Transduccin de Seales

Dr. Leonardo Guzmn G. Depto. de Fisiologa joseguzman@udec.cl

Marco Bio-Lgico de la Transduccin de Seales.

Claude Bernard (1813 1878): La condicin necesaria para la vida de un organismo i es la l constancia t i d l medio del di i t interno. E En l los organismos i multicelulares, el agrupamiento de clulas especializadas en tejidos adaptados a un determinado trabajo, la asociacin de tejidos en rganos apropiados p p para el desarrollo de determinadas funciones, p , y la dispocicin p de rganos en el animal completo y unificado, requiere de mecanismos que permitan que las clulas del organismo se comuniquen entre s.

Humberto Maturana y Francisco Varela definen autopoiesis: Los seres vivos se producen continuamente a s mismos, poseen una organizacin autopoitica. Esta organizacin est dada por ciertas relaciones a nivel celular.

Elementos de los Sistemas de Transduccin de Seal Hormonas

Qu son las hormonas? (versin clsica) Sustancia que se sintetiza y secreta por clulas especializadas, y se transporta por la circulacin a las clulas diana (o clulas blanco), en las que provoca modificaciones especficas de la conducta metablica de la clula al interactuar con un receptor especfico para esa hormona. Qu son las hormonas? (versin moderna) Mensaje qumico de una clula (o grupo de clulas) a otra. Claude Bernard crea el concepto de secrecin interna. La palabra hormona deriva del griego hormon (poner en movimiento), y fue usada por primera vez por William Bayliss y Ernest Starling en 1905 1905, refirindose a la actividad de factores digestivos. Adrenalina, fue la primera hormona aislada (Jokichi Takamine, 1901). Oxitocina fue la primera protena producida sintticamente.

Elementos de los Sistemas de Transduccin de Seal Receptores

Tipos de Receptores

Receptores Acoplados a Protenas G

Receptores con Actividad Tirosina Quinasa

Receptores Intracelulares (Hormonas Esteroidales)

ElConceptodeReceptor

En 1877 Balthasar Luchsinger explic ciertos efectos producidos por alcaloides d bid a que se unen qumicamente debido i t a protenas t vivientes i i t (living li i proteins t i ) (protoplasma). Thomas R. Elliot p postul la hiptesis p de q que la adrenalina no actuaba ni sobre el terminal nervioso, ni sobre el tejido muscular, sino que en la unin mioneural (myoneural junction), el punto en que se unen el nervio y el msculo. John N. N Langley indic que ni las toxinas ni el impulso nervioso actuaban directamente en la sustancia contractil, ms bien sobre una sustancia accesoria, una sustancia receptiva (receptive substance) en el msculo. Sin embargo su existencia solo se sostuvo como hiptesis hasta inicios de los aos 60. El aislamiento de estas protenas se inici en los aos 70. 70

Receptores
Transformadores de la Seal Hormonal

De una u otra D t f forma, la l unin i de d la l h hormona al l receptor t provoca un cambio en la estructura de la parte citoplasmtica de este.

Receptores
Interaccin Hormona - Receptor p
Los receptores presentan: Especificidad: Capacidad del receptor de unirse a un solo tipo de hormona. Un receptor se puede unir a su respectiva hormona, o a un anlogo estructural. Existen hormonas que pueden interaccionar con ms de un tipo de receptor.

Receptores
Interaccin Hormona - Receptor p

Los receptores presentan: Afinidad: fuerza con la que se une una hormona a su receptor. Los receptores presentan una alta afindad por su hormona respectiva.

H + R

[H R]
[H] * [R] [HR]
KD= 10-6 - 10-12

KD =

Receptores
Interaccin Receptor Efector Celular

Los receptores activan sistemas efectores determinados. No activan a todos los efectores intracelulares. Pero, la activacin de un receptor puede activar a ms de un sistema efector. Por lo tanto los receptores, tienen especificidad hacia la hormona que los activa y hacia los efectores intracelulares que son activados por l.

Adaptacin p de las clulas blanco

Las clulas expuestas a un estmulo hormonal se adaptan disminuyendo su respuesta cuando estn expuestas al estmulo por perodos largos de tiempo: adaptacin o desensibilizacin. El mecanismo para lograr esta adaptacin se llama retroalimentacin negativa.

Elementos de los Sistemas de Transduccin de Seal Protenas Quinasas Q

Las fosforilaciones en las protenas van acompaadas de una cambio estructural y un cambio en la actividad de la protena fosforilada. Las protenas L t sustrato t t de d las l quinasas i pueden d d desarrollar ll su actividad ti id d al l estar fosforiladas o el estar desfosforiladas.

