1

CONTENIDO Pg. CAPITULO 1: ANALISIS DE SUELOS 1. 2. 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 3. PARAMETROS PARA SUELOS METODOS GENERALES METODO POTENCIOMETRICO PARA DETERMINAR pH. DETERMINACION DE MATERIA ORGANICA DETERMINACION DE NITROGENO(Metodo kjeldahl) DETERMINACION DE FOSFORO DETERMINACION DE BASES (K, Ca, Mg, Na) DETERMINACION DE ALUMINIO Y ACIDEZ INTERCAMBIABLE DOCUMENTOS DE REFERENCIA 6 7 8 8 9 12 16 19 23 24

CAPITULO 2: ANALISIS DE FERTILIZANTES 1. 1.1 1.2 1.3 1.4 METODOS GENERALES DETERMINACION DE pH DETERMINACION DE HUMEDAD DETERMINACION DE NITROGENO (Metodo kjeldahl) DETERMINACION DE FOSFORO (Mtodo espectrofotomtrico del fosfomolibdovanadato) 1.5 DETERMINACION DE ELEMENTOS SECUNDARIOS Y MENORES POR ABSORCION ATOMICA

25 26 26 27 29 32

35

2 1.6 DETERMINACION DEL AZUFRE DISPONIBLE (Mtodo Turbidimtrico) 1.7 DETERMINACION DEL CONTENIDO DE BORO (Mtodo de Azometina-H) 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA 46 43 38

CAPITULO 3: ANALISIS DE PLAGUICIDAS 1. 1.1 METODOS GENERALES EVALUACION DEL GRADO DE CONTAMINACION POR PESTICIDAS ORGANOFOSFORADOS POR GC-MS EN AGUAS 1.2 2. DETERMINACION DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS EN TOMATES DOCUMENTOS DE REFERENCIA

47 48

48 50 51

CAPITULO 4: ANALISIS DE AGUAS 1. 2. 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 RESOLUCION No. 2115 DE 2007 METODOS GENERALES DETERMINACION DE COLOR DETERMINACION DE LA TURBIDEZ DETERMINACION DE pH. DETERMINACION DE LA ALCALINIDAD DETERMINACION DE ACIDEZ (Mtodo Titulacin) DETERMINACION DE DUREZA

52 52 57 57 60 62 64 68 70 74

2.7 PRUEBA DE JARRAS

3 2.8 2.9 DEMANDA DE CLORO CLORO RESIDUAL 77 81 84

2.10 DETERMINACION DE NITRATOS (Mtodo espectromtrico ultravioleta selectivo) 2.11 DETERMINACION DE NITRITOS (Mtodo colorimtrico) 2.12 DETERMINACION DE SULFATOS (Mtodo Turbidimtrico) 2.13 DETERMINACION DE FOSFATOS 2.14 DETERMINACION DE METALES PESADOS (Cu, Fe, Mn, Zn, Pb, Cd, Cr) 3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

88

92

95 98

100

CAPITULO 5. ANALISIS DE LATONES O BRONCE 1. METODOS GENERALES

101 102 102 104 104 105 106 106 109 110 112

1.1 DETERMINACION DE ESTAO 1.2 DETERMINACION DE PLOMO 1.2.1 DETERMINACION DE PLOMO POR ABSORCION ATOMICA 1.2.2 ELIMINACION DE PLOMO COMO SULFATO 1.3 DETERMINACION DE COBRE 1.3.1 DETERMINACION ELECTROGRAVIMETRICA 1.3.2 DETERMINACION IODOMETRICA DE COBRE 1.4 DETERMINACION DE HIERRO 1.5 DETERMINACION DE ZINC

4 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA 113

CAPITULO 6. ANALISIS DE PINTURAS 1. METODOS GENERALES 1.1 ANALISIS DE PIGMENTOS, RESINAS, COMPUESTOS ORGANICOS VOLATILES (COVs), CROMO Y PLOMO EN PINTURAS 1.1.1 PINTURA A BASE DE SOLVENTES 1.1.2 PINTURA A BASE DE AGUA 3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

114 115

115 115 120 122

CAPITULO 7. ANALISIS DE FARMACOS 1. METODOS GENERALES 1.1 MONITOREO DE LA CALIDAD DE SOLUCIONES ORALES DE ACETAMINOFN (120MG/5ML) MANUFACTURADO POR LABORATORIOS NACIONALES, POR MEDIO DE CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN (HPLC), PARA COMPROBAR EL CUMPLIMIENTO DE LA CONCENTRACIN DECLARADA POR EL FABRICANTE 1.2 MEDICION DE DISOLVENTES RESIDUALES EN MUESTRAS FARMACEUTICAS UTILIZANDO LAS TECNICAS DE CROMATOGRAFIA DE GAS 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

123 124

124

127 128

5 CAPITULO 8. ANALISIS DE METILESTERES DE ACIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFIA DE GASES ACOPLADA A ESPECTROMETRIA DE MASAS 1. METODOS GENERALES 129 130

1.1 COMPARACION Y CUANTIFICACION DE ACIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFIA DE GASES EN EL ACEITE DE LA SEMILLA DE LINAZA 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA 130 132

CAPITULO 9. FORMULACION 1. METODO GENERAL

134 134 134 136

1.1 PASTAS DENTALES 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA

6 CAPTULO 1 ANALISIS DE SUELOS

INTRODUCCIN El suelo es el medio en el cual las plantas crecen para alimentar y vestir el mundo. El entender la fertilidad del suelo es entender una necesidad bsica de la produccin de cultivos. La fertilidad es vital para que un suelo sea productivo. Al mismo tiempo un suelo frtil no es necesariamente un suelo productivo. La fertilidad del suelo en la agricultura moderna es parte de un sistema dinmico. Los nutrientes son continuamente exportados en los productos vegetales y animales que salen de la finca. Desafortunadamente, algunos nutrientes pueden tambin perderse por lixiviacin y erosin. Se conocen que 16 elementos qumicos son esenciales para el crecimiento de la planta divididos en dos grupos, minerales y no minerales los nutrientes no minerales son carbono hidrogeno y oxigeno y los nutrientes minerales estn divididos en primarios: nitrgeno fosfor y potasio; secundarios: calcio magnesio azufre hierro manganeso molibdeno y zinc; y micronutrientes: boro cloro y cobre. Generalmente los nutrientes primarios son los primeros en ser deficientes en el suelo, los nutrientes secundarios y los micronutrientes son en general menos deficientes. Sin embargo estos son tan importantes como los nutrientes primarios y deben tenerse a su alcance cuando la planta los necesita. El anlisis de suelo es la principal herramienta en el manejo de la fertilidad de los suelos, ya sea para determinar deficiencia y necesidades de fertilizacin, as como tambin para monitorear la evolucin de la disponibilidad de nutrientes en sistemas fertilizados. Se debe tener en cuenta que la fertilidad del suelo depende de muchos factores, como la profundidad y el momento de muestreo que tiene un gran efecto sobre el resultado final. Es por eso que el muestreo es la etapa crtica del anlisis del suelo. Un anlisis de suelo, incluyendo todos los nutrientes esenciales para los cultivos es el punto de partida para la formulacin del plan de fertilizacin.

7 1. PARAMETROS PARA SUELOS Cuadro1. Rangos de concentracin de los componentes comunes de un suelo % p.H 5,4 6,1 5,2 5,7 N 0,5 0,4 0,2 0,4 M.O* 12,2 10,4 4,8 9,0 K 0,53 0,37 0,72 0,48 meq/100 g Suelo Ca 3,8 8,0 6,4 9,0 Mg 0,6 1,5 1,7 1,7 Al **** **** **** **** partes por milln P 12 2 13 10

(K:Ca:Mg) 1,0 1,0 1,0 1,0 7,2 21,6 8,9 18,8 1,1 4,1 2,4 3,5

Mg/K Ca/Mg Ca/K 1,1 4,1 2,4 3,5 6,3 5,3 3,8 5,3 7,2 21,6 8,9 18,8

(100*K)/ (Ca+K+Mg) 10,8 3,7 8,2 4,3

Ca/ (Mg+K) 3,4 4,3 2,6 4,1

%C %Min 7,1 6,0 2,8 5,2 15,0 14,5 12,9 14,1

8 2. METODOS GENERALES 2.1 METODO POTENCIOMETRICO PARA DETERMINAR EL pH 2.1.1 Principio Terico El potencimetro mide una diferencia de potencial elctrico en milivoltios entre un electrodo de referencia, generalmente de calomel, que lleva en su interior una solucin de referencia, y otro electrodo generalmente de vidrio, que es sensible a los H+ de la solucin del suelo que pasa a travs de una membrana de vidrio poroso especial, de 1 mm de dimetro. 2.1.2 Equipos Potencimetro.

2.1.3 Reactivos Solucin buffer pH 4 Solucin buffer pH 7

2.1.4 Materiales Beaker de 100 ml. Varilla de agitacin. Vidrio reloj. Frasco lavador.

2.1.5 Procedimiento Colocar 25 g de suelo seco y preparado. Adicionar 25 ml de agua destilada y agitar con ayuda de varilla, aproximadamente cada 15 minutos. Despus de una hora de preparada la suspensin, leer el pH directamente en el potencimetro. Lavar y juagar los electrodos al terminar cada lectura. 2.1.6 Resultados El pH del suelo se obtiene directamente y debe expresarse de acuerdo al equipo utilizado.

9 2.2 DETERMINACIN DE MATERIA ORGANICA 2.2.1 Principio Terico: (Mtodo colorimtrico). La materia orgnica en el suelo es una mezcla heterognea de residuos orgnicos de vegetales o animales en cualquier grado de descomposicin, introducidos en el suelo, y del humus, mezcla compleja de sustancias coloidales producto final de la descomposicin. Todos estos materiales entran a un conjunto de reacciones biolgicas y qumicas que ocurren entre la planta, el suelo y los microorganismos, constituyendo un ciclo bioqumico. Esto mejora las condiciones fsicas, aumenta la capacidad de intercambio de los suelos y tambin aporta N, P, K y S para la nutricin de las plantas. Ayuda a la disponibilidad de los elementos menores y del agua. Consiste en compuestos orgnicos tales como: Carbohidratos que van desde la celulosa hasta los azucares, incluyendo los intermedios. Protenas, sus derivados y los compuestos degradados hasta aminocidos. Grasas y sus derivados. Ligninas y sus compuestos. Sustancias tnicas, polifenoles, resinas, etc. cidos orgnicos, principalmente los cidos hmicos y flvicos. Otros componentes (bacterias, hongos, residuos de organismos vivos).

Para analizar la materia orgnica en los suelos se pueden utilizar mtodos volumtricos, gravimtricos y colorimtricos. Entre los mtodos mas sencillos para su determinacin estn los que se basan en el consumo de un oxidante que acta sobre el carbono y luego determinacin colorimtrica o gravimtrica. La muestra de suelo se trata con un volumen suficiente de solucin de Dicromato de potasio que acta como oxidante en un medio fuertemente acido, en una proporcin determinada. El calor desprendido por la reaccin exotrmica del acido al diluirse, favorece la accin del Dicromato para que oxide la materia orgnica. Se determina el color verde del acido crmico reducido a 585 nm, el cual es proporcional a la materia orgnica (M.O.) que reacciona.

10 REACCIONES El mtodo ms ampliamente utilizado, es el de combustin hmeda de Walkley Black, descrito por Allison (1965 a), el cual se fundamenta en la siguiente ecuacin de xido reduccin:

2.2.2 Equipos Balanza analtica. Espectrofotmetro. Estufa.

2.2.3 Reactivos Acido sulfrico G.A. Concentracin no menor al 96%. Solucin de Dicromato de potasio 1N aproximadamente: Disolver 50 g de K2Cr2O7 y llevar a 1L con agua destilada. Sacarosa G.A. Solucin patrn: Disolver 50 g de sacarosa (C 12H22O11) y llevar a 1L. Cada ml de la solucin contiene 50 mg de sacarosa.

2.2.4 Materiales Erlenmeyer de 500 ml por cada muestra. Pipeta volumtrica de 2 ml para cada patrn. Beaker de 250 ml. Tubo de ensayo de 50 ml. Matraz volumtrico de 1L 6 matraz volumtricos de 100 ml.

2.2.5 Procedimiento Preparacin de patrones: Tomar de la solucin patrn, alcuotas de 2, 5, 10, 15, 20, 25 y 50 ml, depositarlos en frascos volumtricos de 100 ml y llevar a volumen. De cada una de las soluciones preparadas tomar 2 ml, depositarlos en Erlenmeyer de 250 ml y secarlos en estufa a 105 C, de manera que cada uno contiene 2, 5, 10, 15, 20, 25 y 50 mg de sacarosa para colorear, siguiendo el mismo proceso utilizado para las muestras.

11 Tratamiento de la muestra: Colocar en un Erlenmeyer 0,3 g de suelo seco. Agregar 10 ml de Dicromato 1N a la muestra y a los patrones preparados, agitar. Aadir 20 ml de acido sulfrico concentrado G.A., se agita fuertemente por un minuto. Dejar en reposo durante media hora. Agregar 150 ml de agua destilada. Dejar enfriar y sedimentar unas dos horas. Trasvasar con cuidado a los tubos de ensayo para dejar la arcilla en el Erlenmeyer. Se deja en reposo de un da, para otro para que cuando se lea no interfiera la arcilla. Llevar el blanco respectivo sin suelo, para cuadrar el cero. La As se lee en el espectrofotmetro a 585 nm. 2.2.6 Resultados

12 2.3 DETERMINACIN DE NITRGENO (mtodo Kjeldahl) 2.3.1 Principio terico Del N total presente en los suelos, el 98% aproximadamente, se encuentra formando compuestos de la materia orgnica y el resto en forma de nitratos, amonio, y en menor cantidad en forma de N 2 (en el agua del suelo) y xidos de nitrgeno. Las formas mas importantes para le nutricin de la planta son el nitrato y el amonio. La mayor parte del nitrgeno presente en los suelos pasa a la forma de ayuda del catalizador (Cu2+ o Se). Radicales como con deben reducirse o pasar a

la forma de nitrocompuestos y luego a la forma . Todos estos resultaran formando sales de amonio al final de una digestin acida y caliente donde adems se destruye la materia orgnica. En una segunda etapa el se destila como NH3 y se captura dentro de una solucin de acido brico. Posteriormente el amonio se titula con acido clorhdrico de normalidad conocida. REACCIONES

2.3.2 Equipos Equipo Kjeldahl. Balanza analtica. Agitador magntico y barras agitadoras.

2.3.3 Reactivos Sulfato de cobre CuSO4.5H2O Sulfato de sdio anhidro: Na2SO4.5H2O G.T. o G.A. Tiosulfato de sdio: Na2S2O3.5H2O G.A. Acido sulfrico G.T. o G.A. Solucin de acido brico al 4%. Solucin de indicador mixto, rojo de metilo azul de metileno. Hidrxido de sodio al 50%. Acido clorhdrico 0.1 N. Acido saliclico.

13 2.3.4 Materiales Balones Kjeldahl de 800 ml. Erlenmeyer de 500 ml. Bureta de 25 ml. Vidrio reloj Probeta de 100ml y 50 ml. Soporte universal Pinzas para bureta Esptulas

2.3.5 Procedimiento Pesar 2,5 g de suelo, envolver en papel y colocar en un baln Kjeldahl; adicionar 0,2 g de sulfato de cobre, 4 g de Tiosulfato, 4 g de sulfato de sodio anhdrido, 0.8 g de acido saliclico y perlas de ebullicin ( o pastilla catalizadora preparada). Todo esto forma la mezcla catalizadora y las perlas de ebullicin ayudan a mantener la ebullicin en la digestin y posteriormente en la destilacin. El suelo envuelto en papel y los reactivos irn en un baln que ser el blanco. Adicionar 25 ml de cido sulfrico concentrado para la destruccin de la materia orgnica. Calentar por 40 minutos teniendo cuidado de no sobrepasar el calentamiento, pues se reseca y hay perdida de N. girar manualmente los balones durante esta digestin. Dejar enfriar y bajar a las canastas de soporte. Agregar 300 ml de agua y dejar enfriar. Se deben tener listos los erlenmeyer que recibirn el destilado, con 25 ml de solucin de acido brico, 3 gotas de indicador mixto y 150 ml de agua. Prender el puesto donde se va a poner el baln para precalentar el puesto respectivo. Agregar 100 ml de hidrxido al 50% por las paredes del baln inclinado para evitar una reaccin fuerte. Poner el baln inmediatamente a destilar, conectar el tapn con la trampa, agitar y dejar destilando hasta completar unos 320 ml. (El color azul o verde que aparece en el baln indica que la cantidad de soda fue suficiente para alcalinizar). Aunque en los primeros 10 minutos se destila casi todo el amoniaco, hay que dejarlo mas tiempo para arrastrar lo que queda en el destilador y as asegurar destilacin completa. Titular con la solucin de acido clorhdrico 0.1 N, hasta cambio de color a un gris o algo morado. Un morado definido indica que se ha pasado.

14 2.3.6 Resultados Cada ml 0,1N de la solucin de acido clorhdrico equivale a 0,0014 g de N.

Cuando la normalidad del acido no es exacta, debe multiplicarse por F, factor de correccin de la normalidad del acido, as:

En donde: el consumo del blanco es la cantidad de B, el consumo de la muestra es la cantidad de M. Debe expresarse con dos cifras decimales. P (0,05): 0,05% tolerancia mxima permitida para los patrones de trabajo. Nitrgeno con base en el contenido de materia orgnica

O escrita en forma de relacin:

Esto se cumple muy bien para suelos contenidos entre 2 a 15 %.

15 A continuacin se presenta la tabla para calcular el porcentaje de N, con base en esta frmula. Cuadro1. Porcentaje de nitrgeno con base en el contenido de materia orgnica. TABLA PARA CALCULAR EL PORCENTAJE DE NITROGENO CON BASE EN EL CONTENIDO DE MATERIA ORGANICA. % 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 M.O. 1 0,05 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 2 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 3 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20 0,20 4 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 5 0,25 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 6 0,30 0,30 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33 0,333 0,33 0,34 7 0,34 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 8 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,41 0,41 0,41 0,42 0,42 9 0,43 0,43 0,43 0,44 0,44 0,44 0,45 0,45 0,46 0,46 10 0,46 0,47 0,47 0,48 0,48 0,48 0,49 0,49 0,49 0,50 11 0,050 0,50 0,51 0,51 0,52 0,52 0,52 0,52 0,53 0,53 12 0,53 0,54 0,54 0,55 0,55 0,55 0,55 0,56 0,56 0,57 13 0,57 0,57 0,57 0,58 0,58 0,58 0,59 0,59 0,59 0,60 14 0,60 0,60 0,61 0,61 0,61 0,61 0,62 0,62 0,62 0,63 15 0,63 0,63 0,63 0,64 0,64 0,64 0,65 0,65 0,65 0,65 16 0,66 0,66 0,66 0,66 0,67 0,67 0,67 0,68 0,68 0,68 17 0,68 0,68 0,69 0,69 0,69 0,69 0,70 0,70 0,70 0,70 18 0,71 0,71 0,71 0,71 0,72 0,72 0,72 0,72 0,72 0,73 19 0,73 0,73 0,73 0,74 0,74 0,74 0,74 0,74 0,75 0,75 20 0,75 0,75 0,75 0,76 0,76 0,76 0,76 0,76 0,76 0,77

16

2.4 DETERMINACIN DE FOSFORO 2.4.1 Principio Terico: mtodo Bray y Kurtz N 2 La forma como puede encontrarse el fosforo en el suelo puede resumirse en un P total que incluye P de la materia orgnica y P de las sustancias inorgnicas. El P de las sustancias inorgnicas son fosfatos que pueden ser insolubles o solubles. En la mayora de los suelos el fosforo inorgnico es mayor que el P orgnico, pero en suelos ricos en materia orgnica, el P orgnico es mayor que el P inorgnico. Despus de tener el P como PO 4-3 en el extracto, hay dos mtodos de coloracin del complejo fosfo-molibdico. El fsforo que pasa a solucin en solucin extractora de HCl 0,1 N ms NH 4F 0,03 N se determina como fosfato, colorimtricamente. Los fosfatos, con el molibdato de amonio y el tartrato de potasio y antimonio, desarrollan un color azul al reducirse con acido ascrbico. Este color se mide en un espectrofotmetro a 660 nm. Se elabora una grafica de As vs. Concentracin con valores conocidos de fosfatos conocidos. REACCIONES

Este compuesto es azul despus de una reduccin que se efecta con cloruro estaoso o acido ascrbico. 2.4.2 Equipos Balanza analtica. Espectrofotmetro. Cronometro.

2.4.3 Reactivos Acido clorhdrico 4N: Tomar 500 ml de acido clorhdrico concentrado y adicionar 1 litro de agua. Solucin extractora: (HCl 0,1N + NH4F 0,03N). Disolver 1,11 gramos de NH4F+ y 25 ml de HCl 4N en agua y llevar a un litro. Guardar en frasco oscuro y plstico.

17 Solucin A: disolver 60 gramos de molibdato de amonio (NH 4)6Mo7O24.4H2O en 200 ml de agua. Aadir 1,455 gramos de tartrato de antimonio y potasio, disolver. Agregar lentamente con agitacin suave 700 ml de H 2SO4 concentrado. Enfriar y diluir a 1L. Solucin B: disolver 61 gramos de acido ascrbico (C 6H8O6) Completar a 500 ml. en agua.

Solucin de trabajo: A partir de la solucin A y B, tomar 25 ml de la solucin A; transferir a 800 ml de agua en un Beaker de 1L. Mezclar y aadir 10 ml de la solucin B, llevando a volumen de 1 L con agua. Solucin estndar de fsforo: disolver 0,2195 gramos de fosfato de hidrogeno y de potasio cristalizado (KH 2PO4), previamente secado una hora a 105 C. Diluir con agua en un baln volumtrico hasta 1L. La solucin contendr 50 ppm de fsforo a partir de la cual se preparan las soluciones para la curva patrn del fsforo.

2.4.4 Materiales Embudo. Pipeta volumtrica de 25 ml, 10 ml y 2 ml. Erlenmeyer de 125 ml. Matraz volumtrico de 1L y 500ml. 8 matraz volumtricos de 250 ml. Beaker de 1L. Frasco plstico de 50ml. Papel filtro Wathman N42

2.4.5 Procedimiento Pesar 2,85 gramos de suelo, pasar a un tubo de ensayo de 50 ml o a un erlenmeyer. Aadir 20 ml de solucin extractora. Agitar durante 40 segundos manualmente y cronometrando el tiempo. Filtrar la suspensin inmediatamente, utilizando papel filtro Wathman N42. Recibir en un frasco plstico de 50ml. Tomar 2 ml del extracto y transferirlo a un erlenmeyer de 125ml, agregar 18 ml de la solucin de trabajo. Este procedimiento se sigue con las soluciones patrn de fosforo de manera que las soluciones finales de P varan entre 0.05 y 2.0 ppm. Lase el color a 660 nm despus de 15 minutos.

18 Cuadro 1. Concentracin de las disoluciones patrn de P Volumen de la solucin estndar (50 ppm P) 0,0 2,5 5,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0 70,0 80,0 90,0 100,0 2.4.6 Resultados Volumen final con agua destilada (ml) 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 Concentracin de fosforo (ppm) 0,0 0,5 1,0 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 14,0 16,0 18,0 20,0

Expresin de los resultados: cifras enteras. P (0,05): 4 ppm. La As de un patrn de 10 ppm en la solucin debe ser 0.455 0.015. Nota: valido hasta 140 ppm; si la lectura es mayor se reportara + 140 ppm.

19 2.5 DETERMINACIN DE BASES (K, Ca, Mg, Na) 2.5.1 Principio Terico La determinacin de la cantidad de bases se fundamenta en el equilibrio que se establece entre una solucin extractora que suministra cationes y la micela del suelo donde se efecta este intercambio. Una solucin neutra de acetato de amonio en la cual hay disociacin dbil, cumple muy bien esta funcin. Los cationes Ca, K, Mg, Na; que pasan a la solucin extractora se determinan posteriormente por espectrofotometra de absorcin atmica. 2.5.2 Equipos Espectrofotmetro de absorcin atmica. Balanza

2.5.3 Reactivos Solucin extractora neutra de acetato de amonio 1N: Se prepara tomando 1Kg de acetato de amonio y se lleva a una solucin de 12.715 L con agua destilada. Se debe determinar luego el pH, el cual se debe encontrar de 6.8 a 7.0 Solucin de oxido de lantano al 10%: Pesar 100 g de La2O3, agregar 500 ml de agua. Aadir poco a poco 250 ml de HCl agitando permanentemente, aforar a 1L. Solucin de K de 50000 ppm: Pesar 95.35 g de KI y aforar a 1L con agua destilada. Solucin de Na de 50000 ppm: Pesar 127.1 g de NaCl y aforar a 1L con agua destilada. Solucin titrisol de 1000 ppm de Ca: Solucin titrisol de 1000 ppm de Mg Solucin titrisol de 1000 ppm de Na Solucin titrisol de 1000 ppm de k

2.5.4 Materiales Pipeta graduada de 2 ml. Erlenmeyer de 100 ml. Probetas de 100 y 25 ml. Bureta de 25 ml. Embudo buchner.

