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AP.05. DETERMINAO DE GORDURA PELO MTODO DE BLIGH-DYER I.

INTRODUO:
A determinao de gordura, geralmente se baseia nas propriedades dos lipdeos. Estes compostos apresentam propriedades fsicas que refletem seu carter hidrofbico, sendo solveis em solventes orgnicos. Os solventes orgnicos so, ento, usados na determinao de gordura por extrao. No caso de alimentos, nem sempre possvel extrair diretamente a gordura. Se a amostra for mida necessrio proceder uma secagem pois a gua impede a penetrao total do solvente. Quando os lipdeos se encontram ligados a protenas ou acares, faz-se necessrio uma hidrlise prvia, como no mtodo de Gerber. Em alguns casos, em vez de combinao de hidrlise e extrao, suficiente tratar a amostra com uma mistura de clorofrmio e metanol (Mtodo de Bligh-Dyer). Para amostras que podem ser extradas diretamente so usados equipamentos que realizam a extrao por solvente como o aparelho de Soxhlet (extrao intermitente). O extrato obtido diretamente sem tratamento prvio, pode conter, alm da gordura, quantidades pequenas de ceras, resinas, esteris e carotenides. A escolha do mtodo para extrao de lipdeos depende do material a ser analisado e da natureza das subsequentes anlises a serem feitas neste extrato lipdico. O mtodo de Bligh & Dyer pode ser usado para alimentos secos ou para produtos com altos teores de gua (como peixes, vegetais verdes, por ex.). Devido ao uso de solventes polares, h extrao de todas as classes de lipdeos. Como os lipdeos so extrados sem aquecimento, o extrato pode ser utilizado para avaliar o grau de deteriorao dos lipdeos atravs do ndice de perxidos e da porcentagem de cidos graxos livres. O teor de carotenides, de vitamina E, de esteris e a composio de cidos graxos tambm podem ser determinadas no mesmo extrato.

II. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS:


Alimentos Amostras da aula 2, referentes a cada grupo Reagentes metanol clorofrmio soluo aquosa de sulfato de sdio 1,5% sulfato de sdio anidro Material e Vidraria pinas esptulas bandeja de alumnio limpa e seca bquer de 100 ml bquer de 50 ml, previamente aquecido (a 110oC) e tarado pipeta volumtrica de 5 ml pipeta de 25 ml proveta de 10 e 20 ml funil de vidro pequeno grade de tubos
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papel de filtro pera com vlvulas Equipamentos agitador rotativo para tubos centrfuga de baixa rotao estufa a 60 - 80oC dessecador balana analtica balana semi-analtica

III. PROCEDIMENTO: Testar, com clorofrmio, se h vazamento no tubo de 70 ml. Para produtos com teores de gordura acima de 20% (leite integral em p, amendoim, sementes, etc...) pesar entre 2,00 e 2,50g; e para produtos com porcentagem menor que 20% pesar entre 3,00 e 3,50g. ESSENCIAL QUE AS AMOSTRAS ESTEJAM COMPLETAMENTE MODAS. Transferir a amostra pesada para o bquer de 100mL e adicionar exatamente: -10 ml de clorofrmio, -20 ml de metanol e -8 ml de gua destilada. Tampar hermeticamente e colocar os bqueres num agitador rotativo por 30 min. Em seguida adicionar exatamente: -10 ml de clorofrmio e -10 ml da soluo de sulfato de sdio 1,5%. Tampar e agitar por mais 2 minutos. Deixar separar as camadas de forma natural em funil de decantao ou centrifugar a 1000 rpm por 2 minutos para acelerar a separao. Descartar a camada superior e retirar cerca de 15 ml da camada inferior (clorofrmio) e colocar num tubo de 30 ml. Adicionar aproximadamente 1g de sulfato de sdio anidro, tampar e agitar para remover traos de gua que so arrastados na pipetagem da camada inferior. Filtrar rapidamente num funil pequeno com papel de filtro. A soluo obtida deve ser lmpida. Medir exatamente (pipeta volumtrica) 5 ml do filtrado e despejar em bquer de 50 ml previamente tarado. Colocar o bquer numa estufa a 80 oC at evaporar o solvente (15-20 minutos). Resfriar em dessecador e pesar em balana analtica.

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IV. CLCULOS: % lipdeos totais = px4


____________

100

p= peso dos lipdeos (g) contido em 5 ml g= peso da amostra (g)

V. ANLISE DOS RESULTADOS : -Apresentar os dados obtidos por seu grupo -calcular a % de lipdeos totais dessas amostras -comparar os dados de Tabela de Composio de Alimentos, e se houver diferena entre esses valores, explicar porque isto ocorreu.
Questo: Quais as diferenas entre a determinao de gorduras pelo mtodo Bligh & Dyer e pelo mtodo de extrao por Soxlet, quanto vidrarias, solventes, temperatura, amostra, produto de extrao, tempo, facilidade de operao?

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