DISPONIBILIDAD BIOLGICA Durante la etapa de evaluacin de un medicamento, una de las preguntas importantes a tratar de contestar es: Que formulacin

proporciona la concentracin de principio activo ms alta en plasma? Especficamente, existen dos preguntas que sera conveniente contestar adecuadamente, Qu cantidad de frmaco del total de la dosis administrada es absorbida por el organismo?" y "Cual es la disponibilidad relativa entre dos o ms formas farmacuticas diferentes, conteniendo la misma cantidad del mismo principio activo? La disponibilidad de un frmaco para la absorcin, la cual tambin se llama eficiencia de la absorcin, se define como: "Por ciento de frmaco absorbido con relacin a la dosis administrada". En la mayora de los casos, la cantidad total absorbida es difcil determinarla y generalmente no es necesario conocerla. Frecuentemente es suficiente comparar el nuevo producto contra otro ya conocido utilizado como patrn de comparacin, del cual se conoce la efectividad farmacolgica o clnica. Este procedimiento constituye un mtodo adecuado y econmico para determinar la absorcin del frmaco de la nueva formulacin. Por otro lado, solamente un medicamento del cual el principio activo se absorba completamente hacia la circulacin general, tendr una dosis biodisponible igual a la dosis marcada en la etiqueta. En la prctica, esto normalmente se observa nicamente despus de una administracin intravenosa. Por todas las dems vas de administracin, la cantidad biodisponible es frecuentemente menor a la dosis marcada en la etiqueta. Los primeros investigadores que se preocuparon en que la terapia con medicamentos fuera segura, trataron de evaluar la biodisponibilidad por diversos mtodos que variaban de tcnicas cualitativas poco cientficas a mtodos cuantitativos muy precisos. Uno de los primeros intentos en estudiar la disponibilidad biolgica fue reportado en la literatura en 1930 por Wruble, quien investig la eficacia de la capa entrica con que se recubran algunas tabletas. Se administraron por va oral a sujetos sanos, tabletas que contenan sulfuro de calcio y azul de metileno, con diferentes recubrimientos. Si la capa entrica no era adecuada, la tableta se desintegraba en el estmago y el sujeto eructaba con olor caracterstico a sulfuro de hidrgeno, sin embargo, si el recubrimiento era efectivo para proteger a la tableta del jugo gstrico, esta pasaba del estmago al intestino donde se desintegraba y se absorba como se poda demostrar por el color azul que presentaba la orina del sujeto. Otros mtodos utilizados para estudiar la liberacin in vivo del frmaco dependan del uso de radiografas de rayos X utilizando substancias radiopacas. La primera determinacin de biodisponibilidad tal como ahora se conoce, se llev a cabo en 1933 por Losinski y Diver quienes usaron los datos de excrecin urinaria de salicilatos como una medida de la biodisponibilidad de tabletas de salicilato de sodio con capa entrica. La disponibilidad biolgica o fisiolgica puede definirse como: "La relacin en por ciento entre la eficiencia de absorcin de un frmaco contenido en una forma farmacutica, comparada con una preparacin patrn". El trmino fue introducido por Oser y colaboradores en 1945 cuando llevaron a cabo varios estudios de disponibilidad biolgica de vitaminas y definieron el por ciento de biodisponibilidad como "l por ciento de frmaco excretado en la orina en un tiempo determinado despus de la administracin de una dosis de prueba, dividido entre el por ciento de frmaco excretado en la orina en el mismo periodo de tiempo, despus de la administracin del principio activo en forma de solucin oral, multiplicado por 100". Levy en 1963 public el resultado de sus investigaciones sobre disponibilidad fisiolgica de varios frmacos, especialmente aspirina y salicilatos, utilizando datos de concentraciones en sangre y defini disponibilidad biolgica como: "La cantidad relativa de frmaco inalterado que alcanza la circulacin despus de la administracin de una forma farmacutica de prueba comparada con una forma farmacutica considerada como patrn".
1

