ms bien constituir un factor de riesgo de intoxicaciones crnicas e incluso carcinognesis qumica.
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En este sentido los aditivos alimentarios de mayor riesgo para el hombre sern los que se empleen en los alimentos de alta frecuencia de consumo, en dosis elevadas, los que aparecen en alimentos que los nios suelen consumir y otros grupos poblacionales de alto riesgo, y los que como resultado de las evaluaciones toxicolgicas presenten valores bajos de la ingestin diaria admisible. Por estas razones es muy importante, desde el punto de vista preventivo, establecer y cumplimentar dosis de uso adecuadas de aditivos, con las cuales se evite alcanzar la IDA y con ello se aleje el riesgo por su ingestin. No hay ningn mtodo sencillo de estimar la ingestin como parte de la evaluacin de riesgos; es imposible efectuar estimaciones de ingestin exactas de las dosis de consumo alimentario y particularmente de la ingestin de aditivos alimentarios. La determinacin de la ingestin mxima terica (IDMT) se obtiene cuando se multiplica el consumo diario percpita de cada alimento o grupo de alimentos por los NM de los aditivos. La IDMT constituye gran sobreestimacin, pues para calcularla se asume que todos los alimentos en los cuales est autorizado el aditivo lo contiene en una concentracin igual al NM; que la ingestin del aditivo es diaria durante toda la vida; que todos los alimentos en los que se emplea el aditivo se consumen totalmente sin desperdicios y que la concentracin del aditivo en el alimento no se reduce por el procesamiento o almacenamiento. Si la IDMT no sobrepasa la IDA, no hay motivo de preocupacin, pero si la sobrepasa se debe calcular la ingestin diaria efectiva (IDE), lo cual conlleva entre otras operaciones costosas, a realizar anlisis qumico del contenido del aditivo en los alimentos. La determinacin de la exposicin a los aditivos a partir de las estimaciones percpita (promedio de los datos de ingestin de la poblacin en general) no se basan suficientemente en los consumidores efectivos de los alimentos que contienen los aditivos, y las estimaciones basadas en los consumidores especficos son muy costosas. Cuando se evalan adecuadamente las necesidades tecnolgicas del empleo de diversos aditivos, en diferentes alimentos o grupos de alimentos, no es raro encontrar que las DU necesarias tecnolgicamente son inferiores a los NM, lo cual se puede evidenciar con los estudios de eficacia tecnolgica de aditivos, especialmente de conservadores y antioxidantes. Entre los mtodos ms empleados en los ltimos aos para al menos seleccionar los aditivos con IDA numrica, cuya magnitud y frecuencia de ingestin no den motivos de preocupacin, se encuentra el mtodo presupuestario dans, el cual establece una dosis de uso mxima que d lugar a una ingestin total inferior a la IDA, basado en la cantidad de alimentos slidos y lquidos consumidos que pueden contener el aditivo alimentario del cual se desea evaluar su ingestin, considerando un consumo diario de 1,5 kg de alimentos y 1,5 L de bebidas no alcohlicas. Con la aplicacin de dicho mtodo se ha confeccionado un Proyecto Directrices para la Formulacin de Dosis Mximas de Uso de Aditivos Alimentarios de la NGAA.
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Esas directrices proponen el establecimiento de las DU en funcin del consumo probable y el valor de IDA, por ejemplo, para aditivos alimentarios que solo se emplean en alimentos slidos: si las DU propuestas son menores que una cifra igual a 40 veces el valor de la IDA (40 IDA), no hay ninguna preocupacin. Si dichas DU son mayores que 40 IDA, pero menores que 80 IDA, se consideran aceptables si el consumo diario de alimentos que contienen los aditivos no ser habitualmente superior al consumo total de alimentos slidos previstos, lo que equivale a decir convencionalmente que dicho consumo no es mayor que 12,5 g de los alimentos que contienen el aditivo por kilogramo de peso corporal/da. Si las DU son mayores que 80 IDA y menores que 160 IDA, sern aceptables si dicho consumo no es mayor que 6,25 g/kg de peso corporal/da; si las DU son mayores que 160 IDA y menores que 320 IDA, sern aceptables si dicho consumo no es mayor que 3,13 g/kg de peso corporal/da. Si las DU son mayores que 320 IDA debern realizarse estimaciones de ingestin del aditivo con mtodos ms exactos. Para aditivos alimentarios que solo se emplean en las bebidas, el clculo es semejante, pero los valores de DU propuestas se comparan con valores de 20, 40 y 80 veces la IDA, considerando las DU aceptables cuando el consumo diario de alimentos que contienen los aditivos no ser mayor que 50, 25 y 12,5 mg/kg de peso corporal/da, respectivamente. Si un aditivo se propone para su empleo en alimentos slidos y en bebidas, es necesario asignar una fraccin de la IDA a cada una de las aplicaciones; en principio se puede asignar un valor igual a 50 % de la IDA a cada grupo de alimentos, pero en ciertos casos conviene emplear otras fracciones, siempre que la suma de estas no sobrepase la IDA y lo ms frecuente es que la fraccin de la IDA para bebidas sea mayor que para alimentos slidos. Las primeras evaluaciones realizadas con el mtodo presupuestario indicaron algunas prioridades de aditivos a evaluar. En el Reino Unido, Japn y Los Estados Unidos de Amrica (EE.UU.) coincidieron como aditivos de mxima prioridad cuando se expresan como porcentajes de IDA algunos conservadores, y en Japn y EE.UU. coincidieron tambin algunos antioxidantes fenlicos sintticos. Los aditivos se clasifican en: Agentes de recubrimiento. Antioxidantes. Colorantes. Conservantes. Derivados del almidn. Edulcorantes. Emulsionantes. Gases. Gelificantes, estabilizantes y espesantes. Potenciadores del sabor. Productos para tratamiento de harinas. Quelantes.
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Algunos de los aditivos que constituyen txicos intencionales importantes pertenecen a los grupos de antioxidantes y conservadores, y en menor medida, tambin a los grupos de colorantes y edulcorantes.

COLORANTES ORGNICOS SINTTICOS

La Unin Internacional de Consumidores y organizaciones nacionales de consumidores han puesto en duda la necesidad del uso de aditivos alimentarios en general, y de la adicin de colores en particular. Se han aducido varios argumentos, algunos de los cuales se exponen a continuacin. Varios consumidores se muestran preocupados por el hecho de que algunos colores aadidos sean innecesarios y se utilicen solo para inducir a error o a engao al consumidor. Otros sostienen que no basta declarar en el etiquetado de ingredientes la lista completa de los colores aadidos para evitar usos errneos del color aadido, porque ello requiere que el consumidor disponga de conocimientos y tiempo para distinguir entre alimentos con el color aadido y sin l. Otros consumidores sostienen que, dado que no aceptan ninguna justificacin de la necesidad tecnolgica del uso de colores, estos ltimos no deberan incluirse en la NGAA. Otra preocupacin se refiere a los colores aadidos a los piensos con la intencin de obtener un efecto de coloracin en los alimentos destinados al consumo humano (ejemplo, la adicin de colores a los piensos proporcionados a las aves de corral para obtener un efecto de coloracin de la yema, la adicin de colorantes a los piensos para los peces a fin de colorear la carne del salmn). Estas prcticas de coloracin de los piensos pueden dar lugar a la presencia de colores en alimentos que no de hecho van acompaados por una etiqueta en la que se declara la presencia de colores aadidos. Los consumidores tambin sostienen que los requisitos de etiquetado de los alimentos no se aplican a los alimentos que se sirven al pblico en el sector del servicio de comidas; como consecuencia, no pueden identificarse los colores utilizados en dicho sector. Ello podra crear problemas a los consumidores tanto en relacin con la intolerancia como por el hecho de inducirlos tal vez a error o a engao. Estos problemas podran limitarse si el uso de colores se aprobara para un nmero limitado de grupos de alimentos. Se han notificado varias justificaciones respecto a la necesidad tecnolgica del uso de colores en los alimentos, ejemplo, algunos alimentos pierden el color durante la elaboracin y/o el almacenamiento, por lo que la adicin del color puede compensar cualquier prdida de color durante la elaboracin. Los colores alimentarios se aaden tambin a los alimentos como causa de la preferencia de los consumidores o debido a tradiciones culturales respecto a los alimentos con un color caracterstico. Adems, se aaden colores a los alimentos para aumentar su variedad y mejorar su atractivo o conferir un color caracterstico a algunos alimentos elaborados, ejemplo: caramelos, bebidas no alcohlicas, tortas, etc. En todos los casos, la cantidad de color aadido se limita de manera tecnolgica a la que corresponde para alcanzar el nivel de coloracin deseado.
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Aunque existe gran nmero de colorantes naturales, los colorantes orgnicos sintticos continan con mayor aplicacin en la Industria Alimenticia. Algunos de los ms utilizados son: ponceau 4R (SIN 124), amaranto (SIN 123), eritrosina (SIN 127), amarillo ocaso (SIN 110), ndigo carmn (SIN 132), azul brillante (SIN 133), verde slido (SIN 143) y tartracina (SIN 102).

EVALUACIN TOXICOLGICA
Los colorantes orgnicos sintticos se absorben y transforman en el tracto gastrointestinal por la accin de la flora bacteriana que produce nitrorreductasas; la orina es la principal va de excrecin de los metabolitos aminados y/o desmetilados y en pequea proporcin la excrecin biliar. Se han realizado numerosos estudios acerca de la genotoxicidad y carcinogenicidad de los colorantes orgnicos sintticos; en el caso de la tartracina (E 102, un colorante artificial amarillo) se ha informado la induccin de aberraciones cromosmicas in vitro, y actividad mutagnica en orina de ratas debido a su ingestin o la de sus metabolitos. Con relativa alta frecuencia puede provocar reacciones alrgicas con efectos de urticaria recurrente y asma en personas susceptibles. La IDA recomendada es de 7,5 mg/kg de peso corporal. El ponceau 4R ha mostrado en ratas que en determinadas dosis puede provocar anemias y a largo plazo efectos sobre la reproduccin; tambin induce alergias (no tan frecuentemente como la tartracina) que se manifiesta con enrojecimiento y vasodilatacin. La IDA recomendada para el ponceau 4R es 4 mg/kg de peso corporal, en Cuba y otros pases se ha sustituido al amaranto, del cual se han indicado efectos carcinognicos en ratas y cuya IDA es de 0 a 0,5 mg/kg de peso corporal. La eritrosina puede producir un incremento de la secrecin de la tirotropina por la pituitaria, lo que estimula en exceso la tiroides, a lo que se atribuye el hallazgo de tumores. La IDA recomendada para la eritrosina ha sido reducida a 0,1 mg/kg. Recientes estudios realizados acerca de la estimacin de la ingestin de eritrosina han indicado que las dosis de uso son menores que los 400 mg/kg para alimentos slidos, y 300 mg/kg para alimentos lquidos recomendados por el Cdex Alimentarius; adems, un amplio empleo de eritrosina en muchos alimentos coloreados a las dosis de uso recomendada sobrepasara la IDA, y que la ingestin total estimada de este colorante en diversos pases como Brasil, Canad, Estados Unidos de Amrica, Japn y Reino Unido se encuentra por debajo de la IDA, principalmente porque se emplea en un limitado nmero de alimentos coloreados. El amarillo ocaso es estructuralmente semejante a la tartracina, como esta, puede provocar intolerancias en individuos susceptibles y no hay evidencia de que sea un cancergeno, ni que posea gran potencialidad toxicolgica. La IDA recomendada se ha reducido de 0 a 2,5 mg/kg de peso corporal. La IDA recomendada para el ndigo carmn ha sido ampliada y es de 5 mg/kg de peso corporal, mientras que para el azul brillante y el verde slido es de 12,5 y
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25 mg/kg, respectivamente. Como quiera que los alimentos coloreados artificialmente de azul y verde son mucho menos frecuentes que los coloreados de rojo, naranja y amarillo, es muy improbable que la IDA pueda ser alcanzada. Es frecuente la opinin que los colorantes naturales son menos perjudiciales que los sintticos, pero todos los colorantes y los otros aditivos alimentarios se evalan mediante el mismo procedimiento.

USOS, LMITES Y ANLISIS

Dependiendo del alimento en que se emplee, los niveles mximos de uso establecidos o recomendados suelen ser entre 30 y 300 mg/kg de uno de los colorantes orgnicos sintticos o la mezcla de ellos. Los colorantes orgnicos sintticos se encuentran entre los aditivos alimentarios que se producen con porcentajes ms bajos de pureza, por lo cual el control del tipo y contenido de impurezas es particularmente importante. Los cloruros, sulfatos, metales pesados y aminas aromticas son generalmente controlados, no as los naftoles sulfonados y aminas aromticas sulfonadas y otras impurezas como derivados de quinolina, no especificadas en las regulaciones sanitarias. La poblacin infantil tiene una marcada preferencia por el consumo de diferentes tipos de golosinas, las cuales suelen ser coloreadas; es comn en varios pases latinoamericanos que los vendedores ambulantes ofrezcan estas golosinas a la entrada de las escuelas; varios de estos productos no cuentan con marca, registro o cualquier dato que permita eficaz control en la identidad y calidad de sus ingredientes; se ha detectado uso fraudulento de colorantes orgnico sintticos en la confeccin de muchas de esas golosinas. En la 31 Reunin del Comit del Cdex sobre Aditivos Alimentarios y Contaminantes de los Alimentos se present un documento preparado por Dinamarca cerca del uso de colores en los alimentos para que el Comit lo examinara, el documento de trabajo contena algunas propuestas relativas a distintas opciones por examinar, tales como: el Comit podra elaborar una lista de alimentos bsicos en los que no refrendar la adicin de colores (alimentos bsicos que constituyan una lista de alimentos especificados), y deba pedir que se examinen los criterios de etiquetado para los colores aadidos, con objeto de asegurar que sean suficientes para garantizar que las personas con intolerancias estn debidamente protegidas. Algunos estados miembros del Cdex consideran los colores como una categora especial de aditivos alimentarios y opinan que el CCFAC debera examinar la cuestin de si los colores requieren principios especiales para su uso y, por consiguiente, determinar la conveniencia de elaborar criterios especficos para autorizar las disposiciones relativas a los colores en el proyecto de NGAA. Algunas delegaciones, incluidas la delegacin de la Unin Internacional de Consumidores, eran favorables a que el CCFAC elaborara nuevos criterios para el uso de colorantes, incluida una lista de alimentos bsicos en los que no se
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aprobara la adicin de colores. Los consumidores compran alimentos crudos, sin elaborar y frescos, tales como hortalizas, frutas, mariscos, carne, etc., esperando que sean verdaderamente frescos. El color de estos alimentos una vez recogidos o capturados a menudo palidecer y desvanecer con el tiempo, a medida que se deteriore la calidad de los propios alimentos. La aplicacin de colorantes alimentarios a estos tipos de alimentos puede inducir a error por los consumidores, lo que se refiere a su juicio sobre la frescura y calidad del alimento. As pues, el uso de colorantes en los alimentos frescos sin elaborar no debera aceptarse, ya que inducira engao a los consumidores; adems, tales usos no estaran en consonancia por lo general, con los criterios generales contenidos en el prembulo de la NGAA, donde se estipula que el uso de los aditivos alimentarios, incluidos los colorantes, no deber inducir a error o engao a los consumidores en cuanto a la identidad o calidad del alimento. En la 31 Reunin del Comit del Cdex sobre Aditivos Alimentarios y Contaminantes de los Alimentos se acord que el CCFAC podra elaborar una lista de alimentos bsicos sobre los cuales no ratificar la adicin de colores. La cromatografa de papel y de placa delgada ha sido tradicionalmente utilizada para identificar los colorantes orgnicos sintticos. Los mtodos cuantitativos empleados incluyen la comparacin visual o densitomtrica en placa delgada, la cuantificacin espectrofotomtrica y la cromatografa lquida de alta presin.

EDULCORANTES
Los edulcorantes son sustancias que se aaden a algunos alimentos para impartirles sabor dulce. Estos aditivos poseen un sabor dulce muchas veces mayor que el de la sacarosa y tienen gran aplicacin en los alimentos elaborados de bajas caloras y para diabticos. Dada la reduccin del consumo de azcar inspirada por la lucha contra la obesidad e incluso por la introduccin de la delgadez como patrn de belleza internacional, evidentemente los edulcorantes se encuentran entre los aditivos alimentarios que ms han incrementado su uso e ingestin. La tabla 10.1. muestra la propuesta de la Unin Internacional de Consumidores acerca de los grupos de alimentos que podran considerarse alimentos bsicos y no debera aceptarse la adicin de colorantes. Los edulcorantes no calricos, artificiales o naturales son en este momento una de las reas ms dinmicas dentro del campo de los aditivos alimentarios, por la gran expansin que est experimentando actualmente el mercado de las bebidas bajas en caloras. Para que un edulcorante natural o artificial sea utilizable por la industria alimentaria, adems de ser inocuo, tiene que cumplir otros requisitos: el sabor dulce debe percibirse rpido y tambin desaparecer de forma rpida, y tiene que ser lo ms parecido posible al del azcar comn, sin regustos; adems, debe resistir las condiciones del alimento en el que se va a utilizar, as como los tratamientos a los que se vaya a someter.
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Tabla 10.1. Grupos de alimentos Grupos de alimentos 1.1 1.2.1 1.3 1.4 1.5 1.6 Productos lcteos Leches fermentadas (sin otras adiciones) Leche condensada y productos anlogos Nata (crema) Leche y nata (crema) en polvo Debera tomarse en consideracin tambin el queso Grasas y aceites Excepciones 1.2; 1.2.1.1 1.2.1.2 1.2.2 Productos lcteos fermentados y elaborados con cuajo - no sometidos a tratamiento trmico - sometidos a tratamiento trmico Leche cuajada

1.7 2.2 2.3 2.4

Dulces a partir de productos lcteos Mezclas que contienen menos del 80 % de grasa Mezclas para untar que no forman parte de la categora 2.2 Dulces a partir de grasa Pulpas de hortalizas, nueces y semillas Productos hortcolas fermentados Dulces a partir de cereales y almidn

2.0

4.1 4.2.1 6.1

7.0 9.0 10.1 13.0

Zumos (jugos) de frutas Hortalizas frescas Cereales de grano entero, quebrado y en copos, incluido el arroz Productos de panadera Pescado y productos pesqueros Huevos frescos Alimentos para preparados nutricionales particulares Bebidas, excluidos los productos lcteos

4.2.2.6 4.2.2.7 6.5

7.2 9.3 10.4 13.4 13.6 14.1.4

14.0

14.1.5 14.2

Productos de panadera fina Sucedneos del salmn, caviar y otros productos de huevas de pescado Dulces a partir de huevos Preparados dietticos para adelgazar o reducir el peso Complementos alimentarios Bebidas aromatizadas sobre la base de agua, incluidas las bebidas para deportistas o bebidas ricas en electrlitos Caf, infusiones de caf... Bebidas alcohlicas...

El uso de edulcorantes artificiales ha sido objeto de mltiples polmicas por lo que respecta a su seguridad a largo plazo. La forma ms adecuada de enfocar esta polmica es desde la perspectiva del balance riesgo-beneficio. El consumidor tiene que decidir si asume en algunos casos un riesgo muy remoto como contrapartida de las ventajas que le reporta el uso de determinados productos, en
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este caso seran ventajas como: la reduccin de las caloras ingeridas sin renunciar a determinados alimentos o sabores. Tambin deben tenerse en cuenta los efectos beneficiosos sobre el organismo de la limitacin de la ingestin calrica, especialmente en la prevencin de los trastornos cardiovasculares y de ciertos procesos tumorales. Aunque el efecto preventivo se produce fundamentalmente con la reduccin del contenido de la grasa de la dieta, tambin puede contribuir la reduccin del contenido energtico global, y en este caso los edulcorantes artificiales constituiran una ayuda; por supuesto, son de gran inters para el mantenimiento de la calidad de vida de aquellas personas que por razones mdicas tienen que controlar su ingestin de azcares. Los edulcorantes sintticos ms utilizados son la sacarina, los ciclamatos y el acesulfame potsico, el aspartame y recientemente la sucralosa. Se ha indicado que la utilizacin de mezclas de edulcorantes confiere ventajas como son: el aumento del poder edulcorante, la reduccin de la DU de cada uno de ellos y algunas propiedades promotoras de salud de su uso en comparacin con el azcar.

