Biotecnologia translacional:

hemopressina e outros peptdeos intracelulares

Introduo
termo

Emer Suavinho Ferro

biotecnologia foi usado pela primeira vez em 1919, pelo engenheiro hngaro Karl Ereky, mas sua definio oficial aconteceu em 1992 na Conveno sobre Diversidade Biolgica. Essa foi posteriormente ratificada por 168 pases e aceita pela Food and Agriculture Organization (FAO) e pela Organizao Mundial da Sade (OMS), como sendo: qualquer aplicao tecnolgica que usa sistemas biolgicos, organismos vivos ou seus derivados, para criar ou modificar produtos e processos para usos especficos. Com essa definio em mente, conclumos que a biotecnologia uma das prticas mais antigas da humanidade, pois seu emprego na produo de cerveja e po iniciase no antigo Egito entre 4000-2000 a.C; e a diverso continua com o uso da biotecnologia para a produo de queijos e vinhos.1 A expresso utilizada aqui, biotecnologia translacional, parafraseada daquela utilizada na medicina da bancada beira do leito e tem o objetivo de enfatizar o uso da biotecnologia como cincia ligada inovao, cujos resultados so aplicveis, tambm, para a melhoria da condio de vida da populao. No cotidiano acadmico, a biotecnologia uma cincia profundamente orientada pelo mtodo cientfico. ideal que os resultados gerados pela biotecnologia sejam eventualmente convertidos em produtos comerciais, fazendo que essa cincia tenha uma forte correlao com o conceito de inovao; no caso da indstria em geral, inovar significa disponibilizar um produto para o consumo. A biotecnologia aplica-se tanto para a inovao radical, que envolve descobertas originais, como para a inovao incremental, que pode envolver apenas melhorias em processos j existentes. Por exemplo, o desenvolvimento de uma nova molcula que contm um princpio ativo e que pode servir de base para um novo medicamento a ser patenteado pode vir a tornar-se uma inovao radical. Assim, espera-se que o desenvolvimento de projetos de biotecnologia produza resultados para fins de apropriao comercial, contribuindo para melhorar a qualidade de vida dos indivduos.2 A descoberta da estrutura do DNA por Watson & Crick (1953), em maro de 1953, demonstrou o mecanismo para a cpia do material gentico responsvel pela perpetuao das espcies. Essa descoberta proporcionou um avano
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muito rpido das chamadas tcnicas de DNA recombinante, tornando a manipulao gentica popular e fazendo da biotecnologia um importante agente de integrao de diversas reas do conhecimento, como gentica, microbiologia, bioqumica, fisiologia, biologia celular, farmacologia, qumica, entre outras. Um importante fato na popularizao da biotecnologia foi o desenvolvimento por Kary B. Mullis, em 1983, da tcnica de reao de polimerizao em cadeia (PCR) (Saiki et al., 1985). A tcnica de PCR permite, de forma muito simples, amplificar o material gentico em tubos de ensaio e tem sido aplicada s mais diversas reas da biotecnologia. Na rea da sade, a biotecnologia tem sido aplicada para o desenvolvimento de vacinas, terapia gnica e celular, desenvolvimento e uso de clulas-tronco embrionrias, bem como na recm-criada clula sinttica idealizada e desenvolvida no laboratrio de Craig C. Venter (Gibson et al., 2010). Alm disso, uma aplicao importante da biotecnologia est no desenvolvimento de biofrmacos, que podem ser entendidos como protenas recombinantes destinadas teraputica. O mercado de biofrmacos j corresponde a aproximadamente 10% do faturamento anual da indstria farmacutica, que gira em torno de US$ 800 bilhes, com previso de crescimento anual de 3%-6%. Segundo previso da IMS Health, o Brasil deve adicionar entre US$ 5 e 15 bilhes em vendas anuais de produtos farmacuticos em 2013, ficando o mercado brasileiro de biofrmacos com faturamento estimado de US$ 0,5-1,5.3 O uso da biotecnologia permitiu o desenvolvimento pela empresa Genentech, em 1978, do primeiro biofrmaco produzido por bactrias que foi a insulina recombinante humana. Em 1982, a Genentech, em parceria com a Eli Lilly Company, produziu a insulina humana recombinante de forma ideal e conseguiu a aprovao para uso humano junto Food and Drug Administration (FDA) americana.4 A produo de insulina para uso humano fabricada a partir de tcnicas de engenharia gentica permitiu reduzir de forma significativa os problemas associados impureza da substncia, originalmente purificada a partir do pncreas de animais. A tcnica de produo da insulina recombinante humana baseada na insero de DNA humano em uma clula hspede (E. coli, por exemplo). As clulas crescem e se reproduzem normalmente, e, graas ao cdigo de DNA inserido no hospedeiro, produzem insulina prpria para a teraputica humana. Podemos constatar que a biotecnologia uma cincia pragmtica, que hoje beneficia mais de 250 milhes de pacientes que fazem uso de biofrmacos para o tratamento de infartos, esclerose mltipla, cncer de mama, fibrose cstica, leucemia e doenas de origem gentica. A biotecnologia teve um impacto positivo na produo de vacinas seguras e eficientes para as doenas infecciosas. Atualmente, mais de 350 medicamentos elaborados com o uso da biotecnologia esto sendo aprovados para o tratamento de mais de 150 doenas, entre as quais se encontram o cncer, as doenas infecciosas e as desordens autoimunes.5 Os biofrmacos mais importantes na atualidade so:
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 Fatores sanguneos como o Fator VIII e IX: utilizados como fator de

