UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Hematologa

PRCTICA # 1: FROTIS EN SANGRE PERIFERICA

EQUIPO 4: Martnez Jurez Adriana Concepcin Mendoza Rodrguez Martha Isela Sanchz Garca Mara Fernanda Valverde del Ro Alma Karen GRUPO: 1

PROFESORES: Araceli Mendieta Rergis Julio Csar Martnez Alvarez

CIUDAD UNIVERSITARIA

FEBRERO DE 2013

Laboratorio de Hematologa
EQUIPO 4

Facultad de Qumica, UNAM

PRCTICA # 1: FROTIS EN SANGRE PERIFRICA

INTRODUCCIN La sangre es un tejido lquido que constituye el 7% del peso corporal del individuo adulto, ocupando un volumen total de aproximadamente 5L. Forma parte del lquido extravascular, tiene un pH de 7.4 y una temperatura aproximada de 38C. Este tejido conectivo especializado esta formado por elementos formes (eritrocitos encargados del transporte de oxgeno, leucocitos encargados de la defensa inmunitaria del organismo y plaquetas que desempean un papel clave en las reacciones de homeostasia del organismo) y el plasma. El estudio de la sangre en el laboratorio de hematologa es de suma importancia por ello es indispensable que la recoleccin de la muestra, el frotis sanguneo as como la tincin sean realizados adecuadamente. Toma de muestra Existen diferentes reas del cuerpo para la recoleccin de la muestra de sangre, entre ellas se encuentran la venosa, capilar, etc. No obstante la ms empleada en el laboratorio de Hematologa es la de puncin venosa que consiste en obtener la sangre a partir de la vena mediana cubital del brazo, para poder realizar primero se debe de tener listo el material a utilizar, despus se procede a localizar la vena para ello se aplica el torniquete, se limpia la zona donde se realizara la toma de la muestra, limpiando radialmente, se deja secar el alcohol y se procede a introducir la aguja cuidadosamente, cuando se ha extrado sangre suficiente se suelta el torniquete y posteriormente se saca la aguja, colocando la muestra obtenida en el tubo correspondiente. Est extraccin puede realizarse tambin con la ayuda de tubos vacuitainer o tubos al vaco. Frotis sanguneo Se entiende por frotis sanguneo al extendido o fina pelcula de la sangre perifrica sobre alguna superficie como lo es un portaobjetos o cubreobjetos. Este frotis puede realizar por medio de diferentes tcnicas entre estas se encuentran: Tcnica del portaobjeto: se ocupan dos portaobjetos, uno como soporte del extendido y el otro como extensor, se coloca una gota de sangre anticoagulada con EDTA en un extremo del porta objetos, previamente homogenizada, se coloca el otro porta objetos delante de la gota con un ngulo de 35-45 con respecto al otro, y se desliza hacia atrs hasta que toma en contacto con la gota y la sangre se esparce por toda la orilla del portaobjeto, despus se desliza con rapidez y suavidad hacia el otro extremo.

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Tcnica del cubreobjetos: est tcnica es poco empleada para extendidos de sangre perifrica, no obstante raras ocasiones es empleada en espirado de mdula sea. Este mtodo proporciona una distribucin uniforme de leucocitos, sin embargo es difcil dominar la tcnica ya que el cubreobjetos es muy frgil y es difcil teirlos. Se realiza empleando una gota pequea de sangre perifrica o aspirado de mdula sea sobre un cubreobjetos y se coloca otro encima de este para permitir que la muestra se distribuya de manera homognea, luego se hacen girar uno sobre otro para crear extendidos delgados, se dejan segar y se proceden a teir.

Tcnica con centrifugado: requiere de un equipo especial para producir una capa leucocitos y plaquetas distribuidas ampliamente y uniformemente, es difcil por el equipo y los aerosoles que se pueden desprender. Tcnica de extendido en cuadro: Se coloca una gota de sangre anticoagulada en uno de los extremos del portaobjetos, se sujeta colocando los dedos pulgar e ndice en extremos opuestos, con un segundo portaobjetos se extiende la sangre por capilaridad y en un ngulo de 30 se desliza rpida y firmemente en direccin opuesta.

