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INTRODUO

Conceitos Infeco Penetrao, crescimento e multiplicao de microorganismos em hospedeiros. Ex.: bactrias, vrus, fungos, protozorios, prons. Infestao Penetrao, crescimento e multiplicao de macroorganismos em um hospedeiro. Ex.: piolho (S. typhi), carrapato, pulgas (Yensinia pestes peste bulbnica), vermes. Resistncia Mecanismos de imunidade, natural ou adquirida. Patogenicidade capacidade de o microorganismo causar uma doena ou uma leso progressiva. Virulncia Est relacionada com a patogenicidade, apresentando-se como uma caracterstica e servindo para indicar o poder de destruio de um patgeno. Quanto mais virulento um patgeno, mais dano ocorre ao hospedeiro Mecanismos da Infeco Penetrao Vias respiratrias, digestiva, pele e mucosas Estabelecimento Os microrganismos se estabelecem para se multiplicar. Utilizam-se de adesinas (fmbrias, fibrilas e glicoclices) Multiplicao Ocorre quando h a entrada na corrente sangunea, depois de serem fagocitados pelos macrfagos e transportados pela linfa. Quando ocorre a multiplicao, h a septicemia. Infeces Bacterianas Exgenas Produzidas por microrganismos que esto no meio ambiente. Ex. Salmonella Endgenas Produzidas por microrganismos existentes no prprio organismo. Ex. S. saprophyticus Atributos dos microrganismos que causam doenas Fatores de colonizao Cpsula (impede a fagocitose), adesina (fmbrias, fibrilas e glicoclice), invasinas (facilitam a penetrao), evasinas (protenas que facilitam a disseminao das bactrias no hospedeiro); Fatores de leso Associados presena de toxinas (endo e exo). Ex.: S. aureus produz enterotoxina, a qual sobrevive a uma temperatura de 100C por 30min. S. aureus provoca o furnculo e o tersol e contm a enzima hialuronidase, que quebra o cido hialurnico, um dos componentes principais do TC. O S. aureus um corpo piognico. Sintomatologia da Infeco Incubao Perodo desde a penetrao ao aparecimento dos primeiros sintomas Doena Perodo de aparecimento dos sinais e sintomas Convalescena Perodo de desaparecimento dos sintomas Tipos de Infeces Com sintoma (clnica) Sem sintoma (subclnica) Latente

