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ROTEIRO

Membrana Plasmtica.
Digesto Intracelular
A membrana plasmtica mantm constante o meio intracelular, possui receptores para
horm6nios e outros sinais qumicos, e estabelece conexes das clulas umas com as outras e co
a matriz extracelular.
Todas as membranas celulares so constitudas por uma bicamada fluida de fosfolipdios, onde
esto inseridas molculas de protenas que podem ser deslocadas, no plano da membrana, por
atividade do cito esqueleto.
Conforme a maior ou menor facilidade de extrao, distinguem-se as protenas perifricas e as
integrais da membrana.
As molculas de fosfolipdios e de protenas esto dispostas nas membranas de modo assimtriro
uma face da membrana diferente da outra. .
A superfcie externa da membrana plasmtica rica em molculas proticas e lipdicas contell
glicdios. Estas molculas ricas em glicdios constituem o glicoclice.
Os fibronexos, constitudos por diversas molculas proticas, estabelecem conexo entre o
citoesqueleto e molculas da matriz extracelular.
As molculas podem penetrar nas clulas ou delas sair por transporte passivo, transporte ativo.
difuso facilitada ou transporte impulsionado por gradiente i6nico.
O transporte em quantidade de material para o interior da clula chama-se endocitose
(fagocitose e pinocitose), e o processo inverso a exocitose.
O material introduzido por pinocitose passa para o compartimento endossomal, que
especializado no endereamento das molculas captadas por pinocitose.
Os lisossomos so organelas contendo enzimas digestivas com atividade mxima no pH 4,5-5,0
(hidrolases Cidas). .
Os microvilos, interdigitaes e estereoclios aumentam a superfcie celular.
As CAMs so glicoprotenas integrais da membrana que possibilitam a adeso entre as clulas:
algumas CAMs perdem a adesividade quando a concentrao de Ca
2
+ muito baixa.
As membranas plasmticas formam estruturas de adeso (desmossomo e juno aderente), de
vedao do espao intercelular (z6nula oclusiva) e de comunicao entre as clulas (juno
comunicante).
A membrana plasmtica ou celular separa o meio intrace-
lular do extracelular e a principal responsvel pelo controle da
penetrao e sada de substncias da clula.
Por sua diminuta espessura, a membrana plasmtica no vi-
svel no microscpio ptico, s podendo ser vista no microscpio
eletrnico. Todavia, sua existncia j era conhecida antes do mi-
croscpio eletrnico graas ao emprego de tcnicas indiretas. A
observao de que o volume das clulas se altera de acordo com a
concentrao das .solues em que so colocadas (Fig. 5.1) foi um
dos primeiros indcios da existncia da membrana celular.
A membrana plasmtica participa de numerosas funes ce-
lulares. responsvel pela manuteno da constncia do meio
intracelular, que diferente do meio extracelular. Para que as
clulas funcionem, cresam e se multipliquem, necessrio que
as substncias adequadas sejam selecionadas e transferidas para
dentro da clula e as substncias desnecessrias sejam impedidas
de penetrar ou, ento, eliminadas do citoplasma.
Graas a seus receptores especficos, a membrana tem a ca-.
pac idade de reconhecer outras clulas e diversos tipos de mol-
ulas, como, por exemplo, hormnios. Este reconhecimento, pela
ligao de uma molcula especfica (sinal qumico ou ligante)
om o receptor da membrana, desencadeia uma resposta que
varia conforme a clula e o estmulo recebido. A resposta pode
er contrao ou movimento celular, inibio ou estimulao da
-ecreo, sntese de anticorpos, proliferao mittica etc.
Parede
celular
Membrana
Ncleo
Citoplasma
Clula vegetal
normal
NaC11,5%
Plasmlise
NaCIO,9%
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 77
Atravs de suas membranas, certas clulas se prendem fir-
memente umas s outras, formando muitas vezes camadas que
delimitam compartimentos diferentes. Um exemplo a camada
epitelial que recobre internamente o trato digestivo e constitui
uma barreira com permeabilidade seletiva, situada entre o meio
externo (contedo do tubo digestivo) e o meio interno.
Em diversos tecidos, as membranas de clulas contgas po-
dem estabelecer canais de comunicao entre si, por onde tm
lugar trocas de molculas e ons que participam da coordenao
das atividades desses agrupamentos celulares. Em muitos tecidos,
as membranas celulares apresentam molculas que se ligam a
componentes da matriz extracelular, participando assim tanto
da fixao da clula em determinados locais (ligaes estveis),
como servindo de apoio para a migrao celular (ligaes inst-
veis) no interior do tecido.
Alm da membrana plasmtica, que ser estudada neste ca-
ptulo, as clulas eucariontes possuem um elaborado sistema
de membranas (exemplos: envoltrio nuclear, retculo endo-
plasmtico, mitocndrias, cloroplastos, aparelho de Golgi) que
divide a clula em compartimentos. As mitocndrias e cloro-
plastos so subdivididos internamente por membranas, amplian-
do aindg mais a compartimentalizao intracelular. Assim, a
clula executa, em separado e com mais eficincia, funes
especializadas que no poderiam ser realizadas em um nico
compartimento.
Plasmlise
mais avanada
NaCIO,6%
Desplasmli se
NaCIO,4%
ig. 5.1 Modificaes do volume celular conforme a concentrao do meio. Em cima, clulas vegetais em meio isotnico e em meio
hipertnico, que provoca uma plasmlise.Voltando ao meio isotnico, a clula readquire sua forma inicial (desplasmlise). Embaixo, eri-
trcitos em meio isotnico (NaCI 0,9%), em meio hipertnico (NaCI 1,5%) e em meio hipotnico (NaCI 0,6 e 0,4%). Em meio fortemente
hipotnico, o eritrcito se rompe (hemlise).
78 Biologia Celular e Molecular
Por outro lado, muitos sistemas enzimticos encontram-se
presos s membranas, o que possibilita uma ordenao seqencial
da atividade de cada enzima, aumentando a eficincia do sistema.
As molculas enzimticas fixam-se s membranas numa seqn-
cia tal que o produto de uma enzima processado pela enzima
ao lado, e assim sucessivamente, at a obteno do produto final
da cadeia enzimtica. Um exemplo a cadeia transportadora de
eltrons, cujos componentes (enzimas e transportadores) esto
localizados na membrana interna das mitocndrias e na face
interna da membrana celular das bactrias.
Graas ao isolamento de membranas (Fig. 5.2), descobriu-se
que a membrana plasmtica e as demais membranas celulares so
constitudas principalmente de lipdios, protenas e hidratos de
carbono ligados aos lipdios e protenas, mas a proporo desses
componentes varia muito, conforme o tipo de membrana. Por
exemplo, as membranas de mielina que recobrem as fibras ner-
vosas e tm o papel de isolante eltrico, contm 80% de lipdios,
enquanto as membranas mitocondriais internas, metabolicamente
muito ativas, contm apenas 25% de lipdios, apresentando uma
predominncia das protenas responsveis pelo alto metabolismo
dessas membranas.
Lipdios das membranas
Os lipdios das membranas so molculas longas com uma
extremidade hidroflica e uma cadeia hidrofbica. As macro-
molculas que apresentam esta caracterstica de possurem uma
regio hidroflica e, portanto, solvel em meio aquoso e uma
regio hidrofbica, insolvel em gua, porm solvel em lipdios,
so ditas antipticas. Entre os lipdios freqentes nas membra-
nas celulares encontram-se fosfoglicerdeos (fosfatidi1colina,
fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina e fosfatidiltreonina), estio-
golipdios e colesterol. Os fosfoglicerdeos e os esfingolipdios
contm o radical fosfato e so chamados fosfolipdios. Outro
constituinte anfiptico importante das membranas celulares so
os glicolipdios, designao genrica para todos os lipdios que
contm hidratos de carbono, com ou sem radicais fosfato. Os
glicolipdios mais abundantes nas clulas dos animais so os
glicoestingolipdios, que so componentes de muitos receptores
' . .' : . : 0'0: :.' .
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Fig. 5.2 Por serem desprovidos de organelas, os eritrcitos so
um material adequado para o isolamento da membrana plasmtica.
Colocados em meio hipotnico, os eritrcitos se rompem, haven-
do perda da hemoglobina. Por centrifugao, podem-se obter as
membranas isoladas.
da superfcie celular. Os hidratos de carbono dos glicoesfingo-
lipdios so, em geral, molculas com seis tomos de carbono
(hexoses), como a glicose, manose, fucose e galactose. Esses
acares, associados em diferentes propores, formam uma
enorme variedade de cadeias glicdicas, com diferentes tama-
nhos, o que permite elevado nmero de combinaes.
As membranas das clulas animais contm colesterol, o que
no acontece nas clulas dos vegetais, que possuem outros es-
teris. Quanto maior a concentrao de esteris, menos fluida
ser a membrana. As membranas das clulas procariontes no
contm esteris, salvo raras excees.
A membrana uma estrutura
lipoprotica fluida
Todas as membranas celulares apresentam a mesma orga-
nizao bsica, sendo constitudas por duas camadas lipdicas
fluidas e contnuas, onde esto inseridas molculas proticas
(Fig. 5.3), constituindo um mosaico fluido. Esse modelo explica
todos os dados experimentais conhecidos e vlido para todas
as membranas celulares (mitocndrias, cloroplastos, retculo
endoplasmtico, aparelho de Golgi, lisossomos, endossomos,
vesculas de secreo, peroxissomos, envelope nuclear, mem-
brana plasmtica e outras).
As molculas da camada dupla de lipdios esto organizadas
com suas cadeias apoIares (hidrofbicas) voltadas para o interior
da membrana, enquanto as cabeas polares (hidroflicas) ficam
voltadas para o meio extracelular ou para o citoplasma, que so
meios aquosos. Essas duas camadas lipdicas esto associadas
devido interao hidrofbica de suas cadeias apoIares. As
protenas da membrana possuem resduos hidroflicos e hidro-
fbicos, e ficam mergulhadas na camada lipdica, de tal modo
que:
1) os resduos hidrofbicos das protenas esto no mesmo
nvel das cadeias hidrofbicas dos lipdios, e
2) os resduos hidroflicos das protenas ficam na altura das
cabeas polares dos lipdios, em contato com o meio ex-
tracelular ou com o citoplasma.
Portanto, a membrana constituda por uma camada hidro-
fbica mdia e duas camadas hidroflicas, uma interna (lado
citoplasmtico) e outra externa (Figs. 5.3 e 5.4).
