SISTEMAS ANTIOXIDANTES

Para defenderse y controlar la accin de las sustancias reactivas de oxigeno (ROS), los seres vivos han desarrollado sistemas de defensa antioxidante. La vitamina E es el ms importante, ya que acta en las membranas celulares interrumpiendo la reaccin en cadena de la peroxidacin de los cidos grasos poliinsaturados. En condiciones normales existe un equilibrio o balance entre la formacin de ROS y los mecanismos de defensa antioxidante. El desequilibrio entre ellas conduce a lesiones por estrs oxidativo. Los principales constituyentes del sistema antioxidante en estos organismos se puede dividir en: A. Sistema enzimtico: donde las Superxido Dismutasas (SODs) eliminan los aniones superxido, convirtindolos en perxido de hidrogeno y oxigeno molecular, la Catalasa (CAT) que elimina el perxido de hidrogenbo producido y el sistema Glutatin-Glutatin Peroxidasa (GSH-GP) que elimina tanto perxidos de hidrogeno como los perxidos organicos. B. Sistema No Enzimatico: Sustancias que protegen de la accin toxica de los radicales libres de oxigeno (RLO), llamadas antioxidantes, que pueden ser molculas como las vitaminas C, A, E y K, selenio, compuestos con grupos tiol como la cistena, cisteamina o glutatin, metionina, ubiquinona, cido rico, glucosa y los aminocidos en general. Estos antioxidantes pueden ejercer su accin en distintas fases del proceso oxidativo. La vitamina E interfiere en los procesos iniciales de la peroxidacin lipdica, otras pueden degradar los perxidos de hidrogeno sin producir RLO (tioles) o ser secuestradores de RLO (Vit A, E). En otra clasificacin se distinguen los sistemas de defensa antioxidante primarios o preventivos y los sistemas de defensa antioxidante secundarios o rompedores de cadena. Las defensas primarias interactan con los radicales libres generados directamente del O 2 y, de esta manera, disminuye la velocidad de inicio de las reacciones de los radicales libres. Por su parte, las defensas secundarias atrapan los radicales propagadores, deteniendo su efecto nocivo en las etapas iniciales.

A. SISTEMAS DE DEFENSA ANTIOXIDANTE PRIMARIOS

1. ENZIMAS: Existen diversas enzimas cuya funcin primaria es disminuir las concentraciones intracelulares e intercelulares de las especies reactivas de oxgeno. Entre ellas se encuentran las superxido dismutasas, la catalasa, la glutatin peroxidasa, la glutatin reductasa, la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y otras. Las superoxido dismutasas Son una familia de metaloenzimas que catalizan la dismutacin del O2- para producir H2O2 y O2. La forma isoenzimtica prevalente de las SOD es la CuZnSOD, una protena dimrica de 32 kD que se ha encontrado en casi todas las clulas eucariticas. El tomo de cobre es esencial para la actividad cataltica de la enzima, mientras que el tomo de zinc le proporciona estabilidad. Esta protena ha sido encontrada mayoritariamente en el citosol de las clulas eucariticas, aunque tambin puede estar presente en el ncleo. El CuZnSOD se ha encontrado en los fluidos extracelulares. Adems se ha identificado la MnSOD esta localizada preferentemente en la mitocondria, protegiendo a este orgnulo de los O2producidos durante el transporte electrnico mitocondrial. En algunas especies animales se ha encontrado una MnSOD en el citosol de las clulas hepticas. La actividad de las SOD vara entre los tejidos. Se ha encontrado los niveles ms altos en hgado, glndulas suprarrenales, rin y bazo. Estas enzimas se regulan en funcin de la oxigenacin de los tejidos en los que se encuentran, la cual afecta a la sntesis de la protena. La induccin de los SOD tambin ocurre cuando hay sobreproduccin de O2-. Un exceso de SOD no acompaado por la actividad de la catalasa puede ser perjudicial para el organismo, puesto que el perxido de hidrogeno se acumula. El gen humano que codifica la CuZnSOD se encuentra en el cromosoma 21; por lo tanto en el sndrome Down, con trisoma en este cromosoma, presenta una sobreproduccin de perxido de hidrogeno, a partir del cual se puede formar el radical hidroxilo que resulta extremadamente nocivo. Catalasa Es una hemoptrotena que cataliza la reduccin del H2O2 a H2O y O2. Es fundamental en condiciones de elevadas concentraciones de perxidos de hidrogeno. Tiene un peso molecular de 240 kD y est constituida por cuatro