20 2.5.5 Procedimiento Tratamiento de la muestra Obtencin de extracto principal: Pesar 5 g de suelo en un frasco de vidrio, adicionar 25 ml de solucin extractora; agitar manualmente y dejar en reposo toda la noche. Llevar un blanco que contiene nicamente solucin extractora. Filtrar con ayuda de vaci y recibir en un frasco plstico marcado con K, lavando con 75 ml de solucin extractora en porciones de 25 ml. Estos 100 ml aproximadamente son el extracto principal sobre el cual se leer posteriormente potasio, calcio, magnesio y sodio. Determinacin de Ca y Mg. Tomar 2 ml del extracto principal en frascos plsticos marcados con C M agregar 2 ml de solucin de lantano al 10% y 96 ml de agua destilada. Agitar y leer en el equipo de E.A.A. contra los patrones correspondientes. El aparato para leer calcio se cuadra con los patrones de 0.10 y 20 m.e. /100 g de suelo. Llevar a Zero con el blanco de tanda. Las lecturas dan directamente en m.e. /100 mg de suelo. Los resultados para Ca, deben expresarse en m.e. /100g de suelo con una sola cifra decimal. Cuadrar el aparato para leer Mg con patrones de 5 y 10 m.e. /100 g de suelo. Llevar a Zero con el blanco de tanda. Las lecturas dan directamente en m.e. /100 g de suelo y se debe expresar con una sola cifra decimal. Preparacin de patrones: Preparar un patrn de 100 m.e. de Ca /100 g de suelo, tomando 20 ml de una solucin titrisol de 1000 ppm de Ca, llevar a 1L con agua destilada. Preparar un patrn de 100 m.e. de Mg /100 g de suelo tomando 12,16 ml de un patrn titrisol de 1000 ppm de Mg, completar a 1L con agua. Patrones conjuntos de trabajo (Ca y Mg). Patrn intermedio: A 10 ml de solucin patrn de 100 m.e. de Ca y 5.0 ml de solucin patrn de 100 m.e. de Mg, adicionar 2 ml de solucin de lantano y 2 ml de solucin extractora. Llevar a 100ml con agua.

21 Patrn superior: A 20.0 ml de solucin patrn de 100 m.e. de Ca y 10.0 ml de solucin patrn de 100 m.e. de Mg, adicionar 2 ml de solucin de lantano y 2 ml de solucin extractora, llevar a 100 ml con agua. Determinacin de Na Tomar la mitad del remanente (48 ml aproximadamente) del extracto principal en un frasco plstico marcado con N y agregar 1 ml de solucin de 50000 ppm de potasio. Agitar. Cuadrar el aparato PE 403 con los patrones de 0.2 y 0.4 m.e. Na /100g de suelo. Leer directamente en m.e. Na /100g de suelo expresando con una sola cifra decimal. Solucin patrn de Na: Preparar una solucin de 10 m.e. de Na /100 g de suelo, tomando 114,9 ml de un titrisol de 1000 ppm de Na y llevar a 1L con agua. Blanco patrn: tomar 2 ml de solucin de 50 ppm de K y llevar a 100 ml con solucin extractora. Patrn de 0.2 m.e. de Na: Tomar 2 ml de solucin de 10 m.e. de Na, 2 ml de solucin de 50000 ppm de K y llevar a 100 ml con solucin extractora. Patrn de 0,4 m..e de Na: Tomar 4 ml de solucin de 10 m.e. de Na, 2 ml de la solucin de K y llevar a 100 ml con solucin extractora. Determinacin de K. A la proporcin de extracto principal que queda en el frasco marcado K, adicionarle 1 ml de la solucin de 50.000 ppm de Na. (Agregar 2 ml cuando el volumen es de 98 ml aproximadamente). Agitar y leer directamente en m.e. /100 g de suelo, cuadrar el aparato con patrones de 0 0.2 0.4 m.e. Llevar a Zero con el blanco de tanda. Leer directamente. Cuando los niveles sean mayores de 0.4 debe volverse a cuadrar el aparato con patrones de 0 0.4 0.8 m.e. Leer directamente, los resultados se reportan con dos cifras decimales. Solucin patrn de K: Se prepara una solucin de 10 m.e. /100 g de suelo tomando 19,55 ml de una solucin titrisol de 1000 ppm de K y llevar a 100 ml agregando agua. Blanco patrn: Tomar 2 ml de solucin de 50000 ppm de Na y llevar a 100 ml con solucin extractora.

22 Solucin patrn de 0,2 me. de K: Tomar 2 ml de solucin de 10 m.e. de K; 2 ml de solucin de Na y llevar a 100 ml con solucin extractora. Solucin patrn de 0,3 me. de K: tomar 3 ml de solucin de 10 m.e. de K; 2 ml de solucin de Na y llevar a 100 ml agregando solucin extractora Solucin patrn de 0,4 me. de K: tomar 4 ml de solucin de 10 m.e. de K; 2 ml de solucin de Na y llevar a 100 ml agregando solucin extractora Solucin patrn de 0,8 me. de K: tomar 8 ml de solucin de 10 m.e. de K; 2 ml de solucin de Na y llevar a 100 ml agregando solucin extractora. 2.5.6 Resultados Leer directamente en el espectrofotmetro, los resultados se reportan con dos cifras decimales.

23 2.6 DETERMINACIN DE ALUMINIO Y ACIDEZ INTERCAMBIABLE. 2.6.1 Principio Terico La acides intercambiable se define como los miliequivalentes (m.e.) cidos por cada 100g de suelo que se extrae con solucin de KCl 1N sin estabilizar. El contenido de aluminio (Al3+) es el principal componente de esta acides determinada en el extracto de KCl 1N sin estabilizar. En realidad el KCl hace un juego de intercambio pasando a solucin H + y Al3+ y fijando K+ a la vez; tanto la acides creada como el potasio pasan a solucin, Al 3+ del complejo de intercambio y minerales presentes. Si la acides en el extracto se incrementa a pH menores de 4,5 los resultados de Al +3 son mayores de 1,0 m.e./100g de suelo; de donde se podra predecir que el pH en KCl 1N estara mas relacionado con el contenido de Al+3 que el pH en agua ya que seria representativo del mismo mecanismo de intercambio proporcional al incremento de acides. Los cidos (dbiles) de la materia orgnica, tambin aportan poco en la acides intercambiable. 2.6.2 Equipos Balanza. Agitador elctrico. Espectrofotmetro de absorcin atmica.

2.6.3 Reactivos Solucin de cloruro de potasio 1 N. Solucin de 1.000 ppm de Al preparada a partir de solucin titrisol. Solucin patrn de aluminio (Al) de 100 me /100 g Solucin de trabajo. Ha de contener 0,5 1,0 2,0 4,0 5,0 y 10 me /100 g de Al preparadas en KCl 1N. Solucin patrn de 50 ppm de Al en KCl 1N. Hidrxido de sodio 0,05N. Fenolftalena, Solucin de NaF al 4%.

2.6.4 Materiales Embudo Erlenmeyer de 250 ml. Matraz volumtrico de 100 ml con tapa. Bureta de 25 ml. Papel filtro (whatman N 42).

24 2.6.5 Procedimiento Tratamiento de la muestra: Pesar 5 g de suelo seco, agregar 50 ml de solucin de KCl 1N. Tapar y agitar durante 5 minutos, utilizando agitador magntico. Filtrar en seco la solucin, recibir el filtrado en frasco plstico de 100 ml si se va a determinar por E.A.A. o en erlenmeyer de 250 ml si es por titulacin. Titulacin con NaOH 0,05N (mtodo alterno): Se determina acidez intercambiable, cuyo mayor componente es el Al intercambiable (Al +3), ya que el H+ de cambio es relativamente bajo en suelos de la zona cafetera colombiana. Recibir todo el filtrado en un erlenmeyer de 250 ml. Agregar 3 gotas de fenolftalena y titular con solucin de NaOH 0,05N hasta aparicin de color rosado plido. Cuando la normalidad de la soda es exactamente 0,05N, la cantidad de ml consumidos es la acidez dada en m.e. /100 g de suelo. 2.6.6 Resultados Acidez intercambiable = CONSUMO x 20 x N

3.

DOCUMENTOS DE REFERENCIA

Manual de Laboratorio de Suelos Carrillo Pachon, Ignacio F. Colombia, Centro Nacional de Investigacin del Caf CENICAFE 1985 111 Pg. Centro Regional de Ayuda Tecnica. Investigacin de Suelos. Mtodos de Laboratorio y Procedimientos para Recoger Muestras. Mexico, Ed. Triallas 1973.

25 CAPITULO 2 ANALISIS DE FERTILIZANTES

INTRODUCCION Los fertilizantes proveen nutrientes que los cultivos necesitan, se pueden producir ms alimentos, cultivos comerciales y de mejor calidad, se puede mejorar la baja fertilidad de los suelos que han sido sobre explotados. La eficiencia de los fertilizantes y la respuesta de los rendimientos en un suelo particular pueden ser fcilmente analizadas agregando diferentes cantidades de fertilizantes en parcelas adyacentes, midiendo y comparando los rendimientos de los cultivos consecuentemente.

26 1. MTODOS GENERALES 1.1 DETERMINACION DEL pH 1.1.1 Principio Terico El mtodo potenciomtrico o electroqumico para medir pH de un suelo es el ms utilizado. Con este mtodo se mide el potencial de un electrodo sensitivo a los iones H+ (electrodo de vidrio) presentes en una solucin problema; se usa como referencia un electrodo cuya solucin problema no se modifica cuando cambia la concentracin de los iones por medir, que es generalmente un electrodo de calomelano o de Ag/AgCl. El electrodo, a travs de sus paredes, desarrolla un potencial elctrico. En la prctica se utilizan soluciones amortiguadoras, de pH conocido, para calibrar el instrumento y luego comparar, ya sea el potencial elctrico o el pH directamente de la solucin por evaluar. 1.1.2 Equipo Potencimetro

1.1.3 Reactivos Solucin amortiguadora de pH 7 y 4 Agua destilada

1.1.4 Materiales Balanza analtica Vasos de precipitado de 25 ml Pipeta de 10 ml Agitadores magnticos

1.1.5 Procedimiento Pesar 1 g de fertilizante y colocarlo en un vaso de precipitado de 25 ml. Agregar 10 ml de agua destilada. Agitar y dejar reposar 10 minutos. Ajustar el potencimetro con las soluciones amortiguadoras. Pasados los 10 minutos, medir el pH con el potencimetro. 1.1.6 Resultados Registrar el pH.

27 1.2 DETERMINACION DE LA HUMEDAD 1.2.1 Principio Terico El mtodo utilizado para esta medicin es el gravimtrico, para determinar nicamente la cantidad de agua de los suelos. La humedad del suelo se calcula por la diferencia de peso entre una misma muestra hmeda, y despus de haberse secado en la estufa hasta obtener un peso constante. 1.2.2 Equipos Balanza analtica con sensibilidad igual o superior a 0.0001 g. Estufa elctrica con control de temperatura de +/- 1 C Desecador con agente desecante apropiado.

1.2.3 Materiales Capsula de porcelana.

1.2.4 Procedimiento Se pesan 2 a 5 gramos de muestra en una capsula previamente tarada, se extiende la muestra en la capsula de tal modo que presente una gran superficie de contacto, se introduce en la estufa y se somete a las condiciones indicadas en la tabla 1. Tabla 1. Condiciones de secado de la muestra Sustancia Fosfato de amonio Urea Superfosfato simple Nitrato de amonio Superfosfato triple Cloruro de potasio Sulfato de potasio Nitrato de sodio Sulfato de amonio Temperatura (C) 50 90 105 130 Tiempo (h) 2 4 4 5 Presin 474 500 mm de Hg de vaco atmosfrica atmosfrica atmosfrica

Se saca la capsula y se coloca en el desecador hasta que alcance la temperatura ambiente y se pesa. Para el caso de fertilizantes compuestos (mezclas fsicas o complejas), si se conoce su composicin se usan las condiciones de secado propias para el compuesto mas sensible de acuerdo con lo indicado en la tabla 1., si se

28 desconoce la composicin, se determina la humedad por secado en la estufa a 105C durante 4 horas. 1.2.5 Resultados H= (m1 m2) * 100 / m1 Donde H= contenido de humedad en porcentaje m1= masa de la muestra en gramos. m2= masa final de la muestra en gramos.

29 1.3 DETERMINACIN DE NITRGENO (mtodo Kjeldahl) 1.3.1 Principio Terico Del N total presente en los suelos, el 98% aproximadamente, se encuentra formando compuestos de la materia orgnica y el resto en forma de nitratos, amonio y en menor cantidad en forma de N 2 (en el agua del suelo) y xidos de nitrgeno, las formas mas importantes para la nutricin de la planta son el nitrato y el amonio. La mayor parte del nitrgeno presente en los suelos pasa a la forma de ayuda del catalizador (Cu2+ o Se). Radicales como con deben reducirse o pasar a

la forma de nitrocompuestos y luego a la forma . Todos estos resultaran formando sales de amonio al final de una digestin acida y caliente donde adems se destruye la materia orgnica. En una segunda etapa el se destila como NH3 y se captura dentro de una solucin de acido brico. Posteriormente el amonio se titula con acido clorhdrico de normalidad conocida. REACCIONES

1.3.2 Equipos Equipo Kjeldahl. Balanza analtica. Agitador magntico y barras agitadoras.

1.3.3 Reactivos Sulfato de cobre CuSO4. 5H2O (Grado analtico). Sulfato de cobre CuSO4 . 5H2O (Grado tcnico). Sulfato de sodio anhidro Na2SO4 . 5H2O (Grado tcnico o analtico). Tiosulfato de sodio Na2S2O3 . 5H2O (Grado analtico). Acido sulfrico (Grado tcnico o analtico). Solucin de acido brico al 4%. Solucin de indicador mixto, rojo de metilo azul de metileno.

30 1.3.4 Hidrxido de sodio al 50%. Acido clorhdrico 0.1 N. Acido saliclico. Materiales Balones Kjeldahl de 800 ml. Erlenmeyer de 500 ml. Bureta de 25 ml. Vidrio reloj Probeta de 100 ml y 50 ml. Soporte universal Pinzas para bureta Esptulas

1.3.5 Procedimiento Pesar 2,5 g de suelo, envolver en papel y colocar en un baln Kjeldahl; adicionar 0,2 g de sulfato de cobre, 4 g de tiosulfato, 4 g de sulfato de sodio anhdrido, 0,8 g de acido saliclico y perlas de ebullicin ( o pastilla catalizadora preparada). Todo esto forma la mezcla catalizadora, y las perlas de ebullicin ayudan a mantener la ebullicin en la digestin y posteriormente en la destilacin. El suelo envuelto en papel y los reactivos irn en un baln que ser el blanco. Adicionar 25 ml de acido sulfrico concentrado para la destruccin de la materia orgnica. Calentar por 40 minutos; teniendo cuidado de no sobrepasar el calentamiento, pues se reseca y hay perdida de N, girar manualmente los balones durante esta digestin. Dejar enfriar y bajar a las canastas de soporte. Agregar 300 ml de agua y dejar enfriar. Se deben tener listos los erlenmeyer que recibirn el destilado con 25 ml de solucin de acido brico, 3 gotas de indicador mixto y 150 ml de agua. Prender el puesto donde se va a poner el baln para precalentar el puesto respectivo. Agregar 100 ml de hidrxido al 50% por las paredes del baln inclinado para evitar una reaccin fuerte. Poner el baln inmediatamente a destilar, conectar el tapn con la trampa, agitar y dejar destilando hasta completar unos 320 ml. el color azul o verde que aparece en el baln indica que la cantidad de soda fue suficiente para alcalinizar. Aunque en los primeros 10 minutos se destila casi todo el amoniaco, hay que dejarlo mas tiempo para arrastrar lo que queda en el destilador y as asegurar destilacin completa. Titular con la solucin de acido clorhdrico 0,1 N, hasta cambio de color a un gris o algo morado. Un morado definido indica que se ha pasado.

31

1.3.6 Resultados Cada ml 0,1N de la solucin de acido clorhdrico equivale a 0,0014 g de N.

Cuando la normalidad del acido no es exacta, debe multiplicarse por F, factor de correccin de la normalidad del acido, as:

Donde B = consumo del blanco M = consumo de la muestra Debe expresarse con dos cifras decimales. P (0,05): 0,05% tolerancia mxima permitida para los patrones de trabajo.

32 1.4 DETERMINACIN DE FOSFORO (Mtodo espectrofotomtrico del fosfomolibdovanadato) 1.4.1 Principio Terico Los ortofosfatos reaccionan con el molibdovanadato formando complejos coloreados que absorben a una longitud de onda de 400 nm. La absorbancia de esta solucin es proporcional a la concentracin de fsforo presente en la muestra. Este mtodo no se aplica a materiales que producen soluciones coloreadas o que contienen otros iones los cuales pueden formar complejos coloreados con el molibdovanadato. No es recomendado para escorias bsicas. 1.4.2 Equipos Espectrofotmetro

1.4.3 Reactivos Reactivo de molibdovanadato: Se disuelve 40 g de molibdato de amonio tetrahidratado ((NH4)6Mo7O24(H2O)4) en 400 ml de agua, se calienta y se enfra, se disuelven 2 g de metavanadato de amonio (NH 4VO3) en 250 ml de agua caliente, se enfra y se adiciona 450 ml de cido perclrico (HClO 4) del 70 % - 72 % (Precaucin: consultar notas de seguridad del cido perclrico). Lentamente se adiciona la solucin de molibdato a la solucin de vanadato con agitacin y se diluye a 2 L. Solucin estndar de fsforo: Se seca por 2 h a 105 C el fosfato dicido de potasio (KH2PO4) puro (52.15% P2O5). Se preparan soluciones que tengan entre 0.4 mg a 1.0 mg de P 2O5/ml en incrementos de 0.1 mg por pesos de 0.0767 g, 0.0959 g, 0.1151 g, 0.1342 g, 0.1534 g, 0.1726 g y 0.1918 g de KH2PO4, estas soluciones contienen 0.4; 0.6; 0.7; 1 mg/ml respectivamente, se diluye cada uno a 100 ml con agua. Se prepara soluciones frescas de 0.4 y 0.7 mg de P2O5/ml semanalmente. Preparacin de la curva estndar: Se toma con una pipeta alcuotas de 5 ml de cada uno de los siete estndares de P 2O5 (2 mg - 5 mg P2O5/alcuotas) en balones aforados de 100 ml y se adiciona 45 ml de agua. Se espera 5 min y se adiciona a toda la serie 20 ml del reactivo de molibdovanadato desde una bureta o pipeta, se diluye a volumen con agua y se mezcla se deja en reposo por 10 min. Se ajusta el espectrofotmetro a una longitud de onda de 400 nm y el cero de absorbancia con el estndar de 2 mg de P2O5, luego se lee la

33 absorbancia de los otros estndares. Despus de cada lectura se debe ubicar nuevamente el equipo en cero (0) con el estndar de 2 mg para corregir los cambios producidos por la variacin de la temperatura. Grafique absorbancia vs mg P2O5/ml. 1.4.4 Materiales Bureta Agitador mecnico Equipo de filtracin Pipeta volumtrica Pipeta graduada Esptula Matraces

1.4.5 Procedimiento Se toma con una pipeta, alcuota de 5 ml de los estndares de fsforo que contienen 2 mg y 3.5 mg de P2O5/alcuota respectivamente en balones aforados de 100 ml y se desarrolla el color (como en la preparacin de la curva estndar). Se ajusta el instrumento a cero de absorbancia con el estndar de 2 mg y se determina la absorbancia del estndar de 3.5 mg (la absorbancia del estndar de 3.5 mg debe ser similar al valor correspondiente de la curva). Muestras que contienen hasta 5% de P 2O5: Se toman alcuotas de 5 ml de solucin muestra (vase Muestra (a)) y 5 ml de solucin estndar de 2 mg de P2O5. Se desarrolla el color y se determina la absorbancia de la misma forma que en los estndares de fosfato, ajustando el cero (0) con el estndar de 2 mg. Se lee la concentracin de P2O5 en la curva. Cuando se tengan varias series, se cuadra el cero (0) con el estndar de 2 mg antes de cada lectura. Para muestras que contiene ms de 5% P 2O5:. Se toma 5 ml o 10 ml de solucin (vase Muestra (b)) en un matraz aforado de 100 ml. No se adiciona el estndar de P2O5 y se procede como en el parmetro anterior. Muestra Se pesa 1 g o la cantidad indicada de muestra (segn sea el mtodo) con precisin de 0,1 mg. Se somete a uno de los siguientes tratamientos, de acuerdo con el tipo de muestra a analizar y como se seala en los numerales a, b, c, d, e. a) Materiales que contienen pequeas cantidades de materia orgnica. Se disuelve la muestra con una mezcla de: 30 ml cido ntrico (HNO3) y de 3 ml a 5 ml de cido clorhdrico (HCl). Se lleva a ebullicin y se mantiene hasta que la materia orgnica sea destruida (aproximadamente 30 min para lquidos y suspensiones).

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b)

Fertilizantes que contienen mucho fosfato de hierro o de aluminio y/o escorias bsicas. Se disuelve la muestra con una mezcla de: 15 ml a 30 ml de cido clorhdrico (HCl) y de 3 ml a 10 ml de cido ntrico (HNO3).

1.4.6 Resultados Muestras que contienen hasta 5% P2O5

Muestras que contienen ms de 5% P2O5

Donde Lc = lectura en la curva de los mg de P2O5, ledos 2 = 2 mg de P2O5 adicionados a la muestra que presenta un contenido de P 2O5 inferior al 5 % Vm = volumen en ml al que fu llevada la digestin de la muestra M = peso de la muestra en gramos A = volumen en ml de la alcuota tomada de la digestin para la reaccin de desarrollo de color 1 000 = factor para expresar en miligramos el peso de la muestra.

35 1.5 DETERMINACIN DE ELEMENTOS SECUNDARIOS Y MENORES POR ABSORCIN ATMICA (Ca, Cu, Fe, Mg, Mo, Na, K) 1.5.1 Principio Terico Esta norma NTC 1369, establece el mtodo para la determinacin por absorcin atmica de los elementos secundarios: magnesio y calcio y los elementos menores: boro, cobalto, cobre, hierro, manganeso, molibdeno, nquel, silicio y zinc en fertilizantes slidos y lquidos. 1.5.2 Equipos Espectrofotmetro de absorcin atmica. Balanza analtica

1.5.3 Reactivos Patrones certificados para absorcin atmica cido ntrico concentrado. cido clorhdrico concentrado. Solucin de lantano al 5 % (fraccin en masa a volumen). Se prepara disolviendo 58,65 g de xido de lantano del 99,99 % (fraccin en masa) de pureza en 250 ml de cido clorhdrico concentrado, aadiendo el cido lentamente y se diluye a 1 L con agua.

1.5.4 Materiales Matraces aforados de 100 ml y 1 000 ml. Material de vidrio usual de laboratorio

1.5.5 Procedimiento El equipo se debe acondicionar de acuerdo con las condiciones de operacin de la Tabla 1, sin embargo, para lograr las condiciones ptimas de trabajo, se debe consultar el manual de operacin del equipo verificando la absorbancia del estndar de chequeo de sensibilidad, con el fin de confirmar el desempeo del equipo antes de proceder a la calibracin. La curva de calibracin se debe realizar con la absorbancia de por lo menos tres soluciones patrones. La absorbancia de la muestra debe estar entre la absorbancia del patrn de menor y mayor concentracin, utilizados en la curva. Para evitar la interferencia ocasionada por el fsforo cuando se va a determinar calcio o magnesio, se aade solucin de lantano de forma que al final, la concentracin de xido de lantano sea del 1 % en el volumen final.

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Cuadro 1. Condiciones de operacin

Elemento Ca Mg Co Cu Fe Mn Mo Ni Si Zn B Longitud de onda 422.7 422.7 285.2 240.73 324.7 248.3 279.5 313.26 Llama Aire-C2H2 N2O-C2H2 Aire-C2H2 N2O-C2H2 Aire-C2H2 Aire-C2H2 Aire-C2H2 Intervalo 1) mg/L 2 - 20 2 - 20 0.2 - 2 hasta 1.0 2 - 20 2 - 20 2 - 20 Concentracin del estndar de chequeo de sensibilidad mg/L 2) 4.0 5.0 0.3 3.0 4.0 5.0 2.5 Notas Debe usarse solucin de Oxido de lantano

N2O-C2H2 hasta 40 30 hasta 232 Aire-C2H2 3.0 4.0 hasta 251.6 N2O-C2H2 100 150 213.8 Aire-C2H2 0.5 - 5 1.0 hasta 249.8 N2O-C2H2 600 400 1) Este intervalo puede variar dependiendo de las especificaciones del equipo a emplear 2) El estndar de chequeo de sensibilidad debe dar una absorbancia de 0.2 0.03

Preparacin de las soluciones para la curva de calibracin Se diluyen alcuotas de las soluciones de los elementos a determinar a partir de patrones certificados en las mismas condiciones en que se prepara la muestra, con el fin de obtener por lo menos tres soluciones de calibracin de cada elemento, dentro del intervalo de la determinacin. Preparacin de la muestra Determinacin de elementos solubles en agua en fertilizantes slidos y lquidos: Se pesa 1 g de muestra molida que pasa un tamiz con abertura de malla de 500 m (No. 35) para fertilizantes slidos o 1 g de fertilizante lquido previamente homogeneizado. Se disuelve en agua, se transfiere a un matraz volumtrico de 100 ml y se lleva a volumen. Se filtra y se mide la absorbancia de la solucin directamente o se diluye con agua destilada hasta obtener soluciones con concentracin dentro del intervalo de trabajo. Determinacin de elementos solubles en HCl concentrado en fertilizantes slidos y lquidos: En un vaso de precipitados de 150 ml, se coloca 1 g de muestra (slida o lquida) se adicionan 10 ml de cido clorhdrico concentrado y se lleva a ebullicin

37 durante 15 min. Se deja enfriar, se transfiere a un matraz volumtrico de 100 ml y se completa con agua hasta volumen. Se filtra y se mide la absorbancia de la solucin directamente o se diluye con agua hasta obtener soluciones con concentracin dentro del intervalo de trabajo. Determinacin de elementos en fertilizantes que contienen materia orgnica, inorgnica y mezcla de ellos: Este procedimiento se emplea para determinar el contenido total de cada uno de los elementos presentes. En un vaso de precipitados de 150 ml, se coloca 1 g de muestra y se adicionan 10 ml de agua regia (HNO3:HCl) (1:3) respectivamente y se lleva a ebullicin durante 15 min. Se deja enfriar, se transfiere a un matraz volumtrico de 100 ml y se lleva a volumen con agua destilada. Se filtra y se mide la absorbancia de la solucin directamente o se diluye con agua hasta obtener soluciones con concentracin dentro del intervalo de trabajo. 1.5.6 Resultados El contenido del elemento en productos slidos, se calcula aplicando la siguiente ecuacin:

Donde E = contenido del elemento, en porcentaje c = lectura, en mg/L m = masa de la muestra, en gramos F = factor de dilucin Para el caso de las productos lquidos:

De acuerdo con la preparacin de la muestra, los elementos se expresan como solubles en agua o solubles en cido clorhdrico.