EVALUACIN TOXICOLGICA Y LMITES

La sacarina se utiliza como edulcorante desde principios del siglo XX; es varios cientos de veces ms dulce que la sacarosa. La forma ms utilizada es la sal sdica, ya que la forma cida es muy poco soluble en agua; tiene un regusto amargo, sobre todo cuando se utiliza en concentraciones altas, pero este regusto puede minimizarse mezclndola con otras sustancias. Es un edulcorante resistente al calentamiento y a los medios cidos, por lo que es muy til en muchos procesos de elaboracin de alimentos. En Espaa se utiliza en bebidas refrescantes, en yogures edulcorados y en productos dietticos para diabticos. Suelen emplearse y aceptarse como NM de sacarina entre 100 y 300 mg/kg, pero hay categoras de alimentos donde se proponen NM muy superiores. Ya desde los inicios de su utilizacin la sacarina se ha visto sometida a los ataques por razones de tipo econmico, al provocar con su uso la disminucin del consumo de azcar, as como por su posible efecto sobre la salud de los consumidores. En los aos 60 varios grupos de investigadores indicaron que dosis altas de sacarina (5 % del peso total de la dieta) eran capaces de inducir la aparicin de cncer de vejiga en las ratas. La sacarina no es mutgena. Su efecto en la vejiga de las ratas se produce mediante una irritacin continua de este rgano producida por cambios en la composicin global de la orina que, entre otros efectos, dan lugar a cambios en el pH y a la formacin de precipitados minerales. El ataque continuo tiene como respuesta la proliferacin celular para reparar los daos, y en algunos casos esta proliferacin queda fuera de control y ocasiona la produccin de tumores. Es interesante constatar que el efecto de formacin de precipitados en la orina de las ratas se debe en gran parte o en su totalidad al sodio que contiene la sacarina, ya que la forma libre o la sal de calcio no producen este efecto.
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La sacarina no es carcingena de por s, sino a travs de su efecto como desencadenante de una agresin fisicoqumica a la vejiga de la rata, que induce la proliferacin celular. Con concentraciones en la dieta (las utilizadas realmente por las personas) en las que no exista absolutamente ninguna posibilidad de que se produzca esta agresin a la vejiga, el riesgo no ser muy pequeo, sino simplemente nulo. No obstante, el uso de la sacarina est prohibido en algunos pases como Canad. En Estados Unidos se plante su prohibicin en 1977, pero las campaas de las empresas afectadas y de algunas asociaciones, entre ellas las de diabticos, motivaron que se dictara una moratoria a la prohibicin. La situacin de la sacarina qued pues inestable en Estados unidos, estando sometida a normas de etiquetado estrictas con frases del tipo: Este producto contiene sacarina, de la que se ha determinado que produce cncer en animales de laboratorioy el uso de este producto puede ser peligroso para su salud. La sacarina se absorbe a travs del tracto gastrointestinal. Se distribuye por el organismo con mayor concentracin en los rganos de excrecin; puede transferirse al feto, pero no hay evidencia de que se bioacumule en ningn tejido. Se excreta por la orina en 80 % ms, mediante el mecanismo de la secrecin tubular renal. En altas dosis inhibe parcialmente la actividad de enzimas digestivas del pncreas y los intestinos. La ingestin a travs de la lactancia puede inducir efectos nutricionales y bioqumicos reversibles, tales como incrementos en los niveles sricos de colesterol, triglicridos y vitamina E, as como reduccin de los niveles de vitamina A y folato en suero e hgado. La toxicidad en mamferos es baja y en algunos experimentos positivos se ha atribuido a las impurezas, particularmente la ortotoluenosulfonamida. La sacarina, a niveles relativamente altos en dietas, acta como un promotor de tumores en la vejiga de la rata, ya que parece ser un animal muy susceptible. El Comit FAO/OMS no considera que la carcinogenicidad de la sacarina en la rata sea extrapolable al hombre. En humanos los estudios epidemiolgicos que estiman los factores de riesgo para cncer de la vejiga, han concluido que la sacarina ni otros edulcorantes sintticos aparecen como factores causales. Se ha ampliado la IDA hasta 5 mg/kg de peso corporal. El ciclamato y algunas de sus sales se emplean en alimentos hipocalricos y para diabticos. A partir de 1970, ante la sospecha de que poda actuar como cancergeno, se prohibi el uso del ciclamato como aditivo alimentario en muchos pases, entre ellos EE.UU., Japn e Inglaterra. Es unas 50 veces ms dulce que la sacarosa y tiene determinado regusto desagradable, que desaparece cuando se utiliza mezclado con la sacarina. Es muy estable y no le afecta la acidez ni el calentamiento. Su fundamental utilizacin es en las bebidas carbonatadas. Tambin se puede utilizar en yogures edulcorados y como edulcorante de mesa. El ciclamato como tal es menos soluble en agua que sus sales, que son las que se utilizan de forma habitual. El ciclamato no tiene la consideracin universal de aditivo alimentario sin riesgos. Se han publicado trabajos indicando que, en animales de experimentacin, dosis altas de esta sustancia actan como cancergeno y teratgeno, lo que
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significa que produce defectos en los fetos. Tambin se han indicado otros posibles efectos nocivos producidos por su ingestin en dosis enormes, como la elevacin de la presin sangunea o la produccin de atrofia testicular. Los datos acerca de su posible carcinogenicidad son conflictivos. El efecto cancergeno no sera debido al propio ciclamato, sino a un producto derivado de l -la ciclohexilamina- cuya carcinogenicidad tampoco est an totalmente esclarecida. El organismo humano no es capaz de transformar el ciclamato en este derivado, pero s la flora bacteriana presente en el intestino. El grado de transformacin depende mucho de los individuos, variando tambin la magnitud del posible riesgo. Todos los datos acerca de los efectos negativos del ciclamato se han obtenido a partir de experimentos en animales, utilizando dosis muchsimo mayores que las ingeridas por un consumidor habitual de bebidas bajas en caloras, por lo que la extrapolacin no es fcil, y de hecho no existe un acuerdo general acerca de la seguridad o no del ciclamato. Desde su prohibicin en Estados Unidos, la principal compaa fabricante ha presentado a las entidades gubernamentales varias solicitudes para que esta prohibicin fuera retirada, sobre la base de los resultados de mltiples experimentos posteriores a su prohibicin, en los que no se demostraba que fuese cancergeno. La eleccin, teniendo en cuenta que su presencia se indica en la etiqueta, corresponde finalmente al consumidor. Esta sustancia tiene mayores riesgos potenciales en el caso de los nios, a los que estn destinados muchos productos que la contienen, ya que en ellos la dosis por unidad de peso es evidentemente mayor, al ser ellos ms pequeos. Tambin sera ms cuestionable su ingestin por mujeres embarazadas; el riesgo ocasionado por el consumo de este aditivo es sin duda sumamente pequeo, pero existen otros edulcorantes alternativos cuyos riesgos parecen ser aun menores. En la mayora de los casos se absorve en el intestino y se elimina sin alteracin por la orina y las heces fecales. Por la accin de la microflora intestinal puede ser transformado en un metabolito ms txico -la ciclohexilamina- la cual parcialmente puede ser retenida en la grasa de los tejidos en forma de un compuesto conjugado con cidos grasos. En 1969, diversos experimentos con animales administrados con dietas que contenan ciclamatos o ciclohexilamina mostraron efectos adversos como calcificacin del miocardio, cncer de vejiga, ruptura de cromosomas y deformacin de embriones, lo que trajo como consecuencia su prohibicin en los EE.UU., sin embargo est autorizado en la Unin Europea y se ha recomendado su uso en dosis variables segn las categoras de alimentos, predominando los NM entre 500 y 1 000 mg/kg, en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios. La IDA recomendada para los ciclamatos es de 11 mg/kg de peso corporal. El acesulfame-K es otro edulcorante de uso creciente, su poder edulcorante es aproximadamente de 200 veces el de la sacarosa. Es estable a temperaturas y pH propios del tratamiento y almacenamiento de gran cantidad de alimentos.
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Despus de su absorcin se excreta sin cambios a travs de la orina. No hay evidencias de que se acumule en el organismo. No ha mostrado efectos adversos sobre el crecimiento y fertilidad, ni daos histopatolgicos, teratogenicidad o cancerogenicidad; sin embargo, se ha sugerido emplearlo con precaucin por efectos genotxicos observados en ratones. Las impurezas txicas ms significativas son la acetoacetamida y su derivado Nsulfonado. Al acesulfame K se le ha ampliado la IDA hasta 15 mg/kg de peso corporal, y se ha recomendado su uso en dosis variables segn las categoras de alimentos, predominando los NM entre 500 y 1 000 mg/kg, en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios. El aspartame (160-220 veces ms dulce que la sacarosa) est constituido por aminocidos (es el ster metlico de la L-apartil-Lfenilalanina, por lo que no es completamente acalrico, tampoco es demasiado estable al calor, no es til en alimentos sometidos a elevadas temperaturas). Es el ms importante de los nuevos edulcorantes artificiales. Aunque como tal no existe en la naturaleza, sus componentes s existen, en los que se transforma durante la digestin. Aunque a igualdad de peso aporta las mismas caloras aproximadamente que el azcar, en las concentraciones utilizadas habitualmente este aporte energtico resulta insignificante. El aspartame no tiene ningn regusto, al contrario que los dems edulcorantes, y es relativamente estable en medio cido, pero resiste mal el calentamiento fuerte, por lo que presenta problemas para usarse en repostera. Es hidrolizado por completo en el intestino y no es absorbido a la sangre como tal; se absorbe en forma de sus productos de hidrlisis. Sus metabolitos son el metanol (en concentraciones insignificantes), la fenilalanina (est contraindicado en individuos con fenilcetonuria) y el cido asprtico. Tambin se puede formar la dicetopiperazina del dipptido (su impureza principal). El aspartame no ha mostrado ser mutagnico, teratgeno, ni carcingeno. La utilizacin de aspartame en los niveles concebibles en la dieta produce una elevacin de la concentracin de fenilalanina en la sangre, menor que la producida por una comida normal. Cantidades muy elevadas, solo ingeribles por accidente, producen elevaciones de la concentracin de fenilalanina en la sangre, inferiores a las consideradas nocivas, que adems desaparecen rpidamente. Sin embargo, en el caso de las personas que padecen fenilcetonuria, el uso de este edulcorante les aportara una cantidad suplementaria de fenilalanina, lo que no es aconsejable. Por otra parte, el metanol es un producto txico, pero la cantidad formada en el organismo por el uso de este edulcorante es muy inferior a la que podra representar riesgos para la salud, y, en su uso normal, inferior incluso a la presente en forma natural en muchos alimentos, como los jugos de frutas. A pesar de ciertas insinuaciones divulgadas en Internet, las cuales no se han considerado cientficamente probadas, sobre los efectos adversos del aspartame en poblaciones humanas, este se mantiene como un aditivo alimentario aprobado con una IDA de 40 mg/kg de peso corporal (lo que muestra un elevado grado de inocuidad), y se ha recomendado su uso en dosis variables segn las
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categoras de alimentos, predominando los NM de 1 000 mg/kg, en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios. La sucralosa es entre 500 y 750 veces ms dulce que la sacarosa, es pobremente absorbida a travs del tracto gastrointestinal, solo el 5 % de la dosis oral de 2 a 1 000 mg/kg administrada a ratas fue eliminada por la orina; tampoco en ratones y perros ha podido apreciarse bioacumulacin o produccin de metabolitos txicos. Estudios de toxicidad aguda y subcrnica no han mostrado efectos adversos importantes en ratas, pero s reducciones en el consumo de alimentos, ganancia en peso corporal y peso de algunos rganos, as como ciertos cambios histopatolgicos; esos efectos se observaron tras la administracin de dosis muy elevadas de sucralosa en la dieta. No se han observado efectos teratognicos en ratas ni conejos ni tampoco efectos carcinognicos en dosis razonables en ratones ni ratas. En 2 estudios de tolerancia en humanos con dosis de sucralosa de 125 mg/kg/da durante 3 semanas, 250 mg/kg/da durante 7 semanas y 500 mg/kg/da durante 12 semanas no se observaron efectos adversos desde el punto de vista bioqumico o clnico detectables. No hay indicacin de que el consumo frecuente y por largo tiempo de sucralosa en las dosis de ingestin probables tenga significacin toxicolgica. Los NM de sucralosa son variables segn las categoras de alimentos, predominando entre 500 y 1 250 mg/kg. En la ltima evaluacin toxicolgica a que fue sometida por el JECFA se le asign una IDA hasta 15 mg/kg de peso corporal. En un estudio reciente en sistemas modelos con ratas F344 y SpragueDawley, no se encontraron efectos genotxicos de ninguno de los edulcorantes mencionados.

ANLISIS
Para el anlisis del contenido de edulcorantes sintticos en los alimentos se han desarrollado mtodos colorimtricos, polarogrficos, cromatogrficos, espectrofotomtricos y gravimtricos. En el caso de la sacarina y ciclamatos estas 2 ltimas metodologas se han empleado mucho respectivamente, pero en la actualidad se imponen los mtodos por cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) para los anteriores, y tambin para el acesulfame K y el aspartame. En el caso del acesulfame K se ha utilizado la cromatografa de placa delgada con poliamida. La determinacin cuantitativa requiere espectrofotometra a 227 nm o mejor, HPLC con detector ultavioleta. Para el aspartame, prcticamente se imponen mtodos por columna (analizador de aminocidos), por cromatografa gaseosa y especialmente por HPLC.

ANTIOXIDANTES
Los antioxidantes (E300-E321) evitan que los alimentos se oxiden y se pongan rancios. Las vitamina C y E son antioxidantes naturales, aunque suelen emplearse
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otros sintticos y ms baratos como el butilhidroxianisol (BHA) o E320, y el butilhidroxitoluol (BHT) o E321 (que producen problemas toxicolgicos), la lecitina obtenida generalmente de la soja, el man, el maz o la clara de huevo, los galatos y el tocoferol (vitamina E). Son normalmente de origen mineral o vegetal, se aaden a los productos de la fruta en forma de cido ascrbico, a los aceites y grasas, las patatas fritas, las galletas, los cereales para el desayuno, las sopas preparadas, el vino y la cerveza. La oxidacin de las grasas es la forma de deterioro de los alimentos ms importante, despus de las alteraciones producidas por microorganismos. La reaccin de oxidacin es una reaccin en cadena, es decir, una vez iniciada, contina acelerndose hasta la oxidacin total de las sustancias sensibles. Con la oxidacin aparecen olores y sabores a rancio, se altera el color y la textura y desciende el valor nutritivo al perderse algunas vitaminas y cidos grasos polinsaturados; adems, los productos formados en la oxidacin pueden llegar a ser nocivos para la salud. Las industrias alimentarias intentan evitar la oxidacin de los alimentos mediante diferentes tcnicas, como el envasado al vaco o en recipientes opacos, pero tambin utilizando antioxidantes. La mayora de los productos grasos tienen sus propios antioxidantes naturales, aunque muchas veces estos se pierden durante el procesado (refinado de los aceites, por ejemplo), prdida que debe ser compensada. Las grasas vegetales son en general ms ricas en sustancias antioxidantes que las animales. Tambin otros ingredientes, como ciertas especias (el romero, por ejemplo), pueden aportar antioxidantes a los alimentos elaborados con ellos. Los antioxidantes orgnico-fenlico sintticos son especialmente eficaces para evitar o retardar la oxidacin de los lpidos, reaccin de deterioro que ocurre en los alimentos durante el almacenamiento de los aceites, grasas y alimentos que los contienen; ellos producen radicales libres estables que detienen la degradacin oxidativa del oxgeno. Los antioxidantes fenlicos sintticos ms empleados en la Industria Alimentaria son los galatos de propilo, octilo y dodecilo, el butilhidroxitolueno, el butilhidroxianisol y la butilhidroquinona monoterciaria (TBHQ). Ellos se pueden emplear solos o preferentemente mezclados, dado que existe un sinergismo tecnolgico entre estos.

EVALUACIN TOXICOLGICA Y LMITES

En la mayora de las categoras de alimentos, los lmites mximos permisibles actualmente establecidos y recomendados para el galato de propilo (GP) se encuentran entre 100 y 200 mg/kg, al igual que para BHA, BHT y TBHQ pero en estos 3 ltimos predominan las NM de 200 mg/kg. La mezcla de 2, 3 4 de ellos no debe exceder los 300 mg/kg. La propiedad tecnolgica ms importante de los galatos es su poca resistencia al calentamiento, por lo que son poco tiles para proteger aceites de fritura
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o alimentos sometidos a un calor fuerte durante su fabricacin, como las galletas o los productos de repostera. Por su parte, el galato de propilo es algo soluble en agua, y en presencia de trazas de hierro procedentes del alimento o del equipo utilizado en el procesado da lugar a la aparicin de colores azul oscuro poco atractivos; esto puede evitarse aadiendo tambin al producto cido ctrico. Se utilizan mezclados con BHA (E 320) y BHT (E 321) para la proteccin de grasas y aceites comestibles. En Espaa se utilizan galatos, BHA y BHT en conjunto, en aceites, con la excepcin del aceite de oliva. Tambin se usa en repostera o pastelera, galletas, en conservas y semiconservas de pescado y en queso fundido. Los galatos ingeridos se absorben en su mayora por el tracto gastrointestinal y se excretan a travs de la orina como conjugado glucurnido y en menor cantidad como cido glico libre. La dosis letal media (LD50) por va oral en ratas vara entre 1 960 y 6 500 mg/kg. El galato de propilo inhibe la actividad de las oxidasas de funcin mixta en el hgado. En elevadas dosis en la rata provoca disminucin de la ganancia en peso, anemia, hiperplasia tubular en riones e incremento en la actividad de la glucuroniltransferasa y la glutation-s-transferasa, as como efectos adversos sobre el sistema hematopoytico. No existen evidencias de mutagenicidad ni carcinogenicidad. La exposicin ocupacional puede provocar dermatitis por contacto. Los valores de IDA son de 1,4 mg/kg de peso corporal, 0,1 y 0,05 para el galato de propilo, octilo y dodecilo, respectivamente, por los efectos sobre el peso del bazo y daos patolgicos en el hgado de ratas de estos ltimos, por lo que el empleo del GP es ms aconsejable que el de los galatos de cadena carbonada ms larga. El BHA se absorbe por el tracto gastrointestinal y se excreta fundamentalmente por la orina como un conjugado glucurnido. La LD50 del BHA por va oral en ratas vara entre 2 000 y 5 000 mg/kg segn la especie animal. Puede inducir la actividad de las monoxigenasas de funcin mixta en el hgado. En un importante nmero de experimentos se ha evidenciado que el BHA provoca tumores en el preestmago de roedores, pero no en otras especies que anatmicamente, como el hombre no lo poseen. La IDA actual es de 0,5 mg/kg de peso corporal. En los recientes estudios realizados en varios pases asumiendo que los alimentos contienen los niveles permitidos de BHA en esos pases, la ingestin estimada ha estado por debajo de la IDA; en estudios realizados en AustraliaNueva Zelandia y en los Estados Unidos sobre la estimacin de la ingestin de BHA, se ha considerado que el BHA es el nico antioxidante fenlico empleado y que las dosis de uso han sido equivalentes a los NM recomendados en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios, los resultados indican que la IDA puede ser superada notablemente. Sin embargo, esto no es realista, en Japn por ejemplo los estimados de ingestin son mucho menores; en definitiva la ingestin de BHA y de otros antioxidantes fenlicos dependern en gran medida de las proporciones relativas de los distintos antioxidantes fenlicos en las diferentes categoras de alimentos, los niveles reales de uso acorde con las buenas prcticas de manufactura y la proporcin de alimentos en alguna de las categoras donde verdaderamente se emplea el aditivo. (Baines, 1999).
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EL BHT se absorbe por el tracto gastrointestinal y se distribuye a travs de la circulacin enteroheptica y diversos tejidos. Se excreta parcialmente a travs de la bilis en forma de metabolitos. La DL50 del BHT por va oral en ratas vara entre 1 170 y 2 450 mg/kg. Es un hepatotxico que en dosis altas por largo tiempo provoca necrosis centrolobular y dao hepatocelular. Induce la elevacin de la actividad de las monooxigenasas de funcin mixta en el hgado; puede provocar hipertrofia heptica; es un sinergista del desarrollo de tumores, iniciados por otros cancergenos. La IDA recomendada para el BHT es de 0,3 mg/kg de peso corporal. Como aspecto favorable, se ha observado que tanto el BHT como el BHA reducen la mutagenicidad in vitro inducida por las aflatoxinas. Asumiendo que los alimentos contienen los niveles permitidos de BHT en Australia, Nueva Zelandia y Reino Unido, los estudios sobre la ingestin estimada ha estado por debajo de la IDA; mientras que en esos pases, as como en China y los Estados Unidos se supera ampliamente la IDA cuando se asume que los alimentos contienen los NM recomendados en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios. En los estudios realizados en Japn se emplearon los niveles reales de BHT detectados, y la ingestin estimada es mucho menor que en los casos anteriores. De estos estudios se pudo estimar que la IDA podra ser superada cuando se consumen 90 g diarios (g/d) de alimentos que contienen ms de 200 mg/kg de BHT, o 45 g/d de alimentos que contienen ms de 400 mg/kg o 18 g/d de alimentos que contienen ms de 1 000 mg/kg. La TBHQ se absorbe a travs del tracto gastrointestinal, casi completamente, cuando se administra mediante un vehculo graso. La absorcin disminuye cuando el vehculo contiene un bajo porcentaje de grasa. Se excreta en su mayora por la orina como un conjugado sulfatado y en menor magnitud como un conjugado glucurnido. La DL50 por va oral en ratas es de 700-1 000 mg/kg. La ingestin crnica al 0,5 % en la dieta de ratas pareci provocar ligera disminucin en el peso absoluto del cerebro e incremento en el peso relativo del hgado, as como reduccin en la actividad de la transaminasa glutmico pirvica srica. Igual administracin en perros mostr un ligero descenso en los valores de hemoglobina y hematcrito. La TBHQ induce la actividad de las monooxigenasas de funcin mixta en el hgado, particularmente sobre la p-nitroanisol demetilasa y la anilina hidroxilasa, pero en menor grado que el BHA. Igualmente, es menos activa que este ltimo y que el BHT, en inducir la actividad de la bilirrubinglucuronil-transferasa heptica. Prcticamente la TBHQ no se bioacumula en ningn tejido. Las pequesimas cantidades detectadas en el hgado y en la grasa de ratas y perros, probablemente son originadas del antioxidante circulante en sangre. No ha mostrado propiedades carcinognicas. La IDA recomendada para la TBHQ es de 0,7 mg/kg de peso corporal. Los estimados de ingestin de TBHQ se acercan o exceden la IDA cuando se asume que los alimentos contienen los NM recomendados en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios, pero estn por debajo de la IDA asumiendo que los alimentos contienen los NM nacionales. En todos los estudios
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realizados se ha considerado que el TBHQ es el nico antioxidante fenlico empleado.

