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Quim. Nova, Vol. 33, No.

1, 159-171, 2010 HIDRXIDOS DUPLOS LAMELARES: NANOPARTCULAS INORGNICAS PARA ARMAZENAMENTO E LIBERAO DE ESPCIES DE INTERESSE BIOLGICO E TERAPUTICO Vanessa R. R. Cunha, Ana Maria da C. Ferreira e Vera R. L. Constantino* Departamento de Qumica Fundamental, Instituto de Qumica, Universidade de So Paulo, CP 26077, 05513-970 So Paulo SP, Brasil Jairo Tronto Universidade Federal de Viosa, Campus de Rio Paranaba, CP 22, 38810-000 Rio Paranaba MG, Brasil Joo B. Valim Departamento de Qumica, Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Av. Bandeirantes, 3900, 14040-901 Ribeiro Preto SP, Brasil Recebido em 11/12/08; aceito em 1/7/09; publicado na web em 27/11/09

LAYERED DOUBLE HYDROXIDES: INORGANIC NANOPARTICLES FOR STORAGE AND RELEASE OF SPECIES OF BIOLOGICAL AND THERAPEUTIC INTEREST. Studies about the inorganic nanoparticles applying for non-viral release of biological and therapeutic species have been intensified nowadays. This work reviews the preparation strategies and application of layered double hydroxides (LDH) as carriers for storing, carrying and control delivery of intercalated species as drugs and DNA for gene therapy. LDH show low toxicity, biocompatibility, high anion exchange capacity, surface sites for functionalization, and a suitable equilibrium between chemical stability and biodegradability. LDH can increase the intercalated species stability and promote its sub-cellular uptake for biomedical purposes. Concerning the healthy field, LDH have been evaluated for clinical diagnosis as a biosensor component. Keywords: layered double hydroxides; inorganic carriers; drug release.

INTRODUO O desenvolvimento de materiais hbridos um campo de pesquisa que vem apresentando um desenvolvimento considervel nos ltimos anos, devido principalmente ao fato de combinar o conhecimento tradicional com as novas abordagens e as modernas tecnologias. Esse desenvolvimento tem como objetivo atender crescente demanda por novos materiais multifuncionais, com variadas aplicaes em Fsica, Qumica, Biologia, Agricultura e Medicina. Particularmente, merece destaque o nmero de trabalhos que tratam da utilizao de nanopartculas como cpsulas de armazenamento ou carregadores de espcies de interesse biolgico e teraputico.1-3 Diversos sistemas para liberao controlada de drogas tm sido engendrados e descritos, com suas vantagens e desvantagens comparadas, podendo ser classificados em quatro grupos principais: carregadores virais, compostos catinicos orgnicos, protenas recombinantes e nanopartculas inorgnicas. Exemplos recentes incluem: pontos qunticos (quantum dots) ou nanocompsitos magntico-fluorescentes;4,5 gis polimricos;6,7 nanotubos de carbono ou slica funcionalizados;8 cpsulas multilamelares de polieletrlitos;9 nanopartculas de ouro10,11 e hidrxidos duplos lamelares (HDL).12 A Figura 1 mostra alguns exemplos de espcies nanoparticuladas de interesse na rea mdica. Particularmente, a busca por terapias antitumorais novas e racionais, aliadas s tcnicas de diagnstico mais seguras, envolve o planejamento e a obteno de drogas ou frmacos alvo-especficos, isto , que tenham alta especificidade para determinada biomolcula ou componente celular, podendo ento serem transportados e liberados apenas em stios escolhidos ou apropriados, aumentando sua eficcia teraputica e diminuindo seus efeitos colaterais. Uma estratgia criativa utilizar nanopartculas multifuncionais, capazes de carregar o
*e-mail: vrlconst@iq.usp.br

Figura 1. Alguns tipos de nanopartculas empregadas em estudos de transporte de espcies de interesse na rea mdica: (A) lipossomas; (B) nanopartculas de ouro ou slica funcionalizadas; (C) partculas lamelares passveis de sofrer intercalao e (D) nanotubos de carbono funcionalizados

frmaco e que, adicionalmente, contenham um composto (protena, anticorpo ou ligante) reconhecido apenas por protenas ou receptores associados a clulas tumorais (biomarcadores). Dessa forma, com engenhosidade e combinando conhecimento de diferentes reas, consegue-se aprimorar a estratgia de drogas alvo-especficas.13-16 Os carregadores virais tm sido reportados como os mais eficientes, mas apresentam muitos efeitos colaterais, tais como respostas imunes e mutao dos genes. Os carregadores catinicos (lipdios e polmeros) podem evitar tais problemas, porm usualmente so muito

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Tabela 1. Comparao das propriedades de vrias nanopartculas inorgnicas1


Tipo Au Cn (nanotubos) C60,70,80 HDL SiO2 Fe3O4 Tamanho (nm) 1-100 1-10 ~1 30-200 5-100 1-50 Forma esfrica/basto tubular esfrica lamelar esfrica esfrica Citotoxicidade (mg/mL) > 0,05 > 0,05 ~500(b) ~1 ~1 0,5-2,0 Biodegradao No No No Sim No No Eliminao(a) A, C ou M A, C ou M A, C ou M Dissoluo A, C ou M A, C ou M

(a) A = acumulao; C = circulao; M = metabolizao; (b) em unidades de mg/kg de camundongos.

txicos para a clula. Em contraste, os materiais inorgnicos geralmente apresentam propriedades promissoras para serem utilizados como carregadores, tais como boa biodisponibilidade,17 baixa toxicidade, alta biocompatibilidade, alta capacidade de insero de espcies inicas, possibilidade de funcionalizao da superfcie, aumento da estabilidade das espcies inseridas e promoo de sua liberao sustentada. Mais recentemente, tambm foi descrita a possibilidade de controle do alvo celular atravs da morfologia e tamanho das partculas inorgnicas. Isso explica o crescente interesse na pesquisa e desenvolvimento desses materiais para serem utilizados como novos carregadores no-virais de drogas. Alguns sistemas nanoestruturados orgnicos j se encontram aprovados para uso teraputico (por exemplo, sistemas base de lipossomas, albumina e protenas ligadas ao PEG, (polietilenoglicol) ou em estgio de testes clnicos (micelas polimricas e compsitos de polmeros biodegradveis). Entretanto, a utilizao de nanopartculas inorgnicas se encontra em fase de testes clnicos (nanoestruturas base de ouro) e de testes pr-clnicos (por exemplo, nanotubos de carbono e partculas de slica).18 NANOPARTCULAS INORGNICAS A Tabela 1 mostra algumas propriedades de partculas inorgnicas de interesse na rea mdica.1 Convm ressaltar que os dados reportados sobre toxicidade de um material em particular nem sempre concordam entre si, uma vez que esse parmetro pode variar com a morfologia da partcula, com as substncias que recobrem a nanopartcula etc.2,3 Apesar das vantagens apresentadas pelos carregadores inorgnicos, a estabilidade qumica das nanopartculas inorgnicas (exceto HDL), inicialmente uma propriedade excelente para manter a integridade do material durante o processo de liberao do frmaco, faz com que sua biodegradao no plasma e citoplasma do corpo humano seja comprometida.1,3 Como resultado, essas partculas ou sero acumuladas nas clulas, ou circularo pelo plasma, ou sero metabolizadas. Isso ocorre devido dificuldade que essas partculas encontram para sofrer exocitose. O HDL a nica exceo devido sua alcalinidade e capacidade de lenta degradao em meio cido, como o do citoplasma (pH = 4-6), resultando em ons como Mg2+, Al3+, CO32-, Cl-, que podem deixar a clula atravs dos canais inicos competentes ou disponveis. Assim, o HDL parece apresentar um equilbrio favorvel entre estabilidade qumica e biodegradabilidade e, por isso, ser altamente promissor para promover a liberao sustentada de nions orgnicos na clula. HIDRXIDOS DUPLOS LAMELARES Os hidrxidos duplos lamelares, tambm conhecidos como compostos do tipo hidrotalcita ou como argilas aninicas, apresentam estruturas bidimensionalmente organizadas e poros flexveis como os argilominerais. Esses materiais so capazes de incorporar espcies

negativas na regio interlamelar de modo a neutralizar as cargas positivas das lamelas.19-24 Deste modo, espcies inseridas nos espaos interlamelares podem adquirir estabilidade extra atravs de interaes eletrostticas. Os HDL possuem ocorrncia natural e tambm podem ser sintetizados em laboratrio por rotas simples e de baixo custo, que permitem o isolamento de slidos de alta pureza. Os HDL apresentam frmula geral [M2+(1-x)M3+x(OH)2](An-)x/n. zH2O (M = on metlico e An- = nion interlamelar) e uma estrutura derivada da brucita, um mineral de frmula mnima Mg(OH)2, no qual os ctions magnsio esto localizados no centro de octaedros, que possuem nions hidroxila em seus vrtices. Esses octaedros compartilham suas arestas formando camadas planas e neutras, que so mantidas juntas por ligaes de hidrognio. Quando, na estrutura do tipo da brucita, ctions bivalentes so isomorficamente substitudos por ctions trivalentes, a lamela passa a apresentar uma carga residual positiva. Para que o sistema adquira a eletroneutralidade, necessria a presena de nions entre as lamelas, que juntamente com molculas de gua promovem o empilhamento das camadas do hidrxido duplo com um domnio interlamelar pouco ordenado. Nesse caso, as lamelas so mantidas juntas no apenas por ligaes de hidrognio, como no caso da brucita, mas pela atrao eletrosttica entre as lamelas positivamente carregadas e os nions interlamelares. A representao esquemtica da estrutura dos HDL apresentada na Figura 2.

