Você está na página 1de 37

JOS FARIAS DOS SANTOS FILHO

POLINIZAO E BIOLOGIA REPRODUTIVA DE TRS ESPCIES DO GNERO Acianthera Scheidw. (ORCHIDACEAE) EM FLORESTA OMBRFILA MISTA
Dissertao apresentada como requisito parcial obteno do grau de Mestre em Ecologia e Conservao, Curso de PsGraduao em Ecologia e Conservao, Setor de Cincias Biolgicas, Universidade Federal do Paran. Orientadora: Prof. Dra. Isabela Galarda Varassin

CURITIBA 2007

II

Agradecimentos

Agradeo a todas as pessoas que no s durante estes dois anos me ajudaram de uma forma direta ou indireta na realizao deste trabalho, mas desde um processo que se comeou na poca de graduao e veio refletir neste momento. Facilmente cometerei a injustia de esquecer algum, minha memria sempre me prega peas, mas estas pessoas, assim como as citadas aqui, tm o reconhecimento delas guardadas comigo e, sero lembradas em vrias ocasies da minha vida. Comeando, agradeo a minha orientadora, Professora Dra Isabela Galarda Varassin, pela confiana depositada em mim, um farmacutico perdido no que queria fazer da vida, e que gostava de Biologia. Gostaria de agradecer a ela, por todos os auxlios que me deu, sempre que eu precisei, na forma de conselhos, tardes na frente do microscpio de epifluorescncia e, muitas vezes, na forma de artigos, que sempre tiraram as minhas dvidas, me deram segurana e novas idias. Grande parte deste trabalho eu devo a ela. Com muito carinho agradeo ao Professor Dr. Slvio Sanchez Veiga pelos conselhos, pelas oportunidades e pela amizade. Gostaria de agradecer a pacincia e a didtica do Professor Dr. Marcelo Aranha em todas as vezes que fui tirar minhas dvidas de Ecologia bsica, desta forma, devo a ele, minha passagem na seleo de mestrado. Ao Professor Dr. Albino Sakakibara pela pacincia dispensada e pelas timas fotos dos insetos. No poderia esquecer a simpatia contagiante e o carinho da Professora Dra. Danncia Urban que gentilmente me cedeu sua lupa e a mquina fotogrfica para fazer o registro fotogrfico dos insetos. Ao Diretor do Departamento de zoolgicos de Curitiba, Marcos Elias Traad por permitir que eu fizesse minhas observaes focais no bosque do zoolgico. Aos funcionrios

III do Zoolgico: lvaro, Batatinha, Tamandar e tantos outros que mostraram curiosidade pelo meu trabalho e se tornaram grandes amigos. professora Dra. Luciane Marinoni e ao Professor Dr. Cludio Jos Barros de Carvalho pela identificao de Diptera. Ao Professor Dr. Dalton Amorin (Universidade de So Paulo) pela identificao do material de Sciaridae. Ao Professor Dr. ngelo Pires do Prado (Dep. Parasitologia, UNICAMP) pela identificao do material de Phoridae. Maria Luiza Bauer (Instituto Oswaldo Cruz) pela identificao do material de Ceratopogonidae, e ao Professor Dr. Carlos Roberto Ferreira Brando (Museu de Zoologia da Universidade de So Paulo) pela identificao do material de Formicidae. Aos membros da pr-banca (Professor Dr. Eduardo Borba e Professor Dr. Leandro Freitas) pelas timas sugestes para melhorar a dissertao. Agradeo as minhas mes e ao meu pai, por sempre me apoiarem nos caminhos que decido trilhar. Sou muito grato a Jorge Bizarro e Thiago Bevilaqua pela ajuda em preparar as figuras, e aos irmos Jean Vitulle, Luciano Wolff e Ricardo de Campo Leinig pelas palavras de apoio e a grande amizade. Agradeo aos companheiros de turma (Luciano, Fbio, Kak, Csar, Renato, Germinal, Rodrigo, as Aninhas, Carlos, Andr, Bianca, Cssio, Marja, Renato), assim como o Antnio, pelos grandes momentos e pela amizade adquirida no decorrer do curso, que sem dvida, ser duradoura.

IV SUMRIO

LISTA DE FIGURAS E TABELAS......................................................................................... V Resumo....................................................................................................................................... 1 Mtodos...................................................................................................................................... 5 rea de estudo e espcies estudadas ...................................................................................... 5 Biologia floral e polinizao .................................................................................................. 6 Biologia reprodutiva .............................................................................................................. 7 Resultados .................................................................................................................................. 8 Morfologia floral, antese e produo de odores .................................................................... 8 Visitantes florais ................................................................................................................... 14 Biologia reprodutiva e taxa de frutificao ......................................................................... 19 Referncias Bibliogrficas ....................................................................................................... 28 Anexos Instruo aos autores Plant Biology

V LISTA DE FIGURAS E TABELAS

Figura 1: Perodo de florao de A. aveniformis (Aa), A.hygrophila (Ah) e A.sonderana (As), com as variaes de temperatura mdia mensal (linha contnua) e precipitao mensal (linha pontilhada) do perodo de julho de 2005 a julho de 2006. Dados climatolgicos de julho de 2005 a julho de 2006 do Simepar-PR................................................................... 6 Figura 2: Indivduos em florao de (a) A. aveniformis. (b) A. hygrophila. (c) A. sonderana. Escalas: 10mm.................................................................................................................. 11 Figura 3: Vista lateral das flores de (a) A. aveniformis; (b) A. hygrophila; (c) A. sonderana. Esquerda: flores com todas as peas do perianto. Direita: (a) flor com spalas laterais, spala distal e ptalas laterais retiradas; (b, c) flores com uma spala lateral e uma ptala lateral retiradas. Escala: 1mm .......................................................................................... 12 Figura 4: Eletromicrografias (a) da regio de insero entre o labelo e a coluna de A. hygrophila (seta pequena: calo da base do labelo, seta grande: regio com tricomas no p da coluna); (b) do labelo de A. sonderana (seta: regio central do labelo com superfcie diferenciada rica em tricomas). Escalas: 100m.............................................................. 13 Figura 5: Polinizadores das espcies de Acianthera estudadas: (a): Bradysia sp.1 (Sciaridae); com polinrio de A. aveniformis. (b): Zygoneura sp. (Sciaridae); polinizador mais frequente de A. hygrophila. (c): Atrichopogon sp. (Ceratopogonidae); com polinrio de A. hygrophila. (d): Megaselia sp. (Phoridae) com polinrio de A. sonderana (e) Conicera sp. (Phoridae); com polinrio de A. sonderana. Escala: 0,5mm. ........................................... 18 Figura 6: Acompanhamento dos frutos formados no tratamento de polinizao cruzada (20 flores) em A. aveniformis, A. hygrophila e A. sonderana. (frutos): Frutos formados no tratamento de polinizao cruzada; (herb): Frutos perdidos por herbivoria; (ene): frutos enegrecidos e abortados sem ser identificada a causa (desc): frutos perdidos sem ser observada a causa; (sem): Frutos que liberaram sementes. ............................................. 19 Figura 7: Crescimento dos tubos polnicos em A. sonderana 15 dias aps a polinizao (a, b) e em flores abortadas de A. aveniformis (c,d). (a,c) Autopolinizao manual. (b,d) Polinizao cruzada. Observe crescimento menor dos tubos polnicos em (a) e malformaes nos tubos polnicos em (c). Escala: 0,5mm. ............................................. 21

