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AVALIAO DE RESDUOS DE AGROTXICOS EM POLPAS DE MORANGO INDUSTRIALIZADAS

VANESSA HELOISA FERREIRA DE FARIA * BRBARA MESQUITA DIAS ** MRCIA CASSIMIRA MARCOS DA COSTA *** VIRGINIA RIBEIRO DA SILVA **** ANELISE LAPERTOSA DRUMMOND *** VANESSA PAIVA FRANCO * MARIEM RODRIGUES RIBEIRO DA CUNHA ***** HELOZA MARIA OLIVEIRA HORTA FRANKLIN * TNIA MARA AMNCIO GUERRA PEIXOTO ***

Amostras de polpas de morango industrializadas, comercializadas no estado de Minas Gerais, foram coletadas no perodo de 2006 a 2007 pelas Vigilncias Sanitrias e encaminhadas Fundao Ezequiel Dias para anlise de resduos de agrotxicos. Realizou-se a extrao pelo mtodo de multirresduos com acetona, diclorometano e hexano. Os extratos obtidos foram submetidos anlise por cromatografia a gs com detectores de captura de eltrons (CG-DCE), fotomtrico de chama (CG-DFC) e nitrognio fsforo (CG-DNF), espectrometria de massa (CG-MS) e cromatografia a lquido de alta eficincia (CLAE) com detectores ultravioleta (UV) visvel e fluorescncia. Os resultados evidenciaram o uso inadequado de agrotxicos, sendo detectados produtos no autorizados como acefato, captana, clorfenapir, clorpirifs, dimetoato, ometoato, endossulfam, fenarimol, folpete, metamidofs, procloraz e tetradifona e os autorizados azoxistrobina, difenoconazol, fenpropatrina, iprodiona e procimidona. Isso indica que as boas prticas agrcolas no esto sendo cumpridas por alguns produtores e mostra a necessidade de fiscalizao de alimentos processados, o que levaria oferta de produtos de melhor qualidade.

PALAVRAS-CHAVE: AGROTXICOS; RESDUOS DE AGROTXICOS; POLPA DE MORANGO; CROMATOGRAFIA.

Farmacuticas, Servio de Qumica, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG (e-mail: angelicasissi@yahoo.com.br;vanessafranco@gmail.com;hfranklin@funed.mg. gov.br). ** Engenheira de Alimentos, Mestre em Tecnologia de Alimentos, Servio de Qumica, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG (e-mail: barbara.dias@funed.mg.gov.br). *** Farmacuticas, Mestres em Cincia de Alimentos, Servio de Qumica, Fundao Ezequiel Dias, Belo horizonte,MG (e-mail: marcia.marcos@funed.mg.gov.br; aneliselapertosa@gmail.com; tania@ funed.mg.gov.br). **** Qumica, Mestre em Qumica, Servio de Qumica, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG (e-mail: virna_quimica@yahoo.com.br). ***** Biloga, Doutoranda em Cincia de Alimentos, Servio de Qumica, Fundao Ezequiel Dias, Belo Horizonte, MG (e-mail: mariem@funed.mg.gov.br).

Pesticidas: r. ecotoxicol. e meio ambiente, Curitiba, v. 19, p. 49-56, jan./dez. 2009