38 1.6 DETERMINACIN DEL AZUFRE DISPONIBLE (Turbidimtrico) 1.6.1 Principio Terico El mtodo presentado en esta norma NTC 5402, permite la determinacin del azufre en dos etapas: en la primera se realiza la extraccin del in sulfato (SO 4 =) soluble, ms el adsorbido en la fraccin coloidal del suelo y en la segunda se realiza su determinacin cuantitativa mediante mtodos turbidimtricos. La extraccin puede realizarse con diferentes soluciones extractoras. (Vase la tabla 1). La cuantificacin del ion SO 4= se basa en la reaccin de precipitacin entre el in sulfato extrado y el cloruro de bario (BaCl 2) presente en el reactivo turbidimtrico. El precipitado blanco de BaSO 4 puede ser mantenido en suspensin mediante la adicin de gelatina, para posterior determinacin turbidimtrica en el nefelmetro o en el espectrofotmetro. Se requiere que el extracto sea transparente e incoloro lo cual se logra mediante la accin del carbn activado. 1.6.2 Equipos Agitador magntico Espectroftometro que permita lecturas en el rango de 400 nm a 420 nm

1.6.3 Reactivos Mtodos de extraccin Todos los reactivos empleados deben ser grado reactivo analtico. El agua debe ser desionizada o destilada con un pH mayor a 5,6 y una conductividad elctrica menor a 0,2 mS/m a 25 C. Soluciones extractoras de acuerdo con el mtodo seleccionado: Solucin extractora de fosfato monoclcico (Ca(H2PO4)2H2O) 0,008 M: Pesar 2.03 g de fosfato monoclcico monohidratado, agregar 1 ml de cido actico glacial y llevar a 1L con agua. Solucin extractora de fosfato de potasio (K 2HPO4) debe contener 500 mg/L de fsforo: Se pesan 2.19 g de K2HPO4 en agua y se lleva a un litro. Solucin extractora de cloruro de calcio (CaCl2) al 0,15 %: Pesar 1.5 g de cloruro de calcio dihidratado y llevar a un litro con agua. Solucin extractora de cloruro de litio (LiCl) 0,1 N: Disolver 4.2 g de cloruro de litio en agua y llevar a un litro. Solucin extractora de acetato de amonio (NH 4O2C2H3) 0.5 M y cido actico (C2H4O2) 0.25 M:

39

cido actico (C2H4O2) 0.25 M: medir en una probeta 15 ml de cido actico glacial (densidad 1.05 g/ ml, 99.9 %). Llevarlos a 1L con agua. Solucin extractora: disolver 39 g de acetato de amonio y llevar a un litro con cido actico 0.25 M. Cuadro 1. Soluciones extractoras

Solucin extractora Mtodo por extraccin con fosfato monoclcico

Concentracin Fosfato monoclcico (Ca(H2PO4)2H2O en concentracin 0.008M.

Recomendaciones para su uso Recomendado para determinar el azufre absorbido, pues el in fosfato desplaza fcilmente el sulfato absorbido y el in calcio elimina problemas de floculacin, al tiempo que limita la extraccin de materia orgnica.

Mtodo por Fosfato de potasio Recomendado para suelos de regiones hmedas pues el in extraccin con (K2HPO4) en concentracin fosfato desplaza fcilmente el sulfato absorbido. fosfato de 0.15% potasio Mtodo por Cloruro de calcio (CaCl2) en Los extractantes que emplean soluciones de calcio y extraccin con concentracin 0.01 M magnesio, usualmente darn soluciones ms claras para el cloruro de anlisis. calcio Mtodo por extraccin con Cloruro de litio Cloruro de litio (LiCl) en concentracin 0.1 N Recomendado para suelos con poca capacidad de adsorcin y con poco contenido de materia orgnica. Las soluciones de cationes monovalentes frecuentemente extraen cantidades considerables de materia orgnica que pueden interferir seriamente en el anlisis de sulfatos cuando se emplea el mtodo turbidimtrico. Se recomienda para todo tipo de suelos. Presenta buena correlacin con la cantidad de azufre extrado por la planta.

Mtodo por extraccin con agua Mtodo por extraccin con acetato de amonio - cido actico

Pasta saturada

Acetato de amonio (NH4O2C2H3) 0.5 M Acido actico (C2H4O2) 0.25 M

Se recomienda para todo tipo de suelos.

Mtodo de cuantificacin Todos los reactivos empleados deben ser grado reactivo analtico. El agua debe ser desionizada o destilada : con un pH mayor a 5.6 y una conductividad elctrica menor a 0.2 mS/m a 25 C. Solucin estndar de 1 000 mg/L (ppm) de azufre (S): disolver 5.43 g de sulfato potsico (K2SO4) en un baln volumtrico de un litro y llevar a volumen con agua.

40 cido clorhdrico (HCl) 6 M: agregar 500 ml de HCl concentrado a 300 ml de agua y diluir hasta un litro. Solucin inicial cida de azufre: mezclar 65 ml de HNO3 concentrado, 250 ml de cido actico glacial y aproximadamente 500 ml de agua, agregar 2 ml de la solucin estndar de 1 000 mg/L (ppm) de azufre y llevar a volumen de un litro con agua Reactivo turbidimtrico: disolver 10 g de polivinil pirrolidona (PVP) K30 en aproximadamente 300 ml de agua caliente. Este reactivo puede remplazarse por bactogelatina en cantidad de 1 g aproximadamente y 300 ml de agua caliente. Disolver 150 g de cloruro de bario (BaCl 2.2H2O) en aproximadamente 500 ml de agua. Mezclar la solucin de PVP o de la bactogelatina con la solucin de BaCl 2 y llevar el volumen final a un litro filtrando la solucin para guardarla en un frasco oscuro a una temperatura aproximada de 4 C. 1.6.4 Materiales Embudos Bchner Pipetas Buretas Material normal de laboratorio

1.6.5 Procedimiento Extraccin con fosfato monoclcico: Se pesan 10 g de suelo. Se agregan 25 ml de solucin extractora agitando 10 min a velocidad media para luego filtrar. Se contina con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Extraccin con fosfato de potasio: Se pesan 5 g de suelo, aadir 50 ml de solucin extractora, agitar por 30 min a velocidad media y filtrar al vaco. Se contina con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Extraccin con cloruro de calcio: Se pesan 5 g de suelo, aadir 50 ml de solucin extractora, agitar por 30 min a velocidad media y filtrar al vaco. Se contina con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Extraccin con cloruro de litio: Se pesan 5 g de suelo, aadir 50 ml de solucin extractora, agitar por 30 min a velocidad media y filtrar al vaco. Se contina con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Extraccin con agua: Se colocan 100 g de suelo en un cono de saturacin o recipiente y se adiciona poco a poco agua homogenizando hasta lograr una pasta saturada lo ms uniforme posible. Durante el proceso de homogenizacin y saturacin se debe eliminar el aire de los poros destruyndolos. La obtencin de la pasta saturada se logra cuando se tiene un material saturado de agua con un brillo

41 metlico superficial. Esta pasta se deja en reposo de 12 h a 16 h. A continuacin se filtra al vaco. Se continua con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Extraccin con acetato de amonio cido actico: Se pesan 10 g de suelo. Se agregan 25 ml de solucin extractora agitando 30 min a velocidad media para luego filtrar. Se contina con el procedimiento de turbidimtrica usando una alcuota del extracto. Mtodo de cuantificacin El filtrado para desarrollo de turbidez debe ser transparente e incoloro. En caso de tener un filtrado coloreado puede usarse carbn activado para decolorar (aproximadamente 0,3 g). En caso de turbidez, se debe repetir la filtracin. En caso de que se realice decoloracin con carbn activado, este se debe agregar en la misma cantidad usada en las muestras al blanco de proceso. La cuantificacin del azufre por turbidimtrica se debe realizar de acuerdo con las instrucciones del manual del equipo y bajo las condiciones instrumentales y de control requeridas. Se toma una alcuota de 10 ml del filtrado y se agregan 10 ml de la solucin inicial cida de azufre. Se agita y se agregan 4 ml del reactivo turbidimtrico. Se contina la agitacin y se deja en reposo durante 20 min. Este mismo procedimiento se realiza sobre el blanco y los patrones y luego se realiza la lectura del azufre a una longitud de onda de 420 nm en el espectrofotmetro.

42 1.6.6 Resultados Determinacin de la humedad a 105 c en base seca (pw) Se pesan 10 g de suelo en una cpsula metlica y se deja en la estufa a 105 C por 24 h. Se enfra en un desecador y se pesa de nuevo. La humedad se calcula sobre la base de suelo seco y se representa por Pw, empleando la siguiente formula:

Donde: Pw = humedad de la muestra a 105 C, expresada en base seca, en porcentaje. Clculo del azufre El azufre disponible, se calcula mediante la siguiente formula:

Donde Lequipo = Lectura del equipo en unidades de concentracin de mg/L (ppm) Vextractante = Volumen del extractante, en ml. fd = Factor de dilucin (si no se realiza diluciones, el factor es igual a 1) Valicuota = Volumen de la alcuota del extracto, en ml Pmuestra = Peso de la muestra, en g PW = Humedad de la muestra a 105 C, en porcentaje

43 1.7 DETERMINACION DEL CONTENIDO DE BORO (Mtodo azometina - H ) 1.7.1 Principio Terico Esta norma NTC 1860, establece el mtodo espectrofotomtrico de Azometina-H para determinar el contenido de boro en abonos o fertilizantes, que contengan hasta 20000 ppm de boro. Esta norma no es aplicable en fertilizantes que contienen urea formaldehido. El reactivo de coloracin azometina-H con el boro en solucin, forma un complejo boro azometina - H de color amarillo, el cual es estable al cabo de 2 h y su permanencia es de 1 h. El procedimiento emplea agentes quelantes para acomplejar entre otros: iones cobre, aluminio y hierro que causan interferencias. 1.7.2 Equipos Espectrofotmetro capaz de dar lecturas en el espectro visible a una longitud de onda de 420 nm. pH-metro.

1.7.3 Reactivos Los reactivos empleados deben ser grado analtico. Agua destilada libre de CO2 cido Actico cido Perclrico (aproximadamente 1.2 N): Se disuelve una parte de cido clorhdrico en nueve partes de agua destilada. Nota 3. Cuando el fertilizante no contenga materia orgnica o cuando la contenga en pequea cantidad, el cido perclrico puede ser remplazado por cido clorhdrico o cido ntrico. cido ascrbico Solucin reguladora de pH SOLUCIN A. Se disuelven 250 g de acetato de amonio y 25 g de sal sdica de cido etilendiaminotetractico (EDTA) en una pequea cantidad de agua destilada y se neutraliza con hidrxido de sodio , utilizando fenolftalena como indicador. SOLUCIN B. Se disuelven 10 g de sal disdica del cido nitrilotriactico en 400 ml de agua destilada. En el caso de no contar con la sal disdica para la preparacin de la solucin B, sta se debe preparar de la siguiente manera: se mezclan 7, 646 g de cido nitrilo triactico y 46 ml de hidrxido de sodio 1N. Se calienta hasta 45 C, se deja enfriar y se adicionan aproximadamente hasta 400 ml de agua destilada. El pH se debe ajustar entre 6 y 7 con soda o cido actico.

44 Las soluciones A y B se transfieren a un matraz volumtrico de 1L, se adicionan 125 ml de cido actico glacial y se adiciona agua destilada hasta 850 ml; el pH se debe ajustar hasta 4.7 con cido perclrico o hidrxido de amonio, utilizando un pH-metro. Se completa a volumen con agua destilada. Solucin de Azometina-H: Se disuelven 0.9 g del reactivo azometina-H y 2 g de cido ascrbico en 10 ml de agua destilada, se calienta en un bao de mara. Se deja enfriar, se transfiere a un matraz volumtrico de 100 ml y se completa a volumen con agua destilada. Si la solucin presenta turbiedad, se debe calentar nuevamente. Este reactivo conserva su estabilidad hasta por 14 das si se almacena en refrigeracin. Solucin madre de Boro: Se disuelven 0.572 0 g de cido brico en 100 ml de agua destilada, se transfieren cuantitativamente a un matraz volumtrico de 1L, se adicionan aproximadamente 100 ml de agua destilada y se agita hasta disolucin completa. Se completa a volumen y se transfiere a una botella plstica. (1 ml de esta solucin contiene 100 mg. de boro). Hidrxido de amonio: Se prepara una solucin 1:1 Hidrxido de sodio

1.7.4 Materiales Matraces volumtricos Esptula Probeta Beaker

1.7.5 Procedimiento Peso de muestra Para determinar la cantidad de muestra a pesar, se debe tener en cuenta la siguiente tabla: Cuadro 1. Determinacin peso de muestra Ppm de boro esperado De 15000 a 20000 5000 a menos de 15000 De 4000 a menos de 5000 Menos de 4000 peso de muestra (g) 5.0 1.0 1.0 alcuota (ml.) 2 2 5 5

Muestras solubles en agua: Se pesa la cantidad de muestra (vase tabla) con aproximacin al 0.1 mg y se transfieren a un 44erlenmeyer con cuello esmerilado

45 de 500 ml. Se adicionan 125 ml de agua destilada, se instala el 45erlenmeyer en el equipo de refrigeracin y se lleva a ebullicin durante 15 min. Se deja enfriar, se filtra, el filtrado se recoge en un matraz de 250 ml. Los slidos retenidos se lavan con 6 porciones de agua caliente, se deja enfriar, se completa a volumen y se guarda en una botella plstica. Se toma una alcuota (vase tabla) de la solucin obtenida de tal manera que contenga entre 40 mg y 100 mg de boro y se transfiere a un matraz volumtrico de 50 ml. Se adicionan 15 ml de la solucin reguladora con pH 4.7 y 4 ml de azometina-H. Se diluye a volumen, se mezcla vigorosamente y se deja en reposo durante 2h. Muestras solubles en acido: Se pesa una cantidad de muestra (vase tabla 1.) con aproximacin al 0.1mg y se transfieren a un 45erlenmeyer con cuello esmerilado de 500 ml. Se adicionan 10 ml de cido clorhdrico y 50 ml de agua destilada, se instala el erlenmeyer en el equipo de refrigeracin y se lleva a ebullicin durante 15 min. Se deja enfriar y la solucin se transfiere a un matraz volumtrico de 250 ml, se completa a volumen con agua destilada, se filtra, el filtrado se recoge en una botella plstica. Se toma una alcuota (vase tabla 1.) de la solucin obtenida de tal manera que contenga entre 40 mg y 100 mg de boro y se transfiere a un matraz volumtrico de 50 ml. Se adicionan 15 ml de la solucin reguladora con pH 4.7 y 4 ml de azometina-H. Se diluye a volumen, se mezcla vigorosamente y se deja en reposo durante 2h. Se prepara simultneamente un blanco de la siguiente manera: se transfieren 2 ml de cido perclrico a un matraz de 50 ml y se adicionan 15 ml de la solucin reguladora con pH 4.7 y 4 ml de azometina-H. Se diluye a volumen, se mezcla vigorosamente y se deja en reposo durante 2h. Al cabo de 2 h, se determina la absorbancia a 420 nm. Preparacin de la curva de calibracin Se toman alcuotas de 0.25 ml, 0.50 ml, 0.75 ml y 1.0 ml de la solucin madre de boro y se transfieren a matraces de 50 ml. Se adicionan 2 ml de cido perclrico y se adicionan 15 ml de la solucin reguladora con pH 4.7 y 4 ml de azometina-H. Se diluye a volumen, se mezcla vigorosamente y se deja en reposo durante 2h. Se prepara simultneamente un blanco de la siguiente manera: se transfieren 2 ml de cido perclrico a un matraz de 50 ml y se adicionan 15 ml de la solucin reguladora con pH 4.7 y 4 ml de azometina-H. Se diluye a volumen, se mezcla vigorosamente y se deja en reposo durante 2h. Al cabo de 2 h, se determina la absorbancia a 420 nm. El pH de las soluciones patrn deben ser igual al de las muestras para evitar variacin de color.

46 Esta soluciones contienen 0 mg/ml; 0.5 mg/ml; 1.0 mg/ml; 1.5 mg/ml y 2.0 mg/ml. de boro. Se construye el grfico indicando en las abcisas las concentraciones de las soluciones patrones de boro y en las ordenadas los valores correspondientes de absorbancia. 1.7.6 Resultados El contenido de boro en la muestra se determina mediante la siguiente ecuacin:

Donde %B = contenido de boro en porcentaje en masa. C = contenido de boro en la muestra, obtenida a partir de la curva de calibracin. D = factor de dilucin. M = masa de la muestra en gramos.

2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA Norma tcnica Colombiana NTC. Manual de Laboratorio de Suelos.

47 CAPITULO 3 ANALISIS DE PLAGUICIDAS INTRODUCCION El uso de plaguicidas en zonas cercanas a cuerpos de agua, establece la necesidad de realizar anlisis de sustancias a bajos niveles de concentracin para determinar si se encuentran en los rangos establecidos por los organismos de proteccin ambiental. En las cuencas de los Ros se presentan prcticas agrcolas. Esto genera el consumo de pesticidas por parte de los agricultores como una defensa frente a los factores que pueden impedir el desarrollo de sus cultivos. Estos pesticidas podran llegar a las aguas superficiales de los Ros por medio del viento, aguas de escorrenta, o por medio de personas que arrojen desechos contaminados con estas sustancias. Los plaguicidas organofosforados son en general mucho ms txicos para los vertebrados en comparacin con otras clases de insecticidas a pesar que se degradan rpidamente en el medio ambiente. Existe un medio normativo expedido por el ministerio de salud, el decreto N 1594 del 26 de Junio de 1984, en el cual, en el artculo 38 donde se establecen los criterios de calidad admisibles para la destinacin del recurso agua para tratamiento convencional no esta especificada la concentracin permitida para los pesticidas organofosforados. Por esta razn se toma como referencia el articulo 45 donde estn asignados los criterios de calidad admisibles para la destinacin del recurso para la preservacin de flora y fauna, en aguas dulces, fras o clidas y en aguas marinas o estuarinas, en el cual el valor permitido para pesticidas organofosforados expresado como concentracin de agente activo (cada sustancia) es de 0.05 CL9650.

48 1. MTODO GENERAL 1.1 EVALUACIN DEL GRADO DE CONTAMINACIN POR PESTICIDAS ORGANOFOSFORADOS, POR GC-MS, EN AGUAS 1.1.1 Principio Terico Determinacin y cuantificacin de 19 pesticidas organofosforados que pueden encontrarse a nivel de trazas en aguas superficiales en los Ros. El mtodo se basa en la extraccin lquido-lquido por etapas, con Hexano y el anlisis por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (GC/MS). 1.1.2 Equipos Cromatgrafo de gases acoplado a espectrometra de masas GSMSQP2010 marca Shimadzu con automuestreador operando con el modo de impacto electrnico (IE) con el monitoreo de iones selectivos (SIM). Las caractersticas de la columna empleada fueron: 30 m de largo, 0.25 mm DI, 0.25 m de partcula Rtx-CL Pesticidas Restek. El software que se emplea es el GCMS Solutions 2.5. El Cromatgrafo de gases se programa a una temperatura inicial de 50 C por un minuto, seguido de un aumento de temperatura a 125 C con una rata de 25 C/min y finalmente se lleva hasta 320 C con una rata de 10 C/min y se mantiene a esta temperatura por 10 minutos. Se realiza un anlisis total de iones (scan) por el mtodo de impacto electrnico (IE).

1.1.3 Reactivos Patrn de la mezcla de pesticidas organofosforados Hexano grado HPLC NaCl KH2PO4 K2HPO4 Slica gel Na2SO4 anhidro

49 1.1.4 Materiales Micro-jeringas Viales Embudo en V Vidrio reloj Matraces

1.1.5 Procedimiento Calibracin Para la calibracin del mtodo cromatogrfico se realizan curvas de calibracin por el mtodo de impacto electrnico (IE) que van desde 0.2 g/ml hasta 0.01 g/ml incluyendo el valor mximo permitido para pesticidas organofosforados (cada uno) que es de 0.05 g/ml expedido por el ministerio de salud. Tcnica de Extraccin lquido-lquido por etapas con Hexano Se realiza la metodologa de extraccin lquido-lquido por etapas. Como solvente orgnico se utiliza Hexano. Se toman 5 ml de agua desionizada contaminada con volumen del patrn de la mezcla de pesticidas organofosforados de concentracin conocida, se adiciona 0.01 moles de Cloruro de Sodio (NaCl), fosfato de potasio (KH 2PO4) y fosfato de potasio dibsico (K2HPO4). Esta solucin se lleva a un tubo de ensayo donde se agita y realiza la extraccin lquido-lquido con Hexano grado HPLC. El extracto orgnico se analiza por cromatografa de gases y espectrometra de masas. Anlisis de las muestras de agua Se lleva a cabo por cromatografa de gases y espectrometra de masas de igual manera como se analizan los patrones. Las muestras y los patrones se conservan en nevera para mantenerse refrigeradas. 1.1.6 Resultados Reportar los resultados obtenidos por el mtodo cromatogrfico.

50 1.2 DETERMINACION DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS EN TOMATES 1.2.1 Principio Terico Determinacin y cuantificacin de 10 pesticidas organofosforados (POPs) en tomates, usando extraccin lquidolquido (LLE) por etapas, con Hexano y el anlisis por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (GC/MS). 1.2.2 Equipo Rotaevaporador Cromatgrafo de gases acoplado a espectrometra de masas GSMSQP2010 marca Shimadzu con automuestreador operando con el modo de impacto electrnico (IE) con el monitoreo de iones selectivos (SIM). Las caractersticas de la columna empleada fueron: 30 m de largo, 0.25 mm DI, 0.25 m de partcula Rtx-CL Pesticidas Restek. El software que se emplea es el GCMS Solutions 2.5. El Cromatgrafo de gases se programa a una temperatura inicial de 50 C por un minuto, seguido de un aumento de temperatura a 125 C con una rata de 25 C/min y finalmente se lleva hasta 320 C con una rata de 10 C/min y se mantiene a esta temperatura por 10 minutos. Se realiza un anlisis total de iones (scan) por el mtodo de impacto electrnico (IE).