Abriga o microrganismo mas no apresenta sintomas Inaparente O microrganismo abriga o tecido do hospedeiro, realiza o ciclo infeccioso, mas o hospedeiro no tem sintomas. OBS.: Germes especficos responsveis pela doena; Germes inespecficos produzem uma infeco secundria (ex. varola produz pstulas, que servem de porta de entrada para infeces) MORFOLOGIA E ESTRUTURA DA CLULA BACTERIANA Cocos: So redondas, podendo se dividir em vrios planos Diplococos: aos pares Estreptococos: em cadeias Estafilococos: em cachos Sarcina: grupos cbicos Bacilos: S se dividem no plano sobre seu eixo menor Diplobacilos: aos pares Estreptobacilos: em cadeia Cocobacilos: se assemelham aos cocos OBS.: A maior parte dos bacilos apresenta-se como bacilos isolados. Espiraladas: Podem ter um ou mais espirais Vibries: Corpo rgido, como vrgula Espirilos: Forma de saca-rolhas Espiroquetas: Espiraladas e de corpo flexvel Bactrias Gram (+) e (-) O mtodo ou tcnica de Gram (Christian Gram,1884) consiste no tratamento de um esfregao bacteriano, fixado pelo calor, com os seguintes reagentes: cristal violeta, lugol, lcool e fucsina. Toda bactria (gram positiva ou negativa) absorve de maneira idntica o cristal violeta e o lugol, adquirindo a cor roxa devido ao complexo formado pelas duas substncias no citoplasma da clula. Entretanto, ao serem tratadas pelo lcool, apresentam comportamentos diferentes: Gram Positivas No se deixam descorar pelo lcool O solvente desidrata as espessas paredes celulares das bactrias Gram-positivas e provoca a contrao dos poros do peptidoglicano, tornando-as impermeveis ao complexo; o corante primrio retido e as clulas permanecem coradas Mantm a cor roxa do complexo cristal-violeta/lugol Gram Negativas Se descoram pelo lcool O solvente dissolve a poro lipdica das membranas externas das bactrias Gram-negativas e o complexo cristal violeta-iodo removido, descorando as clulas. Ao receber a fucsina, se deixam corar, adquirindo a cor vermelha Estruturas Bacterianas Membrana Citoplasmtica Estrutura Qumica o 60% de protenas imersas em uma bicamada fosfolipdica (40%) o Ctions como o Mg2+ e Ca2+ (mantm a integridade da membrana) o Ausncia de esteris (diferentemente da membrana das clulas eucariticas) Funes o Transporte de solutos Barreira seletiva O transporte de substncias feito por protenas de transporte (transporte ativo, passivo) o Produo de energia por transporte de eltrons e fosforilao oxidativa o Biossntese o Duplicao do DNA o Secreo Para romper macromolculas fornecendo subunidades que serviro como nutrientes Toxinas, bacteriocinas, penicilinases OBS.: Mesossomos: Invaginaes mltiplas que formam estruturas especializadas. Tipos: septal importante papel na diviso celular; lateral confere maior atividade respiratria ou fotossinttica Parece Celular Estrutura Qumica o Gram-negativas Mais complexa que a da gram-positiva Uma camada fina de mucopeptdeo e uma dupla camada de LPS A presena da membrana externa (camada de LPS) confere bactria uma barreira hidrofbica adicional, dificultando a penetrao de algumas substncias. Alguns antibiticos como eritromicina,

actinomicina e alguns corantes (cristal de violeta), no penetram na parede das gram-negativas to facilmente quanto o fazem em gram-positivas o Gram-positivas Uma camada espessa de mucopeptdeo e uma camada fina de LPS Cpsula So polmeros orgnicos que so sintetizados e depositados para fora da parede Funes o Aumento da capacidade invasiva: so escorregadias e escapam ao dos fagcitos o Aderncia: aumentando o poder infectante o Reservatrio de gua e nutrientes o Aumento da resistncia a biocidas Flagelos Confere movimento clula Fmbrias ou Pili Conduo do material gentico (Fmbria F) Estrutura de aderncia (fixao nos tecidos) Nucleide Material gentico bacteriano que se encontra no citoplasma Plasmdios Molculas de DNA circulantes soltos no citoplasma Os genes no determinam caractersticas essenciais, mas conferem muitas vantagens s clulas que as possuem Exemplos: Fatores sexuais (fator F), fatores de resistncia antibiticos (Fator R) Componentes Citoplasmticos Ribossomos o Responsveis pela sntese proteica, compostas de RNA (60%) e protena (40%) Grnulos o Substncias de reserva e subunidades de macromolculas para compor outras estruturas celulares Esporos o Estruturas formadas por algumas espcies de bactrias gram-positivas (principalmente Clostridium e Bacillus) quando o meio se torna carente de gua e nutrientes essenciais o Tipo de diferenciao que ocorre como resposta a uma situao desfavorvel o O processo de formao do esporo chamado esporognese, que, uma vez completada, o esporo liberado no ambiente, podendo sobreviver por muitos anos sob condies de extremo calor, ausncia de gua e presena de radiaes e substncias qumicas txicas. Ex.: Baccilus anthracis, Clostridium tetani, Clostridium perfringens (gangrena gasosa).

