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ABORDAGEM FITOQUMICA DO EXTRATO FOLIAR DA GUABIRABA, Campomanesia lineatifolia

Rafael da C. ALMEIDA (1); Diego de M.V.da COSTA (2); George L. da Silva OLIVEIRA (3) Sabrina M. V. MENDES (4);
(1) Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Piau IFPI, Praa da Liberdade n 1597, Centro, CEP: 64000-040, telefone (086) 3215-5224, Fax (086) 3215-5206, e-mail: rafa_scoutt@hotmail.com (2) Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Piau IFPI, e-mail: dieggo_vaz@hotmail.com (3) Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Piau IFPI, e-mail: georgenota10@hotmail.com (4) Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Piau IFPI, e-mail: sabrinamendes502@hotmail.com

RESUMO
A espcie C. lineatifolia, popularmente conhecida por gabiroba ou guabiroba, pertence famlia Myrtaceae Juss, representada por aproximadamente 140 gneros, os quais renem mais de 3.000 espcies que se distribuem nas regies tropicais e subtropicais. Vrias propriedades teraputicas tm sido atribudas espcie de Campomanesia, tais como: antiinflamatria, anti-reumtica, entre outras. O presente trabalho teve por objetivo realizar uma abordagem fitoqumica das classes de substncias qumicas denominadas metabolitos secundrio a partir de extratos vegetais preparados da folha da Campomanesia lineatifolia. Extratos etanlicos (EtOH) das folhas da planta em estudo foram preparados para identificao fitoqumica utilizando tcnicas clssicas de identificao de metablitos, sendo uma pesquisa experimental, realizada por testes fitoqumicos. A parte dos vegetais em anlise foi coletada no Parque Ambiental do Mocambinho, na cidade de Teresina-PI. As folhas da Campomanesia lineatifolia foram trituradas e modas em moinho de facas e extradas quatro vezes com etanol 99% por um perodo de aproximadamente 16 dias. Foram realizados testes de identificao fitoqumicos com os extratos etanlicos(EtOH) da folha destes vegetais e foram identificados nestes extratos vrias classes de metablitos secundrios, dentre eles verificou-se a presena de: cumarinas, taninos, saponinas, flavonides e outros metabolitos secundrios. Palavras-chave: Campomanesia lineatifolia, Guabiroba, fitoqumica e metabolitos secundrio.

INTRODUO

No Brasil existem muitas espcies e variedades de frutos que levam o mesmo nome popular, gabiroba ou guabiroba, de origem guarani, que significa rvore de casca amarga, conforme citao feita por Sanchotene (1985). A espcie Campomanesia lineatifolia, popularmente conhecida por gabiroba ou guabiroba, pertence famlia Myrtaceae Juss, representada por aproximadamente 140 gneros, os quais renem mais de 3.000 espcies que se distribuem nas regies tropicais e subtropicais. Segundo Cronquist (1981) dividida em duas subfamlias: Leptospermoideae e Myrtoideae, que representam os dois centros de disperso geogrfica da famlia. A espcie estudada est compreendida na subfamlia Myrtoideae. As espcies da subfamlia Myrtoideae possuem folhas opostas, frutos carnosos e baciformes, representados em cerca de 70 gneros, incluindo entre outros, Myrtus, Psidium, Pimenta, Eugenia, Pseudocaryophyllus, Campomanesia, Syzygium, distribuindo-se, principalmente, pelas regies tropicais e subtropicais americanas, com pouqussimos representantes em zonas temperadas (BARROSO, 1991; TYLER APUD AURICHIO & BACCHI, 2003). O gnero Campomanesia, representado por rvores e arbustos, pode ser encontrado do Norte da Argentina at Trindade, e das costas brasileiras at os Andes ou Peru, Equador e Colmbia (LANDRUM, 1986). So plantas pouco exigentes quanto ao tipo de solo. Algumas delas crescem naturalmente em solos pobres em nutrientes, como o caso de C. lineatifolia. A partir da pesquisa realizada com a espcie percebeu-se que so poucos ainda os estudos na medicina popular feito em relao mesma, o que despertou o interesse no desenvolvimento da pesquisa. A cultura popular voltada ao uso de plantas medicinais desperta, indiretamente, o interesse de pesquisadores de diferentes reas do conhecimento. Observaes populares sobre o uso e a eficincia de plantas medicinais contribuem de forma significativa para a realizao de estudos cientficos. A casca e folhas, preparadas por infuso da espcie, so utilizadas na medicina popular contra diarria e problemas do trato urinrio. Dessa maneira, o presente estudo teve como objetivo realizar uma abordagem fitoqumica dos extratos etanlicos das partes foliares das espcies em estudo, uma vez que elas so usadas na medicina popular. 2 FUNDAMENTAO TERICA