Diversos experimentos mostraram que as protenas, exceto
quando fixadas pelo citoesqueleto, se deslocam com facilidade
no plano da membrana. Por exemplo, a fuso de clulas huma-
nas com clulas de camundongos - o que pode ser feito com
tratamento pelo vrus Sendai - mostra que, aps a fuso das
clulas, as protenas da membrana humana deslocam-se rapida-
mente, misturando-se com as protenas da membrana da clu-
la de camundongo. Estas ltimas tambm se deslocam, porm
com velocidade mais lenta, pois so protenas maiores. Outro
experimento que demonstra a fluidez da membrana observa-
do quando se adiciona a lectina concanavalina A a um cultivo
de amebas. Essa lectina (chama-se lectina a uma protena que
se ligue fortemente a glicdios especficos) tem a propriedade
de se ligar quimicamente a certas glicoprotenas da membrana
e tem sido utilizada para o estudo dessas glicoprotenas, que
atuam como receptores. Os receptores para a concanavalina
A, que normalmente se distribuem por toda a membrana, ao se
ligarem concanavalina migram rapidamente, impulsionado
pelo citoesqueleto, para uma determinada regio, onde ficam
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 79
Glicolipdio
Microtbulo
ig. 5.3 As membranas celulares so constitudas por duas camadas de molculas lipdicas, com as cadeias apoiares (hidrofbicas) co-
locadas no interior da membrana e as extremidades polares (hidrofilicas) voltadas para as superficies da membrana. As molculas das
protenas integrais esto mergulhadas na camada lipdica, com as pores hidrofbicas no centro e as pores hidrorilicas nas superficies
da membrana. Algumas dessas protenas atravessam toda a espessura da membrana (protenas transmembrana). As protenas perif-
ricas no esto mergulhadas na membrana. A insero dos microtbulos e ftlamentos de actina na membrana tambm est representada
neste desenho.
Molculas de hidratos de carbono associam-se a protenas da membrana, para formar glicoprotenas, e a lipdios, formando glicolip-
dios que, na membrana plasmtica, aparecem na face externa da membrana como componentes do glicoclice. Observar a acentuada
assimetria entre as duas faces da membrana.
concentrados formando um capuz (Fig. 5.5). Os deslocamentos
descritos nesses dois exemplos mostram que a membrana um
fluido que permite a movimentao das protenas dentro de uma
matriz lipdica lquida.
Protenas da membrana plasmtica
Embora existam diferenas entre os lipdios, que influem nas
propriedades das diversas membranas, a atividade metablica das
membranas depende principalmente das protenas. Cada tipo de
membrana tem suas protenas caractersticas, principais respon-
sveis pelas funes da membrana.
A membrana plasmtica possui grande variedade de protenas,
que podem ser divididas em dois grandes grupos, as integrais
ou intrnsecas e as perifricas ou extrnsecas, dependendo da
facilidade de extra-las da bicamada lipdica.
As protenas integrais esto firmemente associadas aos li-
pdios e s podem ser separadas da frao lipdica por meio de
tcnicas drsticas, como o emprego de detergentes. Setenta por
cento das protenas da membrana plasmtica so integrais, e aqui
se incluem a nitioria das enzimas da membrana, as glicoprotenas
responsvei"S'pelos grupos sangneos M-N, protenas transporta-
doras, receptores para hormnios, drogas e lectinas. As lectinas
so molculas com ao menos dois stios ativos que se ligam a
hidratos de carbono especficos, podendo causar aglutinao de
clulas. Foram descobertas nas plantas, mas hoje se sabe que
existem na maioria dos seres vivos. Elas so muito usadas em
biologia celular para analisar a composio qumica dos hidratos
de carbono das glicoprotenas e glicolipdios na face
externa da membrana plasmtica.
As molculas das protenas integrais, graas s regies hidro-
fbicas situadas na sua superfcie, prendem-se aos lipdios da
membrana por interao hidrofbica, deixando expostas ao meio
aquoso apenas suas partes hidroflicas (Figs. 5.3 e 5.4). Algumas
dessas molculas proticas atravessam inteiramente a bicamada
lipdica, fazendo salincia em ambas as superfcies da membrana,
sendo denominadas protenas transmembrana. As protenas
transmembrana podem atravessar a membrana uma nica vez, ou
ento apresentar a molcula muito longa e dobrada, atravessando
a membrana vrias vezes, recebendo ento o nome de protenas
transmembrana de passagem mltipla (Fig. 5.4).
As protenas extrnsecas podem ser isoladas facilmente, livres
de lipdios, pelo emprego de solues salinas. Essas protenas se
prendem s superfcies interna e externa da membrana celular
atravs de vrios mecanismos. Freqentemente, elas se fixam a
molculas glicosiladas de fosfatidil-inositol.
Os conhecimentos sobre as protenas da membrana plasmtica
foram muito facilitados pelo estudo da membrana dos eritrcitos
de mamferos, porque esses glbulos sangneos no possuem
um sistema interno de membranas. Neles, a nica membrana
existente a membrana plasmtica, que pode ser isolada junto
com o citoesqueleto subjacente. A separao das protenas da
80 Biologia Celular e Molecula;
cadeia glicdica de glicolipdio cadeia lipdica de glicoprotena
meio extracelular
membrana plasmtica
protena transmembrana (a) protena transmembrana (b)
Fig. 5.4 e s ~ n h o esquemtico mostrando protenas transmembrana de passagem nica (a) e de mltiplas passagens (b). Embora o dese-
nho mostre apenas uma molcula de protena perifrica, localizada na face externa da membrana, a face interna, como mostra a Fig. 5.3,
tambm apresenta protenas perifricas ou extrnsecas.
membrana dos eritrcitos e do seu citoesqueleto, por meio de ele-
troforese em gel, levou descoberta de trs protenas principais
que sero estudadas sumariamente a seguir, como exemplos.
Uma dessas protenas a espectrina. Trata-se de uma protena
extrnseca, fibrosa (molcula muito alongada), formada por dois
polipeptdeos, um com 220 kDa e o outro com 240 kDa (quilo-
dltons), aproximadamente. As molculas de espectrina formam
uma malha na superfcie interna da membrana do eritrcito. Tra-
ta-se de uma protena do citoesqueleto, provavelmente a principal
responsvel pela forma de disco bicncavo do eritrcito.
A protena chamada banda 3 (o nome vem da sua posio
no gel) uma protena transmembrana que atravessa a bicamada
lipdica diversas vezes. A molcula da banda 3 tem, portanto, uma
forma pregueada. Ela possui alguns hidratos de carbono presos
parte da molcula localizada na face externa do eritrcito, o que
uma caracterstica geral das glicoprotenas da membrana. A
banda 3 serve como caminho para a passagem de nions atravs
da membrana. Quando passam pelos capilares pulmonares, os
eritrcitos trocam HCO- por Cl- durante o processo de liberao
de COZo A banda 3 o canal por onde sai o HCO- e entra o Cl-
nos eritrcitos.
A ltima das trs principais protenas da membrana dos eri-
trcitos a glicoprotena denominada glicoforina, uma protena
intrnseca que, como a banda 3, tambm transmembrana. Ela '
atravessa a membrana apenas uma vez, e a maior parte de sua
molcula faz salincia na superfcie externa do eritrcito, onde
exibe 16 cadeias glicdicas, com 100 molculas de hidratos de
carbono, que fazem parte do glicoclice. Existem, na molcu-
la da glicoforina, um curto segmento hidrofbico, que fica no
interior da membrana, e dois segmentos hidroflicos, um loca-
lizado no lado citoplasmtico e o outro na superfcie externa da
membrana.
Glicoprotenas e glicolpdios so
marcadores responsveis pelos grupos
sangneos
Um bom exemplo de marcadores da superfcie celular so as
glicoprotenas e glicolipdios que determinam os grupos sang-
neos. Os grupos M-N so devidos tanto parte protica como
parte glicdica da glicoforina, uma glicoprotena da membrana
dos eritrcitos.
Os grupos A-B-O esto na dependncia de pequenas variaes
na estrutura dos hidratos de carbono presentes nos glicolipdios
e glicoprotenas da membrana dos eritrcitos. As pessoas com
sangue do tipo A apresentam a hexose modificada N-acetilgalac-
tosamina, numa determinada posio das molculas de hidratos
de carbono da superfcie. As pessoas com o sangue do tipo B pos-
suem, na mesma posio, a molcula de galactose. J o tipo AB
caracterizado pela presena de molculas de hidratos de carbono
com galactose ou com N-acetilgalactosamina na mesma posio.
No sangue do tipo 0, a mesma posio se apresenta desocupada,
no apresentando nenhum dos acares mencionados.
A membrana plasmtica assimtrica
Existe forte assimetria entre as duas faces da membrana plas-
mtica, tanto na composio de lipdios como nas protenas. Por
exemplo, na membrana dos eritrcitos a camada lipdica externa
mais rica em fosfatidilcolina, enquanto na camada lipdica em
contato com o citoplasma predominam fosfatidiletanolamina
(lecitina) e fosfatidilserina. Como a molcula de fosfatidilserina
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Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 81
g. 5.5 Acmulo dos receptores de concanavalinaA em 'um dos plos da Entamoeba histolytica. Normalmente, os receptores se distri-
uem por toda a membrana, mas o tratamento pela concanavalinaA promove a migrao dos receptores para uma posio polar (cap
rmation). O material foi fixado em glutaraldedo e tratado com benzidina, para revelar a peroxidase usada para marcar a concanavalina
o\. Aumento: 3.500 X. (Cortesia deA. Martinez-Palomo.)
m carga negativa, existe, alm da diferena qumica entre as
duas lminas da bicamada lipdica, tambm uma diferena de
arga eltrica. Outra diferena consiste na distribuio das mo-
culas de glicolipdios e glicoprotenas que se orientam com as
contendo acares, fazendo salincia na superfcie
da clula (Figs. 5.3 e 5.4) e nunca na face citoplasmtica da
membrana.
As Figs. 5.3 e 5.4 ilustram a assimetria na distribuio das
rotenas. As protenas perifricas esto concentradas na face
itoplasmtica da membrana, onde algumas podem ligar-se a
fil amentos do citoesqueleto. Na face externa aparecem as extre-
midades de protenas integrais, incluindo os resduos glicdicos
das glicoprotenas, que vo se adicionar aos glicdios complexos
dos glicolipdios e a outras molculas para constituir uma ca-
mada de acares, na face externa da membrana, denominada
glicoclice.
Visualizao das protenas integrais
das membranas
Isso possvel pela tcnica de criofratura, que consiste no
congelamento rpido do tecido, seguido de sua fratura. As super-
-'cies de fratura so dessecadas e sombreadas com uma camada
de metal pesado depositada em ngulo agudo e, depois, com
uma camada de carbono que servir de suporte. Em seguida, os
-omponentis celulares so dissolvidos, restando uma rplica
da superffie, de fratura. Essa rplica ser ento estudada no
microscpio eletrnico.
Com essa tcnica, a membrana sofre fratura na regio que fica
entre as duas camadas lipdicas, porque os lipdios esto presos
por interaes hidrofbicas, um tipo de ligao fraca. Formam-se,
assim, artificialmente, duas lminas que expem as faces situadas
no interior da membrana. A lmina interna, em contato com o
citoplasma, expe a denominada face P (protoplasmtica), e a
externa expe a chamada face E (externa). A face P olha para
fora da clula e a face E olha em sentido oposto (Fig. 5.6). A
tcnica de criofratura mostra muito bem as protenas integrais
da membrana, que aparecem como partculas presas principal-
mente face P, enquanto a face E mostra as cavidades onde essas
partculas estavam encaixadas.