1.2.3 Reactivos Estndar de plaguicida Hexano grado HPLC Slica gel. Na2SO4 anhidro.

1.2.4 Materiales Viales de 2 ml Micro jeringas Embudo en V Vidrio reloj Matraces

51 1.2.5 Procedimiento Calibracin Se realizaron tres curvas de calibracin de los POPs, empleando las soluciones estndar as: rango bajo de 0.245 ng a 2.45 ng, rango medio de 1.225 ng a 12.25 ng y rango alto de 4.9 ng a 49 ng segn el Triclorfon, con volmenes de inyeccin de 0.5, 1, 2, 3, 4 y 5l. Licuar la muestra y homogenizar, tomar 5 g, llevar a tubos de ensayo de 20 ml con tapa rosca y disolver en 6 ml de agua desionizada. A esta mezcla adicionar el 30%v/v de NaCl. Realizar extraccin lquido lquido con Hexano (1 ml x 3 veces) agitando por 3 minutos y centrifugando a 50 rpm durante 5 minutos. Sulfato de sodio (Na2SO4) anhidro fue adicionado a los extractos obtenidos. Posteriormente someter a clean-up con columnas de slica gel de aproximadamente 4 cm. El volumen obtenido luego de este procedimiento se concentra a 1 ml. Finalmente almacenar las soluciones en viales de 2 ml con tapa de septum perforable. 1.2.6 Resultados Reportar los resultados obtenidos por el mtodo cromatogrfico. 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA Cardona Londoo, Angela Cristina, Giraldo Tamayo, Luisa Fernanda, Arrubla V., Juan Pablo, Montoya Navarrete, Carlos Humberto. Evaluacin del grado de contaminacin por pesticidas organifosforados, de la cuenca del Ro Otun, por GC-Ms. En: Scientia et Technica Ao XIII, No x, Mes de 200x. Universidad Tecnolgica de Pereira. Determinacin de residuos de plaguicidas organofosforados en muestras de tomate de la ciudad de Bogot. P.A Castro. Universidad de los Andes, Bogot, Colombia

52 CAPITULO 4 ANALISIS DE AGUAS

INTRODUCCIN Actualmente, es tan importante conocer la calidad del agua para el consumo humano, como lo puede ser para el riego de cultivos, para el uso industrial en calderas, para la fabricacin de productos farmacuticos, para la expedicin de licencias ambientales, para disear y ejecutar programas de monitoreo en las evaluaciones ambientales, para adecuarla a las mltiples aplicaciones analticas de los laboratorios y para regular y optimizar el funcionamiento de las plantas de tratamiento, entre muchos otros fines. En sntesis, una determinada fuente de aguas puede tener la calidad necesaria para satisfacer los requerimientos de un uso en particular y al mismo tiempo, no ser apta para otro. Puesto que no existe un tipo de agua que satisfaga los requerimientos de calidad para cualquier uso concebible ni tampoco un criterio nico de calidad para cualquier fin, en la actualidad es ms frecuente que el concepto de Calidad de Aguas, se halle ligado a una utilidad o aplicacin perfectamente establecida. Dichas aplicaciones las define el cliente o usuario de los resultados y generalmente estn relacionadas con preguntas tales como: Es apta esta fuente para el consumo humano?, Es til para el riego de cultivos frutales?, Sirve para propsitos pisccolas?, Es incrustante o corrosiva?, etc., etc. 1. RESOLUCION NUMERO 2115 DE 2007 Definiciones Artculo 1. Para los efectos de la presente resolucin, se adoptan las siguientes definiciones: Anlisis microbiolgico del agua: son los procedimientos de laboratorio que se efectan a una muestra de agua para consumo humano para evaluar la presencia o ausencia, tipo y cantidad de microorganismos. Anlisis bsicos: es el procedimiento que se efecta para determinar turbiedad, color aparente, pH, cloro residual libre o residual de desinfectante usado, coliformes totales y escherichia coli.

53 Anlisis complementarios: es el procedimiento que se efecta para las determinaciones fsicas, qumicas y microbiolgicas no contempladas en el anlisis bsico, que se enuncien en la presente resolucin y todas aquellas que se identifiquen en el mapa de riesgo. Anlisis fsico y qumico del agua: son aquellos procedimientos de laboratorio que se efectan a una muestra de agua para evaluar sus caractersticas fsicas, qumicas o ambas. Caractersticas: trmino usado para identificar elementos, compuestos, sustancias y microorganismos presentes en el agua para consumo humano. Cloro residual libre: es aquella proporcin que queda en el agua despus de un periodo de contacto definido que reacciona qumica y biolgicamente como acido hipocloroso o como ion hipoclorito. Dosis letal media DL50: estimacin estadstica de la dosis mnima necesaria para matar el 50% de una poblacin de animales de laboratorio bajo condiciones controladas. Se expresa en miligramos de toxico por kilogramo de peso del animal. Adems de las sealadas en el decreto 1575 de 2007. Agua cruda: Es aquella que no ha sido sometida a proceso de tratamiento. Agua para consumo humano: Es aquella que se utiliza en bebida directa y preparacin de alimentos para consumo. Agua potable: Es aquella que por reunir los requisitos organolpticos, fsicos, qumicos y microbiolgicos, en las condiciones sealadas en el presente decreto, puede ser consumida por la poblacin humana sin producir efectos adversos a su salud. Caractersticas Fsicas y Qumicas del agua para consumo humano Articulo 2. Caractersticas fsicas. El agua para consumo humano no podr sobrepasar los valores mximos aceptables para cada una de las caractersticas fsicas que se sealan a continuacin:

54 Cuadro N 1. Caractersticas Fsicas Caractersticas Color Aparente Olor y Sabor Turbiedad Expresadas en: Unidades de Platino Cobalto (UPC) Aceptable o no aceptable Unidades nefelomtricas de turbidez (UNT) Valor admisible 15 Aceptable 2

Artculo 5. Caractersticas qumicas de sustancias que tienen reconocido efecto adverso en la salud humana. Las caractersticas qumicas del agua para consumo humano de los elementos, compuestos qumicos y mezcla de compuestos qumicos diferentes a los plaguicidas y otras sustancias que al sobrepasar los valores mximos aceptables tienen reconocido efecto adverso en la salud humana, deben enmarcarse dentro de los valores mximos aceptables que se sealan a continuacin: Cuadro N 2. Caractersticas qumicas de sustancias que tienen reconocido efecto adverso en la salud humana Elementos, compuestos qumicos y mezcla de compuestos qumicos diferentes a los plaguicidas y otras sustancias Antimonio Arsnico Bario Cadmio Cianuro libre y disociable Cobre Cromo Total Mercurio Nquel Plomo Selenio

Expresadas como

Valor mximo aceptable (mg/L) 0.02 0.01 0.7 0.003 0.05 1.0 0.05 0.001 0.02 0.01 0.01

Sb As Ba Cd CNCu Cr Hg Ni Pb Se

55 Articulo 6. Caractersticas qumicas de sustancias que tienen implicaciones sobre la salud humana. Se sealan en el siguiente cuadro: Cuadro N 3. Caractersticas qumicas que tienen implicaciones sobre la salud humana. Elementos, compuestos qumicos y mezcla de compuestos qumicos que tienen implicaciones sobre la salud humana Carbono orgnico total Nitritos Nitratos Fluoruros

Expresados como: COT NO2NO3F-

Valor mximo aceptable (mg/L) 5.0 0.1 10 1.0

56 Articulo 7. Criterios de calidad qumica para caractersticas con implicaciones de tipo econmico o accin indirecta sobre la salud. Se sealan en el siguiente cuadro: Cuadro N 4. Caractersticas con implicaciones de tipo econmico o accin indirecta sobre la salud humana Elementos y compuestos qumicos que tienen implicaciones de tipo econmico Calcio Alcalinidad Total Cloruros Aluminio Dureza Total Hierro Total Magnesio Molibdeno Manganeso Sulfatos Zinc Fosfatos

Expresadas como

Valor admisible (mg/L)

Ca CaCO3 ClAl3+ CaCO3 Fe Mg Mo Mn SO4-2 Zn PO4-3

60 200 250 0.2 300 0.3 36 0.07 0.1 250 3 0.5

57 2. METODOS GENERALES 2.1 DETERMINACIN DEL COLOR 2.1.1 Principio Terico El principio de este mtodo se basa en la medicin del color verdadero y/o aparente en una muestra de agua natural, mediante su comparacin visual con una escala estandarizada de platino-cobalto. (La unidad platino-cobalto es la que se produce al disolver un mg de platino/L en forma de Ion cloroplatinato). Este mtodo depende de la apreciacin visual del color de la muestra por el analista en comparacin con una escala estandarizada. El color verdadero y el aparente son dependientes del pH por lo que es necesario especificar el valor de pH de la muestra junto al reporte del color verdadero y aparente. 2.1.2 Equipo Potencimetro con electrodo para medicin de pH. Balanza analtica con precisin de 0.1 mg.

2.1.3 Reactivos Hexacloroplatinato de potasio (K2PtCl6). Cloruro de cobalto hexahidratado (CoCl26H2O). Acido clorhdrico concentrado (HCl). Disolucin madre de cloroplatinato (500 unidades de color).

2.1.4 Material Tubos Nessler Frascos de vidrio o polietileno de 250 ml

2.1.5 Procedimiento Preparacin de disolucin madre de cloroplatinato (500 unidades de color): Pesar aproximadamente y con precisin 1.246 g de hexacloroplatinato de potasio, (equivalente a 0.5 g de platino metlico) y 1.0 g de cloruro de cobalto hexahidratado (equivalente a 250 mg de cobalto metlico) y disolver en 500 ml de agua con 100 ml de cido clorhdrico concentrado. Aforar a 1L con agua. Esta disolucin estndar es equivalente a 500 unidades de color. Recoleccin, preservacin y almacenamiento de muestras: Tomar un mnimo de 100 ml de muestra. Pueden utilizarse muestras compuestas. No se requiere ningn tratamiento especial en campo.

58 Preservar la muestra a 4C hasta su anlisis. Preparacin de disoluciones intermedias estndar en incrementos desde 2.5 a 100 unidades: Estos estndares servirn para poder verificar el valor de la escala de vidrios coloridos. Proteger estos estndares contra la evaporacin y contaminacin utilizando un tapn limpio e inerte. Cuadro N 1. Preparacin de la escala de color mL de disolucin estndar diluida a 50 ml con agua 0.0 0.25 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 Anlisis de la muestra Color aparente: Medir previamente el pH de la muestra usando un potencimetro debidamente calibrado, determinar el color de la muestra llenando un tubo Nessler o similar hasta la marca de 50 ml y comparar con las disoluciones intermedias. Si el color excede de 70 unidades, diluir la muestra con agua destilada en proporciones conocidas hasta que el color sea menor de 70 y mayor de 20 Unidades Pt-Co. Color verdadero. Remover la turbiedad por centrifugacin o filtracin de las muestras hasta que la muestra est totalmente clara. El tipo de filtro a utilizar o la velocidad y tiempo de centrifugacin dependern de la naturaleza de la muestra. Comparar la muestra filtrada o centrifugada con agua para asegurar que la turbiedad ha sido removida. Color en unidades Pt-Co 0 2.5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 60 70 80 90 100

59 2.1.6 Resultados Calcular las unidades de color por medio de la siguiente ecuacin: Unidades de color Pt-Co = A x FD Donde: A = Color estimado de la muestra FD = Factor de dilucin de la muestra.

60 2.2 DETERMINACIN DE LA TURBIDEZ 2.2.1 Principio terico La turbidez de un agua es producida por materias en suspensin como arcilla, materias orgnicas finamente divididas, etc. El grado de turbidez es una medida de la concentracin de estas especies. Cuando la luz pasa a travs de un medio transparente en el que existe una suspensin de partculas, parte de la radiacin se dispersa en todas las direcciones. La disminucin de la intensidad de un haz colimado, como consecuencia de la dispersin de la luz por las partculas constituye la base de los mtodos turbidimtricos. Por otra parte, los mtodos nefelomtricos se basan en la medida de la radiacin dispersada a un ngulo de 90 con respecto al haz incidente. Mtodo Nefelomtrico: Este mtodo se basa en la comparacin de la intensidad de la luz dispersada por la muestra en condiciones definidas y la dispersada por una solucin patrn de referencia en idnticas condiciones. Cuanto mayor es la intensidad de la luz dispersada, ms intensa es la turbidez. 2.2.2 Equipo Turbidmetro

2.2.3 Reactivos Suspensin Patrn de Formacina: Se prepara de la siguiente forma Solucin 1: disolver 1 gramo de sulfato de hidracina (MUY PELIGROSO) en agua destilada y dilyase hasta 100 ml. Solucin 2: Disolver 10 gramos de hexametilenotatraamina en agua destilada y dilyase hasta 100 ml. Mezclar 5 ml. de solucin 1 y 5 ml. de solucin 2 en un matraz de 100 ml. y mantener a temperatura ambiente durante 24 horas. Pasado ese tiempo se habr formado un precipitado blanco. Enrasar a 100 ml. y agitar. A sta solucin se le asigna un valor de 400 UNT (Unidades Nefelomtricas de Turbidez). Suspensin de Turbidez Estndar: Dilyanse 10 ml. de suspensin de Formacina hasta 100 ml. con agua destilada. La turbidez de esta suspensin se considera de 40 UNT.

61 Estndares Diluidos de Turbidez: Dilyanse porciones de suspensin de turbidez estndar en agua destilada segn se requiera, en un rango de 0 a 40 UNT. NOTA: las suspensiones son de preparacin diaria. 2.2.4 Material Matraces de aforo de 1000, y 100 ml Pipeta volumtrica de 10 ml Probeta de 100 ml

2.2.5 Procedimiento Preparar la curva de calibrado con los estndares diluidos. Homogeneizarlos antes con una agitacin suave. Procurar que en la cubeta de medida del espectrofotmetro no queden burbujas. Medir a 400 nm. Empleando como blanco agua destilada. Medir la turbidez de la muestra a partir de la recta de calibrado. Si la turbidez es superior a 40 UNT diluir convenientemente con agua destilada. 2.2.6 Resultados
UNT = ( A * ( B + C )) / C

Donde A= UNT encontradas en muestra diluida, B= volumen (ml) de agua de dilucin, C= volumen (ml) de la muestra tomada para dilucin.

62 2.3 DETERMINACION DE pH. 2.3.1 Principio terico La determinacin del pH en el agua es una medida de la tendencia de su acidez o de su alcalinidad. La mayora de las aguas naturales tienen un pH entre 4 y 9, aunque muchas de ellas tienen un pH ligeramente bsico debido a la presencia de carbonatos y bicarbonatos. El valor del pH en el agua, es utilizado tambin cuando nos interesa conocer su tendencia corrosiva o incrustante y en las plantas de tratamiento de agua. Los mtodos ms utilizados para esta determinacin son: Utilizando un trozo de papel indicador del pH. En las volumetras de neutralizacin. Midiendo el potencial generado (en milivoltios) por un electrodo de vidrio que es sensible a la actividad del in H +, este potencial es comparado contra un electrodo de referencia, que genera un potencial constante e independiente del pH.

2.3.2 Equipo Medidor de pH de laboratorio

2.3.3 Reactivos Solucin amortiguadora de pH 4,00 a 25 C: Disolver 10,12 g de biftalato de potasio(KHC8H4O4) en agua destilada diluya a 1 L Solucin amortiguadora de pH 6.86 a 25 C: Disolver 3.39 g de Fosfato mono potsico (KH2PO4) y 3.53 g de Fosfato disdico anhidro (Na 2HPO4) en agua destilada y diluir a un litro. 2.3.4 Material Beacker de 250 y 500 ml Probeta

63 2.3.5 Procedimiento Medir la temperatura de la muestra y ajustar el medidor con el botn de Temperatura. Insertar los electrodos en la muestra y leer el pH correspondiente. Elevar y enjuagar los electrodos con agua destilada. Almacenar los electrodos en solucin amortiguadora de pH 7 o menor. 2.3.6 Resultados Permita que el equipo se estabilice y reporte el pH marcado, especificando la temperatura a la cual se realizo la lectura.

64 2.4 DETERMINACION DE LA ALCALINIDAD 2.4.2 Principio Terico La alcalinidad de un agua es su capacidad para neutralizar cidos. Es la suma de todas las bases titulables. El valor medido puede variar significativamente con el pH del punto final usado. Los iones hidroxilos se presentan en una muestra como resultado de la disociacin o hidrlisis de solutos que reaccionan con adiciones de cido estndar. La alcalinidad, de este modo, depende del pH del punto final empleado. Cuando la alcalinidad se debe exclusivamente al contenido de carbonato o bicarbonato, el pH en el punto de equivalencia de la titulacin se determina por la concentracin de dixido de carbono (CO 2) presente en ese punto. La concentracin de CO2 depende, en general, de la totalidad de las especies de carbonatos presentes originalmente y cualquier prdida que pueda haber ocurrido durante la titulacin. REACCIONES

CO3 = + H + HCO3
HCO3 + H + CO2 + H2O

Jabones, material graso, slidos suspendidos o precipitados pueden recubrir el vidrio del electrodo y causar un respuesta lenta. permitir tiempo adicional entre las adiciones de titulante para permitir que el electrodo alcance el equilibrio o limpiar el electrodo ocasionalmente. 2.4.3 Equipos Medidor de pH Balanza Analtica Estufa de secado: para ser operada a 250 C. Placa de Agitacin Magntica

65 2.4.4 Reactivos Acido Sulfrico Estndar, 0.1 N: Aadir aproximadamente 2.8 ml de cido sulfrico concentrado (96 %) a un matraz volumtrico de 1L que contenga alrededor de 800 ml de agua destilada, aforar utilizando agua destilada. Acido Sulfrico Estndar, 0.02 N: Diluir 200 ml de solucin de cido sulfrico 0.1 N a 1000 ml con agua destilada. Fenolftalena

2.4.5 Material Bureta Pipeta volumtrica de la capacidad necesaria muestra seleccionado, 100, 50, 25 o 10 ml. Erlenmeyer de 250 ml Probeta de 25 ml Soporte Pinza Desecador

para

el volumen de

2.4.6 Procedimiento Recoleccin y preservacin de la muestra: No filtrar, diluir, concentrar o alterar las muestras con adicin de preservantes. Refrigerar las muestras que no puedan ser analizadas inmediatamente, en lo posible iniciar el anlisis dentro de las 24 h de su recoleccin, bajo ninguna circunstancia exceder el tiempo de almacenamiento de 14 das. Seleccin del tamao de muestra: Utilizar un volumen de muestra de 100 ml para realizar una titulacin inicial que permita calcular un volumen apropiado de muestra para aquellas con una alcalinidad desconocida, si el volumen de cido 0.02 N gastado excede los 20 ml, tomar un volumen de muestra menor; si el volumen de cido 0.02 N es menor 1 ml, utilizar 200 ml. Anlisis de la muestra Muestras con una alcalinidad mayor a 20 mg CaCO 3/L: Determinar el punto final de la titulacin (ver puntos finales). Enjuagar los electrodos y los recipientes de titulacin con agua destilada, desechando los enjuagues. Adicionar la cantidad de muestra seleccionada. Ajustar la temperatura de la muestra a la del ambiente. Sumergir el electrodo en la muestra y aadir una barra de agitacin magntica, colocar el recipiente que contiene la muestra sobre una placa de agitacin magntica, seleccionar un velocidad de agitacin entre 50 100 rpm.

66 Llenar la bureta con la solucin estndar de cido sulfrico 0.02 N, comenzar la adicin de solucin estndar cida en incrementos no mayores a 0.5 ml, de tal forma que se produzcan cambios de pH en 0.2 unidades mximo. Disminuir la cantidad de cido adicionada a medida que se acerca el pH del punto final seleccionado y esperar un tiempo apropiado para alcanzar el equilibrio y permitir una lectura estable en el medidor de pH. Detener la adicin de cido una vez alcanzado el punto final, registrar el volumen total. Muestras con una alcalinidad menor a 20 mg CaCO 3/L: Para alcalinidades menores a 20 mg/L, titular 200 ml de muestra de acuerdo al procedimiento anterior, detener la titulacin a un pH en el rango de 4.3 a 4.7, registrar el pH y el volumen exacto. Cuidadosamente agregar titulante adicional para reducir el pH exactamente en 0.3 unidades y registrar el volumen. Puntos finales: Cuando la alcalinidad se debe exclusivamente al contenido de carbonato o bicarbonato, el pH en el punto de equivalencia de la titulacin se determina por la concentracin de dixido de carbono (CO 2) presente en ese punto. La concentracin de CO2 depende, en general, de la totalidad de las especies de carbonatos presentes originalmente y cualquier prdida que pueda haber ocurrido durante la titulacin. Los valores de pH en la tabla 1 se sugieren como puntos de equivalencia para las correspondientes concentraciones de alcalinidad como miligramos de CaCO3 por litro. Cuadro N1. Valores de pH para puntos finales Condiciones de prueba Alcalinidad mg CaCO3/L: 30 150 500 Silicatos, fosfatos conocidos o sospechados Anlisis de rutina o automticos Desechos industriales o sistemas complejos Puntos finales pH Alcalinidad Alcalinidad Total Fenolftalena 4.9 4.6 4.3 4.5 4.5 4.5 8.3 8.3 8.3 8.3 8.3 8.3

La alcalinidad a la fenolftalena es el trmino empleado tradicionalmente para la cantidad medida por titulacin a pH 8.3 independiente del indicador de color, si alguno, se us en la titulacin. La fenolftalena o el prpura de metacresol pueden

67 ser usados para la titulacin de alcalinidad a pH 8.3. El indicador verde de Bromocresol o una mezcla de verde de Bromocresol - rojo de metilo puede ser usado para pH 4.5. 2.4.7 Resultados Titulacin potenciomtrica a un punto final de pH seleccionado

Donde: A = mL de solucin estndar de cido usada y N = normalidad del cido estndar. Titulacin potenciomtrica de muestras con baja alcalinidad

Donde: B = ml de solucin estndar de cido para el primer pH . C = ml totales de solucin estndar de cido para alcanzar un pH menor en 0.3 unidades N = normalidad del cido estndar.

68 2.5 DETERMINACION DE ACIDEZ (Mtodo de titulacin) 2.5.1 Principios Tericos La volumetra es una tcnica analtica que se basa en una reaccin qumica (reaccin de valoracin), mediante la cual se determino la cantidad de analito presente en una muestra problema por la adicin de un volumen conocido de otra sustancia de concentracin conocida (valorante), que es necesario para reaccionar completamente con dicho analito. el punto en el que la cantidad de reactivo valorante aadido es exactamente igual a la de analito presente en la muestra se conoce como punto de equivalencia de la valoracin. Experimentalmente, se determina el punto final de una valoracin como el volumen de agente valorante necesario para visualizar el punto de equivalencia. El punto final de una valoracin puede venir determinado por un cambio en una propiedad fsica de la disolucin del analito, debido a la presencia de un indicador. Las volumetras acido-base se basan en la reaccin entre un acido y una base y por tanto, se produce un intercambio de protones (reaccin de neutralizacin). En esta prctica, la acidez total se determina mediante una coloracin de la muestra con una disolucin, previamente estandarizada, de NaOH utilizando fenolftalena como indicador acido-base. Cuando se aade el indicador a la muestra, esta permanece incolora. Cuando se valora el punto de equivalencia se detecta gracias al viraje de color del indicador a rosa. 2.5.2 Equipos Balanza analtica. pH-metro Placa de agitacin

2.5.3 Reactivos Hidrxido de sodio 0.02 N Fenolftalena Agua destilada Muestra de agua

69 2.5.4 Material Pipetas volumtricas de 2, 5, 10 y 25 ml Pipetas graduadas de 5 y 10 ml Bureta de 50 ml Matraces volumtricos de 50 y 100 ml Erlenmeyer de 250 ml Vidrio de reloj Embudos en V Varilla de agitacin

2.5.5 Procedimiento Determinacin de la acidez: colocar 100 ml de agua en un matraz de 250 ml junto con tres gotas de fenolftalena como indicador. La muestra permanece incolora. A continuacin se valora con la disolucin de NaOH 0.02 N hasta adquirir una coloracin rosa, anotando el volumen de NaOH consumido. Repita la valoracin al menos dos veces y obtenga la acidez de la muestra a partir de un valor medio. 2.5.6 Resultados Determinar la acidez total del agua utilizada, expresada en mg/L de CaCO 3

Donde: A: volumen gastado de NaOH B: concentracin de NaOH Comparar el valor obtenido con los valores estndar de calidad para un agua potable.

70 2.6 DETERMINACION DE DUREZA (Determinacin de Ca y Mg) 2.6.1 Principio terico El cido etilendiaminotetraactico y sus sales de sodio (EDTA) forman un complejo de quelato soluble al aadirse a las soluciones de algunos cationes metlicos. Si a una solucin acuosa que contenga iones calcio y magnesio a un pH de 10 0.1 se aade una pequea cantidad de colorante, como negro de eriocromo T, la solucin toma un color rojo vino. Si se aade EDTA como reactivo de titulacin, los iones calcio y magnesio formarn un complejo, y, cuando todos estos iones estn incluidos en dicho complejo, la solucin cambiar del rojo vino al azul, sealando el punto final de la titulacin. Para obtener un punto final satisfactorio han de estar presentes los iones magnesio. Para asegurar esta presencia, se aade al tampn una pequea cantidad de sal magnsica de EDTA, neutra desde el punto de vista complexomtrico; de este modo se introduce automticamente una cantidad suficiente de magnesio y evita la necesidad de una correccin de blanco. La nitidez del punto final aumenta con los incrementos de pH. Sin embargo, el pH no puede aumentar indefinidamente debido al peligro de precipitacin del carbonato de calcio (CaCO3) o hidrxido de magnesio (Mg(OH)2), y porque la tincin cambia de color a pH alto. El valor de pH especificado de 10 0.1 constituye una solucin satisfactoria. Se fija un lmite de 5 minutos de duracin para la titulacin, a fin de reducir al mnimo la tendencia a la precipitacin de CaCO3. REACCIONES

71 2.6.2 Equipos Balanza analtica Placa de agitacin

2.6.3 Reactivos Solucin tampn: Disulvanse 16.9 g de cloruro amnico (NH 4Cl) en 143 ml de hidrxido de amonio (NH4OH) concentrado. Adanse 1.25 g de sal de magnesio de EDTA y dilyase hasta 250 ml de agua destilada. Si no se dispone de sal magnsica de EDTA, disulvase 1.179 g de sal Disdica de cido etilendiaminotetraactico dihidrato (grado de reactivo analtico) y 780 mg de sulfato magnsico (MgSO4.7H2O) o 644 mg de cloruro magnsico (MgCl2.6H2O) en 50 ml de agua destilada. Para alcanzar la mxima exactitud, ajstese a equivalente exacto por medio de la adicin de una pequea cantidad de EDTA MgSO4 o MgCl2. Agentes Acomplejantes: Inhibidor I: Ajstense las muestras cidas a pH 6 o ms con tampn de NaOH 0.1N. Adanse 250 mg de cianuro sdico (NaCN) en polvo. A continuacin, adase tampn suficiente para ajustar a pH 10.00. Inhibidor II: Disulvanse 5.0 g de sulfuro sdico no anhidro (Na 2S 9H2O) o 3,7 g de Na2S 5H2O en 100 ml de agua destilada. MgCDTA: Sal magnsica del cido 1,2-ciclohexanodiaminotetraactico. Adanse 250 mg por 100 ml de muestra y disulvase completamente antes de aportar la solucin tampn. Utilcese este acomplejante para evitar el uso de inhibidores txicos. Indicador Negro de Eriocromo EDTA estndar 0.01M Solucin de calcio estndar (1000 mg/L): Psese 1 g de polvo de CaCO 3 anhidro (estndar principal o reactivo especial, bajo en metales pesados, lcalis y magnesio) en un erlenmeyer de 500 ml. Colquese un embudo en el cuello del matraz y adase, poco a poco, HCl 1:1 hasta la disolucin total del CaCO3. Adanse 200 ml de agua destilada y hgase hervir durante unos minutos para expeler el CO 2. Enfrese, adanse unas gotas de indicador rojo de metilo y ajstese al color naranja intermedio por adicin de NH4OH 3N o HCl 1:1, segn se requiera. Transvsese cuantitativamente y dilyase hasta 1000 ml con agua destilada.