1 INTRODUO Na agricultura, grandes quantidades de agrotxicos so utilizadas para o combate e a preveno de pragas agrcolas. Desse modo, grande benefcio para a produo agrcola alcanado, garantindo alimento suficiente para a populao (KRISTENSON et al., 2001). Apesar de sua importncia econmica, os agrotxicos so potencialmente txicos ao homem e seus resduos so encontrados nos alimentos, na gua e no meio ambiente (CALDAS e SOUZA, 2000; PRESIBELLA, 2004). Isso exige acompanhamento e quantificao dos produtos, como pressuposto para a rastreabilidade e proteo da sade do homem e do meio ambiente (AMARAL, 2007). O Brasil tem grande parte da sua economia baseada na atividade agrcola e foi classificado, em 2006, como o segundo maior consumidor de agrotxicos do mundo e o oitavo em uso por rea cultivada (ANVISA, 2006). responsvel, tambm, por 84% do mercado de agrotxicos da Amrica Latina, cujo faturamento anual chega a US$5 bilhes (BRASIL, 2008a). A cultura de morango tem apresentado contaminao com resduos de agrotxicos acima do limite mximo permitido pela legislao e princpios ativos no autorizados, conforme observado nos programas de monitoramento realizados no Brasil (AMARAL e ATO, 2005). Minas Gerais o maior produtor nacional de morango (CEAGESP, 2006), alcanando 40 mil toneladas por ano (o equivalente a 40% da produo nacional), seguido por So Paulo com 29 mil toneladas/ano e depois, respectivamente, por Rio Grande do Sul, Paran e Santa Catarina. GORENSTEIN (2000) estudou a presena de resduos de agrotxicos em alimentos frescos e observou que as amostras de morango analisadas apresentaram os maiores ndices de resduos de agrotxicos em relao s outras frutas e vegetais. Entre os agrotxicos encontrados nessa cultura, estavam o endossulfam, clorotalonil, dimetoato, metamidofs, vinclozalina, tetradifona, ometoato, acefato, monocrotofs e quintozeno. O Decreto n 4074 de 04 de janeiro de 2002 (BRASIL, 2002), que regulamenta a Lei n 7.802/89 do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, instituiu que os agrotxicos, seus componentes e afins s podero ser produzidos, manipulados, importados, exportados, comercializados e utilizados no territrio nacional se previamente registrados em rgo federal competente, atendidas as diretrizes e exigncias dos rgos federais responsveis pelos setores da sade, do meio ambiente e da agricultura. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o grau de contaminao por agrotxicos em polpas de morango industrializadas, coletadas em diversos municpios pelas Vigilncias Sanitrias de Minas Gerais, nos anos de 2006 e 2007, visando oferta de produtos de melhor qualidade. 2 MATERIAL E MTODOS As Vigilncias Sanitrias de Minas Gerais coletaram, no comrcio de diversos municpios, 55 amostras de polpa de morango industrializadas e as encaminharam ao Laboratrio de Resduos de Pesticidas da Fundao Ezequiel Dias para anlise. Efetuou-se a anlise dos agrotxicos por meio de mtodo de multirresduos, conforme NETHERLANDS (1996a) e NETHERLANDS (1996b), mediante extrao com acetona, seguida de partio com diclorometano e hexano, obtendo-se o extrato orgnico (Figura 1). Foram usados solventes e reagentes dos graus pesticida e CLAE. A partir do extrato obtido, alquotas foram

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retiradas e preparadas de acordo com a tcnica cromatogrfica a ser utilizada na identificao e quantificao de 96 princpios ativos (relacionados nos resultados), sendo 12 ismeros e metablitos. Foram utilizados os seguintes equipamentos para a realizao das anlises:
- Cromatgrafo a gs HP 5890 com detector fotomtrico de chama (DFC) para anlise de organofosforados, coluna HP5 (5%-Phenyl-methylpolysiloxane metil), nitrognio ultrapuro como gs de arraste e vazo constante de 10 mL/min. A programao de temperatura do forno foi de 60C por 2 min, 30C/min at 170C por 7 min, 20C/min at 215C por 10 min e 30C/min at 280C por 8 min. O volume de injeo foi 2 L.