Tabela 1: Percentual de formao de frutos em A. aveniformis, A. hygrophila e A. sonderana em polinizaes experimentais e em condies naturais. ................................................ 19

Resumo

A polinizao e a biologia reprodutiva de Acianthera aveniformis (Hoehne) C.N.Gon. & Waechter, A. hygrophila (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase. e A. sonderana (Rchb.f.) Pridgeon & M.W.Chase, foram estudadas em um fragmento de Floresta Ombrfila Mista, Curitiba, Paran, Brasil. Acianthera aveniformis e A. sonderana possuem a articulao do labelo e a base da coluna formando um ngulo aproximado de 45, enquanto que em A. hygrophila este ngulo de aproximadamente 90. As trs espcies produzem odores e recompensas florais, e foram polinizadas por espcies de Diptera. Em A. aveniformis, foi registrado Bradysia sp (Sciaridae). Em A. hygrophila foram registrados Zygoneura sp. (Sciaridae) e Atrichopogon sp. (Ceratopogonidae), enquanto que em A. sonderana a polinizao foi realizada por Megaselia sp e Conicera sp. (Phoridae). As trs espcies foram auto-incompatveis. Em A. sonderana os tubos polnicos dos testes de autopolinizaes cresceram mais lentamente que os de polinizao cruzada, e em A. aveniformis foi observado malformaes com aumento de deposio de calose dos tubos polnicos em flores de tratamentos de autopolinizao. A taxa de formao de frutos variou de 0,2% a 1,5%, o que pode estar relacionado baixa freqncia de visitas dos polinizadores, mas tambm pode ser decorrente de uma baixa constncia dos polinizadores e da perda de polneas em eventos de autopolinizaes.

Abstract

The pollination and the reproductive biology of Acianthera aveniformis (Hoehne) C.N.Gon. & Waechter., A. hygrophila (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase. and A. sonderana (Rchb.f.) Pridgeon & M.W.Chase. were studied in an Atlantic mixed forest (Araucaria forest) fragment in Curitiba, Parana, Brazil. Acianthera aveniformis and A. sonderana has the junction of the lip and the column foot forming close to a 45 angle, while in A. hygrophila this angle is about 90. The three species produced smell and floral resources, and were pollinated by flies. In A. aveniformis, Bradysia sp (Sciaridae) was recorded. In A. hygrophila, Zygoneura sp. (Sciaridae) and Atrichopogon sp. (Ceratopogonidae) were reported, while in A .sonderana the pollination was achieved by Megaselia sp and Conicera sp. (Phoridae). The three species were self-incompatible. In A. sonderana pollen tubes from self-pollinations grew slower than that from cross-pollinations, and in A. aveniformis anomalous pollen tubes growth with increased callose deposition was observed in flowers from self-pollinations. The fruit set ranged from 0,2% to 1,5%, which may be related to the low frequency of the pollinators, but also may be due to a low constancy of pollinators and to the pollinaria loss in self-pollination events.

Introduo1

A famlia Orchidaceae uma das maiores famlias das angiospermas. Estimativas apontam aproximadamente 19.000 espcies (Dressler, 1993). Esta famlia possui grande diversidade morfolgica que, supostamente, resultado da relao entre as orqudeas e seus polinizadores (van der Pijl e Dodson, 1969; Endress, 1994). Apesar das abelhas serem os mais freqentes polinizadores das orqudeas, vrios outros insetos e algumas poucas aves tambm atuam como polinizadores (van der Pijl e Dodson, 1969). Os dpteros so o segundo maior grupo de polinizadores em orqudeas (van der Pijl e Dodson, 1969; Christensen, 1994). Embora a ordem Diptera tenha uma grande importncia na polinizao das orqudeas, poucos estudos tm focado este assunto, e a maioria dos trabalhos, so embasados em observaes casuais, ou feitos em casas de vegetao. Isto decorrente da reputao dos dpteros como polinizadores pouco efetivos e inconstantes (van der Pijl e Dodson, 1969; Chase, 1985; Christensen, 1994). No entanto, alguns estudos, sugerem especificidade em algumas espcies polinizadas por dptera (Manning e Goldblatt 1997; Borba e Semir, 1998, 2001). Na famlia Orchidaceae, a autocompatibilidade parece ser comum, e a polinizao cruzada garantida por barreiras pr-polinizao, como mecanismos florais associados ao comportamento dos polinizadores (Dressler, 1968, 1993; van der Pijl e Dodson, 1969; Borba e Semir, 1999). Apesar disso, espcies de orqudeas podem desenvolver barreiras genticas quando polinizadas por grupos de insetos que costumam permanecer por muito tempo nas inflorescncias promovendo eventos de autopolinizao (auto- e geitonogamia) (Christensen, 1992; Borba e Semir, 2001; Borba et al., 2001a; Pansarin, 2003).

Texto formatado segundo normas da revista Plant Biology

4 A subtribo Pleurothallidinae basicamente polinizada por Diptera, embora existam poucos casos de polinizao por beija-flores (Dressler, 1993). Porm, apesar do seu grande nmero de espcies (aproximadamente 4000), poucos registros de polinizao e biologia reprodutiva neste grupo so conhecidos (Dodson, 1962; van der Pijl e Dodson, 1969; Chase, 1985; Christensen, 1992, 1994; Dressler, 1993; Singer e Coccuci, 1999; Borba e Semir, 2001; Blanco e Barboza, 2005; Albores-Ortiz e Sosa, 2006; Ribeiro et al, 2006). Estudos com algumas espcies do gnero Acianthera em ambiente de campos rupestres mostram especificidade na relao planta polinizador, auto-incompatibilidade total e parcial e uma alta variao gentica nas populaes (Borba e Semir, 2001; Borba et al., 2001a , 2001b), o que sugere que a auto-incompatibilidade pode ser um mecanismo importante para a manuteno da variabilidade gentica em espcies cujo polinizador promove um grande nmero de eventos de autopolinizao. Em regies de floresta ombrfila mista, h o registro da polinizao de Acianthera luteola (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase por Megaselia sp. (Dptera) (Singer e Coccuci, 1999), e nenhum registro de biologia reprodutiva neste gnero. Neste trabalho a polinizao e a biologia reprodutiva de Acianthera aveniformis, A. hygrophila e A. sonderana, foram estudadas em um fragmento urbano de floresta ombrfila mista, com o objetivo de investigar se a relao j observada em ambiente de Campos Rupestres, entre o sistema reprodutivo e o comportamento dos polinizadores (Borba e Semir 2001; Borba et al., 2001a), se mantm nesta formao florestal.

5 Mtodos

rea de estudo e espcies estudadas

O estudo de campo foi realizado no Bosque do Zoolgico de Curitiba, um remanescente de Floresta Ombrfila Mista, com florestas ribeirinhas dominadas por Sebastiania

commersoniana (Baillon) L.B.Sm. & R.J.Downs (Euphorbiaceae), nas reas alagadas pelo rio Iguau e por lagoas artificiais construdas prximas ao rio (observao pessoal). Este bosque est localizado na regio sudeste da cidade de Curitiba (253335S; 491405W) e situado dentro do Parque Natural Municipal do Iguau. Observaes adicionais em A. sonderana foram realizadas em plantas cultivadas na regio urbana da mesma cidade (252523 S; 491659 W). O clima da regio, segundo a classificao de Kppen, do tipo Cfb (Kppen, 1948), com temperatura mdia anual de 16,5C, sem deficincia hdrica. O ms mais chuvoso janeiro, com 190 mm de precipitao e o menos chuvoso agosto com 78,2 mm. A precipitao anual de 1451,8mm (Maack, 1981). As espcies estudadas possuem hbito epiftico, ocorrendo em simpatria na rea de estudo, porm sem sobreposio no perodo de florao (observao pessoal) (Figura 1). Acianthera aveniformis e A. sonderana ocorre geralmente em locais mais expostos luz, principalmente na borda da mata, clareiras e galhos mais altos, e A. hygrophila geralmente encontrada meia sombra. As trs espcies so comuns na rea de estudo e, A. sonderana e A. hygrophila esto entre as mais representativas epfitas vasculares da Bacia do Alto Iguau (Kersten, 2006). O material testemunho foi depositado no Herbrio do Departamento de Botnica da Universidade Federal do Paran (UPCB), A. aveniformis: UPCB 55341, A. hygrophila: UPCB 55338 e A. sonderana: UPCB 55342.