subunidades, cada una de las cuales contiene un grupo hemo que forma parte de su centro activo. La mayora de las clulas contienen catalasa, aunque en animales sta abunda en el hgado, el rin y en los eritrocitos. En cuanto a su localizacin subcelular, la actividad catalasa de las clulas eucariticas se localiza fundamentalmente en los peroxisomas, orgnulos que, por otra parte, contienen muchas de las enzimas generadoras de H2O2 de las clulas aerobias. Glutatin peroxidasa dependiente de selenio Pertenece a la familia de las peroxidasas que cataliza la reduccin de H2O2 y de hidroperxidos orgnicos empleando el glutatin (GSH) como cosustrato, el cual se oxida pasando a glutatin oxidasa (GSSG). A diferencia de la catalasa, la SeGSHpx tiene una elevada afinidad por su sustrato pero baja actividad cataltica. Esta enzima se localiza en el citosol de las eucariotas, aunque tambin puede encontrarse en las mitocondrias. En cuanto a la distribucin en tejidos humanos, hay una gran heterogeneidad, aunque la actividad ms alta se encuentra en hgado. Esta enzima se regula por el suplemento de selenio en la dieta. Glutatin reductasa La SeGSHpx tiene un requerimiento absoluto de GSH para funcionar. La principal enzima responsable de mantener elevada la relacin GSH/GSSG es la glutatin reductasa, que cataliza la reduccin del glutatin oxidado utilizando equivalentes redox en forma de NADPH. Otros disulfuros pueden ser reducidos por la glutatin reductasa. Su localizacin es citoslica u mitocondrial. La distribucin tisular de la glutatin reductasa es similar a la de la SEGSHpx. Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa Las actividades de la SEGSHpx y de la glutatin reductasa estn acopladas a la produccin de NADPH por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa en la va de las pentosas-fosfato. La glucosa-6-fosfato deshidrogenasa humana de los eritrocitos est en equilibrio entre el tetrmero de 210 kD y el dimero de 150 kD. Esta enzima se inhibe en presencia de quelantes de metales.

2. SECUESTRADORES NO ENZIMTICOS Protenas Los metales de transicin, como el hierro o el cobre, estn implicados en la generacin de radicales libres hidroxilo mediante reacciones como la de Fenton o la de HaberWeiss. Asimismo, participa en reacciones con radicales libres en las que convierten especies poco reactivas en otras con mayor reactividad. Cuando estos metales estn ligados a protenas, difcilmente pueden llevar a cabo esta catlisis. Existen distintas protenas que son capaces de unirse a metales y que, por lo tanto reducen los niveles de iones metlicos libres; estas protenas tambin se consideran mecanismos de defensa antioxidante. La ferritina y la transferrina son protenas que se encargan de mantener bajas las concentraciones intracelulares y extracelulares de hierro. La capacidad antioxidante de la ferritina depende del grado de saturacin con hierro que presente, de manera que cuando est parcialmente saturada acta como un potente antioxidante en el plasma al secuestrar el hierro de ste, y cuando esta totalmente saturada puede liberarlo convirtindose en un prooxidante. La transferrina tambin acta como prooxidante cuando esta totalmente cargada de hierro. La ceruloplasmina y la albumina transportan cobre en el plasma y previenen la descomposicin de los hidroperxidos a radicales libres. La ceruloplasmina, adems, es capaz de oxidar el Fe+2 a Fe+3, evitando, de este modo, que el Fe+2 pueda catalizar reacciones generadoras de radicales libres. La albumina en concentraciones inferiores a las fisiolgicas, es capaz de inhibir la peroxidacin lipdica estimulada por cobre. La albumina inhibe la generacin de radicales hidroxilo en sistemas que contiene iones cobre y H2O2, y es capaz de secuestrar los radicales hidroxilo y los peroxilo. Asimismo pude unirse a los cidos grasos libres protegindose de la peroxidacion; sin embargo, su efecto sobre la peroxidacion estimulada por hierro es minimo. Glutatin El triptido glutatin (GSH), -glutamilcisteinilglicina, constituye el tiol de bajo peso molecular ms abundante de las clulas de mamferos. Los fluidos corporales, como la bilis, el filtrado glomerular, el plasma sanguneo y la cubierta de las clulas epiteliales tambin contienen GSH.

