Sexto CIB. Prof.

Brayn Machado

Prctica Nmero 4:

RECONOCIMIENTO DE GLUCIDOS

Objetivos: 1) Conocimiento de los mtodos calorimtricos de identificacin de glcidos. 2) Demostracin del poder reductor de los monosacridos. 3) Comprobacin del carcter hidrolizable del enlace glucosidico. 4) Determinacin de las variaciones de PH y concepto de neutralizacin. 5) Manejo de material y tcnicas de laboratorio. Introduccin: Para poner de manifiesto la presencia de determinados compuestos qumicos se emplean reactivos especficos que ponen de relieve alguna propiedad de estas molculas y permite identificarlas. As, los azcares monosacridos y los disacridos monoglicosdicos pueden identificarse mediante la solucin o reactivo de Fehling, que cambia de color debido a la tendencia que tienen los azcares con el carbono quiral libre, en medio bsico, a dar electrones (capacidad reductora) oxidndose ellos mismos, a su vez, para dar azcares-cidos. El almidn se tie de modo especfico con el colorante Lugol, adoptando un color azulviolceo. Materiales: Tubo de ensayo y gradilla Pipeta Mechero Pinza de madera

Pinza de madera Vasos de bohemia Papel tornasol

Soluciones y sustancias: cido clorhdrico Lugol Hidrxido de sodio Reactivo de Fehling Solucin de glucosa, sacarosa, maltosa y almidn Procedimiento: Identificacin del poder reductor de los glcidos. 1) Colocar 5 tubos en una gradilla 2) Aadir con pipeta 2 ml de las diferentes soluciones azucaradas 3) Aadir a cada tubo 1ml de solucin de Fehling A y 1 ml de solucin de Fehling B 4) Calentar los tubos de ensayo en un vaso de bohemia con agua hirviendo 5) Observar y anotar los resultados (positivo color rojo, negativo ausencia de color rojo)

Hidrlisis de disacridos no reductores y polisacridos. Mientras esperamos la accin de los colorantes en la tcnica anterior, preparamos los tubos para la segunda tcnica. Los enlaces glucosidico son hidrolizables en medio acido diluido liberando sus monosacridos o disacridos constituyentes. 1) Numerar 5 tubos de ensayo y numerarlos segn se indica en la imagen. 2) Aadir 3 ml de solucin problema: Tubo 1 y 2: Sacarosa Tubo 3 y 5: Almidn 3) Aadir 3 ml de HCl diluido a los tubos 1 y 3 4) Calentar a bao mara durante 15 minutos los tubos 1 y 3 5) Pasado el tiempo aadir a dichos tubos NaOH hasta neutralizacin, comprobando con papel tornasol. 6) Separar en 2 el producto del tubo 3, colocando la mitad en un nuevo tubo (4) 7) Realizar la prueba de Fehling a los tubos 1 y 4. Aadir tanta cantidad de Fehling A+B como cantidad exista en el tubo resultado de la hidrlisis cida. 8) A los tubos 2,3 y 5 aadir 3 gotas de Lugol. La presencia de color azul violceo es interpretada como presencia de almidn (+).

Cuestiones y Resultado: 1) Qu funcin cumplen los tubos 2 y 5? 2) Qu indica el cambio de color en los tubos (+) y el que no haya cambiado en los tubos (-)? 3) La sacarosa da positivo frente a la prueba de Fehling? Representa, dibujando las

molculas, el proceso sufrido por la sacarosa del tubo 1 y seala el carbono responsable del cambio de comportamiento frente al Fehling antes y despus de la hidrlisis.