Trabajo

FAMILIA Andrea Miluska Flores MYCOPLASMATACEA Cabrera E 099014-J
ALUMNA: CDIGO: PROFESORA:
BACTERIOLOGA
Olga Francia Arana
Lambayeque, 06 de Diciembre del 2012
FAMILIA MYCOPLASMATACEAE
BACTERIOLOGA
INTRODUCCIN
Los Micoplasmas son los organismos de vida libre ms pequeos que se conocen, que se caracterizan por carecer de pared celular lo que los diferencia de las bacterias verdaderas. Su biologa molecular es intrigante debido a un genoma inusualmente pequeo y una economa gentica que requiere una dependencia estricta del husped para su nutricin y refugio. Existen especies saprfitas, parsitos vegetales y animales. En el hombre, son agentes de numerosos procesos respiratorios como de infecciones genitales. Sus caractersticas biolgicas generan dificultades para su diagnstico. Ningn otro grupo de procariotas como los micoplasmas ha estado tan sujeto a controversia con el fin de establecer una funcin patognica clara. Los conceptos errneos acerca del rol de estos microorganismos en la patognesis pueden atribuirse a sus artimaas biolgicas y/o a las deficiencias existentes en el entendimiento de sus potenciales de virulencia. Del gnero Mycoplasma, la especie ms saltante es Mycoplasma pneumoniae constituye una causa frecuente de infecciones respiratorias adquiridas en la comunidad, siendo responsable del 10-40% de las neumonas extrahospitalarias en nios.
BACTERIOLOGA
FAM. MYCOPLASMATACEAE
I.
ANTECEDENTES HISTRICOS
El primer mycoplasma (Mycoplasma mycoides) fue aislado en 1898 por Nocard y Roux en animales con pleuroneumona bovina contagiosa. A partir de all, en relativamente poco tiempo, otros Mycoplasmas se identificaron en diversos animales. A estos microorganismos se los denomin genricamente como "organismos similares a los de la pleuro pulmona", y la abreviatura en ingls, PPLO (pleuroneumona like organisms), fue la forma habitual de designarlos durante mucho tiempo. Dos aos despus, Dujardin y Beaumetz describieron las caractersticas morfolgicas de sus colonias con aspecto de huevo frito. En 1944, Eaton describi un agente que superaba los filtros virolgicos y causaba reas focales de neumona cuando era inoculado en varias especies de roedores. Se pens por aproximadamente dos dcadas que era un virus, recibiendo la denominacin de agente Eaton. La evidencia que este agente era un mycoplasma provino de diferentes investigadores; Clyde evidenci su crecimiento en cultivos tisulares; Goodburn y Marmion observaron que el agente Eaton era igual al germen causante de la pleuroneumona bovina; y finalmente en 1962, Chanock fue el primero en lograr el crecimiento del organismo en medios artificiales libres de clulas y demostrar que produca
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la mayora de los casos de neumona atpica primaria y se lo identific como miembro del gnero Mycoplasma y, finalmente, en 1963 recibi su nombre actual de Mycoplasma pneumoniae. A finales de la dcada de 1980, se detect otra especie nueva denominada en ese momento Mycoplasma incognitus, en muestras de autopsia de pacientes con SIDA, lo que sugiere que este microorganismo puede ser otra infeccin oportunista o un cofactor transmisible por va sexual que influye en la progresin de la enfermedad. Este microorganismo fue identificado luego como una cepa de Mycoplasma fermentans, una bacteria con requerimientos nutricionales especiales. Otros mycoplasmas recientemente descritos se han aislado en pacientes infectados con VIH y estos descubrimientos determinaron un renovado inters en los factores de virulencia de los micoplasmas y en los mtodos para su deteccin e identificacin. II. TAXONOMA DE LOS MYCOPLASMAS Los Mycoplasmas se clasifican en la clase Mollicutes, que significa cascara blanda, referido a la falta de pared celular bacteriana rgida. La clase Mollicutes contiene cuatro rdenes: Mycoplasmatales, Entomoplasmatales, Acholeplasmatales y anaeroplasmatales. La orden Mycoplasmatales requieren esteroles como colesterol, para el cultivo in vitro. La nica familia del orden, Mycoplasmataceae que ahora incluye a los micoplasmas hemotrpicos que antes estaban clasificados en los gneros Eperythrozoon y Haemobartonella. Estos microorganismos parasitan la superficie de los eritrocitos. Esta familia contiene dos gneros: Mycoplasma y Ureaplasma. El gnero Mycoplasma est compuesto por ms de 100 especies que habitan en una amplia variedad de plantas y animales, como
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mamferos, insectos, aves y reptiles y pueden existir como comensales, parsitos y patgenos.
Segn el MANUAL DETERMINATIVO DE BERGEY de la 9na edicin se ubican en: Categora III: Bacterias carentes de pared celular. En el grupo 30: Mycoplasmas (Mollicutes)
Segn el MANUAL SISTEMATICO DE BERGEY 2da Edicon (2001) Volumen 3: Bacterias Gram Positivas Con Bajo G + C Seccin XXIII: Mycoplasma
