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PARTE XI MICOLOGIA

A Micologia a Cincia que estuda os fungos. Os fungos so organismos com clulas eucariticas muito importantes na natureza. Os fungos se classificam em bolores, leveduras e cogumelos. Os bolores ou mofos apresentam estruturas morfolgicas tpicas que permitem diferenci-los dos outros seres vivos. Eles crescem sobre substratos simples e em meios usualmente acidificados, com pH ajustado para 3,5. comum observ-los crescendo sobre substratos slidos como em certos alimentos como pes, frutas ctricas, \apresentando o aspecto aveludado, cotonoso (similar a algodo) e coloridos como o Aspergillus niger (negro), Penicilium notatum (branco), Cladosporium (azuis), etc. A colorao dos bolores dada pelos esporos. Cada esporo pode dar origem a um novo bolor. Os bolores so organismos pluricelulares que se apresentam como filamentos ao microscpio ptico comum com menor aumento. Ao observar substratos contaminados com bolores em uma lupa a aparncia panormica similar a uma floresta diminuta contendo abundantes e pequenas arvorezinhas. A parte vegetativa dos fungos, i.e., aquela relacionada com a nutrio do bolor est intimamente associada com o substrato onde os bolores formam os filamentos, conhecidos como hifas. A hifa possui cerca de 5 a 10 m de largura e formada pela reunio de vrias clulas. As hifas podem apresentar divisrias formadas por um septo, mas h hifas que no apresentam septos. Desse modo, observando-se microscopicamente as hifas podemos diferenciar as hifas septadas das no septadas. Esta caracterstica muito importante para classificar os bolores. Um conjunto de hifas forma o miclio. A identificao dos fungos , em grande parte, baseada em sua morfologia. Para estudar os fungos verifica-se aspectos da morfologia macroscpica, como colnias filamentosas, cremosas, cotonosas, pulverulentas, etc.; caractersticas do verso e reverso das mesmas, formao de pigmentos, como tambm da morfologia microscpica. Portanto, a unidade estrutural dos fungos representada pela hifa e o conjunto desses elementos denominado miclio. O miclio vegetativo exerce as funes de assimilao dos nutrientes e fixao dos fungos em substratos, podendo se diferenciar em estruturas de frutificao, que realizam a funo reprodutiva dos fungos. Esse ltimo tambm conhecido como miclio reprodutivo ou corpo de frutificao.

O miclio vegetativo constitudo por um aglomerado de hifas, podendo ser dividido, de acordo com sua morfologia, em 3 tipos:
1. Unicelular: caracteriza as leveduras, que so constitudas por clulas esfricas, ovides ou ligeiramente alongadas, e se reproduzem por brotamento ou cissiparidade. Exemplos Candida. 2. Filamentoso: caracteriza os bolores, podendo apresentar-se septado ou cenoctico (i.e., os ncleos ficam imersos no protoplasma, migrando de uma clula para outra atravs de poros de comunicao). As hifas podem se diferenciar em estruturas e

funes variveis, recebendo denominaes diversas como rizides, apressrios, anastomoses, hifas artrosporadas, etc. 3. Pseudomiclio: caracteriza o gnero de levedura, conhecido como Cndida. formado por brotamentos sucessivos de clulas em determinadas condies de cultivo. O miclio de frutificao ou Encarpio realiza as funes de preservao e disseminao da espcie atravs da formao de clulas especiais chamadas de esporos. Esses esporos podem ser hialinos, pigmentados, simples, septados, apresentando vrias formas que, muitas vezes, caracterizam gneros e espcies de fungos. Os esporos, de acordo com a origem, podem ser assexuados ou sexuados e tanto um como outro podem estar contidos ou no no interior de determinadas estruturas. 1. Esporos de origem assexuada: Ectsporos: esporos que se formam na extremidade de hifas especiais denominadas conidiforos. Esses esporos so denominados conidios e so encontrados nos gneros Aspergillus, Penicillium, etc. Endsporos: esporos produzidos no interior de estruturas denominadas esporngios. Nesse caso os esporos so denominados esporangisporos. Ex. Rhizopus. 2. Esporos de origem sexuada: Ectsporos: esporos produzidos na extremidade de basdios e denominam-se basidisporos. Ex. Basidiomicetos. Endsporos: esporos produzidos no interior de clulas denominadas ascos. Nesse caso os esporos so denominados ascsporos. Ex. Piedra hortai. H os fungos que se apresentam ora como filamentosos ora como leveduriforme. Esses fungos so chamados de Dimrficos. Esta caracterstica est relacionada com o ambiente em que se desenvolve o fungo.

SEO I EXAMES MACRO E MICROSCPICOS DE CULTURAS DE FUNGOS

Os fungos estudados em Microbiologia, compreendem as leveduras e os bolores. As leveduras so unicelulares, apresentam em mdia de 1 a 5 m de dimetro e 5 a 30 m de comprimento. Elas so geralmente ovais, mas podem apresentar morfologia alongada ou esfrica. As leveduras no possuem flagelos, sendo portanto, imveis. Em agar Sabourand formam colnias lisas, brilhantes e, usualmente cremosas e pigmentadas. Os pigmentos formados no se difundem para o meio de cultura. Os bolores so organismos multicelulares, que apresentam-se filamentosos sob o exame a fresco com baixa ampliao. Ao exame macroscpico apresentam crescimento caracterstico com aspecto aveludado ou cotonoso (algodo) ou como borra de caf (Aspergillus niger).
Objetivo: Observar uma cultura, estudar o aspecto do fungo em vida saproftica, como a forma da colnia, superfcie, dimenso do miclio areo do substrato, consistncia e reverso da colnia, cor ou pigmentao. Caractersticas gerais dos fungos: Bolores ou mofos . presena de esporos . presena de miclio . ausncia de clorofila ou qualquer outro pigmento fotossinttico similar. Meio de cultura para fungos - Agar Sabouraud Glicose Peptona gar 40 g 10 g 15 g

gua destilada

1000 ml

Dissolver por aquecimento at ebulio. Esterilizar em autoclave 121 oC/15 a 20 min. Esfriar em banho maria a 45oC e adicionar soluo de cido tartrico volume suficiente para baixar o pH at 3,5. Inocular a cultura com agulha com extremo dobrado em ngulo reto. Incubar a temperatura ambiente e examinar por 1 a 5 dias. Culturas selecionadas Fungo filamentoso - Penicillium spp. ou Aspergillus spp. Levedura - Rhodotorula spp. Preparar lminas com a cultura de Penicillium, aps observao da colnia filamentosa e sua cor. Tcnicas Tcnica 1: Colocar uma gota do corante azul de metileno (azul de metileno mais glicerina) numa lmina limpa e flambada; tomar a cultura do Penicillium ou Aspergillus e com a agulha de platina dobrada em ngulo reto, tambm flambada, retirar um fragmento da mesma e depositar sobre a gota para corar os esporos e filamentos. Cobrir a preparao com lamnula limpa, fazendo leve presso. Observar ao microscpio com objetiva de 10 X e depois com a de 40 X e desenhar. Esporos Miclio e rgo de frutificao do Penicillium ou Aspergillus niger Tcnica 2: Preparar esfregaos com a cultura de Rhodotorula spp., aps observar o aspecto leveduriforme da colnia, pigmento avermelhado que no se difunde no meio e concorre para caracterizar este gnero de fungos; corar pelo mtodo de Gram. As leveduras so Gram positivas.