Desde os tempos antigos as plantas vm sendo utilizadas nas sociedades humanas com propsitos teraputicos, sendo que suas propriedades txicas ou curativas foram descobertas pelo homem principalmente enquanto este buscava por alimento. De fato, o conhecimento etnobotnicofarmacolgico acumulado ao longo de geraes tem servido como base para o desenvolvimento de frmacos de grande importncia. Uma das caractersticas dos seres vivos a presena de atividade metablica. O metabolismo nada mais do que o conjunto de reaes qumicas que ocorrem no interior das clulas. No caso das clulas vegetais, o metabolismo costuma ser dividido em primrio e secundrio. Embora o metabolismo secundrio nem sempre seja necessrio para que uma planta complete seu ciclo de vida, ele desempenha um papel importante na interao das plantas com o meio ambiente. Um dos principais componentes do meio externo cuja interao mediada por compostos do metabolismo secundrio so os fatores biticos. Desse modo, produtos secundrios possuem um papel contra a herbivoria, ataque de patgenos, competio entre plantas e atrao de organismos benficos como polinizadores, dispersores de semente e microorganismos simbiontes. Contudo, produtos secundrios tambm possuem ao protetora em relao a estresses abiticos, como aqueles associados com mudanas de temperatura, contedo de gua, nveis de luz, exposio a UV e deficincia de nutrientes minerais (PERES, 2004). Todas as plantas produzem compostos qumicos derivados de seu metabolismo primrio a fotossntese aos quais damos o nome de metablitos secundrios (MONTANARI; BOLZANI, 2001). Nem todos esses metablitos secundrios tm funo totalmente esclarecida no metabolismo da planta (JULKUNEN-TIITO, 1985), embora acredite-se que a maioria deles tenha surgido como auxiliar no mecanismo de defesa contra o herbivorismo (Id, 2001). Em geral, so esses os compostos de interesse farmacutico presentes nos vegetais. Sabe-se que a maioria dos frmacos de origem vegetal utilizados atualmente foi pesquisada e posteriormente levada ao mercado baseado em informaes da chamada medicina tradicional ou popular, demonstrando

assim que as substncias de origem vegetal tm papel essencial na obteno de medicamentos e que partindo do conhecimento popular, bons resultados podem ser obtidos (COLOMBO, 2008). Existem no mundo cerca de 250 mil espcies botnicas conhecidas, das quais apenas cerca de 5% foram estudadas quimicamente, e uma porcentagem ainda menor estudada sob o ponto de vista farmacolgico. importante lembrar que as plantas tm sido muito importantes, notadamente nos ltimos anos, para a obteno de diversos frmacos (CECHINEL FILHO; YUNES, 1998). As espcimes do gnero Campomanesia so subarbustos a rvores, com flores pentmeras, solitrias, axilares ou mesmo sobre ramos jovens, surgindo junto com as folhas novas. Suas bractolas so decduas na antese; o clice com lobos individualizados e persistentes nos frutos; com ptalas presentes; ovrio com 4-10 lculos; numerosos vulos por lculos dispostos em duas fileiras com placentao central. Os frutos so plurisseriados e embries com testa glandulosa (SOBRAL, 2003). Alm do consumo in natura, no p, os frutos de certas espcies como a Campomanesia xanthocarpa podem ser aproveitados na forma de sucos, doces e sorvetes, bem como servir de matria-prima para a fabricao de licores (LORENZI, 1992). J as suas cascas e folhas, preparadas por infuso, so utilizadas na medicina popular contra diarria, problemas do trato urinrio e leucorria (CARRARA, 1997; MARKMAN, 2000). Confirmando esse potencial farmacolgico dos leos essenciais das folhas e dos frutos do gnero Campomanesia, Cruz et al. (2000) estudaram a atividade antibacteriana do leo extrado de uma espcie nativa, conhecida no Piau com o nome vulgar de guabiraba, obtendo o rendimento de 0,16% do leo nas folhas, e 0,02% nos frutos. 3 METODOLOGIA