El glutatin puede reaccionar con los radicales libres de oxigeno de diferentes maneras. Una de ellas es mediante la accin de la glutatin peroxidasa puede reducir especies como el H2O2 u otros perxidos orgnicos, oxidndose a GSSH. La segunda, puede reaccionar directamente con radicales libres como O 2-, OH y RO+, donando un tomo de hidrogeno y formando un radical tiilo. Vitamina C Es una molcula que se ha encontrado intracelularmente y extracelularmente en la mayor parte de los sistemas biolgicos. En el plasma es el antioxidante hidrosoluble que ejerce un mayor efecto protector frente a la peroxidacin lipdica. El papel den anion ascorbato radica en su capacidad para reaccionar directamente con el radical superxido, el radical hidroxilo y diversos hidroperxidos lipdicos. Cuando el ascorbato reduce estos radicales libres, se convierte en

deshidroascorbato (A) a travs de la formacin de un intermediario radical libre, el semideshidroascorbato (A-). El deshidroascrobato es una molecula inestable y se puede romper en una compleja que lleva a la produccin de los cidos oxlico y Ltreonico. Otra funcin importante de la vitamina C es la restaurar las propiedades antioxidantes de la vitamina E. en este caso se oxida al reducir los radicales tocoferilos (vitamina E) originados en las reacciones de la vitamina E con los radicales libres. El ascorbato, en determinadas condiciones, tambin puede funcionar como prooxidante. En altas concentraciones y en presencia de metaloes de transicin, este antioxidante puede inducir la generacin de radicales libres de oxigeno por su capacidad para reducir los iones metlicos que estn implicados en las reacciones de formacin de radicales hidroxilo. cido rico En clulas animales es producido en el catabolismo de las bases puricas. Es capaz de interaccionar directamente con radicales libres de oxigeno como el OH+. Adems, puede acomplejar metales de transicin como el hierro o cobre y, de esta forma preservar el ascorbato del plasma. Taurina Este -aminocido se encuentra en la clulas eucariticas y fluidos corporales. Al no formar parte de las protenas se acumula en el interior de las clulas, donde

alcanza altas concentraciones. La taurina forma parte de algunos cidos biliares y tambin tiene una funcin importante en las reacciones de conjugacin para la eliminacin de distintos xenobioticos. Se ha demostrado su papel antioxidante, ya que puede reaccionar directamente con distintas especies reactivas de oxigeno convirtindolas en formas menos reactivas.

B. SISTEMAS DE DEFENSA ANTIOXIDANTE SECUNDARIOS

1. ENZIMAS Los sistemas de defensa antioxidante descritos anteriormente no siempre son efectivos al 100% y los componentes intracelulares sufren daos oxidativos. Oxidorreductasas especficas de protenas Existen diversas enzimas que catalizan reacciones redox de los grupos sulfhidrilo de las protenas, entre las que se encuentran las que reducen los puentes disulfuro. Estas ltimas podran contribuir a la defensa antioxidante de las clulas, puesto que funcionaran reduciendo los puentes disulfuro mixtos formados por la accin de los radicales libres de oxgeno. Entre estas enzimas se encuentran tiorredoxina reductasa y glutarredoxina. Proteasas Actan como sistema de defensa secundarios porque son capaces de degradar muchas protenas modificadas y daadas oxidativamente y, de esta manera, previenen su acumulacin en las celulas. La macroxiproteinasa (MOP) est implicado en la degradacin no lisosmica e independiente de ATP/ubiquitina de las protenas modificadas por oxidacin. El proteosoma es otro gran complejo proteico que aparece en las clulas eucariticas y que est constituido por distintas subunidades proteolticas. Su componente central est formado por varias subunidades catalticas dispuestas en forma de cilindro, que son las responsables de la rotura proteoltica de las protenas marcadas con ubiquitina. Este proteosoma forma parte de los sistema de defensa responsables de la degradacin y eliminacin de las protenas daadas de forma irreversible por oxidacin. Glutatin peroxidasa no dependiente de selenio Es responsable de la reduccin de los hidroperxidos reactivos hasta sus correspondientes alcoholes. Esta enzima no metaboliza el H2O2 y solo muestra

