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Prof. Valmir F.

Juliano
INTRODUO AOS MTODOS
ESPECTROANALTICOS I
QUI624
Classificao dos mtodos analticos
CLSSICOS E INSTRUMENTAIS
Baseados em propriedades
fsicas (qumicas em alguns casos )
Chamados de mtodos
de via mida
Gravimetria
Volumetria
Espectromtrico
Eletroanaltico
Propriedades
eltricas
Propriedades
pticas
Cromatogrfico
Propriedades
mistas
Natureza ondulatria da
Radiao Eletromagntica
Radiao eletromagntica, ou luz, uma forma de energia cujo comportamento
descrito por propriedades tanto de onda quando de partcula. A natureza exata
da radiao eletromagntica somente foi esclarecida aps o desenvolvimento da
mecnica quntica por volta do incio do sculo XX.
Propriedades pticas, como a difrao, so melhores explicadas quando a
luz tratada como onda. Muitas interaes entre a radiao
eletromagntica e a matria, como absoro e emisso, entretanto, so
melhores descritas tratando a luz como partcula ou fton.

v
c
h h E = =
E = energia
h = constante de Planck (6,626 . 10
-34
J s)
v = frequncia
c = velocidade da luz (2,998 . 10
8
m s
-1
)
= comprimento de onda
Baixa energia Alta energia
Comprimento de onda e Energia
Frequncia (m) Energia Nome Uso

10
20
a 10
21
10
-12
Nuclear Raios- Medicina
10
17
a 10
19
10
-10
Eletrnica Raios-X
Diagnstico
por imagens
10
15
a 10
16
10
-7
Eletrnica Ultra-Violeta Higienizao
10
13
a 10
14
10
-6
Eletrnica Visvel Iluminao
10
12
a 10
13
10
-4
Vibracional Infravermelho Aquecimento
10
9
a 10
11
10
-2
Rotacional Microondas Cozimento
10
5
a 10
8
10
2
Rdio
Frequncia
Comunicao
Usos da radiao eletromagntica
Uso em Qumica:
Mtodos Espectromtricos,
Espectrofotomtricos,
Espectroqumicos ou
Espectroanalticos?!?
Tutti quanti
Mtodos Espectromtricos
Os mtodos espectromtricos abrangem um grupo
de mtodos analticos baseados na espectroscopia
atmica e molecular.

Espectroscopia um termo geral para a cincia que
estuda a interao dos diferentes tipos de radiao
com a matria.

A espectrometria e os mtodos espectromtricos se
referem s medidas das intensidades da radiao
usando transdutores fotoeltricos ou outros
dispositivos eletrnicos.
Os comprimentos de onda da radiao eletromagntica se
estendem dos raios-gama at as ondas de rdio, com
aplicaes diferenciadas.
Os mtodos espectromtricos se baseiam em propriedades
pticas (mesmo que a radiao no seja percebida pelo olho
humano), quer sejam de emisso ou absoro de radiao
eletromagntica de determinados .
Como as interaes da radiao com a matria podem
ocorrer tanto em nvel atmico como em nvel molecular, os
mtodos instrumentais espectromtricos se dividem em 4
classes:
Emisso (emisso atmica)
Luminescncia (fluorescncia atmica e molecular,
fosforescncia)
Espalhamento (Raman, turbidimetria e nefelometria)
Absoro (absoro atmica e molecular)
Mtodos Espectromtricos
Tipo de espectroscopia
Faixa de
comprimento
de onda usual
Faixa de
nmero de onda
usual, cm
-1
Tipo de transio
quntica
Emisso de raios gama 0,005 1,4 Nuclear
Absoro, emisso, fluorescncia
e difrao de raios-x
0,1 100 Eltrons internos
Absoro de ultravioleta de vcuo 10 180 nm 1x10
6
a 5x10
4
Eltrons ligados
Absoro, emisso e fluorescncia
no UV/Visvel
180 780 nm 5x10
4
a 1,3x10
4

Eltrons ligados
Absoro no IV e espalhamento
Raman
0,78 300 m 1,3x10
4
a 33


Rotao/vibrao de
molculas
Absoro de microondas 0,75 375 mm 13 a 0,03 Rotao de molculas
Ressonncia de spin eletrnico 3 cm 0,33 Spin de eltrons em
um campo magntico
Ressonncia Magntica Nuclear 0,6 10 m 1,7x10
-2
a 1x10
-3
Spin de ncleos em
um campo magntico
Mtodos Espectromtricos
Mtodos Espectromtricos
250 300 350 400 450 500 550
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0