La importancia prctica de determinar la disponibilidad biolgica del frmaco contenido en un nuevo medicamento radica en el hecho de que un principio activo administrado en diferentes formas farmacuticas o por diferentes vas de administracin puede presentar diferencias en la velocidad y la cantidad total absorbida dependiendo de la liberacin del frmaco de la formulacin en la cual se encuentra y por lo tanto tambin puede mostrar diferencias en el inicio, intensidad y duracin del efecto farmacolgico. El inters en este campo nuevo de las ciencias farmacuticas aument rpidamente cuando empezaron a aparecer en la literatura trabajos de investigacin que mostraban claramente que la eficacia teraputica de los medicamentos dependa en gran medida de la disponibilidad biolgica del ingrediente activo y tuvo que aceptarse como un hecho, que la variacin observada en el efecto teraputico despus de la administracin de formulaciones supuestamente equivalentes, conteniendo la misma cantidad del mismo principio activo, fabricadas por diferentes laboratorios, se deba en muchas ocasiones a las diferencias en la biodisponibilidad del frmaco. Al mismo tiempo se encontraron tambin diferencias importantes entre lotes del mismo medicamento. Actualmente se utilizan como sinnimos de biodisponibilidad en la literatura mdica y de biofarmacia los trminos de: disponibilidad biolgica, disponibilidad fisiolgica y disponibilidad sistmica. Biodisponibilidad en la actualidad se define como: Cantidad de frmaco, con relacin a la dosis administrada, que alcanza la circulacin sistmica en su forma original y la velocidad a la cual lo hace, despus de la administracin de una forma farmacutica. La biodisponibilidad es un concepto que esta basado en el supuesto de que la medida de ciertos parmetros especficos, generalmente concentraciones del frmaco en sangre y/o cantidad de frmaco eliminada en orina, pueden relacionarse con la eficacia clnica de un medicamento utilizado en la terapia de una enfermedad especfica. As, si se encuentra en estudios de eficacia y seguridad clnica que un medicamento conteniendo un nuevo frmaco es efectivo en el tratamiento de una enfermedad a una dosis de 125 mg cada ocho horas y al mismo tiempo se determinan las concentraciones de frmaco en plasma o sangre que proporcionan esa formulacin, se puede suponer que la eficacia observada est relacionada a varios parmetros de biodisponibilidad, como son: La concentracin mxima del frmaco que se alcanza en sangre despus de la administracin de esa dosis, la velocidad de absorcin del principio activo, o la cantidad total de frmaco absorbida. Conociendo esta relacin, si se quiere lanzar al mercado otra formulacin con la misma cantidad del mismo principio activo, no es necesario llevar a cabo estudios clnicos para comprobar su eficacia, si se demuestra en un estudio de biodisponibilidad comparativo, que se alcanza la misma concentracin en sangre, la misma velocidad de absorcin y la misma cantidad de frmaco absorbida utilizando como patrn de comparacin la formulacin innovadora cuya eficacia ya fue documentada por experiencia clnica. Esta aplicacin del concepto de biodisponibilidad ha sido llamada bioequivalencia y un estudio de biodisponibilidad en el que se comparan, en los mismos sujetos, dos o ms formulaciones de la misma molcula teraputicamente activa, (una de las cuales se toma como estndar) se conoce como un estudio de bioequivalencia. A pesar de que el objetivo ideal sera l demostrar la equivalencia clnica de las formulaciones, esto es complicado de llevarse a cabo por varias razones: es bien conocido que en muchas ocasiones la eficacia teraputica de un medicamento es difcil de cuantificar debido a la variabilidad que existe en la respuesta a la administracin del medicamento entre diferentes pacientes. Debido a esto, se requieren de estudios en un gran nmero de pacientes para poder asegurar con un 90 - 95% de probabilidad que una formulacin proporciona una respuesta mayor que otra, o que las respuestas son iguales, adems estos estudios clnicos son generalmente costosos y consumen mucho tiempo.
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Los estudios de biodisponibilidad en humanos, utilizando concentraciones en sangre plasma o suero y/o datos de eliminacin en orina del frmaco intacto y/o sus metabolismos, son por lo general menos costosos, ms rpidos y ms objetivos ya que se basan en datos reales, y si se disean, se llevan a cabo y se evalan adecuadamente, pueden revelar la verdadera potencia relativa de dos formulaciones utilizando un nmero reducido de voluntarios sanos. Estas razones hacen que en la actualidad, la determinacin de la biodisponibilidad sea uno de los aspectos ms importantes durante el desarrollo, evaluacin y registro de nuevas formulaciones y representa una preocupacin para los fabricantes de medicamentos y las agencias reguladoras en muchos piases del mundo. Un principio activo administrado en diferentes formas farmacuticas o por diferentes vas de administracin, ser absorbido en diferente cantidad y velocidad y mostrar diferencias en el inicio, la duracin y la intensidad del efecto farmacolgico. Estas diferencias pueden ser originadas por el paciente o por la formulacin. En el primer caso se habla de biodisponibilidad modificada por la fisiologa y en el segundo de biodisponibilidad modificada por la forma farmacutica. Algunos de los factores ms comunes que afectan la biodisponibilidad se presentan en la Tabla No. 1. FISIOLGICOS.- Edad, sexo, estado fsico del paciente, tiempo de administracin, vaciamiento gstrico, estado de enfermedad, presencia de comida, administracin de otros frmacos al mismo tiempo, factores hereditarios, etc. FARMACUTICOS.- Tamao de partcula, forma polimrfica, solvatos, formacin de complejos, sales, pKa, solubilidad, procedimientos de manufactura, vehculos, excipientes, etc.

Tabla No. 1. Factores fisiolgicos y del medicamento que afectan la biodisponibilidad del principio activo. En la evaluacin de un medicamento durante la etapa de desarrollo se pone mucho ms nfasis en el segundo grupo de factores, ya que es posible hacer modificaciones a la formulacin para obtener la biodisponibilidad deseada. Esta lista aunque es incompleta, indica que durante la planeacin, ejecucin y evaluacin de un estudio de biodisponibilidad, es importante considerar diferentes aspectos, ya que los factores que afectan la biodisponibilidad pueden ser de naturaleza qumica, fsica, bioqumica o fisiolgica y es necesario el conocimiento de cada uno de ellos con objeto de no atribuir una diferencia en biodisponibilidad de dos medicamentos a factores de la forma farmacutica cuando puede ser que un factor fisiolgico sea el que la est modificando. Las diferencias en biodisponibilidad y probablemente en la respuesta clnica, debidas a factores farmacuticos, para un determinado principio activo, contenido en diferentes formulaciones, pueden presentarse de las siguientes situaciones en orden de importancia. 1 De una forma farmacutica del frmaco a otra, administradas por la misma o diferente va de administracin. 2 De la misma forma farmacutica, fabricada por diferentes compaas. 3 De lote a lote de un mismo medicamento fabricado por el mismo laboratorio.
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A continuacin se presentan definiciones de trminos frecuentemente utilizados en biofarmacia y que ayudarn a comprender mejor el concepto de biodisponibilidad. Biodisponibilidad Absoluta

la literatura de

Cantidad relativa de frmaco proveniente de una forma farmacutica que se absorbe hacia la circulacin general, comparada con una administracin intravenosa de la misma dosis. Biodisponibilidad Relativa Biodisponibilidad de un frmaco proveniente de una forma farmacutica comparada con una formulacin considerada como estndar o patrn que contiene la misma cantidad del mismo principio activo. En este tipo de estudios no se considera la cantidad absorbida y se conocen como estudios de bioequivalencia. Equivalentes Farmacuticos Medicamentos que contienen la misma cantidad de la misma sustancia activa en la misma forma farmacutica. No necesariamente contiene los mismos excipientes y cumple con las normas oficiales de identidad, pureza, calidad y potencia. Alternativas Farmacuticas. Medicamentos que contienen idntica molcula teraputicamente activa o su precursor, pero no necesariamente en la misma cantidad, forma farmacutica o sustancia qumica. Equivalentes Biolgicos Equivalentes o alternativas farmacuticas que al ser administradas a los mismos individuos, bajo el mismo rgimen de dosis, presentan una biodisponibilidad comparable. Equivalentes Teraputicos Equivalentes o alternativas farmacuticas que al administrarse a los mismos individuos, bajo el mismo rgimen de dosis, presentan la misma eficacia y toxicidad, Medicamentos que contienen cantidades iguales de la misma molcula teraputicamente activa y producen efectos similares en el organismo. MTODOS PARA DETERMINAR BIODISPONIBILIDAD De acuerdo a la definicin dada por Levy, la siguiente ecuacin define la disponibilidad biolgica: BD = (1) Donde Ap es la cantidad de frmaco en el cuerpo despus de la administracin del estndar o de la muestra. Ap ( p ) Ap ( s )