72 2.6.4 Materiales Beaker de 250 ml Bureta de 50 ml Embudos en V Erlenmeyer de 250 ml Pipetas volumtricas de 2, 5,10 y 25 ml Varilla de agitacin Vidrio de reloj Crisol con tapa

2.6.5 Procedimiento Toma y preservacin de muestras: Tmense las muestras en frascos de polietileno para evitar adhesin de iones responsables de la dureza a las paredes del recipiente. Analcese con rapidez la muestra para disminuir la precipitacin de compuestos de calcio o magnesio, si se requiere conservacin. Adase 1 ml de H2SO4 concentrado por cada litro de muestra. Tratamiento de la muestra: Tratamiento previo de muestras de aguas contaminadas y residuales: Utilcese la digestin de cido ntrico-cido sulfrico. Titulacin de muestras: Seleccinese un volumen de muestra que requiera menos de 1.5 ml de reactivo EDTA y realcese la titulacin en cinco minutos, medidos a partir del momento de la adicin del tampn. Dilyanse 25 ml de muestra hasta alrededor de 50 ml de agua destilada en una cpsula de porcelana u otro recipiente adecuado. Adase entre 1 y 2 ml de solucin tampn. Por lo general, 1 ml ser suficiente para dar un pH de 10.0 a 10.1. La ausencia de un cambio de color de punto final neto en la titulacin suele significar la necesidad de aadir un inhibidor en este punto, o que el indicador se ha deteriorado. Adanse una o dos gotas de solucin indicadora o una cantidad adecuada de reactivo en polvo seco. Poco a poco, adase titulante EDTA estndar, removiendo continuamente, hasta que desaparezcan los ltimos matices rojizos. Adanse las ltimas gotas con intervalos de 3-5 segundos. En el punto final, la solucin suele ser azul. Se recomienda utilizar luz natural o una lmpara fluorescente de luz da, ya que las lmparas de incandescencia tienden a producir un matiz rojizo en el azul de punto final. Muestra de dureza baja: Para fluido intercambiador de iones u otras aguas ablandadas y para aguas naturales de dureza baja (menos de 5 mg/1), tmese para titulacin una muestra amplia, de 100 a 1000 ml, y adanse cantidades proporcionalmente grandes de tampn, inhibidor e indicador. Adase lentamente

73 titulante EDTA por medio de una microbureta y realcese un blanco, utilizando agua redestilada, destilada o desionizada del mismo volumen que la muestra, a la que hay que aadir idnticas cantidades de tampn, inhibidor e indicador. Sustrigase el volumen del EDTA utilizado como blanco a partir del volumen empleado en la muestra. 2.6.6 Resultados Calclese la dureza como mg de CaCO3/L como sigue: mg CaCO3 / L = A x B x 100090 ml de muestra Donde: A= ml de EDTA gastados B= molaridad del EDTA

74 2.7 PRUEBAS DE JARRAS (coagulacin, floculacin y decantacin) 2.7.1 Principio terico La coagulacin qumica puede definirse como un proceso unitario usado para causar la coalescencia o agregacin de material suspendido no sedimentable y partculas coloidales del agua; es el proceso por el cual se reducen las fuerzas repelentes existentes entre partculas coloidales para formar partculas mayores de buena sedimentacin. En sntesis, la coagulacinfloculacin hace parte de un proceso fsico-qumico de tratamiento de aguas que tiene por objeto retirar el material coloidal del agua, y que consta de cuatro procesos o etapas: mezclado, coagulacin, floculacin y sedimentacin. El mezclado es la distribucin uniforme y rpida del coagulante en el agua antes, de que se verifiquen reacciones qumicas en proporcin apreciable. La coagulacin es la desestabilizacin del coloide mediante la formacin de flculos, originados por la adicin al agua, de un producto capaz de neutralizar la carga elctrica de las partculas coloidales, generalmente electronegativas. La floculacin es un proceso de agitacin suave y continua, que permite a las partculas suspendidas aglomerarse unas con otras, para formar flculos de tamao y densidad apropiada para su separacin por gravedad. Finalmente, la decantacin consiste en la separacin de las partculas slidas aglomeradas bajo la forma de lodos. Los principales coagulantes utilizados son las sales de aluminio o de hierro. Tambin se pueden emplear polmeros inorgnicos como los de hierro (III) y aluminio como coagulantes, por ejemplo actualmente el policloruro de aluminio (PAC) se recomienda para el tratamiento de aguas blandas y turbias. La eleccin del coagulante se efectuar despus de un estudio del agua en laboratorio, deben tenerse en cuenta, entre otros factores: La naturaleza y calidad del agua cruda. La variacin de la calidad del agua cruda (diarias o estacinales, influencia de la temperatura, etc.). Criterios de calidad y destino del agua tratada. Tratamiento previsto despus de la coagulacin. Grado de pureza del coagulante.

75 REACCIONES
Al 2(SO4)3

14 H2O

+ + +

3 Ca(OH)2 3 Na2CO3 3 Ca(HCO3)2

2Al(OH)3

3CaSO4

14 H2O

2.7.2 Equipos Equipo para pruebas de jarras que consiste de un set de agitadores mecnicos controlados por un aparato que regula su velocidad y una lmpara de iluminacin.

2.7.3 Reactivos Solucin del coagulante a emplear o el utilizado, puede ser: alumbre, cloruro frrico, etc. Las dosificaciones se estiman a partir de los valores de turbidez y pH, entre 5 y 150 ppm de alumbre Reactivos para de anlisis para pH, turbidez, color, alcalinidad y dureza. Cuadro 1. Coagulantes

76 2.7.4 Materiales Seis vasos de precipitados de 1000 mililitros. Pipetas graduadas de 5, 10 y 25 mililitros.

2.7.5 Procedimiento Determine a la muestra de agua bien homogenizada, el color, la turbiedad, el pH, la alcalinidad y la dureza. Asegrese de que el pH de la muestra se halle comprendido entre 6.0 y 7.0, en caso contrario, ajstelo con una solucin de hidrxido de sodio 0.1 N. Coloque porciones de un litro de muestra, en 6 vasos de precipitados y colquelos en el aparato de Jarras. Prenda la lmpara y los agitadores y estabilice su rotacin a 100 rpm Dosifique el coagulante seleccionado a los primeros 5 vasos, en proporcin creciente y simultneamente a todos los vasos, (pe: 4, 8, 12, 16 y 20 ml de Stock 1000 ppm de alumbre, Al2(SO4)3.). Mantenga la agitacin de las aspas a 100 rpm durante un minuto, (mezcla rpida o coagulacin) y luego baje la velocidad de agitacin a 40 rpm y mantngala durante 15 minutos mas, (mezcla lenta o floculacin). Una vez transcurridos los 15 minutos de agitacin lenta, suspenda la agitacin, retire los agitadores de los vasos y deje el sistema en reposo por 30 minutos durante los cuales deber observar la apariencia y consistencia del floc y su velocidad de decantacin. Finalmente, determine la dosis ptima seleccionando aquella en donde los valores de color y la turbidez sean los ms bajos y en donde la velocidad de decantacin y la consistencia del floc sean los mejores. Utilice el Vaso nmero seis a manera de blanco, para facilitar las comparaciones

2.7.6 Resultados El pH desempea un papel muy importante en los procesos de Coagulacin Floculacin debido a que los iones hidronio e hidroxilo aportan o destruyen la carga elctrica de las partculas coloidales. Idealmente, se debe propender porque el pH quede dentro de la zona de mnima solubilidad del catin metlico utilizado, que para el caso del aluminio, queda comprendida entre 6.0 y 7,4. Se debe tener en cuenta que la dosis ptima es la mas baja que presente las anteriores caractersticas, sin exceder la dosificacin necesaria debido a que dosificaciones superiores a la ptima, pueden resuspender nuevamente los coloides. La forma mas exacta de establecer la dosis ptima de coagulante para una determinada masa de agua, es mediante la determinacin de sus Potencial Zeta o potencial cero, en una curva de Mililitros de Coagulante Adicionado vs Potencial Elctrico.

77

2.8 DEMANDA DE CLORO 2.8.1 Principio Terico El cloro se agrega al agua para asegurar su pureza bacteriolgica o para mejorar sus caractersticas fsicas, qumicas y organolpticas. La demanda de cloro es la cantidad de ste que es reducido o convertido a formas inertes o menos activas por ciertas sustancias presentes en la muestra. En muchos casos, la demanda de cloro implica reaccin completa con todos los materiales cloro reactivo y se define como la diferencia entre la cantidad de cloro aplicado y la cantidad de cloro remanente al final del perodo de contacto. Este mtodo de control es adecuado para la determinacin de la cantidad aproximada de cloro que se necesita para producir determinado cloro residual en una muestra de agua. En La mayora de los casos se asegura la calidad del agua cuando se tiene presente un ligero exceso de cloro. Las condiciones de la prueba estn expuestas a variaciones de consideracin. La temperatura, el perodo de contacto y la dosificacin del cloro ejercen una marcada influencia en la determinacin de la demanda de cloro, por lo que debe mencionarse al informar sobre todos los resultados de las pruebas de demanda de cloro. REACCIONES DEL CLORO EN EL AGUA Cuando se agrega cloro al agua pura, se produce una mezcla de cido hipocloroso y cido clorhdrico:

A temperaturas ordinarias esta reaccin se lleva a cabo en pocos segundos, para soluciones diluidas y un pH por encima de 4 se presenta un equilibrio entre el cido hipocloroso y el in hipoclorito.

78 2.8.2 Equipos Balanza analtica Placa de agitacin Conductmetro medidor de pH

2.8.3 Reactivos Solucin madre de Cloro, (hipoclorito de sodio al 5%) cido Actico concentrado 96% Yoduro de Potasio 99.5% Tiosulfato de Sodio 0.1 N Almidn

2.8.4 Materiales Matraces volumtricos de 1 L, 500 ml, 100 ml Pipetas volumtricas de 10 ml, 5 ml y 2 ml Erlenmeyer de 250 ml Vidrio de reloj Varilla de agitacin Embudos en V Bureta

2.8.5 Procedimiento PREPARACIN DE SOLUCIONES DE CLORO: Solucin Madre de Cloro: Normalmente la solucin blanqueadora domstica (Clorox) contiene aproximadamente 5% de cloro disponible, lo que representa 50.000 mg / L. Se debe almacenar en un lugar fro y oscuro, como en un refrigerador para mantener indefinidamente la concentracin del reactivo. Solucin Concentrada para la dosificacin de cloro: Disolver 20 ml de Solucin Madre de Cloro en agua destilada y diluir a 100 ml. Se debe conservar en un frasco mbar, cerrado hermticamente, en el refrigerador para mantener la concentracin por un mes. Cada gota de sta solucin representa una dosis de cloro de 1 mg / L, cuando se agrega a 500 ml de muestra. Solucin Diluida para la dosificacin de cloro: Se vierten 10 ml de solucin concentrada de cloro en un baln aforado de 100 ml y se afora con agua destilada. Se debe conservar en un frasco mbar, cerrado hermticamente, en el refrigerador para mantener la concentracin por una semana. Cada gota de sta solucin representa una dosis de cloro de 0.1 mg / L, cuando se agrega a 500 ml de muestra.

79 Se debe comprobar la concentracin de sta solucin como sigue: En un erlenmeyer colocar 2 ml de cido actico, adicionar 10 ml de agua destilada y 1 g de KI, mezclar, adicionar una cantidad adecuada de solucin de cloro; al escoger ste volumen se debe tener en cuenta que 1 ml de solucin de Na 2S2O3 0.025 N es equivalente a aproximadamente 0.9 mg de cloro. Titule con la solucin de Na2S2O3 0.025 N hasta que el amarillo del yodo haya casi desaparecido. Adicione 1 ml de solucin indicadora de almidn y contine la titulacin hasta la desaparicin del color azul. Haga la misma determinacin a un blanco, adicionando idnticas cantidades de cido, KI y solucin de almidn a un volumen de agua destilada que corresponda al volumen de muestra analizada. Determine la cantidad de cloro de acuerdo a la ecuacin.

Donde: A = ml. de titulante para la muestra B = ml. de titulante para el blanco N = normalidad del Na2S2O3 Toma y preservacin de muestras: El cloro en solucin acuosa no es estable y su contenido en las muestras o soluciones, especialmente en soluciones poco concentradas, disminuir rpidamente. La exposicin a la luz solar u otra luz fuerte o la agitacin aceleran la reduccin del cloro. Por ello, se debe empezar la determinacin de cloro inmediatamente despus de tomar la muestra, evitando el exceso de luz o agitacin. No almacenar las muestras destinadas al anlisis de cloro. Seleccin del volumen de muestra: Se miden cuando menos, diez porciones iguales de muestra, (500 ml) preferiblemente el frascos oscuros de tapn esmerilado de suficiente capacidad para permitir el mezclado. Tratamiento de la muestra: Se llevan las muestras envasadas a la temperatura deseada, se agregan a los frascos las siguientes cantidades de gotas de la solucin diluida para la dosificacin de cloro:

80 Cuadro N 1. Gotas de solucin diluida para la dosificacin de cloro Gotas de solucin diluida dosificacin de cloro 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Cloro ( mg/L) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0

A partir de esta serie se puede seleccionar cualquier nmero menor de muestras que se considere adecuado. Al fijar el programa de dosificacin, procdase de tal modo que la primera muestra no debe dejar cloro residual al finalizar el perodo de contacto el cual puede ser de 1 hora, 2 horas o 24 horas. Es indispensable mezclar bien al hacer las adiciones. Es conveniente dosificar de acuerdo con un programa escalonado de tiempo, que permita la determinacin del cloro residual despus del perodo de contacto predeterminado. Titulacin de la muestra: Al final del perodo de contacto determine el cloro residual de cada muestra como se realizo la determinacin de cloro en la solucin diluida para la dosificacin de cloro. 2.8.6 Resultados Se debe registrar la cantidad dosificada de cloro, el cloro residual, el perodo de contacto y la temperatura a la que se conserv la muestra de agua durante el perodo de contacto. Calclese la demanda de cloro como sigue:

Donde: A = Cloro residual al final del tiempo de contacto B = Cantidad dosificada de cloro

81 2.9 DETERMINACIN DE CLORO RESIDUAL 2.9.1 Principio Terico El cloro liberar yodo a partir de las soluciones de yoduro de potasio (KI) a pH 8 o inferior. El yodo libre se valora con una solucin patrn de Tiosulfato de Sodio con almidn como indicador. Hgase la valoracin a pH 3 4, ya que la reaccin no es estequiomtrica a pH neutro debido a la oxidacin parcial del Tiosulfato de Sodio. REACCIONES

2.9.2 Equipos Balanza analtica Placa de agitacin Conductmetro medidor de pH

2.9.3 Reactivos Solucin de Tiosulfato de Sodio 0.1N: Disulvanse 25 g Na2S2O3 * 5 H2O en agua destilada recin hervida y fra y dilyase a 1 L. Solucin Tiosulfato de Sodio 0.025N: Disolver 125 ml de Solucin de Tiosulfato de Sodio 0.1 N en agua destilada y diluir a 500 ml. Solucin de indicadora de almidn cido Actico concentrado 96% Yoduro de Potasio 99.5% Almidn

2.9.4 Materiales Matraces volumtricos de 1 L, 500 ml, 100 ml Pipetas volumtricas de 10 ml, 5 ml y 2 ml. Erlenmeyer de 250 ml. Vidrio de reloj Bureta

82 2.9.5 Procedimiento Preparacin del blanco: Tmese un volumen de agua destilada correspondiente a la muestra usada y adanse 5 ml de cido actico, 1 g de KI y 1 ml de solucin de almidn. Toma y preservacin de muestras: El cloro en solucin acuosa no es estable y su contenido en las muestras o soluciones, especialmente en soluciones poco concentradas, disminuir rpidamente. La exposicin a la luz solar u otra luz fuerte o la agitacin aceleran la reduccin del cloro. Por ello, se debe empezar la determinacin de cloro inmediatamente despus de tomar la muestra, evitando el exceso de luz o agitacin. No almacenar las muestras destinadas al anlisis de cloro. Seleccin del volumen de muestra: Seleccinese un volumen de muestra que no precise ms de 20 ml de Na 2S2O3 0.01N, ni menos de 0.2 ml para el punto final de almidn-yoduro. Para un rango de cloro de 1 a 10 mg / L, utilcese una muestra de 500 ml, por encima de 10 mg / L utilcese una muestra proporcionalmente menor. Tratamiento de la muestra: Colquense 5 ml de cido actico, o la cantidad suficiente para reducir el pH hasta un valor entre 3 y 4 en un Erlenmeyer, adase alrededor de 1 g de KI. Virtase la muestra y mzclese con una varilla de agitacin. Tapar y dejar en la oscuridad durante 5 minutos. Titulacin de la muestra: Titlese fuera de la luz solar directa. Adase Na 2S2O3 0.01 N o 0.025 N con bureta, hasta que casi desaparezca el color amarillo del yodo libre. Adase 1 ml de solucin de almidn y valrese hasta la desaparicin del color azul. Titulacin del blanco: Si al agregar el almidn aparece un color azul, titlese con Na2S2O3 0.01 N o 0.025 N, hasta desaparicin del color azul y regstrese el resultado. Si no aparece color azul, titlese con solucin de yodo 0.0282 N hasta aparicin del color azul. Titlese por retroceso con Na 2S2O3 0.01 N o 0.025 N y registre la diferencia.

83 2.9.6 Resultados Calclese el contenido de cloro residual en la muestra original como sigue:

Donde: A = Vol. de titulante gasta o para la muestra B = Vol. de titulante gasta o para el blanco N = Normalidad del Na2S2O3

84 2.10 DETERMINACIN DE NITRATOS (Mtodo espectromtrico ultravioleta selectivo) 2.10.1 Principios Tericos Utilcese esta tcnica solamente para analizar muestras con un bajo contenido de materia orgnica, aguas naturales no contaminadas y potables. La curva de calibracin obedece la ley de Beer hasta los 11 mg/L. La medida de la absorcin UV a 220 nm hace posible la determinacin rpida de NO3-, Dado que la materia orgnica disuelta puede absorber tambin a 220 nm y el NO3- no lo hace a 275 nm, se utiliza una segunda medida a 275 nm para corregir el valor de NO3-. Esta correccin emprica depender de la naturaleza y concentracin de la materia orgnica y puede variar de unas aguas a otras. En consecuencia, este mtodo no es recomendable cuando se precise una correccin importante para la absorbancia de la materia orgnica, aunque puede ser til para controlar los niveles de NO3- en un sistema de aguas con un tipo constante de materia orgnica. Los factores de correccin para la absorbancia de materia orgnica se pueden establecer por el mtodo de adiciones en combinacin con el anlisis del contenido de NO3- por otro mtodo. La filtracin de la muestra tiene por objeto eliminar posibles interferencias de las partculas suspendidas. La acidificacin con HCl 1 N sirve para impedir interferencias por concentraciones de hidrxido o carbonato de hasta 1000 mg CaCO3/L, el cloruro no afecta la determinacin. REACCIONES Acido fenildisalfonico
OH HO3S HO3S

Derivado nitroso del acido

OH NO2

+
SO 3H

HNO3 SO 3H

H2O

O O N OK

+
3KOH

3H2O

SO 3H

Sal de color amarillo

85 2.10.2 Equipos Espectrofotmetro, con celdas de 1 cm de cuarzo Balanza Analtica

2.10.3 Reactivos Acido Clorhdrico 1 N Carbn activado 98% Cloroformo 95% Nitrato de potasio 99%

2.10.4 Materiales Bureta de 50 ml Embudos en V Matraces volumtricos de 1 L. Matraces volumtricos de 25 ml Pipeta graduada de 1 ml. Pipetas volumtricas de 2,5 y 10 Vidrio de reloj

2.10.5 Procedimiento Utilcese agua redestilada o destilada, desionizada, de la mxima pureza para preparar todas las soluciones y diluciones. Preparacin de patrones Solucin madre de nitrato (50 mg/L): Pngase a secar KNO3 en la estufa a 105 C durante 24 horas. Disulvanse 0.0815 g en agua libre de nitrato en un matraz volumtrico de 1 L y llvese al aforo. Adicione 2 ml de CHCl 3. La solucin es estable por 6 meses. Patrones para la curva de calibracin : Mdanse los mililitros necesarios de la solucin madre de nitrato para preparar cada uno de los patrones de acuerdo al Cuadro N1, llvense a un matraz volumtrico de 25 ml y afrese con agua destilada. A continuacin adicinese a cada uno 1 ml de HCl 1 N, agtese y mdase la absorbancia 10 minutos despus.

86 Cuadro N 1. Volmenes de solucin madre necesarios para preparar los patrones para la curva de calibracin de nitratos Patrn 1 2 3 4 5 6 7 Concentracin (mg/L) 5 10 15 20 25 30 35 Volumen de solucin madre (ml) 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5

Blanco: Tmense 25 ml de agua destilada en un matraz volumtrico y adase 1 ml de HCl 1 N con pipeta volumtrica (despus de aforar). Toma y preservacin de muestras: Inciense las determinaciones de NO 3- al menor tiempo posible despus de tomada la muestra. Si se debe almacenar, consrvese a 4 C por un perodo no mayor a 24 horas; para perodos ms largos, adanse 2 ml de H2SO4 concentrado por cada litro de muestra y mantngase a 4 C. Cuando se conserva una muestra con cido no se puede determinar NO3- y NO2individualmente. Tratamiento de la muestra Muestras que tienen interferencias de materia orgnica suspendida excesiva : Si la muestra no est pticamente limpia, tmense 50 ml y realcese una digestin en caliente con cidos clorhdrico y sulfrico concentrados hasta oxidacin completa de la materia orgnica, a continuacin fltrese utilizando papel cualitativo 595. Al final de la filtracin llvese la muestra a un matraz volumtrico de 50 ml y afrese con agua destilada. Determinacin del contenido de nitratos en las muestras: Una vez filtrada la muestra, transfiranse 25 ml de muestra a un matraz volumtrico y agrguese 1 ml de HCl 1 N. Mzclese bien. Depostese la muestra en la celda de cuarzo y mdase su absorbancia a 220 nm y a continuacin cmbiese la longitud de onda a 275 nm para determinar la absorbancia debida a la materia orgnica remanente, rstese dos veces el valor obtenido en la segunda lectura de la primera. Con la absorbancia corregida lase directamente la concentracin de nitratos en la muestra utilizando la curva de calibracin. Si la absorbancia a 275 nm es mayor del 10 % de la leda a 220 nm no utilizar este mtodo. Preparacin de la curva de calibracin: Tmense los patrones de nitrato y agrguese 1 ml de cido clorhdrico 1 N. Agtese y djese reposar para la lectura.