Figura 2. Representao esquemtica da estrutura dos HDL (se Am- o on carbonato e M2+/M3+ Mg e Al (3:1), o HDL a hidrotalcita)

As camadas inorgnicas dos HDL podem ser empilhadas de acordo com duas simetrias diferentes, resultando em celas unitrias rombodrica ou hexagonal. A maioria dos HDL sintticos apresenta cela unitria rombodrica e, com muito menor frequncia, cela hexagonal; apenas os HDL com proporo M(II)/M(III) igual a 1 apresentam cela unitria ortorrmbica. Maiores detalhes sobre a estrutura dos HDL e, tambm, sobre os mtodos de preparao

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desses materiais so encontrados em artigos de reviso20,21,23,25 e em captulos de livros.26-28 A intercalao de espcies orgnicas em HDL tem recebido ateno expressiva devido s diversas aplicaes possveis para esses materiais hbridos orgnico-inorgnicos. As propriedades dos HDL permitem empreg-los como trocadores de nions, catalisadores, precursores ou suporte para catalisadores, adsorventes, na sntese de materiais cermicos avanados, na preparao de eletrodos modificados e tambm em aplicaes medicinais, como anticidos.20,22,23,26-40 A biocompatibilidade do HDL com a composio da hidrotalcita o torna um interessante aliado nas reas medicinal e farmacolgica, nas quais suas propriedades como anticido so estudadas j h algum tempo.41-44 O HDL de magnsio-alumnio e carbonato encontrado comercialmente com o nome Talcid, um anticido patenteado pela empresa Bayer AG.45,46 Os anticidos so administrados quando identificados problemas de azia, refluxo gastroesofgico e dispepsia funcional. Um bom anticido deve ser caracterizado pelas seguintes propriedades: rpido efeito de neutralizao e ao de longa durao; alta capacidade tamponante na faixa de pH 3-5, evitando assim que o pH do suco gstrico se torne muito alcalino; atividade estvel mesmo na presena de outros componentes do suco gstrico.20,47 A Figura 3 mostra o desempenho in vitro da hidrotalcita (abreviada como Mg3AlCO3-HDL) e de outros compostos utilizados como anticidos. Pelo grfico, pode-se notar que a hidrotalcita o composto que melhor se adapta s caractersticas de um bom anticido. Outros testes mostram tambm que, entre vrios anticidos comerciais, a hidrotalcita a que apresenta a maior capacidade de ligao com o cido taurodesoxiclico, um cido biliar txico para a clula e a mucosa gstrica.47

Figura 4. Principais motivaes dos trabalhos realizados sobre intercalao em HDL de espcies orgnicas de interesse medicinal

Figura 3. Curvas de medida de pH em funo do tempo para vrios anticidos. Adaptado da ref. 47. Copyright 2003, com permisso da Blackwell Publishing Ltd.

Alm do uso como anticido, no qual o HDL o princpio ativo, esses compostos tambm vm sendo empregados h algum tempo como excipientes farmacuticos. Nos ltimos anos, observa-se um nmero crescente de artigos cientficos e de patentes que focam a intercalao de produtos biologicamente ativos em HDL, como uma estratgia para aumentar a estabilidade das substncias, para aplicao em terapias modernas e, ainda, para uso em diagnstico clnico (Figura 4). Conforme ser visto adiante, o confinamento de substncias em estruturas lamelares pode aumentar o seu tempo de prateleira, de modo a manter as especificaes fsicas, qumicas, teraputicas e toxicolgicas do princpio ativo durante o perodo de armazenamento. Alm de promover a estabilidade da substncia, os sistemas hbridos podem direcion-la para alvos especficos (tecidos) e/ou regular a sua liberao no organismo. Neste artigo, alm de frmacos ou drogas, tambm sero tratados como produtos medicinais aquelas substncias capazes de tratar ou prevenir uma doena (como os antioxidantes) ou modificar uma funo fisiolgica. Em 2007, dois artigos de reviso foram publicados

sobre materiais hbridos constitudos por HDL e molculas orgnicas de interesse para as indstrias farmacuticas e de cosmticos.48,49 Na Tabela 2 esto relacionados os artigos reportados at 2008 sobre a intercalao de frmacos e espcies de interesse biolgico em hidrxidos duplos lamelares. Na Tabela 2, no foram considerados trabalhos envolvendo biomolculas como aminocidos, peptdeos, nucleotdeos, mono- ou dissacardeos que no apresentam dados relacionados com o tema deste trabalho de reviso como, por exemplo, ensaios de liberao ou desintercalao em solues de pH de relevncia no meio biolgico; estudos de viabilidade celular etc. Por outro lado, na Tabela 3 foi dado destaque aos artigos que tratam de sistemas hbridos de HDL com potencial aplicao na rea de terapia gnica. Os estudos mostram, alm de resultados de caracterizao estrutural e textural dos sistemas hbridos, os ensaios de viabilidade celular. O encapsulamento de biomolculas funcionais, pela interao de lamelas catinicas do HDL e cargas aninicas na biomolcula, tem permitido sua proteo degradao, tendo at mesmo aumentado significativamente a eficincia de sua transferncia para dentro de clulas ou rgos em mamferos.104 Essa neutralizao de cargas pela intercalao, por exemplo, entre HDL e DNA parece facilitar a penetrao da biomolcula na clula atravs da endocitose, j que as interaes repulsivas entre a membrana celular carregada negativamente e o DNA aninico seriam minimizadas. Outras molculas de interesse farmacutico como os biopolmeros aninicos alginato, pectina, goma xantana, carragenana, poli(a,baspartato) foram intercalados com sucesso em HDL,95,96 mas no sero tratadas neste artigo de reviso, embora a associao entre um carregador inorgnico e um polmero orgnico possa gerar produtos muito interessantes para a rea mdica. Desde as primeiras publicaes sobre a intercalao de espcies de interesse farmacolgico em HDL, observa-se no apenas o aumento no nmero de trabalhos, como tambm o depsito de patentes pelos grupos de OHare,97,98 Choy99 e Costantino,100 que trabalham na sntese e caracterizao de HDL h muitos anos. Outras patentes recentes foram encontradas relatando o uso de HDL para liberao sustentada de bisfosfonatos (tratamento de osteoporose)101 e HDL contendo ons Fe(III) nas lamelas para tratamento de deficincia de ferro no organismo.102 As propriedades dos HDL (como o carter anticido) podem ser combinadas com as propriedades do composto intercalado, resultando em um hbrido no qual as estabilidades qumica, trmica

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Tabela 2. Trabalhos publicados sobre espcies de interesse medicinal intercaladas em hidrxidos duplos lamelares
Substncia Intercalada Diclofenaco, Gemfibrozil, Ibuprofeno, Naproxeno, cido 2-propilpentanico, cido 4-bifenilactico, cido tolfenmico Ibuprofeno cido saliclico, cido ctrico, cido glutmico, cido asprtico Indometacina, Cetoprofeno, cido tioprofnico cido 1-hidroxietilideno-1,1-difosfnico cido ctrico 2-Carboxilato-Indol cido saliclico, Naproxeno Indometacina cido folnico Diclofenaco Fenbufeno Fenbufeno Captotecina Naproxeno Ibuprofeno Ibuprofeno, Diclofenaco, Indometacina cido ferlico 5-Fluorouracil Fenoximetilpenicilina Cordicepina (ou 3-Desoxiadenosina) Metotrexato Tirosina cido mefenmico e cido meclofenmico Protoporfirina lX e cido perfluoroheptanico Gramicidina, Anfotericina Ampicilina, cido nalidixico Succinato de cloramfenicol cido indol-3-actico Podofilotoxina Naproxeno Norfloxina Celecoxib cido mefenmico Curcumina Diclofenaco Colgeno 5-Fluorouracil (5-Fu) Heparina cido mefenmico e cido meclofenmico Colgeno cido mefenmico, cido meclofenmico e Naproxeno Ibuprofeno 5-FluoroCitosina (5-FC) L-DOPA Enalapril, Lisinopril, Captopril e Ramipril Mg2/Al Zn/Al, Zn(OH)3 Mg3/Al Zn/Al Mg/Al Mg/Al Mg2/Al, Mg3/Al, Mg4/Al Mg3/Al Mg3/Al Zn2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Zn2/Al Mg/Al Fe Mg2/Al Zn2/Al Mg2/Al Zn2/Al DRX; TG; UV/Vis DRX; IV; TG-DTA; MEV DRX; UV/Vis; MET DRX; CHN; MET; rea Superficial DRX; IV; UV/Vis; TG-DTA; ICP-AES DRX; IV; DSC; rea superficial DRX; CHN; IV; Raman; TG-MS; MEV DRX; IV; ICP-AES; TG-DTA DRX; UV/Vis; CLAE; Absoro tpica CHNS; ICP-AES; DRX; IV; MET DRX; MEV; CHN DRX; CHN; IV; MEV; MET DRX; CHN; IV; MET; UV/Vis DRX; Raman; TG; MET CHN; DRX; IV; TG-DTA CHN; DRX; IV; UV/Vis; TG; TEM CHN; DRX; IV; MET CHN; ICP-AES; DRX; IV; UV/Vis; TG-DTA; TG-MS; RMN CHN; ICP-AES; DRX; IV; DTA; TG-MS 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 Composio do HDL M /M
2+ 3+

Mtodos de caracterizao DRX; CHN; IV; TG IV; TG; CHN DRX; TG-DTA; IV; CHN DRX; CHN; UV/Vis DRX; CLAE; RMN DRX; IV; MEV DRX; IV DRX; IV; RMN; TG-DTA DRX; IV; RMN; TG-DTA DRX; TG-DTA; ICP-AES; CHN; DRX; XPS DRX; IV; TG; ICP-AES DRX; MET; XPS DRX; IV; UV/Vis; MET DRX; IV; TG; ICP-AES; CHN; UV/Vis IV; FT-Raman; DRX; TG; EPR DRX; IV; Raman; RMN DRX; TG; MEV DRX; IV; TG DRX; IV; CHN; MEV DRX; IV; MET; Eletroforese Capilar DRX; MEV DRX; IV; ICP-AES; rea Superficial; TGDSC; MET DRX; IV; TG-DTA; rea Superficial DRX; IV; UV/Vis; TG DRX; IV; UV/Vis

Ref. 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75

Li/Al2 Mg2/Al Mg3/Al Mg3/Al Mg2/Al e Mg3/Al Mg2/Al Zn2/Al e Zn3/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al e Li/Al2 Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg3 /Al Mg2/Al Mg/Al Mg2/Al Mg3/Al Mg/Al Mg2Al Zn2/Al Mg2/Al Mg2/Al e Mg3/Al Mg2/Al