A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
(nm)
2
7
5
,
3

3
4
1
,
8

3
9
6
,
1

4
7
4
,
9
5

ABSORO ATMICA: O espectro em forma de linhas finas devido
aos nveis atmicos sem subnveis energticos.
Mtodos Espectromtricos
Mtodos Espectromtricos
350 400 450 500 550 600 650 700 750
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0


A
b
s
o
r
v

n
c
i
a
(nm)

max

ABSORO MOLECULAR: O espectro de absoro caracterizado por
bandas largas devido aos vrios nveis e subnveis energticos dos
orbitais moleculares.
E
0
E
1
E
2
Eletrnica
~ 100 kJ mol
-1
UV-Vis
Vibracional
~ 1 kJ mol
-1
IV
Rotacional
~ 0,01 kJ mol
-1
RMN
Mtodos Espectromtricos
Quando as energias envolvidas so altas, por
exemplo emisses de Raios-X, as transies
eletrnicas acontecem com os eltrons dos orbitais
mais internos e, nestes casos, sero independentes
das ligaes que os tomos estejam fazendo.

Quando um eltron excitado a um nvel
vibracional mais alto de um estado eletrnico, a
relaxao para um nvel vibracional mais baixo desse
estado ocorre antes que a transio eletrnica ao
estado fundamental possa ocorrer. A razo disso
explicada em termos da transferncia do excesso
de energia para outros tomos atravs de uma srie
de colises.
Mtodos Espectromtricos
COMPONENTES BSICOS DOS EQUIPAMENTOS

Fonte de radiao:*
Lmpadas de xennio, deutrio, tungstnio,
lasers, etc
Seletor de comprimento de onda:
Filtros e monocromadores.
Transdutores:
Tubos fotomultiplicadores, fotodiodos, CCD,
fotoclulas, etc.

* Para algumas tcnicas de emisso, sero necessrios mais
alguns componentes.
Mtodos Espectromtricos
Fonte
Seletor de
comprimento
de onda
Fotmetro de feixe nico para medidas de
absoro na regio visvel
Mtodos Espectromtricos
Transdutor
Fonte
Seletor de
comprimento
de onda
Transdutor
Espectrofotmetro manual de feixe duplo para
medidas de absoro na regio UV/Visvel
Mtodos Espectromtricos
Espectrometria de Absoro Molecular na regio
do ultravioleta/visvel.

Espectrometria de Luminescncia Molecular.

Espectrometria de Absoro Atmica.

Espectrometria de Emisso Atmica.
Mtodos Espectromtricos
abordados nesta disciplina
Absoro molecular
no UV/Vis
Mais fcil que botnica....
Absoro Molecular no UV/Vis
Espectro de emisso da radiao solar
Regio
IV mdio
25 a 2,5m
Absoro Molecular no UV/Vis
Energia crescente
Sensibilidade do
olho humano
Comprimento de onda
Viso diurna
(Fotpica)
Viso
noturna
(Escotpica)
Absoro Molecular no UV/Vis
L U Z V I S V E L
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
Cores
primrias
Cores
secundrias
COLORIMETRIA: Um objeto tem a cor correspondente
aos comprimentos de onda que ele reflete.
Quando falta uma das cores
primrias, obtm-se uma cor
secundria. As 3 cores secundrias
misturadas do origem ao preto
As 3 luzes (cores)
primrias quando
misturadas do origem
luz branca.
Absoro Molecular no UV/Vis
COLORIMETRIA: Um objeto tem a cor correspondente
aos comprimentos de onda que ele reflete.
R G B
Sntese aditiva:
emisso.




Sntese subtrativa:
As cores se do
pela subtrao da
luz.
Absoro Molecular no UV/Vis
COLORIMETRIA: Um objeto tem a cor correspondente
aos comprimentos de onda que ele reflete.
Se um objeto
da cor ciano,
porque absorve o
vermelho e
reflete o azul e o
verde.
Cor observada
Cor absorvida
Absoro Molecular no UV/Vis
COLORIMETRIA: Um objeto tem a cor correspondente
aos comprimentos de onda que ele reflete.
Disco de Newton
A rotao proporciona a
mistura das cores, de
modo que enxergamos
todos os comprimentos
de onda de uma nica
vez, gerando a luz
branca.

