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SIGNIFICADO CLNICO A sfilis uma doena venrea causada pelo Treponema pallidum, que possui a capacidade de invadir as mucosas intatas ou a pele em reas de abraso. O contato sexual a forma mais comum de transmisso. A deteco e tratamento da doena em seus estgios iniciais fundamental afim de evitar complicaes graves como a sfilis cardiovascular, a neurosfilis e a sfilis congnita. O diagnstico desta doena sofre a carncia de um mtodo para cultivar o microrganismo em meios de laboratrio e a dificuldade para detect-lo nos estgios da doena onde no se observam leses epidrmicas. Apesar disso, desde o incio da infeco aparecem no soro do indivduo infectado certas substncias denominadas "reaginas" que reagem com antgenos de cardiolipina, lecitina e colesterol. Estas reaginas juntamente com os sinais clnicos so os procedimentos mais rpidos e teis disponveis para o diagnstico da sfilis. FUNDAMENTOS DO MTODO As "reaginas" que se encontram presentes em indivduos infectados por T. pallidum, so detectados no soro pela reao com um antgeno cardiolipnico purificado e estabilizado. Se a amostra contm reagina esta se unir ao antgeno produzindo uma floculao visvel ao microscpio. As reaes inespecficas so evitadas com o emprego de antgeno altamente purificado e a adio de cloreto de colina, caracterstica da tcnica USR (Unheated Serum Reagin), na qual no necessrio inativar a amostra. REAGENTES FORNECIDOS A. Reagente A: suspenso aquosa de antgeno de cardiolipina e lecitina purificados, em Tampo fosfatos com cloreto de colina e EDTA, de acordo com as indicaes da O.M.S. REAGENTES NO FORNECIDOS - Soluo fisiolgica (para realizar a prova semiquantitativa). - Soluo de cloreto de sdio 10 g/dl (para realizar a prova em lquido cefalorraquidiano). ESTABILIDADE E INSTRUES DE ARMAZENAMENTO Reagente A: estvel sob refrigerao (2-10oC) at a data de vencimento indicada na embalagem. No congelar. INSTRUES DE USO Reagente A: pronto para uso. Agitar antes da execuo da prova.

V.D.R.L. test
Suspenso antignica estabilizada para realizar a prova VDRL modificada (USR) de deteco de sfilis PRECAUES O Reagente A para uso diagnstico "in vitro". Todas as amostras de pacientes devem ser manipuladas como se tratando de material infectante. Utilizar os reagentes observando as precaues habituais de trabalho no laboratrio de anlises clnicas. Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas conforme regulao local vigente. MATERIAL NECESSRIO 1- Fornecido - 1 conta-gota 2- No Fornecido - Agitador rotatrio, ajustvel a 180 r.p.m. - Placa de vidro transparente com setores de aproximadamente 14 mm de dimetro cada um. - Micropipetas capazes de medir os volumes indicados. - Microscpio AMOSTRAS Soro, plasma ou lquido cefalorraquidiano (LCR) a) Coleta: obter da maneira usual. No inativar. b) Aditivos: no so necessrios para soro ou LCR. Se a prova for realizada com plasma, este poder ser obtido empregando heparina, EDTA ou oxalato de sdio como anticoagulantes. c) Substncias interferentes conhecidas: hemlise ou hiperlipemia, podem ocasionar resultados errneos. d) Estabilidade e instrues de armazenamento: os soros no processados imediatamente podem ser conservados at uma semana sob refrigerao (2-10oC). O plasma pode ser empregado at 24 horas aps sua extrao. PROCEDIMENTO Tanto os reagentes como as amostras devem estar a temperatura ambiente antes da realizao da prova. I- PROVA QUALITATIVA EM SORO OU PLASMA Em cada um dos setores delimitados da placa colocar: Amostra Com o conta-gota fornecido colocar: Reagente A 1 gota Agitar horizontalmente a placa a 180 r.p.m. durante 4 50 ul

