OBJETIVOS COMUNES A TODAS ELLAS:

1. Distinguir los diferentes tejidos que forman nuestro cuerpo y saber identificar las estructuras propias de cada uno en las muestras que observemos. 2. Aprender a manejar con total soltura el microscopio y el material de laboratorio (portas, muestras, bisturs, micrtomos, etc.) 3. Saber cul es el procedimiento adecuado para aplicar las diferentes tinciones y aceites que hemos utilizado. 4. Relacionar lo estudiado durante el tema con los tejidos reales que observamos en las prcticas.

I)

OBSERVACIN DE CLULAS DE MUCOSA BUCAL

Materiales Microscopio Mechero Portas y cubreobjetos Cuentagotas Palillos de dientes 1

Agua destilada Cubeta de tinciones o cristalizador y varillas de soporte

Reactivos Azul de metileno

Fundamento terico

La mucosa bucal, como su nombre indica, se encuentra en la boca y esta corresponde a una de las aberturas naturales de nuestro cuerpo. Por esta razn, la mucosa bucal est formada por tejido epitelial pavimentoso o plano estratificado o tegumentario. Este tejido se caracteriza, al igual que todos los epiteliales, por estar formado por clulas con geometra ms o menos regular, no tener casi espacios intercelulares y por tener una lmina basal formada por fibras entretejidas a la que estn unidas las clulas del epitelio.

Procedimiento

1) Situar una o dos gotas de agua destilada en el centro de un portaobjetos limpio y desengrasado. 2) Cortar un palillo por la mitad cuidando que no queden bordes agudos y raspar suavemente la cara interna de la mejilla. 3) Mezclar la muestra obtenida con la gota de agua y hacer una extensin frotando suavemente el palillo sobre el portaobjetos. 4) Fijar calentando ligeramente la preparacin encima de la llama del mechero, dejando unos 20 cm de separacin, hasta que se evapore el agua. El portaobjetos nunca debe quemar al tocar con l el dorso de la mano. 5) Situar el portaobjetos sobra las varillas o soporte de la cubeta de tincin y dejar enfriar. 6) Aadir unas gotas de azul de metileno (el colorante debe cubrir totalmente la extensin) y dejar actuar cinco minutos. 7) Lavar con agua hasta que no suelte color. 2

8) Secar agitando al calor suave de la llama del mechero. 9) Observar al microscopio.

Cuestiones

a) Por qu se observan clulas aisladas, planas y poligonales si en el epitelio bucal las clulas estn unidas?

Porque el experimento lo hemos hecho a partir de restos de clulas del epitelio bucal. Las hemos extrado de forma desordenada de diferentes localizaciones y por ello no es una muestra uniforme del tejido.

b) Qu tipo de epitelio es el de la mucosa bucal? Por qu?

Es epitelio plano estratificado porque tiene como funcin recubrir las oberturas naturales, como la boca.

II) OBSERVACIN MICROSCPICA DE CLULAS DE TEJIDO ADIPOSO

Materiales

Microscopio ptico Portaobjetos y cubreobjetos Lanceta y pinzas Cuentagotas Papel absorbente Frasco lavador con agua Cubeta de tincin o cristalizador Varillas de vidrio Microtomo de mano, bistur o navaja de afeitar Tocino de cualquier tipo de carne cruda

Reactivos

Solucin alcohlica de Sudn III Solucin comercial de formaldehido (formol)

Fundamento terico

El tejido adiposo entra dentro de la categora de los tejidos conectivos porque sus clulas tienen un origen mesenquimtico, al 4

igual que los dems tejidos de este grupo. Est formado por adipocitos que son clulas llenas de grasa, de forma esfrica y con el ncleo desplazado hacia la periferia de la membrana, debido al volumen de la grasa. Este tejido tiene funcin de reserva energtica, de termoaislante y de proteccin mecnica.

Procedimiento

1) Cortar una lmina muy fina del tejido con la ayuda del micrtomo de mano, la navaja de afeitar o el bistur. 2) Colocar la muestra en el centro de un portaobjetos, que ha de estar bien limpio y desengrasado, cubrirla con unas gotas de formol y esperar 4 minutos. 3) Lavar la muestra con agua cuidando de no arrastrarla a la cubeta. 4) Aadir a la preparacin unas gotas de Sudn III y esperar 5 minutos. 5) Volver a lavar la muestra con agua teniendo la misma precaucin que en el punto 3. 6) Cubrir la preparacin con un cubreobjetos procurando que no queden burbujas de aire. 7) Observar la preparacin al microscopio.

Cuestiones

a) Por qu hay que teir las clulas del tejido adiposo con el colorante Sudn III?

Porque ese colorante concreto es soluble en las clulas del tejido adiposo y hace que solo ellos se tian, facilitando la observacin de las clulas.

b) Observas alguna parte del tejido que no se haya teido con el colorante? Si es as, indica qu es y explica el por qu.

