Introduccin a la Microbiologa

PRIMERA UNIDAD
MAESTRA: I.B.Q NOEMY DEL PILAR CASTILLO BALAN ALUMNO: JOSE MANUEL MORENO MONTERO 3CA INGENIERIA EN AGRONOMIA

29 DE AGOSTO DE 2013

INTRIODUCCIN.
La Microbiologa se puede definir, como la ciencia que estudia los seres vivos muy pequeos, con escalas de tamao del orden de micras por lo cual se encuentran por debajo del poder resolutivo del ojo humano. Por esto, la microbiologa utiliza una metodologa especializada para estudiar a los microorganismos. El origen tardo de esta disciplina con relacin a otras ciencias biolgicas, y el reconocimiento de las mltiples actividades desplegadas por los microorganismos, se atribuye a la carencia, durante mucho tiempo, de los instrumentos y tcnicas pertinentes. Con la invencin del microscopio en el siglo XVII comienza el despegue de una nueva rama del conocimiento. Durante los siguientes 150 aos su progreso se limit casi simplemente a la descripcin de tipos morfolgicos microbianos, y a los primeros intentos taxonmicos, que buscaron su encuadramiento en el marco de los sistemas naturales de los Reinos Animal y Vegetal. El reconocimiento de la Microbiologa como ciencia est ligado a una serie de controversias asociadas a preceptos filosficos y religiosos del siglo XVII, que se continuaron hasta finales del siglo XIX. La resolucin de estas polmicas dependi del desarrollo de una serie de estrategias experimentales confiables (esterilizacin, cultivos puros, perfeccionamiento de las tcnicas microscpicas, etc.), que a su vez dieron origen a una serie de conocimientos que constituyeron a la ciencia microbiolgica. El reconocimiento del origen microbiano de las fermentaciones, el abandono de la idea de la generacin espontnea, y el triunfo de la teora germinal de la enfermedad, representan las conquistas de la Microbiologa como ciencia joven en el cambio de siglo. Tras la Edad de Oro de la Bacteriologa, con figuras como Pasteur y Koch, la Microbiologa fue al principio una disciplina descriptiva y aplicada, estrechamente ligada a la Medicina, y con un desarrollo paralelo al de la Qumica, que le aport avances metodolgicos fundamentales. Sin embargo, una corriente, dedicada a los estudios bsicos en ciertas bacterias del suelo con capacidades metablicas especiales, incluyendo el descubrimiento de las que

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afectan a la nutricin de las plantas, logr poner de manifiesto la ubicuidad ecolgica y la diversidad fisiolgica de los microorganismos. De esta forma, se estableci un enlace entre la Microbiologa y otras ciencias biolgicas, que lleg a su momento decisivo cuando se comprob la unidad qumica de todo el mundo vivo, y se demostr, con material y tcnicas microbiolgicas que la molcula de la herencia era el ADN. Con ello se present un cercano y productivo intercambio entre la Microbiologa, la Gentica y la Bioqumica, que se manifiesta en el nacimiento de la Biologa Molecular, que constituye la base fundamental para el sensacional avance de la Biologa desde mediados del siglo XX.

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CONTENIDO
INTRIODUCCIN. ................................................................................ 0 1.1 ANTECEDENTES. ............................................................................ 3 1.1 DESARROLLO HISTRICO. ............................................................. 4 1.1.2 CONCEPTOS BSICOS. .............................................................. 16 1.1.3 RELACIN CON OTRAS CIENCIAS. ............................................. 18 BIBLIOGRAFIA. .................................................................................. 21

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1.1 ANTECEDENTES.
En un principio el objetivo inicial de la Microbiologa consista en la bsqueda de agentes infectivos, en el entendimiento y aprovechamiento de los mecanismos de defensa del hospedador. En el intento por cumplir estos objetivos, se crearon ciencias de apoyo como la Virologa y la Inmunologa, que posteriormente lograron su autonoma. Finalmente, la lnea de aplicacin de la Microbiologa, fue mejorando con los continuos aportes de la investigacin bsica, y hoy muestra una impresionante cantidad de servicios, as como una prometedora perspectiva de expansin a campos como el control de enfermedades infecciosas (higiene, vacunacin, quimioterapia, antibioterapia) y la optimizacin econmica de los procesos en los que se hallan implicados los microorganismos (biotecnologas).