ANLISIS
Para el anlisis de alimentos, aunque se han escrito mtodos colorimtricos, la cromatografa de placa delgada para identificar, y la cromatografa gas-lquida con detector de ionizacin de llama y la lquida de alta presin para cuantificar, son los mtodos de anlisis ms empleados en el anlisis de los antioxidantes sintticos.

CONSERVADORES
Los agentes antimicrobianos (preservantes o conservadores) se dividen fundamentalmente en agentes fungistticos o bacteriostticos, lo cual no significa que los de un grupo no posean una pequea o moderada actividad contra los microorganismos del otro grupo. Las causas de que algunos agentes fungistticos no incluyan a las bacterias en su espectro de accin o solo acten muy ligeramente, estn determinadas porque al pH ptimo de las bacterias, tales conservadores carecen de actividad o poseen muy poca, correspondiendo en general este pH ptimo con la zona neutra.

AGENTES FUNGISTTICOS
Propionatos. Dada la extensin de su uso, los fungistticos ms importantes son: los propionatos, los benzoatos y los sorbatos. El cido propinico y sus sales de sodio y calcio ejercen su accin inhibidora al acumularse en la clula, con lo que interfiere el metabolismo por bloqueo enzimtico y por competencia con sustancias esenciales para el crecimiento microbiano, como algunos aminocidos. Su accin fungisttica es dbil, por lo que se requieren concentraciones bastante altas para ello; su principal aplicacin es en los productos de panadera y repostera. Se suelen aceptar como NM entre 2 000 y 3 000 mg/kg. El cido propinico es un producto del metabolismo intermediario de la degradacin de ciertos aminocidos y de la oxidacin de los cidos grasos de nmero impar de tomos de carbono, esto lo hace totalmente inocuo, al extremo de que su IDA no est limitada. Benzoatos. La actividad fungisttica de los benzoatos se debe a la inhibicin de enzimas que regulan el metabolismo del cido actico, as como la fosforilacin oxidativa y su accin sobre la pared celular. El pH ptimo para su actividad antimicrobiana es de 2,5 a 4,0. Se ha empleado mezclado con sorbatos, ya que existe un sinergismo tecnolgico entre ellos. Se ha recomendado su uso en dosis variables segn las categoras de alimentos, predominando los NM entre 1 000 y 2 500 mg/kg en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios, pero en la mayora de los pases el NM normalizado ms frecuentemente es de 1 000 mg/kg (expresado como cido
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benzoico) solos o mezclados con otros agentes fungistticos, aunque en productos en que es habitual el consumo de raciones grandes como refrescos y jugos consideramos ms prudente aceptar solo 500 mg/L. El cido benzoico y sus sales son muy poco txicos. La dosis letal media por va oral es de 1,7 a 3,7 g/kg en la rata. En ratones a los que se administr benzoatos durante 4-5 das al 3 % en la dieta, se observ ataxia, convulsiones, disturbios en el sistema nervioso central y necrosis cerebral; en cambio, 1 g de benzoato durante 90 das en humanos no provoc efectos. Se ha observado que la mortalidad en roedores tratados con benzoatos se incrementa despus de un perodo de restriccin de alimentos, lo que se puede atribuir a que la ausencia de glicina en la dieta dificulta su detoxificacin y eliminacin de los metabolitos por la orina. El gato parece ser un animal especialmente susceptible al cido benzoico y sus sales. En el hombre existe la posibilidad de provocar reacciones alrgicas en personas susceptibles, lo cual est menos frecuentemente informado que con los colorantes orgnico sintticos. La IDA recomendada para los benzoatos es de 5 mg/kg de peso corporal, la cual es la ms estricta entre los fungistticos tratados en este captulo. Los estimados de ingestin de benzoatos exceden la IDA cuando se acepta que los alimentos contienen los NM recomendados en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios, pero estn por debajo de la IDA asumiendo que los alimentos contienen los NM nacionales, con excepcin de los estimados de ingestin para grandes consumidores que suelen exceder la IDA; en occidente los alimentos que principalmente contribuyen a una alta ingestin son las bebidas carbonatadas y saborizadas, en Japn y especialmente en China, la salsa de soya es la principal fuente de ingestin de este aditivo. En Cuba se ha desarrollado una salsa china elaborada a partir de levaduras, en la cual se pudo reducir la DU desde 1 500 hasta 500 mg/kg de benzoato de sodio, para su conservacin durante el almacenamiento a temperatura ambiental. Los sorbatos, las sales de cido srbico tienen actualmente mayor extensin de uso que los benzoatos, especialmente en los pases desarrollados. Su accin se debe a la inhibicin de enzimas en la clula microbiana. Su pequea constante de disociacin permite su empleo en alimentos dbilmente cidos, lo cual no es posible en el cido benzoico. El cido srbico es capaz de inhibir parcialmente el crecimiento de algunos hongos formadores de micotoxinas, tambin es activo en ciertos grados frente a las bacterias; de particular importancia es su accin anticlostridial, lo que ha dado lugar a investigaciones y aplicaciones para sustituir o reducir el uso de nitrito en productos crnicos curados. Se ha recomendado su uso en dosis variables segn las categoras de alimentos, entre 500 y 2 000 mg/kg, predominando el NM de 1 000 mg/kg (expresado como el cido, solo o en combinacin con el cido benzoico) en la Norma General del Cdex para los Aditivos Alimentarios. Sorbatos. El cido srbico es un cido graso de cadena corta que el hombre metaboliza a travs de la betaoxidacin. Es inocuo; la dosis letal media por
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va oral en ratas es de 10,5 g/kg oral. Relativamente altas dosis no han mostrado efectos sobre el crecimiento, ni sobre la ganancia en peso, ni algn otro efecto toxicolgico, tampoco ha evidenciado mutagenicidad, teratogenicidad o carcinogenicidad. La IDA recomendada es 25 mg/kg de peso corporal.

ANLISIS DE LOS AGENTES FUNGISTTICOS

Para la determinacin de cido propinico, el cual se controla poco debido a su inocuidad, se utiliza un aislamiento por particin con solventes o destilacin de arrastre con vapor y medicin, con cromatgrafo de gases que posee detector de ionizacin de llama. El mtodo de anlisis que ms se emplea para determinar el cido srbico est basado en la destilacin de arrastre con vapor y posterior medicin colorimtrica del producto de oxidacin del cido srbico -el malonaldehdo- con el cido tiobarbitrico. Para el cido benzoico se emplean frecuentemente la medicin espectrofotomtrica, con el uso de la absorbancia a 225 nm y la cromatografa gas-lquido previa derivatizacin y deteccin con ionizacin de llama. La cromatografa lquida de alta eficacia (HPLC), para la determinacin de cido benzoico y de cido srbico solos y simultneamente, con previa limpieza con columna tipo Extrelut son los mtodos ms modernos.

AGENTES BACTERIOSTTICOS
Sulfitos. Uno de los aditivos que puede causar problemas en personas sensibles es el grupo conocido como agentes de sulfitacin, que incluyen varios aditivos inorgnicos de sulfito (E 220-228), entre ellos el sulfito sdico, el bisulfito potsico y el metabisulfito potsico, que contienen dixido de sulfuro (SO2). Estos conservantes se emplean para controlar la proliferacin de microbios en bebidas fermentadas y su uso ha sido generalizado durante ms de 2 000 aos en vinos, cervezas y productos transformados a partir de frutas. El mecanismo de la accin antimicrobiana (bacteriosttica) de los sulfitos (SO3-) se debe a la inhibicin de reacciones catalizadas por enzimas con grupos sulfidrilos. El efecto inhibidor de los sulfitos es muy selectivo sobre las bacterias cido acticas y lcticas y en menor grado sobre mohos y levaduras. Adems de conservadores, los sulfitos tienen otras funciones como aditivos alimentarios: se emplean como antioxidantes y agentes reductores, para la inhibicin de reacciones enzimticas, y son prcticamente los mejores inhibidores del empardeamiento no enzimtico debido a las reacciones de Maillard. Los sulfitos tienen relativamente buena eficacia en la descontaminacin del maz contaminado con aflatoxinas. Al constituir aditivos multifuncionales, las aplicaciones del empleo y las DU de sulfitos en alimentos han sido muy diversa: mariscos, vinagres, vinos, pulpas concentradas de frutas, frutas y vegetales deshidratados, azcar blanqueada no refinada, jarabes de glucosa, etc. Los NM se expresan como dixido de azufre
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(SO2) dependen del tipo de alimento y del objetivo tecnolgico planteado. Se suelen aceptar alrededor de 50 mg de SO2/kg cuando se emplea como agente microbiano, pero para vinos, pulpas de frutas concentradas y jarabe de glucosa para confitera se han aceptado hasta 400 mg de SO2/kg; suele prohibirse su uso en carnes, particularmente molida, para evitar enmascaramiento de inadecuada calidad de la materia prima, pero con frecuencia se detecta esta aplicacin fraudulenta. En los alimentos una parte del sulfito se combina y otra aparece como dixido de azufre libre; el procesamiento y almacenamiento de los alimentos reduce significativamente el contenido residual de sulfitos y por ellos los estimados de ingestin que se han realizado teniendo en cuenta los niveles reales del aditivo en el momento del consumo son ms reales y se encuentran por debajo de la IDA, no as cuando se ha asumido que los alimentos contienen las DU recomendadas en la NGAA o los NM nacionales. Hace 2 dcadas, un aporte importante en la ingestin total de SO2 en algunos pases como los EE.UU. provena del consumo de ensaladas elaboradas, particularmente de lechugas (que por su composicin no es factible que los sulfitos se combinen en el alimento) ofertadas en restaurantes norteamericanos (prctica actualmente prohibida), a las que sola adicionrsele sulfito, a veces en concentraciones excesivas de dixido de azufre libre. Esta prctica dio lugar a numerosos episodios de intolerancia y crisis severas de asma en personas susceptibles, adems de afectaciones intestinales, urticaria, angioedema, hipotensin y sensaciones de picor. Se ha observado que la sensibilidad depende de los niveles residuales del aditivo en el alimento, del individuo y del tipo de alimento. El metabolismo del sulfito en mamferos ocurre por va enzimtica mediante oxidacin a sulfato. La enzima comprometedora, citocromo oxidorreductasa, nombrada sulfito oxidasa, es aparentemente constante entre las especies de mamferos y se presenta a elevados niveles en el hgado y en bajas concentraciones en la mayora de los dems tejidos del cuerpo. La rapidez metablica de la sulfitooxidasa determina que la ingestin crnica de sulfito no se acumule en tejidos, y aunque alcance un elevado estado constante de concentracin, es rpidamente eliminado despus de la absorcin, provocando cortos perodos de elevacin de los niveles de sulfito en los tejidos. El sulfito tiene un efecto antinutricional: destruye la actividad de la tiamina, causando su deficiencia en el organismo. Se reconoce como genotxico in vitro, ofrece resultados positivos en sistemas de ensayos de aberraciones cromosmicas, formacin de microncleos e intercambio de cromtidas hermanas, pero no in vivo, debido a su rpida inactivacin en mamferos; no parece ser un teratgeno ni cancergeno per se, aunque desde el punto de vista experimental ha incrementado el efecto de la Nmethil-N-nitro-N-nitrosoguanidina sobre la incidencia de adenocarcinomas en la regin pilrica del estmago. En personas sensibles (asmticos), los sulfitos pueden provocar asma, que se caracteriza por dificultades respiratorias, respiracin entrecortada, sibilancia y tos. La IDA recomendada es de 0,7 mg (de SO2)/kg de peso corporal.
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Anlisis de los sulfitos. El anlisis de los sulfitos puede estar dirigido a determinar los sulfitos libres, combinados o ambos simultneamente, es decir total, que es lo ms usual desde el punto de vista sanitario. Los mtodos de anlisis de SO2 libre estn casi siempre basados en la titulacin yodomtrica. Tambin se han propuesto la cromatografa de gases con espacio de cabeza y la cromatografa de exclusin inica con deteccin amperomtrica (Wygant y col, 1997). Para determinar dixido de azufre combinado se ha informado recientemente un mtodo basado en la formacin de derivados de la dinitrofenilhidracina (DNPH) y determinacin por HPLC. Existen muchos mtodos descritos para determinar dixido de azufre total; los ms usados son colorimtricos basados en la fijacin del dixido de azufre con tetracloromercuriato de sodio, y su posterior estimacin mediante la reaccin con el clorhidrato de p-rosanilina y formaldehdo, as como los mtodos basados en destilacin cida y titulacin, entre los que el Monier Williams contina siendo muy reconocido y empleado, incluso adaptado para determinacin por HPLC. Recientemente se ha informado una ventajosa determinacin de dixido de azufre en mariscos por electrodos selectivos, y la aplicacin para el anlisis de vinos de un biosensor de sulfito basado en la inmovilizacin de la sulfito oxidasa en politiramina depositada electrnicamente, con el que se obtuvieron resultados que concuerdan con los obtenidos por los mtodos establecidos hasta la fecha.

NITRATOS Y NITRITOS
Accin, usos y lmites. En la industria lctea, los nitratos (NO3-) se suele emplear para evitar la hinchazn de algunos tipos de quesos (como el Gouda), provocada por los gases que producen los microorganismos, y esto solo cuando la leche no es de excelente calidad microbiana. La DU recomendada por el Comit FAO/OMS es de 200 mg/L de leche empleada en la elaboracin de los quesos, la cual ha sido reducida en algunos pases hasta 100 mg/L y se esperan residuos en el queso inferiores a 50 mg/kg. En realidad, la exposicin y riesgo por ingestin de nitratos estn determinados por la contaminacin del agua de beber y por su presencia en los alimentos, muy notoria particularmente en algunas familias de hortalizas (Chenopodceas y Crucferas), como residuos de la fertilizacin de la agricultura. En la actualidad el nitrato de sodio o potasio ya no se utiliza con tanta frecuencia como aditivo alimentario para el curado de las carnes, debido a que en este proceso, el nitrito de sodio es el aditivo especfico que acta como agente antimicrobiano, fija el color rosado caracterstico de los productos crnicos curados e influye sobre otras propiedades organolpticas. La propiedad antimicrobiana ms importante del nitrito (NO2) es su accin anticlostridial, particularmente contra el Clostridium botulinum, particularmente inhibiendo el crecimiento de las esporas del Clostridium bolulinum. Las propiedades anticlostridiales del nitrito son sumamente importantes en la prevencin del botulismo a travs del consumo de los productos crnicos curados.
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Otras funciones del nitrito en el curado de las carnes tienen una influencia organolptica. Los mecanismos de la reaccin colorimtrica fueron explicados por una combinacin del xido ntrico con los pigmentos de la carne. La influencia del nitrito sobre el sabor y aroma de los productos crnicos curados puede estar relacionada, si no directa, indirectamente con la accin antioxidante de este aditivo. Es importante destacar que para su accin antimicrobiana, particularmente antibotulnica, se considera que se requiere la adicin de las cantidades del aditivo que emplea la industria, lo que determina los lmites de tolerancia establecidos en todos los pases, pues para el resto de sus funciones las cantidades que se requieren son mucho menores. En general, hoy se considera que algo ms de 100 mg/kg son suficientes para la accin antimicrobiana y los dems objetivos tecnolgicos de los nitritos en los productos curados. Los NM establecidos del aditivo varan entre 120 y 150 mg/kg. Toxicocintica y efectos biolgicos. Los nitritos se absorben por difusin a travs de la mucosa gstrica y la pared intestinal. El nitrito absorbido reacciona con la hemoglobina (Hb2+) para formar metahemoglobina (Hb3+). La intoxicacin aguda con nitrito provoca metahemoglobinemia. El hombre adulto es poco susceptible, y en la prctica, solo cuando la dosis de aplicacin ha sido extremadamente elevada, por confundir la sal comn con sal de nitro, o accidentes en los que se emple nitrito reactivo para el curado de las carnes, surgen casos de intoxicaciones frecuentemente fatales. La metahemoglobinemia afecta fundamentalmente a los nios lactantes, lo cual se debe a varios factores: la hemoglobina fetal se oxida con facilidad a metahemoglobina, y los lactantes no tienen desarrollado el sistema enzimtico NADH metahemoglobina reductasa, capaz de impedir o dificultar la oxidacin de la hemoglobina. La IDAs recomendadas para nitratos y nitritos son: de 3,7 mg de nitrato (expresado como in)/kg de peso corporal y 0,07 mg de nitrito (expresado como in)/kg de peso corporal.

C OMPUESTOS

DE

N- NITROSO

Lo que ha determinado la preocupacin por riesgo crnico potencial de la ingestin de nitrito, y en particular por su empleo en la industria crnica, y en menor extensin la de una alta ingestin de nitrato, han sido la demostracin de la formacin de nitrosaminas en los productos crnicos curados con nitrito, la sntesis de estos compuestos in vivo a partir de este precursor y la elevada potencialidad cancergena de estos compuestos N-nitroso. Los compuestos de N-nitroso (CNNO) se caracterizan por la presencia del grupo nitroso (N=O) unido al tomo de nitrgeno; se dividen en nitrosaminas y nitrosamidas. Las nitrosamidas son menos estables y termolbiles, mientras que las nitrosaminas, que han sido mucho ms estudiadas, son estables, solo se descomponen lentamente por accin de la luz o en soluciones acuosas cidas. A travs de la exposicin exgena y endgena, el hombre est expuesto diariamente a cantidades variables de CNNO.
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Toxicocintica y efectos biolgicos. La ingestin oral conduce a la absorcin por el tracto gastrointestinal (particularmente por el intestino). Tras su absorcin las nitrosaminas se distribuyen por el torrente circulatorio; de la sangre desaparecen prcticamente a las 8 h; no se bioacumulan. Las nitrosaminas requieren activacin metablica por la actividad de las enzimas microsomales hepticas vinculadas a la accin del citocromo P450. En ratas la DL50 para la N-nitrosodimetilamina es de 27 a 41 mg/kg de peso corporal. Los efectos agudos de la N-nitrosodimetilamina y la N-nitrosomorfolina sobre el hgado se caracterizan por un incremento en la actividad de la enzima transaminasa glutmico pirvica srica y necrosis centrolobular. Las nitrosaminas son mutgenos potentes que alquilizan el DNA (por ejemplo, la metilacin de la guanidina en la posicin O6), siendo entonces, cancergenos iniciadores. El grado de susceptibilidad a la carcinognesis vara con la especie y se observa cierta especificidad en la localizacin de los tumores. En animales de experimentacin, tanto dosis simples severas como dosis bajas repetidas, producen efectos cancergenos. Niveles y lmites. Aunque a bajos niveles, la N-nitrosodimetilamina (NDMA) es la nitrosamina voltil que con mayor frecuencia se detecta en los alimentos, lo cual es resultado de estar entre las ms buscadas como consecuencia del desarrollo de los conocimientos de la analtica de estos compuestos, y por la comparativamente alta abundancia de precursores en relacin con otras nitrosaminas. Niveles significativamente mayores de otra nitrosamina, la N-nitrosopirrolidina (N-PYR) suelen encontrarse en la tocineta (bacon) cuando se fre. Derivado del empleo de nitrito como aditivo, los alimentos con mayor positividad a la NDMA y otras nitrosaminas voltiles son los productos crnicos curados; los cambios tecnolgicos y regulaciones sanitarias, como son la disminucin de la dosis de uso de nitrito y el empleo de ascorbato o eritorbato como antioxidantes e inhibidores de la nitrosacin, han originado reduccin de la contaminacin de los productos crnicos curados con las nitrosaminas, y por tanto de la exposicin exgena a estos cancergenos; sin embargo, resulta difcil pensar que la introduccin de cambios tecnolgicos y regulaciones sanitarias que implican la disminucin de los niveles de nitrosaminas voltiles en los alimentos haya sucedido tambin en los pases en desarrollo y en Amrica Latina, prcticamente existe muy pocas publicaciones sobre los niveles de nitrosaminas en los alimentos. Formacin in vivo de los compuestos de N-nitroso. El riesgo a las nitrosaminas puede ser endgeno. La cantidad y variedad de compuestos nitrosables que ingresan al organismo es enorme, particularmente a travs de los alimentos y medicamentos, por lo que la ingestin de nitrito desempea un papel determinante en la extensin de la nitrosacin. La cantidad de compuestos de Nnitroso formados en el estmago puede ser superior para individuos que presentan aclorhidria, ya que se incrementa la presencia y actividad de la microflora bacteriana que a bajos pH no puede proliferar. Algunas bacterias son productoras
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de enzimas nitratorreductasas, capaces de reducir cantidades considerables del nitrato ingerido que no sufri cambios en la boca, y con ello provocar significativamente mayor biosntesis de compuestos de N-nitroso en el estmago. La formacin endgena de compuestos de N-nitroso se vincula desde el punto de vista epidemiolgico con el cncer de estmago, esfago y tracto urinario.

