Rpublique Algrienne Dmocratique et Populaire Ministre de lEnseignement Suprieur et de la Recherche Scientifique Universit de Bchar Facult des Sciences et Technologie

Dpartement des Sciences Rapport de stage de licence

Filire : chimie Spcialit : chimie des produits naturels

Suivi et laboration dun bilan des analyses biochimiques (biochimie du sang) chez des sujets gs.
Lorganisme daccueil : Hpital de Bechar. La priode de stage : du 23/12/2012 au 06/01/2013. Rdig et prsent par : MUSTAPHA. Lencadreur : Mr BOURMITA YOUNES.

Lanne duniversit : 2012/2013.

Rsum : La possibilit qui nous a t offerte de faire un stage dans un laboratoire danalyse a t trs motivant pour nous. Ce stage allait nous permettre dentrer en contact avec une ralit. Le domaine Les analyses biochimiques sanguines, ces analyses est ltude des taux de matriaux divers (glycmie, cholestrol et triglycride....) dans le srum par la mthode analytique. Leur tude peut aider au diagnostic et au suivi de nombreuses maladies. Lobjectif de ce stage est de dcouvrir avec le monde du travail, de connatre le travail dune quipe. Et le plus important plaisir de faire plusieurs connaissances. Enfin connaitre les diffrentes mdicales. techniques et quipements des laboratoires d'analyses

Avant-propos
Tout d'abord je remercie Allah pour tous les bienfaits qu'Il m'a accords et pour le courage qu'il m'a attribu afin de complter ce stage.

Je remercie aussi mes Parents pour leur soutient morale et matriel pendant toute ma vie et surtout durant mes tudes.

Je tiens tout particulirement remercier mes maitres de stage Pour leur accueil chaleureux ainsi que notre chef de dpartement qui ma affecte en tant que stagiaire au sein du laboratoire danalyses biochimiques lhpital de Bchar.

Mes sincres remerciements s'adressent Mr Bourmita younes et Berghioua Abdelazziz pour leur aimable aide et pour leur gentillesse avec nous Au cours de la priode d'tude

Je remercie de mme, mes professeurs de l'universit pour leurs confiances et conseils concernant l'laboration de ce rapport.

Sommaire Partie. I: Reprsentation du lieu:....1 I- Introduction:......2 II- Prsentation du lieu de stage:.2 III- Aspect thorique :5 Partie. II: Les expriences ralises au cours du stage :..8 I- les prlvements sanguins :..9 I.1- Dfinition:9 I.2- Matriel:9 I.3- Technique de prlvement :.9 II- Dosage de la glycmie :10 II.1- Principe :10 II.2- Dosage du Glucose (glycmie) sanguin par la mthode analytique :.10 II.3- Mode opratoire :.11 II.4- Les tapes du dosage de glucose :...12 II.5- Calcul de la concentration du glucose sanguin:..15 III- Dosage du cholestrol sanguin:.16 III.1-Principe :.16 III.2- Dosage du cholestrol sanguin par la mthode analytique :.17 III.3- Mode opratoire :...17 III.4- Les tapes du dosage du cholestrol :...18 III.5- Calcul de la concentration du cholestrol sanguin:.21 IV- Dosage du triglycride sanguin:....22 IV.1- Principe :22 IV.2- Dosage du triglycride sanguin par la mthode analytique :.22 IV.3- Mode opratoire :....23 IV.4- Les tapes du dosage de triglycride:24 IV.5- Calcul de la concentration du triglycride sanguin:.25 V- Interprtation globale :.. 27 VI-Bilan de stage : 30 VII-Conclusion :.30 Bibliographie :31

La liste des tableaux : Tableau.1 : mode opratoire du dosage de la glycmie. Tableau.2 : rsultats de la concentration du glucose et labsorbance dchantillon. Tableau.3 : les valeurs varient en fonction de lge et du sexe. Tableau.4 : mode opratoire du dosage du cholestrol. Tableau.5 : rsultats de la concentration du cholestrol et labsorbance dchantillon. Tableau.6 : mode opratoire du dosage du triglycride. Tableau.7 : rsultats de la concentration du triglycride et labsorbance dchantillon.

La liste des figures : Figure.1 : les composants du sang. Figure.2 : lorganigramme de lentreprise. Figure.3 : sang aprs centrifugation. Figure.4 : les ractifs utiliss pour le dosage de la glycmie. Figure.5 : la technique du dosage de Glucose (1 Figure.6 : la technique du dosage de Glucose (2
ere

tape). tape).

eme

Figure.7 : la diffrence de couleur les deux mlange de cuve dtalon et dchantillon. Figure.8 : les chantillons des malades. Figure.9 : les ractifs utiliss pour le dosage du cholestrol. Figure.10: la technique du dosage de cholestrol (1
ere

tape). tape).