coagulao para a hemofilia tipos A e B. Agentes tromboembolticos ativadores de plasminognio tecidual: utilizados para condies associadas a trombose e embolias. Hormnios: como a insulina (utilizada para o diabetes), o hormnio do crescimento e as gonadotrofinas. Fatores de crescimento hematopoiticos como a eritropoietina, que so fatores relacionados com a produo de glbulos vermelhos utilizados no tratamento das anemias causadas por falha renal crnica ou pela quimioterapia contra o cncer. Interferons -, -, -, que so protenas naturais produzidas pelas clulas do sistema imunolgico em resposta ameaa de agentes como vrus, bactrias, parasitas e tumores. Os interferons so utilizados para tratar condies como a esclerose mltipla, leucemias e hepatite C. Produtos baseados em interleucinas, que so utilizados para tratar a doena de Crohn e a colite ulcerosa. Vacinas: para a preveno de vrias doenas. Anticorpos monoclonais, que so anticorpos produzidos por um tipo especfico de clulas imunes, todos a partir de uma mesma clula (monoclonal). Os anticorpos monoclonais podem ser utilizados para tratar uma ampla variedade de doenas. Outros produtos: como enzimas teraputicas e fatores de necrose tumoral, utilizados para as doenas autoimunes, como a artrite reumatoide, doena de Crohn, entre outras. Assim, vemos que a biotecnologia est presente no cotidiano e proporciona opes para a produo recombinante de protenas derivadas do sangue ou de tecidos, garantindo que a produo de medicamentos ocorra de forma segura, eficaz e que no tenha consequncias negativas para o meio ambiente. A maioria dos biofrmacos descritos antes e comercializados no mundo possuim atualmente um biogenrico em desenvolvimento, pois suas patentes encontramse em fase de expirao. Assim, o desenvolvimento e a produo de biofrmacos genricos so atualmente uma excelente oportunidade tanto para laboratrios acadmicos com expertise na produo de protenas recombinantes e que desejem ingressar na rea da inovao como para empresas nacionais de biotecnologia que pretendam ampliar sua linha de servios e produtos.