NUTRIO E METABOLISMO BACTERIANO Fontes de Energia A grande maioria das bactrias quimiotrfica, obtendo energia custa de reaes qumicas onde substratos adequados so oxidados. Litotrficas so as que utilizam compostos inorgnicos Organotrficas exigem doadores orgnicos de eltrons Fontes de Material Plstico Para a renovao da matria viva, os elementos quantitativamente mais importantes so o carbono, o hidrognio, o oxignio, o nitrognio, o enxofre e o fsforo. o Fontes de carbono: Para as autotrficas a nica fonte de carbono o CO2 ou o on carboidrato A maioria das bactrias heterotrfica, exigindo fontes orgnicas de carbono. Fixam tambm CO2, embora no como fonte nica de carbono. o Fontes de Hidrognio e Oxignio Geralmente fazem parte dos compostos orgnicos o Fontes de Nitrognio Algumas retiram nitrognio diretamente da atmosfera e o convertem a nitrognio orgnico (Azotobacter e Rhizobium as ltimas contribuem na fertilidade e produtividade dos solos) A quase totalidade utiliza compostos inorgnicos de nitrognio (sais de amnio e ocasionalmente nitratos) Algumas bactrias exigem fontes orgnicas de nitrognio (aminocidos) o ons orgnicos essenciais Macronutrientes: So os nutrientes necessrios em quantidades apreciveis Fsforo: Importante no metabolismo energtico e sntese de cidos nucleicos Enxofre: Fazem parte de aminocidos e necessrio para a sntese de algumas vitaminas Potssio: Ativador de enzimas e regulador da presso osmtica Magnsio: Ativador de enzimas extracelulares e fator importante na sntese de protenas e unio das fraes ribossmicas Ferro: Necessrio para a sntese de citocromos e de certos pigmentos

Micronutrientes: So os nutrientes necessrios em pouca quantidade e possuem papis no to bem conhecidos

gua No nutriente mas se constitui como indispensvel para o crescimento. Exerce importante papel na regulao da presso osmtica e na regulao trmica A nutrio ocorre pela passagem de substncias em soluo atravs da membrana plasmtica Oxignio Atmosfrico Funciona como receptor final de hidrognio nos processos de respirao aerbica Bactrias aerbias: exigem a presena de oxignio livre. Ex: Acinetobacter Bactrias microaerfilas: toleram pouca quantidade de oxignio. Ex: Campilobacter jejuni Bactrias anaerbias estritas: no toleram a presena de oxignio livre. Ex: Clostridium botulinium Bactrias anaerbias no-estritas: no utilizam oxignio atmosfrico, porm este no txico. Ex: Lactobacillus Bactrias facultativas: podem crescer na presena ou ausncia de oxignio livre. Ex: E. coli

Meios de Cultura O crescimento de bactrias em condies artificiais (laboratrio) conseguido pela semadura das mesmas em meios de cultura, cuja composio deve atender aos princpios expostos acima. No existe meio de cultura universal. O que exigido para uma determinada bactria inibe totalmente o crescimento de outras. Composio dos meios de cultura Meios Sintticos o Chama-se de sintticos aqueles cuja composio qualitativa e quantitativamente conhecida Meios Complexos o Quando h a adio de um produto com composio qumica no perfeitamente definida. Ex: extrato de carne, extrato de leveduras, peptonas, extrato de rgos animais, sangue, soro, etc. Estado fsico dos meios de cultura Meios Lquidos o As bactrias tm maior facilidade de iniciar seu crescimento nesse tipo de meio o Se houver mais de um tipo de bactria, o crescimento final ser constitudo de uma mistura destas, podendo impedir que se tirem concluses a respeito da natureza e atividade de cada uma. Meios Slidos o Semeia-se em meios slidos para que no haja a mistura de bactrias, possibilitando a separao de bactrias vizinhas. o Os meios slidos so preparados adicionando-se um agente solidificador (o mais utilizado o gar) Meios seletivos e diferenciais Meios Seletivos o So aqueles cujas caractersticas impedem o crescimento de certos microrganismos, permitindo apenas o crescimento de outros Meios Diferenciais o So aqueles que conferem caractersticas especiais s colnias que, em condies normais, seriam idnticas. Outros fatores envolvidos na nutrio Temperatura o Psicrfilas: crescem e absorvem melhor entre as temperaturas 0 e 18C o Mesfilas: entre 25 a 40C o Termfilas: entre 50 e 80C pH o Os valores de pH em torno de 7 so os mais adequados para a absoro dos nutrientes, embora existam algumas bactrias adaptadas a viver em ambientes cidos e alcalinos OBS.: Halfitas extremas 25%NaCl ; Termfilas extremas 600C Metabolismo Microbiano Oxidao Aerbica Oxidao de carboidratos - Gliclise Oxidao anaerbica Fermentao de compostos orgnicos resultando sempre na produo final de lactato, etanol e acetato Fermentao de aminocidos Protelise. Ex: Clostridium perfringens, Clostridium botulinium (toxina botulnica carnes enlatadas e contaminadas) CRESCIMENTO BACTERIANO O crescimento um somatrio de processos metablicos progressivos, que normalmente conduz diviso (reproduo) com concomitante produo de duas clulas filha a partir de uma. Curva de Crescimento