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1.1 DESARROLLO HISTRICO.

La Microbiologa, considerada como una ciencia especializada, apareci hasta finales del siglo XIX, como resultado de la confluencia de una serie de progresos metodolgicos que se haban empezado a incubar lentamente en los siglos anteriores, y que obligaron a una revisin de ideas y prejuicios sobre la dinmica del mundo vivo. Se pueden distinguir cuatro etapas en el desarrollo de la Microbiologa: Primer periodo, eminentemente especulativo, que se extiende desde la antigedad hasta los primeros microscopistas. Segundo periodo, de lenta acumulacin de observaciones (desde ~ l675 hasta la mitad del siglo XIX), inici con el descubrimiento de los microorganismos por Leeuwenhoek (l675). Tercer periodo, de cultivo de microorganismos, que llega hasta finales del siglo XIX, donde Pasteur y Koch encabezan el logro de cristalizar a la Microbiologa como ciencia experimental bien asentada. Cuarto periodo (desde principios del siglo XX hasta nuestros das), los microorganismos se estudian en toda su complejidad fisiolgica, bioqumica, gentica, ecolgica, etc. Se logra un extraordinario crecimiento de la Microbiologa, surgen disciplinas microbiolgicas especializadas (Virologa e Inmunologa), estrecha ubicacin de las ciencias microbiolgicas en el marco general de las Ciencias Biolgicas. Antes del descubrimiento del microscopio El descubrimiento de seres vivos no perceptibles a simple vista debi esperar hasta el final del siglo XVII, aunque algunos procesos benficos como la fermentacin para la produccin de bebidas alcohlicas, pan y derivados lcteos, as como procesos perjudiciales, en forma de enfermedades infecciosas, se conocieron mucho tiempo antes de su descubrimiento.

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Diversos escritos de los griegos y romanos hablan de grmenes invisibles que transmiten enfermedades contagiosas. Lucrecio (96-55 a.C.), en su De rerum natura hace varias alusiones a semillas de enfermedad. En el Renacimiento europeo, Girolamo Frascatorius, en su libro De contagione et contagionis (1546) dice que las enfermedades contagiosas se deben a grmenes vivos que pasan de diversas maneras de un individuo a otro. Estos inicios de explicacin renunciando a invocar causas sobrenaturales fueron probablemente catalizados por la introduccin de la sfilis en Europa, una enfermedad en la que es clara la necesidad de contacto para su contagio. Pero la cosa que se transmite en la enfermedad sigui siendo objeto de conjeturas durante mucho tiempo. Los primeros Micros copistas. En el siglo XIV, con el invento de las primeras lentes para corregir la visin, surgi cierta curiosidad sobre su capacidad de aumentar la apariencia en el tamao de los objetos. En el siglo XVI surgieron algunas ideas sobre aspectos de la fsica ptica de las lentes de aumento, pero no se encontr una aplicacin inmediata. Aunque se piensa que Galileo Galilei realiz algunas observaciones microscpicas invirtiendo su telescopio a partir de lentes montadas en un tubo, pero no tuvieron ninguna repercusin. La primera referencia segura sobre el microscopio (1621) se debe a Constantijn Huygens, quien relata que el ingls Cornelis Drebbel tena en su taller un instrumento magnificador, que recibi el nombre de microscopium en l625, en la Accademia dei Lincei, de Roma. El descubrimiento de los microorganismos fue obra de Antonie Van Leeuwenhoek (1632-1723), quien fabric unos cuatrocientos microscopios JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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simples, con los que lleg a obtener aumentos de casi 300 dimetros. En 1675 descubri que en una gota de agua de estanque pululaba una variedad de pequeas criaturas a las que denomin animlculos. En 1683 descubri las bacterias, por lo que se considera el padre de la Microbiologa. Leeuwenhoek fue comunicando sus descubrimientos a la Royal Society de Londres a travs de una serie de cartas que se difundieron, en traduccin inglesa, en las Philosophical Transactions. Sus cualidades de observador le llevaron a describir protozoos (como Giardia, que encontr en sus propias heces), la estructura estriada del msculo, la circulacin capilar, a descubrir los espermatozoides y los glbulos rojos (por lo que tambin se le considera el fundador de la Histologa animal), as como a detallar diversos aspectos estructurales de las semillas y embriones de plantas. Leeuwenhoek se percat de la abundancia y ubicuidad de sus animlculos, observndolos en vinagre, placa dental, etc. Aunque los descubrimientos de Leeuwenhoek despertaron inters al ser comunicados, pocos intentaron o pudieron reproducirlos seriamente. Adems, la fabricacin de lentes sencillas de JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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gran aumento era difcil y el manejo de los microscopios simples, bastante engorroso. Simultneamente el ingls Robert Hooke (1635-1703) usando microscopios compuestos, describi los hongos filamentosos (1667), y descubri la estructura celular de las plantas (Micrographia, 1665), acuando el trmino clula. Sin embargo, el trabajo con microscopios compuestos aplicados al estudio de los animlculos" permaneci poco difundido durante casi 200 aos, debido a sus imperfecciones pticas, hasta que aproximadamente en 1830 se desarrollaron las lentes acromticas.

