UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE INGENIERA REA DE QUMICA LABORATORIO DE BIOQUIMICA ING.

ERWIN ORTIZ

TITULACION DEL ACIDO GLUTAMICO

GUATEMALA, 19 DE AGOSTO DE 2013

1. INTRODUCCIN

El cido glutmico contiene dos grupos COOH y un grupo NH3, es decir, un acido triprotico, tiene sus tres hidrgenos ionizables alrededor de un carbono alfa, los cuales le dan la caracterstica de aminocido. Se determin su punto isoelctrico, que es donde las cargas de este acido se encuentran en una forma neutra. Este punto es posible determinarlo ya sea neutralizando este acido con una base fuerte, en este caso se utiliza NaOH para neutralizar completamente el cido y llevarlo a un pH alrededor de 11, para posteriormente realizar una retro valoracin. Y determinar de esta manera lo que son los diferentes puntos de equivalencia representados por las capacidades amortiguadoras de cada uno de los diferentes pKs y as determinarlos por un mtodo grfico.

2. OBJETIVOS

General:

Analizar las caractersticas acidas y bsicas de un aminocido y sus constantes de disociacin.

Especficos:

1. Conocer las diferentes formas en que puede existir el acido glutmico.

2. Determinar el punto isoelctrico del acido glutmico.

3. MARCO TERICO

Aminocidos y sus formas:

Los aminocidos que son las unidades manomtricas de las protenas, tienen la misma estructura general, con un grupo amino y un grupo carboxilo unidos al mismo tomo de carbono. La naturaleza de la cadena lateral (grupo R) es la base de las diferencias entre aminocidos. Salvo la glicina, los aminocidos pueden existir en existir en dos formas, designadas L y D. Estos dos estereoismeros son imgenes especulares no superponibles. Los aminocidos presentes en las protenas tienen la forma l, pero algunos D-aminocidos se presentan en la naturaleza. Un esquema de clasificacin de los aminocidos puede basarse en la naturaleza de su cadena lateral. Dos criterios de especial importancia, son el carcter polar o no polar de la cadena lateral y la presencia de un grupo cido o bsico en la cadena lateral. En los amino cidos libres a pH neutro, el grupo carboxilato tiene carga negativa y el grupo amino tiene carga positiva. Los aminocidos sin grupos cargados en su cadena lateral existen en solucin neutra como iones anfotricos, sin carga neta. Las curvas de titulacin de los aminocidos indican los intervalos de pH en los que los grupos titulables ganan o pierden un protn. Las cadenas laterales de los aminocidos tambin pueden aportar grupos titulables; hay que tomar en cuenta la carga de la cadena lateral al determinar la carga neta del aminocido.

Punto isoelctrico de los aminocidos:

La presencia de grupos cido (-COOH) y bsico (-NH2) otorga a los aminocidos unas propiedades cido base caractersticas. En medios cidos fuertes, tanto el grupo amino como el grupo cido se encuentran protonados y el aminocido tiene la siguiente forma:

Al subir el pH se desprotona el grupo ms cido, H de menor pKa, formndose una especie neutra llamada Zwitterin.

Cuando el aminocido se encuentra en medio bsicos pierde el protn del grupo amino, dando lugar a la especie desprotonada.

Se llama pH isoelctrico o punto isoelctrico al pH en el que la concentracin de Zwitterin es mxima (no hay carga neta). Otra definicin de punto isoelctrico es que el pH al que la concentracin de especies protonadas y desprotonadas se iguala.

El pH isoelctrico se calcula como la media de pKa, 1, pKa, 2, es decir la media de los pK de las etapas que forman y descomponen el Zwitterin, en donde a nivel laboratorio se titula un aminocido y se traza la grfica de pH vs ml de cido o de base, luengo se identifican los puntos de inflexin los cuales son los pK tal y como se muestra en la siguiente figura:

4. MARCO METODOLGICO

5. REACCIONES

Reaccin de ionizacin del cido glutmico:

6. RESULTADOS

Figura No. 1 pH de cido glutmico vs ml de HCl

12 10 8

pK3 pK3

pH

6 4 2 0 0

Punto isolelectrico

pK3

10

15

20

25

30

35

mL de HCl agregados
Fuente: Hoja de datos originales

Tabla No. 1 Punto isoelctrico y los pK del cido glutmico experimentales

Punto Isoelctrico pKa1 pKa2 pka

Fuente: figura No. 1

3.79 3 4.58 9

7. DISCUSIN DE RESULTADOS

Al observar la figura No. 1 puede observar en donde se encuentra el pKa3 del cido glutmico, determinando grficamente se encuentra para un pH de 9 a un volumen de HCL de 15 ml, este pH es debido a la prdida de un hidrogeno del grupo amino NH3 lo cual le da una carga formal a la especie de -1.

Posteriormente, se tiene que el pKa2 para el cido glutmico es de 4.58 con un volumen agregado de 21 ml de HCl, en donde se tiene la especie en donde uno de los cidos carboxlicos que se encontraba con carga negativa, recupero nuevamente su grupo H lo cual hace que la carga total de la especie sea de 0 ya que la carga que tiene el aminocido es de -1, esta se neutraliza con la carga del grupo amino que se encuentra en su forma ionizada, lo cual le da a la especie una carga neutra.

De la misma manera se determin el pKa1 del cido glutmico, obteniendo un pH de 3 al agregar un volumen de HCl de aproximadamente 31 ml.

Se determin el punto isoelctrico del cido glutmico, sabiendo que este se encuentra en el punto medio del pKa1 y el pKa2, localizando el punto medio en la grfica se tiene que el punto isoelctrico es a un pH aproximado de 3.79.

8. CONCLUSIONES

1. El punto isoelctrico del cido glutmico es de 3.79.

2. El cido glutmico es una cido triprtico 3. Debido a la alta concentracin del HCl no es posible observar claramente los puntos del pKa2 y pKa1.

9. BIBLIOGR AFIA

1. ARROYO. PEA. Bioqumica. 2da. edicin. Editorial Limusa. Mxico D.F. 1988. 427 pginas.

2. CAMPBELL, Mary K. Bioqumica. 4ta. edicin. Editorial CengelLearning. Mxico D.F. 2004. 812 pginas.

10. ANEXOS
Figura No. 2 Cristalera y parte del equipo

Figura No.3 Potencimetro

Figura No. 4 Grupo de Trabajo

Figura No. 5 hoja de datos originales.