UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS DEPARTAMENTO DE QUMICA DISCIPLINA Segurana e Tcnicas bsicas de Laboratrio - Turma: F2 Prof.

. Luiz Claudio Barbosa Alunos: Izabela Diniz Padula Mariana Souza Nascimento Data da prtica: 22/03/2013

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA - CCD

Belo Horizonte, 1 semestre 2013.

1 OBJETIVOS Conhecer e aprender sobre a tcnica de Cromatografia em camada delgada (CCD) e estudar mais profundamente a relao entre isomeria e polaridade. 2 INTRODUO A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao dos compostos de uma substncia ou misturas e tambm, por meio dela, permite muitas vezes, isolar, identificar e quantificar os mesmos. A palavra cromatografia oriundas das palvras chrom cor e graphe escrever, que so gregas, porm a cor apenas facilita na identificao, no um fator que determina a utilizao da cromatografia. Existem vrios tipos de cromatografia e neste relatrio ser enfocada a cromatografia em camada delgada. A cromatografia em camada delgada uma tcnica de adsoro lquido-slido que se baseia na diferena de afinidade dos componentes de uma substncia pela fase estacionria (slido adsorvido na placa de vidro ou plstico). Quando a fase mvel elui, esta arrasta com uma velocidade menor os compostos que possuem uma maior interao com o adsorventes e com uma velocidade maior os que possuem menos afinidade com a fase estacionria e por conseguinte possui mais afinidade com a fase mvel. Assim h uma separao dos compostos sobre a placa. A partir do cromatograma (resultado da separao) pode-se calcular o Fator de Reteno (Rf), que a razo entre a distncia percorrida pelo componente sobra a distncia percorrida da fase mvel. O Rf pode auxiliar na determinao de uma substncia, j que um composto sempre tem um mesmo Rf se a cromatografia realizada nas mesmas condies. Existem vrios adsorventes, como a alumina, celulose, poliamida e slica. Nesta prtica foi optado pelo ltimo adsorvente citado acima. A slica muito porosa, polar e possu um carter levemente cido. A placa onde ser adicionada a slica bem limpa para facilitar a adeso e depois de prontas e secas so levadas ao forno para ativa-la. As amostras devem ser aplicadas sobre o ponto de partida, aproximadamente 1,5 cm do incio da camada de silica na cromatoplaca, que so introduzidas em uma cuba de vidro com o eluente, fase mvel, em abiente saturado do mesmo. A escolha da fase mvel deve levar em conta a natureza qumica da fase estacionria (silca), pois se o solvente for pouco polar no arrastar nenhum composto e se for muito polar arrastar toda amostra no tendo separao. Por isto, utilizam-se mistura de solventes obtendo uma polaridade mdia em relao aos componentes da amostra, gerando timos resultados.

A maioria dos compostos orgnicos so incolores, logo existem mtodos de revelao dos resultados. Um dos mtodos utilizados, quando esta se trabalhando com compostos insaturados, caso desta prtica o uso de iodo que se complexa com as substncias e geram uma cor amarelada a amarronsada. Esta reao no dura por muito tempo, durando a cor por pouco tempo, sendo necessria ento bastante ateno. 3 METODOLOGIA 3.1 MATERIAIS Bquer de 50 mL; Cubas de vidro; Esptula; Iodo slido; 3.2 REAGENTES Acetona; Azobenzeno; Benzidrol; Benzofenona. Tolueno. Placas cromatogrficas previamente preparadas; Papel de filtro; Tubos capilares; Vidros de penicilina.

