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LABORATORIODE ANALISIS CLINICOS

HEMOLAB

GUIA DE TOMA DE MUESTRAS

Prolongacin Acapulco No. 16 A Col. Centro, Mazatepec, Morelos

INDICE

1.- INTRODUCCION A LA TOMA DE MUESTRA _______ 3

Pg. ____________________

2.- TRANPORTE CONSERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS _ _ _ _ _ _ _______4 3.- OBTENCION DE MUESTRA SANGUINEA ______8 ______________________

4.- TECNICA DE PUNCION CUTANEA _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ______6 7.- TUBO CAPILAR _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____7 8.- GRUPO SANGUINEO EN PLACA Y TUBO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ______8 9.- EXUDADO FARINGEO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____9 10.- EXUDADO NAZAL _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____9 14.- EXUDADO LAGRIMEO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _____9 15.- EXUDADO DE HERIDA _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ______9 17.- BIBLIOGRAFA _ _ _ _ _10 ____________________________________

1.- INTRODUCCION La toma de muestra desempea un papel muy importante desde el punto de vista mdico. Ya que la tomada nos proporcionara datos muy importantes en los cuales, el medico dar un diagnostico. La persona encargada de ella deber estar conciente del trato al paciente desde el momento en que se presenta al laboratorio. Ya que es el primer contacto que se tiene con el paciente nos sirve para observar el grado de enfermedad que pueda presentar y los cuidados especiales que debern tomar ala hora de obtener la muestra de sangre y procesarla para dar un diagnostico confiable tanto para el paciente como para el medico responsable. A dems de brindarle una mejor calidad. Es muy importante tomar en cuenta las fases. 1.- ANALITICA 2.-PREANALITICA 3.-POSANALITICA La toma de muestra se encargara solo de tomar las muestras sanguneas, as como: CULTIVOS DE EXUDADOS CULTIVO DE EXUDADO NASOFARINGEO CULTIVO DE EXUDADO LAGRIMEO CULTIVO DE EXUDADO HERIADAS CITOLOGIA VAGINAL (PAPANICOLAOU) As como el recibir muestras ORINAS EXCREMENTO ESPERMATOBIOSCOPIAS

2.- TRANSPORTE, CONSERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRA OBJETIVO: TRANSPORTE El mantener la muestra tan prxima a su estudio original, minimizar el riesgo que afronta quien trasporta la muestra mediante el uso de recipientes hermticamente cerrados. En caso de un retrazo de 4 das es preferible congelar las muestras a menos 20 grados centgrados. Las muestras debern ser trasladadas con mucho cuidado debidamente selladas y etiquetadas con su respectivos datos antes solicitados importante cumplir pacientes. La mayor parte de muestras liquidas son las de orina deben ser trasportadas a el laboratorio tan rpido como sea posible el limite mximo es de 2 horas. Entre la toma y el envi si la muestra de orina se retraza se debe de usar un recipiente que contenga una pequea cantidad de cido bolico para no cambiar el PH. Existen otros medios de trasporte como lo son: stuar, amies y carey -blair. Estos son los mas frecuentes y usados, han sido planeados para conservar la viabilidad de las bacterias durante el trasporte sin permitir su multiplicacin. Para evitar la ruptura en el transporte no hay que usar recipientes de vidrio. es muy con estos requisitos para obtener un buen control de

CONSERVACIN DE MUESTRAS SANGUINEAS:

Errores inducidos por evaporacin. La evaporacin del agua que contiene el suero da lugar a mayores concentraciones (o actividades en el caso de enzimas) de todas las sustancias presentes en la muestra de suero. La prdida por evaporacin aumenta al elevar la temperatura ambiente, la magnitud del flujo de aire en el laboratorio y el tiempo de exposicin del espcimen el entorno; y est inversamente relacionada con la humedad relativa. El tamao y forma del espcimen para la muestra, la fraccin del recipiente ocupada por el suero y la naturaleza del material del recipiente, pueden influir en el grado de evaporacin de la muestra.