Clasificacin taxonmica Phylum BXIII : Firmicutes Clase II : Mollicutes Orden I : Mycoplasmatales Familia I : Mycoplasmataceae Gnero I : Mycoplasma Especies: Mycoplasma pneumoniae M. salivarium M. orale M. buccale M. faucium M.lipophilum M. hominis M. fermentans M. genitalium Gnero II : Eperythrozoon Gnero III : Haemobartonella Gnero IV: Ureaplasma
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III.
GNERO: MYCOPLASMA
El gnero Mycoplasma est compuesto por ms de 100 especies que habitan en una amplia variedad de plantas y animales, como mamferos, insectos, aves y reptiles, y pueden existir como comensales, parsitos y patgenos. Los micoplasmas son los procariotas ms pequeos, cuya propiedad singular que caracteriza a estas formas simples y
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que las diferencia de las bacterias verdaderas es la ausencia de pared celular.
Gnero Mycoplasma
La ausencia de una pared celular bacteriana tpica que contenga peptidoglucano determina que estos microorganismos sean resistentes a los antimicrobiamos que tienen la pared celular como sitio de accin, como las penicilinas y las cefalosporinas. Pero son susceptibles frente a aquellos antibiticos que tienen por blanco otros componentes de la clula. La resistencia natural de los Mycoplasmas a la penicilina se aprovecha para preparar medios selectivos para su aislamiento a partir de muestras naturales. Son anaerobios facultativos, excepto pneumoniae, el cual es un aerobio estricto. Mycoplasma
Todas las especies de Mycoplasma producen adenosintrifosfato (ATP) por fosforilacin a nivel de sustrato efectuada por la cido fosfoglicerico cinasa y la piruvato cinasa. La cantidad de material gentico que compone su genoma es bastante pequea (peso molecular de 4.5 x 10 8 a 1 x 109), por su bajo contenido de guanina y citosina (23 a 40%) tambin se diferencia de otras procariotas. Debido a su menor contenido
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gentico, estos microorganismos presentan una capacidad biosinttica limitada.
1. MORFOLOGA Son clulas muy pequeas y pleomrficas, que carecen de pared celular, y estn rodeadas por una membrana trilaminar de 8 a 10nm de espesor. Su tamao oscila entre 0.2 y 0.3 m de dimetro y son capaces de pasar a travs de una membrana filtrante de 450nm de tamao del poro. Por tanto, estos microorganismos son capaces de atravesar filtros bacteriolgicos. Son resistentes a la lisis osmtica, esta capacidad de resistencia est dada por la naturaleza de su membrana plasmtica, que es ms estable que la de otros procariotas porque contiene esteroles que le proporciona estabilidad a su membrana, pero no lo pueden sintetizar, sino que lo toman del medio de cultivo. Son pleomrficas, ya que, al carecer de pared celular rgida, adoptan ciertas formas que van desde estructuras esfricas o piriformes hasta clulas filamentosas con ramificaciones o con estructuras terminales.
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Mycoplasma mycoides
Mycoplasma pneumoniae
La replicacin es bsicamente por fisin binaria, pero la replicacin del genoma no necesariamente esta sincronizada con la divisin celular y es responsable de las formas con brotes y de las cadenas en rosario que se observan con frecuencia; aunque tambin la forma de las clulas depende de la calidad nutricional, de la presin osmtica del medio de crecimiento y de la fase de crecimiento del cultivo. Si se desean realizar exmenes microscpicos es recomendable hacerlo con microscopia de contraste de fase o de campo oscuro, en cultivos jvenes que estn en fase logartmica, ya que en esta fase las clulas producen menores distorsiones como consecuencia de su plasticidad. La forma real de las clulas puede observarse mejor si se
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examinan clulas en desarrollo en un medio lquido pero adherido a una superficie de vidrio. Los preparados con GRAM tienen una utilidad limitada salvo para diferenciar a Mycoplasmas de bacterias en caldos de cultivo contaminado. Por medio de microscopia electrnica, se ha logrado observar una capa vellosa o una pelusa que recubre toda la superficie de la clula o parte de ella. En su interior la clula contienen ribosomas entremezclados con finas cadenas del nucleoide, pero no hay evidencias de mesosomas o de otras estructuras membranosas. Pueden presentan motilidad por deslizamiento sobre superficies cubiertas por lquidos (M. pneumoniae,), es decir, presentan estructuras especializadas en las terminaciones que sirven como sitio de fijacin y como borde de avance de la clula durante el movimiento.
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Estructura general de un Mycoplasma
El aislamiento de una protena contrctil del tipo de la actina y la presencia de un citoesqueleto primitivo, son lo que se sugiere que pueda presentar este gnero.
Elementos del citoesqueleto de Mycoplasma insons, que vive en las iguanas.
Mycoplasma mobile .En la imagen se muestra estructuras filamentosas marcadas por tringulos blancos.
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2. FISIOLOGA
El genoma del Mycoplasma consiste en una molcula