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Tabela 3. Trabalhos publicados sobre hbridos de HDL com oligonucleotdeos e cidos nucleicos de interesse em terapia gnica
Substncia Intercalada Adenosina-5-monofosfato (AMP), Guanosina-5-monofosfato (GMP), Citidina-5-monofosfato (CMP) e cido desoxirribonuclico (DNA) DNA, ATP, Fluorescena 5-isotiocianato (FITC) CMP, AMP, GMP, Adenosina-5-trifosfato (ATP) DNA DNA DNA DNA DNA DNA DNA Composio do HDL M2+/M3+ Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al, Mg2/Fe e Mg2/Ga Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mg2/Al Mtodos de caracterizao CHN; TG; ICP-AES; DRX; IV; DC; UV/Vis DRX; LSCM DRX; IV CHN; ICP-AES; DRX TG-DTA; MEV; MET; Eletroforese DRX; TG; Eletroforese DRX; IV; MEV; DC; eletroforese DRX; LAMMPS DRX, LAMMPS DRX; MET; CellTiter-Glo Ref. 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112

e/ou fotoqumica, entre outras, so sensivelmente aumentadas em relao do frmaco livre. Alm disso, o material intercalado poder sofrer um processo de liberao sustentada, decorrente da dissoluo da matriz lamelar em funo do ataque cido ou de uma reao de troca aninica.48,49 Essas propriedades permitem que o HDL seja um dos materiais inorgnicos apontado como promissor para uso como suporte para o armazenamento e a liberao sustentada da substncia intercalada, que pode ser um frmaco como os anti-inflamatrios no-esteroidais,50,51,53,65 drogas anti-cancergenas,59,63 um regulador de crescimento vegetal,113 porfirinas para uso em terapia fotodinmica,74 aminocidos,114 herbicidas,115 ou mesmo a molcula de DNA em procedimentos de terapia gnica.106,107 A aplicao do HDL como, por exemplo, excipiente no tratamento de lcera e em terapia de desordens digestivas j descrita h mais tempo. MTODOS DE ADMINISTRAO E ABSORO DE HDL A assimilao dos materiais hbridos contendo produtos medicinais intercalados em HDL tem sido investigada via administrao enteral (pelo trato digestivo), tpica (efeito local) ou parenteral. A liberao da substncia intercalada pode ocorrer atravs de dois mecanismos: solubilizao das lamelas do HDL estimulada pelo abaixamento do pH e/ou pela reao de troca aninica com espcies presentes no organismo. Quando administrado oralmente, o material hbrido pode se dissolver no suco gstrico do estmago ou participar de reao de troca inica (liberao sustentada) no intestino delgado, se recoberto com um revestimento protetor (entrico) adequado (por exemplo, com polmeros que no se dissolvem em meio cido). No estmago, o HDL pode proteger a mucosa gstrica e a desintercalao controlada de um frmaco pode evitar a sua alta concentrao local, diminuindo possveis efeitos colaterais. Para uso tpico (absoro cutnea), rea de interesse tambm das indstrias de cosmticos, a substncia intercalada, aplicada na forma de cremes, adesivos etc., pode ser liberada por troca inica com espcies do fluido da transpirao (NaCl, por exemplo). Outra possibilidade consiste na associao do material hbrido aos sistemas endodrmicos ou transdrmicos, ou seja, a substncia de interesse (um anti-inflamatrio ou um hormnio, por exemplo), atravessaria a epiderme, atingindo a derme ou mesmo a corrente sangunea. Quando a administrao intravenosa, a partcula do hbrido levada para o interior da clula por endocitose, um processo celular que ocorre na resposta imunolgica do organismo, executado por macrfagos para degradar agentes patognicos (molculas, bactrias, vrus) ou partculas pequenas, e que consiste em engolfar e eliminar o intruso.116 Dentro da clula, nos endossomas que confinam o hbrido

de HDL, pode ocorrer a dissoluo parcial ou a troca aninica no HDL em razo da presena de ons H+ e Cl-.71,117 O HDL ainda intacto pode escapar do endossoma, alojando-se no citoplasma, conforme ilustra a Figura 5. Outra possibilidade a fuso dos endossomas com os lisossomos, promovendo a lenta dissoluo em funo da acidez do meio (pH aproximadamente 4-5).3 Parte do material hbrido no dissolvido pode sofrer reaes de troca inica entre a espcie intercalada e aquelas espcies aninicas presentes no citosol (pH aproximadamente 7,4). Esse mtodo importante para o transporte de drogas anticancergenas, cidos nucleicos e oligonucleotdeos para as clulas.

Figura 5. Possveis etapas da incorporao e absoro de HDL pela clula

Se o DNA incorporado ao ncleo da clula, ele pode induzir a produo de uma determinada protena ou, ainda, se compostos (RNA ou oligonucleotdeos) anti-sentido alcanam o ncleo, pode-se regular artificialmente a expresso de genes para inibir a produo de protenas causadoras de doenas. Porm, os cidos nucleicos no conseguem penetrar na membrana celular em virtude da elevada carga proveniente dos grupos fosfato, sendo necessria a intermediao de carregadores; uma vez no citosol, quando no protegidos, os cidos nucleicos so degradados pelas enzimas nucleases. Posteriormente, o DNA ou RNA associados aos carregadores so transportados para o ncleo da clula, por mecanismos ainda no totalmente esclarecidos. Observa-se que a eficincia dos carregadores inorgnicos na transfeco (transporte de cido nucleico externo para clulas eucariticas) no eficiente, se comparados aos nanocarregadores orgnicos, mas os primeiros possuem as vantagens de no sofrerem ataques de micro-organismos, de apresentarem menor toxicidade e de estabilizarem a macrobiomolcula.1,3 A administrao de partculas na forma parenteral requer o controle de seus dimetros para evitar problemas de obstruo de

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capilares, cujos dimetros mdios so da ordem de 10 mm.118 Para injeo intravenosa, Choy et al.118 realizaram um estudo em que, atravs de mtodos convencionais, obtiveram partculas de HDL de tamanho nanomtrico e realizaram testes em cobaias. A injeo intravenosa de suspenso salina de Mg2AlCl-HDL (dimetro de ca. 100 nm) em camundongos adultos, seguida de exames de sangue e de tecidos, mostraram que doses iguais ou menores que 200 mg/kg no causam efeitos sistmicos (generalizados). Porm, observou-se irritao no local da aplicao e na injeo intraperitonial, de modo que a administrao no intravenosa deve ser evitada. Choy et al.119 estenderam os estudos e reportaram em uma patente que partculas com dimetro entre 100 e 300 nm no so txicas mesmo na concentrao de 400 mg/kg quando aplicadas no peritnio de ratos. Partculas contendo metotrexato (MTX), uma droga anticancergena, tambm foram testadas in vivo atravs de injeo intraperitonial. Em outro trabalho do mesmo grupo,86 o agente anticancergeno 5-fluorouracil intercalado em HDL foi testado in vitro frente a trs linhagens diferentes de clulas humanas doentes: adenocarcinoma (A549), osteosarcoma (HOS) e hepatoma (Hep 1). Os resultados mostraram que o HDL sem o frmaco no inibe o crescimento das clulas quando presente em uma concentrao inferior a 500 mg/mL, indicando que o carregador inorgnico no pode ser considerado txico. J outro estudo, empregando outro tipo de clula cancerosa (MNNG/ HOS, osteosarcoma humano), revelou que o HDL contendo carbonato no afeta o ciclo celular, quando em concentraes entre 1,5 e 384 mg/mL.71 Choy et al.120 avaliaram a toxicidade celular de Mg2AlCO3HDL e Zn2AlCO3-HDL, as composies mais utilizadas em estudos de transporte de drogas ou biomolculas atravs de HDL. Para tanto, foram empregadas clulas normais de pulmo humano (L-132), clulas de hepatoblastoma (HepG2) e clulas de adenocarcinoma de mama (MCF-7). O meio celular continha nanopartculas de HDL (de formato hexagonal e tamanho mdio de 200 nm) nas concentraes entre 3,9 e 500 mg/mL (at essa concentrao, no foram observadas alteraes na proliferao celular). Os testes de danos membrana plasmtica tambm confirmaram a baixa toxicidade dos HDL; a composio com magnsio mostrou ser menos danosa que aquela com zinco e os autores inferiram essa diferena menor toxicidade do Mg2+ em relao ao Zn2+. Considerando uma possvel administrao parenteral dos materiais hbridos, tambm foram realizados testes de hemlise atravs da incubao das nanopartculas de HDL com clulas vermelhas do sangue. Nas concentraes empregadas no estudo, tanto as partculas de Mg2AlCO3-HDL quanto de Zn2AlCO3-HDL no causaram a ruptura das clulas vermelhas em intervalo de tempo adequado. HDL como carregadores de produtos medicinais A intercalao de molculas biologicamente ativas na estrutura de HDL de interesse no apenas pelo fato da matriz ser biocompatvel, mas tambm por outros efeitos reportados. Possvel liberao sustentada da droga mediada por alteraes no pH Tronto et al.121 realizaram estudos sobre a liberao in vitro de aminocidos intercalados em HDL de magnsio e alumnio. A partir dos valores de concentrao dos aminocidos e dos valores de pH determinados para cada tempo, foi possvel construir grficos de concentrao do aminocido e pH da soluo em funo do tempo. Analisando a Figura 6, nota-se que inicialmente o valor de pH da soluo de 1,88. Essa soluo, que tem como objetivo simular o pH estomacal, apresenta [HCl] = 0,0132 mol L-1. Nesse valor de pH da soluo (Regio I do grfico), o aminocido est na forma protonada, o que leva a uma repulso entre as cargas da lamela e do aminocido, o qual se desloca para a soluo.

Figura 6. Valores de pH e quantidades de aminocido em soluo em funo do tempo nos estudos de liberao in vitro para o HDL intercalado com aspartato

Com o aumento do pH da soluo em funo da dissoluo do HDL, o material estar em contato com uma soluo na faixa de pH entre 2-3, prximo do ponto isoeltrico do aminocido (Regio II). A velocidade mxima de liberao do aspartato intercalado para a soluo ocorre em um perodo de 3 h, quando o pH da soluo atinge o valor de aproximadamente 4,0 (Regio III), prximo do valor de pKx do aminocido (referente ao segundo grupo carboxlico) que de 3,65. Aps esse tempo, a concentrao de ons aspartato na soluo permanece praticamente constante e em torno de 1,4x10-3 mol L-1. A partir de 3 h, quando o valor de pH superior a 4,0, observa-se uma velocidade de liberao menor. Isso ocorre porque a partir desse valor de pH praticamente no ocorre dissoluo do hidrxido duplo lamelar. Concomitante ao processo de liberao dos nions orgnicos intercalados por dissoluo do HDL, ocorre a troca dos ons aspartato intercalados no HDL por ons cloreto da soluo que simula o pH estomacal. A presena de ons cloreto intercalados no HDL resultante aps a liberao foi confirmada atravs da difratometria de raios X no p e anlise qualitativa. A troca de ons aspartato intercalados por ons cloreto pode ser explicada pela maior estabilizao da estrutura lamelar pelos nions cloreto do que pelos nions aspartato. Tronto et al.55 realizaram tambm testes de liberao in vitro para HDL de magnsio e alumnio intercalado com nions citrato. A partir dos valores de concentrao de nions citrato em soluo e dos valores de pH determinados para cada tempo, foi construdo um grfico de concentrao e pH em funo do tempo (Figura 7).