especificidad por los hidroperxidos orgnicos de bajo peso molecular. La GSHpx muestra baja actividad frente a los hidroperxidos que estn embebidos en las membranas, por lo tanto su efecto protector antioxidante depende de la liberacin de estos hidroperxidos de las correspondientes membranas donde se encuentran. Fosfolipasas La fosfolipasa A2 es la principal enzima responsable de la eliminacin de los cidos grasos daados oxidativamente en la membrana. Existen diversas formas isoenzimaticas de la fosfolipasa A2 y todas ellas desempean un papel crucial en el metabolismo y el recambio de los fosfolpidos de membrana.

2. SECUESTRADORES NO ENZIMTICOS Existen diversas molculas pequeas que son capaces de reaccionar no enzimticamente con intermediarios radicales libres, por ejemplo la vitamina E, distintos carotenoides, el ubiquinol o la bilirrubina. Vitamina E Conjunto de compuestos denominados tocoferoles. De entre estos el de mayor actividad antioxidante es la -tocoferol. La vitamina E se ha encontrado en las membranas de la mayora de las clulas y en mamferos es especialmente abundante en hgado, corazn, glndulas suprarrenales y testculos. Tambin hay en algunos fluidos corporales como el plasma sanguneo. La molcula de tocoferol puede reaccionar con especies reactivas de oxigeno como los radicales peroxilo, convirtindolos en hidroperxidos lipdicos mediante la donacin de un tomo de hidrogeno. Los hidroperxidos que se forman pueden ser eliminados por la accin conjunta de las GSH peroxidas y las fosfolipasa. Carotenoides Los -carotenos, que es un precursor de la vitamina A, se encuentran en elevadas concentraciones en las membranas de distintos tejidos. Es capaz de reaccionar con los radicales peroxilo que se generan durante la peroxidacin lipdica para formar radicales centrados en el carbono de resonancia estable que a su vez, pueden reaccionar con otros radicales peroxilo para formar un compuesto no radical libre. De esta manera, al igual que la vitamina E, el -caroteno funciona como un inhibidor de la propagacin de la lipoperoxidacin de las membranas. Estas reacciones ocurren mejor con bajas concentraciones de oxgeno y complementan

la accin de la vitamina E, que reacciona ms eficientemente con altas concentraciones de oxgeno. Una sola molcula de -caroteno puede reaccionar con muchos radicales peroxilo y formar distintos tipos de radicales centrados en el carbono, que luego quedan bloqueados al interaccionar con otros radicales peroxilo. Ubiquinol Ubiquinol o coenzima Q reducida (QH2) puede ser considerado un antioxidante, porque interviene en el reciclaje de la vitamina E hasta su forma reducida y porque es capaz de reaccionar con los radicales alcoxilo y peroxilo de los lpidos, deteniendo, de este modo, la cadena de propagacin del dao peroxidativo. Bilirrubina Se ha propuesta como un antioxidante de los rompedores de cadena con una gran importancia fisiolgica. Con presiones de oxigeno fisiolgicas, la bilirrubina es capaz de reaccionar directamente con los radicales peroxilo que se originan durante la peroxidacin lipdica.

Algunos autores agregan una clasificacin ms que son los llamados antioxidantes terciarios que se encargan de reparar las biomolculas daadas por los RLO. Estos incluyen enzimas reparadoras de DNA y metionina sulfxido reductasa que podra estar implicada en la reparacin de productos oxidados estables.