Cor Observada (nm) Cor Complementar
Ultravioleta < 380 - - -
Violeta 380 420 Amarelo
Violeta azul 420 440 Amarelo laranja
Azul 440 470 Laranja
Azul verde 470 500 Laranja vermelho
Verde 500 520 Vermelho
Verde amarelo 520 550 Prpura
Amarelo 550 580 Violeta
Amarelo laranja 580 600 Violeta azul
Laranja 600 620 Azul
Laranja vermelho 620 640 Azul verde
Vermelho 640 680 Verde
Prpura 680 780 Amarelo - verde

COLORIMETRIA: Um objeto tem a cor correspondente
aos comprimentos de onda que ele reflete.
Absoro Molecular no UV/Vis
COLORIMETRIA

Um objeto tem a cor
correspondente aos
comprimentos de onda
que ele reflete, mas...
Absoro Molecular no UV/Vis
A colorimetria uma
cincia no exata, pois
alm de problemas
relacionados com a
acuidade visual de cada
um, ela depende do sexo
de quem v!!!

... Brincadeirinha....
Porque as nuvens so brancas?
Espalha todos os igualmente.
Porque durante o dia o cu azul e
porque ao entardecer ou amanhecer ele
alaranjado?
Espalhamento Rayleigh: menores se
espalham com maior facilidade.
Absoro Molecular no UV/Vis
Medidas de absoro da radiao eletromagntica
na regio do UV/Visvel encontram vasta aplicao
para identificao e determinao de milhares de
espcies inorgnicas e orgnicas.

Os mtodos de absoro molecular talvez sejam os
mais amplamente usados dentre todas as tcnicas
de anlise quantitativa em laboratrios qumicos e
clnicos em todo mundo.
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro da radiao eletromagntica de
comprimentos de onda na faixa de 160 a 780 nm.
Comprimentos de onda inferiores a 150 nm so
altamente energticos que levam ruptura de
ligaes qumicas.
Acima de 780 nm atinge-se o IV prximo, onde a
energia, j relativamente baixa, comea apenas a
promover a vibrao molecular e no mais transies
eletrnicas.
Devido ao grande nmero de estados vibracionais e
rotacionais, um espectro de absoro no UV/Vis
apresenta um formato alargado (banda).
Absoro Molecular no UV/Vis
Instrumentao:
1) Fonte de radiao: lmpadas de deutrio (UV) e tungstnio (vis)
ou de arco de xennio para toda a faixa de comprimentos de onda
UV/Vis.
2) Parte ptica: Instrumentos de feixe simples e duplo.
A diferena consiste basicamente em ter a possibilidade de
descontar a perda de potncia do feixe que passa pelo solvente
(branco) simultaneamente medida da amostra.
3) Compartimento para amostra (cubeta):
Deve ter paredes perfeitamente normais (90) direo do feixe.
Quartzo (transparente em toda a faixa UV/Vis)
Vidro (somente visvel, absorve muito a radiao UV).
Muito frequentemente utilizam-se tubos cilndricos por
questes de economia, mas deve-se ter o cuidado de repetir a
posio do tubo em relao ao feixe.
4) Detectores Transdutores
Dispositivos capazes de converter luz para o domnio eltrico: LDR,
fotodiodos, fotoclulas, tubos fotomultiplicadores, CCD, etc.
Absoro Molecular no UV/Vis
Fonte de luz
Regio UV: 160 a 380 nm
Lmpada de deutrio, xennio ou vapor de mercrio
Absoro Molecular no UV/Vis
Lmpada de
Vapor de Hg

Lmpada de
arco de Xennio

Lmpada
de D
2

Fonte de luz
Regio Visvel: 380 a 780 nm
Lmpada de filamento de tungstnio
LED coloridos
Lmpada de xennio (UV/Vis)