Si se considera que el rea bajo la curva de concentracin en plasma contra tiempo es igual a la cantidad de frmaco que alcanza la circulacin dividida entre el volumen de distribucin por la velocidad de eliminacin, se puede sustituir la ecuacin (2) en la (1) para dar la ecuacin (3).
ABC = Ap Vd ke

(2)

BD = (3)

ABC (p ) Vd ke ABC (s ) Vd ke

Como se utiliza el mismo frmaco, Vd y ke tienen el mismo valor y por lo tanto la ecuacin anterior se puede simplificar a: BD = ABC ( p ) ABC ( s ) (4)

La biodisponibilidad expresada en porciento es igual a: %BD= ABC ( p ) ABC ( s ) x 100 (5)

Si las dosis del estndar y el problema son diferentes, es necesario hacer una correccin con respecto a estas y la ecuacin anterior se convierte a: %BD = (6) De acuerdo a Oser, la disponibilidad biolgica se puede calcular a partir de las cantidades totales de frmaco excretadas en la orina despus de la administracin de la formulacin problema y de la utilizada como estndar, utilizando la siguiente ecuacin: %BD = Au ( p ) Au ( s ) x 100 (7) ABC (p ) D ( s ) ABC ( s ) D (p ) x 100

Es necesario enfatizar que la recoleccin de orina se debe hacer durante periodos de tiempo suficientemente largos con el fin de asegurar que todo el frmaco ha sido excretado, de no ser as, se pueden obtener datos falsos. La cantidad total de frmaco excretado en la orina en un tiempo infinito despus de la administracin de una dosis simple se representa por la siguiente ecuacin:
Au = f x F x D

(8) Donde D es la dosis; F la fraccin de esta que alcanza la circulacin general; y f la fraccin de la dosis absorbida que es excretada por los riones.

Cuando se mide la biodisponibilidad despus de la administracin de dos diferentes dosis del mismo frmaco, se supone que f permanece constante y esto no necesariamente es cierto, ya que el metabolismo del frmaco puede ser dependiente de la dosis. Por esta razn, para llevar a cabo este tipo de estudios es recomendable utilizar diseos cruzados. Existen varios procedimientos directos e indirectos para determinar la biodisponibilidad en el humano, la seleccin depender principalmente del propsito del estudio, del mtodo analtico para la determinacin del frmaco y la naturaleza del medicamento que est bajo estudio. Los diferentes procedimientos para la determinacin de la biodisponibilidad de un frmaco contenido en un medicamento o la bioequivalencia de dos productos conteniendo el mismo principio activo son: 1 Datos sanguneos. A.- Administracin de dosis nica. a) Mxima concentracin del frmaco en sangre o plasma, (Cp max). b) Tiempo al cual aparece la mxima concentracin, (tmax). c) Area bajo la curva de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo, (ABC). B.- Administracin de dosis mltiples. a) Area bajo la curva durante un intervalo de dosificacin. b) Concentracin mxima en el estado de estacionario. 2 Datos urinarios. a) Cantidad acumulada excretada en la orina, (Au ). b) Velocidad de excrecin del frmaco, (dAu/dt). c) Tiempo para la mxima excrecin urinaria, (t). 3 Efecto farmacolgico. 4 Observaciones clnicas. 1. DATOS SANGUINEOS. A) Administracin de Dosis nica. a) Mxima concentracin de frmaco en plasma (Cp max). Este parmetro representa la concentracin ms alta que alcanza el frmaco en la circulacin sistmica despus de la administracin del medicamento por cualquier va excepto la intravenosa, se conoce tambin como el pico de la curva y se reporta en unidades de cantidad entre volumen, (mcg/mL, U/mL, mg/100 mL, etc.)

La importancia de este parmetro radica en que la mxima concentracin, est relacionada frecuentemente a la intensidad de la respuesta biolgica y debe tener un valor que este dentro de la ventana teraputica, es decir, entre la concentracin mnima efectiva y la concentracin txica para obtener el efecto deseado con un mnimo de efectos secundarios. Si se observa la figura No. 1, en la que se presentan las curvas de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo, de dos formulaciones del mismo hipntico, la formulacin A producir sueo, mientras que la formulacin B, an cuando es totalmente absorbida, no producir el efecto farmacolgico deseado. Este parmetro es ms importante mientras ms estrecha sea la ventana teraputica, es decir, mientras ms cercanos estn los valores de CME y CT.
CONCENTRACIN EN PLASMA (MCG/ML) 40 PICO 30 FORMULACIN

CT
A

PICO 20 FORMULACIN

CME
B

10

.5

10

12

14

16

18

20

TIEMPO (HR) No. 1. Figura Curvas representativas de dos formulaciones con las que se alcanzan diferentes concentraciones del frmaco en plasma. La formulacin A proporciona concentraciones arriba de la CME por lo que ser efectiva, mientras que la formulacin B no presentar el efecto farmacolgico esperado por no presentar concentraciones dentro de la ventana teraputica.
b) Tiempo de la mxima concentracin del frmaco en plasma (t max). Este parmetro corresponde al tiempo requerido para alcanzar la concentracin mxima del frmaco en la circulacin sistmica despus de la administracin. A t max, la velocidad de absorcin es igual a la velocidad de eliminacin y aunque despus de este tiempo contina el proceso de absorcin, esta se lleva a cabo a menor velocidad. Este parmetro se utiliza como una medida de la velocidad de absorcin y su importancia se puede ver en la figura No. 2, en la cual se presentan dos formulaciones del mismo frmaco con diferentes velocidades de absorcin. El inicio de la accin farmacolgica se presenta a los 30 min en la formulacin A, con un efecto mximo a los 60 min, mientras que en la formulacin B, se presenta el inicio de la accin a las dos 40horas con el mximo a las 4 h. Tambin se puede observar que la formulacin A presenta un efecto ms intenso pero de menor duracin que la formulacin B. c) rea bajo la curva (ABC). El tercero y tal vez el parmetro ms importante representa CT el rea total de la curva de concentracinPICO de frmaco contra tiempo y es una medida de la cantidad total de frmaco que 30 FORMULACIN A alcanza la circulacin sistmica, generalmente se mide de tiempo cero a tiempo infinito y es igual a la ABC 171.0 mcg / ml x hr cantidad de frmaco absorbido entre la depuracin. PICO
CONCENTRACIN EN PLASMA (MCG/ML)