Desenvolvimento da biotecnologia
A seguir, uma viso cronolgica do desenvolvimento da biotecnologia:
4000-2000 a.C: Pela primeira vez a biotecnologia foi usada no Egito para

produo de cerveja e po usando a tcnica de fermentao, por meio de leveduras. 1322: Cavalos de uma raa superior foram inseminados artificialmente por um lder rabe.
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 1761: Plantas de espcies diferentes foram cruzadas pelo naturalista alemo Jo-

seph Gottlieb Koelreuter. 1859: O ilustre cientista britnico Charles Darwin publicou a Teoria da Evoluo das Espcies pela Seleo Natural. O conceito de selecionar e destruir a prole mais fraca teve grande influncia entre os criadores de animais em meados do sculo XIX, apesar da gentica no ser ainda uma cincia reconhecidamente. 1865: Surgiu a gentica, tendo como mentor o cientista austraco Gregor Mendel. Por meio de suas experincias com ervilhas, descobriu que as caractersticas so hereditrias, passadas de pai para filho, assim como descobriu tambm os padres da hereditariedade. 1870: Os criadores de plantas comearam a utilizar a teoria de Darwin para cruzar espcies diferentes de algodo e assim conseguiram desenvolver uma variedade superior da planta. 1876: Louis Pasteur provou que a causa das fermentaes era a ao de seres minsculos, os micro-organismos, caindo por terra a teoria, at ento vigente, de que a fermentao seria um processo puramente qumico. 1879: O cientista Alexander Fleming descobriu a cromatina, uma estrutura parecida com uma varinha dentro do ncleo das clulas, que mais tarde foi chamada de cromossomos. 1897: Eduard Buchner demonstrou ser possvel a converso de acar em lcool, utilizando clulas de levedura maceradas, ou seja, na ausncia de organismos vivos. 1900: A mosca-da-fruta, Drosofila melanogaster, foi usada nos primeiros estudos de genes. 1906: Surgiu o termo gentica. 1919: A palavra biotecnologia foi usada pelo engenheiro hngaro Karl Ereky. 1941: A expresso engenharia gentica foi usada pela primeira vez. 1942: A penicilina comeou a ser produzida como frmaco e utilizada como antibitico em seres humanos. 1944: Foi descoberto que o DNA a estrutura responsvel pela transmisso das informaes genticas. 1953: Os cientistas James Watson e Francis Crick resolvem a estrutura do DNA. O artigo deles publicado na revista Nature e marca a era da gentica contempornea. 1956: O processo de fermentao foi otimizado, Arthur Kornberg descobriu a enzima DNA polimerase I, que catalisa a sntese de DNA em bactrias, levando a um entendimento de como o DNA replicado. 1958: O DNA foi produzido pela primeira vez em um tubo de ensaio. 1969: Uma enzima foi sintetizada in vitro pela primeira vez. 1970: Enzimas de restrio (nucleases especficas) foram identificadas, abrindo o caminho para clonagem molecular de genes. 1972: Foi descoberto que a composio do DNA humano 99% similar dos chimpanzs e gorilas.
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 1975: Os primeiros anticorpos monoclonais foram produzidos. 1982: A FDA aprovou a primeira insulina humana produzida por bactrias ge-

neticamente modificada.