Figure.11: la technique du dosage de cholestrol (2

eme

Figure.12: la diffrence de couleur les deux mlange de cuve dtalon et dchantillon. Figure.13: les chantillons des malades. Figure.14: les ractifs utiliss pour dosage du triglycride. Figure.15: la technique du dosage de triglycride. Figure.16: les chantillons des malades.

Partie. I: Reprsentation du lieu

I- Introduction: Dans le cadre de mes tudes en chimie jai choisi deffectuer mon stage de fin dtude lhpital militaire de Bchar pour mieux connatre le secteur des analyses mdicales et les techniques de prlvements. Dautre part, le choix de cet organisme hospitalier fut motiv par la diversit des cas qui sont frquent pendant la dure de mon stage. Comme je nai pas encore choisie mon futur travail. Le but gnral de ce stage tait de contribuer dvelopper mes capacits d'autonomie, d'initiation et de responsabilit. II- Prsentation du lieu de stage: II.1- Lhpital : Lhpital militaire de Bchar, a t cr en 1935 est un organisme public et le lieu essentiel de dtection des problmes de sant. Les services hospitaliers sont un regroupement d'units mdicales. Ils sont les units fonctionnelles principales de l'hpital militaire de Bchar. Lentreprise hospitalire militaire de Bchar est organise en services qui sont sous la responsabilit hirarchique de la Direction Gnrale. Il sagit de : Secrtariat, Service du personnel, Comptabilit, Caisse, Service gnral, Laboratoire, Radiologie, Scurit, Buanderie, Service de nutrition et un laboratoire d'analyses de sang et une unit de sant pour la rhabilitation et organes mdicaux. II.2- laboratoire: Ce laboratoire est constitu de 6 salles. La premire est la salle de rception. La seconde salle est consacre aux prlvements sanguins, La troisime et le quatrime est aux examens microscopiques et spectrophotomtre pour les dosages biochimiques et lenregistrement des rsultats. Cinquime salle est occupe par une salle du stockage les consommables, un rfrigrateur pour les ractifs.et la sixime salle est un vestiaire. Dans ce laboratoire emploie 14 personnes dont 10 femmes et 4 hommes. Ces employs pratiquent diffrents mtiers : 1 biologiste, 6 techniciens, 2 bactriologistes, deux infirmires, 1 secrtaire, 1 gardien et 1 femme de mnage. Ils travaillent 20 heures par semaine.

Les analyses mdicales effectues dans ce laboratoire: La biochimie: La biochimie est l'tude des ractions chimiques du monde vivant. Les analyses biochimiques consistent mesurer les quantits des constituants des liquides biologiques (sang, urine, etc..). La plupart des maladies ont des rpercussions sur leur composition et leur tude peut aider au diagnostic et au suivi de nombreuses maladies. La Microbiologie: Science qui tudie les micro-organismes tel que : Les virus. Les bactries.

Directeur dunit

Secrtariat

Salle n:04 Spectro -photomtre pour les dosages biochimiques Salle n:03 L'examen microscopique Salle n:02 Prlvements sanguins Salle n:01 Salle de rception

Fig.2 : Lorganigramme de lentreprise

III- Aspect thorique : Le sang est constitu de 55% de liquide (le plasma) et de 45% de cellules, rparties en trois groupes : les globules rouges (rythrocytes), les globules blancs (leucocytes) et les plaquettes (thrombocytes). Les globules rouges jouent un rle important dans le transport de loxygne. Les globules blancs dfendent lorganisme contre les corps trangers et les microbes (virus, bactries). Les plaquettes remplissent une fonction essentielle dans la coagulation du sang. Quant au plasma, il vacue et transporte une foule dlments : substances nutritives, dchets, hormonesLe sang remplit donc des tches importantes, do lintrt de lanalyser [1].