Temperatura mdia (C)

25 20 15 10 5 0 jul ago set out nov dez jan fev mar abr mai jun jul
Aa As Ah

250 200 150 100 50 0 Precipitao (mm)

Figura 1: Perodo de florao de A. aveniformis (Aa), A.hygrophila (Ah) e A.sonderana (As), com as variaes de temperatura mdia mensal (linha contnua) e precipitao mensal (linha pontilhada) do perodo de julho de 2005 a julho de 2006. Dados climatolgicos de julho de 2005 a julho de 2006 do Simepar-PR. Biologia floral e polinizao

Para a descrio da morfologia floral e regio secretora de nctar, flores frescas e flores conservadas em FAA foram observadas em microscpio esteroscpio tico acoplado a cmara clara. Para observao em microscpio eletrnico de varredura JEOL JSM-5410, flores conservadas em lcool 70% ou FAA foram submetidas a uma srie acetnica, desidratadas vcuo em secador a ponto crtico por cinco minutos e cobertas com ouro-paldio por 4,5 minutos. A presena de nctar nas flores foi avaliada mergulhando 10 labelos (10 colunas, no caso de A. hygrophila) em uma gota de gua destilada, e ento, foi utilizado glicofita Diastix (modificado de Kearns e Inouye, 1993). Na deteco de leos nas flores de A. hygrophila, cortes finos do labelo e coluna foram mergulhados em soluo Sudan III e ento observados em microscopia tica (Foster, 1949). Para a deteco de osmforos, foi utilizada soluo aquosa de vermelho neutro 1:10.000 (Vogel, 1963), precedido de testes de concentrao de odor, onde flores foram colocadas em um recipiente fechado por 20 minutos para deteco olfativa de volteis (Dafni, 1992).

7 Para identificao dos polinizadores, foi empregado o mtodo de observao focal (Dafni, 1992). Para A. aveniformis foram realizadas dez observaes focais no perodo de 25 de agosto a 23 de setembro de 2005 e duas no perodo de 14 de agosto a 17 de agosto de 2006 perfazendo um total de 31,5 horas. Em A. higrophyla foram realizadas quatro observaes focais no perodo entre 7 e 12 de junho de 2005 e seis entre 6 e 16 de junho de 2006 em um total de 33,5 horas. Para A. sonderana foram realizados observaes focais nos dias 8 e 13 de maro de 2005 e oito no perodo entre 10 e 31 de maro de 2006 em um total de 33 horas de observao. As observaes foram realizadas nos perodos das 8:00 s 16:00h para A. hygrophila e A. sonderana e das 9:00 s 14:00h para A. aveniformis. Concomitantemente, foram registradas as variaes de temperatura e umidade do ar com auxlio de termo-higrmetro. O comportamento dos insetos nas flores foi registrado, os insetos foram coletados, montados com alfinetes entomolgicos e enviados para identificao e, ento, depositados na Coleo Entomolgica Pe. Jesus Santiago Moure, em Curitiba; na Coleo de Referncia da Coleo de Ceratopogonidae do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro (material de

Ceratopogonidae), e no museu de Zoologia da USP (material de Sciaridae).

Biologia reprodutiva

Para determinao do sistema reprodutivo, foram realizados os experimentos de polinizao cruzada e autopolinizao manual em 6 indivduos para A. hygrophila e A. aveniformis, e em 5 indivduos para A. sonderana , totalizando 20 flores (entre um e trs dias de antese) para cada tratamento. Os tratamentos foram realizados na primeira flor da inflorescncia para A. aveniformis e A. sonderana. Em A. hygrophila foram realizados no mximo dois cruzamentos por inflorescncia, a ordem dos tratamentos de polinizao cruzada e autopolinizao manual

8 na haste floral e as flores utilizadas no foram padronizados nesta espcie. Foram considerados frutos formados aqueles contabilizados um ms aps a realizao dos tratamentos, e o nmero de frutos que liberaram sementes foi acompanhado. Tambm, 10 indivduos de cada espcie foram acompanhados para medir a formao de frutos em condies naturais, e os frutos formados foram acompanhados por visitas quinzenais. Na espcie mais abundante, A. sonderana, foi acompanhado o crescimento dos tubos polnicos em autopolinizaes e polinizaes cruzadas 12 e 24 horas, 3, 5, 7, 10, 13 e 15dias aps o tratamento. Em A. aveniformis o crescimento dos tubos polnicos foi acompanhado em flores abortadas do tratamento de autopolinizao (4 flores) e do tratamento de polinizao cruzada (1 flor). As amostras foram fixadas em FAA, e posteriormente tratadas com NaOH 9N a 50C por 40 minutos, lavadas em gua destilada, coradas com azul de anilina e observadas em microscopia de epifluorescncia (modificado de Martin, 1959).

Resultados Morfologia floral, antese e produo de odores

Acianthera

aveniformis

possui

inflorescncia

terminal

ereta

contendo

uma

flor,

e menos freqentemente duas flores. As flores so ressupinadas, castanho-amareladas com linhas longitudinais prpuras, pndulas, com aproximadamente 9 mm de comprimento (Figura 2a). A spala dorsal ereta, elptica, aguda, geralmente contendo trs linhas prpuras, com aproximadamente 8 mm de comprimento e 2,5 mm de largura. As spalas laterais so eretas unidas na base, com uma gibosa na base, normalmente recurvadas no pice, geralmente com trs linhas longitudinais prpuras, e possuem aproximadamente 8 mm de comprimento e 2 mm de largura cada. As ptalas laterais so eretas, elpticas, oblongas, um pouco assimtricas, com 6 mm de comprimento e 2 mm de largura. O labelo articulado ao p da