1983: Kary B. Mullis desenvolveu a tcnica de reao de polimerizao em ca-

deia (PCR). 1984: Clonou-se o vrus HIV e seu genoma foi totalmente sequenciado. 1986: Foi produzida a primeira vacina recombinante para humanos contra hepatite B e a primeira droga anticncer produzida por meio da biotecnologia. 1990: Foi lanado o Projeto Genoma Humano. O primeiro tratamento de terapia gnica foi realizado em uma criana de quatro anos que sofria de uma desordem no sistema imunolgico, nos Estados Unidos. 1994: O primeiro gene de cncer na mama foi descoberto. 1995: A terapia gnica entra na guerra contra o cncer. O primeiro sequenciamento de um genoma de um organismo vivo diferente de vrus concludo para a bactria Hemophilus influenzae. 1996: Cientistas escoceses clonaram cpias idnticas de cordeiro a partir de embries. 1997: Nasceu a ovelha Dolly, primeiro animal clonado de uma clula adulta. 1998: Descobriram-se as clulas-tronco embrionrias humanas. Foi sequenciado o primeiro genoma completo de um animal, o nematoide C. elegans. 1999: Surge o conceito de interatoma e a ideia de que as protenas raramente desempenham suas funes individualmente 2003: A ovelha Dolly foi submetida a eutansia aps desenvolver um cncer de pulmo; a China aprovou a primeira regulamentao de um produto para terapia gnica. 2004: Primeiro animal de estimao foi clonado: um gato. Foi sequenciado o genoma do rato utilizado para pesquisas em laboratrios. 2005: A FDA aprovou a primeira droga para uma etnia especfica: um remdio para problema cardaco exclusivo de negros. Foi publicado o genoma do cachorro. 2010: Craig C. Venter publicou artigo na revista Science descrevendo pela primeira vez o desenvolvimento de uma clula sinttica, cujo DNA inicial foi inteiramente sintetizado em laboratrio sob o comando humano.
Fonte: Adaptado de http://www.shire.com.br/tecnologia/biotecnologia.