Fig.1: les composants du sang. Pour pouvoir analyser votre sang, il faut dabord le recueillir. Quoi de plus simple et plus rapide quune prise de sang ! Vous vous rendez, jeun ou non (selon les indications du mdecin qui vous a prescrit la prise de sang), dans un laboratoire mdical. Un(e) infirmier(re) vous prlvera quelques centilitres de sang, selon une technique bien codifie: aprs avoir serr votre bras laide dun caoutchouc (pour faire gonfler les veines), une aiguille est introduit dans une veine de lavant-bras ou du pli du coude, en suivant des rgles de dsinfection rigoureuses. On fait ensuite couler le sang lintrieur de petits tubes dont le nombre varie en fonction des examens requis. Les prouvettes sont immdiatement tiquetes votre nom. Aprs la prise de sang, vous serez invit appuyer sur la ponction pendant quelques minutes avec une compresse. Le sang sarrtera rapidement de couler [1].

Si vos veines sont abmes ou trs souvent sollicites, linfirmier utilisera plutt un cathter quune seringue pour recueillir votre sang. Pour les nourrissons, du matriel adapt (mini-cathter) permet de raliser plus facilement la prise de sang. Mais renseignezvous auprs du laboratoire proche de chez vous pour voir sil est quip et habitu prlever du sang chez les tout-petits [1]. La plupart des analyses sont ralises dans tous les laboratoires de biologie mdicale. Par contre, les plus spcifiques dentre elles sont effectues par des laboratoires spcialiss, gnralement en hpital. Ces examens sont aujourdhui soumis un contrle de qualit trs strict et effectus, pour un grand nombre dentre eux, laide de machines perfectionnes qui ralisent les analyses de faon quasi automatique. Vous pouvez ainsi obtenir les rsultats rapidement et avec trs peu de risques derreurs [1]. Contrairement ce que lon pense souvent, il nexiste pas danalyse complte du sang. Cela na dailleurs pas de sens, le nombre et le type de tests variant en fonction de ce que le mdecin recherche. Trois cas de figure sont possibles : - Soit, aprs un examen clinique soigneux, le mdecin a besoin dinformations complmentaires pour poser un diagnostic. Il peut alors recommander une prise de sang de dbroussaillage . Cette analyse compte gnralement quelques tests de base qui peuvent fournir des renseignements utiles sur le fonctionnement des grands systmes du corps (en gnral, sur le nombre de globules rouges et blancs, sur la quantit de plaquettes, sur la prsence dune inflammation, dune infection). - Soit la prise de sang doit permettre dapprofondir un diagnostic dj pos, en essayant de prciser les perturbations des systmes internes concerns. - Soit la prise de sang est utilise dans le suivi et le contrle de certaines maladies chroniques comme le diabte, linsuffisance rnale ou lhpatite... Elle portera alors uniquement sur des tests spcifiques ce type de problmes [1]. Le protocole de lanalyse transmise par le laboratoire comportera, en regard des rsultats, des valeurs normales correspondant la technique utilise. Il convient de sy rapporter pour comprendre les conclusions de lanalyse. Nanmoins, selon la mthode utilise, la population de rfrence ou lide que lon se fait de la normalit , les valeurs peuvent diffrer, notamment dun laboratoire lautre. Les rsultats doivent donc tre considrs avec prudence. Ils doivent aussi tre relativiss : avant que lon en tire des conclusions thrapeutiques, les informations donnes par la prise de sang doivent tre
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mises en relation avec lexamen clinique gnral et ltat de sant du patient. Cest bien sr votre mdecin que revient cette tche, comme celle, dailleurs, dinterprter lanalyse de sang. Si, nanmoins, vous recevez personnellement les rsultats, avant de conclure un problme ou de vous affoler, demandez des explications votre mdecin [1].

Partie. II: Les expriences ralises au cours du stage.

I- les prlvements sanguins : I.1- Dfinition: Le prlvement sanguin est un acte consistant prlever une petite quantit de sang laide dun dispositif adquat afin de lanalyser. I.2- Matriel: Plateau dcontamin contenant : -Des gants. -Un corps de pompe. -Des aiguilles spcifiques (deux) un garrot dcontamin. -Compresses non strile: 1 sche, avec de lantiseptique. -Tubes rcepteurs. I.3- Technique de prlvement : Lavage des mains. Mettre les gants. Raliser la vasodilatation veineuse : -Fixer le garrot environ 5-15 cm au-dessus du point de ponction, en gnral au-dessus du pli du coude. Aseptiser le point de ponction laide de la compresse imbibe dantiseptique. Partir du point de ponction et remonter sur une surface large. Positionnement de laiguille pour faire le prlvement : -Adapter laiguille sur le corps de pompe. -Enlever le capuchon protecteur de laiguille. Piquer. Tenir le corps de pompe avec une main et adapter chaque tube avec lautre main, les uns aprs les autres. Ensuite, mobiliser dlicatement chacun deux afin dhomogniser le sang avec les additifs. Retirer le garrot. Dpiquer. Avec la compresse imbibe dantiseptique, protger le point de ponction lorsque que vous retirez laiguille. Prendre la compresse sche et comprimer le point de ponction. Mettre un sparadrap ou un pansement. Sassurer du confort de la personne. Dcontaminer le matriel et le ranger. Envoyer les tubes au laboratoire aprs vrification de lidentification [2].

