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I. EL ADN COMO PORTADOR DE LA INFORMACIN HEREDITARIA A. Concepto de gen

En la gentica clsica, el gen se define como la unidad elemental de la herencia, responsable de una caracterstica concreta. En la gentica molecular, un gen es una regin del genoma que contiene la informacin necesaria para sintetizar una molcula de polipptido.

B. Experimentos que demostraron el papel del ADN en la herencia 1. Experimentos de Griffith (1928)
Transformacin bacteriana en Streptoccocus pneumoniae.

2. Experimentos de Avery y McCarty (1943)

El ADN es responsable de la transformacin.

3. Experimento de Alfred D. Hershey y Martha Chase (1952)

Demostraron, mediante marcaje radiactivo selectivo del ADN (usando 35P) y de las protenas (usando 32S), que el ADN del fago T2 era la molcula que se introduca en la clula bacteriana para la reproduccin viral.

II. RELACIN GENES-PROTENAS A. Hiptesis de Beadle y Tatum (1941): Un gen, un enzima

Estudiando el metabolismo del moho rojo del pan ( Neurospora crassa) observaron que cada mutacin (inducidas con rayos X) en un gen poda ser relacionada con la prdida de funcin de un enzima. En la actualidad se especifica: Un gen, una cadena de polipptidos.

B. Colinealidad genes-protenas (Crick 1958)

Al principio de correspondencia entre la secuencia de bases en el ADN y de aminocidos en las protenas se le deno mina principio de colinealidad Una secuencia del ADN determina una secuencia de aminocidos de un polipptido. La secuencia de aminocidos determina la estructura tridimensional de la protena y, por lo tanto, su funcionalidad. La alteracin de la secuencia del ADN (mutacin) determina la alteracin de la secuencia de aminocidos de la protena y su estructura tridimensional, lo que provoca su prdida de funcin.

C. Experimentos de Pauling
Comprob mediante electroforesis que los enfermos de anemia drepanoctica (hereditaria) producan una hemoglobi na diferente de la de las personas normales, lo que serva de demostracin de la hiptesis de Beadle y Tatum.

D. Estudio de bacterifagos
Se haba observado que la introduccin del ADN viral en una bacteria no slo ocasionaba la produccin de ms ADN viral, sino tambin de protenas de la cubierta del virus.

III. EL DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR IV. TRANSCRIPCIN

Sntesis de un ARNm a partir de la informacin contenida en el ADN nuclear. El ARNm sintetizado tendr una secuencia de nucletidos complementaria a la de un (ocasionalmente ms de uno) gen. Tiene lugar en el ncleo de la clula duran te la interfase y la profase de la mitosis.

A. Requerimientos
- Enzimas: Endonucleasas - separan las cadenas de ADN. Girasas - eliminan las tensiones y evitan que las cadenas vuelvan a juntarse. ARN-polimerasa - complejo multienzimtico responsable de la unin de los nucletidos para formar el ARN. No necesita cebador. Sintetiza en direccin 5`-3`. - Un catin divalente, como Mg2+ o Mn2+ - Precursores activados (ATP, GTP, UTP y CTP) - ADN patrn

B. Proceso
Iniciacin Previamente actan las endonucleasas y girasas. La ARN-polimerasa reconoce y se acopla a la regin promotora, situada por delante del gen que se va a transcribir. El primer nucletido que se une es siempre ATP o GTP. Elongacin La polimerasa se desplaza hacia el siguiente nucletido de la cadena de ADN que est leyendo y cataliza la formacin de un enlace fosfodister. Este proceso se repite sucesivamente. La energa necesaria para la unin proviene de la hidrlisis de los dos fosfatos terminales de los nucletidos activa dos que se van incorporando. La direccin de transcripcin es 5` 3`.
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Terminacin Al alcanzar una seal de terminacin, un factor proteico, denominado factor de liberacin, provoca la separacin del ARNm recin sintetizado. Intrones y exones Se ha podido comprobar mediante experimentos de hibridacin entre ADN y ARNm que, en muchas ocasiones, en el ADN que codifica un ARNm existen zonas, denominadas intrones, que no tienen correspondencia homloga en el ARN. Estas zonas son eliminadas en el proceso posterior de maduracin del ARN. Se considera que esto puede suponer una ventaja para la diferenciacin celular, ya que pueden existir enzimas es pecficos que controlan el paso del ARN primario al ARN maduro, y que solo existen en las clulas en las que se de ben expresar esos genes. ARNm policistrnico Una sola molcula de ARNm puede transcribir una serie de genes que cumplen funciones afines, lo cual facilita el control de la expresin de los genes.