9 coluna em um ngulo de aproximadamente de 50, trilobado, com pice truncado, de aproximadamente 7 mm de comprimento e 1 mm de largura. A coluna prolongada basalmente em um p (Figura 3a). O polinrio composto de duas polneas cerosas prolongadas em curtas caudculas. O rostelo laminar, mvel, cobrindo toda a extenso do estigma. O estigma cncavo, inteiro. As flores ficam em antese por 4 a 7 dias e produzem um forte odor desagradvel espermtico no fim da manh e primeiras horas da tarde. A superfcie adaxial da parte distal do labelo cora-se intensamente ao vermelho neutro. Acianthera hygrophila possui inflorescncia terminal pndula, tipo racemo, podendo ter de trs a nove flores ressupinadas, creme esverdeadas, com aproximadamente 8 mm de comprimento (Figura 2b). A spala dorsal ereto-patente, elptica, aguda, de aproximadamente 7 mm de comprimento e 1,5mm de largura. As spalas laterais so eretopatentes, unidas, freqentemente livres no pice, com 5mm de comprimento e 1 mm de largura cada. As ptalas laterais so eretas, lanceoladas, agudas, de aproximadamente 5 mm de comprimento e 2 mm de largura. O labelo articulado ao p da coluna em um ngulo aproximado de 90, trilobado, obtuso, com aproximadamente 4 mm de comprimento e 1mm de largura (Figura 3b), apresentando um pequeno calo de colorao castanho-amarelada na base. A coluna possui apndices laterais e ornamentada na regio da antera prolongada basalmente em um p. O polinrio composto de duas polneas cerosas prolongadas em curtas caudculas. O rostelo laminar, mvel. O estigma cncavo e inteiro. As flores ficam em antese por 9 a 13 dias, no foi detectada emisso de odores em campo, mas em flores acondicionadas dentro de um recipiente por vinte minutos, nas ltimas horas da manh, foi notado um odor adocicado. As ptalas laterais, a face adaxial da parte distal do labelo e as margens dos lobos laterais do labelo, coram-se ao vermelho neutro. Acianthera sonderana possui inflorescncia terminal ereta, tipo racemo, podendo ter de uma a cinco flores amarelo alaranjadas, ressupinadas, eretas ou pndulas, um pouco

10 tubulares, com aproximadamente 7 mm de comprimento (Figura 2c). A spala dorsal ereta, elptica, aguda, com aproximadamente 5,5mm de comprimento e 2 mm de largura. As spalas laterais so eretas, unidas e freqentemente livres no pice, agudas, com aproximadamente 4,5 mm de comprimento e 1 mm de largura cada. As ptalas laterais so espatuladas, agudas, com aproximadamente 3 mm de comprimento e 1 mm de largura. O labelo articulado ao p da coluna em um ngulo aproximado de 45, sendo levemente trilobado com lobos laterais espiniformes, com aproximadamente 2,5 mm de comprimento e 1mm de largura (Figura 3c). A coluna possui apndices laterais, e prolongada basalmente em um p. O polinrio composto de duas polneas cerosas prolongadas em curtas caudculas. O rostelo laminar, mvel. O estigma cncavo e inteiro. As flores ficam em antese de 20 a 31dias, e produzem um fraco odor laranja passada, nas horas mais quentes do dia. A superfcie adaxial da parte distal do labelo cora-se ao vermelho neutro.

11

Figura 2: Indivduos em florao de (a) A. aveniformis. (b) A. hygrophila. (c) A. sonderana. Escalas: 10mm

12

Figura 3: Vista lateral das flores de (a) A. aveniformis; (b) A. hygrophila; (c) A. sonderana. Esquerda: flores com todas as peas do perianto. Direita: (a) flor com spalas laterais, spala distal e ptalas laterais retiradas; (b, c) flores com uma spala lateral e uma ptala lateral retiradas. Escala: 1mm

13 Recompensa floral Todas as trs espcies estudadas oferecem recompensa aos polinizadores. Em A. aveniformis foi observado um filme fino de nctar em uma regio bem delimitada na base do labelo, identificado pela anlise com glicofita. Em A. hygrophila foram observadas duas regies ricas em tricomas, aparentemente unicelulares, uma na base do labelo, na forma de um pequeno calo e outra no p da coluna (Figura 4a), nesta ltima regio foi observada um lquido que escorre para a regio basal do labelo. Este lquido quando analisado na coluna, reage com a glicofita. Em A. sonderana foram observadas pequenas gotculas na regio mediana do labelo, com o aumento da quantidade medida que se aproxima da base, nesta espcie foi confirmada a presena de nctar com a glicofita. Quando observada em microscopia eletrnica, esta regio do labelo diferenciada, rica em tricomas (Figura 4b). A base do p da coluna apresentou uma regio rica em tricomas de colorao violcea escura.

Figura 4: Eletromicrografias (a) da regio de insero entre o labelo e a coluna de A. hygrophila (seta pequena: calo da base do labelo, seta grande: regio com tricomas no p da coluna); (b) do labelo de A. sonderana (seta: regio central do labelo com superfcie diferenciada rica em tricomas). Escalas: 100m.

14 Visitantes florais

Em A. aveniformis foram observadas casualmente formigas Crematogaster sp. e dpteros das famlias Cecidomyidae e Sciaridae. As visitas de formigas s flores de A. aveniformis dependeram, aparentemente, da ocorrncia de colnias desses insetos nas proximidades. Estes insetos buscavam recursos entrando na cavidade formada entre o labelo e a coluna, forrageando na base do labelo. No foi observada remoo de polinrio por formigas. Um indivduo da famlia Cecidomyidae visitou vrias flores, buscando recursos na base do labelo, mas no houve remoo de polinrio. Bradysia sp1 (Sciaridae), foi tambm observado casualmente uma vez, o inseto visitou vrias flores, libava a parte distal do labelo e, quando se dirigia para o interior da flor, o inseto escorregava sem conseguir alcanar a base do labelo. Nas observaes focais em A. aveniformis, foram observadas formigas Pseudomyrmex sp., e um indivduo de Bradysia sp1 (Sciaridae). Pseudomyrmex sp. teve um comportamento semelhante s outras formigas observadas casualmente. Um indivduo de Bradysia sp1 foi observado carregando polinrio, no intervalo entre 11:00 e 12:00 horas, com uma frequncia de 0,1 visitas/hora por planta neste intervalo (Figura 5a). O inseto libava a extremidade do labelo de uma flor de A. aveniformis, sendo coletado em seguida sem observaes adicionais de seu comportamento. Os dois indivduos de Bradysia sp1 eram fmeas, e no foi observado comportamento de oviposio nas flores. Apesar da baixa freqncia de polinizadores, era comum observar flores com polinrio deslocado (resultado no quantificado). Em A. higrophyla, foram observadas visitas de insetos de vrias famlias de Dptera: Sciaridae, Drosophilidae, Tachinidae, Muscidae, Phoridae, Chloropidae, Culicidae e Ceratopogonidae, e em duas ocasies foi observado moscas provavelmente Calliphoridae visitando esta espcie. Foram observadas duas visitas de uma espcie da famlia Hybotidae, que aparentemente no buscava recursos nas flores. As visitas ocorreram principalmente entre

15 as 09:00 e 13:00h. Em um evento foi observado um indivduo de Drosophilidae ser preso pelo labelo tendo que forar deixar a flor, mas no houve retirada do polinrio. Dpteros pequenos, como Phoridae e uma espcie de Chloropidae, saram da cavidade formada entre o labelo tambm sem deslocar o polinrio. Insetos maiores como moscas Muscidae, Tachinidae e provavelmente Calliphoridae visitavam vrias flores, aparentemente conseguindo obter recursos. Fomigas de duas espcies no identificadas foram observadas casualmente visitando as flores de A. higrophyla em busca de recursos, com comportamento semelhante aos das formigas que visitaram A. aveniformis. Apesar da variedade de famlias de dptera entre os visitantes florais desta espcie, apenas dpteros Sciaridae e Ceratopogonidae deslocaram o polinrio. Da primeira famlia foram observadas duas espcies, Bradysia sp2 foi observado em apenas uma ocasio, no intervalo entre 10:00 e 11:00 horas, em uma freqncia de 0,16 visitas/hora por planta neste intervalo. O inseto carregava o polinrio e visitou algumas flores libando at a parte mediana do labelo, sem alcanar a base. Ele realizava curtos vos trocando de haste floral e de flores, muitas vezes tocando as pernas nas peas florais enquanto voava de uma flor a outra, o inseto foi coletado sem observaes adicionais de seu comportamento. Zygoneura sp1, foi observado em quatro ocasies, duas destas em observaes ocasionais, e em todas as observaes desta espcie, o inseto transportava ou deslocou polinrios (Figura 5b). Nas observaes focais, as visitas de Zygoneura sp1 ocorreram nos intervalos entre 11:00 e 12:00 horas e entre 12:00 e 13:00 horas, com freqncias de 0,2 e 0,33 visitas/hora por planta para cada intervalo respectivamente. Em uma das visitas foi observada deposio de polinrio no estigma; a flor foi acompanhada, mas no gerou fruto. Nas duas vezes em que foi observada a aproximao do inseto planta, ele chegou pousando na parte abaxial de uma folha, caminhou pela folha at atingir a haste floral, onde o inseto pode visitar algumas flores sem atingir a base do labelo, e mudar de haste floral atravs de vos curtos. Ao entrar na flor alcanando as