As folhas utilizadas na caracterizao fitoquimica da Campomanesia lineatifolia foram coletadas no Parque Ambiental do Mocambinho, no municpio de Teresina-PI, no perodo de junho a agosto de 2009. As coletas foram realizadas atravs de caminhadas aleatrias em toda a rea de estudo. Com o auxlio de tesoura de poda foram coletados ramos frteis (floridos e/ou frutificados), com aproximadamente 45 cm de comprimento, sendo de 5 a 10 amostras de cada indivduo, para as espcies mais altas, utilizou-se o podo. Ainda no campo foram anotados, em caderneta, dados sobre o ambiente (solo, altitude, coordenadas, etc.), alm de informaes da espcie (cor, presena de escama peltada, etc.), que podem ser utilizados na identificao. Todo material coletado foi acondicionado em sacos plsticos, e posteriormente foram prensados, utilizando jornais e papeles e conduzidos para o Laboratrio de Biologia do Instituto Federal do Piau - IFPI, onde foram colocadas para secar para serem desidratados. Depois deste procedimento, os exemplares coletados foram identificados, ao nvel de famlia e gnero e espcie, atravs de consulta s chaves de identificao, descries existentes na literatura disponvel e comparao com exemplares identificados por especialistas. Logo aps as folhas de C. lineatifolia foram trituradas e modas em moinho de facas e extradas quatro vezes com etanol 99% por um perodo de aproximadamente 16 dias. O material dissolvido em etanol foi filtrado e concentrado parcialmente em evaporador rotatrio sob presso reduzida e determinado o peso seco. A frao etanlica obtida foi concentrada e caracterizada fitoquimicamente por testes qumicos especficos para diversos metablitos secundrios. Foram realizados testes de identificao de alcalides, cumarinas, saponinas, taninos e flavonides para folha das plantas em anlise. 3.1 Teste de identicao fitoquimica Alcalides:

Pesou 10mg do extrato etanlico da folha de Campomanesia lineatifolia, diluiu em 2mL de metanol, adicionando 2ml de soluo de HCl (cido clordrico) e esquentou essa mistura por 10 min. Esfriou se, filtrou-se , dividiu-se o filtrado em trs de tubo de ensaios e colocaram algumas gotas do reativo de reconhecimento Dragendorff ou gotas do Reativo de Mayer nos tubos com os respectivos extratos. Se houver a formao de precipitado no fundo do tubo de ensaio, ento a planta tem a presena de alcalides.

Taninos:

Pesou 10mg do extrato etanlico da folha de Campomanesia lineatifolia, diluiu em 2mL de metanol. Depois adicionou mais 5mL de gua destilada. Filtrou e adicionou 5 gotas de soluo de cloreto frrico a 10%. Aps algumas horas formao de colorao azul que indica possvel presena de taninos hidrolisveis, e colorao verde de taninos condensados (BARBOSA et al., 2004). Flavonides:

Pesou 10mg do extrato etanlico da folha de Campomanesia lineatifolia, diluiu-se em 2ml de soluo metanlica num tubo de ensaio. Adicionou quatro fragmentos de fitas de magnsio na soluo metanolica e posteriormente adicionar quatro gotas de cido clordrico concentrado (BARBOSA et al., 2004). A presena de flavonides foi determinada pela ocorrncia de reao mudando a cor da substncia para vermelho ou castanha. Saponinas

Pesou-se 10mg do extrato etanlico da folha de Campomanesia lineatifolia e adicionou-se 2 ml de etanlico para dissolver, adicionou-se 5ml de gua fervente. Esfriou-se, agitou-se vigorosamente e deixou-se em repouso por 20 minutos, se houver formao de espuma indicativo da presena de saponinas(BARBOSA et al., 2004). Cumarinas

Pesou-se 10 mg do extrato etanlico da folha de Campomanesia lineatifolia e dissolveu-se em 2ml de metanol em tubo de ensaio,tampou-se com papel-filtro molhado com uma soluo de NaOH 10% e levou-se a banho-maria a 100C por 5 minutos, retirou-se o papel-filtro e examinou-se sob a luz UV o que permitir observar a presena ou no da substncia(BARBOSA et al., 2004). 4 ANLISE E INTERPRETAO DOS DADOS

Os resultados de identificao de fitoqumica do extrato da folha da guabiraba (Campomanesia lineatifolia) podem ser observado na Tabela 1. Nesse caso, o objetivo foi verificar a presena ou no de alcalides, cumarinas flavonoides, saponinas e taninos. Tabela 1: Identificao de Metablitos Secundrios Metablito secundrio

Presente

Ausente X

Alcalides Taninos Flavonides Saponinas Cumarinas Fonte: Pesquisa direta X X X X

De acordo com a anlise experimental, observou-se a presena em grande quantidade dos metabolitos taninos e cumarinas, sendo que os taninos so componentes de grande ao medicamentosa e, possivelmente, podem ser uma das classes mais significativas na sua produo (FALKENBERG et al., 2001), e as cumarinas so largamente partilhadas nos vegetais, as quais representam uma classe de lactonas que se rompem sob tratamento bsico e ciclizam-se novamente quando submetidas a tratamento cido. Algumas apresentam efeito antipirtico e inibidor da carcinognese, enquanto outras renem um amplo espectro de aes farmacolgicas (STASI, 1995). Para os metabolitos flavonides e saponinas, os resultados de identificao deram positivo, no qual os flavonides tem aes sobre a reduo do cido dehidroascorbico, aumentando o aproveitamento da