Absoro Molecular no UV/Vis
Fonte de luz
Luz negra

Absoro Molecular no UV/Vis
Como selecionar o comprimento de onda desejado?
Filtros pticos:
Filtros de absoro
Simplesmente absorve
alguns comprimentos de
onda.
Filtros de interferncia
Usando de reflexes e
interferncias destrutivas
e construtivas, seleciona
o comprimento de onda
desejado.
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
Filtros pticos de Absoro
Absoro Molecular no UV/Vis
A visualizao
desta imagem
atravs de
filtros pticos
exemplifica bem
o funcionamento
dos filtros em
barrar
determinados
comprimentos de
onda.
Absoro Molecular no UV/Vis
Filtros pticos de Interferncia
Filtro de
interferncia
Filtro de absoro
Absoro Molecular no UV/Vis
Como selecionar o comprimento de onda desejado?
Monocromadores:
Fenda de entrada
Lente colimadora
ou espelho
Prisma ou rede
de difrao ou
hologrfica
Elemento de
focalizao
Fenda de sada
Absoro Molecular no UV/Vis
Detector
Cubeta Fenda
Lentes
Lentes
Fenda
Rede de
difrao
Fonte
luminosa
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
Cubetas
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
O vidro absorve fortemente os comprimentos de onda da regio
do UV. Abaixo de 300 nm toda a radiao absorvida. O quartzo
comea absorver fortemente somente abaixo de 200 nm.
Como fazer a leitura do absoro de luz?
Transdutores de radiao:
Fotnicos monocanais
Clulas fotovolticas
Fototubos
Fotomultiplicadores
Fotodiodos
Fotnicos multicanais
Arranjo de fotodiodos (PDA)
Dispositivos de transferncia de cargas
CID e CCD (bidimensionais)
Absoro Molecular no UV/Vis
Arranjo linear de
fotodiodos
(pda - photodiode array)
Permite detectar
simultaneamente vrios
comprimentos de onda.
Tubo fotomultlicador
Muito sensvel. Consegue
detectar nveis muito
baixos de luminosidade.
Absoro Molecular no UV/Vis
Como ocorre a absoro da luz?
A absoro de radiao UV ou visvel por uma espcie
atmica ou molecular pode ser considerada como um
processo que ocorre em duas etapas:
M + hv M* excitao
M* M + calor (desprezvel) relaxao
So trs tipos de transies eletrnicas:
1) eltrons t, o e n (molculas e ons inorgnicos)
2) eltrons d e f (ons de metais de transio)
3) transferncia de carga (complexos metal-ligante)


Obs.: Se M* sofrer decomposio ou formar novas espcies,
o processo chamado de reao fotoqumica e, neste caso,
no ser possvel fazer a quantificao de M.
Absoro Molecular no UV/Vis
Nveis de energia eletrnica molecular.
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
Comprimentos de onda de absoro
caractersticos das transies eletrnicas.
Transio
Faixa de
comprimentos
de onda (nm)
Exemplos
o o* < 200 CC, CH
n o* 160 260 H
2
O, CH
3
OH, CH
3
Cl
t t* 200 500
C=C, C=O, C=N, CC
n t* 250 600 C=O, C=N, N=N, N=O
Absoro Molecular no UV/Vis
Cromforo Auxocromos
Espectro UV tpico
Os mximos de absoro devem-se presena de cromforos na
molcula. (Temos duas absores em 190 e 270 nm no espectro da
acetona e uma em 510 nm no espectro do complexo [Fe(fen)
3
]
2+
).
tomo ou grupo de tomos
que absorve radiao.
tomo que no absorve radiao.
Modifica alguma caracterstica da
absoro do cromforo.
Espectro Vis tpico
[Fe(fen)
3
]
2+
Como melhorar a absoro da luz?
Se o analito M no for uma espcie absorvente ou que
tenha uma baixa absoro, deve-se buscar reagentes reajam
seletiva e quantitativamente com M formando produtos que
absorvam no UV ou no visvel.
Uma srie de agentes complexantes so usados para
determinao de espcies inorgnicas.
Exemplos: SCN
-
para Fe
3+
; I
-
para Bi
3+
.

Natureza do solvente, pH, temperatura, concentrao de
eletrlitos e presena de substncias interferentes so as
variveis comuns que influenciam o espectro de absoro e,
evidentemente, seus efeitos precisam ser conhecidos.
Absoro Molecular no UV/Vis
Qual a relao entre a absoro e a concentrao?
Mtodos Espectromtricos
Potncia do
feixe incidente
Potncia do feixe
transmitido
Caminho ptico
Perdas por reflexo e espalhamento com uma soluo contida
em uma clula (cubeta) de vidro tpica.
Absoro Molecular no UV/Vis
As reflexes ocorrem
em qualquer interface
que separa os materiais.
Como no h como evitar
estas reflexes e
espalhamentos, torna-se
necessrio usar a mesma
cubeta (ou uma idntica)
nas medidas das vrias
solues dos padres e
da soluo amostra do
analito.
Absoro Molecular no UV/Vis
Para compensar os efeitos da perda de potncia do feixe
luminoso ao atravessar o solvente, a potncia do feixe
transmitido pela soluo do analito deve ser comparada com a
potncia do feixe transmitido em uma cubeta idntica
contendo apenas o solvente.
soluo
solvente
solvente
soluo
P
P
T A
P
P
P
P
T log log
0
= = ~ =
Se o material de fabricao da cubeta provocar uma
diminuio na potncia do feixe luminoso, essa diminuio
tambm ser compensada.
A lei de Beer-Lambert, tambm conhecida como lei de
Beer-Lambert-Bouguer ou simplesmente como lei de Beer
uma relao emprica que relaciona a absoro de luz com as
propriedades do material atravessado por esta.