16 proximidades da base do labelo, o labelo moveu-se lentamente em direo coluna, o escutelo do dptero entrou em contato com o rostelo, podendo o inseto ficar preso flor por 5 a 25 minutos e, ao forar para sair da flor, o inseto deslocou o polinrio junto com o capuz da antera. O dptera tentou remover o polinrio do escutelo com movimentos das asas, mas em seguida continuou a forragear nas flores. A reteno do capuz da antera dificulta o inseto a libar at o interior da flor e o mesmo deixou a planta em aproximadamente 10 minutos aps a remoo do polinrio. Em outra ocasio, o inseto ao deslocar o polinrio, caiu da flor e se afastou da planta. Os dois indivduos de Zygoneura sp1 coletados eram fmeas, e a visita destes insetos planta pode durar at 50 minutos. Atrichopogon sp. (Ceratopogonidae) foi observado em duas ocasies em um mesmo dia de observao focal, nos intervalos entre 8:00 e 9:00 horas e entre 11:00 e 12:00 horas, com freqncias de 0,5visitas/ hora por planta e 0,2 visitas/hora por planta respectivamente para cada intervalo (Figura 5c). O inseto se aproximou da planta pousando sobre a inflorescncia ou sobre folhas de A. hygrophila, podendo ficar parado por vrios minutos antes de forragear nas flores. Este se moveu lentamente na inflorescncia, libando ptalas e spalas at atingir o labelo, quando ele se aproximou da base do labelo, o labelo moveu-se lentamente em direo a coluna, aprisionando o inseto na cavidade formada, o rostelo entrou em contato com o escutelo do dptero, que ao deixar a flor, deslocou o polinrio junto com o capuz da antera. Em uma das duas ocasies observadas, Atrichopogon sp. saiu da flor sem deslocar o polinrio e deixou a planta em seguida. Os dois indivduos de Atrichopogon sp. observados eram machos. Nas observaes de A. sonderana na rea de estudo, foi registrada uma visita de um dptero da famlia Chloropidae e de formigas Pheidole sp. e, ocasionalmente, uma espcie de formiga no identificada. O dptero visitou vrias flores buscando recursos na base do labelo, aparentemente, a pequena altura do inseto impediu a remoo do polinrio, pois este saa da

17 flor sem ficar preso entre o labelo e a coluna. O comportamento das formigas em A. sonderana foi semelhante ao descrito para as formigas que visitaram A. aveniformis, e nenhum dos visitantes florais observados na rea de estudo carregavam ou deslocaram polinrios. Porm, a atividade de polinizadores foi registrada em observaes casuais em plantas cultivadas em jardins na zona urbana. Neste caso, os polinizadores foram dpteros Megaselia sp. e Conicera sp. (Phoridae), e foram observados em seis ocasies (trs observaes de cada espcie) no perodo das 12:00-15:00h (Figura 5d,e). Os insetos pousavam na inflorescncia ou nas folhas da planta e caminhavam at as flores utilizando a haste floral, e com movimentos rpidos circulavam o eixo floral at libarem o labelo. Quando o inseto subia no labelo, ele forava o mesmo para baixo e, medida que ele se aproximou da base, o labelo retornava a sua posio original prendendo o inseto por cerca de 3 minutos. O inseto forava para sair da flor tocando o rostelo com o escutelo, removendo o polinrio e o capuz da antera. Nos dois eventos em que foi observada a retirada do polinrio, o dptero deixou a planta carregando consigo o capuz da antera.

18

Figura 5: Polinizadores das espcies de Acianthera estudadas: (a): Bradysia sp.1 (Sciaridae); com polinrio de A. aveniformis. (b): Zygoneura sp. (Sciaridae); polinizador mais frequente de A. hygrophila. (c): Atrichopogon sp. (Ceratopogonidae); com polinrio de A. hygrophila. (d): Megaselia sp. (Phoridae) com polinrio de A. sonderana (e) Conicera sp. (Phoridae); com polinrio de A. sonderana. Escala: 0,5mm.

19

Biologia reprodutiva e taxa de frutificao

Ocorreu uma variao entre as espcies de 35% a 70% de frutos formados nos tratamentos de polinizao cruzada, e nenhum fruto foi formado nas autopolinizaes. A frutificao em condies naturais foi muito baixa, variando de 0,2% a 1,51% (Tabela 1), sendo reduzido para para 0,16% a 0,65% considerando os frutos que chegaram a liberar sementes. O acompanhamento dos frutos formados nos tratamentos de polinizao cruzada mostra perdas de frutos, principalmente em A. aveniformis e A. hygrophila (Figura 6). Tabela 1: Percentual de formao de frutos em A. aveniformis, A. hygrophila e A. sonderana em polinizaes experimentais e em condies naturais. PC%a A. aveniformis A. hygrophila A. sonderana
a

AM%b 0 (20) 0 (20) 0 (20)

C%c 1.51 (464) 0.41 (1210) 0.2 (993)

35 (20) 60 (20) 70 (20)

Tratamento de polinizao cruzada; b Tratamento de autopolinizao manual; c Condies naturais. Nmero entre parnteses indica o nmero de flores acompanhadas em cada ensaio e em condies naturais.

16 14 12 10 8 6 4 2 0 frutos herb ene desc sem

n de frutos

A. aveniformis A. hygrophila A. sonderana

Figura 6: Acompanhamento dos frutos formados no tratamento de polinizao cruzada (20 flores)
em A. aveniformis, A. hygrophila e A. sonderana. (frutos): Frutos formados no tratamento de polinizao cruzada; (herb): Frutos perdidos por herbivoria; (ene): frutos enegrecidos e abortados sem ser identificada a causa (desc): frutos perdidos sem ser observada a causa; (sem): Frutos que liberaram sementes.

20 Na observao do crescimento de tubos polnicos, em tratamentos de autopolinizaes, no foram observados tubos polnicos alcanando o ovrio para todas as espcies analisadas. Em flores fenescidas de tratamentos de autopolinizao e polinizao cruzada em A. aveniformis, foram observadas malformaes nos tubos polnicos com aumento na deposio de calose nos tratamentos de autopolinizao (Figura 7c), enquanto que tubos polnicos normais foram observados na flor fenescida proveniente de polinizao cruzada (Figura 7d). O crescimento dos tubos polnicos em polinizaes cruzadas e em autopolinizaes manuais em A. sonderana foi distinto, sendo registrada uma taxa de crescimento reduzido nos tratamentos de autopolinizao manual, os quais no avanaram mais que dois teros do tecido de transmisso do estilete. No foram observadas malformaes com aumento de deposio de calose nos tubos polnicos em A.sonderana (Figura 7a). Em A. sonderana, nos tratamentos de polinizao cruzada foi observada a entrada dos tubos polnicos no ovrio 10 dias aps o tratamento, embora no tenha ocorrido fecundao de vulos durante perodo observado (Figura 7b). Nesta espcie foi observado aborto das flores entre 10 a 15 dias aps o tratamento de autopolinizao.