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minutos. Observar imediatamente no microscpio com pouco aumento (60 a 100 X). II- PROVA SEMIQUANTITATIVA EM SORO OU PLASMA Preparar diluies da amostra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 e 1:32, com soluo fisiolgica e realizar para cada diluio a prova como se descreve no item I. III- PROVA QUALITATIVA PARA LCR Diluir o Reagente A 1:2 com soluo de cloreto de sdio 10 g/dl. Utilizar durante as 2 horas posteriores sua preparao. Em cada setor delimitado da placa colocar: Amostra Com agulha calibre 6 adicionar: Antgeno diludo 1 gota (10 ul) Misturar bem e agitar a placa em forma horizontal durante 8 minutos a 180 rpm. Ler os resultados em microscpio com pouco aumento (60 a 100 X). INTERPRETAO DOS RESULTADOS Reativo: presena de floculao. No reativo: ausncia completa de floculao. Prova semiquantitativa: o ttulo dado pelo inverso da ltima diluio que se observar reativa. Ler atentamente LIMITAES DO PROCEDIMENTO. MTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE Para controlar a qualidade do sistema processar um Controle Positivo (soro seguramente reativo) e um Controle Negativo (soro seguramente no reativo) utilizando-os da mesma forma que as amostras. LIMITAES DO PROCEDIMENTO Ver Substncias Interferentes conhecidas em AMOSTRA. Resultados falsamente positivos podem ser observados em indivduos com quadros patolgicos diversos como: hepatite, gripe, brucelose, lepra, malria, asma, tuberculose, cncer, diabetes e doenas autoimunes. Estes casos no so muitos comuns e geralmente apresentam reaes com ttulos baixos e um histrico clnico que no coincide com as caractersticas da sfilis. Por isso imprescindvel que frente a toda prova qualitativa reativa seja realizada a prova semiquantitativa. Resultados falsamente negativos podem ser observados quando se apresenta o fenmeno da prozona. Por este motivo recomendvel repetir a prova com soro diludo 1:5 em soluo fisiolgica, para conferir o resultado. Se nessa condio for observada floculao, a amostra reativa. Apesar das vantagens desse mtodo, seus resultados, como qualquer prova sorolgica somente constitui um dado auxiliar no diagnstico e deve ser comparado com o histrico clnico do paciente. DESEMPENHO Depois de realizar 2140 amostras de um hospital, foram en50 ul

saiadas utilizando V.D.R.L. test e imunofluorescncia como mtodo de referncia, se observou uma concordncia acima de 96%. APRESENTAO Kit para 250 determinaes (Cd. 1853151). REFERNCIA - Zinsser Microbiologa, Joklik W., Willett H. e Amos D., 17 edio, Editorial Mdica Panamericana, 1983. - Manual of Tests for Syphilis, cap. 8, American Public Health Association, Washigton, D.C. 20005, 1990. - Podest, D.; Svetaz, M.J.; Ricomi, R.; Capriotti, G.; Rojkn, L.; Lorenzo, L.; "Evaluacin de tres reactivos para deteccin de sfilis" - VIII Congreso Argentino de Bioqumica, 54 Triduo Bioqumico Cientfico Anual 1990 - Revista A.B.A. 54/3, 1990.

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Smbolos
Os seguintes smbolos so utilizados nos kits de reagentes para diagnstico da Wiener lab.

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P V X H l

Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europia 98/79 CE para dispositivos mdicos de diagnstico "in vitro" Representante autorizado na Comunidade Europia Uso mdico-diagnstico "in vitro"

M
Xn

Elaborado por:

Nocivo

Corrosivo / Castico

Contedo suficiente para <n> testes


Xi

Irritante Data de validade

Limite de temperatura (conservar a)

i
Calibr.

Consultar as instrues de uso

?
F
Cont.

No congelar

Calibrador

b
Risco biolgico Volume aps da reconstituio

Controle

Contedo

Nmero de lote

b c h

Controle Positivo

Controle Negativo

Nmero de catlogo

Wiener lab.
2000 Rosario - Argentina
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UR110318