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Experimento E1: Exerccios de tampo

Definindo tampes so substncias que limitam variaes do pH quando a elas forem adicionadas bases ou cidos. Em um sistema tampo, constitui-se por um cido fraco e sua base conjugada, expresso pela equao: HA A + H+

O objetivo desse experimento era observar os diferentes valores de pH para as amostras em diferentes concentraes de cido Actico a 0,1 M e Acetato de Sdio a 0,1 M, para isso utilizou-se de um equipamento denominado pHmetro.

Materiais Utilizados: cido Actico a 0,1 M; Acetato de Sdio a 0,1 M; Bquers; Pipetas; pHmetro.

Procedimento:
Utilizando 5 Becker foram preparas 5 solues em cada um, contendo diferentes volumes de cido Actico a 0,1 M (cido fraco) e Acetato de Sdio a 0,1 M (base conjugado). Ento cada Becker foi homogeneizado e levado a um pHmetro para se obter o pH. Aps esta etapa, foram feitos clculos para verificar o pH, e compar-lo com o pH obtido pelo equipamento.

Resultados:
Foram obtidos pHs diferentes em cada bquers com o pHmetro; alm disso outra forma de obter o pH atravs de clculos utilizando a equao de Henderson-Hasselbach descrita logo abaixo foram obtidos valores de pH:

pH = pka' + log [base conjugada] /[acido fraco] A tabela a abaixo compara os valores de pH calculados com os valores de obtidos pelo pHmetro, nas diferentes concentraes de cada bquers: Bquer c. actico 0,1M 1 2 3 4 5 19 mL 15 mL 10 mL 5 mL 1 mL Acetato de Na 0,1M 1 mL 5 mL 10 mL 15 mL 19 mL pH medido com pHmetro 2,82 3,44 3,97 4,50 5,50 0,095 M 0,075 M 0,05 M 0,025 M 0,005 M 0,005 M 0,025 M 0,05 M 0,075 M 0,095 M [cido] [base] pH calculado 3,48 4,28 4,76 5,24 6,04

Com os valores obtidos pode-se observar que medida que a quantidade de cido actico inferior que a de acetato de sdio, a soluo apresenta pH mais bsico e quando a quantidade de NaOH adicionado maior, a basicidade diminui. Relacionando o pH calculado com o pH do pHmetro temos o seguinte grfico:
7 6 5 4 3 2 1 0 pH medido com pHmetro pH calculado 3.48 2.98 4.28 3.44 5.24 4.76 3.97 4.5 6.04 5.5

Atravs desse grfico conclui-se que o valor de pH medido foi inferior ao valor de pH calculado em todos os casos.

Experimento E2
Semelhante ao experimento anterior, nesse teremos duas solues um que se comporta com tampo e outra que sofre grande variao de pH portanto no um tampo.

Materiais e reagentes:
Terceiro bquer do experimento E1; NaOH a 0,1M pHmetro; Becker; HCl a 1,73 X 10-5 M.

Procedimentos:
O terceiro bquer do experimento anterior foi utilizado, e nele acrescentou-se em seu contedo 1 mL de soluo de NaOH a 0,1 M e novamente mediu-se o pH com o auxilio do pHmetro. Em outro bquer vazio, adicionou-se 20 mL de soluo de HCl (acido clordrico) a 1,74 X 10-5 M, em seguida mediu-se pH. Aps isto, acrescentou-se 1 mL de NaOH a 0,1 M e mediu-se novamente o pH.

Resultados e Discusso:
No bquer do experimento anterior em que foi acrescentado NaOH 0,1M, apresentou pequena variao de pH na medida de antes da adio da base e depois da adio da base, uma vez que nesse bquer havia 50% de cido fraco e 50% de base conjugada agindo ento como uma soluo tampo e no variando muito seu pH com o acrscimo de mais base. No entanto, no frasco em que foi adicionado um cido forte (cido clordrico), onde o pH medido foi 3,74 e aps adicionada a base NaOH, apresentou alta variao de pH, alterando o pH para 11,67, mostrando assim importncia do uso de solues tampes, j que neste ultimo caso a soluo apresentada no era um tampo pois o pH variou bastante aps a adio de NaOH. Na tabela abaixo demostrado o pH antes e depois da adio da base. Soluo bquer n 3 + NaOH a 0,1 M 3,97 4,36 Soluo HCl 1,74.10-5 M + NaOH a 0,1 M 3,74 11,67

pH antes pH depois

Experimento F: Separao de aminocidos por cromatografia de troca inica


A cromatografia de troca inica foi desenvolvida em meados dos anos 1970, quando foi mostrado que misturas de ctions e nions podem ser facilmente resolvidas em colunas de HPLC com resinas trocadoras de ctions e nions como fases estacionrias. usada para a separao de compostos inicos ou ionizveis. O princpio de separao uma troca de ons do analito com os ons fixados no trocador de ons. A tcnica tem sido utilizada h muito tempo, e algumas tcnicas analticas especficas baseadas na troca inica podem ser vistas como antecessoras da cromatografia lquida de alta eficincia. Um exemplo especfico a anlise de aminocidos, que combina a separao por troca inica de alta eficincia com a Ninhidrina, sendo uma tcnica altamente sensvel e seletiva. Neste experimento, o foi dividido em duas etapas onde a primeira foi realizada uma cromatografia e a segunda um revelao cromatogrfica atravs de reaes com Ninhidrima e Sakaguchi, ambas para deteco de aminocidos diferentes.

Materiais Utilizados: Resina: AMBERLITE IRA 410 - Esferas porosas de material insolvel e inerte, com grupo amino quaternrio na superfcie (resina aninica: trocadora de nions) Coluna: Seringa de 10 mL contendo a resina equilibrada em tampo Acetato de sdio 0,01 M pH = 5,0 (Tampo de equilbrio). Tampo de eluio: Tampo de equilbrio contendo NaCl 0,2 M. Amostra: 1,0 mL da soluo contendo Arginina (Arg) 0,01M e Aspartato (Asp) 0,02 M em tampo de equilbrio.

Reaes para deteco de Aas: 1. Reao de Ninhidrina: detecta grupos amino 2. Reao de Sakaguchi: detecta grupos guanido ou guanidina

Procedimento: 1 Etapa: Cromatografia Primeiramente uma soluo contendo os 2 Aas em pH=5 (com cargas diferentes), foi aplicada a uma coluna contendo a resina de troca inica.