As unidades de membrana tm
diferentes funes
No microscpio eletrnico, a membrana plasmtica e as de-
mais membranas celulares aparecem como duas camadas es-
curas, separadas por uma camada clara central. Admite-se que
esse aspecto trilaminar decorre da reduo do tetrxido de smio
usado como fixador e de sua deposio nas extremidades pola-
res dos lipdios. A parte central clara corresponderia s longas
cadeias lipdicas apoIares (Fig. 5.7).
A mesma estrutura trilaminar da membrana plasmtica vista
em todas as membranas da clula. Por isso, a estrutura trilarninar
foi denominada unidade de membrana ou membrana unit-
ria. A lmina central, clara, mede cerca de 3,5 nrn, e as lminas
escuras medem aproximadamente 2,0 nm cada uma. A espessura
total das membranas unitrias varia de 7 a 10 nrn.
Apesar de morfologicamente parecidas, as unidades de mem-
brana no so iguais, nem na morfologia, nem nas funes. Com
o aperfeioamento das tcnicas de preparao dos tecidos para
82 Biologia Celular e Molecular
Fig. 5.6 Microscopia eletrnica de rplica da membrana plasmtica criofraturada. A fratura tem lugar entre a lmina interna e a externa
da membrana. A maioria das molculas proticas permanece aderente superfcie da lmina interna que olha para fora da clula (face P).
Por isso, a face P das membranas plasmticas mostra numerosas partculas globulares. A superfcie interna da lmina externa, conhecida
como face E, apresenta poucas micelas proticas. Aumento: 150.000 X. (Cortesia deA. Martinez-Palomo.)
estudo no microscpio eletrnico, observou-se que as unidades
de membrana apresentam diferenas na espessura de suas lmi-
nas. Por outro lado, membranas isoladas mostram propriedades
enzimticas muito diferentes, bem como diversidades em sua
composio lipdica. Portanto, embora a organizao molecu-
lar bsica das membranas seja a mesma, elas variam muito na
composio qumica e nas propriedades biolgicas.
Uma mesma membrana, como a membrana plasmtica, pode
mostrar reas diferenciadas. Por exemplo, a membrana dos mi-
crovilos das clulas do epitlio do revestimento intestinal contm
dipeptidases e dissacaridases, enzimas responsveis pelas fases
finais da digesto das protenas e glicdios, respectivamente, e
que no existem no resto da membrana plasmtica dessas c-
lulas.
I I " I I ~ I W I I " I I ~ "
\
7,5 nm 3,5 nrn 2 nm 2 nrn
\
\
Glicoclice
A superfcie externa da membrana plasmtica apresenta uma
regio rica em hidratos de carbono ligados a protenas ou a lip-
dios, denominada glicoclice (Figs. 5.8 e 5.9).
Em sua maior parte, o glicoclice uma extenso da prpria
membrana e no uma camada separada, sendo constitudo: 1) pe-
las pores glicdicas das molculas de glicolipdios da membra-
na plasmtica, que fazem salincia na superfcie da membrana;
2) por glicoprotenas integrais da membrana ou adsorvidas aps
secreo; e 3) por algumas proteoglicanas, todas secretadas e, em
seguida, adsorvidas pela superfcie celular. Certos glicolipdios
possuem em suas molculas uma parte glicdica muito complexa,
Radical bsico
de fosfolipdio
Radical fosfato
'------- de fosfolipdio
Fig. 5.7 esquerda, aspecto da membrana vista ao microscpio eletrnico (duas lminas escuras e uma lmina central, clara). direita,
disposio dos lipdios.
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 83
Fig. 5.8 Glicoclice nos prolongamentos (microvilos) das clulas intestinais. Os microvilos, com fllamentos no interior, aparecem em
corte transversal. Observar a membrana plasmtica, da qual nasce o glicoclice. Eletromicrografia. Aumento: 100.000 X.
,
Fig. 1.9 Glicoclice das clulas epiteliais do intestino de rato, demonstrado pelo vermelho de rutnio. Observar tambm os feixes de flla-
m&tos que penetram nos microvilos (cabeas de setas). Microscopia eletrnica. Aumento: 84.000 X. (Cortesia deA. Martinez-Palomo.)
84 Biologia Celular e Molecular
contendo resduos de D-glicose, de D-galactose, de N-acetil-D-
galactosamina e de cido N-acetil-neuramnico (cido silico).
Dentre as glicoprotenas secretadas e que passam a fazer
parte do glicoclice, uma das mais abundantes a fibronecti-
na. Trata-se de uma molcula em forma da letra V, constituda
por dois polipeptdeos semelhantes, cada um pesando 250 kDa
(quilodltons). A molcula de fibronectina possui regies que se
combinam com molculas do meio extracelular e da superfcie
de outras clulas. Tem a funo de unir as clulas umas s outras
e matriz extracelular (ver Cap. 12). A fibronectina estabelece
uma continuidade entre o citoesqueleto e as macromolculas
do material extracelular dos tecidos (matriz extracelular). Os
microfilamentos de actina do citoesqueleto ligam-se a molculas
da protena vinculina que, por $ua vez, prendem-se a uma pro-
tena intrnseca da membrana, com peso molecular de 140 kDa
(quilodltons), e essa protena se liga fibronectina do glicoc-
lice. Por outras regies de sua molcula, a fibronectina liga-se
a protenas da matriz extracelular, dentre as quais se destaca o
colgeno. O conjunto de macromolculas protiCas constitudo
pela actina, vinculina, protena intrnseca de 140 kDa e fibro-
nectina, denominado fibronexus, um elo de unio funcional,
dinmico, entre o citoesqueleto de uma clula e a superfcie de
outras clulas ou a matriz extracelular dos tecidos.
Mas a fibronectina no a nica protena que estabelece cone-
xo entre as clulas e a matriz extracelular. As clulas dos tecidos
epiteliais de revestimento, por exemplo, ligam-se ao colgeno
por intermdio da glicoprotena laminina, que secretada pelas
clulas epiteliais e passa a fazer parte do seu glicoclice.
O glicoclice funcionalmente importante e sua composio
no esttica. Varia de um tipo celular para outro e, na mesma
clula, varia com a regio da membrana e conforme a atividade
funcional da clula em determinado momento.
As clulas se reconhecem
Numerosas evidncias demonstram que a superfcie celular
dotada de especificidade que permite s clulas se reconhecerem
mutuamente e estabelecerem certos tipos de relacionamento.
Cultivando-se clulas hepticas e renais, dissociadas e mistu-
radas, em meio lquido e mantido sob leve agitao, aps certo
tempo observar-se- o aparecimento de dois aglomerados celu-
lares. Um deles s contm clulas hepticas, enquanto o outro
contm apenas clulas renais. No comeo, as clulas estavam
individualmente isoladas e misturadas; entretanto, como o cultivo
foi mantido em agitao leve, as clulas se chocaram ao acaso e
as do mesmo tipo aceitaram-se mutuamente, aderindo umas s
outras e formando um esboo de tecido.
Outro exemplo que mostra esse papel biolgico da mem-
brana o fenmeno conhecido como inibio por contato.
Clulas cultivadas presas a um suporte - como uma lamnula,
por exemplo -, proliferaram fonnando uma lmina de uma
nica camada de clulas. Iniciando-se o cultivo com vrios gru-
pos ceulares, colocados em locais separados de uma mesma
lamnula, as clulas de cada grupo multiplicar-se-o sobre a
lamnula, formando uma camada celular. Cada grupo de clulas
cresce separadamente, mas, quando as clulas de um grupo se
encontram com as clulas de outro grupo, as mitoses cessam.
interessante notar que o mesmo experimento feito com clulas
cancerosas mostra que estas perdem a propriedade de inibio
por contato. Depois de se encontrarem, as clulas cancerosas
continuam se dividindo e amontoam-se desordenadamente umas
sobre as outras.
Como acontece com as macromolculas em geral, as protenas
da membrana so imunognicas, isto , promovem uma resposta
imunitria quando penetram num r g ~ o estranho. Por exem-
plo, o transplante de tecidos de um animal para outro estimula
o animal receptor a produzir clulas e anticorpos que atacam as
protenas da membrana plasmtica das clulas transplantadas.
Em humanos e em outros mamferos, o mecanismo para dis-
tinguir o que prprio do organismo (selj) daquilo que estra-
nho (non-selj) est na dependncia de um grupo de molculas
glicoproticas da membrana, que fazem salincia na superfcie
externa e so chamadas de complexo principal de histocom-
patibilidade ou MHC (major histocompatibility complex). H
duas classes de MHC, denominadas MHCI e MHCII. Todas as
clulas do organismo, exceto algumas clulas do sistema imu-
nitrio, contm na superfcie MHCI. Certas clulas do sistema
imunitrio apresentam o complexo MHCII em suas superfcies.
Os dois MHC so glicoprotenas cujas molculas tm uma parte
constante e uma parte varivel. A parte varivel difere muito, na
seqncia de aminocidos, de pessoa para pessoa, de tal maneira
que no existe a possibilidade de mais 1e uma pessoa apresentar
MHC idnticos. A nica exceo so os gmeos univitelinos ou
gmeos idnticos, por serem provenientes do mesmo vulo e do
mesmo espermatozide. Portanto, suas clulas so geneticamente
iguais, e, nesses gmeos, as protenas celulares so idnticas. Para
minimizar a resposta imunitria, causa da rejeio dos transplan-
tes, procuram-se doadores cujos complexos MHC sejam o mais
semelhante possvel aos do receptor.
Transporte atravs da membrana
Para a maioria das substncias, existe uma relao direta entre
sua solubilidade nos lipdios e sua capacidade de penetrao nas
clulas. De modo geral, os compostos hidrofbicos, solveis nos
lipdios, como os cidos graxos, hormnios esterides e anest-
sicos, atravessam facilmente a membrana. J as substncias hi-
droflicas, insolveis nos lipdios, penetram nas clulas com mais
dificuldade, dependendo do tamanho da molcula e, tambm, me
suas caractersticas qumicas. A configurao molecular poder
permitir que a substncia seja transportada por intermdio de
um dos mecanismos especiais desenvolvidos durante a evoluo.
como o transporte ativo e a difuso facilitada.
Permeabilidade gua
A membrana celular muito permevel gua. Colocada5
em uma soluo hipotnica, as clulas aumentam de volume
devido penetrao de gua (Fig. 5.1). Se o aumento de volulllC
for muito acentuado, a membrana plasmtica se rompe e o conte-
do da clula extravasa, fenmeno conhecido como lise celular
Inversamente, quando colocadas em soluo hipertnica, as
clulas diminuem de volume devido sada de gua (Fig. 5.1 .