21

Figura 7: Crescimento dos tubos polnicos em A. sonderana 15 dias aps a polinizao (a, b) e em flores abortadas de A. aveniformis (c,d). (a,c) Autopolinizao manual. (b,d) Polinizao cruzada. Observe crescimento menor dos tubos polnicos em (a) e malformaes nos tubos polnicos em (c). Escala: 0,5mm.

22 Discusso Os dpteros so o segundo mais importante grupo de polinizadores, embora a maioria deles no seja dependente das flores para obteno de recursos (Endress, 1994). A maior parte destes insetos (com exceo das famlias Syrphidae, Bombyliidae, Tachinidae e Nemestrinidae) considerada ineficiente devido ao seu comportamento inconstante (Faegri e van der Pijl, 1979; Christensen, 1994). Pequenos dpteros so limitados pelo seu tamanho, no podendo desta forma transportar grandes quantidades de plen (Faegri e van der Pijl, 1979). Entretanto, Mesler et al. (1980) reportam eficincia de dpteros Sciaridae e Mycetophilidae na polinizao de Listeria cordata (L.) R.Br. (Orchidaceae) e Scoliopus bigelovii Torr. (Liliaceae), devido a um grande nmero de visitas destes insetos. Dpteros Sciaridae atuam como polinizadores em alguns grupos em Orchidaceae (Ackerman e Mesler, 1979; Christensen, 1994) e so considerados importantes agentes polinizadores em Pleurothallidinae (van der Pijl e Dodson, 1969; Christensen, 1994), sendo documentada a polinizao por estes dpteros nos gneros Stelis Sw., Zosterophyllantus Szlach. & Marg. e Lepanthes Sw., embora ainda no tivessem sido documentados como polinizadores em Acianthera. Recentemente foi documentada a polinizao por pseudocpula em Lepanthes Sw. (Pleurothallidinae) por dipteros Sciaridae (Blanco e Barboza, 2005). No presente estudo, estes dpteros foram observados com polinrio de A. aveniformis e foram os principais polinizadores em A. hygrophila. Embora em A. aveniformis no podemos afirmar que Bradysia sp1 o seu polinizador. A presena de mosquitos Ceratopogonidae como polinizadores em Pleurothallidinae controversa. Archila (2001 apud Blanco e Barbosa, 2005) relata que mosquitos ceratopogondeos visitam e polinizam vrias espcies de Lepanthes na Guatemala, embora estes dados no tenham sido documentados com fotos nem tenha havido deposio de material biolgico em museu. A polinizao por Atrichopogon sp. em A. hygrophila o

23 primeiro registro desta famlia de Diptera envolvida na polinizao de uma espcie de Acianthera. Entre os dpteros observados como polinizadores em A. sonderana, Conicera sp. (Phoridae) ainda no tinha sido documentado como polinizador em Pleurothallidinae, enquanto que Megaselia spp. haviam sido documentados como polinizadores no gnero Stelis (Alboris-Ortiz e Sosa, 2006), em A. luteola (Singer e Coccuci, 1999), A. ochreata (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, e A. teres (Lindl.) Borba (Borba e Semir, 2001). Em todas as observaes de dpteros Phoridae polinizando espcies de Acianthera, inclusive as do presente trabalho, os insetos, ao deslocarem o polinrio, carregam junto o capuz da antera que pode ficar unido ao polinrio por vrios minutos. As flores destas espcies possuem certas caractersticas em comum, como tendncia a uma corola tubular, o labelo formando um ngulo aproximado de 45 com a coluna (exceto em A. luteola), e oferta de recompensa no labelo. Alm disso, Acianthera luteola e A. sonderana se assemelham em colorao, com A. luteola possuindo pontos escuros no labelo que podem funcionar como guias de nctar (Singer e Coccuci, 1999), sendo que em A. sonderana, uma regio de semelhante colorao encontrada na base da coluna. Apesar de Acianthera luteola e A. sonderana serem sincronoptricas e ambas serem visitadas por Megaselia spp., a hibridao entre estas espcies no esperada devido autoincompatibilidade interespecfica (resultados preliminares) associada a diferenas no tamanho das flores das duas espcies, sendo que A. sonderana polinizada por dpteros menores que os polinizadores de A. luteola. Tambm foi observado sincronopatria entre outras espcies de Pleurothallidinae que ocorrem na rea de estudo, embora nestes casos, as morfologias florais destas espcies foram distintas, o que sugere diferentes agentes polinizadores ou diferentes mecanismos de polinizao.

24 Assim como observado em A. sonderana, os polinizadores de A. hygrohila (dpteros Ceratopogonidae e Sciaridae) retm a antera quando deslocam o mesmo. Nos trs casos em que foi observado o mecanismo de polinizao em Acianthera em ambientes de Floresta Ombrfila Mista (Singer e Coccuci, 1999; o presente trabalho), esta caracterstica foi observada, o que sugere que este mecanismo deve ser comum. Esta adaptao pode funcionar como uma barreira para evitar a perda de polneas em autopolinizaes (Singer e Coccuci, 1999; Borba e Semir, 2001) quando o hbito dos insetos polinizadores de longa permanncia em um mesmo indivduo. Foi observado que dpteros Sciariadae foram atrados por cheiros adocicados em A. hygrophila, e odores espermticos em A. aveniformis, sugerindo diferentes mecanismos de atrao. Zygoneura no reportado como visitante floral (Dalton Amorin comun. pessoal), e foi o agente polinizador de A. hygrophila, espcie que possui um odor floral adocicado. Interessante ressaltar que entre as espcies do gnero Acianthera polinizadas por dpteros Phoridae, A. ochreata e A. teres possuem colorao que tendem ao vermelho ou prpuro e emitem um odor de queijo ranoso (Borba e Semir, 2001), enquanto A. luteola e A. sonderana possuem colorao amarela-alaranjada, cheiros adocicado e de laranja passada

respectivamente (Singer e Coccuci, 1999; presente trabalho). Em outra espcie de Pleurothallidinae polinizada por Megaselia, Stelis immersa (Linden & Rochb.f.) Pridgeon & M.W.Chase, observada uma colorao amarelo-alaranjada e um odor semelhante a melo (Albores-Ortiz e Sosa, 2006). conhecido que moscas Caliphoridae e Sarcophagidae preferem a cor amarela em vez de prpura na presena na presena de cheiros adocicados e que esta preferncia revertida quando na presena de cheiros de fezes ou carne em putrefao (Kugler, 1951, 1956 apud Christensen 1992; Kay, 1978 apud Christensen 1992). Aparentemente esta associao de um sinal visual ao sinal olfativo pode estar ocorrendo em Phoridae, especificamente em Megaselia spp.