A lei de Beer foi
descoberta
independentemente (e
de diferentes maneiras)
por Pierre Bouguer em
1729, Johann Heinrich
Lambert em 1760 e
August Beer em 1852.
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
1
0
0
1
0
log log
I
I
T A
I
I
P
P
P
P
T
solvente
soluo
= = = ~ =
A expresso final da lei
de Beer A = cbc, a qual
pode ser obtida pela
integrao de:
onde S a rea da seo
atravessada pela luz e P
x

a potencia ao longo do
caminho ptico.
S
dS
P
dP
x
x
=
0 2 4 6 8 10
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
T
r
a
n
s
m
i
t

n
c
i
a
Concentrao
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
Concentrao
abc A =
(g/L)
bc A c =
(mol/L)
LEI DE LAMBERT-BEER
Absoro Molecular no UV/Vis
Onde A a absorbncia, a a
absortividade e c a concentrao
em g/L
Onde A a absorbncia, c a
absortividade molar e c a
concentrao em mol/L.
k
k
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
Concentrao
bc A c =
LEI DE LAMBERT-BEER
Absoro Molecular no UV/Vis
cb a inclinao de A x C
e, portanto, responsvel
pela sensibilidade
analtica.
A absorbncia
aumenta conforme
aumenta qualquer um
dos trs: c b ou c
Absoro Molecular no UV/Vis
Aumento do
caminho ptico
Absoro Molecular no UV/Vis
Aumento da concentrao
Absoro Molecular no UV/Vis
350 400 450 500 550 600 650 700 750
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0


5 ppm
4 ppm
3 ppm
2 ppm
1 ppm
0,5 ppm
0,1 ppm
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
(nm)
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
Fe(SCN)
6
3-
A
460 nm
C
Fe
(mg/L)
Absoro Molecular no UV/Vis
Espectros de
absoro do complexo
[Fe(SCN)
6
]
3-
para
vrias concentraes.
Com os valores de
absorbncia no
comprimento de
onda de mxima
absoro (
max
)
constri-se a
curva analtica.
Aplicao da lei de Beer para misturas
A absorbncia uma propriedade aditiva. Assim, a
presena de vrias espcies absorventes na soluo
para o mesmo comprimento de onda resultar em uma
absorbncia maior que para solues individuais.
Contudo no poder haver interao entre as vrias
espcies.
A
T
= A
1
+ A
2
+ ... + A
n
= c
1
bc
1
+ c
2
bc
2
+ ... + c
n
bc
n


Limitaes da lei Beer
Poucas excees so encontradas para a generalizao
de que a absorbncia est relacionada linearmente com
o caminho ptico. Por outro lado, so encontrados
desvios de proporcionalidade com a concentrao
quando b constante.
Absoro Molecular no UV/Vis
Limitaes reais (fundamentais) da Lei de Beer:
Para solues com concentraes maiores que 0,01
mol/L, mesmo no sendo da espcie absorvedora, a
distncia mdia entre as espcies diminui a ponto de
alterar a capacidade das espcies em absorver a
radiao, ou seja, diminui o valor de c.
O ndice de refrao do meio tambm causam desvios.
Assim, se as variaes de concentrao causam
alteraes significativas no ndice de refrao da
soluo, os desvios da lei de Beer so observados.
Quando esse fator preponderante, uma correo pode
ser aplicada, acrescentando expresso da lei de Beer
o termo n/(n+2)
2
, onde n o ndice de refrao.
Absoro Molecular no UV/Vis
2
2) (n
bcn
A
+
=
Desvios Qumicos Aparentes (limitaes qumicas)
Desvios aparentes da lei de Beer surgem quando um
analito se dissocia, se associa ou reage com um solvente
para dar um produto que tenha um espectro de
absoro diferente do analito. Um exemplo disto a
mudana de cor de indicadores cido-base de acordo
com o equilbrio em funo do pH.
HIn H
+
+ In
-

cor 1 cor 2
pH [HIn] e vice-versa A ou A.
Alm disso, se ambas as espcies absorverem no
mesmo comprimento de onda, poder haver um
desvio positivo ou negativo em funo dos valores
de c
HIn
e c
In
.
Absoro Molecular no UV/Vis
Desvios Instrumentais com Radiao
Policromtica
A obedincia estrita lei de Beer observada com
radiao verdadeiramente monocromtica. Na prtica
os monocromadores produzem uma banda mais ou menos
simtrica de comprimentos de onda em torno daquele
desejado. O resultado um desvio negativo.
Absoro Molecular no UV/Vis
Desvios Instrumentais com Radiao
Policromtica
A deduo deste desvio dado a seguir:
Em cada , tem-se um c.