Havendo entrada ou sada de gua, a forma da clula tambm ~
altera, por ser em parte determinada pelo estado de hidrata, -
dos colides celulares. Nas solues isotnicas, o volume e
forma da clula no se alteram.
Nas clulas das plantas ocorre fenmeno semelhante ao
servado nas dos animais, mas as conseqncias so diferell
vido parede de celulose. Em soluo hipertnica, as clulas
plantas perdem gua e diminuem de volume, separando-se
o citoplasma da parede celular, que rgida. Esse fenmeno
hamado plasmlise. Quando colocada em meio hipotnico, a
clula vegetal aumenta de volume, como o eritrcito, mas no
e rompe devido parede de celulose. Essa parede limita o au-
nto de volume da clula e o mantm dentro de uma faixa que
no excede a resistncia da membrana plasmtica. O aumento
de volume sofrido por uma clula vegetal, ao passar de uma
oluo hipertnica para uma soluo hipotnica, chama-se des-
plasmlise (Fig. 5.1).
Como foi visto anteriormente, existe uma relao direta entre
a solubilidade das substncias em lipdios e a facilidade com que
elas penetram nas clulas. Entretanto, a membrana tambm
muito permevel gua e a certas substncias hidrfilas e inso-
lveis em lipdios, como a uria e o glicerol, graas a molculas
proticas localizadas na espessura da membrana, atravessando-a
de uma face a outra. Essas protenas transmembrana formam
"poros funcionais", isto , caminhos hidroflicos pelos quais
passam muitos ons e molculas que no conseguem atravessar
a barreira lipdica.
Difuso passiva
Muitas molculas entram nas clulas ou delas saem por di-
fuso passiva, isto , como a distribuio do soluto tende a ser
uniforme em todos os pontos do solvente, o soluto penetra na
clula quando sua concentrao menor no interior celular do
que no meio externo, e sai da clula no caso contrrio. A fora
que impulsiona o soluto para dentro ou para fora da clula a
agitao trmica das molculas do soluto. A difuso passiva no
gasta energia. Trata-se de um processo fsico de difuso a favor
de um gradiente.
Transporte ativo
Outro processo de passagem atravs da membrana celular o
transporte ativo. Nesse caso, h consumo de energia fornecida
por ATP e a substncia pode ser transportad de um local de
baixa concentrao para um outro de alta concentrao. Portanto,
o soluto na difuso ativa transportado contra um gradiente,
que pode ser um gradiente apenas qumico, no caso de solutos
no-eletrlitos, ou ento um gradiente eltrico e qumico, quando
o soluto ionizado. Assim, por exemplo, quando a clula trans-
porta ons sdio (Na+) do citoplasma (onde sua concentrao
baixa) para o meio extracelular (onde sua concentrao mais
alta), deve ser vencido um obstculo qumico, representado pela
concentrao elevada de ons sdio no meio extracelular, e um
obstculo eltrico, correspondente soma das cargas positivas
dos ons sdio, que dificulta a entrada de novos ons positivos
no espao extracelular.
Difuso
Numerosas substncias, como a glicose e alguns aminocidos,
penetram nas clulas por difuso facilitada, sem gasto de ener-
gia. Nesse caso, a difuso se processa a favor de um gradiente,
porm em velocidade maior do que na difuso passiva.
A velocidade com que se processa a difuso facilitada
Em conseqncia, os compostos ismeros
geralmente penetram com velocidades muito diferentes. Nos
eritrcitos existe difuso facilitada de D-glicose e D-galactose,
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 85
mas o mesmo no ocorre em relao s formas L desses dois
acares.
A velocidade da difuso facilitada no proporcional concen-
trao do soluto, exceto em concentraes muito baixas. Elevando-
se gradativamente a concentrao da molcula penetrante, chega-se
a um ponto de saturao, alm do qual a velocidade de penetrao
no aumenta mais. Esta e outras propriedades mostram que, na
penetrao facilitada, a substncia penetrante se combina com uma
molcula transportadora ou permease, localizada na membrana
plasmtica (Fig. 5.10). Quando todas as molculas transportadoras
esto ocupadas, a velocidade de penetrao no pode aumentar.
Transporte impulsionado por gradientes inicos
I
A clula pode utilizar a energia potencial de gradientes de
ons, geralmente Na+, mas tambm K+ e H+, para transportar mo-
lculas e ons atravs da membrana. O epitlio de revestimento do
intestino delgado um exemplo elucidativo, para a compreenso
desse tipo de transporte contra gradiente. A ingesto de alimentos
leva glicose para a luz do intestino delgado, de onde ela deve ser
absorvida pelas clulas do epitlio e transferida para a corrente
sangnea. O transporte de glicose pela membrana plasmtica da
poro apical das clulas epiteliais do revestimento intestinal se
faz contra o gradiente de glicose existente no citoplasma dessas
clulas. Foi oQservado que essa penetrao de glicose se faz
concomitantemente com a penetrao de Na+. Trata-se de um co-
transporte, realizado com gasto de energia fornecida pelo gra-
diente de Na+. A concentrao deNa+ no citoplasma das clulas
muito baixa, devido atividade das molculas proticas que, por
transporte ativo, bombeiam Na+ para fora das clulas (bombas
de Na+). Como a concentrao de Na+ alta na luz do intestino,
esses ons tendem a penetrar constantemente nas clulas epiteliais
do revestimento intestinal. A energia do movimento dos ons
Na+ utilizada por essas clulas para realizar oco-transporte
de glicose para dentro da clula contra um gradiente de glicose.
glicose
1
. I d,
,I'""
permease
para glicose
r--__ ----.,.
..
modificao na
conformao
inicial
abertura
de canal
membrana
a permease
volta sua
conformao
inicial
plasmtica
Fig. 5.10 Esquema da permease da glicose. Esse acar tem sua
penetrao facilitada por uma protena integral da membrana que
modifica sua forma ao captar glicose do meio extracelular. Admite-se
que a modificao conformacional da permease facilita o transporte
de glicose sem gasto de energia.
86 Biologia Celular e Molecular
Portanto, os ons Na+ penetram nas clulas epiteliais a favor de
um gradiente, fornecendo energia para impulsionar as molculas
de glicose contra um gradiente. Esse tipo de co-transporte, que
movimenta ons e molculas na mesma direo, no exemplo para
dentro da clula, chama-se simporte (Fig. 5.11).
Nesses casos de co-transporte, a protena transportadora que
possibilita o simporte capta tanto glicose como Na+ no meio
extracelular (luz do intestino). A liberao do Na+no citoplasma,
onde a concentrao de Na+ baixa, causa uma modificao
na forma da molcula transportadora, que perde sua afinidade
para a glicose. Desse modo, a molcula de glicose captada na
luz intestinal liberada dentro da clula epitelial do intestino.
Em seguida, a glicose difunde-se no citoplasma e, pela parte
basal das clulas epiteliais, passa, por difuso facilitada, para o
tecido adjacente, onde penetra nos capilares sangneos para ser
distribuda pelo organismo.
Em outros casos de co-transporte, foi observado que o on
que fornece energia e a molcula que transportada movem-se
em direes opostas, constituindo o que se denomina antiporte
(Fig. 5.11). Nos antiportes, quando o on fornecedor de ener-
gia se movimenta para o citoplasma, a molcula transportada
transferida para fora da clula, e vice-versa.
Muitas molculas importantes para as clulas, como hidratos
de carbono e aminocidos, bem como ons, podem ser trans-
portadas por meio de simportes e antiportes, alm dos outros
processos de transporte j mencionados.
Transporte em quantidade
Pelos processos j descritos neste captulo, molculas pe-
quenas e ons atravessam a membrana plasmtica e entram no
citoplasma ou dele saem.
Entretanto, as clulas tambm so capazes de transferir para o
seu interior, em bloco, grupos de macromolculas (protenas, po-
lissacardeos, polinucleotdeos) e, at mesmo, partculas visveis
ao microscpio ptico, como bactrias e outros microrganismos.
Esse transporte depende de alteraes morfolgicas da superfcie
celular, onde se formam dobras englobam o material a ser
meio extracelular
Fig. 5.11 Neste desenho, os ons representados pelo quadrado (a),
mais concentrados do meio extracelular, impulsionam a molcula
(b) para dentro da clula, no simporte. Quando a molcula trans-
portada em sentido oposto ao movimento dos ons, o sistema se
denomina antiporte. A energia derivada do gradiente inico de (a)
utilizada para movimentar a molcula ou on (b).
introduzido na clula. O transporte em quantidade para dentro da
clula, tambm chamado endocitose, feito por dois processos
denominados fagocitose e pinocitose, que, apesar de algumas
diferenas superficiais, tm muito em comum nos seus princpios
bsicos. Quando a transferncia de macromolculas tem lugar em
sentido inverso, isto , do citoplasma para o meio extracelular, o
processo recebe o nome exocitose. Por exemplo, as
clulas secretoras de protenas, co'ihB- as do pncreas excrino,
acumulam o produto de secreo em grnulos citoplasmticos
revestidos de membrana, que se fundem com a membrana celular
e se abrem para o exterior da clula, eliminando assim, por exo-
cito se, as macromolculas secretadas. A exocitose dificultada
porque todas as membranas celulares tm carga eltrica nega-
tiva, devido aos radicais fosfato dos fosfolipdios, e por isso se
repelem. Para sua realizao, a exocitose depende das protenas
fusognicas, que possibilitam a fuso das membranas das ves-
culas de exocitose com a membrana plasmtica.
Fagocitose
o nome dado ao processo pelo qual a clula, graas for-
mao de pseudpodos, engloba no seu citoplasma partculas
slidas que, por suas dimenses, so visveis ao microscpio
ptico. Portanto, a fagocitose pode ser facilmente observada pelo
estudo.de clulas vivas com os microscpios de contraste de fase.
A fagocitose tem lugar quando a partcula se fixa a receptores
especficos da membrana celular, capazes de desencadear uma
resposta da qual participa o citoesqueleto (Figs. 5.12 e 5.13).
Nos protozorios, a fagocitose um processo de alimentao;
nos animais, representa um mecanismo de defesa, atravs do qual
clulas especializadas, chamadas clulas fagocitrias, englobam
e destroem partculas estranhas, principalmente microrganismos
invasores.
Os aspectos morfolgicos da fagocitose tm sido estudados nas
amebas gigantes, que se alimentam por esse processo e cuja ativi-
dade fagocitria to grande que uma nica ameba pode englobar
10 paramcios - seu alimento natural - em cinco minutos. Os
paramcios chocam-se ao acaso com as amebas e ficam presos
no extenso glicoclice, sendo fagocitados em seguida.
A fagocitose consiste na formao de pseudpodos, que en-
volvem gradualmente cada paramcio. Forma-se desse modo um
vacolo, o fagossomo, que puxado pela atividade motora do
citoesqueleto para a profundidade do citoplasma. O fagossolI1o
se funde com lisossomos, ocorrendo ento a digesto do material
fagocitado pelas enzimas hidrolticas dos -lisossomos.