II- Dosage de la glycmie : La glycmie, est le taux de sucre (glucose) dans le sang. Sa mesure est exprime en grammes par litre (g/l) ou en milli moles (mmol/l). A jeun, sa valeur normale est comprise entre 0.70 et 1.05 g/l. Elle est dose au laboratoire partir de sang veineux prlev chez un sujet jeun depuis au moins 8 heures. Elle peut tre mesure galement par un lecteur de glycmie qui analyse une goutte de sang, prleve en gnral au bout du doigt dans une rgion riche en vaisseaux capillaires, laide dun stylo auto piqueur. Il sagit alors dune glycmie capillaire. Remarque: Lhypoglycmie correspond une glycmie infrieure 0.70g/l, et une glycmie leve (diabtique) une valeur suprieure 1.05g/l. La glycmie augmente naturellement aprs les repas du fait de lapport en glucose de lalimentation. La valeur normale de la glycmie postprandiale, mesure 1 h 2 h aprs le dbut du repas. Lcart entre la glycmie avant et aprs un repas est dnomm incrment glycmique postprandiale[3] .

II.1- Principe : Dtermination enzymatique du glucose selon les ractions suivantes : Glucose + O2 + H2O par glucose oxydase nous donnons l'Acide glucuronique + H2O2 2H2O2 +Phnol+ 4-Amino-antipyrine par la peroxydase nous donnons Quinoneimine (rose) + 4H2O. II.2- Dosage du Glucose (glycmie) sanguin par la mthode analytique : II.2.1- But du test: Ce test est destin au dosage quantitatif des Glucoses dans le srum.

II.2.2- Matrielles utiliss : Centrifugeuse, Micropipette, Les cuves, Spectrophotomtres, les pointes de pipette, ltuve.

II.2.3- Les Ractifs utilis : R1 ractif de travail (glucose liquicolor), R2 (standard) Glucose.

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II.3- Mode opratoire : Aprs le prlvement sanguin, mettre les tubes numrots dans centrifugeuse pour sparer le srum les globules rouges et les globules blancs. (Voir la figure.2.).

Fig.3: le sang aprs centrifugation.

Dans une srie de cuve, Mettre dans chaque cuve 1ml de ractif de travail (glucose liquicolor). On ajoute 10 l de la solution d'talon (glucose) dans la cuve dtalon et 10 l du srum dans les cuves des chantillons dj cod.

Fig.4: les ractifs utiliss pour le dosage de la glycmie.

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Tableau.1: mode opratoire du dosage de la glycmie: Le tableau suivant montre le travail: / Standard Echantillon Ractif de travail Blanc ----1ml Standard 10l --1ml Echantillon --10l 1ml

II.4- Les tapes du dosage de glucose : II.4.1- Premire tape:

Fig.5: La technique du dosage de Glucose (1

ere

tape).

12

II.4.2- Deuxime tape:

Aprs quelques secondes

Fig.6: La technique du dosage de Glucose (2

eme

tape).

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Remarque: Nous remarquons que les couleurs deux mlange de cuve dtalon et le cuve dchantillon se transforme en couleur rose, Mais en faisant varier. (Voir la figure.7.).

Fig.7: la diffrence de couleur des deux mlanges de cuve dtalon et dchantillon. Dautres chantillons:

Fig.8: les chantillons avant la lecture.

On mlange bien et on laisse incuber 10 minutes dans l'tuve 37C. Puis on lit la longueur d'onde de chaque cuve avec le spectrophotomtre en respectant : -Le spectrophotomtre : La longueur donde : 505nm. Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif. Placer les chantillons dans le spectrophotomtre. Cuve : 1 cm dpaisseur.