Objetivos: Conocer como se realiza la toma de muestra de sangre perifrica, su importancia y los factores que la afectan. Conocer los tipos de tcnicas para la realizacin de extendidos de sangre perifrica. Realizar frotis de sangre perifrica por medio de la tcnica de extendido en cuadro.

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EQUIPO 4

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Conocer la importancia de la realizacin de un frotis homgeneo y delgado, as como tambin la informacin que puede obtenerse del mismo.

Material Caja de Portaobjetos Aplicadores de madera Torundas Guantes 2 jeringas de de 5mL o 2 equipos vacutainer 2 tubos con anticoagulante EDTA 1 Torniquete o liga para extraccin de muestras de sangre perifrica

Mtodos Para la toma de muestra de sangre se necesita un rea libre de obstculos, con un espacio adecuado (al menos 2 metros), de tal manera que el paciente se sienta cmodo para llevar a cabo la extraccin de manera correcta. Se prepara todo el material a emplear, de manera que se tenga listo a la hora de la toma de la muestra, se coloca el torniquete en el brazo, se localiza la vena a punzar por medio del tacto, se limpia con una torunda con alcohol de manera radial y se deja secar. Luego con una jeringa se realiza la puncin sobre la vena, se comprueba ya que la sangre llena la base de la jeringa, y se jala el embolo, hasta extraer la cantidad de sangre requerida. Finalmente se vierte la sangre en un tubo con anticoagulante, cuidando no hemolisar la muestra. Despus que se mezcla la sangre con el anticoagulante del tubo agitndolo cuidadosamente, se procede a realizar el frotis, para ello se coloca una gota de sangre anticoagulada en uno de los extremos del portaobjetos, se sujeta colocando los dedos pulgar e ndice en extremos opuestos, con un segundo portaobjetos se extiende la sangre por capilaridad y en un ngulo de 30 se desliza rpida y firmemente en direccin opuesta. Una vez realizado el extendido, el cual es homogneo y delgado se deja secar y se identifica para su posterior tincin. Resultados Paciente: Mendoza Rodrguez Martha Isela Flebotomista: Martnez Jurez Adriana Concepcin Mtodo de extraccin: Puncin venosa con aguja Cantidad de tubos de sangre recolectado : 1 Extendido en cuadro Alumno Martnez Jurez Adriana Concepcin Mendoza Rodrguez Martha Isela Nmero de extendidos realizados 25 35

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Como puede observarse en la tabla anterior, la cantidad de frotis realizados depende de la habilidad que el ejecutor, puesto que en algunos casos se pona ms muestra y el frotis quedaba muy grueso, o en el caso contrario se colocaba una gota pequea y no cubra una buena are del portaobjetos y quedaba de un lado ms grueso, en otras la uniformidad no era la adecuada y esto se deba principalmente a la velocidad, presin del portaobjetos y el tamao de la gota. Otro de los factores que influyo fue el tiempo de la realizacin del frotis puesto que la sangre colocada en el portaobjetos comenzaba a secarse. Conclusin La realizacin de un extendido de sangre perifrica se ve afectado por diversos factores como lo son: la viscosidad de la muestra, la velocidad, la tcnica, el material que se utiliza para el extendido y la habilidad de la persona que realiza la ejecucin del frotis. Todas estas variables deben considerarse para obtener un extendido adecuado. En est prctica se realizaron varios intentos de extendidos de sangre perifrica poniendo en manifiesto que es necesario adquirir la habilidad para realizarlos. Finalmente cabe destacar que es de suma importancia la preparacin de un frotis homogneo y delgado en hematologa para el diagnostico presuntivo de enfermedades

que se reflejan en alteraciones en eritrocitos, leucocitos y de plaquetas. De manera que por medio de un buen frotis y una adecuada toma de muestra se pueden tener resultados ms confiables.
Bibliografa Rodak Bernadette. Hematologa: Fundamentos y aplicaciones clnicas, 2da ed, Medica panamericana, Buenos Aires,2004, pp 173-178. Gal, Beatriz, et al,. Bases de la fisiologa, Tbar, Espaa, pp 2005, pp.91-92 http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39584.pdf Fecha de consulta 09/02/13 a las 19:49,