UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

MAESTRA EN CIENCIAS DE LA PRODUCCIN Y DE LA SALUD ANIMAL

ANTEPROYECTO DE TESIS

Seleccin y caracterizacin de mimotopos de pptidos inmunodominantes contra Haemonchus contortus a partir de una biblioteca de phage display

Aspirante: MVZ Vzquez Bucheli Jorge Enrique Asesor principal: Dr. Rogelio A. Alonso Morales FMVZ. Departamento de gentica y bioestadstica. Laboratorio de gentica molecular

Introduccin Los parsitos gastrointestinales causan grandes prdidas econmicas a nivel mundial, repercutiendo negativamente en la eficiencia productiva de los animales en explotaciones pecuarias. Especficamente, en Mxico se reportan prdidas de entre $40 y $65 por animal infectado. Uno de los parsitos de mayor importancia en clima tropical y hmedo en Mxico es Haemonchus contortus, un nemtodo hematfago del orden Strongylidae. Los parsitos adultos se localizan en el abomaso y succionan en promedio 0.05 ml/nematodo/da provocando gastritis hemorrgica, anemia, hipoproteinemia y edema en los animales afectados, lesiones que derivan en una baja de todos los parmetros productivos. El control de estos nematodos se basa en el uso de antihelmnticos, sin embargo su uso indiscriminado ha provocado que desarrollen resistencia a estos desparasitantes, estudios previos establecen que actualmente existe una resistencia de entre el 5% y 65% a diferentes antihelmnticos. Una medida de control alternativa es la vacunacin; as se han descrito antgenos inmunoprotectores potenciales, entre los que se encuentran H11, H-gal-GP y p26/23 que han conseguido una reduccin de la poblacin de Haemonchus contortus adultos en abomaso del 61% al 78%. Investigaciones posteriores se han centrado en la bsqueda de antgenos ocultos, stos al no ser expuestos al sistema inmune del husped infectado no son identificados y pueden llegar a ser ms inmunodominantes que los antgenos naturales. Este enfoque ha sido empleado con xito utilizando el antgeno Bm86 contra las garrapatas del ganado. Un mtodo que ha sido empleado con xito para la seleccin de pptidos inmunodominantes de inters, es el sistema de phage display. Esta se basa, en el tamizaje de bibliotecas combinatorias de pptidos expresados en la superficie del fago filamentoso M13.

Hiptesis: Mediante el tamizaje de una biblioteca phage display con anticuerpos dirigido a la fase infectiva L3 de Haemonchus contortus se podrn seleccionar eptopos inmunodominates con potencial inmunoprotector. Objetivo: Identificar y caracterizar eptopos inmunodominantes de la fase infectiva L3 de Haemonchus contortus con potencial vacunal para el ganado ovino.

Actividad

2013

2014

Fecha

E M M J S N E M M J S N n a a u e o n a a u e o e r y l p v e r y l p v F A J A O D F A J A O D e b u g c i e b u g c i b r n o t c b r n o t c

Revisin bibliogrfica Asignaturas Adquisicin de ejemplares adultos de Haemonchus contortus Cultivo de H. contortus adultos para obtencin de la fase L3 Obtencin y cuantificacin del antgeno de la fase L3 y adulto de H. contortus Inmunizacin de conejos con el antgeno obtenido de las 2 fases de H. contortus Recoleccin de los sueros Caracterizacin de los sueros Determinacin del ttulo de la biblioteca Seleccin y amplificacin de eptopos dominantes por afinidad de H. contortus Caracterizacin de eptopos por secuenciacin de ADN Confirmar la especificidad de los eptopos mediante ELISA