25 O mecanismo de polinizao em A. sonderana o mesmo j reportado para outras espcies dentro da subtribo (Chase, 1985; Singer e Coccuci, 1999; Borba e Semir, 2001). Em A. hygrophila, o mecanismo de polinizao distinto, pois o labelo forma um ngulo maior em relao base da coluna, e est frequentemente apoiado sobre as spalas laterais. Da mesma forma, medida que o inseto se aproxima da base do labelo, o inseto preso entre a coluna e o labelo, mas neste caso, o labelo movimenta-se diminuindo seu ngulo com a coluna. No foi possvel identificar o mecanismo pelo qual este deslocamento acontece. Embora no ocorra uma mudana repentina da posio do labelo, possvel que uma mudana mecnica desencadeada por um mecanismo sensitivo, pode ocorrer nesta espcie. Mecanismos de movimentos ativos do labelo em Pleurothallidinae so conhecidos (Oliver, 1888; Christensen, 1994) Foi observado que a freqncia dos polinizadores na rea de estudo para a trs espcies muito baixa, o que reportado em muitas orqudeas (Dodson, 1962; Calvo, 1990). Em A. aveniformis, a ausncia de visitas de polinizadores pode ser devido a uma baixa atividade dos mesmos, nos horrios de observao, embora o perodo do dia no qual as flores exalavam odores estivesse compreendido nos perodos de observao focal. Em A. hygrophila, o perodo com maior nmero de visitantes florais, final da manh e primeiras horas da tarde, o momento onde h emisso de odor (Singer, 1996). Embora a observao de polinizadores tenha sido rara, foram observados dpteros de vrias famlias visitando esta espcie, sugerindo que os volteis florais no so especficos na atrao dos visitantes. Em A. hygrophila, como citado anteriormente, foram encontradas duas famlias de dpteros como polinizadoras. possvel que o mecanismo de polinizao encontrado nesta espcie, somada a uma forma de atrao no especfica, pode resultar em uma maior generalizao do sistema de polinizao.

26 A ausncia de observaes dos polinizadores em A. sonderana no Bosque do Zoolgico difcil de explicar, pois, os horrios nos quais foram observados os polinizadores na zona urbana, coincidem com os das observaes focais. Entretanto, esta ausncia de visitas pode ser devido ao tempo de observao focal ter sido insuficiente, populao reduzida dos polinizadores, ou a preferncia dos polinizadores por outro recurso abundante. Acianthera sonderana uma espcie muito comum no municpio de Curitiba (Singer, 1996; Borgo et al., 2002 ), e frequentemente observada com frutos (observao pessoal, Singer, 1996). A taxa de frutificao observada no Bosque do Zoolgico corrobora a ausncia de visitas de polinizadores nas observaes focais, sendo a menor taxa de frutificao controle entre as espcies estudadas. Nos Mananciais da Serra, uma regio de transio entre Floresta Ombrfila Mista e Floresta Ombrfila Densa (Reginato & Goldenberg, subm) em Piraquara, municpio vizinho Curitiba, a taxa de formao de frutos em A. sonderana no mesmo ano foi 10 vezes maior, chegando a 2% de flores originando frutos (observao pessoal). Foi observado em A. hygrophila um grande espectro de visitantes florais, porm com poucos polinizadores efetivos, isto pode ocorrer em muitas espcies consideradas equivocadamente como generalistas (Stebbins, 1970; Olerton, 1996; Freitas e Sazima, 2006). As espcies de Acianthera polinizadas por dpteros Phoridae (Singer e Cocucci, 1999; Borba e Semir, 2001; presente trabalho) possuem morfologias florais semelhantes, oferta de recursos florais, e reteno do capuz da antera. Isto sugere que estas espcies responderam a presses seletivas semelhantes exercidas por este grupo de polinizadores, como j proposto para A. ochreata e A. theres (Borba e Semir, 2001). A auto-incompatibilidade observada nas trs espcies estudadas tambm foi encontrada em espcies de Acianthera com sistemas especficos de polinizao (Borba e Semir 2001; Borba et. al., 2001a). Alguns autores tm apontado que a generalizao predomina nos sistemas de polinizao nas angiospermas (Olerton, 1996; Waser et al., 1996), enquanto que Johnson e Steiner (2000) sugerem que as

27 relaes especficas podem no ser to raras. Tambm ao se considerar cada espcie como um polinizador diferente, pode-se gerar padres artificiais quando se avalia a generalizao ou especificidade de uma comunidade, pois as caractersticas florais podem ser selecionadas por grupos funcionais de polinizadores (Fenster, 2004; Freitas e Sazima, 2006). Em um estudo com vrias populaes isoladas, Borba e Semir (2001) reportaram especificidade espacial em cinco espcies de Acianthera, mesmo em populaes separadas por distncias maiores que mil quilmetros. Os estudos at agora realizados em Acianthera reforam a proposta de que a especificidade uma caracterstica na famlia orchidaceae (Tremblay, 1992). Neste estudo, considerando-se apenas os frutos que liberaram as sementes, os valores de taxa de frutificao foram muito menores do que outros valores reportados dentro da subtribo (Calvo, 1990; Christensen, 1992; Borba e Semir, 2001, Tremblay, 2006). Aparentemente, muitas espcies de Pleurothallidinae tm garantido o sucesso reprodutivo devido ao nmero de sementes por frutos ser grande, associado reproduo vegetativa (Christensen, 1992). Taxa de frutificao baixa uma caracterstica comum em Orchidaceae (Tremblay, 2005), assim como pode ser observada em outras famlias de plantas (Anderson e Hill, 2002). Alm da baixa freqncia dos polinizadores na rea, a baixa taxa de formao de frutos pode tambm ocorrer devido baixa constncia dos polinizadores e perda de polneas em autopolinizaes. As trs espcies estudadas so auto-incompatveis, demonstrando que a autoincompatibilidade em espcies de Acianthera tambm ocorre em ambiente de Floresta Ombrfila Mista. O crescimento diminudo dos tubos polnicos em tratamentos de autopolinizao em A. sonderana e as malformaes nos tubos polnicos de flores abortadas de A. aveniformis sugerem uma inibio do crescimento dos tubos polnicos no estilete, o que caracterstico de auto-incompatibilidade homomrfica gametoftica (Richards, 1986). No foi possvel avaliar a presena de depresso endogmica nos frutos provenientes de

28 autopolinizao devido ausncia de frutos neste tratamento, porm a ocorrncia de autoincompatibilidade total ou parcial foi descrita em espcies de Acianthera, e em algumas espcies pode ocorrer depresso endogmica nos raros frutos originados a partir de autopolinizaes (Borba et al., 2001a). Possivelmente, como um mecanismo de compensao do comportamento de seus polinizadores, caracterizado por longas visitas em cada inflorescncia, estas espcies desenvolveram barreiras genticas (auto-incompatibilidade) associadas a barreiras prpolinizao. Em ambientes onde pode ocorrer restrio de recursos (epifitismo), os eventos reprodutivos podem ter um custo alto, e um nmero grande de frutos resultantes de autopolinizaes, poderia resultar em uma diminuio de recursos, para investir em reproduo nas estaes reprodutivas futuras (Montalvo e Ackerman 1987). A produo de uma quantidade menor de frutos, desta forma, asseguraria recursos suficientes para uma quantidade maior de eventos reprodutivos, associados a uma maior variabilidade gentica.

Referncias Bibliogrficas

Albores-Ortiz O. e Sosa V. (2006) Polinizacin de dos species simptricas de Stelis (Pleurothallidinae, Orchidaceae). Acta Botanica Mexicana 74, 155-168. Ackerman, J. D. e Mesler, M. R. (1979) Pollination biology of Listera cordata (Orchidaceae). American Journal of Botany 66, 820-824. Blanco, M. A. e Barboza, G. (2005) Pseudocopulatory pollination in Lepanthes (Orchidaceae: Pleurothallidinae) by fungus gnats. Annals of Botany 95, 763-772. Borba, E. L. e Semir, J. (1998) Wind-assisted fly pollination in three Bulbophyllum (Orchidaceae) species occurring in the Brazilian campos rupestres. Lindleyana 13, 203218.