ANLISIS DE LOS NITRATOS, NITRITOS Y COMPUESTOS DE N-NITROSO

Se han informado mtodos de anlisis rpidos y muy sensibles para determinar nitratos y nitritos por HPLC con deteccin electroqumica, pero el mtodo de anlisis clsico para determinar nitrito en los productos crnicos curados es la determinacin colorimtrica a partir de cido sulfanlico y naftilamina, o preferiblemente, sulfanilamida y clorhidrato de N-1-naftiletilendiamina, en medio cido. Con este mtodo es posible detectar entre 0,5 y 1 mg/kg, con lo cual se logran porcentajes de recuperacin por encima del 95 % y coeficientes de variacin menores que 3 %. Los nitratos se determinan por diferencia entre la concentracin obtenida en una alcuota que se eluye a travs de una columna que contiene un reductor, como el cadmio metlico, y la obtenida en una alcuota semejante no eluida a travs de la columna reductora. Gran nmero de mtodos de anlisis han sido ensayados para la determinacin de nitrosaminas en diversos medios. Inicialmente se propusieron tcnicas basadas en cromatografa de placa delgada y polarografa, ambas metodologas son inespecficas e introducen muchos falsos positivos; adems de poseer baja sensibilidad para las concentraciones de nitrosaminas que habitualmente se encuentran presentes en alimentos, cosmticos y otros medios. El empleo de un cromatgrafo de gases acoplado con un espectrmetro de masa (GLC-MS) permite un anlisis adecuado de las nitrosaminas voltiles, pero por su elevado costo y complejidad, esta metodologa se considera til solo para la confirmacin y no para el pesquisaje de estos compuestos. El desarrollo de detectores especficos para la determinacin del grupo N-nitroso (N-N=O) se convirti en gran necesidad para el anlisis de muestras ambientales. El descubrimiento del analizador de energa trmica (TEA) permiti un verdadero avance en el anlisis de las nitrosaminas. Este detector se fundamenta en que el enlace N-N de las nitrosaminas es considerablemente ms dbil que otros enlaces, y puede ser convertido en radical nitrosilo (NO) a 500600 oC, el cual reacciona con ozono al vaco y produce el radical excitado NO2, que emite fotones que se detectan en la regin infrarroja con la ayuda de un fotomultiplicador y un amplificador. El TEA es altamente especfico para el grupo N-N=O, ya que se requiere muy poca purificacin de las muestras y solo necesita extraccin y concentracin previa a la inyeccin en el cromatgrafo de gases acoplado al TEA. Para el anlisis de alimentos, los mtodos de extraccin son fundamentalmente mediante disolventes (el diclorometano es el ms utilizado), destilacin por arrastre de vapor y destilacin al vaco.
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CAPTULO 11

Peligros toxicolgicos de los envases plsticos

Grettel Garca Daz y Consuelo Macas Matos

Los envases plsticos que se emplean para conservar los alimentos pueden ceder sustancias qumicas al producto que contienen. Las autoridades internacionales en el mbito de la salud pblica han mostrado su preocupacin por conocer la exposicin del consumidor a las sustancias provenientes de los envases. Los materiales en contacto con alimentos son fuente potencial de contaminacin, de ah la necesidad de conocer la exposicin a estas sustancias indeseables en la dieta. Como derivado del petrleo, el plstico es un compuesto sinttico no biodegradable cuya produccin resulta muy contaminante; adems, su incineracin produce sustancias altamente txicas que generan graves problemas de contaminacin y salud. Sin embargo, el mayor peligro de los plsticos es el que genera este material al entrar en contacto con los alimentos o bebidas y los juguetes infantiles. El reciclaje y la investigacin sobre la toxicidad de los plsticos resultan tareas dificultosas, debido a que a ellos se incorporan diferentes aditivos para adaptarlos a sus distintos usos. Estos aditivos pueden abandonar la matriz polimrica (el plstico propiamente dicho) y contaminar los alimentos en un proceso conocido como migracin de sustancias txicas. La migracin aumenta con el incremento de temperatura (20 C son suficientes para desarrollar el proceso) y con el tiempo de almacenamiento del producto. La velocidad con que la industria introduce nuevas sustancias qumicas supone otra importante dificultad, ya que resulta imposible investigar los efectos sobre la salud de los nuevos compuestos plsticos antes de su introduccin en el mercado. De los materiales plsticos empleados para envasar alimentos el policloruro de vinilo (PVC) es el que ms reacciones ha suscitado, debido a su toxicidad y a la contaminacin ambiental derivadas de su fabricacin e incineracin; a este respecto, varios pases han tomado medidas contra el empleo de PVC en los envases de alimentos. Tambin el poliestireno (el material de los vasos de yogur o las bandejas de corcho blanco) puede aportar al organismo sustancias con efectos mutgenos y cancergenos. Si bien los niveles de esta sustancia detectados en productos lcteos no superan los lmites legales, no se conocen sus efectos a largo plazo.
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Una de las consecuencias ms graves del fenmeno de la migracin es la contaminacin hormonal, por la que muchos aditivos de los plsticos son capaces de funcionar en el organismo como hormonas, potenciando su efecto o bloqueando su accin. As, este proceso puede provocar alteraciones en el desarrollo sexual, feminizacin y masculinizacin, infertilidad, insuficiencias hormonales o cncer. Se han descrito hasta 10 grupos de sustancias que se comportan como estrgenos (hormonas femeninas), muchas de ellas de uso habitual en procesos industriales y agrcolas (detergentes, plsticos, cosmticos, anticonceptivos, insecticidas, etc.). Los estudios cientficos indican que el incremento de mortalidad por cncer de mama, ovario o prstata en las ltimas dcadas se debe a la contaminacin por estas sustancias. Los efectos de estos aditivos pueden manifestarse mucho tiempo despus de su incorporacin y hasta en la descendencia, al pasar a esta durante el embarazo y la lactancia. Un grupo de cientficos de la Unin Europea trata de establecer un modelo matemtico que permita predecir la migracin de estas sustancias qumicas de los envases a los alimentos. La Unin Europea dispone de unas listas positivas de sustancias qumicas que se pueden emplear en la fabricacin de envases plsticos para alimentos. Cuando estos materiales se chequean se ve siempre el caso ms extremo para el consumidor, por ejemplo, desde el punto de vista de la temperatura. De este modo se garantiza que, aunque migre la sustancia, no va a suponer ningn riesgo para el consumidor. La legislacin impone unos lmites de migracin que se sitan en 60 mg de sustancia qumica por kilogramo de producto alimenticio. Sin embargo, para las sustancias que pueden presentar ms problemas o riesgo se establecen lmites mucho ms estrictos, en funcin de su toxicidad potencial, ya que los efectos de estas sustancias en el consumidor casi siempre son acumulativos a largo plazo. Desde hace varias dcadas los envases plsticos han sido utilizados preferentemente como el medio de transporte del alimento al consumidor. Sin embargo, el desarrollo tecnolgico de la industria alimentaria ha permitido aumentar sus funciones y en la actualidad poseen funciones tan diversas como: Preservar la calidad del alimento. Ofrecer informacin al consumidor. Proteger el producto envasado frente a contaminaciones externas. Por lo general los envases plsticos son higinicos, cmodos y atractivos. Adems sus propiedades y la tecnologa permiten lograr mltiples combinaciones en envases rgidos, semirrgidos y flexibles, que cumplan los requerimientos de conservacin de un producto terminado. Los envases plsticos tienen como desventaja la posible contaminacin del alimento por la migracin de sustancias qumicas desde el envase. Los polmeros por su gran tamao molecular no son solubles en los alimentos y son inertes, por
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lo que no representan riesgos. A la contaminacin solo pueden contribuir aquellos componentes del plstico, que por su bajo peso molecular difunden a la superficie de contacto y se disuelven en el alimento: los residuos de la polimerizacin entre los que estn los monmeros que quedan libres y los aditivos que se aaden con fines tecnolgicos. No siempre es posible evitar totalmente la presencia de residuos de la polimerizacin en la materia prima o el artculo terminado, ni el uso de aditivos totalmente inocuos; las consecuencias para el alimento pueden variar desde sabores extraos hasta su contaminacin con compuestos txicos. Por esto, la formulacin de un material plstico debe seleccionarse, de forma tal que la migracin sea mnima y que las sustancias que migren no causen riesgos toxicolgicos al consumidor. Existen regulaciones sanitarias que aseguran que no haya riesgo para la salud debido a la ingestin de alimentos contaminados con compuestos del envase; muchos pases, especialmente aquellos que tienen una industria petroqumica desarrollada, cuentan con estas regulaciones. En Estados Unidos el uso de los plsticos en contacto con alimentos est bajo la Jurisdiccin de la Administracin de Alimentos y Drogas (FDA). Cuando se trata de alimentos en contacto con materiales plsticos se establece como exigencia primaria que estos no pueden, en condiciones normales de uso, transferir sus constituyentes a los alimentos en cantidades tales que puedan: Causar riesgos a la salud. Producir cambios indeseables en la composicin del alimento. Alterar sus caractersticas organolpticas. Para evitar el riesgo a la salud del consumidor y la alteracin de las propiedades organolpticas del alimento se aplican los criterios siguientes: Se delimita la cantidad y calidad de los aditivos y monmeros utilizados en el envase plstico. Estas son las llamadas listas positivas. Se delimita la migracin de la sustancia a los alimentos, sobre la base de una autorizacin en la que el productor debe suministrar al organismo responsable informacin acerca de: entidad, composicin, propiedades, especificaciones, cantidad que se debe usar y finalidad del uso, informacin de la operacin y datos toxicolgicos. El uso de materiales plsticos en envases y embalajes para alimentos debe cumplir normas bsicas de seguridad para evitar posibles contaminaciones y minimizar la migracin de compuestos que alteren las propiedades o seguridad del contenido. Una nueva lista de materiales autorizados para la fabricacin de envases plsticos, as como los lmites mximos de migracin quedaron regulados por una normativa el 22 de febrero del 2005. La migracin est relacionada con todos los componentes de bajo peso molecular que se aaden o quedan residualmente en el plstico y que pueden transferirse al alimento en contacto como son: Residuos de la polimerizacin.
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Solventes. Plastificantes. Estabilizadores del calor y la luz. Antioxidantes. Absorbentes de la luz ultravioleta. Reforzantes. Lubricantes. Agentes antibloqueo. Desmoldantes. Pegamentos. Espumantes.

La migracin est regida por el fenmeno de la difusin del aditivo en la matriz del plstico y su solubilidad en el alimento, de aqu se desprende la influencia de distintos factores en este proceso: La naturaleza y estructura qumica del aditivo, que implica mayor o menor interaccin con el polmero; tambin influye el tamao (al aumentar el peso molecular disminuye la migracin) y la concentracin del polmero. La composicin y propiedades de los alimentos: como la mayora de los aditivos y monmeros son compuestos orgnicos insolubles, la migracin es mucho mayor en los alimentos grasos que en los alimentos lquidos no grasos; en los alimentos secos no grasos la interaccin es mnima y la migracin es insignificante. La temperatura y el tiempo de contacto del material con el alimento son directamente proporcionales a las cantidades migradas. La relacin entre la superficie de contacto del plstico respecto al volumen de alimento envasado (en los envases pequeos la relacin superficie/volumen aumenta lo que favorece la migracin. Hay que tener en cuenta que el envase sufre junto con el alimento los procesos de elaboracin y conservacin (esterilizacin, congelacin y descongelacin, irradiacin y microondas), los cuales tambin influyen sobre la migracin.

MIGRACIN TOTAL Y ESPECFICA

A los efectos prcticos se debe hacer una distincin entre migracin total o global y migracin especfica. La primera responde a la suma de todos los compuestos que se transfieren al alimento, sean de inters toxicolgico o no, incluyendo sustancias que son fisiolgicamente inertes, pero no podran tener un efecto sobre las propiedades organolpticas del alimento. Es un mtodo de deteccin que ahorra tiempo y recursos cuando no se espera un riesgo particular, se realiza por la medida gravimtrica de un residuo obtenido en simulantes de alimento y en condiciones experimentales fijadas. La migracin especfica se refiere a uno o ms compuestos definidos, que se determinan mediante un mtodo particular por inters toxicolgico. Para
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determinar la migracin especfica de cada aditivo o monmero es necesario disponer de un mtodo analtico selectivo, preciso y con suficiente sensibilidad, que permita cuantificar las cantidades trazas que se encuentran en los alimentos. La migracin se puede expresar como cantidad de sustancia (o sustancias, migrada por kilogramo de alimento (mg/kg o por superficie en contacto (mg/dm2). Los lmites de la migracin total estn entre 5 y 10 mg/dm2 60 p.p.m. considerando que la relacin superficie/volumen en la mayora de los envases es 0,6:1. No siempre es posible realizar los experimentos de migracin en las condiciones prcticas de uso, es necesario lograr condiciones experimentales: soluciones de extraccin, tiempo y temperatura de contacto y relacin superficie/volumen, lo cual adicionalmente hace comparables los resultados. La naturaleza heterognea de los alimentos provoca grandes dificultades analticas para la determinacin de los colorantes, que adems se encuentran casi siempre en cantidades trazas. Para evitar esto se sustituyen los alimentos por soluciones modelos.-soluciones simulantes- que tratan de imitar la accin extractiva de los alimentos. Las variables que deben fijarse para el estudio de la migracin en condiciones experimentales son el tiempo y la temperatura, sobre la base del proceso o almacenamiento real que va a tener el alimento, tratando de aumentar la temperatura para ahorrar tiempo.

P R I N C I PA L E S P L S T I C O S U T I L I Z A D O S PA R A E L ENVASADO DE ALIMENTOS
Polietileno (PE). Se forma por la polimerizacin del gas etileno. Existen 2 tipos en dependencia del proceso de polimerizacin: el polietileno de baja densidad (PEBD) y el polietileno de alta densidad (PEAD), aunque tambin existen materiales intermedios. PEBD es ligeramente translcido, de aspecto ceroso y muy flexible. Ofrece baja permeabilidad al vapor de agua y alta a los gases (especialmente al oxgeno). Se usa ampliamente en la confeccin de bolsas solo o combinado con papel, aluminio y otros materiales plsticos. El PEAD es ms duro, menos transparente y flexible. Tiene ms baja permeabilidad al vapor de agua. Se utiliza en botellas, bandejas y artculos domsticos. Polipropileno (PP). Se produce por polimerizacin del propileno. Es ms duro que los polietilenos. Los artculos obtenidos por moldes presentan una superficie brillante. Es menos resistente que el PEAD. Presenta muy baja permeabilidad al vapor de agua y al oxgeno. Se usa en artculos domsticos y en envases que se llenan a temperaturas altas, tambin en bolsas para envasar galletas, bizcochos y otros productos que requieran ausencia de agua. Poliestireno (PS). Se forma por polimerizacin del estireno. Cuando la polimerizacin tiene lugar solo a partir de estireno como unidad estructural se obtiene un plstico rgido, transparente, pero con gran fragilidad. Si al polimerizar
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se le aade butadieno, se logra disminuir esa fragilidad, pero a la vez pierde la transparencia y se obtienen los llamados poliestirenos de alto impacto PSAI y poliestireno de medio impacto (PSMI). Tambin se consigue este objetivo por la adicin de otro monmero, el acrilonitrilo, copolmero estireno-acrilonitrilo (SAN, mantiene la transparencia, presenta alta dureza y resiste elevadas temperaturas). Otra posibilidad es la copolimerizacin de estireno, acrilonitrilo y butadieno para obtener el llamado ABS, menos transparente y de buena resistencia a los golpes. El poliestireno posee baja permeabilidad a los gases y al vapor de agua. Su principal uso es en potes, tubos y bandejas para productos lcteos. Policloruro de vinilo (PVC). Se produce por la polimerizacin del cloruro de vinilo (CV). Es un material duro, rgido, transparente y brillante; de esta forma se fabrican botellas para el envasado de agua mineral, vinagre, aceite y jugos. Cuando se aaden plastificantes se obtiene un material sumamente flexible que se procesa en pelculas para envolver quesos, embutidos, carnes, frutas y vegetales; en mangueras, para conexiones industriales y de agua potable; en potes y tubos, para mermeladas, pastas y mostaza y en el sellado de las tapas de pomos y botellas. Se caracteriza por presentar muy baja permeabilidad al vapor agua y a los gases. Posee buena resistencia a los aceites y grasas. Terftalato de polietileno (PET). Se produce por la polimerizacin del cido terftlico y el etilenglicol. Pertenece al grupo de los polisteres saturados. Es un plstico relativamente nuevo que tiene un creciente en sus 2 formas: rgido y flexible; adems de la gran transparencia y brillo que presenta, la propiedad ms apreciada es que constituye una barrera a los gases. Las botellas se usan mucho en el envasado de jugos y bebidas carbonatadas y cervezas. Debido a que resiste elevadas temperaturas se usa en su forma flexible (la cual depende del proceso tecnolgico de fabricacin) para el envasado de comidas que suelen ser calentadas o cocinadas en el envase. Este uso est ltimamente relacionado con el cocinado por microondas. Las pelculas generalmente son combinadas con polietileno, aluminio y otros materiales para lograr buen sellado o cuando se necesita un almacenamiento por largo tiempo.

MONMEROS DE MAYOR INTERS TOXICOLGICO

CLORURO DE VINILO
Es un gas incoloro que constituye la unidad estructural del PVC. Se utiliza tambin como monmero en el policloruro de polivinilideno (PVDC y otros polmeros). Toxicocintica y efectos biolgicos. El PVC se absorbe por inhalacin y por va oral. Se distribuye al hgado y los riones inmediatamente despus de la exposicin, y algunos metabolitos permanecen en los tejidos hasta 48 horas. Se
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metaboliza mediante las monooxigenasas por funcin mixta a xido de cloroetileno, el cual se reordena momentneamente a cloroacetaldehdo. Se excreta por la orina a travs de sus 2 metabolitos principales: la S-carboximetilcistena y el cido tiodigliclico, y tambin sin cambio en pequeas cantidades por va respiratoria. La intoxicacin aguda provoca irritacin de las membranas mucosas y respiratorias, as como prdida de la conciencia. La intoxicacin crnica se desarrolla despus de 4 5 meses hasta varios aos despus de la exposicin. En su primera etapa se caracteriza por polimorfismo, variabilidad esencial y perturbacin de la regulacin vascular-vegetativa, termorregulatoria, neurotrfica y cambios en la piel, acrostelisis de las falanges terminales de los dedos. En la segunda etapa se produce polineuritis vegetativa, perturbacin de la actividad cardaca (arrtmia), afectacin del sistema nervioso central, esplenomegalia, trombocitopenia, funcin respiratoria reducida anemia y leucopenia. El carcter carcinognico del CV est bien establecido. En un experimento con ratas se les suministraron por va oral concentraciones de 3,33; 16,65 y 50 mg/L de CV en aceite de oliva; a partir del segundo grupo aparecieron carcinomas epidermoides y nefroblastomas. Tambin en estudios epidemiolgicos se mostr que la incidencia de mortalidad por cncer era mayor en trabajadores expuestos que en poblacin no expuesta. Niveles y lmites. Estudios sobre la migracin del CV a los alimentos mostraron niveles de 9,4 mg/L en vinagre, 14,8 mg/L en aceite y en bebidas alcohlicas almacenadas en botellas de PVC durante 6 aos hasta 20 mg/L. Se estudi la migracin en relacin con el tiempo y la temperatura, usando distintos simulantes y distintas concentraciones residuales en el envase. Los valores ms elevados de la migracin se encontraron en el alcohol al 50 % y en los simulantes grasos, y disminua al ir reduciendo las concentraciones residuales en el envase hasta no ser detectable para niveles de 1 mg/kg. Se realizaron cambios tecnolgicos que redujeron al mnimo posible los niveles de CV en el envase, y se desarrollaron mtodos de anlisis cada vez ms sensibles que permitieron determinar cantidades menores que 1 mg/kg en el plstico y 0,01mg/kg del alimento, cifras que se consideran los actuales lmites mximos de residuo (LMR).

