UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS FASE I, Unidad Didctica: BIOQUMICA MDICA 2 AO,

2011

11- DESCARBOXILACIN DESCARBOXILACIN OXIDATIVA OXIDATIVA DEL DEL PIRUVATO. PIRUVATO. 22- CICLO CICLO DE DE KREBS. KREBS.
Dr. Dr. Mynor MynorA. A. Leiva Leiva Enrquez Enrquez

PROCEDENCIA Y DESTINO DE ACETIL-CoA Protenas Glucosa Glicerol Aminocidos Piruvato c. Grasos TAG

Acetil-CoA
Cetognesis

Esteroides Colesterol

Ciclo de Krebs C. Respiratoria

Citrato

Acetil-CoA c. grasos

TAG ATP+CO2+H2O

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Ed. Editorial. Elsevier.

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Metabolismo del Piruvato

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Ed. Editorial. Elsevier.

C. Piruvato deshidrogenasa
Localizado en la mitocondria
Complejo multienzimatico 3 enzimas: Piruvato deshidrogenasa (E1) Dihidrolipoil transacetilasa (E2) Dihidrolipoil deshidrogenasa (E3)

5 coenzimas
Acido lipoico Pirofosfato de tiamina FAD NAD CoA

Descarboxilacin oxidativa del piruvato

Proceso intramitocondrial que permite la formacin de Acetil-CoA a partir del Piruvato. Produce NADH + H+ aprovechable en la cadena respiratoria. Libera CO2
Participan 3 enzimas y 5 coenzimas formando un complejo funcional.

Descarboxilacin oxidativa del piruvato

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Descarboxilacin oxidativa del piruvato

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Edicin. Editorial. Elsevier.

Descarboxilacin oxidativa del piruvato

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Edicin. Editorial. Elsevier.

Descarboxilacin oxidativa del piruvato La enzima Piruvato deshidrogenasa usa como herramienta la coenzima pirofosfato de tiamina. La enzima Dihidrolipoilo Transacetilasa usa como herramienta la coenzima lipoamida y traslada a la Co-A. La enzima dihidrolipoilo Deshidrogenasa usa como herramienta la coenzima FAD y modifica al NAD

Descarboxilacin oxidativa del piruvato

Desde que se metaboliza una molcula de glucosa en condiciones aerbicas, se producen en total 16 molculas de ATP: por GLUCLISIS 4 ATP la LANZADERA DE MALATO 6 ATP la DESCARBOXILACIN OXIDATIVA DEL PIRUVATO, 6 ATP

La actividad de la lanzadera y la descarboxilacin del piruvato se cumplen 2 veces.

4 ATP a nivel del sustrato, 6 ATP de cadena respiratoria y 6 ATP al formar Acetil-CoA

Paso 1 Piruvato deshidrogenasa El piruvato se une al TPP Formando Hidroxietil tiamina pirofosfato

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Lipoamida
Deriva del cido lipoico Estado oxidado

Estado reducido

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

 Paso 2 Dihidrolipoil transacetilasa -Traslado del grupo hidroxietilo al primer brazo de la lipoamida (Acetil dihidrolipoamida) Separa TPP
2

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

 Paso 3 E2 Traslado del grupo acetilo a la CoA-SH Acetil CoA + Dihidrolipoamida

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Paso 4 Dihidrolipoil deshidrogenasa E3 Transferencia de 2 electrones de la lipoamida al FAD. Lipoamida es oxidada de nuevo

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Paso 5 E3 El FAD es oxidado por el NAD NADH es reducido y entrega electrones a cadena respiratoria.

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Descarboxilacin de Piruvato

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Edicin. Editorial. Elsevier.

REGULACIN DE PIRUVATO DESHIDROGENASA

MODIFICACIONES ALOSTRICAS
Por sus productos finales Acetil CoA y NADH (ATP)

MODIFICAIONES COVALENTES
Por Fosforilacin (Cinasa) Por desfosforilacin (fosfatasa)

REGULACIN COMPLEJO PD -Inhibidores NADH, Acetil CoA y ATP efectores alostricos negativos Activan Cinasa (P) -Activadores Disminucin de NADH, Acetil CoA y ATP Activa Fosfatasa (insulina)

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Edicin. Editorial. Elsevier.

Regulacin cinasa fosfatasa

Por Fosforilacin : reduce act. de la enzima (cinasa)
Cinasa se activa por incremento en proporciones de Acetil CoA/CoA, NADH/NAD, ATP/ADP

Por desfosforilacin: aumenta act. de enzima (fosfatasa)

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Ciclo del cido Ctrico (KREBS)

10 reacciones enzimticas 2 reacciones irreversible Genera 3 NADH+H, 1 FADH2 y 1 ATP a nivel del sustrato

Mitocondria

Esquema general del ciclo de Krebs

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Edicin. Editorial. Elsevier.

ENZIMA 1- CITRATO SINTASA 2- ACONITASA 3- ISOCITRATO DESHIDROGENASA 4- ALFA-CETO-GLUTARATO DESHIDROGENASA 5- SUCCINATO TIO-CINASA 6- SUCCINATO DESHIDROGENASA 7- FUMARASA 8- MALATO DESHIDROGENASA

SUSTRATO 12 CITRATO 23 ISOCITRATO 34 ALFA CETOGLUTARATO 45 SUCCINIL-CoA 56 SUCCINATO 67 FUMARATO 78 MALATO 81 OXALACETATO

1. Formacin del Citrato

El citroil-CoA es un intermediario transitorio de reaccin La hidrlisis del enlace tioster del intermediario hace que la reaccin sea exergnica

2. Formacin de isocitrato va cis-aconitato

La aconitasa contiene un centro hierro-azufre que acta como centro de fijacin de sustratos y centro cataltico.