29 Borba, E. L. e Semir, J. (1999) Temporal variation in pollinarium size after its removal in species of Bulbophyllum: a different mechanism preventing self-pollination in Orchidaceae. Plant Systematics and Evolution 217, 197-204. Borba, E. L. e Semir, J. (2001) Pollinator specificity and convergence in fly-pollinated Pleurothallis (Orchidaceae) species: a multiple population approach. Annals of Botany 88, 75-88. Borba, E. L., Semir, J. e Shepherd, G. J. (2001a) Self-incompatibility, inbreeding depression, and crossing potential in five Brazilian Pleurothallis (Orchidaceae) species. Annals of Botany 88, 89-99. Borba, E. L., Felix, J. M., Solferini, V. N., e Semir, J. (2001b) Fly-pollinated Pleurothallis (Orchidaceae) species have high genetic variability: evidence from isozyme markers. American Journal of Botany 88, 419-428. Borgo, M., Silva, S. M., e Petean, M. (2002) Epfitos vasculares em fragmentos de floresta ombrfila mista, Curitiba, Paran, Brasil. Revista Brasileira de Botnica 26, 391-401. Calvo, R. N. (1990) Inflorescence size and fruit distribution among individuals in three orchid species. American Journal of Botany 77, 1378-1381. Chase, M. W. (1985) Pollination of Pleurothallis endotrachys. American Orchid Society Bulletin 54, 431-434. Christensen, D. E. (1992) Notes on the reprodutive biology of Stelis argentata Lindl. (Orchidaceae: Pleurothallidinae) in eastern Ecuador. Lindleyana 7, 28-33. Christensen, D. E. (1994) Fly pollination in the Orchidaceae. In Orchid Biology: Reviews and Perspectives VI (Arditti J, ed.) John Wiley & Sons, New York, pp.415-454. Dafni, A. (1992) Pollination Ecology. A Practical Approach. Oxford: IRL Press at Oxford University Press.

30 Dodson, C. H. (1962) The importance of pollination in the evolution of the orchids of tropical America. American Orchid Society Bulletin 31, 525-534, 641-649, 731-735. Dressler, R. L. (1968) Observations on orchids and euglossine bess in Panama and Costa Rica. Revista de Biologia Tropical 15: 143-183. Dressler, R. L. (1993) Phylogeny and Classification of the Orchid Family. Oregon: Dioscorides Press. Endress, P. K. (1994) Diversity and evolutionary biology of tropical flowers. Cambridge: Cambridge University Press. Faegri, K., e van der Pijl, L. (1979) The Principles of Pollination Ecology. Oxosford: Pergamon Press. Fenster, C. B., Ambruster, W. S., Wilson, P., Dudash, M. R., e Thomson, J. D. (2004) Pollination syndromes and floral specialization. Annual Review of Ecology, Evolution and Systematics 35, 375-403. Forster A. S. (1949) Practical Plant Anatomy. New York: Van Nostrand. Freitas, L. e Sazima, M. (2006) Pollination biology in a tropical high-altitude grassland in Brazil: interactions at the community level. Annals of the Missouri Botanical Garden 93, 465-516. Johnson, S. D. e Steiner, K. E. (2000) Generalization versus specialization in plant pollination systems. Trends in Ecology and Evolution 15, 140-143. Kearns, C. e Inouye, W. (1993) Techniques for pollination biologists. Niwot: University Press of Colorado. Koppen, W. (1948) Climatologia com un estudio de los climas de la tierra (Transl. by Peres PRH). Mexico: Fondo de Cultura Econmica. Maack, R. (1981) Geografia Fsica do Estado do Paran. Rio de Janeiro: 2 ed. J. OlympioSecretaria da Cultura e do Esporte do governo do Paran.

31 Manning, J. C. e Goldblatt, P. (1997) The Moegistorhynchus longirostris (Diptera: Nemestrinidae) pollination guild: long tubed flowers and a specialized long-proboscid fly pollination system in southern Africa. Plant Systematics and Evolution 206, 51-69 Martin, F. W. (1959) Staining and observing pollen tubes in the style by means of fluorescence. Stain Technology 37, 125-128. Mesler, M. R., Ackerman J. D., e Lu K. L. (1980) The effectiveness of fungus gnats as pollinators. American Journal of Botany 67, 564-567. Montalvo, A. M. e Ackerman, J. D. (1987) Limitations to fruit production in Ionopsis utricularioides (Orchidaceae). Biotropica 19, 24-31. Ollerton, J. (1996) Reconciling ecological processes with phylogenetic patterns: the apparent paradox of plant-pollinator systems. Journal of Ecology 84, 767-769. Oliver, F. W. (1888) On the sensitive labellum of Masdevallia muscosa Reichb. f. Annals of Botany 1, 461-480. Pansarin, E. R. (2003) Biologia reprodutiva e polinizao em Epidendrum paniculatum Ruiz & Pavn (Orchidaceae). Revista Brasileira de Botnica 26, 203-211. van der Pijl, L., e Dodson, C. H. (1969). Orchid Flowers: their Pollination and Evolution. Miami, USA: University of Miami Press ,Coral Gables. Reginato, M., e Goldenberg, R. Anlise florstica, estrutural e fitogeogrfica da vegetao arbrea/arborescente em um trecho de transio entre as Florestas Ombrfila Densa Montana e Mista, Piraquara, Paran, Brasil. Hoehnea. Submetido. Ribeiro, F. R., Khler, A. e Boelter, C. R. (2006) Pollination of Acianthera aphtosa (Lindl.) Pridgeon & M. W. Chase (Orchidaeae) by Otitidae (Diptera). Uruguaiana 2, 185-189. Richards, A. J. (1986) Plant breeding systems. London: George Allen & Unwin. Singer, R. B. (1996) Morfologia floral e biologia da polinizao de Orchidaceae de Curitiba, Paran. Dissertao. Universidade Federal do Paran.

32 Singer, R. B. e Coccuci, A. A. (1999) Pollination mechanism in four sympatric southern Brazilian Epidendroideae orchids. Lindleyana 14, 47-56. Stebbins, G. L. (1970) Adaptive radiation of reproductive characteristics in angiosperms, I: pollination mechanisms. Annual review of ecology and systematics 1, 307-326. Tremblay, R. L. (1992) Trends in the pollination ecology of the Orchidaceae: evolution and systematics. Canadian Journal of Botany 70, 642-650. Tremblay, R. L. (2006) The effect of flower position on male and female reproductive success in a deceptively pollinated tropical orchid. Botanical Journal of the Linnean Society 151, 405-410. Tremblay, R. L., Ackerman, J. D., Zimmerman, J. K., e Calvo, R. N. (2005) Variation in sexual reproduction in orchids and its evolutionary consequences: a spasmodic journey to diversification. Biological Journal of the Linnean Society 84, 1-54. Vogel, S. (1963) Duftdrsen im Dienste der Bestubung: ber Bau und Funktion der Osmophoren. Abhandlungen der Akademie der Wissenschaften und der Literatur in Mainz Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Klasse 10, 601-763. Waser, N. M., Chittka, L., Price, M. V., Williams, N. M., e Ollerton, J. (1996) Generalization in pollination systems, and why it matters. Ecology 77, 1043-1060.