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II.5- Calcul de la concentration du glucose sanguin:

Abs Echantillon Glucose = Abs Standard x n.

n = 1 en g/l

- le (n): est la concentration de l'talon. Les valeurs normales sont entre 0.7 (g/l) et 1.05 (g/l). Tableau.2: rsultats de la concentration du glucose et labsorbance dchantillon: La lecture des rsultats: Abs standard (talon)= 0.400, la concentration du glucose (talon)= 1 g/l. Abs : l'absorbance C : la concentration
N de cuve

talon 0.400 1

01 0.476 1.19

02 0.412 1.03

03 0.336 0.84

04 0.284 0.71

05 0.444 1.11

06 0.252 0.63

07 0.292 0.73

Abs chantillon C du glucose (g/l)

Nous remarquons que le taux de glucose dans le sang varie dune personne autre personne et nous pouvons distinguer trois cas selon le taux du glucose dans le sang : Une teneur faible (Hypoglycmie) : faible taux de glucose dans le cas o le taux de glycmie est infrieur aux taux normaux de moins de (0.70g / l). Taux normaux : se situe entre 0.70 g / l 1.05 g/l indique que la personne est dans un tat normal. Une teneur leve (Hyperglycmie) : glycmie (glucose) suprieurs aux taux normaux de plus levs (1.05 g/l), donc le sujet est diabtique.

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III- Dosage du cholestrol sanguin: Paramtre de base du bilan lipidique, il est en faible part d'origine alimentaire, et pour la plus grande part fabriqu par le foie. Son dosage permet de dpister une hypercholestrolmie isole ou associe une hypertriglycridmie.

III.1- Principe : Dtermination enzymatique selon les ractions suivantes : Esters de cholestrol+ H2O par Cholestrol estrase nous donnons le Cholestrol+Acides gras. Cholestrol + O2 par Cholestrol oxydase nous donnons Cholestne- 4-one 3 + H2O2. H2O2 + Phnol + Amino- 4 antipyrine par Peroxydase nous donnons Quinoneimine + 4H2O. Tableau.3 : Les valeurs varient en fonction de lge et du sexe Les valeurs normales du cholestrol sanguin:
[4]

Age / 0-14 ans 15-19 ans 20-44 ans 45-59 ans >60 ans mmol/l

Homme g/l 1.60-2.25 1.50-2.15 1.30-2.30 1.35-2.50 1.40-2.65 mmol/l

Femme g/l 1.60-2.20 1.50-2.10 1.55-2.40 1.55-2.55 1.40-2.65

4.13-5.81 3.87-5.55 3.35-5.95 3.48-6.45 3.61-6.86

4.13-5.68 3.87-5.42 4.00-6.20 4.00-6.58 3.61-6.86

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III.2- Dosage du cholestrol sanguin par la mthode analytique : III.2.1- But du test: Ce test est destin au dosage quantitatif des cholestrols dans le srum.

III.2.2- Matrielles utiliss : Centrifugeuse, Micropipette, Les cuves, Spectrophotomtres, les pointes de pipette, ltuve.

III.2.3- Les ractifs utiliss : R1 ractif de travail (cholestrol liquicolor), R2 (standard) cholestrol.

III.3- Mode opratoire : Dans une srie de cuve, Mettre dans chaque cuve 1ml de ractif de travail (cholestrol liquicolor). On ajoute 10 l de la solution d'talon (cholestrol) dans la cuve dtalon et 10 l du srum (les chantillons prcdents) dans les cuves des chantillons dj cod.

Fig.9: les ractifs utiliss pour le dosage du cholestrol.

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Tableau.4 : mode opratoire du dosage du cholestrol : Le tableau suivant montre le travail :

/ Standard Echantillon Ractif de travail

Blanc ----1ml

Standard 10l --1ml

Echantillon --10l 1ml

III.4- Les tapes du dosage du cholestrol : III.4.1- Premire tape:

Fig.10: La technique du dosage de cholestrol (1

ere

tape).

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III.4.2- Deuxime tape:

Aprs quelques secondes

Fig.11: La technique du dosage de cholestrol (2

eme

tape).

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Remarque: Nous remarquons que les couleurs des deux mlanges de cuve dtalon et le cuve dchantillon se transforme en couleur rose, Mais en faisant varier. (Voir la figure.12.).

Fig.12: la diffrence de couleur les deux mlange de cuve dtalon et dchantillon. Dautres chantillons:

Fig.13: les chantillons avant la lecture.

On mlange bien et on laisse incuber 10 minutes dans l'tuve 37C. Puis on lit la longueur d'onde de chaque tube avec le spectrophotomtre en respectant : Le spectrophotomtre : La longueur donde : 505nm. Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif. Placer les chantillons dans le spectrophotomtre. Cuve : 1 cm dpaisseur.

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III.5- Calcul de la concentration du cholestrol sanguin: Abs Echantillon Cholestrol = Abs Standard x n.

n = 2 en g/l.