A fagocitose um processo seletivo, conforme pode ser ob-\
servado no exemplo da fagocitose de paramcios pelas amebas,
j mencionado. A primeira etapa, isto , a fixao dos paramcios
na superfcie das amebas, deve-se afinidade entre os paramcios
e o glicoclice das amebas. Essa fase do processo, que consiste
no reconhecimento dos paramcios pelos receptores da superfcie
da ameba, no afetada pela temperatura, que tem efeito sobre a
fase seguinte, de ingesto dos paramcios. Colocando-se amebas
e paramcios em baixa temperatura, acumulam-se paramcios
presos superfcie das amebas sem que haja fagocitose. Elevan-
do-se a temperatura, esta se processa de imediato.
Nos mamferos, a fagocitose feita principalmente por clulas
especializadas na defesa do organismo, como os neutrfilos e ma-
crfagos (Fig. 5.14). Todavia, conforme mostra a Fig. 5.15, vrio
microrganismos desenvolveram, durante a evoluo, diversos meca
nismos para escapar morte intracelular aps serem fagocitado,
Hemcia
revestida com
fato r C3 do
complemento
Macrfago
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 87
Fig. 5.12 Esquema mostrando que a fagocitose resulta da interao de molculas especficas. O exemplo mostra hemcias experimental-
mente revestidas pelo fator C3 do complemento (o complemento um grupo de protenas do plasma sangneo, com diversas funes).
A combinao sucessiva das molculas do fator C3 com os receptores pode ser comparada ao fechamento de um zper. Desse modo, a
hemcia englobada num vacolo. O receptor estimulado promove a polimerizao de monmeros de actina do citossol, que vo formar
micromamentos contrteis. (Baseado em Silverstein, S.e., Michl,]. and Loike,].D. : International Cel! Biology 1980-1981. Schweiger, R.G.
(ed.) Springer, NewYork, 1981.)
88 Biologia Celular e Molecular
Bactria recoberta
por imunoglobina
Fig. 5.13 Etapas (1-4) da fagocitose de uma bactria j atacada por imunoglobulina. A superfcie do macrfago tem receptores para o
segmento Fc da imunoglobulina, que promovem a aderncia da bactria. Em 4 aparece a bactria dentro de um fagossomo, onde poder
ser morta e, depois, digerida pelas enzimas dos lisossomos. M; mitocndria; REG, retculo endoplasmtico granular; C, centrolo; G, apare-
lho de Golgi. (Reproduzido com permisso de Carneiro,]. Bases Celulares para a Fisiopatologia. ln: Marcondes, M. et aI. Clnica Mdica,
3." ed. , Guanabara Koogan, Rio, 1984.)
Fig. 5.14 Micrografia eletrnica mostrando macrfagos onde est se reproduzindo o Mycobacterium leprae, bacilo responsvel pela
hansenase.
(
fagossomo
lisossomo
livre
Bacilo da
tuberculose
Bacilo da
hansenase
lisossomo
\ : ) . . . - ~ - - fundindo-se
com fagossomo
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 89
Tripanossomo
da doena
de Chagas
Fig. 5.15 Desenhos ilustrando trs exemplos de mecanismos utilizados por microrganismos patognicos (pathos, doena, e genesis,
gerao) fagocitados, para evitar serem atacados pelos lisossomos. A. Alguns microrganismos, como o bacilo da tuberculose, secretam
uma substncia que impede a fuso dos lisossomos com os fagossomos. B. J o bacilo causador da hansenase (lepra) se defende desen-
volvendo uma cpsula resistente e impermevel s enzimas lisossmicas. C. Outro exemplo dado pelo Trypanosoma cruzi, que, ao ser
fagocitado, rapidamente digere a membrana que o envolve (membrana do fagossomo), tornando-se livre no citoplasma.
Pinocitose: captao ativa de macromolculas
em soluo
O termo pinocitose foi usado inicialmente para designar o
englobamento de gotculas de lquido, observado em clulas cul-
tivadas. Essas clulas emitem delgadas expanses do citoplasma
que englobam gotculas do meio de cultivo em vesculas de at 1
J.lIIl de dimetro. Todavia, essa modalidade de pinocitose restrita
a raros tipos celulares, principalmente nas culturas de clulas.
Na pinocitose comum, observada em grau varivel em to-
das as clulas, ocorre a invaginao de uma rea localizada da
membrana plasmtica, formando-se pequenas vesculas que so
puxadas pelo citoesqueleto e penetram no citoplasma. Essas ve-
sculas carregam lquido e so de tamanho uniforme, com 200
nm de dimetro (Fig. 5.16). Em alguns casos, como nas clulas
endoteliais dos capilares sangneos, as vesculas de pino cito se
formadas num lado da clula atravessam o citoplasma e lanam
seu contedo no outro lado da clula, servindo como transpor-
tadoras.
Na pinocitose no-seletiva, as vesculas englobam todos os
solutos que estiverem presentes no fluido extracelular. Todavia,
na maioria das clulas, a pinocitose seletiva e realizada em
duas etapas. Na primeira, a substncia a ser incorporada ade-
re a receptores da superfcie celular; na segunda, a membrana
se afunda e o material a ela aderido passa para uma vescula.
Esta se destaca da superfcie celular e penetra no citoplasma
(Fig. 5.17). Um exemplo bem estudado de pinocitose seletiva
encontrado nas clulas precursoras das hemcias que incor-
poram transferrina, uma protena plasmtica transportadora do
ferro que usado para a sntese de hemoglobina. Contudo, s
existe pinocitose em locais especficos de membrana, onde h
receptores para as molculas de transferrina. Essa pinocitose
tem a vantagem de possibilitar a incorporao ao citoplasma de
grandes quantidades de um tipo de molcula, sem a penetrao
concomitante de muita gua.
Os cortes examinados no microscpio eletrnico mostram que
as reas da membrana onde se formam as vesculas da pinocitose
seletiva apresentam prolongamentos finos e curtos na face citos-
slica, com o aspecto dos plos de uma escova. Quando a vescu-
la se destaca, sua superfcie irregular e filamentosa (nos cortes).
Por isso foi chamada de vescula coberta (coated vesicle). Na
realidade, a superfcie da vescula coberta apresenta um reves-
timento com o aspecto de uma malha pentagonal ou hexagonal
(Fig. 5.18), constituda principalmente por molculas da protena
clatrina, responsvel pelo aspecto filamentoso visto nos cortes.
ln vitro, mesmo na ausncia de vesculas, as molculas de c1atrina
se associam espontaneamente, sem gasto de energia, para formar
estruturas esfricas constitudas por uma rede de malha penta ou
hexagonal. Na presena de vesculas constitudas somente por
membrana, a agregao de clatrina se d de preferncia em tomo
das vesculas que possuem receptores para molculas da rede de
clatrina. Filamentos de actina, que se inserem na superfcie das
vesculas cobertas, participam do deslocamento dessas vesculas
para a profundidade do citoplasma.
Compartimento endossomal
O compartimento endossomal encontrado desde a parte peri-
frica do citoplasma at as proximidades do aparelho de Golgi e do
ncleo celular. Trata-se de um sistema muito irregular de tbulos
e vesculas cujo interior cido, com pR entre 5 e 6. Material que
captado pela membrana celular e introduzido no citoplasma por
meio das vesculas de pinocitose, passa para o interior dos endos-
somos, graas fuso da membrana das vesculas de pinocitose
90 Biologia Celular e Molecular
Fig. 5.16 Parede de vaso capilar sangneo mostrando clulas endoteliais com numerosas vesculas de pinocitose (setas). Eletromicro-
grafia. Aumento: 18.000 x.
com a membrana do compartimento endossomal (Fig. 5.17). Esse
compartimento atua sobre as molculas captadas por pinocitose e
as dirige para diversos destinos intracelulares. O compartimento
endossomal um local de separao e endereamento das mol-
culas introduzidas no citoplasma pelas vesculas de pinocitose,
constituindo um componente importante da via endoctica.
Costuma-se distinguir os endossomos precoces (early endoso-
mes) e os endossomos tardios (late endosomes), caracterizados
por diferenas de pH e composio protica. Os endossomos pre-
coces tm pH menos cido do que o dos endossomos tardios.
Molculas dissolvidas ou ligadas a receptores da membrana
geralmente passam dos endossomos precoces para os endosso-
mos tardios, enquanto as protenas integrais da membrana da
vescula endoctica se concentram em regies tubulares espe-
cializadas dos endossomos precoces, que constituem regies
de reciclagem de membrana (Fig. 5.17). Dessas regies partem
vesculas que levam a membrana com suas protenas de vol-
ta para a superfcie celular. As molculas que passam para os
endosso mos tardios acabam nos lisossomos, por mecanismos
poucos conhecidos. Assim, os lisossomos so o compartimento
terminal da via endoctica.
Reciclagem de membrana plasmtica
Grande quantidade de membrana plasmtica introduzida no
citossol, sem que se note encolhimento da membrana, sem dimi-
nuio do tamanho da clula e sem a sntese de novas molculas
para reconstituir a membrana removida. A enorme quantidade
de membrana retirada da superfcie celular pelos processos de
fagocitose e pinocitose compensada pela devoluo de mem-
brana pelas vesculas de secreo, e tambm pelo retomo da
membrana das vesculas de pinocitose depois que elas liberam
suas cargas nos endossomos (Fig. 5.17). Assim, existe nas clulas
em geral um fluxo constante de membranas, entre a membrana
plasmtica e a membrana das vesculas de fagocitose, pinocito\se
e de secreo. As clulas se mantm do mesmo tamanho n ~ o
pela sntese de nova membrana plasmtica, mas pela devoluo
da membrana retirada.
Os lisossomos so depsitos de
hidrolases cidas
As substncias que penetram na clula por pinocitose ou fago-
citose, bem como componentes celulares desgastados pelo uso,
podem sofrer a ao de enzimas digestivas contidas em organelas
denominadas lisossomos.
Os lisossomos so corpsculos geralmente esfricos (Fig.
5.19) de estrutura e dimenses muito variveis. Cada lisos somo
envolvido por uma unidade de membrana, contm enzimas
hidrolticas com atividade mxima em pH cido e, por isso, ge-
nericamente denominadas de hidrolases cidas.