(9)

20

[ABC]0 = Cpdt 0

ABC

169.8 mcg / ml x hr

CME
FD [ABC]0 = Vdke FD FORMULACIN = Cl

10

(10)
7
.5 1 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

TIEMPO (HR)

Figura No. 2. Curvas de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo, representativas de dos formulaciones que presentan diferentes velocidades de absorcin del principio activo. El ABC se reporta en unidades de concentracin por tiempo, (mcg/mL x hr, etc.) o en cm 2. En el caso de la figura No. 2, a pesar de que las dos curvas son muy diferentes con relacin al pico mximo y al tiempo en que este se presenta, la cantidad de frmaco absorbida es la misma, ya que las reas son prcticamente iguales.
AREA BAJO LA CURVA

AREA BAJO LA CURVA

DOSIS Figura No. 3. Relacin entre dosis y rea bajo la curva. (A) Relacin directamente proporcional, (B) Relacin que existe en algunos frmacos cuando a ciertas dosis se satura el sistema enzimtico del metabolismo del principio activo. Para muchos frmacos, el ABC es directamente proporcional a la dosis, es decir si una dosis simple de un frmaco se aumenta de 250 mg a 1000 mg, el ABC mostrar un incremento tambin de cuatro veces, (figura No.3 A). En algunos casos esto no necesariamente se cumple, sobre todo en ciertos niveles de dosis, por ejemplo, en el caso de los salicilatos y la fenitoina, frmacos que se metabolizan por un proceso enzimtico, cuando las concentraciones en sangre son muy altas, el proceso puede llegar a saturarse aumentando la vida media de eliminacin y por lo tanto el ABC, ya que en proporcin a la dosis se est eliminando menor cantidad de frmaco, (figura No. 3 B).

DOSIS

2 Administracin de Dosis Mltiple. a) ABC entre dos administraciones. En ocasiones es preferible determinar la biodisponibilidad despus de una administracin mltiple ya que es mas parecido a una situacin clnica real y ofrece algunas ventajas en la evaluacin de este parmetro.
8

Es importante hacer notar que este mtodo se debe utilizarse nicamente despus de que ha sido alcanzado el estado estacionario, es decir, una vez que el proceso de acumulacin de frmaco se ha terminado y se obtenga un equilibrio en sangre entre las concentraciones mxima, C max, y mnima, Cmin. En 1965 Wagner demostr que el ABC de concentracin de frmaco contra tiempo despus de una administracin nica es igual al ABC que se obtiene entre el intervalo de dos administraciones continuas, cuando se ha alcanzado el equilibrio, durante un rgimen de dosis mltiples, es decir:

0
(11)

2 Cpdt = Cp dt

t1

DA
CONCENTRACIN EN PLASMA

DA

DA

DA

DA

DA

DB

DB

DB

DB

TIEMPO Figura No. 4.

Representacin grfica para determinar la biodisponibilidad comparativa de dos formulaciones utilizando el mtodo de reas bajo la curva despus de administracin mltiple. Tomando esta relacin como base, la biodisponibilidad comparativa entre dos formulaciones se puede determinar comparando las reas en el estado de equilibrio, de acuerdo a la siguiente ecuacin:
t 2 Cp dt t1 p t 2 Cp dt t1
s

BD =

(12)

En la prctica, se administra la formulacin considerada como estndar a intervalos de tiempo generalmente iguales al t1/2, hasta que se alcanza el estado estacionario y se calcula el ABC entre dos administraciones. Sin interrupcin y manteniendo el mismo intervalo entre las dosis, se administra el medicamento considerado como problema hasta que se alcanza nuevamente el estado estacionario y se vuelve a determinar el ABC entre dos administraciones, (figura No.4). b) Mxima concentracin en el estado de equilibrio.- Otro mtodo para determinar la biodisponibilidad es comparar el pico mximo de concentracin de frmaco en sangre que produce la preparacin estndar con el del medicamento problema. La administracin de las dos formulaciones se hace de la misma manera que para la determinacin del ABC (figura No 5).
9

BD =

( Cmax ) p ( Cmax ) s
D
B

(13)

CONCENTR ACIN DE FRM ACO EN PLASMA

D A

DA

DB

CpMAX

Cp MAX

TIEMPO

Figura No. 5. Representacin grfica para determinar la biodisponibilidad comparativa de dos formulaciones utilizando el mtodo de mxima concentracin, Cpmax, despus de administracin mltiple. 2 DATOS URINARIOS. Los datos de excrecin urinaria del frmaco pueden ser utilizados para determinar la biodisponibilidad siempre y cuando el principio activo se elimine por esta va en cantidades significativas y en cada toma de muestra se colecte el total de orina.
CONCENTRA CIN EN PLASMA

a) Cantidad total de frmaco excretado en la orina .- La cantidad total acumulada excretada en la orina es proporcional a la cantidad de frmaco absorbido por lo que este parmetro puede ser utilizado para conocer la biodisponibilidad de un frmaco contenido en un medicamento considerado como problema, comparndolo con una preparacin estndar. Para poder utilizar este mtodo es necesario recolectar la orina por un periodo de tiempo suficientemente largo para asegurar la excrecin de toda la dosis absorbida (7 a 10 vidas medias). La relacin entre la cantidad acumulada excretada en la orina y la curva de concentracin de frmaco en plasma se presenta en la figura No. 6. En donde se observa que cuando el frmaco ha sido prcticamente en su totalidad eliminado, la concentracin en plasma se aproxima a cero, (punto C de la curva), y se obtiene la cantidad total eliminada, Au .
CANTIDAD ACUMULADA EN ORINA