ESTIRENO
El estireno es un lquido transparente, viscoso, con olor fuerte y desagradable. Su principal uso es en la produccin de polmeros y copolmeros de poliestireno, tambin se utiliza como agente entrecruzante en la fabricacin de resinas polister insaturadas. El primer uso del estireno, que an se mantiene, fue en la industria del caucho en la fabricacin de gomas de estireno-butadieno y estireno-acrilonitrilo. Toxicocintica y efectos biolgicos. La absorcin del estireno es rpida y la va principal es la respiratoria, tambin se absorbe por la piel y la va oral. Se distribuye a travs de todos los rganos y tejidos y se acumula en el tejido adiposo,
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donde el tiempo de vida media es de 2 a 5 das. Es metabolizado a 7,8 xido de estireno por las oxidasas de funcin mixta. Los principales metabolitos urinarios son el cido mandlico y el fenilglioxlico, los cuales que se usan para medir exposicin reciente a estireno. En animales de experimentacin expuestos a los vapores de estireno se produjo irritacin de las membranas mucosas, depresin del sistema nervioso central y dao pulmonar agudo. En dosis oral de 200 mg/kg de peso corporal durante varios meses se produjeron en los animales cambios hematolgicos e inmunolgicos y dao renal. Por ambas vas se produjo dao heptico incluyendo infiltracin grasa del hgado y necrosis de las clulas hepticas. El estireno result ser un carcingeno probable solo en 1 de 3 estudios en ratones y no carcingeno en ratas. Su principal metabolito intermedio, el 7,8 xido de estireno present una letalidad de 4 a 5 veces mayor que el estireno y en estudios in vitro demostr ser mutagnico. En estudios epidemiolgicos se ha encontrado aumento del riesgo de cncer de los sistemas linfticos y hematopoyticos en trabajadores expuestos; sin embargo, hasta el momento existe insuficiente evidencia para establecer una relacin causa-efecto entre exposicin a estireno y desarrollo de cncer en humanos. Niveles y lmites. La significacin sanitaria que tiene el control de la migracin del estireno se debe no solo a su toxicidad, sino tambin a que l causa alteraciones organolpticas sobre ciertos lmites. Con el desarrollo tecnolgico alcanzado actualmente, los niveles de estireno encontrados en los poliestirenos estn, como rango general, entre 200 y 1 200 mg/kg, y en los alimentos son menores que 0,2 mg/kg. El Comit Mixto FAO/OMS de Expertos de Aditivos Alimentarios acord que no se requera una limitacin especfica para el estireno, ya que su presencia es autolimitadora desde el punto de vista organolptico, pero recomend que los materiales a partir de polmeros de estireno se produjeran conforme a las buenas prcticas de fabricacin.

ACRILONITRILO
El acrilonitrilo es un lquido voltil, incoloro, inflamable, con un olor dulce y caracterstico. Cuando se polimeriza solo se obtiene el poliacrilonitrilo (PAN), con el estireno y el butadieno los ya nombrados SAN y ABS. Tiene la caracterstica de conferirle a su polmero y copolmeros impermeabilidad a los gases, resistencia a las grasas, aceites y a la humedad, y en alta proporcin transparencia. En la fabricacin de gomas se utiliza copolimerizado con butadieno para obtener un caucho sinttico resistente a los aceites. Tambin en fibras acrlicas para tejidos. Toxicocintica. El acrilonitrilo se absorbe rpidamente por va drmica y pulmonar, tambin por va oral. No se acumula. Se distribuye de forma bastante uniforme en los distintos tejidos y rganos, los mayores niveles se encuentran en eritrocitos, piel y estmago en dependencia de la va de entrada. Han sido
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identificados 10 metabolitos. Se metaboliza por la va de las monooxigenasas de funcin mixta a glicidonitrilo, y este o el propio acrilonitrilo se conjuga con el glutatin, dando lugar a cidos mercaptricos que son los principales metabolitos urinarios. Tambin se metaboliza parcialmente a cianuro y se elimina por la orina como tiocianato. Efectos biolgicos. Los efectos txicos no son especficos, se relacionan principalmente con el tracto gastrointestinal y respiratorio, el sistema nervioso central y los riones. La LD50 est entre 25 y 186 mg/kg de peso; los ratones son ms sensibles que las ratas, conejillos de india y conejos. Es embriotxico y teratognico en hamsters y ratas. Probablemente no es mutagnico por si mismo, pero s sus metabolitos. Es carcinognico en ratas a travs de los alimentos y por inhalacin. No se ha demostrado una correlacin entre exposicin e incidencia de cncer concluyente en estudios epidemiolgicos, pero los resultados sugieren la posibilidad de que tambin sea cancergeno en el hombre. Lmites. El Comit Mixto FAO/OMS recomend reducir al mnimo posible la exposicin humana al acrilonitrilo. En lo que a envases respecta, la tecnologa no alcanz los mismos avances que con el cloruro de vinilo, y los niveles residuales no han podido disminuirse tanto, por ello, las medidas tomadas implican restriccin en el uso, se prohibieron las botellas de PAN y se estableci un lmite en los alimentos de 0,02 mg/kg. Anlisis. La cromatografa gaseosa con la tcnica de espacio de cabeza es el mtodo de anlisis recomendado para determinar cloruro de vinilo, estireno y acrilonitrilo en los plsticos y en los alimentos. Este mtodo presenta la ventaja que la determinacin se realiza directamente en el alimento sin preparacin preliminar (digestin, extraccin), y como se inyecta en el cromatgrafo una alcuota de la fase gaseosa, se disminuyen las interferencias de otros componentes del alimento o del plstico, lo cual permite obtener mayor sensibilidad. Los lmites de deteccin alcanzados son alrededor de 1 mg/kg en el plstico y de 0,05 a 0,001 mg/kg en los alimentos.

ADITIVOS
Los aditivos empleados en los materiales plsticos de mayor inters toxicolgico son los plastificantes, estabilizadores y pigmentos.

P LASTIFICANTES
Los plastificantes son los aditivos que tienen la finalidad de aumentar la flexibilidad del polmero y adicionalmente disminuyen la fragilidad y actan como lubricantes internos, reduciendo las fuerzas de friccin y la temperatura de procesamiento. Los plastificantes tienen la particularidad, a diferencia de la mayora de los dems aditivos, que requieren ser aadidos en elevada proporcin (10-50 %), para que puedan ejercer su accin flexibilizante, como se puede ver, esto es ya un problema desde el punto de vista de la migracin.
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Existe un amplio rango de plastificantes: steres de los cidos fosfricos, ftlicos, adpicos, sebacnicos y ctricos, parafinas cloradas, difenilos clorados y aceites vegetales epoxidados. Los steres fosfricos, por ejemplo, el tricresilfosfato, a pesar de ser excelentes plastificantes, siempre han estado fuera de las listas positivas por su conocida toxicidad, igualmente sucede con los difenilos y parafinas cloradas. El material plstico de mayor uso en relacin con alimentos donde se utilizan plastificantes es el PVC. Los plastificantes ms usados durante aos en el PVC han sido el dietilhexilftalato (DEHP) llamado tambin dioctilftalato (DOP) y el dietilhexiladipato (DEHA) o dioctiladipato (DOA). El DEHP tiene baja volatilidad, muy buena retencin por el plstico, excelente estabilidad al calor y a la luz, as como le proporciona gran flexibilidad y buena resistencia al PVC. El DEHA tiene la ventaja de tener buena resistencia a bajas temperaturas y por tanto particular aplicacin en estos casos, es ms voltil que el DEHP y no tiene tan buena retencin por el PVC. En los primeros estudios toxicolgicos el DEHP se revel como un compuesto poco txico; la LD50 fue de 31 mg/kg. Pero ya en estudios de toxicidad crnica mostr amplia variedad de sutiles efectos biolgicos: aumento del tamao del hgado, disminucin de la velocidad del flujo coronario, inhibicin de las enzimas del metabolismo de los carbohidratos y alteraciones del tejido heptico. Por otra parte, se fue acumulando informacin sobre la migracin, se encontr en leche que pasaba a travs de las tuberas de ordeo, en sangre almacenada en bolsas de PVC y en tejidos humanos de personas que haban recibido transfusiones de dicha sangre y en alimentos donde adicionalmente se encontr una relacin directa de la migracin con la cantidad de grasa. El Programa Toxicolgico Nacional de los EE.UU. public resultados que indicaban que el DEHP causaba efectos cancergenos en altas dosis en ratas y ratones de uno y otro sexos, as como efectos similares se notaron en el DEHA en ratones hembras y posiblemente tambin en ratones machos. La Agencia Internacional de Investigaciones sobre el Cncer concluy que exista evidencia suficiente para declarar que el DEHP es cancergeno en ratas y ratones, y evidencia limitada sobre la carcinogenicidad del DEHA en ratones, adems que no existen datos suficientes para evaluar en humanos. Se recomienda reducir la exposicin humana a DEHP, y ya que sus niveles en el plstico no pueden ser reducidos porque dejara de cumplir su funcin, sera posible lograrlo mediante el uso de plastificantes alternativos que fueran toxicolgicamente aceptables u otros materiales plsticos alternativos. Una de las medidas tomadas ha sido sustituirlo por el DEHA en las pelculas para envolver alimentos. Se ha calculado que la ingesta dietaria mxima de DEHA, considerando el consumo de alimentos envasados y el nivel promedio de DEHA en dichos alimentos, es alrededor de 16 mg/persona/da, la posibilidad de riesgo a la salud con esta ingesta es remota y aunque no existe razn, por tanto, para prohi154

bir el uso de materiales de envases que contengan DEHA, debe reducirse esa ingesta. En aos recientes el uso de pelculas adheribles de PVC ha ido en franco aumento, tanto en los establecimientos de ventas al por menor, como en usos domsticos que incluyen conservacin en fro o cocinado en el envase por microondas. Tanto la industria productora de plstico como la de envasar alimentos han tomado medidas para poder continuar utilizando este tipo de pelculas, que fueron: disminuir el grosor de las pelculas, con lo cual se reduce la concentracin del plastificante en contacto, as como la migracin y la sustitucin parcial o total del DEHA por un plastificante polimrico, que por su mayor tamao molecular deber migrar menos. Otro material que requiere el uso de plastificantes y al cual se le ha dedicado atencin sanitaria es la celulosa. Las pelculas de celulosa regenerada (celofn) simples o revestidas con nitrocelulosa o con copolmeros del cloruro de vinilideno-cloruro de vinilo (PVDC, comercialmente Sarn) tienen distintas aplicaciones en el envasado de alimentos, por ejemplo, envolturas para caramelos, chocolates, confituras, cakes, pasteles y otros, y son plastificadas con mezclas de glicoles. El monoetilenglicol y el dietilenglicol, muy adecuados tecnolgicamente, rebasaban los lmites de migracin fijados y han sido sustituidos por una mezcla de propilenglicol (PG), trietilenglicol (TEG), polietilenglicol (PEG), glicerol y urea, que adems de eliminar problemas de toxicidad disminuyen la migracin por su mayor peso molecular, especialmente en el caso del TEG y PEG. Existen otros plastificantes que al tener en cuenta su poco uso no parecen constituir un problema sanitario y su migracin ha sido poco estudiada. Uno de ellos es el aceite de soya epoxidado, que se utiliza con distintos materiales plsticos como PVC, PVDC y poliestireno; que adicionalmente a su accin plastificadora sirven como estabilizantes secundarios y lubricantes internos. Otro es el acetiltributilcitrato (ATBC) que es el plastificante ms usado en las pelculas de Sarn en una proporcin de hasta 5 %, estas pelculas se utilizan cuando se requiere baja permeabilidad al oxgeno y a la humedad, as como elevada resistencia a las grasas, solas en el envasado al vaco o en atmsfera controlada o para usos domsticos o como recubrimiento del celofn. Con el Sarn tambin se utiliza en menor medida otro plastificante, el dibutilsebacato (DBS). Se emplean pelculas de acetato de celulosa en forma de lminas rgidas en las ventanas de las cajas de cartn para cakes, pasteles y repostera en general, donde no se espera que exista un contacto directo con el alimento, pero que puede ocurrir durante la manipulacin. Estas pelculas generalmente se plastifican con 16 % de dietilftalato (DEP). Otros ftalatos como el dibutilftalato (DBP), diciclohexilftalato (DCHP) y diisononilftalato (DINP) se utilizan tambin en pequea medida como plastificantes de los revestimientos de nitrocelulosa del celofn y en los artculos de goma, por su poco uso no se le ha conferido mucha atencin.
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ESTABILIZADORES
Los estabilizadores junto con los plastificantes son considerados los aditivos ms importantes de los plsticos, por su toxicidad y porque su uso es indispensable. Se denominan estabilizadores a aquellos compuestos que se aaden al PVC para prevenir o retardar su degradacin, tanto la que puede tener lugar durante el proceso de fabricacin del artculo, ya que el PVC tiene baja resistencia trmica, como en la conservacin del envase o artculo debido a la accin de agentes ambientales (radiaciones, humedad, calor, oxgeno, ozono), que provoca alteraciones de la estructura macromolecular y de sus propiedades. Los estabilizadores generalmente se aaden en una proporcin menor que 2 % respecto al peso del plstico. Existen distintos grupos de compuestos que poseen la propiedad de estabilizar al PVC; algunos protegen contra el calor, otros contra las radiaciones, mientras que otros previenen ambos efectos. La toxicidad es diversa, ya que el rango de sustancias desde inorgnicas hasta orgnicas es muy variado. Entre los mejores estabilizadores para PVC se encuentran los compuestos de Pb y Cd, estos ltimos en combinacin sinrgica con el bario (Ba), que por su toxicidad estn prohibidos para el PVC que se utilice para producir envases que contengan alimentos. Los estabilizadores ms usados en PVC destinado a estar en contacto con alimentos son los compuestos de calcio-zinc y los orgnicos de Sn. Tambin se utilizan en menor medida compuestos orgnicos como los derivados de urea (fenilurea, difeniltiourea), el 2-fenilindol y los steres del cido -aminocrotnico. En los compuestos de calcio-zinc se presenta un efecto sinrgico entre el calcio que mejora la durabilidad y el zinc que produce mejor coloracin inicial. Estos estabilizadores no tienen importancia toxicolgica y se usan principalmente en PVC flexible para envases, juguetes y equipos de transfusin y venoclisis. Los estabilizadores de Sn orgnico se utilizan en PVC rgido para botellas y laminas, no se pueden usar en el PVC flexible porque la presencia de plastificantes aumenta considerablemente la migracin. De los compuestos de Sn orgnico tienen accin estabilizante los dialqulicos (R2SnX2) y algunos monoalqulicos (R Sn X3) Estos estabilizadores tienen efecto sobre el calor y la luz. Existen 2 grupos, los que contienen azufre en su estructura (tioglicolatos de mono- y dialquilSn) que tienen la propiedad de conferirle una excelente transparencia al PVC, y los que no contienen azufre (carboxilatos de dialquilestao), que son inoloros pero no confieren transparencia al PVC. Toxicocintica y efectos biolgicos. Los compuestos de Sn orgnico se absorben ms rpidamente que los de Sn inorgnico, y entre los orgnicos disminuye la absorcin a medida que aumenta la longitud del radical alquilo. Las mayores concentraciones de estos compuestos se han encontrado en el hgado y algo menores en los riones; la ruta de excrecin depende del tipo de compuestos.
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Los trialquilos, que se usan como plaguicidas y se encuentran como impurezas de los mono y di causan daos en el sistema nervioso central. Los dialquilos tienen efecto sobre los conductos biliares especialmente los de cadena corta. Estn prohibidos los compuestos dibutlicos y otros de cadena corta y se recomiendan los dioctilos para estabilizar PVC de uso alimentario. Se ha observado que algunos compuestos dimetlicos y dioctlicos inhiben la oxidacin de los cetocidos y bloquean la respiracin mitocondrial, al administrar altas dosis de dicloruro de dioctil- y dibutilSn se produjo atrofia del timo y supresin de la respuesta immune en ratas pero no en ratones. No existen evidencias de que los compuestos orgnicos de Sn sean cancergenos, mutgenos ni teratgenos. Niveles, lmites y anlisis. El estabilizador de Sn orgnico mundialmente ms usado es el di-2-etilhexiltioglicolato de dioctilSn (TGDO), que se combina con el correspondiente derivado monooctlico por su accin sinrgica. Este compuesto se aade casi siempre en una proporcin de 1,5 % respecto al peso del PVC. Los lmites fijados para su migracin son de 5 g Sn/dm2 en alimentos o simulantes no grasos y de 10 g Sn/dm2 en alimentos o simulantes grasos. El anlisis de Sn total en EP y alimentos se desarrolla de igual manera que la descrita en el captulo 8.

P IGMENTOS
As como los envases de PVC, PET y policarbonatos se caracterizan por su transparencia, que permite exhibir el contenido; los envases de polietileno, polipropileno y poliestireno de uso general se usan casi siempre coloreados, lo cual le confiere un atractivo especial y tambin evita el paso de la luz y otras radiaciones. Los pigmentos para plsticos pueden ser orgnicos e inorgnicos. En el primer grupo se encuentran los azopigmentos: amarillo bencidina, amarillo Hansa, rojo naftol, rojo toluidina; los pigmentos de complejos metlicos, las ftalocianinas verde y azul. Entre los pigmentos inorgnicos estn el xido de titanio y el sulfuro de zinc (blancos), negro de humo, amarillo nquel-titanio, xidos de hierro (rojo y negro), azul y verde cobalto y los sulfuros y sulfoselenuros de Cd (amarillo y rojo). Los pigmentos de sulfuro de Cd dan colores entre el amarillo y el anaranjado, los sulfoselenuros entre rojo y castao, y segn las combinaciones que se hagan se obtienen tonalidades de bellos colores. Son resistentes a los lcalis aunque no a los cidos, resistentes al calor (ms de 500 C) y estables a la luz. Estas caractersticas los convierten en pigmentos tecnolgicamente apreciados; sin embargo, desde hace unos aos, desde el punto de vista sanitario se valora su uso en plsticos para envases y otros usos en relacin con alimentos o contacto directo con el ser humano. En un estudio de la migracin a soluciones simulantes cidas de polietilenos, polipropilenos y poliestirenos se encontraron niveles entre 0,12 a 0,97 g/dm2, los cuales no sobrepasaran la ingestin semanal provisional fijada por el Comit
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Mixto FAO/OMS que es de 0,0070 mg/kg de peso corporal, y por tanto no se debe esperar riesgos para la salud; sin embargo, considerando que el Cd es bioacumulable y cancergeno no se recomienda el uso de pigmentos de Cd para colorear plsticos, por lo que se debe tener en cuenta la posibilidad de sustituirlos. Las listas positivas de las regulaciones generalmente no incluyen los pigmentos, solo especifican que estos no deben migrar a los alimentos, ni en trazas, y en algunos casos se evala el grado de pureza del pigmento fijando lmites de metales pesados y aminas, tambin se han fijado en el producto final plstico cuando se trata de juguetes, pero no para alimentos.