FIGURA 1 - FLUXOGRAMA DO MTODO DE MULTIRRESDUOS EM FRUTAS E HORTALIAS


15 g de amostra + 15 g de Na2 SO4

30 mL de acetona Agitar a 900 g /60 seg em ultraturrax

60 mL de diclorometano-hexano (1:1) Agitar a 900 g /60 seg em ultraturrax

Centrifugar a 1500 g/3 min

Remanescente

Fase orgnica/ Sobrenadante

Extrato orgnico (90 mL)

Organofosforados: 10 mL

Organohalogenados: 2 mL

Benzimidazis: 3 mL

Carbamat os: 3 mL

Concentrar e ret omar com 1 mL de acetato de etila

Conc entrar e retomar com 1 mL de hexano

Concentrar e retomar com 2 mL de tampo fosfato/ metanol (30: 70)

Concentrar e retomar com 1 mL de gua acidificada

2 L CG/DFC 1 L CG/DNF

1 L CG/DCE

40 L CLAE/UV

100 L CLAE/ Fluorescncia

- Cromatgrafo a gs Agilent Technologies 6890 com detector nitrognio fsforo (DNF) para anlise de compostos nitrogenados e fosforados, coluna DB1701, nitrognio ultrapuro como gs de arraste, com vazo constante de 1,4 mL/min. A programao de temperatura do forno foi 100C por 2 min, 30C/min at 170C por 6 min, 20C/min at 200C por 8 min e 30C/min at 280C por 14 min. O volume de injeo foi 1 L. - Cromatgrafo a gs Agilent Technologies 6890 com dois detectores de captura de eltrons (DCE) e duas colunas distintas para anlise de organoclorados e outros halogenados, colunas DB1701 (14%-cyanopropyl-phenyl-methylpolysiloxane) e HP5 (5%-Phenyl-methylpolysiloxane metil), nitrognio ultrapuro como gs de arraste e vazo constante de 1,2 mL/min. A programao de temperatura do forno foi de 70C por 1 min, 25C/min at 180C por 2 min, 10C/min at 250C por 10 min e 15C/min at 280C por 20 min. O volume de injeo foi 1 L.
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- Cromatgrafo a gs Agilent Technologies 6890 acoplado a espectrmetro de massas (CG-MS), utilizado para confirmao dos resultados, coluna HP5-MS (5%-Phenyl-methylpolysiloxane metil) e hlio ultrapuro como gs de arraste. A programao de temperatura do forno foi de 100C por 1 min, 20C/min at 150C, 10C/min at 250C por 4 min e 30C/min at 280C por 6,5 min. - Cromatgrafo a lquido de alta eficincia Shimadzu com detector ultravioleta visvel para anlise de benzimidazis, coluna C18 (4,6 mm x 25 cm, partcula de 5 m), fase mvel composta por metanol: tampo fosfato 0,1% pH 7,0 (70:30), com vazo constante de 0,6 mL/min. A temperatura do forno foi de 30C e o tempo de corrida de 14 minutos. - Cromatgrafo a lquido de alta eficincia Waters com derivatizao ps-coluna e detector de fluorescncia para anlise de carbamatos. Coluna Carbamatos Waters (3,9 mm x 15 cm, partcula de 5 m) com fase mvel composta por gua ultrapura, metanol e acetonitrila em sistema de gradiente, com vazo constante de 1,5 mL/min. A temperatura do forno foi de 30C e o tempo de corrida de 30 minutos.

Paralelamente, foram analisadas amostras testemunhas (branco) e realizados testes de recuperao, fortificando-se as amostras de polpa de morango com mistura de solues padres de analitos representativos dos agrotxicos estudados. Para garantir a correta execuo do processo foi adicionada em todas as amostras, antes da extrao, quantidade conhecida de padro de clorpirifs metlico (surrogate). A recuperao desse padro foi calculada em cada amostra e elaborada a carta controle.

3 RESULTADOS E DISCUSSO 3.1 RECUPERAES DOS AGROTXICOS As anlises das polpas fortificadas apresentaram resultados de 80% a 117%, com coeficientes de variao (CV) na faixa de 5 a 20% (Tabela 1). Os valores encontrados esto de acordo com o recomendado para anlise de resduos de agrotxicos em alimentos, sendo aceitvel a faixa de 70% a 120% de recuperao e coeficiente de variao inferior a 20% (EUROPEAN COMISSION, 2007).