S, el tejido conjuntivo laxo en el que se encuentran insertados los adipocitos porque el Sudn III no es capaz de teirlo.

III) OBSERVACIN MICROSCPICA DE SANGRE HUMANA

Materiales Microscopio ptico Cubeta de tincin o cristalizador Lanceta de hematologa estril Portaobjetos y cubreobjetos Frasco lavador con agua Algodn

Reactivos Metanol (Alcohol metlico) Etanol (Alcohol etlico) Colorante azur-eosina preparado segn Giemsa

Fundamento terico

La sangre es la encargada de mantener nuestro medio interno en condiciones estables y est formada por el plasma sanguneo, que incluye las clulas sanguneas y que da lugar al lquido intersticial (cuando se filtra a travs de los capilares) y a la linfa (que circula por los vasos linfticos). Las clulas sanguneas son los glbulos rojos, que desempean la funcin de transporte de oxgeno; las plaquetas, que tienen como funcin principal el proceso de coagulacin; y los glbulos blancos, (entre los que distinguimos como granulocitos y agranulocitos), que se encargan de la funcin defensiva del organismo.

Procedimiento

1) Limpiar la yema del dedo corazn con alcohol. 2) Apretando la yema del dedo con el pulgar, pichar el dedo con la lanceta estril. 3) Extraer varias gotas de sangre y depositarla en un lado y en el centro de un portaobjetos muy limpio y desengrasado. 4) Con la ayuda del borde de otro portaobjetos, hacer una extensin de sangre o frotis: El portaobjetos con el que se hace la extensin debe deslizarse aplicando su borde contra el otro portaobjetos y slo debe pasarse una vez de forma continua y sin interrupcin para que la sangre quede en una fina pelcula. 5) Secar la preparacin al aire lo ms rpidamente posible (sin aplicar calor y sin soplar sobre ella). 6) Cubrir la extensin con metanol para fijarla y esperar hasta que se evapore.

7) Sin lavar cubrir la preparacin con el colorante Giemsa y esperar 20 minutos. Si el colorante se evapora antes de transcurrir los 20 minutos aadir ms, cuidando que durante todo el tiempo de espera el frotis est siempre cubierto por el colorante. 8) Lavar la preparacin con agua y secar agitando el portaobjetos al calor dbil del mechero. 9) Observar al microscopio y buscar un campo donde las clulas sanguneas estn en una sola capa.

Cuestiones

a) Qu clulas sanguneas son ms numerosas en la preparacin?

Los neutrfilos y los linfocitos.

b) Qu diferencias observas entre los glbulos rojos y los blancos?

Los glbulos rojos son ms pequeos y mucho ms numerosos y no tienen grnulos como le ocurre al neutrfilo. Adems, los glbulos rojos no tienen ncleo mientras que los linfocitos y los neutrfilos s.

IV) OBSERVACIN CONJUNTIVO

MICROSCPICA

DEL

TEJIDO

Materiales Portaobjetos Cubreobjetos Aguja enmangada Agua destilada Muslo de pollo Pinzas

Reactivos Alcohol etlico Azul de metileno

Fundamento terico

El tejido conectivo se encuentra distribuido por todo el cuerpo y est formado, principalmente, por tres componentes: clulas (que distinguimos entre las fijas o propias, como los adipocitos y fibrocitos, y las emigrantes como los mastocitos, linfocitos y fagocitos); fibras (de colgeno, elsticas o de elastina y reticulares) y sustancia fundamental (formada por glicosaminoglicanos como el cido hialurnico y proteoglicanos). Dependiendo en qu proporcin se encuentren estos tres componentes tendremos diferentes tipos de tejidos conjuntivos: laxo, fibroso, elstico y reticular.

Procedimiento 9

1) Separar la epidermis (piel del muslo) y coger un trozo de la telilla que va apareciendo con ayuda de las pinzas y la aguja enmangada. 2) Ponerlo en el portaobjetos. 3) Se cubre de alcohol etlico y se deja evaporar. 4) Se deposita el colorante sobre la muestra y se deja actuar 1 min. 5) Se enjuaga la muestra con agua destilada y el portaobjetos se coloca encima. 6) Se coloca en el microscopio y est lista para ser observada.

Cuestiones

a) Cmo es posible que aparezcan clulas de otros tejidos?

Es posible y muy comn en este tejido porque se encuentra distribuido por todo el cuerpo sosteniendo todo tipo de tejidos y por ello puede arrastrar clulas de cualquier tejido.

b) Qu elementos confieren las propiedades elsticas y plsticas de la piel? Qu clula las produce?

Las fibras de colgeno. Las produce la protena fibrosa de colgeno.

c) Por qu las clulas observadas forman un tejido si no estn conectadas?

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S estn conectadas, mediante el lquido fundamental que aparece en todos los tipos de tejido conjuntivo, unas veces ms espeso que otras pero siempre presente.

