AGAR HIERRO KLIGLER

Equipo 7. Martnez de Len Vctor Romero Monroy Luis Angel

Fundamento
Es un medio de cultivo utilizado para la diferenciacin de

enterobacterias en base a la fermentacin de lactosa y glucosa, adems de la formacin de cido sulfhdrico.

El medio se solidifica en forma inclinada permitiendo

tener dos cmaras de crecimiento: una aerbica, el pico de flauta y la otra anaerbica, el fondo del tubo.
La fermentacin de azcares acidifica el medio lo cual se

observa con el vire del rojo de fenol a amarillo que es el indicador cido-base incorporado. En caso de no haber fermentacin, el medio vira a rojo.

Fermentacin de carbohidratos
La fermentacin de glucosa cambia el medio a amarillo,

pero debido a su baja concentracin (0.1%) esto slo se observa en el fondo del tubo, mientras que la superficie cambia a rojo.
Una vez consumida la glucosa, el microorganismo

comienza a metabolizar aminocidos liberando amonaco, lo cual alcaliniza el medio, esto ocurre en la superficie.
La fermentacin de lactosa cambia el medio a amarillo y

dado que su concentracin es mayor (1%), la formacin de cido es suficiente para mantener el color amarillo tanto en el fondo como en la superficie del tubo.

Tipos de reacciones producidas por bacterias que crecen en agar hierro de kligler: A. Sin fermentacin de carbohidratos. B. Fermentacin de glucosa C. Fermentacin de lactosa

Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagngstico microbiolgico. 6 edicin. Buenos Aires; Mdica Panamricana. Pgina 209

Formacin de gas
La formacin de gas se observa por la presencia de

burbujas, fracturas o desplazamiento del agar.

La produccin de sulfuro de hidrgeno se debe a la

utilizacin del tiosulfato de sodio.

El sulfuro de hidrgeno reacciona con el citrato frrico de

amonio formando sulfuro de hierro que se observan como un precipitado negro.

Modo de empleo
La siembra se realiza por picadura en el agar y estra en

la superficie inclinada.

Se incuban de 18 a 24 horas a 37 C en condiciones

aerobias

Composicin
Mezcla de Peptonas.20.0 g Cloruro de Sodio.5.0 g

Lactosa...10.0 g
Glucosa....1.0 g Tiosulfato de Sodio 0.5 g

Citrato frrico de amonio.......0.5 g

Rojo de Fenol..0.025 g Agar Bacteriolgico...15.0 g

pH 7.4 0.2

Resultados
Superficie roja (alcalina), fondo rojo (alcalino):

El microorganismo no fermenta ningn carbohidrato; glucosa (-), lactosa (-)

Superficie roja (alcalina), fondo amarillo (cido):

El microorganismo solamente fermenta glucosa; glucosa (+), lactosa (-)

Superficie amarilla (cida), fondo amarillo (cido)

El microorganismo fermenta glucosa y lactosa; Glucosa (+), lactosa (+)

 La presencia de burbujas o ruptura del agar indica que el

microorganismo produce gas; gas (+)

La aparicin de un precipitado negro indica que el

microorganismo produce sulfuro de hidrgeno; H2 S (+)

Resultados con cepas control

Manual Bsico de Microbiologa cultimed. Panreac Qumica S.A. Espaa 2002 pgina 110

http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/ 2010/05/agar-hierro-kliger.html

Consideraciones
Los tubos deben interpretarse en un periodo de 18-24

horas de incubacin. Hacerlo antes provocara tener un falso positivo en la fermentacin de glucosa y confundirla con lactosa por ejemplo.
Observarlo despus tambin arrojara falsos resultados

para la fermentacin de lactosa, en este caso podra asumirse que no fermenta carbohidratos.
La formacin de H2 S se realiza en condiciones cidas, por

lo tanto si hay un oscurecimiento por la presencia de FeS de forma que la acidez del fondo queda enmascarada, debe registrarse como cido, es decir, hubo fermentacin.

Referencias
Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagngstico

microbiolgico. 6 edicin. Buenos Aires; Mdica Panamricana

MacFaddin. 2003. Pruebas bioqumicas para la

identifiacin de bacterias de importancia clnica. 3 edicin. Buenos Aires; Mdica Panamricana

Manual Bsico de Microbiologa Cultimed. Panreac

Qumica S.A. Espaa 2002

http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/kliglerhierr

oagar.htm

 http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/2010/05/agar-

hierro-kliger.html
http://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007

458%2807%29%280207%29_ES.pdf
http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.htm http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_hierro_kliger.pdf