10

TIEMPO

Figura No. 6. Relacin entre las curvas de concentracin de frmaco en plasma y la de cantidad total acumulada excretada en orina. b) Velocidad de excrecin del frmaco en la orina .- Debido a que la mayora de los frmacos se eliminan por procesos de primer orden, la velocidad de excrecin es dependiente de la constante de velocidad de eliminacin de primer orden y de la concentracin del frmaco en el plasma. En la figura No. 7 la velocidad mxima para la excrecin del frmaco se alcanza en el punto B y la mnima en los puntos A y C. Con base en esta relacin, la curva de velocidad de excrecin en orina contra tiempo ser idntica a la curva de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo de acuerdo a la figura No. 7. c) Tiempo para la mxima excrecin urinaria.- En las figuras No. 6 y 7, la pendiente del segmento A-B de las curvas esta relacionada a la velocidad de absorcin del frmaco mientras que el punto C representa el tiempo total requerido para que despus de la administracin, el frmaco absorbido sea totalmente eliminado, (t), y este parmetro ha sido utilizado en algunos estudios para comparar la bioequivalencia de varios productos. En el caso de excrecin urinaria no se pueden utilizar las reas bajo las curvas para la determinacin de la biodisponibilidad, ya que proporcionan diferentes valores aunque la cantidad de frmaco absorbido sea la misma. Esto se puede observar en la figura No. 8, donde la cantidad total de frmaco excretado Ae a tiempo t , que representa la cantidad de frmaco absorbido, es la misma para las tres formulaciones, sin embargo las reas bajo la curva de t o a t difieren grandemente. En estos casos, el contorno de la curva se utiliza como una medida de la velocidad de absorcin.
VELOCIDAD DE EXCRECIN

CONCENTRA CIN EN PLASMA

11

TIEMPO

Figura No. 7. Relacin entre las curvas de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo y la obtenida al graficar velocidad de excrecin contra tiempo. Los dos mtodos ms importantes para evaluacin de la biodisponibilidad, el ara total bajo la curva de una grfica de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo y la medida de la cantidad total de frmaco (o sus metabolitos) eliminados en orina, presentan ventajas y desventajas, aunque el mtodo utilizado con ms frecuencia para la mayora de las formulaciones es el de niveles sanguneos despus de administracin nica del medicamento. La ventaja de utilizar los datos de excrecin urinaria es que no es necesario molestar a los sujetos con tcnicas invasivas como es la puncin venosa y por lo tanto no existe ningn riesgo en este sentido, sin embargo, esta tcnica tiene varios inconvenientes que limitan su confiabilidad. Primero, la eliminacin urinaria puede representar solamente una pequea porcin de la dosis absorbida. Segundo, si la vejiga no se vaca totalmente en cada toma de muestra, la orina remanente se diluir con la que se forma durante el siguiente perodo y la velocidad de excrecin del frmaco obtenida ser errnea, dando un dato falso de velocidad de absorcin del frmaco. Tercero, la coleccin frecuente de muestras puede ser difcil y puede requerir de caterizacin adems de administrar a los sujetos cantidades mas o menos grandes de agua, por ejemplo, dar 400 mL de agua una o dos horas antes de iniciar el estudio y mantener el suministro del lquido en aproximadamente 200 mL por hora y aunque esta opcin es la mas conveniente, puede influir artificialmente en los datos de biodisponibilidad debido a modificaciones en el proceso de absorcin en el estmago y/o intestinos. Cuarto, si se llega a perder una muestra de orina, no ser posible el construir la curva acumulativa de excrecin urinaria y por lo tanto no se podr calcular la cantidad total absorbida del frmaco. Y por ltimo, el perodo de recoleccin de muestras necesario para obtener la excrecin completa del principio activo puede llegar a ser de varios das, (7 a 10 vidas medias biolgicas) dependiendo del tiempo de vida media biolgica del frmaco.
CANTIDAD ACUMULADA ELIMINADA EN ORINA

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TIEMPO

Figura No. 8 Curvas de cantidad total eliminada en orina que muestran diferentes patrones de eliminacin, por lo que no es posible tomar el ABC como medida de la biodisponibilidad Por estas razones los mtodos basados en concentraciones del frmaco en plasma son ms confiables y a menos que no se puedan tomar muestras sanguneas o que estas no puedan ser analizadas, este deber ser el mtodo a escoger. El mtodo de administracin nica tiene la ventaja de que el sujeto toma nicamente una dosis del medicamento, que puede ser importante si se utilizan voluntarios sanos. Este tipo de estudios requiere de periodos de tiempo ms cortos para llevarse a cabo. Sin embargo, la curva de niveles sanguneos debe construirse por un periodo de tiempo equivalente a cuando menos cinco vidas medias, lo que requiere de doce muestras aproximadamente, lo cual representa un inconveniente para el sujeto. Adems hay que tomar en cuenta que en ocasiones es difcil la determinacin del frmaco en fluidos biolgicos despus de la administracin de una dosis nica por la concentracin que se alcanza en sangre y/o por la sensibilidad del mtodo analtico. La ventaja del mtodo de dosis mltiples es que la concentracin del principio activo en la sangre es mayor que despus de una dosis nica, la determinacin analtica es ms fcil y precisa y la medida del frmaco se lleva a cabo en niveles teraputicos. El nmero de muestras sanguneas es menor si se utiliza el rea bajo la curva, ya que este parmetro se determina solamente entre un intervalo de dosis. Si se utiliza Cmax, nicamente se requieren de una a tres muestras y no hay necesidad de calcular otros parmetros farmacocinticos. Otra ventaja es que el sujeto se convierte en su propio control, ya que el medicamento problema se administra inmediatamente despus de que se alcanza el estado estacionario y se determina el ABC o Cmax con la formulacin utilizada como estndar. La desventaja de este mtodo, es que para asegurar que se alcanza el estado de equilibrio, el frmaco debe administrarse por aproximadamente 5 o 6 intervalos de dosis, antes de que las muestras empiecen a colectarse y por lo tanto se requieren periodos de tiempo ms largos en comparacin con el de dosis nica y es ms probable que las condiciones fisiolgicas o patolgicas de los sujetos puedan variar en el curso del estudio. Aunque es posible controlar la dieta, el consumo de comida y lquidos, actividad, etc., siempre ser ms difcil hacerlo durante periodos de tiempo largos. 3 EFECTO FARMACOLGICO. Para algunos principios activos, la determinacin cuantitativa del frmaco en sangre u orina no se puede llevar a cabo o no tiene la suficiente exactitud y/o reproducibilidad y es necesario recurrir a la medida del efecto farmacolgico, como por ejemplo, el dimetro de la pupila, el ritmo cardaco, la presin sangunea, etc., para la evaluacin de la biodisponibilidad. En estos casos se requiere de la siguiente informacin: 1) Una curva efecto-tiempo para una formulacin considerada como estndar y otra para el problema a valorar. 2) Una grfica de logaritmo de la dosis contra respuesta, despus de la administracin intravenosa del frmaco. 3) La conversin de los valores encontrados en el punto (1) para el estndar y el problema a dosis o cantidades en el sitio de accin, utilizando la grfica obtenida en (2).

