1.

INTENCION DE LA INSULINA

Reaccin en cadena de la polimerasa

La reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls (polymerase chain reaction), es una tcnica de biologa molecular desarrollada en 1983 por Kary Mullis,1 cuyo objetivo es obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo; en teora basta partir de una nica copia de ese fragmento original, o molde. Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que tras la amplificacin resulta mucho ms fcil identificar con una muy alta probabilidad, virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados de la amplificacin han hecho que se convierta en una tcnica muy extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.

Quin fue el cientfico que descubri la PCR y en qu ao? Kary Mulls perteneciente a la Cetus Corporation en California, en la dcada de 1980.

Pasos de la PCR

Por lo general, la PCR es una tcnica comn y normalmente indispensable en laboratorios de investigacin mdica y biolgica para una gran variedad de aplicaciones. Entre ellas se incluyen la clonacin de ADN para la secuenciacin, la filogenia basada en ADN, el anlisis funcional de genes, el diagnstico de trastornos hereditarios, la identificacin de huellas genticas (usada en tcnicas forenses y test de paternidad) y la deteccin y diagnstico de enfermedades infecciosas.
Tubos de PCR que albergan la mezcla en un volumen total de 100 L.

Para realizar la tcnica se necesitan:2

Los 4 desoxirribonuclesidos-trifosfato (dNTP), sustratos para polimerizar nuevo ADN. Dos cebadores o iniciadores (en ingls, primers), oligonucletidos que son, cada uno, complementarios a una de las dos hebras del ADN. Son secuencias cortas, de entre seis y cuarenta nucletidos, normalmente de dieciocho a veintids, que permiten que la polimerasa inicie la reaccin. Deben estar enfrentados y a no mucha distancia. Delimitan la zona de ADN a amplificar, es decir, corresponden a los nucletidos que definen los extremos de la secuencia que se desea replicar. Iones divalentes. Se suele usar magnesio (Mg2+), agregado comnmente como cloruro de magnesio (MgCl2), o algn otro catin divalente. Tambin se puede emplear manganeso (Mn2+), para mutagnesis de ADN mediante PCR, ya que altas concentraciones de Mn2+ incrementan la tasa de error durante la sntesis de ADN. Actan como confectores de la polimerasa. Iones monovalentes, como el potasio. Una solucin tampn o buffer que mantiene el pH adecuado para el funcionamiento de la ADN polimerasa. ADN polimerasa o mezcla de distintas polimerasas con temperatura ptima alrededor de 70 C (la ms comn es la polimerasa Taq). ADN molde, que contiene la regin de ADN que se va a amplificar. Termociclador, el aparato que mantiene la temperatura necesaria en cada una de las etapas que conforman un ciclo.

Prueba de ADN
Una prueba de ADN es el nombre genrico con que se designa a un grupo de personas que son similares ante la naturaleza sin importar gnero.

En el mbito forense
Las pruebas de ADN han pasado a constituir la base de muchas investigaciones judicialespoliciales, entre las cuales estn:
Determinacin de la paternidad

Las pruebas de ADN para determinar la paternidad se realizan comparando la secuencia de ADN del padre, del nio/nia y de la madre. La combinacin de las secuencias de ADN del padre y de la madre debe dar como resultado la secuencia del nio/nia; slo de esta manera se tendr una seguridad, generalmente de ms del 99%, sobre la paternidad del menor de edad.1
Determinacin de la maternidad

En algunos casos lo que se busca determinar es la lnea gentica materna, en este caso se recurre al ADN mitocondrial que la madre transmite al hijo/hija y que slo sta transmite a sus descendientes. Este tipo de pruebas sirve para determinar linajes en varias generaciones y fue utilizado para conocer cmo ha evolucionado el genoma humano desde la aparicin del Homo sapiens, a travs de la Eva mitocondrial, la primera madre que dio origen a la humanidad moderna. De ah que, en cierto nivel generacional, grandes poblaciones humanas comparten una misma ancestro y ADN mitocondrial.

El proceso de Anlisis del ADN

El proceso de Anlisis del ADN consta de los siguientes pasos Extraccin: Por medio de cualquier clula que posea ncleo se puede obtener el ADN, ya sea desde una gota de sangre, un pelo o saliva son suficientes. Para procesar dichas muestras, se aaden reactivos que rompen las membranas de las clulas y liberan el ADN contenido en ellas, limpindolo de restos como protenas y otros compuestos orgnicos. Amplificacin: Una vez seleccionados los fragmentos de ADN que interesan, a travs de una tcnica llamada Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), se multiplican los fragmentos escogidos, obteniendo millones de copias.