ANLISIS DE MIGRACIN
La seleccin de un determinado material plstico o combinaciones de ellos para envasar un alimento especfico es un problema fundamentalmente tecnolgico, y las consecuencias ms probables de una buena o mala seleccin se manifiestan en la calidad y el valor nutritivo del alimento. Por el contrario, el fenmeno de la migracin de una sustancia desde el envase, tiene adems de las anteriores aplicaciones un carcter txico que implica estricto control sanitario. Las diferencias conceptuales y de aplicacin prctica de la migracin total, entendindose por tal la suma de todos los compuestos que se transfieren al alimento, sean o no de inters toxicolgico, se determina por la medida gravimtrica de un residuo obtenido en condiciones experimentales y especficas. Los lmites establecidos para el material derivado del envase fluctan entre 5 y 10 mg/dm2 o 60 p.p.m., considerando que la relacin superficie/volumen en la mayora de los envases es 0,6:1. Los lmites mximos de residuos de los compuestos, medidos en las pruebas de migracin especfica, varan en cada caso. Las variables que se deben establecer en los estudios relativos a la migracin del material del envase en condiciones experimentales, son el tiempo y la temperatura, de acuerdo con el proceso o tipo de almacenamiento a que se someter el alimento. Los mtodos de ensayos desarrollados para calcular el nivel de migracin global y especfica de materiales plsticos hacen referencia comnmente a 4 tipos de simulantes: Agua destilada. Solucin acuosa de cido actico (3 %). Solucin acuosa de etanol (15 %). Aceite de oliva, dentro de los simulantes grasos. El procedimiento de ensayo de migracin global, empleando simulantes acuosos, permite determinar la cantidad de componentes que se han transferido desde el envase al simulante alimentario mediante gravimetra. Las pruebas interlaboratorio realizadas con este tipo de simulantes han demostrado que existe buena repetitividad y reproducibilidad de los resultados obtenidos.
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El procedimiento de ensayo de migracin global que utiliza simulantes grasos es ms complejo, debido a que implica la extraccin del aceite absorbido por el plstico y su ulterior cuantificacin mediante el empleo de cromatografa gaseosa. Las pruebas interlaboratorio realizadas con este tipo de simulante indican que es necesario mayor experiencia para obtener buena repetitividad y reproducibilidad de los resultados de migracin. El ensayo de migracin global es una buena referencia para determinar la estabilidad de un envase en condiciones de uso. Sin embargo, la migracin especfica de una sustancia concreta es ms interesante desde el punto de vista toxicolgico. La cantidad de una sustancia que es capaz de migrar desde un envase a un simulante alimentario permite dar buena valoracin toxicolgica, al establecer la magnitud de esa sustancia que se transfiere al alimento, y como consecuencia a la toxicidad de esta. La aparicin de un nuevo envase en el mercado debe mantener el equilibrio entre los requisitos tcnicos y los toxicolgicos exigidos al mismo, es decir, entre las funciones tcnicas requeridas para el envase, como puede ser la conservacin del alimento y la seguridad del consumidor. La tcnica de ensayo de migracin especfica implica tambin el empleo de simulantes; sin embargo, una vez finalizado el perodo de exposicin es necesario separar los monmeros plsticos del lquido simulante e identificarlos. Entre los monmeros de inters toxicolgico ms comnmente identificados se destacan el cloruro de vinilo, estireno, butadieno, acrilonitrilo y cido tereftlico. El anlisis qumico de estos monmeros implica el uso de la tcnica cromatografa de gases con Head Space, utilizando detectores de FID y cromatografa HPLC ms espectrometra de masa. De todos los procesos de interaccin envase plstico-alimento, la migracin es el que en mayor medida puede influir en la calidad toxicolgica y organolptica del alimento envasado. En la actualidad se est trabajando con simulantes slidos de alimentos, para soslayar la problemtica de trabajar con matrices tan complejas como son los propios alimentos. Cabe destacar que en la actualidad, la mayor parte de los simulantes que han sido utilizados son lquidos. En un estudio llevado a cabo por investigadores (del Laboratorio de Envases Laben Chile, en conjunto con el Departamento de Ciencia y Tecnologa de los Alimentos, ambos pertenecientes a la Universidad de Santiago de Chile) se determin la validez de la utilizacin de un simulante slido, llamado TENAX, en la realizacin de los ensayos de migracin, junto con la determinacin del efecto de las microondas sobre la migracin global de envases plsticos de polipropileno y Sarn (PVC), material utilizado como film estirable de envases de alimentos. En cada caso el material se coloc en contacto con el simulante, calentndolo en horno microondas de 1 000 W durante 2 y 5 min. En tal oportunidad se observ una amplia gama de componentes voltiles, que son liberados tras el calentamiento con microondas y que son retenidos por el TENAX, y que en ningn caso superaron los niveles mximos permitidos por la legislacin internacional, lo cual favorece su utilizacin como simulante slido alternativo.
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BIBLIOGRAFA
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CAPTULO 12

Contaminantes metlicos en alimentos

Iraida Rub Villazn y Grettel Garca Daz

Los elementos metlicos txicos estn presentes naturalmente en el medio ambiente, por tanto el ser humano siempre ha estado expuesto a ellos. La contaminacin de los alimentos (por su procesamiento inadecuado) y del agua fue lo que ocasion las primeras intoxicaciones causadas por metales. El desarrollo cada vez ms intenso de los procesos tecnolgicos industriales en que se emplean metales y los residuales, que se arrojan diariamente hacia los mares, ros y lagos, contribuyen en gran medida a la contaminacin metlica del ambiente y con ello de los alimentos que son despus consumidos por la poblacin humana. Debido a la gran importancia de la inocuidad de los alimentos respecto al contenido de metales, la determinacin de estos ha adquirido mayor relevancia en las ltimas dcadas.

ARSNICO
Los efectos txicos del arsnico (As) y sus compuestos en humanos se conocen desde la antigedad, y por ello, los arsenicales fueron utilizados en la Edad Media como agentes homicidas y suicidas. Segn observaciones formuladas por el Comit Mixto FAO/OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios y Contaminantes Metlicos en su 10mo. Informe, el arsnico se encuentra ampliamente distribuido en la corteza terrestre de forma natural, en los alimentos y bebidas; de manera comn alcanza concentraciones relativamente grandes en productos marinos, muy especial en crustceos y mariscos. Estas concentraciones pueden aumentar como resultado de la contaminacin industrial, la que se debe al empleo de insecticidas arsenicales. La mayora de los alimentos que consume el hombre contiene cantidades inferiores a 0,5 mg/kg de As y raramente exceden de 1 mg/kg de este metal en base hmeda, aunque esto es aplicable especficamente para frutas, vegetales, cereales, carnes y alimentos derivados de la leche. Sin embargo, en los alimentos de origen marino, especialmente los crustceos, se han reportado cantidades de este elemento mucho ms altas. Los compuestos inorgnicos de arsnico son muy txicos cuando se ingieren en grandes cantidades, por lo que la intoxicacin crnica ocurre por este
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metal en el hombre, con su acumulacin en los tejidos, como consecuencia de la exposicin profesional al mencionado elemento y de una contaminacin industrial excesiva de los alimentos y las bebidas. Segn expertos de la Agencia Internacional del Cncer, el arsnico y sus compuestos poseen propiedades cancergenas para el hombre, y de acuerdo con la va de entrada al organismo se ha reportado cncer en piel, pulmn y vas respiratorias. El arsnico es un slido quebradizo, cristalino, de color gris acero con propiedades metaloides, que sublima fcilmente, formando vapores amarillos muy txicos de color oliceo. Pertenece al subgrupo V-B de la tabla peridica, lo que le concede una configuracin electrnica ns2np3, ya que forma compuestos estables con nmeros de oxidacin -3, 0, +3 y +5. Los compuestos arsenicales se clasifican en 3 grupos de acuerdo con sus caractersticas biolgicas y toxicolgicas: inorgnicos (As2O3, AsCl3, NaAsO2, As2O5 y otros), orgnicos (cido arsenlico, cido dimetilarsnico, etc.) y el gas arsina (AsH3). Fuentes de contaminacin. En la naturaleza, el As se encuentra libre y combinado en gran nmero de minerales y casi siempre en forma pentavalente. Los principales minerales que contienen As son: arsenolita (As2O3), rejalgar (As2S2), oropimento (As2S3), arsenopirita (FeAsS) y otros. Se ha reportado que suelos no contaminados contienen niveles de As entre 0,2 y 40 mg/kg, mientras que los tratados con este elemento llegan hasta 550 mg/kg, por ejemplo, el suelo de la ciudad de Antofagasta en Chile contiene niveles naturales de As aproximadamente de 3,2 mg/kg y en la comarca Lagunera de Mxico se han reportado valores entre 3 y 9 mg/kg en la superficie de sus suelos y ms de 20 mg/kg en la profundidad de estos. La mayor parte del As que existe en el agua y en el medio proviene de la actividad humana. Los productos generados por el hombre incluyen arsnico metlico (As y As4), pentxido (As2O5) y trixido de arsnico (As2O3), los arseniatos de calcio y plomo [Ca3(AsO4)2 y Pb3(As04)2], los arsenicales orgnicos, etc. Estas sustancias pasan al medio ambiente durante su empleo como: insecticidas o herbicidas, aleaciones de plomo y cobre, fabricacin de semiconductores, fundiciones de minerales, emisiones debidas a los hornos de las fbricas que usan carbn; los de la produccin de vidrio u otros procesos de combustin, industria farmacutica (en medicina veterinaria y humana) y como preservantes de la madera. Exposicin y lmites. Los alimentos son los principales contribuyentes a la ingestin de As para el hombre y los animales. En los Estados Unidos la dieta promedio contiene entre 0,05 y 0,16 mg/kg de As, aunque alimentos como los mariscos, crustceos y en general los pescados muestran concentraciones mucho mayores. El contenido de arsnico en pescados consumidos en Cuba oscil entre 0,074 y 1,059 mg/kg en estudios realizados entre los aos 1980 y 1983. Los niveles de As en alimentos, con excepcin de los productos del mar, casi siempre estn por debajo de 1 mg/kg. En pescados y mariscos de agua de
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mar se admiten lmites mximos de residuo (LMR) de As hasta 5 mg/kg. Se han informado concentraciones de As entre 0,6 y 58 mg/kg en alimentos preparados a partir de algas marinas. En cacao y derivados los LMR son de 1 mg/kg, y en otros grupos de alimentos como jugos de frutas, cereales, vegetales procesados y conservas crnicas los LMR estn entre 0,1 y 0,5 mg/kg. La ingesta total diaria de As debido al consumo de alimentos depende en gran medida de la cantidad de alimentos marinos en la dieta. Raciones de comidas que contienen productos del mar pueden conducir a la ingestin de varios miligramos de As, fundamentalmente en forma orgnica. En Japn se reporta una ingestin total de arsnico entre 0,07 y 0,17 mg; en los Estados Unidos la ingestin total de este elemento ha disminuido aproximadamente hasta 0,01-0,02 mg/da. Los estudios realizados en grupos poblacionales infantiles y escolares de la capital de Cuba arrojan una ingesta total de As inferior a 0,1 mg/da. La ingesta total de As en el Reino Unido es aproximadamente de 0,1 mg/da, y en estudios realizados en dietas canadienses durante los aos 70-73 se estim que la ingesta total de As estaba entre 0,025 y 0,035 mg/da. Toxicocintica. Los compuestos inorgnicos de As pueden ser absorbidos en el organismo humano a travs de la va respiratoria, el tracto gastrointestinal y la piel. La absorcin a travs del tracto gastrointestinal ocurre inmediatamente despus de la ingestin de alimentos, agua, bebidas o medicamentos que contengan As. Esta absorcin depende tambin de la solubilidad de los compuestos y, adems, si el compuesto ingerido est en solucin o en partculas no disueltas. Una simple comida de pescados o crustceos que contenga elevados niveles de As en forma orgnica, puede provocar la ingestin de varios miligramos de As, la mayora del cual es aparentemente absorbido a travs del tracto gastrointestinal. Coulson y colaboradores reportaron un experimento realizado con sujetos humanos en el que al cuarto da de haber ingerido camarones que contenan aproximadamente 1 mg de As, se recobraba en las heces el 5 %, lo cual indica que la absorcin a travs del tracto gastrointestinal era casi completa. Una vez absorbidos el As o sus compuestos es transportado por la sangre, prcticamente pasa por todos los tejidos y se distribuye entre los distintos compartimentos corporales. El modo de distribucin es importante en relacin con los efectos y depende del tipo de compuesto, la especie y el tiempo transcurrido despus de absorbido. En el organismo humano, el arsnico se concentra en los leucocitos y se acumula fundamentalmente en hgado y en menor medida en dientes, rin, uas, pelo y piel. La eliminacin depende fundamentalmente del tipo de compuesto arsenical, regulando la velocidad y va de excrecin, por ejemplo, los arsenicales pentavalentes se excretan rpidamente a travs de los riones, lo cual se debe a que interactan poco con los tejidos; en cambio, los trivalentes se eliminan con ms lentitud, lo cual es posible en la medida en que el compuesto se libera de la forma combinada en que se encuentra en los tejidos. El perodo de semieliminacin biolgica del As y sus derivados es por lo menos 10 das. La principal va de eliminacin es la orina, por la cual los
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organoarsenicales se excretan sin modificacin alguna y los arsenicales inorgnicos como derivados metilados, aunque el cido arsnico y el As metlico se eliminan unidos a otros compuestos. Las heces, el sudor, pelo y uas son vas de eliminacin en menor proporcin. Efectos biolgicos. Los efectos txicos del As en humanos se conocen desde hace muchos siglos. En su mayora, las toxicosis causadas por arsenicales inorgnicos y orgnicos alifticos se manifiestan con sntomas diferentes a los causados por los compuestos fenilarsnicos. El hombre y los animales inferiores son susceptibles al arsnico inorgnico y orgnico aliftico, pero el envenenamiento es ms frecuente que ocurra en las especies bovinas y felinas. Muchos de los efectos toxicolgicos se creen que estn asociados con la reaccin entre el As y los grupos sulfidrilos celulares de los tejidos que se encuentran en los sistemas oxidativos, especialmente el tracto gastrointestinal, rin, hgado, pulmn y epidermis. El arsnico pentavalente es capaz de provocar desajustes en las fosforilacin oxidativa de las mitocondrias. La toxicidad de los compuestos arsenicales inorgnicos vara con la especie de los animales expuestos, la formulacin del compuesto arsenical (los arsenicales trivalentes son ms txicos que los pentavalentes), la solubilidad de los compuestos, la ruta de exposicin, el grado de absorcin por el tracto gastrointestinal y el grado de biotransformacin y excrecin por la exposicin individual. EL As puede causar envenenamiento agudo y crnico. En caso de envenenamiento agudo y subagudo los sntomas clnicos con frecuencia incluyen: fiebre, diarreas, anorexia, vmitos, incremento de la irritabilidad, erupcin y prdida del pelo. La lesin principal ante una intoxicacin aguda es el dao gastrointestinal profundo que trae como consecuencia vmitos y diarreas a menudo con partculas sanguinolentas. Otros sntomas agudos y signos incluyen calambres musculares, edema facial y anomalas cardacas, estos sntomas pueden ocurrir si el compuesto arsenical est en solucin, pero puede tardarse varias horas si es un slido o es ingerido en una comida. Cuando se toma por va oral la toxicidad del compuesto arsenical depende de su solubilidad. La dosis fatal del xido de arsnico (III) ingerido en humanos se ha reportado que oscila entre 70 y 180 mg. Los efectos subagudos principalmente involucran los sistemas respiratorio, gastrointestinal, cardiovascular, nervioso y el hematopoytico. La exposicin a compuestos arsenicales irritantes, como el xido de arsnico (III) en el aire puede daar de forma aguda las membranas de las mucosas del sistema respiratorio y de la piel expuesta; esto da como resultado una severa irritacin de la mucosa nasal, laringe, bronquios y el canal del odo, as como tambin puede ocasionar conjuntivitis y dermatitis. Dos ejemplos de envenenamiento masivo por compuestos inorgnicos de As sucedieron en Japn y se manisfest un cuadro de sntomas diversos como envenenamiento agudo y subagudo. El primer episodio ocurri cuando 1 200 bebitos fueron envenenados con leche en polvo contaminada con As inorgnico en forma pentavalente, la cual contena entre 15 y 25 mg de As/kg. Se estim
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que los nios ingirieron entre 1,3 y 3,6 mg de As diariamente, segn la edad, y se reportaron 130 muertos. Los sntomas que aparecieron en forma general fueron: fiebre, insomnio y anorexia. El cuadro sanguneo mostr anemia y leucopenia con linfocitosis relativa. La mayora de los sntomas fueron rpidamente reversibles despus de cesar la exposicin y al inicio de la terapia, sin embargo, los cambios observados en los electrocardiogramas demoraron para desaparecer mucho ms que en otros sntomas clnicos. En el otro episodio se examinaron 220 de los 417 pacientes que haban sido envenenados con salsa de soya contaminada con As inorgnico en una concentracin de 100 mg/L. El promedio de ingestin estimado por persona fue de 3 mg de arsnico diariamente durante 2 3 semanas. Los principales hallazgos fueron edema facial, anorexia y sntomas en los canales neurticos a los 10-20 das posteriores a la exposicin. Se hallaron electrocardiogramas anormales en 16 de los 20 pacientes ensayados. La intoxicacin por exposicin a largo plazo se caracteriza por pacientes con alteraciones cutneas, oculares, respiratorias, alteraciones en el sistema nervioso (cefaleas, debilidad muscular, calambres), alteraciones en la circulacin y digestivas (dolor abdominal, nuseas, vmitos). Los efectos crnicos se producen cuando se ingieren alimentos que contienen As orgnico y los cuadros son similares a los que producen los compuestos inorgnicos. Intoxicaciones crnicas con As por ingestin de alimentos contaminados, bebidas y agua se han reportado en muchos pases. Un incidente en el Reino Unido involucr 6 000 personas que ingirieron cerveza contaminada con As. Por otro lado existen reportes de arsenicismo crnico endmico regional causado por agua de beber con altas concentraciones de As en la provincia de Crdova, Argentina. Los sntomas son dermatolgicos (melanosis, queratosis, descamacin) y hematolgicos (anemia, leucopemia). Se observan a menudo en la piel vasodilatacin, irritabilidad, seguido de hiperpigmentacin debido a la exposicin de compuestos arsenicales inorgnicos. Un nmero de pacientes que sufrieron envenenamiento crnico desarrollaron una variedad de trastornos neurolgicos. EL As orgnico raramente afecta el sistema nervioso. Las propiedades carcinognicas del As han sido investigadas en animales con la administracin de As inorgnico por diferentes vas, incluyendo aplicacin dermatolgica, administracin oral, inyeccin subcutnea, pero con resultados negativos. Los estudios epidemiolgicos han indicado una relacin causal entre el cncer de la piel y pulmonar debido a la elevada exposicin al As inorgnico por va medicamentosa, contaminacin del agua de pozo o exposicin ocupacional. Anlisis. Diversos procedimientos analticos existen para determinar el contenido total de As presente en muestras de alimentos, medios biolgicos y ambientales. El primer paso usualmente consiste en una mineralizacin completa, ya sea con la ayuda de cidos inorgnicos fuertes (mineralizacin hmeda) o por carbonizacin total, empleando calentamiento directo (mineralizacin seca).
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Ms tarde, la tcnica ms comnmente utilizada en la actualidad involucra la transformacn del As presente en alimentos o medios biolgicos a gas arsina y luego medir el mismo, ya sea, por mtodos colorimtricos o por espectrofotometra de absorcin atmica (EAA), usando llamas y dispositivos electrnico, mediante la fluorescencia o emisin atmica, as como tambin por medio de la determinacin por activacin neutrnica, el cual puede detectar 0,1 ng. Pasando la arsina, por borohidruro de sodio en un tubo calentado mediante la espectrofotometra de absorcin atmica o de emisin atmica, se logra un lmite de deteccin ms o menos de 0,5 ng, suficientemente bajo para el anlisis de alimentos.