TABELA 1 - RECUPERAO DOS AGROTXICOS EM POLPAS DE MORANGO


A g r o t x ic o A c e fa t o A z o x is t r o b in a C a p ta n a C l o r fe n a p i r C l o r p i ri f s E ti l D i fe c o n a z o l D i m e to a t o E n d o s s u l fa m A l fa En En Fe Fe d d n n o o a p s s u l fa m B e ta s s u l fa t o r im o l r o pa t r in a C o n c e n t r a o ( m g /K g ) 0, 1 0 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 2 0, 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 0 0, 1 0, 1 0, 0 0, 0 0, 2 0, 0 3 5 1 1 0 5 1 1 1 1 2 7 9 0 1 3 0 2 9 0 2 0 0 0 2 2 2 0 0 3 8 5 5 7 4 0 R e c u p e ra o ( % ) 103 88 100 78 92 117 88 82 82 81 101 88 113 96 85 100 77 87 87 C V (% ) 9 1 1 1 1 3 1 5 3

16 5 20 16 10 1 1 1 1 5 4 2 9

F o l p e te Ip r o d i o n a M e ta m i d o f s P a r a t i o n a m e t l i c a P r o c im id o n a P r o c lo r az T e tr a d i fo n a

6 10 18 10 17

CV = coeficiente de variao.

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3.2 NVEIS DE AGROTXICOS EM POLPAS DE MORANGO Das 55 amostras de polpa de morango industrializadas analisadas, 52 (95%) revelaram resduos de agrotxicos. Entre essas, 27 (49%) apresentaram produtos no autorizados como o acefato, captana, clorfenapir, clorpirifs, dimetoato, endossulfam, fenarimol, folpete, metamidofs, parationa metlica, procloraz e tetradifona (Figura 2).

FIGURA 2 RESULTADO DAS ANLISES DE POLPA DE MORANGO

Trinta e cinco amostras (64%) continham quatro ou mais princpios ativos, encontrando-se at dez tipos de resduos na mesma amostra, dos quais seis no autorizados. Azoxistrobina, fenpropatrina e procimidona foram os agrotxicos autorizados para a cultura de morango que apareceram com maior frequncia, 62%, 82% e 93%, respectivamente. Foram detectados, tambm, resduos de iprodiona e difenoconazol, porm todos com valores de acordo com os limites mximos de resduos permitidos pela legislao vigente. A Tabela 2 apresenta os agrotxicos pesquisados, a faixa de concentrao, os limites de deteco e de quantificao do mtodo, bem como o limite mximo de resduo permitido para a cultura de morango definido pela ANVISA (BRASIL,2008b) e os resultados dos resduos encontrados nas amostras. Os valores de dimetoato incluem o metablito ometoato, conforme determina a Monografia de Produtos Agrotxicos da Anvisa (BRASIL, 2008b). O resultado do endossulfam se refere soma dos ismeros , e do metablito endossulfato. Dos 84 princpios ativos analisados, 17 estavam presentes como resduos nas amostras de polpas de morango. Desses, 12 (70,6%) no so autorizados para a cultura de morango. Esse resultado condizente com o encontrado por GEBARA, CISCATO e FERREIRA (1999), que analisaram por cromatografia a gs 123 amostras de morango comercializadas na cidade de So Paulo. Foram pesquisados 68 princpios ativos e os resultados indicaram a presena de resduos de pesticidas em 57,7% das amostras, sendo 39,0% de produtos no autorizados pela legislao vigente como o clorotalonil, dimetoato, endossulfato, metamidofs, quintozeno e tetradifona.