Electroforesis: Por medio de una descarga elctrica se separan los fragmentos que se han amplificado y con la ayuda de potentes equipos automatizados, se visualizan los resultados en forma de bandas o picos. Comparacin: Se comparan las secuencias obtenidas en una determinada muestra con la de otra muestra de ADN y se observan las coincidencias para verificar si ambas secuencias pertenecen a la misma persona, corresponden a padre e hijo o no tienen ninguna relacin.

CARACTERISTICAS DE LAS PLANTAS TRANSGENICAS

Ejemplo.

Sexo de plantas.

Las flores representan la estructura que produce y contiene los gametos responsables de la reproduccin sexual de las plantas. Por ello, la manipulacin gentica de las estructuras reproductivas de las flores permite determinar el sexo de las plantas. Actualmente, se conocen numerosos genes responsables del desarrollo de estructuras masculinas, femeninas, de ptalos y spalos de la flor. Ejemplos. Modificacin gentica del contenido nutricional de plantas.

Polisacridos.

Las plantas son una de las fuentes ms importantes de polisacridos en la naturaleza. Ellas producen el almidn, para promover el crecimiento del prximo ao o para la nueva planta en desarrollo. Otro polisacrido que las plantas producen es la celulosa, la que cumple una funcin estructural de sostn de los tejidos, y que constituye uno de los principales componentes de la madera en plantas leosas. Ejemplo. Modificacin del gusto y apariencia de alimentos.

Dulzor de frutos.

Para la industria alimenticia es una ventaja que ciertos alimentos puedan ser intrnsecamente ms apetitosos. A partir del fruto de una planta africana (Dioscorephyllum cumminsii) se identific la protena Monelina, que es aproximadamente 100.000 veces ms dulce que la sacarosa (azcar).

Se postul la Monelina como posible sustituto de la sacarosa. Ejemplo. Plantas como birreactores. Las plantas crecen fcilmente y pueden generar gran cantidad de biomasa en corto tiempo. Basndose en esa caracterstica se est evaluando el uso de plantas transgnicas para la produccin comercial de protenas y diversas sustancias qumicas. Ejemplo. En el mbito nacional e internacional existen detractores del uso o consumo de plantas transgnicas, principalmente lideradas por organizaciones de gubernamentales y grupos ecologistas. Las razones que ellos aducen se basan en que las plantas transgnicas implican un potencial o real riesgo para la salud y el ambiente. Las evidencias cientficas que apoyan esos postulados no son muchos, no obstante, es importante y vlido sealar cules son estas razones y sus supuestos cientficos. En general, son tres los argumentos de mayor controversia y reticencia al respecto.

Proyecto Genoma Humano

Representacin grfica del cariotipo humano normal. El Proyecto Genoma Humano (PGH) fue un proyecto de investigacin cientfica con el objetivo fundamental de determinar la secuencia de pares de bases qumicas que componen el ADN e identificar y cartografiar los aproximadamente 20.000-25.000 genes del genoma humano desde un punto de vista fsico y funcional. El proyecto, dotado con 280 millones de dlares, fue fundado en 1990 en el Departamento de Energa y los Institutos Nacionales de la Salud de los Estados Unidos, bajo la direccin del doctor Francis Collins, quien lideraba el grupo de investigacin pblico , conformado por mltiples cientficos de diferentes pases, con un plazo de realizacin de 15 aos. Debido a la amplia colaboracin internacional, a los avances en el campo de la genmica, as como los avances en la tecnologa computacional, un borrador inicial del genoma fue terminado en el ao 2000 (anunciado conjuntamente por el ex presidente Bill Clinton y el ex-primer ministro britnico Tony Blair el 26 de junio de 2000), finalmente el genoma completo fue presentado en abril del 2003, dos aos antes de lo esperado. Un proyecto paralelo se realiz fuera del gobierno por parte de la Corporacin Celera. La mayora de la secuenciacin se realiz en las universidades y centros de investigacin de los Estados Unidos, Canad, Nueva Zelanda, Gran Bretaa y Espaa. El genoma humano es la secuencia de ADN de un ser humano. Est dividido en fragmentos que conforman los 23 pares de cromosomas distintos de la especie humana (22 pares de autosomas y 1 par de cromosomas sexuales). El genoma humano est compuesto por aproximadamente entre 22500 y 25000 genes distintos. Cada uno de estos genes contiene codificada la informacin necesaria para la sntesis de una o varias protenas (o ARN funcionales, en el caso de los genes ARN). El "genoma" de cualquier persona (a excepcin de los gemelos idnticos y los organismos clonados) es nico. Conocer la secuencia completa del genoma humano puede tener mucha relevancia cuanto a los estudios de biomedicina y gentica clnica, desarrollando el conocimiento de enfermedades poco estudiadas, nuevas medicinas y diagnsticos ms fiables y rpidos. Sin embargo descubrir toda la secuencia gnica de un organismo no nos permite conocer su fenotipo. Como consecuencia, la ciencia de la genmica no podra hacerse cargo en la actualidad de todos los problemas ticos y sociales que ya estn empezando a ser debatidos. Por eso el PGH necesita una regulacin legislativa relativa al uso del conocimiento de la secuencia genmica, pero no tendra por qu ser un impedimento en su desarrollo, ya que el saber en s, es inofensivo. Antes de los ochenta ya se conoca la secuencia de genes sueltos de algunos organismos, como tambin se conocan los genomas de entidades subcelulares, tales como virus y plsmidos. As pues, no fue hasta 1986 cuando el Ministerio de Energa (DOE), concret institucionalmente el Proyecto Genoma Humano (PGH) durante un congreso en Santa Fe. El PGH contaba con una buena suma econmica y sera utilizado para estudiar los posibles