Quando uma determinada bactria semeada num meio lquido de composio apropriada e incubada em temperatura adequada, o seu crescimento segue uma curva definida e caracterstica Fase de LAG H aumento de massa, porm sem diviso celular Pode ou no existir. Em condies favorveis, a fase de lag tende a ser menor considerada um perodo de adaptao no qual a atividade enzimtica mltipla da clula, com seus produtos, est sendo coordenada para um estgio de integrao total (somente quando o sistema estiver funcionando harmoniosamente a diviso pode ocorrer) No um perodo de repouso, mas de intensa atividade metablica Fase logartmica Ocorre a diviso regular numa velocidade mxima e constante As bactrias crescem e reproduzem assexuadamente por fisso binria. Fase estacionria A velocidade de multiplicao diminui gradativamente, at que se anule O nmero de bactrias permanece constante por um tempo determinado (o nmero de bactrias novas que se formam contrabalana com o nmero daquelas que esto morrendo) A falta de nutrientes e o acmulo de materiais txicos no meio podem cessar o crescimento de uma cultura Fase de declnio Os microrganismos gradualmente diminuem em nmero at que a cultura se torne estril GENTICA BACTERIANA O DNA em bactrias uma macromolcula em forma de uma dupla fita circular, altamente empacotado e dobrado para se manter dentro da clula. A replicao do DNA semiconservativa, ou seja, uma fita do DNA parental conservada durante o processo de replicao, enquanto a fita complementar sintetizada novamente. Plasmdios So molculas extracromossomais circulares. So geralmente molculas de fita dupla em forma de crculos fechados ou lineares. No so indispensveis para a clula, mas podem conferir-lhe vantagens seletivas: informao para degradao de certos substratos, resistncia a um antibitico ou a um metal pesado Tipos de plasmdios mais frequentemente observados: o Plasmdios de tipo sexual: importantes na transferncia de material gentico o Plasmdios R: contm informaes para a sntese de enzimas que inativam antibiticos especficos o Plasmdios virulentos: transportam informaes que favorecem a virulncia durante o processo de infeco em mamferos o Plasmdios degradativos: permitem a digesto de macromolculas ou substncias pouco habituais o Plasmdios resistentes a mercrio e outros ons de metais pesados Transposons Segmentos mveis de DNA de bactrias que so movimentados (transpostos) em baixa frequncia dentro do cromossomo A transposio dos elementos mveis um processo de intercmbio de DNA, um tipo de recombinao. Os transposons bacterianos so responsveis pela disseminao de genes responsveis pela resistncia bacteriana aos antibiticos e quimioterpicos de um genoma bacteriano para outro, via plasmdios. Existem transposons que so capazes de se transferir de uma clula para outra sem o auxlio de plasmdios, num processo em que necessrio o contato direto entre a clula doadora e a receptora. Mutao Alteraes na estrutura qumica ou fsica do DNA so conhecidas como mutaes. Podem ser ocasionadas por agentes fsicos ou qumicos chamados de mutgenos ou agentes genotxicos. As mutaes so fonte de uma grande variabilidade gentica, e sem elas o processo de adaptao no seria possvel. De acordo com o agente, as mutaes podem ser espontneas ou induzidas. Mutaes espontneas Podem ser causadas por erros durante a replicao do DNA ou pela exposio dos organismo a influncias extracelulares do meio ambiente, como radiaes ou agentes qumicos Mutaes induzidas So produto de uma ao deliberada na qual o organismo exposto ao de um agente genotxico Recombinao e Transferncia gnica Enquanto a mutao assegura a variabilidade, a recombinao gentica garante que diferentes combinaes de genes sejam possveis. Os mecanismos desenvolvidos evolutivamente, que permitem a recombinao so: transformao, transduo e conjugao. Transformao Processo no qual o DNA livre no meio tomado pela clula, resultando em alteraes genotpicas desta. Transduo o processo no qual o DNA bacteriano transferido entre clulas mediado por um vrus Conjugao Mecanismo de transferncia de informao gentica que requer contato entre as clulas