circular de ADN bicatenario que es de 500 MDa y es la ms pequea entre las clulas conocidas que se autorreplican, esto concuerda con la capacidad biosinttica limitada. Tambin se diferencia de otros procariotas por su bajo contenido de guanina y citocina (23-40%). El anlisis de RNA ribosmico sugiere una relacin con bacterias del gnero Clostridium.
Caractersticas de su cultivo
Son exigentes nutricionalmente con respecto al colesterol y esteroles relacionados para la sntesis de membrana, tambin carecen de vas enzimticas para la sntesis de purinas y pirimidinas. Por consiguiente, el cultivo de Mycoplasmas requiere un medio enriquecido
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que contenga precursores para la biosntesis de cidos nucleicos, protenas y lpidos. Los precursores para los cidos nucleicos y las protenas los provee el medio peptonado basal enriquecido y el extracto de levadura, mientras que los lpidos lo provee el agregado de suero. En medio slido forman unas colonias extremadamente pequeas, que tienen forma de cpula sobre la superficie del agar. La parte central de la colonia se desarrolla de forma profunda en el agar, produciendo un core central ms denso.
Morfologa tpica de un micoplasma con un denso ncleo y borde claro.
Si se les observa desde arriba tienen el aspecto de huevo frito, debido a la formacin del ncleo central denso que penetra en el agar, rodeado de un rea circular de dispersin de color menos intenso. Si hablamos de la curva de crecimiento diremos que el tiempo de duplicacin es de 1 a 6 horas, por tanto requieren hasta 3 semanas para formar una colonia visible.
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Aspecto de huevo fritode las colonias de micoplasma. Todos los micoplasmas excepto Mycoplasma penumoniae tienen esta morfologa caracterstica. Mycoplasma penumoniae necesita una atmsfera aerobia estricta. Se trata de uno de los micoplasmas de crecimiento ms lento y suele formar colonias granulares homogneas despus de al menos una semana de incubacin. Los restantes micoplasmas suelen crecer en un plazo comprendido entre 1 y 4 das.
Metabolismo
Son anaerobios facultativos, aunque desarrollan mejor en medios aerobios. Los Mycoplasmas usan en su mayor parte carbohidratos como fuente de energa y requieren diferentes vitaminas, aminocidos, purinas y pirimidinas como factores de crecimiento. 3. DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD Casi todos los Mycoplasmas producen infecciones superficiales, rara vez invaden el torrente sanguneo y los tejidos. El contacto estrecho de los Mycoplasmas con sus clulas huspedes es necesario para conseguir los nutrientes y los factores de crecimiento, en especial los precursores de
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cidos nucleicos, que los Mycoplasmas son incapaces de sintetizar. Los Mycoplasmas se adhieren a las membranas mucosas de los aparatos respiratorio, gastrointestinal y genitourinario. Para ello se han identificado receptores proteicos especficos y un extremo receptor especfico sobre algunos Mycoplasmas.
Los mecanismos por los cuales los Mycoplasmas causan enfermedad en los seres humanos y en los animales no estn claros. Elaboran cierto nmero de productos extracelulares que contribuyen a su capacidad para inducir enfermedad, pero con excepcin de la neurotoxina producida por el Mycoplasma neurolyticum, los intentos para detectar toxinas elaboradas por otras especies han resultado infructuosos. Si bien los sntomas neurotxicos similares a los causados por la exotoxina del M. neurolyticum tambin se observan despus de la inoculacin intravenosa con Mycoplasma gallisepticum, en el ltimo caso los efectos neurotxicos se asocian con clulas viables de Mycoplasmas y no con una exotoxina soluble. El Mycoplasma mycoides produce y excreta un galactano que se agrega alrededor de la superficie externa de la clula y se libera al medio. El galactano induce una respuesta patolgica en los animales en ausencia de microorganismos y se considera que
Micoplasma adherido al tejido por medio de un receptor proteico.