3.3 EPIs Jaleco; culos de proteo. 3.4 PROCEDIMENTOS

Parte I : Isomerismo cis trans no Azobenzeno Aplicou-se cuidadosamente, com o auxlio de um capilar, a 1,0 1,5 cm de altura da placa e mais prxima de uma das laterais, uma gota de azobenzeno conforme indicado na figura 1. Ao fazer a aplicao tomou-se o cuidado para que o capilar no perfurasse a camada de adsorvente e tambm para que a aplicao no ultrapassasse um dimetro de 5 mm. Aps a aplicao, colocou-se a placa em exposio a luz por cerca de 15 minutos. Preparou-se ento a cuba de eluio adicionando tolueno (solvente), lembrando que ele deve atingir cerca de 1 cm de altura na cuba. Umideceu com o mesmo solvente o papel de filtro presente na cuba, isso para que o vapor de tolueno saturasse a cuba. Aps o fim dos 15 minutos de exposio a luz, foi realizada uma nova aplicao de azobenzeno na placa usando uma soluo que permaneceu no escuro e com o cuidado de no utilizar a mesma extremidade do capilar. Introduziu-se ento a placa na cuba de eluio, e a tampou deixando o solvente subir at atingir o fim da placa. Removeu-se ento a placa da cuba e a

deixou dentro da capela para que o solvente evaporasse. Aps a secagem do solvente introduziu-se a placa dentro de uma cuba reveladora e esperou-se que as manchas comeassem a aparecer. Aps o aparecimento, mediu-se a altura atingida pela mancha e calculou-se os Rfs. Associou-se ento as manchas ao cis-azobenzeno e ao trans-azobenzeno. Parte II: Identificao dos Compostos Benzidrol e Benzofenona Transferiu-se uma pequena quantidade da substncia A (uma pontinha de esptula) para um vidro de penicilina e adicionou-se trs gotas de acetona para dissolver a substncia. Aplicou-se ento a soluo na placa, de modo que o ponto de aplicao esteja mais prximo a uma das bordas laterais da placa. Reabasteceu-se ento o capilar e realizou-se uma nova aplicao, neste mesmo ponto. Aps a realizao desta aplicao, pegou-se um segundo frasco de penicilina e de modo semelhante dissolveuse uma pequena quantidade de susbstncia B em acetona. Aplicou-se ento a nova soluo num ponto mais prximo outra borda lateral da placa de modo que os dois pontos de aplicao no fiquem muito juntos (afastados cerca de 1 cm). Proceceu-se ento a eluio da placa, com tolueno. Removeu-se a placa, e esperou que todo o solvente (tolueno) evaporasse, dentro da capela. Aps a evaporao total do solvente introduziu-se a placa numa cuba reveladora (contendo iodo). Aguardouse ento at a complexao do iodo para a visualizao das manchas. Removeu-se ento a placa e calculou-se os Rfs. Associou-se entao as manchas s substncias Benzidrol e Benzofenina em funo da polaridade. Desprezou-se o adsorvente no lixo e lavou-se as vidrarias utilizadas.

4 RESULTADOS E DISCUSSO Parte I Ao trabalhar com o azobenzeno, percebeu-se que em um dos reagentes contido no laboratrio no apresentava sua colorao padro (amarelo), assim o experimento feito utilizou ambos os reagentes para poder observar os possveis resultados. Aps repousar sob luz uma gota de azobenzeno (amarelo) e uma gota de azobenzeno (translcido), posteriormente adicionar uma gota de cada reagente no escuro e deix-los na cuba pode-se perceber que as gotas de azobenzeno translcidas no eluiram e nem adquiriram a colorao amarelo escuro decorrente do iodo contido na cuba. Conclui-se que o material que havia no laboratrio, j havia perdido as caractersticas bsicas do azobenzeno assim no podendo mais ser usado, portanto dever ser descartado. J as gotas de azobenzeno (amarelo) obtiveram resultados: o que esteve na presena de luz teve uma velocidade menor, do que esteve no escuro, isso e devido isomeria do azobenzeno, que na presena de luz muda de ismero. Assim podendo concluir que o ismero do azobenzeno contido no laboratrio o trans, j que possui uma polaridade menor e teve uma interao melhor com a fase mvel

(tolueno), outra comprovao deste fato que a forma mais estvel do azobenzeno o trans, pois este no tem uma configurao distorcida. Abaixo o desenho esquemtico da cromatoplaca da pratica feita:

A partir desse desenho possvel fazer os clculos do Fator de reteno (Rf), que feito pela diviso da distncia percorrida pela substancia e a distncia percorrida pela fase mvel. Sendo assim o Rf do cis-azobenzeno de 0,429 e o do trans-azobenzeno de 0,571. Parte II De modo anlogo ao experimento I, a cromatografia feita foi para identificar duas substancias A e B, entre as substancias benzidrol e benzofenona todas dissolvidas em acetona. Com a mesma fase mvel (tolueno) foi possvel identificar que a substancia A era o benzidrol, pois ele percorreu menos a placa do que a substancia B (benzofenona). Essa afirmao s possvel j que a fase mvel menos polar que a fase estacionaria. A seguir o esquema da placa feita no laboratrio:

A partir desse esquema possvel fazer as medidas de calculo dos Rfs das substancias. De acordo com o mostrado acima, a substancia A (benzidrol) tem Rf igual a 0,457 e a substancia B (benzofenona) tem Rf igual a 0,671. Questionrio 3: As questes 1, 2, 4, 5, 7 e 8 j foram respondidas nos resultados e discusses. 3. Complete a tabela abaixo: Substncia estrutura Polaridade (ordem decrescente) Rf

Cis-azobenzeno Cis azobenzeno> trans-azobenzeno. Trans-azobenzeno

0,429

0,571

Benzidrol Benzidrol> benzofenona benzofenona

0,457

0,671

6. O que ocorre durante a irradiao de luz? Equacione a reao qumica correspondente ao processo.

A presena da luz faz com que o comprimento de onda que o trans-azobenzeno se encontrava, mude para um comprimento de onda diferente, assim desta maneira o azobenzeno se isomeriza para cis. 9. Lista de Reagentes reveladores.

Substncia
EtOH-H2SO4 EtOH-H2SO4+vanilina.

Preparo
8:2

Uso
Revelador universal (forte agente oxidante). Revelador quase universal para quase todas as substncias, em particular terpenos e derivados de policetdeos. Revelador quase universal para quase todas as substncias, em particular terpenos e derivados de policetdeos. Esteris e derivados de lipdios. Flavonides. Derivados guanidnicos. Derivados guanidnicos.

EtOH H2SO4 + anisaldedo

EtOH + cido fosfomolbdico EtOH + SnCl3 (cloreto de antimnio) 8-hidroxiquinolena + hipobromito de sdio (reagente de Sakaguchi) -naftol + hipobromito de sdio EtOH + ninidrina AgNO3 + azul de bromofenol Nitroprussiato de sdio + hexacianoferrato de potssio KMnO4 + Na2CO3 Dragendorff (BiNO3 + cido +KCl + gua) Vapor de cristais de I2 (iodo) Iodoplatinato de Potssio

95:5 9:1

99:1

Aminocidos e aminas primrias. Purinas. Guanidinas, urias, tiourias. cidos carboxlicos. Alcalides (aminas secundrias, tercirias e sais de amnio quaternrio). Substncias com duplas ligaes (inclusive aromticas). Alcalides.

existem pelo menos 5 preparaes diferentes do revelador de Dragendorff

5 CONCLUSO A partir da realizao desta prtica foi possvel conhecer a tcnica de cromatografia, aprendendo como proceder e quando necessria a utilizao desta tcnica. Foi possvel tambm estudar melhor os ismeros cis-trans e a polaridade das substancias. REFERNCIAS

MACAHADO, A.M.R.; SANTOS, M.S. Qumica Orgnica Aplicada I, Belo Horizonte, reviso 2007. Disponvel: http://www.qnesc.sbq.org.br/online/qnesc07/atual.pdf. Acesso em 17/04/13
Disponvel em: <http://quipronat.wordpress.com/2009/05/10/sobre-separacoes-cromatograficas-por-ccd-ii-

reveladores/> acesso em: 17 abr. 13 s 16h30min.