A= log (P
o
/ P) = cbc e A = log (P
o
/ P) = cbc

P
o
= P
o
+ P
o
e P = P + P

A
Total
= log[ (P
o
+ P
o
) / (P+ P )] < (A+ A) = log[(P
o
xP
o
)/(PxP)]

Se c= c, A
Total
= A + A e a lei de Beer
obedecida.
Absoro Molecular no UV/Vis
Um efeito similar ao da radiao
policromtica observado com
radiaes esprias.
Estas radiaes aparecem em
pequenas quantidades no
processo de monocromatizao
por efeitos de espalhamento em
vrias superfcies internas.
Essas radiaes diferem
grandemente em comprimentos
de onda da radiao principal.
Assim, a presena de radiaes
esprias confere igualmente um
desvio negativo lei de Beer.
Absoro Molecular no UV/Vis
Desvios Instrumentais com Radiao Espria
Rudos Instrumentais
Um estudo terico e experimental descreveu vrias fontes
de incerteza instrumentais, classificando-as em 3
categorias:
Caso I: espectrofotmetros de baixo custo equipados com
medidores digitais com resoluo limitada. A preciso independe
de T, s
T
= k
1

Caso II: espectrofotmetros de alta qualidade com detector de
ftons. O rudo associado a este tipo de detector (shot) surge da
transferncia de carga atravs de uma juno, como o movimento
de eltrons do ctodo ao nodo em uma clula fotomultiplicadora.
s
T
= k
2
(T
2
+ T)
1/2
Caso III: espectrofotmetros baratos, com rudo da fonte
(flicker), ou espectrofotmetros de alta qualidade onde o
posicionamento da cubeta gera uma incerteza, j que as cubetas
possuem algumas imperfeies que resultam em espalhamentos e
reflexes diferenciados a cada medida. s
T
= k
3
T
Absoro Molecular no UV/Vis
Absoro Molecular no UV/Vis
1
1
log
434 , 0
2
+ =
T T
k
c
s
c
T
k
c
s
c
log
434 , 0
3
=
T T
s
c
s
T c
log
434 , 0
=
Observa-se que o erro nas medies pode ser minimizado
efetuando-se leituras de absorbncia dentro de certas faixas
de valores para cada tipo de equipamento.
0,25 0,75
Aplicaes:
Como j mencionado, so trs tipos de transies
eletrnicas, de acordo com a espcie absorvente:
1) eltrons t, o e n (molculas orgnicas)
2) eltrons d e f (ons de metais de transio)
3) transferncia de carga (complexos)
Absoro Molecular no UV/Vis
E
n
e
r
g
i
a

o
t
n
t-
o-
E
n
e
r
g
i
a

d
xy
, d
xz
, d
yz

d
z
2
, d
x
2
-y
2
d
x
2
-y
2
d
xy

d
z
2
d
xz
, d
yz

Absoro Molecular no UV/Vis
Molculas
ons
Complexos
Os mtodos espectrofotomtricos apresentam
caractersticas importantes:
1) Ampla aplicao para sistemas orgnicos e
inorgnicos;
2) Limites de deteco tpicos de 10
-4
a 10
-5
mol/L
(podem ser melhorados para 10
-6
a 10
-7
mol/L);
3) Seletividade de moderada a alta;
4) Boa exatido (tipicamente as incertezas so da
ordem de 1 a 3%, podendo ser melhoradas a dcimos
percentuais com alguns cuidados especiais);
5) Facilidade e convenincia na aquisio de dados.