Figura 7. Valores de pH e quantidades de nions citrato em soluo em funo do tempo nos estudos de liberao in vitro para o HDL de Mg e Al intercalado com nions citrato

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A curva de liberao do nion orgnico tem o perfil caracterstico de uma liberao sustentada. O pH durante os testes de liberao foi sempre crescente em funo do tempo. Tal resultado pode estar relacionado ao alto efeito tamponante do sistema, que impede que o pH se eleve bruscamente. Padres de difrao de raios X no p, para as amostras slidas aps 42 h de testes de liberao, apresentam picos basais referentes intercalao de ons citrato (d003 = 1,2 nm). Diferentemente dos resultados obtidos para HDL intercalados com aminocidos, para o HDL de Mg e Al intercalado com nions citrato, o valor de espaamento basal encontrado aps os testes de liberao in vitro no variou em relao ao do composto intercalado, indicando que no ocorreu a reao de troca dos nions citrato intercalados por nions cloreto da soluo. Assim, possvel afirmar que aps 42 h de contato com a soluo cida, os nions citrato intercalados no foram totalmente liberados para a soluo. A amostra MgAl-citrato-HDL apresentou uma alta organizao estrutural, o que poderia dificultar a troca com os nions cloreto da soluo durante os testes de liberao in vitro. Alm disso, os nions citrato proporcionaram um efeito tamponante na soluo, o que no favorece nem o processo de dissoluo do HDL e nem a troca aninica. O efeito tamponante dos HDL foi demonstrado por meio de curvas de titulao com um cido forte. A Figura 8 apresenta as curvas de pH em funo do volume de HCl adicionado, para os HDL de magnsio e alumnio intercalados com nions aspartato e citrato.

pois a liberao ocorre atravs da troca inica entre os ons derivados do ibuprofeno e os ons fosfato presentes na soluo tampo. O difratograma de raios X do slido, remanescente aps a liberao, confirma esse mecanismo devido ao desaparecimento do pico basal em d003 = 2,17 nm referente ao HDL-IBUt.i., e o aparecimento do pico em 1,09 nm referente aos ons fosfato intercalados. A liberao in vitro do HDL-IBUt.i. utilizando aproximadamente as condies do meio gstrico no foi estudada. Essas condies no favoreceram uma liberao sustentada devido rpida dissoluo do HDL em baixos valores de pH, sendo necessrio o recobrimento entrico do material. Aumento da solubilidade de substncias pouco solveis em gua Ambrogi et al.53 tambm desenvolveram um trabalho sobre o aumento da solubilidade de frmacos pouco solveis como a indometacina, cetoprofeno e o cido tioprofnico em HDL de magnsio e alumnio. A solubilidade uma propriedade muito importante dos frmacos, pois tem um papel crucial na liberao e absoro dessas molculas no plasma sanguneo, ou seja, na sua biodisponibilidade. As medidas de solubilidade do frmaco livre, do mesmo intercalado e do material formado pela mistura fsica do frmacoHDL foram determinadas em um ensaio a 37 C, no qual o material em p foi colocado em um meio contendo suco gstrico (pH = 1,2) sem pepsina. Os trs frmacos, quando intercalados em HDL, apresentaram um aumento na solubilidade enquanto a molcula livre e a mistura fsica no mostraram modificaes. Para a indometacina, por exemplo, a concentrao obtida no ensaio aps 3 h, com o frmaco livre e com a mistura fsica, foi aproximadamente seis vezes menor do que a concentrao do frmaco previamente intercalado. Segundo os autores, o aumento na solubilidade pode estar relacionado ausncia de cristalinidade do material intercalado, ocorrendo a liberao direta da forma inica pela rpida dissoluo do HDL em meio cido. Aumento da estabilidade qumica de substncias frente luz, calor, umidade, oxignio molecular etc Estudo sobre a decomposio trmica do anti-inflamatrio naproxeno em HDL de magnsio e alumnio utilizando as tcnicas de difratometria de raios X e absoro no infravermelho in situ foi realizado por Wei et al..64 As mudanas observadas durante o processo de decomposio usando tais tcnicas esto de acordo com os dados de anlise trmica. A espectroscopia no infravermelho e a difratometria de raios X mostram que a decomposio do naproxeno intercalado ocorre em aproximadamente 250 C, temperatura na qual se observa o desaparecimento de bandas caractersticas da molcula e a desidroxilao do HDL. Esse estudo possibilita concluir o notvel aumento da estabilidade do naproxeno quando intercalado em HDL, visto que para a molcula livre a temperatura de decomposio de 170 C. Em um estudo recente, a intercalao de heparina, droga frequentemente usada como anticoagulante, em hidrxido duplo lamelar do tipo MgAl-Cl-HDL removeu algumas de suas limitaes para uso farmacolgico, aumentando sua meia-vida e prolongando sua ao.87 Liberao sustentada pode manter a concentrao plasmtica do frmaco em nveis desejados por um perodo maior de tempo Li et al.61 realizaram um estudo sobre o potencial de liberao do anti-inflamatrio fenbufeno intercalado na matriz de HDL de magnsio/alumnio e ltio/alumnio. O teste de desintercalao foi realizado a temperatura constante de 37 C em uma soluo de tampo fosfato pH=7,8. A curva de liberao do fenbufeno na matriz LiAl2-HDL mostra que nos primeiros 10 min ocorre uma alta liberao e atinge um nvel constante em 20 min. A liberao mxima, utilizando essa matriz, foi de 40%. O perfil encontrado para a matriz Mg2Al-HDL mostra uma rpida liberao nos primeiros 15 min, porm menor do que a visualizada para a matriz LiAl2-HDL. A quantidade de

Figura 8. Curvas de pH em funo do volume de HCl 1,0 mol L-1 adicionado para HDL de Mg e Al intercalados com (a) nions aspartato; (b) nions citrato

O efeito tampo para o HDL intercalado com nions aspartato, Figura 8a, ocorreu com a adio de 2,0 e 4,0 mL de soluo de cido clordrico, com uma variao no valor de pH entre 4,3 a 3,5. Para esse material, a capacidade tamponante foi de 7,0 meq g-1. Para o HDL intercalado com nions citrato, Figura 8b, o efeito tamponante ocorreu com a adio de um volume de cido clordrico entre 1,0 e 3,0 mL, em que o valor de pH variou entre 2,8 a 3,1. Esse HDL apresentou capacidade tamponante de 7,60 meq g-1. Esses materiais hbridos apresentaram curvas de titulao com um perfil tpico de uma base fraca sendo titulada por um cido forte. Ambrogi et al.51 realizaram um estudo de liberao in vitro do anti-inflamatrio ibuprofeno em HDL de magnsio e alumnio, simulando as condies de pH do intestino delgado (pH=7,5). A liberao foi realizada comparando os comportamentos do HDLIBUt.i. (ibuprofeno intercalado no HDL atravs do mtodo da troca inica), HDL-IBU (mistura fsica do sal de sdio do ibuprofeno com o HDL-Cl) e do Neo-Mindol (forma comercial do ibuprofeno na forma de sal de sdio) em pH 7,5. O perfil de liberao do HDLIBUt.i. foi diferente do observado para o Neo-Mindol. A forma comercial e a mistura fsica HDL-IBU apresentaram uma liberao imediata do frmaco. O ensaio com a amostra HDL-IBUt.i. mostrou que 60% da droga foi liberada aps 20 min, e que os 40% restantes foram liberados aps 100 min. Essas diferenas provavelmente esto relacionadas com o mecanismo de liberao do frmaco intercalado,

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fenbufeno liberada aumenta linearmente ao longo do ensaio de 120 min e atinge o valor de 59%. Segundo os autores, a explicao para o diferente comportamento da liberao do fenbufeno nas matrizes Mg2Al-HDL e LiAl2-HDL pode ser devida a maior interao do nion orgnico com o LiAl2-HDL, uma vez que essa matriz possui maior densidade de carga que a Mg2Al-HDL. Superfcie da matriz de HDL pode ser modificada para evitar liberao de espcies no estmago e promover liberao sustentada no intestino Li et al.62 estudaram a liberao, em condies semelhantes s encontradas no trato gastrointestinal, do anti-inflamatrio fenbufeno intercalado na matriz de HDL de magnsio e alumnio recoberto pelo polmero Eudragit S 100. Esse estudo foi desenvolvido devido ao comportamento bsico da matriz de HDL, impossibilitando sua passagem sem decomposio de suas lamelas no meio cido do estmago, expondo assim precocemente o frmaco. Os resultados obtidos mostraram o comportamento desejado do hbrido recoberto, ocorrendo a passagem do frmaco-HDL pelo estmago e possibilitando a liberao sustentada do frmaco nas condies do intestino delgado. Aumento da estabilidade de frmaco frente decomposio no transporte at a clula Choy et al.59 reportaram um estudo sobre o aumento da permeabilidade de frmacos nas clulas, quando intercalados em HDL de Mg e Al. Os autores escolheram para estudo o cido folnico e o metotrexato (MTX), utilizados no tratamento de cncer. O MTX apresenta uma baixa meia-vida no plasma, por isso so necessrias altas dosagens desse frmaco aumentando, assim, a probabilidade de interao com clulas no cancergenas. Os resultados obtidos indicam que o MTX intercalado teve sua eficcia aumentada na supresso do desenvolvimento das clulas cancergenas, mesmo quando administrado em doses menores e menor tempo de incubao. A intercalao do MTX em HDL provavelmente diminui a decomposio dessa molcula durante o transporte. Diminuio de efeitos colaterais de anti-inflamatrios (leses gastrointestinais) Del Arco et al.58 realizaram um estudo in vivo do material obtido pela intercalao do anti-inflamatrio indometacina em HDL de magnsio e alumnio (indometacina-HDL) comparando-o com a indometacina livre e a mistura fsica do HDL-carbonato com a indometacina. O frmaco indometacina, assim como todos os anti-inflamatrios no esteroidais no seletivos a COX-2 (enzima responsvel pela resposta inflamatria no organismo), causam muitos problemas gastrointestinais. A intercalao desses compostos em HDL pode ser de grande ajuda para contornar os seus efeitos colaterais. Os autores realizaram um experimento in vivo utilizando camundongos Swiss dos dois sexos. Aps a administrao oral das trs amostras contendo indometacina, o estmago dos ratos foi retirado e analisado atravs da utilizao de microscpio ptico para visualizar o grau e a rea de ulcerao. Os resultados mostraram danos hemorrgicos ao estmago em 88% dos ratos causados pela administrao da indometacina livre enquanto que apenas 70% sofreram esses danos quando tratados com a droga intercalada em HDL. Os pontos de ulcerao encontrados na superfcie do estmago foram cerca de 0,401 0,100% para a indometacina livre, enquanto apenas dos ratos tratados com indometacina-HDL apresentaram cerca de 0,106 0,033%, indicando o desempenho superior dos materiais intercalados. Para checar se esses resultados foram favorveis devido habilidade de proteo dada pelo HDL, foi comparado o material intercalado com a mistura fsica (HDLcarbonato + indometacina). Os resultados mostraram o decaimento

nos pontos de ulcerao para 0,22 0,037%, um valor intermedirio entre os encontrados para a indometacina livre e a intercalada. Esses resultados podem estar relacionados com a presena do HDL-carbonato na mistura fsica, que tem propriedades anticidas. Controle da distribuio intracelular (ou do compartimento subcelular alvo) atravs da morfologia Estudo recente desenvolvido por Xu et al.117 sobre o comportamento de captao de nanopartculas de HDL por diferentes clulas de mamferos, atravs do uso de indicador isocianato de fluorescena e de microscopia confocal, demonstrou que as nanopartculas aderem rapidamente superfcie celular, devido a interaes entre as partculas com potencial Zeta positivo e a membrana negativamente carregada, sendo ento imediatamente inseridas na clula. Alm disso, esse trabalho mostrou que dependendo do tamanho e da morfologia de partculas de HDL de mesma composio, alvos sub-celulares distintos so atingidos: enquanto nanopartculas na forma de placas hexagonais (hexagonal sheets) ficam retidas no citoplasma, aquelas que apresentam formas de barra (rods) so transferidas para o ncleo (Figura 9). O mesmo resultado foi obtido empregando-se diferentes clulas de mamferos.