C. Diferencias en el proceso entre procariotas y eucariotas

PROCARIOTAS El proceso es ms simple Se puede transcribir todo el DNA en cualquier momento Se transcribe la mayor parte del DNA genmico El RNA transcrito primario es funcional (no precisa maduracin postranscripcional) Los mRNA se empiezan a traducir segn van siendo sintetizados Interviene un solo tipo de RNApol EUCARIOTAS El proceso es ms complejo Slo se puede transcribir el DNA que constituye la eucromatina (cromatina descondensada) La mayor parte de DNA genmico no se transcribe (slo se transcribe el 35%) El RNA transcrito primario sufre en el ncleo el proceso de maduracin o procesamiento postranscripcional Los mRNA deben ser transportados al citoplasma para participar en la traduccin Intervienen tres RNApol diferentes (I, II y III) que sintetizan los distintos tipos de RNA

D. Transcripcin inversa
Excepcin al dogma central en la cual la informacin codificada por ciertos virus de ARN se transcribe a ADN

V. EL CDIGO GENTICO: CONCEPTO Y CARACTERSTICAS

Concepto Es la relacin entre la secuencia de las bases en el ADN y la secuencia de aminocidos en una protena. Caractersticas - Formado por tripletes - No tiene superposiciones. En 1977 se descubri que esto no era as en el caso de algunos virus (al determinar la secuencia nucleotdica del fago x-174). - Es degenerado (redundante) pero no es ambiguo. 61 de los 64 tripletes codifican a un aminocido particular; esto significa que para algunos aminocidos debe haber ms de un triplete. Esto minimiza los efectos deletreos de las mutaciones, puesto que la mayora de los codones que especifican un mismo aminocido difieren nicamente en la ltima base del triplete. - Presenta tripletes sin sentido Se denominan tripletes de terminacin y son reconocidos por protenas especficas llamadas factores de liberacin. - Es universal

VI. TRADUCCIN: BIOSNTESIS DE PROTENAS

Es el proceso mediante el cual la informacin contenida en el ARNm especifica la sntesis de una protena.

A. Requerimientos
La traduccin requiere la interaccin coordinada de ms de 100 tipos de molculas. - ARNt activados (aminoacil-ARNt) - ARNm que acta como molde - Factores proteicos - Ribosomas Son los orgnulos responsables del proceso de traduccin. Existen dos lugares estereoespecficos en los cuales se unen los aminoacil-ARNt: son el locus A (aminoaclico) y el locus P (peptidlico).

B. Proceso
Etapa previa: activacin de los ARN de transferencia Los aminocidos se unen a los ARNt, formando los aminoacil-ARNt, por medio de una reaccin muy especfica catalizada por unos enzimas denominados aminoacil-ARNt-sintetasas. Estos enzimas poseen dos centros de unin, uno para el aminocido y otro para el ARNt correspondiente. Ocurre en el citoplasma y requiere la hidrlisis de una molcula de ATP. Es muy rpido, se ha comprobado que en las bacterias puede durar 15 a 20 segundos.

