ENZIMAS

CONCEITOS GERAIS E FUNES

As enzimas so protenas especializadas na catlise de reaes biolgicas. Elas esto entre as biomolculas mais notveis devido a sua extraordinria especificidade e poder cataltico, que so muito superiores aos dos catalisadores produzidos pelo homem. Praticamente todas as reaes que caracterizam o metabolismo celular so catalisadas por enzimas. Como catalisadores celulares extremamente poderosos, as enzimas aceleram a velocidade de uma reao, sem no entanto participar dela como reagente ou produto. As enzimas atuam ainda como reguladoras deste conjunto complexo de reaes. As enzimas so, portanto, consideradas as unidades funcionais do metabolismo celular.

NOMENCLATURA DAS ENZIMAS Existem 3 mtodos para nomenclatura enzimtica: - Nome Recomendado: Mais curto e utilizado no dia a dia de quem trabalha com enzimas; Utiliza o sufixo "ase" para caracterizar a enzima. Exs: Urease, Hexoquinase, Peptidase, etc. - Nome Sistemtico: Mais complexo, nos d informaes precisas sobre a funo metablica da enzima. Ex: ATP-Glicose-Fosfo-Transferase Nome Usual : Consagrados pelo uso; Exs: Tripsina, Pepsina, Ptialina.

CLASSIFICAO DAS ENZIMAS As enzimas podem ser classificadas de acordo com vrios critrios. O mais importante foi estabelecido pela Unio Internacional de Bioqumica (IUB), e estabelece 6 classes: Oxidorredutases: So enzimas que catalisam reaes de transferncia de eltrons, ou seja: reaes de oxi-reduo. So as Desidrogenases e as Oxidases.

Se uma molcula se reduz, tem que haver outra que se oxide. Transferases : Enzimas que catalisam reaes de transferncia de grupamentos funcionais como grupos amina, fosfato, acil, carboxil, etc. Como exemplo temos as Quinases e as Transaminases. Hidrolases : Catalisam reaes de hidrlise de ligao covalente. Ex: As peptidades. Liases: Catalisam a quebra de ligaes covalentes e a remoo de molculas de gua, amnia e gs carbnico. As Dehidratases e as Descarboxilases so bons exemplos. Isomerases: Catalisam reaes de interconverso entre ismeros pticos ou geomtricos. As Epimerases so exemplos. Ligases: Catalisam reaes de formao e novas molculas a partir da ligao entre duas j existentes, sempre s custas de energia (ATP). So as Sintetases.

PROPRIEDADES DAS ENZIMAS So catalisadores biolgicos extremamente eficientes e aceleram em mdia 109 a 10 vezes a velocidade da reao, transformando de 100 a 1000 molculas de substrato em produto por minuto de reao.
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Atuam em concentraes muito baixas e em condies suaves de temperatura e pH. Possuem todas as caractersticas das protenas. Podem ter sua atividade regulada. Esto quase sempre dentro da clula, e compartimentalizadas. COFATORES ENZIMTICOS E COENZIMAS Cofatores so pequenas molculas orgnicas ou inorgnicas que podem ser necessrias para a funo de uma enzima. Estes cofatores no esto ligados permanentemente molcula da enzima mas, na ausncia deles, a enzima inativa. A frao protica de uma enzima, na ausncia do seu cofator, chamada de apoenzima. Enzima + Cofator, chamamos de holoenzima. Coenzimas so compostos orgnicos, quase sempre derivados de vitaminas, que atuam em conjunto com as enzimas. Podem atuar segundo 3 modelos:

- Ligando-se enzima com afinidade semelhante do substrato. - Ligando-se covalentemente em local prximo ou no prprio stio cataltico da apoenzima. Atuando de maneira intermediria aos dois extremos acima citados.

ESPECIFICIDADE SUBSTRATO \ ENZIMA: O STIO ATIVO As enzimas so muito especficas para os seus substratos. Esta especificidade pode ser relativa a apenas um substrato ou a vrios substratos ao mesmo tempo. Esta especificidade se deve existncia, na superfcie da enzima de um local denominado stio de ligao do substrato. O stio de ligao do substrato de uma enzima dado por um arranjo tridimensional especial dos aminocidos de uma determinada regio da molcula, geralmente complementar molcula do substrato, e ideal espacial e eletricamente para a ligao do mesmo. O stio de ligao do substrato capaz de reconhecer inclusive ismeros ticos "D" e "L" de um mesmo composto. Este stio pode conter um segundo stio, chamado stio cataltico ou stio ativo, ou estar prximo dele; neste stio ativo que ocorre a reao enzimtica.

Composto que transformado por uma enzima que se une a uma zona ativa, onde se produz ima catlise, que no exemplo conduz a uma formao de produtos. A zona sombreada so os aminocidos desta enzima (protena) que configuram, neste caso, o centro ativo da enzima. Alguns modelos procuram explicar a especificidade substrato/enzima: Modelo Chave/Fechadura que prev um encaixe perfeito do substrato no stio de ligao, que seria rgido como uma fechadura. No exemplo da figura abaixo, uma determinada regio da protena - o mdulo SH2 - liga-se tirosina fosfatada, que se adapta ao stio ativo da enzima tal como uma chave faz a sua fechadura. Modelo do Ajuste Induzido que prev um stio de ligao no totalmente prformado, mas sim moldvel molcula do substrato; a enzima se ajustaria molcula do substrato na sua presena. Evidncias experimentais sugerem um terceiro modelo que combina o ajuste induzido a uma "toro" da molcula do substrato, que o "ativaria" e o prepararia para a sua transformao em produto.