El debate sobre la generacin espontnea. Las ideas de Aristteles por un lado y la Biblia, por el otro, junto con las opiniones de escritores como Galeno, Plinio y Lucrecio, a quienes se haca referencia incontrovertible en la literatura mdica de la Edad Media y Renacimiento, dieron origen a la idea de que algunos seres vivos se originaban a partir de materia inanimada, o del aire o de materiales en putrefaccin. Esta doctrina de la generatio spontanea o abiognesis, fue cuestionada por los experimentos de Francesco Redi (16211697), quien acu la expresin Omne vivum JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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ex ovo (1668), tras comprobar que los insectos y nemtodos procedan de huevos puestos por animales adultos de su misma especie. Demostr que si un trozo de carne era cubierto con gasa de forma que las moscas no podan depositar all sus huevos, no aparecan gusanos, que l identific como fases larvarias del insecto. Los descubrimientos de Redi desacreditaron la teora de la generacin espontnea para los animales y plantas, pero la reactivaron respecto de los animlculos, de modo que aunque se acept la continuidad de la vida en cuanto a sus formas superiores, no todos estaban dispuestos a admitir el ms amplio Omne vivum ex vivo aplicado a los microorganismos. Un siglo despus, varios naturalistas retomaron el ataque a la teora preformacionista. Lazzaro Spallanzani (1729-1799) le demostr a Needham (1713-1781) que los infusorios no aparecan en muestras de maceraciones animales o vegetales sometidas durante tiempo suficiente a ebullicin en frascos hermticamente cerrados, pero volvan a aparecer si se practicaban agujeros en el recipiente. Sin embargo, Needham, respondi que el JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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calor haba destruido la fuerza vegetativa de las infusiones y haba cambiado la cualidad del aire dentro de los frascos. A principios del siglo XIX la teora de la generacin espontnea recibi un refuerzo antes de morir, debido por un lado a razones extracientficas (auge del concepto de transmutacin producido por la escuela de la filosofa de la naturaleza), y por otro al descubrimiento del oxgeno y de su importancia para la vida, de modo que los experimentos de Spallanzani se interpretaron como que al calentarse las infusiones, el oxgeno del aire se destrua, y por lo tanto desapareca la fuerza vegetativa que originaba la aparicin de microorganismos. Theodor Schwann (1810-1882) present en 1836 un mtodo para refutar la teora abiognica: calent maceraciones en frascos a los que se haba eliminado previamente el aire, pero no continu trabajando en esta lnea. Para complicar ms las cosas, la publicacin de Sobre el origen de las especies por Darwin en 1859, fue utilizada por algunos preformacionistas. El mismo Haeckel, en una fecha tan tarda como 1866, se mostraba escptico ante las pruebas aportadas por Pasteur. Louis Pasteur (1822-1895) asest el golpe definitivo a favor de la teora biognica. En un informe a la Academia de Ciencias de Pars, en 1860 (Expriences rlatives aux gnrations dites spontanes) y en escritos posteriores comunica sus experimentos: calent infusiones en matraces de vidrio a los que estiraba lateralmente el cuello, hacindolo largo, estrecho y sinuoso, y dejndolo sin cerrar, con esto demostr que el lquido no desarrollaba microorganismos, y elimin la JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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posibilidad de que un aire alterado fuera la causa de la no aparicin de grmenes. Comprob que los grmenes del aire quedaban retenidos a su paso por el largo cuello sinuoso, en las paredes del tubo, y no alcanzaban el interior del recipiente, quedando la infusin estril indefinidamente. Slo si se rompa el cuello lateral o si se inclinaba el frasco de modo que pasara parte de lquido a la porcin de cuello, los grmenes podan contaminar la infusin y originar un rpido crecimiento. Frasco con "cuello de cisne" de Pasteur, con el que refut las ideas sobre la generacin espontnea. En 1861 Pasteur public otro informe en el que explica cmo se pueden capturar los cuerpos organizados del aire con ayuda de un tubo con un tapn de algodn como filtro, y la manera de recuperarlos para su observacin microscpica. De esta forma quedaba definitivamente aclarado el origen de los microorganismos, y se inicia el estudio cientfico de las formas de vida no observables a simple vista. Los ltimos escpticos quedaron callados en 1877 cuando John Tyndall (18201893) aplic su sistema de esterilizacin por calentamiento discontinuo (hoy conocida como tindalizacin), que evidenci las formas microbianas de reposo resistentes al calor, lo cual fue confirmado ms tarde por Ferdinand Cohn al descubrir las esporas bacterianas. Debate sobre los fermentos. Otro factor que contribuy al nacimiento de la microbiolgica fue la relacin entre ciertas transformaciones qumicas que ocurren en las infusiones y el crecimiento de los grmenes que existen en ellas. Cagniard-Latour en 1836, y Schwann y Ktzing en 1837 sugirieron que las levaduras causaban la