ESTRS OXIDATIVO
El oxgeno es esencial para la vida, pero posee una paradoja en los organismos aerobios, es decir, aquellos que usan el oxgeno como medio para conseguir energa, existe el peligro de que sus defensas antioxidantes se vean sobrepasadas por las fuerzas oxidantes. Esta situacin se denomina estrs oxidativo y se relaciona con diferentes enfermedades as como con el envejecimiento. El dao o estrs oxidativo se ha definido como la exposicin de la materia viva a diversas fuentes que producen una ruptura del equilibrio que debe existir entre las sustancias o factores prooxidantes y los mecanismos antioxidantes encargados de eliminar dichas especies qumicas, ya sea por un dficit de estas defensas o por un incremento exagerado de la produccin de especies reactivas del oxgeno. Todo esto trae como consecuencia alteraciones de la relacin estructura-funcin en cualquier rgano, sistema o grupo celular

especializado; por lo tanto se reconoce como mecanismo general de dao celular, asociado con la fisiopatologa primaria o la evolucin de un nmero creciente de entidades y sndromes de inters mdico-social, involucrado en la gnesis y en las consecuencias de dichos eventos. El estrs oxidativo describe un estado de dao causado por las especies reactivas de oxgeno (EROs). Estas representan un tipo de molculas que derivan del metabolismo del oxgeno y existen en todos los organismos aerbicos. La mayora son de origen endgeno y son subproductos de reacciones normales y esenciales, como la generacin de energa mitocondrial y las reacciones de detoxificacin catalizadas por el sistema P450. Entre los factores externos se incluyen las infecciones por bacterias, hongos y virus. El desbalance en la produccin de especies reactivas del oxgeno (EROs) y la defensa antioxidante provoca el estrs oxidativo que lleva a una variedad de cambios fisiolgicos y bioqumicos, los cuales provocan el deterioro y muerte celular. El "estrs oxidativo" puede provenir de:

Una deficiencia del sistema de defensa antioxidante. Un incremento de la formacin de EROs, cuya alta reactividad puede provocar: peroxidacin lipdica, dao de la membrana celular, rotura del ADN, degradacin proteica.

El aumento de varios de estos agentes oxidantes a la vez, provoca cambios biolgicos de manera progresiva en el organismo, siguiendo ms o menos un patrn comn y la acumulacin progresiva de esos cambios ocasiona la enfermedad. Son numerosas las patologas que han sido asociadas con este desbalance entre oxidantes y antioxidantes; la ateroesclerosis, el cncer, la enfermedad de Alzheimer, la Diabetes Mellitas, enfermedades autoinmunes, inflamatorias crnicas, situaciones de injuria por isquemia y repercusin en los tejidos, el sndrome de distrs respiratorio, etc. La enfermedad cardiovascular secundaria al proceso de ateroesclerosis constituye la primera causa de mortalidad e invalidez en los pases desarrollados, y dentro de ellas el infarto agudo de miocardio ocupa un lugar cimero. Con relacin al dao renal, existen evidencias experimentales que implican a EROs como mediadores primarios en la patognesis del dao renal producido por: procesos isqumicos, txicos y reacciones antgeno anticuerpo. Las EROs producen lipoperoxidacin de las membranas y organelos celulares especialmente en segmentos del tbulo proximal generando dao de la integridad celular y alteracin de la capacidad de transporte celular

y la produccin de energa. Adems existe dao microvascular principalmente mediado por citoquinas del tipo proinflamatorias y lesiones morfolgicas con alteracin de la permeabilidad y la hemodinamia glomerular.

Conclusiones

El estrs oxidativo representa un punto de convergencia del mecanismo de dao de diversos rganos provocado por diversas etiologas. Una de las formas a travs de las cuales actan las sustancias antioxidantes es ubicndose en la superficie de las molculas usndolas como cofactores algunos metales de esta manera contribuir a la proteccin de los grupos oxidables.

La capacidad de un rgano para defenderse del estrs oxidativo tambin depende de las defensas antioxidantes del tipo intracelular, representadas por las enzimas antioxidantes tisulares capaces de transformar los radicales libres hasta compuestos sin efecto para la estructura de este rgano.

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