MECANISMO GERAL DE CATLISE As enzimas aceleram a velocidade de uma reao por diminuir a energia livre de ativao da mesma, sem alterar a termodinmica da reao, ou seja: A energia dos reagentes e produtos da reao enzimtica e de sua equivalente no enzimtica so idnticas. Para se superar a energia de ativao de uma reao, passa-se pela formao de um estado intermedirio chamado "Estado de Transio", sempre um composto instvel e de alta energia, representado por "Ts", ligado com altssima afinidade ao stio cataltico. Nas reaes enzimticas, este composto de transio "Ts" no pode ser isolado ou mesmo considerado um intermedirio, uma vez que no liberado para o meio de reao; sua formao ocorre no stio cataltico da enzima!! Como a afinidade do "Ts" ao stio cataltico muito maior que a afinidade do substrato com o mesmo, a pequena quantidade de molculas em "Ts" ser rapidamente convertida em produto. Assim, todo o fator que leva a um aumento do nmero de molculas em "Ts" aumenta a velocidade da reao. So 4 os mecanismos principais atravs dos quais as enzimas aceleram uma reao, aumentando a formao de molculas de substrato em "Ts": Catlise cido-Base que ocorre com a participao de aminocidos com cadeias laterais ionizveis, capazes de doar ou liberar prtons durante a catlise. Toro de Substrato, que depende da toro do substrato induzida pela ligao do mesmo com o stio de ligao da enzima, alcanando o estado de transio e estimulando sua converso em produto. Catlise Covalente que resulta do ataque nucleoflico ou eletroflico de um radical do stio cataltico sobre o substrato, ligando-o covalentemente enzima e induzindo a sua transformao em produto. Envolve com freqncia a participao de coenzimas. Efeito de Diminuio da Entropia. As enzimas ajudam no posicionamento e na definio da estequiometria correta da reao, facilitando os mecanismos anteriores.

CINTICA ENZIMTICA

a parte da enzimologia que estuda a velocidade das reaes enzimticas, e os atores que influenciam nesta velocidade. A cintica de uma enzima estudada avaliando-se a quantidade de produto formado ou a quantidade de substrato consumido por unidade de tempo de reao.

Uma reao enzimtica pode ser expressa pela seguinte equao: E + S <==> [ES] ==> E + P O complexo enzima/substrato (ES) tem uma energia de ativao ligeiramente menor que a do substrato isolado, e a sua formao leva ao aparecimento do estado de transio "Ts". A formao de "P" a partir de ES a etapa limitante da velocidade da reao. A velocidade de uma reao enzimtica depende das concentraes de enzima e de substrato.

Equao de Michaelis-Menten: Michaelis e Menten foram 2 pesquisadoras que propuseram o modelo acima citado como modelo de reao enzimtica para apenas um substrato. A partir deste modelo, estas pesquisadoras criaram uma equao, que nos permite demonstrar como a velocidade de uma reao varia com a variao da concentrao do substrato. Esta equao pode ser expressa graficamente, e representa o efeito da concentrao de substrato sobre a velocidade de reao enzimtica. O Km de um substrato para uma enzima especfica caracterstico, e nos fornece um parmetro de especificidade deste substrato em relao enzima. Quanto menor o Km, maior a especificidade, e vice-versa. FATORES EXTERNOS QUE INFLUENCIAM NA VELOCIDADE DE UMA REAO ENZIMTICA So eles: Temperatura: Quanto maior a temperatura, maior a velocidade da reao, at se atingir a temperatura tima; a partir dela, a atividade volta a diminuir, por desnaturao da molcula. pH: Idem temperatura; existe um pH timo, onde a distribuio de cargas eltricas da molcula da enzima e, em especial do stio cataltico, ideal para a catlise.

NIBIO ENZIMTICA Os inibidores enzimticos so compostos que podem diminuir a atividade de uma enzima. A inibio enzimtica pode ser reversvel ou irreversvel; Existem 2 tipos de inibio enzimtica reversvel:

- Inibio Enzimtica Reversvel Competitiva: Quando o inibidor se liga reversivelmente ao mesmo stio de ligao do substrato; O efeito revertido aumentando-se a concentrao de substrato Este tipo de inibio depende das concentraes de substrato e de inibidor. Inibio Enzimtica Reversvel No-Competitiva:

Quando o inibidor liga-se reversivelmente enzima em um stio prprio de ligao, podendo estar ligado mesma ao mesmo tempo que o substrato; Este tipo de inibio depende apenas da concentrao do inibidor.

Na inibio enzimtica irreversvel, h modificao covalente e definitiva no stio de ligao ou no stio cataltico da enzima. Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas, atuando assim como moduladoras do metabolismo celular. Esta modulao essencial na coordenao dos inmeros processos metablicos pela clula. Alm dos mecanismos j citados de modulao de atividade enzimtica - por variao da concentrao do substrato, ou por inibio enzimtica, por exemplo - existem 2 modelos de regulao enzimtica mais conhecidos: Modulao Alostrica Ocorre nas enzimas que possuem um stio de modulao, ou alostrico, onde se liga de forma no-covalente um modulador alostrico que pode ser positivo (ativa a enzima) ou negativo (inibe a enzima). A ligao do modulador induz a modificaes conformacionais na estrutura espacial da enzima, modificando a afinidade desta para com os seus substratos; Um modelo muito comum de regulao alostrica a inibio por "feed-back", onde o prprio produto da reao atua como modulador da enzima que a catalisa. Modulao Covalente Ocorre quando h modificao covalente da molcula da enzima, com converso entre formas ativa/inativa.

O processo ocorre principalmente por adio/remoo de grupamentos fosfato de resduos especficos de serina.o entre formas ativa/inativa. http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_pos2003/const_microorg/enzi mas.htm