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fermentacin por la que el azcar pasa a alcohol etlico y dixido de carbono, pero se encontraron con la crtica de los qumicos de la poca (Berzelius, Wohler y Liebig). En 1840 Liebig realiz importantes contribuciones a la teora mineral sobre la nutricin de las plantas, enfrentndose a la teora del humus sostenida por Thaer, asestando un golpe a las ideas vitalistas de Leibniz. Se consideraba a las levaduras como plantas microscpicas, se supona que la fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de descomposicin y muerte en el marco de la teora mineral de la fisiologa vegetal. Su convencimiento de que toda actividad vital se poda explicar en trminos de qumica y fsica retras por algn tiempo la adscripcin de estos fenmenos a clulas vivas. Teora mineral de Liebig Pasteur intervino de forma decisiva. En 1857 demostr que los agentes de la fermentacin lctica eran microorganismos, trabaj sobre un problema que haba surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus barricas la fermentacin alcohlica fue sustituida por una indeseable fermentacin lctica. Sus estudios duraron hasta 1876, Pasteur identific distintos microorganismos responsables de diferentes procesos fermentativos. As, en 1860 adscribe la fermentacin alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en 1866, en sus tudes sur le vin resume sus hallazgos al respecto, inaugurando la Microbiologa Aplicada. Pasteur descubri microorganismos que se desarrollaban en ausencia de oxgeno, lo cual desminti la creencia de que todas las formas de vida necesitan aire para crecer. Acu los trminos aerobiosis y anaerobiosis para denominar, JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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a la vida en presencia y en ausencia de oxgeno. Con el descubrimiento de la anaerobiosis, se comprendieron las implicaciones energticas subyacentes a la utilizacin de sustratos orgnicos en presencia y en ausencia de oxgeno, demostrando que, en el segundo caso el crecimiento microbiano era siempre menor, al no poder realizarse la degradacin total de las correspondientes sustancias. Estudios ms profundos sobre los procesos de fermentacin se realizaron hasta 1897 cuando Buchner obtuvo, a partir de levaduras, una preparacin enzimtica (zimasa) capaz de realizar la misma transformacin de fermentacin que las clulas vivas. Este descubrimiento, supuso la confluencia de los enfoques qumico y biolgico: las fermentaciones eran procesos qumicos catalizados por enzimas presentes dentro de clulas vivas, que podan ser estudiados extracelularmente. De esta forma, la Bioqumica, nacida como rama de la qumica fisiolgica, que se vena especializando en la enzimologa, encontr una alianza con la Microbiologa. Avances tcnicos El pleomorfismo, en el siglo XIX, mantena que los microorganismos adoptaban formas y funciones cambiantes dependiendo de las condiciones ambientales. A estas ideas se oponan Koch, Pasteur y Cohn, que estaban convencidos de la especificidad y constancia morfolgica y fisiolgica de cada tipo de microorganismo (monomorfismo). El pleomorfismo surgi como explicacin a la variedad de formas y actividades que aparecan en un simple frasco de infusin, pero Pasteur, se percat de que los cultivos que aparecan eran una sucesin de distintas poblaciones de microorganismos predominantes, que, determinaban la posterior composicin de la comunidad microbiana. La solucin definitiva a esta cuestin dependa, de un desarrollo tcnico, que a su vez suministr una herramienta para la nueva ciencia: los mtodos de cultivo puro. Los primeros cultivos puros fueron obtenidos por el miclogo Brefeld, quien aisl esporas de hongos y las cultiv en medios slidos a base de gelatina. Este mtodo era no viable para las bacterias JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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debido a su menor tamao, por lo que se recurri a un mtodo basado en diluciones: Lister, en 1878 realiz diluciones secuenciales de cultivos mixtos, hasta lograr muestras en las que exista una sola clula. Pero la tcnica era tediosa y normalmente slo se lograba aislar clulas de las bacterias ms abundantes en el cultivo original. Sin embargo, el experimento sirvi para confirmar la naturaleza particulada de los agentes de las fermentaciones. Robert Koch (1843-1910) buscaba mtodos ms sencillos de cultivo puro, necesarios para sus investigaciones sobre bacterias patgenas. Primero emple rodajas de papa como sustrato slido nutritivo en el cual se desarrollaban colonias macroscpicas de bacterias con morfologa caracterstica, que Koch interpret como resultado del crecimiento de clulas individuales. Pero despus utiliz el caldo de cultivo a base de carne (diseado por Loeffler), aadindole gelatina. El medio slido logrado era transparente, y permita ver fcilmente los rasgos coloniales, contena los nutrientes adecuados para el crecimiento de una amplia gama de bacterias. stas eran inoculadas en la superficie del medio con un hilo de platino pasado previamente por la llama, por la tcnica de siembra en estra. Sin embargo, la gelatina era atacada por determinados microorganismos, y tena un bajo punto de fusin; ambos problemas se solventaron cuando en 1882 Walter Hesse, siguiendo una sugerencia de su mujer Fanny, introdujo el agar-agar (polisacrido extrado de algas rojas) como nuevo agente solidificante. El trabajo de Koch derrib las ideas pleomorfistas, y planteo la primera propuesta del concepto de especie en el mundo bacteriano. En 1887 Petri, un ayudante de Koch, sustituy las bandejas de vidrio cubiertas con campanas, por un sistema manejable de placas de cristal planas, que se conoce como cajas de Petri. Cajas de Petri El desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento fue resultado de las investigaciones realizadas por Beijerinck y Winogradsky entre 1888 y los