Absoro Molecular no UV/Vis
Anlise quantitativa:
A primeira etapa da anlise envolve o estabelecimento das
condies de trabalho.
Determinao do(s) mximo(s) de absoro
No mximo de absoro, alm da mxima sensibilidade
por unidade de concentrao, os efeitos de desvios da
lei de Beer so menores. Adicionalmente, o ajuste do
comprimento de onda mais reprodutvel, no
implicando em variaes significativas de c e, por
consequncia, da absorbncia.
No seguro pressupor uma concordncia com a lei de Beer
e usar apenas um padro para determinar a absortividade
molar. Assim recomendvel a construo das curvas:
Curva analtica, em casos mais simples ou
Adio de padro, quando a matriz interfere.
Absoro Molecular no UV/Vis
Exemplo:
Para determinar Fe
3+
em uma amostra, tomou-se cinco
alquotas de 2,00 mL de uma amostra e transferiu-se para
cinco bales volumtricos de 50,00 mL. Em cada balo foram
adicionados um excesso do complexante (SCN
-
) e alquotas
de 5,00, 10,00, 15,00 e 20,00 mL de uma soluo padro de
Fe
3+
, de concentrao 5,553 mg/L, completando-se o volume
com gua destilada. Determine a concentrao de Fe
3+
na
amostra.
Vp, mL A
0,00 0,2412
5,00 0,4322
10,00 0,6232
15,00 0,8142
20,00 1,0052
Absoro Molecular no UV/Vis
Um bom procedimento de adio de padro consiste
em adicionar quantidades do padro bem prximos da
quantidade do analito na alquota da amostra. Assim,
os efeitos da matriz sobre o analito da amostra
tambm sero sentidos pelo analito proveniente do
padro. Uma regra simples consiste em adicionar o
padro em quantidades x, x, 2x da quantidade
estimada do analito. Adicionalmente pode-se incluir
mais alguns pontos x, 1,5x e 3x.
Exemplo:
possvel fazer a determinao traando o grfico tanto em
volume quanto em concentrao do padro adicionado.
Vp, mL A
0,00 0,2412
5,00 0,4322
10,00 0,6232
15,00 0,8142
20,00 1,0052
C, mg/L A
0,000 0,2412
0,555 0,4322
1,111 0,6232
1,666 0,8142
2,221 1,0052
y = 0,0382x + 0,2412
R
2
= 1
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00
Volume de soluo-padro adicionado, mL
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
y = 0,344x + 0,2412
R
2
= 1
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0,000 0,500 1,000 1,500 2,000 2,500
Concentrao de padro adicionado, mg/L
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
V
x
= 0,2412/0,0382
V
x
= 6,31 mL
C
x
= 6,31x5,553/2
C
x
= 17,53 mg/L
Absoro Molecular no UV/Vis
C
d
= 0,2412/0,344
C
d
= 0,7012 mg/L
C
x
= 0,7012x50/2
C
x
= 17,53 mg/L
Exemplo:
Analisando o valor encontrado, pode-se observar que o
procedimento de adio de padro atendeu a recomendao.
Admitindo-se que a estimativa da concentrao do analito
seria 1 mg/L, as adies foram x, x, 1,5x e 2x.
C, mg/L A
0,000 0,2412
0,555 0,4322
1,111 0,6232
1,666 0,8142
2,221 1,0052
Absoro Molecular no UV/Vis
C
d
= 0,2412/0,344
C
d
= 0,7012 mg/L
x
x
1,5x
2x
Titulao fotomtrica
Igualmente aos demais tipos de titulao, o objetivo
detectar o PE com a maior exatido possvel. Deve-se
considerar quanto cada um, titulante, titulado e produto de
reao, contribui com a absorbncia no comprimento de onda
selecionado.
1) Titulado e produto no absorvem, mas o titulante sim;
2) Titulado e titulante no absorvem, mas produto sim;
3) Titulado absorve, mas titulante e produto no;
4) Titulado e titulante absorvem, mas produto no;
5) Titulado no absorve, mas titulante e produto sim,
sendo a absortividade do titulante maior;
6) Titulado no absorve, mas titulante e produto sim,
sendo a absortividade do produto maior;
Alternativamente um indicador absorvente pode provocar a
variao da absorbncia necessria para a localizao do PE.
Absoro Molecular no UV/Vis
Titulao fotomtrica
Absoro Molecular no UV/Vis
Titulao fotomtrica
Similarmente titulao condutimtrica, torna-se
necessrio corrigir a absorbncia em funo do aumento de
volume (efeito de diluio).
A
c
= A (V
i
+ V
a
) / V
i
As titulaes fotomtricas fornecem resultados mais
exatos que uma anlise fotomtrica direta, uma vez que
utilizam vrias medidas para a deteco do ponto final.
Adicionalmente, a presena de espcies absorvente podem
no interferir, uma vez que apenas a variao na absorbncia
est sendo medida.
O ponto final fotomtrico determinado por medidas de
absorbncia bem distantes da regio do ponto de
equivalncia. Assim, as reaes no precisam ter constantes
de equilbrio to favorveis, como no caso de titulaes
potenciomtricas ou com indicadores.
Absoro Molecular no UV/Vis
Titulao fotomtrica
O ponto final fotomtrico tem sido aplicado a todos os
tipos de reaes.