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desempea un papel patgeno anlogo a la endotoxina de las bacterias gran negativas, aunque bioqumicamente diferente. Los lipoglicanos de cierto nmero de especies de Mycoplasma y Acholeeplasma tambin presentan actividad de endotoxina, pero no se cuenta con evidencias concluyentes acerca de que alguna de estas molculas similares a los lipopolisacridos (LPS) participe en la patogenicidad de cualquiera de las enfermedades causadas por Mycoplasmas. Una acumulacin local de ciertos metabolitos de Mycoplasmas, que incluyen enzimas, perxido de hidrgeno, radicales superxido y amonaco, puede participar de forma individual o coordinada con otros factores para producir lesin tisular. Los efectos citopticos se reflejan en alteraciones del metabolismo de los tejidos infectados. Entre las alteraciones bioqumicas ms destacadas pueden mencionarse un agotamiento de la arginina y alteraciones en el metabolismo del cido nucleico del husped.
IV. ESPECIE: Mycoplasma pneumoniae De las 10 especies humanas aceptadas del gnero Mycoplasma slo en el caso del Mycoplasma pneumoniae se ha demostrado de forma concluyente que produce enfermedad. Este microorganismo no forma parte de la flora normal, como ocurre con la mayor parte de los aislamientos de Mycoplasmas humanos, pero es responsable de hasta un 10% del total de las neumonas comprobadas por radiografa de trax.
El M.pneumoniae comparte la mayora de caractersticas descritas para esta familia de organismos. Sin embargo, a diferencia de muchos Mycoplasmas humanos, crece bien en medios aerbicos y fermenta glucosa como su principal fuente de energa. Este organismo es tambin relativamente nico por su capacidad de lisar eritrocitos incorporados en el agar de
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crecimiento a travs de la elaboracin de perxido de hidrgeno. Causante de la neumona atpica, es uno de los tipos ms frecuentes de neumona adquirida en el medio extrahospitalario por personas menores de 40 aos de edad y que, por lo dems, estn sanas. El Mycoplasma pneumoniae, una bacteria intersticial que se disemina por las gotitas de las secreciones respiratorias. A diferencia de lo que ocurre con la neumona tpica extrahospitalaria, que generalmente se debe a neumococos, la neumona causada por Mycoplasma afecta con mayor frecuencia a nios y adultos jvenes (personas de 5 a 20 aos de edad) y se confunde a menudo con un problema de asma. 1. MORFOLOGA Y FISIOLOGA La forma del M. pneumoniae vara desde clulas cocoides pequeas hasta clulas filamentosas cortas y ramificadas u abastonadas. La caracterstica ms sobresaliente de su morfologa es un agrandamiento bulboso con una estructura terminal diferenciada que se puede observar en las clulas filamentosas jvenes desarrolladas en cultivos en caldo. Por medio de esta extremidad diferencial el M. pneumoniae puede fijarse a superficies de vidrio, a eritrocitos y a clulas del epitelio respiratorio. Cuando se fijan de este modo los microorganismos presentan un movimiento de deslizamiento.
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El microorganismo es ms exigente y crece con mayor lentitud que casi todos los otros Mycoplasmas, con colonias que aparecen 5 a 10 das despus de la inoculacin. Se diferencias de los dems Mycoplasmas por no poseer el halo exterior y crecen densamente en forma de mora de aspecto granuloso, en otras palabras la colonia es ms compacta que la de muchos Mycoplasmas, tiene 50 a 100 m de dimetro. Con los pasajes sucesivos y la adaptacin a medios artificiales la proliferacin es ms rpida y las colonias adquieren el aspecto tpico de un huevo frito. La temperatura ptima para el desarrollo es de 36 a 38C.
Colonia de M. pneumoniae en agar glucosa para micoplasma. Esta fotografa muestra una colonia aislada del microorganismo a la cual se le han adsorbido eritrocitos de cobayo. Es la nica especie que demuestra la propiedad de hemadsorcin.
Este microorganismo metaboliza la glucosa para producir cido lctico. Crece bien en presencia de aire o en una atmsfera compuesta por 95% de nitrgeno y 5% de dixido de carbono. El M. pneumoniae se adsorbe a los eritrocitos de varias especies y los aglutina, una propiedad que no comparte con otros Mycoplasmas respiratorios humanos. Por consiguiente,
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esta propiedad posibilita una identificacin rpida de las colonias de M. pneumoniae en agar por medio del examen microscpico despus de recubrir la placa con una suspensin de eritrocitos, decantar y lavar.
2. ESTRUCTURA GENMICA El M. pneumoniae posee un genoma de 816 kb. El pequeo tamao de su genoma impone requerimientos nutricionales complejos, as como la dependencia de fuentes externas de precursores biosintticos tales como aminocidos, nucletidos, cidos grasos y esteroles.
