CITOESQUELETO Y MOVILIDAD CELULAR

M. en C. Carlos Gerardo Castillo Sosa FMVZ-BUAP Primavera 2012

El Citoesqueleto
Compuesto de tres estructuras filamentosas bien definidas: Microtbulos Microfilamentos Filamentos intermedios Son polmeros de subunidades proteicas unidas por enlaces no covalentes

Revisin de las funciones del citoesqueleto

Un andamio dinmico que brinda soporte estructural Un marco interno que establece las posiciones de los organelos Una red de rieles El aparato generador de fuerza que mueve la clula de un sitio a otro Componente esencial para la divisin celular

Microtbulos
Son estructuras tubulares huecas Forman huso mittico y centro de cilios y flagelos La pared esta constituida por hileras longitudinales llamadas protofilamentos Cada protofilamento esta ensamblado por bloques dimericos Tubulina y tubulina

Microtbulos Un extremo del microtbulo termina con una fila de subunidades beta y se llama extremo mas El extremo contrario termina con subunidades alfa y se llama extremo menos

Las MAP
Protenas asociadas a microtbulos ( Microtubules Asociated Proteins) Incrementan la estabilidad de los microtbulos y promueven su ensamble La actividad de las MAP se controla principalmente con la adicin y el retiro de grupos fosfato

Microtbulos como soportes y organizadores estructurales

La distribucin de los microtbulos ayuda a determinar la forma de la clula Tambin participan en el mantenimiento de la organizacin interna de la clula

Microtbulos como agentes de motilidad intracelular

Transporte axnico La mayor parte de los materiales de una neurona motora, como molculas neurotransmisoras, se incluyen en compartimentos dentro de vesculas membranosas Luego se transportan por toda la longitud del axn 0.5 m por segundo Direccin antergrada

Protenas motoras
Estas protenas convierten la energa qumica (ATP) en energa mecnica Transportan: vesculas, mitocondrias, lisosomas y otros filamentos del citoesqueleto Tres grandes familias: Cinesinas Dinenas Miosinas Los filamentos intermedios no tienen motores proteicos

 Las protenas motoras se mueven por pasos en una sola direccin a lo largo del riel de citoesqueleto Sufre un cambio de conformacin: ciclo mecnico Ciclo qumico: Unin de una molcula de ATP con el motor, Hidrlisis del ATP Unin a una nueva molcula de ATP Proporciona un golpe que mueve el motor

Cinesinas
Las protenas motoras mejor estudiadas Tetramero, dos cadenas ligeras y dos pesadas Tienen un par de cabezas globulares que se unen al microtbulo y actan como maquinas generadoras de fuerza Hidrolizan ATP Cabeza, cuello y cola con forma de abanico

Cadena pesada

Cadena ligera

Bisagra flexible

Cabezas

Cuello

Tallo

Cola

 Una sola molcula de cinesina se mueve por un solo protofilamento de un microtbulo Velocidad proporcional a la concentracin de ATP 0.1 m por segundo El movimiento es muy progresivo Superfamilia de protenas conocidas como KLP Los mamferos producen hasta 45 KLP distintas

 Las porciones motoras de las KLP tienen secuencias de aminocidos relacionadas Las colas de las KLP tienen secuencias diversas La cinesina y la mayora de las KPL se mueven hacia el extremo mas del microtbulo

Dineinas
Es una protena muy grande, formada por dos cadenas pesadas idnticas y varias cadenas intermedias y ligeras Cada cadena pesada consiste en una cabeza globular grande con dos proyecciones alargadas (tallo) Acta como una maquina generadora de fuerza Tiene una proyeccin larga, conocida como pie, que esta relacionada con el cargamento

 La dinena se mueve hacia el extremo menos del microtbulo Dos funciones principales: Un agente generador de fuerza para el posicionamiento del huso y el movimiento de los cromosomas durante la mitosis Un motor microtubular dirigido al extremo menos para el movimiento de organelos y vesculas

Centros organizadores de los microtbulos

La funcin de un microtbulo en la clula depender de su localizacin Ensamble de microtbulos en dos fases: Nucleacin, fase lenta Elongacin, fase rpida Relacionadas con los centros organizadores de microtbulos (MTOC)

 Los MTOC tienen funciones similares en todas las clulas Controlan el numero de microtbulos Su polaridad Numero de protofilamentos Momento y localizacin de su ensamble Tubulina gamma

Funcin de la tubulina gamma en el ensamblaje de los microtbulos

Las propiedades dinmicas de los microtbulos Presentan diferencias en su estabilidad Los microtbulos del huso mittico son muy lbiles Los microtbulos de las neuronas son mucho menos lbiles Los de cilios y flagelos son muy estables La labilidad refleja el hecho de que los microtbulos son polmeros formados por enlaces no covalentes

 Los microtbulos del citoesqueleto estn sujetos a despolimerizacin y repolimerizacion Para el ensamble se necesita GTP El GTP se une con la tubulina beta La incorporacin del dmero no necesita de la hidrlisis de GTP El GTP se hidroliza poco despus y el GDP resultante permanece unido al polmero permanentemente

Disposiciones de los microtbulos durante el ciclo celular de una clula vegetal

Filamentos intermedios Son fibras fuertes, similares a cuerdas Proporcionan fuerza mecnica a las clulas que se someten a tensin fsica
Neuronas Clulas musculares Clulas epiteliales de cavidades

Filamentos intermedios
Se han identificado solo en clulas animales Se conectan con otros tipos de filamentos por medio de una protena llamada plectina Estructuralmente heterogneo Cinco clases principales de subunidades De acuerdo a su distribucin tisular