Figura 9. Imagens de microscopia confocal do ncleo de clulas embrionrios de camundongos (NIH 3T3) aps a adio de nanopartculas em forma de barras de HDL com corante fluorescente: A - 15 min; B - 45 min; C - 90 min e D - 180 min. Reproduzido da ref.117 Copyright 2008, com permisso da Elsevier

A viabilidade celular no foi afetada pela presena dessas nanopartculas de HDL. Embora ainda pouco elucidado, o mecanismo desse processo de internalizao celular deve envolver transporte ativo das nanopartculas atravs de endossomas e, subsequentemente, para o complexo Golgi ou para lisossomos.71 Alm disso, atravs do uso de mutantes e inibidores apropriados, como clorpromazina, que bloqueiam etapas especficas no processo de endocitose celular, os estudos de Xu et al. confirmaram resultados anteriores de que a internalizao das nanopartculas de HDL ocorre prioritariamente por esse processo, mediado por clatrina. O fato da viabilidade celular para diferentes clulas no ter sido alterada em presena das nanopartculas de HDL e a insero bem sucedida de compostos fluorescentes tambm indicam um novo emprego de materiais baseados em HDL, para obteno de imagens como auxiliares de diagnsticos clnicos. Alguns trabalhos recentes merecem breves comentrios por apresentarem inovaes em relao aos anteriores. Trikeriotis e

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Ghanotakis75 relataram a sntese e a caracterizao de antibiticos intercalados em HDL. A inovao mostrada nesse artigo est na intercalao de uma espcie orgnica neutra (artigos anteriores tratavam da intercalao de frmacos aninicos). O antibitico gramicidina no possui carga. Logo, para realizar a intercalao desse material em HDL foi realizada primeiramente a incorporao dessa espcie hidrofbica em micelas de colato de sdio para, em seguida, efetuar a intercalao por troca inica usando o HDL-nitrato. A caracterizao atravs da espectroscopia eletrnica UV-vis provou a presena da gramicidina no HDL. Outro artigo aponta a possibilidade de usar partculas de HDL-carbonato encapsuladas em vesculas (de dimetro aproximado de 80 a 150 nm) para carregar drogas associadas ao HDL, uma vez que esse material inorgnico induz a formao de vesculas.122 Recentemente, Nakayama et al.123 intercalaram uma ciclodextrina aninica em HDL tambm com o objetivo de promover a liberao sustentada de droga no aninica. Nesse sentido, o medicamento prazosin, utilizado para o controle da hipertenso, foi confinado no interior das cavidades da ciclodextrina aninica. Choy et al.77 mostraram os resultados obtidos na comparao entre duas matrizes inorgnicas, ZnAl-HDL e sal bsico lamelar de zinco,124 na intercalao e desintercalao do cido indol-3-actico (IAA) utilizado em cosmticos e ingredientes dermatolgicos. De acordo com os dados de difratometria de raios X e espectroscopia vibracional no IV, o nion IAA apresenta maior interao com o sal bsico lamelar de zinco do que com o ZnAl-HDL devido coordenao do nion ao metal divalente nas lamelas da matriz. Essa interao resultou em uma quantidade maior de frmaco imobilizado e na liberao lenta do nion orgnico. Esses resultados possibilitam o desenvolvimento de uma nova matriz para o suporte e liberao de frmacos. O Nanohybrid Research Center (Coria do Sul), fundado em 2001 pelo Dr. Jin-Ho Choy, trabalha no desenvolvimento de sistemas hbridos constitudos de HDL (ou sal bsico lamelar) e espcies orgnicas de interesse para uso como drogas ou em cosmticos.125 Dois produtos patenteados esto disponibilizados para comercializao: VitabridC para liberao de vitamina C e IAA-Brid para liberao de IAA. Recentemente, Ambrogi et al.81 propuseram a imobilizao do anti-inflamatrio celecoxib (uma molcula neutra) em HDL-carbonato calcinado como um meio de evitar a cristalizao do frmaco amorfo quando armazenado para uso posterior. Quando no cristalino, a solubilidade da substncia maior, logo, uma das estratgias para aumentar a solubilidade de frmacos muito pouco solveis promover a amorfizao do slido. No estudo em questo, o HDL calcinado foi suspenso em soluo etanlica contendo o frmaco solubilizado e posteriormente a mistura foi seca a vcuo. Os testes de solubilizao das molculas orgnicas foram realizados em meio de fluido gstrico. Os resultados mostraram que em determinadas concentraes do frmaco no HDL, a cristalizao suprimida e a solubilidade aumentada nas condies avaliadas. Tammaro et al.76 publicaram um trabalho sobre possveis aplicaes do antibitico succinato de cloranfenicol intercalado em HDL na liberao sustentada transdrmica, quando incorporado em um polmero (policaprolactona) biocompatvel e biodegradvel. Segundo os autores, o efeito local da droga evita a administrao de altas doses ao paciente, diminuindo efeitos colaterais do frmaco. O hbrido incorporado ao polmero pode ser empregado em artigos cirrgicos como suturas, membranas, placas para reconstituio ssea, auxiliando na reparao e regenerao do tecido. A sntese do nano-hbrido foi realizada atravs da troca inica de nions nitrato intercalado em Mg2Al- NO3-HDL pelos nions succinato de cloranfenicol. Aps a incorporao do nano-hbrido ao polmero, foram obtidos filmes de 0,15 mm de espessura. O processo de liberao em soluo salina fisiolgica mostrou resultados interessantes, pois foi visualizada a presena de dois estgios. No estgio inicial, acontece uma rpida

liberao, na qual uma pequena frao da droga liberada; o segundo estgio, mais lento, estende-se por um longo perodo. Esse comportamento muito diferente e mais lento se comparado com as amostras nas quais o antibitico est incorporado diretamente na matriz polimrica. Para as aplicaes sugeridas pelos autores, desejvel que a liberao se prolongue por 24 h ou mesmo por dias. A absoro percutnea in vitro do anti-inflamatrio diclofenaco adsorvido (no intercalado) em hidrotalcita comercial foi investigada por Bonina et al.,84 empregando membranas de epiderme humana. A amostra que mostrou o melhor resultado de permeabilidade foi utilizada em testes in vivo na inibio de eritemas induzidos por radiao UV. Os resultados mostraram que a formulao com hidrotalcita apresenta melhor desempenho que aquela empregada para comparao (gel hidroalcolico contendo diclofenaco). HDL como suporte para aplicao em diagnstico clnico Ainda na rea relacionada medicina, outra possibilidade de aplicao dos hidrxidos duplos lamelares consiste na utilizao dos mesmos como suportes para reagentes utilizados em diagnsticos clnicos, e como biossensores. Barhoumi et al.126 publicaram um trabalho que relata o uso do material hbrido contendo urease associada matriz de HDL de zinco e alumnio como biossensor. A imobilizao da enzima foi realizada atravs do mtodo da troca inica, partindo-se da matriz Zn3Aldodecilsulfato. Os dados de difrao de raios X e espectroscopia no infravermelho indicam a obteno da enzima imobilizada no Zn3AlHDL. O material resultante foi depositado pelo mtodo spin coating sobre o detector Si/SiO2/Si3N4. A resposta do biossensor foi obtida atravs de medidas de impedncia e capacitncia, sendo observado um aumento no valor do limite mximo de intervalo dinmico da impedncia (110 mM) em relao capacitncia (5,6 mM). O valor da constante de Michaelis-Menten, calculada pelas medidas de capacitncia de acordo com Lineweaver-Burk para a enzima intercalada no HDL, da mesma ordem de grandeza da constante da urease livre. Estudos para avaliar a possvel aplicao do sistema HDL-urease como biossensor tambm foram realizados por Vial et al..127,128 Na etapa de sntese, os autores exploraram a utilizao de diferentes quantidades da biomolcula intercalada na matriz Zn3Al pelo mtodo da coprecipitao. Os difratogramas de raios X das amostras mostraram que o aumento da razo ZnAl-urease diminui a intensidade do pico basal (00l) devido perda da organizao no empilhamento das lamelas. Alm disso, segundo os autores, esse aumento intensifica as bandas, por exemplo, nC=O 1652 cm1 (amida I) e nN-H 1543 cm1(amida II), referentes enzima, confirmando maior quantidade da enzima imobilizada na regio interlamelar. Atravs das imagens de MEV foi possvel visualizar que os cristais de Zn3Al-Cl so formados por placas hexagonais, organizadas na forma de uma rosa, onde as placas so identificadas individualmente. J para o material hbrido, notou-se uma grande tendncia para a formao de filmes espessos com uma orientao preferencial. Observou-se que o aumento da razo Zn3Al-urease aumenta a densidade do filme, o que demonstra uma maior associao entre a enzima e as lamelas de [Zn3Al]. Por ltimo, a permeabilidade dos hbridos foi investigada utilizando um mtodo voltamtrico. Os resultados obtidos demonstram uma maior permeabilidade do hbrido (1,6 - 0,7 x 10-2 cm s-1) se comparada matriz ZnxAl/Cl (2,2 - 2,5 x 10-2 cm s-1) e a eletrodos modificados com a argila catinica laponita sem (2 x 10-3 cm s-1) ou na presena da urease (3 x 10-3 cm s-1). Recentemente, Forano et al.129 reportaram a imobilizao da enzima fosfatase alcalina em HDL de magnsio e alumnio por coprecipitao. O material hbrido isolado apresenta uma estrutura esponjosa interessante, constituda de macroporos que favorecem