Ao contrrio das outras organelas, que foram descobertas gra-
as aos microscpios ptico e eletrnico, os lisos somos foram
identificados, pela primeira vez, pela tcnica de centrifugao
(
)

protenas do
revestimento
(clatrina)


digesto no
lisossomo
molculas ligantes










vescula
de pinocitose
revestida

vescula
de pinocitose
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 91
membrana
plasmtica
retorno de
receptores e
de membrana
fuso com
endossomo
precoce

endossomo
tardio


.
ig. 5.17 Esquema da via endoctica e da reciclagem de membrana plasmtica. Ligantes como hormnios, fatores de crescimento e ou-
tras molculas se prendem a receptores especficos da membrana plasmtica e so introduzidos no citoplasma por meio das vesculas
revestidas de clatrina. Depois da liberao das molculas de clatrina e protenas a ela associadas, a vescula de pinocitose se funde com
componentes do compartimento endossomal, onde, devido ao baixo pH, o ligante se separa dos receptores. Estes se concentram numa
regio especial do endossomo precoce e so devolvidos superfcie celular. Assim, tanto receptores como membrana plasmtica so
reciclados para serem novamente usados. Na etapa seguinte, o ligante pode ser encontrado nos lisossomos. Todos os deslocamentos de
vesculas descritos se realizam pela atividade de protenas motoras com a participao do citoesqueleto.
fracionada. Observou-se que era possvel isolar da frao rica em
mitocndrias uma subfrao que revelava atividade de hidrolases
cidas aps tratamentos capazes de romper membranas.
Da tirou-se a concluso de que essa subfrao deveria con-
ter vesculas onde as enzimas estariam isoladas por membrana.
Posteriormente - e graas sobretudo tcnica citoqumica para
demonstrao de fosfatase cida, uma enzima dos lisossomos
- foi possvel a identificao dessas organelas atravs das mi-
croscopias ptica e eletrnica.
Os lisossomos so ricos em enzimas digestivas para quase
todas as macromolculas biolgicas, e as clulas seriam facil-
mente destrudas se essas enzimas no estivessem contidas numa
organela envolta por membrana. O fato de que as enzimas lisoss-
rnicas so ativas em pR cido, enquanto o pR do citossol neutro,
constitui uma proteo adicional contra os efeitos dessas enzimas
na ocorrncia eventual de ruptura de lisossomos. O elenco de
enzimas presentes nos lisos somos varivel de acordo com o tipo
celular e depende da especializao funcional de cada clula.
As vesculas de fagocitose ou fagossomos fundem-se com
lisossomos, misturando-se assim o material a ser digerido com as
enzimas lisossmicas. Na membrana dos lisossomos existe uma
enzima que utiliza energia liberada de ATP para bombear prtons
(R+) para dentro dos lisossomos, estabelecendo assim um pR
entre 4,5 e 5, ideal para a atividade das hidrolases cidas.
Algumas vezes permanecem, nos lisossomos, depsitos de
material que resistiu ao processo digestivo, formando-se os cor-
pos residuais, que se acumulam, com o decorrer do tempo, nas
clulas de vida longa.
92 Biologia Celular e Molecular
(
Fig. 5.18 Vescula coberta ou coated vesicle, exibindo a capa cons-
tituda por uma rede contendo clatrina, em arranjo poligonal (quase
sempre hexagonal). Para melhor visualizao, numa parte da vescula
a capa de clatrina aparece destacada. (Reproduzido com permisso
de Carneiro,]. Bases Celulares para Fisiopatologia.ln: Marcondes, M.
et ai. Clnica Mdica, 3. a ed. Guanabara Koogan, Rio, 1984.)
Fig. 5.19 Micrografia eletrnica de clula do crtex da glndula
adrenaI. Os corpsculos globosos e eltron-densos, com zonas mais
escuras em seu interior, so lisossomos. Os dois lisossomos cen-
trais mostram, nitidamente, as membranas limitantes. Aumento:
35.000 x.
Em alguns tipos celulares que no se dividem, como os neu-
rnios e as clulas do msculo cardaco, os corpos residuais se
agregam, formando partculas grandes, visveis no microscpio
ptico, contendo lipdios complexos de cor parda e chamados
grnulos de Iipofuscina. Esses grnulos aumentam de nmero
com a idade.
Outras vezes, o acmulo de material nos corpos residuais
conseqncia de um defeito hereditrio dos lisossomos. Nesses
casos falta uma ou vrias das enzimas que normalmente exis-
tem nos lisossomos. Por exemplo, na doena de Pompe, cujo
aparecimento se verifica nos primeiros anos de vida, todas a
clulas, sobretudo as hepticas e musculares, se carregam de
grande quantidade de glicognio. Nessa doena, os lisossomo
so deficientes na enzima glicosidase, que degrada o glicognio
Os acmulos de glicognio so mais acentuados no fgado e
no msculo, porque nesses tecidos existe normalmente maior
quantidade desse polissacardeo. H diversas outras doenas
hereditrias em que a falta de certas enzimas lisossmicas pode
produzir acmulos de glicosaminoglicanas (mucopolissacar-
deos) ou lipdios.
Nas clulas eucariontes, observa-se a degradao de pores
do citoplasma pela atividade das enzimas dos lisossomos pelo
processo denominado autofagia.
Ao microscpio eletrnico, a autofagia caracteriza-se pelo
aparecimento de organelas, como mitocndrias, cloroplastos e
vesculas de secreo, no interior de vesculas cujas paredes so
constitudas por uma membrana derivada do retculo endoplas-
mtico liso. Essas vesculas so chamadas vacolos autofgicos
ou autofagossomos (Fig. 5.20).
Organelas alteradas ou que no so mais necessrias so en-
volvidas por membrana, que imediatamente se funde com diver-
sos lisossomos, expondo assim o contedo do vacolo atividade
hidroltica das enzimas lisossmicas.
Em certas condies fisiolgicas, h um aumento da autofa-
gia. Isso acontece, por exemplo, nas glndulas mamrias quando
termina a lactao. Durante a gravidez, aumenta o nmero das
clulas secretoras dessas glndulas, para produzir leite aps o
parto. Terminado o perodo de lactao, tem lugar a destruio
autofgica dos restos de seCreo e das organelas no mais ne-
cessrias.
As enzimas lisossmicas algumas vezes tambm participam
da digesto de molculas extracelulares. Nesses casos, a mem-
brana dos lisossomos se funde com a membrana plasmtica e as
enzimas so jogadas no meio extracelular. Por exemplo, os eosi-
nfilos secretam enzimas lisossmicas nos locais onde ocodem
certos tipos de infeco. Mesmo em condies normais, pode
haver secreo de enzimas dos lisossomos, como na remodelac
dos ossos durante o crescimento, quando enzimas lisossmicas
digerem a matriz ssea para possibilitar o crescimento do es-
queleto.
Microvilos so prolongamentos que
aumentam a superfcie de absoro
das clulas
Nos metazorios existem clulas especializadas na absor> -
de substncias diversas. Nos mamiferos, as clulas mais be
estudadas so as do intestino delgado e do rim. As clulas q
)
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 93
ig. 5.20 Micrografia eletrruca de clula acinosa do pncreas. Aparecem diversos autofagossomos, que so lisossomos secundrios, em
diferentes etapas de digesto. Observar, em 1, duas pores de retculo endoplasmtico rugoso segregadas do citoplasma por membrana
e em inicio de alterao. Em 2, aparecem duas mitocndrias e retculo endoplasmtico rugoso em fase mais avanada de digesto. O
processo est em sua fase fmal em 3, onde j no se reconhecem as organelas. Aumento:45.000 X.
Fig. 5.21 Microvilos de clulas epiteliais do intestino delgado. Eletromicrografia. Aumento: 25.000 x.
94 Biologia Celular e Molecular
revestem a superfcie interna do intestino delgado so colunares,
dispostas em camada nica, e suas superfcies em contato com
os alimentos apresentam numerosas digitaes - os microvilos
(Fig. 5.21). Cada microvilo ou microvilosidade uma expanso
do citoplasma recoberta por membrana e contendo numerosos
feixes de microfilamentos de actina responsveis pela manuten-
o da forma dos microvilos; seu glicoclice mais desenvolvido
do que no resto da clula (Fig. 5.9). No intestino, a funo dos
microvilos aumentar a rea da membrana a fim de facilitar o
transporte dos nutrientes da cavidade ou luz intestinal para dentro
das clulas. Posteriormente, os nutrientes passam das clulas para
o tecido conjuntivo e, da, para os vasos sangneos e linfticos,
distribuindo-se ento por todo o organismo.
Os microvilos do epitlio intestinal so paralelos uns aos ou-
tros e formam uma camada muito regular na superfcie intestinal,
a borda estriada, visvel ao microscpio ptico.
No rim, os microvilos so encontrados na superfcie livre da ca-
mada nica de clulas cbicas que revestem os tbulos contorcidos
proximais. Pela luz desses tbulos passa um filtrado do plasma
sangneo que vai dar origem urina, mas que ainda contm muitas
molculas aproveitveis. Nos tbulos contorcidos proximais, muitas
dessas molculas so removidas do filtrado, passando para as clu-
las dos tbulos, de onde so posteriormente devolvidas ao sangue.
Os microvilos dessas clulas so tambm organizados paralelamen-
te entre si, formando uma borda estriada visvel ao microscpio
ptico. Os microvilos das clulas renais, como todos os microvilos,
s podem ser individualizados ao microscpio eletrnico.
A maioria das clulas possui microvilos, embora no to
numerosos e organizados como os das clulas absorventes. Os
microvilos encontrados nas clulas em geral so pequenos, de
forma irregular, contm menor nmero de filamentos e se dis-
tribuem irregularmente por toda a superfcie celular.
Alm de aumentarem a superfcie celular, alguns micro-
vilos possuem membranas que contm molculas especiais.
Por exemplo, algumas enzimas da membrana das clulas do
revestimento intestinal s existem nos microvilos, como as
dissacaridases e dipeptidases, responsveis pela etapa final
da digesto de hidratos de carbono e protenas, respectiva-
mente.
Estereoclios so prolongamentos
imveis que aumentam a superfcie
de algumas clulas epiteliais
Os estereoclios so expanses longas e filiformes da super-
fcie livre de certas clulas epiteliais (Fig. 5.22). So flexuosos
e, apesar do nome, no possuem a estrutura nem a capacidade
de movimento dos clios verdadeiros.
Os estereoclios assemelham-se mais aos microvilos, destes se
distinguindo por se ramificarem freqentemente e apresentarem
maior comprimento. Enquanto os microvilos so freqentes em
muitos tipos de clulas, os estereoclios so encontrados apenas
em certas clulas epiteliais, como as que revestem o epiddimo
e outros ductos do aparelho genital masculino. Os estereoclios
aumentam muito a superfcie das clulas, facilitando o transporte
de gua e outras molculas.
Fig. 5.22 Estereoclios. Clulas epiteliais do epiddimo. Notar que os estereoclios so flexuosos e, por isso, aparecem principalmente em
cortes oblquos. Eletrornicrografia. Aumento: 12.000 X.
)
Aderncia entre as clulas por meio
das CAMs, glicoprotenas
transmembrana
J foi mencionado, neste captulo, que as clulas se reco-
ecem e se podem ligar umas s outras. Essa propriedade
::mportante nos mecanismos de desenvolvimento embrionrio e
""lO estabelecimento e manuteno da estrutura dos tecidos, desde
animais mais primitivos at a espcie humana. As clulas
::nnbm aderem matriz extracelular, o que ser explicado no
Cap. 12.