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Utilizando el antilogaritmo de estos datos, se construye una curva en papel numrico de la cantidad de frmaco en el sitio de accin para los dos productos, se mide el ABC correspondiente al estndar y al problema y se calcula con esto la biodisponibilidad relativa. La medida del efecto farmacolgico debe hacerse con bastante frecuencia para obtener un estimado razonable del ABC total, por un periodo de tiempo equivalente a cuando menos tres vidas medias biolgicas del frmaco. 4 RESPUESTA CLNICA. Durante muchos aos se ha observado medicamento el paciente presenta una teraputica, una respuesta adecuada observaciones es obvio que el principio cantidades y/o a diferentes velocidades. en la clnica que despus de la administracin de un de las tres situaciones siguientes: falta de respuesta o signos de toxicidad y reacciones secundarias. De estas activo administrado llega al sitio de accin en diferentes

La respuesta clnica depende de muchos factores, necesitndose un gran nmero de sujetos para poder detectar diferencias entre dos medicamentos conteniendo el mismo principio activo y por esta razn se prefiere para determinar la biodisponibilidad y/o bioequivalencia la determinacin de cualquiera de los parmetros mencionados anteriormente. ESTUDIOS DE BIOEQUIVALENCIA. La importancia que tienen en la actualidad los estudios de bioequivalencia o de biodisponibilidad comparativa es debido a que se ha demostrado a travs de un gran nmero de reportes en la literatura que productos considerados como equivalentes farmacuticos que se encuentran en el mercado, presentan diferencias importantes en su efecto teraputico durante el tratamiento de una enfermedad especfica. En muchos casos estas diferencias se han podido correlacionar con diferentes concentraciones del frmaco en sangre, causadas principalmente por diferencias en la absorcin, que provienen, generalmente, por diferencias en la liberacin del principio activo de la forma farmacutica. A finales de los aos 50s, Morrison utiliz el anlisis de orina para evaluar la disponibilidad biolgica de riboflavina de tabletas entricas y grageas multivitamnicas y demostr que exista una variacin del 14% al 81% de la dosis de vitamina recobrada en la orina dependiendo de la marca comercial del medicamento. En 1960 Levy public su trabajo sobre tabletas de aspirina y estableci las bases para entender la relacin de la disolucin y la biodisponibilidad en la eficacia clnica del medicamento. En 1962 Catz y otros investigadores reportaron la ineficacia clnica de productos conteniendo tiroides. Cuando estos productos se substituyeron por la levotiroxina en los mismos pacientes con hipotiroidismo, se obtuvieron resultados clnicos satisfactorios. En 1963 Carter report la ineficacia clnica de algunas marcas genricas de tolbutamida y un poco despus Lu report que el tiempo para que se disolviera el 50% del frmaco de 26 lotes que contenan este hipoglicemiante, vari de 3 a 120 min. Los efectos de estas diferencias tan grandes en la efectividad clnica del medicamento cuando se cambiaba de una marca a otra, fueron evidentes. En Australia en 1968 se reportaron varios casos de intoxicacin por difenilhidantoina, frmaco antiepilptico ampliamente utilizado y cuyas concentraciones en sangre deben mantenerse dentro de intervalos muy estrechos para evitar intoxicacin. Al conocerse la formulacin, se descubri que un cambio en los excipientes produca un aumento significante en la biodisponibilidad.