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Ed. Editorial. Elsevier.

3. Oxidacin del isocitrato a -cetoglutarato y CO2

Existen dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa: NAD dependiente (matriz mitocondrial) NADP dependiente (matriz mitocondrial y citosol)

4. Oxidacin del -cetoglutarato a succinil-CoA y CO2

El complejo de la -cetoglutarato deshidrogenasa es muy parecido al complejo piruvato deshidrogenasa, tanto en estructura como en funcin, requiere difosfato de tiamina, lipoato, NAD, FAD y CoA
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

a Cetoglutarato deshidrogenasa
Localizado en la mitocondria Complejo multienzimatico
3 enzimas
Alfa cetoglutarato deshidrogenasa (E1) Dihidrolipoil transsucciniilasa(E2) Dihidrolipoil deshidrogenasa (E3) Acido lipoico Pirofosfato de tiamina FAD NAD CoA

5 coenzimas

Sustrato: alfa cetoglutarato Producto: succinil CoA

El complejo a cetoglutarato deshidrogenasa utiliza 5 coenzimas diferentes

Difosfato de tiamina Lipoamida

NAD (niacina)

FAD (Riboflavina)

CoA (A. Pantotenico)

5. Conversin del succinil-CoA en succinato

La formacin acoplada de GTP (o ATP) a expensas de la energa liberada por la decarboxilacin oxidativa del -ceto-glutarato es otro ejemplo de fosforilacin a nivel del sustrato.

6. Oxidacin del succinato a fumarato

En eucariotas, la succinato deshidrogenasa se encuentra unida a la membrana mitocondrial interna, contiene tres centros hierro-azufre diferentes y una molcula de FAD unida covalentemente.

El malonato es un fuerte inhibidor competitivo de esta enzima

7. Hidratacin del fumarato y produccin de malato

Esta enzima es especfica para el fumarato y el L-malato

8. Oxidacin del malato a oxalacetato

Balance energtico

Vas Anaplerticas Ana: arriba, Plerotikos: llenar

Son reacciones que reponen intermediarios del ciclo Piruvato carboxilasa: produce oxalacetato

Reacciones Anaplerticas

Principales vas biosintticas y anaplerticas

Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Principales vas biosintticas y anaplerticas

Los Carbonos de los aminocidos entran al ciclo de Krebs en diferentes puntos

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Ed. Editorial. Elsevier.

Regulacin del ciclo de Krebs

Disponibilidad de sustratos Necesidad de intermediarios como precursores biosintticos Demanda de ATP El factor regulador ms importante es la relacin intramitocondrial de [NAD+] / [NADH]

Regulacin del ciclo de Krebs

1. Disponibilidad de sustratos 2. Inhibicin por acumulacin de productos 3. Regulacin de las siguientes enzimas: Citrato sintasa
Inhibidores: NADH, succinilCoA, citrato, ATP Activadores: ADP

Isocitrato deshidrogenasa
Inhibidores: NADH Activadores: Ca++, ADP

-cetoglutarato deshidrogenasa
Inhibidores: succinil-CoA, NADH Activadores: Ca++
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

Intoxicacin por Arsnico

Inhibe complejo piruvato deshidrogenasa Inhibe complejo enzimtico alfa cetoglutarato Se combina con grupos sulfhidrilos, inhibe dihidrolipoato

Deficiencias Enzimticas

Complejo Piruvato Deshidrogenasa Enfermedad de Leigh

 El Ciclo de KREBS es un punto de convergencia en el metabolismo intracelular. Carbohidratos, grasas y protenas son fuentes de Acetil-

CoA
Desde aqu, la obtencin de ATP sigue la misma ruta. El requisito para su accin es la presencia de oxgeno.
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.

C. Krebs: proceso anfiblico

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 2. Ed. Editorial. Elsevier.

GLUCONEOGNESIS
LIPOGNESIS

SNTESIS PROTICA
HEM y cidos Nucleicos

Proceso ANFIBLICO

Fuente: Bioqumica de Mathews 3 Edicin.

A nivel del sustrato 4 ATP Lanzadera de Malato 6 ATP Descarboxilacin del piruvato 6 ATP Ciclo de Krebs 24 ATP total 40 ATP

Reaccin
Hexocinasa Fosfofructocinasa Glicerol-3-P Deshidrogenasa

Mecanismo
Fosforilacin Fosforilacin Fosforilacin oxidativa del NADH Fosforilacin a nivel del Sustrato Fosforilacin a nivel del Sustrato Fosforilacin oxidativa del NADH Fosforilacin oxidativa del NADH Fosforilacin oxidativa del NADH Fosforilacin a nivel del sustrato (GTP) Fosforilacin oxidativa del FADH2 Fosforilacin oxidativa del NADH TOTAL

moles ATP/mol Glucosa

-1 -1 +6 (+4)*

Fosfoglicerato cinasa
Piruvato cinasa Piruvato deshidrogenasa Isocitrato deshidrogenasa -cetoglutarato deshidrogenasa

2
2 6 6 6

Succinil-CoA sintetasa
Succinato deshidrogenasa Malato deshidrogenasa

2
4 6 38 (36)

Los cambios estructurales desde La combinacin de Acetil-CoA con Oxalacetato, y la secuencia de las Subsiguientes modificaciones.

Fuente: Bioqumica de Mathews 3 Edicin.

Hacia afuera, la frontera final del espacio se desconoce Hacia adentro, a nivel de biologa molecular y bioqumica, tambin estamos lejos de encontrar la frontera final.

PASEN BUEN DA