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primeros aos del siglo XX, sobre bacterias implicadas en procesos biogeoqumicos y con caractersticas fisiolgicas distintivas (quimioauttrofas, fijadoras de nitrgeno, etc.). Estos medios, donde se aplica a pequea escala el principio de seleccin natural, se disean de forma que su composicin qumica favorezca el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos, capaces de usar ciertos nutrientes del medio. Otra aportacin a este perodo de cultivo en el desarrollo de la Microbiologa fueron los medios diferenciales, en los que se manifiesta algn rasgo bioqumico o metablico, lo que contribuye a la identificacin microbiana. Wrtz, en 1892, incorpor el uso de indicadores de pH en los medios, lo cual permita revelar la produccin de acidificaciones por fermentacin en ciertas bacterias. En la ciudad de Jena se cre una atmsfera de progreso con naturalistas como Haeckel, Strassburger o Abb interactuando con la editorial Gustav Fischer especializada en Biologa y Medicina y la industria ptica y qumica. Estas influencias se reflejaron en una efervescencia de las ciencias naturales despus de Darwin. La industria ptica de Abb y Zeiss, se mantena en conexin con la vidriera Schott, esto facilit satisfacer la necesidad de Koch de perfeccionar el microscopio compuesto, introduciendo las lentes acromticas y la iluminacin inferior con condensador. Abb desarroll en 1878 el objetivo de inmersin en aceite. La industria qumica BASF, sumistr a Koch una serie de derivados de anilina que tean las bacterias permitiendo su visualizacin al microscopio en frotis de tejidos infectados. En 1875 Carl Weigert ti bacterias con pirocarmn, un colorante usado en zoologa. En aos sucesivos se introdujeron el azul de metileno (Koch, 1877), la fuchsina, y el violeta cristal. En 1882-1883 Ziehl y Neelsen desarrollaron el mtodo de cido-alcohol resistencia para teir Mycobacterium tuberculosis. En 1884 Christian Gram establece la tincin de contraste que distingue dos tipos bacterianos en funcin de su reaccin JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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diferencial de tincin y que tienen rasgos estructurales distintivos. En 1890 Loeffler observ los flagelos bacterianos con su tcnica de impregnacin argntica.