V) OBSERVACIN MUSCULAR

MICROSCPICA

DEL

TEJIDO

Materiales Portaobjetos 11

Cubreobjetos Aguja enmangada Agua destilada Muslo de pollo Pinzas

Reactivos Alcohol etlico Azul de metileno

- Fundamento terico

El tejido muscular est formado por fibras musculares especializadas en la contraccin y por ello, contienen en el citoplasma filamentos de miosina y filamentos de actina. Se distinguen tres tipos de tejido muscular: muscular liso (con clulas alargadas, mononucleadas y encargadas del movimiento visceral); muscular estriado (fibras musculares polinucleadas agrupadas en sarcmeros definidos con bandas claras y oscuras, dependiendo de la miofibrilla que aparezca. Su movimiento es voluntario) y, por ltimo, muscular cardaco (clulas mononucleadas y ms cortas, separadas por discos intercalares y encargadas del movimiento rpido e involuncario, como el latir del corazn).

- Procedimiento

1) Con las pinzas se rasga el msculo hasta extraer una fibra (tambin utilizamos la aguja enmangada). 2) Ponerlo en el portaobjetos. 3) Se cubre de alcohol etlico y se deja evaporar. 4) Se deposita el colorante sobre la muestra y se deja actuar 1 min. 12

5) Se enjuaga la muestra con agua destilada y el portaobjetos se coloca encima. 6) Se coloca en el microscopio y est lista para ser observada.

Cuestiones.

a) Realiza el dibujo de un sarcmero y nombre sus partes.

b) Las bandas claras y oscuras del sarcmero se deben a la disposicin de las protenas responsables de la contraccin, cules son estas protenas?

La actina y la miosina.

c) Cul es el tipo de tejido animal que rodea y empaqueta a las fibras musculares?

El endomisio que rodea un grupo pequeo de fibras musculares; el perimisio interno que envuelve cada uno de los diferentes fascculos musculares formados y el epimisio, que rodea el conjunto de fascculos que recubren en msculo. Todos ellos son conjuntivos.

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VI) OBSERVACIN MICROSCPICA DEL TEJIDO CARTILAGINOSO

Materiales Portaobjetos Cubreobjetos Aguja enmangada Agua destilada Muslo de pollo Pinzas

Reactivos Alcohol etlico Azul de metileno

Fundamento terico

El tejido cartilaginoso est formado por una sustancia fundamental slida y elstica en la que se forman una especia de huecos llamados lagunas donde se encuentran por pares los condrocitos. Hay diferentes tipo de tejido cartilaginoso: hialino (sustancia fundamental 14

homognea y localizado en los cartlagos articulares, costales, nasales, traqueales y formando el esqueleto de los fetos); fibroso (sustancia fundamental escasa y formada por fibras de colgeno y se localiza en los discos intervertebrales y la snfisis del pubis), y, para acabar, el elstico (formado por fibras de elastina y localizado en el pabelln de la oreja, la epiglotis y los bronquiolos).

Procedimiento

1) Separar la epidermis (piel del muslo) y localizar la parte cartilaginosa del animal, extraer una muestra con el microtomo o el bistur. 2) Ponerlo en el portaobjetos. 3) Se cubre de alcohol etlico y se deja evaporar. 4) Se deposita el colorante sobre la muestra y se deja actuar 1 min. 5) Se enjuaga la muestra con agua destilada y el portaobjetos se coloca encima. 6) Se coloca en el microscopio y est lista para ser observada.

Cuestiones

a) De qu est formada la laguna en la que se encuentran los condrocitos?

Est formada por la sustancia fundamental de consistencia slida y elstica que alberga gran cantidad de polisacridos como el cido hialurnico y proteoglicanos.

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b) Qu caractersticas presenta este tejido para incluirlo como tejido conectivo?

Se incluye como tejido conectivo porque est formado por las tres partes que definen este tejido especfico: sustancia intercelular (slida y elstica); clulas (como los condrocitos) y fibras (dependiendo de qu tipo de tejido cartilaginoso sea las fibras cambiarn).

c) A qu es debido que en cada laguna haya varios condrocitos?

Se debe a la formacin de grupos isognicos para llevar a cabo la divisin mittica.

d) Desde dnde y cmo llega el alimento y el oxgeno a los condrocitos?

El oxgeno y el alimento estn contenidos en la matriz cartilaginosa que secretan los condrocitos al interior de la laguna y que lleva consigo nutrientes y agua. Adems, esta matriz tambin se halla fuera de la laguna en forma de gel y los nutrientes pasan por difusin hasta dentro de la laguna, proporcionando a los condrocitos todo lo que necesitan.

e) Cul es la funcin del tejido?

Su funcin es soportar la tensin que puede provocar el movimiento de los huesos en las zonas de movilidad, como por ejemplo las articulaciones.

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