ESTABILIDAD DE LAS MUESTRAS. Ciertas muestras requerirn estabilizacin si los anlisis no han de realizarse de inmediato. Segn la variable a analizar se puede requerir refrigeracin, congelamiento profundo. En algunas circunstancias, como cuando se procesan muestras para determinar cardioenzimas, puede requerirse guardar varias alcuotas de suero de un paciente si se solicitan diversas determinaciones con distintos requerimientos de conservacin. Durante el almacenamiento, varias causas pueden provocar una alteracin en la cantidad de constituyentes qumicos. El dixido de carbono en el plasma se desprende de un espcimen almacenado en un recipiente abierto, provocando una disminucin de su concentracin. La prdida de CO 2 del suero conduce a un incremento del nivel srico de pH. El pH del suero alcanzar un valor de 8.5, dos horas despus de separarlo del cogulo sanguneo. A este valor alcalino de pH, la fosfatasa cida empieza a ser destruida. La gluclisis que ocurre en sangre total provocar una disminucin de la concentracin srica de glucosa si transcurre mucho tiempo entre la toma de la muestra de sangre total y la separacin del suero del cogulo. Por otra parte, las variaciones en la permeabilidad de los eritrocitos provocan un incremento de las concentraciones sricas del potasio, fsforo y magnesio cuando se almacena la sangre total antes de separar el suero Sangre entera procesada a una muestra de suero o plasma: A menos que una evidencia concluyente indique que mayores tiempos de contacto no contribuyen a inexactitud en el resultado, el suero o el plasma se deben separar del contacto con clulas tan pronto como sea posible. Se recomienda un lmite mximo de 2 horas a partir del momento de la recoleccin. Para algunos especmenes: 1. Se recomienda un tiempo de contacto de menos de dos horas para el potasio, ACTH, cortisol. 2. Los complejos inmunes requieren un tiempo mnimo de contacto de dos horas. 3. La temperatura afecta la estabilidad. 5

4. teniendo en cuenta que muchos analitos no han sido estudiados. Las siguientes referencias fundamentan las recomendaciones de tiempos lmite para 17 analitos estudiados por Laessing y colaboradores, determinando que no fueron afectados por un tiempo prolongado de contacto sueroclulas durante 48 horas: albmina, fosfatasa alcalina, ALT, bilirrubina, calcio, colesterol, CK, creatinina, magnesio, fsforo, sodio, triglicridos, T3, T4, nitrgeno de urea, cido rico. No obstante los resultados alterados fueron clnicamente significativos (por dos horas de contacto) para los siguientes: glucosa (diminuy), potasio (aument), LD (aument), y por ocho horas, hierro (aument), AST present un aumento ligero y cloruro un decremento ligero con el tiempo. Aunque este estudio no indic cambio alguno para el magnesio, otros informan un aumento de magnesio por cuatro horas a 4C. Efecto sobre las muestras: Con la conservacin a largo plazo en el refrigerador, las poblaciones bacterianas alcanzan niveles significativos, produciendo efectos degradativos graves sobre los componentes biolgicos. Incluso conservados en congelacin (-20 C), los sistemas biolgicos son inestables As se producen reacciones enzimticas que modifican la concentracin del sustrato. La propia molcula enzimtica puede ser inestable, de forma que la actividad de la enzima se modifica con el paso del tiempo. En ciertas muestras, como las de plasma y suero, los cristales de hielo que se forman producen efectos de cortes lesivos para le estructura molecular, especialmente para aquellas molculas grandes como las protenas; la congelacin lenta permite que se formen cristales de mayor tamao, cuyos efectos degradativos son ms graves. En consecuencia, para que la estabilidad sea ptima se prefiere la congelacin rpida. En la tabla 5-2, se recomiendan los tiempos de almacenamiento para las diferentes muestras, as como las condiciones de temperatura. TABLA 5-2.TIEMPOS DE ALMACENAMIENTO RECOMENDADOS Y CONDICIONES PARA LAS MUESTRAS TIEMPO DE MUESTRAS PARA TEMPERATURA ALMACENAMIENTO Qumica clnica Una semana Refrigeracin Inmunologa Hematologa Coagulacin Toxicologa Una semana Dos das Un da Seis semanas Refrigeracin Ambiente Refrigeracin Refrigeracin