MERCURIO
El mercurio (Hg) es un elemento metlico que junto al cadmio y al zinc se ubica en el grupo II-B de la tabla peridica, puede existir en gran variedad de estados fsicos y qumicos, teniendo las distintas formas de este elemento propiedades txicas intrnsecas y diferentes aplicaciones en la industria, la agricultura y la medicina. El mercurio (II) forma adems de las sales simples como el cloruro, nitrato, sulfato, compuestos organometlicos muy importantes donde el mercurio est unido a 1 2 tomos de carbono. El enlace carbono-mercurio es qumicamente estable debido a la bajsima afinidad del mercurio con el oxgeno, no se rompe por el agua, ni por la accin de cidos o bases dbiles. Desde el punto de vista toxicolgico los compuestos organometlicos ms importantes son los alquilmercurio de cadena corta, en los cuales el Hg est enlazado al tomo de carbono de un grupo metilo, etilo o propilo y el vapor de mercurio elemental. Los alquilmercurios, y especialmente el metilmercurio, son ms txicos que los compuestos inorgnicos del Hg debido a la facilidad que tienen para atravesar las membranas celulares. Fuentes de contaminacin. La principal fuente de contaminacin ambiental con Hg es la desgasificacin natural de la corteza terrestre, la cual aumenta anualmente. La corteza terrestre contiene aproximadamente 50 ng/g, mientras que el suelo, especialmente los suelos orgnicos, pueden contener niveles mucho ms elevados. A nivel industrial la produccin de Hg se lleva a cabo por mtodos pirometalrgicos, donde las rocas minerales son calcinadas en hornos especiales en presencia de oxgeno libre a la temperatura de 800 oC. Las industrias que utilizan el Hg y sus compuestos (productoras de compuestos alcalinos del cloro, equipos elctricos y pinturas) son la principal fuente antropognica de Hg, contaminando la atmsfera, las aguas y los suelos. Otras actividades del hombre no vinculadas directamente con el Hg producen descargas apreciables de este metal en el medio como son el consumo de
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combustibles fsiles, la produccin de acero, cemento, fosfato y la fundicin de metales utilizando minerales de sulfuro. Tambin contribuyen a la contaminacin los desechos producidos por las industrias, los barcos, los residuos domsticos, las actividades agrcolas y sanitarias. Usos, niveles y lmites en alimentos. Los alimentos son los principales contribuidores a la exposicin de Hg en poblaciones no expuestas ocupacional o ambientalmente a este metal. Los compuestos del Hg son usados en el tratamiento de semillas para proteger el grano del ataque de los hongos. El tratamiento supone un nivel residual pequeo en la cosecha, cuando el plaguicida ha sido utilizado de acuerdo con buenas prcticas agrcolas, sin embargo, ha sido responsable de envenenamientos en humanos debido al consumo errneo de semilla tratada como es el caso de los pases de Iraq, Paquistn y Guatemala. La disminucin en el uso de fungicidas que contienen Hg disminuye el potencial txico de este metal. En algunos pases como Suiza ha sido prohibido desde 1966 el tratamiento de semillas con alquilmercurio, obteniendo como resultado la disminucin en los niveles de Hg en un factor de tres. La cantidad de compuestos de Hg que se halla en los productos vegetales es pequesima. En los hongos pueden encontrarse concentraciones mayores de 10 mg/kg, debido a la fuerte afinidad del Hg por las protenas azufradas. En la carne, huevos y productos lcteos se pueden hallar concentraciones de mercurio total que se deben quizs a residuos presentes de compuestos organomercuriales en piensos que contuviesen harina de pescado o cereales, por lo que se reportan concentraciones entre 0,003 y 0,060 mg/kg para la carne; 0,003 a 0,043 mg/kg para los huevos y de 0,003 a 0,022 para la leche. Los LMR en estos productos suelen ser de 0,25 mg/kg de Hg total. En productos pesqueros (los principales contribuidores de Hg y particularmente metilmercurio en la dieta), los LMR se encuentran entre 0,4 y 0,7 mg/kg de Hg total. Se ha planteado que los compuestos mercuriales inorgnicos pueden permanecer relativamente inocuos sobre el lecho del sedimento por mucho tiempo y ocurrir su metilacin por accin de las bacterias, que estn presentes en el plancton, convirtindolo as en metilmercurio o difenilmercurio. Los moluscos y peces tienen gran capacidad de filtracin del agua y por tanto de concentracin de sus sales, al ingerir ellos el plancton, incorporan as los derivados organomercuriales en sus tejidos, aumentando de forma considerable la concentracin del Hg, que puede llegar a ser hasta 3 000 veces superior con respecto al agua en que viven. La acumulacin del Hg depende de varios factores, entre los que se pueden citar especie ictcola, ubicacin geogrfica, la edad y/o peso del pez, entre otros. El contenido de Hg de los peces comestibles es muy variable. Los valores ms elevados de mercurio se observan por lo general en peces que se encuentran en el extremo de una larga cadena alimentaria, como las grandes especies carnvoras: atn y pez espada. En los tnidos el contenido de Hg de la parte comestible
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puede variar entre 0,1 y 2,5 mg/kg. Existen especies de peces, en el arenque por ejemplo o la trucha, en los cuales el contenido de mercurio es al parecer siempre muy bajo, entre 0,1 y 0,2 mg/kg. Algunos autores han propuesto el anlisis del contenido de Hg en los peces como indicadores de contaminacin mercrica ambiental, con esta finalidad investigan la presencia del Hg en lucios (Esox lucius) y otros organismos acuticos, los que le ha permitido dividir la zona de estudio de acuerdo con el contenido en Hg hallado en los peces capturados en las mismas. Expertos de la Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin (FAO) y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) anunciaron en el 2003 la necesidad de aplicar nuevas recomendaciones sobre los niveles mximos de diferentes variedades de frmacos en alimentos, incluyendo cadmio y metilmercurio. Un total de 58 expertos de 17 pases han participaron en el 61 encuentro del Comit de Expertos sobre Aditivos Alimentarios y Contaminantes (JECFA, en sus siglas inglesas), celebrado en Roma del 10 al 19 de junio del 2003. El JECFA, creado en 1956 por la FAO y la OMS, se encarga de asegurar la seguridad alimentaria, una de las funciones que realiza con el Cdex Alimentarius. Toxicocintica. Los compuestos mercuriales pueden ser absorbidos por inhalacin, a travs de la piel y por ingestin. La cantidad absorbida depende de la va de exposicin y de la forma qumica. Las formas inorgnicas del Hg, incluyendo el vapor de Hg elemental, sales mercuriosas y mercricas son pobremente absorbidos por el tracto intestinal. En varias especies, la absorcin intestinal es menor que 2 %. En el hombre, la absorcin del Hg a travs de los alimentos depende del tipo de compuesto. Estudios realizados en ratones han revelado que la absorcin de sales inorgnicas de Hg por conducto de alimentos era del 15 % o menos, en comparacin con el 80 % o ms, en el caso de compuestos fenilmercuriales o metilmercuriales, mientras que en voluntarios a los cuales se le suministr Hg inorgnico marcado se observ que la absorcin por conducto de los alimentos est cerca del 7 %. Sin embargo, en un estudio realizado con voluntarios a los que se les suministr compuestos metilmercuriales radioactivos, la absorcin de la dosis administrada fue de 95 %. La absorcin es rpida y los niveles pico son registrados dentro de las primeras horas. El metilmercurio se acumula de forma considerable en la sangre, de 75 a 90 % en las clulas rojas. La forma qumica y la ruta de entrada tienen importante influencia en la distribucin del mercurio en sangre. La distribucin del metilmercurio es casi uniforme en todo el cuerpo, atravesando la barrera hemocerebral y la placentaria. Estudios en voluntarios humanos indican que el cerebro es el depsito principal de metilmercurio. La transferencia transplacental del metilmercurio tiene lugar rpidamente. Se han encontrado niveles en sangre de nios al nacer y an despus de los 4 meses de nacidos sustancialmente mayores que los correspondientes a la madre. El paso transplacentario de metilmercurio en mujeres ha sido suficiente como para causar algunos casos de intoxicacin prenatal en varios pases.
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La eliminacin del metilmercurio tiene lugar a travs del sistema biliar, el tracto gastrointestinal y las heces, solo una pequea parte es excretada por la orina. Estudios en voluntarios humanos indican que aproximadamente el 90 % de la eliminacin se realiza por va fecal, la va urinaria solo se ve favorecida cuando se administran dosis elevadas. El hombre excreta el Hg inorgnico mucho ms rpido que el orgnico. Efectos biolgicos. El envenenamiento con Hg presenta una variedad de sntomas clnicos, dependiendo de la dosis y duracin de la exposicin, de la estructura qumica y de la sensibilidad individual. El dao causado puede ser reversible o irreversible. A elevadas dosis y perodos largos de exposicin el dao puede ser irreversible. La acumulacin de Hg se produce de forma gradual en el sistema nervioso central, causa procesos degenerativos y daos entre los que se citan dificultades en el sistema motor, disminucin y afectaciones auditivas y del paladar, del campo visual, disturbios sensoriales, ataxia, temblor, pueden ocurrir espasmos musculares peridicos y contracciones espasmdicas permanentes en las manos y los pies. En los casos severos los sntomas pueden ser incapacidad fsica y mental, adems de ceguera, sordera, prdida del lenguaje, postura descerebrada, parlisis espasmdica severa y algunas veces coma y muerte. Se ha demostrado la susceptibilidad extrema del cerebro del feto humano a los efectos neurotxicos del metilmercurio, incluso puede llegar a causar parlisis cerebral en los hijos de madres expuestas. Exmenes practicados a nios los cuales recibieron durante el perodo de lactancia, leche materna que contena niveles de metilmercurio han demostrado retardo en alcanzar los requerimientos establecidos para la edad, especialmente en el desarrollo del lenguaje con dficit neurolgico o sin l. El inters cientfico por los efectos txicos que pueden producir los alimentos contaminados con mercurio se inicia a raz de los incidentes de Minamata, Japn, donde pescadores y sus familias sufrieron intoxicacin que evolucion con daos neurolgicos y provoc la muerte en algunos casos. La enfermedad de Minamata se desarroll debido al consumo de peces y mariscos contaminados con metilmercurio, que fue descargado a la baha por una fbrica local que utiliz cloruro mercrico como catalizador en la manufactura del cloruro de vinilo. Las manifestaciones clnicas observadas durante estos incidentes involucran el sistema nervioso central, llegando a provocar procesos degenerativos y daos entre los que se citan dificultades en el sistema motor, disminucin del campo visual, afectaciones auditivas y del paladar, ataxia, temblores, espasmos musculares peridicos y contracciones espasmdicas permanentes en manos y pies. En los casos severos los sntomas fueron incapacidad fsica y mental, adems de ceguera, sordera, prdida del lenguaje, postura descerebrada, parlisis espasmdica severa y en algunos casos coma y muerte. Anlisis. El mtodo preferido para determinar el mercurio total en las muestras ambientales y biolgicas es la espectrofotometra de absorcin atmica sin
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llama (vapor fro), esta tcnica es muy rpida y bastante sensible con lmites de deteccin que varan entre 0,5 y 5 ng del metal. La activacin de neutrones se utiliza en la actualidad principalmente como mtodo de referencia para verificar la exactitud de los procedimientos de absorcin atmica, la cantidad de muestra que se emplea es muy pequea en orden de los mg, dando lmites de deteccin entre 0,3 y 1 g/kg. Existe adems la cromatografa de gas-lquido, mtodo ms comnmente utilizado para cuantificar el metilmercurio en presencia de otros compuestos mercuriales, y los lmites de deteccin pueden variar entre 1 y 5 g/kg.

CADMIO
El cadmio (Cd) es un elemento metlico raro y se encuentra en el subgrupo II-B de la tabla peridica entre el cinc y el mercurio. Su configuracin electrnica en su ltimo nivel es ns2, por lo que sus iones sencillos son divalentes (+2). Es de color blanco argentino, de ligero tono azulado y es mucho ms maleable que el cinc. Fuentes de contaminacin. Aunque el Cd est ampliamente distribuido en la corteza terrestre, fue descubierto como elemento al principio del siglo pasado, y su uso industrial data desde la dcada de 1940. Como su uso industrial aument durante los ltimos 30 aos, asimismo se increment su nivel en el ambiente. El cinc y Cd en los depsitos de las rocas aparecen principalmente como sulfuros, los cuales son prcticamente insolubles en agua, pero pueden transformarse de forma gradual y convertirse en sulfatos, xidos y carbonatos bajo la influencia de oxgeno en el aire, y cido carbnico en el agua, por ltimo se disuelve o se suspende en el agua; de este modo, un contenido elevado de Cd ha sido encontrado en el agua de los ros que fluyen alrededor de las minas de cinc, as como en el suelo prximo a esos ros. El contenido de Cd en el suelo vara mucho, segn la roca subyacente as como del uso del fertilizante de fosfato que contiene cadmio como impureza. La fuente ms abundante de Cd en la naturaleza es la roca, de la cual el cinc y el cadmio son extrados. El cadmio siempre aparece acompaado por el cinc en las rocas de cinc y en otras rocas de metales no ferrosos como el plomo. La cantidad de cadmio est en el rango de 0,1 a 5 % (usualmente 0,3-1 %) de la cantidad de cinc. El cadmio ha sido empleado solo en pequeas cantidades por largo tiempo como sulfuro, el cual es usado como pigmento amarillo en pinturas. Cuando la electrogalvanoplastia de cadmio fue desarrollada y aplicada de manera comercial, la produccin total de este elemento se increment notablemente. Recientemente la produccin mundial anual se ha incrementado, se estim que la demanda mundial de cadmio en el ao 2000 estara entre 25 000 y 49 500 toneladas.
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Las industrias que usan el Cd lo emiten a la atmsfera desde donde este contamina el agua de lluvia, se deposita en los suelos y en las aguas naturales, de esta manera incrementa la entrada a la cadena alimentaria del hombre y el animal. La cantidad de Cd en el aire es muy baja y lo que se inhala por esta va es insignificante. El agua de beber puede contener pequea cantidad de cadmio y no constituye una fuente importante; de esta manera los alimentos constituyen los principales contribuyentes a la exposicin de cadmio para la poblacin promedio, sin embargo, el tabaco de los cigarrillos contiene una cantidad apreciable, el cual al quemarse pasa al humo y contribuye grandemente a una carga corporal de cadmio superior en los fumadores. Los trabajadores de las industrias donde el cadmio se utiliza o es emitido estn adems expuestos a grandes cantidades de este elemento. Niveles y lmites. La mayora de alimentos tiene una concentracin muy baja de cadmio (entre 0,01 y 0,05 mg/kg). La excepcin son los frutos secos y semillas oleaginosas, los moluscos y las vsceras (especialmente hgado y riones). Segn anlisis de la OMS, la media de consumo de cadmio semanal en una dieta normal por regiones est en un rango de 2,8 a 4,2 g/kg. Debido a que el consumo total de alimentos para los grandes consumidores se estima en el doble de la media, advierte el Comit de Expertos, la ingestin de cadmio total podra estar excediendo los lmites tolerables en algunos individuos. El hgado, riones y algunos productos marinos contienen cantidades de cadmio en el orden de los 10 mg/kg o ms. Los alimentos bsicos como el arroz y trigo pueden adems acumular gran cantidad de Cd cuando se cultiva en suelos irrigados con agua contaminada. Las dietas ricas en hgado, rin, moluscos y crustceos pueden aumentar considerablemente la ingestin de Cd. En resumen, entre 50 y 80 % de la ingestin de Cd se realiza a travs de alimentos de origen vegetal, entre 10 y 30 % por el consumo de carnes y vsceras, y solo entre 5 y 10 % a travs de los productos del mar. Los fumadores estn expuestos a una importante cantidad adicional de Cd; se estima que un cigarrillo contiene entre 1,5 y 2 mg de Cd, de los cuales aproximadamente el 70 % pasa al organismo a travs del humo. Los LMR de Cd en productos pesqueros, crnicos, de frutas y vegetales suelen ser entre 0,05 y 0,1 mg/kg, mientras que para vsceras es de 0,5 mg/kg, y 1 mg/kg especficamente en el caso de riones. Se ha estimado que la ingestin diaria de Cd en un rea no contaminada oscila entre 25 y 60 g para una persona con 70 kg de peso corporal. Esto corrobora los estudios realizados en el Reino Unido (10 y 30 g/da) y en los Estados Unidos (26-61 g/da). Los estudios realizados recientemente indican que los estimados de las ingestiones diarias de Cd son inferiores. Una ingestin promedia diaria de 10 g de Cd fue encontrada en Suecia, y un valor muy similar fue obtenido en Blgica (15 g /da). En un estudio realizado en Canad se encontraron valores muy parecidos en adultos (13,8 g/da). Un valor similar fue encontrado en el Reino
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Unido (15 g /da). En los EE.UU. (32 g/da), Austria (67 g/da), Holanda (35 g/da) y Japn (40 g/da), se han informado ingestiones superiores. En todos los casos estas cifras estn por debajo de la ingestin semanal tolerable de 7 g/ kg de peso corporal para adultos, establecida provisionalmente para este elemento por el Comit Mixto FAO/OMS de Experto en Aditivos Alimentarios en la 41 Reunin efectuada en Gnova en febrero de 1993. Toxicocintica. Las principales caractersticas del metabolismo del Cd son: La ausencia de mecanismos de control homeosttico. Su retencin en el cuerpo con larga vida media biolgica de tal manera, que la acumulacin activa de este metal prevalece casi toda la vida. Su acumulacin en los tejidos blandos (principalmente en riones e hgado). Su interaccin con otros nutrientes esenciales fundamentalmente con metales divalentes (tanto en el nivel absortivo como en los tejidos). En el nacimiento la cantidad total de Cd en el organismo humano es menor que 1 g, pero esto gradualmente se incrementa con la edad hasta alcanzar en el adulto el nivel de 15 y 30 g. La nica proteccin que tienen los mamferos contra el Cd y otros metales pesados es a travs de la sntesis de la metalotionena, protena intracelular que se enlaza con los metales. Pero esta protena es adems responsable de la acumulacin selectiva del Cd en los riones y puede de forma indirecta ser causa de su elevado efecto nefrotxico. Las rutas principales de entrada de Cd en el organismo son el tracto gastrointestinal y los pulmones. De manera virtual, la cantidad total de cadmio presente en el cuerpo penetra a travs de estos 2 rganos. La absorcin gastrointestinal de Cd es muy lenta, casi siempre se interpreta entre 3 y 8 % de la ingestin diettica. Los experimentos en animales indican que el Cd es absorbido por un proceso de difusin pasiva en el duodeno, yeyuno e leon; adems el Cd se encuentra en las paredes del intestino y se piensa que las clulas epiteliales ejercen efecto regulatorio sobre su absorcin. La enteropata observada en pacientes con la enfermedad Itai-Itai y adems en experimentos con animales, sugiere que cuando la concentracin de Cd en las clulas de la mucosa alcanza un nivel crtico, los daos estructurales se producen con transporte de Cd significativamente alterado. De esta forma, aunque en dosis baja de Cd la absorcin es regulada, en dosis superiores esto no ocurre y una cantidad sustancial de Cd puede ser absorbida. Otros constituyentes dietticos como protena, calcio, hierro y cinc tambin influyen en la absorcin gastrointestinal de este elemento. La sangre es la responsable de la distribucin de Cd en el cuerpo. El nivel de Cd en la sangre en la exposicin normal y no industrial del hombre es usualmente menor que 1 g/100 mL. Los experimentos en animales sugieren que el Cd se transporta en plasma enlazado a una protena de bajo peso molecular. En el interior de las clulas
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sanguneas el Cd est unido con la hemoglobina y otras protenas de bajo peso molecular raramente separables de la hemoglobina. El Cd presente en las clulas de la sangre no es intercambiable con el Cd libre en el plasma, pero los riones tienen una capacidad nica para extraer este elemento unido a la sangre. Despus de la absorcin el Cd es transportado en la sangre y depositado en diferentes tejidos del cuerpo, pero este se concentra principalmente en el hgado y riones. Estos 2 rganos representan el 50 % de la carga corporal total. Otros rganos como los pulmones, pncreas, intestino, testculos, cerebro, bazo, corazn, msculo y tejido adiposo tambin acumulan cantidades significativas de Cd. El Cd es excretado en muy pequeas cantidades, la principal ruta de eliminacin es la orina. En el hombre normal la proporcin de excrecin de este metal es muy baja (menos de 5 g/da). Normalmente la excrecin urinaria de cadmio es proporcional a todo el cuerpo y de esta forma se incrementa con la edad hasta 50-60 aos; sin embargo, esta relacin no ocurre cuando los daos renales se presentan debido a una carga muy elevada de cadmio en los riones, en tal situacin, la eliminacin de cadmio se incrementa dramticamente y puede alcanzar valores por encima de varios cientos de microgramos por da. Basado en modelos matemticos, segn datos de la ingestin y de la concentracin en rganos con la edad, la vida media ha sido estimada entre 5 y 10 aos en el hgado y entre 16 y 33 aos en los riones. En los riones de personas el gradiente de Cd se presenta con una concentracin en la corteza alrededor de 1,5 veces superior ms que en todo el rgano, y en la corteza externa es 2 veces superior que en la mdula. La concentracin en el hgado es casi siempre muy pobre, pero debido a su gran tamao este rgano contiene una fraccin significativa comparada con todo el cuerpo. La metalotionena acta como una defensa contra el ion de cadmio txico. Adems se ha propuesto que la metalotionena tiene un papel en el transporte de cadmio desde el hgado a los riones. El complejo cadmio-metalotionena es probablemente separado del hgado y transportado a los riones, donde se filtra libremente a travs del glomrulo debido a su pequeo tamao y la reabsorcin subsecuente por las clulas tubulares. Este mecanismo contribuye probablemente a la concentracin inusualmente elevada de Cd presente en la corteza renal. El rin es un rgano crtico para el almacenamiento del cadmio y la toxicidad en el hombre. Se ha postulado que cuando la concentracin de cadmio en la corteza renal excede el nivel crtico de 200 mg/g de peso fresco hmedo, se presentan daos tubulares renales caracterizados por la presencia de proteinuria (protenas de bajo peso molecular). Efectos biolgicos. La ingestin de Cd puede causar problemas gastrointestinales agudos. Tales hechos se observaron en el siglo pasado debido al uso de Cd en utensilios de cocina y el almacenamiento de sustancias cidas en cermicas que contienen cadmio; sin embargo, intoxicaciones recientes han sido reportadas como resultado de la contaminacin del agua con Cd proveniente de las soldaduras en pipas de agua, tapas o refrigerantes inventados.
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Los principales sntomas son: nuseas, vmitos, diarreas, calambres abdominales, jaqueca y salivacin. En el caso de intoxicaciones fatales estos sntomas son seguidos por shock debido a la disminucin del fluido, y la muerte ocurre dentro de 24 h, o por fallas cardiorrespiratorias y renal agudas, ocurriendo la muerte en un perodo de 7 a 14 das. El rin es el rgano que muestra el primer efecto adverso a la exposicin excesiva al Cd, a travs de la inhalacin o ingestin. El catin se acumula en la corteza renal donde produce cambios morfolgicos y funcionales. Las lesiones en los huesos es una manifestacin de la exposicin crnica al Cd que se caracteriza por osteomalacia, osteoporosis y fracturas espontneas. Las personas que presenten esta lesin padecen de dolores en la espalda y en las extremidades, adems dificultades al caminar. Se ha sugerido que los cambios en los huesos son secundarios a la disfuncin renal tubular (incremento urinario de calcio y fsforo), la cual est asociada posiblemente con el metabolismo alterado de la vitamina D. El papel mostrado por el Cd en el desarrollo de enfermedades cardiovasculares no est esclarecido, sin embargo, algunos estudios sugieren que el catin presenta accin hipertensiva breve. En 1976 la Agencia Internacional de Investigaciones del Cncer (IARC) constituy un grupo de trabajo para evaluar los riesgos carcinognicos del cadmio para el hombre, y llegaron a la conclusin de que: los estudios indican que la exposicin ocupacional al cadmio en alguna forma (posiblemente xido) incrementa el riesgo de cncer prosttico en el hombre. El Cd con afinidad a las bases modifica el metabolismo de cidos nucleicos por reaccin directa y actuando sobre su sntesis. Algunos factores adems del Cd, pueden ser responsables de la elevada frecuencia de aberraciones de cromosomas en algunos de estos estudios. En el 2003 investigadores de Estados Unidos hallaron nuevas evidencias de los efectos estrognicos del cadmio sobre el organismo de ratas y su descendencia, en el caso de exposicin intrauterina. Aunque no hay estudios detallados de las dosis, los investigadores destacaron la existencia de una fuerte respuesta estrognica en los animales con dosis consideradas bajas: entre 5 y 10 g semanales por kilogramo de peso. La cifra es preocupante porque coincide con el lmite considerado tolerable en humanos (7 g/kg de peso corporal). El estudio adems aadi pruebas sobre un mecanismo que puede estar relacionado con la aparicin de cncer, as como con la disrupcin endocrina en los seres expuestos, lo que implica la feminizacin de los organismos y compromete el equilibrio demogrfico (el hallazgo de peces transexuales en ros de Europa es una seal de que los contaminantes estrgenicos, a los que ahora parece que se suma el cadmio, estn afectando el ecosistema). Uno de los problemas para valorar los riesgos es que la absorcin y acumulacin del cadmio vara mucho entre diferentes personas, y depende de factores como el sexo, la edad o la dieta. Se sabe, por ejemplo, que una dieta escasa en minerales bsicos como calcio, hierro, cinc y cobre, incrementa la absorcin de
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cadmio. Al contrario, el incremento de estos minerales bsicos reduce sus niveles de absorcin y retencin. Otro problema es que el cadmio tiene una vida media muy prolongada y se acumula durante largo tiempo en el organismo hasta provocar trastornos observables. No menos importante, tampoco se han determinado los biomarcadores ms adecuados para evaluar en el ser humano la relacin entre el nivel de cadmio y el trastorno fsico a largo plazo -hay estudios epidemiolgicos, pero falta consistencia entre ellos, segn indica el informe del Comit de Expertos FAO/OMS. A falta de mejores datos, lo que queda es la va de la prevencin: evaluar el contenido de cadmio en los alimentos, en las dietas, as como cuantificar y controlar el nivel de metales pesados en el ecosistema y su desplazamiento en la cadena trfica. Anlisis. Diversidad de metodologas analticas de aplicabilidad y complejidad variada se emplean en la determinacin de matrices ambientales orgnicas e inorgnicas: espectrofotometra de absorcin atmica, anlisis de activacin de neutrones, espectrometra de emisin atmica con plasma acoplado inductivamente, anlisis de fluorescencia de rayos X, mtodos electroqumicos, espectrometra de masa por dilucin isotpica, espectrometra de masa con chispa elctrica, mtodo colorimtrico usando ditizona y mtodo cromatogrfico. En la actualidad es posible bajo algunas circunstancias determinar concentraciones alrededor de 0,1 g/L en orina y en sangre, y entre 1-10 g/kg en muestras de alimentos y tejidos. El mtodo analtico ms utilizado es la espectrofotometra de absorcin atmica (EAA), cuyos lmites de deteccin varan desde 0,008 hasta 1 p.p.b. La EAA es el mtodo ms comnmente usado en la actualidad para la determinacin de cadmio, debido a que el procedimiento es relativamente simple y rpido, los lmites de deteccin son suficientes para la mayora de las muestras ambientales y los materiales biolgicos. Otros mtodos utilizados son anlisis de activacin de neutrones (LD=1 ppb) y el que utiliza fluorescencia de rayos X (LD desde 5 hasta 50 ppm). Estos mtodos son caros, ya que las muestras tienen que ser irradiadas en un reactor, como en el caso de la activacin de neutrones. Se emplean como mtodos de referencia para ensayos de exactitud de otros mtodos. La espectrometra de masa con chispa elctrica posee un lmite de deteccin de 0,3 ng, mientras que el mtodo de dilucin isotpica alcanza lmites de 10 ppb, estos mtodos son excesivamente caros y se utilizan principalmente para control de calidad de otros mtodos y para materiales de referencias certificados.