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Formacin del complejo de iniciacin Las subunidades del ribosoma estn separadas. Primero se une la subunidad al ARNm por su extremo 5`. Intervie nen tres factores proteicos de iniciacin y se consume una molcula de GTP. El primer codn del ARNm (AUG) co difica la formilmetionina en las clulas procariotas y la metionina en las eucariotas. Elongacin Entrada de un aminoacil-ARNt al locus A Intervienen dos factores proteicos de elongacin y una molcula de GTP. Formacin de un enlace peptdico Catalizada por un enzima presente en la subunidad mayor, la peptidiltransferasa. El enlace se produce entre el grupo amino del nuevo aa-ARNt y el carboxilo del anterior. Translocacin Interviene un tercer factor proteico de elongacin y otra molcula de GTP. Terminacin Cuando se llega a uno de los codones sin sentido (UAA, UAG o UGA) un factor proteico, denominado factor de libe racin R, se une al ribosoma. Esto promueve la ruptura de la unin entre el ARNt y la cadena polipeptdica y la se paracin del ARNm y las subunidades del ribosoma. Frecuentemente varios ribosomas traducen simultneamente la misma protena, asocindose a lo largo del mismo filamento de ARNm formando un polisoma. Una vez traducido, el ARNm es hidrolizado quedando libres los ribonucletidos.

C. Diferencias en el proceso entre procariotas y eucariotas

PROCARIOTAS EUCARIOTAS Ribosomas ms pequeos y con una molcula de ARN Ribosomas ms GRANDES y con una molcula de ARN menos ms El primer aminocido que se une es la formil-metionina El primer aminocido que se une es la metionina El codon de iniciacin es AUG y, en ocasiones, GUG El codon de iniciacin es siempre AUG (valina) ARNm policistrnico ARNm monocistrnico Menos factores proteicos de iniciacin Ms factores proteicos de iniciacin Dos factores de terminacin Un factor de terminacin

VII. CONTROL DE LA EXPRESIN GENTICA A. Regulacin en procariotas (modelo del opern, Jacob y Monod, 1961)
Segn este modelo pueden distinguirse tres tipos de genes diferentes: - GENES ESTRUCTURALES, que contienen la informacin necesaria para la sntesis de protenas estructurales o enzimticas. - GENES REGULADORES, que controlan la expresin de los genes estructurales. - GENES CODIFICANTES DE LOS ARNt Y ARNr, que no se traducen a protenas. El opern es una unidad gentica formada por un conjunto de genes estrechamente relacionados que estn someti dos a una regulacin coordinada. Los elementos que constituyen cada opern son: - Un GEN REGULADOR, que codifica una protena denominada represor. No tiene por qu estar en contacto con el resto de los genes que intervienen en el proceso. El represor codificado por el gen regulador puede encontrarse en forma activa o inactiva. - Un GEN OPERADOR. Se encuentra inmediatamente delante de los genes estructurales. Es el sitio de unin del re presor. - Un GEN PROMOTOR, situado delante del gen operador. Es el lugar de unin de la ARN-polimerasa que va a trans cribir los genes estructurales. - Los GENES ESTRUCTURALES codifican una o varias protenas estrechamente relacionadas. Induccin enzimtica. Opern lactosa El represor es sintetizado en su forma activa. Cuando hay lactosa en el medio, sta se une al represor inactivndo lo, de manera que podrn transcribirse los genes responsables del catabolismo de la lactosa. Represin enzimtica. Opern triptfano El gen regulador produce un represor inactivo. Los genes estructurales, que codifican los enzimas responsables de la sntesis del triptfano, son transcritos hasta que el triptfano acumulado en el medio se une al represor activndo lo.

B. Regulacin en los eucariotas

Cada clula eucaritica solo expresa una pequea proporcin de los genes que contiene en funcin del tejido al cual pertenece, la mayora del ADN no se transcribe. Sin embargo, hay genes que permanecen activos en todas las clu las, para mantener los componentes esenciales de sus estructuras. La regulacin de la expresin gentica puede estar relacionada con la presencia de protenas que estn asociadas a la molcula de ADN.

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