Estas innovaciones tcnicas (mtodos de cultivo, microscopa y tinciones) fueron fundamentales (junto con los sistemas de esterilizacin) para la consolidacin de la Microbiologa como ciencia, permitiendo eliminar las especulaciones que haban predominado.

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1.1.2 CONCEPTOS BSICOS.

La Microbiologa trata preferentemente de los grandes grupos de hongos, bacterias y virus que presentan una variabilidad y fenmenos fisiolgicos tan grandes como los objetos de disciplinas tradicionales como la Botnica o la Zoologa. El estudio de los microorganismos ha brindado en los ltimos aos grandes aportaciones para la solucin de problemas biolgicos bsicos. Su fcil manejo, el crecimiento rpido, la gran capacidad adaptativa y otras caractersticas han hecho de los microorganismos el objeto de estudio preferido de la Bioqumica y la Gentica. Los tres reinos: Animales, Vegetales y Protistos Las diferencias en la forma y la estructura entre los animales y las plantas, en las que hasta el siglo pasado se basaba la clasificacin de los seres vivos, son bien notorias. Estas diferencias se pueden atribuir a las diferencias fundamentales en los tipos de nutricin. Los animales se alimentan de sustancias orgnicas ya formadas (C-heter6trofos), que son elaboradas. Digeridas y asimiladas en el interior del cuerpo, en el tracto intestinal. Del desarrollo embrionario puede deducirse que esta cavidad corporal tiene su origen en la invaginacin de la blstula. EI desarrollo animal tiende a la constitucin de superficies internas de absorcin. Este principio de constitucin se ve realizado desde los celentreos (Hidrozoos; ejemplo: hidra de agua dulce) hasta los vertebrados superiores. Al otro tipo de nutricin totalmente distinto (C-auttrofos) Ie corresponden las plantas, de constitucin bsicamente distinta. Obtienen las sustancias necesarias para la formacin de su cuerpo a partir de sustancias inorgnicas y utilizan la luz solar como fuente energtica. Las clulas y los tejidos fotosintticamente activos, con los pigmentos captadores de radiaciones (clorofilas y carotenoides) estn orientados hacia el exterior, y forman amplias superficies externas. Otras diferencias generales entre animales y vegetales se refieren a la presencia de paredes celulares, a la capacidad de movimiento activo y cambio de lugar, y ala capacidad de sntesis de determinadas sustancias.