87 Lase la absorbancia de los patrones contra el blanco a 220 nm. Tablense los datos experimentales. 2.10.6 Resultados Construccin de graficas: Una vez obtenidas las lecturas de absorbancia de cada patrn, tablense los datos y grafquense para obtener la curva de calibracin. Como el sistema obedece la ley de Beer, realcese el ajuste de la recta pasando por cero y obtngase la ecuacin. Determinacin del contenido de nitratos en una muestra: Obtngase directamente de la curva de calibracin la concentracin de nitratos en la muestra si no fue necesaria ninguna dilucin. Si fue necesaria una dilucin de la muestra para poder utilizar la curva, entonces la concentracin de nitratos en la muestra original es:

88 2.11 DETERMINACION DE NITRITOS (Mtodo colorimtrico) 2.11.1 Principios Tericos El nitrito (NO2-) se determina por la formacin de un colorante azo prpura rojizo, producido a pH 2,0 a 2,5 por acoplamiento de sulfanilamida diazotizada con diclorhidrato de N-(1-naftil)-etilendiamina (diclorhidrato de NED). El rango de aplicacin del mtodo para medidas espectrofotomtricas es de 10 a 1000 g de NO2--N/l, y se puede aplicar al de 5 a 50 g de N/L si se usan un recorrido de luz de 5 cm y filtro de color verde. El sistema de color obedece a la ley de Beer hasta 180 g N/L con 1 cm de recorrido de luz a 543 nm. Diluyendo las muestras se pueden determinar concentraciones ms altas de NO 2-. REACCIONES
+

NH2

N N

+
SO3H

HNO2

HCl

+ H2O
SO3H

Sal diazonea +
H HCl N N

+
SO 3H NH3Cl

HCl

NH3Cl

Cloruro de naftilamina 2.11.2 Equipos

colorante azoico

Espectrofotmetro, con celdas de 1 cm de vidrio Balanza Analtica Placa de calentamiento Agitador Magntico

89 2.11.3 Reactivos Acido fosfrico 85% Acido Sulfrico 98% Cloroformo 99% Diclorhidrato de N-(1-naftil)-etilendiamina 99.5% Nitrito de Sodio 99% Oxalato de Sodio (0.05 N Solucin de Permanganato de Potasio 0.05 N estandarizado Sulfanilamida 99.5%

2.11.4 Materiales Beaker de 250 ml Bureta de 50 ml Crisol Gooch Embudos en V Erlenmeyer de 125 y 250 ml Erlenmeyer de 250 ml con tapn Matraces volumtricos de 50, 100, 250, 500 y 1000 ml Pipetas graduadas de 5 y 10 ml Pipetas volumtricas de 2, 5, 10 y 25 ml Varilla de agitacin Vidrio de reloj Papel filtro Ref. 604

2.11.5 Procedimiento Para todas las preparaciones utilcese agua exenta de nitritos, destilada y desionizada. Preparacin de reactivo colorante: Adanse 25 ml de cido fosfrico al 85 % y 2.5 g de sulfanilamida a 200 ml de agua contenidos en un matraz volumtrico de 250 ml. Tras disolver completamente la sulfanilamida, adicinense 0.25 g de diclorhidrato de N-(1-naftil)-etilendiamina. Mzclese para disolver y dilyase con agua hasta el aforo. La solucin es estable durante cerca de un mes cuando se conserva en frigorfico en un frasco oscuro.

90 Preparacin de patrones Solucin Madre de Nitrito (200 mg/L, 200000 g/L), psense aproximadamente 0.304 g de NaNO2 de pureza menor a 99 % y llvese a un matraz volumtrico de 1000 ml. Dilyase con agua destilada hasta la marca. Consrvese agregando 1 ml de CHCl3. Solucin intermedia de nitrito (2000 g/L) calclese el volumen necesario para preparar 1000 ml de una solucin de 2000g NO2-/L a partir de la solucin madre (aproximadamente 5 ml). Solucin Estndar de nitrito: Mdanse 10 ml de solucin intermedia con pipeta volumtrica y llvense a un matraz volumtrico de 100 ml, afrese con agua destilada. Patrones para la curva de calibracin: Tmense los mililitros necesarios de la solucin estndar de nitrito para preparar cada uno de los patrones de acuerdo a la tabla, llvense a un matraz volumtrico de 50 ml, adanse 2 ml de reactivo de color y afrese con agua destilada. Cuadro 1. Volmenes de solucin estndar necesaria para preparar los patrones para la curva de calibracin de nitritos Patrn 1 2 3 4 5 Concentracin (g/L) 20 40 60 80 100 Volumen de solucin estndar (ml) 5 10 15 20 25

Blanco: Tmense 2 ml de reactivo de color en un matraz volumtrico de 50 ml, adase agua destilada hasta el aforo. Toma y preservacin de muestras: Utilcense recipientes de vidrios perfectamente lavados y libres de cualquier sustancia oxidante para tomar las muestras. Recolctese una muestra con un volumen mnimo de 200 ml. No utilizar nunca la conservacin cida en las muestras destinadas al anlisis de NO2-. Hgase la determinacin inmediatamente sobre muestras recientes para evitar la conversin bacteriana del NO 2- en NO3- o NH3. Para conservacin a corto plazo, durante 1 o 2 das, conglese a -20 C o consrvese a 4 C.

91 Tratamiento de la muestra Eliminacin de slidos en suspensin: Si la muestra contiene slidos suspendidos, mdase una porcin de 100 ml en un matraz volumtrico y fltrese a travs de un filtro (Ref., 604), recogindose el filtrado y los enjuagues en otro matraz de 100 ml. Desarrollo del color: Mdase una porcin adecuada de muestra que contenga mximo 100 g de NO2- en un volumen mximo de 40 ml. Si el pH de la muestra no estuviera comprendido entre 5 y 9, ajstese a ese rango con HCl 1N o NH 4OH segn convenga. Adanse 2 ml de reactivo de color afrese a 50 ml con agua destilada y mzclese. Medida fotomtrica: Lanse las absorbancias a 543 nm, entre 10 minutos y 2 horas despus de aadir el reactivo de color a las muestras, patrones y blanco utilizando celda de vidrio de 1 cm de recorrido. 2.11.6 Resultados Construccin de la grafica: Una vez obtenidas las lecturas de absorbancia de cada patrn, tablense los datos y grafquense para obtener la curva de calibracin. Como el sistema obedece la ley de Beber, realcese el ajuste de la recta pasando por cero y obtngase la ecuacin. Determinacin del contenido de nitritos en una muestra: Con la absorbancia de la muestra calclese a partir de la ecuacin de la curva la concentracin final, en los 50 ml de volumen. Concentracin final = Absorbancia / 0.0009582 A continuacin obtngase la concentracin de nitrito en la muestra.

92 2.12 DETERMINACION DE SULFATOS (Mtodo Turbidimtrico) 2.12.1 Principios Tericos El mtodo turbidimtrico, el cual puede aplicarse a concentraciones hasta de 40mg/L, es por su rapidez un mtodo muy usado para determinar sulfatos. El mtodo se basa en el hecho de que el ion sulfato (SO 4 2- ) tiende a precipitarse como sulfato de bario, en medio cido, con cloruro de bario y en presencia de cloruro de sodio. La absorcin, de la suspensin de la solucin de sulfato de bario formada, se mide con un nefelmetro o espectrofotmetro y la concentracin del ion sulfato se determina por comparacin de la lectura con una curva de calibracin. REACCIONES

2.12.2 Equipos Agitador magntico Balanza analtica Reloj digital (Cronmetro) Turbidmetro

2.12.3 Reactivos Solucin Buffer: Disolver 30 g de Cloruro de Magnesio (MgCl 2.6H2O), 5 g de Acetato de Sodio (CH3COONa3H2O), 1 g de Nitrato de Potasio (KNO 3) y 20 ml de Acido Actico (CH3COOH 99%), 500 ml de agua destilada y aforar hasta 1L. Solucin BaCl2 (10%): Llevar 10g de BaCl2 a un matraz de 100 ml, disolver y aforar con agua destilada. Solucin estndar de Sulfato (40 mg/L): Disulvanse 0.0592 g de sulfato de sodio anhidro (Na2SO4) en agua destilada y dilyase hasta 1000 ml.

93 2.12.4 Material Balones volumtricos de 1L y 100ml Beaker de 250 ml Erlenmeyer de 250 ml Esptula Pipetas graduadas de 5 y 10 ml Vidrio de reloj

2.12.5 Procedimiento Preparacin de patrones: Patrones para la curva de calibracin: Tmense los mililitros necesarios de la solucin de 40 ppm para preparar cada patrn de acuerdo al cuadro No.1 y llvense a un matraz aforado de 100 ml. Agrguese agua destilada hasta el aforo. Cuadro 1. Volumen de solucin de 40 ppm necesario para la preparacin de 100 ml de cada patrn de la curva de calibracin. Patrn 1 2 3 4 5 6 7 Concentracin (ppm) 10 15 20 25 30 35 40 Volumen de solucin estndar (ml) 25.0 37.5 50.0 62.5 75.0 87.5 100.0

Blanco: Utilcense 100 ml de la muestra sin diluir o de la misma dilucin usada para el anlisis, adanse 20 ml de solucin buffer y 10 ml de agua destilada en lugar del BaCl2. Pngase a agitar y lase la turbiedad en las mismas condiciones que los patrones y la muestra. Toma y preservacin de muestras : En presencia de materia orgnica, algunas bacterias pueden reducir el ion SO 4-2 a S-2. Para evitarlo, consrvense las muestras muy contaminadas a 4 C.

94 Tratamiento de la muestra Formacin de la turbiedad de sulfato de Bario: Mdanse 100 ml de muestra o una porcin menor diluida a 100 ml, llvense a un erlenmeyer de 250 ml. Adicinense 20 ml de la solucin buffer y colquense a agitar, luego adicinense 10 ml de solucin de BaCl2 y comincese inmediatamente a medir el tiempo, agtese por 60 2 segundos a velocidad constante. Medida de la turbiedad: Despus de que el perodo de agitacin ha terminado, colquese la solucin en la celda del turbidmetro y mdase la turbiedad a los 5 0.5 minutos. Preparacin de la curva de calibracin: Tmense cada uno de los patrones preparados y realizar lo descrito anteriormente, ( Formacin de la turbiedad de sulfato de Bario y Medida de la turbiedad). Por encima de 40 mg/L la linealidad de la curva decrece y las suspensiones de BaCl 2 pierden estabilidad. Revsese la respuesta de la curva de calibracin leyendo estndares con cada tres o cuatro muestras. 2.12.6 Resultados Construccin de graficas: Grafquense las concentraciones de sulfato contra las respectiva turbiedades corregidas al restar la del blanco. Obtngase la ecuacin de la lnea obtenida. Determinacin del contenido de sulfato en una muestra: Una vez obtenida la turbiedad de la muestra, obtngase directamente de la ecuacin de la recta la concentracin de ion sulfato en los 100 ml de volumen final. Si el volumen de muestra medido fue menor a 100 ml y se complet con agua destilada, calclese la concentracin en la muestra original.

95 2.13 DETERMINACION DE FOSFATOS 2.13.1 Principio Terico El fsforo se encuentra en el agua en forma casi exclusiva de fosfatos, los cuales se clasifican en ortofosfatos, fosfatos condensados (piro-, meta- y otros polifosfatos) y fosfatos orgnicos. El anlisis de fsforo consiste en llevar el fsforo a fosfato, y ste en una solucin diluida reacciona con el molibdato amnico en condiciones cidas para formar un heteropolicido, cido molibdofosfrico. En presencia de vanadio, se forma cido vanadomolibdofosfrico amarillo. La intensidad del color amarillo es proporcional a la concentracin de fsforo. 2.13.2 Equipos Balanza analtica (precisin 0,1 mg) Espectrofotmetro Plancha de calentamiento

2.13.3 Reactivos Reactivo Vanadato - Molibdato: Solucin A: disulvanse 25 g de molibdato amnico, (NH 4)6Mo7O24.4H2O en 300 ml de agua destilada. Solucin B: disulvanse 1.25 g de metavanadato de amonio, NH 4VO3, calentando hasta ebullicin en 300 ml de agua destilada. Enfrese y adanse 330 ml de HCl concentrado. Enfrese la solucin B a temperatura ambiente, virtase la solucin A sobre la B, mzclese y llvese a 1 L.

2.13.4 Materiales Matraces volumtricos de 1 L, 500 ml, 100 ml y 25 ml Pipetas volumtricas de 10 ml, 5 ml y 2 ml Beaker de 250 ml. Vidrio de reloj Embudos en V

96 2.13.5 Procedimiento Blanco: Solucin de 5 ml de solucin para desarrollar color y afrese hasta un volumen de 25 ml con agua destilada. Preparacin de patrones Solucin estndar de Fsforo: Psese con exactitud 0.2197 g de KH 2PO4 previamente secado a 105 C durante una hora, dilyase hasta el aforo con agua destilada en un matraz volumtrico de 1L. Esta solucin tiene 50 mg P/ L. Patrones para la curva de calibracin: Tmense los mililitros de solucin estndar de fsforo necesarios para preparar la serie de patrones para la curva de calibracin de acuerdo con la tabla No.1 en matraces volumtricos de 25 ml, a continuacin adanse 5 ml del reactivo vanadatomolibdato y afrense los matraces utilizando agua destilada. Cuadro 1. Volmenes de solucin estndar necesaria para preparar los patrones para la curva de calibracin. Patrn 1 2 3 4 5 6 7 8 Preparacin de la muestra Filtracin previa: fltrese la muestra a travs de un filtro Ref. 604, para muestras difciles de filtrar hacer una filtracin previa a travs de fibra de vidrio. Digestin para muestras con alto contenido de materia orgnica: Mdase una porcin de muestra de 50 mL y llvese a un Beaker de 250 mL. Adase 1 mL de H2SO4 concentrado y 5 mL de HNO 3 concentrado. Colquese el Beaker sobre la placa de calentamiento y digirase hasta un volumen de 5 mL, hasta que se desaparezca el color amarillo en la solucin por el HNO 3. Enfrese la solucin y adanse aproximadamente 20 ml de agua destilada, una gota de fenolftalena y gota a gota adicinese la solucin de NaOH 1 N hasta neutralizacin. Concentraci n [ppm] 4 6 8 10 12 14 16 18 Volumen de solucin estndar [ml] 2 3 4 5 6 7 8 9

97 Fltrese la muestra enjuagando el papel filtro con porciones de 5 ml de agua destilada, recjase el filtrado y los enjuagues en un matraz volumtrico de 50 ml, a continuacin afrese con agua destilada. Determnese el fsforo directamente en la muestra o hgase la dilucin necesaria. Ajuste del pH de la muestra: Si el pH de la muestra es mayor a 10, tmese una porcin de 50 ml de muestra, adase una gota de fenolftalena y decolrese con HCl 1:1, luego dilyase a 100 ml. Eliminacin del color de la muestra : Agtense 50 ml de muestra neutralizada con 200 mg de carbn activado en un erlenmeyer durante 5 minutos, fltrese para eliminar el carbn activado y llvese a 100 ml con agua destilada. Desarrollo del color en la muestra: Pnganse 15 ml de muestra (de acuerdo al contenido de fsforo) en un matraz aforado de 25 ml. Adanse 5 ml del reactivo vanadato-molibdato y dilyase con agua destilada hasta el aforo. Preprese un blanco con 5 ml de reactivo para desarrollar color y llvese al aforo con agua destilada. Despus de 10 minutos o ms, lase la absorbancia frente al blanco a una absorbancia de 470 nm. Si la absorbancia es mayor que la del patrn de mayor concentracin, tmese una porcin de muestra menor que asegure una absorbancia dentro del rango de lectura. Preparacin de la curva de calibracin: Mdanse las absorbancias de los patrones preparados a una longitud de onda de 470 nm contra el blanco. 2.13.6 Resultados Regstrense los resultados en forma de tabla para construir la grfica. Interplense directamente las concentraciones de las muestras a partir de la curva de calibracin, esta concentracin ser la final, es decir, en los 25 ml de volumen. A continuacin calclese el contenido de fsforo en la muestra original como sigue:

98 2.14 DETERMINACION DE METALES PESADOS (Cu, Fe, Mn, Zn, Pb, Cd, Cr) 2.14.1 Principio Terico Se basa en la cuantificacin de los metales por espectrofotometra de absorcin atmica, determinando la cantidad de luz absorbida (de una longitud de onda determinada para cada metal) por el elemento atomizado por llama. 2.14.2 Equipos Espectrofotmetro de Absorcin Atmica de llama directa. Lmparas de ctodo hueco de Cu, Fe, Mn, Pb, Cd, Cr para Espectrofotmetro de Absorcin Atmica.

2.14.3 Reactivos cido Ntrico concentrado 65% p.a o de calidad superior. cido Clorhdrico 37% p.a. o de calidad superior. Solucin de HNO3 1:1 con agua grado reactivo. Solucin Estndar Multielementos de 100mg/L de Metales Pesados. Tomar alcuotas de acuerdo a tabla 1.

2.14.4 Materiales Matraces de 100 ml Beaker de 250 ml Pipetas graduadas

2.14.5 Procedimiento Blanco curva de calibracin: Tomar 1 ml de solucin de HNO (1:1) en un matraz aforado de 100 ml y llevar a volumen con agua grado reactivo. Preparacin de curva de calibracin Preparar los estndares del metal a analizar para su respectiva curva de calibracin. Tomar los volmenes de las soluciones, correspondientes indicados en el cuadro 1.

99 Cuadro 1. Curva de Calibracin de los estndares del metal a analizar

Preparacin de la muestra de agua Las muestras que contienen material particulado y/o materia orgnica, con una turbiedad >1 NTU requieren pretratamiento de digestin hmeda antes del anlisis espectrofotomtrico. Para muestras de Agua Potable transparentes, incoloras e inodoras con turbiedad <1.0 NTU puede obviarse el pretratamiento de digestin para analizar por EAA con lectura directa Para condicin sin digestin: Homogenizar la muestra de agua a travs de agitacin. Llevar a temperatura ambiente. Tomar 40 ml de muestra y llevar a tubo graduado con tapa y agregar 1ml de solucin HNO3 1:1. Cuantificar en E.A.A el metal correspondiente. Los resultados son obtenidos por interpolacin desde la curva de calibracin en ppm. Los resultados obtenidos se expresan en mg/L del metal correspondiente. Para condicin con digestin en placa calefactora: Transferir a un vaso de precipitado o similar de tamao adecuado 100 ml de muestra, agregar perlas de ebullicin. Adicionar 3 ml de HNO concentrado, cubrir con vidrio reloj, calentar en placa calefactora y cautelosamente evaporar hasta obtener un volumen menor a 5 ml de muestra, evitando la ebullicin y la sequedad de esta. Enfriar, lavar las paredes del vaso contenedor con el mnimo de volumen de agua desionizada, agregar 5 ml de HNO concentrado, cubrir con vidrio reloj y llevar a la placa calefactora nuevamente.

100 Aumentar la temperatura agregando el mismo acido hasta completar la digestin (generalmente se evidencia con la ausencia de color en la muestra y/o no hay cambio en la apariencia del reflujo, enfriar . Agregar 10 ml de HCL (1:1) y 15 ml de agua desionizada y calentar por 15 minutos para disolver algn precipitado o residuo, enfriar. Lavar las paredes del vaso y vidrio reloj con agua desionizada y filtrar para remover material insoluble que podra tapar el nebulizador. Transferir el filtrado a un matraz volumtrico de 100 ml y lavar el filtro hasta completar el volumen. Llevar junto a las muestras un blanco reactivo por cada set de anlisis para someterlo al mismo proceso de digestin. Cuantificar en E.A.A las muestras y el blanco reactivo como muestra. Los resultados son obtenidos por interpolacin desde la curva de calibracin en ppm. 2.14.6 Resultados Para este caso el calculo de los mg/L del metal = (L - bco.) Donde: L= lectura de la muestra en mg/L bco.= lectura del blanco reactivo sometido al mismo proceso de las muestras 3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA AYRES, Gilbert H. Anlisis Qumico Cuantitativo. Segunda Edicin. Editorial HARLA. Mxico 1970. HENAO CAMPUZANO, Alberto. Anlisis Qumico Cuantitativo. Prcticas de laboratorio. Universidad Tecnolgica de Pereira. Escuela de Tecnologa Qumica 1987. SIERRA, Jorge Humberto. Anlisis de Aguas y Aguas residuales. Universidad de Antioquia. ROMERO R., Jairo Alberto. Acuiqumica. Primera edicin. Editorial Presencia. Colombia febrero de 1996. PROTOCOLOS PARA ANALISIS DE AGUAS. IDEAM. BOLETIN PACALA. Ministerio de salud. Repblica de Colombia. Vol. 2, No.3, 1998. Criterios Ecolgicos de Calidad del Agua publicados en el Diario Oficial de la Federacin el 13 de diciembre de 1989 Environmental Protection Agency, Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes, Environmental Monitoring and Support Laboratory, Office of Research and Development, Cincinnati, Ohio, 1983, 5-7 pp.

101 CAPITULO 5 ANALISIS DE LATONES O BRONCES INTRODUCCION En esta prctica se considera el anlisis de una muestra de latn (aleacin de cobre y zinc como constituyentes mayoritarios) y subsidiariamente el anlisis de bronce (aleacin de cobre que contiene estao y/o algn otro elemento como Pt o Al como constituyentes esenciales). Los constituyentes de los latones tpicos y los bronces ordinarios generalmente se encuentran en los siguientes porcentajes: Cu (60-90%), Zn (15-45%), Sn (0-6%), Pb (0-2%), Fe (0-3%). La aleacin se trata con cido ntrico, con lo que el Cu, Zn, Pb y Fe permanecen en la disolucin mientras que el Sn precipita como xido estnnico hidratado (cido metaestnnico), que se filtra, calcina y pesa como SnO 2. Una alcuota se destina a la determinacin de Pb por absorcin atmica. El resto se evapora hasta humus de cido sulfrico, para eliminar el cido ntrico y se disuelve con agua para precipitar el PbSO 4, que se filtra para evitar que interfiera posteriormente. A partir de este filtrado se realizan las siguientes determinaciones: Determinacin de Cobre por electrodeposicin Determinacin yodomtrica de Cobre Determinacin gravimtrica del hierro por precipitacin en medio amoniacal.

Y por ltimo se determina Zinc volumtricamente con EDTA a partir del filtrado del hierro.

102 1. METODOS GENERALES 1.1 DETERMINACION DE ESTAO 1.1.1 Principio Terico En ausencia de otros cidos y de altas concentraciones de hierro, la separacin des estao como cido metaestnnico (xido estnnico hidratado) por digestin con cido ntrico, se puede considerar cuantitativa. Si existiera ms de un 0.5% de hierro en la aleacin, la precipitacin del Sn no podra ser cuantitativa. 1.1.2 Equipos Mufla Estufa

1.1.3 Reactivos Benceno ter o disolvente orgnico similar HNO3 concentrado HNO3 (1:20)

1.1.4 Materiales Vidrio de reloj Beaker de 100 ml Papel filtro sin cenizas Crisol de porcelana Pinza para crisol Frasco lavador

1.1.5 Procedimiento Lavar las limaduras o virutas de latn con ter, benceno o un disolvente orgnico similar (realizar esta operacin en vitrina), secar al aire libre en un vidrio de reloj. Pesar aproximadamente 2g, aadir 10 ml de agua y 15 ml de HNO 3 concentrado y digerir a temperatura baja, mantener la digestin hasta que el volumen se haya reducido hasta unos 10 ml calentando suavemente. Diluir con 50 ml de agua, calentar a 90-100 C (mantener esta temperatura durante 10-15 min), filtrar en caliente por el papel sin cenizas y recoger el filtrado (si el filtrado no es limpio, refiltrarlo). Reservar el filtrado y los lavados. Lavar el precipitado con HNO 3 (1:20) caliente, no superando un volumen final de 100 ml, enrazar el filtrado a 100 ml.

103 Colocar el papel con su contenido en un crisol de porcelana tarado, secar y quemar el carbn a temperatura tan baja como sea posible. Calcinar durante una hora en mufla a 900 C. Repetir la calcinacin hasta peso constante. NOTA: El SnO2 calcinado puede mostrar una coloracin marroncea debida a la presencia de xido frrico. (La presencia de un precipitado gris oscuro, indica la presencia de xido cprico como resultado de un lavado incompleto). Los resultados de estao obtenidos pueden ser ligeramente altos por la presencia de cantidades pequeas de hierro, cobre, zinc y posiblemente plomo. 1.1.6 Resultados Reportar el peso

104 1.2 DETERMINACION DE PLOMO 1.2.1 DETERMINACION DE PLOMO POR ABSORCION ATOMICA 1.2.1.1 Principio Terico

Los tomos en fase de vapor absorben aquellas radiaciones cuyas energas coinciden exactamente con las de sus transiciones electrnicas. Las lneas de absorcin ms tiles corresponden a la excitacin del tomo desde un estado fundamental a uno de los estados excitados. As pues, un tpico espectro de absorcin atmica producido por una llama consta predominantemente de lneas de resonancia que son la consecuencia de las transiciones desde el estado fundamental a niveles superiores. Tienen suma importancia advertir que la longitud de onda de una lnea de resonancia de absorcin es idntica a la lnea de resonancia de emisin correspondiente a la misma transicin. 1.2.1.2 Equipos

Espectrofotmetro de absorcin atmica Reactivos

1.2.1.3

Nitrato de Plomo HNO3 concentrado HNO3 (1:1) Materiales

1.2.1.4

6 matraces de 100 ml Procedimiento

1.2.1.5

Preparar una disolucin patrn intermedia de plomo de (50 ppm) partir de la disolucin patrn de 1000 ppm y aforar a 100 ml. A partir de esta preparar los estndares de la curva de calibrado. Aadir a una serie de matraces aforados de 100 ml 0, 2.5, 5, 10 y 15 ml de la solucin intermedia. Agregar 10 l de cido ntrico sub-boiling a todos los matraces aforados a 100 ml con agua desionizada. Tomar una alcuota de la disolucin procedente de la eliminacin del estao. 1.2.1.6 Resultados

Determinar el valor de la concentracin de Pb de la muestra por la interpolacin en la curva de calibrado obtenida, en ppm y porcentaje respecto a la muestra inicial.