DNA Recombinante O desenvolvimento de variadas tcnicas de biologia molecular abriu uma nova era conhecida como engenharia gentica. A grande maioria das aplicaes est baseada na clonagem de variados genes de interesse. As metas primrias deste ramo da biologia so: Isolamento de um gene particular, parte de um gene ou de uma regio do genoma de interesse Produo de um RNA particular e protenas em grandes quantidades Melhoramento na produo de compostos bioqumicos (enzimas, drogas), ou de outros compostos orgnicos comercialmente importantes Produo de plantas com caractersticas desejveis Produo de organismos com caractersticas economicamente importantes Produo de vacinas Geneterapia OBS.: A fisso binria a forma de reproduo assexuada mais comum, onde primeiramente ocorre a duplicao do material gentico e em seguida a diviso da clula em duas idnticas. A fragmentao, o brotamento e a esporognia tambm so formas de reproduo assexuada. ORIGEM E NATUREZA QUMICA DOS PRINCIPAIS AGENTES ANTIBACTERIANOS Quimioterapia o tratamento de molstias com substncias qumicas Quimioterpicos Substncias qumicas produzidas em laboratrio Antibiticos Substncias qumicas produzidas por seres vivos Tipos o Naturais Sem modificao pela indstria o Semi-sintticos So concludos em laboratrio o Sintticos Integralmente produzidos em laboratrio MECANISMOS DE AO DOS ANTIBACTERIANOS E MECANISMOS DE RESISTNCIA A essncia da quimioterapia antimicrobiana a toxicidade seletiva matar ou inibir o microrganismo sem afetar o hospedeiro. Os antibiticos e quimioterpicos interferem com diferentes atividades da clula bacteriana, causando a sua morte (bactericidas) ou somente inibindo seu crescimento (bacteriostticos) Quanto ao espectro de ao, podem ser divididas em pequeno espectro, quando agem sobre um grupo especfico de bactrias (gram positivas ou negativas ex. penicilina gram +) e amplo espectro, quando atuam sobre bactrias gram positivas e negativas. As interaes dos antibacterianos com a clula bacteriana podem ocorrer no nvel da parede (estrutura e biossntese), membrana citoplasmtica (estrutura e funo), sntese de protenas e sntese de cidos nucleicos. Antibacterianos que atuam na parede Os mais empregados so os B-lactmicos (penicilinas); Outros: bacitracina, cefalosporina, vancomicina A bactria fica desprotegida Antibacterianos que atuam no nvel da membrana citoplasmtica Causam prejuzo no transporte, na produo de energia e no acmulo de nutrientes Os mais empregados so Anfotericina, Polimixina e Nistatina Antibacterianos que interferem na sntese de protenas Atuam no nvel de ribossomos, impedindo-os de sintetizarem protenas. O resultado a morte celular Os mais empregados so a Tetraciclina, Cloranfenicol, Aminoglicosdeos e Estreptomicina Antibacterianos que interferem com a sntese de DNA Os mais empregados so o cido nalidxico, Novobiocina, Rifampicina e Fluorquinolonas OBS.: O antibiograma o resultado de um exame laboratorial para a sensibilidade de bactria isolada para diferentes
antibiticos. um teste de sensibilidade in vitro. Na clnica, antibiticos so frequentemente prescritos com base em guias gerais do conhecimento a respeito da sensibilidade, ex: infeces urinrias sem complicaes podem ser tratadas com quinolonas de primeira gerao, etc. Isso ocorre porque a Escherichia coli o provvel patgeno, e sabidamente sensvel ao tratamento com quinolonas. Contudo, muitas bactrias so resistentes a diversas classes de antibiticos, e o tratamento no to simples. Este o caso de pacientes internados em unidades de terapia intensiva (UTIs). Quando esses pacientes desenvolvem uma pneumonia adquirida em ambiente hospitalar (nosocomial), bactrias mais resistentes como Pseudomonas aeruginosa esto potencialmente envolvidas. O tratamento comumente iniciado com base nos registros a respeito dos patgenos locais provavelmente envolvidos. Este primeiro tratamento, baseado em informao estatstica a respeito de pacientes anteriores e direcionado a um grupo numeroso de microrganismos potencialmente envolvidos denominado "antibioticoterapia emprica".