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a difuso de molculas em direo ao centro ativo da enzima. Os testes de permeabilidade dos filmes hbridos e da atividade enzimtica foram avaliados positivamente em ensaios eletroqumicos com hidroquinona difosfato. A enzima glicose oxidase tambm foi imobilizada em HDL para avaliao como biossensor para deteco e quantificao de glicose.130 O material hbrido foi preparado a partir de uma disperso de MgAl-lactato-HDL esfoliado em gua. Uma mistura contendo o HDL esfoliado e a enzima foi depositada sobre eletrodo de carbono por casting. Os autores comparam os dados de voltametria cclica da enzima imobilizada em HDL a partir do material esfoliado com aquele obtido sem a prvia esfoliao e destacam o melhor desempenho do primeiro. Apenas a enzima depositada no eletrodo de carbono vtreo no mostra resposta nas condies empregadas no estudo. Nanocompsitos constitudos de biopolmeros intercalados em HDL de zinco e alumnio foram avaliados como sensores de ons clcio.95 Os dispositivos potenciomtricos constitudos dos nanocompsitos de alginato e carragenana incorporados em pasta de carbono ou PVC mostraram as melhores respostas. Os ons clcio interagem com as cadeias dos biopolmeros mesmo quando intercalados na matriz inorgnica. Os trabalhos reportados at o momento sugerem que no h a intercalao da enzima no HDL, mas a sua adsoro, uma vez que o tamanho e a conformao desses biopolmeros no permitem a intercalao da maneira usual (troca dos contra ons do sal de partida). O processo de adsoro est principalmente baseado na interao entre partculas de diferentes cargas eltricas.127,130 Nos artigos acima reportados, os autores comparam o desempenho das enzimas associadas a HDL com biossensores construdos com outros materiais inorgnicos (nanotubos de carbono e nanopartculas de Au ou Fe3O4, por exemplo) e orgnicos (polipirrol). Os estudos mostram que o papel da matriz inorgnica no se restringe preservao ou proteo da enzima, mas adiciona novas funcionalidades contraparte bio-orgnica. HDL como carregadores de substncias de interesse na agricultura e na rea de alimentos Recentemente, Cornejo et al.131 publicaram um trabalho de reviso que trata da interao de pesticidas com argilas catinicas e hidrxidos duplos lamelares. A grande maioria dos trabalhos sobre esse assunto enfoca a alta afinidade dos HDL com os pesticidas inicos com vistas remoo dessas espcies da gua e do solo contaminados, bem como a modificao da superfcie dessa matriz com o on orgnico apropriado pode aumentar o seu desempenho na remoo de pesticidas neutros. Alguns trabalhos comeam a tratar da possibilidade de uso dos HDL como reservatrios para a liberao controlada de pesticidas com o objetivo de diminuir o impacto ambiental, diminuindo a ocorrncia de processos indesejveis como volatilizao, transporte e lixiviao. Lakraimi et al.132 reportam trabalho sobre a intercalao do pesticida 2,4-diclorofenxiacetato (2,4-D) em Zn2Al-Cl-HDL atravs do mtodo da troca inica. Os autores investigaram parmetros de sntese como a concentrao molar do nion em soluo (2,4-D/ Zn2Al-Cl), tempo de agitao e temperatura para avaliarem a eficcia da troca inica dos ons cloreto pelo 2,4-D. A intercalao do 2,4D foi evidenciada pelo aumento no espaamento basal do material que passou de 0,78 nm (ons cloreto) para 1,91 nm (ons 2,4-D). A estabilidade trmica do orgnico imobilizado na matriz inorgnica (temperatura de decomposio ocorre acima de 300 C) foi favorecida em relao espcie livre. Valim et al.115 reportaram um estudo em que trs diferentes herbicidas, 2,4-D, cido 4-cloro-2-metil fenxi actico (MCPA) e cido 4-amino-3,5,6-tricloropiridina-2-carboxlico (picloran),

foram intercalados em hidrxidos duplos lamelares de magnsio e alumnio por trs diferentes mtodos: coprecipitao, troca inica e por regenerao de Mg2Al-CO3-HDL calcinado. Os produtos obtidos foram caracterizados e ensaios de liberao foram realizados pelos mtodos de batelada e por lixiviao em colunas de solos. Todos os herbicidas intercalados apresentaram liberao em gua mais lenta do que a dos mesmos livres e foram quase que totalmente liberados pelo mtodo de batelada. Comparados com os herbicidas livres, os materiais intercalados aplicados em colunas de solos resultaram em reduo da concentrao mxima de herbicida nos lixiviados e levaram retardao da lixiviao do herbicida. Tambm foram realizados ensaios da atividade dos herbicidas em plantas, que indicaram que os materiais intercalados apresentaram a mesma eficcia que os herbicidas livres e, portanto, uma potencial aplicabilidade desses materiais como suporte em formulaes para liberao sustentada de herbicidas. Com respeito utilizao de HDL na agricultura, outros hbridos, alm daqueles com pesticidas, foram reportados. Bin Hussein et al.113 publicaram um trabalho sobre a imobilizao de cido -naftalenoactico (NAA), um agente regulador de crescimento vegetal, em HDL de Zn e Al atravs do mtodo da troca inica. A intercalao do regulador foi confirmada atravs dos dados da distncia interlamelar do material que foi aumentada de 0,88 nm (ons nitrato) para 2,05 nm (nion -naftalenoacetato). O estudo da liberao em gua do agente regulador intercalado na matriz inorgnica foi realizado em solues de vrios pHs e mostrou que a taxa de liberao do nion dependente do pH. A maior porcentagem de NAA liberado foi encontrada em meios que so altamente cido ou altamente bsico. Em uma soluo com pH=1, a liberao do nion da lamela foi seguida pela formao de uma nova fase, do ZnO. Porm, em pH neutro ou altamente alcalino, a liberao no destruiu a estrutura lamelar pelo menos at 7 dias. Alm disso, foi observado que a liberao do NAA apresenta cintica de primeira ordem do incio da reao at 8 h, com uma liberao em soluo aquosa de 23, 16 e 22% de NAA para pH inicial igual a 1, 7 e 14, respectivamente. HDL contendo ons nitrato so comumente preparados como intermedirios de sntese, uma vez que sofrem reao de troca inica com certa facilidade quando comparados com outros nions simples intercalados. Olanrewaju et al.133 propem o uso desses materiais contendo nitrato como fertilizantes de liberao lenta. O estudo praticamente simples compreendeu a sntese de MgAl-NO3-HDL de diferentes densidades de cargas lamelares (Mg:Al = 2:1; 2,5:1 e 3:1), sob diferentes temperaturas e na presena da soluo de amnia. Tambm foi realizada a sntese, mantendo-se todos os parmetros constantes, trocando-se a base amnia por hidrxido de sdio. Com o objetivo de aumentar a estabilidade de espcies de consumo humano em matrizes biocompatveis, Choy et al.134 publicaram um trabalho sobre a sntese e caracterizao de corantes comestveis, tais como Allura Red AC (AR) C18H14N2O8S22-, Sunset Yellow FCF (SY) C16H10N2O7S22- e Brilliant Blue FCF (BB) C37H34N2O9S32- imobilizados em Zn3Al-HDL. Os valores dos espaamentos basais do AR, SY e BB (2,40; 2,03 e 2,43 nm, respectivamente) confirmam a intercalao dos ons orgnicos. Os dados de anlise trmica mostram que a temperatura de decomposio das espcies orgnicas nos novos materiais ocorre a partir de 400 C, indicando o aumento da estabilidade trmica se comparados aos sais dos corantes. Esses novos sistemas obtidos baseados na insero de orgnicos em hidrxidos duplos lamelares podem ser teis para vrias aplicaes na indstria alimentcia. Estudos de modelagem molecular A aplicao de tcnicas de simulao computacional ao estudo de argilas catinicas e aninicas tornou-se um aliado importante para as tcnicas instrumentais comumente usadas na caracterizao

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desses materiais.135 A quantidade de informao que pode ser obtida por simulao continua crescendo e os estudos de mecnica quntica prometem revelar novos e inesperados fenmenos. Na rea de HDL intercalados com espcies de interesse medicinal, apenas um trabalho foi reportado at o momento empregando a modelagem computacional para auxiliar no entendimento da interao entre as contrapartes orgnica e inorgnica e seus arranjos espaciais. Mohanambe e Vasudevan66 reportaram a intercalao de trs anti-inflamatrios no-esteroidais, ibuprofeno, diclofenaco e indometacina, em MgAl-HDL. As tcnicas de DRX, IV, Raman e RMN foram utilizadas para caracterizar esses materiais, enquanto que a simulao computacional foi utilizada para obter informaes sobre o arranjo espacial das espcies confinadas entre as camadas positivas do HDL. Segundo dados de DRX, todas as amostras intercaladas com os frmacos apresentam um arranjo de bicamada na regio interlamelar. Os resultados computacionais indicam que a estrutura do ibuprofeno intercalado se manteve a mesma da molcula livre, mas a imobilizao do diclofenaco e indometacina provoca modificaes em suas estruturas quando na regio interlamelar. Segundo os autores, essas diferenas se devem interao eletrosttica entre o tomo de cloro presente nas espcies orgnicas e as cargas positivas das lamelas. PERSPECTIVAS E DESAFIOS A possibilidade de se controlar a morfologia das nanopartculas de HDL por meio de modificaes nos procedimentos de sntese, vislumbrada recentemente, representa mais uma vantagem para seu uso como carregador de frmacos e de outros compostos de interesse medicinal, uma vez que dessa forma se pode controlar sua distribuio dentro da clula priorizando sua entrada no ncleo ou sua permanncia no citoplasma e, portanto, como veculo para atingir alvos especficos. Com isto, tm-se estratgias farmacolgicas mais eficientes, com menor efeito colateral, abrindo-se novas perspectivas para o uso desses nanomateriais em biomedicina celular. Sabe-se que a principal desvantagem das partculas inorgnicas em relao aos carregadores virais o fato das primeiras sofrerem degradao no endossoma, no permitindo alta eficincia na transfeco. Adicionalmente, evidncias obtidas sobre o mecanismo de veiculao intracelular dessas nanopartculas, que parece ocorrer prioritariamente por um processo de endocitose mediada por clatrina, devem permitir um melhor planejamento para obteno de HDL com propriedades apropriadas e ajustadas a cada uso. Alguns estudos sobre a utilizao de nanopartculas inorgnicas para o transporte de DNA para o interior das clulas empregam sistemas contendo mais de um tipo de material inorgnico como, por exemplo, partculas de Fe2O3 recobertas com slica funcionalizada ou mesmo sistemas ternrios com Fe2O3, slica e uma camada externa de ouro. Exemplos desse tipo com HDL ainda so raros, mas poderiam ser mais explorados, de modo a aumentar o desempenho das partculas inorgnicas tanto para a rea de liberao sustentada quanto de diagnstico clnico. O emprego de HDL por via oral praticamente bem documentado, mas para uso intravenoso, so ainda necessrios estudos in vitro e in vivo mais aprofundados para conhecer sua citotoxicidade e rotas de movimentao, sua biodistribuio e seus mecanismos de eliminao no organismo. Com relao a outras partculas inorgnicas que vm sendo avaliadas para uso clnico, os HDL mostram vantagens que devem ser consideradas com ateno em trabalhos futuros. AGRADECIMENTOS FAPESP e ao CNPq pelo apoio financeiro e pelas bolsas concedidas.