cido-base uso de indicadores
Oxirreduo
Complexao indicadores ou reagentes coloridos
Precipitao
As mesmas titulaes clssicas podem ser feitas
fotometricamente, com a vantagem da deteco do ponto
final no depender da acuidade visual do analista.
Com isso aqueles indicadores que mudam sutilmente de
cor podem ser utilizados.
Absoro Molecular no UV/Vis
Titulao fotomtrica
Um exemplo titulao simultnea de Bi
3+
e Cu
2+
com
EDTA. Em 745 nm nenhum dos ctions, nem o EDTA
absorvem e nem o completo Bi-EDTA que mais estvel.
Somente o complexo Cu-EDTA absorve neste .
Absoro Molecular no UV/Vis
-0,01
0,01
0,03
0,05
0,07
0,09
0,11
0,13
0,15
0 1 2 3 4 5 6
Volume de EDTA 0,1 mol/L, mL
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
Ponto final Cu
Ponto final Bi
Enquanto no houver formao
do complexo Cu-EDTA, a
absorbncia no se altera.
Quando no houver
mais produo do
complexo Cu-EDTA, a
absorbncia torna-se
constante.
Para refletir e responder:
A absoro molecular na regio do visvel poderia ser
utilizada para analisar ons Fe
2+
(a soluo Fe
2+
, mesmo
concentrada, apresenta uma colorao amarelo-esverdeada
muito clara)?

Caso sua resposta seja positiva, encontre os valores de absortividade
molar para soluo aquosa de Fe
2+
para corroborar sua afirmativa. Caso
sua resposta seja negativa, indique que tipo de procedimento seria
necessrio para analisar Fe
2+
por absoro molecular na regio do visvel.
Absoro Molecular no UV/Vis
Exerccio:
Uma soluo padro foi adequadamente diluda para
fornecer as concentraes de ferro mostradas na tabela a
seguir. O complexo Fe(II)/1,10-fenantrolina foi formado em
alquotas de 25,00 mL dessas solues, que foram em seguida
diludas a 50,00 mL. As absorbncias, medidas em 510 nm em
clulas de 1,00 cm, esto mostradas na tabela a seguir.
As leituras de absorbncias de solues-amostras,
preparadas a partir de 10,00 mL de amostras originais
diludas em bales de 50,00 mL, onde foi adicionado o agente
complexante, foram: 0,143, 0,068, 0,675 e 1,512.
Determine as concentraes de Fe
2+
nas amostras originais
e discuta se as absorbncias so adequadas para a faixa de
trabalho.
Absoro Molecular no UV/Vis
Exerccio:
Absoro Molecular no UV/Vis
[Fe
2+
], ppm
4,00
10,00
16,00
24,00
32,00
40,00
[[Fe(fen)
3
]
2+
],
ppm
Absorbncia
2,00 0,164
5,00 0,425
8,00 0,628
12,00 0,951
16,00 1,260
20,00 1,582
Preparar a tabela
de C x A
Concentraes das
solues-padro
Concentraes dos
complexos formados e
leituras de absorbncia
Exerccio:
Traar o grfico da concentrao do complexo versus
absorbncia, verificar FLT e determinar a equao da reta.
Absoro Molecular no UV/Vis
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
1,4
1,6
Y = A + B * X
Parameter Value Error
--------------------------------
A 0,01478 0,00997
B 0,07812 8,175E-4
--------------------------------
R SD N P
--------------------------------
0,99978 0,01244 6 <0.0001
--------------------------------
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
[[Fe(fen)
3
]
2+
], ppb

+ =
2 2
2
) (
) ( 1
x x B
y y
N B
s
s
i
r
x
5 , 231 07812 , 0
) 835 , 0 (
6
1
07812 , 0
01244 , 0
2
2
x

+ =
y
s
x
( )
5 , 231 ) (
2
2 2
= =


N
x
x x x
i
i
i
835 , 0 = =

N
y
y
i
Exerccio:
A partir do grfico construdo e dos valores obtidos pela
regresso linear, pode-se determinar as concentraes de
Fe
2+
nas amostras de uma maneira rotineira, bastando que as
amostras no apresentem interferncias de matriz.
A equao obtida da regresso :
A = 0,07812 [Fe(fen)
3
] + 0,01478
As leituras de 0,143 e 0,068 esto abaixo do primeiro ponto da
curva e portanto no esto adequadas para curva traada. Observe:
0,068 [Fe(fen)
3
] = 0,681 ppm s = 0,122 ppm 17,9%
0,143 [Fe(fen)
3
] = 1,64 ppm s = 0,11 ppm 6,7%
Os outros dois valores esto adequados e a concentrao para cada
um deles :
0,675 [Fe(fen)
3
] = 8,45 ppm s = 0,068 ppm 0,8%
Diluio 5x [Fe
2+
] = 42,25 0,34 ppm
1,512 [Fe(fen)
3
] = 19,17 ppm s = 0,11 ppm 0,6%
Diluio 5x [Fe
2+
] = 95,85 0,55 ppm
Absoro Molecular no UV/Vis
Fim da Absoro Molecular
no UV/Visvel...
Mas os Mtodos
Espectromtricos
continuam...