Mecanismos de Resistncia

Trs condies devem ser preenchidas para que um antibacteriano iniba ou mate uma bactria: (1) a existncia de um alvo; (2) o antibacteriano deve ter a capacidade de atingir o alvo, e; (3) no pode ser inativado antes de atingilo. As bactrias podem ser classificadas em sensveis e resistentes aos antimicrobianos. Classificam-se como resistentes as bactrias que crescem in vitro, nas concentraes que os antimicrobianos atingem no sangue quando administrados nas recomendaes de uso clnico. A resistncia pode ser natural ou adquirida. A natural corresponde a uma caracterstica da espcie bacteriana e todas as amostras desta espcie tm essa propriedade. Na adquirida, somente parte das amostras resistente (mutaes, plasmdios de resistncia ou por transposons). O antimicrobiano no induz a resistncia. A resistncia adquirida um fenmeno espontneo da bactria, sendo os antimicrobianos apenas agentes seletores de amostras resistentes. Causas da Resistncia Uso abusivo de antimicrobiano nos hospitais Venda livre / aquisio direta pelo doente (automedicao) Indicao indiscriminada por mdicos Uso como aditivo em rao animal Presso seletiva natural de muitos antibiticos (fungos e bactrias) Exposio a outros agentes seletivos como o mercrio Maior imunodepresso Modernos meios de transporte Como salvar os antimicrobianos Medidas tecnolgicas Busca de novos antimicrobianos Modificar ou rejuvenescer as drogas j existentes Obteno de vacinas por tcnicas convencionais e moleculares Medidas ecolgicas Admitir que a resistncia bacteriana srio problema de sade Adotar medidas que reduzam o uso de antimicrobianos o Usar apenas se indispensvel o Realizar antibiogramas o Programas de vigilncia hospitalar e comunitria o Usar vacinas que aumentem as defesas do organismo e reduzam as necessidades de drogas Controle Hospitalar Plantas Medicinais Rom ao antimicrobiana Goiabeira anti-diarreico Cajueiro cicatrizante Melo de So Caetano Bactrias que Preocupam S. aureus Mycobacterium tuberculosis Streptococcus pneumoniae

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