O emprego da biotecnologia na descoberta acadmica de novas molculas bioativas

O estudo de pequenas protenas, denominadas peptdeos, que atuam no sistema nervoso tem sua origem nas dcadas de 1940-1950, estando a descoberta do peptdeo bradicinina, publicada em 1949 pelo professor Maurcio Rocha e Silva et al. (1949), na Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, respaldada por mais de dezoito mil manuscritos internacionalmente reconhecidos. Peptdeos bioativos descobertos em mamferos, que, como a bradicinina, desempenham
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funes fisiolgicas as mais diversas, j somam hoje mais de uma centena. Em comum, os peptdeos possuem uma estrutura proteica que codificada a partir de uma sequncia nucleotdica especfica armazenada no DNA. Essa estrutura proteica dos peptdeos inicialmente produzida como uma protena, que precisa ser hidrolisada em aminocidos muito especficos por enzimas denominadas proteases. Aps a liberao de seu precursor proteico, os peptdeos ganham atividade biolgica e sinalizam, normalmente em conjunto com outras pequenas molculas de natureza no proteica, clulas e tecidos a desempenharem as mais diversas funes. Assim, sabemos hoje que peptdeos desempenham funes cruciais em clulas e rgos de animais, sejam uni ou multicelulares. comum que uma mesma clula ou tecido produza diversos peptdeos simultaneamente, e os utilize para desempenhar corretamente suas funes. Como seus precursores proteicos, os peptdeos tambm precisam ser constantemente degradados e reciclados a aminocidos, permitindo um processo constante de renovao celular. As enzimas que desempenham esse papel de hidrolisar peptdeos so denominadas peptidases, por hidrolisarem ligaes peptdicas. As peptidases, junto com as proteases, so protenas conservadas ao longo da evoluo das espcies, correspondendo a aproximadamente 2% dos genes codificados pelo genoma humano, reiterando a importncia biolgica de peptdeos e peptidases. Uma classe de peptidases conservadas ao longo da evoluo e que so expressas de forma ubqua nas clulas e tecidos de mamferos, incluindo humanos, so as oligopeptidases. Essas oligopeptidases, que tambm foram descobertas, na Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, pelo professor Antnio Carlos Martins de Camargo et al. (1969), so enzimas cientificamente interessantes por diversos aspectos, entre eles, pela sua conformao estrutural nica que permite apenas a entrada de pequenos peptdeos em seu stio hidroltico. A clonagem molecular, ou seja, a identificao da sequncia de DNA codificante, da primeira oligopeptidase de mamferos ocorreu no incio da dcada de 1990, pelo grupo dos professores James L. Roberts e Marc J. Glucksman, no Mount Sinai School of Medicine (Nova York), e impulsionou o desenvolvimento do conhecimento nessa rea. Particularmente, com a clonagem molecular foi possvel utilizar sistemas de expresso em bactrias para a produo de uma enzima, denominada thimet-oligopeptidase (TOP ou EP24.15), em quantidades e pureza anteriormente impensveis (cf. Rioli et al., 1998). Entre as vantagens de se utilizar a biotecnologia para produzir em micro-organismos protenas que normalmente so encontradas em rgos vitais de mamferos como crebro, rins e corao, esto a quantidade e a pureza do material obtido. Por exemplo, pelo mtodo cromatogrfico originalmente empregado na obteno dessa enzima a partir de quilogramas de material biolgico (normalmente crebro de coelhos, ratos ou bovinos), obtinham-se microgramas de material purificado ao final do processo e de meses de trabalho. Pela biotecnologia, utilizando um sistema de expresso de protenas recombinantes em bactrias, possvel atualmente obter gramas dessa protena em apenas cinco dias de trabalho. Com isso, foi possvel a
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determinao da estrutura cristalogrfica da EP24.15, fator determinante para o entendimento de sua restrio a hidrolisar pequenos peptdeos. Dessa forma, dominar o processo de produo de oligopeptidases recombinantes como a EP24.15 permitiu utiliz-la para a caracterizao estrutural, de suas especificidades bioqumicas, bem como para a produo de anticorpos altamente especficos. Alm desses importantes aspectos, a expresso de protenas por biotecnologia nos permite realizar alteraes estruturais racionais na sequncia de aminocidos da protena expressa. Essa manipulao do cdigo gentico (engenharia gentica) pode ser empregada com diversos objetivos, entre eles o de manipular racionalmente a atividade enzimtica. possvel assim produzir enzimas, por exemplo, estveis a altas temperaturas ou cataliticamente inativas. Diante dessas possibilidades biotecnolgicas, o emprego de uma forma cataliticamente inativa da oligopeptidase EP24.15 permitiu o seu emprego para a descoberta de uma nova famlia de molculas, que foram os peptdeos intracelulares. Em sua tese de doutorado, defendida em 2003 na Universidade Federal de So Paulo, na rea de concentrao de Biologia Molecular, a biloga Vanessa Rioli descreveu pela primeira vez o emprego de oligopeptidases inativas para o isolamento de novas sequncias peptdicas (Rioli et al., 2003). Entre os peptdeos originais identificados, estava um fragmento da cadeia alfa da hemoglobina de nove aminocidos, que, por sua atividade hipotensora, foi denominado hemopressina. importante ressaltar que a identificao da hemopressina, e posteriormente de uma centena de diversos outros peptdeos intracelulares, s foi possvel pelo emprego da espectrometria de massas, chamando a ateno para o carter multidisciplinar da biotecnologia, que, aliada a outras cincias contemporneas, permite avanos significativos no conhecimento. Com a descoberta de uma nova sequncia peptdica bioativa, como a da hemopressina, foi possvel a realizao de investigaes adicionais envolvendo sua funo farmacolgica e mecanismo molecular de ao. Com ensaios farmacolgicos adicionais, um grupo de pesquisadores liderados pelas doutoras Camila S. Dale (Hospital Srio-Libans), Andrea S. Heimann (Proteimax Biotecnologia Ltda.) e Lakshmi A. Devi (Mount Sinai School of Medicine) constatou que, alm da ao hipotensora, a hemopressina tambm possui uma atividade analgsica que envolve o antagonismo de receptores canabinoides (Heimann, 2007). A descoberta de que o mecanismo molecular de ao da hemopressina envolve o antagonismo de receptores canabinoides teve repercusso mundial. Mais recentemente, a demonstrao de que a hemopressina atuando como antagonista de receptores canabinoides inibe a ingesto alimentar em animais de laboratrio, um efeito oposto quele desempenhado pelos agonistas canabinoides presentes em plantas como a Cannabis sativa, aumentou ainda mais o interesse da comunidade cientfica e da sociedade por esse peptdeo. O quanto a hemopressina, um peptdeo descoberto pelo uso da biotecnologia no curso de uma tese orientada por uma hiptese e popularizado por publicaes cientficas que demonstraram a sua potencial relevncia teraputica,
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ir se tornar uma inovao permanece uma questo a ser respondida. Esforos de indivduos e empresas tm sido feitos nesse sentido, considerando o que foi aprendido com as experincias de grupos de pesquisa anteriores.