Grupo sanguneo

Una semana

Refrigeracin

Precaucin si los anlisis de la muestra no van a ser completados en el mismo da en que fue recogida, si es necesario, el suero debe ser removido de cualquier aparato de separacin de suero o barrera y estabilizarlo. Se originan grandes errores por el uso de cubetas de micromuestras, que contienen menos de 500 l de suero y poseen una superficie muy alta. Las muestras en microcubetas deben ser analizadas dentro de los 10 a 15 minutos luego de transferirse el suero y debern mantenerse tapados tanto sea posible. Los residuos de detergente en los tubos utilizados para la recoleccin de los especimenes pueden contaminarlos con fsforo inorgnico. Adems los tapones de corcho y algunos tubos de vidrio pueden liberar calcio al ser expuestos a la accin de la sangre y dar lugar a una concentracin srica de calcio falsamente incrementada. RECOMENDACIONES PARA MANTENER FRESCAS LAS MUESTRAS. 1.- El procedimiento es normado por la estabilidad de la muestra. Las causas ms importantes para las alteraciones de los especimenes son: Metabolismo de las clulas Procesos osmticos. sanguneas. Evaporacin/Sublimacin. Efecto de la luz. Reacciones qumicas Difusin de gases. Descomposicin por factores microbiolgicos. 2.- El transporte rpido y los tiempos de almacenamiento mejoran la fiabilidad de los resultados de laboratorio. 3.- Los especimenes y muestras se conservan mejor en refrigeracin, con las excepciones a la regla. 4.- Los especimenes siempre deben guardarse en contenedores cerrados para evitar la evaporacin. 5.- El peligro de evaporacin tambin existe en los refrigeradores (condensacin de la humedad en elementos frescos). 6.- Los problemas de almacenamiento se reducen si el sistema disponible es probado. 7.- Los agentes de separacin (ejemplo, gel) mejoran el rendimiento del suero/plasma y permiten mantenerlos en los tubos originales sobre la barrera. 8.- Evite agitar los contenedores de las muestras (Sistema de expedicin de tubos neumticos); riesgo de hemlisis. 9.- Los contenedores de las muestras que contienen sangre deben mantenerse siempre verticales; el procedimiento de coagulacin se acelera. 10.- El material infeccioso debe etiquetarse y manejarse con particular cuidado.

RECOMENDACIONES PARA EL MANEJO DE MUESTRAS A.-) Evite guardar sangre entera o total, revise la informacin sobre los analitos sensibles. B.-) Evite la gluclisis en muestras para determinar glucosa y lactato. La gluclisis puede ser evitada por la adicin de un inhibidor junto con un anticoagulante. C.-) Evite por otra parte el efecto de la luz; sta afectar disminuyendo los valores de bilirrubina, vitamina C, porfirinas, creatincinasa (CK), y cido flico. D.-) Reduzca el contacto con el aire hasta donde sea posible. Si esto no se hace, los efectos de evaporizacin/sublimacin producirn un claro aumento en la concentracin/actividad de todos los componentes no voltiles. Esto aplica particularmente en el caso cuando el volumen de la muestra es relativamente pequeo y el rea de la superficie es relativamente grande. E.-) Con toda seguridad los analitos, los especimenes/muestra, no deben someterse a congelacin profunda. No observar esto puede producir desviaciones en los resultados para algunos analitos. F.-) Una fuente comn de error es el mezclado inadecuado de muestras congeladas profundamente, despus de descongelarse.

3.- OBTENCION DE MUESTRA SANGUNEA 1.- El paciente acudir en completo ayuno. 2.- El paciente debe extra en una posicin cmoda en caso de que no se noten las venas se le recomienda, al paciente acostarlo sobre una mesa de exploracin. 3.- Se debe preparar todo el material. 4.- Se solcita al paciente que sierre el puo para que las venas resalten y sean mas palpables. 5.- Se selecciona la vena adecuada para la puncin

6.- Se aplicar el torniquete varios centmetros por encima de la zona de puncin (No dejar ms de 1 min.) 7.- Se hace asepsia de la zona de puncin con una torunda (Se comienza en el punto de la puncin y se prosigue la limpieza hacia fuera siguiendo un movimiento espiral). 8.- Se fija la vena por encima o por debajo del lugar de la puncin con ayuda de los dedos Pulgar y medio. 9.- Se penetra la piel con la aguja formando un ngulo de 15 grados con el brazo. El bisel debe estar hacia arriba, se sigue la direccin de la vena. Se introducir la aguja con suavidad y rapidez para reducir las molestias. Si se utiliza una jeringa se tira hacia atrs del mbolo, con tensin lenta y uniforme a medida que la sangre va fluyendo. 10.- Colocar suavemente una torunda de algodn sobre el punto de puncin, se extrae la aguja con un movimiento rpido. NO aplique masaje. NOTA: Comprobar el estado del paciente, verificando si se ha mareado y si la hemorragia est controlada.

4.- TECNICA DE LA PUNCIN CUTNEA Se utiliza frecuente mente la puncin cutnea cuando bastan pequeas cantidades de sangre por ejemplo para medicin de hemoglobina hematocrito, plaquetas leucocitos, eritrocitos, y meticulositos preparacin de frotis sanguneos y realizacin de anlisis bioqumicas. La puncin venosa es el mtodo ms facial y adecuado para obtener un volumen de sangre suficiente para llevar acabo gran nmero de pruebas. As se evitaran manipulaciones mltiples a la cabecera del enfermo, muchas veces permite efectuar pruebas adicionales sugeridas por los resultados de las