efectos de las radiaciones sobre el ADN. Al siguiente ao, en el congreso de bilogos en el Laboratorio de Cold Spring Harbor, el Instituto Nacional de la Salud (NIH) quiso participar del proyecto al ser otro organismo pblico con mucha ms experiencia biolgica, si bien no tanta en la organizacin de proyectos de esta magnitud. El debate pblico que suscit la idea capt la atencin de los responsables polticos, no solo porque el Proyecto Genoma Humano era un gran reto tecnocientfico, sino por las tecnologas de vanguardia que surgiran, as como porque el conocimiento obtenido asegurara la superioridad tecnolgica y comercial del pas. Antes de dar luz verde a la iniciativa del PGH se necesit por un lado el informe de 1988 de la Oficina de Evaluacin Tecnolgica del Congreso (OTA) y el del Consejo Nacional de Investigacin (NRC). Ese ao se inaugur HUGO (Organizacin del Genoma Humano) y James D. Watson fue nombrado alto cargo del proyecto. Sera reemplazado por Francis Collins en abril de 1993, en gran parte por su enemistad con Bernadine Healy que era su jefe por aquel entonces. Tras esto el nombre del Centro cambi a Instituto Nacional de Investigaciones del Genoma Humano (NHGRI). En 1990 se inaugur definitivamente el Proyecto Genoma Humano calculndose quince aos de trabajo. Sus objetivos principales en una primera etapa eran la elaboracin de mapas genticos y fsicos de gran resolucin, mientras se ponan a punto nuevas tcnicas de secuenciacin, para poder abordar todo el genoma. Se calcul que el PGH americano necesitara unos 3000 millones de dlares y terminara en 2005. En 1993 los fondos pblicos aportaron 170 millones de dlares, mientras que la industria gast aproximadamente 80 millones. Con el paso de los aos, la inversin privada cobr relevancia y amenaz con adelantar a las financiaciones pblicas.

DEFINICIONES
TRANSGENICA El trmino transgnico es un adjetivo que se utiliza para designar a todos aquellos seres vivos que han nacido con su informacin gentica alterada. Normalmente, este trmino se usa para sealar a aquellos animales o plantas que son alterados de manera artificial, ya sea porque existen objetivos cientficos o comerciales detrs de esas modificaciones. HORMONA
Las hormonas son sustancias secretadas por clulas especializadas, localizadas en glndulas de secrecin interna o glndulas endocrinas (carentes de conductos), o tambin por clulas epiteliales e intersticiales cuyo fin es la de afectar la funcin de otras clulas. Tambin hay hormonas que actan sobre la misma clula que las sintetiza (autocrinas). Hay algunas hormonas animales y hormonas vegetales como las auxinas, cido abscsico, citoquinina, giberelina y el etileno.

VACUNA
La vacuna es un preparado de antgenos que una vez dentro del organismo provoca la produccin de anticuerpos y con ello una respuesta de defensa ante microorganismos patgenos. Esta respuesta genera, en algunos casos, cierta memoria inmunitaria produciendo inmunidad transitoria frente al ataque patgeno correspondiente.

INOCULADOS
accin de inocular. Introducir en el organismo una sustancia que contiene grmenes patgenos.

BIOETICA
La biotica es la rama de la tica que se dedica a proveer los principios para la correcta conducta humana respecto a la vida, tanto de la vida humana como de la vida no humana (animal y vegetal), as como al ambiente en el que pueden darse condiciones aceptables para la vida.