As glicoprotenas da membrana responsveis pela aderncia
altre_as clulas so denominadas CAMs (cel! adhesion mole-
:-ules so receptores da superfcie especializados
;!IIl. reconhecer outras clulas e a elas aderir, para constituir os
:ecidos e rgos. Freqentemente, as clulas respondem unio
das CAMs com pequenas modificaes de comportamento,
muitas vezes ocorrendo reduo na freqncia de mitoses. A
inibio por contato nas clulas em cultura, j descrita, um
i!xemplo.
Todas as CAMs so glicoprotenas integrais transmembrana,
. to , com uma extremidade da molcula exposta na superfcie
elular e a outra extremidade fazendo salincia no lado citoplas-
mtico da membrana.
As IgCAMs constituem um grupo importante e suas mol-
culas lembram as dos anticorpos ou imunoglobulinas (Ig). Entre
as IgCAMs podem ser mencionadas a C-CAM, encontrada na
superfcie dos hepatcitos (clulas do fgado), a Ng-CAM, dos
neurnios e clulas da glia (a glia ou neurglia constituda de
clulas que apiam, isolam eletricamente e tm outras funes
relacionadas com a atividade do tecido nervoso), a N-CAM
participa da adeso dos neurnios e a I-CAM encontrada em
diversos tipos celulares. A I-CAM dos leuccitos (glbulos bran-
cos do sangue) participa da aderncia temporria dos leuccitos
com as clulas endoteliais dos vasos sangneos, como parte
do processo inflamatrio. Notar que, nesse caso, a aderncia
transitria, ao contrrio do que geralmente acontece nos teci-
dos, onde as CAMs formam aderncias duradouras. Tambm
nos processos de cicatrizao das feridas e na regenerao de
tecidos, as CAMs formam aderncias transitrias, que se des-
mancham e refazem num processo dinmico relacionado aos
deslocamentos celulares. O mesmo dinamismo acontece durante
o desenvolvimento embrionrio, para possibilitar os movimen-
tos celulares necessrios formao da estrutura definitiva dos
diversos tecidos e rgos.
As caderinas constituem outro grupo de CAMs, porm, ao
contrrio das IgCAMs, so dependentes dos ons Ca2+. As caderi-
nas mantm a adeso entre as clulas nas concentraes normais
de Ca
2
+ no meio extracelular, mas perdem a adesividade quando
a concentrao desse on muito baixa.
Quando as clulas normais se transformam em clulas ma-
ignas, perdem a adesividade, separando-se umas das outras.
-\s clulas malignas soltas so levadas pelo sangue ou pela
:nfa, produzindo tumores a distncia, as metstases (ver
Cap.16).
Mesmo as CAMs de clulas -normais podem participar de
processos patolgicos. Um exemplo a afinidade do vrus da
'"loliomielite pelos neurnios. Esses vrus se ligam a CAMs de
neurnios e, assim, penetram nessas clulas.
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 95
Estruturas especializadas asseguram
a juno celular, a vedao do espao
intercelular e a comunicao entre clulas
Muitas vezes, as clulas acham-se unidas umas s outras e
matriz extracelular graas a estruturas juncionais, que sero
descritas a seguir, e que podem ser divididas em trs grupos:
1.0, estruturas cuja funo principal unir fortemente as clulas
umas s outras ou matriz extracelular (desmossomos e junes
aderentes); 2., estrutura que promove a vedao entre as clulas
(znula oclusiva); e 3., estrutura que estabelece comunicao
entre uma clula e outra (nexos, juno comunicante ou gap
junction).
Desmossomo
Cada desmossomo tem a forma de uma placa arredondada
e constitudo pelas membranas de duas clulas vizinhas (Fig.
5.23). No desmossomo, o espao de 15 a 20 nm existente entre
as membranas permanece inalterad.o, mas a surge um material
filamentoso ou granular mais denso aos eltrons (Fig. 5.24).
Nos desmossomos, nota-se uma camada amorfa, eltron-densa,
na face de cada membrana, chamada placa do
desmossomo. Nessa placa se inserem filamentos intermedirios,
que se aprofundam no interior da clula (Fig. 5.24). Desse mo-
do, os desmossomos so locais onde o citoesqueleto se prende
membrana celular, e, como as clulas aderem umas s outras,
forma-se um elo de ligao do citoesqueleto de clulas vizinhas.
A constituio molecular dos filamentos intermedirios que se
prendem aos desmossomos depende do tipo celular. Nas clulas
epiteliais so constitudos de queratina, mas, nas clulas muscu-
lares do corao, so constitudos de vimentina.
A capacidade dos desmossomos para prender clulas vizinhas
depende da presena de caderinas, protenas transmembrana que
exibem adesividade na presena de ons Ca
2
+. Por isso, o des-
mossomo s tem poder de fixaras clulas quando a concentrao
de Ca
2
+ no espao extracelular normal. Baixas concentraes
desse on causam a separao das clulas.
Os desmossomos so muito freqentes nas clulas submetidas
a traes, como as da epiderne, do revestimento da lngua e es-
fago, e as clulas do msculo cardaco. Formam-se com muita
facilidade nas clulas' mantidas em cultura e desaparecem nas
que sofrem transformao maligna (clulas cancerosas), tanto
in vivo como nas culturas.
A composio molecular dos desmossomos complexa, com
a participao de diversas protenas, como as desmoplaquinas
I e II, glicoprotenas encontradas nas placas. Os filamentos in-
termedirios ligam-se s desmoplaquinas por meio de outras
protenas como a desmocalmina e a queratocalmina. As gli-
coprotenas desmoglena e desmocolinas so caderinas, glico-
protenas integrais da membrana, que prendem as membranas
celulares na altura do desmossomo e tambm contribuem para
a estrutura da placa. A desmoglena e as desmocolinas so pro-
tenas transmembrana que fazem salincia tanto na superfcie
externa como na superfcie citoplasmtica da membrana .
As clulas dos epitlios apiam-se em uma membrana no
celular, chamada lmina basal, que separa o epitlio do tecido
conjuntivo. A face das clulas epiteliais em contato com a lmina
basal apresenta estruturas parecidas com os desmossomos, porm
denominadas hemidesmossomos por no possurem a metade
correspondente outra clula epitelial (Fig. 5.25). Apesar de seu
- -- - ----
96 Biologia Celular e Molecular
Fig. 5.23 Eletromicrografia de interdigitaes
que prendem as clulas da epiderme umas s
outras. Aparecem tambm numerosos desmos-
somos (setas). Aumento: 36.000 X.
Fig. 5.24 Desmossomo. Eletromicrografia de clulas epiteliais de revestimento. Observe tambm os numerosos tonoftlamentos (um tipo
de fllamento intermedirio, constitudo de queratina) no citoplasma das duas clulas. Aumento: 100.000 X.
(
)
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 97
ig. 5.25 Eletromicrografia da parte basal de uma clula epitelial de revestimento, em contato com o tecido conjuntivo (fC). Aparecem
diversos hemidesmossomos unindo a clula ao tecido conjuntivo, atravs da lmina basal (LB). Existe material filamentoso prendendo
cada hemidesmossomo lmina basal. Pele de camundongo. Aumento: 80.000 X.
aspecto morfolgico semelhante a meio-desmossomo, os hemi-
desmossomos apresentam diferenas moleculares em relao aos
desmossomos. Os hemidesmossomos contm desmoplaquinas,
mas no contm desmoglena, aderindo s lminas basais por meio
de molculas proticas da classe das integrinas (ver Cap. 12).
Existe um grupo de doenas da pele humana, onde aparecem
bolhas, denominadas genericamente de pnfigo. Em certos tipos
de pnfigo, detectou-se no sangue dos pacientes anticorpos contra
caderinas dos desmossomos. Nesses casos, a desorganizao dos
desmossomos, pela alterao de suas protenas, causa o afasta-
mento das clulas da epiderme e a penetrao de lquido vindo
do tecido conjuntivo subjacente. Os desmossomos de outros teci-
dos que no a epiderme no mostram alteraes nesses doentes,
sugerindo que existem. diferenas nas protenas que constituem
os desmossomos de clulas diferentes.
Juno aderente
uma formao encontrada em diversos tecidos. Em certos
epitlios de revestimento, circunda a parte apical das clulas, como
um cinto contnuo (znul aderente), sendo particularmente desen-
volvida no epitlio colunar simples com borda estriada da mucosa
do intestino. Alm da forma de cinto, a juno aderente ocorre
tambm com a forma circular ou oval, como os desmossomos.
A juno aderente apresenta, nos cortes, um material granuloso e
eltron-denso no espao intercelular, semelhante ao observado nos
desmossomos. Na altura da juno aderente existe deposio de
material amorfo na face citoplasmtica de cada membrana celular,
formando placas, onde se inserem filamentos de actina que fazem
parte do citoesqueleto e so contrteis. Todavia, o material amorfo
que forma as placas das junes aderentes menos compacto do
que o observado nas placas dos desmossomos.
As junes aderentes, como os desmossomos, tambm so
sensveis aos nveis de ons Ca
2
+, sendo desorganizadas quando
a concentrao desses ons muito baixa, o que acarreta a se-
parao das clulas.
No caso das clulas colunares do epitlio intestinal, ajuno
aderente promove a adeso entre as clulas e oferece um local
de apoio para os filamentos que penetram nos microvilos das
clulas epiteliais com borda estriada.
Znula oclusiva
uma faixa contnua em tomo da poro apical de certas c-
lulas epiteliais, que veda, total ou parcialmente, o trnsito de ons
e molculas por entre as clulas. Desse modo, as substncias que
passam pela camada epitelial o fazem atravs das clulas, sendo
submetidas ao controle celular. Outra funo da znula oc1usiva,
tambm chamada juno oclusiva, permitir a existncia de
potenciais eltricos diferentes, conseqncia de diferenas na
inica entre as duas faces da camada epitelial. Isso
98 Biologia Celular e Molecular
seria impossvel se houvesse passagem livre de ons por entre
as clulas. Trata-se, assim, de uma estrutura responsvel pela
formao de compartimentos funcionalmente separados, muitas
vezes constitudos por camadas epiteliais com junes oclusivas
bem desenvolvidas.
A Fig. 5.26 mostra a estrutura da znula oclusiva. Em corte,
ela aparece como uma regio onde os folhetos externos das mem-
branas plasmticas das duas clulas vizinhas se fundem.