primeras, disminuye la posibilidad de error por dilucin con liquido tisular o con construccin de los vasos sanguneos por el fri o la emociona. Fenmenos que pueden presentarse durante la puncin del dedo y adems es posible obtener bastante sangre par realizar i repetir pruebas en casos de accidentes o error o para verificar un resultado dudoso. Existen 3 lugares habituales para la puncin. La yema del dedo de la mano Taln del dedo gordo del pie El lbulo de la oreja 1.- Seleccionar un punto adecuado para la puncin calentar la zona de puncin, con ello se aumenta el flujo de la sangre. 2.- Realizar asepsia en la zona de la puncin con un a torunda de alcohol y dejar secar la piel. La puncin se lleva acabo con una lanceta estril realizando un nico movimiento, el instrumento NOTA: Cuando la puncin de se efecta en el taln, se sujeta con el primer dedo con el arco y con el pulgar prximo al punto de puncin en la zona del tobillo 3.-Desechar la primera gota de sangre enjuagndola con una torunda o con una gasa estril regule el flujo de sangre mediante presin con el dedo pulgar no realizas maniobras ni ordea ya que se puede Hemolizar la muestra introducir en ella un exceso de liquido mstico (amarillo). 4.-Recoger la muestra en un recipiente adecuado, Un metido adecuado es el del micro tubo recolector 5.-Si la muestra se recolecto en tubos capilares introducindola en plastilina 6.-Etiquetar el recipiente de la muestra con los datos del paciente

7.- TUBO CAPILAR Se recomienda su uso cuando el paciente es un bebe o cuando se requiere de poca sangre para algunos estudios como lo son recuento de clulas, medicin de Hot LOS PASOS SON LOS SIGUIENTES: Se limpia la piel con alcohol y se deja secar; se realiza una puncin firme de 2 a 3mn de profundidad con una pequea lanceta de metal individuales y desechables.

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Se presiona ligeramente alo largo de los lados de la yema del dedo, acierta distancia de la herida y se desecha la primera gota de sangre. Con las gotas siguientes que brota casi ligeramente, sin mucha presin, se hacen las tomas con los tubos capilares en caso de necesitar una laminilla se hace la exencin en ella. De no ser as el tubo se coloca en la flama para sellar por los 2 lados. GRUPO SANGUINEO EN PLACA Sabemos que existen varios tipos de grupos sanguneos como lo son: O (+), O (-), A (+), A (-), B (+), B (-), AB (+), AB (-), Para determinacin de grupo RH se utiliza suero o sangre completa se coloca una gota en una placa de vidrio o de porcelana as sucesivamente la gota del anti A, anti B, y anti Rh. Los antisueros A, B .AB, Se utilizan para reconocer a un anticuerpo del cual se requiere saber. El anti D solo nos sirve para reconocer el RH. NOTA: en caso de alguna duda verificar en la tcnica de tubo. 8.- GRUPO SANGUINEO EN TUBO En un tubo se hace una solucin salina y se rotulan 3 tubos con el nmero de folio y las letras A, B, y RH Se les agrega 2 gotas de sangre a los tobos y 2 gotas de reactivo se mezcla 1X1 y se colocan y se colocan en la centrifuga durante 5 mn. A 2500 r.p.m. Terminado el tiempo se observa agitando suavemente. La aglutinacin ser a simple vista NOTA: En caso de alguna duda colocar una gota en el porta objeto y observar al microscopio a 10 y 40 x 9.- EXUDADO FARINGEO El paciente debe presentarse sin aseo bucal y en completo ayuno este ser tomado de la boca. Pedir al paciente que habr lo mas que pueda la boca que saque la lenguas con el abate lenguas bajar la base de la lengua basta exponer las amgdalas y or farngeo, tomar el hisopo estril frotar la parte superior de la garganta del paciente, a si como las amgdalas y la fosa amigdalina y en las reas con inflamacin. 10.- EXUDADO NAZAL Este estudio ser tomado de la parte de la nariz procurando no lastimar al paciente. Levantar la punta de la nariz introducir por un orificio el hisopo tocando el piso de las fosas nasales. Con cuidado girar el hisopo lentamente, Lugo sacarlo.

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14.- EXUDADO LAGRIMEO Ser tomado de los ojos. Con un hisopo desechable se tomara muestra del ojo afectado de las esquinas. 15.- EXUDADO DE HERIDA Igual que todos se tomara con mucho cuidado primero se limpiara con izodine, sucesivamente se tomara la muestra si es una herida de pie se presionara alas los lados para lograr que supure un poco y poder tomar la muestra de esa parte.

RELACIN DE PRUEBAS QUE SE REALIZAN Y LAS QUE SE MANDAN A MAQUILAR

16.- BIBLIOGRAFIA Diagnostico Y Tratamiento Clnicos Por El Laboratorio. Johon Bernard Henry 9 Edicin. Pg. 4 10. 1062 1063.

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