O emprego da biotecnologia na mudana de paradigmas cientficos

O uso da biotecnologia para a produo de oligopeptidases inativas permitiu o desenvolvimento de um mtodo, patenteado pela Universidade de So Paulo e pela Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado de So Paulo (Fapesp), que levou descoberta de novos peptdeos (Cunha, 2008). Com isso, o que se percebia era a presena de um grande nmero de peptdeos derivados de protenas presentes, especialmente, no citoplasma, ncleo e mitocndrias. Peptdeos derivados de protenas intracelulares haviam at ento sido descritos apenas de forma isolada e espordica, e, no geral, eram tidos apenas como intermedirios inativos no processo de produo de aminocidos para sntese de novas protenas, alm de parte integrante do sistema de reconhecimento autoimune. No entanto, os peptdeos identificados com o uso das oligopeptidases inativas possuam sinais para modificaes ps-traducionais, especialmente para fosforilao, que so frequentemente encontrados nas protenas que participam regulando as cascatas de sinalizao do meio intracelular, particularmente durante a transduo do sinal mediado por receptores da membrana plasmtica. A tese de doutoramento da farmacutica Fernanda Marques da Cunha, defendida na Universidade Federal de So Paulo, e a da biomdica Denise Aparecida Berti, defendida na Universidade de So Paulo, investigaram a possibilidade da existncia e relevncia fisiofarmacolgica do que se antevia como uma nova famlia de molculas sinalizadoras intracelulares. Assim, pela primeira vez, foi demonstrado que peptdeos naturalmente encontrados no meio intracelular so capazes de interferir na sinalizao celular mediada por dois importantes agonistas farmacolgicos, a angiotensina II e o isoproterenol. Alm disso, foi demonstrado que a manipulao da atividade intracelular da oligopeptidase EP24.15, que modifica per se a composio peptdica intracelular, era suficiente para alterar a transcrio gnica resultante da sinalizao celular iniciada pelos agonistas farmacolgicos citados (cf. Cunha, 2008; Berti et al., 2009). Um papel fisiolgico especfico para os peptdeos intracelulares parece estar na regulao da captao de glicose pelo tecido adiposo. Diante da dieta hipercalrica denominada cafeteria, a composio de peptdeos intracelulares especficos aparece alterada no tecido adiposo de ratos que desenvolveram obesidade e resistncia a insulina. Importante para reiterar o conceito inicial de biotecnologia translacional, a reintroduo desses peptdeos intracelulares em clulas adiposas foi capaz de melhorar a captao de glicose em clulas resistentes a insulina. Esses ltimos estudos ainda esto em andamento, mas sugerem um papel fisiolgico adicional para os peptdeos intracelulares na sinalizao da insulina no tecido adiposo (Berti, s. d.).
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Estudos posteriores liderados pelo professor Lloyd D. Fricker, do Albert Einstein College of Medicine (Nova York), levaram identificao sistemtica de um grande nmero de peptdeos intracelulares em tecidos como crebro, vasos e corao (cf. Gelman & Fricker, 2010). Adicionalmente, estudos conduzidos pelo biomdico Leandro Mantovani de Castro, da Universidade de So Paulo, demonstraram que os peptdeos intracelulares descritos em tecidos de mamferos no fazem parte do sistema de reconhecimento autoimune (Castro et al., 2010). Esses estudos sistemticos demonstraram definitivamente a existncia de uma famlia de peptdeos intracelulares que podem ser encontrados em diversos animais e seus respectivos tecidos. Foi demonstrada tambm a existncia de uma composio semelhante de peptdeos intracelulares em diversos tipos celulares. Estudos recentes demonstram alteraes significativas da composio de peptdeos intracelulares especficos em modelos animais de doenas neurodegenerativas, bem como aps a induo de isquemia cerebral. Portanto, possvel sugerir que peptdeos intracelulares desempenhem diversas funes fisiopatolgicas em mamferos. Dessa forma, esses trabalhos desenvolvidos dentro do processo acadmico de cincia dirigida por hiptese, e empregando biotecnologia entre outras cincias, mudam o paradigma de que peptdeos formados durante a protelise intracelular sejam rapidamente convertidos em aminocidos e destinados sntese proteica. Trabalhos adicionais podero ser realizados para investigar a possvel ocorrncia de alteraes no contedo intracelular de peptdeos em doenas humanas (cf. Fricker & Sweedler, 2010).