ComPlexo juncional
Est presente em vrios epitlios prximo extremidade celu-
lar livre, sendo constitudo dos seguintes elementos: znula oclu-
siva, juno (ou znula) aderente e uma fileira de desmossomos
(Figs. 5.27 e 5.28). Alguns autores no incluem os desmossomos .
como parte do complexo juncional. O complexo juncional uma
estrutura de adeso e vedao. Nas clulas do e p i t ~ l i o colunar
simples com borda estriada do intestino, existe, na altura do
complexo juncional, uma condensao de filamentos contendo
actina, mio sina e outras protenas, que recebe o nome de trama
terminal. Os filamentos da trama terminal se inserem na znula
de adeso e se continuam com os filamentos que penetram nos
microvilos da borda estriada. Os filamentos da trama terminal
so contnuos tambm com os filamentos do resto do citoplasma,
participando assim do citoesqueleto.
Juno comunicante
Tambm chamada nexos, juno em hiato ou gap junction
(Fig. 5.29), de ocorrncia muito freqente, tendo sido observada
entre as clulas epiteliais de revestimento, epiteliais glandulares,
musculares lisas, musculares cardacas e nervosas. Trata-se de
uma estrutura cuja funo principal estabelecer comunicao
entre as clulas, permitindo que grupos celulares funcionem de
modo coordenado e harmnico, formando um conjunto funcio-
nal.
Na juno comunicante, as membranas das clulas esto
separadas por 2 nm apenas. Cada juno - em geral com a
forma circular - constituda por um conjunto de tubos pro-
ticos paralelos que atravessam as membranas das duas clulas.
Cada tubo formado pela aposio de dois tubos menores, os
conexons, pertencentes a cada uma das clulas vizinhas. O
conexon constitudo por 6 unidades proticas., O dimetro
do tubo de 7 nm e seu poro ou canal, hidroflico, da ordem
de 1,0 a 1,4 nm, o que permite a passagem de molculas de
at 1.200 dltons.
Atravs das junes comunicantes podem passar de clula
para clula, por distncias apreciveis, substncias naturais
diversas como nucleotdeos, aminocidos e ons. Todavia, os
poros das junes comunicantes no permitem a passagem de
macromolculas como protenas e cidos nuclicos. Foi de-
monstrado que o AMP cclico (um mensageiro intracelular)
produzido numa clula em resposta ao hormonal passa
pelas junes comunicantes, promovendo resposta nas clulas
vizinhas. Isso evidencia que essas junes podem coordenar e
ampliar a resposta de grupos celulares a estmulos fisiolgicos.
As junes comunicantes podem passar de um estado de pouca
permeabilidade a um estado de grande permeabilidade e, desse
modo, abrem ou fecham a comunicao entre as clulas (Fig.
5.30).
Fig. 5.26Microscopia eletrnica de rplica de clula do revestimento do intestino delgado preparada por criofratura. Na regio da zonula
occludens, semelhante s junes oclusivas ou tight junctions, observa-se uma rede de salincias de uma lmina da membrana (parte
esquerda da figura) que correspondem s depresses vistas na parte esquerda da figura. Aumento: 68.000 x. (Cortesia deA. Martinez-
Palomo.)
Microvilosidade
com glicoclice
Penetrao da
trama terminal
mi crovisibilidade
Znula de _.,;;r ..... "
ocluso
A znula de
ocluso forma
_m cinto contnuo
Znula de __
- eso (contnua)
/
--==-:
- - ~ -
Fig. 5.27 Esquemas do comple-
xo juncional existente entre as
clulas epiteliais do intestino
delgado.
Fig. 5.28 Eletromicrografia do complexo juncional. ZO, zonula
occludens; ZA, zonula adherens; MA, ou D, macula adherens ou
desmossomo. Aumento: 80.000 X.
100 Biologia Celular e Molecular
Fig. 5.29 Micrografia eletrnica da rplica de uma juno comunicante criofraturada, mostrando a face P da membrana de uma das
clulas. Observe que h um acmulo de partculas globulares aderentes face P da membrana. A face E, que no aparece nesta figura,
contm depresses onde se encaixam as partculas da face A. Preparado de clula trofoblstica de embrio de rato. Aumento: 190.000 x.
(Cortesia de A. Martinez-Palomo.)
-
"
J
Fig. 5.30 Desenho esquemtico mostrando o modelo da juno
comunicante ou gap junction, no seu estado aberto ( esquerda) e
no estado completamente fechado ( direita). H um deslizamento
das molculas proticas da juno, que fecha o orificio central pelo
qual as clulas contguas se comunicam.
Onde se originam as molculas
que constituem as membranas
celulares?
Os diversos sistemas de membranas intracelulares e a
membrana plasmtica, com suas especializaes, so forma-
dos por diversos tipos de molculas lipdicas, principalmente
fosfolipdios, e por uma grande variedade de protenas. Essas
protenas tm funes enzimticas, receptoras, de aderncia e
outras indispensveis para as atividades funcionais das mem-
branas.
Os lipdios so sintetizados no retculo endoplasmtico liso e a
transferncia das molculas lipdicas ocorre por mais de um me-
canismo. Essas molculas podem migrar, partindo da membrana
do retculo endoplasmtico liso para membranas que sejam con-
tnuas com as desse retculo. por esse processo que os lipdios
passam do retculo liso para o rugoso. Muito freqentemente,
a transferncia se d por meio de vesculas que/e destacam
do retculo liso ou rugoso e so levadas por protenas motoras
apoiadas no citoesqueleto para outros compartimentos, com os
quais se fundem. Outro meio de transferncia representado por
protenas especiais do citossol que se combinam com molculas
lipdicas do retculo liso e as transferem para a membrana de
outros compartimentos. Um exemplo o transporte de molculas
de fosfolipdios da membrana do retculo liso para a membrana
dos peroxissomos.
As protenas so sintetizadas no retculo endoplasmtico
rugoso e, geralmente, so transportadas por vesculas que pas-
sam pelo aparelho de Golgi (Fig. 5.31). Assim, as protenas
chegam membrana plasmtica, e a extremidade da molcula
protica, que estava dentro da vescula, passa para a superfcie
da clula.
Ao lado da movimentao das novas molculas sintetizadas,
existe um intercmbio de molculas da membrana plasmtica,
quando ocorre a endocitose. Muitas molculas que chegam
membrana plasmtica levadas por vesculas so molculas
recicladas, e no, necessariamente, molculas novas. Existe
um fluxo de molculas transportadas por vesculas nos dois
sentidos: da membrana plasmtica para o interior da clula
e de compartimentos citoplasmticos para a membrana plas-
mtica.
(
retculo
endoplasmtico
rugoso
citossol
Membrana Plasmtica. Digesto Intracelular 101
vescula
transportadora
~ d
aparelho de Golgi
ig. 5.31 As protenas ,da membrana plasmtica so sintetizadas no retculo endoplasmtico rugoso. O exemplo mostra molculas de
glicoprotenas, cuja cadeia glicdica se inicia no retculo, sendo aumentada no aparelho de Golgi. Note que a vescula que leva as mol-
culas de glicoprotenas leva tambm os fosfolipdios onde elas esto inseridas. Observe, ainda, que o interior da vescula e as cisternas do
aparelho de Golgi e do retculo endoplasmtico so equivalentes superfcie externa da clula. A cadeia glicdica,inicialmente localizada
no interior dos compartimentos mencionados, passa para a face externa da membrana plasmtica.
Resumo
Pela atividade da membrana plasmtica, as clulas mantm
estvel a composio molecular e inica do meio intracelular,
transferindo parafora as molculas e ons desnecessrios e in-
troduzindo no citoplasma aquilo de que a clula necessita. A
membrana contm macromolculas proticas especficas com
grande afinidade para molculas produzidas por outras clulas
e que servem como sinais qumicos de comunicao. Isso pos-
sibilita a vida das cllas em sociedade, formando organismos
complexos.
Todas as membranas celulares tm estrutura molecular bsica
semelhante. So constitudas por uma bicamada lipdica, com
molculas proticas inseridas e fazendo salincias numa face
ou nas duas faces da membrana. Nas condies de temperatura
do corpo, a membrana um fluido lipoprotico, gozando as
molculas proticas de grande mobilidade lateral, no plano da
membrana, porm sem mobilidade em outra direo. Existe nti-
da assimetria entre as duas faces das membranas. Na membrana
plasmtica, aface externa rica em glicoprotenas receptoras,
enquanto a face interna, no lado citoplasmtico, possui protenas
que se ligam de modo reversvel aos filamentos do citoesqueleto.
Acares ligados a protenas, a glicosaminoglicanas e a lipdios
daface externa da membrana formam uma camada contnua, de
espessura varivel, em volta das clulas: o glicoclice.
Muitas molculas penetram nas clulas, sem consumo de
energia, pelo processo de difuso passiva. Outras so trans-
portadas ativamente, isto , com gasto de energia. Existe ainda o
processo de difuso facilitada, pelo qual a substncia atravessa
102 Biologia Celular e Molecular
a membrana, sem consumo de energia, graas s molculas de
penneases.
A transferncia de macromolculas em quantidade para den-
tro da clula ou endocitose feita por fagocitose, pinocitose no-
seletiva e pinocitose seletiva. O trnsito em sentido inverso - isto
, para fora da clula - tem o nome genrico de exocitose. Na
pinocitose seletiva, as macromolculas a serem transportadas se
prendem a receptores da membrana. Forma-se ento uma ves-
cula encapada que, ao se destacar da membrana, est revestida
por uma malha de clatrina e outras protenas.
As vesculas de endocitose podem-se fundir com lisossomos,
organelas ricas em enzimas digestivas, que atacam as macromo-
lculas introduzidas nas clulas. Outra funo dos lisossomos
digerir, nos autofagossomos, partes da clula que perderam o
significado funcional. Algumas vezes, as enzimas lisossmicas
so secretadas e vo digerir macromolculas da matriz extra-
celular.
Muitas clulas animais apresentam expanses digitiformes
da supeifcie: os microvilos ou microvilosidades, que aumentam
muito a supeifcie celular, sendo numerosos nas clulas especia-
lizadas na absoro, como as do revestimento intestinal.
Na maioria dos tecidos, as clulas se prendem umas s ou-
tras atravs de modificaes de suas membranas, conhecidas
coletivamente como junes celulares. Muitas vezes, a funo
principal dessas estruturas apenas a aderncia entre as clulas,
como acontece com os desmossomos; outras vezes, seu papel
vedar o espao intercelular, impedindo o trnsito molecular
extracelular de tal modo que a passagem tem que ser feita por
via intracelular e, portanto, sob o controle das prprias clulas.
A especializao da membrana para constituir essa estrutura
de vedao chama-se znula oclusiva ou znula de ocluso. H
tambm, em alguns locais, modificaes das membranas de c-
lulas adjacentes para permitir a passagem de uma clula para a
outra, de ons e molculas pequenas, que transferem informaes
atravs desses sinais qumicos, integrando a atividade de con-
juntos celulares. Esses conjuntos apresentam acentuada unidade
funcional, porque todas as clulas respondem aos estmulos (hor-
monais, nervosos) recebidos, mesmo que esses estmulos sejam
captados por apenas algumas clulas do conjunto.
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