3. ESTRUCTURA ANTIGNICA Los antgenos glicolipdicos del M. pneumoniae son los principales antgenos de membrana que se encuentran en la fraccin lipdica. Los glicolpidos purificados actan como antgenos en la reaccin de fijacin del complemento y en otras reacciones antgeno anticuerpo in vitro, pero son malos inmungenos in vivo a menos que estn fijados a protenas. Sobre la superficie de la membrana, los galactosil y el glicosil diglicridos parecen ser los antgenos que estimulan la inmunidad humoral. Tambin existen lpidos serolgicamente activos en el M. pneumoniae y varias otras especies de Mycoplasma. Durante el curso de la infeccin se ha reconocido cierto nmero de antgenos proteicos. Entre ellos se encuentran dos antgenos principales de la superficie o adhesina superficial, uno de los cuales es las protenas P1 (170KD) que media la fijacin a las clulas epiteliales respiratorias. La P1 presenta afinidad por el cido neuramnico de las glicoprotenas eritrocitarias es responsable del fenmeno de hemadsorcion.
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Los anticuerpos contra estas protenas de superficie se encuentran siempre en los sueros humanos de la etapa de la convalecencia y en las secreciones respiratorias por anlisis con tcnicas de radioinmunoprecipitacin, electroforesis en gel y Western blot. La citoadsorcin del microorganismo se inhibe si la protena P1, se cliva de forma enzimtica por accin de la tripsina o se la recubre con anticuerpo monoespecfico anti P1. La ubicacin de la P1 en la membrana micoplasmtica parece estar regulada de manera precisa. En los micoplasmas avirulentos con hemadsorcin negativa se encuentra distribuida de forma espaciada sobre toda la superficie, mientras que en los microorganismos virulentos con hemadsorcin positiva las molculas de P1 estn agrupadas para favorecer la estructura terminal especializada. Los pacientes con neumona por Mycoplasmas siempre desarrollan anticuerpos contra el P1, una observacin que respalda la idea de utilizar protena P1 purificada como vacuna.
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Se han observado cambios citotxicos del epitelio traqueal por la per oxidacin de los lpidos de la membrana citoplasmtica. Este micoplasma induce la produccin de aniones superxido que inactiva la catalasa epitelial, permitiendo as la actividad exudativa del perxido de hidrogeno.
Representacin esquemtica de un organismo M. pneumoniae correspondiente a la superficie del epitelio de la trquea ciliar, como se ve por microscopa electrnica de una seccin delgada.
Tambin hay un gran nmero de antgenos proteicos intracelulares en los pacientes con infecciones por M. pneumoniae y son presentados al sistema inmune del husped por medio de la fagocitosis y la degradacin de los microorganismos. Estos antgenos desempean un papel importante en la estimulacin de las reacciones de los linfocitos T que pueden originar infiltrados celulares
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linfociticos, como en la reaccin de hipersensibilidad retardada. Las crioaglutininas inducidas en los pacientes con una infeccin por M. pneumoniae estn dirigidas contra el determinante antignico I de los eritrocitos, el cual tambin est presente sobre la superficie de otras clulas sanguneas. Los receptores para M. pneumoniae sobre las membranas de los eritrocitos humanos son oligosacridos sialilados, lo que sustenta el concepto que postula que el estmulo para la produccin de las crioaglutininas en la infeccin por M. pneumoniae es el resultado de la interaccin del M. pneumoniae con el antgeno I del husped, lo que lleva a que el antgeno I resulte antignico. En las crioaglutininas de los pacientes con infeccin por M. pneumoniae se ha demostrado la presencia de antgenos con idiotipo compartido y es probable que proporcionen las bases para las respuestas autoinmunes observadas en asociacin con la infeccin por este microorganismo. Estas respuestas incluyen el desarrollo de anticuerpos contra pulmn, msculo liso, encfalo y linfocitos humanos. 4. DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD Si bien no se producen citotoxinas se crea un efecto citotxico por diversas enzimas que sintetizan y por los productos terminales de su metabolismo. Enzimas como ureasas y fosfatasas, que los Mycoplasmas son capaces de elaborar, as como algunos productos finales de su metabolismo con efecto citotxico sobre las clulas eucariotas, especialmente el perxido de hidrogeno por parte de M. pneumoniae. En la patogenia del M. pneumoniae participan factores relacionados con el microorganismo y factores relacionados con el husped. Para que se inicie la enfermedad es esencial que el microorganismo posea la capacidad de adherirse y establecer una asociacin estrecha con las clulas de la mucosa respiratoria mientras elude la fagocitosis y modula la respuesta inmune. Esta adeherencia