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Los reinos vegetal y animal pudieron delimitarse de forma precisa mientras se conoca poco a los microorganismos. Incluso los hongos tenan tantos caracteres en comn con los vegetales, que sin tener en cuenta su tipo heterotr6fico de nutrici6n, podan incluirse entre las plantas. Mas difcil resulto decidir a que reino pertenecan las bacterias, los mixomicetos, y otros seres unicelulares. Para el tercer reino de los seres vivos se cre el nombre colectivo de Protistos. Asi, ERNST HAECKEL (1866) ordeno al mundo de los organismos en tres grupos principales o reinos: animal, vegetal y de los protistos. Basndose en las teoras de la seleccin y de la herencia de CHARLES DARWIN (1859) reuni HAECKEL a todos los gneros y especies vegetales y animales conocidos hasta el momento bajo el punto de vista de su posible desarrollo y distribuy en un rbol filogentico, la posible evolucin a partir de una raz comn, "Radix communis organismorum"., de todos los organismos vivos conocidos hasta el momento. HAECKEL an no tena una idea clara del reino de los protistos. El tercer reino de los Protistos incluye a aquellos organismos que se separan de los animales y los vegetales por una diferenciacin morfolgica muy escasa; la mayora son unicelulares. En base a su estructura celular pueden dividirse los protistos en dos grupos perfectamente delimitados: los protistos superiores se parecen en cuanto a la constitucin de sus clulas a los animales y a las plantas; son eucariotas. A ellos pertenecen las algas, los hongos, y los protozoos. Entre los protistos inferiores se cuentan las bacterias y las cianobacterias (algas verde azules); son procariotas, y se diferencian por su constitucin celular de todos los dems organismos. La denominacin microorganismos hace referencia a las reducidas dimensiones de los organismos citados, y por su significado corresponde a la denominacin de protistos. Los virus, como partculas no celulares, se contraponen a todos los organismos; no pueden reproducirse por s solos, sino que para su reproduccin requieren clulas vivas.

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1.1.3 RELACIN CON OTRAS CIENCIAS.