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS CD Dicrosmo Circular CellTiter-Glo Ensaio de viabilidade celular que quantifica os nveis de ATP celular, como medida da viabilidade celular, usando a produo de luz catalisada por luciferina-luciferase CHN - Anlise qumica dos elementos C, H e N CHNS - Anlise qumica dos elementos C, H, N e S CLAE Cromatografia lquida de alta eficincia DRX - Difratometria de raios X DSC - Calorimetria exploratria diferencial DTA Anlise trmica diferencial DTG - Termogravimetria derivada (curva referente primeira derivada da curva TG) EDX Energia dispersiva de raios X FT-Raman - Espectroscopia Raman com transformada de Fourier ICP-AES - Espectroscopia de Emisso Atmica IV - Espectroscopia vibracional no infravermelho LAMMPS (Large-Scale Atomistic/Molecular Massively Parallel Simulator) - programa de simulao de dinmica molecular LSCM (Laser Scanning Confocal Microscopy) - Microscopia confocal de varredura a laser MET Microscopia eletrnica de transmisso MS - Espectrometria de Massa RMN Ressonncia Magntica Nuclear TG - Termogravimetria TG-DSC-MS - Termogravimetria e calorimetria exploratria diferencial acopladas espectrometria de massas UV/Vis - Espectroscopia eletrnica na regio ultravioleta e visvel XPS Espectroscopia de fotoemisso de raios X REFERNCIAS E NOTAS
1. Xu, Z. P.; Zeng, Q. H.; Lu, G. Q.; Yu, A. B.; Chem. Eng. Sci. 2006, 61, 1027. 2. Sanvicens, N.; Marco, M. P.; Trends. Biotechnol. 2008, 26, 425. 3. Sokolova, V.; Epple, M.; Angew. Chem., Int. Ed. 2008, 47, 1382. 4. Corr, S. A.; Rakovich, Y. P.; Gunko, Y. K.; Nanoscale. Res. Lett. 2008, 3, 87. 5. Hild, W. A.; Breunig, M.; Goepferich, A.; Eur. J. Pharm. Biopharm. 2008, 68, 153. 6. Malmsten, M.; Soft Matter 2006, 2, 760. 7. Drotleff, S.; Lungwitz, U.; Breunig, M.; Dennis, A.; Blunk, T.; Tessmar J.; Gpferich, A.; Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004, 58, 385. 8. Son, S. J.; Bai, X.; Lee, S. B.; Drug Discov. Today 2007, 12, 650. 9. Tong, W.; Gao, C.; Mhwal, H.; Macromolecules 2006, 39, 335. 10. Skrabalak, S. E.; Chen, J.; Au, L.; Lu, X.; Li, X.; Xia, Y.; Adv. Mater. 2007, 19, 3177. 11. Daniel, M. C.; Astruc, D.; Chem. Rev. 2004, 104, 293. 12. Gu, Z.; Thomas, A. C.; Xu, Z. P.; Campbell, J. H.; Lu, G. Q.; Chem. Mater. 2008, 20, 3715. 13. Sun, B.; Ranganathan, B.; Feng, S. S.; Biomaterials 2008, 29, 475. 14. Chatterjee, D. K.; Zhang, Y.; Sci. Technol. Adv. Mater. 2007, 8, 131. 15. Jain, K. K.; Trends. Biotechnol. 2006, 24, 143. 16. Fukumori, Y.; Ichikawa, H.; Adv. Powder Technol. 2006, 17, 1. 17. Biodisponibilidade uma medida da porcentagem da dose administrada da substncia com atividade teraputica que alcana o sistema de circulao e est disponvel no local de ao. 18. Davis, M. E.; Chen, Z.; Shin, D. M.; Nature Rev. 2008, 7, 771. 19. De Roy, A.; Forano, C.; Besse, J. P.; Abstracts of Papers of the Am. Chem. Soc. 1991, 202, 127. 20. Cavani, F.; Trifiro, F.; Vaccari, A.; Catal. Today 1991, 11, 173. 21. Vaccari, A.; Catal. Today 1998, 41, 53.

170

Cunha et al.

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22. Vaccari, A.; Appl. Clay Sci. 1995, 10, 1. 23. Crepaldi, E. L.; Valim, J. B.; Quim. Nova 1998, 21, 300. 24. Pinnavaia, T. J.; Mater. Chem. 1995, 245, 283. 25. Evans, D. G.; Duan, X.; Chem. Commun. 2006, 5, 485. 26. De Roy, A.; Forano C.; El Maki K.; Besse J. P.Em Anionic Clays: Trends in Pillaring Chemistry; Ocelli, M.; Robson, H. E., eds.; Van Nostrand Reinhold: New York, 1992, vol. 2, cap. 7. 27. Trifir, F.; Vaccari, A. Em Hydrotalcite-like Anionic Clays (Layered Double Hydroxides); Alberti, G.; Bein, T., eds.; Wiley: New York, 1996, cap. 8. 28. Braterman, P. S.; Xu, Z. P.; Yarberry, F. Em Handbook of Layered Materials; Auerbach, S. M.; Carrado, K. A.; Dutta, P. K., eds.; Wiley: New York, 2004, cap. 8. 29. Constantino, V. R. L.; Pinnavaia, T. J.; Inorg. Chem. 1995, 34, 883. 30. Valim, J. B.; Crepaldi, E. L.; Pavan, P. C.; J. Mater. Chem. 2000, 10, 1337. 31. Sels, B. F.; De Vos, D. E.; Jacobs, P. A.; Catal. Rev. 2001, 43, 443. 32. Rives, V.; Ulibarri, M. A.; Coord. Chem. Rev. 1999, 181, 61. 33. Ballarin, B.; Gazzano, M.; Seeber, R.; Tonelli, D.; Vaccari, A.; J. Eletroanal. Chem. 1998, 445, 27. 34. Therias, S.; Mousty, C.; Appl. Clay Sci. 1995, 10, 147. 35. Barbosa, C. A. S.; Ferreira, A. M. C.; Constantino, V. R. L.; Eur. J. Inorg. Chem. 2005, 8, 1577. 36. Bonifcio, L. S.; Gordijo, C. R.; Constantino, V. R. L.; Silva, D. O.; Kiyohara, P. K.; Araki, K.; Toma, H. E.; J. Nanosci. Nanotechnol. 2008, 8, 274. 37. Marangoni, R.; Taviot-Gueho, C.; Illaik, A.; Wypych, F.; Leroux, F.; J. Colloid Interf. Sci. 2008, 326, 366. 38. Wypych, F.; Bail, A.; Halma, M.; Nakagaki, S.; J. Catal. 2005, 234, 431. 39. Ferreira, O. P.; Moraes, S. G.; Duran, N.; Cornejo, L.; Alves, O. L.; Chemosphere 2006, 62, 80. 40. Iglesias, A. H.; Ferreira, O. P.; Gouveia, D. X.; Souza-Filho, A. G.; Paiva, J. A.C.; Mendes-Filho, J.; Alves, O. L.; J. Solid State Chem. 2005, 178, 142. 41. Cosnier, S.; Mousty, C.; Gondran. C.; Lepellec, A.; Mater. Sci. Eng. C-Bio. S. 2006, 26, 442. 42. Oh, J. M.; Park, M.; Kim, S. T.; Jung, J. Y.; Kang, Y. G.; Choy, J. H.; J. Phys. Chem. Solids 2006, 67, 1024. 43. Zhang, H.; Zou, K.; Guo, S. H.; Duan, X.; J. Solid State Chem. 2006, 179, 1792. 44. Choy, J. H.; Sc. Tech. Hybrid Mat. Solid State Phenom. 2006, 111, 1. 45. Serna, C. J.; White, J. L.; Hem, S. L.; J. Pharm. Sci-US. 1978, 67, 324. 46. Peterson, C. L.; Perry, D. L.; Masood, H.; Lin, H.; White, J. L.; Hem, S. L.; Fritsch, C.; Haeusler, F.; Pharm. Res. 1993, 10, 998. 47. Miederer, S. E.; Wirtz, M.; Fladung, B.; Chin. J. Digestive Diseases 2003, 4, 140. 48. Del Hoyo, C.; Appl. Clay Sci. 2007, 36, 103. 49. Choy, J. H.; Choi, S. J.; Oh, J. M.; Park, T.; Appl. Clay Sci. 2007, 36, 122. 50. Khan, A. I.; Lei, L. X.; Norquist, A. J.; OHare, D.; Chem. Comm. 2001, 22, 2342. 51. Ambrogi, V.; Fardella, G.; Grandolini, G.; Perioli, L.; Int. J. Pharm. 2001, 220, 23. 52. Tronto, J.; Crepaldi, E. L.; Pavan, P. C.; Paula, C. C.; Valim, J. B.; Mol. Cryst. Liq. Cryst. 2001, 356, 227. 53. Ambrogi, V.; Fardella, G.; Grandolini, G.; Nocchetti, M.; Perioli, L.; J. Pharm. Sci. 2003, 92, 1407. 54. Nakayama, H.; Takeshita, K.; Tsuhako M.; J. Pharm. Sci. 2003, 92, 2419. 55. Tronto, J.; Reis, M. J.; Silvrio, F.; Balbo, V. R.; Marchetti, J. M.; Valim, J. B.; J. Phys. Chem. Solids 2004, 65, 475. 56. Bin Hussein, M. Z.; Long, C. W.; Mater. Chem. Phys. 2004, 85, 427.