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probablemente obligada a causa de su incapacidad de sintetizar sustancias bsicas constitutivas de su membrana citoplasmtica (esteroles). El M. pneumoniae es un parsito de la superficie que coloniza el epitelio que tapiza el aparato respiratorio. Tiene predileccin por el tracto respiratorio inferior, con la invasin del torrente sanguneo como un episodio raro. Todava no se ha aclarado en qu forma penetra el M. pneumoniae en el gel mucoso que recubre el epitelio respiratorio, pero se piensa que la movilidad por deslizamiento del microorganismo facilita la penetracin y que su tamao diminuto y su plasticidad le permiten adaptar su forma para conformarse a los contornos de la superficie de la clula husped. Las formas filamentosas con sus organoides de fijacin terminal diferenciados permiten que los microorganismos se localicen en las criptas y repliegues de la membrana de la clula husped y entre las microvellosidades y los cilios, donde se encuentran protegidos de la fagocitosis. El contacto directo entre la membrana de los Mycoplasmas y la de las clulas huspedes crea una condicin que en teora podra conducir a la fusin de las dos membranas. Aunque se carece de datos para sostener la existencia de una fusin de las membranas, se ha demostrado la transferencia de antgenos de la membrana del husped a la membrana del Mycoplasma adherido. Un episodio de este tipo podra desencadenar respuestas inmunolgicas con graves consecuencias para el husped. El M. pneumoniae se adhiere a una variedad de superficies, incluidos los eritrocitos, las clulas HeLa, los espermatozoides, las clulas epiteliales de la trquea y los cultivos de rganos, y a sustancias inertes como el vidrio. La fijacin del microorganismo a los eritrocitos y a las clulas epiteliales est mediada por las fracciones de cido silico de los receptores glicoconjugados de la membrana que son destruidos por el pretratamiento con neuroaminidasa (protena). Los Mycoplasmas parecen fijarse a la clula
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husped por hidrfobas.
una
combinacin
de
uniones
inicas
5. AISLAMIENTO IDENTIFICACIN DE Mycoplasma pneumoniae
Microfotografa electrnica de Mycoplasma pneumoniae adheridos a clulas epiteliales ciliadas del aparato respiratorio en una muestra de esputo procedente de un paciente con neumona por M.pneumoniae demostrada mediante cultivo. El M.penumoniae se observa sobre el borde luminal unido entre los ciclios
Mycoplasma pneumoniae puede aislarse en muestras de las va respiratorias altas y bajas, como hisopado de fauces, hisopados nasofarngeos, lavado de fauces, esputo, aspirados traqueales y transtraqueales, broncoscopia, lavado broncoalveolar y muestras de tejido pulmonar. Para el aislamiento en general de micoplasmas se utilizan caldos difsicos, con un medio que contiene agar en el fondo de un tubo cubierto con caldo de la misma composicin similar pero sin el agregado de agar. Los medios para el aislamiento de micoplasmas tambin contienen antibiticos para inhibir las bacterias y los hongos contaminentes. En los medios utilizados para el aislamiento de M. pneumoniae se agrega un buffer para amortiguar el pH inicial cerca de 7,8. Adems debe incubarse hasta 4 semanas antes de realizar el informe final del cultivo. Si despus de un tiempo se detecta en forma visual un cultivo positivo (turbidez) en el medio
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difsico, el caldo se subcultiva en un medio slido, como agar SP-4 o Agar diferencial A7. M.pneumoniae es nutricionalmente, en aislamiento deben ser bsicos que deben tener un microorganismo exigente consecuencia, sus medios de enrriquecidos y los componentes estos medios son:
Agar base para micoplasmas (agar PPLO) Extracto de levadura. Solucin de rojo de fenol (indicador de acidez o
alcalinidad) Solucin de azul de metileno (inhibir el crecimiento de otros micoplasmas humanosque pueden encontrarse en el aparato respiratorio) Solucin de acetato de talio. Solucin de glucosa. Solucin de penicilina. Los tipos de medios frecuentemente aislamiento de M. pneumoniae son:
usados
para
el
Medio bifsico azul de metileno glucosa. (Los microorganismos van a reducir el azul de metileno y vira de azul a incoloro)