Ensamble y desensamble de los filamentos intermedios Unidad bsica formada por un tetrmero El filamento ensamblado carece de polaridad Menos sensibles a otros agentes qumicos Mas difciles de disolver Tienen un comportamiento dinmico in vivo

Tipos y funciones de los filamentos intermedios

Los filamentos de queratina constituyen las principales protenas estructurales de las clulas epiteliales
Hepatocitos Clulas epidrmicas Clulas acinares pancreticas

En neuronas, neurofilamentos
Formados por 3 protenas distintas: NF-L, NF-H y NF-M

 Ratones modificados genticamente Delecion en el gen que codifica para K14

Polipptido de queratina, encontrado en clulas de epidermis

Muy sensibles al mas mnimo traumatismo Epidermolisis ampollar simple Miopata relacionada con desmina Enfermedad de Lou Gehrig o esclerosis lateral amiotrofica

Microfilamentos
Miden alrededor de 8 nm de dimetro Compuesto de subunidades globulares de una protena llamada actina Un filamento de actina tiene dos estructuras helicoidales Cada filamento tiene un extremo + y otro Segn el tipo de clula y la actividad, los filamentos pueden organizarse en conjuntos ordenados, en redes laxas o en haces anclados con firmeza

Microfilamentos
La actina se reconoce como una protena principal en todos los tipos de clulas eucariotas Las especies animales y vegetales tienen varios genes codificadores de actina Las actinas se han conservado de manera notable a lo largo de la evolucin Molculas de actina de distintas fuentes pueden polimerizarse juntas

Ensamble y desensamble de Microfilamentos Un monmero de actina debe unirse a un ATP La actina funciona como una ATP-asa La funcin del ATP, es similar a la de GTP El ATP unido al monmero de actina se hidroliza despus de su incorporacin al filamento de actina El filamento consiste en subunidades ADPactina

 Las clulas mantienen un equilibrio dinmico entre las formas monomericas y polimericas de la actina El ensamble y desensamble de los filamentos depender de varias protenas accesorias Cambios locales en una regin particular de la clula La reorganizacin ese necesaria para los procesos como locomocin celular

Miosina
Todos los motores conocidos que funcionan con actina pertenecen a la superfamilia de la miosina En general la miosina se mueve hacia el extremo mas del filamento La miosina se encuentra en:
Tejido muscular esqueltico Tejido muscular liso Tejido muscular cardiaco Tejido extramuscular

Miosina
Tienen un dominio motor caracterstico (cabeza) La cabeza tiene un sitio para unirse a la actina y otro para el ATP Los dominios de cabeza son similares, los de la cola son muy diversos Se dividen en dos grupos:
Miosinas convencionales o Tipo II Miosinas no convencionales Tipos I y III al XVIII

Miosinas no convencionales
Varias se relacionan con diversos tipos de vesculas citoplasmticas (miosinas I, V y VI) Algunas vesculas contienen motores basados en microtbulos y motores basados en Microfilamentos Cooperacin entre microtbulos y microfilamentos estudiada en clulas pigmentarias Transporte de melanosomas Sndrome de Griscelli

Interacciones entre la miosina y la cinesina

Zona de oclusin

Micrografa electrnica de barrido de clulas vellosas de la cclea de ratn

Protenas de unin a actina

La organizacin y el comportamiento de los filamentos de actina dependen de las protenas de unin Afecta el ensamble y desensamble, sus propiedades fsicas y su interaccin Las protenas de unin a actina pueden dividirse en varias categoras segn su funcin en la clula

Protenas de unin a actina

Protenas de nucleacin La nucleacin requiere la unin de por lo menos dos o tres monmeros de actina en la orientacin apropiada Las clulas tienen un complejo proteico el complejo Arp2/3 Arp actin-related proteins El complejo Arp2/3 debe activarse para comenzar la nucleacin Formacin de molde

Protenas de unin a actina

Protenas para secuestro de monmeros Timosinas, se unen con los monmeros de actinaG Protenas para bloqueo de extremos (tapaderas) Regulan la longitud de los filamentos Protenas polimerizadoras de monmeros Profilina Protenas despolimerizadoras de actina Cofilina, locomocin celular y fagocitosis

Protenas de unin a actina

Protenas que forman enlaces cruzados Pueden alterar la organizacin tridimensional del filamento Protenas cortadoras de filamentos Puede unirse con un filamento ya formado y romperlo en dos Protenas de unin con membrana Vinculina, unin indirecta de los filamentos con la membrana plasmtica

Arp2/3

Vinculina

Timosina

Profilina

Filamina Fimbrina

Cofilina

Locomocin celular
Necesaria para muchas actividades en vertebrados superiores Desarrollo de rganos y tejidos Formacin de vasos sanguneos Desarrollo de axones Cicatrizacin de heridas Diseminacin de tumores cancerosos

Locomocin celular
1) El movimiento inicia por una protrusin de una parte de la superficie celular en la direccin en que la clula va a moverse 2) Una parte de la superficie inferior de la protrusin se adhiere al sustrato y forma un anclaje temporal 3) La mayor parte de la clula se impulsa hacia el frente sobre los contactos adhesivos, que al final se convierten en la parte posterior de la clula

Locomocin celular
4) La clula rompe los contactos traseros con el sustrato, lo que causa la retraccin del margen final o cola Lamelipodio Protrusin ancha, semejante a un velo

Locomocin celular
Leucocito, recibe una seal qumica Una vez recibido el estimulo, inicia la polimerizacin localizada de actina Tiene una familia de protenas llamada WASP que activa el complejo Arp2/3 Sndrome de Wiskott-Aldrich

Lamelopodio