A proposta nova de peptdeos intracelulares atuando na sade e na doena

Em um evento organizado em 2009 por Rao Rapaka, diretor do National Institute of Drug Abuse (Nida) / National Institute of Health (NIH), foram discutidas as perspectivas e aes futuras no sentido de desvendar o peptidoma escondido (Fishing for the Hidden Peptidome in Health and Disease; USA, 2009). O proteoma e o peptidoma so definidos, respectivamente, como o conjunto de protenas e peptdeos presentes em um tecido ou amostra biolgica. O mecanismo sugerido para a ao de peptdeos no meio intracelular envolve uma atuao no meio celular interno (Ferro et al., 2004), e outra no meio extracelular (Gomes, 2010), onde podem ser secretados. No meio intracelular, sugere-se que peptdeos sejam moduladores das redes de interao proteicas, fisiologicamente responsveis pela manuteno de processos celulares variados. Essas redes de interao proteicas tambm esto correlacionadas a estados patolgicos, podendo ser utilizadas como mtodos prognsticos, por aparecerem alteradas, por exemplo, no cncer. As primeiras evidncias experimentais no sentido de investigar o papel de peptdeos intracelulares na interao proteica vm do trabalho desenvolvido pela biloga Lilian Cristina Russo Vieira. Utilizando ressonncia plasmnica de superfcie, a Dra. Lilian demonstrou que a interao de protenas especficas com aquelas presentes no citosol do tecido neuronal alterada pela
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adio de peptdeos intracelulares especficos. Alguns desses peptdeos so capazes de aumentar enquanto outros de reduzir as interaes protena-protena. Para agirem no meio extracelular, sugere-se que esses peptdeos sejam secretados a partir do citosol por uma via secretria no convencional. Os exemplos j conhecidos de peptdeos derivados de protenas citoslicas e que so secretados incluem as hemorfinas, fragmentos peptdicos derivados da cadeia beta da hemoglobina que agem como agonistas de receptores opioides. No h, no entanto, at o momento, estudos sobre a possvel de secreo da hemopressina ou de seus precursores, as RVD- e VD-hemopressinas, nem de outros peptdeos intracelulares decorrentes dos trabalhos discutidos aqui. No entanto, importante comentar que trabalhos recentes demonstraram de forma muito elegante a expresso de hemoglobina em clulas neuronais. Em neurnios, sugere-se que a hemoblobina funcione como uma protena antioxidante. Assim, tanto o precursor proteico (cadeia alfa da hemoglobina) quanto o receptor de hemopressinas (receptor canabinoide CB1) podem ser encontrados em neurnios do sistema nervoso central. Com isso, observamos que nosso entendimento sobre a biologia celular est longe de ser suficiente, e que constantes investigaes nas mais diversas reas do conhecimento, como a biotecnologia, espectrometria de massas, biologia celular, farmacologia, fisiologia, patologia, entre outras, so essenciais para quem se prope a melhorar a qualidade de vida da populao.