Agar con glucosa para micoplasmas. Medio SP-4 Agar diferencial A7
Para la identificacin de M. pneumoniae se utiliza:

a) Coloracin de Dienes
Es una tincin inespecfica que imparte un aspecto contraste a las colonias de Mycoplasma sobre agar, lo que
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facilita la visualizacinde la morfologa y las caractersticas de la colonia. Para el caso de M. pneumoniae va a reducir el azul de metileno despus de un tiempo y se pone incoloro, en cambio con los otras especies de micoplamas se observara la colonia tpica de huevo frito donde se ties con un centro de color azul oscuro y una periferia azul clara y tiene aspecto muy granuloso.
Otra especie de micoplasma.
M. pneumoniae
Colonias de M.pneumoniae en huevo frito. Coloracin b) de Dienes
La prueba
de hemadsorcin M. pneumoniae es la nica especie que absorbe especficamente eritrocitos, por lo tanto, esta propiedad representa un mtodo para su identificacin presuntiva.
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Cuando se observa desarrollo de colonias en medios para aislamientos de micoplasmas sembrados con muestras provenientes de las vas respiratorias, se coloca una suspensin de eritrocitos de cobayo sobre la superficie del agar durante un tiempo determinado y luego se elimina por lavado. Las colonias de M. pneumoniae absorvern algunos eritrocitos sobre la superficie de la colonia.
c) La prueba de reduccin del tetrazolio
M. pneumoniae es capaz de reducir el compuesto incoloro tetrazolio al compuesto de color rojo, formozn, un compuesto rojo insoluble que precipita en las clulas y hace que las colonias tomen un color rojo a negro violceo si la exposicin al sustrato es prolongada. Esta es una caracterstica peculiar de este microorganismo que representa para el laboratorio un mtodo rpido y fcil para identificar colonias M. pneumoniae direactamente en el medio de aislamiento. Si la prueba es positiva las colonias de M. pneumoniae se oscurecern visiblemente y se vern de color rojo o purpura despus de 60 minutos; con incubacin prolongada (34 horas) las colonias se ponen negras.
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6. MANIFESTACIONES CLNICAS Tras la exposicin en huspedes susceptibles, los microorganismos se adhieren a las clulas epiteliales del aparato respiratorio donde se multiplican; no atraviesan esas clulas sino que permanecen localizados. Los microorganismos pueden aislarse mediante cultivo durante el perodo de incubacin y varias semanas durante y despus de la enfermedad clnica, incluso en presencia de anticuerpos especficos. Luego de un perodo de incubacin de 2 a 3 semanas, la presentacin clnica de la neumona por Mycoplasmas suele ser insidiosa, en lugar de abrupta, con comienzo gradual de sntomas generales y neumnicos que se asemejan a los de la gripe. La mayora de los pacientes presentan a los pocos das fiebre de 38,3 C a 39C, con escalofros, malestar general, cefaleas, odinofagia, congestin nasal y tos seca no productiva que aparece temprano en la evolucin clnica. El recuento de leucocitos a menudo es normal o slo est levemente elevado. En el 5% a 10% de los pacientes aparecen sntomas de las vas respiratorias bajas; el esputo se torna ms mucoide o mucopurulento y en ocasiones aparece sangre. Los frotis del esputo con tincin de Gram en este momento suelen revelar cantidades escasas a moderadas de clulas inflamatorias