105 1.2.2 ELIMINACION DE PLOMO COMO SULFATO 1.2.3 Principio Terico La solubilidad del sulfato de plomo en cido sulfrico de concentracin adecuada es lo suficiente pequea como para permitir la separacin cuantitativa del plomo, de otros metales cuyos sulfatos son solubles, como el cobre y el zinc. Deben estar ausentes cidos como HCL o HNO3, ya que stos aumentan la solubilidad del sulfato de plomo; dichos cidos se volatilizan fcilmente calentando la disolucin hasta humus de trixido de azufre despus de la adicin de cido sulfrico. 1.2.4 Equipos Estufa

1.2.5 Reactivos H2SO4 concentrado H2SO4 (1:100)

1.2.6 Materiales Vidrio de reloj Beaker de 100 ml

1.2.7 Procedimiento Aadir 4 ml de H2SO4 concentrado a una alcuota de 50 ml proveniente de la filtracin de estao. Evaporar hasta despus de humos de cido sulfrico (el volumen se debe reducir hasta unos 10 ml sin que hierva la disolucin y evitando que precipite el sulfato de cobre). Dejar enfriar, enjuagar las paredes del vaso y evaporar nuevamente hasta humus, para asegurar la completa eliminacin de HNO3. Dejar enfriar y diluir con 50 ml de agua, calentar hasta ebullicin. Aadir 25 ml de agua y dejar en reposo. Al final, el lquido deber estar a temperatura ambiente. Filtrar en embudo de vidrio y lavar muy bien con cido sulfrico (1:100), lavando con unos pocos mililitros de alcohol. Reservar el filtrado y los lavados, el volumen que se emplea hay que aforar a 100 ml.

106 1.3 DETERMINACION DE COBRE 1.3.1 DETERMINACION ELECTROGRAVIMETRICA 1.3.1.1 Principio Terico

Se proceder a la determinacin de cobre mediante deposicin electroltica. La deposicin electroltica o electrodeposicin es una precipitacin cuantitativa, en la que el componente a determinar, generalmente un catin, es separado mediante un proceso de oxidacin sobre electrodos sumergidos en una disolucin. Generalmente el compuesto pesado es un metal que se ha depositado en el ctodo, pero tambin puede tratarse de un xido metlico depositado en el nodo. Una especie dad comienza a experimentar una reaccin electroltica a un determinado potencial denominado de descomposicin de una especie, sta experimenta una reduccin en el nodo. Los potenciales de descomposicin del cobre y del zinc estn lo suficientemente separados como para que se produzca el depsito del Cu y no el del Zn. En realidad, a pH cido, antes de depositarse el Zn, se alcanza el potencial de descomposicin del hidrgeno. Para evitar el desprendimiento de burbujas de H 2 en el ctodo, lo que perjudicara a la calidad del depsito, se utiliza un ion nitrato como despolarizador. Como ctodo puede utilizarse una lmina de acero inoxidable, siempre que se proteja de la accin disolvente de los cidos diluidos mediante la aplicacin de potencial catdico. Y como nodo se puede utilizar un hilo de platino. En este caso se empleara como ctodo una malla de acero inoxidable y como nodo una espiral, tambin de acero inoxidable. 1.3.1.2 Equipo

Agitador magntico con calefaccin nodo y ctodo de acero inoxidable Imanes de tefln Reactivos

1.3.1.3

HNO3 concentrado Hidrxido amnico concentrado Materiales

1.3.1.4

Beaker de 250 ml Vidrio de reloj Tubos de ensayo Pipetas

107 1.3.1.5 Procedimiento

Tomar una alcuota de la disolucin resultante de la eliminacin del plomo aproximadamente 25 ml, aadir agua destilada, 2ml de cido ntrico para la formacin de un buen deposito de cobre e hidrxido amnico hasta que la disolucin presente coloracin azul oscuro. Lavar bien el ctodo con agua y jabn, enjuagar con agua hasta eliminacin del jabn. Enjuagar al menos tres veces con agua destilada y una ultima vez con etanol o cetona. Secar el ctodo en la estufa a 110 C durante unos minutos. Dejar enfriar en el desecador. Pesar (NOTA: el ctodo no debe tocarse con los dedos hasta que sea pesado). Colocar el equipo de electrolisis conjuntamente con el nodo, con l corriente desconectada, asegurarse que el ctodo este conectado al polo negativo. Colocar el vaso sobre el agitador magntico y calentar la disolucin. Montar la celda electroltica, ajustar la altura de los electrodos de forma tal que lleguen casi al fondo del vaso y el ctodo este casi totalmente cubierto por la disolucin. Ajustar la velocidad del agitador magntico para que la disolucin sea agitada vigorosamente, pero sin peligro de prdidas mecnicas de lquido. El voltaje entre los electrodos deber estar entre 1 y 2V. Continuar la electrlisis durante aproximadamente una hora, o hasta que el color del cobre haya desaparecido completamente. Cuando la disolucin este totalmente incolora, aadir agua destilada hasta que el nivel de la disolucin alcance aproximadamente 1 cm por encima del nivel del depsito. Seguir la electrlisis 10 minutos ms. Para comprobar la ausencia de cobre en la disolucin, tomar una pequea porcin (aproximadamente 10 gotas) de la disolucin y se introduce en un tubo de ensayo que contiene 10 gotas de NH 3 concentrado. La formacin de los complejos del cobre con amoniaco de color azulado indica la presencia de cobre en la disolucin. En este caso, continuar con la electrolisis 10 minutos ms. Repetir hasta ausencia de coloracin. Cuando se completa la electrlisis sacar los electrodos de la disolucin, enjuagando simultneamente el ctodo con un chorro de agua. NOTA: No se debe cortar la corriente hasta que el ctodo este totalmente fuera de la disolucin y haya sido perfectamente lavado. (Cualquier resto de la disolucin cido sobre el depsito de cobre lo disolver parcialmente. Finalmente sumergir el ctodo en un vaso con agua para asegurar la eliminacin de sustancias solubles y enjuagarlo con porciones sucesivas de alcohol y acetona para eliminar el agua. Secar 2 3 minutos en estufa a 100 C, dejar enfriar hasta temperatura ambiente y pesar. Una vez pesado el ctodo se procede a la eliminacin del deposito de cobre sumergiendo el electrodo en un Beaker de 250 ml que contiene 200 ml de una disolucin de HNO3 al 25% y calentando en vitrina. La disolucin de cido ntrico al 25% no debe desecharse aunque presente coloracin azul, sirve para el siguiente grupo.

108 1.3.1.6 Resultados

Calcular el porcentaje de cobre. Expresar los resultados como mg Cu/g muestra inicial.

109 1.3.2 DETERMINACIN IODOMTRICA DE COBRE 1.3.2.1 Principio Terico

La proporcin de la muestra a analizar puede ser una alcuota del filtrado del sulfato de plomo que corresponda a 0.1 g de muestra, o bien a partir de la muestra original tomando una serie de precauciones. Se evita la interferencia del hierro con pirofosfato. Los componentes menores de las aleaciones de cobre tales como plomo, bismuto, estao, antimonio y niquel no interfieren. 1.3.2.2 Reactivos

Acido clorhdrico Pirofosfato sdico Almidn al 2%: se prepara disolviendo 1g de almidn en 500 mll de agua hirviente. Disolucin de Tiosulfato sdico (12,5 g/L) Yoduro potsico Tiocianato potsico Disolucin de yodato potsico (0.01M) Materiales

1.3.2.3

Erlenmeyer de 200-250 ml 2 matraces de 100 ml Pipeta de 10 ml Procedimiento

1.3.2.4

Tomar una alcuota del filtrado procedente de la eliminacin del sulfato de plomo que contenga del orden de 1g de latn. Aadir 2g de pirofosfato sdico, 4g de yoduro potsico y 5ml de cido clorhdrico concentrado. Comenzar a valorar con Tiosulfato sdico hasta que se haya consumido la mitad del volumen terico de Tiosulfato que se espera consumir en la valoracin. Aadir almidn al 2% y continuar con la titulacin hasta un color morado. Adicionar 2 g de Tiocianato potsico, agitar vigorosamente la disolucin durante 30 segundos. 1.3.2.5 Resultados

Indicar el resultado de la titulacin como contenido en cobre (%) respecto a la muestra inicial.

110 1.4 DETERMINACION DE HIERRO 1.4.1 Principio Terico La separacin de hierro del zinc en un latn se lleva a cabo generalmente por precipitacin como hidrxido frrico, de ah que el uso de cloruro amnico y un exceso de amoniaco mejore la separacin. La cantidad de hierro presente en un latn es generalmente tan pequea que no se hace necesaria ms de una precipitacin. Si hay aluminio precipitar parcialmente con el hierro y se pesara junto con el xido frrico, mientras que el resto precipitar con el fosfato de amonio y zinc en la determinacin del zinc. 1.4.2 Equipos Mufla

1.4.3 Reactivos Agua de bromo saturada Hidrxido amnico concentrado Hidrxido amnico (1:100) HCL (1:3) y (1:100)

1.4.4 Materiales Papel filtro sin cenizas Probeta Crisol de porcelana Pinza para crisol Frasco lavador

1.4.5 Procedimiento Tomar una alcuota de 25 ml de la disolucin procedente de la eliminacin del plomo. Aadir 2 ml de agua de bromo saturada y luego hidrxido de amonio concentrado hasta que se forme el complejo aminado de cobre, seguido de un exceso de 10 ml. Decantar y filtrar por papel sin cenizas. Lavar tres o cuatro veces con hidrxido de amonio 1:100, hasta eliminacin del cobre. Reemplazar el vaso donde se ha recogido el filtrado y las aguas de lavado por el que se uso para la precipitacin y verter 20 ml de HCl (1:3) caliente sobre el filtro para disolver el precipitado.

111 Lavar el papel con HCL 1:100 caliente y luego con agua para eliminar el cido. Precipitar el hierro como la vez anterior, usando 5 ml de exceso de hidrxido amnico, filtrar por el mismo papel ya utilizado. Lavar con la disolucin de hidrxido amnico (1:100), recogiendo filtrado y lavados en el vaso que contena el primer filtrado. Reservar el lavado y los filtrados para la determinacin de Zinc. Calcinar el precipitado hasta xido frrico a una temperatura superior a 500C hasta peso constante. 1.4.6 Resultados Calcular el contenido en hierro (%) de la muestra inicial.

112 1.5 DETERMINACION DE ZINC 1.5.1 Principio Terico Se proceder a la determinacin de zinc en disolucin mediante valoracin con EDTA, la cual permite una determinacin rpida que a menudo es suficientemente exacta. El procedimiento descrito a continuacin puede aplicarse a una porcin de muestra separada de muestra, siempre que Sn y Pc no excedan el 0.1 %. El cobre se precipita con ioduro o Tiocianato en presencia de acido ascrbico y de esta forma no se valora. 1.5.2 Reactivos Indicador anaranjado de xileno Disolucin de EDTA (0.002M) Disolucin de Zinc de (0.002M): disolver 0.262g de ZnSO 4.7H2O en agua y llevar a 0.5 L en un matraz aforado. Alternativamente se puede emplear AnNO3. Disolucin tampn de pH 4.5: disolver 77g de acetato amnico y 60g de cido actico glacial en agua y se lleva hasta 1L con agua destilada. Hexametilentetraamina al 20%

1.5.3 Materiales Beaker de 250 ml Gotero Esptula Matraz de 100 ml 3 Erlenmeyers de 250 ml Bureta Pipeta volumtrica de 10 ml

1.5.4 Procedimiento Enrasar el filtrado procedente de la determinacin gravimtrica del hierro a 200250 ml. Tomar una alcuota de 10 ml, aadir la disolucin tampn hasta alcanzar un pH de 4.5 aproximadamente (hasta romper el complejo aminado del cobre). Aadir 1-2g de ioduro potsico y suficiente acido ascrbico para reducir el yodo liberado. Aadir 6-8 gotas de anaranjado de xileno (0.1g de indicador en 100 ml de agua) y hexametilentetramina. Valorar con una disolucin previamente valorada con EDTA (0.002M) hasta color amarillo lechoso.

113 1.5.5 Resultados Indicar el resultado de la valoracin como contenido de Zn (%) de la muestra inicial. 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA http://www.unav.es/quimicayedafologia/csanta/a1/latones.pdf

114 CAPITULO 6 ANALISIS DE PINTURAS INTRODUCCION Las pinturas son de gran importancia en la vida cotidiana, dado que es sabida la influencia que pueden tener los colores sobre los estados de nimo, y como cualquier objeto que se pinta cobra nueva vida y atraccin. Adems de esto, las pinturas ayudan a preservar los materiales, por ejemplo, contra la corrosin, contra la luz, entre otros factores que acaban con la vida til de las cosas. Segn esto se puede decir que las pinturas adems de brindar placer esttico, se utilizan con el fin de conservar y proteger. Las pinturas se pueden clasificar de acuerdo a los componentes que la conforman, as existen pinturas a base de agua, de solventes, de aceite y pinturas especiales tales como lacas, siliconas, pinturas de aluminio, etc. Las frmulas de la pintura moderna cuentan con diversas categoras de compuestos qumicos. El aglutinante forma el recubrimiento fino adherente. El pigmento, dispersado en el medio fluido, da a la pelcula terminada su color y su poder cubriente. El disolvente o diluyente se evapora con rapidez una vez extendida la pintura. El aglutinante puede ser aceite no saturado o secante, que es ster formado por la reaccin de un cido carboxlico de cadena larga (como el cido linoleico) con un alcohol viscoso, como la glicerina. El aglutinante puede ser tambin un polmero (resina). Un material de relleno, que contiene componentes en polvo como el caoln o el sulfato de bario, mejora la resistencia de la pelcula seca de pintura. Por eso se considera muy importante el anlisis de las pinturas dentro de la industria, ya que se hace necesario controlar ciertos componentes que en exceso podran causar dao no solo en el ambiente sino tambin en los seres vivos. Lo que sera muy dispendioso, ya que todo en la vida gira en torno a las pinturas y a los colores.

115 1. METODOS GENERALES 1.1 ANLISIS DE PIGMENTOS, RESINAS, COMPUESTOS ORGNICOS VOLTILES (COVs), CROMO Y PLOMO EN PINTURAS COMERCIALES. 1.1.1 PINTURA A BASE DE SOLVENTES 1.1.1.1 Principio Terico PINTURAS BASE SOLVENTE: Son las formuladas con resinas alquidales modificadas y agentes plastificantes que aglutinan y proporcionan propiedades adherentes al pigmento de alto ndice como el titanio, con la caracterstica de tener un secado rpido. 1.1.1.2 Equipos

Centrifuga Balanza analtica Horno mufla Cromatgrafo de gases: El equipo utilizado para el anlisis de VOCs fue el cromatgrafo de gases acoplado a espectrmetro de masas marca Shimadzu GC-MS QP-2010. Sistema equipado con autoinyector AOC-20i, automuestreador AOC-20s, inyeccin Split-splitless, modo de ionizacin EI/SCI/NCI, sistema de insercin directa controlado por el software GCMS solution. Columna Rtx-5SilMS (30 m 0,25 mm DI, 0,25 m espesor de pelcula) y base de datos de fragmentogramas Wiley, 7 edicin, 2003. Las condiciones de los anlisis cromatogrficos fueron: para la temperatura del inyector 280 C, temperatura del horno 50 C durante 2 minutos, despus se llevo hasta 100 C con una razn de 3 C/min, finalmente se llev a 300 C a una razn de 50 C/min y se mantuvo all durante 8 minutos. Volumen de inyeccin 1 L, modo de inyeccin de split 150:1, modo de control de flujo velocidad lineal, flujo en la columna 0,51 mL/min, velocidad lineal del gas 25,8 cm/s, gas de arrastre helio (He), con una presin de 8,8 kPa, temperatura de fuente de iones 260 C, temperatura de interfase 280 C, tiempo de inicio 7 min, tiempo de finalizacin 30 min, m/z inicial 30, m/z final 450. Equipo de IR: El equipo utilizado es un espectrofotmetro infrarrojo de transformada de Fourier, Genesis II FTIR TM, marca Mattson; donde se realiz la medida en una pastilla de KBr en proporcin con la muestra de 10:1 respectivamente, a una temperatura de 35 C y un humedad relativa del 30%.se utiliz un detector de ioduro de cesio (CsI). Equipo de absorcin atmica: Para el anlisis de plomo por absorcin atmica se utiliz un espectrofotmetro UNICAM 969, SOLAAR, empleando una llama de aire-acetileno, de 10 cm de longitud, se realiz la medicin

116 usando una lmpara de ctodo hueco de 217 nm de longitud de onda, caracterstica del plomo. Para el anlisis de cromo se utiliz el mismo equipo con una llama de oxido nitroso-acetileno, una longitud de celda de 5 cm y una longitud de onda de 357,9 nm. 1.1.1.3 Reactivos

Los reactivos utilizados para esta prueba deben ser gado analitico. Acetona Acido clorhdrico Agua destilada Alcohol etlico Alcohol metlico Cloroformo ter de petrleo Tolueno Materiales

1.1.1.4

Horno mufla Tubos de centrifuga Crisol Desecador Matraces de 50 ml Pipeta volumtrica de 5 y 10 ml Procedimiento

1.1.1.5

A. Preparacin de la muestra Se agita vigorosamente la muestra con una esptula durante 5 a 10 minutos para homogeneizarla y se toma la cantidad necesaria para la prueba, cuidando que no se formen burbujas o se contamine con materiales extraos. A.1 EXTRACCION DE LOS PIGMENTOS TOTALES CON TOLUENO POR EL METODO DE CENTRIFUGADO En el tubo de la centrifuga, se colocan de 2 a 5 g de la muestra prueba y se registra la masa del conjunto. Aadir a la muestra pequeas porciones de tolueno hasta completar aproximadamente 60 ml y con agitador de vidrio se agita vigorosamente. Un poco antes de completar este volumen, con el tolueno faltante

117 se lava la pintura adherida al agitador, con el fin de no alterar la masa de la muestra de prueba. Centrifugar la muestra a una velocidad entre 3500 y 4000 rpm, hasta que el pigmento y el solvente queden separados claramente, lo que ocurre en un lapso de aproximadamente 30 min. Posteriormente se elimina por decantacin o con una pipeta, el solvente separado, conservando el pigmento de la pintura dentro del tubo de centrifuga. Con dicho residuo se hacen dos nuevas extracciones, una con tolueno y otra con ter de petrleo, el tiempo de centrifugacin ser de 15 min. El tubo de la centrifuga que contiene el pigmento se seca en el horno a una temperatura de 110 durante 2 horas, posteriormente se deja enfriar a temperatura ambiente dentro del desecador y finalmente se obtiene su masa. A.2. EXTRACCION DE PIGMENTOS TOTALES CON MEZCLA DE SOLVENTES POR EL METODO DE CENTRIFUGADO En caso de que el pigmento no se separe con tolueno, como se indica en la fraccin anterior, se utilizara entonces una mezcla extractora, compuesta por una combinacin de solventes orgnicos en las siguientes proporciones: Diez partes de ter etlico Seis partes de benceno Cuatro partes de alcohol metlico Una parte de acetona El procedimiento de la prueba y el clculo de los resultados son idnticos a los descritos en la fraccin anterior, con la nica diferencia de que se utiliza la mezcla extractora en lugar del tolueno para la extraccin de los pigmentos. A.3. DETERMINACION DE LOS PIGMENTOS TOTALES POR CALCINACION En un crisol, se coloca aproximadamente 1 g de la muestra de prueba y se registra la masa del conjunto. El crisol, se introduce al horno de mufla previamente calentado a 300C y se incrementa la temperatura a 500C, mantenindola durante 20 min o hasta que toda la materia se haya consumido. El crisol con el residuo se deja enfriar a temperatura ambiente dentro del desecador y despus se obtiene su masa. A.4. Anlisis de VOCs Para realizar un anlisis cualitativo en el Cromatgrafo de gases, se destila aproximadamente 5g de pintura, se desecha el primer mililitro del destilado luego en un vial recoger aproximadamente 1ml para llevarlo posteriormente al anlisis. Para los patrones se utilizan mezclas de solventes: xilenos, acetatos, alcanos.

118 A.5. Anlisis de resinas por espectroscopia infrarroja. Se tomo la muestra y se le someti a un secado en un horno a 110 C por aproximadamente 2 horas para eliminar los compuestos voltiles, finalmente el residuo seco es macerado hasta tener un polvo fino con el que se realiza la pastilla de KBr para leer en el equipo. A.6. Anlisis de cromo y plomo por absorcin atmica. Se realizo con cada muestra una calcinacin para eliminar la mayora de los compuestos orgnicos, en una mufla a 400 C por aproximadamente 3 horas, la muestra ya calcinada se somete a una digestin con agua regia, por 1 hora, finalmente se filtra y el filtrado se afora a 25 mL con agua destilada, la curva de calibracin para el plomo se realiz con patrones de 0, 3, 6, 9 y 12 ppm; y la del cromo con patrones de 0, 2, 4, 6 y 8 ppm. 1.1.1.6 Resultados

A.1. Se reporta como resultado de la prueba, el contenido de pigmentos totales y el contenido del vehculo de las pinturas, utilizando las siguientes expresiones.

Donde: P= Contenido total de pigmento (%) A= Masa del tubo de la centrifuga con la muestra de prueba, despus del secado final (g). B= Masa del tubo de centrifuga, (g). C= Masa del tubo de la centrifuga y la muestra de pintura por probar antes de la prueba, (g). V= Contenido de vehculo (%) A.3. Se reporta como resultado de la prueba, el contenido de pigmento, utilizando la siguiente expresin:

Donde: P= Contenido total de pigmento, (%) A= Masa del crisol con la muestra de prueba despus de la calcinacin, (g) B= Masa del crisol, (g) C= Masa del crisol con la muestra antes de calcinacin, (g)

119 A.4. Para este anlisis se realiza una corrida en el cromatgrafo de gases acoplado a masas de una extraccin de solventes de la pintura.

120 1.1.2 PINTURA A BASE DE AGUA 1.1.2.1 Principio Terico

PINTURAS BASE AGUA: Son las elaboradas con resinas acrlicas emulsionadas que proporcionan propiedades adherentes al pigmento de alto ndice como el titanio, agentes fungicidas y antiespumantes. Su tiempo de secado es mayor que el de las pinturas base solvente. 1.1.2.2 Equipos

Centrifuga Balanza analtica Horno mufla Reactivos

1.1.2.3

Acetona Acido clorhdrico Agua destilada Alcohol etlico Alcohol metlico Cloroformo ter de petrleo Tolueno Materiales

1.1.2.4

Horno mufla Tubos de centrifuga Crisol Desecador Matraces de 50 ml Pipeta volumtrica de 5 y 10 ml Procedimiento

1.1.2.5

B. Preparacin de la muestra Se agita vigorosamente la muestra con una esptula durante 5 a 10 minutos para homogeneizarla y se toma la cantidad necesaria para la prueba, cuidando que no se formen burbujas o se contamine con materiales extraos.

121 B.1. Extraccin de pigmentos totales con mezcla de solventes por el mtodo de centrifugado En el tubo de la centrifuga, se colocan de 2 a 5 g de la muestra prueba y se registra la masa del conjunto. Inicialmente se hacen dos extracciones con agua destilada, despus dos con acetona y finalmente una con la mezcla de una parte de tolueno y una de acetona. Opcionalmente se puede hacer la separacin con una mezcla de dos partes de tolueno, dos de alcohol etlico y dos de agua destilada, haciendo las extracciones necesarias para que salga limpia la mezcla. B.2. DETERMINACIN DE LOS PIGMENTOS TOTALES POR CALCINACIN B.2.2 IDENTIFICACION DE LA NATURALEZA DEL PIGMENTO En forma previa al experimento, se identifica la naturaleza orgnica o inorgnica del pigmento, de la siguiente manera: En un vaso de precipitado se mezclan 2 g de la pintura de prueba con 25 mL de agua destilada y se calientan a una temperatura de aproximadamente 40C durante 2 min; se deja asentar y el liquido separado se elimina por decantacin. A continuacin, se repite el procedimiento descrito en el prrafo anterior, primero con 25 ml de alcohol etlico y despus con 25 ml de cloroformo. La identificacin de la naturaleza del pigmento se realiza mediante la observacin del color presentado durante el desarrollo de estas actividades; cualquier coloracin del lquido resultante al adicionar alguno de los reactivos antes mencionados indica la presencia de pigmentos de naturaleza orgnica, mientras que la ausencia de coloracin indica la naturaleza inorgnica de los mismos. Desarrollo de la prueba En un crisol, se coloca aproximadamente 1 g de la muestra de prueba y se registra la masa del conjunto. El crisol con la pintura, se introduce al horno mufla previamente calentado a 400C; si el pigmento es de naturaleza orgnica o inorgnica, la prueba se contina como se describe a continuacin: En el caso de pigmentos orgnicos, la temperatura del horno mufla con la muestra en su interior, se mantiene a 400C durante 2 h. El crisol con el residuo obtenido por este procedimiento se deja enfriar a temperatura ambiente dentro del desecador y despus se obtiene su masa. En el caso de pigmentos inorgnicos, la temperatura del horno mufla con la muestra en su interior, se incrementa paulatinamente hasta alcanzar 900 C, manteniendo esa temperatura durante 20 min a fin de asegurar que toda la

122 materia orgnica se consuma. El crisol con el residuo obtenido se deja enfriar a temperatura ambiente dentro del desecador y despus se obtiene su masa. 1.1.2.6 Resultados

Se reporta como resultado de la prueba, el contenido de pigmento, utilizando la siguiente expresin:

Donde: P= Contenido total de pigmento, (%) A= Masa del crisol con la muestra de prueba despus de la calcinacin, (g) B= Masa del crisol, (g) C= Masa del crisol con la muestra antes de calcinacin, (g) 3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA MMP. Metodos de Muestreo y Prueba de Materiales (Contenido de Pigmento en Pinturas para Sealamiento Horizontal) http://normas.imt.mx/NORMATIVA/l %20MMP/5%20Senalamiento/01%20Pinturas/M-MMP-5-01-003-01.pdf

123 CAPITULO 7 ANALISIS DE FARMACOS INTRODUCCION Los medicamentos, en la sociedad, son de vital importancia para la proteccin, prevencin y teraputica de enfermedades que afectan a la poblacin; en ese sentido, el estricto control de calidad de los medicamentos es fundamental para el cumplimiento de las medidas sanitarias de seguridad, a fin de prevenir la existencia de una situacin que atente o pueda significar un riesgo contra la salud individual o colectiva. En el rea de Fisicoqumico de Medicamentos del Laboratorio Nacional de Salud (LNS) del Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social (MSPAS) se realizan los anlisis de valoracin de principio activo que contienen las muestras recibidas, segn lo declarado por la boleta cualicuantitativa presentada en el expediente de Solicitud de Registro Sanitario de Referencia. Con estos datos, se determina, conforme a normas y reglamentos que aseguran la calidad, eficacia e inocuidad de los medicamentos, si estos productos pueden ser utilizados por la poblacin (2, Morataya, 2009, P.4). Por esta razn, el Laboratorio Nacional de Salud debe utilizar metodologas que sean confiables, seguras y estandarizadas que permitan generar resultados verdicos para asegurar la calidad y competitividad Nacional e Internacional de los servicios prestados y al mismo tiempo brindar un mejor servicio a la comunidad. Debido a que todo medicamento debe cumplir con especificaciones de calidad, es de suma importancia que se cumplan los requerimientos de valoracin, identidad y pureza para garantizar al consumidor final su efectividad. Derivado de estos aspectos es necesario efectuar monitoreos peridicos del cumplimiento de la concentracin del principio activo declarado por el fabricante. Tomando en cuenta lo anterior, para este estudio se consider de importancia evaluar soluciones orales de acetaminofn (120mg/5mL) que se manufacturan en los diferentes laboratorios farmacuticos de Guatemala, para comprobar que la concentracin de principio activo declarada por el fabricante se mantiene luego de aprobado el registro sanitario. El mtodo utilizado fue Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC), segn los criterios establecidos en la monografa descrita en la Farmacopea de los Estados Unidos (USP XXXII).