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En los aos siguientes se reportaron casos de bioinequivalencia de otros productos en el mercado: cloranfenicol, (Glazko, 1968); oxitetraciclina y tetraciclina, (Brice y Hammer, 1969); nitrofurantoina, (varios autores, 1967 a 1981); digoxina, (Lindenbaum, 1971), etc. Estas variaciones en la biodisponibilidad de frmacos importantes para la terapia y la demostracin de sus consecuencias en la seguridad y la eficacia teraputica del medicamento, hicieron que la bioequivalencia pasara a ser de un tema puramente acadmico a una preocupacin seria de farmacuticos, mdicos, agencias reguladoras y fabricantes. Al disear un estudio de bioequivalencia, una de las formulaciones del frmaco en estudio se selecciona como estndar o patrn de referencia, contra el cual los dems productos sern comparados. Este estndar debe contener el frmaco o la molcula teraputicamente activa en su forma ms fcilmente disponible (solucin o suspensin) y de preferencia a la misma concentracin que las otras formulaciones en el estudio. Cuando no se cuenta con una solucin o suspensin del frmaco, el estndar debe ser una formulacin aprobada para su venta para la cual existen datos suficientes de su eficacia y seguridad o tambin un producto aceptado por la profesin mdica y que ha sido utilizado extensamente en la clnica. Generalmente se utiliza como estndar el primer producto que sali al mercado o innovador. Estudios de Biodisponibilidad para Medicamentos Conteniendo Nuevos Frmacos. En la actualidad se reconoce la necesidad de llevar a cabo estudios de biodisponibilidad para nuevos productos que se encuentren en la etapa de desarrollo, ya que es posible, sobre la base de los datos obtenidos, optimizar una formulacin y evitar una falta de eficacia o efectos secundarios innecesarios. Si el nuevo medicamento esta diseado para un uso extravascular (oral, intramuscular, rectal, etc.) es necesario establecer la absorcin del principio activo. En un estudio diseado adecuadamente, si es posible, se debe administrar el frmaco en una solucin intravenosa para tener como referencia toda la dosis en la circulacin sistmica, es decir, "el frmaco 100 % biodisponible". Para determinar la absorcin local, el frmaco se debe administrar, siempre que sea posible, en forma de solucin utilizando la misma va de administracin recomendada para el nuevo medicamento, si se est desarrollando una tableta o cpsula para administracin oral, se debe utilizar una solucin oral del frmaco, si la forma farmacutica es un supositorio, o para ser administrada intravaginalmente, la solucin del frmaco se debe administrar como enema o como ducha vaginal. El utilizar una solucin elimina cualquier efecto que pueda tener la liberacin (disolucin) del frmaco en el proceso de absorcin. Comparando estadsticamente las curvas de concentracin de frmaco en sangre o los datos de excrecin urinaria entre la formulacin original y la solucin administradas por la misma va, se puede concluir si existen efectos o no de la forma farmacutica sobre la biodisponibilidad y comparando con los datos obtenidos despus de la administracin intravenosa se puede conocer la cantidad total de frmaco absorbida. Si el principio activo no se puede administrar en solucin debido a solubilidad, estabilidad, etc., se puede dar en forma de una suspensin del frmaco micronizado. Es necesario y conveniente llevar a cabo estudios de evaluacin de la forma farmacutica "in vitro", tales como desintegracin, disolucin, uniformidad de contenido, etc. antes de iniciar los estudios "in vivo" y tratar, si es posible, de establecer una correlacin. Estudios de Biodisponibilidad para Medicamentos Conteniendo Frmacos que se Encuentran en el Mercado. La controversia que existe en este momento sobre productos en el mercado conteniendo la misma cantidad del mismo principio activo no es con relacin a s uno es superior a otro, sino ms bien si se pueden considerar como equivalentes teraputicos, es decir, si producen los mismos efectos en la clnica.
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Si un frmaco est disponible en el mercado en una particular forma farmacuticas, fabricada por diferentes compaas, es necesario garantizar al mdico y al paciente que los productos darn una respuesta igual. Lo mismo es cierto para formas farmacuticas administradas por diferente va, aunque en estos casos se esperaran diferencias en el inicio, la intensidad y la duracin del efecto farmacolgico. Para establecer la bioequivalencia entre dos o ms formulaciones, la cantidad absorbida, o fraccin de la dosis que alcanza la circulacin sistmica no debe ser muy diferente y la velocidad de absorcin debe ser lo suficientemente parecida para que se obtengan curvas similares de concentracin de frmaco en sangre contra tiempo. En la actualidad solamente son aprobados para su venta los productos bioequivalentes tomando como formulacin patrn o de referencia el producto innovador. Pero que pasa si el nuevo producto tiene una mayor biodisponibilidad que el innovador? Se le debe pedir al fabricante que lo reformule para ajustarse al comportamiento del innovador? La respuesta no es sencilla. A pesar de que existen datos en ocasiones de varios aos de experiencia en la clnica con el innovador, algunas opiniones estn a favor de que el producto con la biodisponibilidad ms baja, no importando que sea el innovador, s reformule para igualarse a la nueva formulacin, con el argumento de que productos con baja biodisponibilidad tienden a presentar una mayor variacin en la absorcin y por lo tanto los niveles sanguneos son poco predecibles, lo que es cierto para algunos principios activos pero no para otros. En ocasiones la velocidad de absorcin y/o la cantidad total absorbida no deben ser los nicos parmetros para tomar una decisin y en estos casos ser necesario un estudio clnico para poder probar una superioridad en el efecto farmacolgico sin aumento de efectos secundarios. Para poder demostrar que dos productos son bioequivalentes es necesario cumplir con las siguientes dos condiciones. a) Que la velocidad de absorcin y la cantidad total absorbida de una formulacin, determinadas por la concentracin del frmaco en sangre y/u orina o por la medida de un efecto farmacolgico especfico no sean significativamente diferentes de los del producto de referencia. b) El diseo estadstico permita detectar diferencias en la velocidad de absorcin o en la cantidad total absorbida que no puedan ser atribuidas a la variabilidad de los sujetos.
CONCENTRACIN EN PLASMA

Si se encuentran diferencias en la velocidad de absorcin pero no en la cantidad total absorbida, el producto puede considerarse an como bioequivalente si la diferencia es intencional y/o s esta diferencia no afecta la seguridad y la efectividad del medicamento. A B Es importante que las conclusiones que se deriven de ABC los resultados obtenidos de un estudio de A = ABC B bioequivalencia se relacionen, en todos los casos, con el propsito para el cual se utiliza el medicamento en la terapia y con el intervalo teraputico ABC C = 0.5 ABC A C del principio activo. Con propsitos de ilustrar la relacin que existe entre la velocidad de absorcin y la cantidad total absorbida y como afectan cambios en estos parmetros al contorno de las curvas de concentracin de frmaco en plasma contra tiempo y las curvas de excrecin urinaria, en la figura No.8 se presentan las curvas de tres formulaciones del mismo frmaco a la misma dosis administradas a los mismos voluntarios sanos en un diseo cruzado al azar.

CANTIDAD ACUMULADA EN ORINA

A B C

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TIEMPO

Figura No. 8. Grficas de concentracin de frmaco en plasma y las correspondientes de cantidad total acumulada en orina de tres formulaciones hipotticas con la misma cantidad de principio activo. Los datos de excrecin urinaria confirman estas observaciones. Estas relaciones se presentan en forma resumida en la tabla No. 2. LA CANTIDAD BIODISPONIBLE AUMENTA LA VELOCIDAD DE BIODISPONIBILIDAD AUMENTA --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------PARMETRO CAMBIO PARMETRO CAMBIO --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------DATOS EN PLASMA tmax Cpmax ABC t (dAu/dt)max Au Sin cambio Aumenta Aumenta DATOS EN ORINA Sin cambio Aumenta Aumenta t (dAu/dt)max Au Disminuye Aumenta Sin cambio tmax Cpmax ABC Disminuye Aumenta Sin cambio