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TABELA 2 LIMITES E RESDUOS DOS AGROTXICOS ESTUDADOS NAS AMOSTRAS DE POLPAS DE MORANGO
A GROTX IC OS Acefato Ald rin Aletrin a Azinfs etlic o Azinfs metlico Azoxistrobin a Bifentrina Bio aletrina Bromoprop ilato C aptana C arbaril C arbendazim C arbofenotiona C arbofurano C iflutrina C ipermetri na C iproconazol C lordano C lorfenvinfs C lorfenapir C lorotaloni l C lorpirifs etil C lorpirifs metlico D DT-Total D eltametrin a D iazinona D iclorvs D icofol D ieldrin D ifenoconazol D imeto ato D issulfotom End ossulfam End rim Esfenvarel ato Etiona Etoprofs Etrinfs Fenamifs Fenarimol Fenitrotion a Fenprop atrin a Fentiona Fentoato Fenvarel ato Folpete Forato H CB H CH H eptacloro H eptacloro-epxi do Imazalil Iprodi ona L ambd a-cial otrin a L indan o Mal ati ona Metamidofs Metidation a Metomil Metoxicloro Mevin fs Micl obutanil Mirex Monocrotofs Oxifluorfem Paration a etlica Paration a metlica Permetrina Pirazofs Piri mi fs etli co Piri mi fs metlic o Procimidona Proclor az Profenofs Propi conazol Protiofs Tebuconazol Terbufos Tetradifona Tiaben dazol Triazofs Triclorfom Trifluralina LD (m g/K g) 0,01 0,005 0,03 0,06 0,05 0,02 0,02 0,03 0,01 0,03 0,04 0,20 0,01 0,04 0,015 0,05 0,20 0,01 0,02 0,005 0,02 0,005 0,01 0,02 0,03 0,005 0,01 0,03 0,01 0,10 0,02 0,01 0,02 0,03 0,03 0,005 0,02 0,02 0,01 0,005 0,005 0,01 0,005 0,005 0,06 0,04 0,005 0,005 0,02 0,005 0,005 0,03 0,10 0,02 0,01 0,02 0,01 0,01 0,04 0,05 0,03 0,05 0,03 0,01 0,005 0,01 0,005 0,03 0,02 0,02 0,005 0,02 0,10 0,02 0,05 0,005 0,05 0,01 0,005 0,25 0,03 0,07 0,02 LQ (m g/K g) 0,1 0,01 0,05 0,20 0,10 0,04 0,06 0,05 0,02 0,05 0,10 0,40 0,03 0,1 0,02 0,10 0,40 0,02 0,06 0,01 0,06 0,01 0,02 0,05 0,05 0,01 0,02 0,05 0,02 0,20 0,05 0,02 0,04 0,07 0,06 0,01 0,05 0,05 0,02 0,01 0,01 0,02 0,01 0,01 0,24 0,07 0,01 0,01 0,06 0,01 0,01 0,05 0,20 0,04 0,02 0,05 0,10 0,02 0,10 0,10 0,10 0,10 0,07 0,02 0,01 0,02 0,01 0,07 0,04 0,05 0,01 0,04 0,20 0,04 0,20 0,01 0,10 0,03 0,02 0,50 0,06 0,10 0,05 LMR (mg/Kg) NA NA NA NA NA 5 NA NA NA NA NA 5,0 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA 0,5 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA 2 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA 2 NA NA 1,0 NA NA NA NA 1,0 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA 3 NA 3,0 NA NA 0,1 NA NA NA NA NA NA Am ostr as c om r esduos ( %) 12,7 --------61,8 ------3,6 ------------------3,6 --2,0 --------------16,4 14,5 --3,6 ------------2,0 --82 ------2,0 ------------56,4 ------14,5 ------------------2,0 --------93 5,4 ----------29 --------Nve is encontra dos (mg/Kg) < 0,1 a 0,21 --------< 0,07 a 0 ,46 ------< 0,05 a 0 ,13 ------------------< 0,01 a 0 ,03 --< 0,01 --------------< 0,20 <0 ,05 a 0,31 --< 0,04 ------------< 0,01 --< 0,02 a 0 ,27 ------< 0,04 ------------< 0,2 a 1 ,4 ------? 0,1 0 ------------------0 ,02 --------< 0,04 a 0 ,55 ? 0,2 0 ----------? 0,0 3 ---------

LD = limite de deteco, LQ = limite de quantificao, LMR = limite mximo de resduo, NA = no autorizado.