polimorfonucleares y ausencia de microorganismos. Con el comienzo de los sntomas neumnicos, los pacientes pueden sentirse como si padecieran un resfro intenso pero pueden continuar con sus actividades normales; de ah, la aplicacin del trmino "neumona ambulaloria" a esta enfermedad. El examen del trax suele revelar roncus localizados y estertores aislados y las radiografas de trax son compatibles con una bronconeumona difusa, que suele afectar varios lbulos del pulmn sin consolidacin. En la neumona por M. pneuminiae.
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BIBLIOGRAFA
PUMAROLA,A. , RODRIGUEZ, A. , GARCA RODRIGUEZ, J. ,PIEDROL, G. Microbiologa y Parasitologa Mdica. 2 da edicin. SALVAT EDITORES, S.A. Barcelona- Espaa. STAINIER, R. ,INGRAHAM,J., WHEELIS , M. 1992. da Microbiologia. 2 edicin. EDITOTIAL REVERTE, S.A. Espaa. BROCK.1999. Biologa De Los Microorganismos.8 va edicin .PRENTICE HALL IBERIA. ESPAA. MURRAY, P. , ROSENTHAL, K. , PFER, M. 2006. Microbiologa Mdica. 5ta edicin. ELSEVIER IMPRINT. Espaa. KONEMAN. 2008. Diagnostico Microbiolgico. 6ta edicin. EDITORIAL MDICA PANAMERICA.ARGENTINA. ZINSSER. 1994. Micorbiologia.20. Edicin. EDITORIAL MDICA PANAMERICA.ARGENTINA.
LINKOGRAFIA
http://webcache.googleusercontent.com/search? q=cache:As8Xq_jG614J:www.angelred.com/natural/informes/n atipica.htm+que+es+neumonia+a+tipica&cd=2&hl=es&ct= clnk&gl=pe&source=www.google.com.pe http://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/0007166050006 6282#preview http://labrat.fieldofscience.com/2010/09/bacteria-that-tearthemselves-apart.html http://www.pnas.org/content/104/49/19518/F1.expansion.htm l http://jb.asm.org/content/191/10/3256.full http://www.actionlyme.org/BIOMARKERS2.htm http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php? term=Mycoplasma+Pneumoniae&lang=2
29
BACTERIOLOGA
http://physrev.physiology.org/content/83/2/417.full http://iai.asm.org/content/75/1/518/F3.expansion http://jb.asm.org/content/193/7/1726/F5.expansion http://cmr.asm.org/content/17/4/697.full? view=long&pmid=15489344 http://www.bioscience.org/2007/v12/af/2093/fulltext.asp? bframe=figures.htm&doi=yes http://microbiology.muohio.edu/people/balish.html http://www.pnas.org/content/104/49/19518/F1.expansion.htm l http://labrat.fieldofscience.com/2010/09/bacteria-that-tearthemselves-apart.html http://cmr.asm.org/content/17/4/697.full
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FAMILIA Andrea Miluska Flores MYCOPLASMATACEA Cabrera E 099014-J

ALUMNA: CDIGO: PROFESORA:

Olga Francia Arana

Lambayeque, 06 de Diciembre del 2012

que las diferencia de las bacterias verdaderas es la ausencia de pared celular.

gentico, estos microorganismos presentan una capacidad biosinttica limitada.

Estructura general de un Mycoplasma

Elementos del citoesqueleto de Mycoplasma insons, que vive en las iguanas.

El genoma del Mycoplasma consiste en una molcula

Morfologa tpica de un micoplasma con un denso ncleo y borde claro.

Micoplasma adherido al tejido por medio de un receptor proteico.

husped por hidrfobas.

5. AISLAMIENTO IDENTIFICACIN DE Mycoplasma pneumoniae

Agar con glucosa para micoplasmas. Medio SP-4 Agar diferencial A7

Para la identificacin de M. pneumoniae se utiliza:

Otra especie de micoplasma.

Colonias de M.pneumoniae en huevo frito. Coloracin b) de Dienes

c) La prueba de reduccin del tetrazolio

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