Clases de Quinasas

Efecto de las Quinasas en sus Protenas Sustratos

Efecto de las Quinasas en sus Protenas Sustratos

Sealizacin a Travs de Receptores p Acoplados p a Protenas G (GPCR) ( )

Caractersticas: Ligandos: glucagn, serotonina, vasopresina, ACTH, adenosina, odorantes, luz. Receptores: R t poseen siete i t hlices hli d de t transmembrana b con dominios citoslicos asociados a una protena G trimrica. produccin de segundos mensajeros: cAMP, IP3, DAG.

Transduccin:

Los efectos de estas hormonas aparecen dentro de segundos de iniciada la estimulacin. Cerca del 70% de los frmacos que se ofrecen en el mercado estn dirigidos hacia GPCR.

Sealizacin a Travs de Receptores p Acoplados p a Protenas G

Esquema de la topologa estructural de un receptor acoplado a protena G

Activacin de las protenas G

Ciclo de activacin de las protenas G

R Toxina Pertussis
GDP

R
GDP GDP GTP

GDP

GTP

Efectores Efectores

GDP

Pi T i Toxina del clera

RGS

Sistemas Efectores Acoplados a Protenas G Adenilil Ciclasa

Adenilil ciclasa PPi

AMP cclico: Segundo mensajero

Fosfodiesterasa (PDE) de AMPc

Fosfodiestera

AMPc

AMP

Topologa de la Adenilil Ciclasa

_ +
Gi

Gs

Resumen Va de Activacin de Protena Gs

Adenilil ciclasa y PKA en un contexto fisiolgico

adrenalina

Glucosa disponible para distintos fines

El Receptor Adrenrgico

Tipo de Receptor 1: A B, A, B D 2: A, B, C 1 2 3

Accin del agonista Contraccin de msc lo liso msculo Contraccin de msculo liso Contraccin de msculo cardiaco Relajacin de msculo liso Aumento de lipolisis

Expresin

Mecanismo Gq: phospholipase C (PLC) activated, IP3 and Ca2+. Gi: adenylate cyclase inactivated, cAMP.

Vasos sanguneos, iris, esfnteres, etc

Corazn Vasos sanguneos, intestinos, tero, vejiga. Tejido Adiposo

Gs: adenylate cyclase activated, cAMP Gs: adenylate cyclase activated, cAMP Gs: adenylate cyclase activated, cAMP

El Receptor Adrenrgico Efectos Fisiolgicos

Adrenalina

1-AR Gq PLC
IP3

Ca2+

Receptores Colinrgicos

Tipo de receptor M Muscarnico i Metabotrpico M t b t i (acoplado a protena G).

Estructura M Monmericos i

Tipo M1 M2 M3 M4 M5 1 10 1 4

Transduccin Protena P t Gq/11 G /11 Protena Gi/o Protena Gq/11 P t Gi/o Protena Gi/ Protena Gq/11 Dependiendo de la composicin i i pueden d conducir Na+ o Ca2+.

Nicotnico

Ionotrpico ( (canal l i inico i activado por ligando)

Pentamricos

Fosfolipasa C en un contexto fisiolgico

Receptores acoplados a protena G de importancia neuronal

Sealizacin a travs de Receptores con Actividad Tirosina Quinasa (RTK)

Caractersticas: Ligandos: factores de crecimiento, interferones, hormona del crecimiento, complejo mayor de histocompatibilidad, etc. Receptores: poseen actividad enzimtica intrnseca o se asocian directamente a protenas con actividad enzimtica enzimtica, en su mayora poseen slo una hlice de transmembrana. 1) activacin de protenas quinasas 2) activacin de protenas G pequeas. 3) activacin de MAPK

Transduccin:

Los efectos de estas hormonas aparecen dentro de minutos de iniciada la estimulacin

Los distintos tipos de Receptores con Actividad Tirosina Quinasa

Sealizacin a Travs de Receptores con Actividad Tirosina Quinasa

Sealizacin a Travs de Receptores con Actividad Tirosina Quinasa

Activacin de Cascadas de Sealizacin por Activacin de RTK Via Ras

Ras: rats sarcoma, fue descubierta como oncogen en sarcomas de ratas.