Consideraes finais
Neste artigo, procuramos reportar o uso do conhecimento adquirido no ambiente acadmico para estabelecer correlaes entre uma cincia pragmtica, como a biotecnologia, e a cincia acadmica dirigida pela hiptese. Nota-se que no h inconvenientes obrigatrios quando essas duas cincias se entremeiam; pelo contrrio, a resultante primria o avano do conhecimento. Os avanos conseguidos ao longo de nfimos onze anos, e que levaram identificao dos peptdeos intracelulares como uma nova famlia de molculas biologicamente ativas, s foram possveis pelo emprego da biotecnologia e das tcnicas de DNA recombinante em conjunto com a introduo da espectrometria de massas e conceitos clssicos de farmacologia, fisiologia, bioqumica e biologia celular. Com a incorporao de novas cincias, como a espectrometria de massas aplicada a macromolculas e da ressonncia plasmnica de superfcie, o perodo necessrio para a realizao de descobertas fundamentais tem se reduzido significativamente. O trabalho contnuo de pesquisadores que se sucedem pelas geraes tem um valor inestimvel e contribui para o desenvolvimento de linhas de pesquisa que vo incorporando novidades e se aprimorando medida que o conhecimento avana. A histria recente da descoberta da hemopressina e dos peptdeos intracelulares um exemplo nesse sentido. Agradecimentos: Aos ps-graduandos do Laboratrio de Comunicao Celular, Diogo Manuel Lopes de Paiva Cavalcanti, Christiane Bezerra Araujo, Natlia Mazini Ribeiro e Rodolfo Mattar Rosa, e ao professor Luiz Roberto G.

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Britto, do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo, pela leitura crtica e pelos comentrios valiosos sobre o texto original.
Notas
1 Cf. <http://www.roche.com.br/fmfiles/re7193008/pdf/medicamentosbiologicos1. pdf>; Fardelone & Branchi (2006); Vieira & Ohayon (s. d.); Global... (2008); Como estimular a inovao tecnolgica (2010). 2 Cf. <http://www.roche.com.br/fmfiles/re7193008/pdf/medicamentosbiologicos1. pdf>; Fardelone & Branchi (2006); Vieira & Ohayon (s. d.); Global... (2008); Como estimular a inovao tecnolgica (2010). 3 Cf. <http://www.roche.com.br/fmfiles/re7193008/pdf/medicamentosbiologicos1. pdf>; Fardelone & Branchi (2006); Vieira & Ohayon (s. d.); Global... (2008); Como estimular a inovao tecnolgica (2010). 4 Cf. <http://www.shire.com.br/tecnologia/biotecnologia>. 5 Cf. <http://www.roche.com.br/fmfiles/re7193008/pdf/medicamentosbiologicos1. pdf>; Fardelone & Branchi (2006); Vieira & Ohayon (s. d.); Global... (2008); Como estimular a inovao tecnolgica (2010).

Referncias
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resumo

A biotecnologia uma prtica antiga, sendo utilizada desde o antigo Egito para a produo de po e cerveja. No mundo contemporneo, a biotecnologia tem sido utilizada de diversas formas, incluindo o tratamento de doenas. No universo acadmico, a biotecnologia tem permitido um avano rpido do conhecimento. Neste artigo, fazemos um breve resumo sobre o que biotecnologia, sua relao com o processo de inovao e produo de biofrmacos. No universo acadmico, a biotecnologia tem contribudo de forma decisiva para a descoberta de novas molculas bioativas, como no caso da hemopressina e de diversos outros peptdeos intracelulares.

palavras-chave: Medicina translacional, Interatoma, Biologia molecular, Comunicao celular, Espectrometria de massas.

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abstract Biotechnology has been used since ancient Egypt for the production of bread and beer. In the modern world, biotechnology has been used in several ways, including for the treatment of diseases. In academia, biotechnology has allowed a rapid advance of knowledge. In this article, we make a brief summary of what is biotechnology and its relation to the process of innovation and production of biopharmaceuticals. In academia, biotechnology has contributed decisively to the discovery of new bioactive molecules, such as in hemopressin and several other intracellular peptides. keywords: Translational medicine, Interactome, Molecular biology, Cell signaling, Mass spectrometry.

Emer Suavinho Ferro professor titular no Instituto de Cincias Biomdicas (ICB) da Universidade de So Paulo (USP). @ eferro@usp.br Recebido em 21.9.2010 e aceito em 24.9.2010.

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