- le (n): est la concentration de l'talon. Les valeurs normales sont entre 1.4 (g/l) et 2.65 (g/l). Tableau.5 : rsultats de la concentration du cholestrol et labsorbance dchantillon: La lecture de rsultats: Abs standard (talon)= 0,28, la concentration du cholestrol (talon)= 2 g/l.

N de cuve

talon 0.28 2

01 0.162 1.16

02 0.155 1.11

03 0.18 1.29

04 0.315 2.25

05 0.378 2.70

06 0.228 1.63

07 0.145 1.04

Abs chantillon C du cholestrol (g/l)

Nous pouvons distinguer trois cas selon le taux du cholestrol dans le sang : Une teneur faible : faible taux de cholestrol dans le cas o ils sont le taux de cholestrol infrieurs aux taux normaux de moins de 1.4 (g/l). Taux normaux : se situe entre 1.4 g / l 2.65 g/l indique que une personne dans un tat normal. Une teneur leve : cholestrol suprieurs aux taux normaux de plus levs 2.65 (g/l).

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IV- Dosage du triglycride sanguin: Les triglycrides font partie comme le cholestrol des composs lipidiques de l'organisme. Ils constituent la principale rserve nergtique de l'organisme et sont stocks dans les tissus adipeux. L'valuation du taux de triglycrides est important pour valuer un potentiel risque athrogne avec atteinte cardiovasculaire mais aussi en raison du risque thrombogne. Les valeurs normales sont entre 0.4 (g/l) et 2 (g/l) [5].

IV.1- Principe : Les triglycrides sont dtermins selon les ractions suivantes: Triglycrides par Lipoprotine lipase nous donnons Glycrol + Acides gras. Gylcrol + ATP par Glycrokinase, Mg ++ nous donnons Glycrol -3-P + ADP. Glycrol-3-Phosphate + O2 par Glycrol-3- Phosphate oxydase nous donnons H2O2+ Dihydroxyactone-P. H2O2 + Amino-4-Antipyrine + chloro-4-phnol par Peroxydase nous donnons Quinone rose +H2O.

IV.2- Dosage du triglycride sanguin par la mthode analytique : IV.2.1-But du test: Ce test est destin au dosage quantitatif des triglycrides dans le srum.

IV.2.2- Matrielles utiliss : Centrifugeuse, Micropipette, Les cuves, Spectrophotomtres, les pointes de pipette, ltuve.

IV.2.3- Les ractifs utiliss : R1 ractif de travail (triglycride liquicolor), R2 (Standard) Standard glycrol.

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IV.3- Mode opratoire : Dans une srie de cuve, Mettre dans chaque cuve 1ml de ractif de travail (triglycride liquicolor). On ajoute 10 l de la solution d'talon (triglycride) dans la cuve dtalon. Ajoute 10 l du srum (les chantillons prcdents) dans les cuves des chantillons dj cod.

Fig.14: les ractifs utiliss pour dosage du triglycride.

Tableau.6 : mode opratoire du dosage du triglycride: Le tableau suivant montre le travail :

/ Standard Echantillon Ractif de travail

Blanc ----1ml

Standard 10l --1ml

Echantillon --10l 1ml

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IV.4- Les tapes du dosage de triglycride:

Aprs quelques secondes

Fig.15: La technique du dosage de triglycride.

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Remarque: Nous remarquons que les couleurs des deux mlanges de cuve dtalon et le cuve dchantillon se transforme en couleur rose, Mais en faisant varier. (Voir la figure.16.).

Fig.16: la diffrence de couleur les deux mlange de cuve dtalon et dchantillon. Dautres chantillons:

Fig.17: les chantillons avant la lecture. On mlange bien et on laisse incuber 10 minutes dans l'tuve 37C. Puis on lit la longueur d'onde de chaque tube avec le spectrophotomtre en respectant : La longueur donde : 505nm. Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif. Placer les chantillons dans le spectrophotomtre. Cuve : 1 cm dpaisseur. IV.5- Calcul de la concentration du triglycride sanguin: Abs Echantillon Triglycride = Abs Standard n = 2 en g/l. x n.

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- le (n): est la concentration de l'talon. Les valeurs normales sont entre 0.4 (g/l) et 2(g/l).

Tableau.7: rsultats de la concentration du triglycride et labsorbance dchantillon: La lecture de rsultats: Abs standard (talon)= 0.164, la concentration du triglycride (talon)= 2 g/l.