124 1. METODOS GENERALES

1.1 MONITOREO DE LA CALIDAD DE SOLUCIONES ORALES DE ACETAMINOFN (120MG/5ML) MANUFACTURADO POR LABORATORIOS NACIONALES, POR MEDIO DE CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN (HPLC), PARA COMPROBAR EL CUMPLIMIENTO DE LA CONCENTRACIN DECLARADA POR EL FABRICANTE 1.1.1 Principio Terico En el caso de soluciones orales de acetaminofn, es de gran importancia monitorear que se mantenga la concentracin del principio activo segn lo declarado por el fabricante, ya que es un medicamento utilizado por la poblacin infantil y al ser de venta libre el acceso es amplio, por lo que es importante verificar que se est produciendo bajo los criterios de calidad establecidos, ya que al ser administrado en dosis altas (superiores a 50 mg/kg en forma repetida) o dosis teraputicas en nios con enfermedad heptica, puede causar toxicidad heptica la cual puede ser mortal. Con dicho estudio se busc demostrar que la concentracin o contenido de principio activo de soluciones orales de acetaminofn (120mg/5mL), producido en laboratorios nacionales, mantiene luego de aprobado el registro sanitario, los requerimientos y criterios establecidos en la monografa descrita en la Farmacopea de los Estados Unidos (USP XXXII). 1.1.2 Equipos Balanza Analtica Mettler Cromatgrafo Lquido de Alta Presin con detector UV/VIS Merk Hitachi Lachrom y Agilent 1200 Series. Columna de 3.9 mm x 30 cm rellena con material L1 (C18 octadecilsilano) o equivalente.

1.1.3 Reactivos Estndar de Acetaminofn Agua destilada Metanol grado HPLC

1.1.4 Materiales Balones aforados de 50ml, 100ml, 200ml y 250ml Pipetas volumtricas de 4ml, 5ml, 20ml y 25ml Esptulas Probetas

125 Beaker de 250 ml Equipo para filtracin al vaco Papel filtro

1.1.5 Procedimiento Muestra: Soluciones orales de acetaminofn (120mg/5mL) producidos en 5 diferentes laboratorios nacionales escogidos al azar. De cada laboratorio fabricante se tomar una muestra. Valoracin del principio activo en solucin oral de acetaminofn Fase mvil Preparar una mezcla desgasificada adecuada de agua y metanol (3:1). Hacer ajustes si fuera necesario. Preparacin estndar Disolver una cantidad pesada con exactitud de Acetaminofeno en Fase Mvil para obtener una solucin con una concentracin conocida de aproximadamente 0.01 mg por ml. Preparacin de valoracin Trasferir a un matraz volumtrico de 250 ml un volumen de Solucin Oral medido con exactitud, que equivalga aproximadamente a 500 mg de acetaminofn, diluir a volumen con Fase Mvil y mezclar. Transferir 5.0 ml de esta solucin a un segundo matraz volumtrico de 250 ml, diluir a volumen con Fase Mvil y mezclar. Transferir 25.0 ml de esta solucin a un matraz volumtrico de 100 ml, diluir a volumen con Fase Mvil y mezclar. Pasar una porcin de esta solucin a travs de un filtro con un tamao de poro de 0.5 Um o menor y descartar los primeros 10 ml del filtrado. Usar el filtrado transparente como Preparacin de valoracin. Sistema cromatogrfico Equipar un cromatgrafo de lquidos con un detector a 243 nm y una columna de 3.9mm x 30 cm rellena con material L1. La velocidad del flujo es de aproximadamente 1.5 ml por minuto. Inyectar en el cromatgrafo la Preparacin estndar y registrar el cromatograma segn indica el procedimiento: la eficiencia de la columna no es menor de 1000 platos tericos; el factor de asimetra no es mayor de 2; y la desviacin estndar relativa para inyecciones repetidas no es ms de 2.0%

126 1.1.6 Resultados Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 10 UL) de la Preparacin estndar y de la Preparacin de valoracin, registrar los cromatogramas y medir las respuestas correspondientes a los picos principales. Calcular la cantidad, en mg, de acetaminofn (C 8H9NO2) en cada ml de Solucin Oral tomada, por frmula:

En donde C es la concentracin, en mg por ml, de Acetaminofeno de la Preparacin estndar; V es el volumen, en ml, de Solucin Oral tomada; y r u y rs son las respuestas de los picos de acetaminofn obtenidos a partir de la Preparacin de valoracin y de la Preparacin estndar respectivamente. Criterios de Aceptacin: La Solucin Oral de acetaminofn contiene no menos de 90,0 por ciento y no ms de 110,0 por ciento de la cantidad de acetaminofn declarada en la etiqueta.

127 1.2 MEDICIN DE DISOLVENTES RESIDUALES EN MUESTRAS FARMACUTICAS UTILIZANDO LAS TCNICAS DE CROMATOGRAFA DE GAS 1.2.1 Principio Terico Solventes residuales en muestras farmacuticas son monitoreadas mediante cromatografa de gases (GC) con cualquier deteccin de ionizacin de flama (FID) o espectrometra de masas. Basado en buenas prcticas de manufactura, la medicin de disolventes residuales es obligatorio para la prueba de lanzamiento de todos los ingredientes farmacuticos activos y habitualmente se realiza en muestras de productos intermedios del proceso. Han desarrollado mtodos generales de GC para supervisar los disolventes utilizados rutinariamente en el proceso de sntesis de drogas. Ahora es posible tomar ventaja del equipo de GC con capacidades de rampa de temperatura ms rpidas, en combinacin con las columnas de GC capilares ms cortas, para lograr una ganancia considerable en la eficiencia y la reduccin de plazos de anlisis. En este artculo, se discutir el desarrollo e implementacin de mtodos GC rpidos para pruebas de disolventes residuales. 1.2.2 Equipos Cromatgrafo de gases: El equipo utilizado para el anlisis de frmacos es el cromatgrafo de gases acoplado a espectrmetro de masas marca Shimadzu GC-MS QP-2010. Sistema equipado con autoinyector AOC-20i, automuestreador AOC-20s, inyeccin Split-splitless, modo de ionizacin EI/SCI/NCI, sistema de insercin directa controlado por el software GCMS solution. Columna Rtx-5SilMS (30 m 0,25 mm DI, 0,25 m espesor de pelcula) y base de datos de fragmentogramas Wiley, 7 edicin, 2003.

1.2.3 Reactivos Acetona Dimetilformamida Metanol Tolueno N-octano

1.2.4 Materiales Pipeta de 1 ml Mortero Beaker Esptula

128 Tubos de ensayo 1.2.5 Procedimiento Mtodo general GC para disolventes residuales pruebas utilizando la inyeccin de lquido Se utilizaron las siguientes condiciones experimentales: un 1 volumen l de una solucin de muestra o estndar se inyect en el puerto de inyeccin de split de GC, que se mantuvo a una temperatura de 190C. Se utiliz una relacin de divisin de 35. La presin del gas portador helio se fij en 11.65 psi para un flujo esperado de 1,0 ml/min. La temperatura del detector de ionizacin de llama a 250C. El gradiente de temperatura aument de 35 a 90 C a una velocidad de 6C/min, luego aument a 15C/min hasta alcanzar una temperatura final de 200C. Este mtodo tambin se aplic con xito a un GC con deteccin de masa. Preparacin de las muestras Aplicaciones de inyeccin directa de gas cromatogrficos mtodos utilizados para analizar disolventes residuales en productos farmacuticos y productos relacionados. Piroxicam: 200 mg en 2 ml de dimetilformamida. Napoxeno: Para la determinacin de solventes residuales en la matriz final de naproxeno, consiste en una extraccin lquido- lquido, donde se utiliza como solvente polar el agua y como solvente apolar el octano, antes de la adicin del octano se lleva la solucin a pH=7 con el fin de aumentar la solubilidad de la muestra. Luego de esto se lleva a cabo dicha extraccin donde se recolecta 1 ml de extracto. La muestra se analiza por cromatografa de gases segn el siguiente mtodo y se prepararon patrones de acetona-tolueno 1:1 y de metanol para la comparacin de los tiempos de retencin.

1.2.6 Resultados Reportar los resultados del cromatgrafo. 4. DOCUMENTOS DE REFERENCIA Measuring residual solvents in pharmaceutical samples using fast gas chromatography techniques http://www.sciencedirect.com.ezproxy.utp.edu.co/science/article/pii/S15700 2320400159X.

129 CAPITULO 8 ANALISIS DE METILESTERES DE CIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFIA DE GASES ACOPLADA A ESPECTROMETRIA DE MASAS. INTRODUCCION La estandarizacin es un procedimiento estadstico que consiste en verificar y documentar, que exista un alto grado de seguridad, en la obtencin de resultados que deberan ser precisos y exactos dentro de las especificaciones y los atributos de calidad previamente establecidos. Se realizan millones de anlisis diariamente en el mundo en los mbitos ms variados: productos manufacturados, naturales, medioambientales, qumicos y fsicos. En todos ellos se requiere una confianza en los resultados obtenidos. La estandarizacin de metodologas analticas permite conseguir calidad, otorgando la confianza necesaria a la vez que le confiere un grado elevado de comparacin entre resultados. La cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (GC-MS por sus siglas en ingles) se basa en la separacin de compuestos voltiles dependiendo de sus puntos de ebullicin. Al llegar al detector, las molculas del analito son bombardeadas por electrones, rompiendo enlaces (en ocasiones no necesariamente) y formando fragmentos estables. La cromatografa de gases se ha convertido en la herramienta ms empleada en la separacin, identificacin y cuantificacin de los cidos grasos convertidos primero metilesteres de cidos grasos (Fatty Acids Methyl Esters, FAMEs); cuya exactitud esta limitada por la complejidad del proceso de calibracin, la pureza de las sustancias empleadas como estndares y la imposibilidad de identificar los compuestos en las muestras. Los anlisis por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas para FAMEs (GC-MS, siglas en ingls) por el mtodo de impacto electrnico (EI) resultan en una fragmentacin fuerte y reestructuracin de la molcula que a menudo no produce un in molecular [M ]+ , este realmente aumenta con pesos moleculares elevados (>6 tomos de carbono), aunque decrece con ramificaciones en la cadena. El modo de ionizacin qumica usando como gas reactivo el metano, permite que el [ M +1]+ sea ms estable, y se muestre un pico ms legible. Con estos dos mtodos de ionizacin, y con el uso de un estndar comercial de una mezcla de metilesteres de cidos grasos se realiz la identificacin de cada pico y la calibracin para cada compuesto separado.

130 1. METODOS GENERALES

1.1 COMPARACIN Y CUANTIFICACIN DE CIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFA DE GASES EN EL ACEITE DE LA SEMILLA DE LINAZA 1.2.1 Principio Terico El presente trabajo investigativo, tiene como finalidad la comparacin y cuantificacin del aceite extrado de la semilla de linaza. Se procede a obtener el aceite de la semilla de linaza por medio de un equipo de extraccin Soxhlet y luego se realiz el proceso de esterificacin para la muestra de aceite, para hacer el anlisis por cromatografa de gases (GC). A partir de los datos obtenidos se establece una composicin mayoritaria de cidos grasos insaturados (alfa-linolnico, oleico, linoleico). 1.2.2 Equipos Cromatgrafo de gases acoplado a espectrmetro de masas

1.2.3 Reactivos Hexano Solucin metanlica de hidrxido de potasio 2N

1.2.4 Materiales equipo de extraccin Soxhlet Equipo de destilacin Mortero Viales Pipetas

1.2.5 Procedimiento Extraccin del Aceite de Linaza. Se tritura la semilla escogida. Seguidamente se extrae el aceite de la semilla utilizando como solvente hexano en un equipo de extraccin Soxhlet. La fraccin oleosa de las semillas de linaza se disuelve en el hexano durante la extraccin para luego eliminar el hexano por destilacin. Debido a su elevado carcter voltil, en el aceite despus de su obtencin queda un residuo de hexano mnimo o nulo, es importante mantener el aceite en refrigeracin y fuera del contacto con la luz para evitar su degradacin. Posterior a un proceso de esterificacin en fro se lleva la muestra a lectura en un cromatgrafo de gases, a partir de los cromatogramas se establece la composicin en cidos grasos presentes en el aceite de linaza.

131

Preparacin del Aceite para el Anlisis Cromatogrfico La muestra debe ser derivatizada con la finalidad de que se transformen los cidos grasos en steres metlicos para que sean ledos por el Detector de Ionizacin de Flama (FID). Para obtener los steres metlicos de cidos grasos realizamos el siguiente procedimiento (REGLAMENTO (CE) n 2568/91): 1. Tomar alrededor de 0.1 gramos del aceite a analizar en un tubo de ensayo de 20 ml (con tapa rosca). 2. Aadir 2 ml de hexano 3. Tapar y agitar por 30 segundos. 4. Luego adicionar 0.2 ml de solucin metanlica de hidrxido de potasio 2N. 5. Tapar y agitar por 30 segundos, centrifugar por 10 minutos a 2000 rpm 6. Tomar la muestra para inyectar en el cromatgrafo (1ul) de la fase superior del tubo. Caracterizacin de cidos grasos del Aceite de Linaza por Cromatografa de Gases. Luego de la esterificacin se coloca la muestra en viales mbar y cierre hermtico con su respectiva identificacin y se inyecta en el cromatgrafo. La muestra se inyecta en el equipo a las condiciones adecuadas para el anlisis de cidos grasos. Sistema cromatogrfico Cromatgrafo de gases acoplado a espectrmetro de masas marca Shimadzu GCMS QP-2010. Sistema equipado con autoinyector AOC-20i, automuestreador AOC-20s, inyeccin Split-splitless, modo de ionizacin EI/SCI/NCI, sistema de insercin directa controlado por el software GCMS solution. Columna RtxCLPesteicides Restek (30 m 0,25 mm DI, 0,25 m espesor de pelcula) y base de datos de fragmentogramas Wiley, 7 edicin, 2003. Condiciones de inyeccin para cidos grasos Inlet Temperatura 250 C Injection volume 1.0 microliter Split ratio 50:1 Carrier gas Helium Head pressure 33.4 psi

132 Oven temperatura Temp initial 50 C Time initial 1min Ramps: # Rate Final Temp. 1 25C/min 175 2 4C/min 215 3 2.5 C/min 230 4 0.0 Off Detector de temperatura 280 C Detector gases Hydrogen Flow : 30 mL/min Air Flow : 300 mL/min Capillary Column Model Number: Agilent 122-2362 DB-23 Max temperature : 250 C Nominal length : 60.0 m Nominal Diameter : 250.00 m Nominal film thickness : 0.25 m Mode : constant pressure Pressure: 33.0 psi Nominal initial flow: 2.1 mL/min 1.2.6 Resultados Para cada componente se obtiene un rea que se integra automticamente mediante el programa DATA ANALISIS, la misma que es ingresada en la curva de calibracin y se obtiene la concentracin del componente, si se realiza alguna dilucin de la muestra se multiplica por el factor de dilucin. 2. DOCUMENTOS DE REFERENCIA http://memorias.utpl.edu.ec/sites/default/files/documentacion/intingali2008/p apers/utpl-congreso-ingenieria-alimentos-2008-ACIDOS-GRASO-ACEITESEMILLA-LINA.pdf

133 CAPITULO 9 FORMULACION INTRODUCCION La formulacin abarca el saber-hacer necesario para el desarrollo y fabricacin de un producto comercial caracterizado por su valor de uso y en respuesta a una lista de especificaciones preestablecidas. Un producto formulado se obtiene por asociacin y mezcla de diversas materias primas de origen sinttico o natural, entre las cuales se distinguen por lo general a las materias activas que cumplen la funcin principal y los auxiliares de formulacin que aseguran las funciones secundarias, facilitando la preparacin o puesta a punto de un producto comercial, o prolongan su duracin. La formulacin toca, por lo tanto, a todas las industrias de transformacin de la materia, desde la produccin de las materias primas aguas arriba hasta el producto final aguas abajo, que estn en contacto directo con el consumidor final (industrial o pblico), fabricando formulaciones listas para su empleo. Las industrias qumicas estn relacionadas con la formulacin ya que ellas fabrican las materias activas y auxiliares de formulacin. Estos compuestos, se conocen comnmente como especialidades qumicas, que son comercializadas ms por las propiedades funcionales que le confieren a la mezcla final (color, espesor, capacidad de formar pelculas, filtro UV, hidratacin de la piel, etc) que por criterios qumicos (estructura molecular, pureza, etc.). Las industrias aguas abajo fabrican, para el consumidor final, formulaciones cuyo grado de complejidad aumenta an ms. En ellas se asocian diversas materias primas para obtener especialidades listas para emplear que poseen las propiedades de uso (curar una enfermedad, lavar el cabello, proteger y decorar una superficie, etc..) que integran simultneamente la facilidad de manejo y los resultados buscados por el consumidor final. La Nomenclatura de Actividad Francesa (NAF) ubica a las industrias de formulacin ms tpicas en el sector farmacutico (medicamentos) y en la paraqumica (fitosanitarios, cosmticos, perfumes, productos de higiene, jabones y detergentes, productos de mantenimiento, productos para la fotografa, soporte de datos, pinturas y barnices, tintas, pegamentos y adhesivos, lubricantes, explosivos). Pero las otras industrias de transformacin de la materia que no pertenecen a estos sectores de actividad (productos agroalimentarios, carburantes, pulpa y papel, textiles, plsticos, cauchos, cementos, hormigones, vidrios, cermicas) son igualmente inducidas a formular los productos que le venden a sus clientes.

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1. METODO GENERAL 1.1 PASTAS DENTALES 1.1.1 Principio Terico La higiene bucal es uno de los elementos principales del cuidado personal. El deseo de lucir una sonrisa con dientes limpios, sanos y blancos ha dado lugar a que en el mercado existan dentfricos de muchos tipos y caractersticas. Se pueden encontrar en una gran variedad de sabores, colores y envases; en gel o crema; con compuestos contra la caries, el sarro, la placa dentobacteriana o para contrarrestar la sensibilidad de los dientes, entre muchas otras propiedades anunciadas que, por cierto, no todos cumplen cabalmente. Ms all de la ilusin cosmtica, lo cierto es que el uso de la pasta dental, ms un buen cepillado, puede ayudar a prevenir problemas como el mal aliento o la caries dental. Conviene recordar que la caries es el resultado de todo un proceso que en general da inicio con la aparicin de la placa bacteriana, formada por la saliva y restos alimenticios que se adhieren a los dientes. Por otro lado, en ocasiones la placa bacteriana puede dar lugar a depsitos duros (sarro), que al atrapar los restos alimenticios en sitios inaccesibles al cepillo dental, forman una fuente infecciosa que irrita la enca, causando que retroceda y exponga la parte del diente que normalmente est cubierta y es ms susceptible al desgaste. Si no se trata a tiempo, el problema puede evolucionar hasta infectar el diente y los tejidos que lo sostienen. La salud dental depende precisamente de evitar este tipo de problemas y para ello es necesario el cuidado sistemtico de la dentadura. 1.1.2 Reactivos Dentro de una misma marca es posible encontrar tipos muy diversos de pastas dentales que pueden diferir de manera sustancial dependiendo de sus componentes. Usted puede identificar en la etiqueta los ingredientes presentes en el producto, para lo cual le mencionamos algunas de sus propiedades: Agentes limpiadores. Generalmente todos los productos incluyen compuestos detergentes que penetran y aflojan los depsitos de la superficie del diente, favoreciendo su eliminacin; el ms comn es el lauril sulfato de sodio. Agentes que previenen la caries. La odontologa preventiva considera esencial la utilizacin del flor debido a que ha demostrado proteger contra la caries, adems de "remineralizar" las lesiones una vez que dicho mal ha aparecido. La mayora de las pastas dentales lo incluyen. Dado que el flor

135 debe ser administrado en cantidades limitadas para evitar efectos negativos, como la fluorosis dental; la norma actual exige que la concentracin de flor en una pasta dental no exceda del 0.2 por ciento. Hay estudios que sugieren limitar el contenido de flor en productos para nios menores de seis aos a un mximo de 0.05 por ciento, o bien, sealan que las pastas con mayor contenido de flor deben emplearse en cantidades pequeas (del tamao de una gota) y bajo la supervisin de un adulto. Agentes que previenen el sarro. Los ms comnmente empleados son los pirofosfatos, que interfieren qumicamente contra la formacin del sarro ya que bloquean los sitios receptores de las sales, responsables de ese proceso. Sin embargo, cabe mencionar que los agentes antisarro no eliminan los depsitos endurecidos, los cuales deben ser removidos mediante una limpieza profesional. Agentes antiplaca bacteriana. La placa dentobacteriana es una pelcula incolora y pegajosa que se forma constantemente sobre los dientes y es la causa principal de enfermedades de las encas, que pueden ocasionar incluso la prdida de los dientes. Por ello es de suma importancia la remocin constante de esta pelcula. Entre los agentes qumicos comerciales antiplaca est el triclosn, antibacteriano efectivo contra una gran variedad de bacterias. Agentes desensibilizantes. La hipersensibilidad puede presentarse en sitios nicos o mltiples. Se relaciona con problemas como alguna fractura dental, nuevas caries, recurrencias de las mismas o migracin de la enca, que deja al descubierto zonas sensibles. Para tratar la hipersensibilidad los dentfricos pueden incluir nitrato de potasio, citrato de sodio y/o cloruro de estroncio. Para el uso prolongado de estos productos es aconsejable la supervisin de un dentista. Agentes pulidores o blanqueadores. Los pulidores se utilizan para eliminar manchas, siendo los ms frecuentemente usados la slice, xido de aluminio, carbonato de calcio y fosfatos de calcio, entre otros. tiles para dentaduras muy pigmentadas y no deben emplearse cuando hay zonas sensibles expuestas. El bicarbonato de sodio tambin puede actuar como un abrasivo leve si se le utiliza en suficiente concentracin. Otros ingredientes. Se incluyen agentes saborizantes como la menta, la hierbabuena y otros edulcorantes artificiales; tambin existen agentes humectantes que previenen la prdida de agua en la pasta y agentes que le dan cuerpo al producto, evitando la separacin de sus componentes.

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1.1.3 Resultados Puede decirse que la gran mayora de las pastas analizadas cumplen al menos adecuadamente la labor de contribuir a la limpieza dental; algunas contienen triclosn, que recientemente ha demostrado efectividad en la prevencin de caries, o flor, que desde hace tiempo es reconocido en ese sentido. Pero no todas las pastas dentales cumplen cabalmente con las propiedades que su propaganda ofrece. Eliminar el sarro es una tarea que slo un dentista puede llevar a cabo, aunque algunos dentfricos pueden ayudar un poco a evitar la acumulacin de sarro. Entre los dentfricos que ofrecen blancura excepcional es importante destacar que algunos son ms abrasivos de lo aconsejable, por lo cual conviene consultar al dentista antes de usarlos. Por ltimo, debe sealarse que no todas las pastas son para todo tipo de usuarios. En aconsejable verificar aquellas cuyo uso no es recomendable, como las llamadas antisarro o las que contienen abrasivos u otros ingredientes no apropiados para los nios. 3. DOCUMENTOS DE REFERENCIA Revista del Consumidor No. 311, Enero 2003. Techniques de l'Ingnieur, Trait de Gnie des Procds, Doc. J2-110 (1999)