Tabla No. 2. Relacin entre los parmetros de biodisponibilidad y los datos derivados de curvas de concentracin del frmaco en sangre y de cantidad total eliminada en orina. CRITERIOS PARA LLEVAR A CABO ESTUDIOS DE BIOEQUIVALENCIA. Los siguientes criterios representan una gua que puede ser til para establecer la necesidad de llevar a cabo estudios de bioequivalencia de diferentes formulaciones. 1 Evidencia de estudios clnicos bien diseados u observaciones controladas en pacientes, que diferentes productos conteniendo la misma cantidad del mismo frmaco no proporcionan efectos
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teraputicos comparables, o que al substituir una marca con otra, existen cambios en los efectos teraputicos, o en el estado clnico del paciente. 2 El frmaco tiene una ventana teraputica muy estrecha, por ejemplo una diferencia menor al doble entre la dosis letal media, DL 50 y la dosis efectiva media, DE 50, o entre la concentracin mnima efectiva, CME y la concentracin txica, CT, por lo que su uso efectivo y seguro requiere de una cuidadosa titulacin de la concentracin y una contnua observacin del paciente. 3 Conocimiento de que la falta de bioequivalencia producir efectos secundarios serios en el tratamiento o prevencin de una enfermedad peligrosa. 4 Evidencias fisicoqumicas: a.- El principio activo tiene una solubilidad muy baja en agua. Menos de 5mg/ml b.- La disolucin en el estmago es crtica para la absorcin. c.- El volumen de lquido requerido para disolver el frmaco es mucho mayor que el volumen del fluido gstrico. d.- La velocidad de disolucin del frmaco de la forma dosificada es lenta. Menos del 50% en 30 min utilizando un mtodo oficial o difiere significativamente de un producto similar en el mercado. e.- El tamao de partcula o el rea de superficie del frmaco es crtico para su biodisponibilidad. f.- Ciertas caractersticas estructurales del principio activo, (formas polimrficas, solvatos complejos, etc.) con disolucin lenta, lo que afecta la disolucin o la biodisponibilidad. g.- El medicamento presenta una relacin en la cantidad de excipiente a principio activo mayor de 5 a 1. h.- Algunos ingredientes especficos de la formulacin, (excipientes hidrfobos, lubricantes, etc.), interfieran con la absorcin del principio activo. 5 Evidencias farmacocinticas: a.- El frmaco o su precursor se absorbe en un segmento particular del tracto gastrointestinal. b.- La cantidad total absorbida del principio activo o su precursor es menor al 50% en comparacin con una dosis intravenosa, an cuando se administre en forma pura. c.- Existe un metabolismo muy rpido del frmaco en la pared intestinal o en el hgado durante el proceso de absorcin, (efecto del primer paso). d.- La molcula teraputicamente activa es rpidamente metabolizada o excretada por lo que se requiere una rpida disolucin y absorcin para producir el efecto teraputico. e.- El ingrediente activo es inestable en algunas porciones del tracto gastrointestinal y se requieren recubrimientos o formulaciones especiales para asegurar una adecuada absorcin. f.- El frmaco presenta cintica dependiente de la dosis cerca o en el intervalo teraputico. Por otro lado, no tiene ningn sentido prctico el llevar medicamentos que cumplan con los siguientes requisitos: 1 - Soluciones para administracin intravenosa.
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a cabo estudios de bioequivalencia, a

2 - Preparaciones tpicas para producir un efecto local. 3 - Formas farmacuticas para administracin oral, de las cuales el principio activo no se absorbe. 4 - Productos para ser administrado por inhalacin y contiene el ingrediente activo en solucin. 5 - El medicamento es una solucin oral, elixir, jarabe, tintura, u otra forma soluble del frmaco que contiene al ingrediente activo en la misma concentracin que un producto ya aprobado y no contiene ingredientes que se conozca afecten significativamente la absorcin del principio activo. 6 - El medicamento es una forma farmacutica slida, (sin incluir las que contienen capa entrica o de liberacin controlada), que ha demostrado ser efectiva en estudios de eficacia y no est incluido en la lista de sustancias para las cuales se requiere estudios de bioequivalencia. 7 - El medicamento es de uso parenteral y ha probado ser efectivo en estudios de eficacia y tiene una formulacin idntica tanto en ingrediente activo como inactivos a un producto ya aprobado. Tampoco se requiere llevar a cabo estudios de bioequivalencia para los siguientes productos: A.- El medicamento cumple, de acuerdo a las agencias gubernamentales con una prueba "in vitro" especfica. B.- El producto est a diferente concentracin en la misma forma farmacutica, en formulaciones proporcionales con los mismos excipientes que otro medicamento fabricado por la misma compaa y cumple con las siguientes condiciones: - Se ha demostrado la biodisponibilidad del primer producto. - Ambas formulaciones cumplen con las pruebas "in vitro" aprobadas por la agencia reguladora. C.- El medicamento cumple con alguna prueba "in vitro" indicativa de biodisponibilidad, (una prueba "in vitro" que ha sido correlacionada con datos "in vivo"). D.- El medicamento ha sido reformulado y es idntico, a excepcin del color, sabor, forma o preservativo, a otro fabricado por el mismo fabricante y se cumple con las siguientes condiciones: - Se ha demostrado la biodisponibilidad del primer producto. - Ambas formulaciones cumplen con las pruebas "in vitro" aprobadas por la agencia reguladora. Se ha encontrado que la biodisponibilidad juega un importante papel en la variacin observada del efecto teraputico de un paciente a otro, despus de la administracin de formulaciones supuestamente equivalentes conteniendo el mismo frmaco fabricadas por diferentes compaas, adems se han documentado diferencias en biodisponibilidad en diferentes lotes fabricados por el mismo laboratorio. En los estudios de biodisponibilidad existe una mayor preocupacin con la fraccin de la dosis que se libera y que alcanza la circulacin general de manera intacta, ya que representa la dosis efectiva o biodisponible, con relacin a la dosis marcada en la etiqueta. Solamente un frmaco que es absorbido completamente hacia la circulacin general tiene una dosis biodisponible igual a la dosis administrada. En la prctica, esto generalmente se observa nicamente despus de administracin intravenosa, por todas las dems vas, la cantidad de frmaco que alcanza la circulacin es menor a la dosis administrada. Es importante para el formulador, el farmaclogo y l medico conocer la biodisponibilidad del frmaco proveniente de un medicamento, ya que esta caracterstica tiene influencia directa en el inicio y controla la intensidad y duracin del efecto farmacolgico deseado.
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Un conocimiento de la velocidad de absorcin es de importancia especial cuando se tratan condiciones agudas tales como ataques de asma o shocks hiperglicmicos, en los que se requiere de una accin inmediata. Por otro lado, hay ocasiones en que se requiere de un inicio retardado o una respuesta menos intensa con objeto de evitar efectos secundarios indeseables como es el caso de ciertos antihipertensivos. Otra aplicacin en la cual es de importancia la velocidad de absorcin es para el caso de medicamentos de liberacin controlada o retardada en donde se desea una duracin de accin ms larga. La cantidad total de frmaco absorbido es generalmente de mayor importancia en el tratamiento de enfermedades crnicas y subcrnicas como diabetes, hipertensin y reumatismo. Para estas condiciones se prescribe un rgimen de administracin mltiple y la acumulacin del frmaco en el cuerpo es un factor importante en el diseo de un apropiado rgimen de dosis para el paciente.

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