N de cuve

talon 0.164 2

01 0.118 1.45

02 0.026 0.317

03 0.139 1.70

04 0.207 2.53

Abs chantillon C du triglycride (g/l)

Nous remarquons qu'il existe des diffrences dans les taux de triglycride chez chaque personne et distinguer trois cas : Une teneur faible : faible taux de triglycride dans le cas o ils sont le taux de triglycride infrieurs aux taux normaux de moins de 0.4 (g/l). Taux normaux : se situe entre 0.4 (g/l) 2(g/l) indique que une personne dans un tat normal. Une teneur leve : triglycride suprieurs aux taux normaux de plus levs 2(g/l).

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V- Interprtation globale : Qu'elles soient basses ou leves, Les valeurs de rfrence peuvent varier d'une personne l'autre et d'un laboratoire lautre. Et de nombreux facteurs pourraient tre responsables de ces diffrences, notamment : Lge, le rgime alimentaire, le sexe, lhrdit, le niveau d'activit physique, le poids corporel. Grce des tests et les rsultats obtenus Taux de glycmie: En fonction des rsultats, nous pouvons distinguer trois cas : Taux normaux : se situe entre 0.70 g / l 1.05 g/l indique que la personne est dans un tat normal. Une teneur leve (Hyperglycmie) : glycmie (glucose) suprieurs aux taux normaux de plus levs (1.05 g/l), donc le sujet est diabtique. Lhyperglycmie peut avoir de nombreuses causes, comme une surconsommation de sucre, une diminution de lactivit physique, un mauvais dosage des mdicaments, le stress, une infection grave comme la pneumonie ou encore la prise de mdicaments dconseills. Elle se traduit par les symptmes communment associs au diabte : limination excessive durine, grande soif, faim accrue, fatigue. Une teneur faible (Hypoglycmie) : glycmie (glucose) infrieurs aux taux normaux de moins (0.70 g/l). Lhypoglycmie a bien sr des causes inverses, comme une consommation insuffisante de sucre, une augmentation de lactivit physique, un repas saut ou un surdosage de mdicament (insuline par exemple). Elle se traduit par des tremblements, des sueurs, des tourdissements, des palpitations, de la fatigue, des billements, une pleur et, si elle nest pas traite, une perte de conscience ventuellement accompagne de convulsions. -Do provient cette glycmie dans le sang ? Les aliments pris par un individu contiennent des glucides, des protides et des lipides. Ce sont les premiers qui seront assimils en glucose pour tre transports par le sang vers les organes concerns et ayant besoin. Ces glucides comprennent les sucres lents et les sucres rapides. Mais pour un taux normal de la glycmie, ce sont les sucres lents qui doivent tre en quantit suprieure par rapport aux sucres rapides. Ils seront transforms en molcules de glucose, dans un intervalle de temps un peu plus long compar lassimilation des sucres rapides, qui serviront dindice au taux de la glycmie.

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Taux de cholestrol: Nous pouvons distinguer trois cas : Une teneur faible : faible taux de cholestrol dans le cas o ils sont le taux de cholestrol infrieurs aux taux normaux de moins de 1.4 (g/l). Taux normaux : se situe entre 1.4 g / l 2.65 g/l indique que une personne dans un tat normal. Une teneur leve : cholestrol suprieurs aux taux normaux de plus levs 2.65 (g/l). -Il est important de savoir que le taux de cholestrol doit tre interprt la lumire d'autres facteurs cliniques. Par exemple, un taux de cholestrol de 2 (g/l) pourrait tre souhaitable chez un patient et trop leve dans un autre. En outre, le taux de cholestrol total peut ne pas tre si lev, mais en conjonction avec un faible taux de HDL (bon cholestrol), il pourrait tre inquitant. Facteurs de risque associs jouent un grand rle dans l'interprtation des taux de cholestrol. Les patients qui ont deux ou plusieurs facteurs de risque, en gnral, ont besoin pour maintenir des niveaux infrieurs de cholestrol. Regardons quelques-uns des jargons mdicaux d'interprtation cholestrol. En gnral, un taux de cholestrol total souhaitable est infrieur 2 g/l. Le cholestrol total est mesure la valeur, ce qui signifie qu'elle est dtermine par une analyse chimique du sang. Si votre taux de cholestrol total est suprieur 2 (g/l), vous devez connatre votre taux de HDL et LDL dire si vous faites OK ou besoin d'un traitement supplmentaire. -Cholestrol HDL: HDL se rfre de haute Densit Lipoprotine et est gnralement connu comme le bon cholestrol. C'est ce qu'on appelle la bonne, car elle permet de protger vos artres d'obtenir des dpts de cholestrol qui obstruent eux. Si votre taux de HDL est moins de 0,65 g/L, il est considr comme un facteur de risque. HDL est une mesure de valeur. -LDL Cholestrol: LDL se rfre " faible Densit Lipoprotine et est communment appel le mauvais cholestrol. Il est connue comme le mauvais, car elle obstrue les artres et est directement associe des crises cardiaques et des accidents vasculaires crbraux. LDL souhaitable est infrieure 130 mg/dl, sauf si vous avez deux facteurs de risque. Si vous avez deux ou plusieurs facteurs de risque, un LDL souhaitable est de moins de 100 mg/dl.