57. Del Arco, M.; Gutirrez, S.; Martn, C.; Rives, V.; Rocha, J.; J. Solid State Chem. 2004, 177, 3954. 58. Del Arco, M.; Cebadera, E.; Gutierrez, S.; Martn, C.; Montero, M. J.; Rives, V.; Rocha, J.; Sevilla, M. A.; J. Pharm. Sci. 2004, 93, 1649. 59. Choy, J. H.; Jung, J. S.; Oh, J. M.; Park, M.; Jeong, J.; Kang, Y. K.; Han, O. J.; Biomaterials 2004, 25, 3059. 60. Dupin, G. C.; Martinez, H.; Guimon, C.; Dumitriu, E.; Fechete, I.; Appl. Clay Sci. 2004, 27, 95. 61. Li, B. X.; He, J.; Evans, D. G.; Duan, X.; Appl. Clay Sci. 2004, 27, 199. 62. Li, B.; He, J.; Evans, D. V.; Duan, X.; Int. J. Pharm. 2004, 287, 89. 63. Tyner, K. M.; Schiffman, S. R.; Giannelis, E. P.; J. Controlled Release 2004, 95, 501. 64. Wei, M.; Shi, S. X.; Wang, J.; Li, Y.; Duan, X.; J. Solid State Chem. 2004, 177, 253. 65. Gordijo, C. R.; Barbosa, C. A. S.; Ferreira, A. M. C.; Constantino, V. R. L.; Silva, D. O.; J. Pharm. Sci. 2005, 94, 1135. 66. Mohanambe, L.; Vasudevan, S.; J. Phys. Chem. B. 2005, 109, 15651. 67. Schoubben, A.; Blasi, P.; Giovagnoli, S.; Nocchetti, M.; Ricci, M.; Perioli, L.; Rossi, C.; Pharm. Res. 2005, 23, 604. 68. Wang, Z.; Wang, B.; Gao, L.; Xu, L.; J. Solid State Chem. 2005, 178, 736. 69. Li, W. Z.; Lu, J.; Chen, J. S.; Li, G. D.; Jiang, Y. S.; Li, L. S.; Huang, B. Q.; J. Chem. Technol. Biotechnol. 2006, 81, 89. 70. Yang, Q. Z.; Yang, J.; Zhang, C. K.; Int. J. Pharm. 2006, 326, 148. 71. Oh, J. M.; Choi, S. J.; Kim, S. T.; Choy, J. H.; Bioconjugate Chem. 2006, 17, 1411. 72. Li, S. P; Colloids Surf. A. 2006, 290, 56. 73. Del Arco, M.; Fernandez, A.; Martin, C.; Rives, V.; Appl. Clay Sci. 2007, 36, 133. 74. Kantonis, G.; Trikeriotis M.; Ghanotakis, D. F.; J. Photochem. Photobiol. A 2007, 185, 62. 75. Trikeriotis, M.; Ghanotakis, D. F.; Int. J. Pharm. 2007, 332, 176. 76. Tammaro, L.; Costantino, U.; Bolognese, A.; Sammartino, G.; Marenzi, G.; Calignano, A.; Tete, S.; Mastrangelo, F.; Califano, L.; Vittoria, V.; Int. J. Antimicrob. Ag. 2007, 29, 417. 77. Yang, J. H.; Han, Y. S.; Park, M.; Park, T.; Hwang, S. J.; Choy, J. H.; Chem. Mater. 2007, 19, 2679. 78. Xue, Y. H.; Zhang, R.; Sun, X. Y.; Wang, S. L.; J. Mater. Sci. Mater. Med. 2007, 19, 1197. 79. Hou, W. G.; Jin, Z. L.; Colloid Polym. Sci. 2007, 285, 1449. 80. Ni, Z. M.; Xia, S. J.; Wang, L. G.; Xing, F. F.; Pan, G. X.; Hu, J.; Chem. J. Chinese U. 2007, 28, 1214. 81. Ambrogi, V.; Perioli, L.; Marmottini, F.; Rossi, C.; Eur. J. Pharm. Biopharm. 2007, 66, 253. 82. Cunha, V. R. R.; Dissertao de Mestrado, Universidade de So Paulo, Brasil, 2007. 83. Ni, Z.; Xing, F.; Wang, P.; Cao, G.; Appl. Clay Sci. 2008, 40, 72. 84. Bonina, F. P.; Giannossi, M. L.; Medici, L.; Puglia, C.; Summa, V.; Tateo, F.; Appl. Clay Sci. 2008, 41, 165. 85. Sun, Y.; Zhou, Y.; Ye, X.; Chen, J.; Wang, Z.; Mater. Lett. 2008, 62, 2943. 86. Choi, S. J.; Oh, J. M.; Choy, J. H.; J. Phys. Chem. Solids 2008, 69, 1528. 87. Gu, Z.; Thomas, A. C.; Xu, Z. P.; Campbell, J. H.; Lu, G. Q.; Chem. Mater. 2008, 20, 3715. 88. Del Arco, M.; Fernandez, A.; Martin, C.; Sayalero, M. L.; Rives, V.; Clay Miner. 2008, 43, 255. 89. Aisawa, S.; Yasutake, A.; Takahashi, S.; Hirahara, H.; Narita, E.; J. Nanosci. Nanotechnol. 2008, 8, 428. 90. Del Arco, M.; Fernandez, A.; Martin, C.; Rives, V.; Appl. Clay Sci. 2009, 42, 3. 91. Gunawan, P.; Xu, R.; J. Pharm. Sci. 2008, 97, 4367. 92. Liu, C.; Hou, W.; Li, L.; Li, Y.; Liu, S.; J. Solid State Chem. 2008, 181, 1792.

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Hidrxidos duplos lamelares

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93. Wei, M.; Pu, M.; Guo, J.; Han, J.; Li, F.; He, J.; Evans, D. G.; Duan, X.; Chem. Mater. 2008, 20, 5169. 94. Xia, S.-J.; Ni, Z.-M.; Xu, Q.; Hu, B.-X.; Hu, J.; J. Solid State Chem. 2008, 181, 2610. 95. Darder, M.; Blanco, M. L.; Aranda, P.; Leroux, F.; Hitzky, E. R.; Chem. Mater. 2005, 17, 1969. 96. Whilton, N. Y.; Vickers, P. J.; Mann, S.; J. Mater. Chem. 1997, 7, 1623. 97. OHare, D. M.; WO 2002/ 47729 2002. 98. OHare, D. M.; US pat. 0052849 2004. 99. Choy, J. H.; Park, T.; Kim, S. T.; Son, Y. H.; WO 2006/ 091009 2006. 100. Marenzi, G.; Bolognese, A.; Califano, L.; Calignano, A.; Costantino, U.; Sammartino, G.; Vittoria, V.; WO 2007/ 010584 2007. 101. Stockel; R. F.; US pat. 0013893 2006. 102. Slaghek, T. M.; Batenburg, L. F.; Fischer, H. R.; WO 2007/ 067043 2007. 103. Choy, J. H.; Kwak, S. Y.; Park, J. S.; Jeong, Y. J.; Portier, J.; J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 1399. 104. Choy J. H.; Kwak, S. Y.; Jeong, Y. J.; Park, J. S.; Angew. Chem., Int. Ed. 2000, 39, 4042. 105. Choy, J. H.; Kwak, S. Y.; Park, J. S.; Jeong, Y. J.; J. Mater. Chem. 2001, 11, 1671. 106. Kwak, S. Y.; Jeong, Y. J.; Park, J. S.; Choy, J. H.; Solid State Ionics 2002, 151, 229. 107. Choy, J. H.; Oh, J. M.; Park, M.; Sohn, K. M.; Kim, J. W.; Adv. Mater. 2004, 16, 1181. 108. Desigaux, L.; Belkacem, M. B.; Richard, P.; Cellier, J.; Leone, P.; Cario, L.; Leroux, F.; Taviot-Gueho, C.; Pitard, B.; Nano Lett. 2006, 6, 199. 109. Oh, J. M.; Kwak, S. Y.; Choy, J. H.; J. Phys. Chem. Solids 2006, 67, 1028. 110. Thyveetil, M. A.; Coveney, P. V.; Greenwell, H. C.; Suter, J. L.; J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 12485. 111. Thyveetil, M. A.; Coveney, P. V.; Greenwell, H. C.; Suter, J. L.; J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 4742. 112. Tyner, K. M.; Roberson, M. S.; Berghorn, K. A.; Li, L.; Gilmour. Jr, R. F.; Batt, C. A.; Giannelis, E. P.; J. Controlled Release 2008, 100, 399. 113. Bin Hussein, M. Z.; Zainal, Z.; Yahaya, A. H.; Foo, D. W. V.; J. Con trolled Release 2002, 82, 417. 114. Nakayama, H.; Wada, N.; Tsuhako, M.; Int. J. Pharm. 2004, 269, 469. 115. Cardoso, L. P.; Celis, R.; Cornejo, J.; Valim, J. B.; J. Agric. Food Chem. 2006, 54, 5968. 116. Voet, D.; Voet, J. G.; Biochemistry, J. Wiley: New York, 1990. 117 . Xu, Z. P.; Niebert, M.; Porazik, K.; Walker, T. L.; Cooper, H. M.; Middelberg, A. P. J.; Gray, P. P.; Bartlett, P. F.; Lu, G. Q.; J. Controlled Release 2008, 130, 86

118. Kwak, S. Y.; Kriven, W. M.; Wallig, M. A.; Choy, J. H.; Biomaterials 2004, 25, 5995. 119. Park, T.; Choy, J. H.; Oh, J. M.; Jung, J. S.; WO 2006/ 129893 2006. 120. Choi, S. J.; Oh, J. M.; Park, T.; Choy, J. H.; J. Nanosci. Nanotechnol. 2007, 7, 4017. 121. Tronto, J.; Cardoso, L. P.; Marchetti, J. M.; Bentley, M. V. B.; Valim, J. B.; Mol. Cryst. Liq. Cryst. 2003, 390, 79. 122. Du, Na; Hou, W.-G.; Song, S.-E.; J. Phys. Chem. B 2007, 111, 13909. 123. Nakayama, H.; Kuwano, K.; Tsuhako, M.; J. Phys. Chem. Solids 2008, 69, 1552. 124. Arizaga, G. G. C.; Satyanarayana, K. G., Wypych, F.; Solid State Ionics 2007, 178, 1143. Os Sais Bsicos Lamelares (SBL) so slidos com estrutura lamelar, tendo em comum com os HDL o fato que ambos apresentam camadas do tipo da brucita, Mg(OH) 2, formadas por octaedros de M(OH)6 compartilhando arestas, com cargas residuais positivas. No caso do SBL de zinco, a estrutura das lamelas formada apenas por ctions Zn, apresentando vacncias em stios octadricos, e a compensao de cargas realizada pela presena de grupamentos aninicos completando a coordenao tetradrica do metal divalente. Nesses ltimos, os tetraedros so localizados fora da camada do tipo da brucita, acima e abaixo das lacunas octadricas. 125. http://www.nanohybrid.com, acessada em Outubro 2008. 126. Barhoumi, H.; Maaref, A.; Rammah, M.; Martelet, C.; Jaffrezic, N.; Mousty, C.; Vial, S.; Forano, C.; Mater. Sci. Eng. C-Bio. S. 2006, 26, 328. 127. Vial, S.; Forano, C.; Shan, D.; Mousty, C.; Barhoumi, H.; Martelet, C.; Jaffrezic, N.; Mater. Sci. Eng. C-Bio. S. 2006, 26, 387. 128. Vial, S.; Prevot, V.; Leroux, F.; Forano, C; Microporous Mesoporous Mater. 2008, 107, 190. 129. Geraud, E.; Prevot, V.; Forano, C.; Mousty, C.; Chem. Commun. 2008, 13, 1554. 130. Zhang, Y.; Chen, X.; Wang, J.; Yang, W.; Electrochem. Solid State Lett. 2008, 11, 19. 131. Cornejo, J.; Celis, R.; Pavlovic, I.; Ulibarri, M. A.; Clay Miner. 2008, 43, 155. 132. Lakraimi, M.; Legrouri, A.; Barroug, A.; De Roy, A.; Besse, J. P.; J. Mater. Chem. 2000, 10, 1007. 133. Olanrewaju, J.; Newalkar, B. L.; Mancino, C.; Komarneni, S.; Mater. Lett. 2000, 45, 307. 134. Choy, J. H.; Kimb, Y. K.; Sona, Y. H.; Choy, Y. B.; Oha, J. M.; Junga, H.; Hwang, S. J.; J. Phys. Chem. Solids 2008, 69, 1547. 135. Greenwell, H. C.; Jones, W.; Coveney, P. V.; Stackhouse, S.; J. Mater. Chem. 2006, 16, 708.