Activacin de Cascadas de Sealizacin por Activacin de RTK Via de las MAPK

MAPK: mitogen-activated protein kinase

Activacin de Cascadas de Sealizacin por Activacin de RTK Via de las MAPK

TCF (ternary complex factor): factor del complejo ternario. SRF (Serum response factor). Factor de respuesta al suero. SRE (serum response element): elemento de respuesta al suero.

Las MAPK en un contexto Fisiolgico

MAPKKK MEK: mitogenactivated ERK kinase. ERK: extracellular sinal regulated kinase.

MAPKK

MAPKK

Sealizacin a Travs de Receptores p Intracelulares

Caractersticas: Ligandos: hormonas lipoflicas: esteroidales, derivadas de cidos grasos. Receptores: ubicados en el citosol o dentro del ncleo. Transduccin: activacin de su capacidad de actuar como reguladores de la transcripcin. Los efectos de estas hormonas aparecen dentro de horas de iniciada la estimulacin.

Sealizacin a Travs de Receptores p Intracelulares

LBD (Ligand Binding Domain): dominio de unin a ligando. DBD (DNA Binding Domain): dominio de unin al DNA. AD (Activating Domain): dominio de activacin de la transcripcin.

ERE: estrogen receptor regulatory element GRE glucocorticoid GRE: l ti id receptor t element l t TRE: Thyroid hormone receptor element VD3RE: vitamin D3 regulatory element RARE retinoic acid receptor regulatory element

Estructura Comn de Receptores Esteroidales

Estructura consenso

Receptor de glucocorticoides Receptor e andrgenos Receptor de progesterona p g Receptor de estrgenos

Canales Inicos Activados por Ligando

Caractersticas: Ligandos: Acetilcolina, acido aminobutrico, glicina, glutamato, etc Receptores: ubicados en la membrana plasmtica (y en la membrana del RE). Transduccin: Cambios en la concentracin de iones en el voltaje de a membrana. cambios

Los efectos de estas hormonas aparecen dentro de microsegundos de iniciada la estimulacin.

Los Neurotransmisores:

Esquema de la topologa estructural de los canales inicos

La Sinapsis como una Forma Especializada de Comunicacin Intercelular

La Sinapsis como una Forma Especializada de Comunicacin Intercelular

La llegada del potencial de accin al terminal presinptico promueve la liberacin del contenido de las vesculas que contiene los neurotransmisores.

Modelo de la apertura de un canal inico

Bsicamente un canal inico est compuesto por un poro y una compuerta

Conductividad de canales inicos a distintos ines

Canales Inicos Activados por Ligando

Modelo estructural

Tipo Funcional

Ligando Acetilcolina (nicotnico)

Canal Inico Na+ / K+ Na+ / K+ y Ca2+ Na+ / K+ ClCl-

Receptores excitatorios

Glutamato (NMDA, AMPA, Kainato) Serotonina (tipo 5-HT3) -aminobutiric acid, GABA (tipo A y C) Glicina

Receptores Inhibitorios

(AMPA: -amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4- propionic acid)

Canales Inicos Activados por Ligando

Combinacin de 5 subunidades forman el receptor p activo

El Receptor Nicotnico

Control voluntario del movimiento movimiento, memoria y atencin atencin, sueo y alerta, dolor y ansiedad

Sinpsis glutamatrgica

Agonista
Acetilcolina Glutamato Serotonina -aminobutiric acid, , GABA

Receptor ionotrpico
Nicotnico NMDA, AMPA, kainato 5-HT3 p A, tipo p C Tipo

Receptor metabotrpico
Muscarnico: M1, M2, M3, M4, M5 mGluR1 mGluR8 5-HT (1A, 1B, 1D, 1e, 1F, 2A, 2B,
2C, 4, 5a, 6 y 7)

Tipo p B

Algunos canales inicos pueden ser modulados por protena G

Accin de la toxina del clera

Acciones de la toxina del clera: modifica covalentemente a la subunidad de la protena Gs. Aumentan los niveles de cAMP y la actividad de PKA. Esta quinasa fosforila canales de Cl- y activa a trasnportadores Na+ / H+. Como resultado se pierde mucho NaCl y con ello grandes cantidades de agua. agua

H2O
s
GTP Cholera toxin NAD+ GTP s

Cl-

Na+ H+ Transp.

ADP

AC
cAMP ATP PKA

CFTR

Estructura y Funcin de Prot G.

CREB Como Factor de Transcripcin Comn para Distintas Vas de Transduccin

Dominios SH2 y SH3

Dominios SH2 y SH3

Mecanismo de Accin Transcripcional de Hormonas Esteroidales