PLOMO
El plomo (Pb) pertenece al subgrupo IV-B de la tabla peridica. Tiene 4 istopos naturales (208, 206, 207 y 204 por orden de abundancia), pero las proporciones isotpicas en minerales de distinto origen son a veces muy distintas. Su
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configuracin electrnica en su ltimo nivel es ns2np2, pero aunque posee 4e- en su rbita de valencia, solo 2 se ionizan fcilmente, por lo que su estado habitual de oxidacin en los compuestos inorgnicos es +2, y no +4. El plomo es un elemento que existe en forma natural en la corteza terrestre de la cual ha sido extrado por el hombre desde pocas remotas para aprovechar su maleabilidad y ductibilidad en la fabricacin de objetos mltiples desde tuberas para la conduccin de agua, monedas, productos de cermica vidriada, hasta objetos de arte. El plomo es un elemento conocido y utilizado desde la antigedad y su comportamiento como txico ha sido ampliamente estudiado. Se han constatado sus efectos nocivos para las funciones renal y heptica y los sistemas hematopoyticos, nervioso central y perifrico. La amplia utilizacin del plomo y sus derivados en las actividades industriales le ha convertido en un contaminante muy importante en el mbito de la prevencin de enfermedades profesionales. Fuentes de contaminacin. As como otros metales, el Pb en su forma natural tiene poca importancia como fuente de contaminacin del ambiente. Con el crecimiento de las actividades industriales las fuentes contaminantes del medio con este y otros metales han aumentado de forma considerable y de una manera importante. Lo ms frecuente es que la contaminacin del medio con plomo sea producido por actividades humanas. Las actividades de la minera del Pb son la fuente de exposicin ms evidente, an cuando las concentraciones ms elevadas estn bajo la forma de sulfuros de plomo, los cuales son insolubles en agua y presentan una absorcin digestiva moderada. El Pb est presente en muy diversas actividades industriales, ya sea como componentes de la materia prima o como parte de los subproductos del proceso. Las industrias que presentan mayor riesgo a la presencia del Pb son: Alfarera. Antidetonantes para gasolina. Bateras (acumuladores). Cobertura de cables. Construccin (caeras). Imprenta. Municiones. Pigmento para pinturas. Productos de acero. Elementos para proteccin contra radiaciones. Tuberas de plomo. El uso de tuberas que contienen Pb y de utensilios con alto contenido de este para preservar y servir los alimentos, podan aadir cantidades adicionales de este metal a los mismos.
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Fuentes muy importantes de contaminacin de alimentos con Pb son los utensilios metlicos de cocina que tengan soldadura de Pb y los utensilios de cermica y barro usados para servir y almacenar alimentos, agua y bebidas, pero la fuente fundamental es el envase de hojalata con costura lateral soldada (98 % de Pb) que se emplea para la conservacin de alimentos. Las pinturas usadas hoy en los interiores de las casas, los envases para los alimentos enlatados y la gasolina, prcticamente ya no contienen plomo; no obstante, los cientficos afirman que por lo menos de 3 a 4 millones de nios menores de 6 aos tienen demasiado plomo en sus cuerpos. Para reducir el riesgo del envenenamiento causado por el plomo de algunos servicios de mesa hechos de cermica, los expertos aconsejan: Abstenerse de almacenar o servir alimentos en platos y tazas de cermica en cuya manufactura se haya aadido plomo; en su lugar deben usarse recipientes de plstico o de vidrio, especialmente cuando se almacenan jugos de frutas, salsas condimentadas, vinos o vinagres que puedan aumentar la cantidad de plomo disuelto por los cidos naturales de las frutas. No comprar alimentos importados empacados en latas soldadas con plomo. Cuidarse de comprar piezas de cermica comunes en otros pases, usarlas solo como adornos y no almacenar alimentos en ellas porque pueden contener cantidades excesivas de plomo. No consumir bebidas en copas de cristal emplomado (especialmente si las mujeres embarazadas), ni almacenar bebidas en objetos de cristal emplomado, ni alimentar a los bebs de una botella de cristal emplomado. No permitir que los nios lleven a sus bocas escamas de pintura desprendidas de las paredes. Niveles y lmites. La Administracin de Drogas y Alimentos (FDA) trabaja diligentemente regulando la presencia de plomo en los pesticidas, los envases de alimentos y toda clase de recipientes manufacturados con el metal. A su vez, otras agencias federales inspeccionan el aire, el agua, la tierra, las pinturas de los juguetes de los nios, y hasta los lugares de trabajo; para lograrlo, la FDA ha fijado lmites especficos relacionados con el nivel de plomo que es permitido filtrarse de piezas de cermica y cristalera. La mayora de los productos cermicos vendidos en los Estados Unidos son seguros y libres de plomo, debido a las regulaciones impuestas a los manufactureros. Con frecuencia algunas piezas de cermica de otros pases contienen niveles de plomo demasiado altos y, por lo tanto, no deben ser usados con alimentos sino como adornos. Recientemente la FDA aprob una droga llamada Chemet que rebaja los niveles de plomo en la sangre de los nios. La exposicin al plomo a travs del agua es mnima debido a que forma esencialmente compuestos insolubles de tipo carbonatos y sulfatos; adems, el agua potable tiende a tener menor contenido de Pb (el LMR establecido internacionalmente es de 50 g/L) que el agua no tratada de la fuente, debido a que el Pb es parcialmente removido por las plantas de tratamiento de agua
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potable. Cuando se detectan niveles elevados de Pb en la red y en los estanques de almacenamiento, son resultado de la corrosin sobre estas estructuras cuando han sido elaboradas con Pb. El suelo es contaminado principalmente por depsito de partculas del aire y por aguas contaminadas por actividades industriales. Los suelos pueden contener cantidades variables de Pb, en los no cultivados el Pb est presente en concentraciones de 5 a 25 mg/kg, lo que indica una presencia permanente en el ambiente; en los suelos cultivados se han encontrado concentraciones de hasta 360 mg/kg. El hecho de que existan carreteras con gran circulacin de vehculos e industrias cercanas, eleva estos valores significativamente. La presencia de plomo en el agua y el suelo influye obviamente en la contaminacin de los alimentos. Los niveles de Pb en los alimentos varan segn el tipo de producto y si son conservados en envases de hojalata o no. Se han encontrado concentraciones de plomo en alimentos enlatados desde 0,1 a 8 mg/kg. Los LMR en alimentos varan desde 0,1 mg/kg en frmulas lcteas para nios y aceites y grasas comestibles, 0,2 mg/kg en jugos y nctares de frutas, 0,3 mg/kg en leches enlatadas y pur de frutas, 0,5 mg/kg en tomate y otros vegetales, mientras que en salsas y pastas de tomate as como la sal comn se admiten 2 mg/kg. En conservas de pescado y crustceos suele aceptarse 1 mg/kg, mientras que en moluscos se admiten hasta 5 mg/kg. Los valores medios de ingestin total de plomo al da en la racin de alimentos varan de acuerdo con los contenidos en los alimentos y los hbitos alimentarios. Se han informado valores desde 17,8 hasta 518 g/da. Un promedio general estimado es del orden de 200 g/da para adultos. La ingestin semanal tolerable (IST) aceptada es de 25 g/kg de peso corporal. La disminucin de la ingestin de plomo puede favorecerse al reducir el aporte del metal a travs de los alimentos y el agua de beber, para lo cual se debe: Laquear la costura de los envases metlicos interiormente. Utilizar soldaduras libres de Pb (soldadura elctrica) o bajas en Pb (buena limpieza de la costura). No emplear recipientes que contengan Pb para la conservacin de alimentos. Controlar el tiempo de almacenamiento y tener en cuenta la durabilidad del producto conservado en envase metlico para su distribucin y consumo. Reducir la contaminacin con Pb del agua de beber, a travs del empleo de tuberas adecuadas y del control de la contaminacin ambiental. Toxicocintica. El Pb y sus compuestos penetran en el organismo por inhalacin e ingestin. La absorcin por la piel tiene importancia solo en el caso de los compuestos orgnicos. La va de ingreso, el tamao de la partcula y el tipo de compuesto de plomo (orgnico o inorgnico) determinan la concentracin y la posibilidad de difusin del plomo hacia el organismo. Entre 5 y 10 % del Pb ingerido se absorbe por el tracto gastrointestinal. Factores dietticos como la baja ingestin de calcio, vitamina D, hierro y protenas incrementan la absorcin de Pb.
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A nivel intestinal el Pb utiliza los mismos mecanismos de absorcin del calcio, por tanto las cantidades de calcio en la dieta influyen en la absorcin del Pb en el sentido de que, dietas ricas en calcio restringen la absorcin intestinal del plomo y viceversa. El Pb absorbido es transportado por la sangre, se establece un rpido equilibrio entre eritrocitos y plasma, llegando a diversos rganos y tejidos. Debido a que el Pb se distribuye rpidamente hacia otros tejidos, el aumento en la concentracin sangunea indica una exposicin reciente, por lo tanto, en los casos de exposiciones intermitentes y variables el dato sobre la concentracin de Pb en sangre tiene un uso limitado. A partir de autopsias se sabe que el Pb tiene una fuerte tendencia a acumularse en los huesos, los cuales reflejan exposicin a largo plazo, representando aproximadamente 90 % del contenido total corporal del metal, estimado entre 100-400 mg por algunos autores. Este Pb acumulado mantiene los niveles sanguneos elevados, an despus de cesar la exposicin. Una fraccin del Pb del plasma se difunde hacia dos tipos de tejitos: los duros (huesos, pelo, uas y dientes) y los tejidos blandos (mdula sea, sistema nervioso, riones, hgado). Se considera que solo el Pb presente en los tejidos blandos es directamente txico. El Pb en los tejidos duros permanece estrechamente fijado y solo es txico cuando la acumulacin sirve como fuente del metal para los tejidos blandos. El tiempo de vida media del Pb resulta difcil de determinar, sin embargo, no hay duda de que se necesitan alrededor de 5 aos para eliminar la mitad de la carga corporal de Pb. Luego de ser absorbido el Pb pasa principalmente a la sangre y los huesos. La porcin de este que no es absorbido pasa a travs del tracto gastrointestinal y es eliminado por las heces. El Pb que penetra en el flujo sanguneo, pero que no es retenido, es excretado por el sistema renal; la va fundamental de excrecin en el organismo humano es la orina (75-80 %), adems se excreta por las heces (aproximadamente 15 %) y por cabellos, uas y sudor (8 %), tambin se excreta por la leche. El proceso de eliminacin renal del plomo es esencialmente una filtracin glomerular. Al parecer el organismo alcanza un equilibrio entre la absorcin y la excrecin, en el que la cantidad de Pb eliminado se corresponde con la cantidad absorbida. Los lactantes y nios de edad preescolar constituyen un grupo muy expuesto en lo que concierne a la absorcin y toxicidad del Pb; comparativamente con los adultos, los factores influyentes pueden ser: Metabolismo ms activo. Crecimiento corporal ms rpido. Composicin corporal diferente. Inmadurez del sistema nervioso y del sistema inmunitario. Desarrollo incompleto de ciertos rganos y tejidos (como los huesos y el cerebro).
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Los lactantes absorben entre 40 y 53 % del Pb ingerido y retienen el 30 % aproximadamente. En los nios el sistema esqueltico crece de manera exponencial; en la primera infancia el esqueleto aumenta 40 veces su masa original y durante este perodo tiene mayor capacidad para acumular Pb. Los daos causados por el plomo en los nios son permanentes. El metal se acumula en los huesos lentamente, impidiendo el crecimiento y deteriorando el cerebro. El envenenamiento debe ser diagnosticado por un mdico, pero los padres pueden tambin darse cuenta de ciertas seales indicativas como: sueo intranquilo, comportamiento errtico y dificultades en las matemticas, la lectura, la escritura y otras fases del aprendizaje en la escuela. Si el nivel del plomo en la sangre es suficientemente alto, el nio puede morir. Efectos biolgicos. El dao en el ser humano se centra en varios sistemas, los ms importantes son: el nervioso, hematopoytico y renal. En general la toxicidad del Pb se debe a: Su competencia con iones esenciales, como el calcio y el cinc en sus sitios de insercin. Su afinidad por los grupos sulfhidrilos de las proteinas, lo cual trae alteraciones de la formacin y funcin de ellas y de diferentes enzimas que poseen dichos grupos. Uno de los primeros y ms importantes efectos del Pb en el organismo humano es la alteracin de la sntesis del grupo HEMO. Esta alteracin se caracteriza por concentraciones anormales de sus precursores en la sangre y la orina, y desde el punto de vista clnico por anemia y palidez facial (fascies saturnina), especialmente peribucal. La inhibicin se produce principalmente sobre las enzimas cido amino levulnico dehidratasa (AAL-D), encargadas de transformar el AAL en porfobilingeno, la coproporfiringeno oxidasa, que transforma la coproporfirina en protoporfirina, y tambin la ferroquelatasa que transforma la transferina en ferritina. El hierro transportado a la membrana de la mitocondria forma un complejo que se utiliza en la biosntesis del HEMO. Como resultado ocurre alteracin en la produccin de la Hb, y se acumulan AAL, coproporfirina III y protoporfirina IX lo cual provoca anemia normoctica hipocrmica aguda. En el laboratorio la combinacin de actividad disminuida de AAL-D, aumento del AAL, coproporfirina III y de la protoporfirina IX en sangre y orina son indicadores de intoxicacin por Pb. Los efectos txicos ms graves son el resultado de la accin del Pb sobre el encfalo y sistema nervioso perifrico. Los efectos del Pb sobre el encfalo estn ms relacionados con el saturnismo infantil que con la intoxicacin en adultos. Actualmente existe intensa preocupacin por evaluar en los nios el dao neuropsicolgico producido por concentraciones bajas denominadas subtxicas, de Pb en el organismo.
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Se ha observado en animales de laboratorio, que haban ingerido acetato de plomo, una disminucin del 50 % en la velocidad de la conduccin de las fibras motoras del nervio citico. Esta se asocia con la mielinizacin (acumulacin de la mielina en la reparacin de los nervios) de la fibra nerviosa, por lo que se concluy que el Pb tiene un efecto txico en el metabolismo de las clulas de Schawnn (clulas que rodean a los axones nerviosos perifricos), para formarlas en una vaina, tambin tiene efecto sobre las clulas capsulares. En una exposicin prolongada al Pb pueden observarse efectos importantes sobre el sistema nervioso central, causando cuadro de encefalopata saturnina, cuyos sntomas varan desde cambios psicolgicos o conductuales sutiles hasta alteraciones neurolgicas graves. En nios pequeos, que han tenido intoxicacin aguda por Pb, la capacidad de aprendizaje est seriamente disminuida por incoordinacin motriz o incapacidad para concentrarse. Tambin se plantea la posibilidad de que una baja exposicin al Pb en nios de edad preescolar afecta el desarrollo cognoscitivo y el rendimiento escolar, que implica problemas en el lenguaje. El Pb inorgnico produce efectos adversos en el sistema nervioso perifrico, tanto en la estructura como en la actividad colinrgica del nervio. El hecho ms caracterstico es el dao de los nervios motores, que se expresa clnicamente con la parlisis saturnina, cuya manifestacin principal es la debilidad de los msculos extensores (falta de fuerza en las manos). Los efectos del Pb sobre el rin han sido estudiados con detenimiento y se observan lesin tubular renal caracterizada por aminoaciduria generalizada, hipofosfatemia y glucosuria, puede llegar a fibrosis peritubular, por lo que estos signos denominados como nefropata crnica pueden culminar en insuficiencia renal. No se sabe con certeza si los efectos vasculares del Pb en el hombre son el resultado de una accin directa sobre los vasos sanguneos, o si son consecutivos a los efectos renales a largo plazo, donde se han observado cambios aterosclerticos en el rin. La IARC plantea evidencia de carcinognesis inducida por el Pb en roedores, pero desde el punto de vista epidemiolgico no est suficientemente establecida su carcinogenicidad para el hombre. Anlisis. Los mtodos ms antiguos y conocidos de amplio uso son los que se basan en la formacin de un complejo rojo de Pb con la ditizona, este se mide mediante el espectrofotmetro. El mtodo de determinacin de Pb que se ha ganado rpida aceptacin en los aos recientes es la espectroscopia de absorcin atmica. En la espectroscopia clsica de absorcin atmica la fuente de calor es una llama dentro de la cual se aspira la solucin muestra, pero, ms recientemente se ha elaborado un recipiente donde la muestra se calienta elctricamente, denominndose esta variante espectroscopia de absorcin atmica sin llama; tiene la ventaja de que se reduce el volumen de muestra a microlitros sin prdida de sensibilidad. Los lmites de deteccin de estos mtodos pueden alcanzar valores hasta 0,005 ng.
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Existen adems otros mtodos analticos en los cuales no es necesario destruccin de la materia orgnica presente en las muestras: activacin neutrnica y fluorescencia de rayos X. Estos mtodos tienen la desventaja de que la determinacin de Pb tiene costo elevado, sin embargo, posee la ventaja de que se pueden determinar varios elementos de manera simultnea.

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