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Taux de triglycride: Nous pouvons distinguer trois cas : Une teneur faible : faible taux de triglycride dans le cas o ils sont le taux de triglycride infrieurs aux taux normaux de moins de 0.4 (g/l). Taux normaux : se situe entre 0.4 (g/l) 2(g/l) indique que une personne dans un tat normal. Une teneur leve : triglycride suprieurs aux taux normaux de plus levs 2(g/l). -lment fondamental du bilan lipidique, ce dosage est toujours associ celui du cholestrol afin de dterminer, partir de ces deux paramtres, les variations pathologiques des lipoprotines. La triglycridmie (taux de triglycrides dans le srum) est normalement comprise entre 0.4 (g/l) 2(g/l). Elle varie selon diffrents facteurs : ainsi chez la femme, elle est ordinairement plus basse que chez l'homme. Elle varie aussi en fonction du poids de lindividu, de sa consommation de tabac, de son alimentation, de lexercice physique, de la grossesse, de la prise de certains contraceptifs oraux contenant des strognes. Un taux excessif de triglycrides dans le srum (hypertriglycridmie) peut tre primitif (parfois favoris par le stress), conscutif une pathologie (diabte etc.), la prise d'strognes (pilule contraceptive), ou sans cause connue. Un taux anormalement bas de triglycrides dans le srum (hypotriglycridmie) est beaucoup plus rare. Il est habituellement li un apport alimentaire insuffisant de triglycrides.

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VI- Bilan de stage : Ce stage, a t pour nous une grande dcouverte dans tout ce qui concerne les analyses du sang. Nous avons appris des choses, cela nous a donn envie de faire de notre future travaille. Ce stage permit de mieux comprendre le fonctionnement dun laboratoire danalyse et les diffrents mtiers qui sont reprsents. Le fait de travailler au quotidien dans une quipe ma montr les diffrentes contraintes et les devoirs qui permettent dassurer le bon fonctionnement dun systme complexe dune entreprise. De plus, jai eu loccasion de rutiliser une partie de connaissance acquise luniversit. Au cours de ce stage dans le laboratoire, nous navons pas affront des difficults: tout tait disponible, les ractifs, les machines, et avec prcision dans le travail. Ce stage a permis d'acqurir des connaissances qui serviront dune suite d'tude.

VII- Conclusion : Ce stage a t une premire exprience professionnelle trs enrichissante sur tous les plans aussi dun point de vue de lapprofondissement de mes connaissances en biologie et biochimie mdicale. Le diabte, ses symptmes et les mthodes d'analyse et de traitement, nous avons la chance d'apprendre ce stage mdical sur une tape parcourue pour la ralisation dun examen mdicale. Nous avons beaucoup apprci dans ce laboratoire puisque mes tuteurs taient gentils, srieux, aimables, comprhensifs et tolrants et connatre le milieu du travail et avoir une ide sur ce que je ferais plut-tard. Le but de ce rapport n'est pas de faire uniquement une prsentation exhaustive de tous les aspects thoriques que j'ai pu apprendre ou approfondir, mais aussi et claire de faire un tour d'horizon des aspects pratiques et humains. Et j'espre donc, par la suite, pouvoir m'orienter dans le secteur des analyses biochimique.

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Bibliographie : [1]-http://www.enmarche.be/sante/therapies_et_techniques/Analyse_sang.htm (consult le 16/02/2013). [2]-http://ifcs.jeun.fr/t718-prelevement-du-sang (consult le 05/03/2013). [3]-http://www.diabete-vals.info/Comprendre/examens-glycemie.html (consult le 22/02/2013). [4]-http://www.doctissimo.fr/html/sante/analyses/ana_lipidique02.htm (consult le 25/02/2013). [5]-http://www.doctissimo.fr/html/sante/analyses/ana_lipidique05.htm (consult le 25/02/2013).

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