vitamina C, com resultante efeito scavenger, ao captar radicais livres originados na inflamao; atividade antiinflamatria por inibio da peroxidao do cido araquidnico; ao de reforo e melhoria da qualidade de fibras de colgeno; ao antihialuronidase e antielastase, diminuindo a permeabilidade vascular; inibio indireta da agregao e adesividade plaquetria; assim como sua propriedade vitamnica P (fator P), reconhecida por muitos clnicos como de efeitos benficos, principalmente, em alteraes circulatrias (ZUANAZZI & MONTANHA, 2001; FRACARO et al., 2004), e as saponinas constituem um grupo particular de heterosdios, cuja denominao devido a formarem espuma. Todas as saponinas so fortemente espumosas e constituem excelentes emulsionantes. Tm outra propriedade caracterstica: proporcionam a hemlise dos glbulos vermelhos (eritrcitos), isto , libertam a sua hemoglobina, o que explica o efeito txico de algumas delas, tornando-as imprprias para consumo (MINAMI & BARRACA, 1999). O nico metabolito secundrio que deu negativo foi para os alcalides, compostos nitrogenados que na sua maioria so empregados como medicamentos, venenos e poes mgicas desde os primrdios da civilizao. 5 CONCLUSO

Os metabolitos secundrios encontrados no material vegetal da guabiraba (Campomanesia lineatifolia) foram taninos, flavonides, cumarinas e saponinas. Observou-se um resultado negativo que foi para o metabolito secundrio alcalides. Enfatiza-se que a planta em estudado, carece de pesquisas para que seu uso seja sugerido para algum fim teraputico, pois a mesma ainda pouco conhecida na parte farmacolgica. Entretanto, observa-se a partir dos dados obtidos que a planta pode apresentar efeito antipirtico e servir de inibidor da carcinognese. REFERNCIAS BARBOSA, Wagner L. R. QUIGNARD, Etienne. TAVARES, Esabel C. C. PINTO, Lucianna do N. OLIVEIRA, Francielda Q. OLIVEIRA, Rodson M. de. Manual para Anlise Fitoqumica e Cromatogrfica de Extratos Vegetais. Revista Cientifica da UFPA. Belm-PA. Vol.4 .2004. BARROSO, G. M. Myrtaceae. In: Sistemtica de angiosperma do Brasil. Viosa: Universidade Federal de Viosa: Imprensa Universitria, 1991. v. 2, p. 114-126. CARRARA, M. dos R. Espcies de Campomanesia Ruiz & Pavon (Myrtinae, Myrtaceae) ocorrentes no Estado do Rio de Janeiro. 1997. 222 f. Dissertao (Mestrado em Cincias Biolgicas Botnica) Universidade Federal do Rio de Janeiro, Museu Nacional, Rio de Janeiro. CECHINEL FILHO, V.; YUNES, R.A. Estratgias para a obteno de compostos farmacologicamente ativos a partir de plantas medicinais. Conceitos sobre modificao estrutural para a otimizao da atividade. Qum. Nova, So Paulo, v. 21, n. 1, jan./fev. 1998. COLOMBO. Utilizando adequadamente as plantas medicinais. Colombo: Herbarium, 2008. 63p. CRONQUIST, A. An integrated system of classification of flowering plants. New York:Columbia University Press, 1981. 1262 p. CRUZ, G. F. da et al. Atividade antibacteriana dos leos essenciais das folhas e dos frutos de Campomanesia sp (Myrtaceae). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE QUMICA, 40., 2000, Recife. Livro de Resumos... Recife: Associao Brasileira de Qumica, 2000. p. 132-133. FALKENBERG, M. B; SANTOS, R. I; SIMES, C. M. Introduo Anlise Fitoquimica. In: SIMES, C. et al. Farmacognosia: Da Planta ao Medicamento. 3 ed. Porto Alegre/Florianpolis: Ed. Da UFRGS/ Ed. Da UFSC, 2001. p. 165 FRACARO, S.N.; DECONTO, I.; NAKASHIMA, T. Potencial de toxicidade reprodutiva do extrato de Tillandsia usneoides Linnaeus, 1762 (barba-de-pau) em coelhas gestantes. Tese (Mestrado em Clinicias Veterinarias), Universidade Federal do Paran. Curitiba, 2004, 60 p. JULKUNEN-TIITTO, r. Phenolic constituints in the leafs of Northern willows: methods for the analysis of certain phenolics. J. Agric. Food Chem. v. 33, p. 213-217, 1985

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