El auge de la microbiologa desde finales del siglo XIX se plasm, entre otras cosas, en el aislamiento de gran variedad de cepas silvestres de microorganismos, lo que suministr un enorme volumen de nuevo material biolgico sobre el que trabajar, aplicndose una serie de enfoques que eran ya habituales en las ciencias naturales ms antiguas; as, haba que crear un marco taxonmico (con sus normas de nomenclatura) para encuadrar a los organismos recin descubiertos, era factible desarrollar trabajos sobre morfologa y fisiologa comparadas, sobre variabilidad y herencia, evolucin, ecologa, etc. De este modo la joven Microbiologa fue objeto, en pocos aos, de la utilizacin, a un ritmo acelerado, de los mtodos taxonmicos y experimentales que haban ido surgiendo y madurando desde el siglo XVIII en los mbitos de la Historia Natural clsica. Los primeros esfuerzos para lograr un clasificacin bacteriana por parte de Cohn (1875) y Migula (1894), que sustentaban su concepto de especie predominantemente sobre caracteres morfolgicos. Pero hacia 1900 era evidente la arbitrariedad e insuficiencia de este tipo de clasificaciones, de modo que los intentos posteriores hicieron uso de caracteres bioqumicos (Orma Jensen, 1909), o de una mezcla de rasgos morfolgicos, bioqumicos, patognicos y de tincin (Buchanan, 1915). El sistema de taxonoma bacteriana adquiri un nuevo impulso a partir de la 1 edicin del Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (1923), y de las propuestas de Kluyver y van Niel (Prospects for a natural system of classification of bacteria, 1936). En cuanto a la nomenclatura, no fue hasta 1958 en que cuaj un Cdigo Internacional de Nomenclatura Bacteriolgica, aunque ya se vena aplicando desde haca tiempo el procedimiento tipolgico para los microorganismos, con criterios similares a los de la Zoologa y la Botnica. El establecimiento de relaciones taxonmicas precis el recurso a mtodos cada vez ms amplios y afinados de anlisis gentico, estructural o fisiolgico. En un apartado anterior ya vimos las conexiones tempranas entre la Bioqumica y la Microbiologa a propsito del JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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descubrimiento de la base enzimtica de las fermentaciones, lo cual abri el camino para dilucidar el metabolismo energtico microbiano, y para demostrar su similitud qumica con rutas metablicas de organismos superiores. Otro paso importante en la percepcin de la unidad bioqumica del mundo vivo deriva del descubrimiento de las vitaminas (trmino acuado por Funk en 1911), al establecerse que determinados factores de crecimiento requeridos por algunos microorganismos eran qumicamente similares a las vitaminas necesarias en la dieta de los animales, y que este tipo de compuestos representa precursores biosintticos de coenzimas del metabolismo celular. As pues, este tipo de investigaciones sent claramente la idea de la unidad qumica de los seres vivos, independientemente de su encuadre taxonmico, y encauz una buena parte de los trabajos bioqumicos hacia los microorganismos, dadas sus cualidades de facilidad de manejo y cultivo en laboratorio. En cuanto a las conexiones de la Microbiologa con la Gentica, ya Beijerink, en 1900, tras analizar la teora de la mutacin de De Vries, haba predicho que los microoganismos podran convertirse en objetos de investigacin ms adecuados que los sistemas animales o vegetales. Pero las primeras conexiones entre ambas ciencias arrancan de la necesidad que hubo, a principios del siglo XX, de determinar la sexualidad de los hongos con fines taxonmicos. En 1905 Maire demostr la existencia de meiosis en la formacin de ascosporas, y Claussen (1907) evidenci fusin de ncleos en Ascomicetos, mientras que Kniepp, hacia finales de los aos 30 haba recogido un gran volumen de informacin sobre procesos sexuales en Basidiomicetos. El sueco Lindegren (1936) realiza las primeras cartografas genticas en cromosomas de Neurospora, durante su estancia en el laboratorio californiano de Morgan; este ltimo, propugnador de la teora de los genes (1926), confiaba desde haca aos en ampliar sus xitos, logrados en Drosophila, hacia el estudio de la gentica microbiana. En 1941, otros dos discpulos de Morgan, Beadle y Tatum, aislan mutantes auxotrficos de Neurospora, con lo que se inicia el estudio de la base bioqumica de la herencia, y convierten a este hongo en una valiosa herramienta de trabajo en esta lnea de investigacin. Las estrategias diseadas por Beadle y Tatum fueron aplicadas por Luria y Delbrck (1943) a cultivos bacterianos, investigando la aparicin de mutaciones espontneas resitentes a fagos o estreptomicina. La conexin de estos JOSE MANUEL MORENO MONTERO

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experimentos con las observaciones previas de Griffith (1928) sobre la transformacin del neumococo, llev a Avery y colaboradores (1944) a demostrar que el principio transformante portador de la informacin gentica es el ADN. En 1949 Erwin Chargaff demuestra bioqumicamente la transmisin gentica mediante ADN en Escherichia coli , y en 1952 Alfred Hershey y Martha Chase, en experimentos con componentes marcados de fagos, ponen un elegante colofn a la confirmacin de la funcin del ADN, con lo que se derribaba el antiguo y asentado paradigma de las protenas que hasta mediados de siglo intentaba explicar la base de la herencia. De esta forma, la Microbiologa experimental se sita en pleno centro del nacimiento de la Gentica molecular, de la mano de los avances paralelos en Bioqumica (anlisis por rayos X de la estructura del ADN debido a Maurice Wilkins y Rosalind Franklin, modelo de Watson y Crick de la doble hlice del ADN, etc.), dando origen esta confluencia a lo que se ha llamado la Edad de Oro de la Biologa Molecular.

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BIBLIOGRAFIA.
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JOSE MANUEL MORENO MONTERO