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4 CONCLUSO A avaliao do nmero de agrotxicos utilizados na mesma cultura evidenciou que, muitas vezes, esse nmero excessivo e que vrios produtos so utilizados de maneira irregular. Este estudo mostrou que a preocupao com os vegetais in natura deve ser estendida aos produtos processados a partir do fruto, j que a contaminao verificada nas polpas de morango foi significativa. A fiscalizao de produtos processados pode contribuir para a oferta de produtos com melhor qualidade, uma vez que a indstria vai se preocupar em adquirir matria-prima mais pura, induzindo, consequentemente, o agricultor a utilizar corretamente os agrotxicos e apenas quando necessrio. ABSTRACT
EVALUATION OF PESTICIDES RESIDUES IN INDUSTRIALIZED STRAWBERRY PULPS Samples of industrialized strawberry pulps, commercialized in Minas Gerais state, Brazil, were collected in the period from 2006 to 2007 by the Sanitary Surveillances, and were sent to Fundao Ezequiel Dias for analysis of pesticide residues. It was performed the extraction by multi-residue method with acetone, dichloromethane and hexane. The obtained extracts were analyzed by gas chromatography with detectors of electron capture (GC-ECD), flame photometric (GC-FPD), nitrogen phosphorus (GC-NPD), mass spectrometry (GC-MS) and high performance liquid chromatography (HPLC) with UV visible and fluorescence detectors. The results showed the inappropriate use of pesticides, which are not authorized as acephate, captan, chlorfenapyr, chlorpyrifos, dimethoate, omethoate, endosulfan, fenarimol, folpet, methamidophos, prochloraz and tetradifon, and the permitted ones azoxystrobin, difenoconazole, fenpropatrina, iprodione and procymidone. These indicate that good agricultural practices are not being followed by some producers, and demonstrate the necessity of processed food fiscalization, which will lead to products of better quality. KEY-WORDS: PESTICIDES; RESIDUES; STRAWBERRY PULP; CHROMATOGRAPHY.

REFERNCIAS
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10 GEBARA, A.B.; CISCATO, C.H.P.; FERREIRA, M. da S. Resduos de pesticidas em morangos comercializados na cidade de So Paulo, de 1994 a 1996. Higiene Alimentar, So Paulo, v. 13, n. 66/67, p. 100-103, nov./dez. 1999. 11 GORENSTEIN, O. Uma abordagem sobre resduos de agrotxicos em alimentos frescos. Informaes Econmicas, So Paulo, 2000. Disponvel em: <http:www.iea.sp.gov.br/out/verTexto.php?codTexto=520>. Acesso em: 26 jan. 2009.

12 KRISTENSON, E.M.; HAVERKATE, E.G.J.; SLOOTEN, C.J.; RAMOS, L.; VREULS, R.J.J.; BRINKMAN, U. A. Miniaturized automated matrix solid-phase dispersion extraction of pesticides in fruit followed by gas chromatographic-mass spectrometric analysis. Journal of Chromatography, v. 917, p. 277-286, 2001. 13 NETHERLANDS. Ministry of Public Health, Welfare and Sport. Method 1: multi-residue pesticides amenable to gas chromatography. In: ANALYTICAL methods for pesticide residues in foodstuffs. 6th ed. Amsterdam: RIVM, 1996a. 14 NETHERLANDS. Ministry of Public Health, Welfare and Sport. Method 2: Multi-residue pesticides analyzed with HPLC procedures. In: ANALYTICAL methods for pesticide residues in foodstuffs. 6th ed. Amsterdam: RIVM, 1996b. 15 PRESIBELLA, K.M. Efeitos da associao dos pesticidas deltametrina e endosulfano sobre o sistema reprodutivo de ratos wistar. Curitiba, 2004, 125 f. Dissertao (Mestrado em Farmacologia) - Setor de Cincias Biolgicas, Universidade Federal do Paran.

AGRADECIMENTOS s Vigilncias Sanitrias de Minas Gerais pela contribuio.

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